WO2017188356A1 - 抗体含有製剤 - Google Patents

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厚 佐伯
翔 西澤
仁 佐々木
千史 今井
智之 井川
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中外製薬株式会社
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    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]

Definitions

  • the present invention binds to both blood coagulation factor IX (FIX) and / or activated blood coagulation factor IX (FIXa) and blood coagulation factor X (FX), and functions blood coagulation factor VIII (FVIII). It relates to formulations containing alternative bispecific antibodies.
  • Bispecific antibodies found that bind to both blood coagulation factor IX (FIX) and / or activated blood coagulation factor IX (FIXa) and blood coagulation factor X (FX), substituting FVIII function (Non-Patent Documents 1 and 2, Patent Documents 1, 2, and 3).
  • Emicizumab ACE910
  • ACE910 a bispecific antibody
  • An object of the present invention is to provide a stable solution formulation containing Emicizumab (ACE910), a bispecific antibody that binds both FIX and / or FIXa and FX and replaces the function of FVIII. .
  • the bispecific antibody is contained in an amount of 20 to 180 mg / mL, 10 to 40 mM mM histidine-aspartate buffer, 0.2 to 1
  • a solution formulation with mg / mL Poloxamer 188, 100 mM to 300 mM arginine, pH 4.5 to 6.5 a stable antibody-containing solution formulation in which aggregate formation and / or charge heterogeneity is suppressed can be achieved.
  • the present invention was completed.
  • the first polypeptide is an H chain comprising the amino acid sequences of H chain CDR1, 2, 3 described in SEQ ID NO: 1, 2, 3 (H chain CDR of Q499)
  • the second polypeptide is SEQ ID NO: : H chain comprising the amino acid sequence of H chain CDR1, 2, 3 described in 4, 5, 6 (H chain CDR of J327)
  • the third polypeptide and the fourth polypeptide are SEQ ID NOs: 7, 8
  • a bispecific antibody comprising a common L chain comprising the amino acid sequences of L chain CDR1, 2, 3 described in 9 (L404 L chain CDR), 10 mM to 40 mM histidine-aspartate buffer, 0.2-1 mg / mL Poloxamer 188, 100 mM to 300 mM arginine,
  • An antibody solution formulation having a pH of 4.5 to 6.5.
  • the bispecific antibody is a bispecific antibody in which a first polypeptide and a third polypeptide form a pair, and a second polypeptide and a fourth polypeptide form a pair.
  • the first polypeptide is an H chain consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 10
  • the second polypeptide is an H chain consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 11, and a third polypeptide
  • the antibody solution formulation of [1] wherein the fourth polypeptide is a bispecific antibody consisting of the common L chain of SEQ ID NO: 12.
  • [4] The antibody solution formulation of any one of [1] to [3], having a pH of 6.0.
  • [5] The antibody solution preparation of any one of [1] to [4], wherein the concentration of the histidine-aspartate buffer is 20 mM.
  • [6] The antibody solution formulation of any one of [1] to [5], wherein the arginine concentration is 150 mM.
  • [7] The antibody solution formulation according to any one of [1] to [6], which is substantially free of chloride ions and acetate ions.
  • the first polypeptide is an H chain consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 10
  • the second polypeptide is an H chain consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 11
  • a third polypeptide A bispecific antibody wherein the fourth polypeptide comprises the common L chain set forth in SEQ ID NO: 12; 20 mM L-histidine-aspartate buffer, 0.5 mg / mL Poloxamer 188 150 mM L-Arginine
  • An antibody solution formulation having a pH of 6. The antibody solution formulation of any one of [1] to [8], which is used for subcutaneous administration.
  • the antibody solution preparation of any one of [1] to [9] which is used for treatment of hemophilia A.
  • a method for stabilizing an antibody in an antibody-containing solution formulation comprising adding histidine-aspartate buffer, Poloxamer 188 and arginine to a solution, wherein the concentration of histidine-aspartate buffer is 10
  • the aforementioned method wherein mM to 40 mM, Poloxamer 188 concentration is 0.2 to 1 mg / mL, and arginine concentration is 100 mM to 300 mM.
  • a method for suppressing antibody association (aggregate formation) in an antibody-containing solution preparation comprising adding histidine-aspartate buffer solution, Poloxamer 188 and arginine to the solution, and comprising histidine-asparagine
  • the acid salt buffer concentration is 10 mM to 40 mM
  • the Poloxamer 188 concentration is 0.2 to 1 mg / mL
  • the arginine concentration is 100 mM to 300 mM.
  • a method for reducing charged heterocomponents in an antibody-containing preparation comprising adding a histidine-aspartate buffer solution to a solution, wherein the histidine-aspartate buffer concentration is 10 mM to 40 mM And said method.
  • the present invention provides an antibody-containing preparation excellent in stability. Furthermore, the present invention has made it possible to provide an antibody-containing preparation in which aggregate formation and / or charge heterocomponents in a solution-form preparation are suppressed.
  • Example 8 is a photograph showing insoluble foreign matter after a shaking experiment according to Example 8 (a: 0 mg / mL Poloxamer188, b: 0.5 mg / mL Poloxamer188). It is a graph which shows the number of insoluble microparticles
  • Emicizumab (ACE910), which is a bispecific antibody that binds to both FIX and / or FIXa and FX and substitutes for the function of FVIII, containing 20 to 180 mg / mL, and 10 to 40 to mM histidine.
  • ACE910 Emicizumab
  • a solution formulation that is aspartate buffer, 0.2-1 mg / mL Poloxamer 188, 100 mM-300 mM arginine, pH 4.5-6.5.
  • the bispecific antibody Emicizumab (ACE910) is as described below.
  • the bispecific antibody is a bispecific antibody in which a first polypeptide and a third polypeptide form a pair, and a second polypeptide and a fourth polypeptide form a pair.
  • a first polypeptide having the H chain comprising the amino acid sequence of the H chain variable region set forth in SEQ ID NO: 13; and a second polypeptide having the amino acid of the H chain variable region set forth in SEQ ID NO: 14
  • a bispecific antibody comprising an H chain comprising a sequence, and a common L chain in which the third polypeptide and the fourth polypeptide comprise the amino acid sequence of the L chain variable region set forth in SEQ ID NO: 15.
  • the bispecific antibody is a bispecific antibody in which a first polypeptide and a third polypeptide form a pair, and a second polypeptide and a fourth polypeptide form a pair.
  • a third polypeptide A bispecific antibody (Q499-z121 / J327-z119 / L404-k) in which the polypeptide and the fourth polypeptide are composed of the common L chain described in SEQ ID NO: 12.
  • Such an antibody can be obtained, for example, according to the method described in WO2005 / 035756, WO2006 / 109592, WO2012 / 067176, and the like.
  • the antibody concentration contained in the preparation of the present invention is not particularly limited, but the antibody concentration is preferably 20 mg / mL to 180 mg / ml.
  • the antibody concentration contained in the preparation of the present invention is, for example, 20 mg / mL, 30 mg / mL, 40 mg / mL, 120 mg / mL, 150 mg / mL, 180 mg / mL.
  • the upper limit of the antibody concentration contained in the preparation of the present invention is not particularly limited, but is usually 250 mg / mL.
  • the antibody used in the present invention is not particularly limited as long as it binds to a desired antigen, and may be a polyclonal antibody or a monoclonal antibody, and a monoclonal antibody is preferable in that a homogeneous antibody can be stably produced.
  • amino acids contained in the amino acid sequences described in the present invention are modified after translation (for example, modification to pyroglutamic acid by pyroglutamylation of N-terminal glutamine is a modification well known to those skilled in the art). In some cases, even when such amino acid is post-translationally modified, it is naturally included in the antibody used in the present invention.
  • “substitute the function of FVIII” means that FIX or FIXa and FX are recognized and FX activation by FIXa is promoted (FXa production by FIXa is promoted).
  • FXa production promoting activity can be evaluated by a measurement system comprising, for example, FIXa, FX, synthetic substrate S-2222 (FXa synthetic substrate), and phospholipid.
  • a measurement system correlates with disease severity and clinical symptoms in hemophilia A cases (Rosen S, Andersson M, Blomba ⁇ ck M et al. Clinical applications of a chromogenic substrate method for determination of FVIII activity. Thromb Haemost 1985; 54: 811-23)
  • the “common L chain” is an L chain that forms a pair with two or more different H chains and can exhibit binding ability to each antigen.
  • “different H chains” preferably refer to H chains of antibodies against different antigens, but are not limited thereto and mean H chains having different amino acid sequences.
  • the common L chain can be obtained, for example, according to the method described in WO2006 / 109592.
  • the “stable antibody-containing preparation” means that it is difficult to produce an association of protein and / or charge hetero component in the preparation, that is, insoluble association, soluble association, charge in the solution. This refers to a preparation that is less prone to deterioration reactions such as the production of chemical heterogeneous components.
  • Charged heterocomponent refers to a component in which the surface charge of the protein is different from that of the main component due to deamidation, oxidation or hydrolysis.
  • the polypeptide in the present invention usually refers to peptides and proteins having a length of about 10 amino acids or more.
  • it is usually a biological polypeptide, but is not particularly limited, and may be, for example, a polypeptide comprising an artificially designed sequence.
  • any of natural polypeptide, synthetic polypeptide, recombinant polypeptide, etc. may be sufficient.
  • fragments of the above polypeptides are also included in the polypeptides of the present invention.
  • antibody is used in the broadest sense and is monoclonal, polyclonal, dimeric, multimeric, multispecific (eg, bispecific) as long as it exhibits the desired biological activity. Further, it may be an antibody derivative or a modified antibody (Miller K et al. J Immunol. 2003, 170 (9), 4854-61). Antibodies may be mouse, human, humanized, chimeric, or derived from other species or artificially synthesized.
  • the antibodies disclosed herein can be any type of immunoglobulin molecule (eg, IgG, IgE, IgM, IgD and IgA), class (eg, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 and IgA2) or subclass. It can be.
  • the immunoglobulin can be from any species (eg, human, mouse or rabbit).
  • the terms “antibody”, “immunoglobulin” and “immunoglobulin” are used interchangeably in a broad sense.
  • bispecific antibody refers to an antibody having two variable regions that recognize different epitopes in the same antibody molecule.
  • the bispecific antibody may be an antibody that recognizes two or more different antigens, or an antibody that recognizes two or more different epitopes on the same antigen.
  • Bispecific antibodies may include whole antibodies as well as antibody derivatives.
  • a recombinant antibody produced using a gene recombination technique can be used as the antibody.
