WO2019168263A1 - 붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법 - Google Patents

붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법 Download PDF

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    • A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine

Definitions

  • the present invention relates to a fermented eel extract, a cosmetic composition comprising the same and a method for preparing the same, and more particularly to a fermented eel extract having excellent skin regeneration, skin elasticity and moisturizing power, a cosmetic composition comprising the same and a method for producing the same. .
  • Conger eel is a saltwater fish belonging to the eel conger family, and its appearance is similar to eel, but unlike eel, it lives only in the sea. In Korea, they did not eat well because of the snake-like appearance, but began to eat under the influence of Japanese people who enjoyed conger eel during the Japanese colonial period. It is caught by low-rise trawling and catching fish rather than fishing, and 90% of the catch is caught in October-April. Skin is used to make leather products and is mainly eaten as sashimi or roasted.
  • Conger eel is rich in vitamin A, which is not only good for the eyes and skin, but also has excellent antioxidant activity, and is rich in vitamin E, vitamin B2, inosinic acid, free amino acids, calcium, iron, and phosphorus. Known.
  • conger eel has a sticky mucus, which is the same substance as mucin, well known as the mucus of snails.
  • Mucin is a mucous substance secreted from the mucous membranes of living organisms, and is present in the pituitary gland, gastric mucosa, cartilage, saliva, blood, and runny nose of animals, and is contained in a large amount of skin such as snails, eel and loach.
  • the chemical body of mucin is a type of glycoprotein, but contains various glycoproteins depending on the origin and type of mucus. Mucin is difficult to dissolve in water and neutral salt solution, and precipitates without dissolving in acid, but in alkaline, it becomes viscous liquid.
  • the role of mucin is the lubrication and protection of biological functions.In the digestive organs, it acts as a lubricant for organ protection and digestive movement.
  • mucin acts to prevent damage by pepsin and gastric acid. It is known that when mucin is added to the formula containing lacturose, which promotes the growth of bifidus bacteria, it is known that the synergy of lacturose increases mucin activity and improves stools. It also helps the absorption of amino acids and fats.
  • the mucin secreted by the large intestine acts as a lubricant in the intestinal lumen so that foreign matter attached to the lumen smoothly falls off.
  • mucin contains chondroitin, a natural compound such as collagen, elastin, and protein, which are related to the skin's structure formation, preventing moisture loss from external harsh environment, preventing dryness of the skin, and regenerating wounded skin quickly. It plays a role.
  • the present invention has been made in view of the above point, and an object of the present invention is to provide a method for preparing conger eel fermentation extract having optimum fermentation process conditions.
  • an object of the present invention is to provide a cosmetic composition with enhanced skin regeneration, skin elasticity and moisturizing power by using conger eel fermented extract prepared by the optimal manufacturing method.
  • the method of preparing a conger eel fermentation extract of the present invention by drying the conger eel mixture comprising at least one of conger eel meat and conger eel shell, to prepare a conger eel dried product, pulverizing the conger eel dried conger eel
  • the second step of preparing a pulverized product, the conger crushed product is mixed with a solvent to prepare a mixture
  • the third step of inoculating and fermenting the lactic acid bacteria or Bacillus subtilis in the mixture to prepare a fermented conger eel
  • the fermented conger eel fermentation The fourth step and the fifth step of preparing a conger eel fermentation extract by filtering the aged conger fermentation.
  • the third step is a step 3-1 of preparing a mixture by mixing the conger crushed with a solvent, inoculating and fermenting lactic acid bacteria or Bacillus subtilis in the mixture to produce a bacterial fermentation product Step 3-2, after applying heat to the fungus fermentation, step 3-3 and centrifugation to obtain a supernatant of the centrifuged bacteria fermentation, step 3-4 to prepare a conger eel fermentation Can be.
  • the drying of the first step may be performed at 48 to 72 ° C. for 57 to 87 hours.
  • the third step of fermentation may be carried out at 10 ⁇ 30 °C for 576 ⁇ 864 hours.
  • the aging of the fourth step may be performed for 57 to 87 hours at 68 ⁇ 102 °C.
  • the mixture of the third step is prepared by mixing 800 to 1200 parts by weight of solvent with respect to 100 parts by weight of conger eel powder, the mixture may be adjusted to pH 6.5 ⁇ 7.5.
  • the lactic acid bacteria or Bacillus subtilis can be inoculated at a concentration of 5 ⁇ 30 CFU / ml.
  • the lactic acid bacteria is Lactobacillus sakei, Lactobacillus brevis, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum, Lactococcus lactis and Bacillus coagulum It may include one or more of the Bacillus coagulance.
  • the Bacillus subtilis may include Bacillus subtilis.
  • the method for preparing conger eel fermentation extract of the present invention may further include a fifth step of concentrating and lyophilizing the prepared conger eel fermentation extract.
  • the conger eel fermentation extract of the present invention may be prepared by the aforementioned manufacturing method.
  • the cosmetic composition of the present invention may contain 0.001 ⁇ 80% by weight of dried conger eel fermentation extract.
  • the cosmetic composition may be used in cosmetics for skin regeneration, skin elasticity or skin moisturizing.
  • the cosmetic is a lotion, gel, water-soluble liquid, cream, essence, oil-in-water (O / W) and water-in-oil (W / O) type emulsion, ointment, oil-in-water and water-in-oil type It may be any one selected from makeup base, foundation, skin cover, lipstick, lip gloss, face powder, two-way cake, eye cream, eye shadow, cheek color and eyebrow pencil.
  • Fermented eel extract of the present invention a cosmetic composition comprising the same and a method for preparing the same are contained in the extract prepared through the fermentation process using lactic acid bacteria and / or Bacillus subtilis of conger eel in large amounts.
  • the conger fermentation extract of the present invention the cosmetic composition comprising the same and its preparation method is excellent in skin regeneration, skin elasticity and moisturizing power.
  • Conger eel fermentation extract manufacturing method of the present invention comprises a first step to a fifth step.
  • Conger eel mixture is a region prepared by roaring conger eel (Conger myriaster), it can be prepared for the conger eel meat (flesh, muscle parts) and head, bones and internal organs, shell parts, respectively.
  • the conger eel mixture of the present invention may include at least one of conger eel meat and conger eel shell, and may preferably include conger eel shell.
  • conger eel meat farlesh, muscle parts
  • head, bones and internal organs, shell parts are prepared through the swelling of the above-mentioned conger eel, one of the prepared conger eel meat and conger eel skin as a mixture of the conger eel of the present invention. It may contain more than one species, preferably may include only conger eel shell.
  • the conger eel fermentation extract manufacturing method of the present invention the conger eel mixture, conger eel head, bone and internal organs may be used, the problem of lowering the content of omega-3 and / or mucin, which is an active ingredient contained in conger eel , Conger eel mixture is preferably used including one or more of conger eel meat and conger eel shell.
  • Prepared conger eel mixture can be used to remove foreign substances through the washing process.
  • the conger eel mixture containing at least one of conger eel meat and conger eel shell may be dried to prepare a conger eel dried product.
  • the drying may be performed at 48 to 72 ° C, preferably 54 to 66 ° C, for 57 to 87 hours, preferably 64 to 80, and if the drying is performed at less than 48 ° C, the conger eel mixture may decay. If the drying is carried out in excess of 72 °C can not only reduce the drying efficiency, but also may cause a problem that the nutrients contained in the conger mixture is destroyed.
