WO2014190555A1

WO2014190555A1 - 一种抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物及其制备方法

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Publication number: WO2014190555A1
Application number: PCT/CN2013/076598
Authority: WO
Inventors: 曲敬来; 高雪; 陈生; 齐继贵
Original assignee: Qu Jinglai
Priority date: 2013-05-31
Filing date: 2013-05-31
Publication date: 2014-12-04

Abstract

抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物及其制备方法，该组合物保护荆芥穗1-30克、酒黄连1-30克、玄参1-30克、玄参1-30克、橘红1-30克、桔梗1-30克、北柴胡1-30克、马勃1-30克、连翘1-30克、牛蒡子1-30克、甘草1-15克。上述原料配以辅料和矫味剂，经过常规工序直接或间接制成药剂学上可接受的颗粒剂、口服液、糖浆、片剂、胶囊、口崩片、泡腾片、滴丸、含漱液、漱口水等多种剂型。

Description

一种抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物及其制备方法技术领域

本发明属于中药技术领域，特别是关于一种抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物及其制备方法。其中，所述的甲型流感病毒为甲型新型 H1N1、甲型 H3N2流感病毒。背景技术

流行性感冒病毒属正粘病毒科（Orthomyxovirdae )成员，是流行性感冒的病原体，并且呈周期性大流行，严重威胁人类健康。历史上世界各国均出现过流感大规模爆发，死亡人数数以亿计。流感病毒分为甲、乙、丙三种类型，致病株主要是甲、乙型，丙型基本不致病。其中甲型流感病毒是几次世界性流感流行的主要病原体，而且目前世界上流行的也多为甲型。根据病毒表面凸出的蛋白质一血凝素 (HA)和神经氨酸酶 (NA)的不同，甲型病毒又可分为多种亚型，如 H1N1、 H1N2、腦 2等。而人对其中的 HI和 H3亚型易感，常见的流感病毒亚型为 H1N1、 H1N2、 H3N2等。近几年来，甲型新型 H1N1流感病毒在临床中越发引起人们的重视，在人群中常引发流行。自发现流感病毒， 20世纪中有 5次世界性大流行的记载，分别发生于 1900、 1918、 1957、 1968和 1977年，其中以 1918年的一次流行最为严重，死亡人数达 2000万以上。我国从 1953年至 1976年已有 12次中等或中等以上的流感流行，每次流行均由甲型流感病毒所引起， 2003年爆发的禽流感也是一种由甲型流感病毒亚型引起的呼吸道传染病。人感染甲型流感病毒后的症状与普通人流感相似，包括发热、咳嗽、喉咙痛、身体疼痛、头痛、发冷和疲劳等，有些还会出现腹泻和呕吐，重者会继发肺炎和呼吸衰竭，甚至死亡。 2009年前后爆发的流感短短几个月内即波及 100 余个国家，感染约 9万人，死亡数百人，我国内地有 24个省份累计确诊病例 1040例。并且药敏提示此次爆发的甲型 H1N1流感病毒对金刚烷胺和金刚乙胺耐药。国内外西医对流感的防治方法就是根据抗原抗体学说运用疫苗来预防流感的发生，但疫苗在几次流感的预防观察中都未能控制流行，其原因是流感的抗原不断发生着变异，疫苗的研发往往很难超越病毒变异的速度，且上一次流感发病期间所用的疫苗对下一次流感爆发会失去预防作用，且疫苗的预防效果也只有 70%〜 90%，因而难以起到全面有效的预防作用。而用于抗甲型流感病毒的药物： 1、金刚烷胺类药物：是目前临床上常用的抗流感药物，但存在神经毒性、长期用药易产生耐药株、对乙型流感病毒及此次爆发的甲型 H1N1流感病毒无效等缺点； 2、神经氨酸酶抑制剂和反义寡核苷酸：代表药物如吸入剂扎那米韦和 Gi lead公司推出的口服剂奥司他韦。这其中奥司他韦（达菲）被认为是目前治疗甲型 H1N1流感病毒相对最为有效的药物之一， "达菲"直接靶向作用在分布于流感病毒表面的神经氨酸酶，抑制神经氨酸酶的活性、阻止病毒颗粒的释放，切断病毒的扩散链，从而达到抑制流感病毒、治疗流感的目的。但在肯定其疗效的同时达菲应用过程中存在诸多问题： ①自奥司他韦上市后，已经陆续收到多份流感患者使用该药治疗发生自我伤害和谵妄事件的报告； ② FDA于 2004年 1月声称奥司他韦应用于幼儿可能造成脑内药物浓度过高，形成潜在的安全问题；③服用奥司他韦的呕吐、恶心（不伴呕吐）、失眠、头痛和腹痛、腹泻、头晕、疲劳、鼻塞、咽痛和咳嗽等临床副作用明显； ④价格昂贵；综上所述，国内外流感病毒的防治问题仍很严峻，抗流感病毒药物及治疗方法的研究具有重要的实际意义。至今，尚未找到针对甲型新型 H1N1、甲型 H1N1、甲型 H3N2流感的疫苗和特效治疗药物。因此，寻找一种疗效明确的治疗及预防甲型新型 H1N1、甲型 H1NK 甲型 H3N2流感药物成为医疗界关注的焦点和亟待解决的突出问题。

