WO2009147695A1 - 抗がん剤 - Google Patents

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mfg
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anticancer
agent
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秀晃 田原
将久 地主
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国立大学法人東京大学
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Definitions

  • the present invention relates to a new anticancer agent, particularly an anticancer agent by enhancing the therapeutic effect of other cancer treatment methods.
  • Cancer treatment methods include surgery, radiation therapy, and chemotherapy (anticancer agent), but treatment with an anticancer agent is used even after surgery.
  • anticancer agents alkylating agents, antimetabolites, alkaloid anticancer agents, antibiotic anticancer agents, platinum preparations, etc. are used, but the therapeutic effect is still not sufficient, There is also a problem that the incidence of side effects is high. From this viewpoint, development of a better anticancer agent is desired.
  • MFG-E8 fat globule glycoprotein-EGF factor 8
  • MFG-E8 fat globule glycoprotein-EGF factor 8
  • Non-patent Document 4 a patent application has already been filed for the development of a therapeutic method using MFG-E8 decoy gene or inhibitory antibody on the premise of combined use with tumor antigens such as cancer vaccines.
  • MFG-E8 is known to be widely expressed not only in antigen-presenting cells such as dendritic cells but also in tumor cells such as breast cancer, colon cancer and melanoma (Non-patent Document 5), and promotes angiogenesis and tumor metastasis Thus, it has been clarified that it has a tumor promoting action and has a positive correlation with the clinical progression of melanoma (Non-patent Document 6). Stubbs T et al. 1990. cDNA reviews the exequence sequences. Proc. Natl Acad. Sci. USA 87: 8417-8421. Hanayama R.D. et al. 2002. Nature 417: 182-187. Hanayama R.D. , Et al. 2004.
  • the present invention is to provide a new anticancer agent and a new cancer treatment method.
  • the present inventor has examined the pharmacological action using an antibody against MFG-E8, and found that the anti-MFG-E8 antibody alone has an excellent anticancer effect.
  • anti-MFG-E8 antibody has an extremely strong anticancer effect when used in combination with other cancer treatments including other anticancer agents, rather than the anticancer effect obtained by itself. It was found that the effect of exerting and enhancing the effect of other cancer treatment methods is particularly excellent.
  • the anti-MFG-E8 antibody has an action of activating intratumor and systemic antitumor immune responses and inducing and promoting antitumor immune responses including induction of tumor-specific cytotoxic T cells and the like. Revealed.
  • the anti-MFG-E8 antibody is extremely useful as a specific immunity inducer capable of strongly inducing an anti-tumor immune response by the anti-MFG-E8 antibody when combined with an agent capable of damaging a target cell or a therapeutic method.
  • the specific immunity mentioned here refers to humoral immunity by B cells and the like specific to the target antigen and cellular immune response by T cells and the like.
  • the present invention provides an anticancer agent comprising an anti-MFG-E8 antibody as an active ingredient.
  • the present invention also provides an anticancer agent comprising a combination of an anti-MFG-E8 antibody and another anticancer agent.
  • the present invention also provides an anticancer agent containing an anti-MFG-E8 antibody for use in combination with other cancer treatment methods.
  • the present invention also provides a specific immunity-inducing agent for use in combination with a drug or therapeutic method capable of damaging a target cell, comprising an anti-MFG-E8 antibody as an active ingredient.
  • the present invention also provides the use of an anti-MFG-E8 antibody for the production of an anticancer agent.
  • the present invention also provides the use of an anti-MFG-E8 antibody for the production of an anticancer agent in combination with another anticancer agent.
  • the present invention also provides the use of an anti-MFG-E8 antibody for the production of an anticancer agent for use in combination with other cancer therapies.
  • the present invention also provides the use of an anti-MFG-E8 antibody for the production of a specific immunity inducer for use in combination with a drug or treatment that can damage target cells.
  • the present invention also provides a method for treating cancer characterized by administering an anti-MFG-E8 antibody.
  • the present invention also provides a method for treating cancer, comprising administering an anti-MFG-E8 antibody in combination with another anticancer agent.
  • the present invention also provides a method for treating cancer characterized by combining administration of an anti-MFG-E8 antibody with other cancer therapies.
  • the present invention also provides a specific immunity induction method characterized by combining an anti-MFG-E8 antibody with a drug or therapeutic method capable of damaging a target cell.
  • the anticancer effect is drastically improved. It is done.
  • cancer treatments such as anti-cancer drugs and radiation therapy that have side effects
  • the dose of the anti-cancer drug and the strength of the cancer treatment (the radiation dose in radiation therapy)
  • Side effects can be reduced because the interval between administration of the anticancer drug and the interval between cancer treatments can be set longer. If the frequency of occurrence of side effects decreases, treatment with an anticancer agent or radiation therapy can be continued for a longer time, and the cancer treatment effect is further improved.
  • the cancer therapeutic effect of the anti-MFG-E8 antibody in the present invention can induce specific immunity using an antigen derived from a tumor cell existing in the body of a cancer patient. According to the invention, it is not necessary to isolate or identify tumor cell antigens from patients, such as conventional tumor vaccines, and therapeutic effects can be obtained without administering tumor antigens to patients during treatment.
  • B16 indicates B16 cells and MC38 indicates MC38 cells. It is a figure which shows the result of having measured the intracellular expression of IFN-g and IL-10 by the flow cytometry about the T cell active state. It is a figure which shows MFG-E8 expression from the tumor cell by an anticancer agent. It is a figure which shows MFG-E8 expression from the tumor cell by an anticancer agent. It is a figure which shows the effect
  • the active ingredient of the anticancer agent of the present invention is an anti-MFG-E8 antibody.
  • the anti-MFG-E8 antibody used in the present invention is not particularly limited as long as it is an antibody that specifically binds to MFG-E8 and inhibits the function of MFG-E8.
  • Antibodies of the present invention include monoclonal and polyclonal antibodies, as well as antibody variants and derivatives such as antibodies and T-cell receptor fragments that retain the ability to specifically bind to antigenic determinants.
  • the type of the antibody of the present invention is not particularly limited, and is intended to reduce mouse antigens, human antibodies, rat antibodies, rabbit antibodies, sheep antibodies, camel antibodies, avian antibodies, etc. Artificially modified recombinant antibodies such as chimeric antibodies and humanized antibodies can be used as appropriate.
  • the recombinant antibody can be produced using a known method.
  • a chimeric antibody is an antibody comprising a non-human mammal, for example, a mouse antibody heavy chain and light chain variable region and a human antibody heavy chain and light chain constant region, and a DNA encoding the murine antibody variable region. Can be obtained by ligating to the DNA encoding the constant region of a human antibody, incorporating it into an expression vector, introducing it into a host, and producing it.
  • a humanized antibody is also called a reshaped human antibody, and is obtained by transplanting a complementarity determining region (CDR) of a non-human mammal such as a mouse antibody into a complementarity determining region of a human antibody.
  • CDR complementarity determining region
  • EP239400 International Patent Application Publication No. WO96). / 02576).
  • FR of a human antibody linked through CDR a complementarity determining region that forms a favorable antigen binding site is selected. If necessary, the amino acid in the framework region of the variable region of the antibody may be substituted so that the complementarity determining region of the reshaped human antibody forms an appropriate antigen-binding site (Sato, K. et al., Cancer). Res, 1993, 53, 851-856.).
  • a method for obtaining a human antibody is also known.
  • human lymphocytes are sensitized in vitro with a desired antigen or cells expressing the desired antigen, and the sensitized lymphocytes are fused with human myeloma cells, such as U266, to form a desired human antibody having binding activity to the antigen.
  • a desired human antibody can be obtained by immunizing a transgenic animal having all repertoires of human antibody genes with a desired antigen (WO93 / 12227, WO92 / 03918, WO94 / 02602, WO94 / 25585).
  • WO96 / 34096, WO96 / 33735 ).
  • variable region of a human antibody is expressed as a single chain antibody (scFv) on the surface of the phage by the phage display method, and a phage that binds to the antigen can be selected.
  • scFv single chain antibody
  • the DNA sequence encoding the variable region of the human antibody that binds to the antigen can be determined. If the DNA sequence of scFv that binds to the antigen is clarified, an appropriate expression vector can be prepared from the sequence to obtain a human antibody.
  • antibodies are low molecular weight antibodies such as antibody fragments (fragments), modified antibodies, etc., as long as they do not lose the property of recognizing the full length or part of the protein encoded by the MFG-E8 gene. Also good.
  • Specific examples of the antibody fragment include Fab, Fab ', F (ab') 2, Fv, Diabody, and the like.
  • genes encoding these antibody fragments are constructed, introduced into an expression vector, and then expressed in an appropriate host cell (for example, Co, MS et al.). al., J. Immunol. (1994) 152, 2968-2976; Better, M. and Horwitz, A.H., Methods Enzymol.
  • modified antibody an antibody conjugated with various molecules such as polyethylene glycol (PEG) can also be used.
  • PEG polyethylene glycol
  • Such a modified antibody can be obtained by chemically modifying the obtained antibody. Antibody modification methods have already been established in this field.
  • an antibody having a modified sugar chain can also be used for the purpose of enhancing cytotoxic activity.
  • Antibody sugar chain modification techniques are already known (for example, WO00 / 61739, WO02 / 31140, etc.).
  • multispecific antibodies having specificity for two or more different antigens are also included.
  • a molecule binds two antigens (ie, a bispecific antibody), but the “multispecific antibody” in the present invention is directed against more (eg, three types) antigens.
  • Multispecific antibodies can be full-length antibodies, or fragments of such antibodies (eg, F (ab ′) 2 bispecific antibodies).
  • the constant domain sequence preferably comprises at least part of the hinge, CH2 and CH3 regions of the constant region of the immunoglobulin heavy chain.
  • the CH1 region of the heavy chain necessary for binding to the light chain is further included.
