WO2019078381A1 - 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육감퇴, 약화 및 근위축 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물, 식품 조성물 및 식품첨가제 - Google Patents

엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육감퇴, 약화 및 근위축 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물, 식품 조성물 및 식품첨가제 Download PDF

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김택중
이명헌
이와사마사히로
한권일
김완재
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연세대학교 원주산학협력단
한국베름 주식회사
니혼 베루무 가부시키가이샤
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Definitions

  • the present invention relates to the use of Enterococcus
  • the present invention also relates to a novel use of the culture broth or a bacterium of the bacterium of the genus Faecalis, more specifically, to an enterococcus plant EF-2001 faecalis EF-2001), a pharmaceutical composition, a food composition and a food additive for preventing or treating muscular dysfunction, weakening and muscle atrophy, which comprises the culture liquid or a bacterium thereof as an active ingredient.
  • Diseases that cause weakness of muscle strength include sarcopenia with aging, muscle atrophy caused by imbalance of protein metabolism or muscle use, starvation, wasting disease (such as cancer), aging And acardiotrophy.
  • Sarcopenia refers to a decrease in muscle strength with a decrease in skeletal muscle mass during aging. In addition to the decrease in muscle mass, which is the most important feature of myopenia, changes in the type of muscle fiber are also observed. Type 1 and Type 2 decrease in age at the same rate, whereas Type 2 muscle fibers do not change much in the presence of myopenia, but Type 1 muscle fiber thickness decreases significantly. This myopenic disorder has been reported to cause senescence and dysfunctions among the elderly (Roubenoff R., Can. J. Appl. Physiol. 26, 78-89, 2001).
  • myopenia is caused by various factors, research on each factor is still insignificant.
  • the balance of growth hormone reduction or neurological change, changes in physical activity, changes in metabolism, sex hormone levels or fat or catabolic cytokines, and the synthesis and differentiation of proteins (Roubenoff R. and Hughes VA, J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 55, M716-M724, 2000).
  • Satellite cells are small mononuclear cells located between the basement membrane and the sarcolemma of the myofiber. They are activated by stimulation, such as injury or exercise, and proliferate into myoblasts. When differentiation proceeds, they fuse with other cells to form multinuclear muscle fibers.
  • the activity of satellite cells decreases, the ability to regenerate damaged muscle or response to differentiation signals is reduced, resulting in decreased muscle formation.
  • muscle atrophy is caused by damage to muscle tissue due to lack of mechanical stimulation such as decrease of muscle use, destruction of muscles due to direct injury or physical factors, restoration of muscular cell by aging, , And disability of muscle use due to damage to the nerves that regulate muscle function (Booth FW, J Appl Physiol Respir Environ Exerc Physiol., 1982).
  • disuse atrophy occurs gradually due to loss of muscle strength due to the disability of the muscles of the affected part and the peripheral part due to disability or accident for a long time, and myasthenia due to the disease of the muscle itself gravis, dystrophy: progressive muscular dystrophy, myotonic muscular dystrophy, duchen type, Becker type, parietal lobe, facial shoulder brachial type, inflammation occurring in the muscle itself, muscular atrophy due to muscle- Amyotrophic lateral sclerosis (ALS): Lou Gehrig's disease, sphinobulbar muscular atrophy: Kennedy's disease, and the like. But also in form.
  • ALS Amyotrophic lateral sclerosis
  • the first is exercise. Exercise has been reported to increase skeletal muscle protein synthesis in the short term and to increase muscular strength and motility of the elderly. However, it is inappropriate for long-term treatment (Timothy J. Doherty, J. Appl. Physiol. 95, 1717-1727, 2003).
  • the second is the use of testosterone or anabolic steroid as a medication, but it induces menstruation in women and side effects such as prostate symptoms in men.
  • Other approved regimens include DHEA (dehydroepiandrosterone) and growth hormone, which have been reported to be therapeutically feasible at sites that include SARMs (DD Thompson, J. Musculoskelet Neuronal Interact 7, 344-345 , 2007).
  • stem cell therapy stem cell therapy which separates satellite cells and introduces them into the body after in vitro differentiation and activates satellite cells directly in the body and promotes myogenesis.
  • the best way to prevent the onset of muscular atrophy in daily life is to prevent muscle loss through continuous use of muscles, but even if muscles can not be used regardless of their will, such as injury or disability, May result in muscle atrophy caused by degeneration of the muscle. In this case, it is necessary to study countermeasures to prevent muscle atrophy by stimulating muscles or preventing muscle atrophy.
  • Reactive oxygen species are highly chemically reactive groups of molecules that are highly reactive for redox reactions that attempt to exchange electrons with nearby molecules. Due to the reactivity of these active oxygen species, surrounding substances such as protein molecules or DNA in the cell lose electrons and become oxidized to exhibit mutations, failing to perform their proper functions, and failing to function properly, Death can be induced. Oxidative stress caused by reactive oxygen species is also present in muscle cells, and oxidative stress may lead to muscle cell loss and muscle atrophy. Several stressors have been shown to affect various tissues in vivo as well as damage to muscle tissue, and have been attracting attention as various disease factors (MCKinnell IW., And Rudnicki MA., Cell, 2004).
  • Enterococcus faecalis EF-2001 Enterococcus faecalis EF-2001
  • Enterococcus faecalis EF-2001 were identified through intestinal flora screening of a 2-year-old girl.
  • the Enterococcus faecalis EF-2001 is heat-treated to kill and the cell component recovered is the Enterococcus faecalis EF-2001 microbial cell.
  • mice fed Enterococcus faecalis EF-2001 have a DSS mitigation effect in mice fed Enterococcus faecalis EF-2001 (Tadano et al., J. Japan Mibyou System association, 2011).
  • DSS Extran sulfate sodium
  • mice fed Enterococcus faecalis EF-2001 also showed a decrease in the ratio of total cholesterol and triglycerides after ingesting high-fat diets (Ku et al., Medicine and biology, 2007).
  • the Enterococcus faecalis EF-2001 was found to be a causative agent of Candida to suppress the activity of albican shows the symptoms improved and the prevention effect efficacy is started to (Ishijima et al., Med. Mycol. J, 2014), in mice by administration of antibiotics as compared to the enteric control yuikgyun is multiply rapidly and harmful bacteria is inhibited (Simohashi et al., Medicine and biology, 2002).
  • the various physiological activities of Enterococcus faecalis EF-2001 are not influenced by heat and pH due to the nature of dead cells, so they can be processed into various forms (Kan, Food industry, 2001). It is also possible to ingest a large amount of lactic acid bacteria in a small amount with a cell content of 7.5 trillion grams per gram.
  • Korean Patent No. 1,560,799 discloses a composition for treating spinal muscular atrophy comprising, as an active ingredient, hnRNP M (Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein M) or a polynucleotide encoding the hnRNP M
  • Patent No. 1,468,123 has a disease, amyotrophic for improving or therapeutic composition comprising a mammalian umbilical cord-derived stem cells as an active ingredient is disclosed
  • Korea Patent registration No. 1385191 discloses a chicory (Cichorium intybus ) extract as an active ingredient
  • 1,349,361 discloses a pharmaceutical composition for prevention and treatment of muscle atrophy comprising Eupatorium There is chinensis . simplicifolium ) as an active ingredient.
  • the effect of the composition on the atrophy of the enterococcus faecalis, the culture solution thereof or the bacterium thereof is not known at all.
  • the present inventors have made efforts to develop a novel agent for treating muscle weakness, weakness and muscular dystrophy which is free from cytotoxicity and secured to the human body.
  • the Enterococcus faecalis EF-2001 cells are free from cytotoxicity
  • the present invention has been accomplished by discovering that it is effective to treat muscular dysfunction, weakness and muscle atrophy by inhibiting muscle cell damage and cell death caused by oxidative stress.
  • the present invention demonstrates the stability of the Enterococcus faecalis EF-2001 to the human body and inhibits muscle cell damage caused by oxidative stress, thereby remarkably inhibiting muscle weakness, weakening, and treating atrophy Respectively. Therefore, it is an object of the present invention to provide a pharmaceutical composition and a food composition for proving the efficacy of treatment of muscle wasting, weakening and muscular atrophy of Enterococcus faecalis EF-2001 dead cells and culture thereof and for preventing and treating new muscle decline, weakening and muscle atrophy And a food additive.
  • the present invention relates to the use of Enterococcus
  • the present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing and treating muscular weakening related diseases, which comprises a culture solution thereof or a bacterium thereof as an active ingredient.
