WO2021080326A1 - 식물바이러스병 증상을 완화시키는 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2를 포함하는 조성물 및 이의 용도 - Google Patents

식물바이러스병 증상을 완화시키는 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2를 포함하는 조성물 및 이의 용도 Download PDF

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virus
lyso
soy
composition
plant
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Inventor
유병태
김미영
Original Assignee
한국생명공학연구원
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N57/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds
    • A01N57/10—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds having phosphorus-to-oxygen bonds or phosphorus-to-sulfur bonds
    • A01N57/12—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds having phosphorus-to-oxygen bonds or phosphorus-to-sulfur bonds containing acyclic or cycloaliphatic radicals

Definitions

  • the present invention relates to a composition comprising lyso-phosphatidylethanolamine 18:2 (Lyso-PE 18:2) for alleviating the symptoms of plant viral disease, and a use thereof.
  • Plant virus disease is fatal to crop cultivation, so once caught, it spreads rapidly, causing economic loss to farmers. Such damage occurs not only domestically, but also globally, horticultural crops and food crops, and the amount of damage is over tens of trillion won. In this situation, in terms of global food security, it is very important to develop a therapeutic agent to alleviate the symptoms of plant virus disease in order to alleviate the damage to major horticultural food crops.
  • a therapeutic agent to alleviate the symptoms of plant virus disease in order to alleviate the damage to major horticultural food crops.
  • Various compositions for the treatment of plant viral diseases have been developed so far, and examples include a composition for controlling plant viral diseases including green tea extract (Korean Patent No. 10-2080889).
  • soy lyso-phosphatidylethanolamine derived from soybeans was compared to egg-derived Lyso-PE (egg Lyso-PE) and pure Lyso-PE 18:1 in reducing the symptoms of plant viral disease.
  • Lyso-PE 18:2 lyso-phosphatidylcholine 18:2 (Lyso-phosphatidylcholine 18:2, Lyso-PC 18:2) and lyso-phosphatidylcholine 18:2) and lyso-phosphatidylcholine 18 Among :2 (Lyso-phosphatidylinositol 18:2, Lyso-PI 18:2), Lyso-PE 18:2 was found to be the most excellent in alleviating the symptoms of plant viral disease.
  • One object of the present invention is to provide a composition for controlling plant virus diseases, comprising lyso-phosphatidylethanolamine 18:2 as an active ingredient.
  • Another object of the present invention is to provide a composition for alleviating symptoms of plant viral diseases, comprising lyso-phosphatidylethanolamine 18:2 as an active ingredient.
  • Another object of the present invention is to provide a composition for inhibiting secondary infection or novel infection of plant viruses, comprising lyso-phosphatidylethanolamine 18:2 as an active ingredient.
  • Another object of the present invention is to provide a pesticide composition having a plant virus disease control activity, including the composition for controlling plant virus disease.
  • Another object of the present invention is to provide a composition for adding fertilizer having plant virus disease control activity, including the composition for controlling plant virus disease.
  • Another object of the present invention is to provide a method for controlling plant virus diseases, comprising the step of treating the plant or soil with the composition for controlling plant virus diseases.
  • soy Lyso-PE alleviates viral symptoms and inhibits new infections in plants infected with plant viruses, and may be provided for symptom relief and suppression of secondary infections or new infections.
  • the viral symptom-relieving effect of soy Lyso-PE according to the present invention is particularly exerted by Lyso-PE 18:2, which is the main component of soy Lyso-PE, soy Lyso-PE and Lyso-PE, which is the main component thereof.
  • 18:2 is a composition for alleviating symptoms of plant viral disease and inhibiting secondary infections or new infections, and can be applied in various fields in agriculture.
  • soy Lyso-PE is effective alone, but by treating soy Lyso-PE by mixing it with natural active minerals, or by additionally treating soy Lyso-PE with a multi-disinfectant, etc., it is more effective to alleviate the symptoms of viral diseases. You can raise it.
  • FIG. 1 is a photograph of an antibody assay kit (Immuno-kit) showing that melon grown in Seongju-myeon, Seongju-eup, Gyeongsangbuk-do was infected with Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV).
  • Immuno-kit an antibody assay kit showing that melon grown in Seongju-myeon, Seongju-eup, Gyeongsangbuk-do was infected with Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV).
  • Figure 2 shows the symptoms of melon CGMMV virus disease in the soy Lyso-PE treatment group in which the main active ingredient is soybean-derived lyso-phosphatidylethanolamine 18:2 (lyso-phosphatidylethanolamine 18:2, Lyso-PE 18:2). This is a picture that shows the relaxation by comparison.
  • Figure 3 is a photograph showing that the symptoms of CGMMV viral disease of melon are significantly alleviated in the soy Lyso-PE treatment group compared to the untreated group, egg-derived Lyso-PE (egg Lyso-PE) or Lyso-PE 18:1.
  • the main components of Egg Lyso-PE are Lyso-PE16:0 and Lyso-PE18:0.
  • (A) no treatment group (B) Egg Lyso-PE treatment group, (C) pure Lyso-PE 18:1 treatment group, (D) soy Lyso-PE treatment group.
  • Figure 4 is the number of shoots grown normally after treatment of various types of Lyso-PE in melon infected with CGMMV virus. Data are presented as the mean and standard deviation of 3 replicates. An asterisk (*) indicates a statistically significant difference compared to the untreated group tested through t-test. * P ⁇ 0.05; ** P ⁇ 0.01.
  • ZYMV Zucchini yellow mosaic virus
  • FIG. 6 is a photograph showing that the symptoms of ZYMV virus disease of cucumbers are significantly alleviated compared to Egg Lsyo-PE or pure Lyso-PE 18:1 in the soy Lyso-PE treatment group.
  • A Egg Lyso-PE treatment group
  • B pure Lyso-PE 18:1 treatment group
  • C soy Lyso-PE treatment group.
  • CMV Cucumber mosaic virus
  • FIG. 10 is a photograph showing that the symptoms of CMV virus disease of pepper leaves are alleviated in the soy Lyso-PE-treated group compared to the untreated group, and that the alleviating effect is maximized when a multidisinfectant is additionally treated in the middle of the treatment period. .
  • A no treatment group
  • B soy Lyso-PE treatment group
  • C comprehensive disinfectant treatment group.
  • D soy Lyso-PE and multidisinfectant treatment group.
  • FIG. 11 is a photograph of an antibody assay kit showing that peppers grown in the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology were infected with tomato spotted wilt virus (TSWV).
  • TSWV tomato spotted wilt virus
  • Figure 12 is a photograph before and after untreatment in the untreated group in which nothing was sprayed on peppers infected with TWSV virus.
  • Figure 13 is a photograph before and after treatment in the treatment group sprayed with a multi-disinfectant insecticide on peppers infected with the TWSV virus.
  • 15 is a photograph before and after treatment in the treatment group sprayed with Lyso-PE and a multidisinfectant to pepper infected with TWSV virus.
  • FIG. 16 is a photograph showing that Lyso-PE 18:2 among the constituents of soy Lyso-PE has an excellent effect on the recovery of symptoms of TSWV virus disease of pepper compared to Lyso-PC 18:2 and Lyso-PI 18:2.
  • 17 is a photograph showing that pure Lyso-PE 18:2 is superior to soy Lyso-PE in which various Lyso-PEs are mixed, and the effect of recovering symptoms of TSWV virus disease of pepper is superior.
  • Figure 18 is a treatment group spraying soy Lyso-PE on a baron potato complex infected with potato virus Y (Potato virus Y, PVY) and potato leafroll virus (PLRV), compared with the untreated group
  • PVY potato virus Y
  • PLRV potato leafroll virus
  • FIG. 19 shows that in the treatment group sprayed with soy Lyso-PE on red potatoes infected with PVY virus and red potatoes infected with PVY and PLRV viruses, plants grew well and the yield was increased in baron potatoes and red potatoes compared to the untreated group. This is a picture showing.
  • 20 is a diagram confirming that plants grow well in the treated group sprayed with soy Lyso-PE on sweet potatoes infected with sweet potato leaf curl virus (APLCV) compared to the untreated group.
  • FIG. 21 shows that viral disease symptoms were alleviated in the treatment group sprayed with a mixture of soy Lyso-PE and Mastana (Mastana; MST) on peppers infected with TWSV virus compared to the untreated group and the soy Lyso-PE treatment group. It's a picture.
  • FIG. 22 is a photograph showing that the viral disease symptoms of apples were alleviated compared to the untreated group when a mixture of soy Lyso-PE and mastera was treated.
  • 23 is a photograph showing that the viral disease symptoms of persimmon were alleviated compared to before treatment when a mixture of soy Lyso-PE and mastana was treated.
  • 24 is a photograph showing that the symptoms of viral disease in corn were alleviated compared to before treatment when a mixture of soy Lyso-PE and mastana was treated.
  • 25 is a photograph showing that the symptoms of viral disease of soybeans grow in normal shoots compared to before treatment when a mixture of soy Lyso-PE and mastana is treated.
  • 26 is a photograph showing that the symptoms of viral diseases of eggplant were alleviated compared to the untreated group when a mixture of soy Lyso-PE and mastera was treated.
  • FIG. 27 is a photograph showing that virus infection was suppressed in the treatment group when soy Lyso-PE treatment was performed on peppers not infected with the virus compared to the non-treated group.
  • the present invention is a composition for controlling plant virus diseases comprising lyso-phosphatidylethanolamine 18:2 (lyso-phosphatidylethanolamine 18:2, Lyso-PE 18:2) as an active ingredient as an embodiment Provides.
  • Lyso-phosphatidylethanolamine refers to a natural compound derived from phosphatidylethanolamine, a typical component of a cell membrane. Lyso-PE is produced by partial hydrolysis of phospholipase A (PLA), which removes one of the acyl chains of phosphatidylethanolamine from cells.
  • Lyso-PE 18:2 is a kind of Lyso-PE.
  • the composition for controlling plant virus diseases comprising Lyso-PE 18:2 as an active ingredient is derived from soybeans, and may be named soy Lyso-PE.
  • the composition may include an active ingredient Lyso-PE 18:2, as well as soybean-derived oil and other by-products, but is not limited thereto.
  • the soy Lyso-PE is a mock solution (glycerin) of the metabolite Lyso-PE obtained by sequentially treating the enzymes PLD (Phospholipase D) and PLA (phospholipase A) on phospholipids extracted from soybeans.
  • PLD Phospholipase D
  • PLA phospholipase A
  • Octanoic acid octanoic acid
  • the mock solution may be used without limitation as long as it is a mock solution that dissolves phospholipids used in the art.
  • the method may be used without limitation as long as it is a method of extracting or separating Lyso-PE from soybeans used in the art.
