WO2019124646A1 - 하이드란제놀을 유효성분으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물 - Google Patents

하이드란제놀을 유효성분으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물 Download PDF

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WO2019124646A1
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skin
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이선희
이근석
김현재
이경태
신지선
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Definitions

  • composition for preventing or improving skin damage caused by ultraviolet rays comprising hydranoenol as an active ingredient
  • the present invention relates to a composition for preventing or improving skin damage caused by ultraviolet rays. More specifically, it includes hydranenol, preferably hydranogenol derived from a hydrolyzate of the mountain syrup, as an active ingredient to inhibit secretion of MMP-1 due to stimulation of ultraviolet rays, and to inhibit proliferation of hyaluronic acid and pro-collagen By increasing the secretion of the skin, thereby preventing or ameliorating skin damage caused by exposure to ultraviolet light.
  • hydranenol preferably hydranogenol derived from a hydrolyzate of the mountain syrup
  • Skin aging can be divided into intrinsic aging and extrinsic aging depending on factors. Endogenous aging is caused by changes in the physiological functions of skin epidermis and dermis with age, and extrinsic aging is known to be caused by changes in physiological functions of the skin caused by environmental pollution, exposure to ultraviolet rays, and stress. Among these mechanisms of aging, UV-induced oxidative stress ( 0 x idat ive stress) increases the free radicals in the body, increases the activity of MMP-1 which degrades collagen (C l agen), and increases hyaluronic acid (Hyaluronic acid) breaks down the skin and damages the skin by increasing the activity of hyaluronidase.
  • UV-induced oxidative stress 0 x idat ive stress
  • MMP-1 degrades collagen
  • Hyaluronic acid hyaluronic acid
  • hydrangea hydrangea iHydr angea serrata
  • the hydrangea is a broad-leaved tall tree of the genus Schnauzer, and its leaf parts are specified as edible parts in food raw materials notified by the KFDA.
  • Chilopodium which is a generic term for chronic bronchitis, Jinhae, It has been used for some time in therapy.
  • a composition containing hydranenzol as an active ingredient derived from Hydrangea serrata extract is useful as a medicament for treating hyaluronic acid (Hya luronic acid and procollagen (Pro-colagen Typel).
  • hyaluronic acid Hya luronic acid and procollagen (Pro-colagen Typel).
  • MMP-1 hyaluronic acid
  • procollagen Pro-colagen Typel
  • Patent Document 1 JP0007546 A
  • Patent Document 2 JP0029934 A
  • a main object of the present invention is to provide a composition for preventing or ameliorating skin damage caused by ultraviolet rays, 2019/124646 1 »(: 1 ⁇ 1 ⁇ 2018/004922.
  • composition for preventing or ameliorating skin damage caused by ultraviolet rays which contains hydrolenol as an active ingredient of formula (1).
  • the present invention provides a composition for preventing or ameliorating skin damage caused by ultraviolet rays, wherein the skin damage is damage to human epidermal cells and dermal cells due to ultraviolet rays.
  • the skin damage is damage to human epidermal cells and dermal cells due to ultraviolet rays.
  • hydranzyme inhibited the growth of skin damaged by ultraviolet rays by increasing or decreasing production of _-1, increasing procollagen production and hyaluronic acid production, To prevent, improve or cure the disease.
  • " damage " of the skin includes death of human skin cells due to ultraviolet rays, damage of skin cells 0, increase of reactive oxygen species, increase of lipid peroxidation and the like.
  • the symptoms include erythema, sunburn, pigmentation, , Skin cancer, and the like.
  • "prevention" of damage refers to any act that inhibits or delays skin cell damage caused by ultraviolet light.
  • " improvement " of impairment refers to any action that alleviates or reduces the severity of a damaged condition of a skin cell by an ultraviolet ray.
  • " treatment " of damage refers to all actions that restore normal skin condition by restoring the damaged state of skin cells caused by ultraviolet rays.
  • the " improvement " of impairment in the present invention translates into a concept that includes " treatment " in a broad sense.
  • the hydranenzol may be used by purchasing a compound in the urine, or may be purified and used from natural products.
  • the present invention provides a composition for preventing or ameliorating skin damage caused by ultraviolet rays, which is characterized in that it is isolated from Shin!: Hydrangea Serrata extract.
  • the mountaineering country can be at least one selected from the group consisting of whole mountain trees, roots, stems, branches, leaves, seeds or fruits of woody matter, preferably leaves.
  • the extract of the mountain plant can be extracted by any extraction method such as hot water extraction, solvent extraction, distillation extraction and supercritical extraction, which are conventionally used for extracting natural plants, And is extracted as a mixed solvent thereof.
  • the organic solvent may be any one selected from the group consisting of alcohols having 1 to 4 carbon atoms, such as ethanol, methanol, isopropanol, and butanol, preferably ethanol. More preferably, (See Example 1 ) .
  • hydranenol is characterized by being a fraction of an extract from mountain juice.
  • the fractions were recrystallized in methanol to give amorphous compounds (hydrangenol).
  • Hydrogenol is present in an amount of 0. 0001 to 10 weight percent of the total weight of the composition.
  • the hydranenol is a skin cell damaged by ultraviolet rays Characterized in that the growth of hyaluronic acid is enhanced by increasing the production of hyaluronic acid by increasing the production of procollagen and by increasing the production of hyaluronic acid Composition for preventing or ameliorating cancer.
  • the composition is used for moisturizing 5 of skin stimulated from ultraviolet rays or for improving wrinkles.
  • the effect of increasing the production of procollagen and increasing the production of hyaluronic acid is not limited to the composition of the present invention not only for preventing or improving skin damage caused by ultraviolet rays but also for moisturizing or wrinkle-improving skin stimulated by ultraviolet rays It can be 1 0 .
  • the composition has one or more formulations selected from the group consisting of tablets, granules, pills, capsules, liquid type, 15 jelly or a sponge, and is characterized in that it is for oral consumption.
  • the composition has at least one formulation selected from the group consisting of a softening agent, a nutritional lotion, a nutritional cream, a water cream, a spot, a gel lotion or an ointment.
  • the composition comprising hydranenzol as an active ingredient derived from the extract of a mountain water plant according to the present invention can be used for various purposes and can be used, for example, as a quasi-drug, a cosmetic composition, a pharmaceutical composition, a health functional food composition and the like.