  • Recombinant antibodies are produced by cloning DNA encoding them from hybridomas or antibody-producing cells such as sensitized lymphocytes that produce antibodies, incorporating them into vectors, and introducing them into hosts (host cells). Can be obtained.
  • Bispecific antibodies are not limited to those of IgG type, but for example, IgG type bispecific antibodies can be secreted by hybrid hybridoma (quadroma) generated by fusing two hybridomas that produce IgG antibodies. (Milstein C et al. Nature 1983, 305: 537-540). Moreover, it can be secreted by co-expressing the L chain and H chain genes constituting the two types of IgG of interest, a total of four genes, by introducing them into cells.
  • hybrid hybridoma quadroma
  • the antibody of the present invention can be produced by methods known to those skilled in the art. Specifically, DNA encoding the target antibody is incorporated into an expression vector. In that case, it integrates into an expression vector so that it may express under the control of an expression control region, for example, an enhancer and a promoter. Next, host cells are transformed with this expression vector to express the antibody. In that case, a combination of an appropriate host and an expression vector can be used.
  • the antibody of the present invention thus obtained can be isolated from the inside of the host cell or outside the cell (medium etc.) and purified as a substantially pure and homogeneous antibody. Separation and purification of antibodies may be carried out using separation and purification methods used in normal antibody purification, and are not limited in any way. For example, chromatography column, filter, ultrafiltration, salting out, solvent precipitation, solvent extraction, distillation, immunoprecipitation, SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, isoelectric focusing, dialysis, recrystallization, etc. are appropriately selected, When combined, antibodies can be separated and purified.
  • titration is performed with a liquid such as an aqueous solution containing aspartic acid in the form of a free amino acid in a solution such as an aqueous solution in which histidine is added in the form of a free amino acid. It is a buffer solution adjusted by this. It is also possible to add and adjust in the reverse order, and it is also possible to titrate directly with powder.
  • the present inventors In order to evaluate the stability at the time of storage of a sample containing the bispecific antibody, the present inventors have made various additives by freeze-thaw test, thermal acceleration test, long-term storage test, cryopreservation test and the like. The effect was examined. As a result, it was found that by using a histidine buffer, aggregate formation and / or charge heterocomponents are suppressed as compared with phosphate buffer, citrate buffer, and acetate buffer.
  • aspartic acid which is an acidic amino acid
  • aspartate buffer as a buffer
  • the concentration (amount) of the histidine-aspartate buffer in the preparation of the present invention is preferably 10-100 ⁇ mM, more preferably 10-40 ⁇ mM.
  • the concentration (amount) of the histidine-aspartate buffer solution is, for example, 10 ⁇ m, 20 ⁇ m, or 40 ⁇ m.
  • the concentration (amount) of arginine in the preparation of the present invention is preferably 100 ⁇ m to 300 ⁇ m.
  • the concentration (amount) of arginine is, for example, 100 ⁇ m, 150 ⁇ m, 200 ⁇ m, or 300 ⁇ m.
  • the pH of the solution is preferably 4.5 to 6.5, more preferably 5.5 to 6.5, and even more preferably 5.5 to 6.
  • the pH of the solution is, for example, 5.5 or 6.
  • the surfactant contained in the preparation of the present invention is, for example, polysorbate 20 (PS20) or pluronic F-68 (poloxamer 188: polyoxyethylene (160) polyoxypropylene (30) glycol), with poloxamer 188 being particularly preferred. .
  • the amount of poloxamer 188 (Poloxamer 188 or PX188) added to the preparation of the present invention is preferably 0.2 mg / mL to 1 mg / mL.
  • the amount of poloxamer 188 added to the preparation is, for example, 0.2 mg / mL, 0.5 mg / mL, 0.8 mg / mL, or 1 mg / mL.
  • the histidine used in the present invention may be either a single product or a derivative thereof, and L-histidine is particularly desirable.
  • Arginine used in the present invention may be either a single product, a derivative thereof, or a salt thereof, and L-arginine or a salt thereof is particularly desirable.
  • the salt of arginine is preferably aspartate or glutamate.
  • the preparation of the present invention can further contain an amino acid.
  • Preferred amino acids used in the present invention are natural amino acids or amino acid derivatives, and particularly preferred are L-methionine and L-proline.
  • the preparation of the present invention can further contain a saccharide.
  • Preferred saccharides used in the present invention are sucrose, trehalose, meglumine and sorbitol.
  • the amount of amino acid or saccharide added to the preparation of the present invention is generally 1 ⁇ m to 1000 ⁇ mM, preferably 5 ⁇ m to 500 ⁇ m, and more preferably 10 ⁇ m to 300 ⁇ m.
  • the preparation of the present invention can further contain an inorganic salt.
  • Preferred inorganic salts used in the present invention are magnesium salts and calcium salts.
  • the preparation of the present invention does not contain an anion other than aspartic acid as a counter ion of a buffer solution (buffering agent) or a stabilizer.
  • a preparation substantially free of chloride ions and acetate ions can be mentioned. “Substantially free of chloride ions and acetate ions” means, for example, that chloride ions and acetate ions are 5 ⁇ mM or less, more preferably 2 ⁇ mM or less, and more preferably 1 ⁇ mM or less.
  • the preparation of the present invention includes, as necessary, a cryoprotectant, a suspending agent, a solubilizing agent, an isotonic agent, a preservative, an adsorption inhibitor, a diluent, an excipient, a pH adjuster, a soothing agent.
  • a cryoprotectant for protecting a cryoprotectant against a cryoprotectant against a cryoprotectant against a cryoprotectant, a suspending agent, a solubilizing agent, an isotonic agent, a preservative, an adsorption inhibitor, a diluent, an excipient, a pH adjuster, a soothing agent.
  • An agent, a sulfur-containing reducing agent, an antioxidant and the like can be appropriately added.
  • cryoprotective agents include saccharides such as trehalose, sucrose, and sorbitol.
  • solution adjuvant examples include polyoxyethylene hydrogenated castor oil, polysorbate 80, nicotinic acid amide, polyoxyethylene sorbitan monolaurate, tuna gol, castor oil fatty acid ethyl ester, and the like.
  • tonicity agents examples include sodium chloride, potassium chloride, calcium chloride and the like.
  • preservatives examples include methyl paraoxybenzoate, ethyl paraoxybenzoate, sorbic acid, phenol, cresol, chlorocresol and the like.
  • adsorption inhibitor examples include human serum albumin, lecithin, dextran, ethylene oxide / propylene oxide copolymer, hydroxypropyl cellulose, methyl cellulose, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, polyethylene glycol and the like.
  • sulfur-containing reducing agents examples include N-acetylcysteine, N-acetylhomocysteine, thioctic acid, thiodiglycol, thioethanolamine, thioglycerol, thiosorbitol, thioglycolic acid and its salts, sodium thiosulfate, glutathione, carbon atoms
  • sulfur-containing reducing agents include N-acetylcysteine, N-acetylhomocysteine, thioctic acid, thiodiglycol, thioethanolamine, thioglycerol, thiosorbitol, thioglycolic acid and its salts, sodium thiosulfate, glutathione, carbon atoms
  • sulfur-containing reducing agents examples include N-acetylcysteine, N-acetylhomocysteine, thioctic acid, thiodiglycol, thioethanolamine,
  • Antioxidants such as erythorbic acid, dibutylhydroxytoluene, butylhydroxyanisole, ⁇ -tocopherol, tocopherol acetate, L-ascorbic acid and its salts, L-ascorbyl palmitate, L-ascorbic acid stearate, sodium bisulfite, sodium sulfite Chelating agents such as sodium, triamyl gallate, propyl gallate or disodium ethylenediaminetetraacetate (EDTA), sodium pyrophosphate, sodium metaphosphate and the like can be mentioned.
  • EDTA disodium ethylenediaminetetraacetate
  • One embodiment of the formulation of the present invention is as follows. 20-180 mg / mL of a bispecific antibody in which a first polypeptide and a third polypeptide are paired, and a second polypeptide and a fourth polypeptide are paired,
  • the first polypeptide is an H chain consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 10
  • the second polypeptide is the H chain consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 11
  • the third polypeptide and the fourth polypeptide A bispecific antibody whose polypeptide consists of a common L chain set forth in SEQ ID NO: 12; 20 mM L-histidine-aspartate buffer, 0.5 mg / mL Poloxamer 188 150 mM L-Arginine
  • An antibody solution formulation having a pH of 6.
  • Emicizumab (ACE910), a bispecific antibody of 20-180 mg / mL, 20 mM L-histidine-aspartate buffer, 0.5 mg / mL Poloxamer 188 150 mM L-Arginine
  • Another embodiment of the formulation of the present invention is as follows.
  • the first polypeptide is an H chain consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 10
  • the second polypeptide is the H chain consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 11
  • the third polypeptide and the fourth polypeptide A bispecific antibody whose polypeptide consists of a common L chain set forth in SEQ ID NO: 12; 20 mM L-histidine-aspartate buffer, 0.05 mg / mL PS20 150 mM L-Arginine
  • Emicizumab (ACE910), a bispecific antibody of 20-180 mg / mL, 20 mM L-histidine-aspartate buffer, 0.05 mg / mL PS20 150 mM L-Arginine
  • the administration of the antibody-containing preparation of the present invention can be administered to a patient via any appropriate route.
  • the dose of Emicizumab (ACE910) is, for example, 0.001 to 1000 mg / kg, and the dose interval is at least one day. More specifically, for example, after the initial dose of 1 mg / kg Emicizumab (ACE910) is administered, a continuous dose of 0.3 mg / kg of Emicizumab (ACE910) can be administered once a week. Further, for example, after administration of Emicizumab (ACE910) at the initial dose of 3 mg / kg, continuous dose of 1 mg / kg of Emicizumab (ACE910) can be administered once a week. Further, for example, after the initial dose of 3 mg / kg of Emicizumab (ACE910) is administered, a continuous dose of 3 mg / kg of Emicizumab (ACE910) can be administered once a week.
  • the antibody-containing preparation of the present invention can be used for diseases that develop and / or develop due to decreased or deficient activity of FVIII and / or activated blood coagulation factor VIII (FVIIIa), such as hemophilia A, FVIII / Although it can be used for hemophilia A, acquired hemophilia A, von Willebrand disease, etc. in which inhibitors against FVIIIa have appeared, it is not particularly limited to these diseases.
  • FVIIIa activated blood coagulation factor VIII
  • Another embodiment of the present invention is a method for stabilizing an antibody in an antibody-containing solution formulation.
  • a method for stabilizing antibodies in an antibody-containing solution formulation comprising adding histidine-aspartate buffer, Poloxamer®188 and arginine to the solution.
  • Another embodiment of the present invention is a method for suppressing antibody association (aggregate formation) in an antibody-containing solution preparation.
  • a method for suppressing antibody association (aggregate formation) in an antibody-containing solution preparation comprising adding histidine-aspartate buffer, Poloxamer 188 and arginine to the solution. is there.
