WO2019194703A1 - Лактитол и пероральная лекарственная форма при неалкогольной жировой болезни печени - Google Patents

Лактитол и пероральная лекарственная форма при неалкогольной жировой болезни печени Download PDF

Info

Publication number
WO2019194703A1
WO2019194703A1 PCT/RU2019/000157 RU2019000157W WO2019194703A1 WO 2019194703 A1 WO2019194703 A1 WO 2019194703A1 RU 2019000157 W RU2019000157 W RU 2019000157W WO 2019194703 A1 WO2019194703 A1 WO 2019194703A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
lactitol
liver
fatty liver
dosage form
oral dosage
Prior art date
Application number
PCT/RU2019/000157
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Владимир Викторович НЕСТЕРУК
Кирилл Константинович Сыров
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "ВАЛЕНТА ИНТЕЛЛЕКТ"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "ВАЛЕНТА ИНТЕЛЛЕКТ" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "ВАЛЕНТА ИНТЕЛЛЕКТ"
Priority to EA202092349A priority Critical patent/EA202092349A1/ru
Priority to CN201980023588.3A priority patent/CN111936148B/zh
Priority to KR1020207031617A priority patent/KR102569081B1/ko
Publication of WO2019194703A1 publication Critical patent/WO2019194703A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7016—Disaccharides, e.g. lactose, lactulose
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2013—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2013—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A61K9/2018—Sugars, or sugar alcohols, e.g. lactose, mannitol; Derivatives thereof, e.g. polysorbates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4841—Filling excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/4858—Organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics

Definitions

  • the present invention relates to the field of pharmaceutical industry, and more particularly to a tool for the treatment and prevention of non-alcoholic fatty liver disease.
  • Fatty hepatosis or non-alcoholic fatty liver disease - NAFLD is a condition in which more than 5% of the liver mass is fat, mainly triglycerides. If the fat content exceeds 10% of the weight of the organ, then more than 50% of the liver cells contain fat, and fat accumulations are distributed throughout the liver tissue.
  • the cause of fatty hepatosis is a metabolic syndrome - metabolic disorders and hormonal changes.
  • diabetes mellitus and an increase in the level of lipids in the blood develop with the threat of the formation of cardiovascular complications.
  • Fatty degeneration of liver cells can be caused by:
  • liver enzymes ALT, ACT, GGT
  • NAFLD is based on insulin resistance (cell immunity to insulin) and metabolic disorders, mainly lipid and carbohydrate. Fatty degeneration of the liver occurs due to the increased intake of fatty acids in the liver either with food or with increased lipolysis (the breakdown of fat in adipose tissue). NAFLD is a multifactorial disease when exposed to a combination of risk factors:
  • abdominal obesity (waist size in men - more than 94 cm and in women - more than 80 cm);
  • NAFLD includes the following stages of development:
  • liver steatosis - fat inclusion is accumulated in the hepatocyte
  • fibrosis an excess of fatty inclusions breaks the liver cell, and a fatty cyst is formed, which helps to replace liver tissue with fibrous tissue;
  • liver cirrhosis as an outcome of NAFLD, with an increased risk of hepatocellular carcinoma.
  • Non-alcoholic fatty liver disease is one of the most widespread liver diseases in the world. Thus, according to epidemiological studies of NAFLD, 10–40% of the world's population suffers [A. Buyerov. Chronic liver diseases: a brief guide for practitioners. 2nd ed. — M.: Medical News Agency, 2014.— 127 p. Fatty liver and coronary heart disease.
  • Geriatric aspects monograph / ed. Khoroshinina L.P. - M .: Concept Design LLC, 2014 - 346 p. Mehdiyev S.N. and other Non-alcoholic fatty liver disease in questions and answers (etiology, modern concept of pathogenesis, clinical features, principles of diagnosis and treatment) / Textbook. - SPb., 2011 - 53 p .; Trukhan D.I. Non-alcoholic fatty liver disease in the practice of the doctor of the "first contact" / Clinical prospects of gastroenterology, hepatology, 2012, Ml, p.3-9].
  • NAFLD is sometimes the first organ damage in the metabolic syndrome and a serious predictor of the development and progression of diabetes mellitus, cardiovascular disease [Fatty liver and coronary heart disease. Geriatric aspects: monograph / ed. Khoroshinina L.P. - M .: Concept Design LLC, 2014 - 346 p. Azizov V. A. et al. Non-alcoholic fatty liver disease and cardiovascular complications: what is the relationship? / Eurasian Journal of Cardiology, 2013, MJ p. 63-69 Schiff, Yu.R. et al. Alcoholic, medicinal, genetic and metabolic diseases / trans. with English, ed. Mukhina N.A. et al. - M: GEOTAR-Media, 2011.
  • Fatty disease develops, as a rule, at the age of 40-60 years, while women get sick more often. The disease also affects children. If you are overweight with an index of 30 (weight in kilograms divided by height in m 2 ), the probability of fatty hepatosis is 40%.
  • NAFLD combines a spectrum of liver lesions, including liver steatosis, non-alcoholic steatohepatitis (NASH), steatofibrosis and steatocirrhosis [. Fatty liver and coronary heart disease. Geriatric aspects: monograph / ed. Khoroshinina L.P. — M .: Concept Design LLC, 2014 - 346 p. ; Trukhan D.I. Non-alcoholic fatty liver disease in the practice of the doctor "first contact ”/ Clinical prospects of gastroenterology, hepatology, 2012, NQI, p.3-9; Schiff Yu.R. et al. Alcoholic, medicinal, genetic and metabolic diseases / trans. with English, ed.
  • NASH is a comorbid state of the metabolic syndrome and, in fact, it is the hepatic manifestation of this pathology [Fatty degeneration of the liver and coronary heart disease. Geriatric aspects: monograph / ed. Khoroshinina L.P. - M .: Concept Design LLC, 2014 - 346 p. Korneeva E.V. et al.
  • NASH is actively involved in the manifestation and exacerbation of atherogenic dyslipidemia [Fatty degeneration of the liver and coronary heart disease. Geriatric aspects: monograph / ed. Khoroshinina L.P. - M .: Concept Design LLC, 2014 - 346 p. Schiff Yu.R. et al. Alcoholic, medicinal, genetic and metabolic diseases / trans. with English, ed. Mukhina N.A. et al. - M.: GEOTAR- Media, 2011 .-- 480 p .;
  • NASH is also of great importance in the progression of disorders of carbohydrate metabolism [Fatty liver and coronary heart disease. Geriatric aspects: monograph / ed. Khoroshinina L.P. — M.: Concept Design LLC, 2014 - 346 p .; Schiff Yu.R. et al. Alcoholic, medicinal, genetic and metabolic diseases / trans. with English, ed. Mukhina N.A. et al. - M.: GEOTAR-Media, 2011. - 480 p.]. Chronic hyperglycemia likewise provokes a high risk of cardiovascular pathologies.
  • NASH is explained by the so-called “multiple parallel hits” hypothesis, according to which the pathogenesis of NAFLD is a model of the interaction of factors such as insulin resistance, activation of lipid peroxidation processes, persistent production of pro-inflammatory cytokines, such as TNF- ⁇ , IL-6 , IL-8, etc. and the production of so-called adipocytokines with adipose tissue: leptin, resistin, adiponectin
  • NAFLD non-alcoholic fatty liver disease
  • Hepatocytes are the main functional cells of the liver, and each individual hepatocyte is 15-30 microns in diameter. About 250 billion hepatocytes are in the human liver. Critical damage to the hepatocyte results in cell necrosis. In the case of necrosis, hepatocytes are able to regenerate by dividing intact hepatocytes. However, the alternation of necrosis and regeneration triggers the process of liver fibrosis, which leads to cirrhosis of the liver, portal hypertension, hepatic encephalopathy, bleeding and other complications.
  • Liver fibrosis is the proliferation of connective tissue that occurs due to excessive accumulation of extracellular matrix proteins, including collagen.
  • Liver cells are known to consist of hepatocytes, sinusoidal endothelial cells, Kupffer cells, and liver stellate cells. Liver stellate cells play the most important role in liver fibrosis [Francis J.E. et al. Fibrogenesis I. New insights into hepatic stellate cell activation: the simple becomes complex / American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology, 2000, V.279, N. l, pp. G7-Gl 1].
  • Liver stellate cells account for 15% of all liver cells that normally carry out the function of storing a retinoid, which is a precursor of vitamin A.
  • Kupffer cells begin to cannibalize damaged hepatocytes and secrete cytokines (TGF-beta, PDGF, FGF, HGF, PAF and ET-1) for proliferation of stellate cells of the liver.
  • Stellate cells of the liver differentiate into myofibroblasts. Myofibroblasts synthesize collagen, which accumulates in the intercellular matrix, which leads to liver fibrosis. Therefore, activation of stellate liver cells plays a dominant role in the progression of liver fibrosis. Activation of stellate cells of the liver proceeds in three stages. Pre-inflammatory stage; inflammatory stage; post-inflammatory stage.
  • hepatocyte damage provokes the synthesis of a hormone that stimulates the proliferation of hepatic stellate cells, or the proliferation of hepatic stellate cells is enhanced by decreasing the activity of arginase, an inhibitor of cell proliferation.
  • arginase an inhibitor of cell proliferation.
  • the formation of acetaldehyde or lipid peroxide stimulates the expression of matrix genes.
  • cytokines [TGF-beta, PDGF, FGF, HGF, PAF and ET-1), which are secreted by excited Kupffer cells and platelets, hepatic stellate cells proliferate and further differentiate into myofibroblasts that can turn into fibrocytes [Marie-Reine Losser et al. Mechanisms of Liver Damage / Seminars in Liver Disease, 1996, VI 6, N.4, pp. 357-367; Anke M.B.C. Tiggelman et al. Transforming growth factory-induced collagen synthesis by human liver myofibroblasts is inhibited by 012-macroglobulin / Journal of Hepatology, 1997, V26, N.6, pp.1220-1228].
  • cytokines and growth factors are secreted by already differentiated myofibroblasts to activate undifferentiated stellate liver cells and to secrete extracellular matrices.
  • Myofibroblasts activated and differentiated under the influence of stellate cells of the liver, form collagen, which then accumulates in the intercellular matrix.
  • Collagen monomer is very unstable and easily decomposes at body temperature, and the decomposed monomers polymerize, causing liver fibrosis
  • Liver cirrhosis as the outcome of liver fibrosis, develops due to the polymerization of accumulating collagen. The resulting collagen passes into insoluble fibers. Cirrhosis of the liver is also provoked and / or supported by permanent inflammation in the liver, in the case when hepatocyte destruction occurs, regeneration is replaced by connective tissue, with alcohol, hepatitis, toxic effects, etc. Cirrhosis is serious pathology and leads to fatal complications, such as portal hypertension, esophageal and gastric bleeding, hepatoma, hepatic encephalopathy, coma, etc. [Gines R. et al. Management of cirrhosis and ascites / The New England Journal of Medicine, 2004, V.350, N.16, pp.1646-1654].
  • the objective of the invention was to find a new tool that would be effective in relation to the prevention and treatment of non-alcoholic fatty liver disease.
  • Lactitol (systematic name: 4-0-alpha-0-galactopyranosyl-0-glucitol) - sugar alcohol synthesized from milk sugar (lactose), refers to disaccharides, has a long experience of use and has unique characteristics.
  • lactitol is used as a sweetener in the food industry, while it has a low energy value of 2 kcal / g. Therefore, it is considered an ideal sweetener for a new generation of functional nutrition products.
  • the main advantage of lactitol compared to other prebiotics is also its resistance to high temperatures and low pH values. These properties make it possible to use it for food products exposed to high-temperature processing, in particular, in bakery and confectionery industry [Artyukhova S.I. et al. Use of lactitol in biotechnology of functional food products / Modern high technology, 2013, NQ3, P.87 -88].
  • lactitol belongs to the group “Laxatives”, according to ATX it belongs to the group “Osmotic laxatives” and has the code A06AD12.
  • lactitol and other osmotic laxatives are the active substance does not have osmotic properties, but the products of its metabolism in the colon.
  • lactitol In the human intestine, there are no enzyme systems capable of split Lactitol, so it is not absorbed in the small intestine and enters the colon in an unchanged form.
  • lactitol is actively assimilated by saccharolytic microflora.
  • the short-chain aliphatic carboxylic acids (SCFA) with a low molecular weight (lactic, acetic, butyric, propionic) formed during microbial metabolism result in: 1) a decrease in the intestinal pH, which promotes activation of propulsive peristalsis; 2) to increase the volume and dilute the intestinal contents by increasing the osmotic pressure and fluid retention, which facilitates its movement through the intestine.
  • SCFA short-chain aliphatic carboxylic acids
  • lactitol In addition to its dose-dependent laxative effect, lactitol has a prebiotic effect (prebiotics are food components that are not digested and are not absorbed in the upper gastrointestinal tract, but are fermented by the microflora of the human large intestine and stimulate its growth and vital activity). Its prebiotic effect is due to the fact that when it enters the colon without changes, it is used by the probiotic intestinal microflora as an energy source, is not split by bacteria of the Escherichia coli group and inhibits the growth of proteolytic bacteria by inhibiting their adhesion to the cell walls of the epithelium. Lactitol enhances protein synthesis by bacteria, inhibits the formation of toxins.
