WO2014073254A1 - 光検出装置 - Google Patents
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Definitions
- the present invention relates to a photodetection device that reads fluorescent labels and the like distributed two-dimensionally.
- a fluorescence detection system using a fluorescent dye as a labeling substance has been widely used in the fields of biochemistry and molecular biology.
- this fluorescence detection system it is possible to evaluate gene sequences, gene mutation / polymorphism analysis, protein separation and identification, and the like, which are used for development of drugs and the like.
- a method is often used in which biological compounds such as proteins are distributed in a gel by electrophoresis and the distribution of the biological compounds is obtained by fluorescence detection. ing.
- an electrode is placed in a solution such as a buffer solution, and an electric field gradient is generated in the solution by flowing a direct current.
- DNA Deoxyribonucleic acid
- RNA ribonucleic acid
- Two-dimensional electrophoresis which is one of the evaluation methods using electrophoresis, is an evaluation method that distributes biomolecules two-dimensionally in a gel by combining two types of electrophoresis methods. Proteomic analysis It is considered the most effective way to do it.
- Examples of the combination of the electrophoresis include, for example, “isoelectric focusing using the difference in isoelectric point of each protein” as the first dimension and “SDS that performs separation based on the molecular weight of the protein” as the second dimension.
- -PAGE sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis
- a fluorescent dye is applied to the protein as the biomolecule thus separated before or after electrophoresis.
- the gel support on which the biomolecules (proteins) prepared as described above are two-dimensionally distributed is irradiated with excitation light, and the generated fluorescence intensity is obtained, and the fluorescence distribution (protein Distribution) Image readers that display images are widely used in the fields of biochemistry and molecular biology.
- the gel As a method for maintaining the two-dimensional distribution of the biomolecules, not only the gel is retained in the gel, but also the protein is separated from the gel and then the membrane is separated from the gel using electrophoresis or capillary action. There is also a method of transferring to the surface. In that case, as in the case of image reading using the gel support, the fluorescence distribution on the transfer support, which is the membrane, can be imaged by an image reading device.
- Patent Document 1 Japanese Patent Laid-Open No. 10-3134
- a mirror having a hole in the center is mounted on an optical head moved in the main scanning direction, and a transfer support on which electrophoresis of denatured DNA labeled with a fluorescent substance is recorded is recorded.
- a laser beam (excitation light) having a wavelength corresponding to the wavelength of the fluorescent material from the light source is irradiated through the hole of the mirror. Then, the fluorescence emitted when the fluorescent dye in the transfer support is excited is reflected around the hole of the mirror, and is detected by being photoelectrically converted by a multiplier.
- image data for one line is stored in the line buffer.
- the fluorescent dye is excited and emitted by irradiation with excitation light such as laser light, and is emitted in an isotropic manner. It is necessary to collect as much as possible.
- the optical elements such as the reflection mirror, the laser light cut filter, and the condensing lens that are installed while the fluorescence is guided to the multiplier are also increased in size. .
- an image reading apparatus that scans an optical system including an optical head has a problem in that it cannot be scanned at high speed due to an increase in the overall size as the optical element becomes larger.
- an object of the present invention is to provide a photodetector that can increase the light condensing efficiency while suppressing the enlargement of the objective lens.
- the photodetection device of the present invention is: An objective lens element that collects light from the measurement object; A light detecting element for detecting light collected by the objective lens element,
- the objective lens element includes a central portion that collects light by refraction, and a peripheral portion that is positioned around the central portion and collects light by reflection.
- the light from the measurement object is light emitted radially from substantially one point on the measurement object
- the objective lens element condenses light emitted radially from substantially one point on the measurement object on the light detection element.
- a light source for irradiating the measurement object with light includes a light transmission part that transmits light from the light source, The light from the light source passes through the light transmission part of the objective lens element and irradiates the measurement object.
- the objective lens element has a concentric shape with respect to the optical axis,
- the optical axis passes through at least a part of the light transmission part.
- a wavelength filter disposed between the objective lens element and the light detection element, and attenuating light having substantially the same wavelength as the light from the light source;
- the wavelength filter irradiates the light detection element by dimming a component having substantially the same wavelength as the light from the light source out of the light collected by the objective lens element.
- An intermediate lens element disposed between the objective lens element and the light detection element; The intermediate lens element further condenses the light collected by the objective lens element on the light detection element.
- the central portion of the objective lens element is While the light from the measurement object is incident, the incident side convex surface having a convex curved shape toward the outside in the optical axis direction, While emitting light from the incident side convex surface, and including an output side convex surface having a curved surface shape convex toward the outside in the optical axis direction
- the peripheral portion of the objective lens element is An incident side end face on which light from the measurement object is incident; An outer peripheral surface for reflecting the light from the incident side end surface inside; And an emission side end surface for emitting the light internally reflected by the outer peripheral surface,
- a concave boundary portion is formed at the boundary between the incident-side convex surface in the central portion and the incident-side end surface in the peripheral portion.
- the incident-side convex surface in the central portion of the objective lens element and the incident-side end surface in the peripheral portion are such that the optical path of light incident from the incident-side convex surface and the optical path of light incident from the incident-side end surface are concave. It has a shape that is separated from each other and does not intersect with each other as a boundary.
- the incident-side end surface in the peripheral portion of the objective lens element has a curved surface shape that is convex outward.
- the outer peripheral surface in the peripheral portion of the objective lens element has a curved surface shape that is convex outward.
- the objective lens element that collects light from the measurement object is reflected on the outer periphery of the central portion corresponding to a normal convex lens that collects light by refraction. Has a peripheral portion for condensing light. Therefore, it is possible to collect light having a large radiation angle that cannot be collected by a normal convex lens, and it is possible to improve the light collection efficiency by increasing the light collection efficiency. Therefore, in order to improve the S / N of the photoelectrically detected signal (image information), the diameter of the objective lens element is made smaller than when a convex lens having the same NA as the objective lens element is used as the objective lens. Can be small.
- the objective lens element condenses light from the measurement object and enters the light detection element, the diameter of the optical element after the objective lens element and the light detection element can be reduced.
- the detection optical system can be made compact to enable high-speed scanning.
- FIG. 4 is a ray diagram from an objective lens to a pinhole in FIG. 3. It is sectional drawing in the conventional collimator lens.
- FIG. 1 is an external view of the light detection apparatus according to the present embodiment.
- the present photodetecting device 1 is roughly constituted by a main body 2 that forms a casing and a lid 3 that covers the upper surface of the main body 2.
- a sample table 4 made of glass is provided on the upper surface of the main body 2, and a transfer support such as a gel support or a membrane on which a biological material labeled with a fluorescent material is distributed (both on the sample stand 4). (Not shown) is set as a sample.
- An optical system is arranged below the sample table 4, and the sample set on the sample table 4 is irradiated with excitation light from below through the sample table 4 by the light irradiation optical system.
- the fluorescence from the sample passing through the table 4 is detected by the detection optical system.
- the detection optical system is connected to an external terminal such as a personal computer (PC) 5 and controls measurement conditions from the PC 5. Further, the PC 5 creates a fluorescence image of the sample based on the detection data, and displays the created fluorescence image or the like on the built-in display screen.
- PC personal computer
- FIG. 2 shows an external view of the scanning stage 6 installed at the lower part of the sample table 4.
- the scanning stage 6 includes a first stage 7 serving as a reference and a second stage 8 placed on the first stage 7.
- a scanning module 9 is placed on the second stage 8.
- the detection optical system for detecting the fluorescence is stored in the scanning module 9.
- the first stage 7 constituting the scanning stage 6 is provided with two guide rails 10a and 10b extending in the first scanning direction and facing each other at a constant interval.
- the second stage 8 is guided by the guide rail 10a of the first stage 7 and reciprocates in the first scanning direction.
- the second stage 8 is guided by the guide rail 10b and reciprocates in the first scanning direction.
- a second guide member 12 that moves.
- the second stage 8 extends in the second scanning direction orthogonal to the first scanning direction and faces each other at a constant interval.
- Two guide rails 13a and 13b are provided.
- the scanning module 9 is guided by the guide rail 13a and reciprocates in the second scanning direction, and the second guide is guided by the guide rail 13b and reciprocates in the second scanning direction.
- Member 15
- the first guide member 11 and the second guide member 12 of the second stage 8 are guided by the guide rails 10a and 10b and moved in the first scanning direction.
- the positioning of the second stage 8 with respect to the first stage 7 is performed.
- the first guide member 14 and the second guide member 15 of the scanning module 9 are guided by the guide rails 13a and 13b and moved in the second scanning direction, so that the scanning module 9 is positioned with respect to the second stage 8. Done.
- the above operation is repeated to scan the sample 16 two-dimensionally.
- the moving means in the first scanning direction is constituted by the guide rails 10a and 10b and the first and second guide members 11 and 12, and the moving means in the second scanning direction.
- the guide rails 13a and 13b and the first and second guide members 14 and 15 are configured.
- first and second guide members 11 and 12 of the second stage 8 are provided below the scanning stage 6 below the sample stage 4 of the main body 2 constituting the casing.
- motors, drive belts, ball screws, gears, control boards, power supplies, wirings, etc. for moving the first and second guide members 14, 15 of the scanning module 9 in the second scanning direction A scanning mechanism is installed.
- FIG. 3 is a longitudinal sectional view showing a schematic configuration of the scanning module 9 placed on the second stage 8.
- weak fluorescence having a wavelength different from that of the excitation light emitted from the sample 16 which is the measurement object labeled with the fluorescent material is irradiated based on irradiation of the excitation light from the light source 18. The case where it detects is illustrated.
- an objective as the objective lens element for condensing fluorescence from the sample 16 set on the sample table 4 is located near the sample table (glass) 4 in the upper part of the scanning module 9.
- a lens 17 is arranged. Furthermore, at a position where the optical axis of the objective lens 17 and the optical axis of the light source 18 for excitation light are orthogonal, excitation light such as laser light emitted from the light source 18 and condensed by a lens group 19 composed of a plurality of lenses.
- the reflection mirror 20 that reflects the light beam so as to enter the objective lens 17 is disposed.
- the objective lens 17 is housed in a lens holder 21, and the lens holder 21 can be moved in the direction of the optical axis of the objective lens 17 by a drive unit 22 such as a stepping motor. Thus, the objective lens 17 can move in the optical axis direction together with the lens holder 21.