  • the DNA encoding the immunoglobulin heavy chain fusion and, if desired, the DNA encoding the immunoglobulin light chain are each inserted into separate expression vectors and transformed into a suitable host organism. By inserting each gene into a separate expression vector, if the ratio of each chain is not the same, if the yield of the resulting antibody is increased, it is possible to adjust the expression ratio of each chain, Of course, it is also possible to insert a gene encoding a plurality of chains into one vector.
  • Antibodies are desirable.
  • the bispecific antibody can be easily separated from other immunoglobulins (see WO94 / 04690).
  • the method of producing the bispecific antibody the method of Suresh et al. (Methods in Enzymology 121: 210 (1986)) can be further referred to.
  • one of the surface of the antibody molecule comprising CH3 of the constant domain of an antibody and binding to the other molecule Change multiple small side chain amino acids to larger side chain amino acids (eg tyrosine or tryptophan), and change the size of the corresponding antibody side chain amino acids to smaller ones (eg alanine or threonine)
  • a method of providing a cavity corresponding to the large side chain of the first antibody molecule is also known (WO96 / 27011).
  • Bispecific antibodies include, for example, heteroconjugated antibodies in which one antibody is bound to avidin and the other is bound to biotin or the like (US Pat. No. 4,676,980; WO 91/00360; WO92 / 00373; EP03089).
  • Cross-linking agents utilized in the production of such heteroconjugated antibodies are well known, for example, US Pat. No. 4,676,980 describes such examples.
  • a method for producing a bispecific antibody from an antibody fragment has also been reported. For example, it can be produced using a chemical bond. For example, first an F (ab ′) 2 fragment is prepared and the fragment is reduced in the presence of the dithiol complexing agent arsanyl sodium to prevent disulfide formation within the same molecule. The F (ab ′) 2 fragment is then converted to a thionitrobenzoate (TNB) derivative.
  • TAB thionitrobenzoate
  • a bispecific antibody obtained by re-reducing one F (ab ′) 2 -TNB derivative to Fab′-thiol using mercaptoethylamine and then mixing equal amounts of F (ab ′) 2 -TNB derivative and Fab′-thiol Manufacturing.
  • VH heavy chain variable domain
  • VL light chain variable domain
  • the antibodies and antibody fragments of the present invention can be produced by any appropriate method, for example, in vivo, cultured cells, in vitro translation reactions, and recombinant DNA expression systems.
  • Polyclonal antibodies are obtained by isolating antisera containing antibodies from immunized animals and using methods well known in the art such as ELISA assay, Western blot analysis, or radioimmunoassay to detect antibodies with the desired specificity. It can be obtained by screening for the presence.
  • Monoclonal antibodies can be obtained by excising spleen cells from an immunized animal and fusing them with myeloma cells to produce hybridoma cells that produce monoclonal antibodies. Using methods well known in the art such as ELISA assay, Western blot analysis, or radioimmunoassay, hybridoma cells producing an antibody that recognizes the protein of interest or a fragment thereof are selected. A hybridoma that secretes the desired antibody is cloned, cultured under appropriate conditions, and the secreted antibody is recovered and purified using methods well known in the art, such as ion exchange columns, affinity chromatography, and the like. be able to.
  • a human monoclonal antibody may be produced using a xenomous strain (Green, J. Immunol. Methods 231: 11-23, 1999; Wells, Eek, Chem Biol 2000 Aug; 7 (8): R185-6. See).
  • monoclonal antibodies based on phage display without immunization are currently being produced, and the antibodies of the present invention may be produced by any of these methods.
  • DNA encoding the monoclonal antibody can be easily isolated and sequenced by conventional methods (eg, using oligonucleotide probes capable of specifically binding to the genes encoding the heavy and light chains of the monoclonal antibody). it can. Hybridoma cells are a preferred starting material for such DNA.
  • the DNA is inserted into an expression vector.
  • Recombinant host cells such as E. coli cells, monkey COS cells, Chinese hamster ovary (CHO) cells or myeloma cells that do not produce immunoglobulin unless transformed, and monoclonal antibodies are produced from the recombinant host cells.
  • an antibody or antibody fragment can be isolated from an antibody phage library produced using the technique described by McCafferty et al. (Nature 348: 552-554 (1990)).
  • the other anticancer agent that can be used in combination with the anti-MFG-E8 antibody is not particularly limited as long as it is an anticancer agent having an anticancer effect, but is an anticancer agent having tumor cytotoxicity. Is particularly preferable in terms of obtaining a synergistic effect.
  • Examples of the other anticancer agents include alkylating agents, antimetabolites, microtubule inhibitors, antibiotic anticancer agents, topoisomerase inhibitors, platinum preparations, molecular target drugs, hormone agents, biologics, and the like.
  • Examples of the alkylating agent include nitrogen mustard, cyclophosphamide, nitrosourea, dacarbazine and the like.
  • Examples of the antimetabolite include 5-FU, UFT, carmofur, capecitabine, tegafur, TS-1, gemcitabine, cytarabine and the like.
  • Examples of the microtubule inhibitor include alkaloid anticancer agents such as vincristine and taxane anticancer agents such as docetaxel and paclitaxel.
  • Antibiotic anticancer agents include mitomycin C, doxorubicin, epirubicin, daunorubicin, bleomycin and the like.
  • the topoisomerase inhibitor include CPT-11 having a topoisomerase I inhibitory effect, Nogitecan, and etoposide having a topoisomerase II inhibitory action.
  • the platinum preparation include cisplatin, paraplatin, nedaplatin, oxaliplatin and the like.
  • molecular target drugs examples include trastuzumag, rituximab, imatinib, gefitinib, erlotinib, bevacizumab, bortezomib, sunitinib, sorafenib and the like.
  • Hormonal agents include dexamethasone, finasteride, tamoxifen and the like.
  • Biologics include interferons ⁇ , ⁇ and ⁇ , interleukin-2.
  • alkylating agents characterized by cytotoxic activity, antimetabolites, microtubule inhibitors, antibiotic anticancer agents, topoisomerase inhibitors, platinum preparations, molecular targeting drugs are particularly important preferable.
  • gemcitabine 5-FU, CPT-11, etoposide, cisplatin, paclitaxel, docetaxel, dacarbazine, doxorubicin, bevacizumab, anti-vascular endothelial growth factor receptor 2 inhibitory antibody, epidermal growth factor tyrosine kinase inhibitor, etc. Particularly preferred.
  • the anti-MFG-E8 antibody and the other anticancer agent may be used as one preparation, or may be used in the form of different preparations. When different preparations are used, they may be a combination of preparations having different administration routes such as injections and oral preparations.
  • the anti-MFG-E8 antibody and the other anticancer agent may be administered simultaneously, or may be administered after a certain period of time. In the case of administration after a certain period of time, either may be used first, for example, administration may be performed within a predetermined period after the administration period of the anticancer agent.
  • cancer therapies besides anti-cancer drugs include surgery, radiation therapy (including gamma knife therapy, cyber knife therapy, boron neutron capture therapy, proton beam therapy / heavy particle therapy), MR Guided focused ultrasound surgery, cryotherapy, radiofrequency coagulation therapy, ethanol infusion therapy, arterial embolization therapy and the like.
  • radiation therapy including gamma knife therapy, cyber knife therapy, boron neutron capture therapy, proton beam therapy / heavy particle therapy
  • MR Guided focused ultrasound surgery including cryotherapy, radiofrequency coagulation therapy, ethanol infusion therapy, arterial embolization therapy and the like.
  • cancer treatment methods and administration of anti-MFG-E8 antibody may be performed either first and the other later, or may be performed simultaneously.
  • a means for administering an anti-MFG-E8 antibody after performing predetermined radiotherapy may be performed either first and the other later, or may be performed simultaneously.
  • the anticancer agent of the present invention is effective against a wide variety of cancers of mammals including humans, such as pharyngeal cancer, laryngeal cancer, tongue cancer, lung cancer, breast cancer, esophageal cancer, stomach cancer, colon cancer, uterine cancer, Ovarian cancer, liver cancer, pancreatic cancer, gallbladder cancer, kidney cancer, prostate cancer, malignant melanoma, thyroid cancer and other epithelial cancers; osteosarcoma, chondrosarcoma, rhabdomyosarcoma, leiomyosarcoma, liposarcoma, hemangiosarcoma And non-epithelial cancers such as fibrosarcoma, leukemia, malignant lymphoma, and myeloma.
  • the anticancer agent of the present invention can be formulated by mixing, dissolving, granulating, tableting, emulsifying, encapsulating, lyophilizing, etc. with a pharmaceutically acceptable carrier well known in the art. it can.
  • anti-MFG-E8 antibody for oral administration, anti-MFG-E8 antibody, together with pharmaceutically acceptable solvents, excipients, binders, stabilizers, dispersants, etc., tablets, pills, dragees, soft capsules, hard capsules, It can be formulated into dosage forms such as solutions, suspensions, emulsions, gels, syrups and slurries.
  • anti-MFG-E8 antibody for parenteral administration, anti-MFG-E8 antibody together with pharmaceutically acceptable solvents, excipients, binders, stabilizers, dispersants, etc., injection solutions, suspensions, emulsions, creams It can be formulated into dosage forms such as ointments, inhalants, and suppositories.
  • the therapeutic agents of the invention can be dissolved in aqueous solutions, preferably in physiologically compatible buffers such as Hanks's solution, Ringer's solution, or physiological saline buffer.
  • the composition can take the form of a suspension, solution, emulsion or the like in an oily or aqueous vehicle.
  • the anti-MFG-E8 antibody may be produced in the form of a powder, and an aqueous solution or suspension may be prepared using sterilized water or the like before use.
  • the anti-MFG-E8 antibody can be powdered and made into a powder mixture with a suitable base such as lactose or starch.
  • the suppository formulation can be produced by mixing the anti-MFG-E8 antibody with a conventional suppository base such as cocoa butter.