  • Soy Lyso-PE prepared according to the present invention includes Lyso-PE 18:2, lyso-phosphatidylcholine 18:2 (Lyso-phosphatidylcholine 18:2, Lyso-PC 18:2) and lyso-phosphatidylcholine 18:2 (Lyso- phosphatidylinositol 18:2, Lyso-PI 18:2) is included as a main component, specifically Lyso-PE 18:2: Lyso-PC 18:2: Lyso-PI 18:2 is about 7 to 5:2 to 4 It may be mixed in a :1 (w/w/w) ratio, and more specifically, it may be mixed in a 6:3:1 ratio.
  • the plant virus disease means a disease in a plant caused by a plant virus.
  • the plant virus is Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV), Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV), Cucumber mosaic virus (CMV), tomato spot wilt Virus (Tomato spotted wilt virus, TSWV), potato virus Y (Potato virus Y, PVY), potato leafroll virus (PLRV), sweet potato leaf curl virus (SPLCV), sweet potato mottle virus (Sweet potato feathery mottle virus, SPFMV), ACLSV (Apple chlorotic leafspot virus), ASPV (Apple Stem Pitting Virus), ASGV (Apple stem grooving virus), Apple chlorotic leafspot virus (ACLSV), apple stem Apple Stem Pitting Virus (ASPV), Apple stem grooving virus (ASGV), soybean yellow mottle mosaic virus, PeCV, Maize dwarf mosaic virus), Tobacco mosaic virus (TMV), Pepper mottle virus (PepMoV), Pepper mild mottle virus (PMMoV), Watermelon mosaic virus (WMV), turn
  • composition according to the present invention soy Lyso-PE
  • soy Lyso-PE has the effect of alleviating the symptoms of viral diseases in plants infected with plant viruses, and can be used for controlling plant viral diseases and alleviating symptoms of plant viruses.
  • soy Lyso-PE was first sprayed on melon infected with CGMMV and confirmed one week later, the soy Lyso-PE treatment group recovered compared to the untreated group, and as a result of checking one month later, the recovery phenomenon of the ground part It was confirmed that it appeared more clearly compared to the untreated group (FIG. 2).
  • composition according to the present invention soy Lyso-PE
  • soy Lyso-PE is effective alone as described above, but when soy Lyso-PE is mixed with minerals, etc. or treated in combination with soy Lyso-PE and bactericidal insecticides, plant viruses are infected. In plants, the effect of alleviating the symptoms of viral diseases and inhibiting new infections may be further increased.
  • the composition of the present invention may further include the aforementioned mineral or bactericidal insecticide, but is not limited thereto.
  • the mineral may be specifically a natural active mineral, and more specifically, may be Mastana, but is not limited thereto.
  • the bactericidal insecticide may be specifically prepared by mixing sulfur as a natural fungicide, oil as a natural emulsifier, and ginkgo extract as a natural insecticide, but is not limited thereto.
  • soy Lyso-PE and mastera were treated. It was confirmed that the soy Lyso-PE treatment group showed a better viral disease symptom relief effect than in the soy Lyso-PE treatment group (FIGS. 21 to 26).
  • soy Lyso-PE the composition according to the present invention, has the effect of alleviating viral symptoms in plants infected with plant viruses and inhibiting new or secondary infections, controlling plant viral diseases, alleviating symptoms of plant viruses. And it can be used for the purpose of inhibiting the infection of plant viruses.
  • TSWV in leaves in the untreated group Viral disease symptoms were observed generally, and it was confirmed that more leaves without viral disease symptoms were observed in the soy Lyso-PE treatment group (FIG. 27, Table 2).
  • soy Lyso-PE The effect of soy Lyso-PE on recovering viral disease symptoms may be due to Lyso-PE 18:2 contained in soy Lyso-PE.
  • Lyso-PE 18:2 As a result of spraying Lyso-PE 18:2, Lyso-PC 18:2, and Lyso-PI 18:2 to peppers infected with TSWV virus, respectively, Lyso-PC 18:2 or Lyso- Compared to the PI 18:2 treatment group, the Lyso-PE 18:2 treatment group showed superior viral disease symptom relief effect (FIG. 16), and even when comparing the efficacy of soy Lyso-PE and pure Lyso-PE 18:2 It was found that the effect of Lyso-PE 18:2 was better than that of soy Lyso-PE (FIG. 17).
  • soy Lyso-PE 18:2 is a composition for alleviating symptoms of plant viral disease and inhibiting new infections or secondary infections (reinfection), and can be applied in various fields in agriculture.
  • soy Lyso-PE is effective alone, but by treating soy Lyso-PE by mixing it with natural active minerals, or by additionally treating soy Lyso-PE with a multi-disinfectant, etc., it is more effective to alleviate the symptoms of viral diseases. You can raise it.
  • composition for controlling plant virus diseases of the present invention may contain various components for formulation, and may include, for example, a liquid carrier, a solid carrier, a surfactant, or an adjuvant.
  • Water, vegetable oil, ethanol, etc. may be used as the liquid carrier, and the vegetable oil includes soybean oil, rapeseed oil, palm oil, palm kernel oil, rice bran oil, corn oil, palm oil, olive oil, etc. Included, but not limited thereto.
  • Mineral powder, gelatin, alginic acid, etc. may be used as the solid carrier, but is not limited thereto.
  • the mineral powder may include cation clay, bentonite, kaolin, talc, diatomaceous earth, and the like, but is not limited thereto.
  • Ethylene oxide-based, diethanolamine-based, sorbitol-based, glycerin-based, and the like may be used as the surfactant, but is not limited thereto.
  • As the auxiliary agent one or more types of extenders, antifreezes, solvents, thickeners, and electrodeposition agents may be used, but are not limited thereto.
  • compositions for alleviating symptoms of plant viral disease comprising lyso-phosphatidylethanolamine 18:2 as an active ingredient.
  • compositions for inhibiting secondary infection or new infection of plant viruses comprising lyso-phosphatidylethanolamine 18:2 as an active ingredient.
  • lyso-phosphatidylethanolamine 18:2 (Lyso-PE 18:2) to relieve symptoms or inhibit infection of plant viruses is as described above.
  • the infection inhibition may be a new infection or a secondary infection, but is not limited thereto.
  • Another aspect of the present invention provides a pesticide composition having a plant virus disease control activity, comprising the composition for controlling plant virus disease.
  • Another aspect of the present invention provides a composition for adding fertilizer having plant virus disease control activity, including the composition for controlling plant virus disease.
  • the pesticide composition or the composition for fertilizer addition of the present invention may contain general ingredients known in the art (for example, solvents, carriers, emulsifiers, dispersants, adjuvants, etc.). Not limited.
  • Another aspect of the present invention provides a method for controlling plant viral diseases, comprising the step of treating the plant or soil with the composition for controlling plant viral diseases.
  • the method may be to further include a step of treating at least one selected from bactericidal insecticides and minerals, but is not limited thereto.
  • the bactericidal insecticide may be specifically prepared by mixing sulfur as a natural fungicide, oil as a natural emulsifier, and ginkgo extract as a natural insecticide, but is not limited thereto.
  • the mineral may be specifically a natural active mineral, and more specifically, may be Mastana, but is not limited thereto.
  • the composition of the present invention may be in any one or more forms selected from the group consisting of a liquid, granule, powder, emulsion, oil, wettable, and coating agent, and the control method is not particularly limited, and the composition It may be appropriately selected and performed according to the type of.
  • the control method may be any one or more selected from the group consisting of foliage treatment, soil treatment, immersion treatment, branch treatment, and farm equipment treatment, but is not limited thereto.
  • the composition of the present invention may be treated alone or administered in combination with other control agents, may be administered sequentially or simultaneously with conventional control agents, and may be administered single or multiple. Considering all of the above factors, it is important to administer an amount that can obtain the maximum effect in a minimum amount without side effects, and the amount of treatment (spraying) or the treatment time interval may vary depending on the plant, and can be easily determined by a person skilled in the art. have.
  • the preferred treatment amount of the composition of the present invention may be appropriately adjusted by a person skilled in the art in consideration of the degree of growth of the plant, the environment of the cultivated land, the degree of onset of plant virus disease, and the like, but is not limited thereto.
  • the composition of the present invention may be treated with plants at a concentration of generally 0.1 to 100 mg/L, specifically 0.5 to 50 mg/L, and more specifically 1 to 20 mg/L. Not limited.
  • a concentration of 1 to 100,000 times the concentration when treated to a plant specifically a concentration of 100 to 50,000 times, and more specifically, a concentration of 500 to 10,000 times It can be manufactured, stored, and transported in concentration, but is not limited thereto.
  • the prepared soy Lyso-PE includes Lyso-PE 18:2, lyso-phosphatidylcholine 18:2 (Lyso-phosphatidylcholine 18:2, Lyso-PC 18:2) and lyso-phosphatidylinositol 18:2 (Lyso-phosphatidylinositol 18:2).
  • Lyso-PI 18:2 is included as a main component, and Lyso-PE 18:2: Lyso-PC 18:2: Lyso-PI 18:2 is about 6:3:1 (w/w/w) ratio It is mixed with.
  • the content of the active ingredient Lyso-PE18:2 in the stock solution for storage is 5g/L.
  • the concentration of the treatment solution applied to the leaf surface of the plant is 5 mg/L obtained by diluting the above-described stock solutions for storage 1,000 times with water.
  • the treatment method was sprayed evenly on the leaf surface of the plant with a Hand-sprayer (hand spreader), and sufficiently moistened so that water droplets fell from the leaf.
  • Example 2 Effect of soy Lyso-PE treatment on Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV) infected melon
  • soy Lyso-PE was first sprayed by the method of Example 1 and confirmed one week later. As a result, it was confirmed that the soy Lyso-PE treatment group recovered compared to the untreated group.
  • Lyso-PE The treatment effect of each type of Lyso-PE was compared for the symptoms of CGMMV virus disease that occurred in the green house of the melon plantation complex in Daeheung-ri, Seongju-myeon, Seongju-eup, Gyeongsangbuk-do.
  • egg-derived Lyso-PE egg Lyso-PE
  • pure Lyso-PE 18:1 egg Lyso-PE
  • soy Lyso-PE egg Lyso-PE
  • Plants were treated. Each treatment group was repeated 3 times.
  • the comprehensive disinfectant was prepared by mixing 1.2, 10, and 15 ml of a natural disinfectant sulfur, a natural emulsifier, and ginkgo extract, respectively, in 473.8 ml of water sold by Jadam (Korea).
  • soy Lyso-PE seems to be further maximized by exerting a synergistic effect when the general disinfectant is treated in the middle.
  • Example 6 Synergistic effect of additional treatment of a multi-disinfectant in the middle of soy Lyso-PE treatment period to tomato spotted wilt virus (TSWV)-infected peppers
  • TSWV 16 pepper plants infected with TWSV (Fig. 11) were identified in a garden in the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology (Yooseong-gu, Daejeon).
  • TSWV is a virus that seriously damages peppers and is also referred to as'color virus disease', and it is not colored evenly, and circular spots appear on the leaves due to the appearance of reddish patterns on the fruit of the pepper.
  • soy Lyso-PE treatment was effective in alleviating the symptoms of fruit virus disease.
  • soy Lyso-PE and multidisinfectant treatment had a remarkable effect than soy Lyso-PE alone treatment.