  • lactitol is similar to dietary fiber, it is not hydrolyzed and absorbed in the stomach and small intestine, and in the large intestine it is fermented with saccharolytic microflora, being converted, as is already known, into lower fatty acids, carbon dioxide, hydrogen and biomass.
  • the products of lactitol metabolism are SCFA, primarily acetic acid and butyric acid in a ratio of 2: 1.
  • SCFA primarily acetic acid and butyric acid in a ratio of 2: 1.
  • the fundamental difference between lactitol and other disaccharides is the different profile of SCFA synthesized by microflora. So, compared with lactulose, lactitol metabolism produces 10 times more butyric acid.
  • organic acids are absorbed by the body and provide an energy value of 2 kcal / g.
  • the total energy value of lactitol is 2, 4-2, 6 kcal / g (unlike carbohydrates - 4 kcal / g).
  • Acetic acid molecules pass through the intestinal wall and enter the liver, from where they are distributed as an energy substrate to muscle tissues and internal organs (heart, kidneys, brain, etc.).
  • SCFAs are the main energy donor and modulator of colonocyte metabolism.
  • lactitol is a food source for colonic bacteria that break down sugars ⁇ Lactobacillus spp., Lactobacillus bifidus, Lactobacillus acidophilus, Bifidobacteria
  • its use selectively increases the biomass of saccharolytic microflora and inhibits the growth of proteolytic bacteria of Enterobacteria and Enterococi constipation.
  • lactitol and lactulose on probiotic and conditionally pathogenic and pathogenic bacteria, it was found that the effect of lactitol is more selective.
  • unlike lactulose it is not fermented by Escherichia coli (E.
  • lactitol is proposed, preferably with a daily dose of 5-15 g, as a food product (or food supplement) to improve intestinal microflora, and for the prevention of intestinal infections, colon cancer, diarrhea, or increased immunity.
  • Lactitol also has approved use in hepatic encephalopathy and hyperammonemia as an agent that helps to reduce the formation and absorption of ammonia in the intestine.
  • lactitol preferably at a dosage 20-200 g per day, for the treatment of port-systemic encephalopathy, which is a disorder of the central nervous system that occurs as a complication of advanced liver cirrhosis.
  • port-systemic encephalopathy which is a disorder of the central nervous system that occurs as a complication of advanced liver cirrhosis.
  • nitrogen-containing toxic substances produced in the intestines preferably ammonia
  • the therapeutically indicated effect of lactitol is also associated with a decrease in the formation and absorption of ammonia.
  • lactitol in non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is not known from the prior art. To date, direct studies regarding the effectiveness of lactitol in case of fatty hepatosis have not been conducted.
  • the technical result of the present invention is to expand the arsenal of tools used for the prevention and treatment of non-alcoholic fatty liver disease.
  • the specified technical result is achieved by using 4-O-alpha-O-galactopyranosyl-O-glucitol (lactitol) in a therapeutically effective amount for the prevention and treatment of non-alcoholic fatty liver disease in a mammal in need thereof.
  • the mammal is a human.
  • a therapeutically effective amount is that amount (or that dose) of the active agent in which it is used for therapeutic or prophylactic purposes.
  • a therapeutically effective amount of lactitol may be 1-20 g per day.
  • Lactitol can be administered to a mammal, preferably a human, at all stages of the development of non-alcoholic fatty liver disease.
  • lactitol in a dosage of 1-20 g per day may also be intended for the prevention and treatment of cirrhosis, which is the outcome of non-alcoholic fatty liver disease.
  • lactitol can be carried out in the form of an oral dosage form.
  • an oral dosage form may be a powder that (in addition to the active agent, lactitol) does not contain additional auxiliary substances and / or active substances. Powder can be placed in a sachet.
  • the oral dosage form in addition to lactitol may further comprise pharmaceutically acceptable excipients and may be selected from a powder, tablets (including modified release tablets), capsules, granules, syrup, drink, gel, plate, soft gelatin candy and the like.
  • pharmaceutically acceptable excipients various additives can be used that are used in the manufacture of finished oral dosage forms that are compatible with both the active agent and other excipients and do not adversely affect a patient who is being given prophylaxis or therapy.
  • lactitol as a tool for the treatment and prevention of non-alcoholic fatty liver disease, including the prevention and treatment of cirrhosis, which is the outcome of NAFLD, the following tests were carried out.
  • mice were taken that had a defect in the leptin gene, a protein that is hyperphage in obesity. In these mice, obesity of the liver is formed quite quickly.
  • mice with a defective gene and obesity about 8 weeks old were randomly assigned to groups of 7 animals. Ordinary white laboratory mice in the amount of 7 pieces acted as a comparison group. All animals were kept at a constant temperature of 23 ⁇ 0.5 ° C, humidity 50 ⁇ 5% and lighting corresponding to daylight hours (7: 00-19: 00 hours). Animals had free access to water and food. All procedures and experiments on mice were carried out in accordance with international rules for the treatment of animals.
  • L-ornithine-L-aspartate is used to treat steatosis and steatohepatitis (of various origins).
  • mice with a leptin gene deficiency develop chronic inflammatory liver obesity, and they represent an animal model of non-alcoholic steatohepatitis (NASH).
  • NASH non-alcoholic steatohepatitis
  • An important criterion for NASH is, in the absence of a viral infection or alcoholism, elevated levels of serum transferase indicators that are released from damaged liver cells: alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (ACT), and sorbitol dehydrogenase (SDH).
  • ALT alanine aminotransferase
  • ACT aspartate aminotransferase
  • SDH sorbitol dehydrogenase
  • Table 1 summarizes the indicators of ALT, ACT and LDH in the blood serum obtained from mice that were given Lactitol, L-ornithine-G-aspartate (LoLa), as well as the levels of these enzymes in blood serum obtained from normal mice with low weight ( control group) and in diabetic mice that were given physiological saline (diabetic group).
  • Levels of ALT, ACT, and LDH are significantly increased in obese diabetic mice with a gene defect compared to normal mice.
  • the obtained serum liver enzyme profiles correlated with liver histology. So, in obese diabetic mice with a gene defect in the diabetic group, which were given saline, there was an intracellular accumulation of fat in the liver in the form of fat droplets. Daily administration of lactitol in therapeutic and subtherapeutic doses for 4 weeks caused a noticeable decrease in fat accumulation in the liver, as well as in the group of mice that were injected
  • Example 2 In addition, in mice of all groups, the studies of Example 1 evaluated the addition of body weight. The data obtained are shown in table 2.
  • Diabetic mice increased in weight during the entire four-week study period.
  • untreated diabetic mice to which neither lactitol nor LoLa were administered
  • lactitol to diabetic mice
  • mice Male obese mice of approximately 8 weeks of age were randomly assigned to groups of 5-7 animals so that body weight (50-55 g) and serum glucose (> 300 mg / decalitre when fed) were similar between in groups. Male skinny mice acted as a control group. To adapt after arrival, mice were left alone for at least 7 days. All animals were kept at a controlled temperature (23 ⁇ 0.5 ° C), relative humidity (50 ⁇ 5%) and daylight hours (7: 00-19: 00 hours). Animals had free access to feed and water.
  • mice prone to obesity was not administered any drugs (obesity group).
  • the remaining groups of obese mice were treatment groups that received daily oral doses of lactitol or LoLa for 2 weeks.
  • 100 ⁇ l of venous blood was taken into a heparinized capillary tube from the retrobulbar sinus of mice for chemical analysis of blood serum for triglycerides and free fatty acids.
  • Table 3 it is shown that the administration of lactitol to mice prone to obesity leads to a dose-dependent decrease in the content of triglycerides and free fatty acids.
  • lactitol has an effect on the course of fatty degeneration of the liver and has a positive therapeutic and prophylactic effect in fatty liver diseases of non-alcoholic origin.
  • Cirrhosis was simulated by intragastric administration of a 50% solution of CC1 4 (hepatotropic poison) in olive oil at a dose of 2 ml / kg for 3 weeks 2 times a week, only 6 times.
  • CC1 4 hepatotropic poison
  • animals received a 10% solution of ethyl alcohol throughout the entire period of the experiment.
  • lactitol (15 mg) was orally administered.
  • the introduction of lactitol continued even after the initiation of cirrhosis induction.
  • the control group of animals according to the same scheme in an equivalent volume instead of lactitol was introduced distilled water.
  • Liver conditions were evaluated after rat death. Biochemical studies were conducted on aspartate aminotransferase (AcAT), alanine aminotransferase (AlAT), alkaline phosphatase (ALP) in serum on the 41st day. In addition, the morphological state of the liver was evaluated on the 41st day of the experiment. The activity of serum enzymes was determined by conventional methods using a biochemical analyzer and standard kits for it. Blood for the study was obtained from the femoral artery through a catheter. On liver histological preparations stained with hematoxylin and eosin, the number of infiltrate cells was determined using an Avtandilov ocular network containing 25 test points.
  • AcAT aspartate aminotransferase
  • AlAT alanine aminotransferase
  • ALP alkaline phosphatase
  • the number of cells reaching the test points of the grid was counted.
  • the relative area of infiltration was calculated through the ratio of the grid points per cell of the infiltrate to all grid points in 20 fields of view.
  • the area of connective tissue was determined using computer graphics processing. For this, the area of structures stained with picrofuxin was measured on a standard area of a liver section (successive microphotographs of 10 fields of view taken by a micro-video camera with a program for transferring images to a computer) and the percentage of the selected standard area was calculated. The results were processed by the method of variation statistics using Student's t-test and non-parametric Wilcoxon-Mann-Whitney U-test.
  • Biochemical studies of blood serum revealed an increase in the activity of AlAT, AsAT, and alkaline phosphatase on the 40th day of the experiment after the introduction of CC1 4 in the control group (table 4). At the same time, stabilization of the enzymatic activity of blood serum was shown for the administration group of lactitol a.
  • the sieved powder of lactitol monohydrate without auxiliary substances was packed in a sachet in an amount of 10 g and placed in cardboard boxes.
  • lactitol monohydrate powder is sieved and thoroughly mixed with lactose powder in a ratio of 2: 1.
  • the resulting mixture in an amount of 500 mg is filled in hard gelatin capsules of a suitable size.
  • 1600 mg of starch, 1600 mg of crushed lactose, 400 mg of talc and 1000 mg of lactitol are mixed and pressed into a block.
  • the resulting bar is crushed into granules and sieved through sieves, collecting granules with a size of 14-16 mesh.
  • the granules obtained are tabletted into a suitable tablet form weighing 560 mg each.
  • lactitol contributes, inter alia, to the prevention of cirrhosis of the liver, which are a consequence of NAFLD.
  • test compound lactitol
  • reference drug b-ornithine-b-aspartate

