WO2018221651A1 - チーズ風味素材の製造方法 - Google Patents
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- A23C9/13—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using additives
- A23C9/137—Thickening substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/131—Cremoris
-
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- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/147—Helveticus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/157—Lactis
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/165—Paracasei
Definitions
- the present invention relates to a method for producing a cheese-flavored material.
- this invention relates to the manufacturing method of the cheese flavor raw material which has a natural cheese flavor.
- analog cheese As an alternative material for cheese, materials called analog cheese, imitation cheese, and EMC (enzyme-treated cheese) are generally used.
- Analog cheese or imitation cheese is a food material having a cheese-like flavor and physical properties even though almost no cheese is used as a raw material.
- EMC is a material that greatly enhances the cheese flavor by adding lactic acid bacteria, proteases, lipases and the like to the raw material cheese and reacting it, and it is also used as a raw material material for analog cheese and imitation cheese It is done.
- the cheese is thought to have a complex flavor due to the aging of the lactic acid bacteria and the elution of the intracellular enzymes of the lactic acid bacteria due to its long-term aging.
- a cheese-flavored material can be obtained by adding lactic acid bacteria or enzyme treatment to cheese or milk raw materials.
- Patent Document 1 JP-T-2007-527213 (Patent Document 1) describes a method for preparing a cheese-like product using lactase-producing microorganisms and lactic acid bacteria (for example, claims of this document).
- Patent Document 2 describes an enzyme-treated cheese obtained by allowing an enzyme produced by Lactobacillus helveticus to act on cheese (for example, claims of this document). ).
- Patent Document 3 JP 2013-503604 A (Patent Document 3) describes that in a method for producing a dairy product using lactic acid bacteria, the dairy product contains cheese, and an enzyme is used before fermentation. (For example, the claims of this document).
- JP-T-2007-527213 (WO2005 / 002361) JP 2009-296972 A JP 2013-503604 A (WO2011 / 026863) Japanese Unexamined Patent Publication No. 2016-093198
- the present inventors have recently crushed lactic acid bacteria to be used by acid addition, and the resulting crushed cells are reacted with enzymes such as protease, peptidase, and lipase in addition to the milk raw material. Compared with conventional flavor materials, we have succeeded in obtaining a cheese flavor material characterized by a flavor closer to natural cheese.
- the present inventors also examined the case of using a crushed cell product by salt treatment and alkali treatment instead of the crushed cell product by acid treatment, and similarly obtained a cheese-flavored material. Successful. By using a cell disruption product efficiently obtained by simple operations such as acid, salt and alkali addition treatment, the flavor of cheese-flavored ingredients can be improved to a more natural cheese-flavored flavor. That was unexpected.
- the present invention is based on these findings.
- an object of the present invention is to provide a method for producing a cheese-flavored material having a natural cheese flavor by allowing lactic acid bacteria that have been subjected to cell disruption by a simple technique and an enzyme to act on milk raw materials such as cheese.
- a method for producing a cheese-flavored material which comprises adding a crushed bacterial body obtained by crushing lactic acid bacteria and an enzyme to a milk raw material to cause a reaction.
- ⁇ 2> The method according to ⁇ 1>, comprising crushing lactic acid bacteria using an acid, an alkali, or a salt to obtain a crushed bacterial cell.
- ⁇ 3> The method according to ⁇ 1> or ⁇ 2> above, comprising crushing lactic acid bacteria by adding an acid to obtain a crushed bacterial cell.
- ⁇ 4> The method according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 3>, wherein the enzyme is at least one selected from the group consisting of protease, peptidase, and lipase.
- ⁇ 5> The method according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 4>, wherein the milk raw material is at least one selected from the group consisting of cheese, butter, cream and skim milk powder.
- the bacterial cell disruption treatment can be carried out by a simple operation without going through large-scale equipment introduction and the like, and the extracellular enzyme of lactic acid bacteria can be efficiently eluted, whereby the cheese flavor is obtained.
- a more natural cheese flavor can be imparted to the material.
- the flavor is close to that of a good natural cheese that is equal to or better than the case of using a crushed product of mechanical cells. Can be realized.
- the cheese flavor raw material which has a more natural cheese flavor safely and efficiently by low-cost and simple operation.
- the flavor complexity increased, and the flavor-improving effect of approaching a more natural cheese flavor was observed.
- the method for producing a cheese-flavored material of the present invention includes adding a cell disruption product obtained by crushing lactic acid bacteria and an enzyme to a milk raw material to cause a reaction.
- the cheese-flavored material means a cheese-flavored material that can be used in the same manner as, for example, analog cheese, imitation cheese, or EMC (enzyme-treated cheese) as an alternative material to cheese.
- lactic acid bacteria are crushed to obtain crushed cells.
- the lactic acid bacteria that can be used here are not particularly limited, and specific examples include lactic acid bacteria such as Lactococcus spp., Lactobacillus spp., Streptococcus spp., Leuconostoc spp., Propionibacterium spp, and Bifidobacterium spp. More specifically, Lactococcus lactis subsp. Lactis, L. lactis subsp. Lactis biovar diacetilactis, L. lactis subsp.cremoris, Lactobacillus helveticus, L. helveticus subsp. Jugurti, L.
- delbrueckii subsp lactis L. acidophilus, L. crispatus, L. amylovorus, L. gallinarum, L. gasseri, L. johnsonii, L. casei, L. paracasei, L. casei subsp. rhamnosus, Streptococcus salivarius subsp. Leu. Lactis, Leu. Mesenteroides subsp. Mesenteroides, Leu. Mesenteroides subsp. Dextranicum, Leu. Parames enteroides, Propionibacterium shermani, Bifidobacterium bifidum, B.umbreve. B. infantis, B. At this time, these lactic acid bacteria may be used alone or in combination of two or more.