祖国医学认为，外感之火由直接感受温热邪气所致，火邪甚于温热，所以有 "温为热之渐，火乃热之极"之说。风、寒、暑、湿、燥入里皆可化火，称为 "五气化火"，如四时感邪之春伤风、秋伤燥，均可化火。据发明人长年临床探索发现并总结，流感均是由火热之邪气所致，此病传播迅速，是多种疾病的起因，常入里化热。病因为火热之邪，病机为外感火热之邪，侵袭肺卫，后迅速进入气分，伏于气分，致阳气郁热，肺卫郁闭，临床上表现为高热、恶寒、咳嗽及肌肉酸痛等卫气同病的症状。本发明人通过抗甲型流感病毒感染二十年的临床治疗及实验研究，认为治疗甲型流感病毒感染，既要清热解毒，防止外邪化热造成种种变证，又要辛凉解表，引邪外出。

中药不仅具有耐药性低、副作用和不良反应少等优点，而且还有抑制病毒复制、调节免疫功能、改善血液循环、解热镇痛及抗菌消炎等综合功效，其在防治病毒感染方面具有独特的优势和广阔的发展前景。研究表明，清热解毒类中药大多具有直接抗病毒的作用，如连翘、金银花、酒黄连等。

发明内容

本研究就是针对上述病因病机，采用有针对性而且具有独特抗甲型流感病毒感染并止咳作用的中草药配制而成。该组合物主要由荆芥穗、酒黄连、玄参、橘红、桔梗、北柴胡、马勃、连翘、牛蒡子、甘草组成，具有清热解毒、解表止咳之功，因势利导，疏风泻火散邪，升降共投，相反相成，既有利于火邪清解，又达到不伤正气，临床上可用于抗甲型流感病毒感染。

为达到更好的疗效，本发明药物可与原料药酒黄芩、板蓝根相结合。

为达到更好的疗效，本发明药物还可与原料药升麻、薄荷相结合。为达到更好的疗效，本发明药物还可与原料药败酱草、鱼腥草相结合。本发明所解决的主要技术问题是克服现有技术的不足，提供一种能够有效抗甲型流感病毒感染并止咳且无毒副作用的中药组合物及其制备方法，满足社会的需求。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物，包括下列重量份数的原料药（重量份数可以以克为单位，或者其他计量单位）：荆芥穗 1-30克、酒黄连 1-30克、玄参 1-30克、橘红 1-30克、桔梗 1_30克、北柴胡 1-30克、马勃 1-30克、连翘 1-30克、牛蒡子 1-30克、甘草 1_15克。

优选用量为：荆芥穗 5-25克、酒黄连 1-10克、玄参 1-10克、橘红 1-10克、桔梗 1-10克、北柴胡 1-10克、马勃 1-10克、连翘 1-10克、牛蒡子 1-15克、甘草 1-10克。

本发明药物的制备方法如下：

取原料药荆芥穗、酒黄连、玄参、橘红、桔梗、北柴胡、马勃、连翘、牛蒡子、甘草加水煎煮合并滤液、浓縮、冷却，加乙醇使含醇量 20-80% ( V/V) ，回收乙醇，使上清液浓縮成稠膏，备用。将制备的稠膏与颗粒剂常用辅料混合，制粒，干燥和分装成袋，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的颗粒剂；或将稠膏与口服液常用辅料混合，煮沸，加水稀释，静置，过滤，混匀分装成瓶，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的口服液；或将稠膏加入蔗糖、矫味剂、防腐剂，煮沸，加水稀释至 1000ml , 静置，滤过，混匀，分装，即得抗甲型流感病毒感染并止咳的糖浆，其中所述蔗糖重量〉 450g，所述矫味剂为甜菊苷、糖精钠、安塞蜜、甘草甜素、环已烷氨基磺酸、天冬酰胺、醇糖、天冬甜精、薄荷脑、各种香精及各种果味料，用量为 0.广 10%，所述防腐剂为山梨酸及其钾钠盐用量为<0. 3%、羟苯甲酯类用量为 <0. 05 %，所述分装使用的包材为玻璃瓶、塑料瓶；或将制备的稠膏与片剂常用辅料混合、压片，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的片剂；或将稠膏加入胶囊剂常用辅料，干燥、粉碎装入胶囊，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的胶囊。

如果还与原料药酒黄芩、板蓝根结合，其制备方法为：

取原料药荆芥穗、酒黄连、玄参、橘红、桔梗、北柴胡、马勃、连翘、牛蒡子、甘草、酒黄芩、板蓝根加水煎煮合并滤液、浓縮、冷却，加乙醇使含醇量 20-80% (V/V)，回收乙醇，使上清液浓縮成稠膏，备用。将制备的稠膏与颗粒剂常用辅料混合，制粒，干燥和分装成袋，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的颗粒剂；或将稠膏与口服液常用辅料混合，煮沸，加水稀释，静置，过滤，混匀分装成瓶，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的口服液；或将稠膏加入蔗糖、矫味剂、防腐剂，煮沸，加水稀释至 1000ml , 静置，滤过，混匀，分装，即得抗甲型流感病毒感染并止咳的糖浆，其中所述蔗糖重量〉 450g，所述矫味剂为甜菊苷、糖精钠、安塞蜜、甘草甜素、环已烷氨基磺酸、天冬酰胺、醇糖、天冬甜精、薄荷脑、各种香精及各种果味料，用量为 0.广 10%，所述防腐剂为山梨酸及其钾钠盐用量为 <0. 3%、羟苯甲酯类用量为 <0. 05 %，所述分装使用的包材为玻璃瓶、塑料瓶；或将制备的稠膏与片剂常用辅料混合、压片，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的片剂；或将稠膏加入胶囊剂常用辅料，干燥、粉碎装入胶囊，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的胶囊。