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области фармацевтической промышленности, а именно к применению лактитола в терапевтически эффективном количестве, предпочтительно в дозировке 1-20 г в сутки, для лечения и профилактики неалкогольной жировой болезни печени у млекопитающего, нуждающегося в этом. Изобретение обеспечивает расширение арсенала средств, эффективных в отношении терапии и профилактики неалкогольной жировой болезни печени.

Description

ЛАКТИТОЛ И ПЕРОРАЛЬНАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА ПРИ
НЕАЛКОГОЛЬНОЙ ЖИРОВОЙ БОЛЕЗНИ ПЕЧЕНИ
Предлагаемое изобретение относится к области фармацевтической промышленности, более конкретно к средству для лечения и профилактики неалкогольной жировой болезни печени.
Жировой гепатоз или неалкогольная жировая болезнь печени - НАЖБП (стеатоз печени, жировая инфильтрация, жировое перерождение печени) — это состояние, при котором более 5% массы печени составляет жир, преимущественно триглицериды. Если содержание жира превышает 10% веса органа, то более 50% печеночных клеток содержат жир, и жировые скопления распределены по всей ткани печени.
Причиной жирового гепатоза является метаболический синдром - нарушение обмена веществ и гормональные изменения. При этом развивается сахарный диабет и повышение уровня липидов в крови с угрозой формирования сердечно-сосудистых осложнений.
Жировое перерождение клеток печени может быть вызвано:
• злоупотреблением алкоголем,
• ожирением,
некоторыми вирусными инфекциями (вирусы гепатитов В и С),
• нарушением питания,
• нарушением обмена веществ при сахарном диабете,
• увеличением печеночных ферментов (АЛТ, ACT, ГГТ),
• наследственными дефектами цикла мочевины и окисления жирных кислот,
• генетическими факторами,
• некоторыми лекарственными средствами, например, нестероидными противовоспалительными препаратами .
В основе НАЖБП лежит инсулинорезистентность (невосприимчивость клеток к инсулину) и нарушение обмена веществ, главным образом липидного и углеводного. Жировая дистрофия печени возникает из-за повышенного поступления в печень жирных кислот либо с пищей, либо при усилении липолиза (расщепления жира в жировой ткани). НАЖБП - это многофакторное заболевание при воздействии совокупности факторов риска:
• абдоминальное ожирение (объем талии у мужчин - более 94 см и у женщин - более 80 см);
• злоупотребляющие алкоголем и вредной пищей;
• страдающие атеросклерозом, в результате высокого уровня липидов в крови, повышение уровня триглицеридов в крови более 1,7 ммоль/л, повышение уровня холестерина и снижение уровня липопротеидов высокой плотности;
• повышение артериального давления более 130/85 мм.рт.ст.;
• нарушение толерантности к глюкозе, длительная гипергликемия (сахарный диабет 2 типа);
• инсулинорезистентность;
• работа с токсическими веществами;
• прием множества лекарственных препаратов;
• после операций желудочно-кишечного тракта;
• страдающие некоторыми хроническими заболеваниями наследственного характера.
НАЖБП включает в себя следующие этапы развития:
1) стеатоз печени - в гепатоците накапливается жировое включение;
2) неалкогольный стеатогепатит - количество жировых включений, приобретает большие размеры;
3) фиброз - избыточное количество жировых включений разрывает клетку печени, и образуется жировая киста, которая способствует замене ткани печени на фиброзную ткань;
4) цирроз печени, как исход НАЖБП, с повышенным риском развития гепатоцеллюлярной карциномы.
Проявляется в следующих стадиях:
• ожирение гепатоцита - клетки печени не разрушаются, функционирование органа практически не нарушается;
• некробиоз гепатоцитов - из-за накапливания жиров клетки отмирают, образуются кисты, происходит мезенхимально-клеточная реакция; • предцирротическая стадия - соединительная ткань органа заменяется на мезенхимальную ;
• цирротическая стадия
Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП) является одним из наиболее широко распространенных заболеваний печени в мире. Так, по данным эпидемиологических исследований НАЖБП страдает 10-40% населения земного шара [Буеверов А. О. Хронические заболевания печени: краткое руководство для практикующих врачей. 2 изд.— М.: Медицинское информационное агентство, 2014.— 127 с. Жировое перерождение печени и ишемическая болезнь сердца.
Гериатрические аспекты: монография / ред. Хорошинина Л.П. - М.: ООО «Концепт дизайн», 2014 - 346 с. Мехтиев С.Н. и др. Неалкогольная жировая болезнь печени в вопросах и ответах (этиология, современная концепция патогенеза, особенности клиники, принципы диагностики и лечения) / Учебное пособие. - СПб., 2011 - 53 с.; Трухан Д.И. Неалкогольная жировая болезнь печенй в практике врача «первого контакта» / Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии, 2012, Ml, с.3-9]. НАЖБП порой является первым органным поражением при метаболическом синдроме и серьезным предиктором развития и прогрессирования сахарного диабета, кардиоваскулярной патологии [Жировое перерождение печени и ишемическая болезнь сердца. Гериатрические аспекты: монография / ред. Хорошинина Л.П. - М.: ООО «Концепт дизайн», 2014 - 346 с. Азизов В. А. и др. Неалкогольная жировая болезнь печени и кардиоваскулярные осложнения: в чем взаимосвязь? / Евразийский кардиологический журнал, 2013, MJ с.63-69 Шифф Ю.Р. и др. Алкогольные, лекарственные, генетические и метаболические заболевания / пер. с англ под ред. Мухина Н.А. и др. - М: ГЭОТАР-Медиа, 2011. - 480 с.]. Жировая болезнь развивается, как правило, в возрасте 40-60 лет, при этом женщины болеют чаще. Заболевание также затрагивает и детей. При избыточном весе с индексом 30 (масса в килограммах, деленная на рост в м2) вероятность жирового гепатоза составляет 40%.
НАЖБП объединяет спектр поражений печени, включающий стеатоз печени, неалкогольный стеатогепатит (НАСГ), стеатофиброз и стеатоцирроз [. Жировое перерождение печени и ишемическая болезнь сердца. Гериатрические аспекты: монография / ред. Хорошинина Л.П.— М.: ООО «Концепт дизайн», 2014 - 346 с. ; Трухан Д.И. Неалкогольная жировая болезнь печени в практике врача «первого контакта» / Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии, 2012, NQI, с.3-9; Шифф Ю.Р. и др. Алкогольные, лекарственные, генетические и метаболические заболевания / пер. с англ под ред. Мухина Н.А. и др. - М.: ГЭОТАР- Медиа, 2011. - 480 с.; Корнеева Е.В. и др. Патофизиология метаболического синдрома / Монография. - М.: Изд. Дом «Высшее образование и Наука», 2012.— 136 с.]. Известно, что НАСГ коморбидное состояние метаболического синдрома и по сути это печеночная манифестация данной патологии [Жировое перерождение печени и ишемическая болезнь сердца. Гериатрические аспекты: монография / ред. Хорошинина Л.П. - М.: ООО «Концепт дизайн», 2014 - 346 с. Корнеева Е.В. и др. Патофизиология метаболического синдрома / Монография. - М.: Изд. Дом «Высшее образование и Наука», 2012. - 136 с. Стельмах В. В. и др. Энерготропная патогенетически ориентированная терапия сукцинатсодержащими препаратами при неалкогольной жировой болезни печени: Методические рекомендации. - СПб.: Тактик-Студио, 2014. - 40 с.]. Развитие НАСГ при метаболическом синдроме составляет 37,5% случаев [Арапкина О.М. Неалкогольная жировая болезнь печени метаболический синдром / Медицинский альманах, 2010, Nsl, с.162-163]. При ожирении НАСГ имеет место в 20-47% случаев, при сахарном диабете 2 типа - 15% случаев, при дислипидемии - в 20-80% случаев. Как известно, в случае игнорирования и отсутствия лечения НАСГ в 5-25% случаев прогрессирует до исхода в цирроз печени с развитием портальной гипертензии, печеночно-клеточной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы [Жировое перерождение печени и ишемическая болезнь сердца. Гериатрические аспекты: монография / ред. Хорошинина Л.П. - М.: ООО «Концепт дизайн», 2014— 346 с. Шифф Ю.Р. и др. Алкогольные, лекарственные, генетические и метаболические заболевания / пер. с англ под ред. Мухина Н.А. и др.— М. : ГЭОТ АР-Медиа, 2011. - 480 с. Шапошников А. В. Гепатоонкопревенция. Концепция и принципы реализации / Пособие для врачей. - М.: Форте принт, 2013.—80 сД
НАСГ активно участвует в манифестации и усугублении атерогенной дислипидемии [Жировое перерождение печени и ишемическая болезнь сердца. Гериатрические аспекты: монография /ред. Хорошинина Л.П. - М.: ООО «Концепт дизайн», 2014 - 346 с. Шифф Ю.Р. и др. Алкогольные, лекарственные, генетические и метаболические заболевания / пер. с англ под ред. Мухина Н.А. и др.— М. : ГЭОТАР- Медиа, 2011. — 480 с.;
Драпкина О.М. и др. Атерогенная дислипидемия и печень / Медицинский алфавит, 2012, Т.4, N°24, с.30-35], что повышает вероятность развития ишемической болезни сердца (ИБС) и соответствующих этой патологии осложнений - острый инфаркт миокарда (ОИМ) и острое нарушение мозгового кровообращения (ОНМК) [Жировое перерождение печени и ишемическая болезнь сердца. Гериатрические аспекты: монография / ред. Хорошинина Л.П. - М.: ООО «Концепт дизайн», 2014 - 346 с. Азизов В.А. и др. Неалкогольная жировая болезнь печени и кардиоваскулярные осложнения: в чем взаимосвязь? / Евразийский кардиологический журнал, 2013, Nel, с.63-69]. НАСГ также имеет большое значение в прогрессии нарушений углеводного обмена [Жировое перерождение печени и ишемическая болезнь сердца. Гериатрические аспекты: монография /ред. Хорошинина Л.П.— М.: ООО «Концепт дизайн», 2014 - 346 с.; Шифф Ю.Р. и др. Алкогольные, лекарственные, генетические и метаболические заболевания / пер. с англ под ред. Мухина Н.А. и др. - М. : ГЭОТАР- Медиа, 2011. - 480 с.]. Хроническая гипергликемия аналогично провоцирует высокий риск кардиоваскулярных патологий.
С биологической точки зрения НАСГ объясняется так называемой гипотезой «параллельных множественных ударов» (multiple parallel hits), согласно которой патогенез НАЖБП есть модель взаимодействия таких факторов как инсулинорезистентность, активация процессов перекисного окисления липидов, персистирующая продукция провоспалительных цитокинов, таких как ФНОа, ИЛ-6, ИЛ-8 и др. и продукция так называемых адипоцитокинов жировой тканью: лептин, резистин, адипонектин
