WO2012164118A1 - Compuestos bioactivos polifenólicos conteniendo azufre o selenio y sus usos - Google Patents

Compuestos bioactivos polifenólicos conteniendo azufre o selenio y sus usos Download PDF

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José María FERNÁNDEZ-BOLAÑOS GUZMÁN
Inés MAYA CASTILIA
Maria de los Angeles LÓPEZ GARCíA
Juan FERNÁNDEZ-BOLAÑOS GUZMÁN
Guillermo RODRÍGUEZ GUTIÉRREZ
Antonio GÓMEZ CARRETERO
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Universidad de Sevilla
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Definitions

  • the present invention relates to compounds containing at least one polyphenol and sulfur or selenium group and their uses as potent antioxidants and free radical scavengers, and therefore applicable in the food industry, cosmetic industry and pharmaceutical industry. Therefore, the present invention is framed in the chemical-pharmaceutical field.
  • Polyphenols are a wide family of compounds that are found, among other foods, in fruit, vegetables, wine, tea, cocoa and extra virgin olive oil and that show a marked antioxidant activity.
  • One of the most abundant and most effective polyphenols as antioxidant and free radical scavenger is hydroxytyrosol, 2- (3,4-dihydroxyphenyl) ethanol, a polyphenol that predominates in the olive tree (European Olea), and shows a proven activity in the prevention and treatment of cardiovascular diseases, such as atherosclerosis, cancer, neurodegenerative diseases, diabetes or osteoporosis.
  • Hydroxytyrosol shows anti-cancer activity, prevents age-related macular degeneration, acts as a photoprotector preventing damage induced by ultraviolet radiation, and presents activity as an anti-inflammatory. It also has antimicrobial activity against pathogens, such as Helicobacter pylori and Mycoplasma pneumoide. It also has anti-HIV activity.
  • sulfur is an essential chemical element, since sulfur-containing compounds such as amino acids, proteins, enzymes and micronutrients have important functions in cell biochemistry.
  • the compounds Natural organosulfurates are frequently found in vegetables, particularly in Allium and Cruciferous vegetables. Especially garlic, onion, scallions, chives and leek are rich in diallyl sulfide, diallyl disulfide, diallyl trisulfide, S-allyl-L-cysteine sulfoxide and ajoene. Broccoli, cabbage and Brussels sprouts are rich in sulforaphane.
  • the selenocompounds have shown a higher anticancer activity compared to their sulfur sister.
  • Selenoureas are compounds of interest both from a biological and synthetic point of view. In relation to its biological activity, the use of selenoureas as depigmenting agents has been described, due to its ability to inhibit tyrosinase, as superoxide radical scavengers and as potential radioprotective agents. The most commonly used method for obtaining selenoureas is the reaction of isoselenocyanates with amines.
  • Certain selenides and disselenides have shown antioxidant, antinociceptive, anti-inflammatory and antidepressant activity.
  • diphenyl disselenide (PhSe-SePh) inhibits lipid peroxidation, acts as an antinociceptive, antiulcer, anxiolytic, anti-inflammatory and antidepressant, and has a neuroprotective and hypoglycemic effect.
  • Said compound and other analogs have exhibited hemolytic and genotoxic activity in human plasma cells.
  • the present invention relates to compounds whose structure results from the combination of the polyphenolic function (monohydroxy, dihydroxy or phenolic polyhydroxy, for example hydroxytyrosyl) with functional groups containing sulfur and / or selenium, giving rise to structures such as thiol, disulfide, thioacetate , thiourea, selenide, diselenide, selenonium and selenourea, for the potentiation and improvement of the biological activity of polyphenols.
  • These compounds significantly improve the properties as antioxidant and free radical sequestrant in different systems and matrices, for example in aqueous medium, lipophilic medium, emulsion and microsomal cells.
  • the compounds of the present invention have also shown activity as tyrosinase inhibitors, involved in enzymatic browning reactions.
  • the compounds of the invention are potent antioxidants and free radical scavengers and are thus useful for application in the following activity sectors: food industry, cosmetic industry and pharmaceutical industry. Specifically for the pharmaceutical industry, the use of these compounds will be aimed at obtaining new drugs or formulations containing them, and would be useful in the prevention and treatment of cardiovascular, neurodegenerative, and tumor diseases; also as anti-inflammatory, antimicrobial and antiviral.
  • a first aspect of the present invention relates to the use of a compound of general formula (I) for the preparation of an antioxidant composition or as an oxidant:
  • R 1 and R 2 are the same or different and are independently selected from hydrogen (H), (C1-C4) alkyl or acetyl (-COCH3).
  • R 1 and / or R 2 are hydrogen, methyl or acetyl and more preferably R 1 and R 2 are hydrogen.
  • X is selected from S, Se, NH or X'-R 4 ; where X 'is S or Se and R 4 is the group of formula (III);
  • R 5 and R 6 are the same or different and are independently selected from hydrogen, (C 1 -C 4) alkyl or acetyl.
  • R 5 and / or R 6 are hydrogen, methyl or acetyl;
  • Z is S or Se
  • R 7 is selected from (Ci-Ci 8 ) alkyl, phenyl (-C6H 5 ), substituted or unsubstituted or benzyl (-CH 2 -C 6 H 5 ), substituted or unsubstituted.
  • alkyl refers in the present invention to aliphatic, linear or branched, substituted or unsubstituted chains, in the case of R 1 , R 2 , R 3 , R 5 and R 6 have 1 to 4 carbon atoms , preferably it is selected from a C 1 -C 2 alkyl, more preferably the alkyl group is a methyl and in the case of R 7 they have 1 to 18 carbon atoms, preferably it is selected from a C 1 -C 9 alkyl, more preferably The alkyl group is a butyl.
  • alkyl groups examples are methyl, ethyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, tert-butyl or sec-butyl.
  • the alkyl group may be substituted.
  • phenyl is meant the group -C6H 5 , which may be substituted or unsubstituted.
  • the substituted phenyl group may be substituted with at least one substituent, preferably it is substituted with a substituent and more preferably the substituent would be in position for.
  • the substituents may be selected from the list comprising, but not limited to, hydrogen, (C1-C4) alkyl, substituted or unsubstituted, hydroxyl, alkoxy, amine, thiourea or selenourea, and these substituents in turn may be optionally substituted.
  • the substituents are hydrogen, alkyl as defined above and alkoxy.
  • benzyl is meant the group (-CH2-C6H5), which may be substituted or unsubstituted.
  • the substituted phenyl group may be substituted with at least one substituent that may be selected from the list comprising, but not limited to, hydrogen, substituted or unsubstituted (C1-C4) alkyl, hydroxyl, alkoxy, amine, thiourea or selenourea, and These substituents in turn may be optionally substituted.
  • the benzyl group is not substituted.
  • alkoxy is understood the group -ORa, where Ra is an alkyl group (CrC4) as described above.
  • Ra is an alkyl group (CrC4) as described above.
  • the alkoxy is methoxy.
  • X is S or Se, and more preferably R 3 is hydrogen, acetyl.
  • X is S or Se and R 3 is the group of formula (II), giving rise
  • X is S or Se and R 3 is the group of formula (III), giving compound (Ib):
  • R 1 , R 2 , R 5 , R 6 have been defined above.
  • X is X'-R 4 and more preferably R 3 is the group of formula (III
  • R 5 and R 6 can be the same or different from each other or between the R 3 and R 4 to which they belong.
  • A is an anion that is preferably a halogen and even more preferably the anion is bromine. Even more preferably X 'is Se.
  • Z, R 1 , R 2 and R 7 have been defined above.
  • R 7 is selected from butyl, phenyl, phenyl substituted by at least one (C1-C4) alkyl or benzyl group, more preferably R 7 is selected from butyl, phenyl, phenyl substituted by a methyl or benzyl
  • Z is Se
  • R 7 is a phenyl, substituted or unsubstituted, more preferably the phenyl group is not substituted or is substituted by a (C1-C4) alkyl group or an alkoxy group, as defined above.
  • the compound is selected from the list comprising:
  • the compounds of the invention described above having antioxidant properties can be used as food additives, for the preparation of a pharmaceutical, food, nutraceutical or cosmetic composition.
  • these compounds can be used as free radical blockers.
  • Another aspect of the present invention relates to the use of the compound of general formula (I) described above, for the preparation of a medicament.
  • Another aspect of the invention relates to the use of the compound of general formula (I), described above for the preparation of a medicament for the treatment and / or prevention of inflammatory, tumor, neurodegenerative diseases related to blood coagulation acting as an antiplatelet agent.
  • platelets such as but not limited to thrombosis or cardiovascular diseases, such as myocardial infarction, infectious, acting as an antimicrobial or antiviral agent, or for use as a tyrosinase inhibitor.
  • Another aspect of the present invention relates to the compound of general formula (I):
  • R 1 and R 2 are the same or different and are independently selected from hydrogen (H), (C1-C4) alkyl or acetyl (-COCH 3 ).
  • R 1 and / or R 2 are hydrogen, methyl or acetyl and more preferably R 1 and R 2 are hydrogen.
  • X is selected from S, Se, NH or X'-R 4 ; where X 'is S or Se and R 4 is the group of formula (III);
  • R 5 and R 6 are the same or different and are independently selected from hydrogen, (C1-C4) alkyl or acetyl.
  • R 5 and / or R 6 are hydrogen, methyl or acetyl;
  • Z is S or Se
  • R 7 is selected from alkyl (Ci-ds), phenyl (-C6H5), substituted or unsubstituted or benzyl (-CH2-C6H5), substituted or unsubstituted.
  • the compound of the invention can be a compound of formula (la), (Ib), (le) or (Id), as defined above.
  • the compound of the invention is selected from the list comprising:
  • Another aspect of the present invention relates to a composition comprising at least one compound of formula (I) described above.
  • composition is a food, nutraceutical, cosmetic or pharmaceutical composition.
  • composition By “food” we mean any liquid, solid or semi-solid composition suitable for human or animal consumption.
  • this composition can also comprise a pharmaceutically acceptable carrier.
  • This composition may also contain another active substance.
  • compositions are the vehicles known to a person skilled in the art.
  • compositions examples include any solid composition (tablets, pills, capsules, granules, etc.) or liquid (gels, solutions, suspensions or emulsions) suitable for oral, nasal, topical or parenteral administration, preferably oral, topical or parenteral
  • the present invention also relates to a method of treatment and / or prevention of the diseases described above in a mammal, preferably a human, comprising the administration of a therapeutically effective amount of a composition comprising at least one compound of formula (I ) of the invention.
  • a composition comprising at least one compound of formula (I ) of the invention.
  • the administration of the composition can be performed orally, nasally, topically or parenterally, more preferably orally, topically or parenterally.
  • the term "therapeutically effective amount” refers to the amount of the composition calculated to produce the desired effect and, in general, will be determined, among other causes, by the characteristics of the composition itself, the age, condition and history of the patient, the severity of the disease, and the route and frequency of administration.
  • FIG. 1. Represents the inhibitory effect of the tyrosinase activity of diselenide, compound 13, using tyrosine as a substrate.
  • Derivatives 2, 3 and 4 have been prepared by reacting hydroxytyrosol with CCI 4 and PPh 3 , CBr 4 and PP i3, and a mixture of, PPh 3 and imidazole, respectively (Scheme 1). Likewise, their corresponding acetylated derivatives 5, 6 and 7 have been prepared by treatment with AC2O (Scheme 1).
  • Ph is phenyl, Ac acetyl and ImH imidazole.
  • the first synthesis of selenides and diselenides derived from hydroxytyrosol has been carried out using selenide and sodium diselenide.
  • Selenide was generated in situ by reaction of elemental selenium with sodium borohydride under an inert atmosphere. To obtain the Na2Se 2 diselenide, the Na 2 Se is reacted with an extra equivalent of elemental Se.
  • thioureas and selenoureas derived from dopamine were prepared.
  • dopamine hydrochloride 19 was reacted with alkyl and aryl isothiocyan.
  • the new thioureas 24-27 were obtained by reacting isothiocyanates 20-23 with dopamine hydrochloride 19, using triethylamine as the base and methanol as the solvent (Scheme 9).
  • aryl isoselenocyanates were prepared from the corresponding formamides according to a described procedure (López O .; Maza, S .; Ulgar, V .; Maya, I .; Fernández-Bola ⁇ os, J. G. Tetrahedron 2009, 65, 2556-2566).
  • This method is based on the ability of antioxidants to facilitate iron reduction.
  • FeC was used as an oxidant.
  • the Fe 2+ ion formed in the redox reaction forms a complex colored with 2,2'-bipyridyl, which is measured spectrophotometrically.
  • the reducing power (P R ) was calculated from the equation obtained by linear regression for Trolox, according to the modification of the method of Psarra et al. (Psarra, E .; Makris, DP; Kallithraka, S .; Kefalas, PJ Sci. Food Agrie. 2002, 82, 1014-1020.) Described by Jiménez et al.
  • the antiradical activity expressed as EC 50 against DPPH represents the amount of antioxidant needed to decrease the DPPH concentration to 50%.
  • the Sánchez-Moreno method was used (Sánchez-Moreno, C; Larrauri, JA; Saura-Calixto, FJ Sci. Food Agrie. 1998, 76, 270-276) with the modifications of Jiménez et al. ((Jiménez, A .; Rodr ⁇ guez, R .; Jaramillo, S .; Rodr ⁇ guez, G .; Espejo, JA; Guéen, R .; Fernández-Bola ⁇ os J .; Heredia, AJ Agrie. And Food Chem. 2005, 53, 5212-5217).
  • the antiradical activity expressed as EC 5 or against ABTS represents the amount of antioxidant needed to decrease the concentration of ABTS to 50%.
  • Re Re et al.
  • Pellegrini N .
  • Proteggente A .
  • Pannala A .
  • Yang M.
  • Rice-Evans C. Free Radie. Biol. Med. 1999, 26, 1231-1237
  • Güicin Güicin, I. Chemico-Biological Interactions, 2009, 179, 71-80
  • TSA Thiobarbituric acid
  • the best result was obtained with thiol 10, followed by disulfide 11 (2.76 mM and 2.58 mM, respectively, measured in Trolox equivalents), which have shown an increase greater than 200 % with respect to the reducing power of 9 (0.85 mM), that is, three times that of HT.
  • the derivative 9 has a reducing power similar to that of HT (1.1 mM), while the compound 8 shows no reducing power.
  • the reducing power of selenoureas is approximately twice that of hydroxytyrosol.
  • values were obtained up to more than 5 times higher, which indicates the high reducing potential of selenium derivatives.
  • the DPPH radical uptake values obtained for seleno compounds 13, 17 and 31-33 show that all seleno compounds they are good radical scavengers at low concentration, and in all cases this capacity is greater than that of hydroxytyrosol (HT). Especially significant is the result obtained for selenonium 17, which has a potential for free radical uptake almost three times that of HT.
  • selenonium 17 is the one with the lowest EC 5 or, which indicates its high capacity to sequester free radicals, 10 times greater than hydroxytyrosol.
  • the tested compounds all have an ABTS radical scavenging power much greater than that of HT.
  • derivative 33 is the one that presents a value superior to its selenoureidos counterparts
  • Table 3 Values obtained for in vitro biological activity tests of thioureas 24-27.
  • Thiourea 27 shows a reducing power about 25 times that of HT.
  • Oxidative damage was then measured by the formation of TBARS (products of oxidative degradation including malonaldehyde from free radical-mediated peroxidation of unsaturated fatty acids of the lipid membrane): the lower the amount of TBARS formed, the greater the effect membrane protector.
  • Microsomes obtained from rats deficient in vitamin E (-VE) were used to determine the different protective effect of the compounds to be tested, comparing them with microsomes obtained from rats subjected to an adequate diet in VE (+ VE), and with vitamin E , which is the main lipid antioxidant soluble in biological membranes (Duthie, GG; González, BM; Morrice, PC; Arthur, JR Free Raci. Res. Commun. 1991, 15, 35-40), and finally microsomes -VE at Tocopherol was added in the same concentrations as the compounds to be tested.
  • Thioderivative 10 shows extraordinary inhibition values, practically equal to those of ⁇ -tocopherol, at concentrations of 0.250 and 0.100 mM. At 0.050 mM concentration the inhibition values remain important, reaching almost 40%. In all cases these values are higher than those of HT, which at high concentrations behaves as a prooxidant, favoring oxidation instead of inhibiting it.
  • microsomes treated with thiohydroxytyrosol show values similar to microsomes + VE.
  • Selenium 17 has a significant inhibition at a concentration of 0.266 0.250 mM, and when it is lower it becomes a prooxidant, that is, it favors oxidation instead of inhibiting it.
  • diselenide 13 is a potent inhibitor of oxidation in microsomes at any of the test concentrations, presenting similar values to those provided by ⁇ -tocopherol or microsomes + VE, from rats that have not been subjected to stress oxidative due to a deficiency of vitamin E.
  • the values obtained for selenoureas 31-33 are represented in Table 7.
  • the four thioureas tested behave as good inhibitors of microsomal oxidation at the concentrations tested, the inhibitory potential being 26> 24> 27> 25, that is, greater with thioureas prepared from aliphatic amines than from aromatic amines.
  • organosellenic derivatives 13 and 17 on fungus tyrosinase were studied and compared with those of hydroxytyrosol.
  • This enzyme catalyzes the first two reactions of melanin synthesis, the hydroxylation of L-tyrosine to give 3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) and the oxidation of L-DOPA to dopaquinone.
  • L-DOPA 3,4-dihydroxyphenylalanine
  • This quinone is highly reactive and can spontaneously polymerize melanin.
  • the effects of compounds 13 and 17 on the activities of monophenolase, using L-tyrosine as a substrate and diphenolase on L-DOPA were followed by inhibition of dopachrome formation by spectrophotometric measurements. It is found that the compounds tested including hydroxytyrosol slows the formation of dopachrome when L-tyrosine is used as a substrate, thus acting as an inhibitor of the fungal tyros
  • Figure 1 depicts the inhibitory effect of diselenide 13 using tyrosine as a substrate. With the data in the graph, the inhibitory effect of diselenide 13 can be seen at different concentrations in the range 8-55 ⁇ , when the study is carried out for a long time.
  • IR v max 2925, 2848, 1766, 1591, 1507, 1427, 1368, 1256, 1203, 1175,
  • IR v max 1024, 2926, 2838, 1587, 1510, 1441, 1240, 1138, 1024, 857,
  • 3,4-Dimethoxyphenethyl bromide 14 (1902 mmol, 480.1 mg) dissolved in tetrahydrofuran (9 mL) was added and stirred at room temperature in darkness and inert atmosphere for another 2 hours. It was concentrated to dryness, it dissolved in water (75 ml) and dichloromethane (75 ml). The organic layer was separated, and the aqueous one was extracted with 2x75 mL of CH2CI2. The organic fraction was washed with 75 ml of saturated sodium chloride, dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness. The residue was purified by column chromatography (AcOEt-hexane 1: 20 ⁇ AcOEt-hexane 1: 3), obtaining a yellowish solid.
  • IR v max 1514, 3220, 3055, 2959, 2923, 2866, 1607, 1571, 1514, 1455, 1347, 1278, 1199, 966, 781 crrf 1 .
  • H-6 '
  • 6.67 d, J 5 , 6 8.0 Hz, 1 H, H-5
  • 6.65 d, J 2 , 6 2.0 Hz, 1 H, H-2
  • 6.50 d, J 2I6 2.0 Hz, J 5 , 6 8.0 Hz, 1 H, H-6
  • 3.72 t, J C H2, CH2 7.0 Hz, 2H, CH 2 NH
  • 2.74 t, JCH2.CH2 7.0 Hz, 2H, CH 2 Ar
  • 2.31 s, 3H, CH 3 ) ppm.
  • IR v max 1510, 3319, 3267, 2929, 2860, 1599, 1572, 1510, 1450, 1337,
  • IR v max 1517, 3340, 3220, 2938, 1706, 1599, 1493, 1444, 1351, 1279,

