WO2009143715A1 - 类维甲酸衍生物及其药物组合物与用途 - Google Patents

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WO2009143715A1
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陈飞虎
石静波
汪渊
李俊
沈娟
阮晶晶
吴繁荣
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安徽医科大学
安徽省新星药物开发有限责任公司
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Definitions

  • the present invention relates to a novel retinoid derivative and a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutical composition prepared therefrom, and to a retinoic acid derivative and a pharmaceutically acceptable salt thereof Preparation methods and uses belong to the fields of chemistry and medicine. Background technique
  • Cancer is a serious threat to human life. According to the World Health Organization, about 5 million people die of cancer every year in the world, so the prevention and treatment of cancer is very difficult. Medication is one of the three major therapies for cancer treatment.
  • Traditional chemical drugs for the treatment of malignant tumors mainly aim at killing tumor cells directly or indirectly, and have a certain degree of lethality to normal cells. The toxic and side effects are obvious, and the presence of drug resistance of tumor cells greatly limits the efficacy of such cytotoxic drugs. And application. Since Friend discovered in 1971 that mouse erythroleukemia cells can be induced to differentiate into hemoglobin by dimethyl sulfoxide, people began to realize that malignant cells can be "reversed” by using differentiation inducers to return to normal cells, causing institutions to Interest and attention.
  • Induction of differentiation refers to a phenomenon in which malignant tumor cells are reversed in the direction of normal or near normal cells under the action of an inducer of differentiation in vitro and in vivo.
  • the focus is not on killing the tumor directly, but on the tumor cells, "returning the evil to the right", and finally curing the tumor.
  • the discovery of effective differentiation inducers will change the previous treatment mode of killing tumor cells, and form new therapies that control and adjust their biological behaviors, and finally achieve the cure of tumors.
  • scientists have achieved fruitful results in the field of drug research for inducing cell differentiation of malignant tumors.
  • differentiation inducers are oncology drugs and their pharmacology. Research has opened up a broad path.
  • Retinoic acid and its analogues are a class of vitamin A derivatives, including retinoic acid, retinoic acid, retinoic ester and natural vitamin A.
  • Retinoic acid compounds are widely used in the treatment of a variety of skin diseases such as keratotic skin diseases, photoaging skin diseases, etc., but their most attractive role is to prevent and treat some malignant tumors, including breast cancer, skin cancer, cervical cancer. , leukemia, etc.
  • researchers have conducted extensive and in-depth research on all-trans retinoic acid and 9-cis retinoic acid in this class of compounds.
  • All-trans retinoic acid (ATRA, retinoic acid) Fenretinide fen 3 ⁇ 4 ⁇ A amine
  • adverse reactions caused by ATRA occur frequently.
  • the main adverse reactions are as follows: 1 skin and mucous membrane damage; 2 adverse reactions of the digestive system such as nausea, vomiting, anorexia, upper abdominal fullness, etc.
  • RA-RS 6-dimensional formic acid syndrome
  • RA-RS is the main risk of ATRA treatment of APL, Mainly manifested as fever and dyspnea, other symptoms and signs including weight gain, distal extremity edema, pleural effusion or pericardial effusion and paroxysmal hypotension, chest interstitial infiltration of pulmonary interstitial, in addition, ATRA can also cause carpal tunnel syndrome
  • Adverse reactions such as severe heart damage, hyperlipidemia and hyperammonemia [Zhao Huanyu; adverse reactions of all-trans retinoic acid Ying; Chinese Journal of Pharmaceuticals 1998 33 (7):
  • retinoic acid ester RI
  • retinoic acid RII
  • retinoic acid esters RI
  • retinoic acid and retinoic acid II
  • Low toxicity indicating its suitability for the treatment of precancerous lesions (Acta Pharmacola 17: 333-337 (1982)).
  • the invention patent No. 97116602.1 discloses a retinoyl coumarin compound, a process for the preparation thereof and a pharmaceutical composition containing the same.
  • retinoids in foreign countries, such as isotretinoin and acitretin, which have been marketed as dermatological drugs.
  • the structural modification of the terminal polar group of retinoic acid mainly focuses on the oxylation of the terminal carboxyl group and the acylation of nitrogen.
  • Kyoko Nakagawa-Goto et al. used retinoic acid and taxane condensation products to enhance drug efficacy (Kyoko Nakagawa-Goto, Koj i Yamada, et al, Antitumor agents. 258.
  • U.S. Patent No. 4,190,594 discloses the esterification and amidation of a series of retinoic acid for the prevention of damage caused by ultraviolet radiation, wherein the compound fenretinide (Fenretinid e , 4-HPR) is used for the treatment of various skin diseases. At the same time, it is currently being evaluated as a drug for the prevention and treatment of multiple tumors (Soo-Jong UM, a Youn-Ja KWON, et al, Synthesis and Biological Activity of Novel Retinamide and Retinoate Derivatives, Chem. Pharm. Bull. 52 ( 5) 501-506 (2004). Fenretinide (4-HPR) is a selective agonist of RAR- ⁇ and RAR- ⁇ .
  • fenretinide is different from traditional retinoids. Its differentiation-inducing effect is weak, and it promotes tumor cell apoptosis, and its toxicity is much lower than other retinoids. It can be used for a long time, and the incidence of drug resistance is low. It can be used alone or in combination with other chemotherapy drugs to fight tumors. In recent years, some foreign studies have shown that fenretinide has a direct inhibitory effect on a variety of solid tumors, and has entered clinical trials, but its anti-tumor mechanism is not fully understood. The possible mechanisms of A-amine include: inhibiting tumor cell proliferation, promoting differentiation, triggering apoptosis, and affecting other signaling pathways.
  • the biochemical pathway of fenretinide-induced apoptosis is very complicated, and it has been reported that both retinoic acid RA receptor-dependent and The retinoic acid RA receptor is non-dependent, and the latter includes the promotion of reactive oxygen species (ROS) and the production of neuropterin. In addition, it also inhibits angiogenesis, inhibits HIV, resists rheumatism, and treats psoriasis. Vitamin A amine has become one of the hotspots of current research. However, the main disadvantages of 4-HPR in clinical application are low bioavailability. Studies have shown that when the patient takes OOmg/day, the blood plasma concentration is low.
  • the effective concentration required for cell apoptosis in the body needs 101 ⁇ , so it is necessary to increase the dose or synthesize a derivative with better clinical effects.
  • Some of the recently synthesized derivatives include aniline structure for hydroxylation. , carboxylation, or methoxy substitution, etc., but some of these derivatives show better biological activity.
  • Soo-Jong UM et al. modified the structure of 4-HPR to obtain one
  • the series of compounds have high cytotoxicity and better water solubility.
  • the main method is to connect sodium butyrate with anticancer activity to retinoic acid via p-aminophenol to form retinoic acid aminophenol butyrate (4-BPRE).
  • Molecular pharmacology experiments showed that the compound has both dual anti-tumor activity of sodium butyrate and retinoic acid (Um SJ , won YJ , Han HS , et al.
  • the compound of the present invention has a retinoic acid derivative represented by the following formula (I) -
  • R3 ⁇ ! 7 are the same or different from each other, and are each independently selected from the group consisting of hydrogen, nitro, halogen, amino, acyl, sulfonyl, carboxyl, carboxylate, amide, nitrile, hydroxy, carbamoyl, thioureido, amino Methyl, cyano, substituted or unsubstituted lower fluorenyl, substituted or unsubstituted lower alkenyl, substituted or unsubstituted lower alkynyl, substituted or unsubstituted lower decyloxy, substituted or unsubstituted lower alkane Amino, substituted or unsubstituted lower fluorenyl, substituted or unsubstituted lower sulfonyl, substituted or unsubstituted lower oxime amide, substituted or unsubstituted lower alienoyloxy, substituted or unsubstituted lower aliphatic acet
  • R 3 ' ⁇ ! u ' are the same or different from each other, and are each independently selected from the group consisting of hydrogen, nitro, halogen, amino, acyl, sulfonyl, carboxy, carboxylate, amide, nitrile, hydroxy, carbamoyl, thiourea, Aminomethyl, cyano, substituted or unsubstituted lower fluorenyl, substituted or unsubstituted lower alkenyl, substituted or unsubstituted lower alkynyl, substituted or unsubstituted lower decyloxy, substituted or unsubstituted lower Amidino, substituted or unsubstituted lower fluorenyl, substituted or unsubstituted lower sulfonyl, substituted or unsubstituted lower oxime amide, substituted or unsubstituted lower alienoyloxy, substituted or unsubstituted lower aliphatic Alkyny
  • R9 to R13 are the same or different from each other, and are each independently selected from the group consisting of haloalkyl, haloalkoxy, hydrogen, nitro, halogen, amino, acyl, sulfonyl, carboxyl, carboxylate, amide, nitrile, Hydroxy, carbamoyl, thioureido, aminomethyl, cyano, substituted or unsubstituted lower fluorenyl, substituted or unsubstituted lower alkenyl, substituted or unsubstituted lower alkynyl, substituted or unsubstituted lower Alkoxy, substituted or unsubstituted lower alkylamino, substituted or unsubstituted lower fluorenyl, substituted or unsubstituted lower sulfonyl, substituted or unsubstituted lower alkanoamide, substituted or unsubstituted lower aliphatic Oxyl, substituted or unsubstitute
  • Z is 0, S or NR14, wherein R14 is selected from hydrogen, substituted or unsubstituted lower fluorenyl, substituted or unsubstituted lower alkenyl, substituted or unsubstituted lower alkynyl, substituted or unsubstituted alicyclic fluorenyl a substituted or unsubstituted heterocyclic fluorenyl group, a substituted or unsubstituted aryl group, a substituted or unsubstituted heteroaryl group;
  • the conditions are: R9 ⁇ ! At least one of 13 is a halogenated fluorenyl group or a halogenated decyloxy group.
  • the retinoic acid derivative described above wherein R3 and R7 are the same or different, are respectively substituted or unsubstituted lower fluorenyl groups, and R4 and R6 are the same or different and are respectively selected from hydrogen, substituted or unsubstituted.
  • the above-mentioned retinoic acid derivative wherein, when R3, R7, and R4 are a methyl group, R5 is a methoxy group, and R6 is hydrogen.
  • the retinoic acid derivative described above wherein R 3 ' and R 4 ' are the same or different, respectively, are substituted or unsubstituted lower fluorenyl groups, and R 5 ' ⁇ R I ( )' are the same or different, respectively Selected from hydrogen, substituted or unsubstituted lower fluorenyl, substituted or unsubstituted lower decyloxy, substituted or unsubstituted lower aliphatic oxy, nitro, amino, lower alkyl substituted amino, substituted or unsubstituted a nitrogen heterocyclic group, R8' is hydrogen, a substituted or unsubstituted lower alkyl group, a substituted or unsubstituted lower alkenyl group, a substituted or unsubstituted lower alkoxy group, and said lower level means 1 to 5 carbons Atom, when substituted, is selected from nitro, halo, amino, acyl, sulfonyl, carboxy,
  • the retinoic acid derivative described above is most preferable, wherein R 3 ' and R 4 ' are each a methyl group, R 5 ' to R 10 ' are both hydrogen, and Ru ' is a methyl group.
  • the retinoic acid derivative described above wherein R9, R10, R1, R12 and R13 are the same or different, are each independently selected from the group consisting of trifluoromethyl, trifluoromethoxy, hydrogen, halogen, hydroxy, and substituted.
  • lower fluorenyl substituted or unsubstituted lower alkoxy, substituted or unsubstituted lower aliphatic alkenyloxy, carboxylic acid, carboxylic acid ester, amide, nitrile group, nitro group, amino group, substituted or unsubstituted
  • the lower fluorenyl group is substituted with an amino group or a nitrogen heterocyclic group, provided that one of R9, RI O, R1 K R12, and R13 is a trifluoromethyl group or a trifluoromethoxy group.
  • halogen includes fluorine, chlorine, bromine and iodine.
  • the "lower” means having 1 to 8 carbon atoms, preferably 1 to 5 carbon atoms.
  • the group may or may not contain a substituent.
  • the substituent is not particularly limited and may contain one or more substituents, and preferably the substituent is selected from the group consisting of a nitro group, a halogen, an amino group, an acyl group, a sulfonyl group, a carboxyl group, a carboxylate group, an amide group, a nitrile group, Hydroxy, carbamoyl, thioureido, aminomethyl or cyano.
  • the compound of formula (I) may contain a chiral center.
  • a chiral center When a chiral center is present in a compound of formula (I), it may exist in enantiomeric form.
  • the pure optical isomers, enantiomeric mixtures, diastereomeric mixtures, racemic mixtures and pharmaceutically acceptable salts, solvates thereof and the like of the structures of the formula (I) are all according to the invention. range.
  • the compounds of the invention may also exist in a variety of polymorphic forms, such as amorphous forms and crystalline forms. All crystal forms of the compounds of the invention are included within the scope of the invention.
  • the present invention relates to a retinoid derivative as described below, which is:
  • the retinoic acid derivative of the formula (I) according to the present invention can be prepared by using the following steps: retinoic acid or etretin (Etret in):
  • A, retinoic acid or altidine is reacted with phosphorus trichloride, and then reacted with a corresponding aromatic amine derivative or phenol derivative;
  • the retinoic acid derivative of the present invention is a new compound which has not been reported, and many methods for synthesizing the analogs thereof have been reported.
  • the present invention synthesizes the following compounds (formula c-01 to formula c-15, formula d- 01 to formula d-15), which are all specific compounds of the present invention, and are prepared as follows:
  • the novel retinoic acid derivatives described above may be in their neutral form, and when they are basic, they may also be combined with inorganic acids or organic acids to form corresponding salts, which are useful for use in medicines.
  • Acids include: hydrochloric acid, hydrogen bromide, naphthalene disulfonic acid (1, 5), phosphoric acid, nitric acid, sulfuric acid, oxalic acid, tartaric acid, lactic acid, salicylic acid, benzoic acid, formic acid, acetic acid, propionic acid, valeric acid, Ethylacetic acid, malonic acid, succinic acid, fumaric acid, succinic acid, pimelic acid, adipic acid, maleic acid, malic acid, sulfamic acid, phenylpropionic acid, gluconic acid, ascorbic acid, isoniazid Acid, methanesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, citric acid, and amino acids.
  • the compound may form a salt with a plurality of moles of acid. These multiple moles of acid may be either single or combined, which is mainly determined according to the need of a corresponding solvent or dilution, and these added salts may be Pass Conversion to a neutral form by methods such as anion exchange.