  • the ratio of abnormal red fruit was 100% of untreated and multidisinfectant, whereas about 30% of soy Lyso-PE treatment group and 9.1% of soy Lyso-PE and multidisinfectant treatment group showed that the final product, red pepper. It was observed that the effect on color recovery was great.
  • Example 7 Identification of major effective components in the effect of soy Lyso-PE on recovering symptoms of viral disease
  • soy Lyso-PE consists of Lyso-PE 18:2 (60%), Lyso-PC 18:2 (30%), and Lyso-PI 18:2 (10%).
  • soy Lyso-PE in recovering viral disease symptoms, a detailed experiment was conducted in a greenhouse within the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology in order to determine which of the above three substances is the main effective component.
  • Seeds received from peppers infected with TSWV virus in 2019 were germinated and grown in spring 2020, and then plants uniformly infected with TSWV virus were secured.
  • Lyso-PE 18:2, Lyso-PC 18:2, and Lyso-PI 18:2 were sprayed three times on the plants at 1-week intervals, and then, after 3 days, relief of viral disease symptoms was observed.
  • Lyso-PC 18:2 treatment group alleviated the leaf shrivel to a certain level, and the Lyso-PI 18:2 treatment group had little effect on alleviating the symptoms of viral disease.
  • Lyso-PE 18:2 treatment group showed excellent viral disease symptom relief effect (FIG. 16).
  • Lyso-PE 18:2 is the main component showing the soy Lyso-PE viral symptom relief effect.
  • Potato (baron and red potato) seeds were purchased from a seed company and sprouted, and virus infection was investigated in young leaves. As a result, potato virus Y (Potato virus Y, PVY) and potato leafroll virus (PLRV) were detected. Baron potatoes (FIG. 18) and red potatoes (FIG. 19) found to be infected with PVY were cultivated in a greenhouse within the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology.
  • baron potatoes were 1 in each treatment group, a total of 7 times per week, and red potatoes were 3 in each treatment group. A total of 4 treatments were performed on the basis of once a week.
  • the virus-infected potato was treated with soy Lyso-PE, which showed the effect of reducing virus damage.
  • the soy Lyso-PE and mastera mixture treatment group showed more excellent viral disease symptom relief than the soy Lyso-PE treatment group (FIG. 21).
  • the vitality of leaves appeared more clearly and showed faster growth.
  • Apple is against three viruses: Apple chlorotic leafspot virus (ACLSV), Apple Stem Pitting Virus (ASPV), and Apple stem grooving virus (ASGV).
  • ACLSV Apple chlorotic leafspot virus
  • ASPV Apple Stem Pitting Virus
  • ASGV Apple stem grooving virus
  • Cheongyang pepper seeds that are not infected with virus are purchased from Heungnong Seeds, germinated in a glass greenhouse of the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, and grown into red pepper seedlings. It was cultivated in a weekly pot. The disease-free seedlings used in this experiment were divided into untreated and soy Lyso-PE treated groups, cultivated adjacent to the existing TSWV-infected pepper plants and treated with soy Lyso-PE before the pepper seedlings blossomed. We investigated whether it has the effect of inhibiting new infection from virus.
  • the soy Lyso-PE treatment group was treated a total of three times a week before pepper seedlings blossomed, and TSWV infection damage was observed in leaves and fruits after 10 days.
  • soy Lyso-PE according to the present invention can be provided for alleviating symptoms of viral disease and inhibiting new infections in plants infected with plant viruses, and for alleviating symptoms and inhibiting new or secondary infections.
  • the viral symptom-relieving effect of soy Lyso-PE according to the present invention is particularly exerted by Lyso-PE 18:2, which is the main component of soy Lyso-PE, soy Lyso-PE and Lyso-PE, which is the main component thereof.
  • 18:2 is a composition for alleviating symptoms of plant viral disease and inhibiting secondary infections or new infections, and can be applied in various fields in agriculture.
  • soy Lyso-PE is effective alone, but by treating soy Lyso-PE by mixing it with natural active minerals, or by additionally treating soy Lyso-PE with a multi-disinfectant, etc., it is more effective to alleviate the symptoms of viral diseases. You can raise it.

Abstract

본 발명은 식물바이러스병 증상을 완화시키는 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2(lyso-phosphatidylethanolamine 18:2, Lyso-PE 18:2)를 포함하는 조성물 및 이의 용도에 관한 것이다. 본 발명에 따른 soy Lyso-PE는 식물바이러스에 감염된 식물체에서 바이러스병 증상을 완화시키고 2차 감염 및 신규 감염을 억제시키는 바, 증상 완화 및 신규 감염 또는 2차 감염 억제 용도로 제공될 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 soy Lyso-PE의 바이러스병 증상완화 효과는 특히 soy Lyso-PE의 주성분인 Lyso-PE 18:2에 의해 발휘되는 것인 바, soy Lyso-PE 및 이의 주성분인 Lyso-PE 18:2는 식물바이러스병 증상 완화 및 2차 감염 또는 신규 감염 억제용 조성물로 농업 분야에 다양하게 적용될 수 있다. 뿐만 아니라, soy Lyso-PE는 단독으로도 효과가 있으나 soy Lyso-PE을 천연활성미네랄 등과 혼합하여 처리하거나 soy Lyso-PE 처리 사이에 종합살균살충제 등을 추가로 처리함으로서 바이러스병 증상 완화 효과를 더욱 상승시킬 수 있다.

Description

식물바이러스병 증상을 완화시키는 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2를 포함하는 조성물 및 이의 용도
본 발명은 식물바이러스병 증상을 완화시키는 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2(lyso-phosphatidylethanolamine 18:2, Lyso-PE 18:2)를 포함하는 조성물 및 이의 용도에 관한 것이다.
식물바이러스병은 농작물 재배에 치명적이어서 한번 걸리면 급속히 전파되어 농가의 경제적 손실을 야기한다. 이러한 피해는 국내뿐 아니라 글로벌적으로 원예작물과 식량작물에 두루 발생하며 피해액이 수십 조원이 넘고 있다. 이러한 상황에서 세계 식량 안보적 측면에서 주요 원예 식량작물들의 피해를 경감하기 위해서는 식물바이러스병 증상을 완화시키는 치료제 개발이 매우 중요하다. 하지만, 널리 상용화되고 있는 효율적인 식물바이러스병 치료제는 없다. 현재는 단순히 식물바이러스의 증식을 일시적으로 억제시키는 항 바이러스 물질이 사용되고 있을 뿐이다. 그러므로 글로벌적으로 효과적인 식물바이러스병 치료 제품의 개발이 시급한 실정이다. 현재까지 식물바이러스병 치료를 위한 다양한 조성물이 개발되어 왔고, 일 예로 녹차추출물을 포함하는 식물바이러스병 방제용 조성물(한국등록특허 10-2080889호) 등이 있다.
본 발명자들은 콩 유래 리소-포스파티딜에탄올아민(soy lyso-phosphatidylethanolamine, soy Lyso-PE)가 계란 유래 Lyso-PE(egg Lyso-PE)와 순수 Lyso-PE 18:1에 비하여 식물바이러스병 증상의 경감에 우수한 효과가 있음을 확인하였고, soy Lyso-PE의 구성성분인 Lyso-PE 18:2, 리소- 포스파티딜콜린 18:2(Lyso-phosphatidylcholine 18:2, Lyso-PC 18:2) 및 리소- 포스파티딜이노시톨 18:2(Lyso-phosphatidylinositol 18:2, Lyso-PI 18:2) 중 Lyso-PE 18:2가 식물바이러스병 증상을 경감시켜 주는 효과가 가장 탁월함을 확인하였다. 또한, soy Lyso-PE 처리기간 중간에 종합살균살충제를 추가로 살포하여 주었을 때 또는 천연활성미네랄과 혼합하여 살포하여 주었을 때에 시너지 효과가 나타나 바이러스병 증상 완화 정도가 더욱 뚜렷이 나타나는 것을 확인하였다. 뿐만 아니라, 바이러스병에 감염되기 전에 Lyso-PE 18:2를 살포할 경우, 바이러스병에 대한 2차 감염 또는 신규 감염 억제 효과가 있음을 확인하여, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 리소-포스파티딜에탄올아민(lyso-phosphatidylethanolamine) 18:2를 유효성분으로 포함하는, 식물바이러스병 방제용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2를 유효성분으로 포함하는, 식물 바이러스병 증상 완화용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2를 유효성분으로 포함하는, 식물 바이러스의 2차 감염 또는 신규 감염 억제용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 식물바이러스병 방제용 조성물을 포함하는, 식물바이러스병 방제 활성을 갖는 농약 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 식물바이러스병 방제용 조성물을 포함하는, 식물바이러스병 방제 활성을 갖는 비료 첨가용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 식물바이러스병 방제용 조성물을 식물체 또는 토양에 처리하는 단계를 포함하는, 식물바이러스병의 방제 방법을 제공하는 것이다.
본 발명에 따른 soy Lyso-PE는 식물바이러스에 감염된 식물체에서 바이러스병 증상을 완화시키고 신규 감염을 억제시키는 바, 증상 완화 및 2차 감염 또는 신규 감염 억제 용도로 제공될 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 soy Lyso-PE의 바이러스병 증상완화 효과는 특히 soy Lyso-PE의 주성분인 Lyso-PE 18:2에 의해 발휘되는 것인 바, soy Lyso-PE 및 이의 주성분인 Lyso-PE 18:2는 식물바이러스병 증상 완화 및 2차 감염 또는 신규 감염 억제용 조성물로 농업 분야에 다양하게 적용될 수 있다. 뿐만 아니라, soy Lyso-PE는 단독으로도 효과가 있으나 soy Lyso-PE을 천연활성미네랄 등과 혼합하여 처리하거나 soy Lyso-PE 처리 사이에 종합살균살충제 등을 추가로 처리함으로서 바이러스병 증상 완화 효과를 더욱 상승시킬 수 있다.
도 1은 경북 성주읍 성주면에서 재배한 참외가 오이 녹색 반점 모자이크 바이러스(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)로 감염된 것을 보여주는 항체검정키트(Immuno-kit)의 사진이다.
도 2는 참외의 CGMMV 바이러스병 증상이 주요 유효성분이 콩 유래 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2(lyso-phosphatidylethanolamine 18:2, Lyso-PE 18:2)인 soy Lyso-PE 처리군에서 무처리군과 비교하여 완화된 것을 보여주는 사진이다.
도 3은 참외의 CGMMV 바이러스병 증상이 soy Lyso-PE 처리군에서 무처리군, 계란 유래 Lyso-PE(egg Lyso-PE) 또는 Lyso-PE 18:1에 비교하여 현격히 완화된 것을 보여주는 사진이다. Egg Lyso-PE의 주요 성분은 Lyso-PE16:0 및 Lyso-PE18:0이다. (A) 무처리군, (B) Egg Lyso-PE 처리군, (C) 순수 Lyso-PE 18:1 처리군, (D) soy Lyso-PE 처리군.
