WO2010131909A2 - 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제 및 상기 질환의 치료 또는 예방 방법 - Google Patents

호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제 및 상기 질환의 치료 또는 예방 방법 Download PDF

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Definitions

  • the present invention provides a pharmaceutical preparation for intra-respiratory administration for the treatment or prevention of respiratory inflammatory diseases containing a peptide acting on a formyl peptide receptor (FPR) or a similar receptor thereof.
  • a method of treating or preventing a kit, and a kit comprising said agent is a pharmaceutical preparation for intra-respiratory administration for the treatment or prevention of respiratory inflammatory diseases containing a peptide acting on a formyl peptide receptor (FPR) or a similar receptor thereof.
  • FPR formyl peptide receptor
  • Respiratory diseases generally involve inflammation, which exacerbates conditions in the bronchus, lungs, and the like.
  • respiratory inflammatory diseases include acute upper respiratory tract infection, respiratory inflammatory disease caused by Th1 or Th17 immune response, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), chronic sinusitis, allergic rhinitis, chronic lower respiratory tract infection, chronic bronchitis, emphysema, Pneumonia, bronchial asthma, pulmonary tuberculosis sequelae, acute respiratory distress syndrome ( ⁇ ⁇ ⁇ ), cystic fibrosis, pulmonary fibrosis and the like.
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • the human body has evolved to develop a defense mechanism against bacterial infection using N-formylmethionyl peptides produced from bacteria as chemoattractants for phagocytic cells, in particular neutrophils and monocytes.
  • N-formylmethionyl peptides produced from bacteria as chemoattractants for phagocytic cells, in particular neutrophils and monocytes.
  • FMLP f-Met-Leu-Phe
  • Synthetic tetrapeptides in particular f-Met-Ile-Phe-Leu and f-Met-Leu-Phe-Ile, have also been shown to elicit neutrophil responses [Rot et al., Proc. Natl, Acad, Scie, USA 84: 7967-7971, 1987]. Initially the efficacy of the peptide was believed to be due to 1) the N-terminal formyl group, 2) methionine side chains, and 3) leucine and phenylalanine side chains.
  • the first and third intracellular loops are relatively small and consist of five and six amino acids, respectively.
  • the carboxyl terminus is exposed to the intracellular space, while the N-terminus is exposed to the extracellular space.
  • Intracellular sequences also include G-protein-binding regions (regions essential for the receptor's action) and latent phosphorylation regions.
  • Trp-Lys-Tyr-Met-Val-d-Met (WKYMVm; SEQ ID NO: 4), consisting of six amino acids, is known to bind to the formyl peptide receptor (FPR) and its analog, formyl peptide receptor-like 1 (FPRL1).
  • FPR formyl peptide receptor
  • FPRL1 formyl peptide receptor-like 1
  • WKYMVm is a short peptide with high affinity for a wide range of receptors and thus may be useful for the study of FPR- or FPRL1-mediated signaling [WO / 2005/077412; Le, Y., Oppenheim, J. J., and Wang, J. M. (2001) Cytokine Growth Factor Rev.
  • the present inventors have found that when a specific peptide acting on the FPR or a similar receptor thereof has a significant respiratory inhibitory effect when administered through the respiratory tract, the present inventors have found a remarkable effect in the treatment or prevention of respiratory inflammatory diseases. .
  • a pharmaceutical preparation for intra-respiratory administration for the treatment or prevention of respiratory inflammatory diseases containing a peptide that acts on the FPR or a similar receptor thereof, and a kit comprising the preparation, and the preparation
  • the present invention provides a method of treating or preventing respiratory inflammatory diseases by inhibiting respiratory inflammation by administering inwardly.
  • a pharmaceutically or veterinary acceptable carrier that can be administered in the respiratory system; And a peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof that acts on a formyl peptide receptor (FPR) or similar receptor thereof in an amount effective to inhibit respiratory inflammation, in the respiratory tract for the treatment or prevention of respiratory inflammatory diseases.
  • FPR formyl peptide receptor
  • a pharmaceutical formulation for administration is provided.
  • kits comprising the pharmaceutical formulation for administration in the respiratory system and the administration device.
  • Another aspect of the invention provides a method of treating or preventing a respiratory inflammatory disease, comprising administering the pharmaceutical formulation for intrarespiratory administration into a respiratory system of a mammal.
  • Intraperitoneal injection of a peptide acting on FPR in a mouse model had no inhibitory effect on respiratory inflammation, but intraperitoneal administration containing a peptide acting on a formyl peptide receptor (FPR) or a similar receptor thereof.
  • FPR formyl peptide receptor
  • Figure 1 schematically shows a method using a mouse with an asthma model showing a Th1 + Th17 immune response.
  • Figure 2 shows the results obtained through the inflammatory cell count in bronchial alveolar lavage fluid, which showed the inflammatory response at 22 days, 6 hours after the last allergen administration, by injecting a peptide acting on FPR into the mouse asthma model abdominal cavity.
  • Figure 3 shows the Th1 immune response at 22 days, 6 hours after the last allergen administration by injecting a peptide acting on the FPR into the mouse asthma model abdominal cavity, showing the results of cytokine expression in lung tissue and bronchoalveolar lavage fluid.
  • Figure 4 shows the Th17 immune response at 22 days, 6 hours after the last allergen administration by injecting a peptide acting on FPR into the mouse asthma model abdominal cavity, showing the results of cytokine expression in lung tissue and bronchoalveolar lavage fluid.
  • FIG. 5 shows the bronchial alveolar lavage fluid of cytokines secreted from inflammatory cells infiltrated by Th17 immune response and IL-17 at 22 days, 6 hours after the last allergen administration, by injecting a peptide acting on FPR into the mouse asthma model abdominal cavity. It shows the result measured in.
  • Figure 6 shows the results obtained by measuring the inflammatory response in the bronchoalveolar lavage fluid 24 hours after the last allergen administration injected into the mouse asthma model intraperitoneal injection of peptides acting on FPR.
  • FIG. 7 shows the bronchial alveolar lavage fluid secretion of cytokines secreted from inflammatory cells infiltrated by Th1 and Th17 immune responses at 24 hours after the last allergen administration by injecting peptides acting on FPR into the mouse asthma model abdominal cavity. It shows the result measured in.
  • Figure 8 shows the results of the inflammatory response measured in the bronchial alveolar lavage fluid on day 22, 6 hours after allergen administration to the mouse asthma inhalation of the peptide acting on the FPR in the mouse asthma model.
  • FIG. 9 shows the Th1 immune response of the peptide acting on the FPR by nasal inhalation in the mouse asthma model and on day 21, 6 hours after allergen administration at 21 days, measured in regional lymph nodes, lung tissue and bronchoalveolar lavage fluid. The results are shown.
  • FIG. 10 shows a Th17 immune response at 22 days, 6 hours after allergen administration, and the peptides acting on FPR were administered by nasal inhalation in a mouse asthma model, measured in local lymph nodes, lung tissues and bronchoalveolar lavage fluid. The results are shown.
  • Figure 11 is a peptide acting on the nasal inhalation of the peptide acting in the nasal asthma model, and the Th2 immune response on day 22, which is 6 hours after allergen administration at 21 days, and shows the results measured in lung tissue.
  • FIG. 13 shows the results of measurement of bronchial hypersensitivity at 23 days, 24 hours after allergen administration and administration of the peptide acting on FPR by nasal inhalation into the mouse asthma model.
  • Figure 14 is a mouse asthma inhalation of the peptide acting on the model of asthma, and the inflammatory response was seen on 24 days, 48 hours after allergen administration on day 22, showing the results measured in bronchoalveolar lavage fluid.
  • FIG. 15 shows bronchial secretion of inflammatory cytokines secreted from inflammatory cells infiltrated by Th17 immune response at 24 days, 24 hours after allergen administration, and peptides acting on FPR in a mouse asthma model. The results obtained from alveolar lavage fluid are shown.
  • FIG. 16 shows bronchial secretion of inflammatory cytokines secreted from inflammatory cells infiltrated by Th1 immune response at 24 days, 24 hours after allergen administration, and peptides acting on FPR in a mouse asthma model. The results obtained from alveolar lavage fluid are shown.
  • 'about' or 'substantially' is generally intended to provide room for limitation by exact numbers.
  • "about” or “substantially” means not limited to the number of amino acids described. As long as functional activity such as binding activity is present, some amino acids added or removed at the N-terminus or C-terminus may be included.
  • 'carriers' are pharmaceutically acceptable carriers, excipients or stabilizers, including those that are not toxic to cells or mammals exposed to the material at the concentrations and doses employed.
  • Pharmaceutically acceptable carriers may be aqueous pH buffer solutions.
  • Examples of pharmaceutically acceptable carriers include buffers such as phosphate, citrate, and other organic acids; Antioxidants such as ascorbic acid; Low molecular weight polypeptides (up to about 10 residues); Proteins such as serum albumin, gelatin or immunoglobulins; Hydrophilic polymers such as polyvinylpyrrolidone; Amino acids such as glycine, glutamine, asparagine, arginine or lysine; Monosaccharides, disaccharides or other hydrocarbons such as glucose, mannose or dextrins; Chelating agents such as EDTA; Sugar alcohols such as mannitol or sorbitol; Salt-forming counterions such as sodium; And or nonionic surfactants such as TWEEN, polyethylene glycol (REG) and PLURONICS.