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Abstract

La invención se refiere a compuestos que contienen al menos un grupo polifenol y azufre o selenio y sus usos como antioxidantes y captadores de radicales libres. Además, se refiere a las composiciones farmacéuticas, nutracéuticas y cosméticas que los incluyen.

Description

COMPUESTOS BIOACTIVOS POLIFENÓLICOS CONTENIENDO AZUFRE O
SELENIO Y SUS USOS
La presente invención se refiere a unos compuestos que contienen al menos un grupo polifenol y azufre o selenio y sus usos como potentes antioxidantes y captadores de radicales libres, y por tanto de aplicación en la industria alimentaria, industria cosmética e industria farmacéutica. Por tanto, la presente invención se enmarca en el campo químico-farmacéutico.
ESTADO DE LA TÉCNICA
Los polifenoles son una amplia familia de compuestos que se encuentran, entre otros alimentos, en la fruta, la verdura, el vino, el té, el cacao y el aceite de oliva virgen extra y que muestran una marcada actividad antioxidante. Uno de los polifenoles más abundantes y más efectivos como antioxidante y atrapador de radicales libres es el hidroxitirosol, 2-(3,4-dihidroxifenil)etanol, un polifenol que predomina en el olivo (Olea europea), y que muestra una contrastada actividad en la prevención y tratamiento de enfermedades cardiovasculares, como la aterosclerosis, cáncer, enfermedades neurodegenerativas, diabetes u osteoporosis.
El hidroxitirosol muestra actividad anticancerígena, previene de la degeneración macular relacionado con la edad, actúa como fotoprotector evitando el daño inducido por la radiación ultravioleta, y presenta actividad como anti-inflamatorio. También presenta actividad antimicrobiana frente a patógenos, como el Helicobacter pylori y el Mycoplasma neumoide. También posee actividad anti-VIH.
Por otro lado, el azufre es un elemento químico esencial, ya que compuestos que contienen azufre como aminoácidos, proteínas, enzimas y micronutrientes poseen importantes funciones en la bioquímica celular. Los compuestos organosulfurados naturales se encuentran frecuentemente en vegetales, particularmente en los vegetales Allium y Cruciferous. En especial ajo, cebolla, cebolleta, cebollinos y puerro son ricos en dialil sulfuro, dialil disulfuro, dialil trisulfuro, S-alil-L-cisteina sulfóxido y ajoeno. El brócoli, la col y las coles de Bruselas son ricas en sulforafano.
Además, se ha estudiado la influencia de los compuestos sulfurados en la prevención de enfermedades cardiovasculares, neurodegenerativas, inflamatorias y cáncer, habiéndose comprobado cómo ciertos compuestos organosulfurados presentan propiedades antioxidantes (Battin, Erin E.; Brumaghim, Julia L. Cell Biochem. Biophys. 2009, 55, 1-23), antiaterosclerótica, antiproliferativa, antibacteriana, inhibición de la agregación plaquetaria, reducción de la presión sistólica de la sangre y reducción de los niveles de colesterol (Vázquez-Prieto, M. A.; Miatello, R. M. Mol. Aspects Meó. 2010, 31, 540-545). Por ejemplo, el sulfuro de bis[2-(3,4-dihidroxifenil)etilo] ha sido descrito como un agente terapéutico útil para la nefritis.
En derivados organoselénicos, estudios epidemiológicos y clínicos en humanos, así como ensayos de laboratorio, apoyan el papel protector del selenio frente al desarrollo del cáncer. Los resultados han demostrado que un suplemento de selenio en la dieta inhibe la proliferación de células cancerígenas, induce la apoptosis de las células tumorales, suprime la metástasis en animales y reduce en humanos el riesgo de cáncer de próstata, de pulmón, de mama y colorrectal. Se ha demostrado que tanto la dosis, como la forma química en la que se administre el selenio, son factores críticos en la respuesta celular. Existen evidencias de que muchas de las numerosas actividades que tiene el selenio en los sistemas biológicos se deben a su capacidad de actuar como antioxidante (Naithani, R. Mini-Rev. Med. Chem. 2008, 8, 657-668). Los selenocompuestos han mostrado una mayor actividad anticancerígena en comparación con sus ¡sósteros de azufre. Las selenoureas son compuestos de interés tanto desde el punto de vista biológico como sintético. En relación con su actividad biológica, se ha descrito el uso de selenoureas como agentes despigmentantes, debido a su capacidad de inhibición de la tirosinasa, como atrapadores de radicales superóxido y como potenciales agentes radioprotectores. El método más utilizado para la obtención de selenoureas es la reacción de isoselenocianatos con aminas.
Determinados selenuros y diselenuros han mostrado actividad antioxidante, antinociceptiva, antiinflamatoria y antidepresiva. En concreto, el diselenuro de difenilo (PhSe-SePh) inhibe la peroxidación lipídica, actúa como antinociceptivo, antiulceroso, ansiolítico, antiinflamatorio y antidepresivo, y tiene efecto neuroprotector e hipoglucémico. Dicho compuesto y otros análogos han exhibido actividad hemolítica y genotóxica en células del plasma humano.
El campo de aplicación de este tipo de compuestos con poder antioxidante, es tan amplio que puede ser de interés la búsqueda de compuestos alternativos o que tengan propiedades mejoradas a los anteriormente citados.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a compuestos cuya estructura resulta de la combinación de la función polifenólica (monohidroxi, dihidroxi o polihidroxi fenólicas, por ejemplo hidroxitirosilo) con grupos funcionales conteniendo azufre y/o selenio, dando lugar a estructuras tales como tiol, disulfuro, tioacetato, tiourea, selenuro, diselenuro, selenonio y selenourea, para la potenciación y mejora de la actividad biológica de polifenoles. Estos compuesto mejoran de forma notable las propiedades como antioxidante y secuestrante de radicales libres en distintos sistemas y matrices, por ejemplo en medio acuoso, medio lipófilo, en emulsión y en células microsomales. Los compuestos de la presente invención también han mostrado actividad como inhibidores de la tirosinasa, implicada en reacciones de pardeamiento enzimático.
Los compuestos de la invención son potentes antioxidantes y captadores de radicales libres y de esta manera son útiles para su aplicación en los siguientes sectores de actividad: industria alimentaria, industria cosmética e industria farmacéutica. En concreto para la industria farmacéutica, el uso de estos compuestos irá encaminado a la obtención de nuevos fármacos o formulaciones que los contengan, y serían útiles en la prevención y tratamiento de enfermedades cardiovasculares, neurodegenerativas, y tumorales; además como antiinflamatorios, antimicrobianos y antivirales.
Dentro de la industria alimentaria pueden ser útiles para la formulación de alimentos funcionales o como aditivos para prevenir el deterioro del alimento mejorando sus propiedades físico-químicas, organolépticas o nutricionales. Y en la industria cosmética, estos compuestos podrán utilizarse como componentes de cremas solares y antienvejecimiento por su capacidad de captación de radicales libres.
Por tanto, un primer aspecto de la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula general (I) para la elaboración de una composición antioxidante o como oxidante:
Figure imgf000006_0001
(I)
donde: R1 y R2 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno (H), alquilo (C1-C4) o acetilo (-COCH3). Preferiblemente R1 y/o R2 son hidrógeno, metilo o acetilo y más preferiblemente R1 y R2 son hidrógeno.
R3 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo (C1-C4), acetilo, C(=Z)-NH-R7, el grupo de fórmula (II) o el grupo de fórmula (III):
Figure imgf000007_0001
(II) (lll)
X se selecciona de entre S, Se, NH o X'-R4; donde X' es S o Se y R4es el grupo de fórmula (III);
R5 y R6 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno, alquilo (C1-C4) o acetilo. Preferiblemente R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo;
Y es S o Se;
Z es S o Se; y
R7 se selecciona de entre alquilo (Ci-Ci8), fenilo (-C6H5), sustituido o sin sustituir o bencilo (-CH2-C6H5), sustituido o sin sustituir.
El término "alquilo" se refiere en la presente invención a cadenas alifáticas, lineales o ramificadas, sustituidas o no sustituidas, en el caso de R1, R2, R3, R5 y R6 tienen de 1 a 4 átomos de carbono, preferiblemente se selecciona de entre un alquilo C1-C2, más preferiblemente el grupo alquilo es un metilo y en el caso de R7 tienen de 1 a 18 átomos de carbono, preferiblemente se selecciona de entre un alquilo C1-C9, más preferiblemente el grupo alquilo es un butilo. Ejemplos de grupos alquilo, pero sin limitarse, son metilo, etilo, n-propilo, i- propilo, n-butilo, tert-butilo o sec-butilo. Opcionalmente el grupo alquilo puede estar sustituido. Por "fenilo" se entiende al grupo -C6H5, que puede estar sustituido o sin sustituir. El grupo fenilo sustituido puede estar sustituido con al menos un sustituyente, preferiblemente está sustituido con un sustituyente y más preferiblemente el sustituyente estaría en posición para. Los sustituyentes pueden ser seleccionados de lista que comprende, pero no limita, hidrógeno, alquilo (C1-C4), sustituido o sin sustituir, hidroxilo, alcoxilo, amina, tiourea o selenourea, y estos sustituyentes a su vez pueden estar opcionalmente sustituidos. Preferiblemente los sustutiyentes son hidrógeno, alquilo como se ha definido anteriormente y alcoxilo.
Por "bencilo" se entiende el grupo (-CH2-C6H5), que puede estar sustituido o sin sustituir. El grupo fenilo sustituido puede estar sustituido con al menos un sustituyente que se puede ser seleccionados de lista que comprende, pero no limita, hidrógeno, alquilo (C1-C4) sustituido o sin sustituir, hidroxilo, alcoxilo, amina, tiourea o selenourea, y estos sustituyentes a su vez pueden estar opcionalmente sustituidos. Preferiblemente el grupo bencilo no está sustituido.
Por "alcoxilo" se entiendo el grupo -ORa, donde Ra es un grupo alquilo(CrC4) como el descrito anteriormente. Preferiblemente el alcoxilo es metoxilo.
En una realización preferida X es S o Se, y más preferiblemente R3 es hidrógeno, acetilo.
En otra realización preferida X es S o Se y R3 es el grupo de fórmula (II), dando lugar
Figure imgf000008_0001
(la) donde: R1, R2, R5, R6 e Y se han definido anteriormente.
En otra realización preferida X es S o Se y R3 es el grupo de fórmula (III), dando lu ar al compuesto (Ib):
Figure imgf000009_0001
donde: R1, R2, R5, R6 se han definido anteriormente.
En otra realización preferida, X es X'-R4 y más preferiblemente R3 es el grupo de fórmula (III
Figure imgf000009_0002
donde: X', R1, R2, R5, R6 se han definido anteriormente, R5 y R6 pueden ser iguales o diferentes entre sí o entre los R3y R4 a los que pertenecen. A es un anión que preferiblemente es un halógeno y aun más preferiblemente el anión es de bromo. Aún más preferiblemente X' es Se.
En otra realización preferida X es NH, más preferiblemente R3 es el grupo - C(=Z)-NH-R7 dando lugar a un compuesto de fórmula (Id):
Figure imgf000010_0001
donde: Z, R1, R2y R7 se han definido anteriormente. Preferiblemente cuando Z es S, R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por al menos un grupo alquilo (C1-C4) o bencilo, más preferiblemente R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por un metilo o bencilo. Cuando Z es Se, preferiblemente R7 es un fenilo, sustituido o sin sustituir, más preferiblemente el grupo fenilo no está sustituido o está sustituido por un grupo alquilo (C1-C4) o un grupo alcoxilo, tal y como se han definido anteriormente.