  • the dried conger eel may be ground to prepare a conger eel.
  • the conger crushed powder may have a size of 0.05 ⁇ 1cm, preferably 0.1 ⁇ 0.9cm, if the size of the conger crushed powder exceeds 1cm, the active ingredients included in the fermented extract of the conger eel produced later is significantly reduced, Skin regeneration, skin elasticity and moisturizing effects may be significantly reduced.
  • a mixture of pulverized conger eel mixture and a solvent to prepare a mixture, inoculate and ferment the lactic acid bacteria or Bacillus subtilis in the mixture can be prepared fermented conger eel.
  • the fermentation may be carried out at 10 to 30 °C, preferably 15 to 25 °C 576 to 864 hours, preferably 648 to 792 hours, more preferably 684 to 756 hours, if the fermentation temperature is 30 °C If exceeding may cause a problem that the active ingredient is destroyed, and if the fermentation time is less than 576 hours may cause a problem that does not reach the stage that can achieve the best efficacy by fermentation, if exceeding 864 hours the efficacy is deteriorated Problems may arise.
  • the solvent used in the third step may include at least one selected from water and C 1 to C 4 alcohols, and may preferably include water.
  • the mixture may be mixed with 800 to 1200 parts by weight, preferably 900 to 1100 parts by weight, more preferably 950 to 1050 parts by weight with respect to 100 parts by weight of conger eel powder, the pH of the mixture through the mixing Can be adjusted from 6.5 to 7.5. If the pH range is less than 6.5, or more than 7.5, it may cause skin irritation.
  • the conger eel fermented extract prepared by the manufacturing method of the present invention is included in the cosmetic composition as an active ingredient, the pH when combined with the ingredients included in other cosmetic compositions is also considered, pH range of 6.5 ⁇ 7.5 is most suitable Do.
  • Lactic acid bacteria or Bacillus subtilis can be inoculated at a concentration of 5 to 30 CFU / ml, preferably 7 to 20 CFU / ml, more preferably 8 to 15 CFU / ml, if the concentration of lactic acid bacteria or Bacillus subtilis If less than 5 CFU / ml, or more than 30 CFU / ml may cause a problem that the moisturizing effect is lowered.
  • Lactobacillus is one or more of Lactobacillus sakei, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum, Lactococcus latis and Bacillus coagulance It may include, and may preferably include Lactobacillus plantarum.
  • the Bacillus subtilis may include Bacillus subtilis.
  • lactic acid bacteria or Bacillus subtilis may be used lactic acid bacteria or Bacillus subtilis cultured in the culture.
  • Lactobacillus sakei (Lactobacillus sakei), Lactobacillus brevis (Lactobacillus brevis), Lactobacillus plantarum (Lactobacillus plantarum), Lactococcus latis and / or Bacillus coagulance Silver may be incubated in a culture medium adjusted to pH 4.0 ⁇ 5.0 at 25 ⁇ 42 °C, preferably 30 ⁇ 37 °C 2 to 8 days, preferably 3 to 7 days.
  • lactic acid bacteria Lactobacillus sakei, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum, Lactococcus latis and / or Bacillus coagulance If the pH of the culture medium to be cultured is less than 4.0, or exceeds 5.0 may cause a problem that the moisturizing effect is lowered. In addition, if out of the culture temperature range and incubation period of the culture fails to obtain the desired lactic acid bacteria.
  • Bacillus subtilis Bacillus subtilis is a culture medium adjusted to pH 6.5 ⁇ 7.5 45 to 65 °C, preferably incubated 18 to 78 hours, preferably 25 to 72 hours at 50 to 60 °C Can be. If the pH of the culture medium for culturing Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) is less than 6.5, or exceeds 7.5 may cause a problem that the moisturizing effect is lowered. In addition, if out of the culture temperature range and incubation period, the culture fails to obtain the desired Bacillus subtilis.
  • the third step of the method for preparing conger eel fermentation extract of the present invention may specifically include steps 3-1 to 3-4.
  • the mixture of the conger eel prepared in the second step may be mixed with a solvent to prepare a mixture.
  • the mixture may be inoculated and fermented with lactic acid bacteria or Bacillus subtilis to produce a bacterial fermentation product.
  • step 3-3 fermentation is performed by applying heat of 64 to 96 ° C., preferably 72 to 88 ° C. for 8 to 12 minutes, preferably 9 to 11 minutes, to induce the loss of function of lactic acid bacteria or Bacillus subtilis. After termination, centrifugation can be effected.
  • conger eel fermentation extract can be prepared.
  • the bacterial fermentation can be removed by using a centrifuge, the supernatant from which the precipitate is removed can be used as a conger fermentation.
  • fermented conger eel can be aged.
  • Aging may be performed by stirring conger eel fermentation, it may be carried out at 68 ⁇ 102 °C, preferably 76 ⁇ 94 °C 57 ⁇ 87 hours, preferably 64 ⁇ 80 hours. If the aging performance temperature is less than 68 °C may be a problem that aging is not carried out completely, if more than 102 °C may be a problem that the active ingredients contained in the conger fermentation products are destroyed.
  • the fermented eel fermented product may be filtered to prepare the conger eel fermentation extract.
  • Filtration of the fifth step may be performed using a filter, but is not particularly limited.
  • the filter of 0.1-0.2 micrometers can be used for a filter, this also is not restrict
  • Filtration performed conger eel fermentation extract may be further added a preservation solution to maintain the preservation power
  • 1,2-hexanediol (1,2-hexanediol) may be used as a preservation solution.
  • 1,2-hexanediol (1,2-hexanediol) is used as a preservative, 1 to 3% by weight of 1,2-hexanediol (1,2-hexanediol) is added to 100% by weight of conger eel fermentation extract. Can be used.
  • conger eel fermented extract manufacturing method of the present invention may further comprise a sixth step.
  • the prepared conger eel fermentation extract may be concentrated under reduced pressure and lyophilized.
  • the conger eel extract is concentrated under reduced pressure at 40 ⁇ 70 °C, preferably 50 ⁇ 60 °C, and rapidly frozen at -100 ⁇ -60 °C, preferably -90 ⁇ -70 °C solid state Can be stored as.
  • the solid conger eel fermentation extract may be lyophilized after use and pulverized to be powdered conger eel fermentation extract.
  • the fermented extract of powdered chickpeas prepared as described above has the advantage that it can be stored for a long time while maintaining the nutritional and functional ingredients of conger eel and easy to handle when stored.
  • the present invention includes the fermented extract of conger eel prepared by the above-mentioned manufacturing method.
  • the present invention may include a cosmetic composition comprising 0.001 to 80% by weight of the dried conger eel fermentation extract as an active ingredient.
  • the cosmetic composition of the present invention may contain, in addition to the conger fermentation extract, other ingredients that can give a synergistic effect to the main effect without impairing the main effect of the invention.
  • the cosmetic composition of the present invention can be used in cosmetics for skin regeneration, skin elasticity or skin moisturizing.