  • buffers such as phosphate, citrate, and other organic acids
  • Antioxidants such as ascorbic acid
  • Low molecular weight polypeptides up to about 10 residues
  • Proteins
  • 'effective amount' or 'effective amount' means an amount sufficient to produce a beneficial or desired clinical or biochemical result.
  • An effective amount can be administered once or twice.
  • an effective amount of the active compound is an amount sufficient to alleviate, ameliorate, stabilize, reverse, slow or slow the progression of the disease state.
  • the 'effective amount' is defined as the amount of the compound which can inhibit the binding of the FPR family receptor and its agonist.
  • the 'FPR analog' may include, for example, but not limited to, formyl peptide receptor-like 1 (FPRL1), FPRL2, and the like.
  • FPRL1 formyl peptide receptor-like 1
  • FPRL2 formyl peptide receptor-like 1
  • 'W-peptide' refers to a ligand having a high affinity for FPR and its analogs and includes peptides, polypeptides, and / or proteins comprising a W-peptide amino acid sequence, All possible variants or fragments of a polypeptide comprising a W-peptide amino acid sequence are included.
  • a pharmaceutically or veterinary acceptable carrier that can be administered in the respiratory system; And a peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof that acts on a formyl peptide receptor (FPR) or similar receptor thereof in an amount effective to inhibit respiratory inflammation, in the respiratory tract for the treatment or prevention of respiratory inflammatory diseases.
  • FPR formyl peptide receptor
  • a pharmaceutical formulation for administration is provided.
  • the peptide may include, for example, hexapeptide as a W-peptide, but the present invention is not intended to be limited to the hexapeptide.
  • the peptide may be slightly longer or shorter.
  • the peptide antagonizes the formyl peptide receptor and its analogous receptor mediated signaling, the peptide consists of 4 to 15 amino acids, preferably 4 to 10 amino acids, more preferably 4 to 7 amino acids. Or about 6 amino acids.
  • the peptide may be composed of an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1 to 28 shown in Table 1 below, but is not limited thereto.
  • the peptide may be composed of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, but is not limited thereto.
  • the carrier may be a gas, a liquid or a solid.
  • the pharmaceutical formulation for intra-respiratory administration may be a formulation administered nasal, inhalable, respirable, intrapulmonary or intratracheal.
  • the pharmaceutical preparation for intra-respiratory administration may be an aerosol or spray comprising liquid particles or powder particles of the carrier on which the peptide is carried.
  • the pharmaceutical preparation for inhalation administration may be an inhalable or respirable preparation comprising particles of substantially about 10 ⁇ m or less in diameter including the carrier on which the peptide is carried.
  • the pharmaceutical preparation for intra-respiratory administration may be a nasal, pulmonary or intratracheal formulation comprising particles of substantially less than about 100 ⁇ m in diameter including a carrier on which the peptide is carried.
  • kits comprising a pharmaceutical formulation and an administration device for intra-respiratory administration according to an aspect of the present invention.
  • the dosing device may include an aerosol or spray generator, but is not limited thereto.
  • the aerosol generator may include an inhaler, but is not limited thereto.
  • the inhaler may be to carry a dosage of a previously metered formulation, but is not limited thereto.
  • the inhaler may include a nebulizer or an insufflator, but is not limited thereto.
  • the kit is such that the dosing device comprises a compressed inhaler and the preparation comprises a suspension or solution of an aqueous or non-aqueous liquid, or an oil-in-water or water-in-oil emulsion. Can be.
  • the kit may be provided as a capsule, cartridge or blister, which may be a penetrating or opening capsule, cartridge or blister.
  • the dosing device may be pressurized and operated with the aid of a propeller.
  • a peptide, a functional derivative, a precursor, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, which acts on the FPR or its analogous receptor, which is an active ingredient is applied into the respiratory system by inhalation, respiration, nasal administration or by any suitable means. It may be administered by intrapulmonary instillation of (into the lungs), preferably by powdering or generating an aerosol or spray containing liquid nasal, intrapulmonary, respirable or inhalable particles. Respirable or inhalable particles containing peptide active ingredients that act on the FPR or similar receptor thereof are inhaled by the subject, i.e., by inhalation or nasal administration or instillation into the respiratory tract or lung itself.
  • the pharmaceutical preparation for intra-respiratory administration may contain respirable or inhalable liquid or solid particles of the peptide active ingredient, and, according to the present invention, is inhaled through the oral cavity and larynx, and the bronchus of the lung And respirable or inhalable particles of a size small enough to persist into the alveoli.
  • the particles included in the pharmaceutical formulation for inhalation administration have a diameter of about 10 ⁇ m or less, for example about 0.05, about 0.1, about 0.5, about 1, about 2 to about 4, about 6, about 8, About 10 ⁇ m in size. More specifically, about 0.5 to about 5 ⁇ m or less in size are respirable or inhalable.
  • Non-breathable particles contained in an aerosol or spray tend to deposit and swallow on the neck.
  • the amount of non-respirable particles in the aerosol is preferably minimized.
  • particle sizes in the range of about 8, about 10, about 20, about 25 to about 35, about 50, about 100, about 150, about 250, about 500 microns It is desirable to ensure or to instill, and to deposit directly into the lungs. Especially when administered to newborns and fetuses, liquid preparations may be ejected into the respiratory (nose) and lungs.
  • the peptide active ingredient may be prepared by combining a stable vehicle, such as sterile water free of pyrogens.
  • a stable vehicle such as sterile water free of pyrogens.
  • the solid particulate composition containing the respirable dry particles of the micronized peptide active ingredient breaks up large chunks by causing the dry active compound to pulverize and pestle and then passing the micronized composition through a 400 mesh screen.
  • the solid particulate composition containing the peptide active ingredient may optionally include a dispersant provided to promote formation of aerosol. Suitable dispersants are lactose, which may be mixed with the active compound in any suitable ratio, such as in a one to one weight ratio.
  • the aerosol of the liquid particles containing the peptide active ingredient can be prepared by any suitable means, such as a nebulizer (see eg US Pat. No. 4,501,729).
  • Nebulizers via narrow venturi orfice, by means of acceleration of compressed gas, typically air or oxygen, or by means of ultrasonic vibration, treat a solution or suspension of the peptide active ingredient as a therapeutic aerosol mist. It is a commercially available device that converts.
  • compositions for use in nebulizers contain 40% w / w of the peptide active ingredient, preferably 20% w / w or less, in a liquid carrier, and are typically carriers, preferably water or dilute aqueous alcohol solutions, for example
  • the addition of sodium chloride includes body fluids and isotonic carriers.
  • Optional additives include preservatives such as methyl hydroxybenzoate, anti-oxidants, fragrances, volatile oils, buffers, and surfactants if the composition is not aseptically prepared. Aerosols of solid particles containing the peptide active ingredient can likewise be prepared with any solid particulate drug aerosol generator.
  • An aerosol generator for administering a solid particulate drug to a subject generates respirable particles as described above, and generates an aerosol volume containing a predetermined metered dose of drug at a rate suitable for administration to a human.
  • aerosol generators include metered dose inhalers and insufflators.
  • Another aspect of the present invention provides a method for treating or preventing respiratory inflammatory diseases, comprising administering a pharmaceutical preparation for intra-respiratory administration according to an aspect of the present invention into a respiratory system of a mammal.
  • the method of treating or preventing the respiratory inflammatory disease comprises administering the agent intranasally, intrapulmonary, inhaled or into the respiratory tract of the mammal.
  • the respiratory inflammatory disease is acute upper respiratory tract infection, respiratory inflammatory disease caused by Th1 or Th17 immune response, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), chronic sinusitis, allergic rhinitis, chronic lower respiratory tract infection, emphysema , Pneumonia, bronchial asthma, pulmonary tuberculosis sequelae, acute respiratory distress syndrome ( ⁇ ⁇ ⁇ ), cystic fibrosis and pulmonary fibrosis may be selected from the group consisting of one or two or more, but is not limited thereto.
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • the acute upper respiratory tract infection is one or two selected from the group consisting of cold, acute pharyngitis, acute rhinitis, acute sinusitis, acute tonsillitis, acute laryngitis, acute laryngitis and acute tracheitis It may be an abnormal disease.
  • the chronic lower respiratory tract infection may be one or two or more diseases selected from the group consisting of chronic bronchitis, diffuse bronchiolitis, and bronchiectasis have.
  • the disease may include allergic rhinitis.
  • the disease may include a respiratory inflammatory disease caused by a Th1 or Th17 immune response.
  • the disease may include chronic obstructive pulmonary disease (COPD).
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • a pharmaceutical preparation for intra-respiratory administration containing a peptide that acts on the FPR or a similar receptor thereof exhibits a remarkable inhibitory effect on respiratory inflammation by administration through the respiratory tract, thereby exhibiting the effect of treating or preventing the respiratory inflammatory disease.
  • Peptides acting on the FPR or similar receptor thereof of the present invention may be administered by single dose, multiple discrete doses, or continuous infusion.
  • Peptides acting on the FPR or similar receptor thereof of the present invention are provided in a wide range of contents in the pharmaceutical preparations for the inhalation administration.
  • the peptide may be present in about 0.001%, about 1%, about 2%, about 5%, about 10%, about 20%, about 40%, about 90%, about 98%, of the entire pharmaceutical formulation for intra-respiratory administration, Or in an amount of about 99.999%.