- a first lens 23 for converting fluorescence from the sample 16 collected by the objective lens 17 into parallel light in order from the reflection mirror 20 side An excitation light cutting wavelength filter 24, a second lens 25 for condensing the fluorescence that has passed through the wavelength filter 24, and a pinhole 26 for cutting off the stray light of the fluorescence that has passed through the second lens 25 are disposed.
- a detector 27 as the light detection element for detecting the fluorescence that has passed through the pinhole 26 is disposed below the pinhole 26.
- the excitation light emitted from the light source 18 is focused by the lens group 19, then reflected by the reflection mirror 20, passes through the objective lens 17 and the sample stage 4, and the lower surface of the sample 16. Focused on one point.
- the length of the reflection mirror 20 in the longitudinal direction (direction perpendicular to the optical axis of the lens group 19) is short, the width in the direction perpendicular to the longitudinal direction is narrow, and the excitation light from the light source 18 is the objective light. Only the vicinity of the optical axis of the lens 17 (excitation light transmitting portion) passes therethrough.
- the fluorescence is emitted isotropically from the substantially single point portion of the sample 16 irradiated with the excitation light.
- the component of the emitted fluorescent light that has passed through the sample stage 4 made of glass and entered the objective lens 17 passes through the objective lens 17, the first lens 23, the wavelength filter 24, the second lens 25, and the pinhole 26. Passed and detected by detector 27.
- the detection signal from the detector 27 is sent to the PC 5 after being subjected to processing such as AD conversion by a built-in AD converter (not shown) or the like. In this way, the fluorescence intensity distribution at each measurement point on the sample 16 is recorded in the internal memory or the like.
- the fluorescence that has passed through the objective lens 17 becomes focused light and is guided in the direction of the first lens 23. Then, the light is refracted by the first lens 23 so as to be substantially parallel to the optical axis.
- the second lens 25 as the intermediate lens element condenses the fluorescence from the first lens 23.
- the pinhole 26 is arrange
- the excitation light cutting wavelength filter 24 is disposed, for example, in a rotating folder (not shown) or the like, and can be replaced with a filter of another wavelength according to the wavelength of the excitation light.
- FIG. 4 is a longitudinal sectional view of the objective lens 17.
- the central portion including the optical axis in the objective lens 17 includes an incident-side convex surface 28a and an output-side convex surface 28b protruding along the optical axis, and functions as a normal convex lens (only by refraction).
- This is a convex lens portion 28 having light deflection.
- the fluorescence a having a small emission angle passes through the convex lens portion 28 and is condensed toward the first lens 23.
- the convex lens portion 28 may be referred to as a “center portion”.
- the peripheral portion of the exit-side convex surface 28b (convex lens portion 28) of the objective lens 17 is a truncated cone-shaped cylindrical body 29 that opens downward.
- the fluorescence b having a large radiation angle that does not enter the convex lens portion 28 enters the cylindrical body 29 from the incident side end face 29 a of the cylindrical body 29, and enters the incident side.
- the light is totally reflected by the outer peripheral surface 29b continuing to the end surface 29a, deflected to the optical axis side, and emitted toward the first lens 23 from the emission side end surface 29c continuously continuing to the outer peripheral surface 29b.
- the cylindrical body 29 may be referred to as a “peripheral portion”.
- the lens element itself can be formed more compactly than the objective lens of the light detection apparatus 1 can be realized with an NA that is equivalent to the objective lens 17 using a normal convex lens.
- FIG. 5 shows an example of a specific shape of the objective lens 17. Note that the dimensions shown in FIG. 5 are merely examples, and the present invention is not limited to the dimensions shown in FIG.
- “R” is a radius of curvature, and the unit is “mm”.
- the leading edge of the objective lens 17 on the optical axis on the optical axis is the origin, the X axis is taken in the direction perpendicular to the optical axis, and the Y axis is taken in the direction of the optical axis.
- the origin is not the intersection of the incident-side convex surface 28a of the convex lens portion 28 and the optical axis, but the plane including the intersection line of the incident-side end surface 29a of the cylindrical body 29 and the outer peripheral surface 29b and the optical axis. It is an intersection.
- the fluorescence a having a small emission angle out of the fluorescence emitted from the sample 16 passes through the central portion (convex lens portion 28) including the optical axis in the objective lens 17 and is collected toward the first lens 23.
- the central portion of the objective lens 17 is preferably a convex lens since the light emitted radially from the point light source is condensed by refraction.
- a lens having a cylindrical body including a convex lens portion at the central portion and an outer peripheral surface that reflects incident light on the peripheral portion of the convex lens portion is disclosed in re-published WO 2008/069143 and JP 2010-1114044 A.
- each of these patent documents relates to a light emitting element lens that emits light from a light emitting element such as an LED forward with good directivity, and a similar lens is used as an objective lens in a light detection device.
- 101 is a light source
- 102 is a collimator lens
- 102b is an ellipsoid that totally reflects light from the light source 101
- 102d is an ellipse that refracts the light totally reflected by the ellipsoid 102b.
- Surface is an ellipse that refracts the light totally reflected by the ellipsoid 102b.
- the central portion including the optical axis in the objective lens 17 is configured with a convex incident-side convex surface 28a as indicated by an arrow “R1”.
- the exit surface is constituted by a convex exit-side convex surface 28b as indicated by an arrow “R2”.
- the fluorescence a having a small emission angle is collected by the central portion including the optical axis in the objective lens 17, while the fluorescence b having a large emission angle is collected in the periphery of the objective lens 17.
- the optical path of the light incident on the incident surface of the central portion and the optical path of the light incident on the incident surface of the peripheral portion may be clearly separated in the objective lens 17. desirable.
- the shape of the incident surface of the objective lens 17 is configured by a convex incident-side convex surface 28a as shown by an arrow “R1” at the central portion including the optical axis.
- the peripheral portion (cylindrical body 29) of the central portion is constituted by a convex incident side end face 29a as indicated by an arrow "R3".
- the central portion and the peripheral portion on the incident surface are formed with different curved surfaces, and a concave (valley) constricted portion is formed at the boundary between the central portion and the peripheral portion. Therefore, the central portion and the peripheral portion on the incident surface are clearly separated.
- the light incident on the incident side convex surface 28a of the central portion is refracted to the optical axis side of the objective lens 17, whereas the incident side of the peripheral portion (tubular body 29).
- the light incident on the end surface 29 a is refracted toward the outer peripheral surface 29 b located on the side opposite to the optical axis of the objective lens 17.
- the light incident on the incident-side convex surface 28a and the light incident on the incident-side end surface 29a are completely different from each other in the refraction direction.
- the light incident on the incident-side end surface 29a can be prevented from reaching the surface between the exit-side convex surface 28b of the central portion and the outer peripheral surface 29b of the peripheral portion, and the exit-side convex surface 28b and the outer peripheral surface 29b It is possible to prevent the light reaching the surface between the two from becoming stray light.
- the optical path of the light incident on the incident-side convex surface 28 a of the central portion on the incident surface of the objective lens 17 and the optical path of the light incident on the incident-side end surface 29 a of the peripheral portion are in the objective lens 17.
- the shapes of the incident side convex surface 28a and the incident side end surface 29a are set so as not to cross each other.
- the exit surface at the central portion of the objective lens 17 is constituted by a convex exit-side convex surface 28b as shown by an arrow “R2” in FIG. Therefore, in the central portion of the objective lens 17, the fluorescence having a small emission angle out of the fluorescence emitted from the sample 16 by the cooperation of the incident-side convex surface 28a that is the incident surface and the output-side convex surface 28b that is the output surface. a can be effectively collected toward the detector 27.
- the incident surface in the peripheral portion of the objective lens 17 is constituted by the convex incident side end surface 29a as described above.
- the incident surface of the objective lens 17 is formed such that the convex incident side convex surface 28a of the central portion and the convex incident side end surface 29a of the peripheral portion have a concave (valley) constricted portion as a boundary. It is configured in an independent convex shape adjacent to each other. Therefore, the light condensing effect by the convex lens can be given to the incident surface also in the peripheral portion, and the irradiation area of the light incident from the incident side end surface 29a of the peripheral portion and irradiating the outer peripheral surface 29b can be reduced. . As a result, the length of the outer peripheral surface 29b of the objective lens 17 in the optical axis direction can be shortened, and the entire objective lens 17 can be reduced in size.
- the reflection surface in the peripheral portion of the objective lens 17 is constituted by an outer peripheral surface 29b that is convex toward the outside of the objective lens 17 as indicated by an arrow “R4” in FIG.
- the fact that the outer peripheral surface (reflection surface) 29b is convex outward in this way means that the outer peripheral surface 29b can be regarded as a concave mirror when viewed from the light in the objective lens 17, and the outer peripheral surface 29b is a concave mirror. In principle, the reflected light can be collected.
- the peripheral portion of the objective lens 17 collects incident light by refracting and collecting the incident light like a convex lens by the convex incident-side end surface 29a, and reflecting it like a concave mirror by the convex outer peripheral surface 29b. It has a two-stage light condensing function. Therefore, the light condensing property can be improved as compared with the case where any one of the light condensing functions is performed alone.
- the incident side end face 29a in the peripheral portion of the objective lens 17 is formed so that the light incident from the incident side end face 29a is incident on the outer peripheral surface 29b so as to satisfy the total reflection condition.
- the light incident from the incident side end face 29a in the peripheral portion of the objective lens 17 is totally reflected by the outer peripheral surface 29b and can travel in the peripheral portion toward the exit surface.
- incident light from the incident side end face 29a is totally reflected by the outer peripheral surface 29b of the cylindrical body 29 in the peripheral portion.
- the present invention is not limited to total reflection, and may be simple reflection. That is, a metal reflection film may be formed on the outer peripheral surface 29b and reflected by the metal reflection film.
- the objective lens 17 totally reflects or reflects, on the outer peripheral surface 29b of the cylindrical body 29, fluorescence having a large emission angle that does not enter the convex lens portion 28 among the fluorescence emitted from the sample 16.
- the lens element itself can be formed more compactly than the objective lens of the present photodetecting device 1 can be realized by using an ordinary convex lens with an NA equivalent to that of the objective lens 17.
- FIG. 6 shows a ray diagram of fluorescence emitted from the sample 16 and passing from the objective lens 17 to the second lens 25.
- an interference filter having a steep cutoff is used as the wavelength filter 24, it is necessary to make the incident light to the wavelength filter 24 parallel light. Therefore, the fluorescence condensed through the objective lens 17 is made into a state close to parallel light by the first lens 23 and is incident on the wavelength filter 24.
