WO2018190695A1 - 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름의 예방 또는 개선용 조성물 - Google Patents
나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름의 예방 또는 개선용 조성물 Download PDFInfo
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Definitions
- the present invention relates to a composition for the prevention or improvement of skin wrinkles containing Nahan and residue extract as an active ingredient.
- Aging of the skin can take many forms, including increased wrinkles, decreased elasticity and pigmentation.
- the most representative phenomenon of aging is wrinkles.
- the causes of aging of the skin to create such wrinkles can be divided into two major. Aging is caused by internal and external factors, which are natural aging with age. External factors include ultraviolet rays, pollution, illness, drinking and smoking, and internal factors include free radicals and inflammation, stress, decreased cell activity and mutation, and cell metabolism imbalance. According to the structure of the skin to explain the cause of wrinkles in more detail, the skin is largely divided into the epidermis and the dermis.
- the cause of wrinkles in the epidermis is the reduction of the turn-over of keratinocytes, which leads to the accumulation of stratum corneum, thereby thickening the stratum corneum, reducing the water content of the stratum corneum, and curing the stratum corneum, causing wrinkles Done.
- the epidermal and dermal borders are involved in epidermal cell support, adhesion, transport of nutrients, and control of epidermal differentiation. As a result, the selective permeation function is weakened, and harmful components easily affect the dermis, thereby forming wrinkles.
- Sihantia grosvenori is a perennial herb that is grown in Guangdong, Guangxi province, China. Fruits are 4 ⁇ 5cm in diameter, brown or spherical, originally used as a raw material or seasoning for soft drinks in Guilin, China. In case of problems with the stomach or intestine, it was used in the private sector.
- the present invention is derived from the above requirements, the present invention provides a composition for the prevention or improvement of skin wrinkles containing Nahan and residue extract as an active ingredient, collagenase of Nahan and residue extract according to the present invention
- the present invention was completed by confirming that the inhibition of activity was remarkable compared to the soluble Nagwa extract and the effect of reducing the expression level of MMP-1 protein increased by ultraviolet irradiation was remarkable.
- the present invention provides a cosmetic composition for the prevention or improvement of skin wrinkles containing Nahan and residue extract as an active ingredient.
- the present invention also provides a health functional food composition for the prevention or improvement of skin wrinkles containing Nahan and residue extract as an active ingredient.
- the present invention is derived by the above requirements, the present invention relates to a composition for the prevention or improvement of skin wrinkles containing Nahan and residue extract as an active ingredient, Nahan and the residue extract of the present invention is a coke It has an excellent effect of inhibiting the activity of the genease, and has an effect of significantly reducing the expression level of MMP-1 protein increased by ultraviolet irradiation, and thus is useful for cosmetics or health functional foods for preventing or improving skin wrinkles. Can be.
- Figure 1 confirms the collagenase inhibitory activity of Nahan and extract and Nahan and residue extract, *, ** is statistically significant collagenase inhibitory activity of Nahan and residue extract compared to Nahan and extract at each treatment concentration * Is p ⁇ 0.05 and ** is p ⁇ 0.01.
- EGCG is a positive control.
- Figure 2 confirms the effect of reducing the amount of MMP-1 protein expression of Nahan and residue extract
- # means that the expression level of MMP-1 in the UVB irradiated group was significantly increased compared to the non-ultraviolet irradiated group
- p ⁇ 0.05 ** indicates that the expression of MMP-1 in the Nahan and the residue 70% (v / v) ethanol extract and Nahan and the residue methanol extract of the present invention was statistically significantly reduced compared to the UVB irradiation group. , p ⁇ 0.01.
- Figure 3 is the result of confirming the cell viability of Nahan and residue extract of the present invention.
- the present invention relates to a cosmetic composition for preventing or improving skin wrinkles containing Nahan and the residue extract as an active ingredient.
- the lower alcohol of C 1 ⁇ C 4 is preferably ethanol or methanol, more preferably 70% (v / v) ethanol, but is not limited thereto.
- the Nahan and the residue extract is characterized in that it inhibits collagenase activity and reduces the expression level of MMP-1 protein.
- Extraction in step (1) may use all conventional methods known in the art, such as filtration, hot water extraction, immersion extraction, reflux cooling extraction and ultrasonic extraction.
- the water is preferably extracted by adding 1 to 20 times the weight of dried cold and more preferably 5 to 15 times.
- Extraction temperature is preferably 4 ⁇ 50 °C but is not limited thereto.