[Буеверов А. О. Хронические заболевания печени: краткое руководство для практикующих врачей. 2 изд.—М.: Медицинское информационное агентство, 2014. - 137 с.].
Ключевыми источниками развития неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП) являются инсулинорезистентность и оксидативный стресс. Поскольку в организме возникает ситуация резистентности к инсулину, а, следовательно, и невозможность использовать глюкозу как источник энергии, то это компенсируется активацией липолиза и извлечением из периферических тканей жирных кислот. Большое количество свободных жирных кислот (СЖК) поступает в печень, что приводит к жировой нагрузке печеночной паренхимы и формированию стеатоза.
НАЖБП, как правило, прогрессирует постепенно и опасна возможностью перерастания в цирроз. Предполагается, что жировая болезнь печени в ближайшие 20-30 лет станет наиболее частой причиной цирроза печени, требующей трансплантации [« Трансплантация печени» Национальные клинические рекомендации, 2013, 42 с.].
Гепатоциты представляют собой главные функциональные клетки печени, и каждый отдельный гепатоцит составляет 15-30 микрон в диаметре. В печени человека находится примерно 250 миллиардов гепатоцитов. Критическое повреждение гепатоцита заканчивается некрозом клетки. В случае некроза гепатоциты способны регенерировать за счет деления неповрежденных гепатоцитов. Тем не менее, чередование некроза и регенерации запускает процесс фиброза печени, что ведет к циррозу печени, портальной гипертензии, печеночной энцефалопатии, кровотечению и другим осложнениям.
Эти заболевания развиваются после стадии фиброза печени. Фиброз печени— это разрастание соединительной ткани, которое возникает из-за чрезмерного накопления белков внеклеточного матрикса, включая коллаген. Известно, что клетки печени состоят из гепатоцитов, синусоидальных эндотелиальных клеток, клеток Купфера и звездчатых клеток печени. Звездчатые клетки печени играют наиболее важную роль в фиброзе печени [ Francis J.E. et al. Fibrogenesis I. New insights into hepatic stellate cell activation: the simple becomes complex / American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology, 2000, V.279, N. l, pp.G7-Gl 1].
Звездчатые клетки печени это 15% всех клеток печени, которые в норме осуществляют функцию запасания ретиноида, являющегося предшественником витамина А. В случае повреждения или гибели гепатоцитов клетки Купфера начинают канибализировать поврежденные гепатоциты и секретировать цитокины (TGF-бета, PDGF, FGF, HGF, PAF и ЕТ-1) для пролиферации звездчатых клеток печени. Звездчатые клетки печени дифференцируются в миофибробласты. Миофибробласты синтезируют коллаген, который накапливается в межклеточном матриксе, что и приводит к фиброзу печени. Следовательно, активация звездчатых клеток печени играет главенствующую роль в прогрессировании фиброза печени. Активация звездчатых клеток печени идет в три стадии. Предвоспалительная стадия; воспалительная стадия; поствоспалительная стадия.
В предвоспалительной стадии повреждение гепатоцитов провоцирует синтез гормона, стимулирующего пролиферацию звездчатых клеток печени, или пролиферация звездчатых клеток печени усиливается посредством уменьшения активности аргиназы, ингибитора клеточной пролиферации. Образование ацетальдегида или пероксида липидов стимулирует экспрессию генов матрикса.
На воспалительной стадии под воздействием цитокинов [TGF-бета, PDGF, FGF, HGF, PAF и ЕТ-1), которые секретируются возбужденными клетками Купфера и тромбоцитами, звездчатые клетки печени пролиферируют и далее дифференцируются в миофибробласты, способные превращаться в фиброциты [Marie-Reine Losser et al. Mechanisms of Liver Damage / Seminars in Liver Disease, 1996, VI 6, N.4, pp.357-367; Anke M.B.C. Tiggelman et al. Transforming growth factory-induced collagen synthesis by human liver myofibroblasts is inhibited by 012-macroglobulin / Journal of Hepatology, 1997, V26, N.6, pp.1220-1228].
На поствоспалительном этапе цитокины и факторы роста секретируются уже дифференцированными миофибробластами для активации недифференцированных звездчатых клеток печени и для секреции внеклеточных матриксов. Миофибробласты, активированные и дифференцированные под воздействием звездчатых клеток печени, образуют коллаген, затем скапливающийся в межклеточном матриксе. Мономер коллагена очень нестабилен и легко распадается при температуре тела, и распавшиеся мономеры полимеризуются, вызывая фиброз печени
[Brenner D.A. et al. Type I collagen gene regulation and the molecular pathogenesis of cirrhosis / American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology, 1993, V.264, N.4, pp.G589-G595].
Цирроз печени, как исход фиброза печени, развивается по причине полимеризации накапливающегося коллагена. Образующийся коллаген переходит в нерастворимые волокна. Цирроз печени также провоцируется и/или поддерживается перманентным воспалением в печени, в случае, когда происходит деструкция гепатоцитов, регенерация замещением соединительной тканью, при потреблении алкоголя, гепатите, токсическом воздействии и т.д. Цирроз печени является серьезной патологией и приводит к смертельным осложнениям, таким как портальная гипертензия, пищеводное и желудочное кровотечение, гепатома, печеночная энцефалопатия, кома и т.д. [Gines Р. et al. Management of cirrhosis and ascites / The New England Journal of Medicine, 2004, V.350, N.16, pp.1646-1654].
В связи с вышесказанным профилактика и лечение неалкогольной жировой болезни печени, в том числе на всех стадиях ее развития, является актуальным и социально значимым фактором.
Задача предлагаемого изобретения состояла в поиске нового средства, которое было бы эффективным в отношении профилактики и терапии неалкогольной жировой болезни печени.
В качестве такого средства в настоящем изобретении предлагается использовать лактитол.
Лактитол (систематическое наименование: 4-0-альфа-0-галактопиранозил-0- глюцитол) - сахарный спирт, синтезируемый из молочного сахара (лактозы), относится к дисахаридам, имеет длительный опыт применения и обладает уникальными характеристиками.
В странах ЕС, США, Японии лактитол используется в качестве подсластителя в пищевой промышленности, при этом он обладает низкой энергетической ценностью - 2 ккал/г. Поэтому его считают идеальным подсластителем для продуктов функционального питания нового поколения. Главным преимуществом лактитола по сравнению с другими пребиотиками является также его устойчивость к воздействию высоких температур и низких значений pH. Эти свойства позволяют использовать его для пищевых продуктов, подвергающихся воздействию высокотемпературной обработки, в частности, в хлебопечении и кондитерской промышленности [Артюхова С. И. и др. Использование лактитола в биотехнологии функциональных продуктов питания / Современные наукоемкие технологии, 2013, NQ3, С.87-88 ].
По фармакологическому указателю лактитол относится к группе «Слабительные средства», по ATX - к группе «Осмотические слабительные» и имеет код A06AD12. Отличием лактитола от других осмотических слабительных средств (за исключением препаратов на основе лактулозы) является то, что осмотическими свойствами обладает не само действующее вещество, а продукты его метаболизма в толстой кишке. В кишечнике человека отсутствуют ферментные системы, способные расщеплять Лактитол, поэтому он не всасывается в тонкой кишке и попадает в практически неизмененном виде в толстую кишку. Уже в восходящей ободочной кишке лактитол активно ассимилируется сахаролитической микрофлорой. Образующиеся в процессе микробного метаболизма короткоцепочные карбоновые кислоты алифатического ряда (КЦЖК) с низкой молекулярной массой (молочная, уксусная, масляная, пропионовая) приводят: 1) к снижению внутрикишечного pH, что способствует активизации пропул ьсивной перистальтики; 2) к увеличению объема и разжижению кишечного содержимого за счет повышения осмотического давления и задержки жидкости, что облегчает его продвижение по кишечнику.
Лактитол помимо своего дозозависимого слабительного эффекта обладает пребиотическим эффектом (пребиотики - это компоненты пищи, которые не перевариваются и не усваиваются в верхних отделах желудочно-кишечного тракта, но ферментируются микрофлорой толстого кишечника человека и стимулируют её рост и жизнедеятельность). Его пребиотический эффект связан с тем, что, попадая в толстую кишку без изменений, он используется пробиотической микрофлорой кишечника как источник энергии, не расщепляется бактериями группы кишечной палочки и подавляет рост протеолитических бактерий за счет ингибирования их адгезии на клеточных стенках эпителия. Лактитол усиливает синтез белка бактериями, тормозит образование токсинов. По типу метаболизма лактитол похож на пищевые волокна, он не гидролизуется и не всасывается в желудке и тонком кишечнике, а в толстом кишечнике ферментируется сахаролитической микрофлорой, преобразовываясь, как уже известно, в низшие жирные кислоты, углекислый газ, водород и биомассу. Продуктами метаболизма лактитола являются КЦЖК, в первую очередь уксусная кислота и масляная кислота в соотношении 2: 1. Принципиальным отличием лактитола от других дисахаридов является разный профиль синтезируемых микрофлорой КЦЖК. Так, по сравнению с лактулозой при метаболизме лактитола в 10 раз больше образуется масляной кислоты. В дальнейшем органические кислоты усваиваются организмом и обеспечивают энергетическую ценность, равную 2 ккал/г. Суммарная энергетическая ценность лактитола равна 2, 4-2, 6 ккал/г (в отличие от углеводов - 4 ккал/г). Молекулы уксусной кислоты проходят через стенки кишечника и попадают в печень, откуда распространяются в качестве энергетического субстрата к мышечным тканям и внутренним органам (сердце, почки, головной мозг и др.). КЦЖК являются главным энергетическим донором и модулятором метаболизма колоноцитов.