- the diameter of the fluorescent beam becomes large, leading to an increase in the size of the optical element below the first lens 23.
- the objective lens 17 having the convex lens portion 28 in the central portion and the frustoconical cylindrical body 29 in the peripheral portion as described above, the first lens 23, the wavelength filter 24, and Each optical element of the second lens 25 can be reduced in size, and the scanning module 9 can be reduced in size and weight.
- the case where the fluorescence emitted from the sample 16 is detected due to the irradiation of the excitation light from the light source 18 has been described as an example.
- the light emitted from the sample 16 is In addition to the above fluorescence, the case of reflected / scattered light is also included. That is, when the transfer support on which the biologically-derived substance labeled with the reflection-absorbing substance is distributed is the sample 16, the sample 16 labeled with the reflection-absorbing substance is extracted based on the irradiation of the excitation light from the light source 18. Emits intense light (reflected / scattered light) having the same wavelength as the excitation light.
- the light is emitted from the light source 18 and isotropically emitted from approximately one point in the sample 16 due to the irradiation of the excitation light that has passed through the excitation light transmitting portion of the objective lens 17.
- the collected light is collected by the objective lens 17 and detected by the detector 27.
- the objective lens 17 is configured to have a convex lens portion 28 in the central portion and a truncated cone-shaped cylindrical body 29 in the peripheral portion of the convex lens portion 28. Therefore, among the light emitted from the sample 16, the light b having a large radiation angle that does not enter the convex lens portion 28 can be condensed by being totally reflected or reflected by the outer peripheral surface 29 b of the cylindrical body 29. In addition, light having a large radiation angle that cannot be collected by a normal convex lens can be efficiently collected.
- the light condensing rate can be increased, and a reduction in S / N due to the presence of light blocked by the reflection mirror 20 disposed on the optical axis of the objective lens 17 and not detected by the detector 27 is prevented.
- a highly sensitive photodetection device can be realized.
- the objective lens 17 can be made smaller than the case where the light b having a large radiation angle is collected by a normal convex lens having a high NA. Further, since the objective lens 17 condenses the light from the sample 16 and enters the first lens 23, the first lens 23, the wavelength filter 24, and the second lens installed on the optical path that guides the light to the detector 27. Optical elements such as the lens 25 can also be reduced in size.
- the scanning module 9 having the light irradiation optical system and the detection optical system is mounted.
- Weight can be reduced. Accordingly, the configuration of the scanning mechanism can be simplified, the weight can be reduced, and the scanning module 9 can be scanned at high speed. Therefore, it is possible to detect a two-dimensional light distribution at a plurality of different positions in the sample 16 at high speed.
- the objective lens 17 has a concentric planar shape having objectivity with respect to the central axis serving as the optical axis.
- the central axis overlaps at least a part of the excitation light transmitting part through which the excitation light reflected by the reflection mirror 20 passes. Therefore, compared to a method of irradiating excitation light through a dichroic mirror, strong excitation energy can be applied to the sample 16 and S / N of a signal (image information) photoelectrically detected by the detector 27 can be improved.
- the excitation light transmitting portion can be provided around the optical axis, and the excitation light can be incident substantially perpendicularly to the central portion of the objective lens 17 so that the excitation light can be easily incident. It can be carried out.
- the excitation light transmitting portion in the objective lens 17 may have any form as long as it has a function of transmitting the excitation light from the light source 18, for example, a peripheral portion of the excitation light transmitting portion. It does not matter if it does not have any different characteristics. In other words, there is no feature such as the lens curvature of the excitation light transmitting portion being different from the lens curvature of the peripheral portion, and the light source can be used in actual use even without a clear structural difference or a clear boundary from the peripheral portion. It is only necessary that the excitation light from 18 can be transmitted.
- the second lens 25 as the intermediate lens element is disposed between the objective lens 17 and the detector 27. Then, the light collected by the objective lens 17 is further condensed by the second lens 25 so that the light collection position is on the detection surface of the detector 27.
- the light detection efficiency of the light detection device 1 it is necessary to collect light so that the diameter of the light collection spot is very small with respect to the detection surface of the detector 27.
- a wavelength filter 24 that blocks light having a wavelength component equivalent to the wavelength of the excitation light from the light source 18 is disposed between the objective lens 17 and the second lens 25. Then, stray light having a wavelength equivalent to the wavelength of the excitation light from the light source 18 about to enter the detector 27 is cut. Therefore, the fluorescence can be detected by the detector 27 more efficiently.
- the photodetector of the present invention is An objective lens element 17 for condensing the light from the measurement object 16, and A light detecting element 27 for detecting the light collected by the objective lens element 17,
- the objective lens element 17 includes a central portion 28 that collects light by refraction and a peripheral portion 29 that is located around the central portion 28 and collects light by reflection.
- the objective lens element 17 that condenses the light from the measurement object 16 condenses the light by reflection on the outer periphery of the central portion 28 corresponding to a normal convex lens that condenses the light by refraction.
- a peripheral portion 29 is provided. Therefore, light having a large radiation angle that cannot be collected by a normal convex lens can be collected, and the light detection element 27 can improve sensitivity by increasing the light collection efficiency. Therefore, as in the conventional image reading apparatus, in order to improve the S / N of the photoelectrically detected signal (image information), a convex lens having an NA equivalent to that of the objective lens element 17 is used as the objective lens. As compared with the above, the diameter of the objective lens element 17 can be reduced.
- the objective lens element 17 condenses the light from the measurement object 16 and enters the light detection element 27. Therefore, the diameters of the optical elements after the objective lens element 17 and the light detection element 27 are reduced.
- the detection optical system can be made compact and high-speed scanning can be achieved.
- the light from the measurement object 16 is light emitted radially from approximately one point on the measurement object 16,
- the objective lens element 17 condenses light emitted radially from substantially one point on the measurement object 16 on the light detection element 27.
- the light detection element 27 can detect the light with high sensitivity.
- the objective lens element 17 includes a light transmission part that transmits light from the light source 18. The light from the light source 18 passes through the light transmission part of the objective lens element 17 and irradiates the measurement object 16.
- the light from the light source 18 is transmitted through the light transmitting portion of the objective lens element 17 to irradiate the measurement object 16. Therefore, compared with the method of irradiating excitation light through a dichroic mirror, strong excitation energy can be applied to the measurement object 16 and the S / of the signal (image information) detected by the light detection element 27 can be applied. N can be improved.
- the objective lens element 17 has a concentric shape with respect to the optical axis, The optical axis passes through at least a part of the light transmission part.
- the light transmission part can be provided around the optical axis in the objective lens element 17 having a concentric shape with respect to the optical axis. Therefore, the light from the light source 18 can be incident substantially perpendicularly on the central portion 28 of the objective lens element 17, and the light can be easily incident.
- a wavelength filter 24 disposed between the objective lens element 17 and the light detection element 27 and for reducing light having substantially the same wavelength as the light from the light source 18;
- the wavelength filter 24 irradiates the light detection element 27 by dimming a component having substantially the same wavelength as the light from the light source 18 out of the light collected by the objective lens element 17.
- the wavelength filter 24 since the wavelength filter 24 attenuates a component having substantially the same wavelength as the light from the light source 18, the wavelength filter 24 is substantially the same as the light from the light source 18 that is about to enter the light detection element 27. Stray light having the same wavelength can be cut by the wavelength filter 24. Therefore, the light detection element 27 can be detected more efficiently.
- An intermediate lens element 25 disposed between the objective lens element 17 and the light detection element 27;
- the intermediate lens element 25 condenses the light collected by the objective lens element 17 on the light detection element 27.
- the light condensed by the objective lens element 17 is condensed on the light detection element 27 by the intermediate lens element 25. Therefore, the light emitted radially from the sample 16 is first collected gently by the objective lens 17 in a state close to parallel light, and then point-condensed on the light detection element 27 by the intermediate lens element 25. And the light detection efficiency can be improved.
- the central portion 28 of the objective lens element 17 is The light from the measurement object 16 is incident, and the incident side convex surface 28a having a convex curved surface shape toward the outer side in the optical axis direction, While emitting light from the incident-side convex surface 28a, and including an output-side convex surface 28b having a curved surface shape convex toward the outside in the optical axis direction,
- the peripheral portion 29 of the objective lens element 17 is An incident side end face 29a on which light from the measurement object 16 is incident; An outer peripheral surface 29b that internally reflects light from the incident side end surface 29a; An emission side end face 29c for emitting the light internally reflected by the outer peripheral face 29b,
- a concave boundary portion is formed at the boundary between the incident-side convex surface 28 a in the central portion 28 and the incident-side end surface 29 a in the peripheral portion 29.
- the central portion 28 of the objective lens element 17 has an incident surface formed of a convex incident side convex surface 28a, and an output surface formed of a convex output side convex surface 28b.
- the efficiency of light collection can be easily improved. Therefore, it is not necessary to increase the curvature of the exit-side convex surface 28b on the exit side, and the focal length of the exit-side convex surface 28b on the exit side is not increased and the scanning module 9 is not enlarged.
- a concave boundary portion is formed at the boundary between the incident side convex surface 28a in the central portion 28 and the incident side end surface 29a in the peripheral portion 29 on the incident surface. Therefore, the refractive directions of the light incident on the incident-side convex surface 28a and the light incident on the incident-side end surface 29a are completely different, and the central portion 28 and the peripheral portion 29 on the incident surface are clearly separated. Therefore, the light incident on the incident-side convex surface 28a and the light incident on the incident-side end surface 29a can be prevented from reaching the surface between the outgoing-side convex surface 28b and the outer peripheral surface 29b. It is possible to prevent the light reaching the surface between the surface 29b from becoming stray light.
- the incident side convex surface 28a in the central portion 28 of the objective lens element 17 and the incident side end surface 29a in the peripheral portion 29 are light paths of light incident from the incident side convex surface 28a and light incident from the incident side end surface 29a. Are separated from each other with the concave boundary portion as a boundary so that they do not cross each other.
- the optical path of the light incident from the incident-side convex surface 28a and the optical path of the light incident from the incident-side end surface 29a do not intersect.
- all of the light incident on the incident side convex surface 28a of the central portion 28 reaches the convex emission side convex surface 28b which is the output surface, whereas the light is incident on the incident side end surface 29a of the peripheral portion 29.