  • the cosmetics are not particularly limited in the formulation as a skin external preparation, such as cosmetics, gels, water-soluble liquids, creams, essences, oil-in-water (O / W) and water-in-oil (W / O) type emulsions, ointments, It may be any one selected from oil-in-water type and water-in-oil makeup base, foundation, skin cover, lipstick, lip gloss, face powder, two-way cake, eye cream, eye shadow, cheek color and eyebrow pencil.
  • the purchased conger eel was used to separate conger eel meat (meat, muscle part), head, bone, intestine and shell, respectively. Separated conger eel meat (meat, muscle part), head, bones, internal organs and shells were washed to remove foreign substances.
  • Conger eel shell prepared in Preparation Example 1 was dried at 60 °C for 72 hours to prepare a conger eel dried product.
  • the Lactobacillus plantarum was used incubated for 5 days at a temperature of 33.5 °C in a culture medium adjusted to pH 4.5.
  • the conger ferment was aged by stirring at 85 ° C. for 3 days.
  • Conger eel shell prepared in Preparation Example 1 was dried at 60 °C for 72 hours to prepare a conger eel dried product.
  • Bacillus subtilus was used incubated for 2 days at a temperature of 55 °C in a culture medium adjusted to pH 7.0.
  • Conger eel fermented extract was prepared in the same manner as in Example 1. However, the conger eel fermentation extract was prepared using conger eel meat prepared in Preparation Example 1 instead of the conger eel skin prepared in Preparation Example 1.
  • Conger eel fermented extract was prepared in the same manner as in Example 2. However, the conger eel fermentation extract was prepared using conger eel meat prepared in Preparation Example 1 instead of the conger eel skin prepared in Preparation Example 1.
  • Conger eel fermented extract was prepared in the same manner as in Example 1. However, fermentation time was fermented for 500 hours instead of 720 hours to prepare a fermented extract of conger eel.
  • Conger eel fermented extract was prepared in the same manner as in Example 2. However, fermentation time was fermented for 940 hours instead of 720 hours to prepare a fermented extract of conger eel.
  • Conger eel fermented extract was prepared in the same manner as in Example 1. However, the conger eel fermentation extract was prepared using the conger eel bone prepared in Preparation Example 1 instead of the conger eel shell prepared in Preparation Example 1.
  • Conger eel fermented extract was prepared in the same manner as in Example 2. However, the conger eel fermentation extract was prepared using the conger eel bone prepared in Preparation Example 1 instead of the conger eel shell prepared in Preparation Example 1.
  • Conger eel shell prepared in Preparation Example 1 was dried at 60 °C for 72 hours to prepare a conger eel dried product.
  • Elastin is a component of the matrix layer in the dermis of the skin. As the skin ages, elastin is degraded, the matrix layer in the dermis collapses, and wrinkles are formed.
  • N-succinyl- (Ala) 3 p-nitroaniline N-succinyl- (Ala) 3 p- nitroaniline (Sigma) was used to measure the elastine activity by measuring the absorbance at a wavelength of 405 nm resulting from the degradation of p-nitroaniline.
  • the control group for measuring the elastase activity was measured in the same manner by adding the third distilled water instead of the sample, and the case was obtained by adding the third distilled water instead of the enzyme solution to obtain a color correction value for each, Samples 1 to 6 And phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF, Sigma), which is a specific inhibitor of elastase, was determined as a comparative group in order to determine the extract and the elastase inhibitory effect of Comparative Examples 1 to 3, using [Equation 1] below. Elastase inhibition rate was calculated numerically.
  • PMSF phenylmethylsulfonylfluoride
  • IC 50 is the concentration of sample required to inhibit 50% elastase activity, the smaller the value, the higher the inhibition rate.
  • the extracts prepared in Examples 1 to 6 and Comparative Examples 1 to 3 are lower than the elastase specific inhibitor of PMSF 0.09 mg / ml, but have a lower activity ratio of elastase, but are currently used for skin improvement functional ingredients.
  • the extracts prepared in Examples 3 to 4 have a similar effect with retinol
  • the extracts prepared in Examples 1 to 2 was confirmed that the effect is superior to retinol.
  • the moisturizing effect was measured using a capacitance measurement method using an oil content measuring instrument (WSK-P500U, Inforward. Inc, Japan), and in the results of 1% by weight aqueous solution of extracts prepared in Examples 1 to 6 and Comparative Examples 1 to 3 and various studies. Compared with 1 wt% aqueous solution of hyaluronic acid sodium salt (Sigma), which is known to have excellent skin moisturizing effect.
  • the oyster flanks were adapted for 20 minutes in a constant temperature and humidity room (22 ° C, 40-60% relative humidity) just before the start of the test to maintain a constant moisture in the skin. Then, after measuring the initial moisture retention amount of each sample application site using a water content meter (WSK-P500U, Inforward. Inc, Japan), the sample was 2.0 mg / cm 2 to minimize the error along the oyster side of the sample It applied, changing the position of the sample to apply
  • WSK-P500U Water content meter
  • the extracts prepared in Examples 1 to 8 and Comparative Example 1 is excellent in the moisturizing effect of the extracts prepared in Examples 1 to 4 compared to 1% by weight aqueous solution of hyaluronic acid, in particular Example 1
  • the extract prepared in ⁇ 2 was confirmed to be remarkably excellent.
  • the component was stirred for about 15 minutes. When it was stirred to the extent that no foreign matter was felt, it was placed in a sterilized container.
  • the component was stirred for about 15 minutes. When it was stirred to the extent that no foreign matter was felt, it was placed in a sterilized container.
  • a mixture of 9 g of jojoba oil, 2.5 g of shea butter and 3.5 g of olive oil wax was prepared and heated to 55 ° C. 20 g of rose floral water was heated to 55 ° C. To the mixture heated to 55 ° C., the rose floral water heated to 55 ° C. was mixed and stirred for 15 minutes. After stirring, when emulsification is made, 13g of conger eel extract, vitamin E 1g, moistin 2g, collagen 2g, niacinamide 2g, hyharuronic acid 2g, pale flowers extract 0.5g, bark fruit extract 0.5g, austenitic extract 0.5g Mix and stir for 5 minutes and place in sterile containers when stirring is complete.
  • the present invention relates to a fermented eel extract, a cosmetic composition comprising the same and a method for preparing the same, and more particularly to a fermented eel extract having excellent skin regeneration, skin elasticity and moisturizing power, a cosmetic composition comprising the same and a method for producing the same. .

Abstract

본 발명은 붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로써, 보다 상세하게는 피부 재생, 피부 탄력 및 보습력이 우수한 붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Description

붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법
본 발명은 붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로써, 보다 상세하게는 피부 재생, 피부 탄력 및 보습력이 우수한 붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
붕장어는 뱀장어목 붕장어과에 속하는 바닷물고기로 생김새는 뱀장어와 비슷하나 뱀장어와 달리 바다에서만 서식한다. 우리나라에서는 뱀을 닮은 모습 때문에 잘 먹지 않다가 일제강점기 때 붕장어를 즐겨 먹는 일본인들의 영향을 받아 식용하기 시작하였다. 낚시보다는 저층트롤어업과 통발어업 등으로 어획되며, 어획량의 90%가 10월~4월에 잡힌다. 껍질은 피혁제품을 만드는데 쓰이며, 주로 회나 구이로 식용된다.