  • the cosmetic composition according to the invention and can include hwajangpumhak acceptable carrier formulated for normal skin cosmetic composition additionally one or more, conventional ingredients coming from example 25 roye oil, water, surfactants, humectants, lower alcohols, thickening agents, , A chelating agent, a coloring matter, an antiseptic, a flavoring, and the like may be appropriately compounded, but the present invention is not limited thereto.
  • the pharmaceutical composition or dietary supplement composition of the present invention may be 30 further comprising a suitable carrier, excipient, diluent or the like commonly used in manufacturing the pharmaceutical composition of.
  • the pharmaceutically acceptable carrier, excipient, or diluent may be a lubricant, Calcium carbonate, cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, But is not limited to, at least one selected from the group consisting of mineral oil,
  • the pharmaceutically effective amount and the effective dose of the pharmaceutical composition according to the present invention may vary depending on the formulation method of the pharmaceutical composition, the administration mode, the administration time and / or the route of administration.
  • the administration of the above-mentioned pharmaceutical composition may be carried out at the same time with respect to the kind and degree of reaction to be achieved, the kind of the subject to be administered, age, weight, general health condition, symptom or degree of sex, sex, diet, Or the components of the drug or other composition used in conjunction therewith, and the like, and similar factors well known in the medical arts.
  • One of ordinary skill in the art can readily determine and prescribe dosages effective for the desired treatment.
  • the administration of the pharmaceutical composition according to the present invention can be administered once per day; it can be administered in divided doses.
  • the preferred dosage of the pharmaceutical composition according to the invention is 0.01ug / kg / day to 20,000yg / kg / day, more specifically, l Ug / kg / day to 10,000ug / kg / day.
  • the composition containing hydranenol derived from the extract of the present invention reduces the secretion of MMP-1 produced by UV-B exposure and increases the secretion of hyaluronic acid and procollagen, To prevent skin aging and maintain skin elasticity. Therefore, the composition of the present invention can be usefully used as a pharmaceutical, food or cosmetic composition.
  • Fig. 1 is a schematic illustration of the separation and purification process of hydrhenol from an aqueous hydrangea leaf.
  • Figure 5 shows the spectrum of hydranenol.
  • FIG. 8 is a graph comparing cell proliferation rates of the extracts of hydronephrosis of epidermal cells and dermis cells caused by UV rays. (392-45 hydroponics, myelin control, 11 31 ': epidermal cells, 3 ⁇ 468: dermal cells)
  • FIG. 9 is a graph showing the cell proliferation rate of hydranenol in epidermal cells and dermal cells damaged by ultraviolet rays.
  • 10 is a graph comparing the inhibitory effect of mp-1 on the extracts of extracts from perennials and dermis-induced skin damaged by UV rays.
  • Fig. 11 is a graph showing the relationship between the amount of hydrocarbons in epidermal cells and dermal cells
  • FIG. 12 is a graph comparing the amounts of procollagen produced by extracts of Solanaceae according to solvent in dermal cells damaged by ultraviolet rays.
  • 13 is a graph showing the amount of procollagen produced by hydranenol in dermal cells damaged by ultraviolet rays.
  • FIG. 14 is a graph showing the amount of hyaluronic acid produced in extracts of extracts from the epidermal cells and dermal cells damaged by UV rays.
  • 15 is a graph showing the amount of hyaluronic acid produced in the epidermal cells and dermal cells damaged by ultraviolet rays.
  • Example 1 Preparation of extract of mountain soup
  • composition of the present invention was prepared by the following procedure 2019/124646 1 »(1 ⁇ ⁇ 2018/004922 c.
  • Example 2 Preparation of hydranenol derived from the extract of mountain juice
  • Example 2 5.66 g of the 70% ethanol extract obtained in Example 1 was subjected to gel filtration using Diaion HP-20.
  • the developing solvent was solvent fractionated using 2 L each of a mixed solution of 30%, 50%, 70%, 100% methanol and CH 2 C 12-MeOH (1: 1, v 8), and 5 small fractions (392-70 EDI al ⁇ 5).
  • H-5 and H-6 hydrogens H-5 and H-7 hydrogen were doubled as ortho-couplings
  • H-6 and H- The protons are ortho and m eta couplings and appear as double of doublets, all of which are peaks corresponding to one hydrogen.
  • Example 2 is hydranolone (Yoshikawa M., Matsuda H.
  • Example 1 and 2 The samples obtained in Examples 1 and 2 were measured for the ability to repair damage of the exposed cells to UV-B.
  • HaCaT keratinocyte was used as the epidermal cell and HS68 fibroblast was used as the dermal cell.
  • each cell was stuck on a 96-well plate for 24 hours at a concentration of 1.0 X 10 4 cells / well.
  • the culture medium was cultured for 24 hours by changing the culture medium with each concentration sample.
  • UV-B the old medium was removed, treated with PBS and then treated with UV-B at 15 mJ / cm 2 .
  • MTT Assay Live 019/124646 2 1 »(1 ⁇ 1 is to measure the amount of formazan formed from ⁇ 2 018/004922 reduced by mitochondria of the cell. More specifically, 51 was treated with ⁇ / 7 solution for each by 50 ⁇ cells and was cultured for 4 hours, the solution was completely removed and measured ⁇ the dissolved plate by £ () absorbance at 540 TM.
  • each cell was dosed on a 24-well plate at a concentration of 1.0 X 10 of 13/1 1 and stabilized for 24 hours. After that, the cells were cultured for 24 hours in a medium supplemented with each concentration sample. To investigate, the old medium was removed, treated with yoghurt, and then treated with 15: 8. After incubation for 48 hours in the medium treated with the sample, 1 ratio) was used to measure the degree of secretion.
  • Example 1 or Example 2 The samples obtained in Example 1 or Example 2 were assayed to be able to increase procollagen type 1 in dermal cells 6868 fi. To ensure that the secretion amount of procollagen type 1 can increase according to the materials treated, at a concentration of 1.0 X 1 0 5 061 15 ⁇ 3 ⁇ 41 ] 24 the respective cells, and dispensed in a well plate to stabilize for a period of time 24 . Subsequently, the cells were cultured for 24 hours in a medium supplemented with each concentration sample. To investigate, the existing medium was removed, After the wash 15 1 ⁇ : I was treated in the ⁇ !. After 48 h incubation with the medium treated with the sample, The degree of secretion of procollagen type 1 was measured using 1: ⁇ urogene.
