WO2019124339A1 - 保護機構を具備する脆弱物保持デバイス - Google Patents

保護機構を具備する脆弱物保持デバイス Download PDF

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WO2019124339A1
WO2019124339A1 PCT/JP2018/046483 JP2018046483W WO2019124339A1 WO 2019124339 A1 WO2019124339 A1 WO 2019124339A1 JP 2018046483 W JP2018046483 W JP 2018046483W WO 2019124339 A1 WO2019124339 A1 WO 2019124339A1
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liquid
lid member
cells
fragile
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PCT/JP2018/046483
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涼平 竹内
昭宏 高橋
陽介 車
稔和 竹内
健太 水本
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テルモ株式会社
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Definitions

  • the present invention relates to a fragile object holding device provided with a protection mechanism.
  • a method of applying a sheet-like cell culture prepared by using a temperature-responsive culture dish to which tissue engineering is applied in severe myocardial infarction and the like is applied to the surface of the heart.
  • the method using sheet-like cell culture can safely transplant large amounts of cells in a wide range, and for example, myocardial infarction (including chronic heart failure associated with myocardial infarction), dilated cardiomyopathy, ischemic cardiomyopathy It is particularly useful for the treatment of heart diseases (eg, heart failure, particularly chronic heart failure) accompanied with systolic dysfunction (eg, left ventricular systolic dysfunction).
  • sheet-like cell culture For clinical application of such a sheet-like cell culture, for example, it is necessary to store the prepared sheet-like cell culture in a container together with a storage solution and transfer it to an intensive care unit or the like where transplantation is performed.
  • sheet-like cell cultures have low absolute physical strength and vibrations, which occur when transferring containers, cause wrinkles, breaks, breakages, etc., advanced techniques are required for this transfer operation. , And must pay close attention.
  • Patent Document 1 describes a package for transporting a cultured cell sheet. Since such a package does not move air bubbles in the liquid medium at the time of transportation by excluding the air together with some liquid medium to make it liquid-tight when sealing with a lid, the displacement of the cultured cell sheet occurs. And can be prevented.
  • the storage solution is corrugated by filling the storage solution with the storage solution to the extent that no gas layer is formed and making it liquid-tight. As a result, no vibration is transmitted to the membranous tissue, and breakage of the membranous tissue can be prevented.
  • containers have been developed for safely transferring fragile cell sheets.
  • such a container is designed so as to make the inside of the container liquid tight so that the movement of air bubbles does not occur.
  • the present invention has been made in consideration of these points, and it is an object of the present invention to provide a device capable of achieving a liquid-tight state efficiently by a simple operation and preventing the liquid from being waved during a lid detachment operation. With the goal.
  • a device including a container for containing fragiles, a lid for sealing the containers, and a protective member, wherein the liquid level in the container containing the fragiles and the liquid is a protective member
  • the device wherein the liquid tight space can be formed by covering and further covering the protective member and the opening of the container with a lid.
  • the device according to [1], wherein the protective member and / or the lid member is water-repellent treated.
  • the device according to [1] or [2], wherein the protective member is flexible.
  • [5] The device according to any one of [1] to [4], which can hold the protective member between the lid member and the container.
  • [6] The device according to any one of [1] to [5], having a space for receiving the extruded liquid.
  • the device according to any one of [1] to [6], wherein the fragile substance is a sheet-like cell culture.
  • [8] The device according to [7], wherein the sheet-like cell culture is a laminate.
  • a holding tool comprising a cover member and a base member configured to be able to press and hold the device according to any one of [1] to [8] from above and below.
  • the liquid tight state can be achieved efficiently by a simple mechanism and a simple operation, there are great merits in terms of workability and manufacturing cost.
  • the inside of the container can be completely liquid-tight, the air bubbles (gas) do not enter the container, and the air bubbles do not move in the container due to the shaking of the container during transfer or the like to break fragile materials.
  • the fragile material is a laminate of a sheet-like cell culture, the air bubbles do not move, and the laminate is not displaced or lost. Therefore, the shape of the fragile material in the liquid can be maintained to prevent deformation while being stored for a long time.
  • the device of the present invention can easily release the liquid tight state, for example, it is possible to suppress the occurrence of container vibration and fluid flow due to forcible removal of the operator's lid member, and fragile materials It will not be damaged.
  • the cleanliness is strictly strict, such as bio clean rooms used for producing sheet-like cell cultures and intensive care units where sheet-like cell cultures are used. Suitable for use in controlled locations.
  • FIG. 1 is a cross-sectional view of the device 1 according to the first embodiment.
  • FIG. 2 is a cross-sectional view of a device 1A according to the second embodiment.
  • FIG. 3 is a cross-sectional view of a device 1B according to the third embodiment.
  • FIG. 4 is a perspective view of the holding tool 7 according to the fourth embodiment.
  • FIG. 5 is a perspective view of a holding tool 7A according to a fifth embodiment.
  • FIG. 6 is a perspective view of a holding tool 7B according to a sixth embodiment.
  • the fragile material in the present invention is an object which has low physical strength and may be broken, broken, deformed or the like due to liquid shaking or the like.
  • Examples of the shape of such an object include an object having a thin portion, an object having a band shape, and an object having a sheet shape.
  • An object having such a sheet shape is not particularly limited, but a sheet-like structure, for example, a flat membrane-like membrane structure made of a bio-derived material such as a sheet-like cell culture, plastic, paper, woven fabric, non-woven fabric And films of various materials such as metals, polymers, and lipids. Among these, those which are hard to be decomposed in liquid, those which are not easily disintegrated in liquid and the like are preferable.
  • the sheet-like structure may be polygonal, circular, etc., and the width, thickness, diameter, etc. may or may not be uniform.
  • only one sheet may be used in the form of a single layer, or two or more sheets may be used in the form of a laminate.
  • the layers of the laminate may or may not be connected to each other, and in the case of connection, even if all overlapping portions are connected, they are partially connected. It is also good.
  • fragmentile means, for example, evaluation of tensile properties in a conventional tensile tester (for example, one described in JIS K 7161 etc.) in which the object is fixed to the grip outside the liquid.
  • Such fragile objects include, for example, objects in which each numerical value of tensile properties is small and it is difficult to accurately measure with a conventional tensile tester.
  • Such fragile materials include, for example, those showing a breaking load of less than 10 N (newton), less than 5 N, less than 2 N, less than 1 N, less than 0.5 N, less than 0.1 N, less than 0.05 N in a tensile test.
  • the measurement limit of the conventional tensile test is generally about 1 N as a breaking load
  • those showing a breaking load for example, less than 0.5 N below this are preferable as fragile materials .
  • a graft refers to a fragile substance derived from a living body having relatively low physical strength.
  • Transplants include cultured cells (eg, cell cultures) and harvested cells.
  • the graft may further contain cell-produced products.
  • the graft may contain, in addition to cells and / or cell products, materials (such as a filling material and a support material) for filling and / or supporting a predetermined part of the living body (for example, a diseased part).
  • the implant can have various shapes such as sheet, membrane, lump, and column.
  • the graft is used for transplantation into a living body and the like.
  • the graft examples include three-dimensional cell tissues (organoids, spheroids, etc.), two-dimensional cell tissues (sheet-like cell cultures, etc.) and the like.
  • the sheet-like cell culture refers to cells in which cells are linked to each other to form a sheet.
  • the cells may be linked to each other directly (including via cell components such as adhesion molecules) and / or via an intermediary substance.
  • the mediator is not particularly limited as long as it is a substance capable of at least physically (mechanically) connecting cells to each other, and examples include extracellular matrix and the like.
  • the mediator is preferably of cell origin, in particular from cells constituting the sheet cell culture.
  • the cells are at least physically (mechanically) linked, but may be further functionally linked, for example, chemically or electrically.
  • the sheet-like cell culture may be composed of one cell layer (monolayer) or may be composed of two or more cell layers (multilayer body).
  • the sheet-like cell culture may have a three-dimensional structure having a thickness exceeding a thickness of one cell without showing a clear layer structure of cells.
  • the cells may be present in a non-uniform (for example, mosaic) arrangement without uniformly aligning in the horizontal direction.
  • the sheet-like cell culture may be present as a single (single-sheet) sheet-like cell culture formed independently, or an independent single-sheet-like cell culture may be used. It may be present as a laminate formed by laminating two or more.
  • the laminate is, for example, a laminate in which sheet-like cell cultures are laminated in two layers (two sheets), three layers (three sheets), four layers (four sheets), five layers (five sheets), or six layers (six sheets). It may be the body.
  • the sheet-like cell culture in the present invention is composed of any cells capable of forming the above-mentioned structure.
  • adherent cells include, but are not limited to, adherent cells (adherent cells).
  • adherent cells are, for example, adherent somatic cells (eg, cardiomyocytes, fibroblasts, epithelial cells, endothelial cells, hepatocytes, hepatocytes, pancreatic cells, pancreatic cells, renal cells, adrenal cells, periodontal ligament cells, gingival cells, periosteal cells, skin) Cells, synoviocytes, chondrocytes etc.
  • stem cells eg myoblasts, tissue stem cells such as cardiac stem cells, embryonic stem cells, pluripotent stem cells such as induced pluripotent stem cells, mesenchymal stem cells etc.
  • Somatic cells may be differentiated from stem cells, in particular iPS cells.
  • Non-limiting examples of cells that can form sheet-like cell cultures include, for example, myoblasts (eg, skeletal myoblasts, etc.), mesenchymal stem cells (eg, bone marrow, adipose tissue, peripheral blood, skin, hair roots) Muscle tissue, endometrium, placenta, umbilical cord blood, etc.), cardiomyocytes, fibroblasts, cardiac stem cells, embryonic stem cells, iPS cells, synoviocytes, chondrocytes, epithelial cells (eg, oral mucosal epithelial cells) Cells, retinal pigment epithelial cells, nasal mucosal epithelial cells, etc., endothelial cells (eg, vascular endothelial cells), hepatocytes (eg, hepatic parenchyma cells), pancreatic cells (eg, pancreatic islet cells), renal cells, adrenals Cells, periodontal ligament cells, gingival cells, periosteal cells,
  • the cells can be derived from any organism that can be treated by cell culture. Such organisms include, but are not limited to, for example, humans, non-human primates, dogs, cats, pigs, horses, goats, sheep and the like. In addition, although only one type of cells may be used to form a sheet-like cell culture, two or more types of cells can also be used. In a preferred embodiment of the present invention, when there are two or more types of cells forming a cell culture, the ratio (purity) of the largest number of cells is 65% or more at the end of cell culture production, for example, in the case of skeletal myoblasts Preferably, it is 70% or more, more preferably 75% or more.