Поскольку лактитол представляет собой источник питания для бактерий толстой кишки, расщепляющих сахара {Lactobacillus spp., Lactobacillus bifidus, Lactobacillus acidophilus, Bifidobacteria), то при его применении избирательно увеличивается биомасса сахаролитической микрофлоры и угнетается рост протеолитических бактерий Enterobacteria и Enterococci, численность которых обычно приумножается при запорах. При сравнительном изучении влияния лактитола и лактулозы на пробиотические и условно патогенные и патогенные бактерии было установлено, что действие лактитола носит более избирательный характер. В частности, он, в отличие от лактулозы, не ферментируется кишечной палочкой ( Е . coli) и расщепляется значительно меньшим количеством штаммов стафилококка {St. aureus) и клостридий (С/ perfringens). Рандомизированные клинические исследования по сравнительному анализу эффективности и безопасности лактитола и лактулозы в лечении запоров [Amit Maydeo. Lactitol or lactulose in the treatment of chronic constipation: Result of a systematic / Journal of the Indian Medical Association, 2010, V.108, N il, pp.789-792 ] показали, что при практически одинаковом послабляющем действии лактитол переносится пациентами лучше. Лактитол показал меньшее число побочных эффектов по сравнению с лактулозой (31,20±0,80% и 62,10±1,10% соответственно, р=0,0019). Кроме того, в педиатрии эффективные используемые дозы лактитола практически в 2 раза меньше эффективных доз лактулозы (250-400 мг/кг/день и 500-750 мг/кг/день соответственно).
В уровне техники [международная заявка на патент WO 0239832 А1, дата публ.: 23.05.2002 ] предложено применение лактитола, предпочтительно при его суточной дозе 5-15 г, в качестве пищевого продукта (или пищевой добавки) для улучшения микрофлоры кишечника, а также для профилактики кишечных инфекций, рака толстой кишки, диареи или повышения иммунитета.
Лактитол также имеет одобренное применение при печеночной энцефалопатии и гипераммониемии в качестве агента, способствующего уменьшению образования и всасывания аммиака в кишечнике.
Так, в документе [патент GB 2113998 А, дата публ.: 17.08.1983 ] предлагается использовать лактитол, предпочтительно при дозировке 20-200 г в сутки, для лечения порто-системной энцефалопатии, которая является расстройством центральной нервной системы, возникающим как осложнение расширенного цирроза печени. У пациентов, страдающих от этого заболевания, вырабатываемые в кишечники азотсодержащие токсические вещества, предпочтительно аммиак, не обезвреживаются печенью, попадая в циркуляцию крови и в мозг, повреждая нервные клетки. В данном документе указанный терапевтически эффект лактитола также связан с уменьшением образования и всасывания аммиака.
Однако из уровня техники неизвестно применение лактитола при неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП). До настоящего времени прямых исследований в отношении эффективности лактитола именно при жировом гепатозе не проводилось.
Технический результат настоящего изобретения заключается в расширении арсенала средств, используемых для профилактики и лечения неалкогольной жировой болезни печени.
Указанный технический результат достигается применением 4-О-альфа-О- галактопиранозил-О-глюцитола (лактитола) в терапевтически эффективном количестве для профилактики и лечения неалкогольной жировой болезни печени у млекопитающего, нуждающегося в этом.
В предпочтительном варианте млекопитающим является человек.
Терапевтически эффективным количеством (или терапевтической дозой) является то количество (или та доза) активного агента, в котором его используют с лечебными или профилактическими целями. Например, терапевтически эффективное количество лактитола может составлять 1-20 г в сутки.
Лактитол может быть введен млекопитающему, предпочтительно человеку, на всех стадиях развития неалкогольной жировой болезни печени.
Кроме того, в одном из вариантов настоящего изобретения лактитол в дозировке 1-20 г в сутки может быть также предназначен для профилактики и лечения цирроза печени, который является исходом неалкогольной жировой болезни печени.
В одном из вариантов применение лактитола может быть осуществлено в виде пероральной лекарственной формы. Такой пероральной лекарственной формой может быть порошок, который (помимо активного агента - лактитола) не содержит дополнительных вспомогательных веществ и/или активных веществ. Порошок может быть помещен в саше. Либо пероральная лекарственная форма (помимо лактитола) может дополнительно содержать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества и быть выбрана из порошка, таблетки (включая таблетки с модифицированным высвобождением), капсулы, гранул, сиропа, напитка, геля, пластинки, мягкой желатиновой конфеты и тому подобное. В качестве фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ могут быть использованы различные добавки, используемые при производстве готовых лекарственных пероральных форм, совместимые как с активным агентом, так и с другими вспомогательными вещества и не оказывающие неблагоприятное воздействие на пациента, которому проводят профилактику или терапию.
Для подтверждения возможности применения лактитола в качестве средства для лечения и профилактики неалкогольной жировой болезни печени, в том числе для профилактики и лечения цирроза печени, являющегося исходом НАЖБП, были проведены следующие испытания.
Пример 1.
Для проведения исследования были взяты мыши, имеющие дефект гена лептина - белка, который является гиперфаговым при ожирении. У таких мышей достаточно быстро формируется ожирение печени.
Мыши самцы с дефектом гена и с ожирением возрастом около 8 недель были случайным образом распределены на группы по 7 животных. Обычные белые лабораторные мыши в количестве 7 штук выступали в качестве группы сравнения. Всех животных содержали при постоянной температуре 23±0,5°С, влажности 50±5% и освещении, соответствующем световому дню (7:00-19:00 часов). Животные имели свободный доступ к воде и питанию. Все процедуры и опыты на мышах проводились в соответствии с международными правилами обращения с животными.
Мышей распределяли на группы исследования и ежедневно вводили им (для соответствующей группы) перорально дозы лактитола (7,5; 15,0 или
30,0 мг/кг), и аналогичные дозы Ь-орнитина-Ь-аспартата. Известно [Журавлева Л. В. и dp. L-opHumuu-L-acnapmam в лечении неалкогольной жировой болезни печени у больных ожирением с признаками метаболического синдрома / Практикуючий лгкар, 2015, , с.25-31], что
Ь-орнитина-Ь-аспартат используется для лечения стеатоза и стеатогепатита (различного генеза).
У мышей с дефектом гена лептина развивается хроническое воспалительное ожирение печени, и они представляют собой животную модель неалкогольного стеатогепатита (НАСГ). При НАСГ происходит увеличение жировых включений и повышается вероятность воспалительных повреждений. Важным критерием НАСГ являются, в отсутствие вирусной инфекции или алкоголизма, повышенные уровни в сыворотке крови показателей трансфераз, которые высвобождаются из поврежденных клеток печени: аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (ACT) и сорбитдегидрогеназы (СДГ). Содержание данных ферментов повышено у мышей с дефектом гена как следствие ожирения печени и сопутствующего вторичного воспаления.
В таблицу 1 сведены показатели АЛТ, ACT и СДГ в сыворотке крови, полученной у мышей, которым давали Лактитол, L-орнитина-Г-аспартат (LoLa), а также уровни указанных ферментов в сыворотке крови, полученной у нормальных мышей с низким весом (контрольная группа) и у диабетических мышей, которым давали физиологический раствор (диабетическая группа). Уровни АЛТ, ACT и СДГ существенно повышены у страдающих ожирением диабетических мышей с дефектом гена по сравнению с нормальными мышами.
Полученные данные, которые сведены в таблицу 1 , свидетельствуют о том, что при введении Ь-орнитина-Ь-аспартата в дозе от 7,5 до 30,0 мг/кг/день происходило снижение показателей АЛТ, ACT и СДГ. В то же время обработка лактитолом в дозе 7,5- 30,0 мг/кг/день также приводила к дозозависимому снижению указанных ферментов печени в сыворотке крови.
Полученные профили ферментов печени в сыворотке крови коррелировали с гистологией печени. Так, у страдавших ожирением диабетических мышей с дефектом гена в диабетической группе, которым давали физиологический раствор, отмечалось внутриклеточное накопление жира в печени в виде жировых капелек. Ежедневное введение лактитола в терапевтических и субтерапевтических дозах в течение 4 недель вызывало заметное снижение накопления жира в печени, также как и в группе мышей, которым вводили
L-орнитина- L-аспартат (LoLa).
Пример 2.
Кроме того, у мышей всех групп исследования примера 1 оценивали прибавление массы тела. Полученные данные показаны в таблице 2.
Мыши диабетической группы увеличились в весе во время всего четырехнедельного периода исследования. Кроме того, диабетические мыши без лечения (которым не вводили ни лактитол, ни LoLa) прибавляли в весе относительно мышей, которых лечили либо препаратом исследования (лактитолом), либо препаратом сравнения (LoLa). Полученные данные показывают, что введение лактитола диабетическим мышам индуцирует дозозависимое ослабление набора веса.
Пример 3.
Самцов мышей, подверженных ожирению, возрастом примерно 8 недель случайным образом распределяли на группы по 5-7 животных, так чтобы масса тела (50-55 г) и уровень глюкозы в сыворотке крови (> 300 мг/декалитр в накормленном состоянии) были схожими между группами. Самцы тощих мышей выступали в качестве контрольной группы. Для адаптации после прибытия мышей оставляли в покое минимум на 7 дней. Все животные содержались при контролируемой температуре (23±0,5°С), относительной влажности (50±5%) и световом периоде суток (7:00-19:00 часов). Животные имели свободный доступ к корму и воде.