  • a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of the above-mentioned retinoic acid derivative or an isomer thereof, an enantiomer, a racemate, a mixture of diastereomers, A racemic mixture, solvate, polymorph or pharmaceutically acceptable salt is used as an active ingredient, and a pharmaceutically acceptable adjuvant.
  • the pharmaceutically acceptable excipients include corresponding pharmaceutically acceptable excipients, binders, sustained release agents, stabilizers, perfumes, flavoring agents, pigments; the dosage forms are tablets or capsules, Or injection, lyophilized powder injection.
  • Another object of the invention is to provide the use of the compounds.
  • tumors of the blood system such as acute leukemia, chronic leukemia, multiple myeloma, lymphoma, etc.
  • solid tumors such as liver cancer, rectal cancer, breast cancer, esophagus Cancer, etc.
  • skin diseases such as psorias
  • Figure 1 Morphological changes in A549 cells (dosing 10ug/ml for three days)
  • CONTROL B DMSO
  • CONTROL B DMSO
  • Blank control group K562 cells B 6a - 02 5 ( ⁇ g / ml)
  • the operation method was the same as in Example 2.
  • the p-trifluoromethylphenol was changed to m-trifluoromethylphenol, and the column chromatography (mobile phase: petroleum ether 60-90 ° C) gave a yellow oil 0.21 g.
  • the operation method was the same as in Example 2.
  • the p-trifluoromethylphenol was changed to o-trifluoromethylphenol, column chromatography (mobile phase: petroleum ether 60-90 ° C), and recrystallized from ethanol to obtain 0.18 g of a yellow solid, mp93 .8-95°C
  • Example 14 (all-trans)- 9-(4-methoxy-2,3,6-trimethylphenyl)-3,7-dimethyl-2,4,6,8-nonanetetraene Acid 3-trifluoromethylphenyl ester (2b-01)
  • Example 15 The same procedure as in Example 15 was carried out from ethyl acetate to give yd.
  • Example 25 (all-trans)- 9-(4-methoxy-2,3,6-trimethylphenyl)-3,7-dimethyl-2,4,6, 8-decylenoic acid (4-trifluoromethoxyphenyl)-amide (6b-03)
  • Example 26 (all-trans)- 9-(4-methoxy-2,3,6-trimethylphenyl)-3,7-dimethyl-2,4,6, 8-decanoic acid (4-light-based-3-trifluoromethylphenyl)-amide (7b-01)
  • Example 28 Determination of biological activity of lung cancer cells A549, HepG2
  • the logarithmic growth phase cells were seeded in a 96-well culture plate at a concentration of 5 ⁇ 10 7 / L, 200 ⁇ l / hole, to be attached, and the next day, the stock solution was added to the culture solution, and the concentration was divided into lug/ml, 5 ug/mK. 10 ug/ml and blank control group, cell control group, solvent control group (1% DMSO and absolute ethanol), 17 groups, after incubation for 3 days, add 20 ⁇ l / hole MTT (5g / L) for 37h at 37 °C.
  • Inhibition rate% (Control hole OD 57 Q-test well OD 57G ) / control well OD 57Q x 100%. repeat three times. In the second experiment, the highest concentration ⁇ / L was cultured for 1, 2, 3, and 7 days, and repeated three times.
  • A549 cells in logarithmic growth phase were collected, adjusted to a cell density of 8 x 10 7 / L, inoculated in a six-well plate, cultured in 37 ⁇ , 5% C0 2 incubator. After the cells were attached, the culture solution was discarded, and the culture medium containing the corresponding concentration of the drug was added, and 10 ⁇ ⁇ I ml of the drug-added group, 10 ⁇ ⁇ I ml of the fenretinide group, the cell control group, and the solvent control group (1%.
  • DMSO and absolute ethanol 11 groups 3d after routine digestion and collection of each group of cells and blown into a single cell suspension, washed twice in cold PBS, resuspended in lOO ⁇ PBS, fixed according to Coulter DNA detection kit The membrane damper and PI dye solution were tested at room temperature in the dark for 30 min, and 10 000 cells were detected in each specimen. The count was repeated 3 times. The data were analyzed by Analysis software for the ratio of Go-G ⁇ S and G 2 -M phases. And the proportion of apoptotic cells.
  • A549 cells were randomly divided into 6 kinds of 10 ⁇ ⁇ I ml plus drug group and cell control group, solvent control group (DMSO, ethanol) and 10 g / ml fenretinide control group (total 1 1 group).
  • the control group and the drug-added group were cultured for three days.
  • Three tubes of the cell culture medium of the drug-added group and the control group were collected. After the culture medium was centrifuged at 4 000 r/min for 5 min, the supernatant was taken, and the enzyme kinetic method and CEA assay reagent were used. The box was tested for CEA content.
  • Table 8 shows the effect of cell cycle and apoptosis on A549 cells
  • Table 9 shows the effect of cell cycle and apoptosis on HepG2 cells
  • ⁇ 562 cell line purchased from the Shanghai Cell Bank of the Chinese Academy of Sciences.
  • the ⁇ 4 cell line was given to the Laboratory of Blood Medicine of the First affiliated Hospital of Anhui Medical University.
  • Fenvirin a retinoic acid derivative: synthesized by the laboratory itself.
  • Fetal bovine serum Hangzhou Sijiqing Biological Engineering Materials Co., Ltd.
  • RPM1 1640 culture powder Gibco. Swiss-style staining solution: Hongci Medical Laboratory.
  • Fluorescently labeled mAb including anti-human CDllb/PE, antibodies, and corresponding isotype control antibodies (IgGl/PE, all purchased from Coulter- Immunotech (Paris, France)
  • Ultra-clean platform Suzhou purification SW-CJ-1F single-sided double-sided clean bench
  • the retinoic acid derivative and fenretinide were prepared in a concentration of 10 mg/mL in absolute ethanol, and stored at -20 ° C in the dark.
  • NB4 cells and K562 cells were seeded at a starting concentration of 2 X 107 ml in RPMI 1640 containing 10% fetal bovine serum (FBS), 100 u/ml penicillin, 100 Lg/ml streptomycin and 2 sleeping ol/L glutamine ammonia.
  • FBS fetal bovine serum
  • the culture was suspended in suspension (37 ° C, 5 % CO 2 ). Change the fluid every 2-3 days.
  • the above cells were collected by a retinoic acid derivative and fenretinide (5 mg/ml) for 72 hours, and after centrifugation, the cells were smeared, naturally dried, and stained with Swiss blue. Observation of cell morphology under oil microscope
  • lxlO 6 cells were washed twice with PBS. Fluorescently labeled anti-human CDl lb/PE antibody and corresponding isotype control antibody were added. The reaction was carried out for 30 minutes at room temperature. Wash once with PBS. Detected by flow cytometry.

Description

类维甲酸衍生物及其药物组合物与用途 技术领域
本发明涉及一种新的类维甲酸衍生物及其药学上可接受的盐， 以及由其制成的药物组 合物， 本发明还涉及所述维甲酸衍生物及其药学上可接受的盐的制备方法和用途， 属于化 学和医药领域。 背景技术
癌症严重威胁着人类的生命。据世界卫生组织统计， 全世界每年死于癌症的患者约 500 万， 因此癌症的预防与治疗任务十分艰巨。 药物治疗是癌症治疗的三大疗法之一。 传统化 学药物治疗恶性肿瘤主要以直接或间接杀伤肿瘤细胞为目的， 对正常细胞也有一定程度的 杀伤力， 毒副作用明显， 加之肿瘤细胞耐药性的存在， 大大限制了该类细胞毒药物的疗效 和应用。 自从 1971年 Friend等发现小鼠红白血病细胞可以贝二甲亚砜诱导分化合成血红蛋 白以来， 人们开始逐渐认识到恶性细胞可以应用分化诱导剂使之 "逆转"， 向正常细胞回归， 引起学者们的兴趣和重视。 随着肿瘤发病学的深入研究， 诱导分化疗法成为肿瘤治疗学的 新突破。 诱导分化 (induction of differentiation)是指恶性肿瘤细胞在体内外分化诱导剂作用 下， 向正常或接近正常细胞方向分化逆转的现象。 其着重点不在于直接杀灭肿瘤而是将肿 瘤细胞"改邪归正"， 最终治愈肿瘤。 有效的分化诱导剂的发现将改变以往杀伤肿瘤细胞为 主的治疗模式， 而形成以控制、 调整其生物学行为为主的新疗法， 最终实现肿瘤的治愈。 尤其是近 20多年来， 随着肿瘤分子生物学及其技术的长足发展， 科学家在诱导恶性肿瘤细 胞分化的药物研究领域取得了丰硕的成果， 目前已发现具有分化作用的化合物达百种以上， 其中相当一部分已进入 I期、 II期临床试验， 少数如维甲酸己作为分化诱导剂用于临床肿瘤 治疗和预防， 显示出一定疗效， 因此分化诱导剂的研究和应用为肿瘤药物及其药理学研究 开辟了一条广阔的途径。