- the extraction time is preferably 0.5 to 10 hours, more preferably 0.5 to 5 hours, most preferably 1 hour is not limited thereto.
- wrinkles are generated due to a decrease in collagen, and the decrease in collagen may be caused by excessive oxidative stress or ultraviolet irradiation, and the cosmetic composition of the present invention is characterized by inhibiting collagenase activity.
- Cosmetic composition according to an embodiment of the present invention is an external skin ointment, cream, supple cosmetics, nourishing cosmetics, pack, essence, hair tonic, shampoo, conditioner, hair conditioner, hair treatment, gel, skin lotion, skin softener, skin Toner, Astringent, Lotion, Milk Lotion, Moisture Lotion, Nourishing Lotion, Massage Cream, Nourishing Cream, Moisture Cream, Hand Cream, Foundation, Nourishing Essence, Sunscreen, Soap, Cleansing Foam, Cleansing Lotion, Cleansing Cream, Body Lotion and Body It may have any one formulation selected from the group consisting of cleansers, but is not limited thereto.
- the cosmetic composition consisting of each of these formulations may contain various bases and additives necessary for the formulation of the formulation and are suitable, and the type and amount of these components can be easily selected by those skilled in the art.
- the carrier component is animal fiber, vegetable fiber, wax, paraffin, starch, tragacanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide. And the like can be used.
- the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a powder or a spray
- lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as the carrier component, and in particular, in the case of a spray, additionally chlorofluorohydro Propellants such as carbon, propane-butane or dimethyl ether.
- a solvent, solvating agent or emulsifying agent is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene.
- a carrier component such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene.
- the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a suspension
- a carrier component water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.
- the carrier component is an aliphatic alcohol sulfate, an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, acethionate, an imidazolinium derivative, a methyltaurate, or a sarcosinate.
- Fatty acid amide ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, linolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.
- the cosmetic composition of the present invention may further contain an excipient including a fluorescent substance, a fungicide, a caustic agent, a moisturizer, a fragrance, a fragrance carrier, a protein, a solubilizer, a sugar derivative, a sunscreen agent, a vitamin, a plant extract, .
- an excipient including a fluorescent substance, a fungicide, a caustic agent, a moisturizer, a fragrance, a fragrance carrier, a protein, a solubilizer, a sugar derivative, a sunscreen agent, a vitamin, a plant extract, .
- the present invention also relates to a health functional food composition for preventing or improving skin wrinkles comprising the extract of Nahan and the residue as an active ingredient.
- the health functional food composition of the present invention When used as a food additive, the health functional food composition may be added as it is or used with other foods or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method.
- the active ingredient may be appropriately used depending on the purpose of use (prevention or improvement).
- the nutraceutical composition of the present invention is added in an amount of 15 parts by weight or less, preferably 10 parts by weight or less with respect to the raw material.
- the amount may be below the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount above the above range.
- dietary supplement there is no particular limitation on the type of dietary supplement.
- foods to which the health functional food composition may be added include meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, dairy products, including ice cream, various soups, drinks, tea Drinks, alcoholic beverages, vitamin complexes, and the like, and include all health foods in the conventional sense.
- the nutraceutical composition of the present invention may be prepared as a food, in particular a functional food.
- the functional food of the present invention may include ingredients that are commonly added. Examples include proteins, carbohydrates, fats, nutrients and seasonings.
- natural carbohydrates or flavors may be included as additional ingredients in addition to the active ingredient.
- the natural carbohydrates can be monosaccharides (e.g. glucose, fructose, etc.), disaccharides (e.g. maltose, sucrose, etc.), oligosaccharides, polysaccharides (e.g. dextrins, cyclodextrins, etc.) or sugar alcohols (e.g.
- the flavourant may be a natural flavourant (eg, taumartin, stevia extract, etc.) and a synthetic flavourant (eg, saccharin, aspartame, etc.).
- the carbonation agent etc. which are used for a drink can be contained further.
- the ratio of the above-mentioned ingredients is not critical, it is generally selected from 0.01 to 0.1 parts by weight based on 100 parts by weight of the health functional food composition of the present invention.
- Collagenase inhibitory activity test was performed. Collagenase inhibitory activity was obtained by adding 4 mM CaCl 2 to 0.1M tris-HCl buffer (pH 7.5), and dissolving 4-phenylazobenzyloxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg (0.3 mg / mL).