  • the sheet-like cell culture in the present invention may be a sheet-shaped culture tissue obtained by seeding and culturing cells on a scaffold (scaffold in cell culture), but preferably the cell culture is constituted It consists only of cell-derived substances and does not contain any other substances.
  • Sheet cell cultures may be produced by any known technique.
  • the sheet-like cell culture is a sheet-like skeletal myoblast culture. This is because the sheet-like skeletal myoblast culture is so fragile that it can be broken by its own weight when grasping a part thereof, so that it can not only be transported by itself conventionally, but it can be returned to its original shape after being folded once. It is very difficult to maintain the shape of the sheet in the liquid.
  • the container is not particularly limited as long as it can contain fragile substances, liquids, etc. and does not leak liquid, and any container can be used including commercially available containers.
  • the material of the container include polyethylene, polypropylene, Teflon (registered trademark), polyethylene terephthalate, polymethyl methacrylate, nylon 6,6, polyvinyl alcohol, cellulose, silicon, polystyrene, glass, polyacrylamide, polydimethyl acrylamide, metal ( Examples include, but are not limited to, iron, stainless steel, aluminum, copper, brass) and the like.
  • the container preferably has at least one flat bottom for maintaining the shape of the fragile material, and examples include, but are not limited to, petri dishes, cell culture dishes, cell culture bottles and the like.
  • the area of the flat bottom is not particularly limited, it is typically 1.13 to 78.5 cm 2 , preferably 12.6 to 78.5 cm 2 , more preferably 9.1 to 60.8 cm 2 . .
  • the liquid in the container is composed of at least one component, and the component is not particularly limited, and is composed of, for example, a liquid such as water, an aqueous solution, a non-aqueous solution, a suspension, or an emulsion.
  • a liquid such as water, an aqueous solution, a non-aqueous solution, a suspension, or an emulsion.
  • the liquid or liquid in the present specification may be any fluid having fluidity as a whole, and may include solid substances such as cell scaffolds and other non-liquid components such as air bubbles.
  • the components constituting the liquid in the container are not particularly limited as long as they have less influence on fragile materials.
  • the fragile material is a membrane made of a biological material
  • the components constituting the liquid in the container are biocompatible, ie, biological tissue or cells, from the viewpoint of biological stability and long-term storability.
  • the agent does not cause an unwanted effect such as an inflammatory response, an immune response, an intoxication response, or at least such an effect is small, for example, water, saline, physiological buffer (eg, HBSS, PBS, EBSS, Hepes) , Sodium bicarbonate etc., medium (eg DMEM, MEM, F12, DMEM / F12, DME, RPMI 1640, MCDB, L15, SkBM, RITC80-7, IMDM etc), sugar solution (sucrose solution, Ficoll-paque (registered) (Trademark) PLUS etc.), seawater, serum-containing solution, Renografin (registered trademark) solution, metrizamide solution, Meg Mince solution, glycerin, ethylene glycol, ammonia, benzene, toluene, acetone, ethyl alcohol, benzol, oil, mineral oil, animal oil, vegetable oil, olive oil, colloid solution, liquid par
  • the components constituting the liquid in the container can stably store the cells, contain the minimum oxygen and nutrients necessary for cell survival, and the like.
  • Those which do not break due to osmotic pressure and the like are preferable, for example, physiological saline, physiological buffer (eg, HBSS, PBS, EBSS, Hepes, sodium bicarbonate etc.), medium (eg, DMEM, MEM, F12, DMEM / F12, DME, RPMI 1640, MCDB, L15, SkBM, RITC80-7, IMDM etc., sugar solutions (sucrose solution, Ficoll-paque PLUS (registered trademark) etc.), etc. may be mentioned, but it is not limited thereto.
  • physiological buffer eg, HBSS, PBS, EBSS, Hepes, sodium bicarbonate etc.
  • medium eg, DMEM, MEM, F12, DMEM / F12, DME, RPMI 1640, MCDB, L
  • the amount of liquid in the container is such that the fragile material can be held with the lid member attached to the container, and the liquid bulk formed between the bottom of the container and the top of the lid member is
  • the height is not particularly limited as long as it does not swing (does not swing) inside. That is, when a space is generated between the liquid level and the lid member, the liquid (liquid level) shakes and fragile materials are easily shaken in the liquid, so that a space is not generated between the liquid level and the lid member. It is preferable to adjust the liquid volume.
  • the diameter of the sheet-like cell culture is about 35-55 mm, and the area is 6 cm 2 or more.
  • the liquid volume is, for example, 1.0 mm to 20.0 mm regardless of the diameter of the sheet-like cell culture.
  • the lid member is not particularly limited as long as it can seal the container.
  • the material of the lid member is, for example, polyethylene, polypropylene, Teflon (registered trademark), polyethylene terephthalate, polymethyl methacrylate, nylon 6,6, polyvinyl alcohol, cellulose, silicon, polystyrene, glass, polyacrylamide, polydimethyl acrylamide, metal Examples thereof include, but are not limited to, iron, stainless steel, aluminum, copper, brass and the like.
  • the shapes of the lid member and the container are not particularly limited as long as the lid member and the container can be engaged and the sealed space can be formed by the engagement.
  • the container is a general purpose petri dish, it is preferable to make the shape of the lid member circular.
  • the lid member and / or the container may be made of a light transmitting material, so that the state of the fragile contained in the container and the presence or absence of air bubbles in the liquid may be confirmed.
  • the fragile material is held in the liquid in the container containing the liquid.
  • the position of the fragile material in the liquid is not particularly limited, but in a state where the lid member is attached to the container to form a sealed space, the lid member is disposed at a position where the lid member does not contact (or contact with) Good).
  • the fragile material is disposed on the bottom surface of the container, near the bottom surface, etc. in the liquid of the container.
  • water repellent finish refers to processing the solid surface so that the contact angle between the liquid surface and the solid surface is 90 ° or more at the boundary where the solid surface and the liquid contact. It means that.
  • the contact angle is close to 180 °, and since the droplets become almost spherical, it is between solid surfaces subjected to water repellency processing. Even if the liquid intervenes, the individual surfaces do not stick.
  • water repellent method examples include a coating method in which a resin such as Teflon (registered trademark), silicon, a fluorine-based water repellent, wax, alumina soap, pyridinium salt, or seratin is attached to a solid surface. Further, as in the case of super water repellent finish, the solid surface may be textured without using a coating agent, such as forming irregularities on the solid surface by laser processing or the like.
  • One aspect of the present invention is a device including a container for containing fragile material, a lid member for sealing the container, and a protective member, and a liquid surface in the container containing fragile material and liquid.
  • the device is capable of forming a fluid-tight space by covering the protective member with a protective member and further covering the opening of the protective member and the container with a lid member.
  • FIG. 1 is a cross-sectional view of a device 1 according to a first embodiment of the present invention
  • FIG. 2 is a cross-sectional view of a device 1A according to a first modification of the first embodiment
  • FIG. 3 is a first embodiment of the first embodiment. It is sectional drawing of device 1B concerning 2 modifications.
  • the sizes of the respective members are appropriately emphasized in order to facilitate the description, and the illustrated members do not indicate actual sizes.
  • the device 1 includes a container 2, a lid member 3 for sealing the container 2, and a protective member 4.
  • the container 2 has the shape of a general-purpose petri dish having an edge 21 surrounding the opening, and constitutes a storage space capable of storing the fragile object S and the like.
  • the lid member 3 includes a cylindrical skirt wall 36 depending from the periphery of the top plate portion 32 and the top plate portion 32 and a female screw portion 35 provided on the inner circumferential surface of the cylindrical skirt wall 36.
  • the female screw portion 35 can be screwed with the male screw portion 25 provided on the outer peripheral surface of the container 2, and the lid member 3 can be screwed to the container 2.
  • the diameter of the protective member 4 is larger than the diameter of the edge 21 of the container 2, and the protective member 4 is a fluid impermeable plate-like member capable of covering the opening of the container 2.
  • the protective member 4 and the lid member 3 are water-repellent treated.
  • the container 2 when using the device 1, the container 2 contains the liquid L and the fragile material S. At this time, a convex surface is formed on the liquid surface by the surface tension of the liquid L by further adding the liquid L in a state where the container 2 is filled with the liquid L (FIG. 1A).
  • the protective member 4 is placed on the liquid surface in an inclined state, and the convex surface is pressed and crushed to be in close contact with the edge 21 while being horizontal.
  • the inclined protective member 4 exerts buoyancy on the bubble, and the bubble can be reliably pushed out.
  • the protective member 4 is held by covering the protective member 4 and the container 2 with the lid member 3 to form a liquid-tight state in the container 2.
  • the fluid impermeable protective member 4 blocks the gas, so air bubbles enter the container 2 and become fragile. There is no such thing as hurting the object S.
  • the lid member 3 When the fragile object S is used, the lid member 3 is removed from the container 2, but at this time, the protective member 4 and the lid member 3 are subjected to water repellent treatment, so the protective member 4 sticks to the lid member 3 There is no Therefore, even if the lid member 3 is removed from the container 2, the protective member 4 can maintain the liquid-tight state in the container 2. Next, the protective member 4 can be easily removed from the container 2 by sliding the protective member 4 in the horizontal direction to release the liquid tight state and removing it. That is, when there is no protective member 4 between the lid member 3 and the container 2, the lid member 3 and the liquid surface are in direct contact with each other, and when the lid member 3 is removed pull.
  • the lid member 3 when the lid member 3 is removed from the container 2 in a liquid-tight state, a rapid force is applied to the lid member 3, so that the liquid surface may be corrugated and the fragile material may be broken.
  • the protective member 4 functions as a protective mechanism that protects the liquid surface.
  • the liquid tight state can be achieved efficiently by a simple mechanism and a simple operation, a great merit is obtained in terms of workability and manufacturing cost. is there.
  • the inside of the container can be completely liquid-tight, the air bubbles (gas) do not enter the container, and the air bubbles do not move in the container due to the shaking of the container during transfer or the like to break fragile materials.
  • the fragile material is a laminate of a sheet-like cell culture, the air bubbles do not move, and the laminate is not displaced or lost. Therefore, the shape of the fragile material in the liquid can be maintained to prevent deformation while being stored for a long time.
  • the vibration of the container and the flow of the liquid due to the worker's unreasonable removal of the lid member Can prevent the occurrence of damage and do not damage fragile materials.
  • a device 1A includes a container 2A, a lid member 3A for sealing the container 2A, and a protective member 4A.
  • the container 2A has the shape of a general purpose petri dish having an edge 21 surrounding an opening, and has a cylindrical wall 26 protruding upward at the bottom.
  • the inner side of the cylindrical wall 26 of the container 2A forms an accommodation space capable of accommodating the fragile object S and the like.