  • the present invention also provides a food composition for preventing and ameliorating muscular weakness related to muscular weakness comprising Enterococcus faecalis, a culture solution thereof or a bacterium thereof as an active ingredient.
  • the present invention also provides a food additive for preventing and ameliorating muscle weakness-related diseases of muscles containing Enterococcus faecalis, a culture solution thereof or a bacterium cell thereof as an active ingredient.
  • the present invention relates to a method of treating muscular weakness related to muscle weakness comprising administering a pharmaceutically effective amount of Enterococcus faecalis, a culture thereof or a bacterium thereof to an individual or an individual afflicted with a muscle weakness- Provide prevention methods.
  • the Enterococcus faecalis EF-2001 of the present invention faecalis EF-2001 cells do not have cytotoxicity, and exhibit remarkable effect of treating muscular dysfunction, weakening and muscle atrophy by inhibiting damage of muscle cells caused by oxidative stress. Therefore, the inventive Enterococcus faecalis,
  • the culture broth or bacterium cells thereof may be usefully used as an effective ingredient, a food composition, and a food additive for compositions for preventing or treating muscular dysfunction, weakening and muscle atrophy.
  • Enterococcus faecalis EF-2001 Entererococcus faecalis EF-2001. < / RTI >
  • FIG. 2 shows the effect of Enterococcus faecalis EF-2001 on oxidative stress-induced muscle cell damage.
  • NAC is a group treated with N-acetylcysteine, which is a positive control.
  • FIG. 3 is a graph comparing the expression of HSP70 (Heat Shock Protein) protein in muscle cells of Enterococcus faecalis EF-2001 in an oxidative stress environment.
  • HSP70 Heat Shock Protein
  • FIG. 4 shows the results of oral administration of two different concentrations of Enterococcus faecalis EF-2001 at 2 mg / kg and 30 mg / kg after surgery in which the right hindlimb nerve of the rat was excised to restrict muscle movement and induce atrophy. And an experimental plan.
  • FIG. 5 is a graph showing the results of a prophylactic treatment in which the intramuscular movement of the right hindlimb nerve of the rat was resected to induce atrophy, and then the enterococcus faecalis EF-2001 was ingested daily for 1 week before surgery
  • FIG. 3 is a view showing a muscle image of a muscle of a treatment group ingested with Enterococcus faecalis EF-2001 by using a micro-tomography apparatus after 3 weeks of operation.
  • FIG. 6 is a graph showing a comparison and analysis of the effect and the difference on the atrophy according to the ingestion of the Enterococcus faecalis EF-2001 based on the photographed image shown in FIG.
  • FIG. 7 is a graph showing the effect of Enterococcus faecalis EF-2001 cells on cell death induced by H 2 O 2 .
  • FIG. 8 is a graph comparing the expression changes of SOD1 protein in muscle cells of Enterococcus faecalis EF-2001 in an oxidative stress environment.
  • the present invention relates to the use of Enterococcus
  • the present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing and treating muscular weakening related diseases, which comprises a culture solution thereof or a bacterium thereof as an active ingredient.
  • enterococcus microorganisms are widely available in nature and utilize carbohydrates aerobically.
  • bacteria such as enterococcus microorganisms are known to prevent damage by pathogenic microorganisms due to in vivo antagonistic action or secreted antimicrobial substances.
  • the culture of Enterococcus faecalis, its culture or its microbial cells may be used either commercially or produced by known microbial cell production methods without any toxicity and harmless to human body.
  • the culture medium refers to a culture of Enterococcus faecalis cultured in a culture medium, a culture solution, a concentrated culture solution, a culture solution, a culture filtrate, a concentrated culture filtrate, or a culture filtrate. And may be a culture filtrate obtained by removing the strain.
  • the dead cells may be prepared by heat treating the corresponding live cells or treating them with formalin or other bactericides, and the dead cells may be substantially dead.
  • the dead cells used in the present invention can be produced by the following method, but are not limited thereto:
  • Muscle weakness of the muscle means a state in which the force of one or more muscles is reduced.
  • the muscle weakness may be limited to one muscle, one side, upper or lower side of the body, or may appear throughout the body.
  • subjective muscle weakness symptoms including myopia and myalgia can be quantified in an objective way through physical examination.
  • the muscle weakness-related disease refers to all diseases that may occur due to weakness of muscle strength, such as, for example, muscular dystrophy or muscular dystrophy.
  • the myopenia refers to a gradual decrease in skeletal muscle mass due to aging, which directly leads to a decrease in muscle strength, resulting in a decrease in various body functions and a disorder.
  • the atrophy is atrophy caused by muscle atrophy caused by loss of muscle tissue caused by not using muscle, muscle atrophy caused by muscle itself, or muscle damage caused by nerve damage. Muscle atrophy caused by loss of muscle tissue caused by not using the muscles is called disuse atrophy. Muscle atrophy caused by the muscle itself is caused by myasthenia gravis or dystrophy, It is preferable that the atrophy caused by the damage of the dominant nerve is spinal muscular amyotrophy, amyotrophic lateral sclerosis, or sphinobulbar muscular atrophy.
  • the present inventors confirmed that the Enterococcus faecalis EF-2001 dead cells were not cytotoxic (see FIG. 1), and the enterococcus faecalis EF-2001 The effect of restoring the survival rate of muscle cells according to the concentration of the microbial cells was confirmed (see FIG. 2).
  • the EF-2001 cells of the Enterococcus faecalis increased the amount of HSP70 and SOD1 protein expressed in the muscle cells, (Fig. 3 and Fig.
  • the Enterococcus faecalis EF-2001 microbial cells of the present invention have no cytotoxicity and exhibit a remarkable effect of treating atrophy by inhibiting oxidative stress-induced muscle cell damage. Therefore, the Enterococcus faecalis EF -2001, a culture solution thereof, or a bacterium thereof may be usefully used as an active ingredient of a pharmaceutical composition for preventing and treating muscular weakness-related diseases such as muscle atrophy and muscle loss.
  • composition according to the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount.
  • pharmaceutically effective amount means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit or risk ratio applicable to medical treatment, and the effective dose level will depend on the type of disease, severity, , Sensitivity to the drug, time of administration, route of administration and rate of release, duration of treatment, factors including co-administered drugs, and other factors well known in the medical arts.
  • the composition of the present invention can be administered as an individual therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, and can be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents, and can be administered singly or in multiple doses. It is important to take into account all of the above factors and to administer the amount in which the maximum effect can be obtained in a minimal amount without side effects, which can be easily determined by those skilled in the art.
  • the effective amount of the composition according to the present invention may vary depending on the age, sex, and body weight of the patient, and is generally in the range of 0.1 mg to 100 mg, preferably 0.2 mg to 17 mg per kg of body weight per day or every other day Or one to three times a day.
  • the dosage may be varied depending on the route of administration, the severity of obesity, sex, weight, age, etc. Therefore, the dosage is not limited to the scope of the present invention by any means.
  • composition When the composition is formulated, it is prepared using diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, humectants, disintegrants, surfactants and the like which are usually used.
  • diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, humectants, disintegrants, surfactants and the like which are usually used.
  • Solid preparations for oral administration include tablets, patients, powders, granules, capsules, troches and the like. These solid preparations can be prepared by adding to the lactic acid bacterium Enterococcus faecalis EF-2001 of the present invention at least one excipient, , Starch, calcium carbonate, sucrose or lactose, or gelatin. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc are also used.
  • Liquid preparations for oral administration include suspensions, solutions, emulsions or syrups. In addition to water and liquid paraffin which are commonly used simple diluents, various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances and preservatives may be included. have.
  • Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, suppositories, and the like.
  • non-aqueous solvent and the suspending agent examples include propylene glycol, polyethyleneglycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like.
  • injectable ester such as ethyl oleate, and the like.
  • a base for suppositories witepsol, macrogol, tween 61, cacao paper, laurin, glycerol, gelatin and the like can be used.
  • the present invention also provides a food composition for preventing and ameliorating muscular weakness related to muscular weakness comprising Enterococcus faecalis, a culture thereof or a bacterium cell thereof as an active ingredient.
  • muscle weakness related to muscle weakness refers to all diseases that may occur due to weakness of muscles, such as, for example, muscular dystrophy or muscular dystrophy.
  • the myopenia refers to a gradual decrease in skeletal muscle mass due to aging, which directly leads to a decrease in muscle strength, resulting in a decrease in various body functions and a disorder.