En una realización preferida, el compuesto se selecciona de la lista que comprende:
4-(2-Acetiltioetil)-1 ,2-diacetoxibenceno (8)
4-(2-Sulfaniletil)benceno-1 ,2-diol (10)
Disulfuro de bis(3,4-dihidroxifenetilo) (11)
Diselenuro de bis (3,4-dihidroxifenetilo) (13)
Bromuro de tris(3,4-dihidroxifenetil)selenonio (17)
1-Butil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (24)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) tiourea (25)
1-Bencil-3-(3,4-dihidroxifenetil)tiourea (26)
1-Fenil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (27)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-fenil selenourea (31)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) selenourea (32)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-metoxifenil) selenourea (33)
Diselenuro de bis(3,4-diacetoxifenetilo) (12)
Selenuro de bis (3,4-dimetoxifenetilo) (15) Diselenuro de b¡s(3,4-dimetox¡fenet¡lo) (16) o
Bromuro de tris (3,4-diacetoxifenet¡l)selenonio (18).
Los compuestos de la invención descritos anteriormente al poseer propiedades antioxidantes se puede utilizar como aditivos para alimentos, para la elaboración de una composición farmacéutica, alimenticia, nutracéutica o cosmética. Además, debido a sus propiedades estos compuestos se pueden utilizar como bloqueadores de radicales libres.
Otro aspecto de la presente invención se refiere al uso del compuesto de fórmula general (I) descrito anteriormente, para la elaboración de un medicamento.
Otro aspecto de la invención se refiere al uso del compuesto de fórmula general (I), descrito anteriormente para la elaboración de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades inflamatorias, tumorales, neurodegenerativas, relacionadas con la coagulación sanguínea actuando como antiagregante plaquetarios, como por ejemplo pero sin limitarse trombosis o enfermedades cardiovasculares, como el infarto de miocardio, infecciosas, actuando como agente antimicrobianos o antivirales, o para su uso como inhibidor de tirosinasa.
Otro aspecto de la presente invención se refiere al compuesto de fórmula general (I):
Figure imgf000011_0001
donde: R1 y R2 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno (H), alquilo (C1-C4) o acetilo (-COCH3). Preferiblemente R1 y/o R2 son hidrógeno, metilo o acetilo y más preferiblemente R1 y R2 son hidrógeno.
R3 se selecciona de entre -C(=Z)-NH-R7, el grupo de fórmula (II) o el grupo de fórmula (III):
Figure imgf000012_0001
(II) (III)
X se selecciona de entre S, Se, NH o X'-R4; donde X' es S o Se y R4 es el grupo de fórmula (III);
R5 y R6 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno, alquilo (C1-C4) o acetilo. Preferiblemente R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo;
Y es S o Se;
Z es S o Se; y
R7 se selecciona de entre alquilo (C-i-ds), fenilo (-C6H5), sustituido o sin sustituir o bencilo (-CH2-C6H5), sustituido o sin sustituir.
En una realización preferida el compuesto de la invención puede ser un compuesto de fórmula (la), (Ib), (le) o (Id), tal y como se ha definido anteriormente.
En otra realización preferida, el compuesto de la invención se selecciona de la lista que comprende:
Disulfuro de bis(3,4-dihidroxifenetilo) (11)
Diselenuro de bis (3,4-dihidroxifenetilo) (13) Bromuro de tr¡s(3,4-dihidrox¡fenetil)selenonio (17)
1-But¡l-3-(3,4-dihidroxifenet¡l) tiourea (24)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) tiourea (25)
1-Bencil-3-(3,4-dihidrox¡fenet¡l)tiourea (26)
1-Fen¡l-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (27)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-fenil selenourea (31)
1-(3,4-D¡hidroxifenetil)-3-(p-tolil) selenourea (32)
1-(3,4-Dihidrox¡fenet¡l)-3-(p-metoxifen¡l) selenourea (33)
Diselenuro de bis(3,4-d¡acetoxifenetilo) (12)
Selenuro de bis (3,4-dimetoxifenetilo) (15)
Diselenuro de bis(3,4-dimetoxifenetilo) (16) o
Bromuro de tris (3,4-diacetoxifenetil)selenonio (18).
Otro aspecto de la presente invención se refiere a una composición que comprende al menos un compuesto de fórmula (I) descrito anteriormente.
En una realización preferida la composición es una composición alimentaria, nutracéutica, cosmética o farmacéutica.
En la presente invención se entiende como "nutracéutica" o "alimento funcional", a aquellos alimentos que son elaborados no sólo por sus características nutricionales sino también por poseer un efecto beneficioso sobre la salud, es decir, que pueden cumplir una función específica como puede ser el mejorar la salud y reducir el riesgo de contraer enfermedades. Para ello se les agregan componentes biológicamente activos, como minerales, vitaminas, ácidos grasos, fibra alimenticia o antioxidantes, etc., en este caso concreto un antioxidante.
Por "alimento" entendemos cualquier composición líquida, sólida o semisólida apta para el consumo humano o animal. Cuando tenemos una composición farmacéutica, está composición además puede comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable. Está composición también puede contener otro principio activo.
Los "vehículos farmacéuticamente aceptables" que pueden ser utilizados en dichas composiciones son los vehículos conocidos por un experto en la materia.
Como ejemplos de preparaciones farmacéuticas se incluye cualquier composición sólida (comprimidos, pildoras, cápsulas, gránulos, etc.) o líquida (geles, soluciones, suspensiones o emulsiones) apropiadas para su administración oral, nasal, tópica o parenteral, preferiblemente oral, tópica o parenteral.
La presente invención también se refiere a un método de tratamiento y/o prevención de las enfermedades descritas anteriormente en un mamífero, preferiblemente un humano, que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición que comprende al menos un compuesto de fórmula (I) de la invención. Preferiblemente, la administración de la composición se puede realizar por vía oral, nasal, tópica o parenteral, más preferiblemente por vía oral, tópica o parenteral.
En el sentido utilizado en esta descripción, el término "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a la cantidad de la composición calculada para producir el efecto deseado y, en general, vendrá determinada, entre otras causas, por las características propias de la composición, la edad, estado y antecedentes del paciente, la severidad de la enfermedad, y de la ruta y frecuencia de administración.
A lo largo de la descripción y las reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o pasos. Para los expertos en la materia, otros objetos, ventajas y características de la invención se desprenderán en parte de la descripción y en parte de la práctica de la invención. Los siguientes ejemplos y figuras se proporcionan a modo de ilustración, y no se pretende que sean limitativos de la presente invención.
BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS
FIG. 1.- Representa el efecto inhibidor de la actividad tirosinasa del diselenuro, compuesto 13, utilizando tirosina como sustrato.
EJEMPLOS
Ejemplo 1.- Síntesis de los compuestos de la invención.
A continuación se muestran a modo de ejemplo ilustrativo y no limitativo, algunas rutas sintéticas para obtener los compuestos derivados del hidroxitirosol.
Ejemplos de síntesis de tioderivados del hidroxitirosol (1).
Se han preparado los derivados 2, 3 y 4 por reacción de hidroxitirosol con CCI4 y PPh3, CBr4 y PP i3, y una mezcla de , PPh3 e imidazol, respectivamente (Esquema 1). Así mismo, se han preparado sus correspondientes derivados acetilados 5, 6 y 7, por tratamiento con AC2O (Esquema 1).
Figure imgf000016_0001
Esquema 1
Siendo Ph fenilo, Ac acetilo e ImH imidazol.
Se llevó a cabo la introducción del átomo de azufre por tratamiento con AcSK de los haloderivados 2-7 (Esquema 2).
Figure imgf000016_0002
Esquema 2
La des-O-acilación de 4-(2-acetiltioetil)-1 ,2-diacetoxibenceno (8) en medio ácido condujo, según las condiciones de reacción, al etanotioato de S-2-(3,4- dihidroxifenil)etilo (9), al 4-(2-sulfaniletil)benceno-1 ,2-diol (10) y al disulfuro de bis(3,4-dihidroxifenetilo) (11) (Esquema 2).
Llevando a cabo la des-O-acilación de 8 en medio básico, se obtuvo el disulfuro 11 (Esquema 2). Dado el interés que presenta el disulfuro de hidroxitirosolo 11, que incorpora dos fragmentos de catecol y dos átomos de azufre en su estructura y del que no existe ningún antecedente, se ha llevado a cabo su síntesis por tratamiento de 2-7 con NaSH, en solo dos pasos, con un rendimiento casi cuantitativo (Esquema 3 .
Figure imgf000017_0001
Esquema 3
Se ha llevado a cabo la primera síntesis de selenuros y diselenuros derivados de hidroxitirosol utilizando selenuro y diselenuro de sodio. Se ha generado in situ el selenuro por reacción de selenio elemental con borohidruro de sodio bajo atmósfera inerte. Para la obtención del diselenuro Na2Se2 se hace reaccionar el Na2Se con un equivalente extra de Se elemental.
Las soluciones fuertemente básicas en las que se prepara el selenuro y el diselenuro sódico se neutralizan añadiendo CO2 sólido hasta formar un tampón carbónico/bicarbonato. Sobre estas soluciones se añade bajo atmósfera inerte 5, 6 o 7 formándose el diselenuro de bis(3,4-diacetoxifenetilo) 12 tanto a partir del diselenuro sódico como del selenuro sódico. La desacetilación del diselenuro 12 dio lugar al diselenuro de bis(3,4-diacetoxifenetilo) (13) (Esquema 4).
Figure imgf000017_0002
Esquema 4 La reacción de los haluros de 3,4-dimetoxifenetilo 14a-c con Se2" y con Se2 2" pe
Figure imgf000018_0001
Esquema 5
Estos mismos procedimientos se llevaron a cabo a partir de los haluros 2-4 para obtener directamente el diselenuro, pero los rendimientos de reacción fueron bajos, además de detectarse la presencia de impurezas.
En la desprotección del diselenuro O-metilado 16 se obtuvo el diselenuro 13 (Esquema 6). Sin embargo, a partir del selenuro 15 se obtuvo el bromuro de selenonio 17 Esquema 7).
Figure imgf000018_0002
Esquema 6
Figure imgf000018_0003
Esquema 7
Con objeto de obtener selenoderivados más lipófilos y estables se procedió a la acetilación del diselenuro 13 y del la sal de selenonio 17 obteniéndose 12 y 18, respectivamente (Esquema 8).
Figure imgf000019_0001
Esquema 8
Tioureas y selenoureas derivadas de la dopamina
Se prepararon una serie de tioureas y selenoureas derivadas de la dopamina. Para la síntesis de tioureas se hizo reaccionar la dopamina hidrocloruro 19 con alquil y aril isotiociantos. Por ejemplo, las nuevas tioureas 24-27 se obtuvieron por reacción de los isotiocianatos 20-23 con dopamina hidrocloruro 19, utilizando trietilamina como base y metanol como disolvente (Esquema 9).
Figure imgf000019_0002
Esquema 9
De manera similar, se describen las primeras selenoureas derivadas de la dopamina por reacción de aril isoselenocianatos con dopamina hidrocloruro. Los aril isoselenocianatos se prepararon a partir de las correspondientes formamidas según un procedimiento descrito (López O.; Maza, S.; Ulgar, V.; Maya, I.; Fernández-Bolaños, J. G. Tetrahedron 2009, 65, 2556-2566).
Se obtuvieron las selenoureas 31-33 por reacción de los correspondientes isoselenocianatos 28-30 con clorhidrato de dopamina con rendimientos casi cuantitativos (Esquema 10).
Figure imgf000020_0001
Esquema 10
ENSAYOS DE ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE IN VITRO
A continuación se representan los resultados obtenidos en las pruebas de poder reductor, actividad antirradical DPPH, actividad antirradical ABTS, inhibición de la oxidación primaria e inhibición de la oxidación secundaria para los compuestos 8-11 (Tabla 1), el diselenuro 13, el selenonio 17, las selenoureas 31-33 (Tabla 2) y las tioureas 24-27 (Tabla 3).