- the lactic acid bacteria are cultured in advance prior to the disruption of the cells if necessary, and the amount of the cells is appropriately increased and then used.
- the lactic acid bacteria those concentrated by one or more of a membrane separation method, a centrifugal separation method, and a vacuum evaporation method can be used.
- lactic acid bacteria that have been neutralized and cultured may be used.
- the method for obtaining crushed cells by crushing lactic acid bacteria there are no particular limitations on the method for obtaining crushed cells by crushing lactic acid bacteria, as long as it can crush or destroy the cell walls and cell membranes of the cells, and mechanical (physical) crushing methods.
- a non-mechanical crushing method may be used.
- the mechanical crushing method for example, a ball mill, a bead mill, a homogenizer (homogeneous machine), an ultrasonic device or the like can be used, and these may be dry pulverization or wet pulverization.
- a non-mechanical technique particularly a method of crushing using an acid, an alkali, or a salt is preferable.
- cell disruption can be carried out by a simple operation without going through large-scale equipment introduction, and a good and natural cheese flavor can be realized in the obtained cheese flavor material.
- the technique for crushing lactic acid bacteria to obtain crushed cells is a method of crushing lactic acid bacteria by adding acid to obtain crushed cells.
- the usable acid is not particularly limited as long as it can be used in food applications such as cheese-flavored materials.
- citric acid Phosphoric acid, malic acid, succinic acid, fumaric acid, lactic acid, acetic acid and the like can be used.
- the acid is citric acid or phosphoric acid.
- the acid When an acid is used, the acid is added to lactic acid bacteria and, if necessary, neutralized with sodium hydroxide or the like, and then used as crushed cells by acid.
- the pH of the solution containing the lactic acid bacterium is once adjusted to 2.5 to 3.8, preferably about 3.0 to 3.5, and then neutralized. It is preferable to do this.
- the reaction temperature is preferably between 10 ° C. and 50 ° C., more preferably between 20 ° C. and 40 ° C.
- usable alkali is not particularly limited as long as it can be used for food use as a cheese flavor material.
- Sodium, potassium hydroxide, potassium carbonate, calcium hydroxide, trisodium phosphate, sodium pyrophosphate and the like can be used.
- the alkali is sodium hydroxide or trisodium phosphate.
- alkali When using an alkali, add the alkali to lactic acid bacteria, neutralize with citric acid, etc., if necessary, and then use it as a crushed cell by alkali.
- the pH of the liquid containing lactic acid bacteria is once adjusted to 9.0 to 10.5, preferably about 9.7 to 10.3, and then neutralized. It is preferable to do this.
- usable salts are not particularly limited as long as they can be used in food applications.
- sodium chloride, potassium chloride, Sodium lactate, monosodium phosphate, disodium phosphate and the like can be used.
- the salt is sodium chloride or potassium chloride.
- a crushed bacterial body obtained by crushing lactic acid bacteria and an enzyme are added to a milk raw material and reacted.
- the survival rate of the microbial cell crushed material is reduced to less than 50% compared to before crushed. If the survival rate is 50% or more, sufficient bacteria are still alive and crushing is not sufficient, so that it is difficult to obtain the effects of the present invention.
- the enzyme that can be used is not particularly limited as long as it is an enzyme usually involved in a general cheese fermentation process or an enzyme that can be present during fermentation, and can be used for food processing.
- any of animal-derived, plant-derived and microorganism-derived enzymes can be used as long as they act on proteins and lipids.
- microorganism-derived enzymes are preferred. Specific examples of enzymes that can be used include proteases, peptidases, lipases, and aminopeptidases.
- the enzyme is one or more selected from the group consisting of protease, peptidase, and lipase, and more preferably a combination of protease, peptidase, and lipase.
- the amount of enzyme used is preferably, for example, about 0.001% to 0.3% with respect to the milk raw material to be added.
- the milk raw material is cheese, butter, cream, skim milk powder, and more preferably cheese curd, fresh cream, butter. You may use these in combination of 2 or more types.
- the disrupted microbial cells and the enzyme are added to the milk raw material and reacted. That is, the microbial cell crushed material and the enzyme are added to the milk raw material and stirred appropriately, and then maintained at a predetermined temperature for a predetermined time to be reacted.
- the reaction temperature can be appropriately adjusted according to the type of enzyme used and the ratio of the enzyme to the milk raw material.
- the reaction time can be appropriately adjusted according to the amount of crushed cells, the type of enzyme used, and the ratio of the enzyme to the milk raw material, and depending on the desired strength of cheese flavor, etc. Can be adjusted.
- the reaction temperature and reaction time conditions of reacting at 20 ° C. to 50 ° C. for 8 hours to 7 days can be mentioned.
- the reaction temperature and reaction time are 25 ° C. to 40 ° C. and 12 hours to 4 days.
- a cheese-flavored material produced by the method of the present invention is provided.
- a cheese flavored food using the cheese flavored material produced by the method of the present invention is also provided.
- the manufacturing method of a cheese flavor foodstuff including adding such a cheese flavor raw material to foodstuff material and manufacturing a cheese flavor foodstuff is also provided.
- Example 1 Production of cheese-flavored material (crushing lactic acid bacteria with acid) (1) Preparation of lactic acid bacteria to be crushed A medium 200 g of 10% skim milk powder and 0.1% yeast extract was prepared and sterilized by heating at 95 ° C. for 60 minutes. Next, 0.4 g of a medium-temperature lactic acid bacteria starter (frozen product) was aseptically added to this medium and maintained at 27 ° C. for 18 hours.