Одной из групп мышей, подверженных ожирению, не вводили никакие препараты (группа ожирения). Остальные группы мышей, подверженных ожирению, были группами обработки, которые получали ежедневно перорально дозы лактитола или LoLa в течение 2 недель. В конце периода обработки у мышей всех групп исследования отбирали по 100 мкл венозной крови в гепаринизированную капиллярную пробирку из ретробульбарной пазухи мышей для химического анализа сыворотки крови на содержание триглицеридов и свободных жирных кислот. На основании полученных результатов, сведенных в таблицу 3, показано, что введение лактитола мышам, подверженных ожирению, приводит к дозозависимому снижению содержания триглицеридов и свободных жирных кислот.
Таким образом, проведенные испытания и исследования достоверно свидетельствуют о том, что лактитол оказывает влияние на течение жирового перерождения печени и обладает положительным и терапевтическим, и профилактическим эффектом при жировых заболеваниях печени неалкогольного генеза.
Пример 4.
В рамках настоящего изобретения также проведены испытания, чтобы подтвердить предположение о том, что введение лактитола будет оказывать терапевтический эффект, препятствующий развитию цирроза печени.
Эксперименты были проведены на беспородных белых лабораторных крысах. Цирроз моделировали внутрижелудочным введением 50%-го раствора СС14 (гепатотропный яд) на оливковом масле при дозе 2 мл/кг в течение 3-х недель 2 раза в неделю, всего 6 раз. Для усиления патологического воздействия на печень животные в течение всего периода эксперимента получали 10%-ый раствор этилового спирта.
Группам животных за 4 недели до моделирования патологии печени каждый день перорально вводили лактитол (15 мг). Введение лактитола продолжили и после начала индукции цирроза печени. Контрольной группе животных по той же схеме в эквивалентном объеме вместо лактитола вводили дистиллированную воду.
Состояния печени оценивали после гибели крыс. Проводились биохимические исследования на аспартатаминотрансферазу (АсАТ), аланинаминотрансферазу (АлАТ), щелочную фосфатазу (ЩФ) в сыворотке крови на 41-е сутки. Помимо этого оценивали и морфологическое состояние печени на 41-е сутки опыта. Активность ферментов сыворотки крови определяли общепринятыми методами, используя биохимический анализатор и стандартные наборы к нему. Кровь для исследования получали из бедренной артерии через катетер. На гистологических препаратах печени, окрашенных гематоксилином и эозином, определяли количество клеток инфильтрата с помощью окулярной сетки Автандилова, содержащей 25 тест-точек. В 20 полях зрения подсчитывали количество клеток, попадающих на тест-точки сетки. Относительную площадь инфильтрации высчитывали через отношение точек сетки, приходящихся на клетки инфильтрата, ко всем точкам сетки в 20 полях зрения. Площадь соединительной ткани определяли с помощью средств компьютерной обработки графических данных. Для этого на стандартной площади среза печени (последовательные микрофотографии 10 полей зрения, выполненные микровидеокамерой с программой передачи изображения на компьютер) измеряли площадь структур, окрашенных пикрофуксином, и вычисляли процентное отношение к выбранной стандартной площади. Обработку результатов проводили методом вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента и непараметрического U-критерия Вилкоксона-Манна-Уитни.
Проведенные эксперименты показали значительную гибель крыс в контрольной группе - 48,9%, в то время как в группе крыс, которым вводили лактитол на фоне моделирования цирроза печени, гибель имела место в весьма незначительном количестве - 4,2%.
Биохимические исследования сыворотки крови выявили повышение активности АлАТ, АсАТ и ЩФ на 40-е сутки опыта после начала введения СС14 в контрольной группе (таблица 4). В то же время для группы введения лактитол а была показана стабилизация ферментативной активности сыворотки крови.
При гистологическом исследовании печени в группе крыс без лечения (не получавших лактитол) имелось выраженное нарушение долькового строения органа. Происходили структурные изменения печеночных венул, артериол и желчных протоков. Грануляционная ткань замещала погибшие гепатоциты, интенсивно протекало новообразование сосудов и печеночных протоков, формировались фиброзные тяжи и микроузлы, так называемые псевдодоли. Последние представляли собой группы гепатоцитов, окруженных участками фиброза. В оставшихся гепатоцитах фиксировалась масштабная крупнокапельная жировая дистрофия. Введение лактитола препятствовало наступлению морфологических признаков цирроза. Сохранялось дольковое строение печени. Стоит отметить, что признаки мелкокапельной жировой дистрофии и портальной инфильтрации фиксировались вплоть до конца периода наблюдения.
Демонстрировалось значимое уменьшение содержания клеток инфильтрата и площади соединительной ткани в группе крыс, получавших лактитол (таблица 5). Пример 5.
Получение пероральной лекарственной формы лактитола в виде порошка, упакованного в саше.
Просеянный порошок лактитола моногидрата без вспомогательных веществ упаковывали в саше в количестве 10 г и помещали в картонные пачки.
Пример 6.
Получение пероральной лекарственной формы лактитола в виде капсул.
Порошок лактитола моногидрата просеивают и тщательно смешивают с порошком лактозы в соотношении 2 : 1. Полученной смесью в количестве 500 мг заполняют твердые желатиновые капсулы подходящего размера.
Пример 7.
Получение пероральной лекарственной формы лактитола в виде таблеток.
Смешивают 1600 мг крахмала, 1600 мг измельченной лактозы, 400 мг талька и 1000 мг лактитола и спрессовывают в брусок. Полученный брусок измельчают в гранулы и просеивают через сита, собирая гранулы размером 14-16 меш. Полученные гранулы таблетируют в подходящую форму таблетки весом 560 мг каждая.
Таким образом, в рамках настоящей заявки достоверно подтверждено, что введение лактитола способствует, в том числе, предотвращению циррозных изменений печени, которые являются следствием НАЖБП.
Таблица 1
Влияние лактитола и Ь-орнитина-Ь-аспартата на сывороточные показатели повреждения печени
Figure imgf000019_0001
Таблица 2
Влияние исследуемого соединения (лактитола) и препарата сравнения (Ъ-орнитина-Ь-аспартата) на массу тела у диабетических мышей
Figure imgf000020_0001
Таблица 3
Влияние введения лактитола и Ь-орнитина-Ь-аспартата на содержание в сыворотке крови триглицеридов и свободных жирных кислот
Figure imgf000021_0001
Таблица 4
Влияние лактитола на биохимические показатели крыс-самцов
с циррозом печени на 41-е сутки эксперимента
Figure imgf000022_0001
* отмечена достоверность различия показателя от его фонового значения при р<0,05.
** отмечена достоверность различия показателя от его контрольного значения при р<0,05.
Таблица 5
Влияние лактитола на морфологические показатели печени крыс-самцов с циррозом печени на 41-е сутки эксперимента
Figure imgf000023_0001
* отмечена достоверность различия показателя от его фонового значения при р<0,05.
** отмечена достоверность различия показателя от его контрольного значения при р<0,05.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Применение 4-0-альфа-0-галактопиранозил-0-глюцитола (лактитола) в терапевтически эффективном количестве для профилактики и лечения неалкогольной жировой болезни печени у млекопитающего, нуждающегося в этом.
2. Применение по п.1, характеризующееся тем, что млекопитающим является человек.
3. Применение по п.1 или п.2, характеризующееся тем, что терапевтически эффективное количество лактитола составляет 1-20 г в сутки.
4. Применение по п.1 или п.2, характеризующееся тем, что лактитол предназначен для введения млекопитающему, нуждающемуся в этом, на всех стадиях развития неалкогольной жировой болезни печени в дозировке 1-20 г в сутки.
5. Применение по п.1 или п.2, характеризующееся тем, что лактитол в дозировке 1-20 г в сутки предназначен для профилактики и лечения цирроза печени, являющегося исходом неалкогольной жировой болезни печени.
6. Применение по п.1 или п.2, характеризующееся тем, что лактитол применяют в дозировке 1-20 г в сутки в виде пероральной лекарственной формы.
7. Применение по п.6, характеризующееся тем, что пероральная лекарственная форма не содержит дополнительных активных веществ.
8. Применение по п.6, характеризующееся тем, что пероральная лекарственная форма представляет собой порошок, который не содержит дополнительных вспомогательных веществ.
9. Применение по п.6, характеризующееся тем, что пероральная лекарственная форма может быть выбрана из порошка, таблеток, капсул, гранул, сиропа, напитка, геля, пластинок, мягких желатиновых конфет и дополнительно содержит фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.
10. Пероральная лекарственная форма для профилактики и лечения неалкогольной жировой болезни печени у млекопитающего, нуждающегося в этом, содержащая 4-0-альфа-0-галактопиранозил-0-глюцитол (лактитол) в терапевтически эффективном количестве, и необязательно фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.
11. Пероральная лекарственная форма по п.10, характеризующаяся тем, что не содержит дополнительных вспомогательных веществ.
12. Пероральная лекарственная форма по п.10, характеризующаяся тем, что не содержит дополнительных активных веществ.
13. Пероральная лекарственная форма по п.10, характеризующаяся тем, что пероральная лекарственная форма может быть выбрана из порошка, таблеток, капсул, гранул, сиропа, напитка, геля, пластинок, мягких желатиновых конфет и дополнительно содержит фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.
PCT/RU2019/000157 2018-04-03 2019-03-13 Лактитол и пероральная лекарственная форма при неалкогольной жировой болезни печени WO2019194703A1 (ru)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA202092349A EA202092349A1 (ru) 2018-04-03 2019-03-13 Лактитол и пероральная лекарственная форма при неалкогольной жировой болезни печени
CN201980023588.3A CN111936148B (zh) 2018-04-03 2019-03-13 用于非酒精性脂肪肝病的乳糖醇及口服药物剂型
KR1020207031617A KR102569081B1 (ko) 2018-04-03 2019-03-13 락티톨 및 비알코올성 지방간 질병을 위한 경구용 약제학적 형태