如果还与原料药升麻、薄荷结合，其制备方法为：

取原料药荆芥穗、酒黄连、玄参、橘红、桔梗、北柴胡、马勃、连翘、牛蒡子、甘草、酒黄芩、板蓝根、升麻、薄荷加水煎煮合并滤液、浓縮、冷却，加乙醇使含醇量 20-80% (V/V)，回收乙醇，使上清液浓縮成稠膏，备用。将制备的稠膏与颗粒剂常用辅料混合，制粒，干燥和分装成袋，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的颗粒剂；或将稠膏与口服液常用辅料混合，煮沸，加水稀释，静置，过滤，混匀分装成瓶，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的口服液；或将稠膏加入蔗糖、矫味剂、防腐剂，煮沸，加水稀释至 1000ml , 静置，滤过，混匀，分装，即得抗甲型流感病毒感染并止咳的糖浆，其中所述蔗糖重量〉 450g，所述矫味剂为甜菊苷、糖精钠、安塞蜜、甘草甜素、环已烷氨基磺酸、天冬酰胺、醇糖、天冬甜精、薄荷脑、各种香精及各种果味料，用量为 0.广 10%，所述防腐剂为山梨酸及其钾钠盐用量为 <0. 3%、羟苯甲酯类用量为 <0. 05 % , 所述分装使用的包材为玻璃瓶、塑料瓶；或将制备的稠膏与片剂常用辅料混合、压片，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的片剂；或将稠膏加入胶囊剂常用辅料，干燥、粉碎装入胶囊，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的胶囊。

如果还与原料药败酱草、鱼腥草结合，其制备方法为：

取原料药荆芥穗、酒黄连、玄参、橘红、桔梗、北柴胡、马勃、连翘、牛蒡子、甘草、酒黄芩、板蓝根、升麻、薄荷、败酱草、鱼腥草加水煎煮合并滤液、浓縮、冷却，加乙醇使含醇量 20-80% (V/V) ，回收乙醇，使上清液浓縮成稠膏，备用。将制备的稠膏与颗粒剂常用辅料混合，制粒，干燥和分装成袋，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的颗粒剂；或将稠膏与口服液常用辅料混合，煮沸，加水稀释，静置，过滤，混匀分装成瓶，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的口服液；或将稠膏加入蔗糖、矫味剂、防腐剂，煮沸，加水稀释至 1000ml , 静置，滤过，混匀，分装，即得抗甲型流感病毒感染并止咳的糖浆，其中所述蔗糖重量〉 450g，所述矫味剂为甜菊苷、糖精钠、安塞蜜、甘草甜素、环已烷氨基磺酸、天冬酰胺、醇糖、天冬甜精、薄荷脑、各种香精及各种果味料，用量为 0.广 10%，所述防腐剂为山梨酸及其钾钠盐用量为 <0. 3%、羟苯甲酯类用量为 <0. 05 %，所述分装使用的包材为玻璃瓶、塑料瓶；或将制备的稠膏与片剂常用辅料混合、压片，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的片剂；或将稠膏加入胶囊剂常用辅料，干燥、粉碎装入胶囊，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的胶囊。本发明中药组合物加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料，运用常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型，如颗粒剂、口服液、糖浆、片剂、胶囊、口崩片、泡腾片、滴丸、含嗽液、漱口水。