- a medium-temperature lactic acid bacteria starter (frozen product) was aseptically added to this medium and maintained at 27 ° C. for 18 hours.
- the lactic acid bacteria starters used here are Lactococcus lactis subsp. Lactis (Lactococcus lactis ⁇ ⁇ subsp. And 4 types of lactic acid bacteria, Lactobacillus helveticus (Lactobacillus helveticus).
- Citric acid was added to the culture medium after retention obtained in (1) above to adjust the pH of the medium to 3.3 and maintained at 37 ° C. for 1 hour.
- sodium hydroxide was added thereto to adjust to pH 5.0. This was used as a crushed lactic acid bacteria solution (bacteria crushed by acid). At this time, when the viable cell count was measured before and after disrupting the cells with acid, the survival rate of the cells was 37.5%.
- Examples 2 to 4 Production of cheese-flavored material (smashing of lactic acid bacteria by salt, alkali and mechanical disruption) Instead of the acid crushing treatment in Example 1 (2a), a salt crushing treatment (2b), an alkali crushing treatment (2c) or a mechanical crushing treatment (2d) described later was carried out in the same manner as in Example 1.
- a salt crushing treatment (2b) instead of the acid crushing treatment in Example 1 (2a), a salt crushing treatment (2b), an alkali crushing treatment (2c) or a mechanical crushing treatment (2d) described later was carried out in the same manner as in Example 1.
- Examples 5 and 6 Production of cheese-flavored ingredients (fresh cream and butter are used as milk ingredients, respectively) Instead of using “cheese” prepared in Example 1 (3a) as a milk raw material, “fresh cream” prepared in (3b) described later, or “butter” prepared in (3c), and Each of the cheeses was carried out in the same manner as in Example 1 except that “(4b) Enzyme treatment and lactic acid bacteria fermentation” described later was carried out instead of “(4a) Enzyme treatment and lactic acid bacteria fermentation” in Example 1. Each sample of the flavor raw material 5 (Example 5, milk raw material / fresh cream) and the cheese flavor raw material 6 (Example 6, milk raw material / butter) was prepared.
- Comparative example Production of cheese-flavored material (without crushing) A sample of cheese-flavored material (comparative example, no crushing) was prepared in the same manner as in Example 1 except that the acid crushing treatment of (2) of Example 1 was not performed.
- Evaluation method 200 mL of milk was heated in a pan, and white sauce (manufactured by QP Corporation, in a can, 245 g in a can) was added little by little while mixing so as not to become lumps.
- white sauce manufactured by QP Corporation, in a can, 245 g in a can