붕장어는 비타민 A가 다량함유되어 눈, 피부의 건강에 좋을뿐만 아니라, 항산화 작용이 우수하고, 비타민 E, 비타민 B2, 이노신산, 유리 아미노산, 칼슘, 철분 및 인 등이 풍부하게 함유되어 보양음식으로 널리 알려져 있다.
특히, 붕장어에는 끈적끈적한 점액질이 있는데 이 성분은 달팽이의 점액질로 잘 알려진 뮤신과 동일한 물질이다.
뮤신(mucin)은 생물체의 점막에서 분비되는 점액 물질로서 동물의 뇌하수체, 위점막, 연골, 침, 혈액, 콧물 등에 존재하며, 달팽이, 장어, 미꾸라지 등의 피부에 다량 함유되어 있다. 뮤신의 화학적 본체는 당단백질의 일종이나, 점액의 기원이나 종류에 따라 여러 가지 당단백질을 함유한다. 뮤신은 물과 중성염용액에는 녹기 어렵고, 산성에서는 녹지 않고 침전되나, 알칼리성에서는 점성질의 액이 되는 특성이 있다. 뮤신의 역할은 생체 기능의 윤활 작용 및 보호 작용으로서, 소화 기관에서는 기관의 보호 및 소화 운동의 윤활제 역할을 하고, 위점막에서 뮤신은 펩신과 위산에 의한 손상을 방지하는 역할을 해서 위산과다와 위궤양 치료에 사용되는데, 비피더스균의 증식을 활발하게 하는 락투로오스를 함유한 조제분유에 뮤신을 첨가하면 락투로오스의 상승 작용으로 뮤신의 활성이 높아지고 변을 좋게 한다고 알려져 있다. 또한 장에서는 아미노산이나 지방의 흡수를 돕는 역할을 한다. 대장에서 분비되는 뮤신은 장내에서 윤활제 기능을 하여 장 내강에 붙어 있는 이물질이 매끄럽게 잘 떨어지게 한다.
특히, 뮤신은 피부의 구조형성에 관계된 성분인 콜라겐, 엘라스틴, 단백질 등 천연 복합물질인 콘드로이친을 함유하고 있어 외부의 거친 환경으로부터 수분손실을 막아 피부의 건조를 막아주며, 상처가 난 피부를 빠르게 재생시켜 주는 역할을 한다.
이러한 뮤신의 수분보유성 및 피부의 재생능을 이용한 화장제재 및 화장품의 개발이 활발히 이루어지고 있는데, 특히, 달팽이와 마로부터의 추출물을 이용한 화장제재 및 화장품이 출시되고 있다.
하지만, 붕장어를 이용한 화장제재 및 화장품 개발은 미미한 상태이며, 특히 피부에 흡수력을 높이고 보습력 및 피부 재생력이 우수한 붕장어 추출물을 이용한 화장제재 및 화장품 개발은 더더욱 미미한 상태이다.
본 발명은 상기와 같은 점을 감안하여 안출한 것으로, 최적 발효공정 조건을 가지는 붕장어 발효 추출물 제조방법을 제공하는데 목적이 있다.
또한, 본 발명은 최적 제조방법으로 제조된 붕장어 발효 추출물을 이용하여 피부 재생, 피부 탄력 및 보습력이 강화된 화장료 조성물을 제공하는데 목적이 있다.
상술한 과제를 해결하기 위하여, 본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법은 붕장어육 및 붕장어껍질 중 1종 이상을 포함하는 붕장어 혼합물을 건조하여 붕장어 건조물을 제조하는 제1단계, 상기 붕장어 건조물을 분쇄하여 붕장어 분쇄물을 제조하는 제2단계, 상기 붕장어 분쇄물을 용매와 혼합하여 혼합물을 제조하고, 상기 혼합물에 유산균 또는 고초균을 접종 및 발효시켜 붕장어 발효물을 제조하는 제3단계, 상기 붕장어 발효물을 숙성시키는 제4단계 및 숙성된 붕장어 발효물을 여과하여 붕장어 발효 추출물을 제조하는 제5단계를 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 제3단계는 상기 붕장어 분쇄물을 용매와 혼합하여 혼합물을 제조하는 제3-1단계, 상기 혼합물에 유산균 또는 고초균을 접종 및 발효시켜 균 발효물을 제조하는 제3-2단계, 상기 균 발효물에 열을 가한 후, 원심분리하는 제3-3단계 및 원심분리된 균 발효물의 상등액을 획득하여, 붕장어 발효물을 제조하는 제3-4단계를 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 제1단계의 건조는 48 ~ 72℃에서 57 ~ 87시간 동안 수행할 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 제3단계의 발효는 10 ~ 30℃에서 576 ~ 864시간 동안 수행할 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 제4단계의 숙성은 68 ~ 102℃에서 57 ~ 87시간 동안 수행할 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 제3단계의 혼합물은 붕장어 분쇄물 100 중량부에 대하여, 용매 800 ~ 1200 중량부를 혼합하여 제조하고, 상기 혼합물은 pH 6.5 ~ 7.5로 조정될 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 유산균 또는 고초균은 5 ~ 30 CFU/ml의 농도로 접종할 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 유산균은 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토코커스 락티스(Lactococcus latis) 및 바실러스 코아귤런스 (Bacillus coagulance) 중 1종 이상을 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 고초균은 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis)을 포함할 수 있다.
한편, 본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법은 제조된 붕장어 발효 추출물을 감압농축 및 동결건조하는 제5단계를 더 포함할 수 있다.
나아가, 본 발명의 붕장어 발효 추출물은 앞서 언급한 제조방법으로 제조된 것일 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 유효성분으로서, 건조된 붕장어 발효 추출물을 0.001 ~ 80 중량% 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 화장료 조성물은 피부 재생용, 피부 탄력용 또는 피부 보습용 화장품에 사용될 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예로서, 상기 화장품은 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 및 유중수(W/O)형의 에멀젼, 연고, 수중유형 및 유중수형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이크림, 아이새도, 치크칼라 및 아이브로우펜슬 중에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
본 발명의 붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법은 붕장어에 다량으로 포함된 뮤신 성분이 붕장어의 유산균 및/또는 고초균을 이용한 발효공정을 통해 제조된 추출물에 풍부하게 함유되어 있다.
또한, 본 발명의 붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법은 피부 재생, 피부 탄력 및 보습력이 우수하다.
이하, 첨부한 도면을 참고로 하여 본 발명의 실시예에 대하여 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다. 도면에서 본 발명을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 동일 또는 유사한 구성요소에 대해서는 동일한 참조부호를 부가한다.
본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법은 제1단계 내지 제5단계를 포함한다.
우선, 준비단계로서 붕장어 혼합물을 준비한다. 붕장어 혼합물은 붕장어(Conger myriaster)를 활복하여 제조되는 부위로서, 붕장어육(살, 근육부위)과 머리, 뼈 및 내장, 껍질부위를 각각 제조할 수 있다.
본 발명의 붕장어 혼합물은 붕장어육 및 붕장어껍질 중 1종 이상을 포함할 수 있고, 바람직하게는 붕장어껍질을 포함할 수 있다. 구체적으로, 앞서 언급한 붕장어의 활복을 통해 붕장어육(살, 근육부위)과 머리, 뼈 및 내장, 껍질부위를 각각 제조되며, 제조된 부위 중 본 발명의 붕장어 혼합물로서 붕장어육 및 붕장어껍질 중 1종 이상만 포함할 수 있고, 바람직하게는 붕장어껍질만 포함할 수 있다.