  • the atrophy is atrophy caused by muscle atrophy caused by loss of muscle tissue caused by not using muscle, muscle atrophy caused by muscle itself, or muscle damage caused by nerve damage. Muscle atrophy caused by loss of muscle tissue caused by not using the muscles is called disuse atrophy. Muscle atrophy caused by the muscle itself is caused by myasthenia gravis or dystrophy, It is preferable that the atrophy caused by the damage of the dominant nerve is spinal muscular amyotrophy, amyotrophic lateral sclerosis, or sphinobulbar muscular atrophy.
  • the Enterococcus faecalis EF-2001 microorganism cells or culture thereof of the present invention is free from cytotoxicity and inhibits the damage of muscle cells induced by oxidative stress, thereby exhibiting remarkable muscle reduction or prevention of muscular atrophy and therapeutic effect
  • the Enterococcus faecalis EF-2001, its culture or its dead cells of the present invention can be used as an active ingredient of a food composition for preventing and ameliorating muscular weakness related to muscle weakness.
  • the kind of the food to which the lactic acid bacterium Enterococcus faecalis EF-2001 of the present invention is added.
  • the foods to which the above substances can be added include dairy products including dairy products, meat, sausage, bread, biscuits, rice cakes, chocolate, candies, snacks, confectionery, pizza, ramen and other noodles, gums, ice cream, Beverages, alcoholic beverages and vitamin complexes, dairy products and dairy products, and includes processed foods and health functional foods in a conventional sense.
  • the food composition according to the present invention is a beverage composition
  • various flavors or natural carbohydrates such as ordinary beverages
  • natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose and the like; And polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol.
  • Natural flavors can be advantageously used as flavorings other than those described above.
  • the ratio of the natural carbohydrate is generally about 1 g to 20 g, preferably about 5 g to 10 g per 100 g of the composition of the present invention.
  • the present invention also provides a food additive for preventing and ameliorating muscle weakness-related diseases of muscles comprising Enterococcus faecalis, a culture solution thereof or a bacterium cell thereof as an active ingredient.
  • the food additive according to the present invention can be used as a food additive in the form of a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolyte), synthetic flavors and natural flavors, a coloring agent and a thickening agent (cheese, chocolate etc.), a pectic acid and its salt, , Organic acids, protective colloid thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonating agents used in carbonated drinks, and the like.
  • a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolyte), synthetic flavors and natural flavors, a coloring agent and a thickening agent (cheese, chocolate etc.), a pectic acid and its salt, , Organic acids, protective colloid thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonating agents used in carbonated drinks, and the like.
  • it may contain natural fruit juice and pulp for the production of fruit juice drinks and vegetable drinks
  • the Enterococcus faecalis EF-2001 dead cells of the present invention can be added directly to food or used together with other food or food ingredients, and can be suitably used according to conventional methods.
  • the amount of the active ingredient to be mixed can be suitably determined according to the intended use (for prevention or improvement).
  • the amount of the composition of the present invention in a health functional food may be 0.1 to 90 parts by weight per total food weight.
  • the amount may be less than the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount exceeding the above range.
  • the present invention relates to a method of treating muscular weakness related to muscle weakness comprising administering a pharmaceutically effective amount of Enterococcus faecalis, a culture thereof or a bacterium thereof to an individual or an individual afflicted with a muscle weakness- Provide prevention methods.
  • a non-human mammal such as a human or a non-human creature such as a cow, a monkey, a bird, a cat, a mouse, a rat, a hamster, a pig, a dog, a rabbit, This can be used for damaged objects.
  • the treatment can be administered orally or parenterally (for example, intramuscularly, intravenously, intraperitoneally, subcutaneously, intradermally, or topically) depending on the intended method,
  • parenterally for example, intramuscularly, intravenously, intraperitoneally, subcutaneously, intradermally, or topically
  • the severity of the disease, the form of the drug, the route of administration, and the time may be suitably selected by those skilled in the art.
  • the Enterococcus faecalis EF-2001 dead cells used in the present invention were prepared and prepared as follows.
  • the Enterococcus faecalis EF-2001 was aerobically or anaerobically cultured on a medium used for culturing a general lactic acid bacterium, and then cultured after seed culture.
  • the pH was maintained at a neutral or weakly acidic temperature of 20 to 40 ° C for 1 to 3 days.
  • the fermentation progressed so that the number of cells per g (gram) of the final raw material reached 7,500 billion won or more, it was pulverized through heat treatment and drying process.
  • Normal muscle cells (C2C12) were cultured in DMEM medium containing 5% fetal bovine serum (FBS). Normal skeletal muscle cells were cultured in a 75 cm2 plastic flask (SPL life science Co., Ltd. Korea) supplemented with 10% FBS, 7.5% NaHCO 3, 150 ⁇ g / ml, glutamine 58.4 ⁇ g / ml, and antibiotics / antimycotics ) was cultured in DMEM medium containing 4.4 ⁇ l / ml at 37 ° C and 5% CO 2. Cells were maintained in secondary culture once every 2-3 days.
  • FBS fetal bovine serum
  • Cells were removed from the bottom of the flask by treatment with 0.25% trypsin / EDTA followed by washing with CMF-PBS (calcium magnesium free-phosphate buffered saline, pH 7.2) After neutralization with the culture medium, the cells were centrifuged (1200 rpm, 5 min). The culture solution was added to the pellet of the remaining cells, and repeatedly inhaled with a sterile pipette to prepare a single cell suspension. The prepared cell suspension and trypan blue were mixed at a ratio of 1: 1 and measured using a hemocytometer on an optical microscope.
  • CMF-PBS calcium magnesium free-phosphate buffered saline, pH 7.2
  • EzCytox kit To determine the toxicity of the Enterococcus faecalis EF-2001 cells to muscle cells, an EzCytox kit was used. Specifically, normal muscle cells (C2C12) were dispensed in 96-well plates at 2 ⁇ 10 4 cells / well. The cells were cultured in an incubator at 37 ° C and 5% CO 2, and then cultured for 24 hours at various concentrations of linoleic acid at 0, 25, 50, 100, 250 and 500 ⁇ g / ml. Cell viability of normal muscle cells cultured for 24 hours was calculated using EzCytox kit to determine the cytotoxicity of Enterococcus faecalis EF-2001 cells.
  • muscle cells were placed in a 96-well plate at 2 ⁇ 10 4 cells / well and incubated for 24 hours at 37 ° C., And cultured at 5% CO 2. Then, cells of Enterococcus faecalis EF-2001 were added at concentrations of 0, 25, 50, 100, 250 and 500 ⁇ g / ml, respectively. The total volume was adjusted to 195 ⁇ l with 10% FBS- And cultured in an incubator at 37 ° C and 5% CO 2 for 24 hours. H 2 O 2 was added to the culture solution to a total volume of 200 ⁇ l at a concentration of 1 mM, and then cultured for another 120 minutes. After incubation, 10 E of EzCytox kit was added and the absorbance was measured after 1 hour to determine its effect.
  • HSP70 Heat Shock Proein
  • SOD1 protein Changes in the amount of HSP70 (Heat Shock Proein) and SOD1 protein were measured in western blot in addition group cells supplemented with Enterococcus faecalis EF-2001 cells. That is, normal muscle cells (C2C12) were dispensed in a 96-well plate at 5 ⁇ 10 4 cells / well and cultured in an incubator at 37 ° C and 5% CO 2. Thereafter, 25 ⁇ g / ml of Enterococcus faecalis EF-2001 cells were added, and the total volume was adjusted to 2 ml with 10% FBS-DMEM medium and cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 24 hours.
  • C2C12 normal muscle cells
  • H 2 O 2 was added to the culture solution to a total volume of 2 ml at a concentration of 1 mM, and then cultured for another 60 minutes. Cells were disrupted to obtain proteins. HSP70 and SOD1, and beta actin antibody were used to detect expression levels of HSP70 protein and SOD1 protein using Western blot.
  • the cells of the Enterococcus faecalis EF-2001 cells can prevent the inhibition of muscle atrophy by inducing an increase in expression of HSP70 and SOD1 protein in muscle cells (FIGS. 3 and 8)
  • mice that induced muscle loss Enterococcus Lacalis EF -2001 The dead cells Comparison of ability to recover muscle loss after ingestion
  • muscle images were obtained using a micro-tomography system to measure the initial muscle volume before muscle atrophy.
  • the right hindlimb nerve of the rat was excised to restrict muscle movement and induce atrophy.