도 4는 CGMMV 바이러스에 감염된 참외에 Lyso-PE 여러 종류를 처리한 후 정상적으로 성장한 신초 개수이다. 데이터는 3회 반복의 평균 및 표준편차로 나타내었다. 별표(*)는 t-test를 통해 검정된 무처리구와 비교하여 통계적으로 유의성이 있는 차이를 나타낸다. *P < 0.05; **P < 0.01.
도 5는 경북 상주시 이안면에서 재배한 오이가 호박 누른 모자이크 바이러스(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV)로 감염된 것을 보여주는 항체검정키트의 사진이다.
도 6는 오이의 ZYMV 바이러스병 증상이 soy Lyso-PE 처리군에서 Egg Lsyo-PE 또는 순수 Lyso-PE 18:1에 비교하여 현격히 완화되는 것을 보여주는 사진이다. (A) Egg Lyso-PE 처리군, (B) 순수 Lyso-PE 18:1 처리군, (C) soy Lyso-PE 처리군.
도 7은 ZYMV 바이러스에 감염된 오이에 Lyso-PE 여러 종류를 처리한 후 정상적으로 성장한 신엽 개수이다. 데이터는 3 회 반복의 평균 및 표준편차로 나타내었다. 별표(*)는 t-test를 통해 검정된 무처리구와 비교하여 통계적으로 유의성이 있는 차이를 나타낸다. **P < 0.001.
도 8은 Lyso-PE 18:1를 처리하였으나 ZYMV 바이러스병 증상이 완화되지 못한 오이에 Lyso-PE 18:2를 처리한 후 바이러스병 증상이 현격히 완화되고 다시 정상적인 성장을 하는 것을 보여주는 사진이다.
도 9은 경북 상주시 은척면에서 재배한 고추가 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus, CMV)로 감염된 것을 보여주는 항체검정키트의 사진이다.
도 10은 soy Lyso-PE 처리군에서 무처리군과 비교하여 고추 잎의 CMV 바이러스병 증상이 완화되는 것과 그 완화 효과가 종합살균살충제를 처리기간 중간에 추가로 처리하였을 때 극대화된 것을 보여주는 사진이다. (A) 무처리군, (B) soy Lyso-PE 처리군, (C) 종합살균살충제 처리군. (D) soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리군.
도 11는 한국생명공학연구원 내에 재배한 고추가 토마토 반점 시듦 바이러스(Tomato spotted wilt virus, TSWV)로 감염된 것을 보여주는 항체검정키트의 사진이다.
도 12은 TWSV 바이러스에 감염된 고추에 아무것도 살포하지 않은 무처리군에서의 무처리 전과 무처리 후 사진이다.
도 13은 TWSV 바이러스에 감염된 고추에 종합살균살충제를 살포한 처리군에서의 처리 전과 처리 후 사진이다.
도 14는 TWSV 바이러스에 감염된 고추에 Lyso-PE를 살포한 처리군에서의 처리 전과 처리 후 사진이다.
도 15은 TWSV 바이러스에 감염된 고추에 Lyso-PE 및 종합살균살충제를 살포한 처리군에서 처리 전과 처리 후 사진이다.
도 16는 soy Lyso-PE의 구성성분 중 Lyso-PE 18:2가 Lyso-PC 18:2와 Lyso-PI 18:2에 비하여 고추의 TSWV 바이러스병 증상 회복에 탁월한 효과가 있음을 보여주는 사진이다.
도 17는 순수 Lyso-PE 18:2가 다양한 Lyso-PE가 혼합되어 있는 soy Lyso-PE보다 고추의 TSWV 바이러스병 증상 회복 효과가 우수함을 보여주는 사진이다.
도 18은 감자 바이러스 Y(Potato virus Y, PVY)와 감자 엽권 바이러스(Potato leafroll virus, PLRV)에 복합 감염된 남작 감자에 soy Lyso-PE를 살포한 처리군이 무처리군과 비교하여 잎의 쪼그라진 바이러스병 증상이 완화되고 수확량이 증가된 것을 보여주는 사진이다.
도 19은 PVY 바이러스에 감염된 홍감자 및 PVY 및 PLRV 바이러스에 감염된 홍감자에 soy Lyso-PE를 살포한 처리군에서 무처리군과 비교하여 식물체가 잘 자라고 남작 감자 및 홍감자에서 수확량이 증가되는 것을 보여주는 사진이다.
도 20은 고구마 잎말림바이러스(Sweet potato leaf curl virus, APLCV)에 감염된 고구마에 soy Lyso-PE를 살포한 처리군에서 무처리군과 비교하여 식물체가 잘 자라는 것을 확인한 도이다.
도 21은 TWSV 바이러스에 감염된 고추에 soy Lyso-PE 및 마스타나(Mastana; MST)의 혼합액을 살포한 처리군에서 무처리군과 soy Lyso-PE 처리군과 비교하여 바이러스병 증상이 완화된 것을 보여주는 사진이다.
도 22는 사과의 바이러스병 증상이 soy Lyso-PE 및 마스타나의 혼합액을 처리하였을 때 무처리군과 비교하여 완화된 것을 보여주는 사진이다.
도 23은 감의 바이러스병 증상이 soy Lyso-PE 및 마스타나의 혼합액을 처리하였을 때 처리 전과 비교하여 완화된 것을 보여주는 사진이다.
도 24는 옥수수의 바이러스병 증상이 soy Lyso-PE 및 마스타나의 혼합액을 처리하였을 때 처리 전과 비교하여 완화된 것을 보여주는 사진이다.
도 25는 콩의 바이러스병 증상이 soy Lyso-PE 및 마스타나의 혼합액을 처리하였을 때 처리 전과 비교하여 정상적인 신초가 자라 나오는 것을 보여주는 사진이다.
도 26은 가지의 바이러스병 증상이 soy Lyso-PE 및 마스타나의 혼합액을 처리하였을 때 무처리군과 비교하여 완화된 것을 보여주는 사진이다.
도 27은 바이러스에 감염이 되지 않은 고추에 soy Lyso-PE 처리를 처리하였을 때 처리군에서 무처리군과 비교하여 바이러스 감염이 억제된 것을 보여주는 사진이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 출원에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 출원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 출원의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하나의 양태로서 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2(lyso-phosphatidylethanolamine 18:2, Lyso-PE 18:2)를 유효성분으로 포함하는, 식물바이러스병 방제용 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어, "리소-포스파티딜에탄올아민(lyso-phosphatidylethanolamine, Lyso-PE, LPE)"은 세포막의 전형적인 구성성분 포스파티딜에탄올아민(phosphatidylethanolamine)으로부터 유래하는 천연물질 화합물을 의미한다. Lyso-PE는 세포에서 포스파티딜에탄올아민의 아실 체인(acyl chain) 중 하나를 제거하는 포스포리파제 A(phospholipase A; PLA)의 부분 가수분해에 의하여 생산된다. 본 발명에 있어서, Lyso-PE 18:2은 Lyso-PE의 일종이다.
본 발명에 있어서, 상기 Lyso-PE 18:2를 유효성분으로 포함하는 식물바이러스병 방제용 조성물은 콩으로부터 유래하는 바, soy Lyso-PE로 명명될 수 있다. 상기 조성물은 유효성분인 Lyso-PE 18:2를 비롯하여, 콩 유래의 오일 및 기타 부산물을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구현 예에서, 상기 soy Lyso-PE은 콩에서 추출한 인지질에 PLD(Phospholipase D)와 PLA(phospholipase A) 효소를 순차적 처리하여 얻은 대사물질 Lyso-PE 등을 mock 용액[글리세린(glycerin):옥타노익산(octanoic acid) = 6:4 (w/w)]에 녹여 제조하는 것일 수 있다. 상기 Mock 용액은 당업계에서 사용되는 인지질을 녹이는 Mock 용액이면 제한 없이 사용할 수 있다. 또한, 상기 방법은 당업계에서 사용되는 콩으로부터 Lyso-PE을 추출 또는 분리하는 방법이면 제한 없이 사용할 수 있다.
본 발명에 따라 제조된 soy Lyso-PE에는 Lyso-PE 18:2, 리소- 포스파티딜콜린 18:2(Lyso-phosphatidylcholine 18:2, Lyso-PC 18:2) 및 리소- 포스파티딜이노시톨 18:2(Lyso-phosphatidylinositol 18:2, Lyso-PI 18:2)이 주성분으로 포함되어 있으며, 구체적으로 Lyso-PE 18:2 : Lyso-PC 18:2 : Lyso-PI 18:2가 약 7 내지 5:2 내지 4:1 (w/w/w) 비율로 혼합되어 있는 것일 수 있고, 보다 구체적으로 6:3:1 비율로 혼합되어 있는 것일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 식물바이러스병은 식물바이러스에 의해 유발되는 식물체에서의 병증을 의미한다.
본 발명에 있어서, 식물바이러스는 오이 녹색 반점 모자이크 바이러스(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV), 호박 누른 모자이크 바이러스(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV), 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus, CMV), 토마토 반점 시듦 바이러스(Tomato spotted wilt virus, TSWV), 감자 바이러스 Y(Potato virus Y, PVY), 감자 엽권 바이러스(Potato leafroll virus, PLRV), 고구마 잎말림병 바이러스 (Sweet potato leaf curl virus, SPLCV), 고구마 모틀 바이러스 (Sweet potato feathery mottle virus, SPFMV), ACLSV(Apple chlorotic leafspot virus), ASPV(Apple Stem Pitting Virus), ASGV(Apple stem grooving virus), 사과 황화 잎반점 바이러스(Apple chlorotic leafspot virus, ACLSV), 사과 줄기 구덩이 바이러스(Apple Stem Pitting Virus, ASPV), 사과 줄기 그루빙 바이러스(Apple stem grooving virus, ASGV), 콩 모자이크 바이러스(soybean yellow mottle mosaic virus), 감 잠재바이러스(PeCV), 옥수수 위축바이러스(Maize dwarf mosaic virus), 담배 모자이크 바이러스(Tobacco mosaic virus, TMV), 고추 모틀 바이러스(Pepper mottle virus, PepMoV), 고추 마일드 모틀 바이러스(Pepper mild mottle virus, PMMoV), 수박 모자이크 바이러스(Watermelon mosaic virus, WMV), 순무 모자이크 바이러스(Turnip Yellow Mosaic Virus, TuMV), 메론 괴저 반점 바이러스(Melon necrotic spot virus, MNSV), 호박 녹반 모자이크 바이러스(Zucchini green mottle mosaic virus, ZGMMV), 나리 모틀 바이러스((lily mottle virus, LMoV), 나리 무병징 바이러스(Lily symptomless virus, LSV), 오돈토그로솜 윤점 바이러스(Odontoglossum ringspot virus, ORSV), 심비디움 모자이크 바이러스(cymbidium mosaic virus, CyMV), 잠두 위축 바이러스(Broad Bean Wilt Virus, BBWV), 토마토 윤점 바이러스(Tomato ringspot virus, TomRSV), 담배 윤점 바이러스(Tobacco ringspot virus, TRSV), 딸기 모틀 바이러스(Strawberry mottle virus, SMoV) 및 선인장 바이러스 X(Cactus virus X, CVX)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있고, 구체적으로 오이 녹색 반점 모자이크 바이러스(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV), 호박 누른 모자이크 바이러스(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV), 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus, CMV), 토마토 반점 시듦 바이러스(Tomato spotted wilt virus, TSWV), 감자 바이러스 Y(Potato virus Y, PVY), 감자 엽권 바이러스(Potato leafroll virus, PLRV), 고구마 잎말림병 바이러스 (Sweet potato leaf curl virus, SPLCV), 고구마 모틀 바이러스 (Sweet potato feathery mottle virus, SPFMV), ACLSV(Apple chlorotic leafspot virus), ASPV(Apple Stem Pitting Virus), ASGV(Apple stem grooving virus), 사과 황화 잎반점 바이러스(Apple chlorotic leafspot virus, ACLSV), 사과 줄기 구덩이 바이러스(Apple Stem Pitting Virus, ASPV), 사과 줄기 그루빙 바이러스(Apple stem grooving virus, ASGV), 콩 모자이크 바이러스(soybean yellow mottle mosaic virus), 감 잠재바이러스(PeCV) 및 옥수수 위축바이러스(Maize dwarf mosaic virus)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 따른 조성물인 soy Lyso-PE는 식물바이러스에 감염된 식물체에서 바이러스병 증상을 완화시키는 효과가 있는 바, 식물바이러스병 방제, 식물 바이러스의 증상 완화 용도로 사용될 수 있다.