维甲酸及其类似物 (retinoids) 是一类维生素 A衍生物,包括维甲酸、 维胺酸、 维胺酯和 天然维生素 A等,约有 4000多种。 维甲酸类化合物广泛应用于治疗多种皮肤病如角化性皮 肤病、 光老化皮肤病等,但其最引人注目的作用是预防及治疗一些恶性肿瘤,包括乳腺癌、 皮 肤癌、 宫颈癌、 白血病等。 科研人员对该类化合物中的全反式维甲酸和 9-顺式维甲酸进行 了广泛、 深入的研究。 它们他们通过参与调节细胞的增殖和分化， 具有抗角化、 抗增生、 促进表皮细胞正常分化的作用， 并能通过抑制鸟氨酸脱氢酶的活性干扰肿瘤的发生， 可直 接抑制皮脂合成和皮脂腺细胞的增殖， 以减少皮脂分泌。 【由蕾， 严煌林， 维甲酸类化合物 及其受体与银屑病研究进展； 医学综述 2007 ， 13 ( 06)， 466— 467】。 自 1988年， 上海 维甲酸协作组首先使用全反式维甲酸 (all-trans retinoic acid, ATRA)诱导分化治疗人急性早 幼粒细胞白血病， 获得显著疗效， 五年临床总结显示完全缓解率为 86 %。 目前,全反式维甲 酸已经用于急性早幼粒细胞白血病、 口腔白斑等恶性肿瘤的治疗， 已成为治疗白血病的首 选药物之一【 EvansT R ,K ayeS B.Br J Cancer,1999，80 (l-2): l-9】。 9-顺式维甲酸的疗效和全 反式维甲酸相当而副作用更小,很有希望成为临床药物. 常见的维甲酸类化合物结构式分别
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All-trans retinoic acid (ATRA,维甲酸） Fenretinide 芬 ¾§A胺
但是维甲酸随着其应用日益广泛， ATRA 引起的不良反应时有发生,主要不良反应如下： 1皮肤、 粘膜损害； 2消化系统的不良反应如恶心、 呕吐、 纳差、 上腹饱胀等消化道反应发 生率较高； 3神经系统的不良反应， 在 ATRA治疗过程中,患者常出现头痛、 视神经乳头水 肿、 脑脊液压力升高； 4骨骼、 关节、 肌肉不良反应， ATRA引起的骨骼、 关节、 肌肉疼痛 较为常见； 5白细胞计数增多， 国外报道, ATRA治疗 APL过程中白细胞增多症发生率高达 30%左右； 6维甲酸综合征（RA-RS), RA-RS是 ATRA治疗 APL的主要危险,主要表现为发 热及呼吸困难，其它症状和体征包括体重增加、 肢体远端水肿、 胸水或心包积液以及发作性 低血压,胸片见肺间质浸润,此外, ATRA还可引起腕管综合征、严重的心脏损害、高血脂和高 血胺血症等不良反应 【赵环宇； 全反式维甲酸的不良反应； 中国药学杂志 1998 33 ( 7) :440-441 ], 大大限制了药物的应用， 同时快速发展的耐药与高复发率仍是影响长期疗 效的两大障碍， 随着临床进一步应用， 发现其可形成耐药性并使复发患者难以再次获得缓 解。 因此需要改进药物的疗效和拓宽药物的临床应用范围， 同时降低药物的不良反应。 因 此国内外对维甲酸类的药物的结构展开大量的结构修饰工作。
徐世平等为改善维甲类化合物的性能设计合成了一系列维甲酸衍生物 (药学学报 (1981), 16(9), 678-86)，其中维胺酯（RI)和维胺酸（RII)在抗致癌等方面效果良好， 而且毒性较低， 适合癌化学预防， 治疗癌前病变。 杜从之等比较了维胺酯 （RI)和维胺酸（RII)及维甲酸， 抗癣灵和保肤灵等维甲酸类化合物的毒性， 发现维胺酯 （RI) 和维胺酸 （ II) 毒性较低， 表明其适合于治疗癌前病变的应用（药学学报 17: 333— 337 ( 1982) )。申请号为 97116602.1 的发明专利公开了一种维甲酰香豆素类化合物及其制备方法和含该化合物的药物组合物。
国外也有大量有关维甲类研究方面的报道， 如异维甲酸， 阿维 A酸作为皮肤用药已经 上市。对维甲酸的末端极性基团结构改造主要集中在末端羧基的氧酰化，氮酰化。如 Kyoko Nakagawa-Goto 等将维甲酸同紫杉烷缩合产物用于增强药物疗效 （ Kyoko Nakagawa-Goto,Koj i Yamada,et al, Antitumor agents. 258. Syntheses and evaluation of dietary antioxidant― taxoid conjugates as novel cytotoxic agents, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 17 (2007) 5204-5209 ) . Gholam H. Hakimelahi 等利用能和肿瘤细胞表面抗原特异性 结合的单克隆抗体作为载体，将 β—内酰胺酶转运到肿瘤细胞后,服用维甲酸前药 (将全反式 维甲酸连接到头孢菌素的 C-3位上获得的化合物），使其在肿瘤细胞被 β-内酰胺酶催化，释放 C-3位的药效基团，从而达到选择性杀灭肿瘤细胞的作用。 体外试验发现，化合物 (5) 和 β-内 酰胺酶合用,抑制乳腺癌肿瘤细胞 MCF7增殖能力明显强于化合物 (5) (Hakimelahi G H , Ly T W, Yu S F , et al. Design and synthesis of a cephalosporin-retinoic acid prodrug activated by amonoclonal antibody- -lactamase conjugate [J ] . Bioorg Med Chem , 2001 , 9(8)： 2139—2147)。 Stefano Manfredini等将维甲酸与 Ara-A, Ara-C, 3(2H)-Furanone,共价缩合， 其中部分化合物 具有很强的细胞生长抑制作用 （Stefano Manfredini, Daniele Simoni,Roberto Ferroni,et al, Retinoic Acid Conjugates as Potential Antitumor Agents: Synthesis and Biological Activity of Conjugates with Ara-A, Ara-C, 3(2H)-Furanone, and Aniline Mustard Moieties, J. Med. Chem. 1997, 40, 3851 -38 ) , 但是这些结构改造均是同相关的药物进行拼合， 同时发挥药物作用， 由 于是两种药物拼合， 存在在分子量大， 稳定性， 以及与药物作用靶点不明确等缺陷， 其作 为药物应用可能不大。 因此应选用小分子化合物作为末端羧基酰化的底物。
美国专利 US4190594公开了系列维甲酸的酯化和酰胺化， 用于防治紫外线照射引起的 损伤， 其中的化合物芬维 A胺 (Fenretinide,4-HPR)， 被用于多种皮肤病的治疗， 同时目前正 在作为用于预防和治疗多个肿瘤的药物进行评价 （Soo-Jong UM,a Youn-Ja KWON,et al , Synthesis and Biological Activity of Novel Retinamide and Retinoate Derivatives, Chem. Pharm. Bull. 52(5)501 -506(2004)。芬维 A胺 (Fenretinide,4-HPR)是 RAR-β , RAR-γ的选择性激动剂， 近 年研究发现芬维 A胺与传统的维甲酸类化合物不同， 其诱导分化作用较弱， 而促进肿瘤细 胞凋亡较强， 且毒性远较其它维甲酸类化合物低， 可长期使用， 且耐药性发生率低， 并可 单独或合用其它化疗药物抗肿瘤。 近年来国外的一些研究显示芬维 A胺对多种实体瘤均有 直接的抑制作用， 并已进入了临床试验， 但其抗肿瘤作用机制尚未完全明了。 目前研究认 为芬维 A胺可能机制包括:抑制肿瘤细胞增殖、 促进分化、 引发凋亡， 并影响其他信号传导 途径， 芬维 A胺诱导凋亡的生化途径十分复杂， 己报道同时有维甲酸 RA受体依赖型和维 甲酸 RA受体非依赖型， 后者包括促进活性氧簇 (ROS)及神经酞胺的产生等。 此外， 还有抑 制血管生成、 抑制 HIV、 抗风湿、 治疗银屑病等作用。 因此芬维 A胺成为目前研究的热点 之一。 但是 4-HPR在临床应用时， 其主要的缺点生物利用度低， 研究表明， 当病人服用剂 量为 OOmg/日的时， 其血桨血药浓度低于 1 μΜ， 而体内需要产生细胞调亡的有效浓度需要 101 μΜ， 因此需要加大给药剂量或者合成具有更好临床效果的衍生物。 在最近合成的一些 衍生物中包括 苯胺结构进行羟基化， 羧基化， 或者甲氧基取代等等， 但是这些衍生物中， 部分化合物显示出较好的生物活性。 （Clifford J. L.， Sabichi A. L.， Zou C, Yang X., Steele V. E.， Kelloff G.J., Lotan R.， Lippman S. M., Cancer Epidemiol. Biomarkers Pre v., 10,391― 395 (2001)； Sun S. Y" Yue P., Kelloff G. J., Steele V. E., Lippman S. M., Hong W. ., Lotan R.， Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev., 10, 595— 601(200 l).Soo- Jong UM等对 4-HPR 的结构进行了修 饰,得到的一系列化合物均具有较高的细胞毒性和更好的水溶性。 主要方法是将具有抗癌活 性的丁酸钠通过对氨基酚连接到维甲酸上,生成维甲酸氨基苯酚丁酸酯 (4-BPRE) 。分子药理 实验结果表明，该化合物兼具丁酸钠和维甲酸双重抗肿瘤活性 (Um SJ , won YJ , Han H S , et al. Synthesis and biological activity of novel retinamide and retinoate derivatives [ J ] .Chem Pharm Bull , 2004 , 52(5)： 501 -506； Um S J , Han H S , Kwon YJ , et al. In vitro antitumor potential of 4-BPRE， a butyryl aminophenyl ester of retinoic acid: role of the butyryl group [J ] . Oncol Rep , 2004 , 1 1 (3)： 719-726)。 发明内容
本发明的目的在于提供一种结构新颖的类维甲酸衍生物。
本发明技术方案如下：
本发明所述化合物， 具有下式（I )所示的类维甲酸衍生物-
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(0
或者式（I )所示的类维甲酸衍生物的异构体、 对映体、 消旋体、 非对映体混合物、 外消旋混 合物、 溶剂化物、 多晶型物或药学上可接受的盐； 其中， R1代表式 ( II )或者式 (III)所示的结构， R2代表式 (IV)所示的结构；
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(II) (HI) (IV) 表示连接位置；
R3〜！ 7相互间相同或者不同， 各自独立地选自氢、 硝基、 卤素、氨基、 酰基、 磺胺基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰基、 硫脲基、 氨基甲基、 氰基、 取代或 未取代的低级垸基、 取代或未取代的低级烯基、 取代或未取代的低级炔基、 取代或未取代 的低级垸氧基、 取代或未取代的低级烷氨基、 取代或未取代的低级垸巯基、 取代或未取代 的低级垸磺基、 取代或未取代的低级垸酰胺基、 取代或未取代的低级脂烯氧基、 取代或未 取代的低级脂炔氧基、 取代或未取代的脂环垸基、 取代或未取代的杂环垸基、 取代或未取 代的芳基、 取代或未取代的杂芳基、 取代或未取代的芳氧基、 取代或未取代的杂芳氧基、 取代或未取代的芳基羰基、 取代或未取代的杂芳基羰基、 取代或未取代的芳氧基羰基、 取 代或未取代的杂芳氧基羰基、 取代或未取代的芳氨基、 取代或未取代的杂芳氨基、 取代或 未取代的芳巯基、 取代或未取代的杂芳巯基；
R3 '〜！ u'相互间相同或者不同， 各自独立地选自氢、 硝基、 卤素、 氨基、 酰基、 磺胺 基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰基、 硫脲基、 氨基甲基、 氰基、 取 代或未取代的低级垸基、 取代或未取代的低级烯基、 取代或未取代的低级炔基、 取代或未 取代的低级垸氧基、 取代或未取代的低级垸氨基、 取代或未取代的低级垸巯基、 取代或未 取代的低级垸磺基、 取代或未取代的低级垸酰胺基、 取代或未取代的低级脂烯氧基、 取代 或未取代的低级脂炔氧基、 取代或未取代的脂环烷基、 取代或未取代的杂环垸基、 取代或 未取代的芳基、 取代或未取代的杂芳基、 取代或未取代的芳氧基、 取代或未取代的杂芳氧 基、 取代或未取代的芳基羰基、 取代或未取代的杂芳基羰基、 取代或未取代的芳氧基羰基、 取代或未取代的杂芳氧基羰基、 取代或未取代的芳氨基、 取代或未取代的杂芳氨基、 取代 或未取代的芳巯基、 取代或未取代的杂芳巯基；
R9〜R13 相互间相同或者不同， 各自独立地选自卤代垸基、 卤代烷氧基、 氢、 硝基、 卤素、 氨基、 酰基、 磺胺基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰基、 硫脲 基、 氨基甲基、 氰基、 取代或未取代的低级垸基、 取代或未取代的低级烯基、 取代或未取 代的低级炔基、 取代或未取代的低级垸氧基、 取代或未取代的低级烷氨基、 取代或未取代 的低级垸巯基、 取代或未取代的低级垸磺基、 取代或未取代的低级烷酰胺基、 取代或未取 代的低级脂烯氧基、 取代或未取代的低级脂炔氧基、 取代或未取代的脂环烷基、 取代或未 取代的杂环垸基、 取代或未取代的芳基、 取代或未取代的杂芳基、 取代或未取代的芳氧基、 取代或未取代的杂芳氧基、 取代或未取代的芳基羰基、 取代或未取代的杂芳基羰基、 取代 或未取代的芳氧基羰基、 取代或未取代的杂芳氧基羰基、 取代或未取代的芳氨基、 取代或 未取代的杂芳氨基、 取代或未取代的芳巯基、 取代或未取代的杂芳巯基；
Z为 0、 S或者 NR14, 其中 R14选自氢、 取代或者未取代的低级垸基、 取代或未取代 的低级烯基、 取代或未取代的低级炔基、 取代或未取代的脂环垸基、 取代或未取代的杂环 垸基、 取代或未取代的芳基、 取代或未取代的杂芳基；， 条件是： R9〜！ 13中至少之一为卤代垸基或者卤代垸氧基。
作为优选， 上述所述的类维甲酸衍生物， 其中， R3和 R7相同或者不同， 分别是取代 或未取代的低级垸基， R4和 R6相同或者不同， 分别选自氢、 取代或未取代的低级垸基、 取代或未取代的低级烷氧基、 取代或未取代的低级脂烯氧基、 硝基、 氨基、 低级垸基取代 氨基、取代或未取代的氮杂环基， R5为取代或未取代的低级垸氧基，所述的低级是指含 1〜 5个碳原子， 取代时取代基选自硝基、 卤素、 氨基、 酰基、 磺胺基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺 基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰基、 硫脲基、 氨基甲基或氰基。
最优选地， 上述所述的类维甲酸衍生物， 其中， R3， R7, R4是甲基时， R5是甲氧基， R6是氢。
作为优选， 上述所述的类维甲酸衍生物， 其中， R3'和 R4'相同或者不同， 分别是取代 或未取代的低级垸基， R5'〜RI ()'相同或者不同， 分别选自氢、 取代或未取代的低级垸基、 取代或未取代的低级垸氧基、 取代或未取代的低级脂烯氧基、 硝基、 氨基、 低级烷基取代 氨基、 取代或未取代的氮杂环基， R8'为氢、 取代或未取代的低级烷基、 取代或未取代的低 级烯基、 取代或未取代的低级烷氧基， 所述的低级是指含 1〜5个碳原子， 取代时取代基选 自硝基、 卤素、 氨基、 酰基、 磺胺基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰 基、 硫脲基、 氨基甲基或氰基。
其中， 最优选上述所述的类维甲酸衍生物， 其中 R3'、 R4'均是甲基， R5'〜R10'均是氢， Ru '为甲基。
作为优选， 上述所述的类维甲酸衍生物， 其中， R9、 R10、 R1 R12、 R13相同或者 不同， 分别独立地选自三氟甲基、 三氟甲氧基、 氢、 卤素、 羟基、 取代或未取代的低级垸 基、 取代或未取代的低级烷氧基、 取代或未取代的低级脂烯氧基、 羧酸、 羧酸酯、 酰胺、 腈基、 硝基、氨基、 取代或未取代的低级垸基取代氨基、 氮杂环基， 条件是 R9、 RI O, R1 K R12、 R13中之一为三氟甲基或者三氟甲氧基。
其中， 所述术语 "卤素" ， 包括氟、 氯、 溴和碘。
其中， 所述的 "低级" ， 是指含 1〜8个碳原子， 优选含 1〜5个碳原子。
其中， 所述的基团可以含取代基， 也可以不含取代基。 取代时， 取代基没有特别限制， 可以包含 1个或者更多个取代基， 优选取代基选自硝基、 卤素、 氨基、 酰基、 磺胺基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰基、 硫脲基、 氨基甲基或氰基等。
本领域的技术人员将会理解， 式 （ I ) 化合物可能含有手性中心。 当式 （ I ) 化合物 中含有手性中心时， 它可以存在对映异构体形式。 式 （ I )所示结构的纯旋光异构体、 对映 体混合物、非对映体混合物、外消旋混合物及其上述化合物药学上可接受的盐、溶剂合物等， 都属于本发明的范围。
本发明化合物还可以存在各种多晶型， 例如无定形形式和结晶性型。本发明化合物的所 有晶型都包括在本发明的范围内。 作为优选地， 本发明涉及如下所述的类维甲酸衍生物， 其为：