  • Example 1 or Example 2 The samples obtained in Example 1 or Example 2 were examined for the ability to increase hyaluronic acid in the epidermal cell HaCaT kerat inocyte and the dermis Hs68 fibroblast. To confirm that the hyaluronic acid content was increased with the material treatment, each cell was dispensed on a 24-well plate at a concentration of 1.0 X 10 5 cel 1 / well and stabilized for 24 hours. Then, each of the concentration samples was exchanged with the treated medium and cultured for 24 hours. To irradiate UV-B, the old medium was removed, treated with PBS and then treated with UV-B at 15 mJ / cm 2 .
  • Example 2 increases the production of hyaluronic acid to help moisturize the skin, thereby preventing or improving skin damage caused by ultraviolet rays.
  • Formulation Example 1 Preparation of tablets
  • Tablets were prepared by mixing and tableting the ingredients of Table 1 according to the conventional tablet preparation method described in Example 2 above.
  • Example 2 the ingredients shown in the following Table 3 are mixed according to a preferable beverage preparation method, and the solution is prepared by heating the bottle or pouch.
  • Example 2 the ingredients shown in Table 4 below are mixed according to the preferred jelly preparation method, and the jelly is prepared by filling the three-sided jelly.
  • the nutritional cream was prepared according to the above-mentioned Example 2 according to a conventional method with the composition shown in Table 5 below.
  • composition ratio is generally prepared by mixing appropriate components, the formulation ratio and the raw materials may be arbitrarily changed as necessary.
  • the extract of the present invention is stable in all formulation test conditions, .
  • the hydran from the extract of the mountain plant of the present invention The composition containing the genol reduces the secretion of 1 ⁇ 1 produced by large exposures and increases the secretion of hyaluronic acid and procollagen, Prevent aging and maintain skin elasticity. Therefore, the composition of the present invention can be usefully used as a pharmaceutical, food or cosmetic composition

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Abstract

본 발명은 하이드란제놀(Hydragenol), 바람직하게는 산수국 추출물에서 유래한 하이드란제놀(Hydragenol)을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을위한 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 본 발명의 조성물은 피부세포에서 히알우론산(Hyaluronic acid) 및 프로콜라겐 (Pro-collagen Type1)의 분비를 증가시키고, MMP-1의 분비를 억제시킴으로써, 자외선에 의한 피부세포 손상의 예방 또는 개선 효과를 확인하였다. 따라서 본 명세서에 개시된 하이드란제놀을 포함하는조성물은 의약외품, 의약품, 식품또는 화장품 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.

Description

2019/124646 1»（：1^1{2018/004922
【명세서】
【발명의 명칭】
하이드란제놀을유효성분으로하는자외선에 의한피부손상예방또는 개선을위한조성물
【기술분야】
본발명은자외선에 의한피부손상예방또는개선용조성물에 관한 것 이다. 더욱구체적으로하이드란제놀， 바람직하게는산수국추출물에서 유래한 하이드란제놀을유효성분으로포함하여 자외선의 자극으로인한 MMP-1분비를 억제시키고, 히알우론산및프로콜라겐 (pro-col l agen)의 분비를증가시킴으로 써, 자외선 노출에 의해 생기는피부손상을 예방또는개선하는조성물에 관 한것이다.
【배경기술】
피부노화는요인에 따라내인성 노화 ( Intr insi c aging)와외인성 노화 (E xtr insi c aging)로구분할수있다. 내인성 노화는나이에 따른피부표피 및 진피의 생리적 기능변화가원인이며， 외인성 노화는대기오염, 자외선노출, 스트레스등의 환경으로부터 발생하는피부의 생리적 기능변화가원인으로알 려져 있다. 이러한노화의 메커니즘중 UV에 의해유도되는산화적 스트레스 (0 xidat ive Stress)는체내의 자유라디칼 (Free Radical )을증가시키고, 콜라겐 (C ol l agen)을분해하는 MMP-1의 활성 증가및 히알우론산 (Hyaluroni c acid)을분 해는 히알우론다제 (Hyaluronidase)의 활성 증가로피부표피 및 진피 손상을 야기한다.
일상생활에서 우리는 햇빛에 항상노출되아 있으며， 특히 UV-B노출로 인해 발생하는세포의 손상및 피부암유발은일상생활에서 피할수없는요소 이다. 이에 따라， 최근 UV노출에 의한피부세포손상예방또는 개선에 대한 생화학적 효능， 효과를나타내는소재에 대한연구가활발히 진행되고있다. 신［수국 iHydr angea serrata)은범의귀과의 넓은잎작은키 나무로식약 처에서 고시한식품원재료에 잎부위가식용가능부위로명시되어 있다. 한방에 서는생약명으로칠엽담이라고하여 만성기관지염, 진해, 거담， 소염해독등의 2019/124646 1»（：1^1{2018/004922 치료에 예로부터사용되고있다.
하이드란제놀은切선ra/?供· 5속에서 발견되는대표적인성분으로서 (일본공 개특허 JP-0029934)， 분자량은 256.25 g/nrol이며 IUPAC명은 8-hydroxy-3 - (4-h ydroxyphenyl )-3, 4-dihydroisochromen- 1-one이다. 또한이것의 유도체로는 (-) -hydrangenol 4’-0_glucoside， (+)-hydrangenol 4’-Oglucoside가있다. 또한 이것의 기능성으로는피부미백 (일본공개특허 JP-0007546) , 항염효과 (Kim, H.J, et al.， Hydrangenol inhibits 1 ipopolysaccharide-induced nitric oxide pro duction in BV2 microglial cells by suppressing the NF-KB pathway and acti vating the Nrf2-mediated H0-1 pathway, International immunopharmaco 1ogy v .35 ,pp. 61 - 69 , 2016 , 1567-5769)가있는것으로보고된 바있다.
하지만하이드란제놀의 자외선에 의한피부손상예방또는개선에 대한 용도는알려지지 않았으며， 그에 대한기전연구도이루어지지 않은실정이다 . 따라서 본발명자들은상기 성분이 가지는자외선에 의한항산화효소활성 과 인간표피세포및 진피세포손상억제에 대한직접적인 기초효능연구를 수행하였다.
이에， 본발명자들은상기 종래기술들의 문제점들을극복하기 위하여 연 구한 결과, 신:수국｛Hydrangea serrata) 추출물에서 유래한하이드란제놀을유 효성분으로함유하는조성물이 인간표피세포및 진피세포에서 히알우론산(Hya luronic acid) 및프로콜라겐 (Pro-col lagen Typel)의 분비를증가시켰다. 또한 , MMP-1를 감소시킴으로서， 내에 의한피부손상을 억제해 피부개선효과를 나타낼수있음을확인하고， 본발명을완성하게 되었다.