- All of the incident light reaches the outer peripheral surface 29b which is a reflection surface.
- the incident side end face 29a in the peripheral portion 29 of the objective lens element 17 has a curved surface shape that is convex outward.
- the incident side end face 29a in the peripheral portion 29 has a curved surface shape that is convex outward. Therefore, in the peripheral portion 29 as well, the incident surface can have a condensing effect by the convex lens, and the irradiation area of the light incident from the incident side end surface 29a and irradiating the outer peripheral surface 29b can be reduced. As a result, the length of the outer peripheral surface 29b in the optical axis direction can be shortened, and the entire lens element 17 can be reduced in size.
- the outer peripheral surface 29b in the peripheral portion 29 of the objective lens element 17 has a curved surface shape that is convex outward.
- the outer peripheral surface (reflective surface) 29b of the objective lens element 17 has a curved surface convex toward the outside, and a concave mirror can be seen from the light in the objective lens element 17. Can be considered. Therefore, the outer peripheral surface 29b can collect the reflected light by the principle of a concave mirror.
- the peripheral portion 29 of the objective lens element 17 refracts incident light like a convex lens by the convex incident side end surface 29a and condenses it, and further reflects it like a concave mirror by the convex outer peripheral surface 29b.
- Photodetection device 4 ... Sample stand 5 ... PC, 6 ... Scanning stage, 9 ... Scanning module, 16 ... sample, 17 ... Objective lens, 18 ... light source, 20 ... reflecting mirror, 23. First lens, 24 ... wavelength filter, 25 ... second lens, 26 ... pinhole, 27.
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Abstract
光検出装置は、測定対象物(16)からの光を集光する対物レンズ素子(17)と、上記対物レンズ素子(17)によって集光された光を検出する光検出素子とを備え、上記対物レンズ素子(17)は、屈折によって光を集光する中央部分(28)と、この中央部分(28)の周辺に位置して反射によって光を集光する周辺部分(29)とを含んでいる。こうして、通常の凸レンズでは集光できないような大きな放射角度の光をも集めることができ、集光効率を高めて上記光検出素子による感度アップを図ることができる。
Description
この発明は、二次元的に分布する蛍光標識等を読み取る光検出装置に関する。
従来より、生化学分野や分子生物学分野において、蛍光色素を標識物質として利用した蛍光検出システムが広く用いられている。この蛍光検出システムを用いることによって、遺伝子配列,遺伝子の変異・多型解析,タンパク質の分離および同定等の評価を行うことができ、薬等の開発に利用されている。
上述のような蛍光標識を利用した評価方法としては、電気泳動によってタンパク質等の生物学的化合物をゲル内に分布させ、その生物学的化合物の分布を蛍光検出により取得するという方法がよく用いられている。上記電気泳動では、緩衝液等の溶液中に電極を設置しておき、直流電流を流すことによって上記溶液中に電場勾配を生じさせる。このとき、上記溶液中に電荷を有するタンパク質やDNA(Deoxyribonucleic acid:デオキシリボ核酸)やRNA(ribo nucleic acid:リボ核酸)がある場合に、プラス電荷を有する分子は陰極に、マイナス電荷を有する分子は陽極に引き寄せられ、生体分子の分離を行うことができる。
上記電気泳動を用いた評価方法の一つである二次元電気泳動は、2種類の電気泳動法を組み合わせることによって、ゲル内に生体分子を2次元的に分布させる評価方法であり、プロテオーム解析を行う上で最も有効な方法であると考えられている。
上記電気泳動の組み合わせとしては、例えば、一次元目としての「個々のタンパク質の等電点の違いを利用する等電点電気泳動」と、二次元目としての「タンパク質の分子量で分離を行うSDS‐PAGE(ドデシル硫酸ナトリウム‐ポリアクリルアミドゲル電気泳動)」との2種類が主に用いられる。こうして分離された上記生体分子としてのタンパク質に対して、蛍光色素は電気泳動前あるいは電気泳動後に付与される。
さらに、上述のようにして作製された上記生体分子(タンパク質)が二次元的に分布されたゲル支持体に励起光を照射し、発生した蛍光強度を取得して、それに基づいて蛍光分布(タンパク質分布)画像を表示させる画像読取装置が、生化学や分子生物学の分野で広く普及している。
また、上記生体分子の二次元分布を保持する方法としては、上記ゲル内に保持するだけではなく、上記ゲル内にタンパク質を分離させた後に、電気泳動や毛細管現象を利用して上記ゲルからメンブレンに転写させる方法も行われる。その場合には、上記ゲル支持体を用いた画像読取の場合と同様に、上記メンブレンである転写支持体上の蛍光分布を画像読取装置によって画像化することができる。
上述したような生体分子が二次元的に分布されたゲル支持体や転写支持体から生体分子分布画像を読み取る画像読取装置として、特開平10‐3134号公報(特許文献1)に開示された画像読み取り装置がある。
上記従来の画像読み取り装置では、中央部に孔が形成されたミラーを主走査方向に移動される光学ヘッドに搭載し、蛍光物質によって標識された変性DNAの電気泳動が記録された転写支持体に対して、光源からの上記蛍光物質の波長に応じた波長のレーザ光(励起光)を上記ミラーの孔を通過させて照射する。そして、上記転写支持体中の蛍光色素が励起されて発せられた蛍光が上記ミラーの上記孔の周囲で反射され、マルチプライヤによって光電変換されて検出される。こうして、ラインバッファに、1ライン分の画像データが記憶される。以下、上記主走査方向に直交する副走査方向に上記光学ヘッドを移動させながら上記動作を繰り返すことにより、画像処理装置によって二次元の可視画像(蛍光画像)を得るようにしている。
上述のように、上記従来の画像読み取り装置においては、ダイクロイックミラーを用いることなく励起光を転写支持体に照射するため、ダイクロイックミラーを通して励起光を照射する方式に比して、強い励起エネルギーを上記転写支持体に付与することができ、光電検出される信号(画像情報)のS/Nを向上できる。
しかしながら、微弱な蛍光を検出するに当たっては、さらなるS/Nの向上が求められる。
上記光電検出される信号(画像情報)のS/Nを向上するためには、レーザ光等の励起光の照射によって蛍光色素が励起されて発せられて等方的に広がって出射されるた蛍光をなるべく捕集する必要がある。
ここで、広角度で放出される蛍光をなるべく高効率に捕集する方法としては、高いNA(開口数:numerical aperture)の対物レンズを使用する方法があるが、レンズ素子が大型化してしまう。
その場合には、蛍光を捕集する対物レンズの大型化に伴って、蛍光を上記マルチプライヤまで導く間に設置される反射ミラー,レーザ光カットフィルターおよび集光レンズ等の光学素子も大型化する。そのため、光学ヘッドを含む光学系を走査させる画像読み取り装置では、光学素子の大型化に伴って全体のサイズが大きくなり、高速にスキャンすることができなくなるという問題がある。
そこで、この発明の課題は、対物レンズの大型化を抑制しつつ光の集光効率を高めることができる光検出装置を提供することにある。
上記課題を解決するため、この発明の光検出装置は、
測定対象物からの光を集光する対物レンズ素子と、
上記対物レンズ素子によって集光された光を検出する光検出素子と
を備え、
上記対物レンズ素子は、屈折によって光を集光する中央部分と、この中央部分の周辺に位置して反射によって光を集光する周辺部分とを含んでいる
ことを特徴としている。
測定対象物からの光を集光する対物レンズ素子と、
上記対物レンズ素子によって集光された光を検出する光検出素子と
を備え、
上記対物レンズ素子は、屈折によって光を集光する中央部分と、この中央部分の周辺に位置して反射によって光を集光する周辺部分とを含んでいる
ことを特徴としている。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記測定対象物からの光は、上記測定対象物上の略一点から放射状に出射される光であり、
上記対物レンズ素子は、上記測定対象物上の略一点から放射状に出射される光を上記光検出素子上に集光するようになっている。
上記測定対象物からの光は、上記測定対象物上の略一点から放射状に出射される光であり、
上記対物レンズ素子は、上記測定対象物上の略一点から放射状に出射される光を上記光検出素子上に集光するようになっている。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記測定対象物に光を照射する光源を備え、
上記対物レンズ素子は、上記光源からの光を透過する光透過部を含んでおり、
上記光源からの光は、上記対物レンズ素子の上記光透過部を透過して上記測定対象物を照射するようになっている。
上記測定対象物に光を照射する光源を備え、
上記対物レンズ素子は、上記光源からの光を透過する光透過部を含んでおり、
上記光源からの光は、上記対物レンズ素子の上記光透過部を透過して上記測定対象物を照射するようになっている。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子は、光軸に対して同心円状の形状を有しており、