(全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲基苯酯；
(全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2，6,6-三甲基环己烯 )-2，4，6,8-壬四烯酸 3-三氟甲基苯酯；
(全-反式) - 3，7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸 2-三氟甲基苯酯；
(全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2，4,6，8-壬四烯酸 （4-三氟甲基苯基)-酰胺； (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2，4,6，8-壬四烯酸 （3-三氟甲基苯基)-酰胺； (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 4-氨基 -3-三氟甲基苯酯； (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯) -2,4,6,8-壬四烯酸 4-氨基 -2-三氟甲基苯酯； (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲氧基苯酯；
(全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2，6，6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 3-三氟甲氧基苯酯；
(全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2，4,6,8-壬四烯酸 （4-三氟甲氧基苯基)-酰胺； (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 （3-三氟甲氧基苯基)-酰胺； (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己炼 )-2，4,6,8-壬四烯酸（4-羟基 -3-三氟甲基苯基)-酰胺； (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )- 2,4,6,8-壬四烯酸（4-轻基 -2-三氟甲基苯基)-酰胺； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2，4,6,8-壬四烯酸 3-三氟甲基苯酯； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 2-三氟甲基苯酯； . (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲基苯酯； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4，6,8-壬四烯酸（3-三氟甲氧基苯基)-酰胺； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3，7-二甲基 -2,4，6,8-壬四烯酸（2-三氟甲氧基苯基)-酰胺； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3，6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 4-氨基 -3-三氟甲基苯酯； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3，7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 4-氨基 -2-三氟甲基苯酯； (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基)- 3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲氧基苯酯； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 3-三氟甲氧基苯酯； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3，6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸（3-三氟甲氧基苯基)-酰胺； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸（2-三氟甲氧基苯基)-酰胺； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基)- 3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸（4-三氟甲氧基苯基)-酰胺； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 （4-羟基 -3-三氟甲基苯 基) -酰胺； 或者
(全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基 )-3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 （4-羟基 -2-三氟甲基苯 基) -酰胺。
本发明所述的式（I )类维甲酸衍生物， 可以以维甲酸或依曲替酸（Etret in)为原料， 通 过下列步骤制备：
A 、 维甲酸或依曲替酸与三氯化磷反应后， 然后与相应的芳香胺衍生物或苯酚衍生物反应 制得；
B 、 维甲酸或阿维 A 酸与相应的芳香胺衍生物或苯酚衍生物， 在 N，N-二环己基碳二亚胺 (DCC)， 4-二甲氨基吡啶（DMAP)条件下反应制得相应衍生物；
C、 维甲酸或阿维 A 酸与相应的芳香胺衍一生物或苯酚衍生物， 在 N，N-二环己基碳二亚胺 (DCC)， 4-二甲氨基吡啶（D AP)对甲苯磺酸盐条件下反应制得相应衍生物。
上述制备方法可用
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R
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本发明的类维甲酸衍生物是未见报道的新化合物， 其类似物的合成方法报道很多， 主
DCC， DCC/D AP等方法， 这些方法均可以合成本发明中的新化合物。
进一步地， 本发明合成制得如下化合物（式 c-01〜式 c-15， 式 d- 01〜式 d- 15 )， 其都为 本发明具体实施化合物， 其制备方法如下：
c式系列化合物合成通法
反应瓶中， 加入维甲酸， 含三氟甲基或三氟甲氧基的多取代苯胺或苯酚， 4-二甲氨基 吡啶 (DMAP), 二氯甲垸 5ml， 滴加入 DCC的二氯甲垸溶液， 加毕后于室温条件下搅拌过 夜， 用饱和氯化铰溶液中止反应， 用二氯甲垸萃取， 用水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 浓缩后， 柱层析 （石油醚 60-90°C ) 收集流分后， 浓缩， 得产物。
d式系列化合物合成通法
反应瓶中， 加入依曲替酸， 含三氟甲基或三氟甲氧基的多取代苯胺或苯酚， 4-二甲氨基 吡啶 (DMAP), 二氯甲垸 5ml， 滴加入 DCC的二氯甲垸溶液， 加毕后于室温条件下搅拌过 夜， 用饱和氯化铰溶液中止反应， 用二氯甲垸萃取， 用水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 浓缩后， 柱层
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Li_V-
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C29¾2F3N02 Mol. Wt.: 483.57 式 (全-反式） - 9- (4-甲氧基 -2， 3, 6 -三甲苯基） -3， 7-二甲基 -2， 4， 6， 8-壬
(d-04) 四烯酸 2-甲基 -4-三氟甲基苯基酰胺
Figure imgf000012_0002
式 (全-反式) - 9 - (4-甲氧基 -2, 3, 6 -三甲苯基) -3, 7-二甲基 -2， 4， 6, 8 -壬
(d-05) 四烯酸 2-氰基 -4-三氟甲基苯基酰胺
Figure imgf000013_0001
I I
Figure imgf000014_0001
Figure imgf000014_0002
上述所述的新的类维甲酸衍生物， 可以是它们的中性形式， 当其具有碱性时， 也可以 和无机酸或有机酸加成形成相应的盐使用， 对药物中所能用的酸包括有： 盐酸， 溴化氢， 萘二磺酸（1， 5) ,磷酸， 硝酸， 硫酸， 草酸， 酒石酸， 乳酸， 水杨酸， 苯甲酸， 甲酸， 乙酸， 丙酸， 戊酸， 二乙基乙酸， 丙二酸， 琥珀酸， 富马酸， 丁二酸， 庚二酸， 己二酸， 马来酸， 苹果酸， 氨基磺酸， 苯丙酸， 葡糖酸， 抗坏血酸， 异烟酸， 甲磺酸， 对甲苯磺酸， 柠檬酸， 以及氨基酸。 所述的化合物可和多摩尔的酸加成形成盐， 这些多摩尔的酸可以是单一的也 可以是组合的， 这主要根据需要相应的溶剂或稀释的情况来决定， 这些加成的盐可以通过 阴离子交换等方法而转为中性形式。
作为本发明另一发明目的， 提供一种药物组合物， 其包含治疗有效量的上述所述的类 维甲酸衍生物或其异构体、 对映体、 消旋体、 非对映体混合物、 外消旋混合物、 溶剂化物、 多晶型物或药学上可接受的盐作为有效成分， 以及药学上可接受的辅料。 所述的药学上可 接受的辅料， 包括相应的医药上准许应用的赋形剂， 粘合剂， 缓释剂， 稳定剂， 香料， 调 味剂， 色素； 所述的剂型是片剂或胶囊， 或者针剂、 冻干粉针剂。
本发明另一发明目的是提供所述化合物的应用。 所述的类维甲酸衍生物或其异构体、 对 映体、 消旋体、 非对映体混合物、 外消旋混合物、 溶剂化物、 多晶型物或药学上可接受的 盐在制备药物的应用， 其中所述的药物具有能够： 预防或治疗血液系统肿瘤， 如急性白血 病， 慢性白血病， 多发性骨髓瘤， 淋巴瘤等； 预防和治疗实体肿瘤， 如肝癌， 直肠癌， 乳 腺癌， 食道癌等； 预防和治疗皮肤病， 如银屑病， 痤疮等皮肤病。 附图说明：
图 1: A549细胞形态学变化 （加药 10ug/ml三天）
A: CONTROL B: DMSO
C: 乙醇 D: 芬维 A胺 （DMSO)
E: 芬维 A胺 （乙醇） F: 6a-02(DMSO)
G: 3a-01(DMSO) H: 6a-01(DMSO)
I： 3a-02(DMSO) J: 2a-03(乙醇）
: 4a-02(DMSO) 图 2: HepG2细胞形态学变化 （加药 10ug/ml三天）
A: CONTROL B: DMSO
C: 乙醇 D: 芬维 A胺 （DMSO)
E: 芬维 A胺 （乙醇） F: 6a-02(DMSO)
G: 3a-01(DMSO) H: 6a-01(DMSO)
I： 3a-02(DMSO J: 2a-03(乙醇）
: 4a-02(DMSO) 图 3: 维甲酸衍生物处理 NB4细胞 72h形态学变化
Α,Β:空白对照组 NB4细胞 C 6a- 02 5(μ g/ml)
D 4a- 02 5(μ g/ml) E 4a-01 5(μ g/ml)
F 2a- 03 5(μ g/ml) G 3a- 02 5(u g/ml)
Η 芬维 A胺 5( g/ml) 图 4: 维甲酸衍生物处理 K562细胞 72h形态学变化
空白对照组 K562细胞 B :6a- 02 5(μ g/ml)
6a- 01 5(μ g/ml) D: 4a- 02 5(u g/ml)
5a- 02 5(μ g/ml) F :4a- 01 5(u g/ml)
2a - 03 5(μ g/ml) H :3a- 02 5(u g/ml)
芬维 A胺 5(yg/ml) J: 2a- 01 5(ug/ml) 图 5: 各组 NB4细胞表面 CDllb表达的流式检测结果柱形图 具体实施方式：
以下包括的具体的实施例用于说明制备方法， 并不对本公幵内容作任何限制。所用试剂 及中间体或者可由商业提供，或者可由有机合成领域那些技术娴熟人员根据标准文献方法容 易地制备。 本领域那些技术熟练人员可知还有其他制备本发明化合物的方法。 实施例 1 (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6，6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲基苯酯 (2a-01 )
室温条件下， 加入维甲酸 0.5g,二氯甲垸 10ml搅拌， 加入 4一三氟甲基苯酚 0.4g, 4-二甲 氨基吡啶 (DMAP)0.23g， 然后滴加入 Ν,Ν-二环己基碳二亚胺 (DCC) 0.4g和二氯甲垸的溶液， 加毕后， 为黄色透明液体， 室温搅拌 20小时， 反应完成， 用饱和氯化铵溶液中止反应， 二 氯甲垸萃取， 水洗， 无水硫酸钠干燥， 抽滤， 浓缩后， 柱层析 （流动相： 石油醚 60— 90)， 用乙醇重结晶得 0.23g黄色固体。 mpl l8.5-120.4°C
'HNMR(CDCl3),5(ppm): 1.04 (s,6H); 1.72( s,3H); 2.00(s,3H); 2.41(s,3H
)； 1.47 +1.62(t,4H); 2.02(m,2H); 5.98(s,lH); 6.15-6.39(m,4H); 7.11(m,lH); 7.66 (d,lH);
7.24(s,lH)
13CNMR(CDC13)， 5(ppm): 13.06； 14.26； 19.29； 21.83； 29.05； 33.22； 34.36; 39.71； 116.45； 129.37; 129.50； 130.41； 132.59； 134.55； 137.20； 137.76； 140.94； 156.71； 164.85； 122.35； 127.59； 153.51； 127.59-128.71(q); 122.11-123.52(q)
高分辨 MS: m/z: 444. 2271 (理论值: 444.2276) 分子式： C27H3,F302 实施例 2 (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4，6,8-壬四烯酸 3-三氟甲基苯酯 (2a-02 )
操作方法同实施例 2， 将对三氟甲基苯酚换为间三氟甲基苯酚， 柱层析 （流动相： 石油 醚 60— 90°C )， 得黄色油状物 0.21g
'HNMI^CDCb SCppm): 1.04( s,6H); 1.72 (s,3H); 2.00(s,3H); 2.41(s,3H); 1.47+1.62 (t,4H); 2.02(m,2H); 5.98(s,lH); 6.15-6.39(m,4H); 7.08(m,lH); 7.50(m,lH); 7.41(s,lH); 7.25(m,lH) 13CNMR(CDC13), 5(ppm): 13.04； 14.24； 19.29； 21.82； 29.04； 33.22； 34.36； 39.70； 116.45； 129.38； 129.46； 130.18； 132.56； 134.57； 137.22； 137.75； 140.89; 156.65； 164.97； 119.18； 122.28； 125.51； 130.18； 131.74； 137.39； 151.03
高分辨 MS: m/z: 444.2278 (理论值： 444.2276) 分子式： C27H31F302 实施例 3 (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6，6-三甲基环己烯 )-2,4,6，8-壬四烯酸 2-三氟甲基苯酯 (2a-03 )
操作方法同实施例 2， 将对三氟甲基苯酚换为邻三氟甲基苯酚， 柱层析 （流动相： 石油 醚 60— 90°C )， 用乙醇重结晶得 0.18g黄色固体， mp93.8-95°C
'HNMR(CDCl3),5(ppm): 1.04(s,6H); 1.73(s,3H); 2.03(s,3H); 2.40(s,3H); 1.47+1.62(t，4H); 2.05(m,2H); 6.02(s,lH); 6.15-6.4 l(m,4H); 7.10(m,lH); 7.68(d，lH); 7.57(t，lH); 7.26-7.34(m,lH) I3CNMR(CDC13)， 5(ppm): 13.06； 14.24； 19.31； 21.84； 29.06； 33.23； 34.37； 39.72； 116.28； 129.40； 129.44； 130.37； 132.54； 134.66； 137.26； 137.77； 140.82； 156.75； 164.78； 148.52； 133.06； 130.22； 126.88； 125.57； 124.43
