WO2011132983A2 - 다시마추출물, 미역추출물 및 차전자추출물을 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

다시마추출물, 미역추출물 및 차전자추출물을 함유하는 화장료 조성물 Download PDF

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Definitions

  • the present invention relates to a cosmetic composition containing kelp extract, seaweed extract and chason extract as an active ingredient. More specifically, the present invention relates to a cosmetic composition that contains the shimashima extract, wakame extract and cha cha extract as an active ingredient to improve the moisturizing power of the skin and at the same time improves skin elasticity.
  • the skin protects the body from physical and chemical stimuli from the external environment.
  • the skin controls the evaporation of about 65-70% of the body's water to the body.
  • the skin becomes dry and rough. Problems related to skin moisturization are becoming more and more important due to the phenomenon of skin loss and dullness.
  • the decrease in elasticity that occurs as the skin ages is caused by endogenous, genetic, and environmental factors such as photoaging due to ultraviolet rays, age increase, and menopause, and thus, fibroblast division is decreased.
  • the elasticity of the skin decreases due to the decrease of collagen synthesis and the increase of MMP production.
  • Another object of the present invention is to provide a skin cosmetic composition for improving the elasticity of the skin.
  • the present invention provides a cosmetic composition containing a kelp extract, seaweed extract and chaja extract as an active ingredient.
  • the skin cosmetic composition of the present invention contains a kelp extract, seaweed extract and cha cha extract to increase the skin moisturizing power, and also has an excellent skin elasticity improving effect.
  • FIG. 1 is a graph showing changes in skin water volume before and after application of Example 1 and Comparative Example 1.
  • FIG. 1 is a graph showing changes in skin water volume before and after application of Example 1 and Comparative Example 1.
  • FIG. 2 is a graph showing changes in skin elasticity before and after application of Example 1 and Comparative Example 1.
  • FIG. 3 is a photograph showing changes in shape of artificial dermis before and after application of Example 1 and Comparative Example 1.
  • FIG. 4 is a graph showing changes in moisture evaporation amount of artificial dermis before and after application of Example 1 and Comparative Example 1.
  • FIG. 4 is a graph showing changes in moisture evaporation amount of artificial dermis before and after application of Example 1 and Comparative Example 1.
  • FIG. 5 shows changes in occludin expression of tight junctions after application of Example 1 and Comparative Example 1.
  • the cosmetic composition of the present invention contains kelp extract, wakame extract and chaja extract.
  • the cosmetic composition of the present invention it is preferable to use sesame seaweed extract, seaweed seaweed extract and cha-cha extract.
  • sesame seaweed extract, seaweed seaweed extract and cha-cha extract it is preferable to use sesame seaweed extract, seaweed seaweed extract and cha-cha extract.
  • Chamdashima used in the present invention is a kelp belonging to the seaweed kelp family
  • the kelp extract used in the present invention is accurately weighed 50g of lyophilized kelp, extracted by immersion at room temperature for 48 hours with an organic solvent, and then the organic solvent used for extraction using an evaporator Was concentrated to complete evaporation and used as sample without further manipulation.
  • the organic solvent may be at least one selected from the group consisting of ethanol, methane, butane, ether, ethyl acetate and chloroform, or a mixed solvent of these organic solvents and water may be used.
  • the process of obtaining the extract is not limited to the above.
  • the skin cosmetic composition of the present invention contains the kelp extract in an amount of 0.001-10% by weight based on the total weight of the composition. This is because a distinct effect cannot be expected at less than 0.001 weight 3 ⁇ 4>, and when the content exceeds 10 weight%, there is no apparent effect increase with increasing content.
  • Seaweed seaweed refers to seaweed seaweed (undaria pinnatifida), which is a year-old seaweed of brown seaweed.
  • the wakame extract used in the present invention is accurately measured 50g of lyophilized wakame seaweed, extracted by immersion at room temperature for 48 hours with an organic solvent, and then using the evaporator to extract the organic solvent used for extraction It was concentrated by complete evaporation and used as sample without further manipulation.