上記光軸は、上記光透過部の少なくとも一部を通過している。
上記対物レンズ素子は、光軸に対して同心円状の形状を有しており、
上記光軸は、上記光透過部の少なくとも一部を通過している。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子と上記光検出素子との間に配置されると共に、上記光源からの光と略同一波長の光を減光する波長フィルタを備え、
上記波長フィルタは、上記対物レンズ素子によって集光された光のうち、上記光源からの光と略同一波長の成分を減光して上記光検出素子上を照射するようになっている。
上記対物レンズ素子と上記光検出素子との間に配置されると共に、上記光源からの光と略同一波長の光を減光する波長フィルタを備え、
上記波長フィルタは、上記対物レンズ素子によって集光された光のうち、上記光源からの光と略同一波長の成分を減光して上記光検出素子上を照射するようになっている。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子と上記光検出素子との間に配置された中間レンズ素子を備え、
上記中間レンズ素子は、上記対物レンズ素子によって集光された光を、さらに上記光検出素子上に集光するようになっている。
上記対物レンズ素子と上記光検出素子との間に配置された中間レンズ素子を備え、
上記中間レンズ素子は、上記対物レンズ素子によって集光された光を、さらに上記光検出素子上に集光するようになっている。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子の上記中央部分は、
上記測定対象物からの光が入射すると共に、光軸方向外側に向かって凸状の曲面形状を有する入射側凸面と、
上記入射側凸面からの光を出射させると共に、光軸方向外側に向かって凸状の曲面形状を有する出射側凸面と
を含む一方、
上記対物レンズ素子の上記周辺部分は、
上記測定対象物からの光が入射する入射側端面と、
上記入射側端面からの光を内部で反射させる外周面と、
上記外周面で内部反射された光を出射させる出射側端面と
を含んでおり、
上記中央部分における上記入射側凸面と上記周辺部分における上記入射側端面との境界には、凹状の境界部が形成されている。
上記対物レンズ素子の上記中央部分は、
上記測定対象物からの光が入射すると共に、光軸方向外側に向かって凸状の曲面形状を有する入射側凸面と、
上記入射側凸面からの光を出射させると共に、光軸方向外側に向かって凸状の曲面形状を有する出射側凸面と
を含む一方、
上記対物レンズ素子の上記周辺部分は、
上記測定対象物からの光が入射する入射側端面と、
上記入射側端面からの光を内部で反射させる外周面と、
上記外周面で内部反射された光を出射させる出射側端面と
を含んでおり、
上記中央部分における上記入射側凸面と上記周辺部分における上記入射側端面との境界には、凹状の境界部が形成されている。
尚、ここで言う「内部反射」とは、全反射をも含む概念である。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子の上記中央部分における上記入射側凸面および上記周辺部分における上記入射側端面は、上記入射側凸面から入射した光の光路と上記入射側端面から入射した光の光路とが、上記凹状の境界部を境にして互いに分離されて交差することがないような形状を有している。
上記対物レンズ素子の上記中央部分における上記入射側凸面および上記周辺部分における上記入射側端面は、上記入射側凸面から入射した光の光路と上記入射側端面から入射した光の光路とが、上記凹状の境界部を境にして互いに分離されて交差することがないような形状を有している。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子の上記周辺部分における上記入射側端面は、外側に向かって凸状の曲面形状を有している。
上記対物レンズ素子の上記周辺部分における上記入射側端面は、外側に向かって凸状の曲面形状を有している。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子の上記周辺部分における上記外周面は、外部に向かって凸状の曲面形状を有している。
上記対物レンズ素子の上記周辺部分における上記外周面は、外部に向かって凸状の曲面形状を有している。
以上より明らかなように、この発明の光検出装置では、測定対象物からの光を集光する対物レンズ素子は、屈折によって光を集光する通常の凸レンズに相当する中央部分の外周に、反射によって光を集光する周辺部分を有している。したがって、通常の凸レンズでは集光できないような大きな放射角度の光をも集めることができ、集光効率を高めて光検出素子による感度アップを図ることができる。そのため、光電検出される信号(画像情報)のS/Nを向上するために、対物レンズとして上記対物レンズ素子と同等のNAを有する凸レンズを用いる場合に比して、上記対物レンズ素子の直径を小さくすることができる。
また、上記対物レンズ素子は、上記測定対象物からの光を集光して上記光検出素子に入射するので、上記対物レンズ素子以降の光学素子および上記光検出素子の直径を小さくすることができ、検出光学系をコンパクトにして高速スキャンを可能にできる。
以下、この発明を図示の実施の形態により詳細に説明する。
図1は、本実施の形態の光検出装置における外観図である。本光検出装置1は、筺体を成す本体2と、本体2の上面を覆う蓋体3とで、大まかに構成されている。本体2の上面には、ガラスでなるサンプル台4が設けられており、サンプル台4上には例えば蛍光物質によって標識された生体由来物質が分布するゲル支持体やメンブレン等の転写支持体(共に図示せず)がサンプルとしてセットされる。
そして、上記サンプル台4の下側には光学系が配置されており、サンプル台4上にセットされたサンプルに対して、光照射光学系によってサンプル台4を通して下方から励起光を照射し、サンプル台4を透過してくるサンプルからの蛍光を検出光学系によって検出する。上記検出光学系はPC(Personal computer:パーソナルコンピュータ)5等の外部端末と接続されており、PC5から測定条件の制御等を行う。さらに、PC5によって、検出データに基づいてサンプルの蛍光画像を作成し、内蔵する表示画面に上記作成した蛍光画像等を表示する。
図2は、上記サンプル台4の下部に設置された走査ステージ6の外観図を示す。この走査ステージ6は、基準となる第1ステージ7と第1ステージ7の上に載置された第2ステージ8とで構成されている。そして、第2ステージ8の上に走査モジュール9が載置されている。上記蛍光を検出する上記検出光学系は走査モジュール9の中に格納されている。
上記走査ステージ6を構成する第1ステージ7には、第1走査方向に延在すると共に、一定の間隔で互いに対向する2本のガイドレール10a,10bが配設されている。また、第2ステージ8は、第1ステージ7のガイドレール10aによって案内されて上記第1走査方向に往復動する第1ガイド部材11と、ガイドレール10bによって案内されて上記第1走査方向に往復動する第2ガイド部材12とを有している。
上記第2ステージ8を構成する第1ガイド部材11と第2ガイド部材12との間には、上記第1走査方向に直交する第2走査方向に延在すると共に、一定の間隔で互いに対向する2本のガイドレール13a,13bが配設されている。また、上記走査モジュール9は、ガイドレール13aによって案内されて上記第2走査方向に往復動する第1ガイド部材14と、ガイドレール13bによって案内されて上記第2走査方向に往復動する第2ガイド部材15とを有している。
上記構成を有する走査ステージ6による走査方法は、先ず、上記第2ステージ8の第1ガイド部材11と第2ガイド部材12とがガイドレール10a,10bによって案内されて上記第1走査方向に移動して、第2ステージ8の第1ステージ7に対する位置決めが行われる。そうした後に、走査モジュール9の第1ガイド部材14と第2ガイド部材15とがガイドレール13a,13bによって案内されて上記第2走査方向に移動して、走査モジュール9の第2ステージ8に対する位置決めが行われる。以後、上記動作を繰り返すことによって、サンプル16上を二次元に走査するのである。
すなわち、本実施の形態においては、上記第1走査方向への移動手段を、ガイドレール10a,10bと第1,第2ガイド部材11,12とで構成し、上記第2走査方向への移動手段を、ガイドレール13a,13bと第1,第2ガイド部材14,15とで構成しているのである。
また、具体的な説明は省略するが、上記筺体を成す本体2のサンプル台4下部における走査ステージ6よりも更に下側には、第2ステージ8の第1,第2ガイド部材11,12を上記第1走査方向に、走査モジュール9の第1,第2ガイド部材14,15を上記第2走査方向に移動させるためのモータ,駆動ベルト,ボールねじ,歯車,制御基板,電源および配線等の走査機構が設置されている。
図3は、上記第2ステージ8の上に載置される走査モジュール9の概略構成を示す縦断面図である。尚、以下の説明においては、光源18からの励起光の照射に基づいて、上記蛍光物質で標識された上記測定対象物であるサンプル16から発せられる上記励起光とは異なる波長の微弱な蛍光を検出する場合を例示する。
図3において、走査モジュール9内の上部には、サンプル台(ガラス)4の近傍に位置して、サンプル台4上にセットされたサンプル16からの蛍光を集光する上記対物レンズ素子としての対物レンズ17を配置している。さらに、対物レンズ17の光軸と励起光の光源18の光軸とが直交する位置には、光源18から出射されて複数のレンズでなるレンズ群19で集光されたレーザ光等の励起光を対物レンズ17に入射するように反射させる反射ミラー20を配置している。
上記対物レンズ17はレンズホルダ21内に収納されており、レンズホルダ21はステッピングモータ等の駆動部22によって、対物レンズ17の光軸方向に移動可能になっている。こうして、対物レンズ17は、レンズホルダ21と共に上記光軸方向に移動可能になっている。
また、上記対物レンズ17の光軸上における反射ミラー20の下方には、反射ミラー20側から順に、対物レンズ17によって集光されたサンプル16からの蛍光を平行光に変換する第1レンズ23、励起光カット用の波長フィルタ24、波長フィルタ24を通過した蛍光を集光する第2レンズ25、および、第2レンズ25を通過した蛍光の迷光をカットするピンホール26が配置されている。さらに、対物レンズ17の光軸上におけるピンホール26の下方には、ピンホール26を通過した蛍光を検出する上記光検出素子としての検出器27が配置されている。
上記構成を有する走査モジュール9において、光源18から出射された励起光は、レンズ群19で集束され、次いで反射ミラー20によって反射されて、対物レンズ17およびサンプル台4を通過し、サンプル16における下面上の一点に集光される。その場合、反射ミラー20の長手方向(レンズ群19の光軸に直交する方向)の長さは短く、上記長手方向に直交する方向の幅は狭くなっており、光源18からの励起光は対物レンズ17の光軸付近(励起光透過部)のみを通過するようになっている。
上記蛍光は、サンプル16における上記励起光が照射された略一点の部分から周囲に等方的に出射される。そして、出射された蛍光のうちのガラスで成るサンプル台4を透過して対物レンズ17に入射した成分が、対物レンズ17,第1レンズ23,波長フィルタ24,第2レンズ25およびピンホール26を通過して、検出器27によって検出される。そして、検出器27からの検出信号は、内蔵されるAD変換器(図示せず)等によってAD変換等の処理が施された後に、PC5へ送出される。こうして、サンプル16上の各測定点での蛍光強度の分布が内部メモリ等に記録される。