  • Enterococcus faecalis EF-2001 was orally administered to rats at two concentrations of 2 mg / kg and 30 mg / kg.
  • the prophylactic group received Enterococcus faecalis EF-2001 daily for one week prior to surgery to induce atrophy, and the treatment group received Enterococcus faecalis EF-2001 for three weeks after surgery to induce atrophy.
  • the muscle images were acquired using a micro-tomography apparatus and are shown in FIG. 5. Based on the images, the difference in the effect of the ingestion of the Enterococcus faecalis EF-2001 on muscle atrophy Respectively.
  • the present inventors confirmed that the Enterococcus faecalis EF-2001 cells were able to potently eliminate oxidative stress-induced cell death and increased radicals, thereby counteracting oxidative damage, cell death and structural changes of cells Respectively.
  • tablets were prepared by tableting according to a conventional method for producing tablets.
  • the capsules were filled in gelatin capsules according to the conventional preparation method of capsules.
  • an injectable preparation was prepared by incorporating the aforementioned components in the amounts indicated.
  • Vitamin B6 0.5 mg
  • composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixture is comparatively mixed with a composition suitable for health food as a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional method for producing healthy foods , Granules can be prepared and used in the manufacture of health food compositions according to conventional methods.
  • the above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was stirred and heated at 85 DEG C for about 1 hour. The resulting solution was filtered to obtain a sterilized container, which was sealed and sterilized, And used for manufacturing.
  • compositional ratio is relatively mixed with a component suitable for a favorite drink, it is also possible to arbitrarily modify the compounding ratio according to the regional or national preference such as the demand class, the demanding country, and the use purpose.

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Abstract

본 발명은 엔테로코커스 패칼리스 그 중에서도 특히 엔테로코커스 패칼리스EF-2001, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육감퇴, 약화 및 근위축 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물, 식품 조성물 및 식품첨가제에 관한 것으로, 본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체는 산화스트레스(Oxidative stress)에 의한 근육세포의 손상을 억제하여 현저한 근육감퇴, 약화 및 근위축 치료 효과를 나타내므로, 본 발명의 유산균 사균체 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 또는 이의 배양액은 근위축, 근육감소예방을 위한 약학적 조성물, 식품 조성물 및 식품 첨가제의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육감퇴, 약화 및 근위축 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물, 식품 조성물 및 식품첨가제
본 발명은 엔테로코커스 패칼리스(Enterococcus faecalis), 이의 배양액 또는 이의 사균체의 신규한 용도에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001(Enterococcus faecalis EF-2001), 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 포함하는 근육감퇴, 약화 및 근위축 예방 및 치료/개선용 약학 조성물, 식품 조성물 및 식품 첨가물에 관한 것이다.
근력의 약화를 유발하는 질환은 노화와 함께 진행되는 근감소증(sarcopenia), 단백질 대사의 불균형이나 근육사용 감소에서 유발되는 근위축증(muscle atrophy), 기아, 소모성질환(암 등), 노화와 함께 진행되는 심위축증(acardiotrophy) 등이 있다.
근감소증(sarcopenia)은 노화가 진행되는 동안 근육량(skeletal muscle mass) 감소에 따른 근력의 저하를 일컫는다. 근감소증의 가장 큰 특징인 근육량의 감소뿐만이 아니라, 근섬유의 종류 변화도 관찰된다. 나이가 들어가면 타입 1과 타입 2가 비슷한 비율로 감소하는데 반해, 근감소증이 오면 타입 2의 근섬유 두께에는 큰 변화가 없지만 타입 1 근섬유 두께는 눈에 띄게 감소한다. 이러한 근감소증은 노인들 사이에서 일어나는 노쇠와 기능 장애를 유발한다고 보고되고 있다(Roubenoff R., Can. J. Appl. Physiol. 26, 78-89, 2001).
근감소증은 다양한 요인에 의해 유발되나, 각각의 요인들에 대한 연구는 아직 미진하다. 성장 호르몬의 감소 또는 신경학적 변화(neurological change), 생리활성(physical activity)의 변화, 대사의 변화, 성호르몬의 양 또는 지방이나 카타볼릭 싸이토카인(catabolic cytokines)의 증가와 단백질의 합성과 분화의 균형 변화에 의해 유도된다(Roubenoff R. and Hughes V.A., J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 55, M716-M724, 2000). 근감소증의 가장 큰 특징인 근육량 감소의 원인으로는 위성 세포의 활성(satellite cell activation) 감소가 중요한 원인으로 손꼽힌다. 위성 세포란, 기저막(basement membrane)과 근섬유의 근(sarcolemma) 사이에 위치하고 있는 작은 단핵 세포이다. 이들은 부상 또는 운동과 같은 자극에 의해 활성화되어 근원세포(myoblast)로 증식하며, 분화가 진행되면 다른 세포와 융합되어 다핵의 근섬유를 형성한다. 따라서 위성 세포의 활성이 감소함에 따라 손상된 근육을 재생하는 능력이나 분화 신호에 대한 반응이 떨어지게 되고 그 결과 근육 형성이 저하된다.
한편, 근위축(muscle atrophy)은 근육의 사용 감소와 같은 기계적 자극의 부재에 의한 근육 조직의 손상, 직접적인 상해나 물리적 요인에 의한 근육의 파괴, 노화에 의한 근육 세포의 회복력 장애, 그리고 근육의 작용을 조절하는 신경의 손상으로 인한 근육 사용의 장애와 같은 요인에 의해 발생한다(Booth FW., J Appl Physiol Respir Environ Exerc Physiol., 1982). 일반적인 경우 장애나 사고에 의해 장기간 해당 부위와 주변부의 근육을 사용하지 않아 근육 강도의 소실로 인해 점차 근위축으로 진행되는 무용성근위축(disuse atrophy)이 나타나며, 근육 자체의 질병으로 인한 중증 근무력증(myasthenia gravis), 근이영양증(dystrophy): 진행성 근이영양증, 근긴장성 근이영양증, 듀센형, 베커형, 지대형, 안면견갑상완형, 근육 자체에 발생하는 염증, 근육을 지배하는 신경의 손상으로 인한 근위축인 척수성 근위축(spinal muscular amyotrophy) : 베라드니히-호프만형, 쿠겔베르그, 벨란더병, 근위축성 축삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis; ALS) : 루게릭병, 척수구근 근위축(sphinobulbar muscular atrophy) : 케네디병 등의 형태로도 발병된다.
오늘날 윤택해진 삶의 질과 생활을 토대로 사람들의 관심사는 의식주에 집중되었던 과거에 비해 점점 복지와 여가생활로 집중되고 있으며 운동을 통한 건강한 삶을 영위하려 노력하고 있다. 그리고 이러한 생활을 영위하기 위해서는 수의근의 자유로운 조절과 사용이 전제되어야 하며, 근육 기능 이상으로 인한 수의근의 사용이 불가능한 상황은 사람의 활동 범위를 한정시키고 이로 인한 삶의 질을 저하시키는 결과를 초래한다.
근감소증의 치료방법으로는 크게 3가지를 들 수가 있다. 첫 번째는 운동이다. 운동은 단기적으로 골격근의 단백질 합성 능력을 증가시키며, 노인들의 근육의 힘이나 운동성을 증가시킨다고 보고되고 있다. 그러나 장기적 치료방법에 부적절하다(Timothy J. Doherty, J. Appl. Physiol. 95, 1717-1727, 2003). 두 번째는 약물치료로서 테스토스테론(Testosterone) 또는 아나볼릭 스테로이드(anabolic steroid)의 사용이 가능하나 이는 여성에게는 남성화를 유도하며, 남성의 경우 전립선 증상(prostate symptoms) 등 부작용을 나타낸다. 다른 승인된 처방법으로 DHEA(dehydroepiandrosterone) 와 성장 호르몬이 있는데 SARMs(Selective Androgen Receptor Modulators)을 포함하는 부위에서 치료법으로 가능하다는 연구가 보고된 바 있다(D.D. Thompson, J. Musculoskelet Neuronal Interact 7, 344-345, 2007). 최근에는 위성 세포를 분리하여 체외에서 분화시킨 후 체내에 도입시키는 줄기세포치료법(stem cell therapy)과 직접 체내의 위성 세포를 활성화하여 근육 분화(myogenesis)를 촉진시켜 근육을 유지하거나 강화시키는 방법이 근감소증과 같은 근력약화를 치료할 수 있는 방법으로 대두되고 있다(Shihuan Kuang, and Michael A. Rudnicki, Trends in Molecular Medicine 14, 82-31, 2008).