  • the organic solvent may be at least one selected from the group consisting of ethane, methanol, butane, ether, ethyl acetate and chloroform, or a mixed solvent of these organic solvents and water may be used.
  • the process of obtaining the extract is not limited to the above.
  • the external preparation for skin composition of the present invention contains the above seaweed extract in an amount of 0.001-10% by weight based on the total weight of the composition. This is because a distinct effect cannot be expected at less than 0.001% by weight, and if it exceeds 10% by weight, no apparent effect increases with increasing content.
  • Char is a seed of Plantago asiatica L., a plant belonging to Plantaginaceae, and is mainly used to treat urinary incontinence, large hematuria, and seawater. It can clog and stagnate urine, excrete moisture well, brighten the eyes, eliminate stratification, and treat soy sauce poisoning, so the chariot improves swelling due to edema.
  • the process of obtaining the cha cha extract used in the present invention is as follows. All. Accurately weigh 50g of the chasen, extract it by immersing it at room temperature for 48 hours with organic solvent, and then completely evaporate and concentrate the organic solvent used for extraction using an evaporator. Used as a sample.
  • the organic solvent may be at least one selected from the group consisting of ethanol, methane, butanol ether, ethyl acetate and chloroform, or a mixed solvent of these organic solvents and water may be used.
  • the process of obtaining the extract is not limited to the above.
  • the external preparation composition for skin of the present invention contains 0.001-10 weight 3 ⁇ 4 with respect to the total weight of the above-mentioned chaff extractol composition. This is because a clear effect cannot be expected at less than 0.001 weight 3 ⁇ 4, and when the content exceeds 10 weight%, there is no increase in the apparent effect as the content increases.
  • the external preparation composition for skin contains a cosmetically and dermatologically acceptable medium and / or base.
  • a cosmetically and dermatologically acceptable medium and / or base are all formulations suitable for topical application, for example emulsions, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic (liposomes) obtained by dispersing the oil phase in solution, gels, solid or pasty anhydrides, aqueous phases and And / or in the form of a nonionic vesicle dispersant, or in the form of a cream, skin, lotion, powder, ointment, spray or cone stick.
  • these compositions can be prepared according to conventional methods in the art.
  • the topical skin composition according to the present invention may be used in the form of a product or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant.
  • the external preparation composition for skin is a fatty substance, an organic solvent, a dissolving agent and a gelling agent, an emollient, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, a water, an ionic type or a nonionic type.
  • ⁇ 34> Accurately weigh 50 g of lyophilized seaweed and then extract it by immersing it in 950 g of 70% ethanol at room temperature for 48 hours, then condensing the ethane used for extraction by using an evaporator. Seaweed extract was prepared.
  • Example 1 and Comparative Example 1 were prepared as a cream formulation with the composition shown in Table 1 below (unit: weight%).
  • the subjects of evaluation were to select 30 women aged 30 years and divide Example 1 and Comparative Example 1, and use the Example 1 and Comparative Example 1 on the left and right cheeks, respectively, 2 weeks after the skin moisture The content was measured. Specifically, after washing the face with soap in 30 subjects, the skin was depressed under constant temperature and humidity conditions (temperature 20 ⁇ 2 ° C, relative humidity 40 ⁇ 2%). Skin surface capacitance was measured three times using a Corneometer (CM825). The average result is shown in FIG.
  • Test Example 1 measured skin elasticity after using Example 1 and Comparative Example 1 for two weeks. Specifically, after washing the face with soap for 30 subjects, the skin was emptied under constant temperature and humidity conditions (temperature 20 ⁇ 2 ° C, relative humidity 40 ⁇ 2%). Using a cutometer MPA580, skin elasticity was analyzed by measuring the degree of recovery of the applied skin by applying negative pressure to the skin. The results are shown in FIG.
  • FIG. 3 shows the shape of artificial dermis immediately after application and 5 hours after the application of Comparative Example 1 and Comparative Example 1, respectively, made of collagen and fibrobalst (Dermal Equivalent). Each water vaporization amount was measured and the result is shown in FIG. 4.