만약, 본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법에 있어서, 붕장어 혼합물로서 붕장어 머리, 뼈 및 내장이 사용되게 된다면 붕장어에 포함된 유효성분인 오메가-3 및/또는 뮤신의 함량의 저하되는 문제가 발생할 수 있으니, 붕장어 혼합물은 붕장어육 및 붕장어껍질 중 1종 이상을 포함하여 사용되는 것이 좋다.
준비된 붕장어 혼합물은 세척과정을 통해 이물질을 제거하여 사용할 수 있다.
다음으로, 본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법의 제1단계로서, 붕장어육 및 붕장어껍질 중 1종 이상을 포함하는 붕장어 혼합물을 건조하여 붕장어 건조물을 제조할 수 있다.
상기 건조는 48 ~ 72℃, 바람직하게는 54 ~ 66℃에서 57 ~ 87시간, 바람직하게는 64 ~ 80 동안 수행할 수 있으며, 만약 48℃ 미만에서 건조가 수행된다면 붕장어 혼합물이 부패하는 문제점이 발생할 수 있고, 72℃를 초과하여 건조가 수행된다면 건조효율이 떨어질 뿐만 아니라, 붕장어 혼합물에 포함된 영양소가 파괴되는 문제가 발생할 수 있다.
다음으로, 본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법의 제2단계로서, 상기 붕장어 건조물을 분쇄하여 붕장어 분쇄물을 제조할 수 있다.
상기 붕장어 분쇄물은 0.05 ~ 1cm, 바람직하게는 0.1 ~ 0.9cm의 크기를 가질 수 있으며, 만일 붕장어 분쇄물의 크기가 1cm를 초과하게 된다면 추후 제조된 붕장어 발효 추출물에 포함되는 유효성분들이 현저히 감소하여, 피부 재생, 피부 탄력 및 보습력 효과가 현저히 저하될 수 있다.
다음으로, 본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법의 제3단계로서, 붕장어 분쇄물을 용매와 혼합하여 혼합물을 제조하고, 상기 혼합물에 유산균 또는 고초균을 접종 및 발효시켜 붕장어 발효물을 제조할 수 있다.
상기 발효는 10 ~ 30℃, 바람직하게는 15 ~ 25℃에서 576 ~ 864시간, 바람직하게는 648 ~ 792시간, 더욱 바람직하게는 684 ~ 756 시간 동안 수행할 수 있으며, 만일, 발효온도가 30℃를 초과하면 유효성분이 파괴되는 문제가 발생할 수 있고, 또한 발효 시간이 576시간 미만이면 발효에 의한 최고의 효능을 낼 수 있는 단계까지 도달하지 못하는 문제가 발생할 수 있고, 864시간을 초과한다면 효능이 저하되는 문제가 발생할 수 있다.
제3단계의 사용된 용매는 물 및 C1 ~ C4 알코올 중에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있고, 바람직하게는 물을 포함할 수 있다. 또한, 혼합물은 붕장어 분쇄물 100 중량부에 대하여, 용매 800 ~ 1200 중량부, 바람직하게는 900 ~ 1100 중량부, 더욱 바람직하게는 950 ~ 1050 중량부가 혼합될 수 있으며, 상기 혼합을 통해 혼합물의 pH는 6.5 ~ 7.5로 조정될 수 있다. 만약, pH의 범위가 6.5 미만이거나, 7.5를 초과하게 된다면 피부에 자극을 주는 문제가 발생할 수 있다. 구체적으로 본 발명의 제조방법으로 제조된 붕장어 발효 추출물이 유효 성분으로 화장료 조성물에 포함될 때, 다른 화장료 조성물에 포함되는 성분과의 배합하였을 때의 pH도 고려해야되기 때문에, pH 6.5 ~ 7.5 범위가 가장 적합하다.
유산균 또는 고초균은 5 ~ 30 CFU/ml의 농도, 바람직하게는 7 ~ 20 CFU/ml의 농도, 더욱 바람직하게는 8 ~ 15 CFU/ml의 농도로 접종될 수 있으며, 만약, 유산균 또는 고초균의 농도가 5 CFU/ml 미만이거나, 30 CFU/ml를 초과하면 보습효과가 저하되는 문제가 발생할 수 있다.
유산균은 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토코커스 락티스(Lactococcus latis) 및 바실러스 코아귤런스 (Bacillus coagulance) 중 1종 이상을 포함할 수 있고, 바람직하게는 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum)을 포함할 수 있다.
상기 고초균은 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis)를 포함할 수 있다.
또한, 유산균 또는 고초균은 배양액에서 배양된 유산균 또는 고초균이 사용될 수 있다.
구체적으로, 유산균인 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토코커스 락티스(Lactococcus latis) 및/또는 바실러스 코아귤런스 (Bacillus coagulance)은 pH 4.0 ~ 5.0으로 조정된 배양액에 25 ~ 42℃, 바람직하게는 30 ~ 37℃에서 2 ~ 8일, 바람직하게는 3 ~ 7일간 배양된 것일 수 있다. 만일, 유산균인 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토코커스 락티스(Lactococcus latis) 및/또는 바실러스 코아귤런스 (Bacillus coagulance)을 배양하는 배양액의 pH 가 4.0 미만이거나, 5.0를 초과하면 보습효과가 저하되는 문제가 발생할 수 있다. 또한, 배양온도 범위 및 배양기간 범위를 벗어나게 된다면 배양에 실패하여 원하는 유산균을 얻을 수 없다.
또한, 고초균인 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis)는 pH 6.5 ~ 7.5으로 조정된 배양액에 45 ~ 65℃, 바람직하게는 50 ~ 60℃에서 18 ~ 78시간, 바람직하게는 25 ~ 72시간 배양된 것일 수 있다. 만일, 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis)를 배양하는 배양액의 pH 가 6.5 미만이거나, 7.5를 초과하면 보습효과가 저하되는 문제가 발생할 수 있다. 또한, 배양온도 범위 및 배양기간 범위를 벗어나게 된다면 배양에 실패하여 원하는 고초균을 얻을 수 없다.
한편, 본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법의 제3단계는 구체적으로, 제3-1단계 내지 제3-4단계를 포함할 수 있다.
먼저, 제3-1단계로서, 제2단계에서 제조된 붕장어 분쇄물을 용매와 혼합하여 혼합물을 제조할 수 있다.
다음으로, 제3-2단계로서, 혼합물에 유산균 또는 고초균을 접종 및 발효시켜 균 발효물을 제조할 수 있다.
다음으로, 제3-3단계로서, 균 발효물에 열을 가한 후, 원심분리할 수 있다. 구체적으로, 제3-3단계는 64 ~ 96℃, 바람직하게는 72 ~ 88℃의 열을 8 ~ 12분, 바람직하게는 9 ~ 11분 동안 가하여, 유산균 또는 고초균의 기능상실을 유도하여 발효를 종료시킨 후, 원심분리할 수 있다.
마지막으로, 제3-4단계로서, 원심분리된 균 발효물의 상등액을 획득하여, 붕장어 발효 추출물을 제조할 수 있다. 구체적으로 균 발효물은 원심분리기를 이용하여 침전물이 제거될 수 있으며, 침전물이 제거된 상등액만을 획득하여 붕장어 발효물로 사용할 수 있다.