- the mixture was thoroughly mixed at a temperature at which it did not boil, and divided into 3% portions of each of the flavor materials of Examples 1 to 4 and mixed. These were then refrigerated (4 ° C.) and returned to room temperature (23 ° C.) at the time of evaluation.
- Evaluation criteria As for the evaluation items, three items, “natural cheese-like flavor”, “complex aroma”, and “total taste”, were each evaluated by 3 independent evaluators as -3 (weak or felt). No) to +3 (feels strong).
Landscapes
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Abstract
本発明は、乳酸菌を破砕して得られた菌体破砕物と、酵素とを、乳原料に添加して反応させることを含むチーズ風味素材の製造方法に関する。本発明によれば、低コストで、かつ簡便な操作にて、より自然なチーズ風味を有するチーズ風味素材を、安全かつ効率的に製造可能な、チーズ風味素材の製造方法を提供することができる。
Description
本願は、先行する日本国特許出願である特願2017-109325号(出願日:2017年6月1日)に基づくものであって、その優先権の利益を主張するものであり、その開示内容全体は参照することによりここに組み込まれる。
本発明は、チーズ風味素材の製造方法に関する。詳しくは、本発明は、自然なチーズ風味を有するチーズ風味素材の製造方法に関する。
チーズの代替素材として、一般にアナログチーズやイミテーションチーズ、EMC(酵素処理チーズ)と呼ばれる素材が使用されている。
アナログチーズやイミテーションチーズは、原料にチーズをほとんど使用していないにもかかわらず、チーズのような風味と物性を有する食品素材である。また、EMCは、原料のチーズに、乳酸菌、プロテアーゼ類、およびリパーゼ類等を加えて反応させることによって、チーズ風味を大幅に増強させた素材であり、アナログチーズやイミテーションチーズの原料素材としても用いられる。
アナログチーズやイミテーションチーズは、原料にチーズをほとんど使用していないにもかかわらず、チーズのような風味と物性を有する食品素材である。また、EMCは、原料のチーズに、乳酸菌、プロテアーゼ類、およびリパーゼ類等を加えて反応させることによって、チーズ風味を大幅に増強させた素材であり、アナログチーズやイミテーションチーズの原料素材としても用いられる。
このように、従来から、チーズ風味を増強した様々なアナログチーズやイミテーションチーズ、EMCが検討されているが、更なる良好なチーズ風味の素材が依然として求められている。
チーズは、その長期熟成により、乳酸菌が徐々に死滅し、乳酸菌の菌体内酵素が溶出することによって、複雑な風味が形成されていくと考えられている。
チーズや乳原料などに、乳酸菌を添加したり、酵素処理などを行ったりすることで、チーズ風味素材が得られることが知られている。
しかしながら、これらの素材は風味が人工的であり、自然なチーズの風味とは乖離したものであった。
例えば、特表2007-527213号公報(特許文献1)には、ラクターゼ産生微生物と、乳酸菌とを用いるチーズ様製品の調製方法が記載されている(例えば、この文献の特許請求の範囲)。
特開2009-296972号公報(特許文献2)には、チーズに、ラクトバチルス・ヘルベティカスが産生する酵素を作用させて得られる酵素処理チーズが記載されている(例えば、この文献の特許請求の範囲)。
特表2013-503604号公報(特許文献3)には、乳酸菌を用いた乳製品の製造方法において、乳製品にはチーズが含まれることが記載され、また、発酵前に酵素を使用することが記載されている(例えば、この文献の特許請求の範囲)。
しかしながら、これら文献のいずれにも、乳酸菌を菌体破砕処理して利用することについて、何ら記載も示唆もされていない。
菌体破砕処理した乳酸菌を使用する技術としては、機械的に乳酸菌の菌体を破砕し、その菌体破砕した乳酸菌を、ナチュラルチーズの製造に利用する技術が報告されている(特開2016-093198号公報(特許文献4))。しかしながら、ここに開示されている技術は、ナチュラルチーズの製造に関するものにとどまる。
本発明者等は今般、使用する乳酸菌を、酸添加により菌体破砕処理して、得られた菌体破砕処理物を、プロテアーゼ、ペプチダーゼ、リパーゼといった酵素とともに、乳原料に加えて反応させることで、従来の風味素材に比べて、より一層自然なチーズに近い風味を特徴とする、チーズ風味素材を得ることに成功した。本発明者等は、酸処理による菌体破砕処理物の代わりに、塩処理、およびアルカリ処理による菌体破砕処理物を使用した場合についても検討したところ、同様に、チーズ風味素材を得ることに成功した。酸、塩やアルカリの添加処理という簡便な操作によって効率的に得られた菌体破砕処理物を利用することによって、チーズ風味素材の風味を、より自然なチーズ風味のものに改善することができたことは予想外のことであった。
本発明は、これら知見に基づくものである。
本発明は、これら知見に基づくものである。
よって本発明は、簡便な手法により菌体破砕処理した乳酸菌と、酵素とをチーズなどの乳原料に作用させ、自然なチーズ風味を有するチーズ風味素材の製造方法を提供することを目的とする。
すなわち、本発明によれば、以下の発明が提供される。
<1> 乳酸菌を破砕して得られた菌体破砕物と、酵素とを、乳原料に添加して反応させることを含む、チーズ風味素材の製造方法。
<2> 乳酸菌を、酸、アルカリ、または塩を用いて破砕して、菌体破砕物を得ることを含む、前記<1>の方法。
<3> 酸を添加することによって乳酸菌を破砕して、菌体破砕物を得ることを含む、前記<1>または<2>の方法。