  • the height of the cylindrical wall 26 is the same as the height of the edge 21 of the container 2A, and both the edge 21 of the container 2A and the edge of the cylindrical wall 26 when the lid member 3A is attached to the container 2A.
  • the diameter of the protective member 4A is smaller than the diameter of the edge 21 of the container 2A and larger than the diameter of the edge of the cylindrical wall 2.
  • the protective member 4A is in the form of a flexible film, and the inner surface of the lid member 3A is water-repellent treated.
  • the liquid L and the fragile material S are accommodated inside the cylindrical wall 26 of the container 2A.
  • a convex surface is formed on the liquid surface by the surface tension of the liquid L by further adding the liquid L in a state where the accommodation space is filled with the liquid L (FIG. 2A).
  • the protective member 4A is placed on the liquid surface, and the convex surface is crushed and crushed to be in close contact with the edge 21 while being horizontal.
  • the protective member 4A is in the form of a film, and can be placed slowly on the liquid surface, so that the liquid does not wave.
  • the convex portion of the liquid L pushed out by the protection member 4A is received in the space G outside the cylindrical wall 26 of the container 2A, it does not contaminate the surroundings, and the protection member 4A and the lid member 3A Since the liquid L does not enter between them, the protective member 4A does not stick to the inside of the lid member 3A when the lid member 3A is removed. Furthermore, since the cover member 3A can be screwed to the container 2A, and the protective member 4A can be held between the cover member 3A and the container 2A with a strong force, liquid tightness in the storage space can be maintained. The liquid L in the space G does not leak out.
  • the lid member 3A When the fragile object S is used, the lid member 3A is removed from the container 2A. At this time, since the plurality of irregularities are formed on the inner surface of the lid member 3A, the protective member 4A sticks to the inside of the lid member 3A. There is no Therefore, even if the lid member 3A is removed from the container 2A, the protective member 4A can maintain the liquid tight state in the container 2A. Next, by rolling off the protective member 4A from the liquid surface so as to wind it up, by making the contact area with the liquid surface gradually smaller, it is possible to minimize the waving of the liquid surface.
  • the lid member 3A when the inner surface and the liquid surface of the lid member 3A are in contact with each other, the lid member 3A is pulled to the liquid surface when removing it, and a repulsive force is generated at the moment the lid member 3A is removed. Vibration occurs.
  • the protective member 4A when the protective member 4A is interposed, the vibration is not transmitted to the fragile object S because the protective member 4A protects the liquid surface.
  • an elastic seal member for example, a packing ring or the like
  • the liquid tight state can be achieved efficiently by a simple mechanism and a simple operation, a great merit is obtained in terms of workability and manufacturing cost. is there.
  • the inside of the container can be completely liquid-tight, the air bubbles (gas) do not enter the container, and the air bubbles do not move in the container due to the shaking of the container during transfer or the like to break fragile materials.
  • the fragile material is a laminate of a sheet-like cell culture, the air bubbles do not move, and the laminate is not displaced or lost. Therefore, the shape of the fragile material in the liquid can be maintained to prevent deformation while being stored for a long time.
  • the liquid tight state can be easily released, for example, the vibration of the container and the flow of the liquid due to the worker's unreasonable removal of the lid member Can prevent the occurrence of damage and do not damage fragile materials.
  • a device 1B includes a container 2B, a lid member 3B for sealing the container 2B, and a protective member 4B.
  • the container 2B is a bottomed cylindrical container including an upper portion 22 and a lower portion 23, and the lower portion 23 constitutes a space that can accommodate the fragile object S and the like.
  • the inner diameter of the upper portion 22 is larger than the inner diameter of the lower portion 23, and the stepped portion 24 is provided at the boundary between the upper portion 22 and the lower portion 23.
  • the lid member 3B has a convex portion 31 projecting downward from the top plate 32.
  • the protective member 4B is sandwiched between the convex portion 31 and the step portion 24, and a packing ring R for improving adhesion is provided between the protective member 4B and the step portion 24.
  • the protective member 4B is provided with a plurality of small holes, and can transmit the liquid L.
  • a packing ring R ′ having a U-shaped cross section is provided between the edge 21 of the container 2B and the lid member 3B to absorb vertical and horizontal dimensional errors of the device 1B. Can.
  • the container 2B when using the device 1B, the container 2B contains the liquid L and the fragile material S. At this time, the liquid L is filled to a height exceeding the step portion 24 and the protection member 4B is placed on the step portion 24 while being inclined. Next, the lid member 3B is screwed to the container 2B, and the protective member 4B is held between the convex portion 31 and the step portion 24 of the container 2B. Then, by pressing the protective portion 4B with the convex portion 31, the packing ring R interposed between the protective portion 4B and the step portion 24 is crushed, and the liquid tight state formed in the lower portion 23 of the container 2B is enhanced.
  • the liquid L extruded by the convex portion 31 is received in the space G between the upper portion 22 of the container 2B and the convex portion 31.
  • the lid member 3B is removed from the container 2B, but since the protective member 4B is provided with a plurality of small holes and surface tension does not occur between the protective member 4B and the lid member 3B, The member 4B does not stick to the inside of the lid member 3B. Further, when the lid member 3B is removed, the lower portion 23 and the upper portion 22 space of the container 2B communicate with each other through the plurality of small holes of the protective member 4B, that is, the liquid tight state is released. It is possible to take out vulnerable materials.
  • the liquid tight state can be achieved efficiently by a simple mechanism and a simple operation, so a great merit is obtained in terms of workability and manufacturing cost. is there.
  • the air bubbles gas
  • the air bubbles do not enter the container, and the air bubbles do not move in the container due to the shaking of the container during transfer or the like to break fragile materials.
  • the fragile material is a laminate of a sheet-like cell culture, the air bubbles do not move, and the laminate is not displaced or lost. Therefore, the shape of the fragile material in the liquid can be maintained to prevent deformation while being stored for a long time.
  • the liquid tight state can be easily released, for example, the vibration of the container and the flow of the liquid due to the worker's unreasonable removal of the lid member Can prevent the occurrence of damage and do not damage fragile materials.
  • lids 3, 3A, 3B, the containers 2, 2A, 2B and the protective members 4, 4A, 4B in the first to third embodiments can be freely combined.
  • each configuration may be replaced with any one capable of performing the same function, or any configuration may be added.
  • the use of fragile materials using the device of the present invention can be performed sequentially, for example, by the following steps. (1) Contain liquid and fragile materials in a container. (2) Protect the liquid level of the container with a protective member. (3) Cover the container with a lid member to form a liquid tight state. (4) Transport the device. (5) Remove the lid member to release the fluid tight state. (6) Remove the protective member. (7) Take out fragile materials and use them.
  • FIG. 4 is a perspective view of the holding tool 7 according to the fourth embodiment of the present invention
  • FIG. 5 is a perspective view of the holding tool 7A according to the fifth embodiment of the present invention
  • FIG. 6 is a sixth embodiment of the present invention It is a perspective view of clamping tool 7B which concerns on a form.
  • the sizes of the respective members are appropriately emphasized in order to facilitate the description, and the illustrated members do not indicate actual sizes. Also,
  • the holding tool 7 includes a base member 8 and a cover member 9.
  • the holding tool 7 can press and hold the device including the container (not shown) and the lid member (not shown) for sealing the container from above and below.
  • the base member 8 and the cover member 9 both have a circular shape, and can properly press the device from above and below.
  • the base member 8 includes an opening 81, a bottom 82, a screwing portion (engaging portion) 83, a placement portion 84, and a protruding portion 85.
  • the engagement is screwing.
  • the mounting unit 84 has a mounting surface on which the container can be mounted on the upper surface, and an opening 81 is provided in the central portion.
  • the placement unit 84 has an annular ridge 85 (an elongated ridge) surrounding the lower end of the container when the container is placed on the placement surface, and can define the installation position of the container with respect to the base member 8 .
  • the mounting portion 84 has a disk shape protruding upward from the bottom portion 82, and a screwing portion 83 is provided on the side circumferential surface thereof.
  • the bottom portion 82 has an outer diameter larger than the outer diameter of the mounting portion 84, and serves as a bottom portion when the base member 8 is installed on a table or the like.
  • the cover member 9 includes an opening 91, a top portion 92, a screwing portion (engaging portion) 93, a cylindrical skirt wall 94 and a grip portion 95.
  • the top portion 92 has a cover surface capable of covering the upper surface of the lid member, and an opening 91 is provided in the central portion.
  • the top portion 92 includes a tubular skirt wall 94 depending from the periphery of the top portion 92, and the top portion 92, the tubular skirt wall 94 and the placement portion 84 can sandwich and hold the device.
  • a screwing portion 93 (not shown) is provided on the inner peripheral surface of the lower end portion of the cylindrical skirt wall 94, and the cover is obtained by screwing the screwing portion 93 with the screwing portion 83 of the base member 8.
  • the member 9 can be screwed onto the base member 8.
  • the installation position of the lid member relative to the holding member 7 by matching the inner diameter of at least a part of the cylindrical skirt wall 94 (for example, the inner peripheral surface of the upper end of the cylindrical skirt wall 94) with the outer diameter of the lid member. can also be defined.
  • the lid member When using the holding tool 7, the lid member is put on the container in which the content S is stored. At this time, a liquid-tight space can be formed by covering the lid member in a state where the inside of the container is filled with the liquid L, as needed. Also, optionally, a sealing member (not shown) may be interposed at a suitable position between the container and the lid member to enhance the sealing performance.
  • the container is installed on the base member 8, and at this time, the container can be positioned at the center of the mounting portion 84 by using the protruding portion 85. Further, the screwing portion 83 of the base member 8 is provided on the lower side than the mounting portion 84, that is, the screwing portion 83 does not have a structure surrounding the side surface of the container.
  • the cover member 9 is attached to the base member 8.
  • the lid member can be positioned at the center of the cover member 9 (and the base member 8) by utilizing the cylindrical skirt wall 94.
  • the clamping tool 7 can define the relative position between the container and the lid member using the ridge portion 85 of the base member 8 and the cylindrical skirt wall 94 of the cover member 9.
  • the screwing portion 83 of the base member 8 and the screwing portion 93 of the cover member 9 are screwed together.
  • the grip portion 95 provided as a projecting portion (or a groove portion) on the outer peripheral surface of the cylindrical skirt wall 94, the container and the lid member are subjected to a strong force from above and below.
  • Can be tightened with This is suitable, for example, for use in the case where the container is a container not having a threaded portion such as a general purpose petri dish, and has high versatility.
  • the female screw 35 and the male screw 25 may be omitted so that the lid member is not rotated (screwed) in the container.