本发明药物选择荆芥穗、酒黄连、玄参、橘红、桔梗、北柴胡、马勃、连翘、牛蒡子、甘草进行组合，将这些药物组合使得各药物功效产生协同作用，从而能够有效抗甲型流感病毒感染并止咳。其中荆芥穗辛、微温为方中之主药，归肺、肝经，有解表散风、透疹的功效，是治疗感冒的常用药。张寿颐云：荆芥，治风热在表在上诸症，能泄肺热而达皮毛，风热咳嗽宜之。《滇南本草》：荆芥穗，解肺、肝、咽喉热痛 ......通肺气鼻窍塞闭；酒黄连苦，寒，无毒，归心、脾、胃、肝、胆、大肠经，功可清热燥湿，泻火解毒，主治湿热痞满，呕吐吞酸，泻痢，黄疸，高热神昏，心火亢盛，心烦不寐，血热吐衄，目赤，牙痛，消渴，痈肿疔疮；玄参味甘、苦、咸，性微寒，归肺、胃、肾经，功擅清热凉血，泻火解毒，滋阴，主治温邪入营，内陷心包，温毒发斑，热病伤阴、舌絳烦渴、津伤便秘、骨蒸劳嗽、目赤、咽痛、瘰疬、白喉、痈肿疮毒；少量橘红辛、苦，性温，归肺、脾经，功能散寒、燥湿、利气、消痰，用于治疗咳嗽，喉痒痰多，食积伤酒，呕恶痞闷；少量桔梗味苦、辛、性微温，入肺经，能祛痰止咳，并有宣肺、排脓作用，用于咳嗽痰多、咽喉肿痛、肺痈吐脓、胸满胁痛；柴胡味辛苦，气微寒，芳香疏泄，能条达肝气，疏肝解郁，疏散少阳半表半里之邪，为改善胸胁苦满、口苦咽干等少阳证之要药；北柴胡长于解热泄下，推陈致新，发明人通过临床应用发现其疏导邪气，解表退热的作用优于南柴胡；马勃辛、平，归肺经，善于清肺、利咽、解毒、止血，用于肺热咳嗽、失音、咽喉肿痛等证；连翘苦、微寒，归肺、心、胆经，功效清热解毒，消痈散结，用于外感风热或温病初起、发热、头痛、口渴等证；牛蒡子辛、苦、性寒，归肺、胃经，疏散风热、清热解毒透疹、宣肺利咽散肿。上九药合用，有清有解，火邪得除，甘草和中缓急，调和诸药，为方中使药。邪去正安，内外通和，人体气机升降得益，阴平阳秘，五脏元真通畅，人即安和，恢复健康。

本方最大特点为在大部清热泻火药中重用一味微温的荆芥穗，且作为方中主药，这是因为： 1、荆芥穗性微温，但温而不燥，方中用之即可防止大部清热泻火药配伍过于寒凉，避免寒凉遏邪之弊，又不影响方剂清热泻火的主要功效； 2、荆芥穗具有解表散风功效，协同北柴胡组成方剂解表的主要力量，引导邪从表解； 3、体内外试验证实荆芥穗具有抗病毒和止咳作用，目前未发现其他性温而有抗病毒作用的中药； 4、试验证实荆芥穗在合理范围内较大剂量比小剂量抗病毒作用明显，且方剂协同功效发挥更佳; 其重要性及巧妙处不言而喻。传统医家多专注清热泻火，药物皆为寒凉之品，如多用白僵蚕清热利咽，然临床发现，服药期间易腹泻、热退后多遗留咳嗽难愈等问题，究其根源即为方药过于寒凉所致，临床亦发现存在服用动物药白僵蚕过敏现象。本方另一重要特点为重用酒黄连，酒黄连苦寒，功可清热燥湿，泻火解毒，为方中清解主要组成力量，同时酒黄连入胃经，可泻胃火，运用恰当可防止和治疗邪传阳明经。

为达到更好的临床疗效，本发明中药组合物还可与酒黄芩、板蓝根结合；这是因为酒黄芩是有名的清热泻火中药，酒黄芩苦、寒，清热燥湿、泻火解毒，善清肺火及上焦之实热；板蓝根味苦性寒，归心、胃经，功能清热解毒、凉血、利咽，用于温热病发热、头痛、喉痛等多种热毒炽盛之证。

为达到更好的临床疗效，本发明中药组合物还可与升麻、薄荷结合；这是因为升麻有清热解毒、辛凉解表之功，用治风热上攻、阳明头痛，也可主治外感风热夹湿之证，切实提高临床疗效；薄荷辛，凉，气香，入肺、肝经，有疏散风热、清热解表、祛风消肿、利咽止痛之功效，常用于风热感冒、风热头痛、目赤疼痛、咽喉肿痛等。

为达到最佳临床疗效，本发明中药组合物还可与败酱草、鱼腥草结合；这是因为败酱草辛、苦，微寒，有清热解毒、消痈排脓之功效，运用于热毒痈肿；鱼腥草辛，微寒，归肺经，有清热解毒、排脓功效，用于肺热咳嗽等证。

本发明中药组合物是在多年中医疫病临床实践中总结运用出的经验方，加之科学的实验依据，各组份既能发挥各自的药理作用，又能起到相互的协同作用，使药理作用增强，配方合理，药味精炼，该方用于治疗或预防甲型流感病毒的感染，只要见症有发热、咳嗽、咯黄痰、咽痛、头痛身痛等，即可应用，疗效确切，且无毒副作用，在流行期间，作为通用方用于治疗与预防皆有效，剂型和制备工艺适合工业化大批量生产。

具体实施方式

本发明抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物，包括下列重量份数的原料药：荆芥穗 5-25克、酒黄连 1-10克、玄参 1-10克、橘红 1-10克、桔梗 1_10克、北柴胡 1_10 克、马勃 1-10克、连翘 1-10克、牛蒡子 1-15克、甘草 1-10克。

实施方式 1 :

称取原料药荆芥穗 12克、酒黄连 10克、玄参 5克、橘红 5克、桔梗 5克、北柴胡 5克、马勃 5克、连翘 5克、牛蒡子 5克、甘草 5克，以上十味药物共 62克，加水煎煮合并滤液、浓縮、冷却，加乙醇使含醇量为 20-80%，回收乙醇，使上清液浓縮成稠膏，备用。加入 β _环糊精，加热溶解、搅拌、滤过、喷雾干燥热空气进风温度 180°C，出风温度 80°C，喷干粉加入调味剂，混匀，物料在 40°C温度下干式制粒、整粒、分装成袋，即得本发明抗甲型流感病毒感染并止咳的颗粒剂。