Poder reductor del hierro.
Este método se basa en la capacidad de los antioxidantes para facilitar la reducción del hierro. Se empleó de FeC como oxidante. El ión Fe2+ formado en la reacción redox forma un complejo coloreado con el 2,2'-bipiridilo, el cual es medido espectrofotométricamente. El poder reductor (PR) se calculó de la ecuación obtenida por regresión linear para el Trolox, según la modificación del método de Psarra y col.(Psarra, E.; Makris, D. P.; Kallithraka, S.; Kefalas, P. J. Sci. Food Agrie. 2002, 82, 1014-1020.) descrita por Jiménez y col., (Jiménez, A.; Rodríguez, R.; Jaramillo, S.; Rodríguez, G.; Espejo, J ; Guillén, R.; Fernández-Bolaños J.; Heredia, A. J. Agrie. And Food Chem. 2005, 53, 5212- 5217) y se expresa como equivalentes Trolox (mM trolox): PR = 1932 x A490 - 177.48
Actividad antirradical. Captación de radicales DPPH.
La actividad antirradical expresada como EC50 frente al DPPH representa la cantidad de antioxidante necesario para disminuir la concentración de DPPH al 50%. Se utilizó el método de Sánchez-Moreno (Sánchez-Moreno, C; Larrauri, J. A.; Saura-Calixto, F. J. Sci. Food Agrie. 1998, 76, 270-276) con las modificaciones de Jiménez y col. ((Jiménez, A.; Rodríguez, R.; Jaramillo, S.; Rodríguez, G.; Espejo, J.A.; Guillén, R.; Fernández-Bolaños J.; Heredia, A. J. Agrie. And Food Chem. 2005, 53, 5212-5217).
Actividad antirradical. Captación de radicales ABTS.
La actividad antirradical expresada como EC5o frente al ABTS representa la cantidad de antioxidante necesario para disminuir la concentración de ABTS al 50%. Se empleó una modificación de los métodos descritos por Re y col. (Re, R.; Pellegrini, N.; Proteggente, A.; Pannala, A.; Yang, M., Rice-Evans, C. Free Radie. Biol. Med. 1999, 26, 1231-1237 y Güicin. (Güicin, I. Chemico-Biological Interactions, 2009, 179, 71-80)
Inhibición de la oxidación primaria del ácido linoleico en emulsión. Método del tiocianato férrico.
Se empleó el método de Mitsuda y col. (Mitsuda, H.; Yasumoto, K.; Iwami, K. Eiyo to Shokuryo, 1966, 19, 210-214) con algunas modificaciones, basado en la oxidación del ácido linoleico en emulsión, inducida por ABAP y por calentamiento. Durante este proceso se forman radicales peróxido que oxidan el Fe2+ a Fe3+, el cual forma un complejo de color rojo con el anión SCN", el cual se mide espectrofotométricamente. La función de los antioxidantes consiste en reducir el Fe3+, con lo que se evita la formación de complejos coloreados. (Güicin, I. Life Sci. 2006, 78, 803 - 811) Los valores obtenidos se representaron en función del EC50, es decir, la concentración de oxidante a la cual la oxidación primaria desciende en un 50%, expresado en unidades mM.
Inhibición de la oxidación secundaria del ácido linoleico en emulsión. Método del ácido tiobarbitúrico (TBA).
Se utilizó el procedimiento descrito por Moon y col.,(Moon, J.K.; Shinamoto, T. J Agrie Food Chem. 2009, 57, 1655-1666) con algunas modificaciones, basado en la medida de la cantidad de malondialdehído formado por oxidación del ácido linoleico (inducida por ABAP y calentamiento prolongado), que reacciona con ácido tiobarbitúrico (TBA) formando un complejo coloreado. Con este método se mide la concentración de las especies reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS). Los resultados obtenidos se expresaron en función del EC5o en unidades mM.
Figure imgf000022_0001
9 0,84 1 ,87 2,37 1 ,61
10 2,76 0,98 1 ,34 0,80
11 2,58 1 ,18 0,33 0,71
HT 1 ,11 1 ,43 4,92 0,94
En cuanto al poder reductor, el mejor resultado con diferencia se consiguió con el tiol 10, seguido del disulfuro 11 (2,76 mM y 2,58 mM, respectivamente, medido en equivalentes de Trolox), que han mostrado un incremento superior al 200% con respecto al poder reductor de 9 (0,85 mM), es decir, tres veces el del HT. El derivado 9 presenta un poder reductor similar al del HT (1 ,1 mM), mientras que el compuesto 8 no muestra poder reductor.
En relación con la actividad antirradicalaria el mejor resultado se consiguió con el tiol 10, seguido del disulfuro 11. La capacidad antirradicalaria de 9 no es destacable, mientras que el compuesto 8 es inactivo. Respecto a la inhibición de la oxidación primaria, cabe destacar el elevado potencial del disulfuro 11, más de diez veces superior al del HT. También son destacables los datos obtenidos para el tiol 10 y el tioacetato 11, mejores que los del hidroxitirosol. Aunque el derivado 8 mostró inhibición, su valor no mejora al del HT, si bien es destacable al tratarse un derivado con su grupo catecol protegido.
Y respecto a la oxidación secundaria, son los que presentan de nuevo un mayor potencial con respecto al HT (hidroxitirosol).
De los datos de la tabla para la oxidación secundaria, se deduce el elevado poder inhibidor de los compuestos sulfurados, especialmente el tiol 10 y el disulfuro 11 , con ECsode 0,80 y 0,71 mM, respectivamente.
Tabla 2: Valores obtenidos para las pruebas de actividad biológica in vitro del
Figure imgf000023_0001
17 6,02 0,51 0,021 0,42 0,17
31 2,78 0,77 0,055 1 ,34 0,40
32 2,03 0,72 0,059 1 ,09 0,38
33 2,29 0,80 0,028 1 ,99 0,22
HT 1 ,11 1 ,43 0,210 4,92 0,94
El poder reductor de las selenoureas es aproximadamente el doble que el del hidroxitirosol. Para el selenuro 13 y el selenonio 17 se obtuvieron valores hasta más de 5 veces superiores, lo cual indica el elevado potencial reductor de los derivados del selenio.
Los valores de captación de radicales DPPH obtenidos para los selenocompuestos 13, 17 y 31-33 demuestran que todos los selenocompuestos son buenos captadores de radicales a baja concentración, y en todos los casos esta capacidad es mayor que la del hidroxitirosol (HT). Especialmente significativo es el resultado obtenido para el selenonio 17, el cual presenta un potencial de captación de radicales libres casi tres veces mayor que el del HT.
De los datos obtenidos para la captación de radicales ABTS se deduce que al igual que en el caso del DPPH, el selenonio 17 es el que presenta menor EC5o, lo cual indica su elevada capacidad para secuestrar radicales libres, 10 veces mayor que el hidroxitirosol. Los compuestos testados poseen todos un poder de captación de radicales ABTS mucho mayor que el del HT. Dentro de las selenoureas, el derivado 33 es el que presenta un valor superior a sus homólogos selenoureídos
Los resultados obtenidos muestran la elevada capacidad e inhibición de la oxidación primaria del diselenuro 13 y del selenonio 17, más de 10 veces superior al HT. También son destacables los datos obtenidos para las selenoureas 31-33. En todos los casos los valores obtenidos superan a los del hidroxitirosol. Los selenoderivados 13 y 17 muestran un poder de reducción de la oxidación primaria superiores a las selenoureas.
De los datos de la tabla para la oxidación secundaria, se deduce el elevado poder inhibidor de los compuestos del selenio, especialmente el selenonio 17, cuyo EC50 es tan sólo 0,17 mM. Las diferencias entre los valores de EC50 obtenidos para los organoselenoderivados 13 y 31-33 y el hidroxitirosol muestran el magnífico poder antioxidante en cuanto a oxidación secundaria, y por tanto de inhibición de formación de especies reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) de estos compuestos.
Tabla 3: Valores obtenidos para las pruebas de actividad biológica in vitro de las tioureas 24-27.
PR Actividad Actividad Ox. Ox.
Compuesto (mM antirradical antirradical Primaria Secundaria
Trolox) DPPH ABTS EC50 EC50 (mM) EC50 (mM) ECso (mM) (mM)
24 2,30 1 ,12 0,050 2,50 0,55
25 2,38 1 ,01 0,040 1 ,20 0,30
26 1 ,43 1 ,00 0,029 1 ,32 0,36
27 2,86 1 ,20 0,057 1 ,01 0,32
HT 1 ,11 1 ,43 0,210 4,92 0,94
Para el poder reductor de los tioderivados, en todos los casos se obtuvieron valores superiores a los del hidroxitirosol. La tiourea 27 muestra un poder reductor unas 25 veces superior al del HT.
Los valores de EC50 (mM) obtenidos en la prueba de captación de radicales DPPH para las tioureas 24-27 indican que en todos los casos el poder antirradical es superior al del hidroxitirosol.
Los resultados obtenidos para el EC5o (mM) en la prueba de captación de radicales libres ABTS superan con creces a los del HT, entre 3 y 7 veces mejores. La tiourea 26 es la que presenta un mejor valor.
En el ensayo de inhibición de la oxidación primaria para las tioureas 24-27, éstas muestran mejores valores que en el HT, entre 2 y 5 veces mejores que el HT.
Los datos obtenidos en las pruebas de inhibición de la oxidación secundaria del ácido linoleico para las tioureas 24-27 muestran que éstas son entre 1 ,7 y 3 veces mejores que el HT.
ENSAYOS DE ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE EX VIVO Inhibición de peroxidación microsomal
Los productos a ensayar se incubaron, siguiendo el protocolo de Mitchell y col.(Mithchel, J.H.; Gardner, P.T.; McPhail, D.B.; Morrice, P.C.; Collilns, A.R.; Duthie, G.G. Archiv. Biochem. Biophys. 1998, 360, 142-148), con microsomas hepáticos (vesículas que resultan de la fragmentación del retículo endoplasmático de las células del hígado de ratas), tras 20 minutos de estrés oxidativo inducido por el quelato de Fe(ll)-ADP y ascorbato. El daño oxidativo se midió entonces por la formación de TBARS (productos de la degradación oxidativa incluido el malonaldehído procedente de la peroxidacion mediada por radicales libres de los ácidos grasos insaturados de la membrana lipídica): cuanto menor sea la cantidad de TBARS formado, mayor efecto protector en la membrana. Los microsomas obtenidos de ratas deficientes en vitamina E (-VE) se emplearon para determinar el diferente efecto protector de los compuestos a testar, comparándolos con microsomas obtenidos de ratas sometidas a una adecuada dieta en VE (+VE), y con la vitamina E, que es el principal antioxidante lipídico soluble en membranas biológicas (Duthie, G.G.; González, B.M.; Morrice, P.C.; Arthur, J. R. Free Raci. Res. Commun. 1991, 15, 35-40), y finalmente microsomas -VE a los que se adicionó tocoferol en las mismas concentraciones que los compuestos a ensayar.
Los resultados obtenidos en los ensayos de inhibición de oxidación lipídica en microsomas para el tiohidroxitirosol 10, comparados con el HT y el a-tocoferol, utilizando como referencias microsomas de ratas con dieta deficiente en vitamina E (-VE), y ratas con dieta adecuada en vitamina E (+VE), aparecen representados en la Tabla 4.
Tabla 4. Inhibición de la oxidación lipídica en células de microsomas con el tiohidroxitirosol 10, HT y α-tocoferol.
Compuesto Concentración % de inhibición a la oxidación
(mM) lipídica en células de microsomas
Control (-VE) - 0
(+VE) - 72,60
10a 0,250 85,94
10 0,100 84,84
10 0,050 39,72
HTb 0,250 -35,18
HT 0,100 -16,66
HT 0,050 25,8 α-Tocoferol 0,250 91 ,6 α-Tocoferol 0,100 89,51
α-Tocoferol 0,050 81 ,27
Disolvente3 19,07
Disolvente15 27,31
10 disuelto en EtOH/MeOH 1:1. "HT y α-tocoferol disueltos en EtOH.
El tioderivado 10 muestra unos valores de inhibición extraordinarios, prácticamente iguales a los del α-tocoferol, a concentraciones de 0,250 y 0,100 mM. A concentración 0,050 mM los valores de inhibición siguen siendo importantes, alcanzando casi el 40%. En todos los casos estos valores son superiores a los del HT, que a concentraciones elevadas se comporta como prooxidante, favoreciendo la oxidación en lugar de inhibirla.
Los datos obtenidos a partir de las pruebas de inhibición de la peroxidación microsomal para el disulfuro 11 en un amplio rango de concentraciones, comparado con el α-tocoferol se expresan en la Tabla 5.