본 발명의 일구현예에서, CGMMV에 감염된 참외에 soy Lyso-PE를 1차 살포하고 1주일 후 확인한 결과 soy Lyso-PE 처리군이 무처리군에 비해 회복되었고, 한달 후 확인한 결과 지상부의 회복 현상이 무처리군에 비하여 더욱 뚜렷하게 나타나는 것을 확인하였다(도 2).
CGMMV에 감염된 참외에 soy Lyso-PE를 처리한 결과 다른 Lyso-PE, 즉, 계란 유래 Lyso-PE(egg Lyso-PE), 순수 Lyso-PE 18:1에 비해 바이러스병 증상 완화가 현저히 나타나는 것을 확인하였다(도 3 및 도 4), Egg Lyso-PE의 주요 성분은 Lyso-PE16:0 및 Lyso-PE18:0이다. ZYMV에 감염된 오이에 soy Lyso-PE를 처리한 결과 계란 유래 Lyso-PE(egg Lyso-PE), 순수 Lyso-PE 18:1에 비해 바이러스병 증상 완화가 현저히 나타나는 것을 확인하였다(도 6 및 도 7). 특히, Lyso-PE 18:1를 4회 처리하였음에도 바이러스병 증상이 완화되지 못하고 오히려 죽어가는 오이에 soy Lyso-PE를 4회 처리하였을 때 바이러스병 증상이 완화되어 신초가 나오고 정상적으로 생장하는 것을 확인하였다(도 8).
또한, PVY와 PLRV에 복합 감염된 감자 또는 PVY에 감염된 감자에 soy Lyso-PE를 처리한 결과, 바이러스 피해가 경감되고, 식물체 생장이 더 활발해지며, 식물체의 수고와 엽수가 증가하였으며, 수확량이 현저히 증가하는 것을 확인하였다(도 18, 도 19).
본 발명에 따른 조성물인 soy Lyso-PE는 전술한 바와 같이 단독으로도 효과가 있으나 soy Lyso-PE을 미네랄 등과 혼합하여 처리하거나 soy Lyso-PE와 살균살충제 등을 병용 처리하는 경우, 식물바이러스에 감염된 식물체에서 바이러스병 증상을 완화시키고 신규 감염을 억제시키는 효과가 더욱 증대될 수 있다. 이에, 본 발명의 조성물은 전술한 미네랄 또는 살균살충제를 추가로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 미네랄은 구체적으로 천연활성미네랄일 수 있고, 보다 구체적으로 마스타나(Mastana)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 상기 살균살충제는 구체적으로 천연 살균제인 유황, 천연 유화제인 오일 및 천연 살충제인 은행 추출액을 혼합하여 제조한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일구현예에서, CMV 또는 TSWV에 감염된 고추에 soy Lyso-PE를 1차 및 2차 처리하고, 1차와 2차의 사이에 종합살균살충제를 살포한 결과, soy Lyso-PE 단독처리군, 종합살균살충제 단독처리군에 비해 현저히 우수한 바이러스병 증상완화 효과가 나타나는 것을 확인하였다(도 10, 도 15, 표 1).
또한, TSWV 바이러스 감염 고추를 비롯하여 바이러스에 감염된 사과, 감, 옥수수, 콩, 및 가지에 soy Lyso-PE와 천연활성미네랄인 마스타나를 혼합한 혼합액을 처리한 결과, soy Lyso-PE 및 마스타나 혼합액 처리군에서 soy Lyso-PE 처리군보다 더 뛰어난 바이러스병 증상완화 효과가 나타나는 것을 확인하였다(도 21 내지 도 26).
뿐만 아니라, 본 발명에 따른 조성물인 soy Lyso-PE는 식물바이러스에 감염된 식물체에서 바이러스병 증상을 완화시키고 신규 감염 또는 2차 감염을 억제시키는 효과가 있는 바, 식물바이러스병 방제, 식물 바이러스의 증상 완화 및 식물 바이러스의 감염 억제 용도로 사용될 수 있다.
본 발명의 일구현예에서, 꽃이 피고 열매가 맺히는 단계의 고추를 무처리와 soy Lyso-PE 처리군으로 나누어 기존의 TSWV에 감염된 고추 식물체에 인접하여 재배한 결과, 무처리군에서는 잎에서 TSWV 바이러스병 증상이 전반적으로 많이 관찰되었고, soy Lyso-PE 처리군에서는 바이러스병 증상이 나타나지 않는 잎이 더 많이 관찰되는 것을 확인하였다(도 27, 표 2).
상기 soy Lyso-PE의 바이러스병 증상 회복 효과는 soy Lyso-PE에 포함된 Lyso-PE 18:2에 의한 것일 수 있다.
본 발명의 일구현예에서, TSWV 바이러스에 감염된 고추에 Lyso-PE 18:2, Lyso-PC 18:2, 및 Lyso-PI 18:2을 각각 살포한 결과, Lyso-PC 18:2 또는 Lyso-PI 18:2 처리군에 비해 Lyso-PE 18:2 처리군은 우수한 바이러스병 증상 완화효과를 나타내었으며(도 16), soy Lyso-PE와 순수 Lyso-PE 18:2의 효능을 비교하였을 때에도 순수 Lyso-PE 18:2의 효과가 soy Lyso-PE 보다 좀더 우수한 것으로 나타났다(도 17).
즉, 본 발명에 따른 조성물인 soy Lyso-PE의 바이러스병 증상완화 효과는 특히 soy Lyso-PE의 주성분인 Lyso-PE 18:2에 의해 발휘되는 것인 바, soy Lyso-PE 및 이의 주성분인 Lyso-PE 18:2는 식물바이러스병 증상 완화 및 신규 감염 또는 2차 감염(재감염) 억제용 조성물로 농업 분야에 다양하게 적용될 수 있다. 뿐만 아니라, soy Lyso-PE는 단독으로도 효과가 있으나 soy Lyso-PE을 천연활성미네랄 등과 혼합하여 처리하거나 soy Lyso-PE 처리 사이에 종합살균살충제 등을 추가로 처리함으로서 바이러스병 증상 완화 효과를 더욱 상승시킬 수 있다.
본 발명의 식물바이러스병 방제용 조성물은 제형화를 위해 다양한 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 액체 담체, 고체 담체, 계면활성제 또는 보조제 등이 포함될 수 있다.
상기 액체 담체로는 물(water), 식물유(vegetable oil), 에탄올(ethanol) 등이 사용될 수 있으며, 상기 식물유에는 대두유, 유채씨기름, 야자유, 팜핵유, 미강유, 옥수수유, 팜유, 올리브유 등이 포함되고, 이에 제한되지 않는다. 상기 고체 담체로는 광물 분말, 젤라틴, 알긴산 등이 사용될 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 상기 광물 분말로는 양이온 점토(cation clay), 벤토나이트(bentonite), 카올린(kaolin), 탈크(Talc), 규조토(diatomaceous earth) 등이 사용될 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 상기 계면활성제로는 에틸렌옥사이드(Ethyleneoxide)계, 다이에탄올아민(Diethanolamine)계, 솔비톨(Sorbitol)계, 글리세린(Glycerine)계 등이 사용될 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 상기 보조제로는 증량제, 부동액, 용제, 증점제, 및 전착제 등이 1종 이상 사용될 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 다른 양태는 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2를 유효성분으로 포함하는, 식물 바이러스병 증상 완화용 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 양태는 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2를 유효성분으로 포함하는, 식물 바이러스의 2차 감염 또는 신규감염 억제용 조성물을 제공한다.
여기에서 사용되는 용어는 전술한 바와 같다.
상기 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2(Lyso-PE 18:2)의 식물 바이러스의 증상 완화 또는 감염 억제 효과에 대해서는 전술한 바와 같다.
상기 감염 억제는 신규 감염 또는 2차 감염일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 다른 양태는 상기 식물바이러스병 방제용 조성물을 포함하는, 식물바이러스병 방제 활성을 갖는 농약 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 양태는 상기 식물바이러스병 방제용 조성물을 포함하는, 식물바이러스병 방제 활성을 갖는 비료 첨가용 조성물을 제공한다.
여기에서 사용되는 용어는 전술한 바와 같다.
본 발명의 농약 조성물 또는 비료 첨가용 조성물에는 유효성분인 Lyso-PE 18:2 이외에 당업계에 공지된 일반적인 성분(예를 들어, 용매, 담체, 유화제, 분산제, 보조제 등)이 포함될 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 또 하나의 양태는 상기 식물바이러스병 방제용 조성물을 식물체 또는 토양에 처리하는 단계를 포함하는, 식물바이러스병의 방제 방법을 제공한다.