【선행가술문헌】
(특허문헌 1) JP0007546 A
(특허문헌 2) JP0029934 A
【발명의 상세한설명】
【기술적 과제】
따라서， 본발명의 주된목적은산수국추출물에서 유래한하이드란제놀 을유효성분으로하는자외선에 의한피부손상예방또는개선조성물을제공 2019/124646 1»（：1^1{2018/004922 하는데 있다.
【기술적 해결방법】
본발명의 한양태에 따르면, 본발명은하기 화학식 1의 하이드란제놀 을유효성분으로 함유하는자외선에 의한피부손상 예방또는개선용조성물 을제공한다.
[화학식 1]
Figure imgf000005_0001
본 발명에 있어서, 상기 피부손상은자외선에 의한인간표피세포 및 진피세포의 손상인 것을특징으로하는자외선에 의한피부손상예방또는개 선용조성물을제공한다. 본발명의 실험예에서는하이드란제놀이 자외선으로 손상된표피세포및 진피세포에서 손상된세포를증식 또는복구하고， _-1의 생성을감소시키고， 프로콜라겐 생성량및 히알우론산생성량을증가시킴으로 써 자외선에 의한피부손상을예방, 개선또는치료하는효과가있음을증명하 였다.
본발명에 있어서， 피부의 “손상”이란자외선에 의한인간피부세포의 사멸, 피부세포 0 손상, 활성산소종증가, 지질과산화증가등을포함하며 , 그증상으로는홍반， 일광화상， 색소침착, 광노화， 피부암등을포함할수 있다. 또한， 손상의 “예방”은상기 자외선에 의한피부세포의 손상을 억제시 키거나지연시키는모든행위를의미한다. 또한, 손상의 “개선”은상기 자외 선에 의한피부세포의 손상상태의 완화또는증상의 정도를감소시키는모든 행위를의미한다. 또한, 손상의 “치료”는상기 자외선에 의한피부세포의 손 상상태를복구하여 정상적인 피부상태를유지하는모든 행위를 의미한다. 본발명에서 손상의 “개선”은넓은의미로 “치료”를포함하는개념으로이 해된다.
본발명에 있어서, 상기 하이드란제놀은시중에서 화합물을구입하여 사 용할수도있으며， 천연물에서 분리 정제하여 사용할수도있다. 바람직하게는 2019/124646 1»（：1^1{2018/004922
, 본발명은신!:수국｛Hydrangea Serrata） 추출물에서 분리한 것을특징으로하 는자외선에 의한피부손상 예방또는 개선용조성물을제공한다. 산수국은 산수국 전체， 목본의 뿌리， 줄기, 가지， 잎, 종자또는열매로 이루어진 군에 서 선택된하나이상일수있으며, 바람직하게는잎이 사용될수있다.
본발명에 있어서, 산수국추출물은종래에 천연식물을추출하기 위하여 이용된 열수추출， 용매추출， 증류추출， 초임계 추출등어떠한추출방법으로 도추출될 수 있으며, 바람직하게는물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매로추 출되는것을특징으로한다. 상기 유기용매는탄소수 1내지 4의 알코올， 예컨 대 에탄올, 메탄올, 이소프로판올, 및부탄올등으로이루어진군에서 선택된 어느하나이상이 사용될수있으며, 바람직하게는에탄올이 사용될수있으며 ， 더욱바람직하게는발효주정이사용될수있다（실시예 1참조） .
본발명에 있어서 , 하이드란제놀은산수국추출물의 분획물인 것을특징 으로한다. 바람직하게는산수국에탄올추출물을가지고이온교환크로마토그 래피 （예컨대, Di ai on HP-20） 과크기배제 크로마토그래피 （예컨대， Sephadex L H-20）을순차적으로 이용하여 분리 정제한분획물이다（도 1 참조）. 상기 분획 은메탄올에서 재결정하여 무정형의 화합물（hydrangeno l）을순수하게수득하였 다.
본 발명의 실시예에서는산수국추출물로부터 분리 정제한물질에 대하 여 질량분석 （ESIMS） 및 NMR분석 （1H-NMR , 13C-NMR , DEPT NMR , HSQC NMR , HMB C NMR）을실시하여 하기 상기 화학식 1의 구조를 갖는하이드란제놀이라는 것 을밝혀냈다.
[화학식 1]
Figure imgf000006_0001
하이드란제놀은조성물총중량대비 0 . 0001내 지 10중량 ¾포함하는것을특징으로하는자외선에 의한피부손상예방또는 개선용조성물을제공한다.
본발명에 있어서， 상기 하이드란제놀은자외선에 의해손상된피부세포 2019/124646 1»（：1^1{2018/004922 를증식시키고, _-1의 생성을감소시키고， 프로콜라겐의 생성을증가시키고， 히알우론산의 생성을증가시키는 것을특징으로하는자외선에 의한피부손 상예방또는개선용조성물을제공한다.
본발명에 있어서, 상기 조성물은자외선으로부터 자극된 피부의 보습 5 또는주름개선용으로사용되는 것을특징으로 하는자외선에 의한피부손상
Figure imgf000007_0001
감소시키고， 프로콜라겐의 생성을 증가시키고 , 히알우론산의 생성을 증가시키 는효과는본발명의 조성물이 자외선에 의한피부손상예방또는개선용뿐만 아니라, 자외선으로부터 자극된피부의 보습또는주름개선 용도로도사용될 10 수있다는것을알려준다.
본발명의 실험예에 따르면， 산수국추출물에서 유래한하이드란제놀이
Figure imgf000007_0002
실험예 1내지 4참조）.
본발명에 있어서， 상기 조성물은정제, 과립제， 환제， 캡슐제， 액상형, 15 젤리 또는낌으로구성되는군으로부터 선택된하나이상의 제형을갖는것으 로서， 구강섭취용인 것을특징으로한다.
본발명에 있어서, 상기 조성물은유연화장수， 영양화장수, 영양크림， 수분크림， 스팟， 젤로션 또는 연고로구성된 군으로부터 선택된 하나이상 의 제형을갖는것으로서, 피부외용제용인 것을특징으로한다.