ここで、上述したように、上記対物レンズ17を通過した蛍光は、集束光となって第1レンズ23の方向に導かれる。そして、第1レンズ23によって実質的に光軸と平行な光になるように屈折される。また、上記中間レンズ素子としての第2レンズ25は第1レンズ23からの蛍光を集光する。また、ピンホール26は空間的に迷光をカットするために配置される。尚、励起光カット用の波長フィルタ24は、例えば回転フォルダ(図示せず)等に配置されて、励起光の波長に応じて他の波長のフィルタと交換可能になっている。
以下、本願の特徴である上記対物レンズ17に付いて、詳細に説明する。
図4は、上記対物レンズ17の縦断面図である。図4から分かるように、対物レンズ17における光軸を含む中央部分は、上記光軸に沿って突出する入射側凸面28aと出射側凸面28bとを含んで、通常の凸レンズの機能(屈折のみで光を偏向)を有する凸レンズ部28となっている。そして、サンプル16から出射された蛍光のうち、放射角度の小さい蛍光aは、この凸レンズ部28の部分を通過して第1レンズ23に向かって集光される。以下、凸レンズ部28を指して「中央部分」と言う場合もある。
上記対物レンズ17における出射側凸面28b(凸レンズ部28)の周辺部分は、下方に向かって開いた円錐台形の筒状体29となっている。そして、サンプル16から出射された蛍光のうち、凸レンズ部28に入りきらないような放射角度の大きい蛍光bは、筒状体29の入射側端面29aから筒状体29内に入射し、入射側端面29aに連続する外周面29bで全反射されて光軸側に偏向され、外周面29bに間接に連続する出射側端面29cから第1レンズ23に向かって出射される。以下、筒状体29を指して「周辺部分」と言う場合もある。
以上のごとく、上記サンプル16から出射された蛍光のうち、凸レンズ部28に入りきらないような放射角度の大きい蛍光を、筒状体29の外周面29bで全反射させることによって、通常の凸レンズでは集光できないような大きな放射角度の光をも集めることができる。そのため、検出器27の感度アップを図ることができるのである。
また、本光検出装置1の対物レンズを上記対物レンズ17と同等のNAを通常の凸レンズで実現するよりも、レンズ素子自体をコンパクトに形成することができるのである。
図5に、上記対物レンズ17の具体的形状の一例を示す。尚、図5に記載の寸法は一例であり、この発明は、図5の寸法に限定されるものではない。ここで、図5中、「R」は曲率半径であり、単位は「mm」である。尚、図5においては、対物レンズ17における光軸上の入射側の最先端を原点とし、上記光軸に垂直な方向にX軸を取り、上記光軸の方向にY軸を取っている。したがって、上記原点は、凸レンズ部28の入射側凸面28aと上記光軸との交点ではなく、筒状体29の入射側端面29aと外周面29bとの交線を含む平面と上記光軸との交点である。
上述したように、上記サンプル16から出射された蛍光のうち放射角度の小さい蛍光aは、対物レンズ17における光軸を含む中央部分(凸レンズ部28)を通過して第1レンズ23に向かって集光される。このように、対物レンズ17の中央部分は、点光源から放射状に放出された光を屈折によって集光するため、凸レンズの形状が望ましい。
ここで、中央部分に凸レンズ部を有すると共に、凸レンズ部の周辺部分に入射光を反射させる外周面を含む筒状体を有するレンズは、再公表WO2008/069143や特開2010‐114044号公報に開示されている。しかしながら、これら特許文献は、何れも、LED等の発光素子からの光を前方に指向性よく出射させる発光素子用レンズに関するものであり、これに類似するレンズを対物レンズとして光検出装置に用いる点や、上記レンズを対物レンズとして使用することによって光検出装置の光学素子を小型化する点については一切開示も示唆もされてはいない。
また、上記再公表WO2008/069143に開示されているコリメータレンズの場合には、図7に示すように、上記凸レンズの形状とは言っても、光軸との成す角が小さい光線を屈折する部分の出射面は凸形状の楕円面102cであるものの、入射側は凹形状の球面102aである。そのため、光軸を含む中央部分は、出射側だけで集光効果を得る必要があり、凸レンズとしての集光能率が低下する。したがって、出射側の凸形の楕円面102cの曲率を大きくする必要が生ずる等の設計上の制約が生ずる。あるいは、出射側の凸形の楕円面102cの焦点距離が大きくなるため、このコリメータレンズレンズを搭載した場合には、走査モジュール9が大型化するなどの問題が発生する。
尚、図7において、101は光源であり、102はコリメータレンズであり、102bは光源101からの光を全反射させる楕円面であり、102dは楕円面102bで全反射された光を屈折する楕円面である。
本実施の形態においては、図5に示すように、上記対物レンズ17における光軸を含む中央部分は、入射面を矢印「R1」で示すように凸形の入射側凸面28aで構成する。一方、出射面を矢印「R2」で示すように凸形の出射側凸面28bで構成している。このように、レンズ素子17の上記中央部分は、入射面と出射面との両方が凸形面であるため、集光の能率を容易に向上させることができる。したがって、出射側の出射側凸面28bの曲率を特に大きくする必要はなく、出射側の出射側凸面28bの焦点距離が大きくなって走査モジュール9が大型化することもない。
また、上記サンプル16から出射された蛍光のうちで放射角度の小さい蛍光aを、対物レンズ17における光軸を含む中央部分によって集光する一方、放射角度の大きい蛍光bを、対物レンズ17における周辺部分によって集光する場合に、上記中央部分の入射面に入射された光の光路と上記周辺部分の入射面に入射された光の光路とが、対物レンズ17内において明確に分離されることが望ましい。
しかしながら、上記再公表WO2008/069143に開示されているコリメータレンズの場合には、球面102aに入射されて凸形の楕円面102cに至る中央部分の光と、球面102aに入射されて凸形の楕円面102bに至る周辺部分の光とが、明確に分離されることがない。そのため、球面102aに入射されて凹形の楕円面102dに至って全反射され、迷光となる光が存在する。
本実施の形態においては、図5に示すように、上記対物レンズ17における入射面の形状を、光軸を含む中央部分は矢印「R1」で示すように凸形の入射側凸面28aで構成する一方、上記中央部分の周辺部分(筒状体29)は矢印「R3」で示すように凸形の入射側端面29aで構成している。このように、入射面における上記中央部分と上記周辺部分とが異なる曲面で形成されて、上記中央部分と上記周辺部分との境界には、凹状(谷状)のくびれ部分が形成される。したがって、入射面における上記中央部分と上記周辺部分とが明確に分離されている。
そのため、上記中央部分(凸レンズ部28)の入射側凸面28aに入射される光は、対物レンズ17の光軸側に屈折されるのに対して、上記周辺部分(筒状体29)の入射側端面29aに入射される光は、対物レンズ17の光軸とは反対側に位置する外周面29b側に屈折される。このように、入射側凸面28aに入射される光と入射側端面29aに入射される光との屈折方向か全く異なるために、上記中央部分の入射側凸面28aに入射された光と上記周辺部分の入射側端面29aに入射された光とが、上記中央部分の出射側凸面28bと上記周辺部分の外周面29bとの間の面に至ることを防止でき、出射側凸面28bと外周面29bとの間の面に至った光が迷光となることを防止できるのである。
また、上記対物レンズ17の入射面における上記中央部分の入射側凸面28aに入射された光の光路と、上記周辺部分の入射側端面29aに入射された光の光路とが、対物レンズ17中で互いに交差することがないように、入射側凸面28aおよび入射側端面29aの形状が設定されている。
したがって、上記中央部分の入射側凸面28aに入射された光の総てが、出射面である凸形の出射側凸面28bに至るのに対し、上記周辺部分の入射側端面29aに入射される光の総てが、反射面である外周面29bに至ることになる。その結果、対物レンズ17の入射面に入射されて出射側凸面28bおよび外周面29b以外の面に至る光によって、迷光が発生することなはないのである。
また、上記対物レンズ17の上記中央部分における出射面は、図5において、矢印「R2」で示すように凸形の出射側凸面28bで構成されている。したがって、対物レンズ17の上記中央部分においては、入射面である入射側凸面28aと出射面である出射側凸面28bとの協働によって、サンプル16から出射された蛍光のうちの放射角度の小さい蛍光aを、効果的に検出器27に向かって集光することができる。
また、上記対物レンズ17の上記周辺部分における入射面は、上述したように凸形の入射側端面29aで構成されている。このように、対物レンズ17の入射面は、上記中央部分の凸形の入射側凸面28aと上記周辺部分の凸形の入射側端面29aとが、凹状(谷状)のくびれ部分を境界として、互いに隣接して独立した凸形の形状に構成されている。したがって、上記周辺部分においても入射面に凸レンズによる集光効果を持たせることができ、上記周辺部分の入射側端面29aから入射されて外周面29bを照射する光の照射面積を小さくすることができる。その結果、対物レンズ17における外周面29bの光軸方向の長さを短くすることができ、対物レンズ17全体の小型化を図ることが可能になる。
また、上記対物レンズ17の周辺部分における反射面は、図5において矢印「R4」で示すように対物レンズ17の外側に向かって凸形の外周面29bで構成している。このように外周面(反射面)29bが外部に向かって凸状であると言うことは、対物レンズ17内の光から見れば外周面29bを凹面鏡と見なすことができ、外周面29bは凹面鏡の原理で反射光を集光させることができる。
すなわち、上記対物レンズ17における上記周辺部分は、凸形の入射側端面29aによって入射光を凸レンズのように屈折させて集光し、さらに凸形の外周面29bによって凹面鏡のように反射させて集光する2段階の集光機能を有している。したがって、何れか一方の集光機能を単独で行う場合に比べて、集光性を向上させることができる。
また、上記対物レンズ17の上記周辺部分における入射側端面29aは、当該入射側端面29aから入射された光が外周面29bに対して全反射条件を満たすように入射させるように形成されている。
したがって、上記対物レンズ17の上記周辺部分における入射側端面29aから入射された光は、外周面29bで全反射されて、上記周辺部分内を出射面に向かって進むことができる。
尚、本実施の形態においては、上記周辺部分における筒状体29の外周面29bで、入射側端面29aからの入射光を全反射するようにしている。しかしながら、この発明は全反射に限定されるものではなく、単なる反射でもよい。すなわち、金属反射膜を外周面29bに形成して、上記金属反射膜で反射するようにしてもよい。
以上のごとく、上記対物レンズ17は、サンプル16から出射された蛍光のうち、凸レンズ部28に入りきらないような放射角度の大きい蛍光を、筒状体29の外周面29bで全反射あるいは反射させることによって、通常の凸レンズでは集光できないような大きな放射角度の光をも集めることができる。そのため、検出器27の感度アップを図ることができるのである。
また、本光検出装置1の対物レンズを上記対物レンズ17と同等のNAを通常の凸レンズで実現するよりも、レンズ素子自体をコンパクトに形成することができる。
また、図6には、上記サンプル16から発せられて対物レンズ17から第2レンズ25までを通過する蛍光の光線図を示す。図6において、波長フィルタ24としてカットオフが急峻な干渉フィルターを用いるため、波長フィルタ24への入射光を平行光にする必要がある。そこで、対物レンズ17を通過して集光された蛍光を、第1レンズ23によって平行光に近い状態にして波長フィルタ24へ入射するようにしている。ここで、対物レンズ17によって平行光にすることも可能ではある。しかしながら、その場合には、蛍光のビーム径が大きくなってしまい、第1レンズ23以下の光学素子の大型化を招くことになる。