  • Comparative Example 1 can confirm that the collagen gel shape is disturbed due to evaporation of water, while Example 1 inhibits evaporation of water to maintain the original shape of the collagen gel. In addition, it can be confirmed that the moisture evaporation amount of Comparative Example 1 and Example 1 differs by more than 10% after 5 hours.
  • Tight junction plays an important role in maintaining and strengthening the barrier function of the skin.
  • the function of this tight junction can be confirmed by occludin, a cell membrane protein that is specifically expressed in the tight junction. It can be said that the relationship with.
  • Human-derived keratinocytes were cultured on the coverslip for microscopic observation. At this time, the groups treated with Comparative Example 1 and Example 1 were cultured separately. After 24 hours ImM CaCl 2, ImM .MgCl washed with PBS and fixed with 2 includes the cells with paraformaldehyde solution. After increasing the permeability of the cell membrane with 0.1% Triton X-100 solution, the primary antibody against ocludin was attached for 1 hour. After washing the cells with PBS again, the secondary antibody (Alexar fluor 488) was attached for 1 hour for fluorescence observation. The fluorescence protein expression level change was observed using the fluorescence microscope (LSM510). The results are shown in FIG.

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Abstract

본 발명은 유효성분으로 다시마추출물, 미역추출물 및 차전자추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 유효성분으로 다시마추출물, 미역추출물 및 차전자추출물을 함유하여 피부의 보습력을 향상시키고 이와 더불어 피부 탄력도 증진시키는 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

【명세서】
【발명의 명칭】
다시마추출물， 미역추출물 및 차전자추출물을 함유하는 화장료 조성물 【기술분야】
<1> 본 발명은 유효성분으로 다시마추출물， 미역추출물 및 차전자추출물올 함유 하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는， 본 발명은 유효성분으로 다 시마추출물， 미역추출물 및 차전자추출물을 함유하여 피부의 보습력을 향상시키고 이와 더불어 피부 탄력도 증진시키는 화장료 조성물에 관한 것이다.
【배경기술】
<2> 피부는 인체를 외부 환경으로부터의 물리적， 화학적인 자극으로부터 보호해 주는 기능을 하는데, 특히 피부는 인체가 갖고 있는 약 65~70%의 수분이 체외로 증 발되는 것을 조절해 준다. 그러나， 환경의 변화 혹은 생활 패턴의 변화， 사회 생활 에서 발생되는 각종 스트레스와 환경 오염， 화장 습관에 따른 잦은 세안 및 연령 증가에 따른 자연적인 피부 노화 등의 원인으로 피부가 건조해지고 표면이 거칠게 되며, 피부가 윤기를 잃어 칙칙하게 보이는 등의 현상이 발생하여 피부 보습에 관 한 문제는 그 중요성이 점점 더 커지고 있다.
<3> 한편， 피부가 노화됨에 따라 진행되는 탄력 저하 현상은 자외선에 의한 광노 화와 나이의 증가 및 폐경 등의 내인성 요인, 유전적인 요인, 환경적인 요인에 의 한 현상으로 섬유아세포의 분열 감소, 콜라겐 합성의 감소， MMP생성의 증가 등으로 인해 피부의 탄력이 감소하게 된다.
<4> 이에， 피부 보습과 피부 탄력 저하를 개선하고자 하는 의미에서 다양한 화장 품 원료들이 개발되고 있는데 근래의 외부 환경을 살펴 보면 동물성 원료들에 대 한 소비자들의 선호도 하락과 광우병 등의 파문으로 동물성 원료에 대한 사용이 급 격히 줄어들고 천연 식물 유래의 원료들이 각광 받고 있다. 게다가, 소비자들도 한 가지 기능이 아닌 멀티 기능의 화장품， 예를 들면 보습은 기본으로 하고 탄력 강화 효과를 부가적인 기능으로 갖는 화장품들에 대한 선호도가 증가하여 멀티 기능을 가질 수 있는 식물추출물올 개발하는 것이 매우 시급하고 중요한문제가 되었다.
