WO2020139308A1 - Инактивированная стафилококковая жидкая вакцина - Google Patents

Инактивированная стафилококковая жидкая вакцина Download PDF

Info

Publication number
WO2020139308A1
WO2020139308A1 PCT/UA2019/000162 UA2019000162W WO2020139308A1 WO 2020139308 A1 WO2020139308 A1 WO 2020139308A1 UA 2019000162 W UA2019000162 W UA 2019000162W WO 2020139308 A1 WO2020139308 A1 WO 2020139308A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
vaccine
strains
staphylococcal
staphylococcus
staphylococcus aureus
Prior art date
Application number
PCT/UA2019/000162
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Игорь Семёнович МАРКОВ
Артём Игоревич МАРКОВ
Original Assignee
Игорь Семёнович МАРКОВ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Игорь Семёнович МАРКОВ filed Critical Игорь Семёнович МАРКОВ
Publication of WO2020139308A1 publication Critical patent/WO2020139308A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/085—Staphylococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/116—Polyvalent bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents

Definitions

  • the group of inventions relates to medical microbiology, the pharmaceutical industry, in particular to vaccines, in particular, to vaccines for the treatment and prevention of staphylococcal infections, methods for their manufacture, methods of treatment and prevention, and can be used for specific immunotherapy of adults and children suffering from acute or chronic (in the acute stage) staphylococcal infection (furunculosis, hydradenitis, panaritium, phlegmon, pyoderma, osteomyelitis, mastitis, inflammatory gynecological, urological, otolaryngological diseases, laryngo-tracheitis, bronchitis, pneumonia, etc.), patients with clinical manifestations chronic staphylococcal infection as an alternative to antibiotics or as a method of additional treatment in conjunction with antibiotics in septic conditions that are life-threatening.
  • acute or chronic staphylococcal infection furunculosis, hydradenitis, panaritium, phlegmon, pyoderma, osteomyelitis,
  • strain Stahpylococcus aureus N ° 44 is intended for use as one of the components in the technology of manufacturing an inactivated vaccine for the specific prevention of streptococcal, enterococcal and staphylococcal infections of animals (CCIT vaccine).
  • the CCIT vaccine is intended for prophylactic use in veterinary medicine and is not intended for use in clinical medicine in humans.
  • Strain 44 of Staphylococcus aureus does not indicate a degree of sensitivity / resistance to antibiotics.
  • the vaccine is intended for use in veterinary medicine for animals and cannot be used in clinical practice for humans.
  • a vaccine is known in which only one deposited strain of Staphylococcus aureus is contained, which significantly narrows its antigenic composition and, accordingly, the immunological response to vaccination.
  • the vaccine is intended for use in animals - marine mammals and is not intended for use in humans [CN 108048364 C1, 2018.
  • the isolated strains did not go through the deposition procedure.
  • the authors of the article studied the sensitivity of the isolated strains of staphylococci to various antibiotics in order to select those drugs for which the bacteria, the causative agents of various diseases, still remained susceptible and did not mean the creation and use of staphylococcal vaccine for therapeutic purposes.
  • the vaccine contains only one staphylococcus aureus - golden, which is why it is not effective enough.
  • staphylococcus vaccine - staphylococcal toxoid in which the active substance is a staphylococcus toxin (a sterile filtrate of staphylococcus aureus broth culture containing exotoxin), previously partially inactivated with formalin and thermal energy.
  • Staphylococcal anatoxin is a sterile filtrate of staphylococcus aureus broth culture containing formalin-neutralized exotoxin.
  • the microbial biomass and all ballast proteins which makes it more purified. 1 ml of suspension contains from 10 to 14 so-called binding units [htp: //mednarodna.com.ua/9903-anatoksin-stafilokokkovyy.html].
  • Anatoxin has insufficient functionality: the age of patients who are prescribed toxoid is limited from 16 to 60 years, that is, it is not intended for children. Anatoxin can also cause allergic reactions.
  • a known method of producing staphylococcal purified liquid toxoid for specific immunotherapy of patients with staphylococcal infection including the conversion of the toxin into the anaform by treatment with formaldehyde, the purification of the toxoid by treatment with dry sodium chloride, precipitation with trichloroacetic acid, separation, dissolution of the precipitate in a 0.9% sodium chloride solution , treatment with ethanol, separating the precipitate by centrifugation and dissolving in a 0.9% sodium chloride solution to 12 EC in 1 ml with residual formaldehyde of not more than 0.003% [RU 2169580 Cl, A61K 39/085, 2001].
  • staphylococcal toxoid vaccine including detoxification of exo-, endo- and superenterotoxins in suspension with autoclaved staphylococci with a formalin solution, sorption on aluminum hydroxide, sterilization.
  • Detoxification of staphylococcal toxins is carried out with two detoxifiers - first with a 0.2% formalin solution for 7-9 days at 40-45 ° C, and then with a 0.6 ⁇ 0.1% ethonium solution for 7-9 days at 40-45 ° C, while the concentration of inactivated toxins with microorganisms is doubled by decantation of 50 ⁇ 5% of the supernatant [RU N ° 2008115050 A, A61K 39/085, 2009].
  • formaldehyde is used to obtain the staphylococcal toxoid vaccine, which reduces the immunogenic effect of the vaccine and the immunological and positive clinical responses after vaccination.
  • a known method of manufacturing a vaccine associated against Escherichiosis, streptococcosis and staphylococcosis of cattle including obtaining antigens with their subsequent mixing, the introduction of an adjuvant, while the selection of pathological material from a patient and fallen cattle from a local epizootic focus, then from selected pathological material prepare a suspension and then make inoculation on differential diagnostic media, after which cells of pure cultures of Escherichia coli Escherichiosis causative agent are isolated, streptococcosis Streptococcus pneumoniae and staphylococcosis Staphylococcus aureus, then cells of pure cultures of causative agents of Escherichiosis, streptococcosis and staphylococcosis are separately grown in meat-peptone broth with glucose added to 0.2% concentration with a titer of 4-5 billion microbial cells in 1 cm 3 , of this, cells of pure cultures of causative agents of Escherichia
  • This method is intended for use in veterinary medicine and is not used to treat people, it is not recommended for use in research and production institutions and for clinical use.
  • the method produces an associated vaccine containing the causative agents of three common diseases of cattle (E. coli, streptococci and staphylococci), which reduces the antigenic load of each of them in a single dose of the vaccine and is intended for the simultaneous treatment of escherichiosis, streptococcosis and staphylococcosis.
  • the causative agents used for the manufacture of this vaccine are obtained from sick and dead animals (cattle) in “local epizootic foci”, which is inappropriate for the treatment of purulent-septic diseases in children and adults.
  • Formalin is used to inactivate bacterial cultures, and aluminum hydroxide, which makes up 1/5 of the vaccine volume, is used as an adjuvant, which significantly increases the allergenicity level of the finished product with the possible use of such a vaccine in humans.
  • a known method of producing a staphylococcal vaccine for the treatment of purulent infections including the cultivation of six to eight strains of pyogenic staphylococcus in a liquid nutrient medium and sterilization of biomass.
  • the cultivation of six to eight strains of pyogenic staphylococci identified as Staphylococcus aureus is carried out separately for 14-16 days at a temperature of 37 ° C, then cultivated separately at a temperature of 3-5 ° C for 6-8 days, after which the resulting material is mixed and immediately autoclave at a temperature of 115-125 ° C for 15-40 minutes. [RU 2421240 C1, A61K 39/085, 2011].
  • the staphylococcal vaccine obtained in this way can be used to prevent and treat purulent infections in animals and humans, the description of the use of this vaccine in humans is completely absent in the description. Namely:
  • Closest to the claimed method of manufacturing a vaccine is a method of obtaining a staphylococcal vaccine for the treatment of purulent infections, including growing cultures of staphylococci in a liquid nutrient medium and sterilization of biomass.
  • the cultivation of six to eight strains of pyogenic staphylococci identified as Staphylococcus aureus is carried out separately for 14-16 days at a temperature of 37 ° C, then cultivated separately at a temperature of 3-5 ° C for 6-8 days, after which the resulting material is mixed and immediately autoclave at a temperature of 115-125 ° C for 15-40 minutes. [RU ° 2009 136 113 A, A61K 39/085, 2011].
  • staphylococcus aureus which contains 6-8 strains, narrows the spectrum of action and clinical efficacy of the vaccine obtained. In addition, they receive such a staphylococcal vaccine for a sufficiently long time - 24 days.
  • Closest to the claimed method of treatment is a method of treatment by introducing the staphylococcal purified toxoid liquid subcutaneously into the region of the lower angle of the scapula, alternately to the right and left sides with each subsequent injection.
  • the full course of treatment includes 7 injections of the drug, carried out after 2 days, in the following increasing doses: 0.1 - 0.3 - 0.5 - 0.7 - 0.9 - 1.2 - 1.5 ml.
  • Treatment with staphylococcal purified liquid toxoid can be carried out in parallel with general and local therapy, except for serum antistaphylococcal drugs, such as antistaphylococcal immunoglobulin and antistaphylococcal plasma [https://tabletki.ua/ Anatoxin-staphylococcal /].
  • serum antistaphylococcal drugs such as antistaphylococcal immunoglobulin and antistaphylococcal plasma [https://tabletki.ua/ Anatoxin-staphylococcal /].
  • Staphylococcal toxoid Since in staphylococcal toxoid there is only a weakened staphylococcal toxin, the vaccine is not effective enough. Staphylococcal toxoid vaccination is done only for adults. In addition, with such vaccination, allergic reactions are possible.
  • the basis of the invention is the task of creating an inactivated liquid staphylococcal vaccine, which would have wide functionality, effectively treat purulent-inflammatory diseases of staphylococcal etiology without allergic reactions.
  • the second task which is the basis of the invention, is the creation of a method for producing inactivated staphylococcal liquid vaccine, which would expand the spectrum of action and clinical efficacy of the vaccine, as well as reduce the time for its receipt.
  • the third task which is the basis of the invention, is the creation of a method for the treatment of staphylococcal infection by introducing an inactivated staphylococcal liquid vaccine to expand the functionality, effective treatment of purulent-inflammatory diseases of staphylococcal etiology without allergic reactions.
  • the inactivated staphylococcal liquid vaccine including Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus), according to the invention, contains at least 21 strains of 3 types of staphylococci, namely at least 15 strains of Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus), 3 strains of hemolytic staphylococcus (Staphylococcus haemolyticus) and 3 strains of epidermal staphylococcus (Staphylococcus epidermidis), including bacterial strains with varying degrees of antibiotic resistance, deposited in the Depository of the Institute of Microbiology and Virology of the National Academy of Sciences of Ukraine:
  • staphylococcal toxoid where only weakened staphylococcal toxin
  • the claimed vaccine there is an antigenic complex of whole non-viable cells of thermally inactivated bacteria, corpuscular thermolabile and thermostable protein-polysaccharide antigens of the staphylococcal cell wall and unrefined staphylococcal toxins (mainly endotoxins), which increases the immunogenic immunological vaccine effect and the vaccine .
  • the vaccine can be used both for adults and children, starting from infancy, which expands its functionality.
  • the vaccine has a hypoallergenic effect with a significant reduction in the levels of IgE that are elevated before treatment.
  • the vaccine is prepared from at least 21 different types of staphylococci from a clinical clinical strain, isolated from bacteriological examination of biological substrates from smears from the skin and mucous membranes: Staphylococcus aureus - 15 strains, Staphylococcus haemolyticus - 3 strains, Staphylococcus epidermidis - 3 strains of a certain location, isolated from various acute and chronic inflammatory diseases of the bacterial etiology, wash off the agar from the surface of the solid nutrient medium with pyrogen-free distilled water and placed in sterile containers, and to eliminate impurities of the nutrient medium, bacterial strains are washed with distilled water by centrifugation at 1500-3000 rpm pouring
  • a container with inactivated bacteria add an equal amount of a preparation of embryonic origin, or physiological saline, or water for injection and receive a suspension of microbial cells, to control sterility, vaccine samples are plated on nutrient broth, seeded incubated in a thermostat at a temperature of 35-40 ° C for 24-48 hours, and in the absence of growth, a preservative is added and poured the vaccine in sterile ampoules.