<4> 酵素が、プロテアーゼ、ペプチダーゼ、およびリパーゼからなる群より選択される1種以上である、前記<1>~<3>のいずれかの方法。
<5> 乳原料が、チーズ、バター、クリームおよび脱脂粉乳からなる群より選択される1種以上である、前記<1>~<4>のいずれかの方法。
本発明の方法によれば、大掛かりな設備導入などを経ることなく、簡便な操作によって菌体破砕処理を行って、乳酸菌の菌体外酵素を効率良く溶出させることができ、それによって、チーズ風味素材に対してより一層自然なチーズ風味を付与することができる。本発明におけるように、酸等による菌体の破砕処理物を利用する場合によると、機械的な菌体の破砕物を使用する場合と同等かそれより優れた良好な自然なチーズに近い風味を実現することができる。このような酸処理等の簡便な手法による菌体破砕物を使用した、チーズ風味素材の製法は、本発明者等の知る限り、これまで例がない。
したがって、本発明によれば、低コストで、かつ簡便な操作にて、より自然なチーズ風味を有するチーズ風味素材を、安全かつ効率的に製造することが可能となる。本発明により得られたチーズ風味素材では、味の複雑さが増し、より自然なチーズ風味に近づくという風味向上効果が見られた。
したがって、本発明によれば、低コストで、かつ簡便な操作にて、より自然なチーズ風味を有するチーズ風味素材を、安全かつ効率的に製造することが可能となる。本発明により得られたチーズ風味素材では、味の複雑さが増し、より自然なチーズ風味に近づくという風味向上効果が見られた。
以下、本発明の実施形態について説明する。
本発明のチーズ風味素材の製造方法は、前記したように、乳酸菌を破砕して得られた菌体破砕物と、酵素とを、乳原料に添加して反応させることを含む。
ここでチーズ風味素材とは、チーズの代替素材として、例えば、アナログチーズ、イミテーションチーズ、または、EMC(酵素処理チーズ)などと同様に使用することができる、チーズ風味の素材を意味する。
本発明の方法においては、乳酸菌を破砕して菌体破砕物を得る。ここで使用可能な乳酸菌としては、特に限定はないが、具体例を挙げれば、Lactococcus 属、Lactobacillus 属、Streptococcus 属、Leuconostoc 属、Propionibacterium 属、Bifidobacterium 属などの乳酸菌が例示できる。より具体的には、Lactococcus lactis subsp. lactis、L. lactis subsp. lactis biovar diacetilactis、L. lactis subsp.cremoris、Lactobacillus helveticus、L. helveticus subsp. jugurti、L. delbrueckii subsp. bulgaricus、L. delbrueckii subsp. lactis、L. acidophilus、L. crispatus、L. amylovorus、L. gallinarum、L. gasseri、L. johnsonii、L. casei、L. paracasei、L. casei subsp. rhamnosus、Streptococcus salivarius subsp. thermophilus、Leuconostoc cremoris、Leu. lactis、Leu. mesenteroides subsp. mesenteroides、Leu. mesenteroides subsp. dextranicum、Leu. parames enteroides、Propionibacterium shermani、Bifidobacterium bifidum、B. longum、B. breve. B. infantis、B. adolescentisなどを例示できる。このとき、これらの乳酸菌を単独で用いても、2種類以上を混合して組み合わせて用いても良い。
本発明において、乳酸菌は、必要により、菌体の破砕に先立って、予め培養しておき、菌体量を適切に増やし、それを使用するのが好ましい。また乳酸菌は、膜分離法、遠心分離法、真空蒸発法の何れか1以上の方法により濃縮されたものを用いることができる。また、凍結乾燥法、減圧噴霧乾燥法、噴霧乾燥法の何れかの方法により乾燥された乳酸菌を用いても良い。更に、中和培養した乳酸菌を用いても良い。
膜分離法、遠心分離法、真空蒸発法、凍結乾燥法、減圧噴霧乾燥法、噴霧乾燥法、中和培養法などにより、単位容量当たりの乳酸菌数を増やして、乳酸菌の培養物などで乳酸菌を高濃度に調整できる。
本発明において、乳酸菌を破砕して菌体破砕物を得る手法としては、菌体の細胞壁や細胞膜を破砕もしくは破壊することができるものであれば特に限定はなく、機械的(物理的)破砕法であっても、非機械的な破砕法であってもよい。機械的破砕法としては、例えば、ボールミル、ビーズミル、ホモゲナイザー(均質機)、超音波装置などを使用することができ、これらは、乾式粉砕や湿式粉砕であってよい。
本発明においては、乳酸菌を破砕して菌体破砕物を得る手法としては、好ましくは、非機械的手法、特に、酸、アルカリ、または塩を用いて破砕する方法である。これらの方法によれば、大掛かりな設備導入などを経ることなく、簡便な操作によって菌体破砕処理を実施でき、かつ、得られるチーズ風味素材において、良好で自然なチーズ風味を実現できる。これらのうち、酸を用いるのがより好ましい。
本発明のより好ましい態様によれば、乳酸菌を破砕して菌体破砕物を得る手法は、酸を添加することによって乳酸菌を破砕して、菌体破砕物を得る方法である。
酸を用いて乳酸菌を破砕して菌体破砕物を得る場合において、使用可能な酸としては、チーズ風味素材という食品用途において使用可能なものであれば、特に限定はされず、例えば、クエン酸、リン酸、リンゴ酸、コハク酸、フマル酸、乳酸、酢酸などが使用できる。好ましくは、酸は、クエン酸、リン酸である。
酸を使用する場合、酸を乳酸菌に添加し、必要により、水酸化ナトリウム等で中和した後、酸による菌体破砕物として使用する。ここで、酸を乳酸菌に添加する際には、乳酸菌を含む液のpHが、2.5~3.8、好ましくは3.0~3.5程度になるように一旦調整し、その後中和するのが好ましい。このとき、反応の温度が、10℃~50℃の間であるのが好ましく、20℃~40℃の間であるのがより好ましい。