  • the method for stabilizing an antibody and the method for suppressing antibody association (aggregate formation) include adding histidine-aspartate buffer, Poloxamer 188 and arginine to the solution, Concentration is 20-180 mg / mL, histidine-aspartate buffer concentration is 10 m -40 mM, Poloxamer 188 concentration is 0.2-1 mg / mL, Arginine concentration is 100 mM -300 mM and pH is 4.5-6.5 It is preferable that the antibody concentration is 20 to 180 mg / mL, the histidine-aspartate buffer concentration is 20 ⁇ mM, the concentration of Poloxamer 188 is 0.5 mg / mL, the arginine concentration is 150 ⁇ mM, and the pH is 6. It is preferable.
  • Another embodiment of the present invention is a method for reducing charge heterogeneity in antibody-containing formulations.
  • a method of reducing charged heterocomponents in an antibody-containing formulation comprising adding a histidine-aspartate buffer in the solution.
  • a method for reducing charged heterogeneous components in an antibody-containing preparation comprising adding a histidine-aspartate buffer to the solution, wherein the histidine-aspartate buffer concentration is 10 mM to 40 It is the said method including setting to mM or 20 mM.
  • Another embodiment of the present invention is a method of reducing charge heterocomponents in an antibody-containing formulation, comprising adding histidine-aspartate buffer, Poloxamer 188 and arginine in solution.
  • the method More preferably, a method for reducing charge heterogeneous components in an antibody-containing preparation comprising adding histidine-aspartate buffer, Poloxamer 188 and arginine in a solution, wherein the antibody concentration is 20-180 mg /
  • the histidine-aspartate buffer concentration is 10 mM to 40 mM
  • the Poloxamer 188 concentration is 0.2 to 1 mg / mL
  • the arginine concentration is 100 mM to 300 mM
  • the pH is 4.5 to 6.5.
  • the antibody concentration is preferably 20 to 180 mg / mL, the histidine-aspartate buffer concentration is 20 mM, the Poloxamer 188 concentration is 0.5 mg / mL, the arginine concentration is 150 mM, and the pH is 6.
  • the antibody is preferably a bispecific antibody, more preferably Emicizumab (ACE910).
  • an aspect represented by the expression “comprising” is an aspect represented by an expression “essentially consisting of”. As well as an embodiment represented by the expression “consistingconsistof”.
  • Example 1 Histidine inhibits aggregates during thermal accelerated storage of humanized IgG4 antibody ACE910
  • Material ACE910 is a bispecific antibody that recognizes blood coagulation factor IX and blood coagulation factor X, respectively, and is activated It is a humanized IgG4 antibody that is expected to prevent hemorrhagic A bleeding by substituting the function of blood coagulation factor VIII.
  • Test sample ACE910 100 mg / mL, 150 mmol / L NaCl, pH 6.0, 20 mmol / L Phosphate buffer, or 20 mmol / L Citrate buffer, or 20 mmol / L Acetate buffer, or 20 mmol / L as buffer
  • Each preparation solution containing one of the histidine buffers was prepared, and 5 to 15 ⁇ L was filled into glass vials.
  • the humanized antibody-containing solution preparation thus prepared was allowed to stand in a thermostatic bath at 25 ° C. for 8 weeks, and then used as a test sample.
  • ACE910 aggregate amount measurement method and aggregate amount calculation method The sample used was a column (Tosoh G3000SW XL ), 50 mmol / L phosphate buffer (pH 7.0), 300 mmol / L sodium chloride. The amount of aggregates was measured by size exclusion chromatography (SEC) using a mobile phase at a flow rate of 0.5 mL / min. Among the detected peaks, the largest in both area and height is the monomer body, and the generic name of the peaks detected before the monomer body is the aggregate (HMWS). The area was calculated for all the peaks, and the peak area ratio of the target peak was calculated according to the following formula.
  • Example 2 Aggregate inhibitory effect of salt concentration and arginine on heat-accelerated storage and freeze-thawing of humanized IgG4 antibody ACE910 (1) Material The antibody described in Example 1 was used.
  • Test sample ACE910 100mg / mL, 20mmol / L Histidine, pH 6.0, containing either 50mmol / L NaCl or 75mmol / L NaCl or 150mmol / L NaCl or 150mmol / L Arginine as an additive
  • Each formulation solution was prepared and filled into glass vials at 5 to 15 ⁇ L.
  • the humanized antibody-containing solution preparation thus prepared was allowed to stand in a thermostatic bath at 25 ° C for 8 weeks, or after freeze / thaw (F / T) (5 ° C to -20 ° C) 10 times, A sample was used.
  • Example 3 Aggregate inhibitory effect of aspartic acid on freezing and thawing of humanized IgG4 antibody ACE910 (1) Material The antibody described in Example 1 was used.
  • Test sample ACE910 100 mg / mL, 20 mmol / L Histidine, pH 6.0, each preparation liquid containing either 150 mmol / L NaCl or 150 mmol / L Sodium L-Aspartic acid as a counter ion, Glass vials were filled 5-15 ⁇ L each.
  • the prepared humanized antibody-containing solution preparation was freeze-thawed (5 ° C to -20 ° C) 10 times, and then used as a test sample.
  • Example 4 Aggregate and charge hetero-component inhibitory effect on pH during thermal accelerated storage of humanized IgG4 antibody ACE910 (1) Material The antibody described in Example 1 was used.
  • Test sample ACE910 100 mg / mL, 20 mmol / L Histidine-Aspartic acid, 150 mmol / L Arginine-Aspartic acid, pH 4.5 or 5.0 or 5.5 or 6.0 or 6.5 or 7.0 or 7.5 Each glass vial was filled with 5 to 15 ⁇ L.
  • the humanized antibody-containing solution preparation thus prepared was allowed to stand in a thermostatic bath at 25 ° C. for 8 weeks, and then used as a test sample.
  • the sample is a column (BioPro QA-F manufactured by YMC), 20 mmol / L Tris-HCl buffer (pH 7.8) is used as mobile phase A, 20 mmol. / L Tris-HCl buffer solution (pH 7.8), 500 mmol / L sodium chloride was used for mobile phase B, and the amount of charged heterocomponents was measured by ion exchange chromatography (IEC) performed at a flow rate of 0.5 mL / min. .
  • IEC ion exchange chromatography
  • the peak with the largest area and height is called Main peak
  • the generic name of the peaks detected after Main peak is called Acidic peak.
  • the area was calculated for all the peaks, and the peak area ratio of the target peak was calculated according to the following formula.
  • Example 5 Aggregate and charge heterogeneous component inhibitory effect of histidine concentration during thermal accelerated storage of humanized IgG4 antibody ACE910 (1) Materials The antibody described in Example 1 was used.
  • Test sample ACE910 100 mg / mL, 150 mmol / L Arginine, pH 6.0, Histidine-aspartic acid 5 mmol / L or 10 mmol / L or 20 mmol / L or 40 mmol / L Each glass vial was filled with 5 to 15 ⁇ L.
  • the humanized antibody-containing solution preparation thus prepared was allowed to stand in a thermostatic bath at 25 ° C. for 8 weeks, and then used as a test sample.
  • Example 6 Aggregate inhibitory effect of arginine concentration on freeze-thaw and heat-accelerated storage and cryopreservation of humanized IgG4 antibody ACE910 (1) Material The antibody described in Example 1 was used.
  • Test sample ACE910 100 mg / mL, 20 mmol / L Histidine-aspartic acid, pH 6.0, Arginine 75 mmol / L or 100 mmol / L or 150 mmol / L or 200 mmol / L or 300 mmol / L
  • Each formulation solution was prepared and filled into glass vials at 5 to 15 ⁇ L.
  • the humanized antibody-containing solution preparation thus prepared was freeze-thawed (5 ° C to -20 ° C) 10 times, or left in a constant temperature bath at 25 ° C for 8 weeks, or a constant temperature of -20 ° C After being left in the tank for 6 months, it was used as a test sample.
  • Example 7 Inhibiting effect of insoluble foreign matter and insoluble fine particles produced by poloxamer 188 during storage at 5 ° C. of humanized IgG4 antibody ACE910 (1) Material The antibody described in Example 1 was used.
  • Test sample ACE910 80 mg / mL, 20 mmol / L Histidine-Aspartic acid, 150 mmol / L Arginine, pH 6.0, 0 mg / mL Poloxamer 188 or 0.2 mg / mL Poloxamer 188 or 0.5 mg / mL as an additive
  • Each preparation liquid containing Poloxamer 188 or 1.0 mg / mL Poloxamer 188 or 0.05 mg / mL Polysorbate 20 or 1.0 mg / mL Polysorbate 20 was prepared, and 1.0 mL was filled in a glass vial. The thus prepared humanized antibody-containing solution preparation was allowed to stand in a refrigerator at 5 ° C. for 5 months, and then used as a test sample.
  • Example 8 Inhibiting effect of insoluble foreign matter and insoluble fine particles on poloxamer 188 during shaking stress and freezing and thawing storage of humanized IgG4 antibody ACE910 (1) Materials The antibody described in Example 1 was used.
  • Test sample ACE910 150 mg / mL, 20 mmol / L Histidine-Aspartic acid, 150 mmol / L Arginine-Aspartic acid, pH 6.0, 0 mg / mL Poloxamer 188 or 0.2 mg / mL Poloxamer 188 or 0.5 as an additive
  • the humanized antibody-containing solution preparation thus prepared is shaken at a rate of 200 stroke / min for 24 hours using a shaker at room temperature, or freeze-thawed (5 ° C to -20 ° C) is repeated 10 times. Then, it was set as a test sample.
  • Example 9 Stability of Humanized IgG4 Antibody ACE910 Concentration during Thermally Accelerated Storage and Freeze-Thaw Storage (1) Materials The antibody described in Example 1 was used. (2) Test sample 20 mmol / L Histidine-Aspartic acid, 150 mmol / L Arginine-Aspartic acid, pH 6.0, 0.5 mg / mL Poloxamer 188, 20 mg / mL ACE910 or 30 mg / mL ACE910 or 40 mg as ACE910 Each preparation liquid containing / mL ACE910 or 120 mg / mL ACE910 or 150 mg / mL ACE910 or 180 mg / mL ACE910 was prepared, and 0.65 mL was filled in a glass vial. The humanized antibody-containing solution preparation thus prepared was allowed to stand in a constant temperature bath at 40 ° C. for 8 weeks, or after freeze and thaw (25 ° C. to ⁇ 20 ° C.)
  • the sample is a column (Waters TSKgel Q-STAT), 50 mmol / L Tris-HCl buffer (pH 8.0) is used as mobile phase A, 50 mmol. / L Tris-HCl buffer solution (pH 8.0), 200 mmol / L sodium chloride is used as mobile phase B, and the amount of charged heterocomponents is measured by anion exchange chromatography (AIEC) performed at a flow rate of 0.5 mL / min. did.
  • the peak having the largest area and height is called Main peak
  • the generic name of the peak detected before Main peak is Basic peak
  • the generic name of the peak detected after Main peak is Acidic peak.
  • the largest in area and height were BiAb peak, the generic name of the peak detected before BiAb peak was Pre peak, and the generic name of the peak detected after BiAb peak was Post peak.
  • the area was calculated for all the peaks, and the peak area ratio of the target peak was calculated according to the following formula.
  • Results Table 9 shows the results obtained. SE indicates the result of size exclusion chromatography, AE indicates the result of anion exchange chromatography, and CE indicates the result of cation exchange chromatography.
  • the antibody solution preparation of the present invention is a preparation excellent in stability in a solution state as compared with conventional preparations, and is a group of proteins such as antibody molecules after storage at low temperature, normal temperature, or high temperature and after freeze-thawing. It is characterized in that coalescence generation is suppressed.
  • the antibody solution formulation of the present invention that hardly causes a degradation reaction can be used, for example, for the treatment of hemophilia A by subcutaneous administration.