상기 방법은 살균살충제 또는 미네랄 중 선택되는 어느 하나 이상을 처리하는 단계를 추가로 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 살균살충제는 구체적으로 천연 살균제인 유황, 천연 유화제인 오일 및 천연 살충제인 은행 추출액을 혼합하여 제조한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 상기 미네랄은 구체적으로 천연활성미네랄일 수 있고, 보다 구체적으로 마스타나(Mastana)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 방제 방법에 있어서, 본 발명의 조성물은 액제, 입제, 분제, 유제, 오일제, 수화제, 및 도포제로 이루어지는 군 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 형태일 수 있으며, 방제 방법은 특별이 제한되지 않고 상기 조성물의 형태에 따라 적절하게 선택되어 수행될 수 있다. 구체적으로, 상기 방제 방법은 경엽처리, 토양처리, 침지처리, 가지처리, 및 농기구 처리로 이루어지는 군 중에서 선택되는 어느 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 방제 방법에 있어서, 본 발명의 조성물은 단독으로 처리하거나 다른 방제제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 방제제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 처리(살포)량 또는 처리 시간 간격은 식물체에 따라 다를 수 있고, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물의 바람직한 처리량은 식물체의 생육정도, 경작지 환경, 식물바이러스병의 발병 정도 등을 고려하여 당업자에 의해 적절하게 조절할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 조성물은 일반적으로 0.1 내지 100 mg/L의 농도, 구체적으로는 0.5 내지 50 mg/L의 농도, 보다 구체적으로는 1 내지 20 mg/L의 농도로 식물체에 처리되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 조성물을 제조, 보관, 및 운반할 경우 일반적으로 식물체에 처리시 농도보다 1 내지 100,000배의 농축 농도, 구체적으로는 100 내지 50,000배의 농축 농도, 보다 구체적으로는 500 내지 10,000배의 농축 농도로 제조, 보관, 및 운반할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
이하 본 출원을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 출원을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 출원의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 콩 유래 soy Lyso-PE와 순수 Lyso-PE18:2, Lyso-PC18:2, Lyso-PI18:2의 제조 및 식물체에 처리방법
콩에서 추출한 인지질에 PLD(phospholipase D)와 PLA(Phospholipase A) 효소를 US 6,773,902B1(두산, 한국)에 기술된 방법에 따라 처리 후 mock 용액[글리세린(glycerin):옥타노익산(octanoic acid) = 6:4 (w/w)]에 녹여 soy Lyso-PE를 제조하였다. 제조된 soy Lyso-PE에는 Lyso-PE 18:2, 리소- 포스파티딜콜린 18:2(Lyso-phosphatidylcholine 18:2, Lyso-PC 18:2) 및 리소- 포스파티딜이노시톨 18:2(Lyso-phosphatidylinositol 18:2, Lyso-PI 18:2)이 주성분으로 포함되어 있으며, Lyso-PE 18:2 : Lyso-PC 18:2 : Lyso-PI 18:2가 약 6:3:1 (w/w/w) 비율로 혼합되어 있다. 보관용 원액에서의 유효성분 Lyso-PE18:2의 함량은 5g/L이다.
Lyso-PE18:2, Lyso-PC18:2 및 Lyso-PI18:2는 Avanti Polar Lipids(미국)에서 구매한 PE(16:0/18:2), PC(16:0/18:2) 및 Soy PI에 Sigma-Aldrich(미국)에서 구매한 PLA 효소 Novozyme 435를 처리하여 생산한 다음 mock 용액(glycerin:octanoic acid = 6:4)에 녹여 제조하였다. 보관용 원액에서의 Lyso-PE18:2, Lyso-PC18:2 및 Lyso-PI18:2의 함량은 각각 5g/L이다.
식물체에의 엽면에 살포하는 처리 용액의 농도는 별도의 기재가 없는 한 상기한 보관용 원액들을 물로 1,000배 희석한 5mg/L이다. 처리방법은 Hand-sprayer(손 살포기)로 식물체 엽면에 골고루 분사하며, 잎에서 물방울이 떨어질 정도로 충분히 적셔주었다.
실시예 2. 오이 녹색 반점 모자이크 바이러스(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV) 감염된 참외에 대한 soy Lyso-PE 처리효과
2019년 1월 경북 성주읍 성주면 대흥리 참외재배단지 비닐하우스 내에서 발생한 바이러스를 항체검정키트(Immuno-kit)로 조사한 결과 CGMMV로 판명되었다(도 1).
2019년 2월 22일에 실시예 1의방법으로 soy Lyso-PE를 1차 살포하고 1주일 후 확인하였다. 그 결과, soy Lyso-PE 처리군에서 무처리군에 비해 회복하는 것을 확인하였다.
또한, 이로부터 한달 후인 3월 23일에 soy Lyso-PE 처리군에서 지상부의 회복 현상이 무처리군에 비하여 더욱 뚜렷하게 나타났다(도 2). 구체적으로, 잎의 노란 바이러스병색이 사라지고 건강한 녹색 잎이 새롭게 자라났으며 참외 과실에서도 바이러스 증상이 사라지고 정상 형태를 나타내었다.
실시예 3. CGMMV 감염된 참외에 대한 soy Lyso-PE 특이적 처리효과
경북 성주읍 성주면 대흥리 참외재배단지 비닐하우스 내에서 발생한 CGMMV 바이러스병 증상에 대하여 Lyso-PE 종류별 처리효과를 비교하였다.
2019년 4월 13일에 무처리군, 계란 유래 Lyso-PE(egg Lyso-PE), 순수 Lyso-PE 18:1, soy Lyso-PE를 실시예1의 방법으로 각각 1.5m x 2 m 구간의 참외 식물체에 처리하였다. 각 처리군은 3반복하였다.
그 결과, Lyso-PE 처리 후 8일 뒤 무처리군(도 3A)와 비교하여 Egg Lyso-PE(도 3B), 순수 Lyso-PE 18:1(도 3C) 처리군에서는 큰 차이가 없었다. 그러나 Soy Lyso-PE 처리구에서는 특이적으로 활발한 건강한 잎과 줄기의 생육이 일어나는 것이 관찰되었으며 (도 3D), 무처리와 다른 Lyso-PE 처리구와도 유의성 있는 차이를 보였다 (도 4). 그 후 2주에 한번씩 총 3회를 처리하여 주었을 때 Soy Lyso-PE 처리구에서 다른 Lyso-PE 처리구들에 비교하여 잎과 과일의 바이러스병 증상완화 현상이 더욱 뚜렷이 관찰되었다.
또한, 그 후 2주에 한번씩 총 3회를 처리하여 주었을 때 soy Lyso-PE 처리군은 무처리군, Egg Lyso-PE, 순수 Lyso-PE 18:1 처리군과 비교하여 잎과 과일의 바이러스병 증상완화 현상이 더욱 뚜렷이 관찰되었다.
실시예 4. 호박 누른 모자이크 바이러스(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV) 감염된 오이에 soy Lyso-PE의 특이적 처리효과
경북 상주시 이안면 오이농장 비닐하우스 내에서 바이러스 감염 의심 증상을 확인하고 항체검정키트로 조사한 결과 ZYMV에 감염된 것으로 판명되었다(도 5).
2019년 5월 2일에 실시예 1의 방법으로 Egg Lyso-PE, Lyso-PE 18:1, soy Lyso-PE를 각각 3개의 감염 오이 식물체에 1차 살포하였다. 이후 2일에 한번씩 3번을 더 살포하고 3일 후, 5월 11일에 관찰하였다.
그 결과, Egg Lyso-PE와 Lyso-PE 18:1 처리군에서 바이러스병 증상이 심한 오이는 바이러스병 증상이 완화되지 못하였다(도 6A 및 5B). 이에 비하여 soy Lyso-PE 처리군에서는 매우 뚜렷한 바이러스병 증상완화 효과가 나타났으며 증상이 심했던 오이도 거의 정상적인 잎 형태와 생육을 보였다(도 6C). Soy Lyso-PE만이 처리 후 성장한 정상적인 신엽 개수에서 무처리구와 유의성이 있는 차이를 보였다 (도 7).
또한, Lyso-PE 18:1를 4회 처리하였음에도 바이러스병 증상이 완화되지 못한 오이에 soy Lyso-PE를 4회 처리하였을 때 바이러스병 증상이 완화되어 신초가 나오고 정상적으로 생장하는 것을 확인하였다(도 8).
실시예 5. 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus, CMV)에 감염된 고추에 soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 병용 처리의 시너지 효과
경북 상주시 은척면 청량고추(당조) 야외 재배지에서 발생한 바이러스를 항체검정키트로 조사한 결과 CMV에 감염된 것으로 판명되었다(도 9).
2019년 8월 17일에 무처리군, soy Lyso-PE, 종합살균살충제, soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리군으로 나누고 처리군 당 10개의 고추 식물체를 선정하여 실시예 1의 방법으로 잎에 1차 살포 처리하고, 2주 후에 2차 처리하였다. soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리군은 soy Lyso-PE를 1차 및 2차 처리하고, 1차와 2차의 사이에 종합살균살충제를 살포한 것이다. 1차 처리 후 3주 뒤(2차 처리 1일 후)에 각 처리군에서 잎의 바이러스 감염 정도를 비교하기 위하여 재배 현장에서 잎의 사진을 찍었다.
상기 종합살균살충제는 자닮(한국)에서 판매하는 천연 살균제인 유황, 천연 유화제인 오일 및 천연 살충제인 은행 추출액을 각각 1.2, 10, 15ml을 473.8ml의 물에 혼합하여 제조하였다.
그 결과, 무처리군에서는 바이러스 증상 즉 잎이 쪼그라드는 현상이 매우 심한 상태로 유지되었으나(도 10A), soy Lyso-PE 처리군에서는 그 증상이 현저히 감소하는 것을 확인하였다(도 10B). 종합살균살충제 처리군도 어느 정도의 증상 감소 현상을 보였으며(도 10C), soy Lyso-PE 처리 2회 사이에 종합살균살충제를 1회 부가적으로 처리해 준 soy Lyso-PE 및 종합살균살충제(soy Lyso-PE/종합살균살충제) 처리군에서는 가장 우수한 바이러스병 증상완화 효과가 나타났다(도 10D).
이에 따라, soy Lyso-PE의 효과는 종합살균살충제를 중간에 처리하였을 때 시너지효과가 발휘되어 더욱 극대화되는 것으로 보인다.
실시예 6. 토마토 반점 시듦 바이러스(Tomato spotted wilt virus, TSWV) 감염된 고추에 soy Lyso-PE 처리기간 중간에 종합살균살충제 추가 처리의 시너지 효과
한국생명공학연구원(대전광역시 유성구) 내 텃밭에서 TWSV에 감염된(도 11) 고추 16개 식물체를 확인하였다. TSWV는 고추에 심각한 피해를 주는 바이러스로 '칼라바이러스병' 이라고도 불리며 고추 과실에 울긋불긋한 무늬가 나타나 고르게 착색되지 않고 잎에 원형 반점이 나타난다.
무처리, 종합살균살충제, soy Lyso-PE, soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리군으로 분류하여 실시예 1의 방법으로 각각 1주일에 1회씩 살포하여 5번을 살포하고 7일 후 결과를 사진으로 촬영하였다. soy Lyso-PE 및 종합살균살충제(soy Lyso-PE/종합살균살충제) 처리군은 종합살균살충제를 soy Lyso-PE 매주 1회 처리 사이에 살포하였다. 자닮 종합살균살충제 제조는 실시예 5에 기술한 것과 같았다.
그 결과, 가장 중요한 고추 과실의 형태에서 무처리와 종합살균살충제의 경우에는 총 비정상과가 약 80% 이상이었고, soy Lyso-PE 처리군은 20%, soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리군은 4.5%로 나타나, soy Lyso-PE 처리가 과실 바이러스병 증상 완화에 효과적인 것으로 나타났다. 또한, soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리가 soy Lyso-PE 단독처리보다 현저한 효과가 있는 것으로 확인되었다.