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018111985 2018-04-03
RU2018111985A RU2692243C1 (ru) 2018-04-03 2018-04-03 Применение лактитола и пероральная лекарственная форма для лечения и профилактики неалкогольной жировой болезни печени

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2019194703A1 true WO2019194703A1 (ru) 2019-10-10

Family

ID=67038280

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2019/000157 WO2019194703A1 (ru) 2018-04-03 2019-03-13 Лактитол и пероральная лекарственная форма при неалкогольной жировой болезни печени

Country Status (5)

Country Link
KR (1) KR102569081B1 (ru)
CN (1) CN111936148B (ru)
EA (1) EA202092349A1 (ru)
RU (1) RU2692243C1 (ru)
WO (1) WO2019194703A1 (ru)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2113998A (en) * 1982-02-05 1983-08-17 Cv Chemie Combinatie Amsterdam Lactitol for the treatment of liver disease

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002039832A1 (en) * 2000-11-17 2002-05-23 Purac Biochem B.V. Use of lactitol for improving intestinal microflora

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2113998A (en) * 1982-02-05 1983-08-17 Cv Chemie Combinatie Amsterdam Lactitol for the treatment of liver disease

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Lekarstvenny preparat "Eksportal" (poroshok dlya prigotovleniya rastvora dlya priema vnutr)", LSR-003898/07, 19 November 2007 (2007-11-19), Retrieved from the Internet <URL:http://grls.rosminzdrav.ru/Grls_View_v2.aspx?routineGuid=727a6a88-bf7d-47eb-a8b4-67ea4b75da36&t=> [retrieved on 20190620] *

Also Published As

Publication number Publication date
RU2692243C1 (ru) 2019-06-24
KR102569081B1 (ko) 2023-08-23
KR20200140326A (ko) 2020-12-15
EA202092349A1 (ru) 2020-12-22
CN111936148A (zh) 2020-11-13
CN111936148B (zh) 2023-07-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Yin et al. Melatonin reprogramming of gut microbiota improves lipid dysmetabolism in high‐fat diet‐fed mice
JP2020514338A (ja) 対象におけるマイトファジーを改善するための方法
Salehi et al. Rhabdomyolysis in a patient with severe hypothyroidism
KR20130041902A (ko) 성인 폴리글루코산체병（ａｐｂｄ）의 치료를 위한 트리헵타노인 식이
JP2020510678A (ja) 対象におけるマイトファジーを改善するための方法
DK2266582T3 (en) PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR PREVENTING DYSBIOSIS IN CONNECTION WITH ENTERAL ADMINISTRATION OF ANTIBIOTICS
DK2266619T3 (en) PHARMACEUTICAL PREPARATION BASED ON A LIVING PROTECTIVE AGENT AND A PREBIOTIC AGENT, PREPARATION AND USE OF IT
WO2016000637A1 (zh) 一种降血脂组合物及其应用
WO2019109551A1 (zh) 一种含有铝碳酸镁的药物组合物及制药用途
RU2692243C1 (ru) Применение лактитола и пероральная лекарственная форма для лечения и профилактики неалкогольной жировой болезни печени
WO2022089591A1 (zh) 氨基葡萄糖在制备治疗非酒精性脂肪性药物中的应用
EA043465B1 (ru) Применение лактитола для профилактики и лечения неалкогольной жировой болезни печени
CN112457423B (zh) 一种具有改善胰岛素抵抗作用的天然提取复合多糖及应用
CN110520120A (zh) 药物活性成分及其用途，特别是用于预防和治疗人和动物中的代谢紊乱
CN111686239B (zh) 抗真菌化合物的应用
RU2462251C1 (ru) Способ лечения больных хроническими заболеваниями печени с латентной стадией и i степенью клинически выраженной стадии печеночной энцефалопатии
US20200197471A1 (en) S. spinosum extract for treating fatty liver disease
CN110420270A (zh) 一种含有山茶油和鱼油的功能性组合物及其应用
Abd El Majid et al. Effect of Calcium, Vitamin D and Chia Seeds on Rats Suffering from Osteoporosis
CN110448569A (zh) 一种具有止泻功效的组合物及其制备方法和其应用
Mitsui et al. Severe caffeine poisoning treated with intermittent hemodialysis under circulatory support
CN112641779B (zh) Gw441756在制备预防和/或治疗脂肪肝药物中的应用
TWI698244B (zh) 小分子褐藻醣膠與藻褐素之組合物用於製備改善非酒精性脂肪肝之組成物的用途
JP6792848B2 (ja) 代謝改善剤
RU2694842C1 (ru) Способ лечения неалкогольной жировой болезни печени у пациентов с метаболическим синдромом при недостаточности витамина d

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 19781063

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 20207031617

Country of ref document: KR

Kind code of ref document: A

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 19781063

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1