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Abstract

本発明は、FVIIIの機能を代替する二重特異性抗体であるEmicizumab（ACE910）の、会合体形成が抑制された安定な抗体含有溶液製剤に関し、具体的には、20～180 mg/mLの前記二重特異性抗体、10 mM～40 mMのヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、0.2～1 mg/mLのPoloxamer 188、および100 mM～300 mMのアルギニンを含み、pHが4.5～6.5である、前記抗体含有溶液製剤に関する。

Description

抗体含有製剤
　本発明は血液凝固第IX因子（FIX）および／または活性化血液凝固第IX因子(FIXa)ならびに血液凝固第X因子（FX）の双方に結合し、血液凝固第VIII因子（FVIII）の機能を代替する二重特異性抗体を含有する製剤に関する。
　血液凝固第IX因子（FIX）および／または活性化血液凝固第IX因子（FIXa）ならびに血液凝固第X因子（FX）の双方に結合し、FVIIIの機能を代替する二重特異性抗体が見出された（非特許文献１、２、特許文献１、２、３)。二重特異性抗体であるEmicizumab（ACE910）はFVIIIの機能を代替することで、FVIII欠損及び機能異常による凝固反応の低下を改善するため、血友病A患者を対象とした臨床試験が行われている。
　これまで抗体の溶液製剤は数多く開発されており、これまで抗体の高濃度の溶液製剤ではヒスチジンやアルギニンを用いた製剤（特許文献４）、ヒスチジン－アスパラギン酸塩緩衝液を用いた製剤（特許文献５）が報告されている。一方で、バッファーとしてヒスチジン／ヒスチジン－HClを用いたアミロイドβ（Aβ）を含む安定な液体薬学的抗体製剤（特許文献６）が報告されている。
　しかしながら、前記二重特異性抗体を含む溶液製剤で会合体形成及び／又は電荷的ヘテロ成分が抑制された安定した溶液製剤はまだ報告されていない。
WO2005/035756 WO2006/109592 WO2012/067176 WO2002/030463 WO2011/090088 WO2013/131866
Nat Med. 2012; 18(10):1570-74 PLoS One. 2013; 8(2):e57479.
　本発明の目的は、FIXおよび／またはFIXaならびにFXの双方に結合し、FVIIIの機能を代替する二重特異性抗体であるEmicizumab（ACE910）を含有する、安定な溶液製剤を提供することである。
　上記目的を達成するために鋭意研究した結果、本発明者らは、前記二重特異性抗体を20～180 mg/mLを含み、10 mM～40 mM ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、0.2～1 mg/mL Poloxamer 188、100 mM～300 mM アルギニン、pH4.5～6.5である溶液製剤とすることで、会合体形成及び／又は電荷的ヘテロ成分が抑制された安定な抗体含有溶液製剤となしうることを見いだし、本発明を完成した。
　すなわち、本発明は以下のものを提供する。
〔１〕20～180 mg/mLの、第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：1、2、3（Q499のH鎖CDR）に記載のH鎖CDR1、2、3のアミノ酸配列を含むH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：4、5、6（J327のH鎖CDR）に記載のH鎖CDR1、2、3のアミノ酸配列を含むH鎖、第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：7、8、9（L404のL鎖CDR）に記載のL鎖CDR1、2、3のアミノ酸配列を含む共通L鎖からなる二重特異性抗体、
10 mM ～40 mM ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、
0.2～1 mg/mL Poloxamer 188、
100 mM ～300 mM アルギニン、
を含み、pHは4.5～6.5である抗体溶液製剤。
〔２〕前記二重特異性抗体は、第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：10に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：11に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、および第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：12に記載の共通L鎖からなる二重特異性抗体である、〔１〕の抗体溶液製剤。
〔３〕Poloxamer 188の濃度は0.5 mg/mLである、〔１〕または〔２〕の抗体溶液製剤。
〔４〕pHが6.0である、〔１〕～〔３〕のいずれかの抗体溶液製剤。
〔５〕ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液の濃度は20 mMである、〔１〕～〔４〕のいずれかの抗体溶液製剤。
〔６〕アルギニン濃度は150 mMである、〔１〕～〔５〕のいずれかの抗体溶液製剤。
〔７〕塩化物イオンおよび酢酸イオンを実質的に含まない、〔１〕～〔６〕のいずれかの抗体溶液製剤。
〔８〕20～180 mg/mLの、第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：10に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：11に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、および第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：12に記載の共通L鎖からなる二重特異性抗体、
20 mM L-ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、
0.5 mg/mL Poloxamer 188 
150 mM L-Arginine
を含み、pHは6である抗体溶液製剤。
〔９〕皮下投与に用いられる、〔１〕～〔８〕のいずれかの抗体溶液製剤。
〔１０〕血友病A治療に用いられる、〔１〕～〔９〕のいずれかの抗体溶液製剤。
〔１１〕抗体含有溶液製剤において抗体を安定化する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、Poloxamer 188及びアルギニンを添加することを含み、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が10 mM ～40 mM、Poloxamer 188の濃度が0.2～1 mg/mL 、アルギニン濃度が100 mM ～300 mMとする、前記方法。
〔１２〕抗体含有溶液製剤において抗体の会合化（会合体形成）を抑制する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、Poloxamer 188及びアルギニンを添加することを含み、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が10 mM ～40 mM、Poloxamer 188の濃度が0.2～1 mg/mL 、アルギニン濃度が100 mM ～300 mMとする、前記方法。
〔１３〕抗体含有製剤において電荷的ヘテロ成分を低減する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液を添加することを含み、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が10 mM ～40 mMとする、前記方法。
　本発明により、安定性に優れた抗体含有製剤が提供される。また本発明により、溶液状態の製剤における会合体生成及び／又は電荷的ヘテロ成分が抑制された抗体含有製剤を提供することが可能となった。
実施例８に係る振とう実験後の不溶性異物を示す写真である (a: 0 mg/mL Poloxamer188, b: 0.5 mg/mL Poloxamer188)。 実施例８に係る振とう実験後および凍結融解後の不溶性微粒子数（微粒子数/mL）を示すグラフである。
　以下、本発明を詳細に説明する。
　本発明は、FIXおよび／またはFIXaならびにFXの双方に結合し、FVIIIの機能を代替する二重特異性抗体であるEmicizumab（ACE910）を20～180 mg/mLを含み、10 mM～40 mM ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、0.2～1 mg/mL Poloxamer 188、100 mM～300 mM アルギニン、pH4.5～6.5である溶液製剤を提供する。
　前記二重特異性抗体であるEmicizumab（ACE910）は以下に記載したとおりである。
　第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：1、2、3（Q499のH鎖CDR）に記載のH鎖CDR1、2、3のアミノ酸配列を含むH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：4、5、6（J327のH鎖CDR）に記載のH鎖CDR1、2、3のアミノ酸配列を含むH鎖、第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：7、8、9（L404のL鎖CDR）に記載のL鎖CDR1、2、3のアミノ酸配列を含む共通L鎖からなる二重特異性抗体（Q499-z121/J327-z119/L404-k）。
　さらに具体的には、前記二重特異性抗体は、第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：13に記載のH鎖可変領域のアミノ酸配列を含むH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：14に記載のH鎖可変領域のアミノ酸配列を含むH鎖、および第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：15に記載のL鎖可変領域のアミノ酸配列を含む共通L鎖からなる二重特異性抗体である。
　さらに具体的には、前記二重特異性抗体は、第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：10に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：11に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、および第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：12に記載の共通L鎖からなる二重特異性抗体（Q499-z121/J327-z119/L404-k）である。
このような抗体は、例えばWO2005/035756、WO2006/109592、WO2012/067176などに記載の方法に従って取得することができる。
　本発明の製剤に含まれる抗体濃度は特に制限されないが、抗体濃度は好ましくは、20 mg/mL～180mg/mlである。本発明の製剤に含まれる抗体濃度は、例えば20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL、120 mg/mL、150 mg/mL、180 mg/mLである。本発明の製剤に含まれる抗体濃度の上限は、特に限定されないが、通常、250 mg/mLである。
　本発明で使用される抗体は、所望の抗原と結合する限り特に制限はなく、ポリクローナル抗体であってもモノクローナル抗体であってもよく、均質な抗体を安定に生産できる点でモノクローナル抗体が好ましい。
　なお、本発明で記載されているアミノ酸配列に含まれるアミノ酸は翻訳後に修飾（例えば、N末端のグルタミンのピログルタミル化によるピログルタミン酸への修飾は当業者によく知られた修飾である）を受ける場合もあるが、そのようにアミノ酸が翻訳後修飾された場合であっても当然のことながら本発明で使用される抗体に含まれる。