【발명의 상세한 설명】
【기술적 과제】
<5> 본 발명자들은 연구를 거듭한 결과， 다시마추출물 , 미역추출물 및 차전자추 출물의 성분이 피부의 보습력을 향상시키고ᅳ 피부의 탄력도를 높이는 효과를 가짐 을 밝혀내어 이에 본 발명을 완성하게 되었다.
<6> 따라서， 본 발명의 목적은 우수한 보습력을 갖는 피부 화장료 조성물을 제공 하는 것이다.
<7> 또한 본 발명의 다른 목적은 피부의 탄력을 향상시키는 피부 화장료 조성물 을 제공하는 것이다.
【기술적 해결방법】
<8> 상기한 목적을 달성하기 위해, 본 발명에서는 유효성분으로 다시마추출물， 미역추출물 및 차전자추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.
【유리한 효과】
<9> 본 발명의 피부 화장료 조성물은 다시마추출물， 미역추출물 및 차전자추출물 을 함유하여 피부 보습력을 높이고， 아울러 피부 탄력 개선 효과가 우수하다.
【도면의 간단한 설명】
<ιο> 도 1은 실시예 1 및 비교예 1의 적용 전후 피부 수부량 변화를 나타내는 그 래프이다.
<ιι> 도 2는 실시예 1 및 비교예 1의 적용 전후 피부 탄력도 변화를 나타내는 그 래프이다.
<12> 도 3는 실시예 1 및 비교예 1의 적용 전후 인공진피.의 모양 변화를 나타내는 사진이다. ᅳ
<13> 도 4는 실시예 1 및 비교예 1의 적용 전후 인공진피의 수분증발량 변화를 나 타내는 그래프이다.
<14> 도 5는 실시예 1 및 비교예 1의 적용 후 타이트 정션 (Tight Junction)의 오 클루딘 (occludin) 발현 변화를 나타내는 것이다.
【발명의 실시를 위한 최선의 형태】
<15> 본 발명의 화장료 조성물은 다시마추출물 , 미역추출물 및 차전자추출물을 함 유한다.
<16> 특히 본 발명의 화장료 조성물은 참다시마추출물 , 참미역추출물 및 차전자추 출물을 사용함이 바람직하다 . ᅳ <17> 본 발명에서 사용하는 참다시마는 갈조류 다시마과에 속하는 다시마
(Laminar i a japonica)를 칭하는 것으로， 한의학계에서는 엽상체를 말린 것을 한방 약재로 이용하며 그 맛은 짜고 성질은 차며 신장과 간에 작용한다. 가래와 어혈을 없애고 소변을 잘 나오게 하는 성질을 가지고 있어 기침， 천식， 해수를 없애는 약 으로 사용한다. 또한 요오드， 칼륨 등의 미네랄을 다량함유하고 있어 신진대사를 촉진하는 효과를 가진다.
<18> 본 발명에 사용되는 다시마 추출물은 동결건조된 다시마 50g을 정확하게 중 량을 측정한 다음， 유기용매로 48시간 동안 상온넁침하여 추출한 다음, 증발기 (evaporator)를 사용하여 추출에 사용된 유기용매를 완전히 증발시켜 농축한 후 더 이상의 조작 없이 시료로 사용하였다. 이때， 유기용매는 에탄올， 메탄을, 부탄을, 에테르， 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으며， 또는 이들 유기용매와 물과의 흔합용매를 사용할 수 있다. 또한 추출물 을 수득하는 공정은 위 내용에만 국한되지 않는다.
<19> 본 발명의 피부 화장료 조성물은 상기 다시마 추출물을 조성물 총 중량에 대 하여 0.001-10중량 %로 함유한다. 이는 0.001중량 ¾> 미만에서는 뚜렷한 효과를 기대 할 수 없고, 10중량 %를 초과할 경우는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않기 때문이다.