高分辨 MS: m/z: 444.2275 (理论值: 444.2276) 分子式： C27H31F302 实施例 4 (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 （4-三氟甲基苯 基) -酰胺 （3a-01 )
反应瓶中， 加入维甲酸 0.5g,甲苯 5ml， 然后滴加入三氯化磷 0.11ml, 然后于室温条件下 搅拌 3小时， 将该溶液滴加入冷却条件下对三氟甲基苯胺 0.18ml和 5ml吡啶的溶液中， 加 毕后于冷却条件下搅拌反应 5 小时， 再于室温搅拌过夜， 然后将反应液倾入碎冰中， 用浓 盐酸调节 PH= 1， 用乙酸乙酯萃取三次， 有机层用饱和氯化钠洗涤， 无水硫酸钠干燥， 过 滤， 减压浓缩至干， 用乙醇重结晶， 得亮黄色产物 0.3g， mpl86.1-187.6°C
'HNMR(CDCl3),6(ppm): 1.03(s,6H); 1.72(s,3H); 2.01(s,3H); 2.43(s,3H); 1.46+1.63(t,4H); 2.02(m,2H); 5.79(s,lH); 6.12-6.30(m,4H); 7.03(m,lH); 7,55(d,lH); 7.68(d,lH)
13CNMR(CDC13), 5(ppm): 13.01； 13.90； 19.31； 21.82； 29.04； 33.21； 34.36； 39.71； 120.48； 128.98； 129.45； 130.18； 131.23； 134.98； 137.27； 137.80； 139.95； 152.13； 165.34； 119.26； 126.33； 141.50
高分辨 MS: m/z: 443.2444 (理论值: 443.2436) 分子式： C27H32F3NO 实施例 5 (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 （3-三氟甲基苯基) - 酰胺 (3a-02)
反应瓶中， 加入维甲酸 0.5g， 间三氟甲基苯胺 0.32g， 4-二甲氨基吡啶 (DMAP)对甲本磺 酸盐 0.56g， 二氯甲垸 5ml，冰浴条件下搅拌， 有白色不溶物， 滴加入 DCC 0.4g， 二氯甲垸溶 液， 反应液溶液变为橙红色， 加毕后于室温条件下搅拌过夜， 用饱和氯化铰溶液中止反应， 用二氯甲垸萃取， 用水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 浓缩后， 柱层析 （石油醚 60-90Ό ) 收集流 分后， 浓缩， 用甲醇重结晶， 得黄色固体 200mg， mp89.7-92.5°C
'HNMR(CDCl3),8(ppm): 1.03(s,6H); 1.72(s,3H); 2.01(s,3H) ； 2.44(s,3H) ； 1.47+1.62(t,4H); 2.02(m,2H); 5.78(s,lH); 6.15-6.30(m,4H); 7.03(m,lH); 7.72(d,lH); 7.22(s,lH); 7.33,7.45(m,lH); N-H 7.88(s,lH)
,3CNMR(CDC13), 5(ppm): 13.00； 13.88； 19.31； 21.82； 29.04； 33.21； 34.36； 39.71； 116.47； 129.49； 129.53； 130.15； 131.11； 135.06； 137.29； 137.81； 139.84； 151.92； 165.39； 138.95； 128.90； 125.33； 122.63(d); 120.50； 131.29(q)
高分辨 MS: m/z: 443.2437 (理论值: 443.2436) 分子式： C27H32F3NO 实施例 6 (全-反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 4-氨基 -3-三氟甲基 苯酯 （4a-01 )
室温条件下， 加入维甲酸 0.18g, 4-氨基 -3-三氟甲基苯酚 0.1g， 4-二甲氨基吡啶 (DMAP)0.09g，二氯甲垸 10ml搅拌， 然后滴加入 Ν,Ν-二环己基碳二亚胺 (DCC) 0.15g和二氯 甲烷的溶液， 为黄色透明液体， 室温搅拌 20小时， 反应完成， 用饱和氯化铵溶液中止反应， 二氯甲垸萃取， 水洗， 无水硫酸钠干燥， 抽滤， 浓缩后， 柱层析（流动相： 石油醚 60— 90°C : 乙酸乙酯 40: 1 )， 收集流分后， 浓缩， 用甲醇重结晶得 0.09g黄色固体。 mpl l9.7-121.2°C 'HNMR(CDCl3),6(ppm): 0.96(s,6H); 1.65(s,3H); 1.95(s,3H) ； 2.32(s,3H) ； 1.40+1.56(t,4H); 1.97(m,2H); 5.88(s,lH); 6.07-6.30(m,4H); 7.00(m,lH); 7.12(d，); 7.01(s,); 6.65(d，)； 4.03(s,2H) NH2
高分辨 MS: m/z: 459.2379 (理论值： 459.2385 ) 分子式： C27H32F3N02 实施例 7 (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2，6，6-三甲基环己炼 )-2,4,6,8-壬四烯酸 4-氨基 -2-三氟甲基 苯酯 （4a-02 )
室温条件下， 加入维甲酸 0.5g, .4-氨基 -2-三氟甲基苯酚 0.32g , 4-二甲氨基吡啶 (DMAP)0.23g,二氯甲垸 10ml搅拌，然后滴加入 Ν,Ν-二环己基碳二亚胺 (DCC) 0.4g和二氯甲 垸的溶液， 为黄色透明液体， 搅拌过夜， 反应完成， 用饱和氯化铵溶液中止反应， 二氯甲 垸萃取， 水洗， 无水硫酸钠干燥， 抽滤， 浓缩后， 柱层析 （流动相： 石油醚 60— 90°C :乙酸 乙酯 2: 1 )，收集流分后， 浓缩，用石油醚 (60— 90°C)重结晶得 0.21g黄色固体。 mp89.7-91.3°C 'HNMR(CDCl3),8(ppm): 1.04(s,6H); 1.72(s,3H); 2.02(s,3H); 2.39(s,3H); 1.46+1.63(t,4H); 2.03(m,2H); 5.99(s,lH); 6.14-6.39(m,4H); 7.08(m,H); 7.02(m,); 6.91(d,lH); 6.82(t,lH) 13CNMR(CDC13), 6(ppm): 13.03； 14.16； 19.30； 21.83； 29.05； 33.21； 34.36； 39.71； 118.63； 129.21； 129.48； 130.29； 130.20； 134.81； 137.28； 137.76； 140.52； 156.02； 165.55； .112.54； 112.58； 116.69； 125.45； 139.81； 144.12； 123.34
高分辨 MS: m/z: 459.2378 (理论值： 459.2385 ) 分子式： C27H32F3N02 实施例 8 (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )- 2,4，6,8-壬四烯酸 4-三氟甲氧基苯 酯 （5a-01 )
室温条件下， 加入维甲酸 0.5g,对三氟甲氧基苯酚 0.4g， 4-二甲氨基吡啶 (DMAP)0.23g, 二氯甲烷 10ml搅拌，然后滴加入 N，N-二环己基碳二亚胺 (DCC) 0.4g和二氯甲垸的溶液， 为 黄色透明液体， 室温搅拌 20小时， 反应完成， 用饱和氯化铵溶液中止反应， 二氯甲垸萃取， 水洗， 无水硫酸钠干燥， 抽滤， 浓缩后， 柱层析（流动相： 石油醚 60— 90°C )， 收集流分后， 浓缩， 用乙醇重结晶得 O.l lg黄色固体。 mp88.3-90.6°C
1HNMR(CDCl3),5(ppm): 1.04(s,6H); 1.72(s,3H); 2.03(s,3H); 2.41(s,3H); 1.47+1.62(t,4H); 2.02(m,2H); 5.98(s,lH);6.15-6.39(m,4H); 7.06(m,lH); 7.24(d,lH); 7.14(d,lH)
13CNMR(CDC13)， 5(ppm): 13.04； 14.21 ; 19.29； 21.82； 29.04； 33.21； 34.35； 39.70； 116.65； 129.40； 129.40； 130.37； 132.42； 134.62； 137.22； 137.75； 140.79； 156.36； 165.19； 149.18; 146.38； 123.17； 122.06； 122.90(q)
高分辨 MS: m/z: 460.2219 (理论值： 460.2225 ) 分子式： C27H31F303 实施例 9 (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2，4,6,8-壬四烯酸 3-三氟甲氧基苯 酯 （5a-02)
操作同实施例 9， 柱层析 （流动相： 石油醚 60— 90)， 得黄色油状物
'HNMR(CDCl3),6(ppm): 1.04(s，6H); 1.72(s,3H); 2.03(s,3H); 2.41(s，3H); 1.47+1.62(t,4H); 2.02(m,2H); 5.59(s，lH); 6.15-6.39(m,4H); 7.04(m,lH); 7.41(t,lH); 7.04-7.10(m,lH) I3CNMR(CDC13)， 5(ppm): 13.06； 14.25； 19.30； 21.83； 29.05； 33.23； 34.37； 39.71； 116.55； 129.40； 130.44； 130.39； 132.50； 134.61； 137.22； 137.77； 140.85; 156.55； 164.90； 151.66； 149.66； 130.20； 120.45； 117.83； 115.19； 116.89(q)
高分辨 MS: m/z: 460.2221 (理论值： 460.2225 ) 分子式： C27H31F303 实施例 10(全-反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 （4-三氟甲氧基苯 基) -酰胺 （6a-01 )
反应瓶中， 加入维甲酸 0.5g， 对三氟甲氧基苯胺 0.35g， 4-二甲氨基吡啶 CDMAP)对甲苯 磺酸盐 0.56g， 二氯甲烷 5ml,冰浴条件下搅拌， 有白色不溶物， 滴加入 Ν,Ν-二环己基碳二亚 胺 (DCC) 0.4g， 二氯甲烷溶液， 反应液溶液变为橙红色， 加毕后于室温条件下搅拌过夜， 用 饱和氯化铵溶液中止反应， 用二氯甲烷萃取， 用水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 浓缩后， 柱层 析（石油醚 60-90°C )收集流分后，浓缩，用甲醇重结晶，得黄色固体 0.05g, mP172.5-174.5°C 'HNMR(CDCl3),5(ppm): 0.96(s,6H); 1.64(s,3H); 1.94(s,3H); 2.35(s,3H); 1.40+1.55(t,4H); 1.95(m,2H); 5.70(s,lH); 6.05-6.23(m,4H); 6.95(m，lH); 7.51(d,lH); 7.11(d,lH); N-H 7.09(s,lH) I 3CNMR(CDC13), 5(ppm): 13.01； 13.86； 19.32; 21.83； 29.05； 33.21； 34.37； 39.72； 121.83； 128.86； 129.50； 130.13； 130.97； 135.11； 137.32； 137.82； 139.74； 151.59； 165.14； 120.64； 120.86； 137.04
高分辨 MS: m/z: 459.2379 (理论值： 459.2385 ) 分子式： C27H32F3N02 实施例 11(全-反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 （3-三氟甲氧基苯 基) -酰胺 （6a-02)
操作同实施例 11， 柱层析 （石油醚 60— 90Ό )， 用甲醇重结晶， 得黄色固体 0.09g,mpl39.2-140°C
'HNMR(CDCl3),5(ppm): 0.96(s,6H); 1.65(s,3H); 1.94(s,3H); 2.36(s,3H); 1.40+1.56(t,4H); 1.95(m,2H); 5.70(s,lH); 6.05-6,23(m,4H); 6.95(m,lH); 7.22-7.29(m,lH); 6.86-6.88(m,lH); N-H 7.10(s,lH)
13CNMR(CDC13)， 6(ppm): 13.02； 13.88； 19.32； 21.83； 29.05； 33.22； 34.37； 39.72； 120.53； 128.89； 129.50； 130.14； 130.09； 135.07； 137.31； 137.82； 139.83； 151.89； 165.15； 112.51； 1 16.13； 117.64； 119.08； 121.06； 130.02； 149.72
高分辨 MS: m/z: 459.2377 (理论值： 459.2385 ) 分子式： C27H32F3N02 实施例 12 (全 -反式)- 3，7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6，8-壬四烯酸 （4-羟基 -3-三氟甲 基苯基) -酰胺 （7a-01 )
反应瓶中， 加入维甲酸 0.5g,甲苯 5ml， 然后滴加入三氯化磷 0.11ml, 然后于室温条件下 搅拌 3小时， 将该溶液滴加入冷却条件下的 4-羟基 -3-三氟甲基苯胺 0.17g和 5ml吡啶的溶 液中， 加毕后于冷却条件下搅拌反应 5 小时， 再于室温搅拌过夜， 然后将反应液倾入碎冰 中， 用浓盐酸调节 PH= 1， 用乙酸乙酯萃取三次， 有机层用饱和氯化钠洗涤， 无水硫酸钠 干燥， 过滤， 减压浓缩至干， 柱层析 （硅胶柱 100-200 目） ，流动相 （石油醚 60-90°C :乙酸 乙酯 = 10: 1 ), 收率流分， 浓缩后， 得黄色产物 0.08g 实施例 13 (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 （4-羟基 -2-三氟甲 基苯基) -酰胺 （7a-02 )
操作同实施例 13， 柱层析 （硅胶柱 100-200 目） ，流动相 （石油醚 60-90°C :乙酸乙酯二 10： 1 ), 收率流分， 浓缩后， 得黄色产物 0.12g 实施例 14 (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 3-三氟甲基 苯酯 （2b-01 )
反应瓶中， 加入依曲替酸 0.53g， 间三氟甲基苯酚 0.4g， 4-二甲氨基吡啶 (DMAP)0.4g， 二氯甲垸 5ml,冰浴条件下搅拌， 有白色不溶物， 滴加入 Ν,Ν-二环己基碳二亚胺 (DCC) 0.4g， 二氯甲垸溶液， 搅拌反应 4h，， 用饱和氯化铵溶液中止反应， 用二氯甲垸萃取， 用饱和氯化 钠水容易洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后，用乙醇重结晶，得黄色固体 0.62g， mpl21.5-123.rC 'H MR(CDCl3),6(ppm): 7.48(d^H); 7.41(s,lH); 73¾m,lH); 7.14(dd,lH); 6.76(d,lH)； 6.71(s,lH)； 6.4¾d,lH)； 629(d,lH)； 62¾s,lH); 6.00(s,lH)； 3.82(s3H)； 2.43(s H)； 23(s3H)； 224(s^H)； 2.15(s3H)； 2.13(s3H) l3CNMR(CDCl3)， 6(ppm): 164.72； 156.48； 156.37； 151.02； 140.47； 138.07； 136.02； 135.11； 134.02； 132.31； 132.09； 131.76； 130.18； 129.90； 129.80； 129.28； 125.50； 122.90； 122.35； 119.18; 116.78； 110.10； 55.60； 21.49； 17.54； 14.26； 13.11； 11.92
高分辨 MS: m/z: 470.2076 (理论值: 470.2069) 分子式： C28H29F303 实施例 15 (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 2-三氟甲基 苯酯 （2b-02 )
操作同实施例 15， 用乙醇重结晶二次， 得黄色固体 0.25g， mpl l7.7-121.2°C
*H MR(CDCl3),5(ppm): 7.70(d,lH); 7.68(t,lH); 736(d,lH); 732(ζ1Η); 7.1 (q,lH)； 6.77(d,lH)； 6.73(s,lH)； 6.46(d,lH)； 631(d,lH)； 62 (s,lH)； 6.05(s,lH)； 3.84(s3H)； 2.44(s3H)； 233(s3H)； 226(s3H)； 2.15(s3H)； 2.11(s3H)