アルカリを用いて乳酸菌を破砕して菌体破砕物を得る場合において、使用可能なアルカリとしては、チーズ風味素材という食品用途において使用可能なものであれば、特に限定はされず、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、水酸化カルシウム、リン酸三ナトリウム、ピロリン酸ナトリウムなどが使用できる。好ましくは、アルカリは、水酸化ナトリウム、リン酸三ナトリウムである。
アルカリを使用する場合、アルカリを乳酸菌に添加し、必要により、クエン酸等で中和した後、アルカリによる菌体破砕物として使用する。ここで、アルカリを乳酸菌に添加する際には、乳酸菌を含む液のpHが、9.0~10.5、好ましくは9.7~10.3程度になるように一旦調整し、その後中和するのが好ましい。
塩を用いて乳酸菌を破砕して菌体破砕物を得る場合において、使用可能な塩としては、食品用途において使用可能なものであれば、特に限定はされず、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、乳酸ナトリウム、リン酸一ナトリウム、リン酸二ナトリウムなどが使用できる。好ましくは、塩は、塩化ナトリウム、塩化カリウムである。
本発明のチーズ風味素材の製造方法においては、乳酸菌を破砕して得られた菌体破砕物と、酵素とを、乳原料に添加して反応させる。
ここで、菌体破砕物は、破砕の前と比較して、数の生存率が50%未満にまで減少していることが好ましい。生存率が50%以上であると、まだ十分な菌が生存しており、破砕が十分でないことから、本発明の効果が得られにくくなる。また、菌体破砕物は、加える乳原料に対して、0.1%~5%で添加することが好ましい。
ここで、菌体破砕物は、破砕の前と比較して、数の生存率が50%未満にまで減少していることが好ましい。生存率が50%以上であると、まだ十分な菌が生存しており、破砕が十分でないことから、本発明の効果が得られにくくなる。また、菌体破砕物は、加える乳原料に対して、0.1%~5%で添加することが好ましい。
本発明において、使用可能な酵素としては、一般的なチーズの発酵過程に通常、関与する酵素または発酵の際に存在し得る酵素であれば、特に制限はなく、食品加工に用いることのできる酵素のうち、タンパク質や脂質に作用するものであれば、動物由来、植物由来、微生物由来のいずれの酵素も使用可能であるが、本発明では微生物由来の酵素が好ましい。使用可能な酵素として、具体的には、例えば、プロテアーゼ、ペプチダーゼ、リパーゼ、アミノペプチターゼ等が挙げられる。本発明の好ましい態様によれば、酵素は、プロテアーゼ、ペプチダーゼ、およびリパーゼからなる群より選択される1種以上であり、より好ましくは、プロテアーゼ、ペプチダーゼ、およびリパーゼの組合せである。
ここで、使用する酵素の量は、加える乳原料に対して、例えば、0.001%~0.3%程度であることが好ましい。
本発明において使用可能な乳原料としては、チーズ用乳、チーズカード、チーズフード、ナチュラルチーズ、プロセスチーズ、生乳、脱脂乳、脱脂粉乳、全粉乳、濃縮乳、脱脂濃縮乳、成分調整乳、生クリーム、バターなどが挙げられる。好ましくは、乳原料は、チーズ、バター、クリーム、脱脂粉乳であり、より好ましくは、チーズカード、生クリーム、バターである。これらは2種以上を組み合わせて使用しても良い。
本発明においては、菌体破砕物と、酵素とを、乳原料に添加して反応させる。すなわち、菌体破砕物と、酵素とを、乳原料に添加して、適宜撹拌した後、所定の温度で所定の時間維持し、反応させる。反応温度は、使用する酵素の種類や、酵素の乳原料に対する量比に応じて適宜調整することができる。また反応時間も、菌体破砕物の量、使用する酵素の種類や、酵素の乳原料に対する量比に応じて適宜調整することができ、また希望するチーズ風味の強さ等に応じて、適宜調整することができる。例えば、反応温度及び反応時間の例として、20℃~50℃で、8時間から7日間反応させる条件が挙げられる。好ましくは、反応温度及び反応時間は、25℃~40℃で、12時間から4日間である。
本発明のさらに別の態様によれば、本発明の方法により製造されたチーズ風味素材が提供される。
本発明の別の態様によれば、本発明の方法により製造されたチーズ風味素材を用いたチーズ風味食品が提供される。さらに、そのようなチーズ風味素材を、食品材料に添加してチーズ風味食品を製造することを含む、チーズ風味食品の製造方法も提供される。
本発明の別の態様によれば、本発明の方法により製造されたチーズ風味素材を用いたチーズ風味食品が提供される。さらに、そのようなチーズ風味素材を、食品材料に添加してチーズ風味食品を製造することを含む、チーズ風味食品の製造方法も提供される。
以下において、本発明を下記の実施例によって詳細に説明するが、本発明は、これらに限定されるものではない。
実施例1: チーズ風味素材の製造(酸による乳酸菌の破砕)
(1) 破砕する乳酸菌の準備
脱脂粉乳10%および酵母エキス0.1%の培地200gを調製し、95℃で60分間、加熱殺菌した。
ついで、この培地に、0.4gの中温乳酸菌スターター(凍結品)を無菌的に添加し、27℃で18時間、保持した。
(1) 破砕する乳酸菌の準備
脱脂粉乳10%および酵母エキス0.1%の培地200gを調製し、95℃で60分間、加熱殺菌した。
ついで、この培地に、0.4gの中温乳酸菌スターター(凍結品)を無菌的に添加し、27℃で18時間、保持した。
なおここで使用した乳酸菌スターターは、Lactococcus lactis subsp. lactis (ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・ラクティス)、Lactococcus lactis subsp. cremoris(ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・クレモリス)、Lactobacillus paracasei(ラクトバチルス・パラカゼイ)、およびLactobacillus helveticus(ラクトバチルス・ヘルベティカス)の4種の乳酸菌を含むものであった。