  • the method uses a 24-hour agar culture.
  • Erbisol or inflamafertin are used as a preparation of embryonic origin.
  • Bacterial strains are washed with distilled water by centrifugation three times.
  • the pellet is standardized according to the MAK Farland (McF) standard with an optical density of 1.0, which corresponds to 3 billion (3.0 * 10 L 9) microbial cells in 1 ml.
  • McF MAK Farland
  • the vaccine is poured into ampoules of 1 ml.
  • Spilled and sealed ampoules are checked for leaks, labeled and packaged in 10 ampoules for vaccination, leaving 2 ampoules of each series for control.
  • the vaccine is received within 24 hours, and in the prototype - 24 days.
  • the third task is solved by the fact that in the method of treating staphylococcal infection with an inactivated staphylococcal liquid vaccine, comprising administering the vaccine subcutaneously in the region of the lower angle of the scapula, alternately in the right and left sides with each subsequent injection in appropriate increasing doses, according to the invention, the course of treatment is 10- 12 injections, with 6-7 injections being carried out first, and after an interval of 3 weeks, another 4-5 injections are given taking into account the age and body weight of the patients.
  • immunization with a staphylococcal vaccine is carried out according to the scheme: 0.1 - 0.2 - 0.3 - 0.4 - 0.5 - 0.5 - 0.5 ml in the 1st, 3rd, 5th, 7th, 9th, 14th and 19th days of treatment, and 3 weeks after the seventh injection - every other day according to the scheme: 0.1 - 0.2 - 0.3 - 0.4 - 0.5 ml.
  • immunization with a staphylococcal vaccine is carried out according to the scheme: 0.1 - 0.3 - 0.5 - 0.6 - 0.7 - 0.7 - 0.7 ml in the 1st, 3rd , 5th, 7th, 9th, 14th and 19th days of treatment, and 3 weeks after the seventh injection - every other day according to the scheme: 0.2 - 0.4 - 0, 5 - 0, 6 - 0.8 ml.
  • immunization with a staphylococcal vaccine is carried out according to the scheme: 0.1 - 0.3 - 0.5 - 0.7 - 0.9 - 0.9 - 0.9 ml in the 1st, 3rd , 5th, 7th, 9th, 14th and 19th days of treatment, and 3 weeks after the seventh injection - every other day according to the scheme: 0.2 - 0.4 - 0, 6 - 0, 8 - 1.0 ml.
  • immunization with a staphylococcal vaccine is carried out according to the scheme: 0.1 - 0.3 - 0.5 - 0.7 - 0.9 - 1.0 - 1.0 ml in the 1st, 3rd , 5th, 7th, 9th, 14th and 19th days of treatment, and 3 weeks after the seventh injection - every other day according to the scheme: 0.3 - 0.5 - 0, 7 - 0, 9 - 1.0 ml.
  • immunization with a staphylococcal vaccine is carried out according to the scheme: 0.1 - 0.5 - 0.7 - 0.9 - 1.0 - 1.0 - 1.0 ml in the 1st, 3rd , 5th, 7th, 9th, 14th and 19th days of treatment, and 3 weeks after the seventh injection - every other day according to the scheme: 0.3 - 0.7
  • immunization with a staphylococcal vaccine is carried out according to the scheme: 0.1 - 0.5 - 0.7 - 0.9 - 1.0 - 1.0 - 1.5 ml in the 1st, 3rd , 5th, 7th, 9th, 14th and 19th days of treatment, and 3 weeks after the seventh injection - every other day according to the scheme: 0.3 - 0.7
  • immunization with a staphylococcal vaccine is carried out according to the scheme: 0.1 - 0.5 - 1.0 - 1.0 - 1.5 - 1.5 - 2.0 ml in the 1st, 3rd, 5th, 7th, 9th, 14th and 19th days of treatment, and 3 weeks after the seventh injection - every other day according to the scheme: 0.3 - 0.7
  • the claimed vaccine is used for acute or chronic staphylococcal infection (furunculosis, hydradenitis, panaritium, phlegmon, pyoderma, osteomyelitis, mastitis, inflammatory gynecological, urological, otolaryngological diseases, laryngo-tracheitis, bronchitis, pneumonia and bronchitis. n.), in patients with clinical manifestations of chronic staphylococcal infection as an alternative to antibiotics or as a method of additional treatment in conjunction with antibiotics in septic conditions that are life-threatening.
  • staphylococcal infection furunculosis, hydradenitis, panaritium, phlegmon, pyoderma, osteomyelitis, mastitis, inflammatory gynecological, urological, otolaryngological diseases, laryngo-tracheitis, bronchitis, pneumonia and bronchitis. n.
  • the claimed method of treatment contains whole cells of inactivated non-viable bacteria, corpuscular thermolabile and thermostable protein-polysaccharide antigens of staphylococcal cell wall and unrefined staphylococcal effect, which enhances the immunological effect and enhances the toxic effect of and positive clinical effect after vaccination.
  • the vaccine can be used both for adults and children, which expands its functionality.
  • the vaccine Stafilo Primavak has no side effects. Only local (hyperemia, swelling and pain at the injection site) and general (fever, skin rash, as a manifestation of bacterial toxicoderma) reactions to the vaccine are possible. Such reactions are of a natural physiological nature and are due to the activation of local immunity (at the injection site) and a general immune response with the release of toxins from the bacteria against which a specific Stafilo Primavak vaccine is directed, due to the rapid destruction of bacteria after their immune recognition by a tuned immune system.
  • the vaccine When using the Stafilo Primavak vaccine, there is no development of allergic reactions, moreover, the vaccine has a hypoallergenic effect with a significant decrease in the levels of IgE elevated before treatment.
  • the claimed inactivated staphylococcal liquid vaccine StafiloPrimavak includes at least 21 strains of staphylococci 3 different species, namely: Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) - 15 strains, hemolytic staphylococcus (Staphylococcus haemolyticus) - 3 strains, and epidermal epidermal 3 strain of a certain location, isolated in various acute and chronic inflammatory diseases of bacterial etiology in children and adults.
  • Stafilo Primavak receive as follows.
  • the vaccine is prepared from industrial clinical strains of staphylococci, not less than from the 21st strain of 3 different types of different locations previously isolated during bacteriological examination of biological substrates (sputum, mucus from the nose, urine, tears, prostate juice, vaginal discharge, etc.
  • swabs smears from the mucous membranes, purulent foci and from the skin of patients with various acute and chronic inflammatory diseases of bacterial etiology in children and adults, namely: Staphylococcus aureus - 15 strains, Staphylococcus haemolyticus - 3 strains, Staphylococcus epidermidis - 3 strains , including bacterial strains with varying degrees of antibiotic resistance deposited in the Depository of the Institute of Microbiology and Virology of the National Academy of Sciences of Ukraine:
  • Staphylococcus aureus strain 776, isolated from the pharynx of a patient with lacunar angina, November 1, 2017, deposited on January 17, 2018 under registration number IIB B-7684, antibiotic resistance - 10%;
  • Staphylococcus aureus strain 627 isolated from sputum of a patient bronchial asthma 04/18/2018, deposited on 05/07/2018 under the registration number IIW ⁇ -7756, resistance - 0%;
  • Staphylococcus aureus strain 681, isolated from an abscess on 09/27/2017, deposited on 10/26/2018 under registration number IIV ⁇ -7665, resistance - 10%;
  • Staphylococcus aureus strain 308, isolated from the urine of a patient with chronic pyelonephritis September 27, 2017, deposited October 26, 2017 under registration number IIV B-7666, resistance - 0%;
  • Staphylococcus aureus strain 834, isolated from the sputum of a patient with chronic bronchitis on September 26, 2018, deposited on October 31, 2018 under registration number IIV B-7782, resistance - 10%;
  • Staphylococcus aureus strain 487, isolated from the sputum of a child with cystic fibrosis on 03/10/2018, deposited on 10/31/2018 under registration number IIV B-7786, resistance - 20%;
  • Staphylococcus haemolyticus strain 908, isolated from the urethra and prostate juice of a patient with chronic urethroprostatitis December 13, 2017, deposited on March 23, 2018 under registration number IIV B-7712, resistance - 20%;
  • Staphylococcus haemolyticus strain 502, isolated from the urine of a patient with chronic cystitis on 02/20/2018, deposited on 03/23/2018 under registration number IIV B-7731, resistance - 0%;
  • Staphylococcus haemolyticus strain 579, isolated from the nose of a patient with chronic sinusitis 05/23/2018, deposited on 10/31/2018 under registration number IIV B-7766, resistance - 0%;
  • Staphylococcus epidermidis strain 116, isolated from the skin of a patient with pyoderma and furunculosis on 04/25/2018, deposited on 05/14/2018 under registration number IIV B-7763, resistance - 0%.
  • At least 21 clinical pathogenic strains of staphylococci of 3 types of a specific location are used, which were isolated during bacteriological examination of patients with localized bacterial diseases of various organs and systems: nose, pharynx, oral mucosa, tongue, gums, teeth, eyes , trachea, bronchi, lungs, genitourinary system, skin, etc.
  • pyrogen-free distilled water water for injection
  • bacterial strains are washed with distilled water by centrifugation three times at 1500-3000 rpm. within 10-15 minutes. The supernatant is poured.
  • the resulting culture residue of the bacteriological strain is suspended in pyrogen-free distilled water for injection and standardized in accordance with the MAK Farland (McF) standard with an optical density of 1.0, which corresponds to 3 billion (3.0 * 10 L 9) microbial cells in 1 cm 3 ( 1 ml).
  • McF MAK Farland
  • Strains of microorganisms are taken in equal quantities to obtain the same final concentration - a total of 3 billion (3.0 * 10 L 9) microbial cells in 1 ml.
  • a standardized suspension of strains is inactivated in an autoclave at a temperature of 115-125 ° C and a pressure of 1 ATM. within 15-40 minutes.
  • Erbisol or another preparation of embryonic origin, for example, Inflamafertin
  • physiological saline or water for injection or another solvent is added in equal amounts in accordance with the production technical regulations and a suspension of microbial cells of 1.5 billion (1.5 * 10 L 9) in 1 ml of the finished vaccine.
  • vaccine samples are plated on nutrient broth. Crops are incubated in a thermostat at a temperature of 37 ° C for 24-48 hours. In the absence of growth, a preservative and other ingredients are added according to the production technical regulations and the 1 ml vaccine is poured into sterile ampoules. Spilled and sealed ampoules are checked for leaks, labeled and packaged in 10 ampoules for vaccination, leaving 2 ampoules of each series for control.
  • Immunization with the Stafilo Primavak vaccine is prescribed for acute staphylococcal infection in newborns, infants and children, adults with lesions of the skin and mucous membranes, organs of the rhinopharynx, eyes, respiratory tract, urinary tract and genitals, bones and joints (osteomyelitis, purulent arthritis, including including after the installation of artificial joints), as well as with other purulent-inflammatory diseases of staphylococcal etiology (paraproctitis, bartholinitis, Fournier gangrene, etc.) subcutaneously (under the shoulder blade) with a course of 12 injections (vaccination - 7 injections, after an interval of 3 weeks revaccination - another 5 injections) taking into account the age and body weight of patients according to the following schemes:
  • the shelf life of the Stafilo Primavak vaccine is 24 months.
  • the invention is not limited to the manufacture of a liquid vaccine.
  • the vaccine can also be made in the form of sublingual sucking tablets, capsules for oral administration, drops in the nose or spray, vaginal suppository suppositories, ointments, solution for irrigation of the mucous membranes.
  • the invention is illustrated by examples of treatment.
  • strains of Staphylococcus aureus were identical from nasopharynx and feces and additionally from different affected areas of the skin and urine.
  • the level of total IgE increased from 2 to 110 IU / ml (age norm - up to 10 IU / ml).
  • 2 courses of immunization with the staphylococcal vaccine StafiloPrimavak were carried out (each - 10 injections).
  • positive clinical dynamics were noted: the skin was completely cleansed of the elements of the rash until the 12th month of the child's life.
  • the level of total IgE decreased to 19 IU / ml.
  • Hyperimmunoglobulinemia E syndrome (or Job syndrome), the symptoms of which begin at the age of the infant, is considered a hereditary disease in which there is a combined humoral-cell immunodeficiency (T and B cells) with severe staphylococcal skin lesions (boils, abscesses, skin phlegmon, etc.) in combination with total eosinophilic dermatitis with stunning itching of the skin.
  • T and B cells humoral-cell immunodeficiency
  • severe staphylococcal skin lesions (boils, abscesses, skin phlegmon, etc.) in combination with total eosinophilic dermatitis with stunning itching of the skin.
  • T cells were 59% or 3537.05 * 10 b / l cells (above normal), B cells - 6% or 359.7 * 10 6 / l (within normal limits) ); IgA -0.58 g / l, IgM -1.24 g / l, IgG-10.2 g / l.
  • the level of total IgE was 2250 IU / ml at the start of treatment in the clinic. Over 2 years (until August 2014), 3 courses of immunization with a staphylococcal vaccine, a total of 35 injections, and 4 courses of immunization with bacterial auto- and multivalent vaccines were carried out.