　本発明において「FVIIIの機能を代替する」とは、FIXまたはFIXa、および、FXを認識し、FIXaによるFXの活性化を促進する（FIXaによるFXa産生を促進する）ことを意味する。FXa産生促進活性は、例えば、FIXa、FX、合成基質S-2222（FXaの合成基質）、リン脂質から成る測定系で評価することができる。このような測定系は、血友病A症例における疾患の重症度および臨床症状と相関性を示す(Rosen S, Andersson M, Blomba¨ck M et al. Clinical applications of a chromogenic substrate method for determination of FVIII activity. Thromb Haemost 1985; 54: 811-23)
　本発明において「共通L鎖」とは、異なる2種以上のH鎖とそれぞれ対を形成し、それぞれの抗原に対して結合能を示し得るL鎖である。ここで、「異なるH鎖」とは、好ましくは異なる抗原に対する抗体のH鎖を指すが、それに限定されず、アミノ酸配列が互いに異なっているH鎖を意味する。共通L鎖は、例えばWO2006/109592に記載の方法に従って取得することができる。
　なお本発明における「安定な抗体含有製剤」とは、当該製剤中に抗体等のタンパク質の会合体及び／又は電荷的ヘテロ成分が生成しにくい、即ち溶液中に不溶性会合体、可溶性会合体、電荷的ヘテロ成分などの生成を始めとする劣化反応が起こりにくい製剤を指す。
　電荷的ヘテロ成分とは、脱アミド、酸化や加水分解等によりタンパク質の表面電荷が主成分と異なる成分を差す。
　本発明におけるポリペプチドとは、通常、１０アミノ酸程度以上の長さを有するペプチド、およびタンパク質を指す。また、通常、生物由来のポリペプチドであるが、特に限定されず、例えば、人工的に設計された配列からなるポリペプチドであってもよい。また、天然ポリペプチド、あるいは合成ポリペプチド、組換えポリペプチド等のいずれであってもよい。さらに、上記のポリペプチドの断片もまた、本発明のポリペプチドに含まれる。
　「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、所望の生物学的活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二量体、多量体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、抗体誘導体および抗体修飾物であってもよい（Miller K et al. J Immunol. 2003, 170(9), 4854-61）。抗体は、マウス、ヒト、ヒト化、キメラであってもよく、または他の種由来であっても、人工的に合成したものであってもよい。本明細書中に開示される抗体は、免疫グロブリン分子の任意のタイプ（例えば、IgG、IgE、IgM、IgDおよびIgA）、クラス（例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1およびIgA2）またはサブクラスであり得る。免疫グロブリンは、任意の種（例えば、ヒト、マウスまたはウサギ）由来であり得る。尚、「抗体」、「免疫グロブリン」および「イムノグロブリン」なる用語は互換性をもって広義な意味で使われる。
　「二重特異性」抗体は、それぞれ異なるエピトープを認識する２つの可変領域を同一の抗体分子内に有する抗体をいう。二重特異性抗体は2つ以上の異なる抗原を認識する抗体であってもよいし、同一抗原上の異なる2つ以上のエピトープを認識する抗体であってもよい。二重特異性抗体には、wholeの抗体だけでなく抗体誘導体が含まれていてもよい。
　抗体としては、遺伝子組換え技術を用いて産生した組換え型抗体を用いることができる。組換え型抗体は、それをコードするDNAをハイブリドーマ、または抗体を産生する感作リンパ球等の抗体産生細胞からクローニングし、ベクターに組み込んで、これを宿主（宿主細胞）に導入し産生させることにより得ることができる。
　二重特異性抗体はIgGタイプのものに限られないが、例えばIgGタイプ二重特異性抗体はIgG抗体を産生するハイブリドーマ二種を融合することによって生じるhybrid hybridoma(quadroma)によって分泌させることが出来る（Milstein C et al. Nature 1983, 305: 537-540）。また目的の二種のIgGを構成するL鎖およびH鎖の遺伝子、合計4種の遺伝子を細胞に導入することによって共発現させることによって分泌させることが出来る。
　本発明の抗体は当業者に公知の方法により製造することができる。具体的には、目的とする抗体をコードするDNAを発現ベクターへ組み込む。その際、発現制御領域、例えば、エンハンサー、プロモーターの制御のもとで発現するよう発現ベクターに組み込む。次に、この発現ベクターにより宿主細胞を形質転換し、抗体を発現させる。その際には、適当な宿主と発現ベクターの組み合わせを使用することができる。
　これにより得られた本発明の抗体は、宿主細胞内または細胞外（培地など）から単離し、実質的に純粋で均一な抗体として精製することができる。抗体の分離、精製は、通常の抗体の精製で使用されている分離、精製方法を使用すればよく、何ら限定されるものではない。例えば、クロマトグラフィーカラム、フィルター、限外濾過、塩析、溶媒沈殿、溶媒抽出、蒸留、免疫沈降、SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動、等電点電気泳動法、透析、再結晶等を適宜選択、組み合わせれば抗体を分離、精製することができる。
　本発明の製剤中のヒスチジン－アスパラギン酸塩緩衝液の好ましい態様は、ヒスチジンを遊離アミノ酸の状態で添加した水溶液等の溶液に、アスパラギン酸を遊離アミノ酸の状態で含む、水溶液等の液体で滴定することによって調整される緩衝液である。またその逆の順番で添加して調整することも可能であり、さらには粉末によって直接滴定することも可能である。
　本発明者らは、前記二重特異性抗体を含有する試料の保存時の安定性を評価するために、凍結融解試験、熱加速試験、長期保存試験及び凍結保存試験等により種々の添加剤の効果を検討した。その結果、ヒスチジン緩衝液を用いることにより、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液に比べ、会合体生成及び／又は電荷的ヘテロ成分が抑制されることを見出した。
　さらにその対イオン種として、酸性アミノ酸であるアスパラギン酸を用いることにより、すなわち、緩衝液としてヒスチジン－アスパラギン酸塩緩衝液を用いることにより、会合体生成及び／又は電荷的ヘテロ成分が抑制されることを見出した。
　本発明の製剤におけるヒスチジン－アスパラギン酸塩緩衝液の濃度（量）は、10～100 mMであることが好ましく、10～40 mMであることがより好ましい。また、ヒスチジン－アスパラギン酸塩緩衝液の濃度（量）は例えば10 mM、20 mM、40 mMである。
　さらに抗体含有製剤の安定化剤として報告されている塩化ナトリウムと比較して、アルギニンを添加することにより、より高い安定化効果（会合体生成抑制効果、電荷的ヘテロ成分抑制効果）を示すことも見出した。
　本発明の製剤におけるアルギニンの濃度（量）は、100 mM～300 mMであることが好ましい。また、アルギニンの濃度（量）は、例えば100 mM、150 mM、200 mM、300 mMである。
　本発明の製剤は、溶液のpHが4.5～6.5であることが好ましく、5.5～6.5であることがより好ましく、5.5～6であることがさらに好ましい。また、溶液のpHは例えば5.5、6である。
　本発明の製剤に含まれる界面活性剤は、例えばポリソルベート２０（ＰＳ２０）、プルロニックＦ－６８（ポロキサマー１８８：ポリオキシエチレン(160)ポリオキシプロピレン(30)グリコール）であるが、特にポロキサマー１８８が好ましい。本発明の製剤に対するポロキサマー１８８（Poloxamer 188またはPX188）の添加量は、好ましくは0.2 mg/mL～1 mg/mLである。また、製剤に対するポロキサマー１８８の添加量は、例えば、0.2 mg/mL、0.5 mg/mL、0.8 mg/mL、1 mg/mLである。
　本発明で使用されるヒスチジンは、単品またはその誘導体のいずれを用いてもよく、特に、L-ヒスチジンが望ましい。本発明で使用されるアルギニンは、単品、その誘導体、その塩のいずれを用いてもよく、特に、L-アルギニンまたはその塩が望ましい。また、アルギニンの塩は、アスパラギン酸塩またはグルタミン酸塩が好ましい。
　本発明の製剤は、さらにアミノ酸を含有することができる。本発明にて用いられる好ましいアミノ酸は、天然アミノ酸またはアミノ酸誘導体であり、特に好ましいのはL-メチオニン、およびL-プロリンである。
　本発明の製剤は、さらに糖類を含有することができる。本発明にて用いられる好ましい糖類は、スクロース、トレハロース、メグルミン及びソルビトールである。
　本発明の製剤に対するアミノ酸または糖類の添加量は、一般には1 mM～1000 mMであり、好ましくは5 mM～500 mMであり、さらに好ましくは10 mM～300 mMである。
　本発明の製剤は、さらに無機塩を含有することができる。本発明にて用いられる好ましい無機塩は、マグネシウム塩及びカルシウム塩である。
　 さらに本発明の製剤は、緩衝液（緩衝剤）または安定化剤の対イオンとして、アスパラギン酸以外の陰イオンを含まないことが好ましい。そのような製剤の一態様として、例えば、塩化物イオンおよび酢酸イオンを実質的に含まない製剤を挙げることができる。「塩化物イオンおよび酢酸イオンを実質的に含まない」とは、例えば塩化物イオンおよび酢酸イオンが5 mM以下、より好ましくは2 mM以下、より好ましくは1 mM以下であることを意味する。安定化効果の小さい塩化物イオンおよび酢酸イオンを実質的に含まず、安定化効果の大きいアスパラギン酸を対イオンとして用いることで、浸透圧を上げることなく安定性の高い抗体含有製剤を製造することが可能である。
　また本発明の製剤には、必要に応じて、凍結保護剤、懸濁剤、溶解補助剤、等張化剤、保存剤、吸着防止剤、希釈剤、賦形剤、ｐＨ調整剤、無痛化剤、含硫還元剤、酸化防止剤等を適宜添加することができる。
　凍結保護剤として例えば、トレハロース、ショ糖、ソルビトール等の糖類を挙げることができる。
　溶液補助剤として例えば、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリソルベート８０、ニコチン酸アミド、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、マグロゴール、ヒマシ油脂肪酸エチルエステル等を挙げることができる。
　等張化剤として例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム等を挙げることができる。
　保存剤として例えば、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、ソルビン酸、フェノール、クレゾール、クロロクレゾール等を挙げることができる。
　吸着防止剤として例えば、ヒト血清アルブミン、レシチン、デキストラン、エチレンオキサイド・プロピレンオキサイド共重合体、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリエチレングリコール等を挙げることができる。
　含硫還元剤として例えば、Ｎ－アセチルシステイン、Ｎ－アセチルホモシステイン、チオクト酸、チオジグリコール、チオエタノールアミン、チオグリセロール、チオソルビトール、チオグリコール酸及びその塩、チオ硫酸ナトリウム、グルタチオン、炭素原子数１～７のチオアルカン酸等のスルフヒドリル基を有するもの等が挙げられる。
　酸化防止剤として例えば、エリソルビン酸、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、α－トコフェロール、酢酸トコフェロール、Ｌ－アスコルビン酸及びその塩、Ｌ－アスコルビン酸パルミテート、Ｌ－アスコルビン酸ステアレート、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、没食子酸トリアミル、没食子酸プロピルあるいはエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ）、ピロリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム等のキレート剤が挙げられる。