다음으로, 본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법의 제4단계로서, 붕장어 발효물을 숙성시킬 수 있다.
숙성는 붕장어 발효물의 교반에 의해 수행될 수 있으며, 68 ~ 102℃, 바람직하게는 76 ~ 94℃에서 57 ~ 87시간, 바람직하게는 64 ~ 80시간 동안 수행될 수 있다. 만약, 숙성 수행 온도가 68℃ 미만이면 숙성이 완전하게 수행되지 않는 문제가 있을 수 있고, 102℃를 초과하면 붕장어 발효물에 포함된 유효성분들이 파괴되는 문제가 있을 수 있다.
마지막으로, 본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법의 제5단계로서, 숙성된 붕장어 발효물을 여과하여 붕장어 발효 추출물을 제조할 수 있다.
제5단계의 여과는 필터를 이용하여 수행될 수 있지만 특별히 제한되지 않는다. 또한, 필터는 0.1 ~ 0.2 ㎛의 필터가 사용될 수 있지만 이 또한, 특별히 제한되지 않는다.
여과가 수행된 붕장어 발효 추출물에는 보존력을 유지할 수 있도록 하는 보존액이 더 투입될 수 있으며, 보존액으로 1,2-헥산디올(1,2-hexanediol)이 사용될 수 있다. 또한, 보존액으로 1,2-헥산디올(1,2-hexanediol)이 사용될 때, 붕장어 발효 추출물 100중량%에 대하여 1,2-헥산디올(1,2-hexanediol) 1 ~ 3 중량%가 투입되어 사용될 수 있다.
한편, 본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법은 제6단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 붕장어 발효 추출물 제조방법의 제6단계로서, 제조된 붕장어 발효 추출물을 감압농축 및 동결건조할 수 있다.
구체적으로, 제조된 붕장어 발효 추출물을 40 ~ 70℃, 바람직하게는 50 ~ 60℃에서 감압농축을 수행하고, -100 ~ -60℃, 바람직하게는 -90 ~ -70℃에서 급속 냉동하여 고체상태로 보관할 수 있다.
고체상태의 붕장어 발효 추출물은 추후 사용시 동결건조 후, 분쇄하여 파우더 형태의 붕장어 발효 추출물이 될 수 있다. 이와 같이 제조된 파우더 상태의 방중아 발효 추출물은 붕장어의 영양성분 및 기능성 성분을 유지하면서 장시간 보관이 가능하고 보관 시 취급이 용이하다는 장점이 있다.
나아가, 본 발명은 앞서 언급한 제조방법으로 제조된 붕장어 발효 추출물을 포함한다.
또한, 본 발명은 유효성분으로서, 건조된 붕장어 발효 추출물을 0.001 ~ 80 중량% 포함하는 화장료 조성물을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 붕장어 발효 추출물 외에 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않고 주 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분등을 함유하는 것도 무방할 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 피부 재생용, 피부 탄력용 또는 피부 보습용 화장품에 사용될 수 있다.
이 때, 화장품은 피부외용제로서 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않으며, 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 및 유중수(W/O)형의 에멀젼, 연고, 수중유형 및 유중수형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이크림, 아이새도, 치크칼라 및 아이브로우펜슬 중에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
이상에서 본 발명에 대하여 구현예를 중심으로 설명하였으나 이는 단지 예시일 뿐 본 발명의 구현예를 한정하는 것이 아니며, 본 발명의 실시예가 속하는 분야의 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 본질적인 특성을 벗어나지 않는 범위에서 이상에 예시되지 않은 여러 가지의 변형과 응용이 가능함을 알 수 있을 것이다. 예를 들어, 본 발명의 구현예에 구체적으로 나타난 각 구성 요소는 변형하여 실시할 수 있는 것이다. 그리고 이러한 변형과 응용에 관계된 차이점들은 첨부된 청구 범위에서 규정하는 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.
준비예 1 : 준비과정
구입한 붕장어를 활복하여 붕장어육(살, 근육부위), 머리, 뼈, 내장 및 껍질을 각각 분리하였다. 분리된 붕장어육(살, 근육부위), 머리, 뼈, 내장 및 껍질은 세척하여 이물질을 제거하였다.
실시예 1 : 붕장어 발효 추출물 제조
(1) 준비예 1에서 준비된 붕장어껍질을 60℃에서 72시간동안 건조하여 붕장어 건조물을 제조하였다.
(2) 붕장어 건조물을 0.5cm의 크기로 분쇄하여 붕장어 분쇄물을 제조하였다.
(3) 붕장어 분쇄물 100 중량부에 대하여 물 1000 중량부를 혼합하여, pH 7로 조정된 혼합물을 제조하였다. 혼합물에 락토바실러스 플렌타럼 10 CFU/ml을 접종하여 720시간동안 발효시켰다.
이 때, 락토바실러스 플렌타럼은 pH 4.5로 조정된 배양액에 33.5℃의 온도에서 5일간 배양된 것을 사용하였다.
발효를 종료하기 위해 80℃에서 10분간 열을 가하여 락토바실러스 플렌타럼의 기능상실을 유도하고, 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하여 상등액만을 채취하였다. 채취된 상등액은 붕장어 발효물이다.
(4) 붕장어 발효물은 85℃에서 3일동안 교반하여 숙성시켰다.
(5) 숙성된 붕장어 발효물을 0.22㎛의 필터를 이용하여 여과하여 붕장어 발효 추출물을 제조하였다.
실시예 2 : 붕장어 발효 추출물 제조
(1) 준비예 1에서 준비된 붕장어껍질을 60℃에서 72시간동안 건조하여 붕장어 건조물을 제조하였다.
(2) 붕장어 건조물을 0.5cm의 크기로 분쇄하여 붕장어 분쇄물을 제조하였다.
(3) 붕장어 분쇄물 100 중량부에 대하여 물 1000 중량부를 혼합하여, pH 7로 조정된 혼합물을 제조하였다. 혼합물에 바실러스 서브틸러스 10 CFU/ml을 접종하여 720시간동안 발효시켰다.
이 때, 바실러스 서브틸러스는 pH 7.0으로 조정된 배양액에 55℃의 온도에서 2일간 배양된 것을 사용하였다.
발효를 종료하기 위해 80℃에서 10분간 열을 가하여 바실러스 서브틸러스의 기능상실을 유도하고, 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하여 상등액만을 채취하였다. 채취된 상등액은 붕장어 발효물이다.
(4) 붕장어 발효물은 85℃에서 3일동안 교반하여, 숙성시켰다.
(5) 숙성된 붕장어 발효물을 0.22㎛의 필터를 이용하여 여과하여 붕장어 발효 추출물을 제조하였다.
실시예 3 : 붕장어 발효 추출물 제조
실시예 1과 동일한 방법으로 붕장어 발효 추출물을 제조하였다. 다만, 준비예 1에서 준비된 붕장어껍질 대신 준비예 1에서 준비된 붕장어육을 사용하여 붕장어 발효 추출물을 제조하였다.