  • the content of the peptide can be adjusted.
  • the dosage of the peptide content may vary depending on the subject's age, weight, and disease.
  • the peptide active ingredient acting on the FPR or a similar receptor thereof contained in the pharmaceutical preparation for intra-respiratory administration of the present invention has a dosage level of about 0.001 mg / kg / d to about 100 mg / kg / d.
  • the dosage level is about 0.1 mg / kg / d to about 100 mg / kg / d.
  • the dosage level is about 1 mg / kg / d to about 10 mg / kg / d.
  • Specific dosage levels for any particular patient may include the activity and possible toxicity of the specific active ingredient employed; The age, body weight, general health, sex, and diet of the patient; Dosing time; Discharge rate; Drug combinations; Severity of the disease; And various factors including the form of administration.
  • in vitro dose-effect results provide useful guidelines for appropriate dosages for patient administration.
  • research is useful in animal models. Considerations for determining the appropriate dosage level are well known in the art and belong to the general practitioner's skill.
  • Comparative Example 1 Evaluation of Efficacy of WKYMVm (SEQ ID NO: 4) Systemically Administered by Intraperitoneal Injection
  • mice were used as ovalbumin (OVA) as allergens at 0, 1, 2 and 7 days in each of the experimental and positive control groups.
  • OVA ovalbumin
  • 75 ⁇ g and 10 ⁇ g of LPS (Lipopolysaccharide) as an adjuvant were sensitized by nasal administration.
  • allergens OVA, 50 ⁇ g
  • mice were administered systemically by intraperitoneal injection of WKYMVm 4 mg / kg.
  • mice belonging to the positive control group were injected with the same amount of phosphate-buffered saline (PBS) in the same abdominal cavity.
  • the negative control group was the same as the positive control group, except that the same amount of phosphorylated buffered saline (PBS) was used instead of allergens during the sensitization on day 0, 1, 2, and 7 and allergen administration on days 14, 15, 21, and 22. made.
  • a mouse asthma model is shown graphically in FIG. 1.
  • Airway hypersensitivity to methacholine was measured 24 hours after the last allergen dose.
  • the mouse was placed in a chamber and inhaled with phosphorylated buffered saline (PBS) solution for 3 minutes using a nebulizer, followed by non-invasive whole body plethysmography (Allmedicus, Korea).
  • the penh (enhanced pause) value was measured for 3 minutes.
  • 6.25, 12.5, 25, 50 mg / ml of methacholine PBS solution was inhaled sequentially in the mouse and the penh value for each concentration was measured.
  • the average penh value measured for 3 minutes was used as an indicator of airway obstruction.
  • BAL fluid Bronchoalveolar lavage fluid
  • the BAL solution was centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes at 4 degrees Celsius, and then the cell pellets were loosened in PBS solution. Cytospin the cell pellet and smear it on a slide and perform Diff Quick staining to observe more than 300 inflammatory cells under a 1000-fold optical microscope. Macrophage, Lymphocyte, and Neutrophil (Neutrophil) and eosinophils (Eosinophil) were classified into each inflammatory cell number was measured.
  • interleukins that reflect the cytokines gamma interferon, interferon-g-inducible protein 10 (IP-10), IL-12, and Th2 inflammatory responses that reflect Th1 inflammatory responses in BAL fluid ( IL) _4 [interleukin (IL) _4], IL-13, IL-17, which reflects Th17 inflammatory response, and TGF- ⁇ , which reflects Th2 and Th17 inflammatory response, were measured by ELISA method It was.
  • the isolated lung tissue was treated with collagenase type IV (Sigma) to isolate cells.
  • the surface of the cell was stained with anti-CD3, anti-CD4 and anti-CD8 (BD Pharmingen) antibodies attached to the surface of the cell, and then triton was used to puncture the cell membranes, followed by anti-IFN- ⁇ and anti-IL-17.
  • intracellular cytokine staining was performed with anti-IL-10 and anti-IL-4.
  • Expression analysis was performed to determine the type of T lymphocytes introduced into the lung using a FACSCalibur (Becton Dickinson), a fluorescence activated cell scanner.
  • Cells obtained from lymph nodes were incubated for 72 hours in a phosphorylated buffered saline solution at a concentration of 100 ⁇ g / ml OVA, and the cytokines gamma interferon, IL-17, IL- reflecting the Th1, Th17, and Th2 inflammatory responses in the solution. 4 and the like were measured by ELISA method.
  • FIG. 2 shows the results measured at 22 days, 6 hours after the last allergen administration.
  • the number of inflammatory cells in BAL fluid was increased in the asthma model sensitized with OVA and LPS compared to the negative control group sensitized with allergen alone regardless of intraperitoneal drug administration (FIG. 2).
  • the W-peptide systemic group increased the number of inflammatory cells rather than the placebo-positive control group.
  • ⁇ -cell interferon secretion was also increased in inflammatory cells isolated from lung tissue (FIG. 3A), which was accompanied by increased secretion of IP-10 (FIG. 3B) and IL-12p40 (FIG. 3C) in BAL fluid.
  • CD4 + T cells expressing IL-17 were also increased in inflammatory cells isolated from lung tissue (FIG. 4A), and IL-17 secretion in BAL fluid was also increased (FIG. 4B). This change was accompanied by increased secretion of IL-6 (FIG. 5A) and TNF-a (FIG. 5B), which are considered downstream molecules of IL-17 in BAL fluid.
  • FIG. 6 and 7 show the results measured at 24 days after the last allergen administration.
  • the number of inflammatory cells in BAL fluid which is an indicator of pulmonary inflammation, was increased compared to the negative control group administered with allergen alone when LPS was sensitized with allergen, but W-peptide was detected in mice allergen- and LPS-sensitized mice. There was no difference between the experimental group administered systemically and the positive control group administered placebo.
  • the experimental group in which W-peptide was administered systemically in mice sensitized with allergen and LPS were also detected in the amounts of cytokines IL-12p40 (FIG. 7A) and TGF-b (FIG. 7B) measured by ELISA in BAL fluid.
  • IL-12p40 concentration indicates the degree of Th1 immune response
  • TGF-b concentration indicates the degree of Th17 / Th2 immune response, it can be seen that there is no change in pulmonary inflammation.
  • WKYMVm was injected into the abdominal cavity and administered systemically, instead of systemically, the efficacy was evaluated in the same manner as in Comparative Example. Allergen [OVA 50 ⁇ g] was challenged nasal with WKYMVm 200 ⁇ g / kg at 14, 15, 21 and 22 days. Other procedures were performed in the same manner as the comparative example.
  • IL-1 ⁇ (FIG. 12d) and IL-1 ⁇ (FIG. 12d), which are considered downstream molecules of IL-17, also decreased compared to the positive control in the experimental group.
  • secretion of inflammatory cytokines induced by Th1 and Th17 cytokines (chemokine), MCP-1 (FIG. 12E) and MIP-1a (FIG. 12F) was also reduced in the experimental group compared to the positive control group.
  • FIG. 13 shows airway hyperresponsiveness measured at 23 days, 24 hours after the last allergen administration.
  • Penh an indicator of airway obstruction
  • 14 to 16 show the results at 24 hours, 48 hours after the last allergen administration.
  • the BAL cellularity in BAL fluid an indicator of pulmonary inflammation, was also significantly reduced in the experimental group compared to the positive control group (FIG. 14).
  • IL-17 secretion an indicator of Th17 immune response in BAL fluid, was increased in the experimental group compared to the positive control group (FIG. 15), whereas TGF- ⁇ secretion in inflammatory cells infiltrated by IL-17 was positive in the experimental group.
  • WKYMVm was directly administered to the respiratory tract through the nasal cavity, unlike the systemic administration of the intraperitoneal injection.
  • compositions for respiratory administration containing a peptide acting on the formyl peptide receptor (FPR) of the present invention or a similar receptor thereof may be useful for the treatment or prevention of respiratory inflammatory diseases because of its remarkable inhibitory effect on respiratory inflammation. It is expected.
  • FPR formyl peptide receptor

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Abstract

본 발명은, 포밀 펩타이드 수용체(formyl peptide receptor, FPR) 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드를 호흡기 염증을 억제하는 데 효과적인 양으로 함유하는, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제, 상기 제제를 이용하여 호흡기 염증성 질환을 치료 또는 예방하는 방법 및 상기 제제를 포함하는 키트에 관한 것으로서, 상기 펩타이드를 주사로 전신에 투여하는 경우에 비해 직접 호흡기에 투여함으로써 호흡기 염증 억제 효과가 현저히 향상된다.

Description

호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제 및 상기 질환의 치료 또는 예방 방법
본 발명은, 포밀 펩타이드 수용체(formyl peptide receptor, FPR) 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드를 함유하는 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제, 상기 제제를 이용하여 호흡기 염증성 질환을 치료 또는 예방하는 방법, 및 상기 제제를 포함하는 키트에 관한 것이다.
호흡기 질환은 일반적으로 염증을 수반하며, 이는 기관지, 폐 등의 상태를 악화시킨다. 이와 관련하여, 호흡기 염증성 질환으로는, 급성 상기도 감염증, Th1 혹은 Th17 면역반응에 의한 호흡기 염증성 질환, 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD), 만성 부비강염, 알레르기성 비염, 만성 하기도 감염증, 만성 기관지염, 폐기종, 폐렴, 기관지 천식, 폐결핵 후유증, 급성 호흡 궁박증후군(窮迫症候群), 낭포성 섬유증, 폐섬유증 등이 있다.