Abstract

Изобретение относится к вакцинам для лечения и профилактики стафилококковой инфекции и может быть использована для специфической иммунотерапии. Вакцина включает: золотистый стафилококк - 15 штаммов, гемолитический стафилококк- 3 штамма и эпидермальный стафилококк - 3 штамма. Согласно способу изготовления агаровую культуру бактерий смывают с поверхности твердой питательной среды апирогенной дистиллированной водой и помещают в стерильные емкости, а для устранения примесей питательной среды штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем центрифугирования, выливая надосадочную жидкость, полученный осадок биомассы культуры бактериологического штамма, выращенного порознь, суспендируют в апирогенной дистиллированной воде для инъекций и стандартизируют, причем штаммы микроорганизмов берут в равных количествах, стандартизированную суспензию штаммов инактивируют в автоклаве, в емкости с инактивированными бактериями добавляют в равных количествах препарат эмбрионального происхождения, или физиологический раствор, или воду для инъекций. Вакцину вводят подкожно в область нижнего угла лопатки, поочередно в правую и левую стороны при каждой последующей инъекции в соответствующих нарастающих дозах. Изобретение позволяет повысить иммуногенный эффект вакцины и усилить иммунологический и клинический эффект после вакцинации без аллергических реакций, уменьшить срок получения вакцины.