실시예 4 : 붕장어 발효 추출물 제조
실시예 2와 동일한 방법으로 붕장어 발효 추출물을 제조하였다. 다만, 준비예 1에서 준비된 붕장어껍질 대신 준비예 1에서 준비된 붕장어육을 사용하여 붕장어 발효 추출물을 제조하였다.
실시예 5 : 붕장어 발효 추출물 제조
실시예 1과 동일한 방법으로 붕장어 발효 추출물을 제조하였다. 다만, 발효시간을 720시간이 아닌 500시간동안 발효시켜 붕장어 발효 추출물을 제조하였다.
실시예 6 : 붕장어 발효 추출물 제조
실시예 2와 동일한 방법으로 붕장어 발효 추출물을 제조하였다. 다만, 발효시간을 720시간이 아닌 940시간동안 발효시켜 붕장어 발효 추출물을 제조하였다.
비교예 1 : 붕장어 발효 추출물 제조
실시예 1과 동일한 방법으로 붕장어 발효 추출물을 제조하였다. 다만, 준비예 1에서 준비된 붕장어껍질 대신 준비예 1에서 준비된 붕장어 뼈를 사용하여 붕장어 발효 추출물을 제조하였다.
비교예 2 : 붕장어 발효 추출물 제조
실시예 2와 동일한 방법으로 붕장어 발효 추출물을 제조하였다. 다만, 준비예 1에서 준비된 붕장어껍질 대신 준비예 1에서 준비된 붕장어 뼈를 사용하여 붕장어 발효 추출물을 제조하였다.
비교예 3 : 붕장어 열수 추출물 제조
(1) 준비예 1에서 준비된 붕장어껍질을 60℃에서 72시간동안 건조하여 붕장어 건조물을 제조하였다.
(2) 붕장어 건조물을 0.5cm의 크기로 분쇄하여 붕장어 분쇄물을 제조하였다.
(3) 붕장어 분쇄물 100 중량부에 대하여 물 1000 중량부를 혼합하여, pH 7로 조정된 혼합물을 제조하였다. 혼합물을 80℃에서 3시간 가온 환류 추출하여 상등액과 침전물을 분리하고 3회 반복 추출하였다. 각 추출물은 냉침한 후, 0.22㎛의 필터를 이용하여 여과하여 붕장어 열수 추출물을 제조하였다.
실험예 1 : 실시예 1 ~ 6 및 비교예 1 ~ 3에서 제조된 추출물의 피부 개선 효과 측정
피부 개선 효과를 검정하기 위하여, 엘라스틴 분해 활성 저해 시험을 실시하였다.
엘라스틴은 피부 진피 내 매트릭스 층을 구성하는 성분으로 피부가 노화됨에 따라 엘라스틴이 분해되고 진피 내 매트릭스 층이 무너지며 주름이 생기게 된다.
이러한 원리를 이용하여 엘라스틴을 분해하는 효소인 엘라스테이즈의 활성을 측정하는 방법으로 엘라스테이즈 기질인 N-석시닐-(Ala)3 p-니트로아닐린(N-succinyl-(Ala)3 p-nitroaniline, Sigma)을 이용하여 p-니트로아닐린이 분해되면서 생기는 색의 변화를 405㎚의 파장에서 흡광도를 측정함으로써 엘라스테이즈 활성을 측정하였다.
엘라스테이즈 활성도를 측정하기 위한 대조군은 시료 대신 3차 증류수를 넣어 같은 방법으로 측정하였으며, 효소액 대신 3차 증류수를 넣어 각각에 대한 색 보정값을 얻은 경우를 설정하였으며, 시료는 실시예 1 ~ 6 및 비교예 1 ~ 3에서 제조된 추출물과 엘라스테이즈 활성저해효과를 판단하기 위해 엘라스테이즈의 특이 저해제인 phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF, Sigma)를 비교군으로 설정하였고, 하기 [수학식 1]을 이용하여 엘라스테이즈 저해율을 수치로 계산하였다.
IC50은 엘라스테이즈 활성을 50% 저해하기 위해 소요되는 시료의 농도이며, 값이 작을수록 저해율이 높음을 나타낸다.
완충액은 pH 8.0, 0.267M Trizma-HCl(Sigma), 기질액은 8.8mM N-Succinyl-(Ala)3 p-nitroaniline, 효소액은 돼지췌장 엘라스테이즈를 10㎍/㎖(Sigma)의 농도로 사용하였다. 완충액 60㎕, 기질액 20㎕와 상기 실시예 1 ~ 6 및 비교예 1 ~ 3에서 제조된 추출물 각각을 농도별로 3차 증류수에 희석한 시료액 100㎕를 섞은 후, 효소액 20㎕를 넣어 25℃ 항온수조에서 15분간 반응시켜 p-니트로아닐린의 생성량을 microplatereader(UVT-06685, Thermo max, 미국)를 사용하여 파장 405㎚에서 측정하고 그 결과값을 표 1에 나타내었다.
[수학식 1]
엘라스테이즈 활성저해율(%)= 100-((시료의흡광도)/대조군의 흡광도)x100)
구분 엘라스테이즈 활성저해율 IC50(ppm)
레티놀(Retinol) 1.18
PMSF 0.09
실시예 1 1.14
실시예 2 1.09
실시예 3 1.25
실시예 4 1.20
실시예 5 1.43
실시예 6 3.58
비교예 1 3.55
비교예 2 3.49
비교예 3 2.35
상기 표 1에 기재된 바와 같이, 실시예 1 ~ 6 및 비교예 1 ~ 3에서 제조된 추출물은 엘라스타아제 특이 저해제인 PMSF 0.09㎎/㎖ 보다는 엘라스테이즈 활성저해율이 낮지만, 현재 피부 개선 기능성 원료로 널리 알려진 레티놀과 비교하면 실시예 3 ~ 4에서 제조된 추출물은 레티놀하고 효과가 유사하고, 실시예 1 ~ 2에서 제조된 추출물은 레티놀보다 효과가 우수함을 확인할 수 있었다.
실험예 2 : 실시예 1 ~ 6 및 비교예 1 ~ 3에서 제조된 추출물의 피부 보습 효과 측정
보습효과의 측정은 유수분측정기(WSK-P500U, Inforward. Inc, 일본)를 이용한 커패시턴스 측정법을 사용하고, 실시예 1 ~ 6 및 비교예 1 ~ 3에서 제조된 추출물 1 중량% 수용액과 여러 연구결과에서 피부 보습 효과가 뛰어나다고 알려진 히아루론산(Hyaluronic acid sodium salt, Sigma) 1 중량% 수용액과 비교하였다.
20 ~ 30대 여성 100명을 대상으로 하여, 시험 시작 직전에 전박 굴측면을 항온항습실(22℃, 상대습도 40-60%)에서 20분 동안 적응하게 하여 피부의 수분 자체를 일정하게 유지시켰다. 이후, 유수분측정기(WSK-P500U, Inforward.Inc, 일본)를 사용하여 각 시료 도포부위의 초기 수분 보유량을 측정한 후, 시료를 2.0㎎/㎝2를 전박 굴측면에 따른 오차를 최소화하기 위하여 피검자마다 도포하는 시료의 위치를 달리하면서 도포하였다. 도포 10분, 30분, 50분, 90분, 120분에서 시간별로 피부 수분량을 1차 측정하고, 2시간 후에 다시 피부 수분량을 측정하였다.