Tabla 5. Inhibición de la oxidación lipídica en células de microsomas con el disulfuro 11 y α-tocoferol.
Compuesto Concentración % de inhibición a la oxidación
(μΜ) lipídica en células de microsomas
Control (-VE) - 0
(+VE) - 89,25
11a 2000 81 ,23
11 1000 87,11
11 500 86,95
11 250 86,18
11 100 84,8
11 50 78,54
11 40 81 ,42
11 20 70,08
11 5 24,3
11 0,5 -4,82
a-Tocoferola 40 35,97
a-Tocoferol 20 31 ,85
a-Tocoferol 5 6,73
a-Tocoferol 0,5 3,91 11 y α-tocoferol disueltos en EtOH
Los resultados fueron excelentes, ya que para bajas concentraciones el efecto del compuesto es incluso mejor que el del α-tocoferol. Para el rango de concentraciones entre 1000 y 100 μΜ, los microsomas tratados con el tiohidroxitirosol muestran valores análogos a los microsomas +VE.
Los resultados obtenidos para el diselenuro 13 en concentraciones 0,250 mM, 0,100 mM y 0,050 mM, y el selenonio 17 en concentraciones finales de 152 mg/l, 60,8 mg/l y 30,4 mg/l se muestran en las Tabla 6.
Tabla 6. Inhibición de la oxidación lipídica en células de microsomas con el selenuro 13 y el selenonio 17.
Compuesto Concentración ,. * d<> ,nhlbJ?lf n * la∞idación
Control (-VE) - 0
(+VE) - 76,36
13a 0,250 mM 90,95
13 0,10 mM 85,69
13 0,050 mM 84,56
17a 0,250 mM 43,67
17 0,100 mM -5,54
17 0,050 mM -75,93
a-Tocoferola 0,25 mM 92,31
a-Tocoferol 0,100 mM 89,63
a-Tocoferol 0,050 mM 90,37
Disolvente - -11 ,75
13, 17 y a-tocoferol disueltos en EtOH
El selenonio 17 presenta una inhibición significativa a concentración 0,266 0,250 mM, y cuando es menor se convierte en prooxidante, es decir, favorece la oxidación en lugar de inhibirla. Sin embargo, el diselenuro 13 es un potentísimo inhibidor de la oxidación en microsomas a cualquiera de las concentraciones de ensayo, presentando valores análogos a los que proporcionan el α-tocoferol o los microsomas +VE, provenientes de ratas que no han sido sometidas a estrés oxidativo debido a una deficiencia de vitamina E. Los valores obtenidos para las selenoureas 31-33 aparecen representados en la Tabla 7.
Tabla 7. Inhibición de la oxidación lipídica en células de microsomas con las selenoureas 31-33.
Concentración % de inhibición a la oxidación
Compuesto
(mM) lipídica en células de microsomas
Control (-VE) - 0
(+VE) - 78,66
31a 0,25 88,58
31 0,1 77,85
31 0,05 66,76
32a 0,25 88,42
32 0,1 87,55
32 0,05 78,98
33a 0,25 89,11
33 0,1 73,57
33 0,05 64,24
a-Tocoferola 0,25 91 ,94
a-Tocoferol 0,1 93,52
a-Tocoferol 0,05 93,05
Disolvente3 - 33,11
a31-33 y α-tocoferol disueltos en EtOH.
Todas las selenoureas muestran una inhibición prácticamente total a una concentración 0,250 mM, casi idéntica a la que proporciona el tocoferol. A concentración 0,100 mM el efecto inhibidor, aunque menor, continúa siendo alto para las selenoureas 31 y 33, y total para 32. Para disoluciones de selenoureas 0,050 mM en microsomas, se sigue observando una importante inhibición, algo mayor nuevamente para el selenoderivado 32.
En las pruebas realizadas con los microsomas hepáticos tratados con las tioureas 24-27, se utilizaron concentraciones finales de los mismos de 0,250, 0,100 y 0,050 mM. También se emplearon los controles con +VE, y a-tocoferol. Los resultados obtenidos se expresan en la Tabla 9. Tabla 9. Inhibición de la oxidación de microsomas con las tioureas 24-27.
ComDuesto Concentración % de inhibición a la oxidación P lipídica en células de microsomas
Control (-VE) - 0
(+VE) - 87,94
24a 0,25 59,77
24 0,1 56,77
24 0,05 46,73
25a 0,25 34,97
25 0,1 18,79
25 0,05 26,57
26a 0,25 65,59
26 0,1 64,88
26 0,05 61 ,89
27a 0,25 44,54
27 0,1 44,37
27 0,05 34,68
a-Tocoferola 0,25 96,22
a-Tocoferol 0,1 96,47
a-Tocoferol 0,05 95,79
Disolvente9 - 17,51
a24-27 y a-tocoferol disueltos en EtOH.
Las cuatro tioureas ensayadas se comportan como buenos inhibidores de la oxidación microsomal a las concentraciones ensayadas, siendo el potencial inhibidor 26>24>27>25, es decir, mayor con las tioureas preparadas a partir de aminas alifáticas que a partir de aminas aromáticas.
Inhibición de la actividad tirosinasa
Se estudiaron las características inhibidoras de los derivados organoselénicos 13 y 17 sobre la tirosinasa de hongo y se compararon con las del hidroxitirosol. Este enzima cataliza las primeras dos reacciones de la síntesis de la melanina, la hidroxilación de la L-tirosina para dar 3,4-dihidroxifenilalanina (L-DOPA) y la oxidación de la L-DOPA a dopaquinona. Esta quinona es altamente reactiva y puede polimerizar espontáneamente a melanina. Los efectos de los compuestos 13 y 17 sobre las actividades de monofenolasa, utilizando L-tirosina como sustrato y difenolasa sobre L-DOPA, se siguieron mediane la inhibición de la formación del dopacromo mediante medidas espectrofotométricas. Se comprueba que los compuestos ensayados incluido el hidroxitirosol ralentiza la formación de dopacromo cuando L-tirosina se utiliza como sustrato, comportándose por tanto como inhibidor de la actividad monofenolasa de la tirosinasa del hongo.
Cuando se estudia la actividad difenolasa, usando L-DOPA como sustrato en presencia de los compuestos también se confirma que todos producen una reducción de actividad difenolasa, siendo quizás el efecto sobre la actividad monofenolasa más importante que sobre la difenolasa.
En la Figura 1 se representa el efecto inhibidor del diselenuro 13 utilizando tirosina como sustrato. Con los datos de la gráfica puede verse el efecto inhibidor del diselenuro 13 a diferentes concentraciones en el rango 8-55 μΜ, cuando el estudio se realiza durante tiempo prolongado.
SINTESIS DE LOS COMPUESTOS
4-(2-Cloroetil)benceno-1 ,2-diol (2)
Figure imgf000031_0001
A una disolución de hidroxitirosol (100 mg, 0.65 mmol) en CH3CN seco (5 mi) se añadió PPh3 (238.3 mg, 0.91 mmol) y CCI4 (171 μΙ, 1.77 mmol) y se agitó a t.a. durante 10 horas. A continuación, se evaporó el disolvente, el residuo se disolvió en CH2CI2 (8 mi) y se lavó con agua (15 mi). La fase acuosa se lavó con CH2CI2 (3 x 7 mi) y el conjunto de las fracciones orgánicas se secó con MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a sequedad, resultando un simpo de color rojo vino que se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt- hexano 1 :5). Se obtuvo un sólido incoloro que corresponde al derivado clorado 2.
Rendimiento: 67 mg, 60%; RF 0.39 (hexano-AcOEt 2:1); p.f.: 102-104 °C.
|R Vmax 3448, 3321 , 2953, 2924, 2865, 1617, 1531 , 1451 , 1378,
1280, 1273 crn-1.
1H-RMN (300 MHz, CD3OD): δ (ppm) 6.69 (d, 1 H, J5,6 = 8.0 Hz, H-6), 6.66
(d, 1 H, J3,5 = 2.0 Hz, H-3), 6.54 (dd, 1 H, H-5), 3.64 (t, 2H, J ,z = 7.5 Hz, CH2CI), 2.87 (t, 2H, CH2Ar).
13C-RMN (75.5 MHz, CD3OD): δ (ppm) 146.2, 145.1 (C-1 , C-2), 131.3 (C-4),
121.2 (C-5), 116.9 (C-3), 116.4 (C-6), 46.1 (CH2CI), 39.8 (CH2Ar).
EIMS m/z 172 ([M-H]", 54%).
HREIMS m/z calculado para [Mf C8H9CI02: 172.0291. Encontrado:
172.0296.
4-(2-Bromoetil)benceno-1 ,2-diol (3)
Figure imgf000032_0001
Una disolución enfriada a 0 °C de hidroxitirosol (500 mg, 3.246 mmol), tetrabromuro de carbono (6.491 mmol, 1.958 g, 2 equiv.), trifenilfosfina (9.737 mmol, 2.688 g, 3 equiv.) y ascorbato sódico (3.246 mmol, 642.8 mg, 1 equiv.) en DMF (10 mi), bajo atmósfera de argón, se agitó una hora a 0 °C, y seguidamente otras 7 horas a ta.. Se concentró a sequedad, y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :20→ AcOEt- hexano 1 :5), obteniéndose el bromuro como un sólido.
Rendimiento 5.64 mg, 80 %; RF 0.28 AcOEt/Hex (1 :2); p.f.: 76-78 °C.
IR (KBr): vmax: 3439, 3323, 2926, 1617, 1531 , 1449, 1375, 1269, 1210,
1122, 944, 863, 820, 790, 760 crn-1.
1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6.81 (d, J5,e 8.0 Hz, 1H, H-6), 6.73 (d, J3,5 1 -8
Hz, 1 H, H-3), 6.65 (dd, J5,6 8.0 Hz, J3,5 1.8 Hz, 1 H, H-5), 5.20 (s.a., 2H, OH), 3.51 (t, Jr,2. 7.6 Hz, 2H, CH2Br), 3.04 (t, Jv,2- 7.6 Hz, 2H, CH2Ar), ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, CDCI3): 143.6 (C-2), 142.3 (C-1), 132.1 (C-4), 121.2 (C-
5), 1 15.8 (C-6), 1 15.5 (C-3), 38.7 (CH2Br), 33.2 (CH2Ar) ppm.
EIMS m/z 346 ([M]+, 27%), 137 ([M-Br]+, 23%).
HREIMS m/z calculado para C8H9 79BrO2 ([M+]+): 215.9786. Encontrado:
215.9793.
4-(2-Yodoetil)benceno-1 ,2-diol (4)
Figure imgf000033_0001
A una disolución de hidroxitirosol (300 mg, 1.95 mmol) en THF seco (5 mi) y atmósfera inerte, se añadió PPh3 (510 mg, 1.95 mmol), imidazol (265 mg, 3.89 mmol), l2 (741 mg, 2.92 mmol) y tamiz molecular 4Á y se calentó a reflujo durante 3 horas. A continuación, se filtró la mezcla de reacción, se evaporó el disolvente, el residuo resultante se disolvió en AcOEt (20 mi) y se añadió una disolución saturada de NaHCO3 (5 mi) y una disolución saturada de Na2S2O3 (5 mi), agitándose durante unos minutos hasta desaparición del color amarillento. La fase orgánica se separó de la acuosa y esta última se extrajo con AcOEt (3 x 15 mi). El volumen total de fase orgánica se secó con MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :5→1 :3) y se obtuvo un sólido incoloro que corresponde al derivado yodado 4.
Rendimiento: 356 mg, 69%; RF 0.42 (hexano-AcOEt 2:1); p.f.: 110-112 °C.
IR vmax 3486, 3332, 3033, 2949, 1732, 1601 , 1515, 1454, 1346, 1275 cm"1.
1H-RMN (300 MHz, CD3OD): δ (ppm) 6.69 (d, 1 H, J5,6 = 8.0 Hz, H-6), 6.64
(d, 1 H, J3,5 = 2.0 Hz, H-3), 6.52 (dd, 1 H, H-5), 3.30 (t, 2H, Jr,2. = 7.7 Hz, CH2I), 2.97 (t, 2H, CH2Ar). (75.5 MHz, CD3OD): δ (ppm) 146.2, 145.0 (C-1 , C-2), 133.9 (C-4), 120.7 (C-5), 1 16.4 (C-3, C-6), 41.0 (CH2Ar), 39.8 (CH2I).
EIMS m/z 264 ([M]+, 32%).
HREIMS m/z calculado para [M]+ C8H9IO2: 263.9647. Encontrado:
263.9648.
1 ,2-Diacetoxi-4-(2-cloroetil)benceno (5)
Figure imgf000034_0001
Una disolución de 2 (55 mg, 0.32 mmol) en Ac20-Py 1 :1 (2.0 mi) se mantuvo a 5 °C durante 24 h. A continuación, se eliminó el disolvente a presión reducida, coevaporando con tolueno y EtOH. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :5), aislándose 4 en forma de simpo incoloro.
Rendimiento: 65 mg, 79%; Rf 0.46 (hexano-AcOEt 2:1).
IR vmax 3369, 3220, 2962, 2919, 2380, 2346, 1764, 1502, 1428,
1371 , 1259, 1201 , 1177, 1104, 1007 crn"1.
H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ (ppm) 7.13 (d, 1 H, J5,6 = 8.2 Hz, H-6), 7.09
(dd, 1 H, J3,5 = 2.1 Hz, H-5), 7.06 (d, 1 H, H-3), 3.69 (t, 2H, J ,2- = 7.4 Hz, CH2CI), 3.05 (t, 2H, CH2Ar), 2.28, 2.27 (2s, 6H, 2CH3CO).
13C-RMN (75.5 MHz, CDCI3): δ (ppm) 168.4, 168.3 (2CH3CO), 142.1 , 141.1
(C-1 , C-2), 137.0 (C-4), 127.1 (C-5), 123.9 (C-3), 123.5 (C-6), 44.5 (CH2CI), 38.5 (CH2Ar), 20.7 (2CH3CO).
EIMS m/z 256 ([M]\ 5%).
HREIMS m/z calculado para [M]+ Ci2Hi3CIO4: 256.0502. Encontrado:
256.0504.
1 ,2-Diacetoxi-4-(2-bromoetil)benceno (6)
Figure imgf000035_0001
A una disolución del 4-(2-bromoetll)benceno-1 ,2-diol 2 (250 mg, 0.856 mmol) en piridina (2 mi) a 0 °C, se fue añadiendo gota a gota anhídrido acético (2 mi). Se agitó a 0 °C durante una hora, y se dejó en congelador toda la noche. Se concentró a sequedad a presión reducida. Se disolvió en agua destilada (40 mi) y se extrajo con 3 x 40 mi de diclorometano. La fracción orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :20 → AcOEt-hexano 1 :5), obteniéndose un aceite amarillento.
Rendimiento 237.1 mg, 92 %. RF: 0.42 AcOEt/Hex (1 :2).
IR vmax: 2925, 2848, 1766, 1591 , 1507, 1427, 1368, 1256, 1203, 1175,
1 107, 1010, 901 cnY1.
H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7.14 (d, J5,6 8.1 Hz, 1 H, H-5), 7.10 (d, J3,5 1.7
Hz, 1 H, H-3), 7.06 (dd, J3,5 1.7 Hz, J5,6 8.1 Hz, 1 H, H-5), 3.54 (t, J ,2.