(2a) 乳酸菌の破砕(酸破砕)
前記(1)で得られた保持後の培養培地に、クエン酸を添加し、その培地のpH3.3とし、37℃で1時間、保持した。
次いで、ここに水酸化ナトリウムを添加し、pH5.0に調整した。これを破砕済み乳酸菌液(酸による菌体破砕物)とした。このとき、酸による菌体破砕の前後で生菌数を測定したところ、菌の生存率は37.5%であった。
前記(1)で得られた保持後の培養培地に、クエン酸を添加し、その培地のpH3.3とし、37℃で1時間、保持した。
次いで、ここに水酸化ナトリウムを添加し、pH5.0に調整した。これを破砕済み乳酸菌液(酸による菌体破砕物)とした。このとき、酸による菌体破砕の前後で生菌数を測定したところ、菌の生存率は37.5%であった。
(3a)乳原料の調製(乳原料/チーズ)
ゴーダチーズ1009gに水372gを加え、よく懸濁させた後、ここに、糸状菌由来のプロテアーゼを5.4g添加し、36℃で4時間、撹拌した。
その後、63℃で30分間、加熱殺菌し、次いで36℃に冷却した。
これを乳原料(前処理済みチーズ)とした。
ゴーダチーズ1009gに水372gを加え、よく懸濁させた後、ここに、糸状菌由来のプロテアーゼを5.4g添加し、36℃で4時間、撹拌した。
その後、63℃で30分間、加熱殺菌し、次いで36℃に冷却した。
これを乳原料(前処理済みチーズ)とした。
(4a) 酵素処理および乳酸菌発酵
前記(3a)で得られた乳原料に、以下のもの:
(i) 前記(2a)で得られた破砕済み乳酸菌液(酸による菌体破砕物)170g、
(ii) 塩化ナトリウム16.9g、および
(iii) 糸状菌由来プロテアーゼ2種を合計7.6gと、糸状菌由来ペプチダーゼを2.3gと、酵母由来リパーゼを0.04gと、糸状菌由来リパーゼを0.17g、
を添加し、36℃で3日間撹拌保持した。
前記(3a)で得られた乳原料に、以下のもの:
(i) 前記(2a)で得られた破砕済み乳酸菌液(酸による菌体破砕物)170g、
(ii) 塩化ナトリウム16.9g、および
(iii) 糸状菌由来プロテアーゼ2種を合計7.6gと、糸状菌由来ペプチダーゼを2.3gと、酵母由来リパーゼを0.04gと、糸状菌由来リパーゼを0.17g、
を添加し、36℃で3日間撹拌保持した。
次いで、得られた懸濁液1400gを回収し、65℃に加熱して、カゼインナトリウム塩96gと、キサンタンガム3.2gと、水70gとを添加した後、85℃に加温して、殺菌した。
得られた液をホモジナイザーで15MPaで、5分間、処理し、均質化を行った。
その後、容器に充填して冷却し、これを、チーズ風味素材1(実施例1)とした。
得られた液をホモジナイザーで15MPaで、5分間、処理し、均質化を行った。
その後、容器に充填して冷却し、これを、チーズ風味素材1(実施例1)とした。
実施例2~4: チーズ風味素材の製造(塩、アルカリ、および機械的破砕による乳酸菌の破砕)
実施例1の(2a)の酸破砕処理の代わりに、後述する塩破砕処理(2b)、アルカリ破砕処理(2c)または機械的破砕処理(2d)を行った以外は、実施例1と同様にして、それぞれ、チーズ風味素材2(実施例2、塩破砕)、チーズ風味素材3(実施例3、アルカリ破砕)、およびチーズ風味素材4(実施例4、機械的破砕)の各サンプルを調製した。
実施例1の(2a)の酸破砕処理の代わりに、後述する塩破砕処理(2b)、アルカリ破砕処理(2c)または機械的破砕処理(2d)を行った以外は、実施例1と同様にして、それぞれ、チーズ風味素材2(実施例2、塩破砕)、チーズ風味素材3(実施例3、アルカリ破砕)、およびチーズ風味素材4(実施例4、機械的破砕)の各サンプルを調製した。
(2b) 乳酸菌の破砕(塩破砕)
実施例1の(1)で得られた保持後の培養培地を60g調製し、そこに塩化ナトリウムを12g添加し、37℃で1時間、保持した。
これを破砕済み乳酸菌液(塩による菌体破砕物)とした。このとき、塩による菌体破砕の前後で生菌数を測定したところ、菌の生存率は41.7%であった。
実施例1の(1)で得られた保持後の培養培地を60g調製し、そこに塩化ナトリウムを12g添加し、37℃で1時間、保持した。
これを破砕済み乳酸菌液(塩による菌体破砕物)とした。このとき、塩による菌体破砕の前後で生菌数を測定したところ、菌の生存率は41.7%であった。
(2c) 乳酸菌の破砕(アルカリ破砕)
実施例1の(1)で得られた保持後の培養培地を200g調製し、そこに水酸化ナトリウム溶液(25w/v%)をpH10.0となるように添加し、37℃で、1時間、保持した。
次いで、ここにクエン酸を添加し、pH5.0に調整した。これを破砕済み乳酸菌液(アルカリによる菌体破砕物)とした。このとき、アルカリによる菌体破砕の前後で生菌数を測定したところ、菌の生存率は37.5%であった。
実施例1の(1)で得られた保持後の培養培地を200g調製し、そこに水酸化ナトリウム溶液(25w/v%)をpH10.0となるように添加し、37℃で、1時間、保持した。
次いで、ここにクエン酸を添加し、pH5.0に調整した。これを破砕済み乳酸菌液(アルカリによる菌体破砕物)とした。このとき、アルカリによる菌体破砕の前後で生菌数を測定したところ、菌の生存率は37.5%であった。
(2d) 乳酸菌の破砕(機械的破砕(ホモ破砕))
実施例1の(1)で得られた保持後の培養培地を200g調製し、ホモジナイザー(Niro Soavi社製 PANDA2K)を用いて、1200barで均質化した。
これを破砕済み乳酸菌液(機械的破砕による菌体破砕物)とした。このとき、機械的破砕による菌体破砕の前後で生菌数を測定したところ、菌の生存率は25.0%であった。
実施例1の(1)で得られた保持後の培養培地を200g調製し、ホモジナイザー(Niro Soavi社製 PANDA2K)を用いて、1200barで均質化した。
これを破砕済み乳酸菌液(機械的破砕による菌体破砕物)とした。このとき、機械的破砕による菌体破砕の前後で生菌数を測定したところ、菌の生存率は25.0%であった。
実施例5および6: チーズ風味素材の製造(乳原料としてそれぞれ、生クリーム、バターを使用)