したがって、上述したような、中央部分に凸レンズ部28を有すると共に、凸レンズ部28の周辺部分に円錐台形の筒状体29を有する対物レンズ17を用いることによって、第1レンズ23,波長フィルタ24および第2レンズ25の各光学素子の小型化を図ることができ、走査モジュール9の小型・軽量化を図ることができるのである。
尚、上述の説明においては、上記光源18からの励起光の照射に起因して、サンプル16から出射される蛍光を検出する場合を例に挙げて説明したが、サンプル16から出射される光は、上記蛍光以外に、反射・散乱光である場合も含まれる。すなわち、反射吸収物質で標識された生体由来物質が分布する転写支持体をサンプル16とした場合には、光源18からの励起光の照射に基づいて、上記反射吸収物質で標識されたサンプル16からは上記励起光と同じ波長の強い強度の光(反射・散乱光)が発せられる。
上述のように、本実施の形態においては、光源18から出射されて対物レンズ17の上記励起光透過部を透過した励起光の照射に起因して、サンプル16における略一点から等方的に出射される光を、対物レンズ17によって集光し、検出器27によって検出するようにしている。
そして、上記対物レンズ17を、中央部分に凸レンズ部28を有すると共に、凸レンズ部28の周辺部分に円錐台形の筒状体29を有するように構成している。したがって、サンプル16から出射された光のうちで、凸レンズ部28に入りきらないような放射角度の大きい光bを、筒状体29の外周面29bで全反射あるいは反射させて集光することができ、通常の凸レンズでは集光できないような大きな放射角度の光を効率良く集めることができる。その結果、上記光の集光率を高めることができ、対物レンズ17の光軸上に配置された反射ミラー20で遮られて検出器27によって検出されない光の存在によるS/Nの低下を防止して、高感度な光検出装置を実現することができる。
したがって、本実施の形態によれば、上記大きな放射角度の光bを高いNAの通常の凸レンズで集光する場合よりも対物レンズ17を小型に構成することができる。また、対物レンズ17は、サンプル16からの光を集光して第1レンズ23に入射するので、光を検出器27に導く光路上に設置される第1レンズ23,波長フィルタ24および第2レンズ25等の光学素子をも小型にすることが可能になる。
また、上記対物レンズ17,第1レンズ23,波長フィルタ24および第2レンズ25等の光学素子を小型にすることにより、上記光照射光学系および上記検出光学系を搭載している走査モジュール9の重量を軽くすることができる。したがって、上記走査機構の構成を簡素化すると共に、軽量化を図って、走査モジュール9の高速走査を可能にすることができる。したがって、サンプル16における異なる複数の位置での二次元の光分布を高速に検出することが可能になる。
また、本実施の形態において、上記対物レンズ17は、図4に示すように、上記光軸となる中心軸に関して対象性を有する同心円状の平面形状を有している。そして、この中心軸と、反射ミラー20で反射された上記励起光が透過する上記励起光透過部の少なくとも一部とが、重複するようになっている。そのため、ダイクロイックミラーを通して励起光を照射する方式に比して、強い励起エネルギーをサンプル16に付与することができ、検出器27で光電検出される信号(画像情報)のS/Nを向上することができる。さらに、上記光軸の周囲に上記励起光透過部を設けることができ、上記励起光を対物レンズ17の上記中央部分に対して略垂直に入射させることができ、上記励起光の入射を簡単に行うことができる。
ここで、上記対物レンズ17における上記励起光透過部は、光源18からの励起光を透過させる機能を有していればどのような形態であってもよく、例えば上記励起光透過部の周辺部と比べて何ら異なる特徴を有していなくても差し支えない。つまり、上記励起光透過部のレンズ曲率を周辺部のレンズ曲率とは異なる等の特徴がなく、上記周辺部と明確な構造的な違いや明確な境界が無くとも、実際に使用する際に光源18からの励起光を透過させることができればよいのである。
また、本実施の形態においては、上記対物レンズ17と検出器27との間に上記中間レンズ素子としての第2レンズ25を配置している。そして、対物レンズ17によって集光された光を、さらに第2レンズ25で集光位置が検出器27の検出面上になるように点集光するようにしている。
本光検出装置1の光検出効率を向上させるためには、検出器27の検出面に対して集光スポットの径が非常に小さい点になるように集光させる必要がある。ところが、上述のような構成を有する対物レンズ17のみで点集光させることは困難である。例えば、対物レンズ17とサンプル16との間の距離がわずかにずれた場合であっても、検出器27の検出面上のスポット径が非常に大きくなり、検出効率が低下するという問題が発生する。そこで、本実施の形態においては、先ず、対物レンズ17でサンプル16から放射状に発せられた光を並行光に近い状態でゆるく集光したうえで、次に、第2レンズ25で検出器27の検出面上に点集光するのである。こうすることによって、光検出効率を向上させることができるのである。
また、本実施の形態においては、上記対物レンズ17と第2レンズ25との間に、光源18からの励起光の波長と同等の波長成分の光を遮光する波長フィルタ24を配置している。そして、検出器27に入射しようとする光源18からの励起光の波長と同等の波長の迷光をカットするようにしている。したがって、検出器27によってさらに効率よく蛍光を検出することができるのである。
以上のごとく、この発明の光検出装置は、
測定対象物16からの光を集光する対物レンズ素子17と、
上記対物レンズ素子17によって集光された光を検出する光検出素子27と
を備え、
上記対物レンズ素子17は、屈折によって光を集光する中央部分28と、この中央部分28の周辺に位置して反射によって光を集光する周辺部分29とを含んでいる
ことを特徴としている。
測定対象物16からの光を集光する対物レンズ素子17と、
上記対物レンズ素子17によって集光された光を検出する光検出素子27と
を備え、
上記対物レンズ素子17は、屈折によって光を集光する中央部分28と、この中央部分28の周辺に位置して反射によって光を集光する周辺部分29とを含んでいる
ことを特徴としている。
上記構成によれば、上記測定対象物16からの光を集光する対物レンズ素子17は、屈折によって光を集光する通常の凸レンズに相当する中央部分28の外周に、反射によって光を集光する周辺部分29を有している。したがって、通常の凸レンズでは集光できないような大きな放射角度の光をも集めることができ、集光効率を高めて上記光検出素子27による感度アップを図ることができる。そのために、上記従来の画像読み取り装置のように、光電検出される信号(画像情報)のS/Nを向上するために、対物レンズとして上記対物レンズ素子17と同等のNAを有する凸レンズを用いる場合に比して、上記対物レンズ素子17の直径を小さくすることができる。
また、上記対物レンズ素子17は、上記測定対象物16からの光を集光して上記光検出素子27に入射するので、上記対物レンズ素子17以降の光学素子および上記光検出素子27の直径を小さくすることができ、検出光学系をコンパクトにして高速スキャンを可能にすることができるのである。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記測定対象物16からの光は、上記測定対象物16上の略一点から放射状に出射される光であり、
上記対物レンズ素子17は、上記測定対象物16上の略一点から放射状に出射される光を上記光検出素子27上に集光するようになっている。
上記測定対象物16からの光は、上記測定対象物16上の略一点から放射状に出射される光であり、
上記対物レンズ素子17は、上記測定対象物16上の略一点から放射状に出射される光を上記光検出素子27上に集光するようになっている。
この実施の形態によれば、上記測定対象物16上の略一点から放射状に出射される微弱な光であっても、上記対物レンズ素子17によって高い集光効率で集光して上記光検出素子27上に集光するので、上記光検出素子27によって高感度で検出することができるのである。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記測定対象物16に光を照射する光源18を備え、
上記対物レンズ素子17は、上記光源18からの光を透過する光透過部を含んでおり、
上記光源18からの光は、上記対物レンズ素子17の上記光透過部を透過して上記測定対象物16を照射するようになっている。
上記測定対象物16に光を照射する光源18を備え、
上記対物レンズ素子17は、上記光源18からの光を透過する光透過部を含んでおり、
上記光源18からの光は、上記対物レンズ素子17の上記光透過部を透過して上記測定対象物16を照射するようになっている。
この実施の形態によれば、上記光源18からの光を上記対物レンズ素子17の上記光透過部を透過して上記測定対象物16に照射するようにしている。そのために、ダイクロイックミラーを通して励起光を照射する方式に比して、強い励起エネルギーを上記測定対象物16に付与することができ、上記光検出素子27で検出される信号(画像情報)のS/Nを向上することができる。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子17は、光軸に対して同心円状の形状を有しており、
上記光軸は、上記光透過部の少なくとも一部を通過している。
上記対物レンズ素子17は、光軸に対して同心円状の形状を有しており、
上記光軸は、上記光透過部の少なくとも一部を通過している。
この実施の形態によれば、光軸に対して同心円状の形状を有する上記対物レンズ素子17における上記光軸の周囲に、上記光透過部を設けることができる。したがって、上記光源18からの光を、上記対物レンズ素子17の上記中央部分28に対して略垂直に入射させることができ、上記光の入射を簡単に行うことができる。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子17と上記光検出素子27との間に配置されると共に、上記光源18からの光と略同一波長の光を減光する波長フィルタ24を備え、
上記波長フィルタ24は、上記対物レンズ素子17によって集光された光のうち、上記光源18からの光と略同一波長の成分を減光して上記光検出素子27上を照射するようになっている。
上記対物レンズ素子17と上記光検出素子27との間に配置されると共に、上記光源18からの光と略同一波長の光を減光する波長フィルタ24を備え、
上記波長フィルタ24は、上記対物レンズ素子17によって集光された光のうち、上記光源18からの光と略同一波長の成分を減光して上記光検出素子27上を照射するようになっている。
この実施の形態によれば、上記波長フィルタ24は上記光源18からの光と略同一波長の成分を減光するので、上記光検出素子27に入射されようとする上記光源18からの光と略同一波長の迷光を上記波長フィルタ24によってカットすることができる。したがって、上記光検出素子27によってさらに効率よく検出することができる。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子17と上記光検出素子27との間に配置された中間レンズ素子25を備え、
上記中間レンズ素子25は、上記対物レンズ素子17によって集光された光を、さらに上記光検出素子27上に集光するようになっている。
上記対物レンズ素子17と上記光検出素子27との間に配置された中間レンズ素子25を備え、