이에 호흡기 염증을 억제함으로써 상기 호흡기 염증성 질환을 치료 또는 예방할 수 있으나, 여전히 만족할 만한 약효를 갖는 호흡기 염증성 질환을 치료 또는 예방하는 약제의 개발이 요구되고 있다.
한편, 인체는 식균세포, 특히 호중구(neutrophil) 및 단핵구(monocyte)에 대한 화학유인물질로서 박테리아로부터-생산된 N-포르밀메티오닐 펩티드를 사용하여 박테리아 감염에 대한 방어기전을 개발하도록 진화하였다. N-포르밀 펩티드 중, f-Met-Leu-Phe(FMLP)가 식균세포를 보충하고 호중구에 의한 리소솜성 효소의 방출을 촉진한다는 능력면에서 가장 효능이 있는 것으로 확인되었다 [Showell et al., J, Exp. Med, 143:1154-1169, 1976]. 합성 테트라펩티드, 특히, f-Met-Ile-Phe-Leu 및 f-Met-Leu-Phe-Ile는 또한 이후에 호중구 반응을 유발시키는 것으로 나타났다 [Rot et al., Proc. Natl, Acad, Scie, USA 84:7967-7971, 1987]. 초기에 상기 펩티드의 효능은 1) N-말단의 포르밀 그룹, 2) 메티오닌 측쇄, 및 3) 류신 및 페닐알라닌 측쇄에 기인하는 것으로 여겨졌다.
N-포르밀 펩티드 수용체 (FRP = formyl peptide receptor) 는 세포외 공간 또는 세포내 공간중 어느 것에 노출된 친수성 서열에 의해 연결된 원형질막에 놓여진 7개의 소수성 영역을 포함한다(Murphy, Annu. Rev. Immunol. 12: 593-633, 1994). 첫째 및 세째 세포내 루프(loop)는 상대적으로 작고, 각각 5개 및 6개의 아미노산으로 구성된다. 카복실 말단은 세포내 공간에 노출되는 반면, N-말단은 세포외 공간에 노출된다. 세포내 서열은 또한 G-단백질-결합 영역 (수용체의 작용에 필수적인 영역) 및 잠재성 인산화 영역을 포함한다.
6개의 아미노산으로 이루어진 Trp-Lys-Tyr-Met-Val-d-Met(WKYMVm; 서열 번호 4)이 FPR(formyl peptide receptor) 및 그 유사체인 FPRL1(formyl peptide receptor-like 1)에 결합한다고 알려져 있으며, WKYMVm은 넓은 범위의 수용체에 대하여 높은 친화도를 가지는 짧은 펩타이드이므로 FPR- 또는 FPRL1-매개된 시그널링의 연구에 유용할 수 있다 [국제특허출원공개 WO/2005/077412; Le, Y., Oppenheim, J. J., and Wang, J. M. (2001) Cytokine Growth Factor Rev. 12, 91-105); Bae YS et al., Journal of Leukocyte Biology 71(2): 329-338 (2002); Christophe T et al., Journal of Biological Chemistry 276(24): 21585-21593 (2001); He R et al., Journal of Immunology 165(8): 4598-4605 (2000); Li BQ et al., Blood 97(10): 2941-2947 (2001); Seo JK et al.,Journal of Immunology 158(4): 1895-1901 (1997); Seo JK et al., Clinical Biochemistry 31(3): 137-141 (1998)].
그러나, FPR또는 이의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드를 질병 치료에 이용한 예는 많지 않다. WKYMVm(서열 번호: 4)를 사용하여 백혈병 환자나 화학치료를 받은 암환자가 박테리아에 대한 저항력을 높였다고 보고되었다 [H. Kim et al., Leukemia Research 32(5):717-725 (2008); H. Kim et al., Experimental Hematology 34(4):407-413 (2006)]. WKYMVm 및 이와 아미노산 서열이 유사한 펩타이드를 사용하여 면역 반응을 조절하는 방법이 보고되었다 [WO2005/077412]. 그러나 FPR또는 이의 유사 수용체에 작용하는 WKYMVm 등의 펩타이드를 호흡기 염증 억제에 사용한 예는 알려져 있지 않으며, 특히, 다른 투여 경로에 비하여 호흡기내에 투여함으로써 호흡기 염증을 현저하게 억제할 수 있는 것에 대하여는 아직 보고된 바 없다.
본 발명자들은, 상기 FPR 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 특정 펩타이드를 호흡기를 통하여 투여하는 경우 현저한 호흡기 염증 억제 효과를 나타내어 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방에 있어 현저한 효과를 나타냄을 발견하고 본 발명을 완성하였다.
이에, 본 발명의 기술적 과제는, FPR 또는 이의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드를 함유하는, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제 및 상기 제제를 포함하는 키트, 및 상기 제제를 호흡기 내로 투여함으로써 호흡기 염증을 억제하여 호흡기 염증성 질환을 치료 또는 예방할 수 있는 방법을 제공하는 것에 있다.
그러나, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 목적을 해결하기 위하여, 본 발명의 일 측면은, 호흡기내 투여 가능한 약학적 또는 수의학적 허용 담체; 및 포밀 펩타이드 수용체(formyl peptide receptor, FPR) 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드 또는 그의 약학적 허용가능한 염을 호흡기 염증을 억제하는 데 효과적인 양으로 함유하는, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제를 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 상기 호흡기내 투여용 약학 제제 및 투여 장치를 포함하는 키트를 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 호흡기내 투여용 약학 제제를 포유 동물의 호흡기 내로 투여하는 것을 포함하는, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방 방법을 제공한다.
마우스 모델에서 FPR에 작용하는 펩타이드를 복강에 주사하여 전신 투여한 경우에는 호흡기 염증 억제 효과가 없었으나, 포밀 펩타이드 수용체(formyl peptide receptor, FPR) 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드를 함유하는 호흡기내 투여용 약학 제제를 흡입을 통해 호흡기로 투여한 경우에는 호흡기 염증 억제 효과가 뚜렷하게 나타났다. 이에, 상기 펩타이드를 주사로 전신에 투여하는 경우에 비해 본 발명에 따라 직접 호흡기에 투여함으로써 호흡기 염증 억제 효과가 현저히 향상된다. 이에 이러한 본 발명의 상기 FPR 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 특정 펩타이드를 함유하는 호흡기내 투여용 약학 제제를 호흡기를 통하여 투여하는 경우 현저한 호흡기 염증 억제 효과를 나타내어 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방에 있어 현저한 효과를 나타낸다.
도 1은 Th1+Th17 면역반응을 보이는 천식모델을 마우스를 이용하여 만든 방법을 도식적으로 보인 것이다.
도 2 는 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델 복강에 주사하여 전신 투여하고 마지막 알레르겐 투여 6 시간 후인 22 일에 염증 반응을 본 것으로, 기관지폐포 세척액에서 염증세포 수를 통해 얻은 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델 복강에 주사하여 전신 투여하고 마지막 알레르겐 투여 6 시간 후인 22 일에 Th1 면역반응을 본 것으로, 폐조직 및 기관지폐포세척액에서 사이토카인 발현 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델 복강에 주사하여 전신 투여하고 마지막 알레르겐 투여 6 시간 후인 22 일에 Th17 면역반응을 본 것으로,폐조직 및 기관지폐포세척액에서 사이토카인 발현 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델 복강에 주사하여 전신 투여하고 마지막 알레르겐 투여 6 시간 후인 22 일에 Th17 면역반응 및 IL-17에 의해 침윤된 염증세포에서 분비된 사이토카인을 기관지폐포세척액에서 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델 복강에 주사하여 전신 투여하고 마지막 알레르겐 투여 48 시간 후인 24 일에 측정한 염증반응을 기관지폐포세척액에서 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델 복강에 주사하여 전신 투여하고 마지막 알레르겐 투여 48 시간 후인 24 일에 Th1 및 Th17 면역반응에 의해 침윤된 염증세포에서 분비되는 사이토카인의 분비를 기관지폐포세척액에서 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 8은 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델에 비강으로 흡입시켜 투여하고 21 일에 알레르겐 투여 후 6 시간인 22 일에 기관지폐포세척액에서 측정한 염증 반응 결과를 나타낸 것이다.