乳原料として、実施例1(3a)で調製した「チーズ」を使用する代わりに、後述する(3b)で調製した「生クリーム」、または(3c)で調製した「バター」を使用し、かつ、実施例1の「(4a)酵素処理および乳酸菌発酵」を実施する代わりに、後述する「(4b) 酵素処理および乳酸菌発酵」を実施した以外は、実施例1と同様にして、それぞれ、チーズ風味素材5(実施例5、乳原料/生クリーム)、チーズ風味素材6(実施例6、乳原料/バター)の各サンプルを調製した。
乳原料として、実施例1(3a)で調製した「チーズ」を使用する代わりに、後述する(3b)で調製した「生クリーム」、または(3c)で調製した「バター」を使用し、かつ、実施例1の「(4a)酵素処理および乳酸菌発酵」を実施する代わりに、後述する「(4b) 酵素処理および乳酸菌発酵」を実施した以外は、実施例1と同様にして、それぞれ、チーズ風味素材5(実施例5、乳原料/生クリーム)、チーズ風味素材6(実施例6、乳原料/バター)の各サンプルを調製した。
(3b)乳原料の調製(乳原料/生クリーム)
脱脂粉乳400gに水600gを加え、よく懸濁させた後、ここに、脂肪分47%の生クリームを570g添加し、よく撹拌した。
その後、63℃で30分間、加熱殺菌し、次いで36℃に冷却した。
これを乳原料(生クリーム)とした。
脱脂粉乳400gに水600gを加え、よく懸濁させた後、ここに、脂肪分47%の生クリームを570g添加し、よく撹拌した。
その後、63℃で30分間、加熱殺菌し、次いで36℃に冷却した。
これを乳原料(生クリーム)とした。
(3c)乳原料の調製(乳原料/バター)
脱脂粉乳400gに水873gを加え、よく懸濁させた後、ここに、加温溶解させた無塩バターを327g添加し、よく撹拌した。
その後、63℃で30分間、加熱殺菌し、次いで36℃に冷却した。
これを乳原料(バター)とした。
脱脂粉乳400gに水873gを加え、よく懸濁させた後、ここに、加温溶解させた無塩バターを327g添加し、よく撹拌した。
その後、63℃で30分間、加熱殺菌し、次いで36℃に冷却した。
これを乳原料(バター)とした。
(4b) 酵素処理および乳酸菌発酵
前記(3b)または(3c)で得られた乳原料に、以下のもの:
(i) 前記(2a)で得られた破砕済み乳酸菌液(酸による菌体破砕物)170g、
(ii) 塩化ナトリウム16.9g、および
(iii) 糸状菌由来プロテアーゼ1種を2.2gと、酵母由来リパーゼを0.04gと、糸状菌由来リパーゼを0.17g、
を添加し、36℃で3日間撹拌保持した。
前記(3b)または(3c)で得られた乳原料に、以下のもの:
(i) 前記(2a)で得られた破砕済み乳酸菌液(酸による菌体破砕物)170g、
(ii) 塩化ナトリウム16.9g、および
(iii) 糸状菌由来プロテアーゼ1種を2.2gと、酵母由来リパーゼを0.04gと、糸状菌由来リパーゼを0.17g、
を添加し、36℃で3日間撹拌保持した。
次いで、得られた懸濁液1400gを回収し、65℃に加熱し、カゼインナトリウム塩96gと、キサンタンガム3.2gを添加した後、85℃に加温して、殺菌した。
得られた液をホモジナイザーで15MPaで、5分間、処理し、均質化を行った。
その後、容器に充填して冷却し、これを、チーズ風味素材5または6(実施例5または6)とした。
得られた液をホモジナイザーで15MPaで、5分間、処理し、均質化を行った。
その後、容器に充填して冷却し、これを、チーズ風味素材5または6(実施例5または6)とした。
比較例: チーズ風味素材の製造(破砕なし)
実施例1の(2)の酸破砕処理を行わなかった以外は、実施例1と同様にして、チーズ風味素材(比較例、破砕なし)のサンプルを調製した。
実施例1の(2)の酸破砕処理を行わなかった以外は、実施例1と同様にして、チーズ風味素材(比較例、破砕なし)のサンプルを調製した。
評価試験
上記で得られた実施例1~6のチーズ風味素材1~6について、下記の様な風味評価試験を実施した。
上記で得られた実施例1~6のチーズ風味素材1~6について、下記の様な風味評価試験を実施した。
・評価方法
牛乳200mLを鍋で加熱し、ホワイトソース(キユーピー社製、缶入り、1缶245g)を、ダマにならないよう混ぜながら少量ずつ添加した。次いで、沸騰しない温度で完全に混合し、小分けにして実施例1~4の風味素材それぞれを3%ずつ添加し混合した。次いでこれらを冷蔵(4℃)し、評価時には室温(23℃)に戻した。
牛乳200mLを鍋で加熱し、ホワイトソース(キユーピー社製、缶入り、1缶245g)を、ダマにならないよう混ぜながら少量ずつ添加した。次いで、沸騰しない温度で完全に混合し、小分けにして実施例1~4の風味素材それぞれを3%ずつ添加し混合した。次いでこれらを冷蔵(4℃)し、評価時には室温(23℃)に戻した。
・評価基準
評価項目として、「自然なチーズらしい風味」、「複雑な香り」、および「総合的な美味しさ」の3項目について、独立した評価者10名によって、それぞれ-3(弱い、または感じない)~+3(強く感じる)の基準によるスコアで評価した。
評価項目として、「自然なチーズらしい風味」、「複雑な香り」、および「総合的な美味しさ」の3項目について、独立した評価者10名によって、それぞれ-3(弱い、または感じない)~+3(強く感じる)の基準によるスコアで評価した。
またこれら各評価項目に基づいて総合評価(A(優れている)、B(普通)、C(少し劣る))を行った。
結果は下記表の通りであった。
Claims (5)
- 乳酸菌を破砕して得られた菌体破砕物と、酵素とを、乳原料に添加して反応させることを含む、チーズ風味素材の製造方法。
- 乳酸菌を、酸、アルカリ、または塩を用いて破砕して、菌体破砕物を得ることを含む、請求項1に記載の方法。
- 酸を添加することによって乳酸菌を破砕して、菌体破砕物を得ることを含む、請求項1または2に記載の方法。
- 酵素が、プロテアーゼ、ペプチダーゼ、およびリパーゼからなる群より選択される1種以上である、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
- 乳原料が、チーズ、バター、クリームおよび脱脂粉乳からなる群より選択される1種以上である、請求項1~4のいずれか一項に記載の方法。
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