I3CNMR(CDC13)， 5(ppm): 164.72； 156.57； 156.36； 148.49; 140.38； 138.11； 136.03； 135.18； 134.03； 132.88； 132.29； 130.23； 129.83； 129.20； 126.92； 126.88； 125.59； 124.70; 124.49；； 123.36； 123.05； 122.88； 121.78； 116.60； 110.10； 55.61； 21.50； 17.54； 14.23； 13.11； 11.92 高分辨 MS: m/z: 470.2073 (理论值: 470.2069) 分子式： C28H29F303 实施例 16 (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲基 苯酯 （2b-03)
操作同实施例 15， 用乙酸乙酯重结晶， 得黄色固体 570mg， mpl62.5-164.7°C
'HNMR(CDCl3),5(ppm): 7.68(<¾2Η); 728(t,lH); 726(s,lH); 7.16 (q,lH); 6.78(d,lH)； 6.63(s,lH)； 6.45(d,lH)； 628( Η)； 6.02(saH)； 3.8 (s3H)； 2.45(s3H)； 2.33(s3H)； '227(s H)； 2.16(s H)； 2.06(s3H) ,3CNMR(CDC13), 5(ppm): 164.78； 156.53； 156.37； 153.49； 140.50； 138.05； 136.00； 135.07； 134.01； 132.34； 130.16； 129.78； 129.31； 126.73； 122.89； 122.33； 116.77； 110.09； 55.58； 21.48； 17.53； 14.25； 13.10； 11.91
高分辨 MS: m/z: 470.2065 (理论值： 470.2069) 分子式： C28H29F303 实施例 17 (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 （3-三氟甲氧 基苯基) -酰胺 （3b-01 )
反应瓶中， 加入依曲替酸 0.5g,甲苯 10ml， 然后滴加入三氯化磷 0.19ml， 然后于室温条件 下搅拌 2小时， 将该溶液滴加入冷却条件下的间三氟甲基苯胺 0.25g和 6ml吡啶的溶液中， 加毕后室温搅拌反应 5小时， 然后将反应液倾入碎冰中，， 用二氯甲烷萃取三次， 有机层用 饱和碳酸氢钠洗涤， 水洗涤至中性， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓缩至干， 柱层析 （硅 胶柱 100-200 目） ，流动相 （石油醚 60-90Ό :乙酸乙酯 = 15: 1 )， 收率流分， 浓缩后， 得用 甲醇重结晶， 得黄色产物 0.1g， mp 188.6-190.7 °C
'HNMR(CDa3),5(ppm): 7.88 (s,lH); 7.74(d,lH); 7.43(1,1H); 735(d,lH); 725(s,lH); 7.06 (q,lH); 6.72(d,lH)； 6.60(s,lH)； 633(d,lH)； 62¾¾2H)； 5.79(s,lH)； 3.82(s3H)； 2.45(s3H)； 230(s3H)； 224(s3H)； 2.15(s3H)； 2.10(s3H)
13CNMR(CDC13), 6(ppm): 165.22； 164.69； 156.31； 151.83； 149.87； 139.44； 138.90； 138.41； 138.17； 135.60； 132.13； 131.33； 130.91； 130.31； 129.93； 129.55； 128.73； 128.43； 122.87； 120.76； 118.90； 116.47； 110.14； 55.63； 21.49; 17.54； 13.89； 13.07； 11.91
高分辨 MS: m/z: 469.2234 (理论值: 469.2229) 分子式： C28H30F3NO2 实施例 18 (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4，6,8-壬四烯酸 （2-三氟甲 氧基苯基) -酰胺 （3b-02 )
反应瓶中， 加入依曲替酸 0.5g，甲苯 10ml， 然后滴加入三氯化磷 0.19ml， 然后于室温条 件下搅拌 2小时，将该溶液滴加入冷却条件下的邻三氟甲基苯胺 0.25g和 6ml吡啶的溶液中， 加毕后室温搅拌反应 5 小时， 然后将反应液倾入碎冰中， 用二氯甲烷萃取三次， 有机层用 饱和碳酸氢钠洗涤， 水洗涤至中性， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓缩至干， 柱层析 （硅 胶柱 100-200 目） ，流动相 （石油醚 60-9(TC :乙酸乙酯 =20: 1 ), 收率流分， 浓缩后， 得用 甲醇重结晶， 得黄色产物 0.18g,mpl65.5-166.5°C
'HNMR(CDCl3),5(ppm): 8.26(d，lH)， 7.54(d，lH); 7.48(t,lH); 7.36(s,lH); 7.13(t,lH); 6.98 (q,lH); 6.65(d,lH) ； 6.53(s,lH) ； 6.29(d,lH) ； 6.15(q,2H) ； 5.22(s,lH) ； 3.75(s,3H) ； 2.37(s,3H) ； 2.23(s,3H) ； 2.21(s,3H) ； 2.08(s,3H) ； 2.05(s,3H)
l3CNMR(CDCl3), 6(ppm): 165.08； 156.31； 151.85； 139.39； 138.22； 135.65； 134.01； 132.85； 130.90； 130.36； 129.95； 128.70； 126.10； 124.10； 122.86； 120.92; 110.09； 55.63； 21.50; 17.55； 13.90； 13.07； 11.93
高分辨 MS: m/z: 469.2236 (理论值： 469.2229) 分子式： C28H3GF3N02
实施例 19 (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4，6,8-壬四烯酸 4-氨基 -3-三 氟甲基苯酯 （4b-0i)
反应瓶中， 加入依曲替酸 0.53g， 4-氨基 -3-三氟甲基苯酚 0.28g， 4-二甲氨基吡啶 (DMAP)0.23g, 二氯甲烷 5ml，冰浴条件下搅拌， 有白色不溶物， 滴加入 Ν,Ν-二环己基碳二 亚胺 (DCC) 0.4g， 二氯甲垸溶液， 搅拌反应 4h，， 用饱和氯化铵溶液中止反应， 用二氯甲烷 萃取， 用饱和氯化钠水溶液洗涤， 无水硫酸钠干燥， 浓缩后， 柱层析 （石油醚 60— 90Ό : 乙酸乙酯 20: 1 ) 用乙醇重结晶， 得黄色固体 60mg， mpl66.7-168.6
'HNMR(CDCl3),5(ppm): 7.22 (d,lH); 7, 12(m,lH); 7.09(d,lH); 6.79(d,lH) ； 6.72(s,lH) ； 6.62(d,lH) ； 6.43(d,lH) ； 6.30(s,lH) ； 6.26(d,lH); 5.98(s,lH) ； 3.84(s,3H) ； 2.43(s,3H) ； 2.32(s,3H) ； 2.26(s,3H) ； 2.14(s,3H) ； 2.11(s,3H)
13CNMR(CDC13), 5(ppm): 165.59； 156.35； 155.84； 148.49； 140.21； 138.10; 136.03； 135.36； 134.94； 134.02； 132.01； 130.23； 129.83； 129.12； 126.68； 122.88； 120.00； 118.77； 117.13 ; 110.10； 55.61； 21.49； 17.53； 14.20； 13.10； 11.92
高分辨 MS: m/z: 485.2176 (理论值： 485.2178 ) 分子式： C28H3()F3N03 实施例 20 (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2，4，6,8-壬四烯酸 4-氨基 -2-三 氟甲基苯酯 （4b-02)
反应瓶中， 加入依曲替酸 0.53g， 4-氨基 -2-三氟甲基苯酚 0.28g， 4-二甲氨基吡啶 (DMAP)0.23g, 二氯甲垸 5ml,冰浴条件下搅拌， 有白色不溶物， 滴加入 Ν,Ν-二环己基碳二 亚胺 (DCC) 0.4g， 二氯甲烷溶液， 搅拌反应 4h,， 用饱和氯化铵溶液中止反应， 用二氯甲烷 萃取， 用饱和氯化钠水容易洗涤， 无水硫酸钠干燥， 浓缩后， 柱层析 （石油醚 60— 90: 乙 酸乙酯 20: 1 ) 用乙醇重结晶， 得黄色固体 60mg， mpl l8.7-123.8°C
1HNMR(CDCl3),6(ppm): 7.39 (d,lH); 7.26(m,lH); 7.12(m,lH); 6.75(d,lH) ； 6.61(d,lH) ； 6.43(d,lH) ； 6.30(s,lH) ； 6.26(d,lH); 6.01(s,lH) ； 3.82(s,3H) ； 2.42(s,3H) ； 2.31(s,3H) ； 2.25(s,3H) ； 2.14(s,3H) ； 2.09(s,3H)
13CNMR(CDC13)， 6(ppm): 165.62； 156.35； 155.93； 144.11； 140.15； 139.81； 138.14； 136.03； 135.33； 134.03； 132.02； 130.28； 129.88; 129.06； 125.43； 122.88； 121.07； 118.67； 116.98； 112.05； 110.10； 55.63 ; 21.49； 17.54； 14.19； 13.09； 11.92
高分辨 MS: m/z: 485.2177 (理论值： 485.2178 ) 分子式： C28H3QF3N03 实施例 21 (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲氧 基苯酯 (5b-01)
反应瓶中， 加入依曲替酸 0.53g， 对三氟甲氧基苯酚 0.4g， 4-二甲氨基吡啶 (DMAP)0.4g， 二氯甲垸 5ml，冰浴条件下搅拌， 有白色不溶物， 滴加入 Ν,Ν-二环己基碳二亚胺 (DCC) 0.4g， 二氯甲垸溶液， 搅拌反应 4h,， 用饱和氯化铵溶液中止反应， 用二氯甲垸萃取， 用饱和氯化 钠水容易洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后，用乙醇重结晶，得黄色固体 0.67g，mpl45.0-147.9°C 1HNMR(CDCl3),6(ppm): 7.26 (s,lH); 7.24(s,lH); 7.19-7.11(m,3H); 6.77(d,lH) ； 6.63(s,lH) ； 6.40(d,lH) ； 6.27(t,2H) ； 6.01(s,lH) ； 3.84(s,3H) ； 2.44(s,3H) ； 2.33(s,3H) ； 2.26(s,3H) ； 2.17(s,3H) ； 2.15(s,3H)
13CNMR(CDC13), 6(ppm): 165.14； 156.37； 156.17； 149.17； 146.40； 140.36； 138.07； 136.01； 135.15； 134.01； 132.17； 130.19； 129.80； 129.23； 123.16； 122.89； 122.06； 116.97； 110.10； 55.59; 21.48； 17.53； 14.21； 13.09； 11.91
高分辨 MS: m/z: 486.2015 (理论值: 486.2018 ) 分子式： C28H29F3G4 实施例 22 (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3，7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 3-三氟甲氧 基苯酯 （5b-02)
操作同实施例 22， 然后柱层析（石油醚 60-90 °C : 乙酸乙酯 100: 1 )， 用乙醇 /乙酸乙酯重结 晶， 得黄色固体 330mg， mpl25.6-126.7°C
'HNMR(CDCl3),5(ppm): 7.43 (t,lH); 7.24(s,lH); 7.10-7.06(m,3H); 6.78(d,lH) ； 6.63(s,lH) ； 6.44(d,lH) ； 6.31(t,2H) ； 6.00(s,lH) ； 3.84(s,3H) ； 2.45(s,3H) ； 2.33(s,3H) ； 2.26(s,3H) ； 2.17(s,3H) ； 2.15(s,3H) "CNMR(CDC13)， S(ppm): 164.84； 156.37； 151.65 ; 149.66； 140.42； 138.09； 136.03； 135.14； 134.03； 132.25； 130.19； 129.82； 129.25； 122.91； 120.44； 117.85； 116.88； 115.19； 110.11； 55.62； 21.50； 17.55； 14.26； 13.12； 11.93
高分辨 MS: m/z: 486.2014 (理论值: 486.2018 ) 分子式： C28H29F304 实施例 23 (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 （3-三氟甲氧 基苯基) -酰胺 （6b-01 )
反应瓶中， 加入依曲替酸 0.5g,甲苯 10ml， 然后滴加入三氯化磷 0.19ml， 然后于室温条 件下搅拌 2小时，将该溶液滴加入冷却条件下的间三氟甲氧基苯胺 0.27g和 6ml吡啶的溶液 中， 加毕后室温搅拌反应 5小时， 然后将反应液倾入碎冰中，， 用二氯甲烷萃取三次， 有机 层用饱和碳酸氢钠洗涤， 水洗涤至中性， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓缩至干， 柱层析
(硅胶柱 100-200 目） ，流动相 （石油醚 60-90°C :乙酸乙酯 =20: 1 )， 收率流分， 浓缩后， 得用甲醇重结晶， 得黄色产物 0.20g.
'HNMR(CDCl3),5(ppm) : 7.64 (s,lH) ; 7.38(d,lH) ; 7.31(t,l H) ; 7.21(s,lH) ； 7.06(q,lH) ； 6.97(d,lH) ； 6.73(d,l H) ； 6.62(s,lH) ； 6.34(d,lH) ； 6.23(q,2H) ； 5.80(s,lH) ； 3.83(s,3H) ； 2.46(s,3H) ； 2.32(s,3H) ； 2.25(s,3H) ； 2.17(s,3H) ； 2.13(s,3H) 实施例 24 (全 -反式)- 9- (4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 （2-三氟甲氧 基苯基) -酰胺 （6b-02 )
操作同实施例 23. 实施例 25 (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 （4-三氟甲氧 基苯基) -酰胺 （6b-03 )
操作同实施例 23. 实施例 26 (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 （4-轻基 -3-三 氟甲基苯基) -酰胺 （7b-01 )
反应瓶中， 加入依曲替酸 0.5g,甲苯 10ml， 然后滴加入三氯化磷 0.19ml， 然后于室温条 件下搅拌 2小时， 将该溶液滴加入冷却条件下的 4-羟基 -3-三氟甲基苯基胺 0.27g和 6ml吡 啶的溶液中， 加毕后室温搅拌反应 5小时， 然后将反应液倾入碎冰中，， 用二氯甲垸萃取三 次， 有机层用饱和碳酸氢钠洗涤， 水洗涤至中性， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓缩至干， 柱层析 （硅胶柱 100-200目） ，流动相 （石油醚 60-90Ό :乙酸乙酯 =5 : 1 )， 收率流分， 浓缩 后， 得用甲醇重结晶， 得黄色产物 0.20g. 实施例 27 (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3，7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 （4-羟基 -2-三 氟甲基苯基) -酰胺 （7b-02 )
操作同实施例 26. 实施例 28 类维甲酸衍生物对肺癌细胞 A549， HepG2生物活性测定
1 材料与方法