<20> 참미역은 갈조식물 미역과의 한해살이 바닷말인 미역 (undaria pinnatifida) 을 뜻하는 것으로， 열이 나면서 답답한 것을 없애고 기 (氣)가 뭉친 것을 치료하며 오줌을 잘 나가게 하는 효능을 가진다.
<2i> 본 발명에 사용된 미역 추출물은 동결건조된 미역 50g을 정확하게 증량을 측 정한 다음， 유기용매로 48시간 동안 상온넁침하여 추출한 다음, 증발기 (evaporator)를 사용하여 추출에 사용된 유기용매를 완전히 증발시켜 농축한 후 더 이상의 조작 없이 시료로 사용하였다. 이때， 유기용매는 에탄을, 메탄올， 부탄을， 에테르， 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으며, 또는 이들 유기용매와 물과의 흔합용매를 사용할 수 있다. 또한 추출물 을 수득하는 공정은 위 내용에만 국한되지 않는다.
<22> 본 발명의 피부외용제 조성물은 상기의 미역 추출물을 조성물 총 중량에 대 하여 0.001-10중량 %로 함유한다. 이는 0.001중량 % 미만에서는 뚜렷한 효과를 기대 할 수 없고， 10중량 %를 초과할 경우는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않기 때문이다.
<23> 차전자는 질경이과 (Plantaginaceae)에 속하는 식물인 질경이 (Plantago asiatica L.)의 종자를 일컫는 것으로， 소변불통， 대하 혈뇨， 해수 등을 치료하는 데 주로 쓰인다. 소변의 막히고 체함을 통하게 하고， 수분이 잘 배설되게 하며, 눈 을 밝게 하고 층혈을 없애주며， 간장의 열독을 다스리는 효능이 있고， 따라서 차전 자는 수독형의 부종으로 인해 붓는 증상을 개선해 준다.
<24> 다음으로 본 발명에 사용되는 차전자 추출물을 수득하는 공정은 다음과 같 다. 차전자를 50g을 정확하게 중량을 측정한 다음， 유기용매로 48시간 동안 상온넁 침하여 추출한 다음， 증발기 (evaporator)를 사용하여 추출에 사용된 유기용매를 완 전히 증발시켜 농축한 후 더 이상의 조작 없이 시료로 사용하였다. 이때， 유기용매 는 에탄올， 메탄을， 부탄올 에테르， 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으며， 또는 이들 유기용매와 물과의 흔합용매를 사용할 수 있다. 또한 추출물을 수득하는 공정은 위 내용에만 국한되지 않는다.
<25> 본 발명의 피부외용제 조성물은 상기의 차전자 추출물올 조성물 총 중량에 대하여 0.001-10 중량 ¾로 함유한다. 이는 0.001 중량 ¾ 미만에서는 뚜렷한 효과를 기대할 수 없고， 10 중량 %를 초과할 경우는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증 가가 나타나지 않기 때문이다.
<26> 본 발명에 의한 피부외용제 조성물은 화장품학 및 피부과학적으로 허용 가능 한 매질 및 /또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로， 예를 들면 용액， 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물， 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀 견， 현탁액， 마이크로에멀견， 마이크로캡슬， 미세과립구 또는 이온형 (리포좀) 및 / 또는 비이온형의 소낭 분산제의 형태로， 또는 크림， 스킨， 로션, 파우더， 연고， 스 프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상 적 방법에 따라 제조될 수 있다. 또한, 본 발명에 의한 피부외용제 조성물은 품의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있 다.
<27> 본 발명에 의한 피부외용제 조성물은 지방 물질， 유기 용매， 용해제 농축제 및 겔화제， 연화제, 항산화제， 현탁화제， 안정화제， 발포제， 방향제， 계면활성제， 물， 이온형 또는 비이온형 유화제， 층전제， 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제 , 보존 제， 비타민， 차단제， 습윤화제, 필수 오일， 염료， 안료， 친수성 또는 친유성 활성 제， 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장 품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제 등을 함유할 수 있다. 이들 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 함량으로 도 입된다.