  • the protective force interposed between the container and the lid member is particularly advantageous because the rotational force of the lid member is not applied.
  • the seal member is advantageously compressed between the container and the lid member whose relative position is accurately determined, and the sealing performance is enhanced.
  • the cover member 9 may be screwed by the height of the screwing portion 83 of the base member 8, and the holding operation is easy, and the holding pressure can be easily adjusted. Can be prevented.
  • both the base member 8 and the cover member 9 have the opening 81 and the opening 91 at the central portion, the fixed position of the device and the state of the liquid L and the container S contained in the device It can be observed constantly.
  • This is particularly advantageous when the container and the lid are made of a light transmissive material.
  • the fragile material is a low visibility such as a sheet-like cell culture, it is advantageous because light can be emitted from one opening and the sheet-like cell culture can be viewed from the other opening. .
  • the device is transferred, but since the device is firmly held by the holding tool 7, problems such as the lid member coming out of the container due to shaking during transfer can be prevented, and the periphery is surrounded by the holding tool 7. It is protected from external shocks. Finally, the clamp 7 is removed from the device at the transfer destination and used.
  • the screwing portion 83 and the screwing portion 93 are in slide engagement (see, for example, JP 2006-315757), flange fitting (see, eg, JP 2006-001582), and protrusion engagement (eg, JP Other engaging means having a function of pressing the device from the up and down direction can be replaced, such as 2016-203985).
  • the annular ridge 85 can be replaced by other means capable of positioning the container on the mounting surface, such as a plurality of annularly arranged projections.
  • fragile materials for example, a laminate of sheet-like cell cultures
  • the container is liquid-tight by transferring the inside of the container while transferring the shape of the fragile materials. It can also be done.
  • the holding tool 7A includes a base member 8A and a cover member 9A.
  • the base member 8A further includes a projecting wall 86, a groove 87, and a notch 88.
  • the protruding wall 86 is a wall provided on the outer side of the protruding portion 85 and protruding from the mounting portion 84 beyond the height of the container.
  • a groove portion 87 is provided on the lower surface of the bottom portion 82 of the base member 8A, and when the base member 8A is installed on a table or the like, the base member 8A can be prevented from sticking to the work surface.
  • the container (not shown) is positioned at the center of the base member 8 by using the protruding portion 85.
  • the lid member can be positioned at the center of the base member 8 by placing the lid member along the projecting wall 86. That is, the worker can define the relative position between the container and the lid member using the projection 85 and the projection wall 86 of the base member 8A. This is advantageous because the seal member can be pressed accurately, particularly when an annular seal member is interposed between the container and the lid member.
  • a device (not shown) is held, and at this time, it is provided on the side surface of the grip portion 95 configured as a projecting portion radially projecting from the cover member 9A and the bottom portion 82 of the base member 8A.
  • the screwing operation can be easily performed.
  • the cover member 9A is unscrewed and the device is removed from the base member 8A.
  • the device since the device is exposed from the gaps of the plurality of projecting walls 86, the device can be easily grasped . Further, since the plurality of projecting walls 86 are arranged to surround the container, the lid member can be accurately positioned relative to the container.
  • the holding tool 7B includes a cover member (not shown) and a base member 8B.
  • the base member 8B includes a mounting portion 84B, a protruding portion 85B and a protruding wall 86B (the description of the other configuration is omitted).
  • the protruding portion 85B is disposed on the mounting portion 84B in a semicircular shape.
  • the projecting wall 86B is disposed in a semi-annular shape on the outer side of the projecting portion 85B, and a notch (a gap) C is provided in a part (a plurality of projecting walls 86B is provided in a semi-annular gap May be placed). That is, in the present embodiment, one half of the mounting surface of the mounting portion 84B (the opposite half of the protruding portion 85B and the protruding wall 86B) is configured as a flat surface.
  • the container When using the holding tool 7B, the container (not shown) is slid in the lateral direction (the direction of the protrusion 85B and the protrusion wall 86B) from the opposite side of the protrusion 85B and the protrusion wall 86B. Install. At this time, by sliding the container on the flat surface of the mounting portion 84B, careless vibration of the container can be suppressed.
  • the lid member (not shown) is attached to the container. At this time, the lid member can be accurately positioned relative to the container by pressing the lid member against the projecting wall 86B of the base member 8B. .
  • the device When using the device (not shown), the device is removed from the base member 8A, but by pushing the side of the device (container and / or lid member) exposed from the notch C, the device is removed Can be removed by sliding it on a flat surface.