实施方式 2: 称取原料药荆芥穗 20克、酒黄连 10克、玄参 5克、橘红 5克、桔梗 5克、北柴胡 5克、马勃 5克、连翘 5克、牛蒡子 5克、甘草 5克，以上十味药物共 70克，然后按实施方式 1所述的方法制成颗粒剂。

实施方式 3:

称取原料药荆芥穗 12克、酒黄连 10克、玄参 5克、橘红 5克、桔梗 5克、北柴胡 5克、马勃 5克、连翘 5克、牛蒡子 5克、甘草 5克、酒黄芩 5克（后下药）、板蓝根 5克，以上十二味药物共 72克，然后按实施方式 1所述的方法制成颗粒剂。

实施方式 4:

称取原料药荆芥穗 20克、酒黄连 10克、玄参 5克、橘红 5克、桔梗 5克、北柴胡 5克、马勃 5克、连翘 5克、牛蒡子 5克、甘草 5克、酒黄芩 5克（后下药）、板蓝根 5克，以上十二味药物共 80克，然后按实施方式 1所述的方法制成颗粒剂。

实施方式 5:

称取原料药荆芥穗 12克、酒黄连 10克、玄参 5克、橘红 5克、桔梗 5克、北柴胡 5克、马勃 5克、连翘 5克、牛蒡子 5克、甘草 5克、酒黄芩 5克（后下药）、板蓝根 5克、升麻 5克、薄荷 5克（后下药），以上十四味药物共 82克，然后按实施方式 1所述的方法制成颗粒剂。

实施方式 6:

称取原料药荆芥穗 20克、酒黄连 10克、玄参 5克、橘红 5克、桔梗 5克、北柴胡 5克、马勃 5克、连翘 5克、牛蒡子 5克、甘草 5克、酒黄芩 5克（后下药）、板蓝根 5克、升麻 5克、薄荷 5克（后下药），以上十四味药物共 90克，然后按实施方式 1所述的方法制成颗粒剂。

实施方式 7:

称取原料药荆芥穗 12克、酒黄连 10克、玄参 5克、橘红 5克、桔梗 5克、北柴胡 5克、马勃 5克、连翘 5克、牛蒡子 5克、甘草 5克、酒黄芩 5克（后下药）、板蓝根 5克、升麻 5克、薄荷 5克（后下药）、败酱草 5克、鱼腥草 5克，以上十六味药物共 92克，然后按实施方式 1所述的方法制成颗粒剂。

实施方式 8:

称取原料药荆芥穗 20克、酒黄连 10克、玄参 5克、橘红 5克、桔梗 5克、北柴胡 5克、马勃 5克、连翘 5克、牛蒡子 5克、甘草 5克、酒黄芩 5克（后下药）、板蓝根 5克、升麻 5克、薄荷 5克（后下药）、败酱草 5克、鱼腥草 5克，以上十六味药物共 100克，然后按实施方式 1所述的方法制成颗粒剂。

实施方式 9:

称取原料药酒黄连 10克、玄参 5克、橘红 5克、桔梗 5克、北柴胡 5克、马勃 5克、连翘 5克、牛蒡子 5克、甘草 5克、酒黄芩 5克（后下药）、板蓝根 5克、升麻 5克、薄荷 5克（后下药），以上十三味药物共 70克，然后按实施方式 1所述的方法制成颗粒剂。试验例 1: 中药组合物体外抗甲型流感病毒亚型的实验

测试原理：以 MDCK (狗肾细胞）为病毒宿主，测定样品抑制流感病毒甲型引起 MDCK 细胞病变程度。

测试材料和方法：

1.病毒株：流感病毒甲型 A/粤防 /243/72 (H3N2)。

2. 样品处理:取实施例 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9制得的稠膏加水溶解并分别制成 lOOOmg/ml的溶液装瓶备用； 3000rpm离心 20分钟后取上清液，用 50%的枸橼酸钠调 pH7. 2〜7. 6，倾入无菌试管中， 121 °C、 15— 20分钟高压灭菌，取出后置 4°C 冰箱中保存备用；实验时溶液样品用培养液 1 : 10稀释开始，作 2倍稀释，共 8个稀释度。

3.阳性对照药：达菲。

4.测试方法： MDCK细胞种 96孔培养板， 24小时后分别感染流感病毒甲型 A/粤防 /243/72 (H3N2) (感染量为 100个 TCID50), 吸附 2小时，弃病毒液，按以上稀释度加入样品，同时设细胞对照孔和病毒对照孔， 24小时观察细胞病变程度（CPE)，用 Reed-Muench法分别计算样品的半数有效浓度（IC₅。），并计算药物选择指数 (SI)。