【발명의 실시를 위한 형태】
<28> 이하， 실시예 및 시험예를 들어 본 발명을 보다 상세히 설명하지만， 본 발명 이 이들 예로만 한정되는 것은 아니다.
<29>
<30> <제조예 1> 참다시마 추출물의 제조 <31> 동결건조된 참다시마미역 50g을 정확하게 중량을 측정한 다음, 70% 에탄올 950g으로 48시간 동안 상온넁침하여 추출한 다음， 증발기 (evaporator)를 사용하여 추출에 사용된 에탄을을 완전히 증발시켜 농축하여 참다시마 추출물을 제조하였다.
<32>
<33> <제조예 2> 참미역 추출물의 제조
<34> 동결건조된 참미역 50g을 정확하게 중량을 측정한 다음， 70% 에탄올 950g으 로 48시간 동안 상온넁침하여 추출한 다음, 증발기 (evaporator)를 사용하여 추출에 사용된 에탄을을 완전히 증발시켜 농축하여 참미역 추출물을 제조하였다.
<35>
<36> <제조예 3> 차전자 추출물의 제조
<37> 차전자 50g올 정확하게 중량을 측정한 다음， 70% 에탄올 950g으로 48시간 동 안 상온넁침하여 추출한 다음， 증발기 (evaporator)를 사용하여 추출에 사용된 에탄 올을 완전히 증발시켜 농축하여 참미역 추출물을 제조하였다.
<38>
<39> <실시예 1 및 비교예 1>
<40> 하기 표 1의 조성으로 실시예 1 및 비교예 1을 크림 제형으로 제조하였다 (단 위 : 중량 %).
<41> 【표 1】
Figure imgf000007_0001
<42> <43> [시험예 1] 피부 수분량 측정
<44> 평가대상은 30세의 여성 30명을 선정하여 실시예 1 및 비교예 1을 나누어 주 고 왼쪽 및 오른쪽 뺨에 각각 실시예 1 및 비교예 1을 사용하게 한 후 2주 후에 피 부 수분함유량을 측정하였다. 구체적으로 상기 피험자 30명을 대상으로 안면을 비 누로 씻은 후， 항온항습 조건 (온도 20±2°C , 상대습도 40 ±2%)에서 피부를 적웅시켰 다. 코네오미터 (Corneometer, CM825)를 이용하여， 피부 표면 전기용량 (capacitance)을 3회 반복 측정하였다. 그 평균 결과를 도 1에 도시하였다.
<45> 도 1에서 알 수 있듯이, 비교예 1을 2주간 사용한 후에는 뺨 정면의 수분량 이 3% 상승하였고 안면 중에 특히 건조한 부분인 볼 아랫부분의 수분량이 11%상승 한 반면， 실시예 1을 2주간 사용한 후에는 뺨 정면의 수분량이 상승하였고 볼 아랫부분의 수분량이 78% 상승하여， 본 발명에 따른 실시예를 사용할 경우 피부 수 분량이 현저하게 증가시킬 수 있음을 알 수 있다.
<46>
<47> [시험예 2] 피부 탄력도 개선 측정
<48> 상기 시험예 1의 평가대상 30명이 2주 동안 실시예 1 및 비교예 1을 사용한 후에 피부 탄력도를 측정하였다. 구체적으로 상기 피험자 30명을 대상으로 안면을 비누로 씻은 후， 항온항습 조건 (온도 20±2°C, 상대습도 40 ±2%)에서 피부를 적웅시 켰다. 큐토미터 (Cutometer MPA580)를 이용하여， 피부에 음압을 걸어 당겨지는 피부 가 회복되는 정도를 측정하여 피부 탄력을 분석하였다. 그 결과를 도 2에 도시하였 다.
<49> 도 2에서 알 수 있듯이， 비 S예 1을 2주간 사용한 후에 피부 탄력도가 0.1% 상승한 반면, 실시예 1을 사용한 후에는 피부 탄력도가 6.6¾> 개선되어 현저하게 우 수한 효과를 보임을 확인할 수 있다.