  • the therapeutic agent of the present invention can be encapsulated in a polymer matrix or the like and formulated as a sustained release preparation.
  • the dose of anti-MFG-E8 antibody varies depending on the patient's symptoms, administration route, body weight, age, etc., but is preferably 1 ⁇ g to 500 mg per day for adults, for example.
  • the dosage of other anticancer agents is preferably an effective amount of each anticancer agent or 0.01 to 1 times the effective amount thereof.
  • the radiation dose in other cancer treatment methods such as radiotherapy can be reduced by 0.1 to 0.8 times.
  • the anticancer agent of the present invention is usually administered by parenteral administration route, for example, injection (subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, etc.), transdermal, transmucosal, nasal, transpulmonary, etc.
  • parenteral administration route for example, injection (subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, etc.), transdermal, transmucosal, nasal, transpulmonary, etc.
  • parenteral administration route for example, injection (subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, etc.), transdermal, transmucosal, nasal, transpulmonary, etc.
  • parenteral administration route for example, injection (subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, etc.), transdermal, transmucosal, nasal, transpulmonary, etc.
  • injection subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, etc.
  • transdermal
  • the mechanism of action of the anti-cancer effect of the anti-MFG-E8 antibody of the present invention has not been completely elucidated, it activates the anti-tumor immune response in the tumor and systemic and produces tumor-specific cytotoxic T cells. It is thought that the main thing is to induce and promote an anti-tumor immune response including induction of the tumor.
  • the anti-MFG-E8 antibody activates an immune response against a target cell as described above, induces cytotoxic T cells, and induces and promotes an immune response against the target cell.
  • an anti-MFG-E8 antibody when an anti-MFG-E8 antibody is combined with a drug or therapeutic method capable of damaging a target cell, an immune response against the target cell can be strongly induced. Therefore, specific immunity against various focal cells such as cancer can be excluded. It can be used as an inducer.
  • Example 1 (Synergistic tumor reduction effect by anticancer drug and anti-MFG-E8 antibody) (Method) After ingesting mouse colon cancer cells MC-38 (1 ⁇ 10 5 cells per mouse) subcutaneously on the dorsal side of the mouse, the tumor diameter grew to 5 mm long (25-30 mm 2 ) (day 10) as an anticancer agent, anti-MFG -E8 antibody is intraperitoneally administered into day 10, day 13, day 16 peritoneal cavity according to the following protocol. The same examination was performed twice according to the following protocol. As the anti-MFG-E8 antibody, an inhibitory antibody commercialized by MBL was used.
  • Protocol 1 ⁇ Gemcitabine (GEM): 4 mg / kg -Gemcitabine (GEM): 1 mg / kg Anti-MFG-E8 antibody: 1 mg / kg Gemcitabine (GEM): 4 mg / kg + anti-MFG-E8 antibody: 1 mg / kg Gemcitabine (GEM): 1 mg / kg + anti-MFG-E8 antibody: 1 mg / kg Protocol 2: ⁇ CPT-11: 1mg / kg ⁇ 5FU: 0.1M Anti-MFG-E8 antibody: 1 mg / kg CPT-11: 1 mg / kg + anti-MFG-E8 antibody: 1 mg / kg ⁇ 5FU: 0.1M + anti-MFG-E8 antibody: 1 mg / kg
  • Example 2 (Examination of surface traits related to immunological function of intratumoral lymphocytes) (Method)
  • Method In a tumor model using subcutaneous administration of colon cancer cells MC38 as described above, various treatment protocols were performed, and tumor tissues were collected from mice at 1 week later (day 23). After treatment with collagenase I, lymphocytes present in the tumor tissue were separated and collected by a specific gravity gradient method using Lymphoprep. The following examination was carried out on the surface antigen related to the activity of intratumoral lymphocytes using flow cytometry.
  • CD11b-Gr-1 positive cells a marker of dendritic cells that contribute to enhancing antitumor T cell activity-Dendritic cells
  • CD11b proportion of CD11b and CD86 positive fractions
  • Example 3 Evaluation of splenic lymphocyte immunoreactivity
  • spleen cells which are representative peripheral lymphoid tissues.
  • the spleen is removed from a mouse that has been examined for the immune activity of intratumoral lymphocytes, and the spleen cells are isolated from the spleen, and mainly CD4 positive helper T cells and CD8 positive cytotoxic T cells.
  • the activity was examined by flow cytometry as follows.
  • the ratio of T cells, immature myeloid cells, and dendritic cells in the group administered with the anticancer agent alone does not change significantly (FIGS. 4A and 4B).
  • the anti-MFG-E8 antibody alone administration group is equivalent to the anticancer agent.
  • CD44 expression and IFN ⁇ production were clearly enhanced.
  • There was no significant difference in IL-10 response compared to the untreated group and the anticancer agent alone group (FIGS. 4A and 4B). From the above, it has been clarified that the combined use of an anticancer agent and an anti-MFG-E8 antibody activates not only a tumor locality but also a systemic antitumor immune response.
  • Example 4 (Investigation of ability to induce tumor-specific cytotoxic T cells by combined use of anti-MFG-8 antibody and anticancer agent) (Method) Lymph node cells were isolated from cancer-treated mice treated with the untreated group, the anti-MFG-E8 antibody group, the anticancer agent group, and the anticancer agent and antibody combination group, and then treated with radiation-treated (200 Gy) MC38 colon cancer cells and 10: 1. Co-culture was performed at a rate. Five days later, lymph node cells and target tumor cells labeled with 51 Cr were mixed and cultured for 4 hours, and then the amount of 51 Cr released into the supernatant was measured with a ⁇ scintillator to measure tumor cytotoxic activity.
  • Example 5 In vitro study of antigen-specific T cell activity enhancement through dendritic cell activity modification by MFG-E8, (Method) The mechanism of dendritic cell and T cell activity in combination with anti-MFG-E8 antibody and anticancer agent observed in vivo was examined in detail in a mixed culture system in vitro. Specifically, in order to use Ovalbumin (OVA) as a model antigen, bone marrow cells were collected from DO11.10 (MHC class II-restricted OVA antigen transgenic mouse), and granulocyte monocyte colony-stimulating factor (GM-CSF) To induce differentiation of dendritic cells.
  • Ovalbumin Ovalbumin
  • DO11.10 MHC class II-restricted OVA antigen transgenic mouse
  • GM-CSF granulocyte monocyte colony-stimulating factor
  • MFG-E8 recombinant protein 100 ⁇ g / mL or anti-MFG-E8 antibody (20 ⁇ g / mL)
  • MHC class IIOVA-restricted OVA peptide 5 mg / mL or negative control peptide was used on day 8.
  • HSA HSA was pulsed for 6 hours. They are mixed with a native CD4 + positive T cell derived from Syngeneic (Balb / c) mouse so that the ratio of dendritic cell to CD4 + T cell is 1:10, and anti-CD3 antibody (0.1 ⁇ g / mL) Mixed culture was carried out in the presence. After 72 hours, T cell activity was examined by measuring intracellular expression of IFN-g and IL-10 by flow cytometry.
  • Untreated dendritic cells T cell activity by OVA-specific dendritic cells was observed (it is considered that both IFNg and IL-10 have been activated, and both immune activity and inhibitory function are active).
  • Dendritic cells pre-stimulated with MFG-E8 OVA-specific reduced IFNg production and enhanced IL-10 production were observed compared to the control group (suppression of antigen-specific immune response was observed).
  • MFG-E8 of dendritic cells was inhibited with anti-MFG-E8 antibody, enhanced OVA-specific IFNg production ability and decreased IL-10 production were observed compared to the control group (antigen-specific immunity). Response activation was observed).
  • MFG-E8 acts directly on dendritic cells, negatively controls its immune activity function, and strongly activates immune responses by dendritic cells antigen-specifically by neutralization with anti-MFG-E8 antibody It became clear. Since the function of this anti-MFG-E8 antibody was also observed in dendritic cells pulsed with peptide, it is thought to be through the control of costimulatory molecules that are functions other than antigen presentation of dendritic cells. (FIG. 6).
  • Example 6 (Investigation of MFG-E8 expression (secretion) induction from tumor cells by anticancer agents) (Method) 24 hours after administration of various anticancer agents (Doxorubicine, GEM, 5-FU, CPT-11, etc.) to MC38 colon cancer cells and normal fibroblasts (NIH3T3, Primary Fibroblast) in order to investigate the sensitivity enhancement of MFG-E8 inhibition by anticancer agents. Later, MFG-E8 expression was examined by intracellular flow cytometry and ELISA using cell culture supernatant.
  • various anticancer agents Doxorubicine, GEM, 5-FU, CPT-11, etc.
  • Example 7 Investigation of the effect of anti-MFG-E8 antibody on tumor cell death induction by anticancer agents
  • Method When administering various anticancer agents (GEM: 1M, CPT-11: 0.5M, 5FU: 1M) to MC38 colon cancer cell line, anti-MFG-E8 inhibitory antibody (20 ⁇ g / mL) or IgG antibody is added simultaneously as a negative control.
  • the cell death ratio after 48 hours of culturing under serum-free conditions was quantitatively examined by flow cytometry.