测试结果

编号 IC50 SI

实施方式例 1组 1. 42mg/mL 1. 61

达菲组 0. 000022mg/mL ) 909. 1

实施方式例 2组 1. 23 mg/mL 2. 31

达菲组 0. 000156mg/mL

实施方式例 3组 1. 16mg/mL 2. 88

达菲组 0. 000036mg/mL

实施方式例 4组 0. 43mg/mL 5. 09

达菲组 0. 000093mg/mL

实施方式例 5组 0. 58mg/mL 4. 21

达菲组 0. 000012mg/mL

实施方式例 6组 0. 03mg/ml 6. 02

达菲组 0. 00027 lmg/ml

实施方式例 7组 0. 89mg/mL 3. 60

达菲组 0. 000113mg/mL 实施方式例 8组 0. 45mg/mL 5. 12

达菲组 0. 000033mg/mL

实施方式例 9组 1. 66mg/mL 1. 32

达菲组 0. 000096mg/mL

试验例 2: 中药荆芥穗、防风体外抗甲型流感病毒亚型的实验

1、实验原理、测试方法、实验设计同试验例 1.

2、测试材料：荆芥穗 1组为称取原料药荆芥穗 12g按照实施方式 1方法制得的稠膏，荆芥穗 2组为称取原料药荆芥穗 20g按照实施方式 1方法制得的稠膏，荆芥穗 3组为称取原料药荆芥穗 30g按照实施方式 1方法制得的稠膏；防风组为称取原料药防风 20g按照实施方式 1方法制得的稠膏。对照组为达菲。

3、实验结果：表 2

测试结果

编号 IC50 SI

荆芥穗 1组 1. 51mg/mL 1. 5

荆芥穗 2组 0. 43mg/mL 3. 1

荆芥穗 3组 0. 19mg/mL 5. 9

防风组无效无效

达菲组 0. 000063mg/mL 试验例 3: 中药荆芥穗对小鼠咳嗽影响的对比研究

1、试验原理

小鼠吸入刺激性化学药物的气雾后，刺激呼吸道感受器，反射地引起咳嗽。

2、材料与方法

2. 1 试剂及仪器氨水、蒸馏水，生化仪等。

2. 2 动物昆明小鼠 50只，体质量 (25 ± 2) g，雌雄各半，由广州中医药大学附属深圳医院动物实验中心提供，实验前各组小鼠状态正常，无咳嗽或其他不正常的现象。

2. 3 药物抗感止咳颗粒，由荆芥穗、牛蒡子、酒黄芩、酒黄连、板蓝根、橘红、桔梗、马勃、连翘、玄参、升麻、北柴胡、薄荷、甘草组成；荆芥穗组，由原料药荆芥穗组成，按照本发明实施方式 1所述方法制成颗粒剂；抗感止咳颗粒去荆芥穗组，由牛蒡子、酒黄芩、酒黄连、板蓝根、橘红、桔梗、马勃、连翘、玄参、升麻、北柴胡、薄荷、甘草组成，按照本发明实施方式 1所述方法制成颗粒剂；生药质量浓度为 100g / lOOmL, 生药由广州中医药大学附属深圳医院中药房提供，经鉴定全部符合《中华人民共和国药典》相关规定。氯雷他定分散片（商品名：雷宁，批准文号：国药准字 H20030208, 2010-12-08，生产单位：北京双鹭药业股份有限公司）。

2. 4 分组将小鼠随机分为抗感止咳颗粒组、荆芥穗组、抗感止咳颗粒去荆芥穗组、空白对照组，西药对照组，每组 10只。常规伺养 1周后，按照《药理实验方法学》相关内容，按 60kg体质量成人换算小鼠给药剂量。抗感止咳颗粒组、荆芥穗组、抗感止咳颗粒去荆芥穗组分别灌胃抗感止咳颗粒 2mL / 20g、荆芥穗颗粒剂 2ml/20g、抗感止咳颗粒去荆芥穗颗粒剂 2ml/20_{g ;} 西药对照组灌胃氯雷他定分散片 2mL / 20_{g :} 空白组灌胃等剂量蒸馏水。每日 1次，时间为 4d。

2. 5 引咳实验实验前小鼠禁食不禁水 12h，给药 lh后，分别置于 20cmX 20cmX 15cm 密闭有机玻璃试验箱内，将浓氨水 50mL置于雾化器内，向实验箱内通雾化氨水 30s。结束后，立即取出小鼠，观察。

2. 6 观察方法：以小鼠腹肌收縮或胸部收縮，同时张嘴记为一次咳嗽，有时可有咳嗽声者，算作 "有咳嗽"，否则算作 "无咳嗽"，记录 3分钟内小鼠咳嗽次数。

2. 7 统计学方法采用 SPSS16. 0统计软件，采用独立样本检验和单因素方差分析，计量资料以（ ±S) 表示， P〈0. 05为差异有统计学意义。

3、结果

中药对小鼠咳嗽次数的影响（见下表）

抗感止咳颗粒组、荆芥穗组、西药对照组的咳嗽次数明显比空白对照组、抗感止咳颗粒去荆芥穗组低. 对小鼠的咳嗽有效。而抗感止咳颗粒组效果尤为明显，荆芥穗组次之，抗感止咳颗粒去荆芥穗组基本无效。试验说明荆芥穗有非常好的止咳作用。

表 3 各组小鼠咳嗽次数比较（士 S)

组别 N 剂量 (ml/20g) 咳嗽次数

抗感止咳颗粒组 10 2 24. 3 ± 7· 8** 荆芥穗组 10 2 33. 4 ±8. 2* 抗感止咳颗粒去荆芥穗组 10 2 45. 9± 12. 7 氯雷他定分散片组 10 2 32. 2 ± 10· 5* 对照组 10 2ml蒸馏水 46. 7 ±8. 9 注：与对照组比较： *P<0.05， ** P<0.05.