일반적으로 일상에서 근위축의 발병을 예방하기 위해 할 수 있는 가장 좋은 방법은 지속적인 근육의 사용을 통한 근육의 소실 예방이지만 부상이나 장애 등과 같이 본인의 의지와 상관없이 근육의 사용이 불가능해지는 경우에도 근육의 퇴화에 의한 근위축이 발생할 수 있다. 이러한 경우에도 근육에 자극을 주거나 근육의 퇴화를 예방하여 근위축을 막을 수 있는 대응책과 그에 대한 연구가 필요하다.
활성 산소 종(reactive oxygen species)은 화학적으로 반응성이 큰 분자 집단으로써 주변 물질들과 전자를 주고받으려는 산화 환원 반응에 대한 성질이 강하여 높은 반응성을 나타내는 물질이다. 이러한 활성 산소 종의 반응성으로 인해 세포 내 단백질분자나 DNA와 같은 주위 물질들은 전자를 잃고 산화되어 변이를 나타내게 되고 올바른 기능을 수행하지 못하게 되며 올바른 기능을 수행할 수 없게 된 세포는 생존이 불가능해져 세포사멸이 유도될 수 있다. 이와 같은 스트레스의 여러 요인 중 활성 산소 종에 의한 산화 스트레스는 근육세포에서도 나타나며 이러한 산화 스트레스에 의해 근육 세포의 소실과 근위축이 유도될 수 있다. 다양한 스트레스 요인들은 근육 조직의 손상뿐만 아니라 생체 내 여러 조직에 영향을 주는 것으로 보여져 여러 가지 질병의 요인들로 주목받고 있다(MCKinnell IW., and Rudnicki MA., Cell, 2004).
엔테로코커스 패칼리스 EF-2001(Enterococcus faecalis EF-2001)은 2세 여아의 장내 세균총 스크리닝을 통하여 동정되었다. 이러한 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 열처리하여 사멸시키고 균체 성분을 회수한 것이 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체이다.
엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 생리활성에 대해 보고된 연구들에 따르면 DSS(Dextran sulfate sodium)로 유도된 대장염을 앓고 있는 마우스의 경우 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 섭취한 마우스에서 DSS 완화 효과를 보였으며 이식한 육종암세포(Sarcoma-180)의 증식이 감소되고 NK세포가 활성화됨이 보고되었다(Tadano et al., J. Japan Mibyou System association, 2011). 또한, 생화학적으로는 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 섭취시킨 마우스의 경우 고지방 식이를 섭취한 후에도 총 콜레스테롤 및 중성지방의 비율이 저하됨이 보고되었다(Ku et al., Medicine and biology, 2007). 또한, 유해균의 억제 및 정장 작용에 관해서, 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001은 백태의 원인인 Candida albican의 활동성을 억제하여 증세 개선 및 예방 효과를 나타내며(Ishijima et al., Med. Mycol. J, 2014), 항생제를 투여한 마우스에서 장내 대조군에 비해 유익균은 빠르게 증식하고 유해균은 억제시키는 효능이 개시되어 있다(Simohashi et al., Medicine and biology, 2002). 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 다양한 생리활성은 사균체의 특성상 열과 pH에 영향을 받지 않아 다양한 형태의 제제로 가공이 가능한 장점이 있다(Kan, Food industry, 2001). 또한 그램당 7조 5천억 마리의 균체 함량으로 적은 양으로도 다량의 유산균체 섭취가 가능하다.
한편, 근위축증 치료제에 관한 선행문헌으로, 한국등록특허 제1,560,799호에는 hnRNP M(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein M) 또는 이를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 유효성분으로 포함하는 척수성 근위축증 치료용 조성물이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1,468,123호에는 포유동물 탯줄 유래 줄기세포를 유효성분으로 포함하는 근위축 질환 개선 또는 치료용 조성물이 개시되어 있으며, 한국등록특허 제1,385,191호에는 치커리(Cichorium intybus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 근위축 예방 및 치료용 의약 조성물이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1,349,361호에는 등골나물(Eupatorium chinensis var. simplicifolium) 추출물을 유효성분으로 포함하는 근위축 예방 및 치료용 의약 조성물이 개시되어 있을 뿐, 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체의 근위축에 대한 효과에 대해서는 전혀 알려진 바 없다.
이에, 본 발명자들은 세포독성이 없고, 인체에 안전성이 확보된 신규한 근육감퇴, 약화 및 근위축증 치료제를 개발하기 위해 노력한 결과, 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체가 세포독성이 없고, 인체에 안정성이 확보되어 있으며, 산화스트레스(Oxidative stress)에 의한 근육세포의 손상 및 세포사멸을 억제하여 현저한 근육감퇴, 약화 및 근위축 치료효과를 나타냄을 발견함으로써 본 발명을 완성하였다.
[선행기술문헌]
[특허문헌]
한국등록특허 제1560799호 (등록일 2015.10.08)
한국등록특허 제1349361호 (등록일 2014.01.02)
[비특허문헌]
Roubenoff R., Can. J. Appl. Physiol. 26, 78-89, 2001
Roubenoff R. and Hughes V.A., J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 55, M716-M724, 2000
D.D. Thompson, J. Musculoskelet Neuronal Interact 7, 344-345, 2007
Shihuan Kuang, and Michael A. Rudnicki, Trends in Molecular Medicine 14, 82-31, 2008
Timothy J. Doherty, J. Appl. Physiol. 95, 1717-1727, 2003
Tadano et al., J. Japan Mibyou System association, 2011
Ku et al., Medicine and biology, 2007
Ishijima et al., Med. Mycol. J, 2014
Simohashi et al., Medicine and biology, 2002
Kan, Food industry, 2001
종래 엔테로코커스 패칼리스의 근육의 근력 약화 관련 질환 치료용도에 대해서 알려진 바가 없었다. 따라서 본 발명은 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 인체에 대한 안정성을 입증하고, 산화스트레스(Oxidative stress)를 원인으로 하는 근육세포의 손상을 억제하여 현저한 근육감퇴, 약화 및 근위축 치료 효과가 있음을 확인하였다. 따라서 본 발명의 목적은 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체 및 이의 배양액의 근육감퇴, 약화 및 근위축 질환 치료효능을 입증하고 새로운 근육감퇴, 약화 및 근위축 예방 및 치료용 약학적 조성물, 식품 조성물 및 식품첨가제를 제공하기 위한 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 엔테로코커스 패칼리스(Enterococcus faecalis), 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 첨가물을 제공한다.
아울러, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 근육의 근력 약화 관련 질환에 걸린 개체, 또는 개체에 투여하는 단계를 포함하는 근육의 근력 약화 관련 질환 치료 또는 예방 방법을 제공한다.
본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001(Enterococcus faecalis EF-2001) 사균체는 세포 독성이 없고, 산화 스트레스(Oxidative stress)에 의한 근육세포의 손상을 억제하여 현저한 근육감퇴, 약화 및 근위축 치료 효과를 나타내므로, 본 발명의 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체는 근육감퇴, 약화 및 근위축 예방 또는 치료용 조성물의 유효성분, 식품 조성물 및 식품 첨가제로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 (Enterococcus faecalis EF-2001)의 세포 독성을 확인한 도이다.
도 2는 산화 스트레스(Oxidative stress)로 유도된 근육세포 손상에 대한 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 효과를 확인한 도이다. NAC는 양성대조군인 N-아세틸 시스테인 처리군이다.
도 3은 산화 스트레스 환경에서 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 근육 세포 내 HSP70(Heat Shock Protein) 단백질의 발현 변화 비교를 확인한 도이다.
도 4는 쥐의 우측 뒷다리 궁둥 신경을 절제하여 근육의 움직임을 제한해 근위축을 유도하는 수술 후 2 mg/kg과 30 mg/kg 두 개의 서로 다른 농도의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 경구 투여하는 시기 및 실험 계획을 나타낸 도이다.
도 5는 쥐의 우측 뒷다리 궁둥 신경을 절제하여 근육의 움직임을 제한해 근위축을 유도하는 수술을 한 후 수술 1주 전부터 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 매일 섭취시킨 예방군과 수술 후 3주간 매일 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 섭취시킨 치료군의 근육을 수술 3주 후 미세 단층 촬영 장치를 이용하여 촬영한 근육 영상을 나타낸 도이다.