上記中間レンズ素子25は、上記対物レンズ素子17によって集光された光を、さらに上記光検出素子27上に集光するようになっている。
上記検出器27での光検出効率を向上させるためには、上記検出器27の検出面に対して集光スポットの径が非常に小さい点になるように集光させる必要がある。
この実施の形態によれば、上記対物レンズ素子17によって集光された光を、上記中間レンズ素子25によって上記光検出素子27上に集光するようにしている。したがって、サンプル16から放射状に発せられた光を、先ず、対物レンズ17によって並行光に近い状態でゆるく集光し、次に、上記中間レンズ素子25で上記光検出素子27上に点集光することができ、光検出効率を向上させることができるのである。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子17の上記中央部分28は、
上記測定対象物16からの光が入射すると共に、光軸方向外側に向かって凸状の曲面形状を有する入射側凸面28aと、
上記入射側凸面28aからの光を出射させると共に、光軸方向外側に向かって凸状の曲面形状を有する出射側凸面28bと
を含む一方、
上記対物レンズ素子17の上記周辺部分29は、
上記測定対象物16からの光が入射する入射側端面29aと、
上記入射側端面29aからの光を内部で反射させる外周面29bと、
上記外周面29bで内部反射された光を出射させる出射側端面29cと
を含んでおり、
上記中央部分28における上記入射側凸面28aと上記周辺部分29における上記入射側端面29aとの境界には、凹状の境界部が形成されている。
上記対物レンズ素子17の上記中央部分28は、
上記測定対象物16からの光が入射すると共に、光軸方向外側に向かって凸状の曲面形状を有する入射側凸面28aと、
上記入射側凸面28aからの光を出射させると共に、光軸方向外側に向かって凸状の曲面形状を有する出射側凸面28bと
を含む一方、
上記対物レンズ素子17の上記周辺部分29は、
上記測定対象物16からの光が入射する入射側端面29aと、
上記入射側端面29aからの光を内部で反射させる外周面29bと、
上記外周面29bで内部反射された光を出射させる出射側端面29cと
を含んでおり、
上記中央部分28における上記入射側凸面28aと上記周辺部分29における上記入射側端面29aとの境界には、凹状の境界部が形成されている。
この実施の形態によれば、上記対物レンズ素子17の上記中央部分28は、入射面を凸形の入射側凸面28aで構成する一方、出射面を凸形の出射側凸面28bで構成するので、集光の能率を容易に向上させることができる。したがって、出射側の出射側凸面28bの曲率を特に大きくする必要はなく、出射側の出射側凸面28bの焦点距離が大きくなって走査モジュール9が大型化することもない。
さらに、上記入射面には、上記中央部分28における入射側凸面28aと上記周辺部分29における入射側端面29aとの境界に、凹状の境界部が形成されている。そのため、入射側凸面28aに入射される光と入射側端面29aに入射される光との屈折方向が全く異なり、入射面における上記中央部分28と上記周辺部分29とが明確に分離される。したがって、入射側凸面28aに入射された光と入射側端面29aに入射された光とが、出射側凸面28bと外周面29bとの間の面に至ることを防止でき、出射側凸面28bと外周面29bとの間の面に至った光が迷光となることを防止できる。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子17の上記中央部分28における上記入射側凸面28aおよび上記周辺部分29における上記入射側端面29aは、上記入射側凸面28aから入射した光の光路と上記入射側端面29aから入射した光の光路とが、上記凹状の境界部を境にして互いに分離されて交差することがないような形状を有している。
上記対物レンズ素子17の上記中央部分28における上記入射側凸面28aおよび上記周辺部分29における上記入射側端面29aは、上記入射側凸面28aから入射した光の光路と上記入射側端面29aから入射した光の光路とが、上記凹状の境界部を境にして互いに分離されて交差することがないような形状を有している。
この実施の形態によれば、上記入射側凸面28aから入射した光の光路と入射側端面29aから入射した光の光路とは、交差することがない。その結果、上記中央部分28の入射側凸面28aに入射された光の総てが、出射面である凸形の出射側凸面28bに至るのに対して、上記周辺部分29の入射側端面29aに入射される光の総てが、反射面である外周面29bに至ることになる。
したがって、上記入射面に入射されて出射側凸面28bおよび外周面29b以外の面に至る光によって、迷光が発生することが防止される。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子17の上記周辺部分29における上記入射側端面29aは、外側に向かって凸状の曲面形状を有している。
上記対物レンズ素子17の上記周辺部分29における上記入射側端面29aは、外側に向かって凸状の曲面形状を有している。
この実施の形態によれば、上記周辺部分29における上記入射側端面29aは、外側に向かって凸状の曲面形状を有している。したがって、上記周辺部分29においても入射面に凸レンズによる集光効果を持たせることができ、入射側端面29aから入射されて外周面29bを照射する光の照射面積を小さくすることができる。その結果、外周面29bの光軸方向の長さを短くすることができ、レンズ素子17全体の小型化を図ることが可能になる。
また、一実施の形態の光検出装置では、
上記対物レンズ素子17の上記周辺部分29における上記外周面29bは、外部に向かって凸状の曲面形状を有している。
上記対物レンズ素子17の上記周辺部分29における上記外周面29bは、外部に向かって凸状の曲面形状を有している。
この実施の形態によれば、上記対物レンズ素子17の上記外周面(反射面)29bが外部に向かって凸状の曲面形状を有しており、上記対物レンズ素子17内の光から見れば凹面鏡と見なすことができる。したがって、外周面29bは凹面鏡の原理で反射光を集光させることができる。
すなわち、上記対物レンズ素子17における上記周辺部分29は、凸形の入射側端面29aによって入射光を凸レンズのように屈折させて集光し、さらに凸形の外周面29bによって凹面鏡のように反射させて集光する2段階の集光機能を有している。したがって、何れか一方の集光機能を単独で行う場合に比べて、集光性を向上させることができる。
1…光検出装置、
4…サンプル台、
5…PC、
6…走査ステージ、
9…走査モジュール、
16…サンプル、
17…対物レンズ、
18…光源、
20…反射ミラー、
23…第1レンズ、
24…波長フィルタ、
25…第2レンズ、
26…ピンホール、
27…検出器、
28…凸レンズ部(中央部分)、
28a…入射側凸面、
28b…出射側凸面、
29…筒状体(周辺部分)、
29a…入射側端面、
29b…外周面、
29c…出射側端面。
4…サンプル台、
5…PC、
6…走査ステージ、
9…走査モジュール、
16…サンプル、
17…対物レンズ、
18…光源、
20…反射ミラー、
23…第1レンズ、
24…波長フィルタ、
25…第2レンズ、
26…ピンホール、
27…検出器、
28…凸レンズ部(中央部分)、
28a…入射側凸面、
28b…出射側凸面、
29…筒状体(周辺部分)、
29a…入射側端面、
29b…外周面、
29c…出射側端面。
Claims (10)
- 測定対象物(16)からの光を集光する対物レンズ素子(17)と、
上記対物レンズ素子(17)によって集光された光を検出する光検出素子(27)と
を備え、
上記対物レンズ素子(17)は、屈折によって光を集光する中央部分(28)と、この中央部分(28)の周辺に位置して反射によって光を集光する周辺部分(29)とを含んでいる
ことを特徴とする光検出装置。 - 請求項1に記載の光検出装置において、
上記測定対象物(16)からの光は、上記測定対象物(16)上の略一点から放射状に出射される光であり、
上記対物レンズ素子(17)は、上記測定対象物(16)上の略一点から放射状に出射される光を上記光検出素子(27)上に集光するようになっている
ことを特徴とする光検出装置。 - 請求項1あるいは請求項2に記載の光検出装置において、
上記測定対象物(16)に光を照射する光源(18)を備え、
上記対物レンズ素子(17)は、上記光源(18)からの光を透過する光透過部を含んでおり、
上記光源(18)からの光は、上記対物レンズ素子(17)の上記光透過部を透過して上記測定対象物(16)を照射するようになっている
ことを特徴とする光検出装置。 - 請求項3に記載の光検出装置において、
上記対物レンズ素子(17)は、光軸に対して同心円状の形状を有しており、
上記光軸は、上記光透過部の少なくとも一部を通過している
ことを特徴とする光検出装置。 - 請求項3あるいは請求項4に記載の光検出装置において、
上記対物レンズ素子(17)と上記光検出素子(27)との間に配置されると共に、上記光源(18)からの光と略同一波長の光を減光する波長フィルタ(24)を備え、
上記波長フィルタ(24)は、上記対物レンズ素子(17)によって集光された光のうち、上記光源(18)からの光と略同一波長の成分を減光して上記光検出素子(27)上を照射するようになっている
ことを特徴とする光検出装置。 - 請求項1から請求項5までの何れか一つに記載の光検出装置において、
上記対物レンズ素子(17)と上記光検出素子(27)との間に配置された中間レンズ素子(25)を備え、
上記中間レンズ素子(25)は、上記対物レンズ素子(17)によって集光された光を、さらに上記光検出素子(27)上に集光するようになっている
ことを特徴とする光検出装置。 - 請求項1から請求項6までの何れか一つに記載の光検出装置において、
上記対物レンズ素子(17)の上記中央部分(28)は、
上記測定対象物(16)からの光が入射すると共に、光軸方向外側に向かって凸状の曲面形状を有する入射側凸面(28a)と、
上記入射側凸面(28a)からの光を出射させると共に、光軸方向外側に向かって凸状の曲面形状を有する出射側凸面(28b)と
を含む一方、
上記対物レンズ素子(17)の上記周辺部分(29)は、
上記測定対象物(16)からの光が入射する入射側端面(29a)と、
上記入射側端面(29a)からの光を内部で反射させる外周面(29b)と、
上記外周面(29b)で内部反射された光を出射させる出射側端面(29c)と
を含んでおり、
上記中央部分(28)における上記入射側凸面(28a)と上記周辺部分(29)における上記入射側端面(29a)との境界には、凹状の境界部が形成されている
ことを特徴とする光検出装置。 - 請求項7に記載の光検出装置において、
上記対物レンズ素子(17)の上記中央部分(28)における上記入射側凸面(28a)および上記周辺部分(29)における上記入射側端面(29a)は、上記入射側凸面(28a)から入射した光の光路と上記入射側端面(29a)から入射した光の光路とが、上記凹状の境界部を境にして互いに分離されて交差することがないような形状を有している
ことを特徴とする光検出装置。 - 請求項7あるいは請求項8に記載の光検出装置において、
上記対物レンズ素子(17)の上記周辺部分(29)における上記入射側端面(29a)は、外側に向かって凸状の曲面形状を有している
ことを特徴とする光検出装置。 - 請求項7から請求項9までの何れか一つに記載の光検出装置において、
上記対物レンズ素子(17)の上記周辺部分(29)における上記外周面(29b)は、外部に向かって凸状の曲面形状を有している
ことを特徴とする光検出装置。
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