7.6 Hz, 2H, CH2Br), 3.15 (t, Jr,27.6 Hz, 2H, CH2Ar), 2.28 (2 s, 2 x
3H, OAc) ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, CDCI3): 168.2 y 168.1 (2 C=0, OAc) 142.0 (C-2), 140.9
(C-1), 137.6 (C-4), 126.7 (C-5), 123.6 y 123.4 (C-3 y C-6), 38.6 (CH2Br), 32.0, (CH2Ar) 20.6 (2 CH3, OAc) ppm.
FABMS m/z 301 ([M+H]+, 45%), 221 ([M-Brf, 20%).
HRFABMS Cale, para Ci2H14 79BrO4 ([M+H]+): 301.0075. Encontrado: 301.0078.
1 ,2-Diacetoxi-4-(2-yodoetil)benceno (7)
Figure imgf000035_0002
Una disolución de 5 (300 mg, 1.14 mmol) en Ac2O-Py 1 :1 (5.0 mi) se mantuvo a 5 °C durante 24 h. A continuación, se eliminó el disolvente a presión reducida, coevaporando con tolueno y EtOH. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :4), aislándose 7 en forma de simpo amarillento.
Rendimiento: 267 mg, 75%; f?F 0.51 (hexano-AcOEt 2:1).
IR vmax 3369, 3229, 2962, 2938, 2350, 1759, 1589, 1502, 1429,
1366, 1255, 1192, 11 13, 1012 ατϊ1.
1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ (ppm) 7.13 (d, 1 H, J5,6 = 8.2 Hz, H-6), 7.07
(dd, 1 H, J3,5 = 2.0 Hz, H-5), 7.03 (d, 1 H, H-3), 3.34 (m, 2H, J ,2 =
7.7 Hz, CH2I), 3.17 (m, 2H, CH2Ar), 2.28, 2.28 (2s, 6H, 2CH3CO). 13C-RMN (75.5 MHz, CDCI3): δ (ppm) 168.3, 168.3 (2CH3CO), 142.1 , 141.0
(C-1 , C-2), 139.4 (C-4), 126.5 (C-5), 123.6 (C-6), 123.4 (C-3), 39.8
(CH2Ar), 20.7 (2CH3CO), 4.3 (CH2I).
EIMS m/z 348 ([M]\ 9%).
HREIMS m/z calculado para [M]+ C12H13IO4: 347.9859. Encontrado:
347.9865.
4-(2-Acetiltioetil)-1 ,2-diacetoxibenceno (8)
Figure imgf000036_0001
A una disolución de 7 (1 equiv.) en butanona se añadió tioacetato potásico (1.4 equiv.) y se calentó a reflujo durante 2 h. A continuación, se eliminó el disolvente a presión reducida, el residuo se disolvió en AcOEt y se lavó con agua. La fase acuosa se extrajo con AcOEt y el conjunto de los extractos orgánicos se secó con MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a sequedad. El crudo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :6), aislándose 6 en forma de sólido de color pardo rojizo.
Rendimiento: 111 mg, 76%; RF 0.36 (hexano-AcOEt 2:1), p.f.: 39-41 °C.
IR vmax 3374, 3316, 3239, 2977, 2919, 1774, 1682, 1502, 1424,
1366, 1264, 1192, 1133, 1104, 1012, 896, 623 crn" . 1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ (ppm) 7.11-7.05 (m, 3H, H-3, H-5, H-6), 3.09
(m, 2H, CH2S), 2.85 (m, 2H, CH2Ar), 2.33 (s, 3H, CH3COS), 2.28, 2.27 (2s, 6H, 2CH3CO).
13C-RMN (75.5 MHz, CDCI3): δ (ppm) 195.6 (SCOCH3), 168.4, 168.3
(2CH3CO), 142.0, 140.7 (C-1 , C-2), 138.9 (C-4), 126.8 (C-5), 123.6 (C-6), 123.4 (C-3), 35.4 (CH2S), 30.7 (CH2Ar), 20.7 (2CH3CO).
EIMS m/z 296 ([M]\ 1 %).
HREIMS m/z calculado para [M]+ C12H13I04: 296.0718. Encontrado:
296.0714.
Etanotioato de S-2-(3,4-dihidroxifenil)etilo (9)
Figure imgf000037_0001
A una disolución de 8 (100 mg, 0.34 mmol) en MeOH (2.0 mi) se añadió HCI 2N
(1.0 mi) y, en atmósfera de argón, se agitó a t.a. durante 12 h en la oscuridad.
A continuación, se neutralizó con una disolución saturada de NaHC03 hasta pH
5 y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :5→1 :3), aislándose 7 en forma de sirupo de color pardo rojizo.
Rendimiento: 58 mg, 86%; RF 0.35 (hexano-AcOEt 2:1).
IR vmax 3335, 2924, 2850, 2375, 2346, 1715, 1652, 1604, 1517,
1444, 1366, 1279, 1250, 1192, 1114, 1051 crn"1.
1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ (ppm) 6.79 (d, 1 H, J5\6' = 8.1 Hz, H-5'), 6.74
(d, 1 H, J2.,6' = 1.9 Hz, H-2'), 6.62 (dd, 1 H, H-6'), 5.70 (s.a., 2H, 20H), 3.06 (m, 2H, CH2S), 2.71 (m, 2H, CH2Ar), 2.34 (s, 3H, CH3CO).
13C-RMN (75.5 MHz, CDCI3): δ (ppm) 197.3 (SCOCH3), 143.7, 142.4 (C-3',
C-4'), 133.0 (C-1 '), 121.1 (C-6'), 123.6 (C-2'), 123.4 (C-5'), 35.0 (CH2S), 30.8 (CH2Ar), 30.8 (CH3CO).
EIMS m/z 212 ([M]\ 6%). HREIMS m/z calculado para [M]+ C 0Hi2O3S: 212.0507. Encontrado: 212.0506.
4-(2-Sulfaniletil)benceno-1 ,2-diol (10)
Figure imgf000038_0001
A una disolución del compuesto 8 (100 mg, 0.34 mmol) en MeOH (2.0 mi) se añadió HCI 2N (1.0 mi) y, en atmósfera de argón y en la oscuridad, se agitó calentando a 40 °C durante 34 h. A continuación, se neutralizó con una disolución saturada de NaHCO3 hasta pH 5 y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :5), aislándose el compuesto 10 en forma de sólido amarillento.
Rendimiento: 57 mg, 100%; Rf 0.30 (hexano-AcOEt 2:1), p.f.: 77-78 °C.
IR vmax 3466, 3347, 3132, 3030, 2962, 2928, 2904, 2850, 2568,
2360, 1658, 1609, 1517, 1438, 1352, 1273, 1250, 1187, 1 134,
1104, 958 crn"1.
1H-RMN (300 MHz, (CD3)2CO): δ (ppm) 6.74 (d, 1 H, J5,e = 8.0 Hz, H-6),
6.71 (d, 1 H, J3,5= 2.0 Hz, H-3), 6.55 (dd, 1 H, H-5), 3.06 (2s.a., 2H, 2OH), 2.72 (m, 4H, CH2S, CH2Ar), 1.64 (t, 1 H, J ,SH = 7.2 Hz, SH).
13C-RMN (75.5 MHz, (CD3)2CO): δ (ppm) 145.8, 144.4 (C-1 , C-2), 132.8 (C- 4), 120.7 (C-5), 116.5 (C-6), 116.0 (C-3), 40.5 (CH2S), 26.7 (CH2Ar).
EIMS m/z 170 ([M]+, 37%).
HREIMS m/z calculado para [M]+ C8Hi0O2S: 170.0402. Encontrado:
170.0396.
Disulfuro de bis(3,4-dihidroxifenetilo) (11)
Figure imgf000039_0001
A una suspensión de NaHS (170 mg, 3.03 mmol) en DMF y en atmósfera de argón, se añadió una disolución de 3 (200 mg, 0.76 mmol) en DMF y se calentó a 55 °C en la oscuridad durante 5 h. Posteriormente, se concentró a sequedad y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna (CH2Cl2-MeOH
20:1), aislándose 9 en forma de simpo de color pardo-rojizo.
Rendimiento: 128 mg, 90%; RF 0.37 (CH2CI2-MeOH 10:1).
IR vmax 3335, 2924, 2850, 2375, 2346, 1715, 1653, 1605, 1517,
1444, 1366, 1279, 1250, 1192, 1114, 1051 cm"1.
H-RMN (300 MHz, (CD3OD): δ (ppm) 6.68 (d, 2H, J5,6 = 8.0 Hz, H-6), 6.64
(d, 2H, J3,5 = 2.0 Hz, H-3), 6.51 (dd, 2H, H-5), 4.93 (s.a., 4H, 40H) 2.84 (m, 8H, 2CH2S, 2CH2Ar).
C-RMN (75.5 MHz, (CD3OD): δ (ppm) 146.2, 144.7 (C-1 , C-2), 133.2 (C-
4), 120.9 (C-5), 1 16.7 (C-6), 116.4 (C-3), 41.6 (CH2S), 36.1 (CH2Ar).
EIMS m/z 338 ([M]+, 16%).
HREIMS m/z calculado para [M]+ C16H18O4S2: 338.0647. Encontrado:
338.0651.
Diselenuro de bis(3,4- iacetoxifenetilo) (12)
Figure imgf000039_0002
A una disolución de selenio negro (150 mg, 1.901 mmol) en etanol (1 1 mi), bajo atmósfera de argón, se fue añadiendo borohidruro sódico, en pequeñas porciones, hasta que el color de la disolución cambió a blanco y además persistió. El exceso de basicidad se neutralizó con C02 sólido, y a continuación se adicionó 4-(2-bromoetil)benceno-1 ,2-diacetox¡ 6 (520.2 mg, 1.728mmol) disuelto en tetrahidrofurano (1 1 mi) y se agitó en oscuridad a temperatura ambiente bajo atmósfera de argón durante 2.5 horas. Se concentró a sequedad. Se disolvió en agua destilada (75 mi) y diclorometano (75 mi). Se separó la capa orgánica y la acuosa se extrajo con 2x75 mi de diclorometano. La fracción orgánica se lavó con 2x75 mi de cloruro sódico saturado, se secó sobre MgS04 y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :20→AcOEt-hexano 1 :3), obteniéndose un sólido amarillo.
Rendimiento 265 mg, 51 %; RF\ 0.22 AcOEt-Hex (1 :2); p.f.: 98-100 °C.
IR vmax: 1768, 2914, 2851 , 1502, 1427, 1368, 1258, 1192, 1124,
10107, 894, 825, 669 cm"1.
1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7.1 1 (d, J5,6 8.1 Hz, 2H, H-5), 7.09 (d, J2,e 1.6
Hz, 2H, H-2), 7.05 (dd, J5,6 8.1 Hz, J2,6 1.7 Hz, 2H, H-6), 3.12 (m,
4H, CH2Se), 3.03 (t, 4H, CH2Ar), 2.28 (2 s, 2x3H, OAc) ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, CDCI3): 168.3 y 168.2 (2 C=0, OAc) 142.0 (C-3), 140.5
(C-4), 139.6 (C-1), 126.6 (C-6), 123.3 (C-2 y C-5), 36.9 (CH2Se),
29.9, (Ctf2Ar), 20.6 (4 CH3, OAc) ppm.
FABMS m/z 521 ([M - H]\ 12%), 545 ([M+Na]+, 5%).
HRFABMS Cale, para C24H26 O2 80SeNa ([M+Na]+): 545.0688 Encontrado:
545.0691.
Diselenuro de bis ( -dihidroxifenetilo) (13)
Figure imgf000040_0001
Procedimiento A:
A una disolución de diselenuro de bis (3,4-diacetoxifenetilo) 12 (150 mg, 0.25 mmol) en diclorometano-metanol 1 :1 (7 mi) se añadió una cantidad catalítica de K2CO3, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente, en oscuridad y en atmósfera de argón durante 1 h. Se neutralizó el medio de reacción con ácido acético diluido hasta pH 6 y se concentró a sequedad. Rendimiento 55 mg, 51 %. Procedimiento B:
A una disolución enfriada a -78 °C de diselenuro de bis(3,4- dimetoxifenetilo) 16 (250 mg, 0.512 mmol), en diclorometano seco (8.5 mi), en atmósfera de argón y con tamiz molecular de 4 A, se añadió tribromuro de boro (2.046 mmol, 193 μΙ_) y la mezcla se agitó en oscuridad a -78 °C durante 30 minutos, y una hora a temperatura ambiente. Se adicionó entonces 1 mi de agua y se agitó 15 minutos más. Se concentró a sequedad. El residuo obtenido se disolvió en metanol y se filtró sobre celita, evaporando posteriormente el disolvente en el rotavapor. Rendimiento 122 mg, 55 %.
El residuo obtenido por cualquiera de los dos métodos se purificó mediante cromatografía en columna (CH2Cl2→CH2Cl2-MeOH 25:1), obteniéndose un sólido amarillento. RF 0.39. CH2CI2-MeOH (10:1). p.f.: 104-108 °C.
IR vmax: 1281 , 3451 , 3249, 2918, 1605, 1524, 1439, 1374, 1253, 1179,
1119, 927, 864, 812, 786, 656 crn"1.
H-RMN (300 MHz, MeOH-d4): δ 6.68 (d, J5,6 8.0 Hz, 2H, H-6), 6.64 (d, J3,5
2.0 Hz, 2H, H-3), 6.51 (dd, J3,5 2.0 Hz, J5,6 8.0 Hz, 2H, H-5), 3.09 (m, 4H, CH2Se), 2.87 (m, 4H, CH2Ar), ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, MeOH-c/4): 146.3 (C-2), 144.8 (C-1), 134.0 (C-4), 120.6
(C-5), 111.6 y 111.4 (C-6, C-3), 38.0 (CH2Se), 32.3, (CH2Ar) ppm.
CIMS m/z 435 ([M + H]+, 2%, 217 ([M/2]\ 30%).
HRCIMS Cale, para C8H9O2 80Se ([M/2]+): 216.9776. Encontrado: 216.9768.
Selenuro de bis (3,4-dimetoxifenetilo) (15)
Figure imgf000041_0001
A una disolución de selenio negro (150 mg, 1 ,90 mmol), en etanol (12 mi) se añadió borohidruro sódico poco a poco hasta que persistió la tonalidad incolora. Se adicionó bromuro de 3,4-dimetoxifenetilo 14 (1 ,726 mmol, 436,4 mg) y la reacción se agitó en oscuridad a temperatura ambiente en atmósfera de argón durante 3 horas. Se concentró a sequedad, se disolvió en agua (75 mi) y diclorometano (75 mi). Se separó la capa orgánica, y la acuosa se extrajo con 2x75 mi de CH2CI2. La fracción orgánica se lavó con 75 mi de cloruro sódico saturado, se secó con sulfato magnésico y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :20 AcOEt- hexano 1 :3), obteniéndose un sólido amarillento.
Rendimiento339 mg, 98 %. RF 0.22 AcOEt-Hex (1 :3). p.f.: 69-72 °C.
IR vmax: 1024, 2926, 2838, 1587, 1510, 1441 , 1240, 1138, 1024, 857,
807, 765 cm"1.
1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6.80 (d, J5,6 8.1 Hz, 2H, H-5), 6.73 (m, 4H, H-2 y H-6), 3.87 y 3.85 (2 s, 4x3H, OMe), 2.90 (m, 4H, CH2Se), 2.78 (m, 4H, CH2Ar), ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, CDCI3): 148.9 (C-3), 147.6 (C-4), 133.9 (C-1), 120.2 (C- 6), 111.7 y 111.3 (C-5 y C-2), 55.9 (OMe), 36.8 (CH2Se), 25.4, (CH2Ar) ppm.
EIMS m/z 409 ([M - H]+, 10%), 433 ([M+Na]+, 30%).
HREIMS Cale, para C20H26O4Se ([M+Na]+): 433.0888. Encontrado: 433.0894.
Diselenuro de bis(3 -dimetoxifenetilo) (16)
Figure imgf000042_0001
A una suspensión enfriada a 0 °C de selenio negro (300 mg, 3.800 mmol) y NaOH (8.360 mmol, 334.4 mg) en tetrahidrofurano-agua 100:1 (13.5 mi), bajo atmósfera de argón, se fue añadiendo borohidruro sódico (8.360 mmol, 316.2 mg) en pequeñas porciones. Finalizada la adición se agitó a 0 °C durante 30 minutos, y otros 30 minutos a temperatura ambiente. Se agregó selenio negro (3.800 mmol, 300 mg), y se continuó la agitación en oscuridad durante 3 horas. Se añadió el bromuro de 3,4-dimetoxifenetilo 14 (1.902 mmol, 480.1 mg) disuelto en tetrahidrofurano (9 mi) y se agitó a temperatura ambiente en oscuridad y atmósfera inerte 2 horas más. Se concentró a sequedad, se disolvió en agua (75 mi) y diclorometano (75 mi). Se separó la capa orgánica, y la acuosa se extrajo con 2x75 mi de CH2CI2. La fracción orgánica se lavó con 75 mi de cloruro sódico saturado, se secó con sulfato magnésico y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt-hexano 1 :20→AcOEt-hexano 1:3), obteniéndose un sólido amarillento.