　本発明の製剤の一つの実施態様は以下のとおりである。
20～180 mg/mLの、第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：10に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：11に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、および第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：12に記載の共通L鎖からなる二重特異性抗体、
20 mM L-ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、
0.5 mg/mL Poloxamer 188 
150 mM L-Arginine
を含み、pHは6である抗体溶液製剤。
また、
20～180 mg/mLの二重特異性抗体であるEmicizumab（ACE910）、
20 mM L-ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、
0.5 mg/mL Poloxamer 188 
150 mM L-Arginine
を含み、pHは6である抗体溶液製剤。
本発明の製剤の別の一つの実施態様は以下のとおりである。
20～180 mg/mLの、第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：10に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：11に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、および第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：12に記載の共通L鎖からなる二重特異性抗体、
20 mM L-ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、
0.05 mg/mL PS20 
150 mM L-Arginine
を含み、pHは6である抗体溶液製剤。
また、
20～180 mg/mLの二重特異性抗体であるEmicizumab（ACE910）、
20 mM L-ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、
0.05 mg/mL PS20 
150 mM L-Arginine
を含み、pHは6である抗体溶液製剤。
　本発明の抗体含有製剤の投与は、任意の適切な経路を介して患者に投与することができる。例えば、ボーラスとしてまたは一定期間にわたる持続注入による静脈内、筋肉内、皮下による経路により患者に投与される。静脈内投与または皮下投与が好ましい。
　Emicizumab（ACE910）の投与量は、例えば0.001～1000mg/kgであり、投与間隔は少なくとも1日以上である。
　より具体的には、例えば初回用量1 mg/kgのEmicizumab（ACE910）を投与後、週一回の頻度で継続用量0.3 mg/kgのEmicizumab（ACE910）を投与することが出来る。また、例えば初回用量3 mg/kgのEmicizumab（ACE910）を投与後、週一回の頻度で継続用量1 mg/kgのEmicizumab（ACE910）を投与することが出来る。また、例えば初回用量3 mg/kgのEmicizumab（ACE910）を投与後、週1回の頻度で継続用量3 mg/kgのEmicizumab（ACE910）を投与することが出来る。
　本発明の抗体含有製剤は、FVIIIおよび/または活性化血液凝固第VIII因子(FVIIIa)の活性の低下ないし欠損によって発症および/または進展する疾患に用いることができ、例えば血友病A、FVIII/FVIIIaに対するインヒビターが出現している血友病A、後天性血友病A、フォンビルブランド病等に用いることができるが、これら疾患に特に制限されない。
　本発明の別の一つの実施態様は、抗体含有溶液製剤において抗体を安定化する方法である。好ましくは、抗体含有溶液製剤において抗体を安定化する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、Poloxamer 188及びアルギニンを添加することを含む、前記方法である。
　また、本発明の別の一つの実施態様は、抗体含有溶液製剤において抗体の会合化（会合体形成）を抑制する方法である。好ましくは、抗体含有溶液製剤において抗体の会合化（会合体形成）を抑制する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、Poloxamer 188及びアルギニンを添加することを含む、前記方法である。
　また、前記、抗体を安定化する方法及び抗体の会合化（会合体形成）を抑制する方法においては、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、Poloxamer 188及びアルギニンを添加することを含み、抗体濃度が20～180 mg/mL、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が10 mM ～40 mM、Poloxamer 188の濃度が0.2～1 mg/mL 、アルギニン濃度が100 mM ～300 mM 及びpHが4.5～6.5とすることが好ましく、さらに抗体濃度が20～180 mg/mL、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が20 mM、Poloxamer 188の濃度が0.5 mg/mL 、アルギニン濃度が150 mM 及びpHが6とすることが好ましい。
　本発明の別の一つの実施態様は、抗体含有製剤において電荷的ヘテロ成分を低減する方法である。好ましくは、抗体含有製剤において電荷的ヘテロ成分を低減する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液を添加することを含む、前記方法である。さらに好ましくは、抗体含有製剤において電荷的ヘテロ成分を低減する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液を添加することを含み、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が10 mM ～40 mM若しくは20 mMとすることを含む、前記方法である。
また、本発明の別の一つの実施態様は、抗体含有製剤において電荷的ヘテロ成分を低減する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、Poloxamer 188及びアルギニンを添加することを含む、前記方法である。さらに好ましくは、抗体含有製剤において電荷的ヘテロ成分を低減する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、Poloxamer 188及びアルギニンを添加することを含み、抗体濃度が20～180 mg/mL、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が10 mM ～40 mM、Poloxamer 188の濃度が0.2～1 mg/mL 、アルギニン濃度が100 mM ～300 mM 及びpHが4.5～6.5とすることが好ましく、さらに抗体濃度が20～180 mg/mL、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が20 mM、Poloxamer 188の濃度が0.5 mg/mL 、アルギニン濃度が150 mM 及びpHが6とすることが好ましい。
　前記、抗体を安定化する方法、抗体の会合化（会合体形成）を抑制する方法、及び電荷的ヘテロ成分を低減する方法においては、抗体は好ましくは二重特異性抗体であり、さらに好ましくはEmicizumab（ACE910）である。
　本明細書において用いる場合、「・・・を含む（comprising）」との表現により表される態様は、「本質的に・・・からなる（essentially consisting of）」との表現により表される態様、ならびに「・・・からなる（consisting of）」との表現により表される態様を包含する。
　本明細書に記載の数値は、例えば機器、測定条件、当業者の手技に起因して、一定の範囲内で変動し得るものであり、本発明の目的を達成できる範囲内であれば、例えば10%程度変動することはあり得る。
　本明細書において明示的に引用される全ての特許および参考文献の内容は全て本明細書に参照として取り込まれる。
　本発明は、以下の実施例によってさらに例示されるが、下記の実施例に限定されるものではない。
実施例１：ヒスチジンがヒト化IgG4抗体ACE910の熱加速保存中に及ぼす会合体抑制効果
（１）材料
　ACE910は血液凝固第IX因子および血液凝固第X因子をそれぞれ認識するBispecific抗体であり、活性化血液凝固第VIII因子の機能代替により血友病Aの出血を予防することが期待されているヒト化IgG4抗体である。
（２）被験試料
　ACE910 100mg/mL, 150 mmol/L NaCl, pH 6.0, 緩衝液として20 mmol/L Phosphate buffer、もしくは20 mmol/L Citrate buffer、もしくは20 mmol/L Acetate buffer、もしくは20 mmol/L Histidine bufferのいずれかを含む各調剤液を調製し、ガラスバイアルに5～15 μLずつ充填した。
　このように調製したヒト化抗体含有溶液製剤を、25℃の恒温槽内に8週間静置した後、被験試料とした。
（３）ACE910の会合体量測定方法及び会合体量の算出方法
　試料は、カラム（東ソーG3000SWXL）を用い、50 mmol/Lリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）、300 mmol/L塩化ナトリウムを移動相に用い、流速0.5 mL/minで行ったサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）により会合体量を測定した。
　検出されるピークの内，面積，高さ共に最大のものをモノマー体，モノマー体の前に検出されるピークの総称を会合体（HMWS）とした。
すべてのピークについて面積を算出し、以下の式に従って対象ピークのピーク面積比率を算出した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000001
（４）結果
　得られた結果を表１に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　表１から明らかなように、20 mmol/L ヒスチジンを添加した試料は、２５℃熱加速8週間後の試料において高い会合体抑制効果が得られた。
実施例2：塩濃度およびアルギニンがヒト化IgG4抗体ACE910の熱加速保存中および凍結融解中に及ぼす会合体抑制効果
（１）材料
　実施例1に記載した抗体を使用した。
（２）被験試料
　ACE910 100mg/mL, 20 mmol/L Histidine, pH 6.0, 添加剤として50 mmol/L NaClもしくは75 mmol/L NaClもしくは150 mmol/L NaClもしくは150 mmol/L Arginineのいずれかを含む各調剤液を調製し、ガラスバイアルに5～15 μLずつ充填した。
　このように調製したヒト化抗体含有溶液製剤を25℃の恒温槽内に8週間静置した後、もしくは凍結融解（F/T）（5℃⇔-20℃）を10回繰り返した後、被験試料とした。
（３）ACE910の会合体量測定方法及び会合体量の算出方法
　実施例1に記載した方法に従った。
（４）結果
　得られた結果を表2に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
　表2から明らかなように、150 mmol/L アルギニンを添加した試料は、２５℃熱加速8週間後の試料および凍結融解後の試料において高い会合体抑制効果が得られた。
実施例3：アスパラギン酸がヒト化IgG4抗体ACE910の凍結融解中に及ぼす会合体抑制効果
（１）材料
　実施例1に記載した抗体を使用した。
（２）被験試料