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Abstract

　本発明は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を有効成分とする抗がん剤、および抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と他の抗がん剤を含むがん治療法とを組み合せてなる抗がん剤に関する。

Description

抗がん剤
　本発明は、新たな抗がん剤、特に他のがん治療法の治療効果を増強させることによる抗がん剤に関する。
　癌は昭和５６年に死因の一位になって以来、現在でも死因の一位を続けており、常に新たな治療法が求められている。癌の治療法としては、外科療法、放射線療法、化学療法（抗がん剤）があるが、外科手術後でも抗がん剤による治療が用いられる。
　抗がん剤としては、アルキル化剤、代謝拮抗剤、アルカロイド系抗がん剤、抗生物質抗がん剤、白金製剤等が用いられているが、その治療効果は未だ十分とはいえず、また副作用の発生頻度が高いという問題もある。かかる観点から、より優れた抗がん剤の開発が望まれている。
　一方、ＭＦＧ－Ｅ８（脂肪球被膜糖蛋白質：ｍｉｌｋ　ｆａｔ　ｇｌｏｂｕｌｅ－ＥＧＦ　ｆａｃｔｏｒ８）は、乳腺より分泌され乳腺分化、授乳刺激を促進する因子として同定された（非特許文献１）。近年ＭＦＧ－Ｅ８がこれらの作用のみならず、種々の異なった機能を有する事が明らかになった。その一つが、オプソニンとしてアポトーシス細胞上のホスファチジルセリンを認識してマクロファージや樹状細胞による貪食処理能を促進し免疫寛容を維持するという重要な機能である（非特許文献２、３）。さらに、ＭＦＧ－Ｅ８はＦｏｘｐ３陽性制御性Ｔ細胞の増殖を促進することで免疫寛容誘導を誘導し、腫瘍ワクチンの抗腫瘍免疫を負に調節することも判明した（非特許文献４）。この知見を基盤として、癌ワクチンをはじめとした腫瘍抗原との併用を前提として、ＭＦＧ－Ｅ８のデコイ遺伝子あるいは阻害抗体を用いる治療法開発について既に特許出願がなされている(特許文献１)。またＭＦＧ－Ｅ８は樹状細胞などの抗原提示細胞に限らず乳癌、大腸癌、メラノーマなど腫瘍細胞に広範に発現することが知られること（非特許文献５）、血管新生や腫瘍転移能を促進することにより腫瘍促進作用を有することやメラノーマの臨床的進行度と正相関することが明らかになっている（非特許文献６）。
Ｓｔｕｂｂｓ　Ｔ　ｅｔ　ａｌ．１９９０．ｃＤＮＡ　ｒｅｖｅａｌｓ　ｔｈｅ　ｅｘｉｓｔｅｎｃｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ　８７：８４１７－８４２１． Ｈａｎａｙａｍａ　Ｒ．ｅｔ　ａｌ．２００２．Ｎａｔｕｒｅ　４１７：１８２－１８７． Ｈａｎａｙａｍａ　Ｒ．，ｅｔ　ａｌ．２００４．Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ　ＭＦＧ－Ｅ８－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ　ｍｉｃｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ　３０４：１１４７－１１５０． Ｊｉｎｕｓｈｉ　Ｍ．，ｅｔ　ａｌ．２００７．ＭＦＧ－Ｅ８　ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｕｐｔａｋｅ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｃｅｌｌｓ　ｂｙ　ＡＰＣｓ　ｌｉｎｋｓ　ｔｈｅ　ｐｒｏ－ａｎｄ　ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ＧＭ－ＣＳＦ．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｉｎｖｅｓｔ　１１７：１９０２－１９１３． Ｃａｒｍｏｎ　Ｌ．，ｅｔ　ａｌ．２００２．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｎｏｖｅｌ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ＢＡ４６－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｐｅｐｔｉｄｅｓ　ｉｎ　ＨＬＡ－２．１／Ｄ（ｂ）－ｂｅｔａ２ｍ　ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ　ｍｉｃｅ．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｉｎｖｅｓｔ　１１０：４５３－４６２． Ｎｅｕｔｚｎｅｒ　Ｍ．，ｅｔ　ａｌ．２００７．ＭＦＧ－Ｅ８／ｌａｃｔａｄｈｅｒｉｎ　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ｔｕｍｏｒ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎ　ａｎ　ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ　ｍｏｕｓｅ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆ　ｍｕｌｔｉｓｔａｇｅ　ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ　６７：６７７７－６７８５． ＷＯ２００８／０４３０１８号パンフレット
　本発明は、新たな抗がん剤および新たながんの治療方法を提供することにある。
　本発明者は、ＭＦＧ－Ｅ８に対する抗体を用いて、その薬理作用について検討してきたところ、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体が、単独で優れた抗がん効果を有することを見出した。さらに検討を進めたところ、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体は、単独による抗がん効果よりも、他の抗がん剤を含む他のがん治療法との併用により、極めて強力な抗がん効果を発揮し、他のがん治療法の効果を増強させる効果が特に優れていることを見出した。さらに、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体は、腫瘍内および全身性の抗腫瘍免疫応答を活性化させ、腫瘍特異的細胞傷害性Ｔ細胞等の誘導を含む抗腫瘍免疫反応を惹起促進させる作用を有することを明らかにした。特に抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体は、標的細胞を傷害し得る薬剤又は治療法と組み合せた際に、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体による抗腫瘍免疫反応を強力に誘導し得る特異的免疫誘導薬として極めて有用であることも見出した。ここであげた特異的免疫とは、標的抗原に対して特異的なＢ細胞などによる液性免疫およびＴ細胞などによる細胞性免疫応答をさす。
　すなわち、本発明は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を有効成分とする抗がん剤を提供するものである。
　また本発明は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と他の抗がん剤とを組み合せてなる抗がん剤を提供するものである。
　また本発明は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を含有し、他のがん治療法と組み合せて使用するための抗がん剤を提供するものである。
　また本発明は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を有効成分とし、標的細胞を傷害し得る薬剤又は治療法と組み合せて使用するための特異的免疫誘導薬を提供するものである。
　また本発明は、抗がん剤製造のための抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の使用を提供するものである。
　また本発明は、他の抗がん剤と組み合せてなる抗がん剤製造のための抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の使用を提供するものである。
　また本発明は、他のがん治療法と組み合せて使用するための抗がん剤製造のための抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の使用を提供するものである。
　また本発明は、標的細胞を傷害し得る薬剤又は治療法と組み合せて使用するための特異的免疫誘導薬製造のための抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の使用を提供するものである。
　また本発明は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を投与することを特徴とするがんの治療法を提供するものである。
　また本発明は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と他の抗がん剤とを組み合せて投与することを特徴とするがんの治療法を提供するものである。
　また、本発明は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の投与と、他のがん治療法とを組み合せることを特徴とするがんの治療法を提供するものである。
　また本発明は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と、標的細胞を傷害し得る薬剤又は治療法とを組み合せることを特徴とする特異的免疫誘導方法を提供するものである。
　本発明の抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と他の抗がん剤等の他のがん治療法とを組み合せれば、抗がん効果が飛躍的に向上するため、より優れたがん治療効果が得られる。また、副作用のある抗がん剤や放射線療法等のがん治療法と併用した場合には、その抗がん剤の投与量やがん治療法の強度（放射線療法における放射線照射量にあたるもの）を減らすことができ、その抗がん剤の投与間隔やがん治療法実施の間隔を長く設定できるため、副作用の軽減も可能になる。副作用が発生する頻度が低下すれば、抗がん剤や放射線療法等による治療をより長く継続できるため、がん治療効果はさらに向上することになる。
　また、本発明における抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体によるがん治療効果はがん患者の体内に存在している状態の腫瘍細胞由来の抗原を利用して特異的免疫を誘導し得るものであるため、本発明によれば、従来の腫瘍ワクチンのような腫瘍細胞の抗原を患者から分離あるいは同定する必要はなく、また治療の際に患者に腫瘍抗原を投与することなく治療効果が得られる。
抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体単独投与、または抗がん剤（ゲムシタビン：ＧＥＭ）との併用による抗がん効果を示す図である。ＮＴは無治療群、Ａｎｔｉ－ＭＦＧＥ８Ａｂは抗ＭＦＭ－Ｅ８抗体を示す（以下同じ）。 抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体単独投与、または抗がん剤（ＣＰＴ１１、５ＦＵ）との併用による抗がん効果を示す図である。 ５－ＦＵと抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体併用による腫瘍内リンパ球（ＣＤ４、ＣＤ８）の活性に関連する表面抗原のフローサイトメトリーを示す図である。 ５－ＦＵと抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体併用による腫瘍内リンパ球（ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ）の活性に関連する表面抗原のフローサイトメトリーを示す図である。 ５－ＦＵと抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体併用による脾臓内リンパ球（ＣＤ４）の活性に関連する表面抗原のフローサイトメトリーを示す図である。 ５－ＦＵと抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体併用による脾臓内リンパ球（ＣＤ８）の活性に関連する表面抗原のフローサイトメトリーを示す図である。 抗癌剤と抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体併用によるリンパ節内リンパ球の腫瘍特異的細胞傷害活性を示す図である。Ｂ１６はＢ１６細胞を、ＭＣ３８はＭＣ３８細胞を示す。 Ｔ細胞活性状態をフローサイトメトリーによってＩＦＮ－ｇおよびＩＬ－１０の細胞内発現を測定した結果を示す図である。 抗がん剤による腫瘍細胞からのＭＦＧ－Ｅ８発現を示す図である。 抗がん剤による腫瘍細胞からのＭＦＧ－Ｅ８発現を示す図である。 ＭＦＧ－Ｅ８抗体が抗がん剤による腫瘍細胞死誘導に与える作用を示す図である。
　本発明の抗がん剤の有効成分は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体である。本発明に用いられる抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体は、ＭＦＧ－Ｅ８に特異的に結合し、ＭＦＧ－Ｅ８の機能を阻害する抗体であれば特に制限されない。
　本発明の抗体には、モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体、ならびに抗原決定基に特異的に結合する能力を保持している抗体およびＴ－細胞レセプターフラグメント等の、抗体の変種および誘導体が含まれる。
　又、本発明の抗体の種類は特に制限されず、マウス抗体、ヒト抗体、ラット抗体、ウサギ抗体、ヒツジ抗体、ラクダ抗体、トリ抗体等や、ヒトに対する異種抗原性を低下させること等を目的として人為的に改変した遺伝子組換え型抗体、例えば、キメラ抗体、ヒト化抗体、等を適宜用いることができる。遺伝子組換え型抗体は、既知の方法を用いて製造することができる。キメラ抗体は、ヒト以外の哺乳動物、例えば、マウス抗体の重鎖、軽鎖の可変領域とヒト抗体の重鎖、軽鎖の定常領域からなる抗体であり、マウス抗体の可変領域をコードするＤＮＡをヒト抗体の定常領域をコードするＤＮＡと連結し、これを発現ベクターに組み込んで宿主に導入し産生させることにより得ることができる。ヒト化抗体は、再構成（ｒｅｓｈａｐｅｄ）ヒト抗体とも称され、ヒト以外の哺乳動物、たとえばマウス抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ；ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ　ｒｅｇｉｏｎ）をヒト抗体の相補性決定領域へ移植したものであり、その一般的な遺伝子組換え手法も知られている。具体的には、マウス抗体のＣＤＲとヒト抗体のフレームワーク領域（ｆｒａｍｅｗｏｒｋ　ｒｅｇｉｏｎ；ＦＲ）を連結するように設計したＤＮＡ配列を、末端部にオーバーラップする部分を有するように作製した数個のオリゴヌクレオチドからＰＣＲ法により合成する。得られたＤＮＡをヒト抗体定常領域をコードするＤＮＡと連結し、次いで発現ベクターに組み込んで、これを宿主に導入し産生させることにより得られる（欧州特許出願公開番号ＥＰ２３９４００、国際特許出願公開番号ＷＯ９６／０２５７６参照）。ＣＤＲを介して連結されるヒト抗体のＦＲは、相補性決定領域が良好な抗原結合部位を形成するものが選択される。必要に応じ、再構成ヒト抗体の相補性決定領域が適切な抗原結合部位を形成するように抗体の可変領域のフレームワーク領域のアミノ酸を置換してもよい（Ｓａｔｏ，Ｋ．ｅｔ　ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，１９９３，５３，８５１－８５６．）。
　また、ヒト抗体の取得方法も知られている。例えば、ヒトリンパ球をｉｎ　ｖｉｔｒｏで所望の抗原または所望の抗原を発現する細胞で感作し、感作リンパ球をヒトミエローマ細胞、例えばＵ２６６と融合させ、抗原への結合活性を有する所望のヒト抗体を得ることもできる（特公平１－５９８７８参照）。また、ヒト抗体遺伝子の全てのレパートリーを有するトランスジェニック動物を所望の抗原で免疫することで所望のヒト抗体を取得することができる（ＷＯ９３／１２２２７，ＷＯ９２／０３９１８，ＷＯ９４／０２６０２，ＷＯ９４／２５５８５，ＷＯ９６／３４０９６，ＷＯ９６／３３７３５参照）。さらに、ヒト抗体ライブラリーを用いて、パンニングによりヒト抗体を取得する技術も知られている。例えば、ヒト抗体の可変領域を一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）としてファージディスプレイ法によりファージの表面に発現させ、抗原に結合するファージを選択することができる。選択されたファージの遺伝子を解析すれば、抗原に結合するヒト抗体の可変領域をコードするＤＮＡ配列を決定することができる。抗原に結合するｓｃＦｖのＤＮＡ配列が明らかになれば、当該配列を適当な発現ベクターを作製し、ヒト抗体を取得することができる。これらの方法は既に周知であり、ＷＯ９２／０１０４７，ＷＯ９２／２０７９１，ＷＯ９３／０６２１３，ＷＯ９３／１１２３６，ＷＯ９３／１９１７２，ＷＯ９５／０１４３８，ＷＯ９５／１５３８８を参考にすることができる。
　また、これらの抗体は、ＭＦＧ－Ｅ８遺伝子によってコードされる蛋白質の全長または一部を認識する特性を失わない限り、抗体断片（フラグメント）等の低分子化抗体や抗体の修飾物などであってもよい。抗体断片の具体例としては、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｄｉａｂｏｄｙなどを挙げることができる。このような抗体断片を得るには、これら抗体断片をコードする遺伝子を構築し、これを発現ベクターに導入した後、適当な宿主細胞で発現させればよい（例えば、Ｃｏ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．　Ｉｍｍｕｎｏｌ．（１９９４）１５２，２９６８－２９７６；Ｂｅｔｔｅｒ，Ｍ．ａｎｄ　Ｈｏｒｗｉｔｚ，Ａ．Ｈ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅｎｚｙｍｏｌ．（１９８９）１７８，４７６－４９６；Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ａ．ａｎｄ　Ｓｋｅｒｒａ，Ａ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅｎｚｙｍｏｌ．（１９８９）１７８，４９７－５１５；Ｌａｍｏｙｉ，Ｅ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅｎｚｙｍｏｌ．（１９８６）１２１，６５２－６６３；Ｒｏｕｓｓｅａｕｘ，Ｊ．ｅｔ　ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅｎｚｙｍｏｌ．（１９８６）１２１，６６３－６６９；Ｂｉｒｄ，Ｒ．Ｅ．ａｎｄ　Ｗａｌｋｅｒ，Ｂ．Ｗ．，Ｔｒｅｎｄｓ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（１９９１）９，１３２－１３７参照）。
　抗体の修飾物として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の各種分子と結合した抗体を使用することもできる。このような抗体修飾物は、得られた抗体に化学的な修飾を施すことによって得ることができる。なお、抗体の修飾方法はこの分野においてすでに確立されている。
　又、本発明においては、細胞傷害活性を増強する目的などで、糖鎖を改変した抗体などを用いることも可能である。抗体の糖鎖改変技術は既に知られている（例えば、ＷＯ００／６１７３９、ＷＯ０２／３１１４０など）。
　又、本発明においては、２種以上の異なる抗原に対して特異性を有する多特異性抗体も含まれる。通常このような分子は２個の抗原を結合するものであるが（すなわち、二重特異性抗体）、本発明における「多特異性抗体」は、それ以上（例えば、３種類の）抗原に対して特異性を有する抗体を包含するものである。多特異性抗体は全長からなる抗体、またはそのような抗体の断片（例えば、Ｆ（ａｂ’）２二特異性抗体）であり得る。
　当分野において多特異性抗体の製造法は公知である。全長の二特異性抗体の産生は、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖－軽鎖の共発現を含むものである（Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎｅｔ　ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ　３０５：５３７－５３９（１９８３））。免疫グロブリンの重鎖および軽鎖はランダムに取り合わされるので、共発現を行う得られた複数のハイブリドーマ（クワドローマ）は、各々異なる抗体分子を発現するハイブリドーマの混合物であり、このうち正しい二特異性抗体を産生するものを選択する必要がある。選択はアフィニティークロマトグラフィー等の方法により行うことができる。また、別な方法では所望の結合特異性を有する抗体の可変領域を免疫グロブリンの定常ドメイン配列に融合する。該定常ドメイン配列は、好ましくは免疫グロブリンの重鎖の定常領域の内、ヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３領域の一部を少なくとも含むものである。好ましくは、さらに軽鎖との結合に必要な重鎖のＣＨ１領域が含まれる。免疫グロブリン重鎖融合体をコードするＤＮＡ、および、所望により免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡをそれぞれ別々の発現ベクターに挿入し、適当な宿主生物に形質転換する。別々の発現ベクターに各遺伝子を挿入することにより、それぞれの鎖の存在割合が同じでない方が、得られる抗体の収量が上がる場合に、各鎖の発現割合の調節が可能となり都合が良いが、当然ながら、複数の鎖をコードする遺伝子を一つのベクターに挿入して用いることも可能である。
　好ましい態様においては、第一の結合特性を有する重鎖がハイブリッド免疫グロブリンの一方の腕として存在し、別の結合特性の重鎖－軽鎖複合体がもう一方の腕として存在する二重特異性抗体が望ましい。このように一方の腕のみに軽鎖を存在させることにより、二重特異性抗体の他の免疫グロブリンからの分離を容易に行うことができる（ＷＯ９４／０４６９０参照）。二重特異性抗体の作成方法については、さらに、Ｓｕｒｅｓｈら（Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ　１２１：２１０（１９８６））の方法を参照することができる。組換細胞培養物から得られる最終産物中のホモダイマーを減らしヘテロダイマーの割合を増加させる方法として、抗体の定常ドメインのＣＨ３を含み、一方の抗体分子において、他方の分子と結合する表面の１若しくは複数の小さな側鎖のアミノ酸を大きな側鎖のアミノ酸（例えば、チロシンやトリプトファン）に変え、他方の抗体分子の対応する部分の大きさ側鎖のアミノ酸を小さなもの（例えば、アラニンやスレオニン）に変えて第一の抗体分子の大きな側鎖に対応する空洞を設ける方法も知られている（ＷＯ９６／２７０１１）。
　二重特異性抗体には、例えば、一方の抗体がアビジンに結合され、他方がビオチン等に結合されたようなヘテロ共役抗体が含まれる（米国特許第４，６７６，９８０号；ＷＯ９１／００３６０；ＷＯ９２／００３７３；ＥＰ０３０８９）。このようなヘテロ共役抗体の作製に利用される架橋剤は周知であり、例えば、米国特許第４，６７６，９８０号にもそのような例が記載されている。