Rendimiento 437 mg, 94 %. RF: 0.22 AcOEt-hexano (1 :3). p.f.: 74-76 °C.
IR vmax: 1025, 2938, 2838, 1587, 1515, 1451 , 1418, 1233, 1140, 852,
814, 766 crn"1.
1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6.80 (d, J5,6 7.9 Hz, 2H, H-5), 6.74 (m, 4H, H-2 y H6), 3.87 y 3.85 (2s, 4x3H, OMe), 3.15 (m, 4H, CH2Se), 2.99 (m, 4H, CH2Ar), ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, CDCI3): 148.9 (C-3), 147.6 (C-4), 133.4 (C-1), 120.4 (C- 6), 111.8 y 111.3 (C-2 y C-5), 55.9 (OMe), 37.2 (CH2Se), 31.1 , (CH2Ar) ppm.
FABMS m/z 491 ([M+H]\ 5%), 513 ([M+Na]+, 18%).
HRFABMS Cale, para C24H26O880Se2Na ([M+Na]+): 513.0054. Encontrado:
513.0059.
Bromuro de tris(3,4-dihidroxifenetil)selenonio (17)
Figure imgf000043_0001
A una disolución enfriada a -78 °C de selenuro de bis (3,4-dimetoxifenetilo) 15 (250 mg, 0.623 mmol) en diclorometano seco (8.5 mi), en atmósfera de argón y con tamiz molecular de 4 A, se añadió tribromuro de boro (2.489 mmol, 235 μΙ_) y la mezcla se agitó en oscuridad a -78 °C durante 30 minutos, y una hora a temperatura ambiente. Se adicionó entonces 1 mi de agua y se agitó 15 miuntos más. Se concentró a sequedad. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2→CH2CI2-MeOH 25:1).
Rendimiento 238 mg, 67 %. RF: 0.39 CH2CI2-MeOH (10:1).
IR vmax: 1182, 3325, 2928, 2825, 1701 , 1604, 1507, 1438, 1347, 1278,
1104, 1012, 783 crrf1.
1H-RMN (300 MHz, MeOD): δ 6.67 (d, J5,6 8.0 Hz, 2H, H-6 y H-6'), 6.63 (d,
J3,5 2.0 Hz, 2H, H-3, H-3'), 6.50 (dd, J3,s 2.0 Hz, J5,e 8.0 Hz, 2H, H5 y H-5'), 2.76 (m, 4H, CH2Se), 2.68 (m, 4H, CH2Ar), ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, MeOD): 146.1 (C-2 y C-2'), 144.6 (C-1 y C-1'), 134.6 (C-
4 y C-4'), 120.7 (C-5 y C-5'), 116.6 y 116.3 (C-6, C6', C-3 y C-3'),
37.9 (CH2Se), 26.1 , (CH2-Ar) ppm.
CIMS m/z 491 ([M+], 10%).
HRFABMS Cale, para C24H27O6 80Se ([M]+): 491.0967. Encontrado: 49 .0973. Bromuro de tris (3,4-diacetoxifenetil)selenonio (18)
Figure imgf000044_0001
A una disolución de bromuro de tris(3,4-diacetoxifenetil)selenonio 17 (50 mg, 0.0877 mmol) y en piridina (1 mi), enfriada a 0 °C se añadió anhídrido acético (1 mi) y la mezcla se agitó en oscuridad a durante 15 minutos. Se mantuvo en el congelador durante toda la noche. Se añadió 1 mi de H2O y se concentró a sequedad. Se purificó por cromatografía en columna (Hexano→AcOEt/Hexano 1 :3), obteniéndose 18 como un aceite viscoso amarillento.
Rendimiento 55 mg, 76 %. RF.: 0.50 AcOEt-hexano (1 :1). IR vmax: 1 173, 2928, 2851 , 1763, 1502, 1426, 1370, 1254, 1203, 1 173, 1 104, 1008, 828 cm-1.
H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7.09 (m, 6H, H-5 y H-2), 7.02 (m, 3H, H-6),
2.94 (m, 6H, CH2Se), 2,78 (m, 6H, CH2Ar), 2.28 (s, 3x3H, OAc) ppm.
C-RMN (75.5 MHz, CDCI3): 168.3 y 168.2 (2 C=0, OAc) 141.9 (C-3), 140.5
(C-4), 140 (C-1), 126.6 (C-6), 123.3 (C-2 y C-5), 36.5 (CH2Se), 24.6, (CH2Ar) 20.6 (4 CH3, OAc) ppm.
CIBMS m/z 743 ([M]+, 10%).
HREIMS Cale, para C36H39O12 80Se ([M]+): 743.1607. Encontrado: 743.1660
Procedimiento general para la obtención de tioureas derivadas del hidroxitirosol.
A una disolución de clorhidrato de dopamina (300 mg, 1.582 mmol) y del isotiocianato correspondiente (1.898 mmol, 1.2 equivalentes) y en metanol (20 mi) se añadió trietilamina (1.582 mmol, 220 μΙ_) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente y bajo atmósfera de argón durante una hora. Se concentró a sequedad, y el bruto de reacción se purificó por cromatografía en columna.
1-Butil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (24)
Figure imgf000045_0001
Se obtuvo a partir del butilisotiocianato. Se purificó por cromatografía en columna (CH2CI2→CH2CI2/MeOH 25:1), obteniéndose 24 como un sólido blanco.
Rendimiento 177 mg, 42 %. RF: 0.16 CH2CI2-MeOH (20:1). p.f.: 95-96 °C.
IR vmax: 1514, 3220, 3055, 2959, 2923, 2866, 1607, 1571 , 1514, 1455, 1347, 1278, 1199, 966, 781 crrf1.
(300 MHz, MeOH-d4): δ 6.68 (m, 2H, H-2 y H-5), 6.54 (dd, J2,6 2.0 Hz, J5,6 8.0 Hz, 1 H, H-6), 3.62 (m, 2H, ArCH2CH2NH), 3.38 (m, 2H, CH3(CH2)2CH2), 2.71 (t, JCH2,CH2 7.2 Hz, 2H, CH2Ar), 1.51 (m, 2H, CH3CH2CH2, 1.34 (m, 2H, CHs-CH^), 0.94 (t, 3H, JCH3,CH2 7.3 Hz, CH3) ppm.
(75.5 MHz, MeOH-ck): 182.8 (C=S), 146.3 (C-3), 144.8 (C-4), 132.0 (C-1), 121.1 (C-6), 116.9 y 116.4 (C-2 y C-5), 46.9 (ArCH2CH2NH), 44.9 (NHCH2-Alifático), 35.7 (CH2Ar), 32.9 (CH2-CH2-CH3), 21.1 (CH2-CH3) ppm. m/z 269 ([M+H]\ 100%), 211 ([M-Bu]+, 3%).
Cale, para C13H21N202S ([M+Na]+): 269.1324. Encontrado: 269.1324
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tol¡l) tiourea (25)
Figure imgf000046_0001
Se obtuvo a partir del p-tolilisotiocianato. Se purificó por cromatografía en columna (CH2CI2→CH2CI2-MeOH 25:1), obteniéndose 25 como un sólido blanco.
Rendimiento 354 mg, 74 %. f?F.: 0.25 CH2CI2-MeOH (20:1). p.f.: 151-153 °C.
IR (KBr): vmax: 1509, 3351 , 3190, 2971 , 2922, 2870, 1598, 1542, 1448,
1349, 1276, 1188, 781 crn"1.
1H-RMN (300 MHz, MeOH-d4): δ 7.13 (m, 2H, Η-3'y H-5'), 6.99 (m, 2H, Η-2'y
H-6'), 6.67 (d, J5,6 8.0 Hz, 1 H, H-5), 6.65 (d, J2,6 2.0 Hz, 1 H, H-2), 6.50 (d, J2I6 2.0 Hz, J5,6 8.0 Hz, 1 H, H-6), 3.72 (t, JCH2,CH2 7.0 Hz, 2H, CH2NH), 2.74 (t, JCH2.CH2 7.0 Hz, 2H, CH2Ar), 2.31 (s, 3H, CH3) ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, MeOD): 181.7 (C=Se), 146.4 (C-3), 144.9 (C-4), 137.3
(C-1'), 136.2 (C-4'), 131.8 (C-1), 131.0 (C-3' y C-5'), 126.0 (C-2' y C- 6'), 121.1 (C-6), 116.9 y 116.5 (C-2 y C-5), 47.2 (CH2NH), 35.2 (CH2Ar) 21.0 (CH3), ppm.
CIMS m/z 303 [M+H]+, 18%.
HRCIMS Cale, para C16H19N202S ([M+H]+): 303.1167. Encontrado: 303.1156
1 -Bencil-3-(3,4-dihidroxifenetil)tiourea (26)
Figure imgf000047_0001
Se obtuvo a partir del bencilisotiocianato. Se purificó por cromatografía en columna (CH2CI2-→CH2CI2-MeOH 25:1), obteniéndose 26 como un sólido blanco.
Rendimiento 297 mg, 62 %. RF: 0.25 CH2CI2-MeOH (20:1). p.f.: 136-138 °C.
IR vmax: 1510, 3319, 3267, 2929, 2860, 1599, 1572, 1510, 1450, 1337,
1281 , 1107, 1013, 804 cm'1.
1H-RMN (300 MHz, MeOH-d4): δ 7.28 (m, 5H, Ph), 6.68 (m, 2H, H-2 y H-5),
6.52 (dd, J2,6 1.8 Hz, J5,e 8.0 Hz, 1H, H-6), 4.66 (sa, 2H, ArCH2NH) 3.66 (sa, 2H, CH2NH), 2.71 (t, JCH2,CH2 7.2 Hz, 2H, CH2Ar), ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, MeOH-c/4): 183.4 (C=S), 146.3 (C-3), 144.8 (C-4) 139.9
(C-1'), 131.9 (C-1), 129.5 y 128.4 (C-2', C-3', C-5' y C-6'), 128.2 (C- 4'), 121.1 (C-6), 116.9 y 116.4 (C-2 y C-5), 48.2 (ArCH2NH), 46.9 (CH2NH), 35.7 (CH2Ar) ppm. CIMS m/z 303 ([M+H]+, 27%)
HRCIMS Cale, para C 6H19N202S ([M+H]+): 303.1167. Encontrado: 303.1167
1-Fenil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (27)
Figure imgf000048_0001
Se obtuvo a partir del fenilisotiocianato. Se purificó por cromatografía en columna (CH2Cl2→CH2Cl2-MeOH 40:1), obteniéndose 27 como un sólido blanco.
Rendimiento 420 mg, 92 %. RF: 0.30 CH2CI2-MeOH (20:1). p.f.: 98- 00 °C.
IR vmax: 1517, 3340, 3220, 2938, 1706, 1599, 1493, 1444, 1351 , 1279,
1177, 1109, 1022, 809 crn'1. H-RMN (300 MHz, MeOD): δ 7.31 (m, 2H, Η-3'y H-5'), 7.16 (m, 3H, Η-2', H- 4' y H-6'), 6.68 (m, 2H, H-2 y H-5), 6.53 (dd, J2,e 2.0 Hz, J5,6 8.0 Hz, 1 H, H-6), 3.74 (t, JCH2,CH2 7.0 Hz, 2H, CH2NH), 2.76 (t, JCH2,CH2 7.0 Hz, 2H, CH2Ar), ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, MeOD): 181.8 (C=Se), 146.4 (C-3), 144.9 (C-4), 139.2
(C-1'), 131.9 (C-1), 130.4 (C-3' y C-5'), 126.9 (C-2' y C-6'), 125.7 (C- 4'), 121.1 (C-6), 117.0 y 116.5 (C-2 y C-5), 47.3 (CH2NH), 35.2 (CH2Ar) ppm.
CIMS m/z 289 ([M+H]+, 14%), 271 ([M - OH]+, 2%).
HRCIMS Cale, para C15H17N2O2S ([M+H]+): 289.1011. Encontrado: 289.1008 Procedimiento general para la obtención de selenoureas derivadas del hidroxitirosol.
A una disolución de clorhidrato de dopamina (300 mg, 1 ,582 mmol) y del isoselenocianato correspondiente (1 ,898 mmol, 1 ,2 equivalentes) y en metanol (20 mi) se añadió trietilamina (1 ,582 mmol, 220 μΙ) y la mezcla se agitó en oscuridad a temperatura ambiente y bajo atmósfera de argón durante una hora. Se concentró a sequedad, y el bruto de reacción se purificó por cromatografía en columna.
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-fenil selenourea (31)
Figure imgf000049_0001
Se obtuvo a partir de fenilisoselenocianato. Se purificó por cromatografía en columna (CH2CI2→CH2CI2-MeOH 40:1), obteniéndose 31 como un sólido amarillento.
Rendimiento 493 mg, 93%. RF: 0.32 CH2CI2-MeOH (20:1). p.f.: 106-108 °C.
(KBr): vmax: 1549, 3215, 2362, 1597, 1510, 1447, 1348, 1281 , 1187, 1 1 13, 810 cnT1.
(300 MHz, MeOH-d4): δ 7.35 (m, 2H, Η-3'y H-5'), 7.23 (m,1 H, H-4'), 7.08 (m, 2H, 7.6 Hz Η-2'y H-6'), 6.68 (m, 2H, H-2 y H-5), 6.53 (d, J5,6 7.8 Hz, 1 H, H-6), 3.81 (t, JCH2,CH2 7.2 Hz, 2H, CH2NH), 2.78 (t, JCH2,CH2 7.2 Hz, 2H, CH2Ar), ppm.
(75.5 MHz, MeOH-d*): 178.8 (C=Se), 146.4 (C-3), 144.9 (C-4 y C- 1 '), 131.6 (C-1), 130.8 (C-3' y C-5'), 127.1 (C-4'), 126.1 (C-2' y C-6'), 121.1 (C-6), 117.0 y 116.5 (C-2 y C-5), 49.9 (CH2NH), 35.2 (CH2Ar) ppm.
m/z 337 ([M+H]+, 22%), 359 ([M+Na]+, 25%).
Cale, para C15H16N2O2 80SeNa ([M+Na]+): 359.0285. Encontrado:
359.0275. 1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) selenourea (32)
Figure imgf000050_0001
Se obtuvo a partir de p-tolilisoselenocianato. Se purificó por cromatografía en columna (CH2Cl2→CH2Cl2-MeOH 30:1), obteniéndose 32 como un sólido amarillento.
Rendimiento 530 mg, 96 %. RF: 0.28 CH2CI2-MeOH (20:1). p.f.: 142-148 °C.
IR (KBr): vmax: 1509, 3446, 3307, 2950, 1599, 1510, 1460, 1281 , 1184,
1 106, 1021 , 810 crn-1.
1 H-RMN (300 MHz, MeOH-d,): δ 7.15 (m, 2H, Η-3'y H-5'), 6.94 (m, Η-2'y H-
6'), 6.67 (m, 2H, H-2 y H-5), 6.51 (d, J5,6 7.9 Hz, 1 H, H-6), 3.79 (t,
JCH2,CH2 7.0 Hz, 2H, CH2NH), 2.76 (t, JCH2,CH2 7.0 Hz, 2H, CH2Ar),
2.31 (s, 3H, CH3) ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, MeOH-d,): 178.5 (C=Se), 146.4 (C-3), 144.9 (C-4),
138.1 (C- '), 35.6 (C-3' y C-5'), 131.6 (C-1 y C-4'), 126.2 (C-2' y C-
6'), 121.5 (C-6), 1 17.0 y 116.5 (C-2 y C-5), 56.0 (Me), 49.9 (CH2NH),
35.2 (CH2Ar) ppm.
FABMS m/z 351 ([M+H]+, 43%), 373 ([M+Na]+, 39%).
HRFABMS Cale, para C16H18N2O280SeNa ([M+Naf): 373.0421. Encontrado:
359.0431
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-metoxifenil) selenourea (33)
Figure imgf000050_0002
Se obtuvo a partir de p-metoxifenilisoselenocianato. Se purificó por cromatografía en columna (CH2CI2→CH2CI2-MeOH 20:1), obteniéndose 33 como un sólido amarillento.
Rendimiento 561 mg, 97 %. RF: 0.42 CH2CI2-MeOH (10:1). p.f.: 144-146 °C. IR (KBr): vmax: 1508, 3309, 3061 , 2843, 1590, 1547, 1466, 1342, 1275,
1238, 1170, 1104, 1024, 828 cnT1
1H-RMN (300 MHz, MeOH-d4): δ 6.98 (m, 2H, Η-3'y H-5'), 6.88 (m, Η-2'y H-
6'), 6.67 (m, 2H, H-2 y H-5), 6.50 (d, J5,6 7.9 Hz, 1 H, H-6), 3.77 (m, 5H, CH2NH y OMe), 2.75 (t, JCH2,CH2 7.1 Hz, 2H, CH2Ar) ppm.
13C-RMN (75.5 MHz, MeOH-d4): 178.7 (C=Se), 146.4 (C-3), 144.9 (C-4),
160.1 (C-4'), 131.6 (C-1), 130.7 (C-1'), 128.6 (C-2' y C-6'), 121.1 (C- 6), 117.0 y 116.5 (C-2 y C-5), 116.0 (C-3' y C-5'), 56.0 (OMe), 49.9 (CH2NH), 35.3 (CH2Ar) ppm.
FABMS m/z 367 ([M+H]\ 20%), 389 ([M+Na]+, 39%)
HRFABMS Cale, para Ci6H18N2O3 80SeNa ([M+Na]+): 389.0394. Encontrado:
389.0380