  • a projection 89 serving as a mark may be provided on the side facing the notch C on the mounting portion 84B.
  • the device 1 can be accurately positioned on the mounting portion 84B simply by sliding the device 1 between the projection 89 and the notch C.
  • the projection 89 is disposed on the extension of the projection 85B so as to face the notch C, and the side of the device 1 is engaged by the projection 89, so that the device 1 is displaced. It can also be avoided.
  • the container and the lid can be brought into close contact with each other efficiently by a simple mechanism and a simple operation.
  • the contents in the container can be visually recognized from the outside, the state of the contents and the contamination of foreign matter can be easily confirmed.
  • the relative positional relationship between the container and the lid member can be accurately matched, the sealing performance is enhanced. In particular, in the case where an elastic seal member is interposed between the container and the lid member, the seal member can be pressed accurately, so the sealing performance is further enhanced.
  • the holding tool of the present invention since the container and the lid member can be reliably brought into close contact with each other and fixed, it is possible to prevent problems such as the lid member being detached from the container during transfer.
  • the contained material is a laminate of sheet-like cell cultures
  • the inside of the container can be reliably transported in a liquid tight state, and air bubbles enter the container and move, causing the laminate to be dislocated or defective. Can be prevented, and can be stored for a long time while maintaining its shape to prevent deformation.
  • the present invention is not limited to the above embodiments, and those skilled in the art can combine various configurations and shapes by suitably combining the configurations and the configurations of the clamps according to the above fourth to sixth embodiments. Can be realized.
  • the cover member 9 or the cover member 9A may be combined with the base member 8, the base member 8A or the base member 8B, or the projection 85, the projection 85B, the projection wall 86 or the projection wall 86B. You may combine with the base member 8, the base member 8A, or the base member 8B.
  • each configuration may be replaced with any one capable of performing the same function, or any configuration may be added.

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Abstract

本発明の目的は、液体中の脆弱物の形状を安定的に保持するための手段を提供することにある。本発明は、脆弱物を収容するための容器と、容器を密閉するための蓋部材と、保護部材とを含む、デバイスであって、脆弱物および液体を収容した容器内の液面を保護部材で覆い、さらに保護部材および容器の開口部を蓋部材で覆うことで液密空間を形成することができる、前記デバイスに関する。

Description

保護機構を具備する脆弱物保持デバイス
　本発明は、保護機構を具備する脆弱物保持デバイスに関する。
　近年、重症心不全治療の解決策として新しい再生医療の開発が進められている。その一例として、重症心筋梗塞等において組織工学を応用した温度応答性培養皿を用いて作製したシート状細胞培養物を心臓表面に適用する手法などが試みられている。シート状細胞培養物を用いる手法は、大量の細胞を広範囲に安全に移植することが可能であり、例えば、心筋梗塞（心筋梗塞に伴う慢性心不全を含む）、拡張型心筋症、虚血性心筋症、収縮機能障害（例えば、左室収縮機能障害）を伴う心疾患（例えば、心不全、特に慢性心不全）などの治療にとくに有用である。
　このようなシート状細胞培養物を臨床応用するには、例えば、作製されたシート状細胞培養物を保存液と共に容器内に収容し、移植が行われる集中治療室などに移送する必要がある。しかしながら、シート状細胞培養物は絶対的な物理的強度が低く、容器を移送する際などに生じる振動で、皺、破れ、破損などが生じることから、この移送作業には高度な技術が要求され、かつ細心の注意を払う必要がある。
　このようなニーズに応えるために、種々の方法や容器が開発されている。たとえば、下記特許文献１には、培養細胞シートを運搬するための包装体が記載されている。かかる包装体は、リッドで密封する際に若干の液体培地と共に空気を排除して液密にすることによって、運搬時に液体培地中を気泡が移動したりすることがないため、培養細胞シートのズレや欠損を防止できるようになっている。
　さらに、下記特許文献２に記載された膜状組織の保存輸送容器は、収容部内を気体層が形成されることがない程度に保存液で満たして液密にすることで、保存液が波打ったり流動したりせず、結果的に、膜状組織に振動が伝わらず、膜状組織の破損を防止できるようになっている。
特開２００９－８９７１５号公報 特開２０１２－１３０３１１号公報
　上述のように脆弱な細胞シートを安全に移送するための容器が開発されている。またこのような容器は、容器内を液密にして気泡の移動が起こらないような工夫がなされている。
　しかしながら、容器内から完全に気泡を取り除いて液密状態を達成するには高度な技術が要求される。また、液密状態の容器から蓋を取り外すには強い力が必要なため、蓋の脱着の際に液体が波打ち、細胞シートを破損させてしまうことがある。
　本発明はこのような点を考慮してなされたものであり、簡単な作業で効率よく液密状態を達成でき、蓋の脱着作業中の液体の波打ちを防止することができるデバイスを提供することを目的とする。
　すなわち本発明は、以下に関する。
［１］脆弱物を収容するための容器と、容器を密閉するための蓋部材と、保護部材とを含む、デバイスであって、脆弱物および液体を収容した容器内の液面を保護部材で覆い、さらに保護部材および容器の開口部を蓋部材で覆うことで液密空間を形成することができる、前記デバイス。
［２］保護部材および／または蓋部材に撥水加工が施されている、［１］に記載のデバイス。
［３］保護部材が可撓性を有する、［１］または［２］に記載のデバイス。
［４］保護部材が流体不透過性である、［１］～［３］のいずれかに記載のデバイス。
［５］蓋部材と容器とで保護部材を挟持することができる、［１］～［４］のいずれかに記載のデバイス。
［６］押し出された液体を受容する空間を有する、［１］～［５］のいずれかに記載のデバイス。
［７］脆弱物がシート状細胞培養物である、［１］～［６］のいずれかに記載のデバイス。
［８］シート状細胞培養物が、積層体である、［７］に記載のデバイス。
［９］［１］～［８］のいずれかに記載のデバイスを上下から押圧して挟持できるように構成されているカバー部材とベース部材とを含む、挟持具。
　本発明のデバイスによれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よく液密状態を達成することができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。そして、容器内を完全に液密状態にできるため、気泡（気体）が容器内にはいらず、移送中の容器の揺れなどによって気泡が容器内で動いて脆弱物を破損することがない。特に、脆弱物がシート状細胞培養物の積層体である場合に、気泡が移動して、積層体がズレたり欠損したりすることがない。したがって、液体中の脆弱物の形状を保持して変形を防止しつつ、長期保存することができる。
　本発明のデバイスは、液密状態を簡単に解除することができるため、例えば、作業者の蓋部材の無理な取り外しによる、容器の振動や液体の流動の発生を抑えることができ、脆弱物を破損することがない。また、周囲を汚染することなく作業を行うことができるため、シート状細胞培養物の作製に使用されるバイオクリーンルームや、シート状細胞培養物が使用される集中治療室など、清浄度が厳密に管理されている場所での使用に適している。
図１は、第１実施形態に係るデバイス１の断面図である。 図２は、第２実施形態に係るデバイス１Ａの断面図である。 図３は、第３実施形態に係るデバイス１Ｂの断面図である。 図４は、第４実施形態に係る挟持具７の斜視図である。 図５は、第５実施形態に係る挟持具７Ａの斜視図である。 図６は、第６実施形態に係る挟持具７Ｂの斜視図である。
　本発明における脆弱物とは、物理的強度が低く、液体の揺れなどによって、破れ、破損、変形などが生じ得る物体をいう。かかる物体の形状としては、薄肉部を有する物体、帯形状を有する物体、シート形状を有する物体などが挙げられる。かかるシート形状を有する物体としては、とくに限定されないが、シート状構造物、例えば、シート状細胞培養物などの、生体由来材料からなる平膜状の膜組織や、プラスチック、紙、織布、不織布、金属、高分子、脂質といった種々の材質のフィルム等が含まれる。これらのうち、液体中で難分解性のもの、液体中で難崩壊性のものなどが好ましい。シート状構造物は、多角形や円形などであってもよく、幅、厚み、直径などは一様であってもなくてもよい。本発明におけるシート状構造物は、１枚のみを単層の状態で使用してもよいし、２枚以上を重ねた積層体の状態で使用してもよい。後者の場合、積層体の各層は互いに連結していても、連結していなくてもよく、連結している場合は、重なり合っている部分が全て連結していても、部分的に連結していてもよい。また、本発明において脆弱とは、例えば、液体外で物体のつかみ具への固定がなされる従来の引張試験機（例えば、JIS K 7161等に記載のもの）での引張特性の評価が、その脆弱性のために困難であるか、実質的に不可能であることを指す。かかる脆弱な物体としては、例えば、引張特性の各数値が小さく、従来の引張試験機では正確に測定することが困難な物体などが挙げられる。かかる脆弱物としては、引張試験において、例えば、１０Ｎ（ニュートン）未満、５Ｎ未満、２Ｎ未満、１Ｎ未満、０．５Ｎ未満、０．１Ｎ未満、０．０５Ｎ未満の破断荷重を示すものが挙げられる。また、従来の引張試験の測定限界は、破断荷重として一般に１Ｎ程度であるため、本発明の一態様においては、これを下回る破断荷重（例えば、０．５Ｎ未満）を示すものが脆弱物として好ましい。