도 6은 도 5에 나타낸 촬영된 영상을 기반으로 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 섭취여부에 따라 근위축에 미치는 영향과 차이를 비교 분석하여 나타낸 도이다.
도 7은 H2O2로 유도되는 세포사에서 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체의 효과를 확인한 도이다.
도 8은 산화 스트레스 환경에서 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 근육 세포 내 SOD1 단백질의 발현 변화 비교를 확인한 도이다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명은 엔테로코커스 패칼리스(Enterococcus faecalis), 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 엔테로코커스 속 미생물은 자연계에 널리 존재하며 탄수화물을 호기적으로 이용한다. 일반적으로 엔테로코커스 속 미생물과 같은 세균은 생체내 길항작용이나 분비 항균성 물질에 의하여 병원성 미생물에 의한 피해를 예방한다고 알려져 있다.
상기 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체는 시판되는 것, 또는 공지된 사균체 제조법으로 제조된 것 중 어느 것을 이용하여도 무방하며, 독성을 나타내지 않고, 인체에 무해하다.
상기 배양액은 엔테로코커스 패칼리스를 배양 배지에서 배양하여 수용한 배양액, 농축 배양액, 배양액 건조물, 배양 여과액, 농축 배양 여과액, 또는 배양 여과액의 건조물을 의미하는 것으로 상기 균주를 포함하는 것, 배양한 후 균주를 제거한 배양여액일 수 있다.
상기 사균체는 상응한 생균체를 열처리하거나 포르말린 또는 기타 살균제와 함께 처리하여 제조할 수 있으며 사균체는 실질적으로 죽어 있는 것이어도 사용가능하다. 또한, 본 발명에서 사용한 상기 사균체는 하기와 같은 방법으로 제조될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다:
1) 엔테로코커스 페칼리스(Enterococcus faecalis)를 종균배양한 후, 중성 또는 약산성에서 20~40 ℃의 온도범위에서 본 배양하는 단계;
2) 상기 1)의 본 배양한 후 열처리 후 건조하는 단계.
상기 근육의 "근력 약화"란 한 개 또는 그 이상의 근육의 힘이 감소된 상태를 의미한다. 상기 근력 약화는 어느 한 근육이나, 몸의 한쪽, 상지나 하지 등에 국한될 수도 있고, 전신에 걸쳐 나타날 수도 있다. 또한 근피로나 근육통을 포함하는 주관적인 근력 약화 증상은 이학적 검진을 통해 객관적인 방법으로 정량화될 수 있다.
상기 근력 약화 관련 질환이란 근력약화로 인해 발생할 수 있는 모든 질환을 의미하며, 예를 들어 근감소증 또는 근위축증 등을 들 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
상기 근감소증은 노화에 따른 점진적인 골격 근육량의 감소를 의미하는 것으로서, 직접적으로 근력의 저하를 유발하며 그 결과 각종 신체기능의 감소 및 장애를 일으킬 수 있는 상태를 의미한다.
상기 근위축은 근육을 사용하지 않음으로써 발생하는 근육조직의 손실로 인한 근위축, 근육 자체의 병으로 인한 근위축 또는 근육을 지배하는 신경의 손상으로 인한 근위축인 것이 바람직하다. 상기 근육을 사용하지 않음으로써 발생하는 근육 조직의 손실로 인한 근위축은 무용성 근위축(disuse atrophy), 상기 근육 자체의 병으로 인한 근위축은 중증근무력증(myasthenia gravis) 또는 근이영양증(dystrophy), 근육을 지배하는 신경의 손상으로 인한 근위축은 척수성 근위축(spinal muscular amyotrophy), 근위축성 축삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis) 또는 척수구근 근위축(sphinobulbar muscular atrophy)인 것이 보다 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 구체적인 실험예에서, 본 발명자들은 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체가 세포 독성이 없음을 확인하였으며(도 1 참조) 산화 스트레스로 유도된 근육세포 손상에 있어서 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체 처리시 농도에 따라 근육세포의 생존율이 회복되는 효과를 확인하였다(도 2 참조). 또한 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체를 첨가한 세포에서 HSP70 및 SOD1 단백질 양의 변화를 측정한 결과 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체가 근육세포의 HSP70 및 SOD1 단백질의 발현양을 증가시켜 근위축 억제를 유도함을 알아내었으며(도 3 및 도 8 참조), 근육감소를 유도한 마우스에 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체를 섭취시킨 후 감소된 근육량이 다시 회복됨을 확인하였다(도 4 내지 도 6 참조). 아울러, 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체는 근육세포의 산화적 스트레스로 유도된 세포사 및 증가된 라디칼을 잠정적으로 소거함으로써 산화적 손상인 세포사 및 세포의 구조적 변화에 대항함을 확인하였다(도 7 참조).
결론적으로, 본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체는 세포 독성이 없고, 산화 스트레스로 유도된 근육세포의 손상을 억제하여 현저한 근위축 치료 효과를 나타내므로, 본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001, 이의 배양액 또는 이의 사균체는 근위축, 근육 감소 등의 근육의 근력 약화 관련 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜 또는 위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
구체적으로, 본 발명에 따른 조성물의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1 kg 당 0.1 mg 내지 100 mg, 바람직하게는 0.2 mg 내지 17 mg을 매일 또는 격일로 투여하거나 1일 1회 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
상기 조성물을 제제화할 경우, 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.
경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 유산균 사균체 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러가지 부형제, 예를들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결 건조 제제, 좌제 등이 포함된다.
비수성용제, 현탁 용제로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸 렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween)61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 근육의 근력 약화 관련 질환이란 근력약화로 인해 발생할 수 있는 모든 질환을 의미하며, 예를 들어 근감소증 또는 근위축증등을 들 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
상기 근감소증은 노화에 따른 점진적인 골격 근육량의 감소를 의미하는 것으로써, 직접적으로 근력의 저하를 유발하며 그 결과 각종 신체기능의 감소 및 장애를 일으킬 수 있는 상태를 의미한다.
상기 근위축은 근육을 사용하지 않음으로써 발생하는 근육조직의 손실로 인한 근위축, 근육 자체의 병으로 인한 근위축 또는 근육을 지배하는 신경의 손상으로 인한 근위축인 것이 바람직하다. 상기 근육을 사용하지 않음으로써 발생하는 근육 조직의 손실로 인한 근위축은 무용성 근위축(disuse atrophy), 상기 근육 자체의 병으로 인한 근위축은 중증근무력증(myasthenia gravis) 또는 근이영양증(dystrophy), 근육을 지배하는 신경의 손상으로 인한 근위축은 척수성 근위축(spinal muscular amyotrophy), 근위축성 축삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis) 또는 척수구근 근위축(sphinobulbar muscular atrophy)인 것이 보다 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
결론적으로, 본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체 또는 이의 배양액은 세포 독성이 없고, 산화 스트레스로 유도된 근육세포의 손상을 억제하여 현저한 근육감소 또는 근위축 예방 및 치료 효과를 나타내므로, 본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001, 이의 배양액 또는 이의 사균체는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있다.
본 발명의 유산균 사균체 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001이 첨가되는 식품의 종류에는 특별한 제한이 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 가공 식품 및 건강 기능 식품을 모두 포함한다.
본 발명에 따른 식품 조성물이 음료 조성물인 경우, 필수 성분이 지시된 비율로 상기 화합물을 함유하는 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를들어, 포도당, 과당등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아추출물, 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100g 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 g 내지 10 g이다.
또한, 본 발명은 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 첨가제를 제공한다.
본 발명에 따른 식품 첨가제는 여러가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 첨가 비율은 제한되지 않으나, 본 발명의 리놀레산 100 중량부당 0.1 내지 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체는 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로 건강기능식품 내 본 발명의 조성물의 양은 전체 식품 중량부당 0.1 내지 90 중량부로 할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
아울러, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 근육의 근력 약화 관련 질환에 걸린 개체, 또는 개체에 투여하는 단계를 포함하는 근육의 근력 약화 관련 질환 치료 또는 예방 방법을 제공한다.
상기 개체는 인간 또는 인간 이외의 생물, 예를 들면 소, 원숭이, 새, 고양이, 마우스, 렛트, 햄스터, 돼지, 개, 토끼, 양, 말 등의 비인간 포유동물을 의미하는 것으로, 창상 또는 피부 조직이 손상된 개체에 이용할 수 있다.