20 본발명에 따른산수국추출물에서 유래한하이드란제놀을유효성분으로 포함하는조성물은다양한용도로사용될수 있으며， 예컨대 의약외품， 화장 료조성물, 약학적조성물, 건강기능식품조성물등으로사용될수있다. 본발명에 따른화장료조성물은일반피부화장료에 배합되는화장품학 적으로허용가능한담체를 1종이상추가로포함할수있으며， 통상의 성분으 25 로예를들면유분， 물, 계면활성제， 보습제， 저급알코올， 증점제, 킬레이트 제， 색소， 방부제, 향료등을적절히 배합할수 있으나， 이에 제한되는 것은 아니다.
본발명에 따른약학적 조성물또는건강기능식품조성물은약학적 조성 물의 제조에 통상적으로사용되는적절한담체, 부형제， 또는희석제등을더 30 포함할수있다. 상기 약학적으로허용가능한담체, 부형제, 또는희석제는락 토오스， 덱스트로오스， 수크로오소， 칼슘실리케이트， 셀룰로오스, 메틸셀룰로 오스， 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈， 물， 메틸히드록시벤조에이트， 프 로필히드록시벤조에이트, 활석 , 마그네슘스테아레이트, 및 광물유등으로이루 어진 군에서 선택된 어느하나이상이 포함될수 있으나, 이에 한정되지 않는 다.
본발명에 따른약학적 조성물의 약학적 유효량， 유효투여량은약학적 조성물의 제제화방법, 투여 방식， 투여시간및/또는투여 경로등에 의해 다 양할수있다 . 또한 , 상기 약학조성물의 투여로달성하고자하는반응의 종류 와정도， 투여 대상이 되는개체의 종류, 연령 , 체중， 일반적인건강상태, 질 병의 증세나정도, 성별， 식이， 배설, 해당개체에 동시 또는 이시에 함께 사 용되는약물기타조성물의 성분등을비롯한여러 인자및 의약분야에서 잘 알려진 유사인자에 따라다양해질 수 있다. 당해 기술분야에서 통상의 지식 을가진자는목적 하는치료에 효과적인투여량을용이하게 결정하고처방할 수 있다. 본발명에 따른약학조성물의 투여는하루어;] 1회 투여될 수 있고， 수회에 나누어 투여될수 있다. 따라서 상기 투여량은어떠한면으로든본발 명의 범위를한정하는것은아니다. 본발명에 따른약학적 조성물의 바람직한 투여량은 0.01ug/kg/일 내지 20,000yg/kg/일， 보다구체적으로는 lUg/kg/ 일내지 10,000ug/kg/일이다. 【발명의 효과】
이상설명한바와같이， 본원발명의 산수국추출물에서 유래한하이드란 제놀을함유하는조성물은 UV-B노출에 의해 생성되는 MMP-1의분비를감소시키 고， 히알우론산및 프로콜라겐의 분비를증가시킴으로써 자외선에 의한피부노 화를방지하고피부탄력을유지시킬수있다. 따라서 본발명의 조성물은약학 ， 식품또는화장품조성물로서 유용하게사용될수있다.
【도면의 간단한설명】
도 1은산수국 잎으로부터 하이드란제놀의 분리정제과정을도식화한것 이다.
도 2는하이드란제놀의 ESIMS (positive-ion mode)스펙트럼이다. \ () 2019/124646 1»(그1^1{2018/004922 도 3은하이드란제놀의 ¾-_스펙트럼이다.
도 4는하이드란제놀의 13（〕-_스펙트럼이다.
도 5는하이드란제놀의 ■!?스펙트럼이다.
Figure imgf000009_0001
도 8는자외선으로손상이 야기된표피세포및 진피세포에서 용매별산 수국추출물의 세포증식율을비교한그래프이다. （392-45 산수국， 묘 양 성대조군, 11 31': 표피세포， ¾68: 진피세포）
도 9는자외선으로손상이 야기된 표피세포 및 진피세포에서 하이드란 제놀의 세포증식율을나타낸그래프이다.
도 10은자외선으로손상이 야기된 표피세포 및 진피세포에서 용매별 산수국추출물의 mp-l억제효능을비교한그래프이다.
도 11은자외선으로손상이 야기된표피세포및 진피세포에서 하이드란
Figure imgf000009_0002
도 12는자외선으로손상이 야기된 진피세포에서 용매별산수국추출물 의프로콜라겐 생성량을비교한그래프이다.
도 13은자외선으로 손상이 야기된 진피세포에서 하이드란제놀의 프로 콜라겐생성량을나타낸그래프이다.
도 14는 자외선으로손상이 야기된 표피세포 및 진피세포에서 용매별 산수국추출물의 히알우론산생성량을나타낸그래프이다.
도 15는자외선으로손상이 야기된 표피세포 및 진피세포에서 하이드란 제놀의 히알우론산생성량을나타낸그래프이다.
【발명의 실시를위한형태】
이하， 실시예를통하여 본발명을더욱상세히 설명하기로한다. 이들 실시예는단지 본발명을 예시하기 위한 것이므로, 본발명의 범위가이들실 사예에 의해 제한되는것으로해석되지는않는다. 실시예 1： 산수국추출물제조
본발명의 조성물중산수국추출물은다음과같은과정에 의해 제조된 2019/124646 1»（그1^1{2018/004922 다. 우선, 산수국잎은제주도에서 채집하여 4-5일동안건조시킨후세절하여 추출재료로이용하였다. 세절한산수국 25 g을열수와 30%, 50%, 70%에탄올 175mL(7배， v八 0을사용하여 50°C에서 3시간동안환류추출하였다. 추출에 의해 얻어진 물질은상온에서 와트만 (No 2. ) 추출용매 여과지를사용하여 불 용성 물질을제거하였다. 그후, 냉각콘덴서가달린 증류장치에서 감압농축 하면서 용매를완전히 제거하였다. 산수국추출물을완전히 건조후추출수율 을측정한결과 20%의 수율을나타내었다. 실시예 2： 산수국추출물에서 유래한하이드란제놀제조
실시예 1로얻어진 70%에탄올추출물 5.66g을 Diaion HP-20을이용하여 gel f i l trat ion을실시하였다. 전개용매는 30%, 50%, 70%, 100%메탄올과 CH2 C12-MeOH(l：l, v八)의 혼합용액을각각 2L씩 사용하여 용매분획 하였으며 5개 의 소분획 (392-70EDi al~5)으로나누었다. 소분획 392-70EDia4(357.½g)는 Seph adex LH-20을사용하여 메탄올을전개용매로하여 7개의 소분획 (392-70EDia4a~ 4g)으로나누었고， 이중 392-70EDi a4d분획은메탄올에서 재결정하여 무정형의 화합물 Khydrangenol) 31.1mg을순수하게 수득하였다/
상기 실시예 2의 구조를확인하기 위하여, 먼저 ESI MS (posi t ive-ion mo de)를확인한결과 m/z = 257 [M+H]+로나타났다 (도 2참조) . ¾-NMR (도 3참조 )에서， 고자장에서 나타나는 8 H 5.50에서의 methine proton(H_3)과 8 H 3.30 과 3.06에서의 methylene proton(H_4)이 서로 vi cinal coupl ing한다는점과 ch emical shi ft 값으로 C r ing에서 기인하는 proton이라는것을알수있었다. B -r ing의 p-subst i tuted benzene r ing에서 기인하는 H-2 , 3’ 과 H-6' , 5’ 은 서로 ortho coupl ing하여 doublet (J = 8.4 Hz)으로나타나고, H-2' 과 H_6' 의 피크와 H- 과 H-5, 의 피크들도서로 ortho coupl ing을하여 doublet으로 나타나 hydroxy기를중심으로서로대칭구조임을알수있었다. A-r ing의 1,2 ,3-tr i subst i tuted benzene에서는 H-5와 7번수소는각각 H-6수소와 coupl ing 하여 H-5와 7번수소는 ortho coupl ing으로 doublet , H-6 proton은 ortho와 m eta coupl ing으로 double of doublets로나타나며， 모두하나의 수소에 해당하 는피크임을알수있었다.