　本発明において、移植片とは、比較的に物理的強度が低い生体由来の脆弱物をいう。移植片は培養した細胞（例えば細胞培養物など）や採取された細胞を含む。移植片はさらに細胞が産生した産生物を含むことがある。移植片は細胞および／または細胞の産生物のほかに、生体の所定部（例えば患部等）を補填および／または支持するための材料（補填材料や支持材料）なども含むことができる。移植片はシート状、膜状、塊状、柱状等の種々の形状をとることができる。移植片は生体への移植などに用いられる。移植片の一例としては、３次元細胞組織（オルガノイド、スフェロイド等）、２次元細胞組織（シート状細胞培養物等）などが挙げられる。
　本発明において、シート状細胞培養物とは、細胞が互いに連結してシート状になったものをいう。細胞同士は、直接（接着分子などの細胞要素を介するものを含む）および／または介在物質を介して、互いに連結していてもよい。介在物質としては、細胞同士を少なくとも物理的（機械的）に連結し得る物質であれば特に限定されないが、例えば、細胞外マトリックスなどが挙げられる。介在物質は、好ましくは細胞由来のもの、特に、シート状細胞培養物を構成する細胞に由来するものである。細胞は少なくとも物理的（機械的）に連結されるが、さらに機能的、例えば、化学的、電気的に連結されてもよい。シート状細胞培養物は、１の細胞層から構成されるもの（単層）であっても、２以上の細胞層から構成されるもの（多層体）であってもよい。また、シート状細胞培養物は、細胞が明確な層構造を示すことなく、細胞１個分の厚みを超える厚みを有する３次元構造を有してもよい。例えば、シート状細胞培養物の垂直断面において、細胞が水平方向に均一に整列することなく、不均一に（例えば、モザイク状に）配置された状態で存在していてもよい。シート状細胞培養物は、独立して形成された単一の（一枚の）シート状細胞培養物として存在してもよく、また独立した単一の（一枚の）シート状細胞培養物が二以上積層されて形成された積層体として存在してもよい。積層体は、例えばシート状細胞培養物が２層（２枚）、３層（３枚）、４層（４枚）、５層（５枚）、または６層（６枚）積層された積層体であってよい。
　本発明におけるシート状細胞培養物は、上記の構造を形成し得る任意の細胞から構成される。かかる細胞の例としては、限定されずに、接着細胞（付着性細胞）を含む。接着細胞は、例えば、接着性の体細胞（例えば、心筋細胞、線維芽細胞、上皮細胞、内皮細胞、肝細胞、膵細胞、腎細胞、副腎細胞、歯根膜細胞、歯肉細胞、骨膜細胞、皮膚細胞、滑膜細胞、軟骨細胞など）および幹細胞（例えば、筋芽細胞、心臓幹細胞などの組織幹細胞、胚性幹細胞、ｉＰＳ（induced pluripotent stem）細胞などの多能性幹細胞、間葉系幹細胞等）などを含む。体細胞は、幹細胞、特にｉＰＳ細胞から分化させたものであってもよい。シート状細胞培養物を形成し得る細胞の非限定例としては、例えば、筋芽細胞（例えば、骨格筋芽細胞など）、間葉系幹細胞（例えば、骨髄、脂肪組織、末梢血、皮膚、毛根、筋組織、子宮内膜、胎盤、臍帯血由来のものなど）、心筋細胞、線維芽細胞、心臓幹細胞、胚性幹細胞、ｉＰＳ細胞、滑膜細胞、軟骨細胞、上皮細胞（例えば、口腔粘膜上皮細胞、網膜色素上皮細胞、鼻粘膜上皮細胞など）、内皮細胞（例えば、血管内皮細胞など）、肝細胞（例えば、肝実質細胞など）、膵細胞（例えば、膵島細胞など）、腎細胞、副腎細胞、歯根膜細胞、歯肉細胞、骨膜細胞、皮膚細胞等が挙げられる。本明細書においては、単層の細胞培養物を形成するもの、例えば、筋芽細胞または心筋細胞などが好ましく、とくに好ましくは骨格筋芽細胞またはｉＰＳ細胞由来の心筋細胞である。
　細胞は、細胞培養物による治療が可能な任意の生物に由来し得る。かかる生物には、とくに限定されないが、例えば、ヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ブタ、ウマ、ヤギ、ヒツジなどが含まれる。また、シート状細胞培養物の形成に用いる細胞は１種類のみであってもよいが、２種類以上の細胞を用いることもできる。本発明の好ましい態様において、細胞培養物を形成する細胞が２種類以上ある場合、最も多い細胞の比率（純度）は、細胞培養物製造終了時において、例えば骨格筋芽細胞の場合、６５％以上、好ましくは７０％以上、より好ましくは７５％以上である。
　本発明におけるシート状細胞培養物は、スキャフォールド（細胞培養時の足場）に細胞を播種し、培養することによって得られるシート形状の培養組織などでもよいが、好ましくは、細胞培養物を構成する細胞由来の物質のみからなり、それら以外の物質を含まない。
　シート状細胞培養物は、任意の既知の手法によって製造されたものであってよい。
　本発明の一態様において、シート状細胞培養物は、シート状骨格筋芽細胞培養物である。これは、シート状骨格筋芽細胞培養物は、その一部をつかむと自重で破断するほど脆弱であるがゆえに、従来単体で移送することができないばかりか、一度折り重なると元の形状に戻すことが極めて困難なため、液中でシート形状を維持することに大きな意義があるからである。
　本発明において、容器は、内部に脆弱物、液体などを収容でき、液体が漏出しないものであればとくに限定されず、市販の容器を含む任意のものを用いることができる。容器の材料としては、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、テフロン（登録商標）、ポリエチレンテレフタレート、ポリメチルメタクリレート、ナイロン６，６、ポリビニルアルコール、セルロース、シリコン、ポリスチレン、ガラス、ポリアクリルアミド、ポリジメチルアクリルアミド、金属（例えば、鉄、ステンレス、アルミニウム、銅、真鍮）等が挙げられるがこれに限定されない。また、容器は、脆弱物の形状を維持するための少なくとも１つの平坦な底面を有することが好ましく、例えば、シャーレ、細胞培養皿、細胞培養ボトルなどが挙げられるがこれに限定されない。平坦な底面の面積は、特に限定されないが、典型的には、１．１３～７８．５ｃｍ２、好ましくは１２．６～７８．５ｃｍ２、より好ましくは９．１～６０．８ｃｍ２である。
　本発明において、容器内の液体は、少なくとも１種の成分から構成され、その成分としてはとくに限定されないが、例えば、水、水溶液、非水溶液、懸濁液、乳液などの液体から構成される。
　本明細書における液または液体とは、全体として流動性を有する流体であればよく、細胞足場などの固形物質や気泡などその他非液体成分を含んでもよい。
　容器内の液体を構成する成分は、脆弱物に与える影響が少ないものであればとくに限定されない。脆弱物が生体由来材料からなる膜である場合、容器内の液体を構成する成分は、生物学的安定性や長期保存可能性の観点から、生体適合性のもの、すなわち、生体組織や細胞に対して炎症反応、免疫反応、中毒反応などの望まない作用を起こさないか、少なくともかかる作用が小さいものが好ましく、例えば、水、生理食塩水、生理緩衝液（例えば、ＨＢＳＳ、ＰＢＳ、ＥＢＳＳ、Ｈｅｐｅｓ、重炭酸ナトリウム等）、培地（例えば、ＤＭＥＭ、ＭＥＭ、Ｆ１２、ＤＭＥＭ／Ｆ１２、ＤＭＥ、ＲＰＭＩ１６４０、ＭＣＤＢ、Ｌ１５、ＳｋＢＭ、ＲＩＴＣ８０－７、ＩＭＤＭ等）、糖液（スクロース溶液、Ｆｉｃｏｌｌ－ｐａｑｕｅ（登録商標）ＰＬＵＳ等）、海水、血清含有溶液、レノグラフィン（登録商標）溶液、メトリザミド溶液、メグルミン溶液、グリセリン、エチレングリコール、アンモニア、ベンゼン、トルエン、アセトン、エチルアルコール、ベンゾール、オイル、ミネラルオイル、動物脂、植物油、オリーブ油、コロイド溶液、流動パラフィン、テレピン油、アマニ油、ヒマシ油などが挙げられる。
　脆弱物がシート状細胞培養物である場合、容器内の液体を構成する成分は、細胞を安定して保存することができ、細胞生存に必要な最低限の酸素や栄養等を含み、細胞を浸透圧等により破壊しないものが好ましく、例えば、生理食塩水、生理緩衝液（例えば、ＨＢＳＳ、ＰＢＳ、ＥＢＳＳ、Ｈｅｐｅｓ、重炭酸ナトリウム等）、培地（例えば、ＤＭＥＭ、ＭＥＭ、Ｆ１２、ＤＭＥＭ／Ｆ１２、ＤＭＥ、ＲＰＭＩ１６４０、ＭＣＤＢ、Ｌ１５、ＳｋＢＭ、ＲＩＴＣ８０－７、ＩＭＤＭ等）、糖液（スクロース溶液、Ｆｉｃｏｌｌ－ｐａｑｕｅ　ＰＬＵＳ（登録商標）等）などが挙げられるが、これらに限定されない。
　容器内の液体の量は、蓋部材を容器に取り付けた状態で脆弱物を保持できる程度であって、容器の底部と蓋部材の頂部との間に形成される液嵩が、脆弱物が液中で揺動しない（揺れ動かない）程度の高さであればとくに限定されない。すなわち、液面と蓋部材との間に空間が生じると、液体（液面）が揺れ動き、脆弱物が液中で揺れ動きやすくなるため、液面と蓋部材との間に空間が生じないように液嵩を調整することが好ましい。本発明の一態様において、シート状細胞培養物の直径は約３５～５５ｍｍであり、面積は６ｃｍ２以上である。上記液嵩は、シート状細胞培養物の直径に関わらず、例えば、１．０ｍｍ～２０．０ｍｍである。
　本発明において、蓋部材は、容器を密閉できるものであればとくに限定されない。蓋部材の材料としては、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、テフロン（登録商標）、ポリエチレンテレフタレート、ポリメチルメタクリレート、ナイロン６，６、ポリビニルアルコール、セルロース、シリコン、ポリスチレン、ガラス、ポリアクリルアミド、ポリジメチルアクリルアミド、金属（例えば、鉄、ステンレス、アルミニウム、銅、真鍮）等が挙げられるがこれに限定されない。
　本発明において、蓋部材および容器の形状は、蓋部材と容器とが係合可能で、かかる係合により密閉空間が形成され得る限り、特に限定されない。例えば、容器が汎用シャーレである場合は、蓋部材の形状を円形にすることが好ましい。また、蓋部材および／または容器を光透過性の材料で構成することで、容器に収容されている脆弱物の状態や、液体中の気泡の有無を確認できるようにしてもよい。
　本発明において、脆弱物は液体が収容された容器内の液体中に保持される。脆弱物の液体中での位置は、特に限定されないが、蓋部材を容器に取り付けて密閉空間を形成した状態で、蓋部材と脆弱物とが接触しない位置に配置される（または接触してもよい）。好ましくは、脆弱物は、容器の液体中で、容器の底面上、底面付近などに配置される。
　本発明において、「撥水加工」とは、固体表面と液体とが接触する境界線において、液体面が固体面と成す角度である接触角が９０°以上になるように、個体表面を加工することをいう。例えば、テフロン（登録商標）加工などが施された撥水性のある固体表面では接触角は１８０°に近くなり、液滴がほぼ球形になるため、撥水加工が施された個体表面同士の間に液体が介在しても個体表面同士は張り付かない。撥水加工法としては、固体表面にテフロン（登録商標）、シリコン、フッ素系撥水剤、蝋質、アルミナ石鹸、ピリジニウム塩、セラチンなどの樹脂を付着させるコーティング法が挙げられる。また、超撥水加工のように、レーザー加工などで固体表面に凹凸を形成するなど、コーティング剤を使用せずに固体表面に凹凸加工を施す方法でもよい。
〔第１実施形態〕
　本発明の一側面は、脆弱物を収容するための容器と、容器を密閉するための蓋部材と、保護部材とを含む、デバイスであって、脆弱物および液体を収容した容器内の液面を保護部材で覆い、さらに保護部材および容器の開口部を蓋部材で覆うことで液密空間を形成することができる、前記デバイスに関する。
　以下、本発明の好適な実施形態について、図面を参照しつつ詳細に説明する。
　まず、本発明の第１実施形態について説明する。
　図１は、本発明の第１実施形態に係るデバイス１の断面図、図２は、第１実施形態の第１変形例に係るデバイス１Ａの断面図、図３は、第１実施形態の第２変形例に係るデバイス１Ｂの断面図である。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
　図１Ａに示すように、本発明の第１実施形態に係るデバイス１は、容器２、容器２を密閉するための蓋部材３、および保護部材４を含む。容器２は、開口部を取り囲む縁部２１を有する汎用シャーレの形状を有しており、脆弱物Ｓなどを収容できる収容空間を構成する。蓋部材３は、天板部３２と天板部３２の周縁から垂下する筒状スカート壁３６および筒状スカート壁３６の内周面に設けられる雌ネジ部３５を含む。雌ネジ部３５は、容器２の外周面に設けられる雄ネジ部２５と螺合し、蓋部材３を容器２に螺着させることができる。保護部材４の直径は容器２の縁部２１の直径より大きく、保護部材４で容器２の開口部を覆うことができる流体不透過性の板状部材である。保護部材４および蓋部材３には撥水加工が施されている。