도 9는 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델에 비강으로 흡입시켜 투여하고 21 일에 알레르겐 투여 후 6 시간인 22 일에 Th1 면역반응을 본 것으로, 국소림프절, 폐조직 및 기관지폐포세척액에서 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 10은 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델에 비강으로 흡입시켜 투여하고 21 일에 알레르겐 투여 후 6 시간인 22 일에 Th17 면역반응을 본 것으로, 국소림프절, 폐조직 및 기관지폐포세척액에서 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 11은 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델에 비강으로 흡입시켜 투여하고 21 일에 알레르겐 투여 후 6 시간인 22 일에 Th2 면역반응 등을 본 것으로, 폐조직에서 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 12는 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델에 비강으로 흡입시켜 투여하고 21 일에 알레르겐 투여 후 6 시간인 22 일에 Th1 및 Th17 면역반응에 의해 염증세포 침윤 및 침윤된 염증세포에서 분비되는 염증성 매개체의 분비를 기관지폐포세척액에서 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 13은 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델에 비강으로 흡입시켜 투여하고 22 일에 알레르겐 투여 후 24 시간인 23 일에 기관지과민성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 14는 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델에 비강으로 흡입시켜 투여하고 22 일에 알레르겐 투여 후 48 시간인 24 일에 염증반응을 본 것으로, 기관지폐포세척액에서 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 15는 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델에 비강으로 흡입시켜 투여하고 22 일에 알레르겐 투여 후 48 시간인 24 일에 Th17 면역반응에 의해 침윤된 염증세포에서 분비되는 염증성 사이토카인의 분비를 기관지폐포세척액에서 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 16은 FPR에 작용하는 펩타이드를 마우스 천식 모델에 비강으로 흡입시켜 투여하고 22 일에 알레르겐 투여 후 48 시간인 24 일에 Th1 면역반응에 의해 침윤된 염증세포에서 분비되는 염증성 사이토카인의 분비를 기관지폐포세척액에서 측정한 결과를 나타낸 것이다.
본 명세서에 사용된 바로서, '약' 또는 '실질적으로'는 일반적으로 정확한 숫자에 의한 한정에 여지를 제공하기 위한 것이다. 예컨대, 펩타이드 서열의 길이를 나타내는 문장에 사용되는 경우, '약' 또는 '실질적으로'는 기재된 아미노산 개수에 한정되지 않음을 나타내는 것이다. 결합 활성 등의 기능적 활성이 존재하는 한, N-말단 또는 C-말단에 첨가되거나 제거된 약간의 아미노산이 포함될 수 있다.
본 명세서에 사용된 바로서, '담체(carriers)'는 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 안정화제로서, 사용된 농도 및 용량에서 상기 물질에 노출된 세포 또는 포유류에 대하여 독성이 없는 것을 포함한다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 수용성 pH 버퍼 용액인 경우도 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체의 예로서 포스페이트, 시트레이트, 및 다른 유기산과 같은 버퍼; 아스코르브산 등의 항산화제; 저분자량 폴리펩티드 (약 10 잔기 이하); 혈청 알부민, 젤라틴 또는 이뮤노글로불린과 같은 단백질; 폴리비닐피롤리돈 등의 친수성 폴리머; 글라이신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌 또는 라이신 등의 아미노산; 글루코오스, 만노오스 또는 덱스트린과 같은 단당류, 이당류 또는 기타 탄화수소류; EDTA와 같은 킬레이팅제; 만니톨 또는 소르비톨 등의 당알코올; 소듐 등의 염 형성 카운터이온; 및 또는 TWEEN, 폴리에틸렌글리콜 (REG) 및 PLURONICS와 같은 비이온성 계면활성제를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 바로서, '효과적인 양(effective amount)' 또는 '유효량'은 이롭거나 소망하는 임상적 또는 생화학적 결과를 나타내기에 충분한 양을 의미한다. 유효량은 1회 또는 2회 이상 투여될 수 있다. 본 발명의 목적을 위하여, 활성 화합물의 유효량은 질병 상태의 진행을 완화, 개선, 안정화, 역전, 감속화 또는 지연시키기에 충분한 양이다. 본 발명의 바람직한 구체예에 있어서, '유효량'은 FPR 계열 수용체 및 이의 작용제의 결합을 억제할 수 있는 화합물의 양으로서 정의된다.
본 명세서에 사용된 바로서, 'FPR 유사체'로서 예를 들어 FPRL1 (formyl peptide receptor-like 1), FPRL2 등을 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 바로서, 'W-펩타이드'는 FPR 및 그의 유사체에 높은 친화도를 갖는 리간드를 나타내는 것으로서, W-펩타이드 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드, 폴리펩타이드, 및/또는 단백질을 포함하며, W-펩타이드 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드의 가능한 모든 변이체 또는 단편을 포함한다.
이하, 첨부한 도면을 참조하여 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 구현예 및 실시예를 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 구현예 및 실시예에 한정되지 않는다. 그리고 도면에서 본 발명을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 유사한 부분에 대해서는 유사한 도면 부호를 붙였다.
본 발명의 일 측면은, 호흡기내 투여 가능한 약학적 또는 수의학적 허용 담체; 및 포밀 펩타이드 수용체(formyl peptide receptor, FPR) 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드 또는 그의 약학적 허용가능한 염을 호흡기 염증을 억제하는 데 효과적인 양으로 함유하는, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제를 제공한다.
상기 본 발명의 일 구현예에서, 상기 펩타이드는 W- 펩타이드로서 예를 들어 헥사펩티드(hexapeptide)를 들 수 있으나, 본 발명이 상기 헥사펩티드로 한정되는 의도는 아니다. 상기 펩타이드는 약각 더 길거나 더 짧을 수 있다. 상기 펩타이드가 포르밀 펩타이드 수용체 및 그의 유사 수용체 매개 신호전달을 길항하는 한, 상기 펩타이드는 4 내지 15개 아미노산으로 이루어지거나, 바람직하게는 4 내지 10개 아미노산으로, 더욱 바람직하게는 4 내지 7개 아미노산, 또는 약 6개 아미노산으로 이루어질 수 있다. 상기 본 발명의 바람직한 구현예에서, 상기 펩타이드는 하기 표 1에 나타낸 서열번호 1 내지 28 로 이루어진 군에서 선택되는 아미노산 서열로 이루어지는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 하기 표 1에 기재된 펩타이드에 대하여 국제특허출원공개 WO/2005/077412를 참고할 수 있다. 하기 표 1에서 표준 아미노산 약어를 하기 표에서 사용하였으며, 소문자는 D-잔기를 나타낸다. 상기 펩타이드의 작용성 유도체, 전구체 또는 약학적으로 허용 가능한 염 또한 본 발명에서 사용될 수 있다.
표 1
Figure PCTKR2010003015-appb-T000001
Figure PCTKR2010003015-appb-I000001
상기 본 발명의 다른 구현예에서, 상기 펩타이드가 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어지는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 담체가 기체, 액체 또는 고체일 수 있다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 호흡기내 투여용 약학 제제는 비강, 흡입가능, 호흡가능, 폐내 또는 기관내로 투여되는 제제일 수 있다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 호흡기내 투여용 약학 제제는 상기 펩타이드가 담지된 담체의 액체 입자 또는 분말 입자를 포함하는 에어로졸 또는 스프레이일 수 있다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 호흡기내 투여용 약학 제제는 상기 펩타이드가 담지된 담체를 포함하는 실질적으로 약 10 ㎛ 이하 직경의 입자를 포함하는 흡입가능 또는 호흡가능 제제일 수 있다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 호흡기내 투여용 약학 제제는 상기 펩타이드가 담지된 담체를 포함하는 실질적으로 약 100 ㎛ 이하 직경의 입자를 포함하는 비강, 폐내 또는 기관내 제제일 수 있다.
본 발명의 다른 측면은, 상기 본 발명의 일 측면에 따른 호흡기내 투여용 약학 제제 및 투여 장치를 포함하는 키트를 제공한다.
상기 본 발명의 일 구현예에서, 상기 투여 장치가 에어로졸 또는 스프레이 발생기를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 본 발명의 다른 구현예에서, 상기 에어로졸 발생기가 흡입기를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 흡입기가 사전에 계량화된 제제의 투약량을 운반하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 흡입기가 네뷸라이저(nebulizer) 또는 인서플레이터(insufflator)를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 키트는, 상기 투여 장치가 압축 흡입기를 포함하고, 상기 제제가 수성 또는 비-수성 액체의 현탁액 또는 용액, 또는, 수중유 또는 유중수 에멀젼을 포함하는 것일 수 있다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 키트는, 관통할 수 있거나 또는 개봉할 수 있는 캅셀, 카트리지 또는 블리스터일 수 있는, 캅셀, 카트리지 또는 블리스터로 제공되는 것일 수 있다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 투여 장치가 가압되고 프로펠런트(propellant)의 도움으로 작동하는 것일 수 있다.
본원에 있어서, 유효성분인 상기 FPR 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드, 그의 작용성 유도체, 전구체 또는 약학적으로 허용 가능한 염은 흡입, 호흡, 비강 투여에 의한 호흡 시스템 내로 또는 임의의 적절한 수단으로 대상의 폐내 점적 주사로 (폐 안으로) 투여될 수 있으며, 바람직하게는 분말화되거나 또는 액체 비강, 폐내, 호흡가능 또는 흡입가능 입자를 함유하는 에어로졸 또는 스프레이를 발생시킴으로써 투여된다. 상기 FPR 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드 유효성분을 함유하는 호흡가능 또는 흡입가능 입자는 호흡기 또는 폐 자체 내부로 대상에 의해, 즉 흡입으로 또는 비강 투여로 또는 점적주사로 흡입된다. 예를 들어, 상기 호흡기내 투여용 약학 제제는 상기 펩타이드 유효성분의 호흡가능 또는 흡입가능 액체 또는 고체 입자를 함유할 수 있으며, 본 발명에 따라, 구강 및 후두를 통해 통과하여 흡입되고 그리고 폐의 기관지 및 폐포 내로 지속되도록 충분히 작은 크기의 호흡가능 또는 흡입가능 입자를 함유한다. 일반적으로, 상기 호흡기내 투여용 약학 제제에 포함된 입자는 약 10 ㎛ 이하의 직경, 예를 들어, 약 0.05, 약 0.1, 약 0.5, 약 1, 약 2 내지 약 4, 약 6, 약 8, 약 10 ㎛ 크기 범위이다. 더 구체적으로, 약 0.5 내지 약 5 ㎛ 이하 크기는, 호흡가능 또는 흡입가능하다. 에어로졸 또는 스프레이 중에 함유되는 호흡 불가 크기의 입자는 목에 침착되고 그리고 삼켜지는 경향이 있다. 에어로졸 중에 호흡 불가 입자의 양은 바람직하게는 최소화된다. 비강 투여 또는 폐내 점적주사를 위해, 약 8, 약 10, 약 20, 약 25 내지 약 35, 약 50, 약 100, 약 150, 약 250, 약 500 ㎛의 범위의 입자 크기가, 비강 내에 체류를 보장하기 위해 또는 점적주사하기 위해, 그리고 직접 폐 안으로 침착시키기 위해 바람직하다. 특히 신생아 및 태아에 투여된 때, 액체 제제가 호흡기 (코) 및 폐 안으로 분출될 수 있다.