　また、抗体断片より二特異性抗体を製造する方法も報告されている。例えば、化学結合を利用して製造することができる。例えば、まずＦ（ａｂ’）２断片を作成し、同一分子内でのジスルフィド形成を防ぐため断片をジチオール錯化剤アルサニルナトリウムの存在化で還元する。次にＦ（ａｂ’）２断片をチオニトロ安息香酸塩（ＴＮＢ）誘導体に変換する。メルカプトエチルアミンを用いて一方のＦ（ａｂ’）２－ＴＮＢ誘導体をＦａｂ’－チオールに再還元した後、Ｆ（ａｂ’）２－ＴＮＢ誘導体およびＦａｂ’－チオールを等量混合し二特異性抗体を製造する。
　組換細胞培養物から直接、二重特異性抗体を製造し、単離する方法も種々、報告されている。例えば、ロイシンジッパーを利用した二重特異性抗体の製造方法が報告されている（Ｋｏｓｔｅｌｎｙ　ｅｔ　ａｌ．，Ｊ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５４７－１５５３（１９９２））。まず、ＦｏｓおよびＪｕｎ蛋白質のロイシンジッパーペプチドを、遺伝子融合により異なる抗体のＦａｂ’部分に連結させ、ホモダイマーの抗体をヒンジ領域においてモノマーを形成するように還元し、抗体へテロダイマーとなるように再酸化する。また、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を、これら２つのドメイン間での対形成できない位に短いリンカーを介して連結し、相補的な別のＶＬおよびＶＨドメインと対を形成させ、それにより２つの抗原結合部位を形成させる方法もある（Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ　ｅｔ　ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ　９０：６４４４－６４４８（１９９３））。また、一本鎖Ｆｖ（ｓＦＶ）を用いたダイマーについても報告されている（Ｇｒｕｇｅｒ　ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５３６８（１９９４））。さらに、二重特異性ではなく三重特異性の抗体についても報告されている（Ｔｕｔｔ　ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１））。
　本発明の抗体および抗体フラグメントは、任意の適当な方法、例えば、インビボ、培養細胞、インビトロ翻訳反応、および組換えＤＮＡ発現系により製造することができる。
　モノクローナル抗体およびハイブリドーマを製造する手法は当該技術分野においてよく知られている（Ｃａｍｐｂｅｌｌ，“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　Ａｎｔｉｂｏｄｙ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｉｎ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ”、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，Ｔｈｅ　Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ，１９８４；Ｓｔ．Ｇｒｏｔｈ　ｅｔ　ａｌ．、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　３５：１－２１，１９８０）。ＭＦＧ－Ｅ８遺伝子によりコードされる蛋白質またはフラグメントを免疫原として用いて、抗体を生成することが知られている任意の動物（マウス、ウサギ等）に皮下または腹膜内注射することにより免疫することができる。免疫に際してアジュバントを用いてもよく、そのようなアジュバントは当該技術分野においてよく知られている。
　ポリクローナル抗体は、免疫した動物から抗体を含有する抗血清を単離し、ＥＬＩＳＡアッセイ、ウエスタンブロット分析、またはラジオイムノアッセイ等の当該技術分野においてよく知られる方法を用いて、所望の特異性を有する抗体の存在についてスクリーニングすることにより得ることができる。
　モノクローナル抗体は、免疫した動物から脾臓細胞を切除し、ミエローマ細胞と融合させ、モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞を作製することにより得ることができる。ＥＬＩＳＡアッセイ、ウエスタンブロット分析、またはラジオイムノアッセイ等の当該技術分野においてよく知られる方法を用いて、目的とする蛋白質またはそのフラグメントを認識する抗体を産生するハイブリドーマ細胞を選択する。所望の抗体を分泌するハイブリドーマをクローニングし、適切な条件下で培養し、分泌された抗体を回収し、当該技術分野においてよく知られる方法、例えばイオン交換カラム、アフィニティークロマトグラフィー等を用いて精製することができる。あるいは、ゼノマウス株を用いてヒト型モノクローナル抗体を製造してもよい（Ｇｒｅｅｎ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　２３１：１１－２３，１９９９；Ｗｅｌｌｓ，Ｅｅｋ，Ｃｈｅｍ　Ｂｉｏｌ　２０００　Ａｕｇ；７（８）：Ｒ１８５－６を参照）。また、免疫を行わないファージディスプレイに基づいたモノクローナル抗体の作製も現在行われており、本発明の抗体はこれらの方法のいずれで製造されてもかまわない。
　モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、慣用な方法（例えば、モノクローナル抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを用いて）により容易に単離、配列決定できる。ハイブリドーマ細胞はこのようなＤＮＡの好ましい出発材料である。一度単離したならば、ＤＮＡを発現ベクターに挿入し、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞または形質転換されなければ免疫グロブリンを産生しないミエローマ細胞等の宿主細胞へ組換え、組換え宿主細胞からモノクローナル抗体を産生させる。また別の態様として、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら（Ｎａｔｕｒｅ　３４８：５５２－５５４（１９９０））により記載された技術を用いて製造された抗体ファージライブラリーより抗体、または抗体断片は単離することができる。
　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と併用することができる他の抗がん剤としては、抗がん効果を有する抗がん剤であれば特に限定されないが、腫瘍細胞傷害性を有する抗がん剤であることが、相乗効果を得る点で特に好ましい。
　当該他の抗がん剤としては、アルキル化剤、代謝拮抗剤、微小管阻害剤、抗生物質抗がん剤、トポイソメラーゼ阻害剤、白金製剤、分子標的薬、ホルモン剤、生物製剤等が挙げられる。アルキル化剤としてはナイトロジェンマスタード、シクロホスファミド、ニトロソウレア、ダカルバジン等が挙げられる。代謝拮抗剤としては、５－ＦＵ、ユーエフティ、カルモフール、カペシタビン、テガフール、ＴＳ－１、ゲムシタビン、シタラビン等が挙げられる。微小管阻害剤としては、ビンクリスチン等のアルカロイド系抗癌剤、ドセタキセル、パクリタキセル等のタキサン系抗がん剤が挙げられる。抗生物質抗がん剤としては、マイトマイシンＣ、ドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、ブレオマイシン等が挙げられる。トポイソメラーゼ阻害剤としてはトポイソメラーゼＩ阻害作用を有するＣＰＴ－１１やノギテカン、トポイソメラーゼＩＩ阻害作用をもつエトポシドが挙げられる。白金製剤としては、シスプラチン、パラプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン等が挙げられる。分子標的薬としては、トラスツズマグ、リツキシマブ、イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ベバシズマブ、ボルテゾミブ、スニチニブ、ソラフェニブ等が挙げられる。ホルモン剤としては、デキサメタゾン、フィナステリド、タモキシフェン等が挙げられる。生物製剤としてはインターフェロンα、βおよびγ、インターロイキン２が挙げられる。これらの他の抗がん剤のうち、細胞傷害活性を特徴とするアルキル化剤、代謝拮抗剤、微小管阻害剤、抗生物質抗がん剤、トポイソメラーゼ阻害剤、白金製剤、分子標的薬が特に好ましい。具体的には、ゲムシタビン、５－ＦＵ、ＣＰＴ－１１、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、ダカルバジン、ドキソルビシン、ベバシズマブ、抗血管内皮増殖因子受容体２阻害抗体、上皮性増殖因子チロシンキナーゼ阻害剤等が特に好ましい。
　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と他の抗がん剤は、一の製剤として用いてもよいし、それぞれ別の製剤の形態で用いてもよい。別の製剤にする場合、例えば注射剤と経口剤のように、投与ルートの異なる製剤の組み合せであってもよい。また、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と他の抗がん剤とは、同時に投与してもよいし、一定時間をあけて投与してもよい。一定時間をあけて投与する場合、いずれが先でもよく、例えば抗がん剤の投与期間終了後所定期間内に投与することでもよい。
　抗がん剤以外の他のがん治療法としては、外科手術の他、放射線療法（ガンマーナイフ療法、サイバーナイフ療法、ホウ素中性子捕捉療法、陽子線治療・重粒子線治療法を含む）、ＭＲガイド下集束超音波手術、凍結療法、ラジオ波凝固療法、エタノール注入療法、動脈塞栓療法等が挙げられる。
　これらのがん治療法と抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の投与とは、いずれか一方を先に行い、他方を後に行ってもよいが、同時に行ってもよい。例えば、所定の放射療法を行った後に抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を投与する手段が挙げられる。
　本発明の抗がん剤は、ヒトを含む哺乳類の、多岐にわたる癌に対して有効であり、例えば咽頭癌、喉頭癌、舌癌、肺癌、乳癌、食道癌、胃癌、大腸癌、子宮癌、卵巣癌、肝臓癌、膵臓癌、胆嚢癌、腎臓癌、前立腺癌、悪性黒色腫、甲状腺癌などの上皮がん；骨肉腫、軟骨肉腫、横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、血管肉腫、繊維肉腫、白血病や悪性リンパ腫、骨髄腫などの非上皮がんが挙げられる。
　本発明の抗がん剤は、当該技術分野においてよく知られる薬学的に許容しうる担体とともに、混合、溶解、顆粒化、錠剤化、乳化、カプセル封入、凍結乾燥等により、製剤化することができる。
　経口投与用には、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を、薬学的に許容しうる溶媒、賦形剤、結合剤、安定化剤、分散剤等とともに、錠剤、丸薬、糖衣剤、軟カプセル、硬カプセル、溶液、懸濁液、乳剤、ゲル、シロップ、スラリー等の剤形に製剤化することができる。