13C-NMR에서 (도 4참조)는 para-치환체를포함하여 총 15개의 피크가나 2019/124646 1»（：1^1{2018/004922 타나고있었다. 6C 172에서의 quarternary탄소는화합물 1번탄소인 carbony 1 group에서 기인한피크이며, 8C 116.9(C-3 ,5' )과 129.6C-2' ,6 )는 ar omatic ring의 파라치환체에서 기인한피크이며, 6C 36.1과 83.1의 피크는 각각 aliphatic carbon과 oxygenated carbon에서 기인한것을 예상할수 있었 다. 또한 DEPT NMR (도 5참조)에서는 7개의 protonated carbons을 확인할수 있었으며， 8 C 36.1의 피크는이에서 기인한 methylene group임을알수있었 다. 이들의 정확한구조를분석하기 위하여 2D NMR을분석하였다. HSQC (도 6 참조)로부터 피크들의 정확한위치를동정하였으며， _C (도 7참조)로부터 치 환기가결합된위치를알수있었다. 즉, SH 7.26 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-2^ ,6' )의 피크는 8C 36.1의C-4와상관관계가나타나고 H-4에서 기인한 6H 3.0
6과 3.30의 피크들은 6 C 83.1 (C-3) , 119.8 (C-5) , 110.0 (09)， 142.2 (010 )의 피크와상관관계가나타나고있다. 이상의 결과를종합하여 문헌과비교하 여 실시예 2가하이드란제놀이라는것을확인하였다(Yoshikawa M. , Matsuda H.
， Shimoda H. , Shimada H. , Harada E. , Naitoh Y. , Miki A., Yamahara J. , Mu rakami N. Development of Bioact ive Functions in Hydrangeae Dulcis Folium. V. On the Antiallergic and Antimicrobial Principles of Hydrangeae Dulcis Folium. (2). Thunberginols C, D, and E, Thunberginol G 3'-0-Glucoside, ( -)-Hydrangenol 4'-0-Glucoside, and (+)-Hydrangenol 4'-0~Glucoside. Chem. Pharm. Bull. 1996, 44： 1440-1447) . 실험예 1： 하이드란제놀의 내에 의한손상된세포의 중식 확인
상기 실시예 1및 실시예 2에서 얻은시료에 대하여 UV-B에 노출시킨피 부세포의 손상을복구할수있는지 측정하였다. 본실험에서 표피세포로 HaCaT keratinocyte 및 진피세포로 HS68 fibroblast를사용하였다. 자외선에 의한 피부세포손상예방또는개선의 효능이 있는지 확인하기 위해， 1.0 X 104cell s/well 의 농도로각각의 세포들을 96 -웰플레이트상에 24시간동안부착시켜 안정화시켰다. 이후각농도시료를처리한배지토교환하여 24시간동안배양 하였다. UV-B를조사하기 위해, 기존배지를제거하고， PBS세척을한후 15mJ /cm2으로 UV-B를처리하였다. 이후시료를처리한배지를이용해 24시간배양 후， MTT어세이를통해 세포생존정도를측정하였다. MTT어세이는살아있는 2019/124646 1»（：1^1{2018/004922 세포의 미토콘드리아에 의해 환원된 로부터 형성된포마잔의 양을측정하는 방법이다. 더 자세하게는， 51犯/ 7용액을 50成씩 각각의 세포에 처리하 고 4시간동안배양한후， 용액을완전히 제거하고■£（）로용해시킨플레이트를 540™의 흡광도에서 측정하였다.
도 8에 도시된 것과같이，
Figure imgf000012_0001
로부터 손상이 야기된 표피세포 및 진피세포에서 실시예 1의 모든추출물이 세포독성을나타내지 않았으며, 대부분의 추출물들에서 세포증식 효과를 확인하였다. 특히 진피세포에서는 양 성대조군인
Figure imgf000012_0002
유사한세포 증식효과 를보였다.
Figure imgf000012_0003
물질인 것을고려할때 , 실시예 1의 모든추출물에서 자외선에 의한피부손상개선에 더욱효과적인유효성분이 있을것이라고판 단했다. 도 9에 도시된 것과같이， 15 /011 2 생로부터 손상이 야기된표피세 포및 진피세포에서 실시예 2의 하이드란제놀은세포독성을나타내지 않았으며 ， 세포증식 효과를 확인하였다. 특히 10 의
Figure imgf000012_0004
하이드란제놀은 유사한세포증식효과를보였다. 묘就가 1（八1 ¾1이라는 것을고려한다면， 낮은농 도로도우수한자외선에 의한피부손상예방또는개선효능을가진다는것을 알수있었다. 실험예 2:세^니의 함량분석
상기 실시예 1또는실시예 2에서 얻은시료에 대하여 표피세포
Figure imgf000012_0005
6대 1100 6및 진피세포 ¾68 1）1'0131331：에서 1·?-]^ 분비를억제시킬수 있 는지 측정하였다. 물질처리에 따라 1記-1이 감소할수 있는지 확인하기 위해, 1.0 X 10 이13/ 1 1의 농도로각각의 세포들을 24 -웰플레이트상에 분주하고 24시간동안안정화시켰다. 이후각농도시료를처리한배지로교환하여 24시 간동안배양하였다.