　図１Ａおよび図１Ｂに示すように、デバイス１を使用する際は、容器２に液体Ｌおよび脆弱物Ｓを収容する。この際に、容器２を液体Ｌで満たした状態でさらに液体Ｌを加えることで、液体Ｌの表面張力で液面に凸面を形成させる（図１Ａ）。次に、保護部材４を傾斜させた状態で液面に載置し、凸面を圧し潰して水平にしながら縁部２１に密着させる。このように保護部材４で容器２を密閉することによって、液面に気泡などがある場合は、傾斜させた保護部材４で気泡に浮力を掛かり、気泡を確実に押し出すことができる。そして、蓋部材３で保護部材４および容器２を覆うことで保護部材４を挟持して、容器２内の液密状態を形成する。また、この際に蓋部材３と保護部材４との間に気体が入った場合であっても、流体不透過性の保護部材４が気体をブロックするため、容器２内に気泡が入り込んで脆弱物Ｓを傷つけるようなことがない。
　脆弱物Ｓを使用する際は、容器２から蓋部材３を取り外すが、この際に保護部材４および蓋部材３に撥水加工が施されているため、保護部材４が蓋部材３に張り付くことがない。したがって、蓋部材３を容器２から取り外しても、保護部材４が容器２内の液密状態を保つことができる。次に、保護部材４を水平方向にスライドさせて液密状態を解除して取り外すことで、簡単に保護部材４を容器２から取り外すことができる。すなわち、蓋部材３と容器２との間に保護部材４がない場合は、蓋部材３と液面とが直接密着してしまい、蓋部材３を取り外す際に蓋部材３が表面張力で液を引っ張る。これと同時に、液密状態の容器２から蓋部材３を取り外す際に、蓋部材３に急激な力が加わるため、液面が波立ち脆弱物が破損する場合がある。それに対して、保護部材４で液面を保護することで、このような問題を防ぐことができるため、保護部材４は、液面を保護する保護機構として機能する。容器２、蓋部材３および保護部材４同士の間に、弾性のシール部材（例えば、パッキンリングなど）を介在させることで、デバイス１の垂直方向および水平方向の寸法誤差を吸収するようにしてもよい。
　以上、本願発明の第１実施形態に係るデバイス１によれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よく液密状態を達成することができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。そして、容器内を完全に液密状態にできるため、気泡（気体）が容器内にはいらず、移送中の容器の揺れなどによって気泡が容器内で動いて脆弱物を破損することがない。特に、脆弱物がシート状細胞培養物の積層体である場合に、気泡が移動して、積層体がズレたり欠損したりすることがない。したがって、液体中の脆弱物の形状を保持して変形を防止しつつ、長期保存することができる。
　また、本願発明の第１実施形態に係るデバイス１によれば、液密状態を簡単に解除することができるため、例えば、作業者の蓋部材の無理な取り外しによる、容器の振動や液体の流動の発生を抑えることができ、脆弱物を破損することがない。
　次に、本発明の第２実施形態について説明する。以下、第１実施形態との相違点について詳細に説明し、同様の事項については、説明を省略する。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
　図２Ａに示すように、本発明の第２実施形態に係るデバイス１Ａは、容器２Ａ、容器２Ａを密閉するための蓋部材３Ａ、および保護部材４Ａを含む。容器２Ａは、開口部を取り囲む縁部２１を有する汎用シャーレの形状を有しており、底部において上方に突設された筒状壁２６を有する。容器２Ａの筒状壁２６内側は、脆弱物Ｓなどを収容することができる収容空間を形成する。筒状壁２６の高さは、容器２Ａの縁部２１の高さと同じであり、蓋部材３Ａを容器２Ａに取り付けた際に、容器２Ａの縁部２１および筒状壁２６の縁部の両方に密着させることができる。保護部材４Ａの直径は、容器２Ａの縁部２１の直径より小さく、筒状壁２の縁部の直径より大きい。本実施形態において、保護部材４Ａは、可撓性を有するフィルム状であり、蓋部材３Ａの内面には撥水加工が施されている。
　図２Ａおよび図２Ｂに示すように、デバイス１Ａを使用する際は、容器２Ａの筒状壁２６の内側に液体Ｌおよび脆弱物Ｓを収容する。この際に、収容空間を液体Ｌで満たした状態でさらに液体Ｌを加えることで、液体Ｌの表面張力で液面に凸面を形成させる（図２Ａ）。次に、保護部材４Ａを液面に載置し、凸面を圧し潰して水平にしながら縁部２１に密着させる。保護部材４Ａはフィルム状であり、液面に対してゆっくりと載置することができるため、液体が波打つことがない。また、保護部材４Ａで押し出された液体Ｌの凸部分は、容器２Ａの筒状壁２６の外側の空間Ｇに受け入れられるため、周囲を汚染することがない上に、保護部材４Ａと蓋部材３Ａとの間に液体Ｌが入り込むことがないため、蓋部材３Ａを取り外す際に、保護部材４Ａが蓋部材３Ａの内側に張り付くことがない。さらに、蓋部材３Ａを容器２Ａに螺着して、蓋部材３Ａと容器２Ａとで保護部材４Ａを強い力で挟持することができるため、収容空間内の液密を保持することができ、同時に、空間Ｇ内の液体Ｌが外に漏れることがない。
　脆弱物Ｓを使用する際は、容器２Ａから蓋部材３Ａを取り外すが、この際に蓋部材３Ａの内面に複数の凹凸が形成されているため、保護部材４Ａが蓋部材３Ａの内側に張り付くことがない。したがって、蓋部材３Ａを容器２Ａから取り外しても、保護部材４Ａが容器２Ａ内の液密状態を保つことができる。次に、保護部材４Ａを巻き取るように液面から引き剥すことで、液面との接触面積を徐々に小さくすることで、液面の波打ちを最小限に抑えることができる。すなわち、蓋部材３Ａの内面と液面とが面同士で接している場合は、取り外す際に蓋部材３Ａが液面に引っ張られ、蓋部材３Ａが外れた瞬間に反発力が生じて液面に振動が発生する。一方で、保護部材４Ａを介在させた場合は、保護部材４Ａが液面を保護するため、振動が脆弱物Ｓまで伝わらない。容器２Ａ、蓋部材３Ａおよび保護部材４Ａ同士の間に、弾性のシール部材（例えば、パッキンリングなど）を介在させることで、デバイス１Ａの垂直方向および水平方向の寸法誤差を吸収するようにしてもよい。
　以上、本願発明の第２実施形態に係るデバイス１Ａによれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よく液密状態を達成することができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。そして、容器内を完全に液密状態にできるため、気泡（気体）が容器内にはいらず、移送中の容器の揺れなどによって気泡が容器内で動いて脆弱物を破損することがない。特に、脆弱物がシート状細胞培養物の積層体である場合に、気泡が移動して、積層体がズレたり欠損したりすることがない。したがって、液体中の脆弱物の形状を保持して変形を防止しつつ、長期保存することができる。
　また、本願発明の第２実施形態に係るデバイス１Ａによれば、液密状態を簡単に解除することができるため、例えば、作業者の蓋部材の無理な取り外しによる、容器の振動や液体の流動の発生を抑えることができ、脆弱物を破損することがない。
　次に、本発明の第３実施形態について説明する。以下、第１実施形態および第２実施形態との相違点について詳細に説明し、同様の事項については、説明を省略する。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
　図３Ａに示すように、本発明の第３実施形態に係るデバイス１Ｂは、容器２Ｂ、容器２Ｂを密閉するための蓋部材３Ｂ、および保護部材４Ｂを含む。容器２Ｂは、上部２２および下部２３を含む有底筒状の容器であり、下部２３は、脆弱物Ｓなどを収容できる空間を構成する。上部２２の内径は下部２３の内径より大きく、上部２２と下部２３との境界に段差部２４が設けられている。蓋部材３Ｂは、天板部３２から下方に突出する凸部３１を有する。本実施形態において、保護部材４Ｂは、凸部３１と段差部２４との間に挟持され、保護部材４Ｂと段差部２４との間には密着性を高めるためのパッキンリングＲが設けられている。保護部材４Ｂは、複数の小孔が設けられており、液体Ｌを透過させることができる。また、容器２Ｂの縁部２１と蓋部材３Ｂとの間には、断面形状がコの字形のパッキンリングＲ’が設けられており、デバイス１Ｂの垂直方向および水平方向の寸法誤差を吸収することができる。
　図３Ａおよび図３Ｂに示すように、デバイス１Ｂを使用する際は、容器２Ｂに液体Ｌおよび脆弱物Ｓを収容する。この際に、液体Ｌを段差部２４を越える高さまで満たして、保護部材４Ｂを傾斜させながら段差部２４の上に載置する。次に、蓋部材３Ｂを容器２Ｂに螺着させて、凸部３１と容器２Ｂの段差部２４との間で保護部材４Ｂを挟持する。そして、凸部３１で保護部４Ｂを押し付けることで、保護部４Ｂと段差部２４との間に介在するパッキンリングＲが押しつぶされ、容器２Ｂ下部２３に形成された液密状態が高まる。凸部３１で押し出された液体Ｌは、容器２Ｂの上部２２と凸部３１との間の空間Ｇに受容される。脆弱物Ｓを使用する際は、蓋部材３Ｂを容器２Ｂから取り外すが、保護部材４Ｂには複数の小孔が設けられ保護部材４Ｂと蓋部材３Ｂとの間に表面張力が発生しないため、保護部材４Ｂが蓋部材３Ｂの内側に引っ付くことがない。また、蓋部材３Ｂを取り外すと、保護部材４Ｂの複数の小孔を介して容器２Ｂの下部２３と上部２２空間が連通、すなわち、液密状態が解除されるため、保護部材４Ｂを簡単に取り外して脆弱物を取り出すことができる。
　以上、本願発明の第３実施形態に係るデバイス１Ｂによれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よく液密状態を達成することができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。そして、容器内を完全に液密状態にできるため、気泡（気体）が容器内にはいらず、移送中の容器の揺れなどによって気泡が容器内で動いて脆弱物を破損することがない。特に、脆弱物がシート状細胞培養物の積層体である場合に、気泡が移動して、積層体がズレたり欠損したりすることがない。したがって、液体中の脆弱物の形状を保持して変形を防止しつつ、長期保存することができる。
　また、本願発明の第３実施形態に係るデバイス１Ｂによれば、液密状態を簡単に解除することができるため、例えば、作業者の蓋部材の無理な取り外しによる、容器の振動や液体の流動の発生を抑えることができ、脆弱物を破損することがない。
　以上、本発明を図示の実施形態について説明したが、本発明はこれに限定されるものではない。第１～第３実施形態における蓋部材３、３Ａ、３Ｂと、容器２、２Ａ、２Ｂと、保護部材４、４Ａ、４Ｂとは、自由に組み合わせることができる。
　本発明においては、各構成は、同様の機能を発揮し得る任意のものと置換することができ、あるいは、任意の構成を付加することもできる。
　本発明のデバイスを用いた脆弱物の使用は、例えば以下の工程によって順次行うことができる。
　（１）容器に液体および脆弱物を収容する。
　（２）保護部材で容器の液面を保護する。
　（３）蓋部材で容器を覆って液密状態を形成する。
　（４）デバイスを移送する。
　（５）蓋部材を取り外して液密状態を解除する。
　（６）保護部材を取り外す。
　（７）脆弱物を取り出して使用する。
　以下、本発明のデバイス（容器および蓋部材）を押圧して挟持するのに好適な挟持具の実施形態について、図面を参照しつつ詳細に説明する。
　図４は、本発明の第４実施形態に係る挟持具７の斜視図、図５は、本発明の第５実施形態に係る挟持具７Ａの斜視図、図６は、本発明の第６実施形態に係る挟持具７Ｂの斜視図である。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。また、
〔第４実施形態〕
　図４に示すように、本実施形態に係る挟持具７は、ベース部材８およびカバー部材９を含む。挟持具７は、容器（図示せず）および容器を密閉するための蓋部材（図示せず）を含むデバイスを上下から挟み込むように押圧して挟持することができる。　　　
　ベース部材８およびカバー部材９は、共に円形形状を有しており、デバイスを上下から適切に押圧することができる。ベース部材８は、開口部８１、底部８２、螺合部（係合部）８３、載置部８４および突条部８５を含む。本実施形態において係合は螺合である。載置部８４は、容器を載置することができる載置面を上面に有し、中央部には開口部８１が設けられている。載置部８４は、容器を載置面に載置した際に容器の下端を取り囲む環状の突条部８５（細長いリッジ）を有し、ベース部材８に対する容器の設置位置を画定することができる。載置部８４は、底部８２から上方に突出する円盤形状を有しており、その側周面には螺合部８３が設けられている。底部８２は、載置部８４の外径より大きな外径を有しており、テーブルなどにベース部材８を設置する際の底部としての役割を果たす。