예를 들어, 에어로졸 형태의 호흡기내 투여용 약학 제제를 제조하기 위하여, 상기 펩타이드 유효성분을 안정한 비이클(vehicle), 예컨대 파이로젠이 없는 무균수와 조합함으로써 제조될 수 있다. 또는, 미소화된 상기 펩타이드 유효성분의 호흡가능 건조 입자를 함유하는 고체 미립자 조성물은 건조 활성 화합물을 유발 및 유봉으로 분쇄함으로써, 그리고 이후 400 메시 스크린을 통해 미소화된 조성물을 통과시킴으로써 큰 덩어리를 부수거나 또는 분리시켜 제조할 수 있다. 상기 펩타이드 유효성분을 함유하는 고체 미립자 조성물은 선택적으로 에어로졸의 형성을 촉진하도록 제공되는 분산제를 포함할 수 있다. 적절한 분산제는 락토즈이며, 이는 임의의 적절한 비, 예컨대, 1 대 1 중량비로 활성 화합물과 혼합될 수 있다. 상기 펩타이드 유효성분을 함유하는 액체 입자의 에어로졸은 임의의 적절한 수단, 예컨대 네뷸라이저(nebulizer)로 제조될 수 있다 [예컨대 US 특허 4,501,729 참조]. 네뷸라이저는, 협소한 벤투리 오르피스(venturi orfice)를 통해 압축 기체, 전형적으로 공기 또는 산소의 가속화를 수단으로 또는 초음파 진동을 수단으로, 상기 펩타이드 유효성분의 용액 또는 현탁액을 치료용 에어로졸 미스트로 전환시키는 상업상 구입할 수 있는 장치이다. 네뷸라이저에 사용하기 위한 적절한 조성물은 액체 담체 중에 상기 펩타이드 유효성분 40% w/w, 바람직하게는 20% w/w 이하를 함유하며, 전형적으로 물 또는 묽은 알콜 수용액인 담체, 바람직하게는, 예컨대 염화 나트륨을 추가함으로써 체액과 등장이 된 담체를 포함한다. 선택적 추가제는, 만약 조성물이 무균으로 제조되지 않았다면, 보존제, 예컨대, 메틸 히드록시벤조에이트, 항-산화제, 방향제, 휘발성 오일, 완충제 및 계면활성제를 포함한다. 상기 펩타이드 유효성분을 함유하는 고체 입자의 에어로졸은 마찬가지로 임의의 고체 미립자 약물 에어로졸 발생기로 제조될 수 있다. 고체 미립자 약물을 대상에 투여하기 위한 에어로졸 발생기는 전술한 바와 같이 호흡가능한 입자를 발생시키며, 그리고 인간에게 투여하기에 적절한 속도로 약물의 소정의 계량된 투약량을 함유하는 에어로졸 부피로 발생시킨다. 그런 에어로졸 발생기의 예로는 계량 투약량 흡입기 및 인 서플레이터(insufflator)를 포함한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 본 발명에 일 측면에 따른 호흡기내 투여용 약학 제제를 포유 동물의 호흡기 내로 투여하는 것을 포함하는, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방 방법을 제공한다.
상기 본 발명의 일 구현예에서, 상기 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방 방법은 상기 제제를 상기 포유 동물의 비강내, 폐내, 흡입으로 또는 호흡기도 내로 투여하는 것을 포함한다.
상기 본 발명의 다른 구현예에서, 상기 호흡기 염증성 질환이 급성 상기도 감염증, Th1 혹은 Th17 면역반응에 의한 호흡기 염증성 질환, 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD), 만성 부비강염, 알레르기성 비염, 만성 하기도 감염증, 폐기종, 폐렴, 기관지 천식, 폐결핵 후유증, 급성 호흡 궁박증후군(窮迫症候群), 낭포성 섬유증 및 폐섬유증으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 급성 상기도 감염증이 감기, 급성 인두염, 급성 비염, 급성 부비강염, 급성 편도염, 급성 후두염, 급성 후두개염 및 급성 기관염으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 질환일 수 있다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 만성 하기도 감염증이 만성 기관지염, 미만성(彌漫性)범세기관지(汎細氣管支)염 및 기관지 확장증으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 질환일 수 있다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 질환이 알레르기성 비염을 포함하는 것일 수 있다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 질환이 Th1 혹은 Th17 면역반응에 의한 호흡기 염증성 질환을 포함하는 것일 수 있다.
상기 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 질환이 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD)을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에 의하여 상기 FPR 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드를 함유하는 호흡기내 투여용 약학 제제는 호흡기를 통하여 투여됨으로써 현저한 호흡기 염증 억제 효과를 나타내어 상기 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방의 효과를 나타낸다.
본 발명의 상기 FPR 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드는 일회량, 다중 분할 투여량(multiple discrete doses), 또는 연속 주입에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 상기 FPR 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드는 상기 호흡기내 투여용 약학 제제에 있어서 넓은 함량 범위 내에서 제공된다. 예컨대, 상기 펩타이드는 상기 호흡기내 투여용 약학 제제 전체 중에 약 0.001%, 약 1%, 약 2%, 약 5%, 약 10%, 약 20%, 약 40%, 약 90%, 약 98%, 또는 약 99.999%의 양으로 함유될 수 있다. 그리고 만약, 추가 약제 및 첨가제 등이 포함된 때, 상기 펩타이드의 함량이 조정될 수 있다. 그렇지만, 상기 펩타이드의 함량의 투약량은 대상의 연령, 체중, 및 질병에 좌우되어 다양할 수 있다.
본 발명의 상기 호흡기내 투여용 약학 제제내에 함유되는 상기 FPR 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드 유효성분는 약 0.001 mg/kg/d 내지 약 100 mg/kg/d에 속하는 투여량 수준은 본 발명의 방법을 위하여 유용하다. 하나의 구체예에서, 상기 투여량 수준은 약 0.1 mg/kg/d 내지 약 100 mg/kg/d이다. 다른 구체예에서, 상기 투여량 수준은 약 1 mg/kg/d 내지 약 10 mg/kg/d이다. 어느 특별한 환자를 위한 특정한 투여량 수준은 사용되는 특정 유효성분의 활성 및 가능한 독성; 환자의 연령, 체중, 전반적 건강 상태(general health), 성별, 및 식이(diet); 투여 시간; 배출 속도; 약물 조합; 질병의 심각성; 및 투여의 형태를 포함하는 다양한 인자에 의존하여 변경될 것이다. 전형적으로, 시험관내의 용량-효과 결과는 환자 투약을 위한 적당한 투여량에 대한 유용한 가이드라인을 제공한다. 또한, 동물 모델에서 연구는 유용하다. 적당한 투여량 수준을 결정하기 위하여 고려할 사항들은 이 분야에 잘 알려져 있으며, 일반적인 의사가 갖는 기술에 속한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 설명하기 위한 것으로, 이들 실시예에 의해 본 발명의 범위가 한정되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 분야에서 통상의 지식을 가진 자들에게 있어서 자명할 것이다.
[실시예]
이하, 실시예 및 비교예에서 Th1 및 Th17 면역반응을 특징으로 염증을 일으키는 천식 동물 모델을 통해 WKYMVm의 효능을 평가하였다.
비교예 1: 복강 주사로 전신 투여한 WKYMVm(서열 번호 4)의 효능 평가
TH1+TH17 면역반응을 보이는 천식 모델을 만들기 위하여, BALB/c (female, 6주) 마우스를 실험군과 양성대조군 각 5마리에 0, 1, 2 및 7 일에 알레르겐으로서 오브알부민(ovalbumin, OVA) 75 ㎍과 보강제로서 LPS(Lipopolysaccharide) 10 ㎍을 마취 후 비강으로 투여하여 감작 (sensitization)하였다. 14, 15, 21 및 22 일에 알레르겐 (OVA, 50 ㎍)을 마취 후 비강으로 투여 (challenge)할 때 실험군에 속한 마우스에는 WKYMVm 4 mg/kg를 복강에 주사하여 전신 투여하였다. 이때 양성대조군에 속한 마우스에는 인산화 완충 생리식염수 (phosphate-buffered saline, PBS)를 같은 양 복강에 주사하였다. 음성대조군은 0, 1, 2 및 7 일에 감작시키는 과정과 14, 15, 21, 22 일째 알레르겐 투여 시 알레르겐 대신 같은 양의 상기 인산화 완충 생리식염수(PBS)를 사용한 것 이외에 상기 양성대조군과 동일하게 만들었다. 도 1에 마우스 천식 모델을 도식적으로 표시하였다.