Figure imgf000012_0006
조사하기 위해, 기존배지를제거하고， 요으세척을 한후 15 八: 으로 내를처리하였다. 이후시료를처리한배지를이용해 48시간배양후상층액에서
Figure imgf000012_0007
크 , 1比）를사 용하여■?-；[의 분비 정도를측정하였다.
도 10에 도시된 것과같이， 151 /011 2의 내부터 손상이 야기된 표피세 포및 진피세포에서 실시예 1의 모든추출물들이 ■?-[ 생성을농도의존적으 로 감소시켰다. 도 11에 도시된 것과 같이，
Figure imgf000012_0008
로부터 손상이 야기 2019/124646 1»（：1^1{2018/004922 된 표피세포 및 진피세포에서 실시예 2의 하이드란제놀은■?-[ 생성을농도 의존적으로억제시켰다. 특히 진피세포에서, 같은농도의 하이드란제놀과묘（¾刀 를비교해보았을때， 하이드란제놀의 1記-1생성 억제 능력이 더욱우수하다 는 것을 알수 있었다. 이로써, 실시예 2가자외선으로부터 생성되는 -1 생 성을억제시켜 자외선으로인한피부손상개선에 효과적이라는것을확인하였 다. 실험예 3： 프로콜라겐타입 1의 함량분석
상기 실시예 1또는실시예 2에서 얻은시료에 대하여 진피세포 ¾68 f i 에서 프로콜라겐타입 1을증가시킬수있는지 측정하였다. 물질처리에 따라프로콜라겐타입 1의 분비양이 증가할수 있는지 확인하기 위해, 1.0 X 1 05 061 15八¾1】의 농도로각각의 세포들을 24 -웰 플레이트상에 분주하고 24시 간동안안정화시켰다. 이후각농도시료를 처리한배지로교환하여 24시간동 안배양하였다.
Figure imgf000013_0002
조사하기 위해， 기존배지를제거하고,
Figure imgf000013_0001
세척을한 후 151 八:！ ^으로 내를 처리하였다. 이후시료를 처리한배지를 이용해 48시 간배양후상층액에서
Figure imgf000013_0003
1：^ 뇨크대， 사용하여 프로콜라겐타입 1의 분비 정도를측정하였다.
도 12에 도시된 것과 같이 ,
Figure imgf000013_0004
로부터 손상이 야기된 진피세 포에서 실시예 1의 모든추출물이 프로콜라겐생성량을증가시켰다. 특히 50% 및 70%추출물은단일물질인
Figure imgf000013_0005
프로콜라겐생성 효능이 우수했다（도 12 참조）. 이러한점을고려하였을때, 실시예 1의 모든추출물에 피부탄력에 더욱효과적인유효성분이 있을것이라고판단했다. 도 13에 도시된 것과같 이，
Figure imgf000013_0006
로부터 손상이 야기된 진피세포에서 실시예 2의 하이드란제 놀은프로콜라겐 생성량을증가시켰다. 특히
Figure imgf000013_0007
1나 의 하이드란 제놀은유사한프로콜라겐생성 효과를보였다. 요（¾石가 1011 이라는것을고려 한다면, 낮은농도로도우수한프로콜라겐 생성 효과를나타낼 수 있음을확인 했다. 이로써， 실시예 2가프로콜라겐의 생성을증가시켜 자외선으로부터 분해 된콜라겐섬유들의 재생을도와자외선에 의한피부손상을예방또는개선한 다는것을확인하였다. 2019/124646 실험예 4： 히알우론산 (Hyaluronic Acid)함량분석
상기 실시예 1또는실시예 2에서 얻은시료에 대하여 표피세포 HaCaT k erat inocyte및 진피세포 Hs68 f ibroblast에서 히알우론산을증가시킬수있는 지 측정하였다. 물질처리에 따라히알우론산함량이 증가되는지 확인하기 위해 ， 1.0 X 105cel l s/wel l의 농도로각각의 세포들을 24 -웰플레이트상에 분주하 고 24시간동안안정화시켰다. 이후각농도시료를처리한배지로교환하여 24 시간동안배양하였다. UV-B를조사하기 위해， 기존배지를제거하고， PBS세척 을 한후 15 mJ/cm2으로 UV-B를 처리하였다. 이후시료를 처리한배지를 이용 해 24시간배양후, 상층액에서 TECO® Hyaluroni c Aci d PLUS ELISA Ki t (TE 10 18-2 , TECO medical Group , US)를사용하여 히알우론산의 분비 정도를측정하 였다.
도 14에 도시된 것과 같이， 15mJ/cm2 UV-B로부터 손상이 야기된 표피세 포 및 진피세포에서 실시예 1의 모든추출물이 히알우론산생성량을증가시켰 다. 특히 진피세포에서 대부분의 추출물들이 가장낮은농도에서도우수한히 알우론산 생성 효과를보였다. 도 15에 도시된 것과 같이 , 15mJ/cm2 UV-B로부 터 손상이 야기된 표피세포 및 진피세포에서 실시예 2의 하이드란제놀은히알 우론산생성량을증가시켰다. 특히 l ii M의 하드란제놀에서 우수한히알루론산 생성효과가나타났다. 이로써 실시예 2가히알우론산의 생성을증가시켜 피부 의 보습을도와자외선에 의한피부손상을예방또는개선한다는것을확인하 였다. 제형예 1： 정제의 제조
상기 실시예 2에 대하여 통상의 정제 제조방법에 따라하기 표 1의 성분 을혼합하고타정하여 정제를제조한다.
【표 1]
Figure imgf000014_0001
2019/124646 1»（：1^1{2018/004922 제형예 2： 캡슐제의 제조
상기 실시예 2에 대하여 통상의 캡슐제 제조방법에 따라하기 표 2의 성분을혼합하고젤라틴캡슐에 충전하여 연질캡슐제를제조한다.
【표 2]
Figure imgf000015_0001
제형예 3： 액제의 제조
상기 실시예 2에 대하여 기호에 적합한음료 제조방법에 따라서 하기 표 3의 성분을혼합하고과병 또는파우치에 중전하여 액제를제조한다.
【표 3】
Figure imgf000015_0002
제형예 4： 젤리의 제조
상기 실시예 2에 대하여 기호에 적합한 젤리 제조방법에 따라서 하기 표 4의 성분을혼합하고삼면포에 충전하여 젤리를제조한다.