　カバー部材９は、開口部９１、天部９２、螺合部（係合部）９３、筒状スカート壁９４およびグリップ部９５を含む。天部９２は、蓋部材の上面を覆うことができるカバー面を有し、中央部には開口部９１が設けられている。天部９２は、天部９２の周縁から垂下する筒状スカート壁９４を含み、天部９２、筒状スカート壁９４および載置部８４で、デバイスを取り囲むようにして挟持することができる。筒状スカート壁９４下端部の内周面には螺合部９３（図示せず）が設けられており、かかる螺合部９３をベース部材８の螺合部８３と螺合させることにより、カバー部材９をベース部材８に螺着させることができる。任意に、筒状スカート壁９４の少なくとも一部（例えば、筒状スカート壁９４上端部の内周面）の内径を、蓋部材の外径と合わせることにより、挟持具７に対する蓋部材の設置位置を画定させることもできる。
　挟持具７を使用する際は、収容物Ｓが収容された容器に蓋部材を被せる。この際に、任意に、容器内を液体Ｌで満たした状態で蓋部材を被せることで、液密空間を形成することもできる。また、任意に、容器と蓋部材との間の好適な位置に、シール部材（図示せず）を介在させたりして、密閉性を高めることもできる。次に、容器をベース部材８に設置するが、この際に、突条部８５を利用して容器を載置部８４の中央に位置決めすることができる。また、ベース部材８の螺合部８３は、載置部８４より下側に設けられている、すなわち、螺合部８３が容器の側面を取り囲む構造ではないため、容器を載置部８４に設置／除去する際に、容器を横方向にスライドさせることで振動を抑えることができる。次に、カバー部材９をベース部材８に取り付けるが、この際に、筒状スカート壁９４を利用して蓋部材をカバー部材９（およびベース部材８）の中央に位置決めすることもできる。
　このように、挟持具７は、ベース部材８の突条部８５と、カバー部材９の筒状スカート壁９４とを利用して、容器と蓋部材との相対位置を画定することができる。デバイスを挟持する際には、ベース部材８の螺合部８３と、カバー部材９の螺合部９３とを螺合させる。この際に、筒状スカート壁９４の外周面に突出部（溝部でもよい）として設けられているグリップ部９５を把持して螺合作業を行うことにより、容器と蓋部材とを上下から強い力で締め付けることができる。これは、例えば、容器が汎用シャーレのような螺合部を有さない容器である場合の使用に適しており、汎用性が高い。上記実施形態１～３のデバイス１、１Ａ、１Ｂにおいて、雌ネジ部３５および雄ネジ部２５を省略して、蓋部材を容器に対して回転（螺合）させないように構成してもよい。この場合、容器と蓋部材との間に介在させた保護部材に蓋部材の回転力が及ばないため、特に有利である。そして、特に、弾性のシール部材を介在させている場合に、正確に相対位置が確定された容器と蓋部材との間で、シール部材が正確に圧縮されて密閉性が高まるため有利である。カバー部材９は、ベース部材８の螺合部８３の高さ分だけ螺合させればよく、挟持作業が容易である上に、挟持圧力を容易に調節できるため、デバイスを破壊するなどの問題を防止することができる。
　ベース部材８およびカバー部材９は、共に中央部に開口部８１、開口部９１を有しているため、デバイスの固定位置や、デバイス内に収容されている液体Ｌや収容物Ｓなどの状態を常時観察することができる。これは、容器および蓋部材が、光透過性の材料で構成されている場合に、特に有利である。そして、脆弱物が、シート状細胞培養のような視認性が低い物であっても、一方の開口部から光を放射し、他方の開口部からシート状細胞培養を視認できるため、有利である。また、上記のように液密空間を形成する場合は、開口部９１を介して容器内に気泡や異物などが混入していないかを確認しながら、蓋部材を容器に押し付けることができる。次に、デバイスを移送するが、デバイスは、挟持具７で強固に挟持されているため、移送中の揺れなどによって蓋部材が容器から外れるなどの問題を防止でき、周囲が挟持具７で取り囲まれているため、外部からの衝撃から保護される。最後に、移送先でデバイスから挟持具７を取り外して使用する。
　本発明を図示の実施形態について説明したが、本発明はこれに限定されるものではない。例えば、螺合部８３および螺合部９３は、スライド係合（例えば、特開２００６－３１５７５７参照）、フランジ嵌合（例えば、特開２００６－００１５８２参照）、突条係合（例えば、特開２０１６－２０３９８５参照）など、デバイスを上下方向から押圧する機能を有する他の係合手段に置き換えることができる。環状の突条部８５は、環状に配置された複数の突起など、容器を載置面上で位置決めできる他の手段に置き換えることができる。収容物Ｓとして、例えば、脆弱物（例えば、シート状細胞培養の積層体）を収容することもでき、この場合は、容器内を液密にすることで脆弱物の形状を保持しながら移送することもできる。
〔第５実施形態〕
　次に、本発明の第５実施形態について説明する。以下、第４実施形態との相違点について詳細に説明し、同様の事項については、説明を省略する。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
　図５に示すように、本実施形態に係る挟持具７Ａは、ベース部材８Ａおよびカバー部材９Ａを含む。本実施形態において、ベース部材８Ａは、突設壁８６、溝部８７および切り欠き部８８をさらに含む。突設壁８６は、突条部８５の外側に複数設けられる、載置部８４から容器の高さを越えて突設された壁である。ベース部材８Ａの底部８２下面には、溝部８７が設けられており、ベース部材８Ａをテーブルなどに設置した際に、ベース部材８Ａが作業面に張り付くことを防止することができる。
　挟持具７Ａを使用する際は、容器（図示せず）を突条部８５を利用してベース部材８の中央に位置決めする。次に、容器に蓋部材（図示せず）を被せる際に、蓋部材を突設壁８６に沿わせることで、蓋部材をベース部材８の中央に位置決めすることができる。すなわち、作業者は、ベース部材８Ａの突条部８５と突設壁８６とを利用して、容器と蓋部材との相対位置を画定することができる。これは、特に、容器と蓋部材との間に環状のシール部材を介在させている場合に、シール部材を正確に押圧できるため有利である。
　次に、デバイス（図示せず）を挟持するが、この際に、カバー部材９Ａから放射状に突出する突出部として構成されているグリップ部９５と、ベース部材８Ａの底部８２側面に設けられている切り欠き部８８とを把持することで螺合作業を容易に行うことができる。デバイスを使用する際は、カバー部材９Ａの螺合を解除してデバイスをベース部材８Ａから取り外すが、この際に、複数の突設壁８６の隙間からデバイスが露出しているためデバイスを掴みやすい。また、複数の突設壁８６は、容器を取り囲むように配置されているため、蓋部材を容器に対して正確に位置決めすることができる。
〔第６実施形態〕
　次に、本発明の第６実施形態について説明する。以下、第４実施形態および第５実施形態との相違点について詳細に説明し、同様の事項については、説明を省略する。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
　図６に示すように、本実施形態に係る挟持具７Ｂは、カバー部材（図示せず）と、ベース部材８Ｂとを含む。ベース部材８Ｂは、載置部８４Ｂ、突条部８５Ｂおよび突設壁８６Ｂを含む（他の構成の説明は省略）。突条部８５Ｂは、載置部８４Ｂ上に半環状に配置されている。突設壁８６Ｂは、突条部８５Ｂの外側に半環状に配置されており、一部に切り欠き（隙間）Ｃが設けられている（２以上の突設壁８６Ｂを半環状に隙間を設けて配置してもよい）。すなわち、本実施形態において、載置部８４Ｂの載置面の片側半分（突条部８５Ｂおよび突設壁８６Ｂの反対側半分）は、平坦な面として構成されている。
　挟持具７Ｂを使用する際は、容器（図示せず）を突条部８５Ｂおよび突設壁８６Ｂの反対側から横方向（突条部８５Ｂおよび突設壁８６Ｂの方向）にスライドさせるようにして設置する。この際に、容器を載置部８４Ｂの平坦な面上で滑らせることで、容器の不用意な振動を抑えることができる。次に、蓋部材（図示せず）を容器に取り付けるが、この際に、蓋部材をベース部材８Ｂの突設壁８６Ｂに押し付けることで、蓋部材を容器に対して正確に位置決めすることができる。デバイス（図示せず）を使用する際は、デバイスをベース部材８Ａから取り外すが、この際に、切り欠きＣから露出しているデバイス（容器および／または蓋部材）の側面を押し込むことで、デバイスを平坦な面上でスライドさせるようにして取り外すことができる。デバイス１をベース部材８Ａ上でスライドさせる際のスライド方向が分かりやすいように、載置部８４Ｂ上の切り欠きＣと対向する側に目印となる突起部８９を設けてもよい。これにより、デバイス１を突起部８９と切り欠きＣとの間でスライドさせるだけで、デバイス１を載置部８４Ｂ上に正確に位置決めすることができる。また、突起部８９を突条部８５Ｂの延長線上に、切り欠きＣと対向するように配置し、デバイス１の側面が突起部８９で係止されるように構成することで、デバイス１がズレないようにすることもできる。
　以上、本願発明の第４～６実施形態に係る挟持具によれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よく容器と蓋とを密着させることができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。また、容器内の収容物を外側から視認できるため、収容物の状態や異物の混入などを簡単に確認することができる。さらに、容器と蓋部材との相対的な位置関係を正確に合わせることができるため、密閉性が高まる。特に、容器と蓋部材との間に弾性のシール部材を介在させる場合は、シール部材を正確に押圧することができるため、密閉性がより高まる。
　また、本発明の挟持具によれば、容器と蓋部材とを確実に密着させて固定できるため、移送中に蓋部材が容器から外れるなどの問題を防止できる。特に、収容物がシート状細胞培養物の積層体である場合に、容器内を確実に液密状態にして移送することができ、容器内に気泡が入り込んで移動し、積層体がズレたり欠損したりすることが防止でき、その形状を保持して変形を防止しつつ、長期保存することができる。
　本発明は上記の実施形態に限定されるものではなく、当業者は、上記の実施形態４～６に係る挟持具の各構成およびその形状を好適に組み合わせて、異なる構成や形状を有する挟持具を実現することができる。例えば、カバー部材９またはカバー部材９Ａを、ベース部材８、ベース部材８Ａまたはベース部材８Ｂと組み合わせてもよいし、突条部８５、突条部８５Ｂ、突設壁８６または突設壁８６Ｂを、ベース部材８、ベース部材８Ａまたはベース部材８Ｂと組み合わせてもよい。
　本発明においては、各構成は、同様の機能を発揮し得る任意のものと置換することができ、あるいは、任意の構成を付加することもできる。
１、１Ａ、１Ｂ　　　　　　デバイス
２、２Ａ、２Ｂ　　　　　　容器
２１　　　　　　　　　　　縁部
２２　　　　　　　　　　　上部
２３　　　　　　　　　　　下部
２４　　　　　　　　　　　段差部
２５　　　　　　　　　　　雄ネジ部
３、３Ａ、３Ｂ　　　　　　蓋部材
３１　　　　　　　　　　　凸部
３２　　　　　　　　　　　天板部
３５　　　　　　　　　　　雌ネジ部
３６　　　　　　　　　　　筒状スカート壁
６　　　　　　　　　　　　シール部材
７，７Ａ，７Ｂ　　　　　　挟持具
８，８Ａ，８Ｂ　　　　　　ベース部材
８１　　　　　　　　　　　開口部
８２　　　　　　　　　　　底部
８３　　　　　　　　　　　係合部
８４　　　　　　　　　　　載置部
８５，８５Ｂ　　　　　　　突条部
８６，８６Ｂ　　　　　　　突設壁
８７　　　　　　　　　　　溝部
８８　　　　　　　　　　　切り欠き部
８９　　　　　　　　　　　突起部
９，９Ａ　　　　　　　　　カバー部材
９１　　　　　　　　　　　開口部
９２　　　　　　　　　　　天部
９３　　　　　　　　　　　係合部
９４　　　　　　　　　　　筒状スカート壁
９５　　　　　　　　　　　グリップ部

 

Claims (9)

  1. 　脆弱物を収容するための容器と、容器を密閉するための蓋部材と、保護部材とを含む、デバイスであって、脆弱物および液体を収容した容器内の液面を保護部材で覆い、さらに保護部材および容器の開口部を蓋部材で覆うことで液密空間を形成することができる、前記デバイス。
  2. 　保護部材および／または蓋部材に撥水加工が施されている、請求項１に記載のデバイス。
  3. 　保護部材が可撓性を有する、請求項１または２に記載のデバイス。
  4. 　保護部材が流体不透過性である、請求項１～３のいずれか一項に記載のデバイス。
  5. 　蓋部材と容器とで保護部材を挟持することができる、請求項１～４のいずれか一項に記載のデバイス。
  6. 　押し出された液体を受容する空間を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載のデバイス。
  7. 　脆弱物がシート状細胞培養物である、請求項１～６のいずれか一項に記載のデバイス。
  8. 　シート状細胞培養物が、積層体である、請求項７に記載のデバイス。
  9. 　請求項１～８のいずれか一項に記載のデバイスを上下から押圧して挟持できるように構成されているカバー部材とベース部材とを含む、挟持具。
    　
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