　非経口投与用には、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を、薬学的に許容しうる溶媒、賦形剤、結合剤、安定化剤、分散剤等とともに、注射用溶液、懸濁液、乳剤、クリーム剤、軟膏剤、吸入剤、座剤等の剤形に製剤化することができる。注射用の処方においては、本発明の治療剤を水性溶液、好ましくはハンクス溶液、リンゲル溶液、または生理的食塩緩衝液等の生理学的に適合性の緩衝液中に溶解することができる。さらに、組成物は、油性または水性のベヒクル中で、懸濁液、溶液、または乳濁液等の形状をとることができる。あるいは、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を粉体の形態で製造し、使用前に滅菌水等を用いて水溶液または懸濁液を調製してもよい。吸入による投与用には、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を粉末化し、ラクトースまたはデンプン等の適当な基剤とともに粉末混合物とすることができる。坐剤処方は、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体をカカオバター等の慣用の坐剤基剤と混合することにより製造することができる。さらに、本発明の治療剤は、ポリマーマトリクス等に封入して、持続放出用製剤として処方することができる。
　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の投与量は、患者の症状、投与経路、体重、年令等によっても異なるが、例えば成人１日あたり１μｇ～５００ｍｇであるのが好ましい。また、他の抗がん剤の投与量は、それぞれの抗がん剤の有効量またはその有効量の０．０１～１倍までが好ましい。また、他のがん治療法、例えば放射線療法における放射線照射量を０．１～０．８倍に低減することができる。
　本発明の抗がん剤は、通常非経口投与経路で、例えば注射剤（皮下注、静注、筋注、腹腔内注など）、経皮、経粘膜、経鼻、経肺などで投与されるが、特に限定されず、経口投与でもよい。
　本発明の抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の抗がん効果の作用機序は完全には解明されていないが、腫瘍内および全身性の抗腫瘍免疫応答を活性化させ、腫瘍特異的細胞傷害性Ｔ細胞の誘導を含む抗腫瘍免疫反応を惹起・促進させることを主要なものとすると考えられる。
　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体は、上記のように標的細胞に対する免疫応答を活性化させ、細胞傷害性Ｔ細胞等を誘導して、標的細胞に対する免疫反応を惹起・促進させる。とりわけ抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を、標的細胞を傷害し得る薬剤又は治療法と組み合せれば、標的細胞に対する免疫反応を強力に誘導し得ることから、癌等の排除したい種々の病巣細胞に対する特異的免疫誘導薬として用いることができる。
　次に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれに何ら限定されるものではない。
実施例１（抗癌剤と抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体による相乗的な腫瘍縮小効果）
（方法）
　マウス大腸癌細胞ＭＣ－３８（マウス一匹あたり１×１０５個）をマウス背側皮下に摂取後、腫瘍径が長径５ｍｍ（２５～３０ｍｍ２）に増殖した時点（ｄａｙ１０）で抗癌剤、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を以下のプロトコールにてｄａｙ１０，ｄａｙ１３，ｄａｙ１６腹腔に内投与する。以下のプロトコールに沿って各々２回同様の検討を施行した。なお、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体は、ＭＢＬ社より商品化されている阻害抗体を用いた。
プロトコール１：
・Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ（ＧＥＭ）：４ｍｇ／ｋｇ
・Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ（ＧＥＭ）：１ｍｇ／ｋｇ
・抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体：１ｍｇ／ｋｇ
・Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ（ＧＥＭ）：４ｍｇ／ｋｇ＋抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体：１ｍｇ／ｋｇ
・Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ（ＧＥＭ）：１ｍｇ／ｋｇ＋抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体：１ｍｇ／ｋｇ
プロトコール２：
・ＣＰＴ－１１：１ｍｇ／ｋｇ
・５ＦＵ：０．１Ｍ
・抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体：１ｍｇ／ｋｇ
・ＣＰＴ－１１：１ｍｇ／ｋｇ＋抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体：１ｍｇ／ｋｇ
・５ＦＵ：０．１Ｍ＋抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体：１ｍｇ／ｋｇ
（結果）
　抗癌剤を単独投与した場合、投与後５～１０日は無治療群と比較して有意な腫瘍増殖抑制効果を示しているが、それ以降で無治療群と同等な確率で腫瘍増殖を認めた。以上の傾向はＧＥＭ、５ＦＵ、ＣＰＴ－１１いずれの抗癌剤投与にても同等であった。以上より、抗癌剤による制癌効果は一過性であり長期的な抗腫瘍効果は期待できないことが判明した（図１および２）。
　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体単独投与では、無治療群に比較して軽微な腫瘍増殖抑制効果を認めるが、抗癌剤投与時に比較してその効果は弱い（図１および２）。
　抗癌剤と抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の併用投与群では有意な強い腫瘍増殖抑制効果を認めた。この効果は抗癌剤単独投与群と異なり、治療終了後長期間を経過しても強力な腫瘍抑制効果を維持した。例えばゲムシタビン４ｍｇ／ｋｇと抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体併用群や５－ＦＵと抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体併用群では３５日後まで腫瘍はほとんど増殖しなかった。上記の結果は抗癌剤の種類に関わらず、同様であった（図１および２）。
　以上の結果より、抗体によるＭＦＧ－Ｅ８活性阻害が、各種抗癌剤による抗腫瘍効果を劇的に改善する事が明らかとなった。なお、この抗腫瘍効果は、抗体に限定せずにＭＦＧ－Ｅ８の機能を特異的に阻害する薬剤を使用しても同等の効果が期待できると想定される。
実施例２（腫瘍内リンパ球の免疫学的機能に関連する表面形質の検討）
（方法）
　上記と同様の大腸癌細胞ＭＣ３８皮下投与を用いた腫瘍モデルにおいて、各種治療プロトコールを施行し、その１週間後（ｄａｙ２３）の時点でマウスより腫瘍組織を採取した。これをコラゲナーゼＩにて処理後、Ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐを用いた比重勾配法にて、腫瘍組織内に存在するリンパ球を分離・採取した。この腫瘍内リンパ球の活性に関連する表面抗原についてフローサイトメトリーを用いて、下記の検討を行った。
・ＣＤ４陽性ヘルパーＴ細胞、ＣＤ８陽性細胞傷害性Ｔ細胞のメモリー活性状態（ＣＤ４４発現）
・Ｔ細胞活性抑制に重要なＣＤ１１ｂ・Ｇｒ－１陽性細胞（未熟ミエロイド細胞）の割合
・抗腫瘍Ｔ細胞活性増強に寄与する樹状細胞のマーカーであるＣＤ１１ｃ陽性細胞分画の割合
・樹状細胞の活性度の評価：ＣＤ１１ｂ、ＣＤ８６陽性分画の割合
（結果）
　代表例として５ＦＵ投与群のみ提示する。他の治療群でも同様の結論である。
　無治療群と比較して、抗癌剤単独投与群でのＴ細胞、未熟ミエロイド細胞、樹状細胞の比率に大きな変化を生じない（図３Ａおよび３Ｂ）。抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体単独投与群でも抗癌剤と同等である。
　抗癌剤と抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体とを併用した群では以下の変化が生じた。
　Ｔ細胞のメモリー活性（ＣＤ４４発現）が増加した（図３Ａ）。これは、腫瘍内に浸潤したＴ細胞の活性能が誘起されたことを示す。
　樹状細胞数の大幅な増加、活性の増強が生じた（図３Ａおよび３Ｂ）。これは、腫瘍内の樹状細胞の浸潤、活性が誘起されていることを示唆しており、特異的Ｔ細胞免疫応答を増強するのに好適な環境となっている。
　以上より、抗癌剤と抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体との併用により、腫瘍内の抗腫瘍免疫応答（標的とする腫瘍に対する特異的免疫応答）が増強されているものと考えられた。この腫瘍局所での環境が、併用群における腫瘍増殖抑制効果の大幅な増強に関与している可能性が示唆された。
実施例３（脾臓内リンパ球免疫活性能の評価）
　腫瘍局所だけではなく、全身の免疫応答の変化を検討するため、代表的な末梢リンパ系組織である脾臓細胞を用いて検討した。具体的には、腫瘍内リンパ球の免疫活性能の検討を行ったマウスより脾臓を摘出し、そこから脾細胞を分離して、主にＣＤ４陽性ヘルパーＴ細胞、ＣＤ８陽性細胞傷害性Ｔ細胞の活性について、フローサイトメトリー法にて以下のように検討した。
・メモリー活性状態（ＣＤ４４発現）
・サイトカイン産生プロフィール：Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｇａｍｍａ（ＩＦＮ－ｇ；免疫活性化のマーカー）
　　　　　　　　　　　　　　　：Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１０（ＩＬ－１０；免疫抑制のマーカー）
（結果）
　無治療群と比較して、抗癌剤単独投与群でのＴ細胞、未熟ミエロイド細胞、樹状細胞の比率については、大きな変化を生じない（図４Ａおよび４Ｂ）。
　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体単独投与群でも抗癌剤と同等である。
　抗癌剤と抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を併用した群では、ＣＤ４４発現およびＩＦＮγ産生の明らかな増強を認めた。ＩＬ－１０反応については無治療群、抗癌剤単独群と比較して有意差を認めなかった（図４Ａおよび４Ｂ）。
　以上より、抗癌剤と抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の併用により、腫瘍局所だけではなく全身性の抗腫瘍免疫応答が活性化していることが明らかとなった。
実施例４（抗ＭＦＧ－８抗体、抗癌剤併用による腫瘍特異的細胞傷害性Ｔ細胞誘導能についての検討）
（方法）
　無治療群、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体群、抗癌剤群、および抗癌剤と抗体併用群で治療した担癌マウスよりリンパ節細胞を分離して、放射線処理（２００Ｇｙ）したＭＣ３８大腸癌細胞と１０：１の割合で共培養を施行した。５日後にリンパ節細胞と５１Ｃｒで標識した標的腫瘍細胞を４時間混合培養したあと、γシンチレーターにて５１Ｃｒの上清への放出量を計測することにより、腫瘍細胞傷害活性を計測した。
（結果）
　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体治療群由来のリンパ節細胞によりＭＣ３８に対する細胞傷害活性を認めた。さらに抗癌剤と抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体併用治療群由来のリンパ節細胞では、ＭＣ３８特異的細胞傷害の増強作用を認めた。それに対し、Ｂ１６悪性黒色腫細胞への傷害活性は殆ど誘起されなかった（図５）。