1.1试剂 维甲酸衍生物 12种由安徽医科大学药学院合成， 用二甲基亚砜 （DMSO ) 与无 水乙醇配制成终浓度为 lug/ml， lOug/ml, 分装后于 -20°C保存。 使用时避光， DMSO的终 浓度 < 0.1 %。 MTT购自 Sigma公司。 Coulter DNA检测试剂盒由安徽省立医院中心实验室 馈赠。 AFP、Y-GT由解放军 105医院检验科提供。细胞凋亡 -Hoechst染色试剂盒购自 Beyotime 公司 。
1.2 细胞培养人肝癌 A549， HepG2细胞由本实验室保存，细胞生长条件 DMEM ( GIBICO 公司）培养液加入 10%小牛血清（血清购杭州四季青生物公司）培养于 37°C、 5 %C02、 饱 和湿度的细胞培养箱中。
1.3细胞生长和增殖实验 采用 MTT法。 取对数生长期细胞以 5x l07 / L细胞浓度种于 96 孔培养板， 200μ1 /孔， 待贴壁， 次日弃去原液加入培养液， 按其浓度分 lug/ml、、 5ug/mK 10ug/ml及空白对照组、 细胞对照组、 溶剂对照组 （1%。的 DMSO及无水乙醇） 共 17组， 孵育 3d后加入 20μ1 /孔 MTT ( 5g / L ) 37°C温育 4h， 小心弃去原液， 控干， 加入 200μ1/ 孔 DMSO溶解结晶物， 振荡 10min， 于 570nm测定 OD值。 每浓度设 5个复孔， 每组取 3 次实验的平均值， 根据各组中各孔吸光度平均值 （OD ) ， 按照如下公式计算细胞生长的抑 制率： 抑制率％= (对照孔 OD57Q-试验孔 OD57G ) /对照孔 OD57Qx 100%。 重复三次。 第二 次实验取最高浓度 ΙΟμπιοΙ / L分别以 1， 2， 3， 7天培养， 重复三次。
1.4流式细胞术检测细胞周期和凋亡 收集处于对数生长期的 A549细胞， 调整细胞密度为 8 x l07 / L, 接种于六孔板中， 37 Ό、 5 %C02 培养箱培养， 待细胞贴壁后弃去培养液， 加 入含有相应浓度药物的培养液，分 10μ§ I ml加药组， 10 μΕ I ml芬维 A胺组及细胞对照组、 溶剂对照组（1%。的 DMSO及无水乙醇）共 11组， 3d后常规消化收集各组细胞并吹打成单 细胞悬液， 冷 PBS洗 2次后， 用 lOO^PBS重悬， 按 Coulter DNA检测试剂盒加入固定破膜 剂和 PI染液， 室温避光反应 30 min后上机检测， 每个标本检测 10 000个细胞， 重复计数 3 次， 资料由 Analysis软件分析 Go-G^ S、 G2-M期比例和凋亡细胞比例。
1.5 A549, HepG2细胞形态学观察 10μ§ I ml芬维 A胺衍生物作用细胞瓶中细胞三天， 三 天后光镜下观察细胞形态变化并摄片， 并设 10μ§ / ml芬维 A胺对照组及细胞对照组、溶剂 对照组。
1.6分化指标的检测 将培养的 A549细胞随机分为 6种 10μ§ I ml加药组和细胞对照组、 溶剂对照组 (DMSO,乙醇)以及 lO g/ml芬维 A胺对照组 (共 1 1组)。 对照组和加药组均培养 三天， 收集加药组和对照组细胞培养液各 3管， 培养液经 4 000 r/min 离心 5min后， 取上 清， 采用酶动力学法和 CEA测定试剂盒测 CEA含量。
2 结果
2.1 lug/ml、、 5ug/ml、 10ug/ml对 A549增殖的影响 见表 1。
表 1 对 A549增殖的影响
组别 浓度 OD值 （Ϊ ± s 抑制率
6a-02 ( D) l ug/ml 1.614士 0.146 0.135
5ug/ml 1.580±0.096 0.154
lOug/ml 1.498±0.218 0.197
3a-01 ( D) l ug/ml 1.517±0.100 0.187
5ug/ml 1.357±0.159 0.273
l Oug/ml 1.296±0.192 0.305
6a-01 ( D) l ug/ml 1.637±0.146 0.123
5ug/ml 1.613±0.120 0.136
l Oug/ml 1.362±0.077 0.270
3a-02 ( D ) l ug/ml 1.551士 0.083 0.169
5ug/ml 1.510士 0.193 0.191
lOug/ml 0.939±0.040 0.497
2a-02 ( D) 1.735士 0.048 0.070
5ug/ml 1.621±0.070 0.131
lOug/ml 1.580±0.207 0.144
5a-02 ( D) I .843±0.179 0.012
5ug/ml 1.817±0.142 0.027
l Oug/ml 1.689士 0.154 0.095
2a-01 (乙醇） 1.878±0.158 -0.006
5ug/ml 1.487±0.175 0.203
l Oug/ml 1.458±0.066 0.219 2a-03 (乙醇） 1 ug/ml 1 .639±0.1 15 0.122
5ug/ml 1.555士 0.162 0.167
l Oug/ml 1.382±0.133 0.260
5a-01 (乙醇） l ug/ml 1.962±0.225 -0.051
5 ug/ml 1.754±0.138 0.060
lOug/ml 1.732±0.317 0.072
4a-02 ( D) l ug/ml 1.644±0.272 0.1 19
5 ug/ml 1.618±0.087 0.133
lOug/ml 1.026士 0.0.069 0.450
4a-01 ( D) l ug/ml 2.020士 0.317 , -0.083
5 ug/ml 1.979±0.138 -0.060
lOug/ml 1.808±0.143 0.031
对照组 1.866士 0.073
D SO 1.830士 0.099 0.019
乙醇 1.805±0.086 0.033
芬维 A胺 (DMSO) 1.724±0.080 0.076
芬维 A胺 (乙醇） 1.710±0.056 0.083
由上表可以看出每种衍生物对肺癌细胞均有不同程度的抑制作用。
随后选取了六种作用比较明显的又按时间梯度重复了三次 MTT， 浓度为 lOug/ml, 结 果见表 2。
表 2 对 A549增殖的影响 组别 时间 OD值 （S ± s ) 抑制率
6a-02(l) Id 0.774d=0.030 0.156
( 10ug/ml ) 2d 1.065±0.045 0.272
3d 0.408士 0.028 0.561
7d 0.666士 0.049 0.679
3a-01(2) Id 0.680±0.055 0.258
( 10ug/ml ) 2d 1.042±0.046 0.288
3d 0.623±0.006 0.328
7d 1.325±0.028 0.361
6a-01(3) Id 0.646±0.019 0.296
( lOug/ml ) 2d 0.909±0.065 0.378
3d 0.567士 0.057 0.389
7d 1.243±0·024 0.401
3a-02(4) - I d 0.617±0.072 0.327
( lOug/ml ) 2d 0.703±0.025 0.519
3d 0.229±0.010 0.753
7d 0.106士 0.035 0.949
2a-03(8) I d 0.902±0.055 0.016
( lOug/ml ) 2d 1.066±0.015 0.271
3d 0.635±0.033 0.315
7d 1.393士 0.043 0.328
4a-02(l l) Id 0.815±0.045 0.1 1 1
( lOug/ml ) 2d 1.176±0.021 0.196
3d 0.720±0.025 0.223
7d 1.144±0.150 0.448
CELL I d 0.917±0.048 0.000
2d 1.463±0.086 0.000
3d 0.927±0.045 0.000
7d 2.074±0.053 0.000
DMSO I d 0.913±0.039 0.004
2d 1.289±0.088 0.1 19
3d 0.832±0.049 0.102 7d 1.821 ±0.144 0.122 乙醇 I d 0.902±0.037 0.017
2d 1.442士 0.030 0.014
3d 0.916±0.027 0.012
7d 2.041 ±0.1 15 0.016 芬维 A胺 (DMSO) Id 0.883±0.062 0.037
2d 1.360±0.052 0.070
3d 0.845±0.034 0.089
7d 1.835±0.030 0.1 15 芬维 A胺 (乙醇） I d 0.887±0.057 0.033
2d 1.333±0.046 0.089
Figure imgf000025_0001
1.32±0.50 0.22 0.86士 0.13 0.49
4a-01 1.72士 0.44 -0.009
1.63±0.36 0.04 1.57±0.30 0.07 对照组 1.70±0.51
DMSO 1.45±0.42 0.14 乙醇 1.56士 0.40 0.08 芬维 A胺 (DMSO) 1 ·27±0.25 0.25
芬维八胺(乙醇） 1.28±0.21 0.24 由上表可以看出每种衍生物对肝癌细胞均有不同程度的抑制作用。
随后选取了六种作用比较明显的又按时间梯度重复了三次 ΜΤΤ， 浓度为 lOug/ml, 结 果见表 4。
表 4 对 HepG2增殖的影响 组别 时间 OD值 x ± s ) 抑制率
6a-02(l)* I d 1.60±0.19 0.07
( 10ug/ml ) 2d 1.14±0.09 0.32
3d 0.81±0.12 0.34
7d 0.49±0.32 0.63
3a-01(2) Id 1.52±0.13 0.12
( 10ug/ml ) 2d 0.71 ±0.02 0.42
3d 0.77±0.03 0.54
7d 0.30±0.08 0.77
6a-01(3) Id 1.28±0.07 0.06
( l Oug/ml ) 2d 1.55±0.1 1 0.10
3d 1.24士 0.18 0.26
7d 0.62±0.13 0.50
3a-02(4)* Id 1.43±0.07 0.17
( lOug/ml ) 2d 0.81±0.12 0.52
3d 0.55±0.03 0.55
7d 0.32±0.12 0.76
2a-03(8) Id l .61±0.14 0.07
( lOug/ml ) 2d 1.55±0.09 0.08
3d 1.24±0.09 0.09
7d 0.79±0.08 0.36
4a-02(l l)* Id 1.53士 0.27 0.11
( lOug/ml ) 2d 1.36±0.13 0.20
3d 0.74士 0.08 0.46
7d 0.70±0.05 0.48
CELL Id 1.78±0.07 1
2d 1.70±0.12 1
3d 1.24±0.13 1
7d 1.37士 0.07 1
DMSO Id 1.70士 0.12 0.04
2d ,1.68±0.07 0.01
3d 1.09士 0.07 0.12
7d 1.25±0.19 0.08
乙醇 Id 1.68±0.07 0.05
2d 1.67±0.05 0.01
3d 1.19士 0.07 0.03
7d 1.3 U0.09 0.04
芬维 A胺 (DMSO) Id 1.61±0.16 0.09
2d 1.37±0.07 0.19
3d 1.07±0.20 0.13
7d 1.17±0.06 0.14
芬维 A胺 (乙醇） Id 1.67士 0.05 0.05
2d 1.31 ±0.09 0.22
3d 1.06±0.09 0.14 最后我们又选取了 3天作为后续实验的作用时间， MTT重复两次结果见表 对 HepG2增殖的影响 组别 浓度 OD值 (x ± s ) 抑制率
对照组 2.167±0.205 0.000
DMSO 1.849±0.072 0.146
乙醇 1.938±0.123 0.105
芬维 A胺 (DMSO) 1.469±0.078 0.322*
芬维 A胺 (乙醇） 1.422±0.123 0.343*
6a-02(DMSO) lOug/ml 1.125±0.146 0.480*
3a-01(DMSO) lOug/ml 0.978±0.072 0.548*
6a-01(DMSO) lOug/ml 1.163±0.102 0.463*
3a-02(DMSO) lOug/ml 1.331±0.067 0.385*
2a-03(DMSO) lOug/ml 1.847±0.091 0.468*
4a-02(乙醇） lOug/ml 1.409士 0.090 0.349*
*表示与细胞对照组比较有统计学意义 可以看出六种药物对于肝癌细胞的抑制作用均较好。
2. 3对 A549细胞 CEA分泌量的影响 结果如表 6所示， 选取六种 ATRA衍生物 (同前)进 行实验， 10ug/ml药物浓度作用三天， 然后取上清进行检测， 六种药物对于 CEA分泌量均 有影响。 表 6 对 A549细胞 CEA分泌量的影响
组别 CEA(ug/L)
CONTROL 5.8
DMSO 5.3
乙醇 ' 5.5
芬维 A胺 (DMSO) 4.5
芬维八胺(乙醇） 4.3
6a-02(DMSO) 3.5
3a-01(DMSO) 2.9
6a-01(DMSO) 2.9
3a-02(DMSO) 2.8
2a-03(乙醇） 3.9
4a-02(D SO) 3.1
2. 4 对 HepG2细胞 γ-GT比活性及 AFP分泌量的影响 如表 7所示， ATRA衍生物中 3a-01, 6a-01, 4a-02对于肝癌细胞 HepG2的 AFP分泌量影响均具有统计学意义， 六 种药物对于 r-GT分泌量均有影响。 表 7对 HepG2细胞 γ-GT比活性及 AFP分泌量的影响 组别 AFP(ug/L) r-GT(U/L)
CONTROL 16^8 71.0±1.0
DMSO 16.6 69.6±2.1
乙醇 16.5 69.0±1.0
芬维 A胺 (DMSO) 15· 1 66.6±0.5
芬维八胺(乙醇） 14.9 61.0±1.0* 6a-02(D SO) 15.6 42.3±2.0*
3a-01(D SO) 13.6* 52.3± 1.5*
6a-01(D SO) 13.6* 58.0±1.5*
3a-02(D SO) 15.6 35.6±1.0*
2a-03(DMSO) 14.7 60.6士 0.5*
4a-02(乙醇） 10.4* 32.6±1.5*
与对照组比较： '尸<0.05
2.5 对于 A549细胞细胞周期及凋亡的影响 见表 8
从表 8可以看出， 六种药物中 3a-02对于 A549细胞凋亡的影响最大 (
表 8对于 A549细胞细胞周期及凋亡的影响
组别 G0-G 1 ( % ) S ( ) G2-M ( % ) 凋亡率 （％) 细胞对照 80.1 15.1 2.20 2.95
溶剂对照 (DMSO) 66.3 25.7 2.66 5.83
溶剂对照 （乙醇） 67.9 22.9 2.92 6.47
芬维 A胺 (DMSO) 47.2 22.2 2.09 29.3
芬维八胺(乙醇） 59.3 24.5 2.63 14.0
l(6a-02) 70.0 19.0 1.71 9.79
2(3a-01) 55.6 , 24.9 2.41 17.6
3(6a-01 ) 40.1 ' 27.9 2.34 30.5
4(3a-02) 35.1 23.6 1.62 40.9
8(2a-03) 45.7 25.8 1.01 28.9
1 l'(4a-02) 44.1 29.4 1.90 23.9
2.6 对于 HepG2细胞细胞周期及凋亡的影响见表 9。
从表 9可以看出， 六种药物中 4a-02对于 HepG2细胞凋亡的影响最大。
表 9对于 HepG2细胞细胞周期及凋亡的影响
组别 G0-G 1 ( ) S ( % ) G2-M ( % ) 凋亡率 （％) 细胞对照 68.8 17.8 5.90 7.68
溶剂对照 (DMSO) 69.7 19.8 2.80 8.00
溶剂对照 （乙醇） 67.7 22.5 4.66 5.38
芬维 A胺 (DMSO) 67.3 19.8 7.64 5.71
芬维 A胺 (乙醇） 60.0 24.1 5.69 10.6
l(6a-02) 57.5 25.4 2.61 15.7*
2(3a-01 ) 56.3 24.8 4.14 16.5*
3(6a-01) 57.4 26.7 5.30 1 1.1
4(3a-02) 40.3 27.9 2.71 30.2*
8(2a-03) 57.3 25.5 3.40 16.3* l l(4a-02) 30.9 28.5 3.20 38.1 * 与正常组比较： P'<0.005
2. 7 A549细胞形态学变化（加药 l Oug/ml三天） 见图 1。
2.8 HepG2细胞凋亡 Hoechst33258染色结果 见图 2。 实施例 29、 类维甲酸衍生物对白血病细胞株 K562， ΝΒ4生物活性测定
材料
1.细胞株
Κ562细胞株， 购于中科院上海细胞库。
ΝΒ4细胞株， 为安徽医科大学第一附属医院血液内科实验室馈赠。
2·试剂
芬维 Α胺，维甲酸衍生物：由本实验室自己合成。
胎牛血清:杭州四季青生物工程材料有限公司
RPM1 1640培养粉： Gibco公司。 瑞式染色液： 弘慈医学化验所。
碘化丙啶（propidium Iodide, PI )： Sigma公司。
RNaseA : Sigma公司。