　ACE910 100 mg/mL, 20 mmol/L Histidine, pH 6.0, 対イオンとして150 mmol/L NaClもしくは150 mmol/L Sodium L-Aspartic acidのいずれかを含む各調剤液を調製し、ガラスバイアルに5～15 μLずつ充填した。
　このように調製したヒト化抗体含有溶液製剤を凍結融解（5℃⇔-20℃）を10回繰り返した後、被験試料とした。
（３）ACE910の会合体量測定方法及び会合体量の算出方法
　実施例1に記載した方法に従った。
（４）結果
　得られた結果を表3に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
　表3から明らかなように、アスパラギン酸を添加した試料は、凍結融解後の試料において高い会合体抑制効果が得られた。
実施例4：pHがヒト化IgG4抗体ACE910の熱加速保存中に及ぼす会合体および電荷的ヘテロ成分抑制効果
（１）材料
　実施例1に記載した抗体を使用した。
（２）被験試料
　ACE910 100 mg/mL, 20 mmol/L Histidine-Aspartic acid, 150 mmol/L Arginine-Aspartic acid, pH 4.5もしくは5.0もしくは5.5もしくは6.0もしくは6.5もしくは7.0もしくは7.5を含む各調剤液を調製し、ガラスバイアルに5～15 μLずつ充填した。
　このように調製したヒト化抗体含有溶液製剤を25℃の恒温槽内に8週間静置した後、被験試料とした。
（３）ACE910の会合体量測定方法及び会合体量の算出方法
　実施例1に記載した方法に従った。
（４）ACE910の電荷的ヘテロ成分測定方法及び算出方法
　試料は、カラム（YMC製BioPro QA-F）を用い、20 mmol/L Tris-HCl 緩衝液（pH 7.8）を移動相Aに、20 mmol/L Tris-HCl 緩衝液（pH7.8）、500 mmol/L 塩化ナトリウムを移動相Bに用い、流速0.5 mL/minで行ったイオン交換クロマトグラフィー（IEC）により電荷的ヘテロ成分量を測定した。
　検出されるピークの内，面積，高さ共に最大のものをMain peak，Main peakの後に検出されるピークの総称をAcidic peakとした。
　すべてのピークについて面積を算出し、以下の式に従って対象ピークのピーク面積比率を算出した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000005
（５）結果
　得られた結果を表4に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
　表4から明らかなように、pH4.5～pH6.5、特にpH5.5およびpH6.0の試料は、25℃保存後の試料において高い会合体および電荷的ヘテロ成分抑制効果が得られた。
実施例5：ヒスチジン濃度がヒト化IgG4抗体ACE910の熱加速保存中に及ぼす会合体および電荷的ヘテロ成分抑制効果
（１）材料
　実施例1に記載した抗体を使用した。
（２）被験試料
　ACE910 100 mg/mL, 150 mmol/L Arginine, pH 6.0， Histidine-aspartic acid 5 mmol/Lもしくは10 mmol/Lもしくは20 mmol/Lもしくは40 mmol/Lを含む各調剤液を調製し、ガラスバイアルに5～15 μLずつ充填した。
　このように調製したヒト化抗体含有溶液製剤を25℃の恒温槽内に8週間静置した後、被験試料とした。
（３）ACE910の会合体量測定方法及び会合体量の算出方法
　実施例1に記載した方法に従った。
（４）ACE910の電荷的ヘテロ成分測定方法及び算出方法
　実施例4に記載した方法に従った。
（５）結果
　得られた結果を表5に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
　表5から明らかなように、Histidine-aspartic acid 10 mmol/L以上含む試料は、25℃保存後の試料において高い会合体および電荷的ヘテロ成分抑制効果が得られた。
実施例6：アルギニン濃度がヒト化IgG4抗体ACE910の凍結融解および熱加速保存および凍結保存中に及ぼす会合体抑制効果
（１）材料
　実施例1に記載した抗体を使用した。
（２）被験試料
　ACE910 100 mg/mL, 20 mmol/L Histidine-aspartic acid, pH 6.0， Arginine 75 mmol/Lもしくは100 mmol/Lもしくは150 mmol/Lもしくは200 mmol/Lもしくは300 mmol/Lを含む各調剤液を調製し、ガラスバイアルに5～15 μLずつ充填した。
　このように調製したヒト化抗体含有溶液製剤を凍結融解（5℃⇔-20℃）を10回繰り返した後、もしくは25℃の恒温槽内に8週間静置した後、もしくは-20℃の恒温槽内に6カ月間静置した後、被験試料とした。
（３）ACE910の会合体量測定方法及び会合体量の算出方法
　実施例1に記載した方法に従った。
（４）結果
　得られた結果を表6に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000008
　表6から明らかなように、Arginine 100 mmol/L以上含む試料は、凍結融解後および25℃保存後および-20℃保存後の試料において高い会合体抑制効果が得られた。
実施例7：ポロキサマー188がヒト化IgG4抗体ACE910の5℃保存中に及ぼす不溶性異物および不溶性微粒子生成抑制効果
（１）材料
　実施例1に記載した抗体を使用した。
（２）被験試料
　ACE910 80 mg/mL, 20 mmol/L Histidine-Aspartic acid, 150 mmol/L Arginine, pH 6.0、添加剤として0 mg/mL Poloxamer 188もしくは0.2 mg/mL Poloxamer 188もしくは0.5 mg/mL Poloxamer 188もしくは1.0 mg/mL Poloxamer 188もしくは0.05 mg/mL Polysorbate20もしくは1.0 mg/mL Polysorbate20を含む各調剤液を調製し、ガラスバイアルに1.0 mLずつ充填した。
　このように調製したヒト化抗体含有溶液製剤を5℃冷蔵室内に5カ月間静置した後、被験試料とした。
（３）不溶性異物観測方法
　試料をバイアル用目視検査台の試料台に載せ，試料台を回転させた後バイアルを観察し，不溶性異物の有無を確認した。
（４）不溶性微粒子測定法
　液中微粒子計測器（Hach Ultra Analytics, Model9703）を用いて液中不溶性微粒子数を計測した。
（５）結果
　得られた結果を表7に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000009
　表7から明らかなように、PS20を0.05 mg/mL含む試料、Poloxamer 188を0.2 mg/mL以上含む試料は、5℃保存後の試料において高い不溶性異物および不溶性微粒子生成抑制効果が得られた。
実施例8：ポロキサマー188がヒト化IgG4抗体ACE910の振とうストレスおよび凍結融解保存中に及ぼす不溶性異物および不溶性微粒子生成抑制効果
（１）材料
　実施例1に記載した抗体を使用した。
（２）被験試料
　ACE910 150 mg/mL, 20 mmol/L Histidine-Aspartic acid, 150 mmol/L Arginine-Aspartic acid, pH 6.0、添加剤として0 mg/mL Poloxamer 188もしくは0.2 mg/mL Poloxamer 188もしくは0.5 mg/mL Poloxamer 188もしくは0.8 mg/mL Poloxamer 188もしくはを含む各調剤液を調製し、ガラスバイアルに0.9 mLずつ充填した。
　このように調製したヒト化抗体含有溶液製剤を室温において振とう試験機を用いて200 stroke/minの速度で24時間振とうした後、もしくは凍結融解（5℃⇔-20℃）を10回繰り返した後、被験試料とした。
（３）不溶性異物観測方法
　実施例7に記載した方法に従った。
（４）不溶性微粒子測定法
　実施例7に記載した方法に従った。
（５）結果
　得られた結果を表8および図1,2に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000010
　表8および図１, 2から明らかなように、Poloxamer 188を0.2 mg/mL以上含む試料は、振とうストレスおよび凍結融解保存後の試料において高い不溶性異物および不溶性微粒子生成抑制効果が得られた。
実施例9：ヒト化IgG4抗体ACE910濃度の熱加速保存中および凍結融解保存中に及ぼす安定性
（１）材料
　実施例1に記載した抗体を使用した。
（２）被験試料
　20 mmol/L Histidine-Aspartic acid, 150 mmol/L Arginine-Aspartic acid, pH6.0, 0.5 mg/mL Poloxamer 188、ACE910として20 mg/mL ACE910もしくは30 mg/mL ACE910もしくは40 mg/mL ACE910もしくは120 mg/mL ACE910もしくは150 mg/mL ACE910もしくは180 mg/mL ACE910を含む各調剤液を調製し、ガラスバイアルに0.65 mLずつ充填した。
　このように調製したヒト化抗体含有溶液製剤を40℃の恒温槽内に8週間静置した後、もしくは凍結融解（25℃⇔-20℃）を5回および10回繰り返した後、被験試料とした。
（３）ACE910の会合体量測定方法及び会合体量の算出方法
　実施例1に記載した方法に従った。
（４）ACE910の電荷的ヘテロ成分測定方法及び算出方法
　試料は、カラム（Waters製TSKgel Q-STAT）を用い、50 mmol/L Tris-HCl 緩衝液（pH 8.0）を移動相Aに、50 mmol/L Tris-HCl 緩衝液（pH8.0）、200 mmol/L 塩化ナトリウムを移動相Bに用い、流速0.5 mL/minで行った陰イオン交換クロマトグラフィー（AIEC）により電荷的ヘテロ成分量を測定した。
　検出されるピークの内，面積，高さ共に最大のものをMain peak，Main peakの前に検出されるピークの総称をBasic peak、Main peakの後に検出されるピークの総称をAcidic peakとした。
　また、カラム（Thermo Scientific製ProPac WCX-10G）を用い、9.6 mmol/L Tris, 6.0 mmol/L piperazine, 11.0 mmol/L imidazole緩衝液（pH 6.0）を移動相Aに、9.6 mmol/L Tris, 6.0 mmol/L piperazine, 11.0 mmol/L imidazole, 100 mmol/L NaCl緩衝液（pH 10.1）を移動相Bに用い、流速0.5 mL/minで行った陽イオン交換クロマトグラフィー（CIEC）により電荷的ヘテロ成分量を測定した。
　検出されるピークの内，面積，高さ共に最大のものをBiAb peak，BiAb peakの前に検出されるピークの総称をPre peak、BiAb peakの後に検出されるピークの総称をPost peakとした。
　すべてのピークについて面積を算出し、以下の式に従って対象ピークのピーク面積比率を算出した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000011
（５）結果
　得られた結果を表9に示す。尚、SEはサイズ排除クロマトグラフィーの結果、AEは陰イオン交換クロマトグラフィーの結果、CEは陽イオン交換クロマトグラフィーの結果を示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000012
　表9から明らかなように、ACE910 20 mg/mL～ACE910 180 mg/mLの試料を比較して、40℃保存後および凍結融解後において同等の十分な安定性を有していた。
　本発明の抗体溶液製剤は、従来の製剤と比べて、溶液状態での安定性に優れた製剤であり、低温、常温、または高温での保存後および凍結融解後の抗体分子等のタンパク質の会合体生成が抑制されることを特徴とする。このように劣化反応が起こりにくい本発明の抗体溶液製剤は、例えば、皮下投与による血友病Aの治療に用いることができる。