마지막 알레르겐 투여 후 24 시간 (제 23 일)에 메타콜린에 대한 기도과민성을 측정하였다. 마우스를 챔버(chamber)에 넣고 분무기(nebulizer)를 사용하여 3 분간 인산화 완충 생리식염수 (PBS) 용액을 흡입시킨 후, 비침습 체적 변동 기록법 (non-invasive whole body plethysmography) (Allmedicus, Korea)를 이용하여 3 분간 penh (enhanced pause)값을 측정하였다. 같은 방법으로 6.25, 12.5, 25, 50 mg/ml 농도의 메타콜린 PBS용액을 차례로 마우스에 흡입시킨 후 각 농도에 대한 penh값을 측정하였다. 3 분간 측정한 penh 값의 평균을 기도 폐색의 지표로 사용하였다.
폐염증은 마지막 알레르겐 투여 후 6 시간 (22 일)과 48 시간 (24 일)에 측정하였다. 22, 24 일에 케타민(Ketamin)과 자일라진(xylazine)을 혼합한 마취액을 마우스 복강에 주사하여 마취한 후, 흉부를 절개하고 기관을 노출시켜 카테터를 기도에 삽입하고 결찰시켰다. 무균성 인산화 완충생리식염수를 1 ml씩 2 회 주입하고 기도를 세척하여 기관지 폐포 세척액 (bronchoalveolar lavage fluid, 이하 'BAL 액'이라 함)을 얻었다. 그리고 폐 조직 내 T림프구 분석을 위해 폐를 적출하고 국소 림프절에서 세포를 추출하였다.
BAL 액을 섭씨 4도에서 3000 rpm으로 10 분간 원심분리한 뒤, 셀 펠렛(cell pellet)을 PBS용액에 풀었다. 상기 셀 펠렛을 사이토스핀(cytospin)하여 슬라이드에 도말하고 디프 퀵(Diff Quick) 염색을 시행하여 광학현미경 1000배 시야에서 300개 이상의 염증세포를 관찰하여 대식세포(Macrophage), 림프구(Lymphocyte), 호중구(Neutrophil), 호산구(Eosinophil)로 분류하여 각 염증 세포 수를 측정하였다. 또한 BAL 액에서 Th1염증 반응을 반영하는 사이토카인인 감마인터페론, 인터페론-g-유도 단백질10[interferon-g-inducible protein 10 (IP-10)], IL-12, Th2 염증반응을 반영하는 인터루킨 (IL)_4[interleukin (IL)_4], IL-13, Th17 염증반응을 반영하는 IL-17, TNF-α, IL-6, 그리고 Th2 및 Th17 염증반응을 반영하는 TGF-β를 ELISA 방법으로 측정하였다.
적출한 폐 조직을 콜라게나제(collagenase) type IV (Sigma)로 처리하여 세포를 분리하였다. 세포 표면을 형광물질이 부착된 anti-CD3, anti-CD4, anti-CD8 (BD Pharmingen) 항체로 염색한 후, 트리톤(triton)으로 세포막에 구멍을 내고 anti-IFN-γ, anti-IL-17, anti-IL-10 및 anti-IL-4로 세포내 사이토카인 염색(intracellular cytokine staining)을 시행하였다. 발현분석은 형광표지세포스캐너(fluorescence activated cell scanner)인 FACSCalibur (Becton Dickinson)를 사용하여 폐로 유입된 T 림프구의 종류를 결정하였다.
림프절에서 얻은 세포를 OVA 100 ㎍/ml 농도의 인산화 완충 생리식염수 용액에서 72시간 동안 배양한 후 용액에 포함된 Th1, Th17, Th2 염증 반응을 반영하는 사이토카인인 감마인터페론, IL-17, IL-4 등을 ELISA 방법으로 측정하였다.
도 2는 마지막 알레르겐 투여 6 시간 후인 22 일에 측정한 결과를 나타낸 것이다. BAL 액 내의 염증세포 수가 OVA와 LPS로 같이 감작시킨 천식모델이 복강 내 약물투여에 상관없이 알레르겐 단독으로 감작시킨 음성대조군에 비해 증가하였다 (도 2). 알레르겐과 LPS를 감작시킨 마우스에서 W-펩타이드를 전신 투여한 실험군에서는 위약을 전신 투여한 양성대조군보다 오히려 염증 세포 수가 증가하였다. 이와 함께 폐조직에서 분리한 염증 세포에서 감마인터페론 분비 또한 증가하였고 (도 3a), 이는 BAL 액 내 IP-10 (도 3b), IL-12p40 (도 3c) 분비 증가와 동반되었다. 또한, 폐조직에서 분리한 염증세포에서 IL-17을 발현하는 CD4+ T세포도 증가하였고 (도 4a), BAL 액 내 IL-17 분비도 증가하였다 (도 4b). 이러한 변화는 BAL 액 내 IL-17의 다운스트림 분자(downstream molecule)로 여겨지는 IL-6 (도 5a) 및 TNF-a (도 5b) 분비 증가와 동반되었다.
도 6과 도 7은 마지막 알레르겐 투여 48 시간 후인 24 일에 측정한 결과를 나타낸 것이다. 도 6에 보인 것처럼 폐염증의 지표인 BAL 액 내의 염증세포 수는 알레르겐과 함께 LPS를 감작시킨 경우에 알레르겐 단독으로 투여한 음성대조군에 비하여 증가하였으나, 알레르겐과 LPS를 감작시킨 마우스에서 W-펩타이드를 전신 투여한 실험군과 위약을 전신 투여한 양성대조군과는 차이가 없었다. 또한 도 7에 보인 것처럼 BAL 액에서 ELISA 방법으로 측정한 사이토카인 IL-12p40 (도 7a), TGF-b(도 7b)의 양에도 알레르겐과 LPS로 감작시킨 마우스에서 W-펩타이드를 전신 투여한 실험군과 위약을 전신 투여한 양성대조군과는 차이가 없었다. IL-12p40 농도는 Th1 면역 반응의 정도를, TGF-b 농도는 Th17/Th2 면역 반응의 정도를 나타내기 때문에 폐염증에 변화가 없음을 알 수 있다.
실시예 1: 비강으로 투여한 WKYMVm(서열 번호: 4)의 효능 평가
WKYMVm를 복강에 주사하여 전신 투여하는 대신 비강으로 투여하여 비교예와 같은 방법으로 효능을 평가하였다. 14, 15, 21 및 22 일에 알레르겐 [OVA 50 ㎍]을 WKYMVm 200 ㎍/kg와 함께 비강으로 투여 (challenge)하였다. 이 밖의 절차는 상기 비교예와 동일하게 진행하였다
도 8 내지 도 12는 마지막 알레르겐 투여 후 6 시간인 22 일에 측정한 결과를 나타낸 것이다. BAL 액 내의 염증세포 수가 W-펩타이드를 비강 투여한 실험군에서 위약을 비강 투여한 양성대조군에 비해 변화가 없었다 (도 8). 면역학적 지표의 변화를 보면, 알레르겐과 LPS로 감작시킨 경우에 음성대조군에 비하여 Th1 면역반응인 경우 국소림프절에서 분리한 면역세포에서 체외 (in vitro)에서 알레르겐으로 자극 시 감마인터페론 분비가 W-펩타이드를 비강 투여한 실험군이 위약을 비강 투여한 양성대조군에 비해 증가하였고 (도 9a), 폐조직에서 분리한 염증세포에서 W-펩타이드를 비강 투여한 실험군에서 위약을 비강 투여한 양성대조군보다 감마인터페론을 발현하는 CD4+ T 세포 수도 증가하였다 (도 9b). 그러나 BAL 액 내 감마인터페론의 분비는 실험군에서 양성대조군에 비하여 오히려 감소하였다 (도 9c). Th17 면역반응인 경우, 국소 림프절에서 분리한 면역세포에서 체외에서 알레르겐으로 자극 시 IL-17 분비가 실험군에서 양성대조군에 비하여 증가하였고 (도 10a), 폐조직에서 분리한 염증세포에서 실험군에서 양성대조군에 비하여 IL-17을 발현하는 CD4+ T 세포의 수가 증가하였다 (도 10b). 그러나 BAL 액에서 측정한 IL-17의 분비는 실험군에서 양성대조군에 비하여 감소하였다 (도 10c). 한편, Th2 사이토카인의 경우 실험군에서 양성대조군에 비하여 폐조직 내 T 세포에서 발현이 감소하였으나 (도 11a), IL-10인 경우에는 오히려 증가하였다 (도 11b). 이와 함께 염증세포 침윤 후 염증이 증폭되는 후기 염증반응과 관련이 있는 염증매개체 분비양상을 보면, 실험군에서 감마인터페론의 다운스트림 분자인 IP-10(도 12a)과 IL-12p40 (도 12b)의 분비가 양성대조군에 비하여 감소하였고, IL-17의 다운스트림 분자로 여겨지는 TNF-α (도 12c)와 IL-1β (도 12d)도 실험군에서 양성대조군에 비하여 감소하였다. 또한, Th1 및 Th17 사이토카인에 의해 유도되는 염증유발 사이토카인 (chemokine)인 MCP-1 (도 12e), MIP-1a (도 12f) 분비도 실험군에서 양성대조군에 비하여 감소하였다.