试验例 4: 中药组合物抗甲型流感病毒感染并止咳的临床疗效试验

1.1 资料和方法

1.1.1 临床资料

本组病例均为 2009年确诊的新型甲型 H1N1流感的患者，年龄 11~69岁， 90例符合下列诊断标准的患者，随机分为治疗一组（实施方式例 9组） 30例，治疗二组（实施方式例 6组） 30例，对照组（达菲） 30例。各组在性别、年龄、病程和病情分布上无统计学意义 (P>0.05)。

1.1.2 诊断标准

(1) 与新型 H1N1患者有密切接触史；

(2) 两天内出现以发热、咳嗽、咽痛为主的流感临床表现及相应体征者；

(3) 鼻咽拭子 RT-PCR检测，新型 H1N1病毒为阳性者。

1.1.3 排除标准

(1) 伴发肺炎、急慢性鼻窦炎、肺结核等疾病患者；

(2) 血 WBC〉1L 0X107L或中性粒细胞〉75%;

(3) 合并严重的心、脑、肺、肝、肾和血液系统等严重原发性疾病，如病毒性肝炎、血友病、糖尿病、精神病患者等；

(4) 就诊前已接受其它针对本病的内服药物如抗病毒药、抗生素、中药等药物治疗；或正在参加其它临床试验的患者；

(5) 妊娠期、哺乳期妇女；

(6) 过敏体质，如对两种以上药物或食物过敏史者，已知对本药物成份过敏者。 1.2 治疗方法

治疗一组给予（实施方式例 9组）的中药组合物颗粒剂，口服，每日两次，每次用量相当于各生药材量见实施方式例 9组；治疗二组给予（实施方式例 6组）的中药组合物颗粒剂，口服，每日两次，每次用量相当于各生药材量见实施方式例 6组；对照组用达菲（磷酸奥司他韦胶囊） 75mg/次，每日 2次，口服。儿童酌减。疗程为 5天。

1.3 疗效标准

显效： 24h内体温正常，咳嗽、咽痛等临床症状明显缓解，从鼻咽拭子中分离的病毒经 RT-PCR检测，新型 H1N1病毒 RNA在 72小时内转阴。

有效： 72h内体温正常，咳嗽、咽痛等临床症状有所缓解，从鼻咽拭子中分离的病毒经 RT-PCR检测，新型 H1N1病毒 RNA在 72小时内转阴。

无效：治疗 5天仍发热，咳嗽、咽痛等临床症状未缓解，从鼻咽拭子中分离的病毒经 RT-PCR检测，新型 H1N1病毒 RNA结果仍为阳性。

1. 4 结果

运用本发明（实施方式例 9组）、（实施方式例 6组）中药组合物和对照达菲组进行抗甲型流感病毒感染临床实验，结果表明：比较三组患者发热、咳嗽、咯痰等临床改善情况、 72小时病毒核酸转阴率、平均退热时间等治疗。治疗一组临床改善总有效率 59. 33%, 72小时病毒核酸转阴率 11.13%，平均退热时间 41.23小时；治疗二组临床改善总有效率 71 · 58%, 72小时病毒核酸转阴率 33.55%，平均退热时间 23.38小时；对照组临床改善总有效率 73. 11%， 72小时病毒核酸转阴率 36.12%，平均退热时间 27.06小时。

以上内容是结合具体的实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。

Claims

权利要求书

1. 一种抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物，其特征在于：包括下列重量份数的原料药：荆芥穗 1-30、酒黄连 1-30、玄参 1-30、橘红 1-30、桔梗 1_30、北柴胡 1-30、马勃 1-30、连翘 1-30、牛蒡子 1-30、甘草 1-15。

2. 根据权利要求 1所述的抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物，其特征是：所述原料药为：荆芥穗 5-25克、酒黄连 1-10克、玄参 1-10克、橘红 1-10克、桔梗 1-10克、北柴胡 1-10克、马勃 1-10克、连翘 1-10克、牛蒡子 1-15克、甘草 1-10克。

3. 根据权利要求 2所述的抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物，其特征是：其中原料药还包括：酒黄芩 1-20克、板蓝根 1-20克。

4. 根据权利要求 3所述的抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物，其特征是：其中原料药还包括：升麻 1-20克、薄荷 1-20克。

5. 根据权利要求 4所述的抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物，其特征是：其中原料药还包括：败酱草 1-20克、鱼腥草 1-20克。

6. 权利要求 1或者 2所述中药组合物的制备方法，它包括下列步骤：

Φ取荆芥穗、酒黄连、玄参、橘红、桔梗、北柴胡、马勃、连翘、牛蒡子、甘草加水煎煮合并滤液、浓縮、冷却，加乙醇使含醇量 20-80% (V/V) ，回收乙醇，使上清液浓縮成稠膏，备用：