Description

ИНАКТИВИРОВАННАЯ СТАФИЛОКОККОВАЯ ЖИДКАЯ ВАКЦИНА
Группа изобретений относится к медицинской микробиологии, фармацевтической промышленности, в частности к вакцинным препаратам, а именно, к вакцинам для лечения и профилактики стафилококковой инфекции, способов их изготовления, способов лечения и профилактики, и может быть использована для специфической иммунотерапии взрослых и детей, страдающих острой или хронической (в стадии обострения) стафилококковой инфекцией (фурункулез, гидраденит, панариций, флегмона, пиодермия, остеомиелит, мастит, воспалительные гинекологические, урологические, отоларингологические заболевания, ларинго-трахеиты, бронхиты, пневмонии и т.п.), больных с клиническими проявлениями хронической стафилококковой инфекции как альтернатива антибиотикам или как метод дополнительного лечения совместно с антибиотиками при септических состояниях, представляющих угрозу для жизни.
Известен штам Stahpylococcus aureus N°44 для изготовления иммунобиологических препаратов, изолированный из сердца теленка, больного пневмоэнтеритом, депонирован и который сохраняется в Депозитарии Государственного научно-контрольного института биотехнологии и штаммов микроорганизмов (г. Киев), регистрационный номер 541, Семья Micrococcacea, Род Stahpylococcus, Вид Stahpylococcus aureus [UA N° 115553 U, C12N 1/20, 2017].
Штамм Stahpylococcus aureus N°44 предназначен для использования в качестве одного из компонентов в технологии изготовления инактивированной вакцины для специфической профилактики стрептококковых, энтерококковых и стафилококковых инфекций животных (вакцина CCIT).
Вакцина CCIT предназначена для профилактического использования в ветеринарной медицине и не предназначена для применения в клинической медицине у людей. Штамм 44 Staphylococcus aureus не имеет указаний на степень чувствительности/устойчивости к антибиотикам.
Известна инактивированная стафилококковая вакцина для лечения мастита у коров [CN 101979089 С1, 2011].
Вакцина предназначена для использования в ветеринарной медицине для животных и не может быть использована в клинической практике для людей. Известна вакцина, в которой содержится только один депонированный штамм золотистого стафилококка, что значительно сужает его антигенный состав и, соответственно, иммунологический ответ на вакцинацию. Вакцина предназначена для применения у животных - морских млекопитающих и не предназначена для применения у людей [CN 108048364 С1, 2018.
Известна статья Никулина Ю.Ю. Биологические свойства бактерий рода Staphylococcus, выделенных от пациентов Днепропетровской клинической больницы им. И.И. Мечникова. Вестник Днепропетровского университета, 2011, вып.2, т.1, с.101-106. Дана оценка биологических свойств 494 штаммов бактерий рода Staphylococcus, выделенных из патологического материала от пациентов 15 отделений большой областной больницы г. Днепр, по сути - госпитальных штаммов и определение их чувствительности к антибиотикам различных фармгруп. Клинический материал для культуральных бактериологических исследований получали из ликвора, мочи, мокроты, из ран различного происхождения, носа, горла, глаз, влагалища. Выделенные штаммы не проходили процедуру депонирования. Авторы статьи изучали чувствительность выделенных штаммов стафилококков к различным антибиотикам с целью подбора тех препаратов, к которым бактерии, возбудители различных заболеваний, еще сохранили восприимчивость и не имели в виду создание и использование в лечебных целях стафилококковой вакцины.
Известна бесклеточная антистафилококковая вакцина для лечения хронической стафилококковой инфекции, отличающаяся содержанием термолабильних и термостабильных белковополисахаридной природы антигенов клеточной стенки S. aureus, использованием штаммов N 1991, 1986 S.aureus, характеризующихся высокой иммуногенностью: ED50=20-100 млн микробных клеток, слабой вирулентностью: PD50=0,5-2,0 млрд микробных клеток, низким содержанием белка, слабой аллергенной активностью [RU !N 95120818 А, А61К 39/116, 1998].
В состав вакцины входит только один стафилококк - золотистый, из-за чего она недостаточно эффективна.
Наиболее близкой к заявленной вакцине является вакцина против стафилококка - анатоксин стафилококковый, в которой активное вещество представлено токсином стафилококка (стерильный фильтрат бульонной культуры золотистого стафилококка, содержащего экзотоксин), предварительно частично инактивированным с помощью формалина и тепловой энергии. Анатоксин стафилококковый является стерильным фильтратом бульонной культуры золотистого стафилококка, содержащий экзотоксин, обезвреженный формалином. Кроме того, из препарата изъято микробную биомассу и все балластные белки, что делает его более очищенным. 1 мл суспензии содержит от 10 до 14 так называемых единиц связывания [htp://mednarodna.com.ua/9903-anatoksin- stafilokokkovyy.html] .
В анатоксине стафилококковом присутствует только ослабленный стафилококковый токсин, поэтому вакцина недостаточно эффективна. Анатоксин имеет недостаточно широкие функциональные возможности: возраст пациентов, которым назначают анатоксин, ограничен от 16 до 60 лет, то есть для детей он не предназначен. Анатоксин также может вызвать аллергические реакции.
Известен способ получения анатоксина стафилококкового очищенного жидкого для специфической иммунотерапии больных стафилококковой инфекцией, включающий перевод токсина в анаформу с помощью обработки формальдегидом, очистки анатоксина путем обработки сухим хлоридом натрия, осаждения трихлоруксусной кислотой, сепарацию, растворение осадка в 0,9% -ном растворе хлорида натрия, обработку этиловым спиртом, отделения осадка центрифугированием и растворения в 0,9%-ном растворе хлорида натрия до содержания 12 ЕС в 1 мл при остаточном формальдегиде не более 0,003 % [RU 2169580 Cl, А61К 39/085, 2001].
Известен также способ получения стафилококковой анатоксин-вакцины, включающий детоксикацию экзо-, эндо- и суперэнтеротоксинов в суспензии с автоклавированными стафилококками раствором формалина, сорбцию на гидроксиде алюминия, стерилизацию. Детоксикацию стафилококковых токсинов проводят двумя детоксикаторами - сначала 0,2%-ным раствором формалина в течение 7-9 суток при 40- 45°С, а затем 0,6±0,1%-ным раствором этония в течение 7-9 суток при 40-45°С, при этом концентрацию инактивированных токсинов с микроорганизмами увеличивают вдвое путем декантации 50±5% надосадочной жидкости [RU N°2008115050 А, А61К 39/085, 2009].
В обоих аналогах способа при получении стафилококковой анатоксин-вакцины используют формальдегид, что снижает иммуногенный эффект вакцины и иммунологические и положительные клинические ответы после вакцинации.
Известен способ изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота, включающий получение антигенов с последующим их смешиванием, внесение адъюванта, при этом проводят отбор патологического материала от больного и павшего крупного рогатого скота из местного эпизоотического очага, потом из отобранного патологического материала готовят суспензию и дальше делают посев на дифференциально-диагностические среды, после чего выделяют клетки чистых культур возбудителя эшерихиоза Escherichia coli, стрептококкоза Streptococcus pneumoniae и стафилококкоза Staphylococcus aureus, потом отдельно выращивают клетки чистых культур возбудителей эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза в мясо-пептонном бульоне с добавлением глюкозы до 0,2%-ной концентрации с титром 4-5 млрд микробных клеток в 1 см3, после этого отдельно инактивируют клетки чистых культур возбудителей эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза формалином до 0,4-0,5%-ной конечной концентрации при температуре 37 °С в течение 72-96 часов при периодическом перемешивании, затем смешивают клетки чистых культур возбудителей эшерихиоза Escherichia coli, стрептококкоза Streptococcus pneumoniae и стафилококкоза Staphylococcus aureus в равных соотношениях, затем в смесь инактивированных клеток чистых культур вносят адъювант - гидроокись алюминия в количестве 20% к объему, тщательно смешивают, а перед фасовкой тщательно перемешивают конечный продукт [RU 2538158 Cl, А61К 39/188, 2015].
Этот способ предназначен для использования в ветеринарной медицине и не используется для лечения людей, не рекомендуется для использования в научно- исследовательских и производственных учреждениях и для клинического применения.
В способе изготавливается ассоциированная вакцина, содержащая возбудители трех распространенных болезней крупного рогатого скота (кишечную палочку, стрептококки и стафилококки), что уменьшает антигенную нагрузку каждого из них в одной дозе вакцины и предназначено для одновременного лечения эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза.
Возбудители заболеваний, используемые для изготовления указанной вакцины, получают от больных и павших животных (крупный рогатый скот) в «местных эпизоотических очагах», что неуместно для лечения гнойно-септических заболеваний у детей и взрослых. Для инактивации культур бактерий используют формалин, а как адъювант - гидроокись алюминия, составляющего 1/5 часть объема вакцины, существенно, что повышает уровень аллергогенности готового продукта при возможном использовании такой вакцины у людей.
Известен способ получения стафилококковой вакцины для лечения гнойных инфекций, включающий выращивание шести-восьми штаммов гноеродных стафилококков в жидкой питательной среде и стерилизацию биомассы. Культивирование шести-восьми штаммов гноеродных стафилококков, идентифицированных как Staphylococcus aureus, осуществляют порознь в течение 14-16 дней при температуре 37°С, затем культивируют порознь при температуре 3-5 °С в течение 6-8 суток, после чего полученный материал смешивают и сразу автоклавируют при температуре 115-125°С в течение 15-40 мин. [RU 2421240 С1,А61К 39/085, 2011]. Несмотря на декларацию, что полученная указанным способом стафилококковая вакцина может быть использована для профилактики и лечения гнойных инфекций у животных и человека, в описании данные об использовании этой вакцины у людей полностью отсутствуют. А именно:
- иммуногенный эффект вакцины, в частности, проверяли на кроликах;
- положительный эффект применения приведен на основании лечения животных с маститом в одном из животноводческих хозяйств Приволжского района Самарской области;
- дозировки вакцины приведены для животных и не предназначены для использования у людей;
- в вакцине использовали 6 штаммов стафилококка золотистого, выделенных от больных животных, что вряд ли уместно для лечения гайморита, конъюнктивита, бронхита, вагинита, простатита, пиелонефрита и др. у детей и взрослых.