<50>
<5i> [시험예 3] 보습력의 시험관내 (in vitro) 테스트
<52> 콜라젠과 섬유아세포 (Fibrobalst)로 만들어진 인공진피 (Dermal Equivalent) 에 실시예 1 및 비교예 1을 각각 도포하고 도포 직후 및 도포 후 5시간 경과 후의 인공진피의 모양을 도 3에 도시하였으며， 각 수분증발량을 측정하여 그 결과를 도 4에 도시하였다.
<53> 도 3 및 도 4를 보면 비교예 1은 수분이 증발되어 콜라젠 젤 모양이 흐트러 짐을 확인할 수 있는 반면 실시예 1은 수분증발을 저해하여 콜라젠 젤 원래의 모 양을 유지함을 확인할 수 있다. <54> 또한 비교예 1과 실시예 1의 수분증발량이 5시간 이후 10% 이상 차이남을 확 인할 수 있다.
<55>
<56> [시험예 4] 타이트 정션 (Tight junction) 단백질의 발현 시험관내 테스트
<57> 타이트 정션은 피부의 장벽기능 유지 및 강화에 중요한 기능을 담당한다. 이 타이트 정션의 기능은 타이트 정션에서 특이적으로 발현되는 세포막 단백질인 오클 루딘 (occludin)으로 확인할 수 있는데， 타이트 정션 단백질 발현이 저해되면 TEWL(Transepidermal Water Loss 경표피 수분 손실)이 크게 증가하므로 수분 손실 과의 관련성이 높다고 할 수 있다.
<58> 인간유래 각질형성세포 (HaCaT)를 현미경 관찰을 위해 커버슬립에서 배양 하 였다. 이 때 비교예 1과 실시예 1을 각각 처리한 군올 따로 배양하였다. 24시간 후 ImM CaCl2, ImM .MgCl2 포함된 PBS로 씻어준 후 파라포름알데히드 용액으로 세포를 고정하였다. 0.1% Triton X-100 용액으로 세포막의 투과도를 높인 후， 오클루딘에 대한 1차 항체를 1시간 동안 붙였다. 다시 한 번 PBS로 세포를 씻어준 후， 형광 관 찰을 위해 2차 항체 (Alexar fluor 488)를 1시간 동안 붙였다. 형광 현미경 (LSM510) 을 이용하여 오클루딘 단백질 발현량 변화를 관찰하였다. 그 결과는 도 5에 나타내 었다.
<59> 그 결과 비교예 1을 처리한 인간유래 각질형성세포에서는 타이트 정션 특이 적 단백질인 오클루딘의 발현을 관찰할 수 없었으나， 실시예 1을 처리한 인간유래 각질형성세포에서는 오클루딘의 발현이 증가함을 확인할 수 있었다.
<60>

Claims

【청구의 범위】
【청구항 1】
유효성분으로 다시마추출물, 미역추출물 및 차전자추출물을 함유하는 화장료 조성물.
【청구항 2]
제 1항에 있어서， 상기 다시마추출물은 참다시마추출물임을 특징으로 하는 화 장료 조성물.
【청구항 3】
제 1항에 있어서， 상기 미역추출물은 참미역추출물임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
【청구항 4】
제 1항에 있어서， 상기 다시마추출물， 미역추출물 및 차전자추출물은 조성물 총 중량에 대하여 각각 0.001~10중량 ¾의 먕으로 함유됨을 특징으로 하는 화장료 조 성물.
【청구항 5】
계 1항에 있어서， 상기 조성물은 피부 수분량 증진용임을 특징으로 하는 화장 료 조성물.
【청구항 6】
제 1항에 있어서, 상기 조성물은 타이트 정션 (tight junction) 단백질 발현 증진용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
【청구항 7】
거 U항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 의한 화장료 조성물의 피부 보습용으로서 의 용도.
【청구항 8】
거 11항 내지 게 6항 중 어느 한 항에 의한 화장료 조성물의 피부 탄력 증진용 으로서의 용도.
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