【표 4]
Figure imgf000015_0003
2019/124646 1»（：1^1{2018/004922
Figure imgf000016_0001
제형예 5 : 영양크림의 제조
상기 실시예 2에 대하여 영양크림을통상의 방법에 따라하기 표 5의 조성으로제조하였다.
【표 5】
Figure imgf000016_0002
상기의 조성비는 일반적으로 적합한성분을 혼합하여 제형예로 조성하 였지만， 필요에 따라서 그배합비 및 원료를임의로변경 실시하여도무방하다 본발명의 추출물은모든 제형예 시험 조건에서 안정하므로 제형의 안 정성에는문제가없었다.
【산업상이용가능성】
이상설명한바와같이, 본원발명의 산수국추출물에서 유래한하이드란 2019/124646 1»（：1/10公018/004922 제놀을함유하는조성물은 대노출에 의해 생성되는■1^1의 분비를감소시키 고， 히알우론산및프로콜라겐의 분비를증가시킴으로써 자외선에 의한피부노 화를방지하고피부탄력을유지시킬수있다. 따라서 본발명의 조성물은약학 ， 식품또는화장품조성물로서 유용하게사용될수있다

Claims

2019/124646 1»（：1^1{2018/004922 【청구의 범위】 【청구항 1】 하기 화학식 1의 하이드란제놀을유효성분으로함유하는자외선에 의한 피부손상예방또는개선용조성물.
[화학식 1]
Figure imgf000018_0001
【청구항 2】
제 1항에 있어서， 상기 피부손상은자외선에 의한인간표피세포 및 진 피세포의 손상인 것을특징으로하는자외선에 의한피부손상예방또는개선 용조성물.
【청구항 3]
제 1항에 있어서， 상기 하이드란제놀은산수국0¾¾^3/7 드 石） 추출 물에서 분리한것을특징으로하는자외선에 의한피부손상예방또는개선용 조성물.
【청구항 4】
제 2항에 있어서, 상기 산수국추출물은물, 유기용매 또는 이들의 혼합 물로이루어진군에서 선택된하나이상의 용매로추출된 것을특징으로하는 자외선에 의한피부손상예방또는개선용조성물.
【청구항 5】
제 1항에 있어서， 상기 하이드란제놀은조성물총중량대비 0.0001내지
10중량%포함하는 것을특징으로하는자외선에 의한피부손상 예방또는개 선용조성물. 2019/124646 1»（：1^1{2018/004922
【청구항 6】
저 11항에 있어서 , 상기 하이드란제놀은자외선에 의해손상된피부세포를 증식시키고， !_?-1의 생성을 감소시키고， 프로콜라겐의 생성을 증가시키고， 히알우론산의 생성을증가시키는것을특징으로하는자외선에 의한피부손상 예방또는개선용조성물.
【청구항 7]
제 1항에 있어서， 상기 조성물은자외선으로부터 자극된 피부의 보습또 는주름개선용으로사용되는 것을특징으로하는자외선에 의한피부손상 예 방또는개선용조성물.
【청구항 8]
제 1항내지 제 7항중어느한항에 있어서， 상기 조성물은정제, 과립제 , 환제， 캡슐제， 액상형， 젤리， 낌으로구성되는군으로부터 선택된하나이상 의 제형을갖는것으로서， 구강섭취용인 것을특징으로하는자외선에 의한 피부손상예방또는개선용조성물.
【청구항 9]
제 1항내지 제 7항중어느한항에 있어서， 상기 조성물은유연화장수， 영양화장수， 영양크림, 수분크림， 스팟， 젤, 로션， 연고로구성된군으로부 터 선택된하나이상의 제형을갖는것으로서, 피부외용제용인 것을특징으로 하는자외선에 의한피부손상예방또는개선용조성물.
【청구항 10】
제 1항내지 제 7항중어느한항에 있어서, 상기 조성물은의약외품, 의 약품, 식품또는화장품조성물인 것을특징으로하는자외선에 의한피부손 상예방또는개선용조성물.
PCT/KR2018/004922 2017-12-19 2018-04-27 하이드란제놀을 유효성분으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물 WO2019124646A1 (ko)

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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102342409B1 (ko) * 2020-03-09 2021-12-23 주식회사 더가든오브내추럴솔루션 수국 전초의 가수분해물 및 그 용도
JPWO2023276942A1 (ko) * 2021-06-28 2023-01-05
KR102450893B1 (ko) * 2022-03-16 2022-10-06 (주)지에프씨생명과학 수국 잎 유래 엑소좀 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 화장료 조성물 및 이의 제조방법

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000007546A (ja) * 1998-06-18 2000-01-11 Yakult Honsha Co Ltd 色素沈着防止剤並びにこれを利用する皮膚化粧料および皮膚外用剤
KR20010057585A (ko) * 1999-12-24 2001-07-04 고바야시 레이지로 피부외용제
JP2003192566A (ja) * 2001-12-27 2003-07-09 Nonogawa Shoji Kk 化粧料
KR20090081178A (ko) * 2008-01-23 2009-07-28 주식회사 사임당화장품 야생화 추출물을 함유하는 화장료 조성물
US20160074315A1 (en) * 2007-11-19 2016-03-17 Stiefel Laboratories, Inc. Topical cosmetic skin lightening compositions and methods of use thereof
KR20170132388A (ko) * 2016-05-23 2017-12-04 코스맥스바이오 주식회사 애기수영 또는 산수국의 추출물을 유효성분으로 함유하는 주름개선 또는 피부미백용 조성물

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000007546A (ja) * 1998-06-18 2000-01-11 Yakult Honsha Co Ltd 色素沈着防止剤並びにこれを利用する皮膚化粧料および皮膚外用剤
KR20010057585A (ko) * 1999-12-24 2001-07-04 고바야시 레이지로 피부외용제
JP2003192566A (ja) * 2001-12-27 2003-07-09 Nonogawa Shoji Kk 化粧料
US20160074315A1 (en) * 2007-11-19 2016-03-17 Stiefel Laboratories, Inc. Topical cosmetic skin lightening compositions and methods of use thereof
KR20090081178A (ko) * 2008-01-23 2009-07-28 주식회사 사임당화장품 야생화 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR20170132388A (ko) * 2016-05-23 2017-12-04 코스맥스바이오 주식회사 애기수영 또는 산수국의 추출물을 유효성분으로 함유하는 주름개선 또는 피부미백용 조성물

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