Наиболее близким к заявляемому способу изготовления вакцины является способ получения стафилококковой вакцины для лечения гнойных инфекций, включая выращивание культур стафилококков в жидкой питательной среде и стерилизацию биомассы. Культивирование шести-восьми штаммов гноеродных стафилококков, идентифицированных как Staphylococcus aureus, осуществляют порознь в течение 14-16 дней при температуре 37 °С, затем культивируют порознь при температуре 3-5°С в течение 6-8 суток, после чего полученный материал смешивают и сразу автоклавируют при температуре 115-125°С в течение 15-40 мин. [RU °2009 136 113 А, А61К 39/085, 2011].
Использование только одного вида стафилококка - золотистого, содержащего 6-8 штаммов, сужает спектр действия и клиническую эффективность полученной вакцины.К тому же, получают такую стафилококковую вакцину достаточно долго - 24 суток.
Наиболее близким к заявляемому способу лечения является способ лечения путем введения анатоксина стафилококкового очищенного жидкого подкожно в область нижнего угла лопатки, поочередно в правую и левую стороны при каждой последующей инъекции. Полный курс лечения включает 7 инъекций препарата, осуществляют через 2 дня, в следующих нарастающих дозах: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,2 - 1,5 мл. При быстром клиническом эффекте курс терапии по усмотрению лечащего врача может быть сокращен до 5 инъекций. Лечение анатоксином стафилококковым очищенным жидким может проводиться параллельно с общей и местной терапией, кроме сывороточных антистафилококковых препаратов, таких как антистафилококковый иммуноглобулин и антистафилококковая плазма [https://tabletki.ua/ Анатоксин-стафилококковый/] .
Так как в анатоксине стафилококковом присутствует только ослабленный стафилококковый токсин, вакцина недостаточно эффективна. Вакцинацию анатоксином стафилококковым делают только взрослым. Кроме того, при такой вакцинации возможны аллергические реакции.
В основу изобретения поставлена задача создания инактивированной жидкой стафилококковой вакцины, которая бы имела широкие функциональные возможности, эффективно лечила гнойно-воспалительные заболевания стафилококковой этиологии без аллергических реакций.
Вторая задача, поставленная в основу изобретения, это создание способа получения инактивированной стафилококковой жидкой вакцины, который бы расширил спектр действия и клиническую эффективность вакцины, а также уменьшил срок ее получения.
Третья задача, поставленная в основу изобретения, - создание способа лечения стафилококковой инфекции путем введения инактивированной стафилококковой жидкой вакцины для расширения функциональных возможностей, эффективного лечения гнойно- воспалительные заболевания стафилококковой этиологии без аллергических реакций.
Поставленную задачу решают тем, что инактивированная стафилококковая жидкая вакцина, включающая золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), согласно изобретению, содержит не менее 21-го штамма 3-х видов стафилококков, а именно: не менее 15 штаммов золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus), 3 штаммов гемолитического стафилококка (Staphylococcus haemolyticus) и 3 штаммов эпидермального стафилококка (Staphylococcus epidermidis), в том числе штаммы бактерий с разной степенью антибиотикорезистентности, депонированные в Депозитарии Института микробиологии и вирусологии Национальной академий наук Украины:
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7684;
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7684,
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7756;
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7665;
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7666
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7782
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7786;
Staphylococcus haemolyticus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7712; Staphylococcus haemolyticus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7731; Staphylococcus haemolyticus депонирован под регистрационным номером- ИМВ В-7766; Staphylococcus epidermidis депонирован под регистрационным номером - ИМВ В-7763.
В противоположность анатоксину стафилококковому, где присутствует только ослабленный стафилококковый токсин, в заявленной вакцине присутствует антигенный комплекс из цельных нежизнеспособных клеток термически инактивированных бактерий, корпускулярные термолабильные и термостабильные белковополисахаридные антигены клеточной стенки стафилококков и неослабленные стафилококковые токсины (преимущественно эндотоксины), что повышает иммуногенный эффект вакцины и усиливает иммунологический и положительный клинический эффект после вакцинации.
Вакцина может применяться как взрослым, так и детям, начиная с грудного возраста, что расширяет ее функциональные возможности.
В прототипе возможно развитие аллергических реакций при применении вакцины, а в заявленной вакцине аллергических реакций нет, более того, вакцина оказывает гипоаллергенный эффект с существенным снижением повышенных до лечения уровней IgE.
Вторую поставленную задачу решают тем, что в способе изготовления инактивированной стафилококковой жидкой вакцины, включающем выращивание культуры стафилококков на твердой питательной среде, инактивацию в автоклаве, согласно изобретению, вакцину готовят не менее чем из 21-го производственного клинического штамма 3-х различных видов стафилококков, выделенных при бактериологическом исследовании биологических субстратов, из мазков с кожи и слизистых оболочек: Staphylococcus aureus - 15 штаммов, Staphylococcus haemolyticus - 3 штамма, Staphylococcus epidermidis - 3 штамма определенной локации, выделенных при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии, агаровую культуру бактерий смывают с поверхности твердой питательной среды апирогенной дистиллированной водой и помещают в стерильные емкости, а для устранения примесей питательной среды штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем центрифугирования при 1500-3000 об/мин. в течение 10-15 минут, выливая надосадочную жидкость, полученный осадок биомассы культуры бактериологического штамма, выращенного порознь, суспендируют в апирогенной дистиллированной воде для инъекций и стандартизируют, причем штаммы микроорганизмов берут в равных количествах, стандартизированную суспензию штаммов инактивируют в автоклаве при температуре 115- 125 °С и давлении 1 атм. в течение 15-40 минут, 15-40 минут, в емкости с инактивированными бактериями добавляют в равных количествах препарат эмбрионального происхождения, или физиологический раствор, или воду для инъекций и получают суспензию микробных клеток, для контроля стерильности образцы вакцины высевают на питательный бульон, посевы инкубируют в термостате при температуре 35- 40°С в течение 24-48 часов, и при отсутствии роста добавляют консервант и разливают вакцину в стерильные ампулы.
В способе используют 24-часовую агаровую культуру.
В качестве препарата эмбрионального происхождения используют эрбисол или инфламафертин.
Штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем трехкратного центрифугирования.
Осадок стандартизируют в соответствии со стандартом МАК Фарленд (McF) с оптической плотностью 1,0, что соответствует 3 млрд (3,0* 10л9) микробных клеток в 1 мл.
В способе получают суспензию микробных клеток 1,5 млрд (1,5*10Л9) в 1 мл готовой вакцины.
Разливают вакцину в ампулы по 1 мл.
Разлитые и запаянные ампулы проверяют на герметичность, этикетируют и упаковывают по 10 ампул для вакцинации, оставляя по 2 ампулы каждой серии для контроля.
Использование в способе трех видов стафилококков - золотистого, гемолитического и эпидермального вместо одного - золотистого в прототипе и не менее 21 штамма в противоположность 6-8 штаммам в прототипе позволяет расширить спектр действия и клиническую эффективность полученной вакцины.
Вакцину получают в течение 24 часов, а в прототипе - 24 суток.
Третью поставленную задачу решают тем, что в способе лечения стафилококковой инфекции инактивированной стафилококковой жидкой вакциной, включающем введение вакцины подкожно в область нижнего угла лопатки, поочередно в правую и левую стороны при каждой последующей инъекции в соответствующих нарастающих дозах, согласно изобретению, курс лечения составляет 10-12 инъекций, при этом сначала осуществляют 6-7 инъекций, а после интервала в 3 недели - еще 4-5 инъекций с учетом возраста и массы тела пациентов.
Для детей весом до 10 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 - 0,5 - 0,5 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 мл.
Для детей весом 11-20 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,6 - 0,7 - 0,7 - 0,7 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,2 - 0,4 - 0, 5 - 0,6 - 0,8 мл. Для детей весом 21-30 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 0,9 - 0,9 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,2 - 0,4 - 0, 6 - 0,8 - 1,0 мл.
Для детей весом 31 -40 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,0 - 1,0 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,5 - 0, 7 - 0,9 - 1,0 мл.
Для взрослых весом 45-80 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,0 - 1,0 - 1,0 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,7
- 0, 9 - 1,0 - 1,0 мл.
Для взрослых весом 80-120 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,0 - 1,0 - 1,5 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,7
- 0, 9 - 1,0 - 1,5 мл.
Для взрослых весом более 120 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,5 - 1,0 - 1,0 - 1,5 - 1,5 - 2,0 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,7
- 1,0 - 1,5 - 2,0 мл.
Заявленную вакцину применяют при острой или хронической (в стадии обострения) стафилококковой инфекции (фурункулез, гидраденит, панариций, флегмона, пиодермия, остеомиелит, мастит, воспалительные гинекологические, урологические, отоларингологические заболевания, ларинго-трахеиты, бронхиты, пневмонии, бронхиальная астма и т.п.), у больных с клиническими проявлениями хронической стафилококковой инфекции в качестве альтернативы антибиотикам или как метод дополнительного лечения совместно с антибиотиками при септических состояниях, представляющих угрозу для жизни.
В противоположность лечению анатоксином стафилококковым, где присутствует только ослабленный стафилококковый токсин, в заявленном способе лечения присутствуют цельные клетки инактивированных нежизнеспобных бактерий, корпускулярные термолабильны и термостабильные белковополисахаридные антигены клеточной стенки стафилококков и неослабленные стафилококковые токсины (преимущественно эндотоксины), что повышает иммуногенный эффект лечения и усиливает иммунологический и положительный клинический эффект после вакцинации. Вакцину можно применять как взрослым, так и детям, что расширяет ее функциональные возможности.