　以上より、抗癌剤と抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の併用により、腫瘍特異的細胞障害性リンパ球の誘導能増強を認めることが明らかとなった。
実施例５（ＭＦＧ－Ｅ８による樹状細胞活性修飾を介した抗原特異的Ｔ細胞活性増強のｉｎ　ｖｉｔｒｏでの検討）
（方法）
　Ｉｎ　ｖｉｖｏで認められた抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体、抗癌剤併用による樹状細胞、Ｔ細胞活性のメカニズムについてｉｎ　ｖｉｔｒｏでの混合培養の系にて詳細に検討した。
　具体的にはモデル抗原としてＯｖａｌｂｕｍｉｎ（ＯＶＡ）を利用するため、ＤＯ１１．１０（ＭＨＣ　ｃｌａｓｓ　ＩＩ拘束性ＯＶＡ抗原トランスジェニックマウス）より骨髄細胞を採取し、顆粒球単球コロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）により樹状細胞を分化誘導する。誘導開始後Ｄａｙ７でＭＦＧ－Ｅ８組換え蛋白（１００μｇ／ｍＬ）ないし抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体（２０μｇ／ｍＬ）で処理、さらにｄａｙ８にてＭＨＣ　ｃｌａｓｓ　ＩＩＯＶＡ拘束性ＯＶＡ　ｐｅｐｔｉｄｅ（５ｍｇ／ｍＬ）あるいは陰性コントロールｐｅｐｔｉｄｅ（ＨＳＡ）を６時間パルスした。それらを、Ｓｙｎｇｅｎｅｉｃ（Ｂａｌｂ／ｃ）マウス由来のｎａiｖｅ　ＣＤ４＋陽性Ｔ細胞と、樹状細胞とＣＤ４＋Ｔ細胞の比が１：１０の割合となるように混和し、抗ＣＤ３抗体（０．１μｇ／ｍＬ）存在下にて混合培養した。７２時間後にＴ細胞活性状態をフローサイトメトリー法によってＩＦＮ－ｇおよびＩＬ－１０の細胞内発現を測定することにより検討した。
（結果）
　無処理樹状細胞：ＯＶＡ特異的な樹状細胞によるＴ細胞活性を認めた（ＩＦＮｇ，ＩＬ－１０供に増加しているため免疫活性、抑制機能双方を活性している状態と考えられる）。
　ＭＦＧ－Ｅ８を前刺激した樹状細胞：コントロール群に比して、ＯＶＡ特異的なＩＦＮｇ産生低下、ＩＬ－１０産生増強を認めた（抗原特異的免疫応答の抑制が認められた）。
　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体にて樹状細胞のＭＦＧ－Ｅ８を阻害した場合、コントロール群に比して、ＯＶＡ特異的なＩＦＮｇ産生能の増強、ＩＬ－１０産生の低下を認めた（抗原特異的免疫応答の活性化が認められた）。
　以上よりＭＦＧ－Ｅ８は樹状細胞に直接作用し、その免疫活性機能を負に制御すること、抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体による中和により抗原特異的に樹状細胞による免疫応答を強力に活性化することが明らかになった。この抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の機能は、ｐｅｐｔｉｄｅをパルスした樹状細胞においても同様に見られたので、樹状細胞の抗原提示以外の機能である共刺激分子の制御を介したものであると考えられた（図６）。
実施例６（抗癌剤による腫瘍細胞からのＭＦＧ－Ｅ８発現（分泌）誘導の検討）
（方法）
　抗癌剤によるＭＦＧ－Ｅ８阻害の感受性増強を検討するため、ＭＣ３８大腸癌細胞、正常繊維芽細胞（ＮＩＨ３Ｔ３，Ｐｒｉｍａｒｙ　Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ）に各種抗癌剤（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎｅ、ＧＥＭ，５－ＦＵ，ＣＰＴ－１１等）投与後２４時間後におけるＭＦＧ－Ｅ８発現を細胞内フローサイトメトリー、細胞培養上清を用いＥＬＩＳＡ法にて検討した。
（結果）
　各種抗癌剤投与により、ＭＣ３８におけるＭＦＧ－Ｅ８産生能は有意に増強した。これに対してＮＩＨ３Ｔ３、Ｐｒｉｍａｒｙ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ非癌細胞でのＭＦＧ－Ｅ８発現は抗癌剤による増強効果を認めなかった（図７Ａ）。またＢ１６メラノーマ細胞においても抗癌剤によるＭＦＧ－Ｅ８産生誘導を認めた（図７Ｂ）。
　以上の結果より、抗癌剤により腫瘍細胞のＭＦＧ－Ｅ８産生が誘導されることが判明した。これまでに明らかとなったＭＦＧ－Ｅ８の機能を考慮すると、抗癌剤に対する治療抵抗性獲得の機序の一つとなっている可能性が示唆された。
実施例７（抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体が抗癌剤による腫瘍細胞死誘導に与える影響についての検討）
（方法）
　ＭＣ３８大腸癌細胞株に各種抗癌剤（ＧＥＭ：１Ｍ，ＣＰＴ－１１：０．５Ｍ，５ＦＵ：１Ｍ）投与する際に抗ＭＦＧ－Ｅ８阻害抗体（２０μｇ／ｍＬ）あるいは陰性コントロールとしてＩｇＧ抗体を同時に添加し、無血清下で４８時間培養した後の細胞死比率をフローサイトメトリー法にて定量的に検討した。
（結果）
　抗癌剤非添加群においても抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体添加にて有意の腫瘍細胞死の誘導を認めたが、抗癌剤と比してその効果は軽微である。
　抗癌剤投与群については、コントロール群と比較して抗体併用群で、有意の腫瘍細胞死増強を認めた。この効果は抗癌剤の種類に関わりなく一定であった。
　以上よりＭＦＧ－Ｅ８阻害による抗腫瘍効果には、免疫能増強による間接的な腫瘍退縮に加え、直接的な抗癌剤による腫瘍細胞アポトーシス誘導増強作用が関与している可能性が示された（図８）。

Claims (21)

  1. 　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を有効成分とする抗がん剤。
  2. 　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と他の抗がん剤とを組み合せてなる抗がん剤。
  3. 　他の抗がん剤が、腫瘍細胞傷害性抗がん剤である請求項２記載の抗がん剤。
  4. 　他の抗がん剤が、アルキル化剤、代謝拮抗剤、微小管阻害剤、抗生物質抗がん剤、トポイソメラーゼ阻害剤、白金製剤又は分子標的薬である請求項２又は３記載の抗がん剤。
  5. 　　他の抗がん剤が、ゲムシタビン、５－ＦＵ、ＣＰＴ－１１、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、ダカルバジン、ドキソルビシン、べバシズマブ、抗血管内皮増殖因子受容体２阻害抗体、上皮性増殖因子チロシンキナーゼ阻害剤である請求項２～４のいずれか１項記載の抗がん剤。
  6. 　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を含有し、他のがん治療法と組み合せて使用するための抗がん剤。
  7. 　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体を有効成分とし、標的細胞を傷害し得る薬剤又は治療法と組み合せて使用するための特異的免疫誘導薬。
  8. 　抗がん剤製造のための抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の使用。
  9. 　他の抗がん剤と組み合せてなる抗がん剤製造のための抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の使用。
  10. 　他の抗がん剤が、腫瘍細胞傷害性抗がん剤である請求項９記載の使用。
  11. 　他の抗がん剤が、アルキル化剤、代謝拮抗剤、微小管阻害剤、抗生物質抗がん剤、トポイソメラーゼ阻害剤、白金製剤又は分子標的薬である請求項９又は１０記載の使用。
  12. 　他の抗がん剤が、ゲムシタビン、５－ＦＵ、ＣＰＴ－１１、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、ダカルバジン、ドキソルビシン、べバシズマブ、抗血管内皮増殖因子受容体２阻害抗体、上皮性増殖因子チロシンキナーゼ阻害剤である請求項９～１１のいずれか１項記載の使用。
  13. 　他のがん治療法と組み合せて使用するための抗がん剤製造のための抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の使用。
  14. 　標的細胞を傷害し得る薬剤又は治療法と組み合せて使用するための特異的免疫誘導薬製造のための抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の使用。
  15. 　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の有効量を投与することを特徴とするがんの治療法。
  16. 　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と他の抗がん剤とを組み合せて投与することを特徴とするがんの治療法。
  17. 　他の抗がん剤が、腫瘍細胞傷害性抗がん剤である請求項１６記載の治療法。
  18. 　他の抗がん剤が、アルキル化剤、代謝拮抗剤、微小管阻害剤、抗生物質抗がん剤、トポイソメラーゼ阻害剤、白金製剤又は分子標的薬である請求項１６又は１７記載の治療法。
  19. 　他の抗がん剤が、ゲムシタビン、５－ＦＵ、ＣＰＴ－１１、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、ダカルバジン、ドキソルビシン、べバシズマブ、抗血管内皮増殖因子受容体２阻害抗体、上皮性増殖因子チロシンキナーゼ阻害剤である請求項１６又は１７記載の治療法。
  20. 　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体の投与と、他のがん治療法とを組み合せることを特徴とするがんの治療法。
  21. 　抗ＭＦＧ－Ｅ８抗体と、標的細胞を傷害し得る薬剤又は治療法とを組み合せることを特徴とする特異的免疫誘導方法。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPWO2020075823A1 (ja) * 2018-10-10 2021-06-03 国立大学法人鳥取大学 微小核細胞融合法による目的ｄｎａを含む動物細胞の作製方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008503480A (ja) * 2004-06-18 2008-02-07 ジェネンテック・インコーポレーテッド 腫瘍の治療
WO2008043018A1 (en) * 2006-10-04 2008-04-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Tumor immunity

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008503480A (ja) * 2004-06-18 2008-02-07 ジェネンテック・インコーポレーテッド 腫瘍の治療
WO2008043018A1 (en) * 2006-10-04 2008-04-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Tumor immunity

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPWO2020075823A1 (ja) * 2018-10-10 2021-06-03 国立大学法人鳥取大学 微小核細胞融合法による目的ｄｎａを含む動物細胞の作製方法
JP7010442B2 (ja) 2018-10-10 2022-01-26 国立大学法人鳥取大学 微小核細胞融合法による目的ｄｎａを含む動物細胞の作製方法

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