또한 상기 처리는 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구투여(예를 들어, 근육 내, 정맥 내, 복강 내, 피하, 피내, 또는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
이하 본 발명을 실시예, 실험예 및 제조예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예, 실험예 및 제조예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예, 실험예 및 제조예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체의 제조준비
본 발명에서 사용한 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체를 하기와 같이 제조 및 준비하였다.
구체적으로, 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 일반적인 유산균 배양에 사용되는 배지에 호기 또는 혐기 배양을 하였으며 종균배양을 거친 후 본 배양을 하였다. pH는 중성 또는 약산성, 배양온도는 20~40℃를 유지하면서 1~3 일간 배양하였다. 최종 원료를 기준으로 g(그램)당 균체의 수가 7조 5천억 이상에 이르도록 발효가 진행되면 열 처리 후 건조 과정을 거쳐 분말화하였다.
<실시예 2> 세포의 배양
정상근육세포(C2C12)를 우태아혈청(fetal bovine serum; FBS)이 5 % 함유된 DMEM 배지에서 배양하였다. 즉, 75 ㎠ 플라스틱 플라스크(SPL life science Co., Ltd. Korea)에 정상 골격 근육세포를 10 % FBS, 7.5 % NaHCO3 150 μg/ml, 글루타민 58.4 μg/ml 및 항생제(antibiotic)/항진균제(antimycotics) 4.4 μl/ml가 함유된 DMEM 배지에서 37℃, 5% CO₂의 조건 하에서 배양하였다. 2~3일마다 한 번씩 2차 배양하여 세포주를 유지하였다.
<실시예 3> 세포 정량
세포가 자란 75 ㎠ 플라스틱 플라스크에서 배지액을 제거하고, CMF-PBS (calcium magnesium free-phosphate buffered saline, pH 7.2)로 세척한 후, 0.25 % 트립신/EDTA를 처리하여 세포를 플라스크 바닥으로부터 떼어내고 세포 배양액으로 중화시킨 후 원심분리(1200 rpm, 5 min) 하였다. 남은 세포의 펠렛(pellet)에 배양액을 가한 다음, 멸균 피펫으로 반복 흡입하여 단일 세포 부유액을 제조하였다. 제조한 세포 부유액과 트립판 블루(trypan blue)를 1:1의 비율로 혼합하여 광학 현미경상에서 혈구계산판(hemocytometer)을 이용하여 측정하였다.
< 실험예 1> 엔테로코커스 패칼리스 EF -2001 사균체의 세포 독성(Cell viability) 확인
엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체의 근육세포에 대한 독성 측정은 EzCytox 키트를 이용하였다. 구체적으로, 정상근육세포(C2C12)를 96 well plate에 2×104 cells/well이 되도록 분주하였다. 이를 37℃, 5% CO₂ 조건의 배양기에서 배양한 후, 0, 25, 50, 100, 250, 500 μg/ml의 다양한 농도의 리놀레산을 첨가하여 24시간 동안 배양하였다. 24시간 동안 배양한 정상 근육 세포를 대상으로 EzCytox키트를 이용하여 세포 생존율을 계산함으로써 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체의 세포 독성을 결정하였다.
그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체를 첨가하지 않았을 경우 근육세포는 100 %의 생존률을 나타내었으며, 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체를 여러 농도로 첨가한 군에서 역시 리놀레산을 첨가하지 않은 군과 비슷한 생존률을 보였다. 따라서 본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체는 근육세포에 대하여 세포독성을 나타내지 않음을 확인하였다(도 1).
< 실험예 2> 산화 스트레스로 유도된 근육세포 손상에 대한 엔테로코커스 패칼리스 EF -2001 사균체의 효과 확인
H2O2로 유도된 세포사멸에 있어서 EF-2001 사균체의 농도별 효과를 확인하기 위하여, 먼저 96 well plate에 근육세포를 2×104 cells/well이 되도록 넣고, 24시간동안 37℃, 5% CO₂ 조건에서 배양하였다. 그런 다음, 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체를 0, 25, 50, 100, 250, 500 μg/ml의 농도로 각각 첨가한후, 10 % FBS-DMEM 배지로 전체부피를 195 ㎕로 조절하여 37℃, 5% CO2의 조건의 배양기에서 24시간 배양하였다. 이 배양액에 H2O2를 1 mM 농도로 전체 부피가 200 ㎕가 되게 첨가한 다음, 이를 다시 120 분간 배양하였다. 배양 후, EzCytox kit 10 ㎕를 첨가하고, 1시간 후 흡광도를 측정하여 그 효과를 결정하였다.
그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, H2O2를 첨가하지 않았을 경우 근육세포는 100 %의 생존율을 나타내었으며, H2O2를 처리시 세포 생존율이 떨어지는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체를 처리시 농도에 따라 근육세포의 생존율이 회복되는 효과를 확인하였다(도 2).
따라서 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체는 농도 의존적으로 산화 스트레스에 대한 근육 세포의 손상을 유의적으로 회복시킴을 확인하였다.
< 실험예 3> HSP70 (Heat Shock Proein ) 및 SOD1 단백질의 발현 변화 비교
엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체를 첨가한 첨가군 세포에서 HSP70(Heat Shock Proein) 및 SOD1 단백질 양의 변화를 웨스텐 블롯(western blot)을 이용하여 측정하였다. 즉, 정상 근육 세포(C2C12)를 96 well plate에 5×104 cells/well이 되도록 분주한 후, 이를 37℃, 5% CO₂조건의 배양기에서 배양하였다. 그 후, 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체를 25 μg/ml 첨가한후, 10 % FBS-DMEM 배지로 전체 부피를 2 ml로 조절하여 37℃, 5% CO₂조건에서 24시간 배양하였다. 이 배양액에 H2O2를 1 mM 농도로 전체 부피가 2 ml이 되게 첨가한 다음, 이를 다시 60 분간 배양한 후, 세포를 파쇄하여 단백질을 획득하였다. 웨스턴 블롯을 이용하여 HSP70과 SOD1, 및 베타엑틴 항체를 사용해 HSP70 단백질과 SOD1 단백질의 발현량을 검출하였다.
그 결과 도 3 및 도 8에 나타낸 바와 같이 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체를 첨가한 첨가군에서는 정상세포의 HSP70 및 SOD1 단백질 발현 수준까지 회복하였다. 즉, HSP70의 발현을 통하여 근육세포의 산화적 스트레스에 대한 근육 세포보호 효과를 나타냄을 확인하였다. 또한, 산화적 스트레스인 활성산소의 자유라디칼을 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체가 감소시켜 활성산소에 대해 나타나는 SOD1의 발현을 회복시키는 것을 확인하였다.
따라서 본 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체는 근육세포의 HSP70 및 SOD1 단백질의 발현 증가를 유발함으로써 근위축 억제를 예방할 수 있음을 확인하였다(도 3 및 도 8)
< 실험예 4> 근육감소를 유도한 마우스에 엔테로코커스 패칼리스 EF -2001 사균체를 섭취시킨 후 근육 감소 회복 능력 비교
엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체의 근위축 예방 및 회복 효과를 확인하기 위해 근위축 유발 전 초기 근육량 측정을 위해 미세 단층 촬영 장치를 이용하여 근육 영상을 획득하였다.
구체적으로, 근위축을 유발하기 위하여 쥐의 우측 뒷다리 궁둥 신경을 절제하여 근육의 움직임을 제한해 근위축을 유도하였다. 도 4에 표시한 디자인으로 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 2 mg/kg 과 30 mg/kg 두개의 농도로 쥐에게 경구 투여 방법으로 섭취시켰다. 예방군은 근위축을 유도하는 수술 1주 전부터 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 매일 섭취시켰으며, 치료군은 근위축을 유도하는 수술 후 매일 3주간 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 섭취시켰다. 수술 3주 후 미세 단층 촬영 장치를 이용하여 근육 영상을 획득하여 도 5에 표시하였고, 촬영된 영상을 기반으로 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 섭취 여부에 따라 근위축에 미치는 영향과의 차이를 비교 분석하였다.
그 결과, 도 6에 나타낸 바와 같이 3주에서 4주 간 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001을 섭취시킨 결과 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 섭취군의 근육양이 근위축군(Denervation)에 비해 회복되었음을 확인하였다(도 5 및 도 6).
< 실험예 5> 산화 스트레스로 유도된 근육세포 아폽토시스에 대한 엔테로코커 스 패칼리스 EF-2001 사균체의 효과 확인
H2O2로 유도되는 세포사에서 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체의 효과를 확인하기 위하여, DAPI 고정염색을 통해 염색질 응축 및 단편화 형태 변화를 통해 확인하였다.