②将制备的稠膏与颗粒剂常用辅料混合，制粒，干燥和分装成袋，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的颗粒剂；或将稠膏与口服液常用辅料混合，煮沸，加水稀释，静置，过滤，混匀分装成瓶，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的口服液；或将稠膏加入蔗糖、矫味剂、防腐剂，煮沸，加水稀释至 1000ml , 静置，滤过，混匀，分装，即得抗甲型流感病毒感染并止咳的糖浆，其中所述蔗糖重量〉 450g，所述矫味剂为甜菊苷、糖精钠、安塞蜜、甘草甜素、环已烷氨基磺酸、天冬酰胺、醇糖、天冬甜精、薄荷脑、各种香精及各种果味料，用量为 0.广 10%，所述防腐剂为山梨酸及其钾钠盐用量为 <0. 3%、羟苯甲酯类用量为 <0. 05 %，所述分装使用的包材为玻璃瓶、塑料瓶；或将制备的稠膏与片剂常用辅料混合、压片，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的片剂; 或将稠膏加入胶囊剂常用辅料，干燥、粉碎装入胶囊，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的胶囊。

7. 根据权利要求 3所述中药组合物的制备方法，它包括下列步骤：

Φ取荆芥穗、酒黄连、玄参、橘红、桔梗、北柴胡、马勃、连翘、牛蒡子、甘草、酒黄芩、板蓝根加水煎煮合并滤液、浓縮、冷却，加乙醇使含醇量 20-80% ( V/V) ，回收乙醇，使上清液浓縮成稠膏，备用： ②将制备的稠膏与颗粒剂常用辅料混合，制粒，干燥和分装成袋，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的颗粒剂；或将稠膏与口服液常用辅料混合，煮沸，加水稀释，静置，过滤，混匀分装成瓶，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的口服液；或将稠膏加入蔗糖、矫味剂、防腐剂，煮沸，加水稀释至 1000ml , 静置，滤过，混匀，分装，即得抗甲型流感病毒感染并止咳的糖浆，其中所述蔗糖重量〉 450g，所述矫味剂为甜菊苷、糖精钠、安塞蜜、甘草甜素、环已烷氨基磺酸、天冬酰胺、醇糖、天冬甜精、薄荷脑、各种香精及各种果味料，用量为 0.广 10%，所述防腐剂为山梨酸及其钾钠盐用量为 <0. 3%、羟苯甲酯类用量为 <0. 05 %，所述分装使用的包材为玻璃瓶、塑料瓶；或将制备的稠膏与片剂常用辅料混合、压片，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的片剂；或将稠膏加入胶囊剂常用辅料，干燥、粉碎装入胶囊，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的胶囊。

8. 权利要求 4所述中药组合物的制备方法，它包括下列步骤：

Φ取荆芥穗、酒黄连、玄参、橘红、桔梗、北柴胡、马勃、连翘、牛蒡子、甘草、酒黄芩、板蓝根、升麻、薄荷加水煎煮合并滤液、浓縮、冷却，加乙醇使含醇量 20-80% (V/V) ，回收乙醇，使上清液浓縮成稠膏，备用：

②将制备的稠膏与颗粒剂常用辅料混合，制粒，干燥和分装成袋，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的颗粒剂；或将稠膏与口服液常用辅料混合，煮沸，加水稀释，静置，过滤，混匀分装成瓶，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的口服液；或将稠膏加入蔗糖、矫味剂、防腐剂，煮沸，加水稀释至 1000ml , 静置，滤过，混匀，分装，即得抗甲型流感病毒并止咳感染的糖浆，其中所述蔗糖重量〉 450g，所述矫味剂为甜菊苷、糖精钠、安塞蜜、甘草甜素、环已烷氨基磺酸、天冬酰胺、醇糖、天冬甜精、薄荷脑、各种香精及各种果味料，用量为 0.广 10%，所述防腐剂为山梨酸及其钾钠盐用量为 <0. 3%、羟苯甲酯类用量为 <0. 05 %，所述分装使用的包材为玻璃瓶、塑料瓶；或将制备的稠膏与片剂常用辅料混合、压片，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的片剂；或将稠膏加入胶囊剂常用辅料，干燥、粉碎装入胶囊，即可制备成抗甲型流感病毒感染并止咳的胶囊。

9. 权利要求 5所述中药组合物的制备方法，它包括下列步骤：

Φ取荆芥穗、酒黄连、玄参、橘红、桔梗、北柴胡、马勃、连翘、牛蒡子、甘草、酒黄芩、板蓝根、升麻、薄荷、败酱草、鱼腥草加水煎煮合并滤液、浓縮、冷却，加乙醇使含醇量 20-80% (V/V) ，回收乙醇，使上清液浓縮成稠膏，备用：

10. 根据权利要求 1〜5所述的抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物，其特征在于：所述的组合物的剂型为：颗粒剂、口服液、糖浆、片剂、胶囊、口崩片、泡腾片、滴丸、含嗽液、漱口水。

11. 根据权利要求 1〜5所述的抗甲型流感病毒感染并止咳的中药组合物，其特征在于: 临床上可用于治疗或预甲型新型 H1N1和 /或甲型 H3N2流感病毒的感染及其产生的咳嗽。