荧光标记单抗：包括抗人 CDllb/PE,抗体， 及相应同型对照抗体（IgGl/PE，均购自 Coulter— Immunotech (Paris, France)
3.仪器
C02培养箱： SHEL LAB
超净台： 苏州净化 SW-CJ-1F型单人双面净化台
离心机： Sigma 3-16K
流式细胞仪： EPICS XL-MCL
油镜： COIC XSZ-H
实验方法
1.制剂
维甲酸衍生物和芬维 A胺用无水乙醇配制成浓度为 lOmg/mL储存液， _20°C 避光保存。
2.细胞培养
NB4细胞、 K562细胞以 2 X 107 ml的起始浓度接种于含 10%胎牛血清（FBS) , 100u/ml青 霉素， 100Lg/ml链霉素和 2睡 ol/L谷胺酸氨的 RPMI 1640培养液中悬浮培养（37°C, 5 %C02)。 每 2— 3天换液。
3.细胞形态学观察
上述细胞经维甲酸衍生物和芬维 A胺（5mg/ml)作用 72h后收集， 离心后细胞涂片， 自然干 燥， 用瑞士蓝染色。 油镜下观察细胞形态
4.细胞周期分析
上述细胞经维甲酸衍生物和芬维 A胺 (5mg/Ml)作用 72h后， 收集约 106细胞， PBS清洗两次， 经 70%冷乙醇固定 24小时以上后， 再用 PBS清洗两次， 随后， 加入碘化丙啶 5ug /ml染色， 经 流式细胞仪检测后， 所得资料再经 muti-cycle软件分析处理。
5.流式细胞仪检测细胞分化抗原
NB4细胞在维甲酸衍生物和芬维 A胺（5mg/Ml)作用 72h后， 取 lxlO6细胞， PBS清洗两次.加 入荧光标记的抗人 CDl lb/PE抗体和相应的同型对照抗体， 于室温反应 30分钟. PBS清洗一次。 用流式细胞仪检测。
6. 结果
6. 1. 维甲酸衍生物对白血病细胞诱导分化的形态学变化
油镜下观察显示， 加入维甲酸衍生物处理后 NB4细胞的形态均有不同程度的改变， 表现 为胞体变小， 核 /浆比例减小， 胞浆内颗粒增多， 核变小且明显凹陷扭曲， 细胞形态似中、 晚幼粒细胞（图 3， 图 4)
6. 2. 维甲酸衍生物对白血病细胞株细胞周期的影响
FCM分析显示， 维甲酸衍生物作用后 G1期分布高于空白对照组， 而 S期分布低于空白 对照组。 （表 9， 表 10)
表 9维甲酸衍生物对 NB4细胞周期的影响
Group Gl % s % G2 空白对照 47.01 51.46 1.53
6a-02 75.47 19.01 5.52
6a-01 38.24 59.06 2.70
4a-02 52.59 39.73 7.68
5a-02 60.06 35.03 4.91
4a-01 59.15 33.78 7.07
2a-03 65.72 28.74 5.54 3a-02 45.83 51.30 2.87
5a-01 59.28 35.74 ' 4.98
' 芬维 A胺 63.25 33.72 4.03
表 10 维甲酸衍生物对 K562细胞周期的影响
Group G1 % S % G2 %
空白对照 32.4 60.8 6.8
6a-02 32.2 56.8 10.9
6a-01 34.2 56.4 9.4
4a-02 33.1 55.4 1 1.5
5a-02 38.2 54.2 7.7
4a-01 39.1 53.9 6.9
2a-03 45.1 47.3 7.6
3a-02 39.7 54.2 6.0
5a-01 32.6 55.0 12.5
2a-02 35.4 54.6 9.9
芬维 A胺 33.5 57.5 9.0
2a-01 36.1 51.4 12.5
6. 3.维甲酸衍生物对 NB4细胞表面分化抗原 CDllb的影响
不同的维甲酸衍生物处理 72h， NB4细胞 CDl lb表达与对照组相比明显增高。随着 CDl lb 表达量的增加， 说明 NB4细胞向成熟粒细胞方向分化 （图 5 )。 己经根据优选实施例对本发明作了描述。 应当理解的是前面的描述和实施例仅仅为了 举例说明本发明而已。 在不偏离本发明的精神和范围的前提下， 本领域技术人员可以设计 出本发明的多种替换方案和改进方案， 其均应被理解为在本发明的保护范围之内。

Claims

权利 要 求
1. 具有下式（I )所示的类维甲酸衍生物:
Figure imgf000031_0001
(I)
或者式（I )所示的类维甲酸衍生物的异构体、 对映体、 消旋体、 非对映体混合物、 外消旋 混合物、 溶剂化物、 多晶型物或药学上可接受的盐；
其中， R1代表式 ( II )或者式 (III)所示的结构， R2代表式 (IV)所示的结构；
Figure imgf000031_0002
表示连接位置; 其中：
R3〜R7相互间相同或者不同， 各自独立地选自氢、 硝基、 卤素、氨基、 酰基、 磺胺基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰基、 硫脲基、 氨基甲基、 氰基、 取代或 未取代的低级烷基、 取代或未取代的低级烯基、 取代或未取代的低级炔基、 取代或未取代 的低级垸氧基、 取代或未取代的低级烷氨基、 取代或未取代的低级垸巯基、 取代或未取代 的低级垸磺基、 取代或未取代的低级垸酰胺基、 取代或未取代的低级脂烯氧基、 取代或未 取代的低级脂炔氧基、 取代或未取代的脂环垸基、 取代或未取代的杂环垸基、 取代或未取 代的芳基、 取代或未取代的杂芳基、 取代或未取代的芳氧基、 取代或未取代的杂芳氧基、 取代或未取代的芳基羰基、 取代或未取代的杂芳基羰基、 取代或未取代的芳氧基羰基、 取 代或未取代的杂芳氧基羰基、 取代或未取代的芳氨基、 取代或未取代的杂芳氨基、 取代或 未取代的芳巯基、 取代或未取代的杂芳巯基；
R3，〜Rn，相互间相同或者不同， 各自独立地选自氢、 硝基、 卤素、 氨基、 酰基、 磺胺 基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰基、 硫脲基、 氨基甲基、 氰基、 取 代或未取代的低级烷基、 取代或未取代的低级烯基、 取代或未取代的低级炔基、 取代或未 取代的低级垸氧基、 取代或未取代的低级烷氨基、 取代或未取代的低级垸巯基、 取代或未 取代的低级垸磺基、 取代或未取代的低级烷酰胺基、 取代或未取代的低级脂烯氧基、 取代 或未取代的低级脂炔氧基、 取代或未取代的脂环烷基、 取代或未取代的杂环烷基、 取代或 未取代的芳基、 取代或未取代的杂芳基、 取代或未取代的芳氧基、 取代或未取代的杂芳氧 基、 取代或未取代的芳基羰基、 取代或未取代的杂芳基羰基、 取代或未取代的芳氧基羰基、 取代或未取代的杂芳氧基羰基、 取代或未取代的芳氨基、 取代或未取代的杂芳氨基、 取代 或未取代的芳巯基、 取代或未取代的杂芳巯基； R9〜！ 13 相互间相同或者不同， 各自独立地选自卤代垸基、 卤代垸氧基、 氢、 硝基、 卤素、 氨基、 酰基、 磺胺基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰基、 硫脲 基、 氨基甲基、 氰基、 取代或未取代的低级垸基、 取代或未取代的低级烯基、. 取代或未取' 代的低级炔基、 取代或未取代的低级垸氧基、 取代或未取代的低级垸氨基、 取代或未取代 的低级垸巯基、 取代或未取代的低级垸磺基、 取代或未取代的低级垸酰胺基、 取代或未取 代的低级脂烯氧基、 取代或未取代的低级脂炔氧基 取代或未取代的脂环烷基、 取代或未 取代的杂环垸基、 取代或未取代的芳基、 取代或未取代的杂芳基、 取代或未取代的芳氧基、 取代或未取代的杂芳氧基、 取代或未取代的芳基羰基、 取代或未取代的杂芳基羰基、 取代 或未取代的芳氧基羰基、 取代或未取代的杂芳氧基羰基、 取代或未取代的芳氨基、 取代或 未取代的杂芳氨基、 取代或未取代的芳巯基、 取代或未取代的杂芳巯基；
Z为 0、 S或者 NR14， 其中 R14选自氢、 取代或者未取代的低级烷基、 取代或未取代 的低级烯基、 取代或未取代的低级炔基、 取代或未取代的脂环烷基、 取代或未取代的杂环 垸基、 取代或未取代的芳基、 取代或未取代的杂芳基；
条件是： R9〜！ 13中至少之一为卤代烷基或者卤代垸氧基。
2、 如权利要求 1所述的类维甲酸衍生物， 其中， R3和 R7相同或者不同， 分别是取代或未 取代的低级垸基， R4和 R6相同或者不同， 分别选自氢、 取代或未取代的低级烷基、 取代 或未取代的低级烷氧基、 取代或未取代的低级脂烯氧基、 硝基、 氨基、 低级垸基取代氨基、 取代或未取代的氮杂环基， R5 为取代或未取代的低级垸氧基， 所述的低级是指含 1〜5个 碳原子， 取代时取代基选自硝基、 卤素、 氨基、 酰基、 磺胺基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰基、 硫脲基、 氨基甲基或氰基。
3、 如权利要求 2所述的类维甲酸衍生物， 其中， R3， R7， R4是甲基时， R5是甲氧基， R6 是氢。
4、 如权利要求 1所述的类维甲酸衍生物， 其中， R3'和 R4'相同或者不同， 分别是取代或未 取代的低级烷基， R5'〜R1()'相同或者不同， 分别选自氢、 取代或未取代的低级垸基、 取代 或未取代的低级垸氧基、 取代或未取代的低级脂烯氧基、 硝基、 氨基、 低级烷基取代氨基、 取代或未取代的氮杂环基， Rn'为氢、取代或未取代的低级垸基、取代或未取代的低级烯基、 取代或未取代的低级垸氧基， 所述的低级是指含 1〜5个碳原子， 取代时取代基选自硝基、 卤素、 氨基、 酰基、 磺胺基、 羧基、 羧酸酯基、 酰胺基、 腈基、 羟基、 氨基甲酰基、 硫脲 基、 氨基甲基或氰基。
5、 如权利要求 4所述的类维甲酸衍生物， 其中 R3'、 R4'均是甲基， R5'〜R10'均是氢， Rn' 为甲基。
6、 如权利要求 1所述的类维甲酸衍生物， 其中， R9、 RIO, Rl l、 R12、 R13相同或者不同， 分别独立地选自三氟甲基、 三氟甲氧基、 氢、 卤素、 羟基、 取代或未取代的低级垸基、 取 代或未取代的低级烷氧基、 取代或未取代的低级脂烯氧基、 羧酸、 羧酸酯、 酰胺、 腈基、 硝基、 氨基、 取代或未取代的低级烷基取代氨基、 氮杂环基， 条件是 R9、 RIO, Rll、 R12、 R13中之一为三氟甲基或者三氟甲氧基。
7、 如权利要求 1所述的类维甲酸衍生物， 其为盐的形式， 所述的盐包括但不限于盐酸盐， 氢溴酸盐， 萘二磺酸盐，磷酸盐， 硝酸盐， 硫酸盐， 草酸盐， 酒石酸盐， 乳酸盐， 水杨酸盐， 苯甲酸盐， 甲酸盐， 乙酸盐， 丙酸盐， 戊酸盐， 二乙基乙酸盐， 丙二酸盐， 琥珀酸盐， 富 马酸盐， 丁二酸盐， 庚二酸盐， 己二酸盐， 马来酸盐， 苹果酸盐， 氨基磺酸盐， 苯丙酸盐， 葡糖酸盐， 抗坏血酸盐， 异烟酸盐， 甲磺酸盐， 对甲苯磺酸盐， 柠檬酸盐， 或者氨基酸盐 (
8、 如权利要求 1所述的类维甲酸衍生物， 其为：
(全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2，6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲基苯酯；
(全-反式) - 3,7-二甲基 -9- (2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 3-三氟甲基苯酯；
(全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 2-三氟甲基苯酯；
(全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6，6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 （4-三氟甲基苯基)-酰胺； (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6，6-三甲基环己烯 )-2,4,6，8-壬四烯酸 （3-三氟甲基苯基)-酰胺； (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2，6,6-三甲基环己烯 )-2，4,6,8-壬四烯酸 4-氨基 -3-三氟甲基苯酯； (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6，6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 4-氨基 -2-三氟甲基苯酯； (全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲氧基苯酯；
(全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2，6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 3-三氟甲氧基苯酯；
(全 -反式)- 3,7-二甲基 -9-(2，6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸 （4-三氟甲氧基苯基)-酰胺； (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6，6-三甲基环己烯 )-2，4，6，8-壬四烯酸 （3-三氟甲氧基苯基) -酰胺； (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸（4-羟基 -3-三氟甲基苯基)-酰胺； (全-反式) - 3,7-二甲基 -9-(2,6,6-三甲基环己烯 )-2,4,6,8-壬四烯酸（4-羟基 -2-三氟甲基苯基)-酰胺； (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2，3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 3-三氟甲基苯酯； (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3，7-二甲基 -2,4,6，8-壬四烯酸 2-三氟甲基苯酯； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲基苯酯； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2，3，6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸（3-三氟甲氧基苯基)-酰胺； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3，7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸（2-三氟甲氧基苯基)-酰胺； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 4-氨基 -3-三氟甲基苯酯； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3，7-二甲基 -2,4,6，8-壬四烯酸 4-氨基 -2-三氟甲基苯酯； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 4-三氟甲氧基苯酯； (全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2，3，6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 3-三氟甲氧基苯酯； (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2，3,6-三甲苯基) -3，7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸（3-三氟甲氧基苯基) -酰胺 (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸（2-三氟甲氧基苯基) -酰胺 (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸（4-三氟甲氧基苯基) -酰胺 (全-反式) - 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 （4-羟基 -3-三氟甲基苯 基) -酰胺；
(全 -反式)- 9-(4-甲氧基 -2,3,6-三甲苯基) -3,7-二甲基 -2,4,6,8-壬四烯酸 （4-羟基 -2-三氟甲基苯 基) -酰胺。
9、 一种药物组合物， 其包含治疗有效量的权利要求 1一 8任一项所述的类维甲酸衍生物或 其异构体、 对映体、 消旋体、 非对映体混合物、 外消旋混合物、 溶剂化物、 多晶型物或药 学上可接受的盐作为有效成分， 以及药学上可接受的辅料。
10、 权利要求 1一 8任一项所述的类维甲酸衍生物或其异构体、 对映体、 消旋体、 非对映体 混合物、 外消旋混合物、 溶剂化物、 多晶型物或药学上可接受的盐在制备药物的应用， 其 中所述的药物具有能够： 预防或治疗血液系统肿瘤、 实体肿瘤、 皮肤病。
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