특히 비정상 적색과의 비율은 무처리 및 종합살균살충제가 100%인 반면, soy Lyso-PE 처리군이 약 30%, soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리군이 9.1%으로 나타나 최종 산물인 고추의 착색 회복에 효과가 큰 것으로 관찰되었다.
한편, TSWV 바이러스병 증상 중 하나인 울긋불긋한 색은 과실이 적색으로 착과 시 관찰되었는데, 해당 증상은 무처리군에서 40%, 종합살균살충제구에서 20%로 나타난 것에 반하여 soy Lyso-PE 처리군은 8%, soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리군은 4%로 나타나 soy Lyso-PE 또는 soy Lyso-PE 및 종합살균살충제의 처리가 TSWV에 대한 과실 품질 피해를 경감시키는 것으로 나타났으며, 이 경우에도 soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리가 soy Lyso-PE 단독처리 보다 효과가 우수한 것으로 확인되었다(표 1).
이러한 경향은 사진으로 식물체의 과실을 촬영한 사진에서도 나타났다(도 12 내지 13). 전반적으로 무처리군이나 종합살균살충제는 과실이 휘어진 형태로 나타나는 경우가 많고 적색으로 착색된 과실 중 비정상과의 비율이 높았으며 TSWV 바이러스병 증상이 확실히 나타났다(도 12, 도 13). 이에 비하여 soy Lyso-PE 처리군이나 soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리군은 과실이 곧은 모양이 많이 관찰되었으며, 적색과의 모양이 정상이고 적색으로 착색이 잘되었다(도 14, 도 15).
본 실시예 6의 결과를 요약하면 TSWV에 감염된 고추의 과실이 soy Lyso-PE를 처리하였을 때 비정상과의 비율이 20%로 무처리군(83%)보다 낮아졌으며, 종합살균살충제를 soy Lyso-PE와 병용 처리하였을 때 비정상과의 비율이 더욱 낮아졌다(4.5%). 한편 종합살균살충제만을 처리하여 주었을 때는 효과가 미미해 비정상과 비율이 무처리군과 비슷하게 높았다(80%). 전술한 soy Lyso-PE 및 종합살균살충제 처리가 바이러스에 감염된 고추 식물체의 과실에 미치는 영향에 대한 구체적인 수치는 하기 표 1에 나타내었다.
　 비정상 청색과 비정상 적색과 TSWV(적색과 병징) 총 비정상과율
무처리 (도 12) 75.0% (15/20) 100.0% (10/10) 40.0% (4/10) 83.3% (25/30)
종합살균살충제 (도 13) 77.8% (35/45) 100.0% (5/5) 20.0% (1/5) 80.0% (40/50)
Soy Lyso-PE (도 14) 15.1% (5/33) 33.3% (4/12) 8.3% (1/12) 20.0% (9/45)
Soy Lyso-PE /
종합살균살충제
(도 15)		 3.0% (2/67) 9.1% (2/22) 4.5% (1/22) 4.5% (4/89)
* 조사 기준 : 수고 80cm 이상, 적색과를 포함하는 식물체
* 비정상과 : 30°도 이상 꼬부라진 고추 열매
* TSWV 병징 : 칼라 무늬가 보이는 적색 고추 열매
실시예 7. soy Lyso-PE의 바이러스병 증상 회복 효과에서 주요 효능성분 확인
실시예 1에서 서술한 바와 같이 soy Lyso-PE는 Lyso-PE 18:2(60%), Lyso-PC 18:2(30%), Lyso-PI 18:2(10%)로 이루어져 있다. 이에, soy Lyso-PE의 바이러스병 증상 회복 효과에 있어서, 상기 3 가지 물질 중 어느 물질이 주요 효능성분인지를 밝히기 위하여 한국생명공학연구원 내 온실에서 정밀 실험을 하였다.
2019년 TSWV 바이러스에 감염된 고추에서 받은 종자들을 2020년 봄에 발아시켜 키운 다음, 균일하게 TSWV 바이러스에 감염된 식물체들을 확보하였다. 실시예 1의 방법으로 Lyso-PE 18:2, Lyso-PC 18:2, 및 Lyso-PI 18:2를 식물체에 1주 간격으로 3번 살포한 다음 3일 후 바이러스병 증상 완화를 관찰하였다.
그 결과, 무처리군에 대조하여 볼 때 Lyso-PC 18:2 처리군은 잎이 오그라드는 현상이 어느 수준 이상으로 완화되었고, Lyso-PI 18:2 처리군은 바이러스병 증상 완화효과가 거의 없는 것에 반해, Lyso-PE 18:2 처리군은 우수한 바이러스병 증상 완화효과를 나타내었다(도 16). soy Lyso-PE와 순수 Lyso-PE 18:2의 효능을 비교하였을 때는 순수 Lyso-PE 18:2의 효과가 soy Lyso-PE 보다 좀더 우수한 것으로 나타났다(도 17).
상기 결과들은 Lyso-PE 18:2가 soy Lyso-PE 바이러스병 증상 완화 효능을 나타내는 주성분임을 시사하였다.
실시예 8. 바이러스에 감염된 감자에 soy Lyso-PE 처리의 효과
종자회사에서 감자(남작 및 홍감자) 종자를 구매한 후 싹을 틔어 어린 잎에서 바이러스 감염 조사를 실시한 결과, 감자 바이러스 Y(Potato virus Y, PVY)와 감자 엽권 바이러스(Potato leafroll virus, PLRV)에 복합 감염된 것으로 판명된 남작 감자(도 18)와 PVY에 감염된 것으로 판명된 홍감자(도 19)를 한국생명공학연구원 내 온실에서 재배하였다.
무처리와 soy Lyso-PE 처리군으로 구분하고 실시예 1의 방법으로 남작 감자는 각 처리군에서 1개체씩 1주 1회를 기준으로 총 7회, 홍감자는 각 처리군에서 3개체씩 1주 1회를 기준으로 총 4회 처리하였다.
PVY와 PLRV에 복합 감염된 남작 감자는 무처리군에서 잎의 모양이 뒤틀리는 증상이 많이 나타났으며, 이에 반해 soy Lyso-PE 처리군에서는 이러한 증상이 완화되어 잎이 정상적으로 펴지는 경향이 나타났다(도 18). 감자 수확량에 있어서는 무처리군에서 새로 생성된 감자 개수가 1개인 반면 soy Lyso-PE 처리군에서는 4개가 관찰되었으며, 총 생성된 감자의 무게는 무처리가 17.7g, soy Lyso-PE 처리가 76.1g이었다(도 18, 도 19).
잎의 외관과 더불어 작물의 결과 산물인 감자 생산량을 비교하여 보았을 때 바이러스에 감염된 감자에 soy Lyso-PE를 처리한 결과, 바이러스 피해가 경감되는 효과가 나타났다.
한편, 홍감자는 4회 처리 후 식물체의 생장에서 무처리보다 soy Lyso-PE 처리군에서 식물체 생장이 더 활발한 것으로 나타났는데, 식물체의 수고와 엽수가 증가하는 경향이 나타났다(도 19). 처리 후 수확량을 비교해 보았을 때 무처리에서는 새로 생성된 감자 개수가 10개인 반면, soy Lyso-PE 처리군에서는 21개로 2배 증가한 것으로 나타났다. 생성된 감자들의 총 무게는 무처리가 28.6g, soy Lyso-PE 처리군이 41.1g으로 약 1.4배 증가하였다(도 19).
특이한 점은 새로운 감자가 생성되는 부분을 무처리와 soy Lyso-PE 처리군을 비교하여 보았을 때 무처리는 원래의 모감자 표면에서 바로 생산되는 비정상적인 경향이 50% 이상이었고, soy lyso-PE 처리군에서는 식물체의 줄기 밑부분에서 괴경이 형성되고 비대되는 정상적인 경로를 통해 새로운 감자가 생성되었다는 점으로, 이에 따라 정상적인 경로로 생성되는 홍감자는 soy lyso-PE 처리군에서 시간이 경과될수록 개체수가 무처리군보다 더 증가할 것으로 예상된다.
생성된 감자의 수와 무게에 있어서, 남작과 홍감자를 합하여 생성된 감자의 수와 무게를 비교해보면 무처리군에서 11개로 46.3g 이고, soy lyso-PE 처리군에서 25개가 생성되어 117.2g으로 2배가 넘는 수확량을 나타냈다.
이러한 결과는 soy lyso-PE 처리가 감자에서 바이러스의 피해를 경감시키는 효과를 가져온다는 것을 시사하였다.
실시예 9. 바이러스에 감염된 고구마에 soy Lyso-PE 처리의 효과
종자회사에서 고구마(황금고구마) 잎을 포함하는 줄기모종을 구매한 후 잎에서 바이러스 감염 조사를 실시한 결과, 고구마 잎말림바이러스(Sweet potato leaf curl virus, APLCV)에 감염된 것으로 판명된 개체들을 한국생명공학연구원 내 온실에서 재배하였다.
무처리와 soy Lyso-PE 처리군으로 구분하고 실시예 1의 방법으로 각 처리군에서 8개체씩 1주 1회를 기준으로 총 7회 처리하였다.
무처리군에서 잎의 색이 옅여지고, 식물체의 길 생장이 저하되는 증상이 많이 나타났으며, 이에 반해 soy Lyso-PE 처리군에서는 엽색이 진한 녹색으로 유지되고 식물체의 길이가 활발하게 신장되며 잎의 면적도 넓어지며 생장하는 경향이 나타났다(도 20). 또한, 무처리 구에서는 고구마 모틀 바이러스(Sweet potato feathery mottle virus, SPFMV) 로 의심되는 증상, 즉 엽맥이나 가장자리나 보라색 점이 나타나는 증상이 관찰된 반면 Lyso-PE 처리군에서는 그러한 현상이 전혀 관찰되지 않았다 (도 20).
식물체의 생장 정도를 비교해 보았을 고구마에 soy Lyso-PE를 처리한 결과, 바이러스 피해가 경감되는 효과가 나타났다.
실시예 10. soy Lyso-PE 및 마스타나(Mastana) 혼합 처리의 시너지 효과
2020년 봄 한국생명공학연구원 내 정원에 심은 TSWV 바이러스 감염 고추에 soy Lyso-PE 또는 soy Lyso-PE 및 마스타나 혼합액을 실시예 1의 방법으로 1주 간격으로 3회 처리한 다음 3일 후에 관찰하여 그 효능을 상호 비교하였다. 마스타나는 (주)인터퓨(한국)에서 생산 판매하는 천연활성미네랄이며 시판원액을 5,000배 희석배율로 soy Lyso-PE 용액에 첨가하였다.