- 0.15 ml of collagenase (0.2 mg / ml) was added to a mixed solution of 0.25 ml of solution and 0.1 ml of solution according to the concentration of sample (100, 200, 400, 800, and 1,200 ⁇ g / ml), and allowed to stand at room temperature for 20 minutes, followed by 6% 0.5 ml of citric acid was added to terminate the reaction, and 1.5 ml of ethyl acetate was added thereto to measure absorbance at 320 nm. Collagenase inhibitory activity was calculated by the absorbance reduction rate of the added and non-added samples.
- the UV irradiation group increased the expression level of MMP-1 compared to the non-UV irradiation group, and the experimental group treated with Nahan and residue 70% (v / v) ethanol extract and Nahan and residue methanol extract.
- the expression level of MMP-1 was decreased compared to the UV irradiation group.
- the cell survival rate of the UV irradiation group was lower than that of the non-UV irradiation group, and the cell survival rate was slightly lower in the group treated with Nahan and the residue extract of the present invention together with UV irradiation under the same conditions. Elevated levels indicated that Nahan and the residue extracts were not cytotoxic.
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Abstract
본 발명은 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름의 예방 또는 개선용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 유효성분인 나한과 잔사 추출물의 콜라게나아제 저해 활성이 가용성 부분인 나한과 추출물에 비해 우수하며, 자외선 조사에 의해 증가된 MMP-1 단백질의 발현량을 현저하게 감소시키는 효과가 있으므로, 피부주름의 예방 또는 개선용 화장료 또는 건강기능식품 산업에 유용하게 쓰일 수 있다.
Description
본 발명은 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름의 예방 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.
피부의 노화는 주름 증가와 탄력감소, 색소 침착 등의 여러 형태로 나타난다. 그 중 가장 대표적인 노화의 현상은 바로 주름이다. 이러한 주름을 생성하게 하는 피부의 노화원인은 크게 두 가지로 나누어 볼 수 있다. 나이가 들어감에 따른 자연적인 노화인 내적 요인과 외적 요인으로 인한 노화이다. 외적 요인으로는 자외선, 공해, 병, 음주, 흡연 등이 있고, 내적 요인으로는 프리라디칼과 염증의 발생, 스트레스, 세포 활성의 저하 및 돌연변이화, 세포대사 불균형 등이다. 피부의 구조에 따라 주름 발생 원인을 좀 더 자세히 설명하면, 피부는 크게 표피와 진피로 나뉜다. 표피에서의 주름 생성 원인으로는 각질 형성 세포의 턴-오버(turn-over)의 감소로 각질층의 누적과 이로 인해 각질층이 두꺼워지고, 각질층의 수분 함유 능력이 감소되며, 각질이 경화되어 주름이 발생하게 된다. 표피와 진피의 경계부위는 표피세포 지지, 부착, 영양물질의 이동, 표피 분화의 조절 등에 관여하는데, 각종 노화 요인으로 특히, UV로 인하여 콜라겐 IV, VII이 감소되어 표피, 진피 지지기능이 감소하고, 선별 투과 기능이 약화되어 해로운 성분이 쉽게 진피에 영향을 미치게 되어 주름이 생성된다.
한편, 나한과(Siraitia
grosvenori)는 중국 광동, 광서성의 고랭지에서 재배되는 박과의 다년생 초본으로 과실은 직경 4~5cm의 달갈형 또는 구형이며 원래 중국계림지방에서는 청량음료의 원료나 조미료로 사용되어져 왔으며, 목이 아프거나 기침, 위나 장에 문제가 있을 경우 민간에서 사용되었다.
나한과 추출물에 관한 알려진 종래 기술의 일례로는 한국등록특허 제0773856호에 나한과 추출물 또는 이로부터 분리된 트라이터펜계 화합물을 함유하는 주름 개선용 조성물이 개시되어 있으나, 아직까지는 본 발명의 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름의 예방 또는 개선용 조성물이 알려진 바 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름의 예방 또는 개선용 조성물을 제공하고, 본 발명에 따른 나한과 잔사 추출물의 콜라게나아제 활성 저해가 가용성 나한과 추출물에 비해 현저하다는 것과 자외선 조사에 의해 증가된 MMP-1 단백질의 발현량을 감소시키는 효과가 현저하다는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부주름의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름의 예방 또는 개선용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 유효성분인 나한과 잔사 추출물은 콜라게나아제의 활성을 억제하는 효과가 우수하며, 자외선 조사에 의해 증가된 MMP-1 단백질의 발현량을 현저하게 감소시키는 효과가 있으므로, 피부주름의 예방 또는 개선용 화장료 또는 건강기능식품에 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 나한과 추출물과 나한과 잔사 추출물의 콜라게나아제 저해 활성을 확인한 것으로, *, **는 각각의 처리 농도에서 나한과 추출물에 비해 나한과 잔사 추출물의 콜라게나아제 저해 활성이 통계적으로 유의미하게 차이가 있다는 것이며, *는 p<0.05이고, **는 p<0.01이다. EGCG는 양성 대조군이다.