Вакцина СтафилоПримавак не имеет побочных действий. Возможны только местные (гиперемия, отечность и болезненность в месте введения) и общие (повышение температуры тела, сыпь на коже, как проявление бактериальной токсикодермии) реакции на введение вакцины. Такие реакции носят естественный физиологический характер и обусловлены активацией местного иммунитета (в месте введения вакцины) и общего иммунного ответа с выделением токсинов из бактерий, против которых направлена конкретная вакцина СтафилоПримавак, за счет быстрого разрушения бактерий после их иммунного распознавания настроенной иммунной системой.
При применении вакцины СтафилоПримавак развитие аллергических реакций отсутствует, более того, вакцина оказывает гипоаллергенный эффект с существенным снижением повышенных до лечения уровней IgE.
Заявленная инактивированная стафилококковая жидкая вакцина СтафилоПримавак включает не менее 21 штамма стафилококков 3-х разных видов, а именно: золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus) - 15 штаммов, гемолитический стафилококк (Staphylococcus haemolyticus) - 3 штамма, и эпидермальный стафилококк (Staphylococcus epidermidis ) - 3 штамма определенной локации, выделенные при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии у детей и взрослых.
Инактивированную стафилококковую жидкую вакцину СтафилоПримавак получают следующим образом.
Вакцину готовят из производственных клинических штаммов стафилококков, не менее чем с 21-го штамма 3-х различных видов различной локации, ранее выделенных при бактериологическом исследовании биологических субстратов (мокроты, слизи из носа, мочи, слезы, сока простаты, выделений из влагалища и др.), смывов, мазков со слизистых оболочек, гнойных очагов и с кожи пациентов при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии у детей и взрослых, а именно: Staphylococcus aureus - 15 штаммов, Staphylococcus haemolyticus - 3 штамма, Staphylococcus epidermidis - 3 штамма, в том числе и штаммы бактерий с разной степенью антибиотикорезистентности, депонированные в Депозитарии Института микробиологии и вирусологии Национальной академии наук Украины:
Staphylococcus aureus, штамм 776, изолированный из зева больного лакунарной ангиной 1.11.2017 г., депонирован 17.01.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В- 7684, резистентность к антибиотикам - 10%;
Staphylococcus aureus, штамм 627, изолированный из мокроты больного бронхиальной астмой 18.04.2018 г., депонирован 07.05.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7756, резистентность - 0%;
Staphylococcus aureus, штамм 681, изолированный из абсцесса 27.09.2017 г., депонирован 26.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7665, резистентность - 10%;
Staphylococcus aureus, штамм 308, изолированный из мочи больного хроническим пиелонефритом 27.09.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номером ИМВ В-7666, резистентность - 0%;
Staphylococcus aureus, штамм 834, изолированный из мокроты больного хроническим бронхитом 26.09.2018 г., депонирован 31.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7782, резистентность - 10%;
Staphylococcus aureus, штамм 487, изолированный из мокроты ребенка с муковисцедозом 03.10.2018 г., депонирован 31.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7786, резистентность - 20%;
Staphylococcus haemolyticus, штамм 908, изолированный из уретры и сока простаты больного хроническим уретропростатитом 13.12.2017 г., депонирован 23.03.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7712, резистентность - 20%;
Staphylococcus haemolyticus, штамм 502, изолированный из мочи больной хроническим циститом 20.02.2018 г., депонирован 23.03.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7731, резистентность - 0%;
Staphylococcus haemolyticus, штамм 579, изолированный из носа больного хроническим гайморитом 23.05.2018 г., депонирован 31.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7766, резистентность - 0%;
Staphylococcus epidermidis, штамм 116, изолированный из кожи больного пиодермией и фурункулезом 25.04.2018 г., депонирован 14.05.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7763, резистентность - 0%.
При изготовлении вакцины используют не менее 21-го клинического патогенного штамма стафилококков 3-х видов определенной локации, выделенных при бактериологическом обследовании пациентов с локализованными бактериальными заболеваниями различных органов и систем: носа, глотки, слизистой оболочки ротовой полости, языка, десен, зубов, глаз, трахеи, бронхов, легких, органов мочеполовой системы, кожи и т.д.
При изготовлении вакцины используют не менее 21-го клинического патогенного штамма стафилококков 3-х видов с разной степенью резистентности к существующим антибиотикам (от 0% резистентности - чувствительные ко всем антибиотикам, и до 100% резистентности - госпитальные не чувствительны ко всем антибиотикам штаммы).
24-часовую агаровую культуру бактерий, каждый штамм которых культивируют порознь, смывают с поверхности твердой питательной среды апирогенной дистиллированной водой (вода для инъекций) и помещают в стерильные емкости. Для устранения примесей питательной среды штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем трехкратного центрифугирования при 1500-3000 об/мин. в течение 10-15 минут. Надосадочную жидкость выливают. Полученный осадок культуры бактериологического штамма суспендируют в апирогенной дистиллированной воде для инъекций и стандартизируют в соответствии со стандартом МАК Фарленд (McF) с оптической плотностью 1,0, что соответствует 3 млрд (3,0*10л9) микробных клеток в 1 см3 (1 мл). Штаммы микроорганизмов берут в равных количествах для получения такой же конечной концентрации - суммарно 3 млрд (3,0*10Л9) микробных клеток в 1 мл. Стандартизированную суспензию штаммов инактивируют в автоклаве при температуре 115-125°С и давлении 1 атм. в течение 15-40 минут. В емкости с инактивированными бактериями добавляют в равных количествах Эрбисол (или другой препарат эмбрионального происхождения, например, Инфламафертин) или физиологический раствор или воду для инъекций, или другой растворитель согласно с производственным техническим регламентом и получают суспензию микробных клеток 1,5 млрд (1,5*10л9) в 1 мл готовой вакцины. Для контроля стерильности образцы вакцины высевают на питательный бульон. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37°С в течение 24-48 часов. При отсутствии роста добавляют консервант и другие ингредиенты согласно производственному техническому регламенту и разливают вакцину по 1 мл в стерильные ампулы. Разлитые и запаянные ампулы проверяют на герметичность, этикетируют и упаковывают по 10 ампул для вакцинации, оставляя по 2 ампулы каждой серии для контроля.
Иммунизацию вакциной СтафилоПримавак назначают при острой стафилококковой инфекции у новорожденных, детей грудного и старшего возраста, взрослых при поражениях кожи и слизистых оболочек, органов носоротоглотки, глаз, дыхательных путей, мочевыводящих путей и половых органов, костей и суставов (остеомиелит, гнойный артрит, в том числе - после установки искусственных суставов), а также при других гнойно-воспалительных заболеваниях стафилококковой этиологии (парапроктит, бартолинит, гангрена Фурнье и др.) подкожно (под лопатку) курсом из 12 инъекций (вакцинация - 7 инъекций, после интервала в 3 недели ревакцинация - еще 5 инъекций) с учетом возраста и массы тела пациентов по следующим схемам:
Figure imgf000015_0001
Срок годности вакцины СтафилоПримавак составляет 24 месяца.
Изобретение не ограничивается изготовлением жидкой вакцины. Вакцина может также быть изготовлена в виде сублингвальных сосательных таблеток, капсул для приема внутрь, капель в нос или спрея, вагинальных свечей-суппозиториев, мази, раствора для орошения слизистых оболочек.
Изобретение поясняется примерами лечения.
Пример 1
Ребенок К., 7 лет, родители обратились в клинику в июне 2018 г. на плановую очередную консультацию, девочка закончила 1-й класс, жалоб нет, клинически здорова. Первый раз обратились в клинику около 1,5 лет назад. Был установлен диагноз: хроническая стафилококковая инфекция: носительство в носоглотке, хронический риносинусит с частыми затяжными насморками, заложенностью носа, аденоиды I-II ст., хронический тонзиллит с рецидивирующими ангинами, повторные эпизоды отита в отдаленном и ближайшем анамнезе, рецидивирующие ларинготрахеиты и бронхиты с обструктивным синдромом с настойчивым приступообразным коклюшеподобным кашлем, частые простудные заболевания. Повторные многократные предыдущие курсы лечения антибиотиками (более 14-15 раз, в том числе с учетом чувствительности выделенных при бакпосевах из носоглотки штаммов Staphylococcus aureus) с грудного возраста давали кратковременный клинический эффект с последующими все более ранними рецидивами заболевания. За 1,5 года наблюдения и лечения в клинике были проведены 2 курса иммунизации вакциной СтафилоПримавак (суммарно - 22 инъекции), и два курса - поливалентной вакциной РинодентаПримавак по 10 инъекций каждый в возрастной дозировке.
Пример 2
Женщина Н., 33 года, обратилась в клинику с жалобами на рецидивирующий в течение 3 лет фурункулез различной локализации: на лице, на туловище, под мышками (гидрадениты), на ягодицах; в момент обращения: 2 свежих не вскрывшихся фурункула на лобке и карбункул - на ягодице. Ранее более 10 раз проводили хирургическое вскрытие фурункулов и карбункулов. Неоднократные курсы лечения антибиотиками, переливание крови из вены в ягодицу, назначение пивных дрожжей, ультрафиолетового и лазерного облучения крови, озонотерапия и другие усилия давали лишь кратковременный клинический результат. В день обращения в клинику была назначена иммунизация вакциной СтафилоПримавак по стандартной схеме в возрастной дозировке сначала - 7 инъекций, а через 3 недели - ревакцинация еще из 5 инъекций (суммарно 12 инъекций). На 2-3-й день после начала вакцинации фурункулы и карбункул раскрылись, быстро очистились и затянулись. В процессе вакцинации появился еще один фурункул на животе, не глубокий и с более быстрым циклом развития и произвольным вскрытием. В течение 2 месяцев наблюдения после окончания ревакцинации было несколько эпизодов появления поверхностных микрофурункулов (по типу пиодермии) и одного фурункула-эквивалента (без нагноения и расплавления подкожной клетчатки). В связи с чем был проведен дополнительный второй курс иммунизации вакциной СтафилоПримавак (тоже из 12 инъекций, суммарно - 24). Катамнез: в течение следующих 2-х лет наблюдения рецидивов фурункулеза больше не было. Пример 3