도 13은 마지막 알레르겐 투여 후 24시간인 23일에 측정한 기도과민성 결과이다. 비강으로 WKYMVm를 투여한 실험군에서는 기도폐색의 지표인 Penh가 양성대조군에 비하여 감소하였다 (도 13). 도 14 내지 도 16은 마지막 알레르겐 투여 후 48시간인 24일에 측정한 결과이다. 폐염증의 지표인 BAL 액 내 염증세포 수 (BAL cellularity)도 실험군에서 양성대조군에 비하여 유의하게 감소하였다 (도 14). 또한, BAL 액에서 Th17 면역반응의 지표인 IL-17 분비는 실험군에서 양성대조군에 비하여 증가하였으나 (도 15), IL-17에 의해 침윤된 염증세포에서 분비되는 TGF-β 분비는 실험군에서 양성대조군에 비하여 유의하게 감소하였다 (도 15b). 또한 Th1 면역반응의 결과로 침윤된 염증세포에서 분비되는 사이토카인인 IL-12p40 (도 16a)과 IP-10 (도 16b)의 분비도 실험군에서 양성대조군에 비하여 감소하였다.
이상의 결과를 요약하면 WKYMVm를 비강을 통해 기도로 직접 투여한 경우에는 복강으로 주사하여 전신 투여한 경우와 달리 기도 과민성과 폐염증을 억제하는 효과가 뛰어났다. 이는 면역학적으로 Th1, Th17 면역반응을 항진시킴과 동시에 Th2 면역반응을 억제함으로써 기존의 면역조절제가 갖고 있는 부작용으로 문제가 되고 있는 국소적인 Th1 및 Th17 면역반응 억제에 의한 감염 등을 줄일 수 있고, 또한 폐염증에 의해 발생하는 천식 및 만성폐쇄성폐질환 등의 병인과 관련해서 Th1 및 Th17 면역반응에 의해 침윤된 염증세포에서 분비되는 염증성 매개체 분비를 억제함으로써 항염증 효과를 나타내는 것으로 판단할 수 있다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
본 발명의 포밀 펩타이드 수용체(formyl peptide receptor, FPR) 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드를 함유하는 호흡기내 투여용 약학 제제는 현저한 호흡기 염증 억제 효과를 나타내므로 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방에 유용할 것으로 기대된다.
서열 번호 아미노산 서열
1 His-Phe-Tyr-Leu-Pro-Met-CONH2; HFYLPM
2 Met-Phe-Tyr-Leu-Pro-Met-CONH2; MFYLPM
3 His-Phe-Tyr-leu-pro-D-Met-CONH2; HFYLPm
4 Trp-Lys-Tyr-Met-Val-D-Met-CONH2; WKYMVm
5 Trp-Lys-Gly-Met-Val-D-Met-NH2; WKGMVm
6 Trp-Lys-Tyr-Met-Gly-D-Met-NH2; WKYMGm
7 Trp-Lys-Tyr-Met-Val-Gly-NH2; WKYMVG
8 Trp-kg-Tyr-Met-Val-D-Met-NH2; WRYMVm
9 Trp-Glu-Tyr-Met-Val-D-Met-NH2; WEYMVm
10 Trp-His-Tyr-Met-Val-D-Met-NH2; WHYMVm
11 Trp-Asp-Tyr-Met-Val-D-Met-NH2; WDYMVm
12 Trp-Lys-His-Met-Val-D-Met-NH2; WKHMVm
13 Trp-Lys-Glu-Met-Val-D-Met-NH2; WKEMVm
14 Trp-Lys-Trp-Met-Val-D-Met-NH2; WKWMVm
15 Trp-Lys-Arg-Met-Val-D-Met-NH2; WKRMVm
16 Trp-Lys-Asp-Met-Val-D-Met-NH2; WKDMVm
17 Trp-Lys-Phe-Met-Val-D-Met-NH2; WKFMVm
18 Trp-Lys-Tyr-Met-Tyr-D-Met-NH2; WKYMYm
19 Trp-Lys-Tyr-Met-(Phe/Trp)-D-Met-NH2; WKYM(F/W)m
20 Trp-Lys-Tyr-Met-Val-Glu-NH2; WKYMVE
21 Trp-Lys-Tyr-Met-Val-Val-NH2; WKYMVV
22 Trp-Lys-Tyr-Met-Val-Arg-NH2; WKYMVR
23 Trp-Lys-Tyr-Met-Val-Trp-NH2; WKYMVW
24 Trp-Lys-Tyr-Met-Val-NH2; WKYMV
25 Lys-Tyr-Met-Val-D-Met-NH2; KYMVm
26 Lys-Tyr-Met-Val-NH2; KYMV
27 Tyr-Met-Val-D-Met-NH2; YMVm
28 Met-Val-D-Met-NH2; MVm

Claims (21)

  1. 호흡기내 투여 가능한 약학적 또는 수의학적 허용 담체; 및
    포밀 펩타이드 수용체(formyl peptide receptor, FPR) 또는 그의 유사 수용체에 작용하는 펩타이드 또는 그의 약학적 허용가능한 염을 호흡기 염증을 억제하는 데 효과적인 양으로 함유하는,
    호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 펩타이드는 서열번호 1 내지 28로 이루어진 군에서 선택되는 아미노산 서열로 이루어지는 것인, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제.
  3. 제 2 항에 있어서,
    상기 펩타이드는 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어지는 것인, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 담체가 기체, 액체 또는 미세입자 분말인, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제.
  5. 제 1 항에 있어서,
    상기 제제는 비강, 흡입가능, 호흡가능, 폐내 또는 기관내로 투여되는 제제인, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제.
  6. 제 5 항에 있어서,
    상기 제제는 상기 펩타이드가 담지된 담체의 액체 또는 미세입자 분말을 포함하는 에어로졸 또는 스프레이인, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제.
  7. 제 5 항에 있어서,
    상기 제제는 상기 펩타이드가 담지된 담체를 포함하는 직경 10 ㎛ 이하의 입자를 포함하는 흡입가능 또는 호흡가능 제제인, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제.
  8. 제 5 항에 있어서,
    상기 제제는 상기 펩타이드가 담지된 담체를 포함하는 직경 100 ㎛ 이하의 입자를 포함하는 비강, 폐내 또는 기관내로 투여되는 제제인, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방을 위한 호흡기내 투여용 약학 제제.
  9. 제 1 항의 호흡기내 투여용 약학 제제 및 투여 장치를 포함하는 키트.
  10. 제 9 항에 있어서,
    상기 투여 장치가 에어로졸 또는 스프레이 발생기를 포함하는 것인 키트.
  11. 제 10 항에 있어서,
    상기 에어로졸 발생기가 흡입기를 포함하는 것인 키트.
  12. 제 11 항에 있어서
    상기 흡입기가 사전에 계량화된 제제의 투약량을 운반하는 것인 키트.
  13. 제 11 항에 있어서,
    상기 흡입기가 네뷸라이저(nebulizer) 또는 인서플레이터(insufflator)를 포함하는 것인 키트.
  14. 제 9 항에 있어서,
    상기 투여 장치가 압축 흡입기를 포함하고, 상기 제제가 수성 또는 비-수성 액체의 현탁액 또는 용액, 또는, 수중유 또는 유중수 에멀젼을 포함하는 것인 키트.
  15. 제 9 항에 있어서,
    상기 키트는 관통할 수 있거나 또는 개봉할 수 있는 캅셀, 카트리지 또는 블리스터일 수 있는, 캅셀, 카트리지 또는 블리스터로 제공되는 것인 키트.
  16. 제 9 항에 있어서,
    상기 투여 장치가 가압되고 프로펠런트(propellant)의 도움으로 작동하는 것인 키트.
  17. 제 1 항의 호흡기내 투여용 약학 제제를 포유 동물의 호흡기내로 투여하는 것을 포함하는, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방 방법.
  18. 제 17 항에 있어서,
    상기 제제를 상기 포유 동물의 비강내, 폐내, 흡입으로 또는 호흡기도 내로 투여하는 것을 포함하는, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방 방법.
  19. 제 17 항에 있어서,
    상기 호흡기 염증성 질환이 급성 상기도 감염증, Th1 혹은 Th17 면역반응에 의한 호흡기 염증성 질환, 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD), 만성 부비강염, 알레르기성 비염, 만성 하기도 감염증, 폐기종, 폐렴, 기관지 천식, 폐결핵 후유증, 급성 호흡 궁박증후군(窮迫症候群), 낭포성 섬유증 및 폐섬유증으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방 방법.
  20. 제 19 항에 있어서,
    상기 급성 상기도 감염증이 감기, 급성 인두염, 급성 비염, 급성 부비강염, 급성 편도염, 급성 후두염, 급성 후두개염 및 급성 기관염으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 질환인, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방 방법.
  21. 제 20 항에 있어서,
    상기 만성 하기도 감염증이 만성 기관지염, 미만성(彌漫性)범세기관지(汎細氣管支)염 및 기관지 확장증으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 질환인, 호흡기 염증성 질환의 치료 또는 예방 방법.
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