도 2는 나한과 잔사 추출물의 MMP-1 단백질의 발현량 감소효과를 확인한 것으로, #는 자외선 비조사군에 비해 UVB 조사군의 MMP-1의 발현량이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것을 의미하며, p<0.05이고, **는 UVB 조사군에 비해 본 발명의 나한과 잔사 70%(v/v) 에탄올 추출물 및 나한과 잔사 메탄올 추출물의 MMP-1의 발현량이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것을 의미하며, p<0.01이다.
도 3은 본 발명의 나한과 잔사 추출물의 세포 생존율을 확인한 결과이다.
본 발명은 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름의 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
상기 나한과 잔사 추출물은
(1) 건조한 나한과에 물을 가하여 추출 및 여과한 후, 상등액을 제거하는 단계; 및
(2) 상기 상등액을 제거하고 남은 나한과 잔사에 C1~C4의 저급 알코올을 가하여 나한과 잔사 추출물을 획득하는 단계;를 포함하는 방법으로 제조된 것이 바람직하지만 이에 한정하는 것은 아니다.
상기 C1~C4의 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올이지만 이에 한정하는 것은 아니다. 상기 나한과 잔사 추출물은 콜라게나아제 활성을 억제하며, MMP-1 단백질의 발현량을 감소시키는 것을 특징으로 한다.
상기 단계 (1)에서 추출은 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등의 당 업계에 공지된 모든 통상적인 방법을 이용할 수 있다. 상기 물은 건조된 나한과 중량의 1~20배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 5~15배 첨가하는 것이다. 추출온도는 4~50℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 0.5~10시간인 것이 바람직하며, 0.5~5시간이 더욱 바람직하고, 1시간이 가장 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
본 발명에서 주름 생성은 콜라겐의 감소로 인해 발생하는 것이며, 상기 콜라겐의 감소는 과도한 산화 스트레스나 자외선 조사가 원인일 수 있으며, 본 발명의 화장료 조성물은 콜라게나아제 활성을 저해하는 것이 특징이다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 화장료 조성물은 피부외용 연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형으로 이루어진 화장료 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판-부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 아세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 형광물질, 살진균제, 굴수성 유발물질, 보습제, 방향제, 방향제 담체, 단백질, 용해화제, 당 유도체, 일광차단제, 비타민, 식물 추출물 등을 포함하는 부형제를 추가로 함유할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부주름의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 건강기능식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분은 그의 사용 목적(예방 또는 개선)에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시 본 발명의 건강기능식품 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품의 종류에 특별한 제한은 없다. 상기 건강기능식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 식품, 특히 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 본 발명의 기능성 식품은 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있다. 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분 이외에 천연 탄수화물 또는 향미제를 추가 성분으로서 포함시킬 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예컨대, 글루코오스, 프럭토오스 등), 디사카라이드(예컨대, 말토스, 수크로오스 등), 올리고당, 폴리사카라이드(예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등) 또는 당알코올(예컨대, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등)인 것이 바람직하다. 상기 향미제는 천연 향미제(예컨대, 타우마틴, 스테비아 추출물 등)와 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)를 이용할 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물 이외에 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 더 함유할 수 있다. 이러한 상기 첨가되는 성분의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강기능식품 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
실시예
1. 나한과 추출물의 제조
건조 나한과는 200g을 분쇄한 후, 물 2ℓ를 가하여 3시간 동안 환류 추출하였다. 추출액을 여과하고 남은 잔사에 다시 물 1ℓ를 가하고 1시간 동안 환류 추출한 후 여과하였다. 1차 추출액과 2차 추출액을 합하여 농축, 건조하여 나한과 추출물을 제조하였다.
실시예
2. 나한과
잔사
추출물의 제조
실시예 1에서 추출하고 남은 나한과 잔사를 건조하여 얻어진 건조 잔사 50g에 1ℓ의 70%(v/v) 에탄올을 첨가한 후, 3시간 동안 환류 추출하였다. 추출액을 여과한 후, 농축, 건조하여 나한과 잔사 추출물을 제조하였다.