각 측정부위를 3번 반복 측정하고 그 평균값으로 피부 수분량을 계산하여 하기 표 2에 나타내었다.
구분 도포 후 시간 경과에 따른 수분량 (A.U)
10분 30분 50분 90분 120분
1 중량%히아루론산 61.40 58.29 57.37 55.94 52.27
1중량%실시예 1 80.11 77.87 76.11 74.99 73.55
1중량%실시예 2 81.54 79.11 77.89 76.50 74.91
1중량%실시예 3 76.20 74.55 73.01 71.56 70.33
1중량%실시예 4 77.79 75.99 74.50 72.83 71.05
1중량%실시예 5 58.99 56.57 55.01 52.99 50.65
1중량%실시예 6 39.55 37.94 36.48 35.01 33.98
1중량%비교예 1 39.84 38.01 36.54 35.11 34.08
1중량%비교예 2 40.55 39.48 37.38 35.88 34.89
1중량%비교예 3 50.33 48.22 47.11 45.89 44.02
상기 표 2에 기재된 바와 같이, 실시예 1 ~ 8과 비교예 1에서 제조된 추출물은 히아루론산 1중량% 수용액과 비교하여 실시예 1 ~ 4에서 제조된 추출물은 보습효과가 우수하고, 특히 실시예 1 ~ 2에서 제조된 추출물은 현저히 우수함을 확인할 수 있었다.
하기에서 본 발명의 붕장어 발효 추출물을 포함하는 화장품의 제조예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 한다.
제조예 1: 화장수(스킨)의 제조(50ml 기준)
붕장어 발효 추출물 14g
알로에베라겔 13g
나이아신아마이드 3g
콜라겐 1g
모이스틴 2g
로즈플로럴워터 25g
할미꽃추출물 0.5g
초피나무열매추출물 0.5g
어스니어추출물 0.5g
로즈아로마오일 2drop
상기 성분을 약 15분간 교반하였다. 이물감이 느껴지지 않을 정도로 교반이 되었을 때 소독된 용기에 담았다.
제조예 2 : 에센스의 제조(50ml 기준)
붕장어 발효 추출물 14g,
알로에베라겔 30g
나이아신아마이드 5g
콜라겐 2g
모이스틴 2g
호호바오일 4g
할미꽃추출물 0.5g
초피나무열매추출물 0.5g
어스니어추출물 0.5g
비타민E 1g
로즈아로마오일 2drop
상기 성분을 약 15분간 교반하였다. 이물감이 느껴지지 않을 정도로 교반이 되었을 때 소독된 용기에 담았다.
제조예 3 : 아이크림의 제조(50ml 기준)
붕장어 발효 추출물 13g
호호바오일 9g
시어버터 2.5g
올리브유화왁스 3.5g
비타민 E 1g
모이스틴 2g
콜라겐 2g
나이아신아마이드 2g
로즈플로럴워터 20g
히하루론산 2g
할미꽃추출물 0.5g
초피나무열매추출물 0.5g
어스니어추출물 0.5g
호호바오일 9g, 시어버터 2.5g, 올리브유화왁스 3.5g를 혼합한 혼합물을 제조하고 55℃까지 가열하였다. 로즈플로럴워터 20g를 55℃까지 가열하였다. 55℃까지 가열된 혼합물에, 55℃까지 가열된 로즈플로럴워터를 혼합하고 15분간 교반하였다. 교반 후, 유화가 이루어지면 붕장어 발효 추출물 13g, 비타민 E 1g, 모이스틴 2g, 콜라겐 2g, 나이아신아마이드 2g, 히하루론산 2g, 할미꽃추출물 0.5g, 초피나무열매추출물 0.5g, 어스니어추출물 0.5g을 혼합하고 5분간 교반하고, 교반이 완료되면 소독된 용기에 담았다.
본 발명의 단순한 변형이나 변경은 이 분야의 통상의 지식을 가진 자에 의해서 용이하게 실시될 수 있으며, 이러한 변형이나 변경은 모두 본 발명의 영역에 포함되는 것으로 볼 수 있다.
본 발명은 붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로써, 보다 상세하게는 피부 재생, 피부 탄력 및 보습력이 우수한 붕장어 발효 추출물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Claims (10)

  1. 붕장어육 및 붕장어껍질 중 1종 이상을 포함하는 붕장어 혼합물을 건조하여 붕장어 건조물을 제조하는 제1단계;
    상기 붕장어 건조물을 분쇄하여 붕장어 분쇄물을 제조하는 제2단계;
    상기 붕장어 분쇄물을 용매와 혼합하여 혼합물을 제조하고, 상기 혼합물에 유산균 또는 고초균을 접종 및 발효시켜 붕장어 발효물을 제조하는 제3단계;
    상기 붕장어 발효물을 숙성시키는 제4단계; 및
    숙성된 붕장어 발효물을 여과하여 붕장어 발효 추출물을 제조하는 제5단계;
    를 포함하는 것을 특징으로 하는 붕장어 발효 추출물 제조방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 제3단계는
    상기 붕장어 분쇄물을 용매와 혼합하여 혼합물을 제조하는 제3-1단계;
    상기 혼합물에 유산균 또는 고초균을 접종 및 발효시켜 균 발효물을 제조하는 제3-2단계;
    상기 균 발효물에 열을 가한 후, 원심분리하는 제3-3단계; 및
    상기 원심분리된 균 발효물의 상등액을 획득하여, 붕장어 발효물을 제조하는 제3-4단계;
    를 포함하는 것을 특징으로 하는 붕장어 발효 추출물 제조방법.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 제1단계의 건조는 48 ~ 72℃에서 57 ~ 87시간 동안 수행하고,
    상기 제3단계의 발효는 10 ~ 30℃에서 576 ~ 864시간 동안 수행하고,
    상기 제4단계의 숙성은 68 ~ 102℃에서 57 ~ 87시간 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 붕장어 발효 추출물 제조방법.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 제3단계의 혼합물은 붕장어 분쇄물 100 중량부에 대하여, 용매 800 ~ 1200 중량부를 혼합하여 제조하고, 상기 혼합물은 pH 6.5 ~ 7.5로 조정되며,
    상기 유산균 또는 고초균은 5 ~ 30 CFU/ml의 농도로 접종하는 것을 특징으로 하는 붕장어 발효 추출물 제조방법.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 유산균은 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토코커스 락티스(Lactococcus latis) 및 바실러스 코아귤런스 (Bacillus coagulance) 중 1종 이상을 포함하고,
    상기 고초균은 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis)를 포함하는 것을 특징으로 하는 붕장어 발효 추출물 제조방법.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 붕장어 발효 추출물을 감압농축 및 동결건조하는 제6단계;
    를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 붕장어 발효 추출물 제조방법.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 제조방법으로 제조된 것을 특징으로 하는 붕장어 발효 추출물.
  8. 유효성분으로, 건조된 붕장어 발효 추출물을 0.001 ~ 80 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  9. 제8항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 피부 재생용, 피부 탄력용 또는 피부 보습용 화장품에 사용되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  10. 제9항에 있어서,
    상기 화장품은 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 및 유중수(W/O)형의 에멀젼, 연고, 수중유형 및 유중수형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이크림, 아이새도, 치크칼라 및 아이브로우펜슬 중에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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