Claims (13)

  1. 　20～180 mg/mLの、第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：1、2、3（Q499のH鎖CDR）に記載のH鎖CDR1、2、3のアミノ酸配列を含むH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：4、5、6（J327のH鎖CDR）に記載のH鎖CDR1、2、3のアミノ酸配列を含むH鎖、第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：7、8、9（L404のL鎖CDR）に記載のL鎖CDR1、2、3のアミノ酸配列を含む共通L鎖からなる二重特異性抗体、
    10 mM ～40 mM ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、
    0.2～1 mg/mL Poloxamer 188 、
    100 mM ～300 mM アルギニン、
    を含み、pHは4.5～6.5である抗体溶液製剤。
  2. 　前記二重特異性抗体は、第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：10に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：11に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、および第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：12に記載の共通L鎖からなる二重特異性抗体である、請求項１に記載の抗体溶液製剤。
  3. 　Poloxamer 188の濃度は0.5 mg/mLである、請求項１または２に記載の抗体溶液製剤。
  4. 　pHが6である、請求項１～３のいずれかに記載の抗体溶液製剤。
  5. 　ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液の濃度は20 mMである、請求項１～４のいずれかに記載の抗体溶液製剤。
  6. 　アルギニン濃度は150 mMである、請求項１～５のいずれかに記載の抗体溶液製剤。
  7. 　塩化物イオンおよび酢酸イオンを実質的に含まない、請求項１～６のいずれかに記載の抗体溶液製剤。
  8. 　20～180 mg/mLの、第一のポリペプチドと第三のポリペプチドが対を形成し、第二のポリペプチドと第四のポリペプチドが対を形成する二重特異性抗体であって、第一のポリペプチドが配列番号：10に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、第二のポリペプチドが配列番号：11に記載のアミノ酸配列からなるH鎖、および第三のポリペプチドと第四のポリペプチドが配列番号：12に記載の共通L鎖からなる二重特異性抗体、
    20 mM L-ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、
    0.5 mg/mL Poloxamer 188 
    150 mM L-Arginine
    を含み、pHは6である抗体溶液製剤。
  9. 　皮下投与に用いられる、請求項１～８のいずれかに記載の抗体溶液製剤。
  10. 　血友病A治療に用いられる、請求項１～９のいずれかに記載の抗体溶液製剤。
  11. 　抗体含有溶液製剤において抗体を安定化する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、Poloxamer 188及びアルギニンを添加することを含み、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が10 mM ～40 mM、Poloxamer 188の濃度が0.2～1 mg/mL 、アルギニン濃度が100 mM ～300 mMとする、前記方法。
  12. 　抗体含有溶液製剤において抗体の会合化（会合体形成）を抑制する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液、Poloxamer 188及びアルギニンを添加することを含み、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が10 mM ～40 mM、Poloxamer 188の濃度が0.2～1 mg/mL 、アルギニン濃度が100 mM ～300 mMとする、前記方法。
  13. 　抗体含有製剤において電荷的ヘテロ成分を低減する方法であって、溶液中にヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液を添加することを含み、ヒスチジン-アスパラギン酸塩緩衝液濃度が10 mM ～40 mMとする、前記方法。
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Cited By (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10450381B2 (en) 2010-11-17 2019-10-22 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of treatment that include the administration of bispecific antibodies
WO2019239080A1 (fr) 2018-06-14 2019-12-19 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Combinaison de facteur vii et d'un anticorps bispécifique anti-facteurs ix et x
WO2020053301A1 (en) * 2018-09-11 2020-03-19 Ichnos Sciences S.A. Compositions comprising a bispecific antibody, bufffer and one or more stabilizing agents
US10759870B2 (en) 2017-09-29 2020-09-01 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Multispecific antigen-binding molecules having blood coagulation factor VIII (FVIII) cofactor function-substituting activity and pharmaceutical formulations containing such a molecule as an active ingredient
US10934344B2 (en) 2006-03-31 2021-03-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of modifying antibodies for purification of bispecific antibodies
US11046784B2 (en) 2006-03-31 2021-06-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies
US11124576B2 (en) 2013-09-27 2021-09-21 Chungai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for producing polypeptide heteromultimer
US11142587B2 (en) 2015-04-01 2021-10-12 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for producing polypeptide hetero-oligomer
US11150254B2 (en) 2014-09-26 2021-10-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for measuring reactivity of FVIII
US11168344B2 (en) 2005-03-31 2021-11-09 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association
US11214623B2 (en) 2014-09-26 2022-01-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody capable of neutralizing substance having activity alternative to function of coagulation factor VIII (FVIII)
US11248053B2 (en) 2007-09-26 2022-02-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in CDR
US11352438B2 (en) 2016-09-06 2022-06-07 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor IX and/or activated coagulation factor IX and coagulation factor X and/or activated coagulation factor X
US11612562B2 (en) 2010-01-20 2023-03-28 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Solution preparation containing stabilized antibody
WO2023058723A1 (ja) * 2021-10-08 2023-04-13 中外製薬株式会社 プレフィルドシリンジ製剤の調製方法
US11649262B2 (en) 2015-12-28 2023-05-16 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for promoting efficiency of purification of Fc region-containing polypeptide
WO2023100975A1 (ja) * 2021-12-01 2023-06-08 中外製薬株式会社 抗体含有製剤の調製方法

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111665352B (zh) * 2020-06-23 2024-05-17 广州市丹蓝生物科技有限公司 一种储存剂及由其制备的抗体溶液制剂及其应用
US20240115698A1 (en) * 2021-02-05 2024-04-11 Bio-Thera Solutions, Ltd. Anti-il-5 antibody formulation, preparation method therefor and use thereof
CN114544839A (zh) * 2022-01-20 2022-05-27 未名生物医药有限公司 一种抗人神经生长因子抗体的电荷变异体检测方法

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002030463A2 (en) 2000-10-12 2002-04-18 Genentech, Inc. Reduced-viscosity concentrated protein formulations
WO2005035756A1 (ja) 2003-10-10 2005-04-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
WO2006109592A1 (ja) 2005-04-08 2006-10-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 血液凝固第viii因子の機能代替抗体
WO2009084659A1 (ja) * 2007-12-27 2009-07-09 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 高濃度抗体含有溶液製剤
WO2011090088A1 (ja) 2010-01-20 2011-07-28 中外製薬株式会社 安定化抗体含有溶液製剤
WO2012067176A1 (ja) 2010-11-17 2012-05-24 中外製薬株式会社 血液凝固第viii因子の機能を代替する機能を有する多重特異性抗原結合分子
WO2013131866A1 (en) 2012-03-08 2013-09-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Abeta antibody formulation

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5530101A (en) * 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
TWI831106B (zh) * 2014-06-20 2024-02-01 日商中外製藥股份有限公司 用於因第viii凝血因子及/或活化的第viii凝血因子的活性降低或欠缺而發病及/或進展的疾病之預防及/或治療之醫藥組成物

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002030463A2 (en) 2000-10-12 2002-04-18 Genentech, Inc. Reduced-viscosity concentrated protein formulations
WO2005035756A1 (ja) 2003-10-10 2005-04-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
WO2006109592A1 (ja) 2005-04-08 2006-10-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 血液凝固第viii因子の機能代替抗体
WO2009084659A1 (ja) * 2007-12-27 2009-07-09 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 高濃度抗体含有溶液製剤
WO2011090088A1 (ja) 2010-01-20 2011-07-28 中外製薬株式会社 安定化抗体含有溶液製剤
WO2012067176A1 (ja) 2010-11-17 2012-05-24 中外製薬株式会社 血液凝固第viii因子の機能を代替する機能を有する多重特異性抗原結合分子
WO2013131866A1 (en) 2012-03-08 2013-09-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Abeta antibody formulation

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MILLER K ET AL., J IMMUNOL., vol. 170, no. 9, 2003, pages 4854 - 61
MILSTEIN C. ET AL., NATURE, vol. 305, 1983, pages 537 - 540
NAT MED., vol. 18, no. 10, 2012, pages 1570 - 74
PLOS ONE, vol. 8, no. 2, 2013, pages e57479
ROSEN S; ANDERSSON M; BLOMBA''CK M ET AL.: "Clinical applications of a chromogenic substrate method for determination of FVIII activity", THROMB HAEMOST, vol. 54, 1985, pages 811 - 23
SAMPEI, ZENJIRO ET AL.: "Identification and Multidimensional Optimization of an Asymmetric Bispecific IgG Antibody Mimicking the Function of Factor VIII Cofactor Activity", PLOS ONE, vol. 8, no. 2, 2013, pages e57479, XP055553036, ISSN: 1553-734X, DOI: doi:10.1371/journal.pone.0057479 *
SAURABH SUMAN, KALONIA CAVAN, LI ZONGYI, HOLLOWELL PETER, WAIGH THOMAS, LI PEIXUN, WEBSTER JOHN, SEDDON JOHN M., LU JIAN R., BRESM: "Understanding the Stabilizing Effect of Histidine on mAb Aggregation: A Molecular Dynamics Study", MOLECULAR PHARMACEUTICS, vol. 19, no. 9, 5 September 2022 (2022-09-05), US , pages 3288 - 3303, XP093034804, ISSN: 1543-8384, DOI: 10.1021/acs.molpharmaceut.2c00453

Cited By (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11168344B2 (en) 2005-03-31 2021-11-09 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association
US10934344B2 (en) 2006-03-31 2021-03-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of modifying antibodies for purification of bispecific antibodies
US11046784B2 (en) 2006-03-31 2021-06-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies
US11248053B2 (en) 2007-09-26 2022-02-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in CDR
US11612562B2 (en) 2010-01-20 2023-03-28 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Solution preparation containing stabilized antibody
US10450381B2 (en) 2010-11-17 2019-10-22 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of treatment that include the administration of bispecific antibodies
US11124576B2 (en) 2013-09-27 2021-09-21 Chungai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for producing polypeptide heteromultimer
US11150254B2 (en) 2014-09-26 2021-10-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for measuring reactivity of FVIII
US11214623B2 (en) 2014-09-26 2022-01-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody capable of neutralizing substance having activity alternative to function of coagulation factor VIII (FVIII)
US11142587B2 (en) 2015-04-01 2021-10-12 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for producing polypeptide hetero-oligomer
US11649262B2 (en) 2015-12-28 2023-05-16 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for promoting efficiency of purification of Fc region-containing polypeptide
US11352438B2 (en) 2016-09-06 2022-06-07 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor IX and/or activated coagulation factor IX and coagulation factor X and/or activated coagulation factor X
US10759870B2 (en) 2017-09-29 2020-09-01 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Multispecific antigen-binding molecules having blood coagulation factor VIII (FVIII) cofactor function-substituting activity and pharmaceutical formulations containing such a molecule as an active ingredient
WO2019239080A1 (fr) 2018-06-14 2019-12-19 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Combinaison de facteur vii et d'un anticorps bispécifique anti-facteurs ix et x
WO2020053301A1 (en) * 2018-09-11 2020-03-19 Ichnos Sciences S.A. Compositions comprising a bispecific antibody, bufffer and one or more stabilizing agents
WO2023058723A1 (ja) * 2021-10-08 2023-04-13 中外製薬株式会社 プレフィルドシリンジ製剤の調製方法
WO2023100975A1 (ja) * 2021-12-01 2023-06-08 中外製薬株式会社 抗体含有製剤の調製方法
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