Ребенок Маричка, родители которой обратились в клинику в декабре 2008 г., когда ребенку было 3 месяца, с жалобами на неоформленные испражнения зеленого цвета со слизью, плохой сон, сучение ножками, беспокойность. Из кала, носа и глотки были выделены идентичные штаммы Staphylococcus aureus. Было проведено местное лечение носоглотки и дисбактериоза кишечника, после чего состояние ребенка временно улучшилось. Но уже в ближайшее время в возрасте 6 месяцев сначала на коже лица, а затем очень быстро сплошь на туловище и конечностях появилась сыпь, которая была верифицирована специалистами как атопический дерматит (генетически детерминированный) с элементами мокнущей экземы. При бактериологическом исследовании повторно из носоглотки и кала и дополнительно из разных пораженных участков кожи и из мочи были выделены идентичны штаммы Staphylococcus aureus. Уровень общего IgE повысился с 2 до 110 МЕ/мл (возрастная норма - до 10 МЕ/мл). Были проведены 2 курса иммунизации стафилококковой вакциной СтафилоПримавак (каждый - по 10 инъекций). В течение 6 месяцев отмечена положительная клиническая динамика: кожа полностью очистилась от элементов сыпи до 12-го месяца жизни ребенка. Уровень общего IgE снизился до 19 МЕ/мл. В течение следующих 10 лет наблюдения (25.09.2019 г. ребенку исполнилось 11 лет) рецидивов атопического дерматита больше не было, кожа ребенка остается гладкой, диеты не придерживалась, ограничений в питании и режиме жизни не было.
Пример 4
Ребенок Асхаб, был впервые осмотрен в клинике 27.08.2012, когда родители привезли его в Киев из г.Махачкала (Дагестан), в возрасте 1 года 6 месяцев с установленным ранее в г.Москва диагнозом «Гипер-IgE синдром». Синдром гипериммуноглобулинемии Е (или синдром Джоба), симптомы которого начинаются с возраста младенца, считается наследственным заболеванием, при котором имеет место комбинированный гуморально-клеточный иммунодефицит (Т- и В -клеток) с тяжелыми стафилококковыми поражениями кожи (фурункулы, абсцессы, флегмоны кожи, и т.п.) в сочетании с тотальным эозинофильным дерматитом с ошеломляющим зудом кожи. В течение года (с 6 месяцев до обращения в клинику в Киеве) ребенок находился под наблюдением и неоднократно проходил соответствующее протокольное лечение с многократным назначением различных антибиотиков в Москве, с почти полным отсутствием положительного клинического результата: состояние ребенка ухудшалось^ стафилококковая болезнь с гнойными осложнениями прогрессировала, а уровень общего IgE за год вырос с 1470 до 2510 МЕ/мл. Главная жалоба родителей была на постоянно рецидивирующий тотальный фурункулез лица, головы, туловища и конечностей. Полиэтиологические очаги хронической бактериальной инфекции были обнаружены в носоглотке (с доминированием Staphylococcus aureus) и в почках (с доминированием энтерококков и клебсиеллы). Кроме того, дополнительно было установлено внутриутробное инфицирование цитомегаловирусом, который оставался в активной форме, что было главным провоцирующим фактором для такого агрессивного поведения бактериальных инфекций. Ни одного изъяна иммунитета выявлено не было: 23.08.2012 г. уровень Т-клеток составлял 59% или 3537.05* 10б/л клеток (выше нормы), В-клеток - 6% или 359.7* 106/л (в пределах нормы); IgA -0,58 г/л, IgM -1.24 г/л, IgG - 10.2 г/л. Уровень общего IgE составлял на момент начала лечения в клинике 2250 МЕ/мл. За 2 года (до августа 2014 г.) были проведены 3 курса иммунизации стафилококковой вакциной, суммарно из 35-и инъекций, и 4 курса иммунизации бактериальными ауто- и поливалентными вакцинами. С сентября 2014 г. рецидивы фурункулеза прекратились, на 21.06.2015 г. (дата очередного посещения клиники) родители отмечали редкое появление микрофурункулов и фурункулов-эквивалентов, а с 2016 г. эпизоды гнойного поражения кожи вовсе прекратились, хотя еще 2 года беспокоили приступы гнойных лакунарных ангин (как дополнительное проявление хронической стафилококковой инфекции). За это время дополнительно была проведена иммунизация стафилококковой вакциной СтафилоПримавак из 12 инъекций (суммарно - 47). Последнее посещение клиники состоялось 12 января 2018 г.: ребенок клинически здоров, проявления «гипер-IgE синдрома» отсутствуют, уровень развития соответствует возрасту, состояние клеточного и гуморального иммунитета даже активировано, уровень общего IgE заметно снизился и составлял 491 МЕ/мл. Последний звонок - на Новый 2019 г.: жалоб на здоровье ребенка у родителей нет.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Инактивированная стафилококковая жидкая вакцина, включающая золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), отличающяяся тем, что содержит не менее 21-го штамма 3-х видов стафилококков, а именно: 15 штаммов золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus), а также содержит гемолитический стафилококк (Staphylococcus haemolyticus) - 3 штамма, и эпидермальный стафилококк (Staphylococcus epidermidis) - 3 штамма различной локации, выделенных при бактериологическом обследовании пациентов с локализованными и/или системными бактериальными заболеваниями различных органов и систем, в том числе штаммы бактерий с разной степенью антибиотикорезистентности, депонированные в Депозитарии Института микробиологии и вирусологии Национальной академий наук Украины:
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7684;
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7684,
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7756;
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7665;
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7666
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7782
Staphylococcus aureus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7786;
Staphylococcus haemolyticus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7712; Staphylococcus haemolyticus депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7731; Staphylococcus haemolyticus депонирован под регистрационным номером- ИМВ В-7766; Staphylococcus epidermidis депонирован под регистрационным номером - ИМВ В-7763.
2. Способ изготовления инактивированной стафилококковой жидкой вакцины, включающий выращивание культуры стафилококков на твердой питательной среде, инактивирование в автоклаве, отличающийся тем, что вакцину готовят не менее чем из 21-го производственного клинического штамма 3-х разных видов стафилококков различной локации, которые были выделены при бактериологическом исследовании биологических субстратов, из мазков с кожи и слизистых оболочек: Staphylococcus aureus - 15 штаммов, Staphylococcus haemolyticus - 3 штамма, Staphylococcus epidermidis - 3 штамма, агаровую культуру бактерий смывают с поверхности твердой питательной среды апирогенной дистиллированной водой и помещают в стерильные емкости, а для устранения примесей питательной среды штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем центрифугирования при 1500-3000 об/мин. в течение 10-15 минут, выливая надосадочную жидкость, полученный осадок биомассы культуры бактериологического штамма, выращенного порознь, суспендируют в апирогенной дистиллированной воде для инъекций и стандартизируют, причем штаммы микроорганизмов берут в равных количествах, стандартизированную суспензию штаммов инактивируют в автоклаве при температуре 115-125 °С и давлении 1 атм. в течение 15-40 минут, в емкости с инактивированными бактериями добавляют в равных количествах препарат эмбрионального происхождения, или физиологический раствор, или воду для инъекций и получают суспензию микробных клеток, для контроля стерильности образцы вакцины высевают на питательный бульон, посевы инкубируют в термостате при температуре 35- 40°С в течение 24-48 часов, и при отсутствии роста добавляют консервант и разливают вакцину в стерильные ампулы.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что используют 24-часовую агаровую культуру.
4. Способ по п.2, отличающийся тем, что в качестве препарата эмбрионального происхождения используют Эрбисол или Инфламафертин.
5. Способ по п.2, отличающийся тем, что штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем трехкратного центрифугирования.
6. Способ по п.2, отличающийся тем, что стандартизируют в соответствии со стандартом МАК Фарленд (McF) с оптической плотностью 1,0, что соответствует 3 млрд (3,0*10л9) микробных клеток в 1 мл.
7. Способ по п.2, отличающийся тем, что получают суспензию микробных клеток 1,5 млрд (1,5*10Л9) в 1 мл готовой вакцины.
8. Способ по п.2, отличающийся тем, что разливают вакцину в ампулы по 1 мл.
9. Способ по п.2, отличающийся тем, что разлитые и запаянные ампулы проверяют на герметичность, этикетируют и упаковывают по 10 ампул для вакцинации, оставляя по 2 ампулы каждой серии для контроля.
10. Способ лечения и профилактики стафилококковой инфекции инактивированной стафилококковой жидкой вакциной, включающий введение вакцины подкожно в область нижнего угла лопатки, поочередно в правую и левую стороны при каждой последующей инъекции в соответствующих нарастающих дозах, отличающийся тем, что курс лечения составляет 10-12 инъекций, при этом сначала осуществляют 6-7 инъекций, а после интервала в 3 недели - еще 4-5 инъекций с учетом возраста и массы тела пациентов.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что детям весом до 10 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 - 0,5 - 0,5 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 мл.
12. Способ по п.10, отличающийся тем, что детям весом 11-20 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,6 - 0,7 - 0,7 - 0,7 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,2 - 0,4 - 0,5 - 0,6 - 0,8 мл.
13. Способ по п.10, отличающийся тем, что детям весом 21-30 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 0,9 - 0,9 мл в
1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,0 мл.
14. Способ по п.10, отличающийся тем, что для детей весом 31-40 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,3 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,0 - 1,0 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,2 - 0,4 - 0,6 - 0,8 - 1,0 мл.
15. Способ по п.10, отличающийся тем, что взрослым весом 45-80 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,0
- 1,0 - 1,0 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,7 - 0,9 - 1,0 - 1,0 мл.
16. Способ по п.10, отличающийся тем, что взрослым весом 80-120 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,5 - 0,7 - 0,9 - 1,0
- 1,0 - 1,5 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,7 - 0,9 - 1,0 - 1,5 мл.
17. Способ по п.10, отличающийся тем, что взрослым весом более 120 кг иммунизацию стафилококковой вакциной осуществляют по схеме: 0,1 - 0,5 - 1,0 - 1,0 - 1,5
- 1,5 - 2,0 мл в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й, 9-й, 14-й и 19-й дни лечения, а через 3 недели после седьмой инъекции - через день по схеме: 0,3 - 0,7 - 1,0 - 1,5 - 2,0 мл.
PCT/UA2019/000162 2018-12-27 2019-12-27 Инактивированная стафилококковая жидкая вакцина WO2020139308A1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAA201812970A UA121358C2 (uk) 2018-12-27 2018-12-27 Інактивована стафілококова рідка вакцина, спосіб її виготовлення і спосіб лікування та профілактики нею
UAA201812970 2018-12-27