실시예
3. 나한과
잔사
추출물의
콜라게나아제
(
collagenase
) 저해 활성 확인
상기 실시예 1 및 2에서 얻은 시료들의 피부주름 예방 및 개선 효과를 확인하기 위하여, 콜라게나아제(Collageanse) 저해 활성시험을 실시하였다. 콜라게나아제 저해 활성은 반응구 0.1M tris-HCl buffer(pH 7.5)에 4mM CaCl2를 첨가하여, 4-phenylazobenzyloxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg (0.3mg/㎖)를 녹인 기질액 0.25㎖ 및 시료 농도별(100, 200, 400, 800 및 1,200㎍/㎖) 용액 0.1㎖의 혼합액에 콜라게나아제(0.2mg/㎖) 0.15㎖를 첨가하여 실온에서 20분간 정치한 후 6% 시트르산 0.5㎖을 넣어 반응을 정지시킨 후, 에틸아세테이트 1.5㎖을 첨가하여 320nm에서 흡광도를 측정하였다. 콜라게나아제 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 계산되었다.
그 결과, 도 1에 개시한 바와 같이, 본 발명의 나한과 잔사 추출물이 나한과 추출물에 비해 통계적으로 유의미하게 콜라게나아제 활성을 저해하는 것을 확인하였다. 본 발명의 나한과 잔사 추출물의 콜라게나아제(Collagenase) 저해활성에 대한 IC50
값은 246.0㎍/㎖인 것으로 나타났고, 나한과 추출물(가용성 부분)의 콜라게나아제(Collagenase) 저해활성에 대한 IC50
값은 562.6㎍/㎖인 것으로 나타났다.
실시예
4. 나한과
잔사
추출물의 처리에 따른
MMP
-1(Matrix metalloproteinase-1)의 발현 저해 효과 및 세포
생존률
(%) 확인
96웰 플레이트에 세포를 2×104 세포가 되도록 접종하고 10% 혈청 DMEM 배지 및 37℃의 조건에서 24시간 동안 배양한 후 배지를 제거하고 인산완충용액(PBS)으로 세척한 후 나한과 잔사 70%(v/v) 에탄올 추출물과 나한과 잔사 메탄올 추출물(실시예 2에서 70%(v/v) 에탄올 대신 메탄올을 첨가하여 제조함)을 16시간 동안 배양하였다. 16시간 배양 후 PBS로 세척하고 새로운 무혈청 배지를 세포에 첨가하여 UVB 20mJ/cm2의 양으로 조사한 후, 세포배양액을 확보하여 상업적으로 판매하는 Pro-MMP-1(R&D)를 이용하여 Pro-MMP-1 농도를 측정하여 생성억제율(%)로 계산하였다.
세포 생존율(cell viability)은 상기와 동일한 조건에서 MTT 에세이를 이용하여 측정하였고 상대적인 생존율(%)로 표기하였다.
그 결과, 도 2에 개시한 바와 같이 자외선 조사군은 자외선 비조사군에 비해 MMP-1의 발현량이 증가하였으며, 나한과 잔사 70%(v/v) 에탄올 추출물과 나한과 잔사 메탄올 추출물을 처리한 실험군은 자외선 조사군에 비해 MMP-1의 발현량이 감소하였다.
또한 도 3에 개시한 바와 같이 세포 생존률은 비자외선 조사군에 비해 자외선 조사군의 세포 생존률이 낮아졌으며, 동일한 조건에서 자외선 조사와 함께 본 발명의 나한과 잔사 추출물을 처리한 군에서는 세포 생존률이 약간 상승하는 수준을 나타내어, 나한과 잔사 추출물은 세포독성이 없다는 것을 확인하였다.
Claims (6)
- 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 나한과 잔사 추출물은(1) 건조한 나한과에 물을 가하여 추출 및 여과하여 상등액을 제거하는 단계; 및(2) 상기 상등액을 제거하고 남은 나한과 잔사에 C1~C4의 저급 알코올을 가하여 나한과 잔사 추출물을 획득하는 단계;를 포함하는 방법으로 제조된 것을 특징으로 하는 피부주름의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 C1~C4의 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 피부주름의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 나한과 잔사 추출물은 콜라게나아제 활성을 억제하고, MMP-1 단백질의 발현을 감소시키는 것을 특징으로 하는 피부주름의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부외용 연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부주름의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
- 나한과 잔사 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부주름의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
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| KR101907919B1 (ko) | 2018-10-16 |
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