구체적으로, H2O2를 처리한 실험군에서는 처리하지 않은 대조군에 비해 염색질 응축 및 단편화 형태의 세포수가 높게 관찰되었고, 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체의 농도별로 처리한 군에서는 염색질 응축 및 단편화 형태의 세포수가 농도 의존적으로 감소되는 것을 확인하였다(도 7). H2O2로 유도된 근육세포의 경우 세포 내 높은 라디칼 농도를 유지하여 단백질 또는 DNA에 손상을 주게 되며 이는 세포 외막, 세포내 구조 단백질, 핵안 DNA 등에서 산화를 시켜 구조적 변화로 인한 손상을 유발함으로써 세포사를 유도한다.
따라서, 본 실험을 통해 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체는 근육세포의 산화적 스트레스로 유도된 세포사 및 증가된 라디칼을 잠정적으로 소거함으로써 산화적 손상인 세포사 및 세포의 구조적 변화에 대항함을 확인하였다.
<제조예 1> 약제의 제조
1. 산제의 제조
본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체 1 mg ~ 10 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
2. 정제의 제조
본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체 1 mg ~ 10 g
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산마그네슘 2 mg
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
3. 캡슐제의 제조
본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체 1 mg ~ 10 g
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산마그네슘 2 mg
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
4. 주사제의 제조
엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체 1 mg ~ 10 g
만니톨 180 mg
Na₂·HPO₄·2H2O 26 mg
증류수 2974 mg
통상적인 주사제의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 함유시켜 주사제를 제조하였다.
<제조예 2> 건강 식품의 제조
1. 건강 식품의 제조
본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체 1 mg ~ 10 g
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 mg
비타민 0.13 mg
비타민 B2 0.15 mg
비타민 B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 mg
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 mg
엽산 50 mg
판토텐산칼슘 0.5 mg
무기질혼합물 적량
황산제1철 1.75 mg
산화아연 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 mg
제1인산칼륨 15 mg
제2인산칼슘 55 mg
구연산칼륨 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강 식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합조성 하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조 방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
2. 건강음료의 제조
본 발명의 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체 1 mg ~ 10 g
구연산 1000 mg
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가한 전체 900 ml
통상의 건강 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 건강 음료 조성물 제조에 사용하였다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (22)

  1. 엔테로코커스 패칼리스(Enterococcus faecalis), 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 엔테로코커스 패칼리스는 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001(Enterococcus fecalis EF-2001)인 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 엔테로코커스 패칼리스는 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 사균체인 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.
  4. 제 3항에 있어서, 상기 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체는, 엔테로코커스 패칼리스를 종균 배양한 후, 중성 또는 약산성 및 20~40℃의 온도범위에서 본 배양 한 다음, 열처리를 거쳐 수득되는 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 근육세포 내 HSP70 단백질 또는 SOD1 단백질의 발현을 증가시키는 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.
  6. 제 1항에 있어서, 상기 질환은 근감소증 또는 근위축증인 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 근위축증은 무용성근위축(disuse atrophy), 중증근무력증(myasthenia gravis), 근이영양증(dystrophy), 척수성 근위축(spinal muscular amyotrophy), 근위축성 축삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis) 및 척수구근 근위축(sphinobulbar muscular atrophy)으로 이루어진 군에서 선택되는 질환인 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  8. 제 1항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 캡슐, 정제, 분말, 과립, 액상, 환, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리 및 바로 이루어진 군에서 선택되는 형태의 제제인 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  9. 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물.
  10. 제 9항에 있어서, 상기 엔테로코커스 패칼리스는 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001인 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물.
  11. 제 9항에 있어서, 상기 엔테로코커스 패칼리스는 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 사균체인 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물.
  12. 제 11항에 있어서, 상기 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001 사균체는, 엔테로코커스 패칼리스를 종균 배양한 후, 중성 또는 약산성, 및 20~40℃의 온도범위에서 본 배양 한 다음, 열처리를 거쳐 수득되는 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물.
  13. 제 9항에 있어서, 상기 질환은 근감소증 또는 근위축증인 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물.
  14. 제 13항에 있어서, 상기 근위축증은 무용성근위축, 중증근무력증, 근이영양증, 척수성 근위축, 근위축성 축삭 경화증 및 척수구근 근위축으로 이루어진 군에서 선택되는 질환인 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물.
  15. 제 9항에 있어서, 상기 식품에 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제, 천연 풍미제, 착색제, 중진제, 펙트산, 팩트산 염, 알긴산, 알긴산염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산화제 및 과육 중 선택된 하나 이상의 첨가제를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물.
  16. 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 첨가물.
  17. 제 16항에 있어서, 상기 엔테로코커스 패칼리스는 엔테로코커스 패칼리스 EF-2001의 사균체인 것을 특징으로 하는 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 첨가물.
  18. 약학적으로 유효한 양의 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 근육의 근력 약화 관련 질환에 걸린 개체에 투여하는 단계를 포함하는 근육의 근력 약화 관련 질환 치료 방법.
  19. 약학적으로 유효한 양의 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 개체에 투여하는 단계를 포함하는 근육의 근력 약화 관련 질환 예방 방법.
  20. 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물로 사용하기 위한, 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체의 용도.
  21. 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물로 사용하기 위한, 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체의 용도.
  22. 근육의 근력 약화 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 첨가물로 사용하기 위한, 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체의 용도.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4074324A4 (en) * 2019-10-24 2024-02-28 Doctor TJ Co., Ltd. COMPOSITION CONTAINING ENTEROCOCUS FAECALIS AS ACTIVE INGREDIENT FOR THE PREVENTION OR TREATMENT OF OBESITY OR METABOLIC SYNDROMES INDUCED THEREBY

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003261453A (ja) * 2002-03-11 2003-09-16 Nippon Berumu Kk Ｅ．フェカリスからなる抗腫瘍剤及び放射線防護剤
KR20060108964A (ko) * 2005-04-14 2006-10-19 정명준 엔테로코커스 패칼리스 ｃｂｔ―ｓｌ（5）, 이를 이용한항균 배양액 분리농축물의 제조 방법 및 이를 포함하는조성물
KR20140070794A (ko) * 2012-11-27 2014-06-11 차의과학대학교 산학협력단 탯줄 유래 줄기세포를 포함하는 근위축 질환 개선 또는 치료용 조성물
KR20140082964A (ko) * 2011-10-11 2014-07-03 아힘 바이오테라퓨틱스 에이비 혐기성 조건으로 배양된 인간 장내 미생물을 포함하는 조성물
KR20170123122A (ko) * 2016-04-28 2017-11-07 연세대학교 원주산학협력단 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육감퇴, 약화 및 근위축 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물, 식품 조성물 및 식품첨가제

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002249434A (ja) * 2001-02-23 2002-09-06 Nippon Berumu Kk 鎮痛剤
WO2016068186A1 (ja) * 2014-10-29 2016-05-06 東亜薬品工業株式会社 腸管筋層菲薄化予防・治療組成物、下痢予防・治療組成物及び離乳ストレス緩和組成物

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003261453A (ja) * 2002-03-11 2003-09-16 Nippon Berumu Kk Ｅ．フェカリスからなる抗腫瘍剤及び放射線防護剤
KR20060108964A (ko) * 2005-04-14 2006-10-19 정명준 엔테로코커스 패칼리스 ｃｂｔ―ｓｌ（5）, 이를 이용한항균 배양액 분리농축물의 제조 방법 및 이를 포함하는조성물
KR20140082964A (ko) * 2011-10-11 2014-07-03 아힘 바이오테라퓨틱스 에이비 혐기성 조건으로 배양된 인간 장내 미생물을 포함하는 조성물
KR20140070794A (ko) * 2012-11-27 2014-06-11 차의과학대학교 산학협력단 탯줄 유래 줄기세포를 포함하는 근위축 질환 개선 또는 치료용 조성물
KR20170123122A (ko) * 2016-04-28 2017-11-07 연세대학교 원주산학협력단 엔테로코커스 패칼리스, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 근육감퇴, 약화 및 근위축 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물, 식품 조성물 및 식품첨가제

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4074324A4 (en) * 2019-10-24 2024-02-28 Doctor TJ Co., Ltd. COMPOSITION CONTAINING ENTEROCOCUS FAECALIS AS ACTIVE INGREDIENT FOR THE PREVENTION OR TREATMENT OF OBESITY OR METABOLIC SYNDROMES INDUCED THEREBY

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