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2020139308A1 true WO2020139308A1 (ru) 2020-07-02

Family

ID=71116114

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/UA2019/000162 WO2020139308A1 (ru) 2018-12-27 2019-12-27 Инактивированная стафилококковая жидкая вакцина

Country Status (2)

Country Link
UA (1) UA121358C2 (ru)
WO (1) WO2020139308A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115105588A (zh) * 2021-03-23 2022-09-27 成都威斯克生物医药有限公司 一种金黄色葡萄球菌疫苗的生产方法及应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2421240C1 (ru) * 2009-09-29 2011-06-20 Государственное научное учреждение Самарская научно-исследовательская ветеринарная станция Российской академии сельскохозяйственных наук Способ получения стафилококковой вакцины
US20130337012A1 (en) * 2004-06-07 2013-12-19 Qu Biologics Inc. Tissue Targeted Antigenic Activation of the Immune Response to Treat Cancers

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20130337012A1 (en) * 2004-06-07 2013-12-19 Qu Biologics Inc. Tissue Targeted Antigenic Activation of the Immune Response to Treat Cancers
RU2421240C1 (ru) * 2009-09-29 2011-06-20 Государственное научное учреждение Самарская научно-исследовательская ветеринарная станция Российской академии сельскохозяйственных наук Способ получения стафилококковой вакцины

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
УЧАЙКИН В. Ф. /UCHAIKIN V. F. ET AL. /: "Руководство по клинической вакцинологии. /Rukovodstvo po klinicheskoi vaktsinologii. /", 2006, ГЭОТАРМЕДИА /GEOTAR-MEDIA./, pages: 592, 305, 307 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115105588A (zh) * 2021-03-23 2022-09-27 成都威斯克生物医药有限公司 一种金黄色葡萄球菌疫苗的生产方法及应用
CN115105588B (zh) * 2021-03-23 2024-03-15 成都威斯克生物医药有限公司 一种金黄色葡萄球菌疫苗的生产方法及应用

Also Published As

Publication number Publication date
UA121358C2 (uk) 2020-05-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104292298A (zh) 多肽、编码该多肽的dna分子、载体、制备方法及应用
CN106822890A (zh) 一种用于防治断奶仔猪腹泻的药物组合物及其制备方法和应用
CN1195545C (zh) 用于泌尿生殖系统感染的阴道栓剂菌苗
US20220267419A1 (en) Human Immunoglobulin Against Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus, Preparation Method Therefor, And Use Thereof
CN109985069B (zh) 益生菌组合物及其用途
WO2020139308A1 (ru) Инактивированная стафилококковая жидкая вакцина
CN111729076B (zh) 重组人溶菌酶的应用
CN109400705A (zh) 一种抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体及其制备方法
CN109453372A (zh) 一种含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体的添加剂
RU2672589C2 (ru) Вакцина против внутриутробного заболевания
WO2020139316A1 (ru) Поливалентная комбинированная инактивированная жидкая вакцина «уропримавак» и способ ее изготовления
JP3995733B2 (ja) 免疫賦活組成物
US3992521A (en) Immunological product for the treatment of intestinal infections due to pathogenic enterobacteria of the infant
CN115119940A (zh) 嗜酸乳杆菌LA85和乳双歧杆菌BLa80在抑制幽门螺旋杆菌上的应用
WO2020139314A1 (ru) Противобактериальная поливалентная комбинированная инактивированная жидкая вакцина
JPS6337770B2 (ru)
WO2020139311A1 (ru) Ешерихиозно-энтерококковая инактивированная жидкая вакцина «екопримавак» против кишечной палочки и энтерококков, способ ее изготовления, способ лечения и профилактики ею
WO2020139309A1 (ru) Псевдомонадная инактивированная вакцина «псевдопримавак» против синегнойной палочки
RU2176668C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS N.V.EP 317/402 "НАРИНЭ" ТНСи, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ПРИ ПРИГОТОВЛЕНИИ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ НОРМАЛИЗАЦИИ КИШЕЧНОЙ МИКРОФЛОРЫ
WO2020139312A1 (ru) Клебсиелезно-протейная вакцина «клепропримавак» против клебсиеллы и протея
CN114146171B (zh) 一种猪萎缩性鼻炎灭活疫苗及其制备方法
UA125851C2 (uk) Стрептококова інактивована рідка вакцина проти стрептококів і стафілококів, спосіб її виготовлення та спосіб лікування і профілактики нею
RU2377016C1 (ru) Способ получения стафило-стрептококковой анатоксин-вакцины
RU2189252C2 (ru) Способ получения стрептококкового анатоксина
RU2145504C1 (ru) ПОЛИСПЕЦИФИЧЕСКАЯ ГИПЕРИММУННАЯ СЫВОРОТКА ПРОТИВ РОТА-, КОРОНА-, ГЕРПЕСВИРУСОВ И E.coli (K 99, A 20) ДЛЯ ЛОКАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ И ИММУНОТЕРАПИИ СМЕШАННЫХ ФОРМ ДИАРЕИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 19904122

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

DPE1 Request for preliminary examination filed after expiration of 19th month from priority date (pct application filed from 20040101)
NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 19904122

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1