Claims

REIVINDICACIONES
1.- Uso de un compuesto de fórmula general (I):
Figure imgf000052_0001
donde: R1 y R2 son ¡guales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno (H), alquilo (C1-C4) o acetilo (-COCH3).
R3 se selecciona de entre hidrógeno, alquilo (Ci-C4), acetilo, C(=Z)-NH-R7, el grupo de fórmula (II) o el grupo de fórmula (III):
Figure imgf000052_0002
(N) (III)
X se selecciona de entre S, Se, NH o X'-R4; donde X' es S o Se y R4 es el grupo de fórmula (III);
R5 y R6 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno, alquilo (C1-C4) o acetilo;
Y es S o Se;
Z es S o Se; y
R7 se selecciona de entre alquilo (C-i-de), fenilo, sustituido o sin sustituir o bencilo, sustituido o sin sustituir, para la elaboración de una composición antioxidante.
2. - Uso según la reivindicación anterior, donde R1 y/o R2 son hidrógeno, metilo o acetilo.
3. - Uso según la reivindicación anterior, donde R1 y R2 son hidrógeno.
4. - Uso del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde X es S o Se.
5. - Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde R3 es hidrógeno o acetilo.
6. -Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde R3 es el grupo de fórmula (II).
7. -Uso según la reivindicación anterior, donde Y es S o Se y los radicales R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo.
8. -Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde R3 es el grupo de fórmula (III).
9. -Uso según la reivindicación anterior, donde R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo.
10. -Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde X es X'-R4.
11. -Uso según la reivindicación anterior, donde X' es Se y R3 es el grupo de fórmula (III).
12. - Uso según la reivindicación 11 , donde R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo.
13. -Uso según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12, donde la sal formada es un halogenuro.
14. - Uso según la reivindicación anterior, donde la sal es de bromuro.
15. - Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde X es NH.
16. - Uso según la reivindicación anterior, donde R3 es el grupo -C(=Z)-NH-R7.
17. -Uso según la reivindicación anterior, donde Z es S.
18. - Uso según cualquiera de las reivindicaciones 16 o 17, donde R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por al menos un grupo alquilo (C1-C4) o bencilo.
19. - Uso según la reivindicación anterior, donde R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por un metilo o bencilo.
20. -Uso según la reivindicación 16, donde Z es Se.
21. -Uso según la reivindicación anterior, donde R7 es un fenilo, sustituido o sin sustituir.
22. -Uso según la reivindicación anterior, donde el grupo fenilo no está sustituido o está sustituido por un grupo alquilo (C1-C4) o un grupo alcoxilo.
23. -Uso según la reivindicación 1 , donde el compuesto se selecciona de la lista que comprende:
4-(2-Aceti Itioeti I)- 1 ,2-diacetoxibenceno (8)
4-(2-Sulfaniletil)benceno-1 ,2-diol (10)
Disulfuro de bis(3,4-dihidroxifenetilo) (11) Diselenuro de bis (3,4-dihidroxifenetilo) (13)
Bromuro de tris(3,4-dihidroxifenetil)selenonio (17)
1-Butil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (24)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) tiourea (25)
1 -Bencil-3-(3,4-dihidroxifenetil)tiourea (26)
1-Fenil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (27)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-fenil selenourea (31)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) selenourea (32)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-metoxifenil) selenourea (33)
Diselenuro de bis(3,4-diacetoxifenetilo) (12)
Selenuro de bis (3,4-dimetoxifenetilo) (15)
Diselenuro de bis(3,4-dimetoxifenetilo) (16) o
Bromuro de tris (3,4-diacetoxifenetil)selenonio (18).
24. -Uso del compuesto de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, para la elaboración de un medicamento.
25. -Uso del compuesto de fórmula general (I), según cualquiera de las reivindicaciones anteriores para la elaboración de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades inflamatorias, tumorales, neurodegenerativas, trombosis, cardiovasculares o infecciosas.
26.- Compuesto de fórmula general (I):
Figure imgf000055_0001
donde: R1 y R2 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno (H), alquilo (C C4) o acetilo (-COCH3). R3 se selecciona de entre -C(=Z)-NH-R7, el grupo de fórmula (II) o el grupo de fórmula (III):
Figure imgf000056_0001
(II) (III)
X se selecciona de entre S, Se, NH o X'-R4; donde X' es S o Se y R4 es el grupo de fórmula (III);
R5 y R6 son iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre hidrógeno, alquilo (C-1-C4) o acetilo;
Y es S o Se;
Z es S o Se; y
R7 se selecciona de entre alquilo (C1-C18), fenilo, sustituido o sin sustituir o bencilo, sustituido o sin sustituir.
27. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde R y/o R2 son hidrógeno, metilo o acetilo.
28. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde R1 y R2 son hidrógeno.
29. - Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 28, donde X es S o Se.
30. - Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 29, donde R3 es el grupo de fórmula (II).
31. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde Y es S o Se y los radicales R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo.
32. - Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 29, donde R3 es el grupo de fórmula (III).
33. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo.
34. - Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 28, donde X es X'-R4
35. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde X' es Se y R3 es el grupo de fórmula (III).
36. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde R5 y/o R6 son hidrógeno, metilo o acetilo.
37. - Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 34 a 36, donde la sal formada es un halogenuro.
38. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde la sal es de bromuro.
39. - Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 28, donde X es NH.
40. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde R3 es el grupo -C(=Z)- NH-R7
41. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde Z es S.
42. - Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 40 o 41 , donde R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por al menos un grupo alquilo (C1-C4) o bencilo.
43. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde R7 se selecciona de entre butilo, fenilo, fenilo sustituido por un metilo o bencilo.
44. - Compuesto según la reivindicación 40, donde Z es Se.
45. -Compuesto según la reivindicación anterior, donde R7 es un fenilo, sustituido o sin sustituir.
46. - Compuesto según la reivindicación anterior, donde el grupo fenilo no está sustituido o está sustituido por un grupo alquilo (C1-C4) o un grupo alcoxilo.
47. - Compuesto según la reivindicación 26, donde el compuesto se selecciona de la lista que comprende:
Disulfuro de bis(3,4-dihidroxifenetilo) (11)
Diselenuro de bis (3,4-dihidroxifenetilo) (13)
Bromuro de tris(3,4-dihidroxifenetil)selenonio ( 7)
1-Butil-3-(3,4-dihidroxifenetil) tiourea (24)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) tiourea (25)
1 -Bencil-3-(3,4-dihidroxifenetil)tiourea (26)
1-Fenil-3-(3,4-dihidroxifenet¡l) tiourea (27)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-fenil selenourea (31)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-tolil) selenourea (32)
1-(3,4-Dihidroxifenetil)-3-(p-metoxifenil) selenourea (33)
Diselenuro de bis(3,4-diacetoxifenetilo) (12)
Selenuro de bis (3,4-dimetoxifenetilo) (15)
Diselenuro de bis(3,4-dimetoxifenetilo) (16) o
Bromuro de tris (3,4-diacetoxifenetil)selenonio (18)
48. - Composición que comprende al menos un compuesto de fórmula (I) descrito según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 44.
49. -Composición según la reivindicación anterior, donde dicha composición es alimentaria, nutracéutica, cosmética o farmacéutica.
50. -Composición según la reivindicación 49 que además comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable.
51. - Composición según cualquiera de las reivindicaciones 49 o 50, donde además comprende otro principio activo.
52. - Composición según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde dicha composición se encuentra en una forma adecuada para su administración tópica, oral o parenteral.
53. - Composición según cualquiera de las reivindicaciones 48 a 51, donde dichas composición están en forma de emulsión, complejo o capsulada.
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Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014153893A1 (zh) * 2013-03-25 2014-10-02 上海爱启生态科技有限公司 一种有机硒化合物的制备方法
CN104119260A (zh) * 2013-04-25 2014-10-29 上海爱启生态科技有限公司 以碱金属离子硒配合物为功能团的多酚硒化合物
WO2015131421A1 (zh) * 2014-03-06 2015-09-11 上海爱启生态科技有限公司 一种高硒含量硒化茶多酚制剂
RU2586067C1 (ru) * 2015-04-20 2016-06-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "НОВОСИБИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПЕДАГОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ" (ФГБОУ ВПО "НГПУ") Бис-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил)селенид, обладающий антиоксидантной и гипогликемической активностью
EP3185860A4 (en) * 2014-08-29 2018-08-29 The Board of Regents of the University of Texas System Novel capsazepine analogs for the treatment of cancer and other proliferative diseases
RU2713183C1 (ru) * 2019-08-05 2020-02-04 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Новосибирский государственный педагогический университет" Одностадийный способ синтеза бис(3,5-диалкил-4-гидроксибензил)селенидов
IT202100027827A1 (it) * 2021-10-29 2023-04-29 Univ Degli Studi Di Firenze Derivati del carbamoselenoile come agenti antinfettivi

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2539637B1 (es) * 2013-09-24 2016-02-05 Universidad De Sevilla Nuevos antiiflamatorios basados en polifenoles del olivo
ES2556151B2 (es) * 2014-06-30 2016-04-22 Universidad De Sevilla Uso como antioxidantes de compuestos organoselénicos fenólicos y sus composiciones

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002033596A2 (en) * 2000-10-17 2002-04-25 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Method of operating a computer system to perform a discrete substructural analysis
WO2007107352A1 (en) * 2006-03-21 2007-09-27 The European Molecular Biology Laboratory Agents that disrupt cellular replication and their use in inhibiting pathological conditions
US20080064687A1 (en) * 2000-08-21 2008-03-13 Suh Young G Novel thiourea derivatives and the pharmaceutical compositions containing the same

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080064687A1 (en) * 2000-08-21 2008-03-13 Suh Young G Novel thiourea derivatives and the pharmaceutical compositions containing the same
WO2002033596A2 (en) * 2000-10-17 2002-04-25 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Method of operating a computer system to perform a discrete substructural analysis
WO2007107352A1 (en) * 2006-03-21 2007-09-27 The European Molecular Biology Laboratory Agents that disrupt cellular replication and their use in inhibiting pathological conditions

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALI, A.R. ET AL.: "A greener synthetic protocol for the preparation Of carbodiimide", TETRAHEDRON LETTERS, vol. 51, 11 December 2009 (2009-12-11), pages 1019 - 1021 *
DATABASE REGISTRY 19 February 2002 (2002-02-19), AMBITER (CHEMICAL LIBRARY): "N-[2-(3,4-dihidroxifenil)etil]-N'-(4-metilfenil)tiourea", accession no. 73878-33-0 *
DATABASE REGISTRY 27 January 2003 (2003-01-27), AMBITER (CHEMICAL LIBRARY), accession no. 81666-01-7 *
DATABASE REGISTRY 27 January 2003 (2003-01-27), AMBITER (CHEMICAL LIBRARY): "N-[2-(3,4-dihidroxifenil)etil]-N'-feniltiourea", accession no. 74253-01-7 *
DATABASE REGISTRY 4 February 2003 (2003-02-04), AMBITER (CHEMICAL LIBRARY): "N-[2-(3,4-dihidroxifenil)etil]-N'-(fenilmetil)tiourea", accession no. 75371-41-3 *
PATEL, R.B. ET AL.: "Synthesis and studies of novel homoveratryl based thiohydantoins asantibacterial as well as anti-HIV agents", INDIAN JOURNAL OF CHEMISTRY, vol. 45B, July 2006 (2006-07-01), pages 1716 - 1721 *
TAKEUCHI, T. ET AL.: "Dopamine selective molecularly imprinted polymers via post-imprinting modification", ORGANIC & BIOMOLECULAR CHEMISTRY, vol. 4, 5 January 2006 (2006-01-05), pages 565 - 568 *

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014153893A1 (zh) * 2013-03-25 2014-10-02 上海爱启生态科技有限公司 一种有机硒化合物的制备方法
CN104119260A (zh) * 2013-04-25 2014-10-29 上海爱启生态科技有限公司 以碱金属离子硒配合物为功能团的多酚硒化合物
WO2015131421A1 (zh) * 2014-03-06 2015-09-11 上海爱启生态科技有限公司 一种高硒含量硒化茶多酚制剂
EP3185860A4 (en) * 2014-08-29 2018-08-29 The Board of Regents of the University of Texas System Novel capsazepine analogs for the treatment of cancer and other proliferative diseases
US10457676B2 (en) 2014-08-29 2019-10-29 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Capsazepine analogs for the treatment of cancer and other proliferative diseases
US12358909B2 (en) 2014-08-29 2025-07-15 Board Of Regents Of The University Of Texas System Capsazepine analogs for the treatment of cancer and other proliferative diseases
RU2586067C1 (ru) * 2015-04-20 2016-06-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "НОВОСИБИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПЕДАГОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ" (ФГБОУ ВПО "НГПУ") Бис-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил)селенид, обладающий антиоксидантной и гипогликемической активностью
RU2713183C1 (ru) * 2019-08-05 2020-02-04 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Новосибирский государственный педагогический университет" Одностадийный способ синтеза бис(3,5-диалкил-4-гидроксибензил)селенидов
IT202100027827A1 (it) * 2021-10-29 2023-04-29 Univ Degli Studi Di Firenze Derivati del carbamoselenoile come agenti antinfettivi
WO2023073634A1 (en) * 2021-10-29 2023-05-04 Universita' Degli Studi Di Firenze Carbamoselenoyl derivatives as anti-infective agents

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