그 결과, 바이러스병 증상을 심하게 보이는 무처리군과 비교하여 soy Lyso-PE 및 마스타나 혼합액 처리군에서 soy Lyso-PE 처리군보다 더 뛰어난 바이러스병 증상완화 효능이 나타났다(도 21). 구체적으로, soy Lyso-PE 및 마스타나 혼합액 처리군은 잎의 생기가 더욱 뚜렷이 나타나며 더욱 빠른 생장을 보였다.
이러한 시너지 효과는 하기의 실시예에서 고추 외 다른 작물에서의 추가 반복 실험에서도 확인되었다.
실시예 11. 여러 작물에 대한 soy Lyso-PE 및 마스터나 혼합 처리의 시너지 효과
2020년 여름 경북 상주시 은척면에서 재배 중에 바이러스에 감염된 사과, 감, 옥수수, 콩, 가지에 soy Lyso-PE 및 마스타나 혼합액을 실시예 1의 방법으로 1회 처리한 다음 16일 후 바이러스병 증상의 변화를 처리 전과 비교하여 관찰하였다. 혼합 방법은 실시예 10에 기술한 것과 같았다.
사과(홍로)는 사과 황화 잎반점 바이러스(Apple chlorotic leafspot virus, ACLSV), 사과 줄기 구덩이 바이러스(Apple Stem Pitting Virus, ASPV), 사과 줄기 그루빙 바이러스(Apple stem grooving virus, ASGV)의 3 종 바이러스에 복합 감염이 되어 있었다(도 22). soy Lyso-PE 및 마스타나 혼합액 처리 결과, 처리 전에 비하여 잎의 오그라든 증세가 호전되어 잎이 펴지고 생기가 돌았다(도 22). 이에 비하여 무처리군에서는 잎이 더욱 노화되고 시들어졌다.
감 잠재바이러스(PeCV) 감염 증상을 보이는 감에 상기와 동일한 방법으로 soy Lyso-PE 및 마스타나 혼합액을 처리하였을 때 처리 전에 비하여 잎의 오그라드는 증세가 완화되었다(도 23).
옥수수 위축바이러스(Maize dwarf mosaic virus) 감염 증상을 보이는 옥수수에 동일한 방법으로 soy Lyso-PE 및 마스타나 혼합액을 처리하였을 때 처리 전에 비하여 잎의 쭈글쭈글 거리는 증상이 완화되었다(도 24).
콩 모자이크 바이러스(soybean yellow mottle mosaic virus) 감염 증상을 보이는 콩(울타리 콩)에 동일한 방법으로 soy Lyso-PE 및 마스타나 혼합액을 처리하였을 때 처리 전에 비하여 모자이크 바이러스병 증상이 사라지고 생기 가득한 새 잎이 나왔다(도 25).
CMV 바이러스 증세를 보이는 가지에 동일한 방법으로 soy Lyso-PE 및 마스타나 혼합액을 처리하였을 때 무처리군과 비교하여 열매의 굽어지는 현상이 사라지고 정상적인 가지 열매가 열렸다(도 26).
실시예 12. soy Lyso-PE 처리에 의한 바이러스 신규감염 억제 효과
흥농종묘에서 바이러스에 감염되지 않은 청양고추 종자를 구매하여 한국생명공학연구원 유리온실 내에서 발아시켜 고추묘로 키운 후, TSWV에 감염된 고추 식물체가 약 30여 개체가 토양에서 재배되고 있는 연구원내 텃밭에서 4주간 포트에 재배하였다. 본 실험에 사용되는 무병묘 개체들은 무처리와 soy Lyso-PE 처리군으로 나누어 기존의 TSWV에 감염된 고추 식물체에 인접하여 재배하고 고추묘가 꽃을 피우기 전에 soy Lyso-PE를 처리하였을 때 주변에 있는 TSWV 바이러스로부터 신규 감염되는 것을 억제하는 효과가 있는지를 알아보았다.
실시예 1의 방법으로 soy Lyso-PE 처리군은 고추묘가 꽃을 피우기 전에 주 1회로 총 3회 처리하고 10일 후에 잎과 과실에서 TSWV 감염 피해를 관찰하였다.
그 결과, 무처리군에서는 잎에서 TSWV 바이러스병 증상이 전반적으로 많이 관찰되었고, soy Lyso-PE 처리군에서는 바이러스병 증상이 나타나지 않는 잎이 더 많이 관찰되었다(도 27). 고추 과실은 무처리에서 정상과가 3개, 비정상과가 5개로 비정상과가 2배 이상 많았으며, soy Lyso-PE 처리군에서는 정상과가 11개, 비정상과가 2개로 정상과가 5배 이상 많았다(표 2). 상기 결과는 고추에 soy Lyso-PE를 처리하여 주면 바이러스 신규 감염이 억제되는 것을 나타내었다. 상기 soy Lyso-PE 처리가 식물바이러스에 감염이 안된 고추의 신규 바이러스 감염에 미치는 영향에 대한 구체적인 수치는 하기 표 2에 나타내었다.
Soy Lyso-PE의 바이러스 신규감염 억제효과
처리 무처리 Soy Lyso-PE
정상과 3 11
비정상과 5 2
총 개수 8 13
* 비정상과 기준 - 과육의 30o 이상 휘어짐
상기 실시예의 결과에 따라, 본 발명에 따른 soy Lyso-PE는 식물바이러스에 감염된 식물체에서 바이러스병 증상을 완화시키고 신규 감염을 억제시키는 바, 증상 완화 및 신규 감염 또는 2차 감염 억제 용도로 제공될 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 soy Lyso-PE의 바이러스병 증상완화 효과는 특히 soy Lyso-PE의 주성분인 Lyso-PE 18:2에 의해 발휘되는 것인 바, soy Lyso-PE 및 이의 주성분인 Lyso-PE 18:2는 식물바이러스병 증상 완화 및 2차 감염 또는 신규 감염 억제용 조성물로 농업 분야에 다양하게 적용될 수 있다. 뿐만 아니라, soy Lyso-PE는 단독으로도 효과가 있으나 soy Lyso-PE을 천연활성미네랄 등과 혼합하여 처리하거나 soy Lyso-PE 처리 사이에 종합살균살충제 등을 추가로 처리함으로서 바이러스병 증상 완화 효과를 더욱 상승시킬 수 있다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 다른 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변경된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (11)

  1. 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2(lyso-phosphatidylethanolamine 18:2)를 유효성분으로 포함하는, 식물바이러스병 방제용 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 콩 유래인 것인, 식물바이러스병 방제용 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 식물바이러스는 오이 녹색 반점 모자이크 바이러스(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV), 호박 누른 모자이크 바이러스(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV), 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus, CMV), 토마토 반점 시듦 바이러스(Tomato spotted wilt virus, TSWV), 감자 바이러스 Y(Potato virus Y, PVY), 감자 엽권 바이러스(Potato leafroll virus, PLRV), 고구마 잎말림병 바이러스 (Sweet potato leaf curl virus, SPLCV), 고구마 모틀 바이러스 (Sweet potato feathery mottle virus, SPFMV), ACLSV(Apple chlorotic leafspot virus), ASPV(Apple Stem Pitting Virus), ASGV(Apple stem grooving virus), 사과 황화 잎반점 바이러스(Apple chlorotic leafspot virus, ACLSV), 사과 줄기 구덩이 바이러스(Apple Stem Pitting Virus, ASPV), 사과 줄기 그루빙 바이러스(Apple stem grooving virus, ASGV), 콩 모자이크 바이러스(soybean yellow mottle mosaic virus), 감 잠재바이러스(PeCV), 옥수수 위축바이러스(Maize dwarf mosaic virus), 담배 모자이크 바이러스(Tobacco mosaic virus, TMV), 고추 모틀 바이러스(Pepper mottle virus, PepMoV), 고추 마일드 모틀 바이러스(Pepper mild mottle virus, PMMoV), 수박 모자이크 바이러스(Watermelon mosaic virus, WMV), 순무 모자이크 바이러스(Turnip Yellow Mosaic Virus, TuMV), 메론 괴저 반점 바이러스(Melon necrotic spot virus, MNSV), 호박 녹반 모자이크 바이러스(Zucchini green mottle mosaic virus, ZGMMV), 나리 모틀 바이러스((lily mottle virus, LMoV), 나리 무병징 바이러스(Lily symptomless virus, LSV), 오돈토그로솜 윤점 바이러스(Odontoglossum ringspot virus, ORSV), 심비디움 모자이크 바이러스(cymbidium mosaic virus, CyMV), 잠두 위축 바이러스(Broad Bean Wilt Virus, BBWV), 토마토 윤점 바이러스(Tomato ringspot virus, TomRSV), 담배 윤점 바이러스(Tobacco ringspot virus, TRSV), 딸기 모틀 바이러스(Strawberry mottle virus, SMoV) 및 선인장 바이러스 X(Cactus virus X, CVX)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것인, 식물바이러스병 방제용 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 상기 식물바이러스는 오이 녹색 반점 모자이크 바이러스(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV), 호박 누른 모자이크 바이러스(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV), 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus, CMV), 토마토 반점 시듦 바이러스(Tomato spotted wilt virus, TSWV), 감자 바이러스 Y(Potato virus Y, PVY), 감자 엽권 바이러스(Potato leafroll virus, PLRV), 고구마 잎말림병 바이러스 (Sweet potato leaf curl virus, SPLCV), 고구마 모틀 바이러스 (Sweet potato feathery mottle virus, SPFMV), ACLSV(Apple chlorotic leafspot virus), ASPV(Apple Stem Pitting Virus), ASGV(Apple stem grooving virus), 사과 황화 잎반점 바이러스(Apple chlorotic leafspot virus, ACLSV), 사과 줄기 구덩이 바이러스(Apple Stem Pitting Virus, ASPV), 사과 줄기 그루빙 바이러스(Apple stem grooving virus, ASGV), 콩 모자이크 바이러스(soybean yellow mottle mosaic virus), 감 잠재바이러스(PeCV), 및 옥수수 위축바이러스(Maize dwarf mosaic virus)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것인, 식물바이러스병 방제용 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 Lyso-PC 18:2 또는 Lyso-PI 18:2 중 선택되는 어느 하나 이상을 추가로 포함하는 것인, 식물바이러스병 방제용 조성물.
  6. 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2를 유효성분으로 포함하는, 식물 바이러스병 증상 완화용 조성물.
  7. 리소-포스파티딜에탄올아민 18:2를 유효성분으로 포함하는, 식물 바이러스의 2차 감염 또는 신규 감염 억제용 조성물.
  8. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 식물바이러스병 방제용 조성물을 포함하는, 식물바이러스병 방제 활성을 갖는 농약 조성물.
  9. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 식물바이러스병 방제용 조성물을 포함하는, 식물바이러스병 방제 활성을 갖는 비료 첨가용 조성물.
  10. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 식물바이러스병 방제용 조성물을 식물체 또는 토양에 처리하는 단계를 포함하는, 식물바이러스병의 방제 방법.
  11. 제10항에 있어서, 상기 방법은 살균살충제 또는 미네랄 중 선택되는 어느 하나 이상을 처리하는 단계를 추가로 포함하는, 식물바이러스병의 방제 방법.
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