WO2009093713A1 - ペグ修飾ハイドロキシアパタイト及びそれを基材とする医薬とその製造方法 - Google Patents
ペグ修飾ハイドロキシアパタイト及びそれを基材とする医薬とその製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- WO2009093713A1 WO2009093713A1 PCT/JP2009/051122 JP2009051122W WO2009093713A1 WO 2009093713 A1 WO2009093713 A1 WO 2009093713A1 JP 2009051122 W JP2009051122 W JP 2009051122W WO 2009093713 A1 WO2009093713 A1 WO 2009093713A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- substance
- peg
- active pharmaceutical
- pharmaceutical ingredient
- hap
- Prior art date
Links
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical class [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 title claims abstract description 26
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 title description 9
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 116
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims abstract description 34
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 34
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 33
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 claims abstract description 18
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims abstract description 12
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims abstract description 11
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims abstract description 9
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 claims description 49
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 29
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 26
- 229960004130 itraconazole Drugs 0.000 claims description 16
- 229960002626 clarithromycin Drugs 0.000 claims description 15
- AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N clarithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@](C)([C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)OC)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N 0.000 claims description 15
- VHVPQPYKVGDNFY-DFMJLFEVSA-N 2-[(2r)-butan-2-yl]-4-[4-[4-[4-[[(2r,4s)-2-(2,4-dichlorophenyl)-2-(1,2,4-triazol-1-ylmethyl)-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]piperazin-1-yl]phenyl]-1,2,4-triazol-3-one Chemical compound O=C1N([C@H](C)CC)N=CN1C1=CC=C(N2CCN(CC2)C=2C=CC(OC[C@@H]3O[C@](CN4N=CN=C4)(OC3)C=3C(=CC(Cl)=CC=3)Cl)=CC=2)C=C1 VHVPQPYKVGDNFY-DFMJLFEVSA-N 0.000 claims description 14
- 239000002053 C09CA06 - Candesartan Substances 0.000 claims description 14
- 229960000932 candesartan Drugs 0.000 claims description 14
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 13
- GHOSNRCGJFBJIB-UHFFFAOYSA-N Candesartan cilexetil Chemical compound C=12N(CC=3C=CC(=CC=3)C=3C(=CC=CC=3)C3=NNN=N3)C(OCC)=NC2=CC=CC=1C(=O)OC(C)OC(=O)OC1CCCCC1 GHOSNRCGJFBJIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229960004349 candesartan cilexetil Drugs 0.000 claims description 7
- RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N SJ000286063 Natural products C12C(OC(=O)C(C)(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 claims description 6
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 claims description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- NQHXCOAXSHGTIA-SKXNDZRYSA-N nelfinavir mesylate Chemical compound CS(O)(=O)=O.CC1=C(O)C=CC=C1C(=O)N[C@H]([C@H](O)CN1[C@@H](C[C@@H]2CCCC[C@@H]2C1)C(=O)NC(C)(C)C)CSC1=CC=CC=C1 NQHXCOAXSHGTIA-SKXNDZRYSA-N 0.000 claims description 6
- 229960005230 nelfinavir mesylate Drugs 0.000 claims description 6
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 claims description 6
- 229960002855 simvastatin Drugs 0.000 claims description 6
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 5
- FJHBVJOVLFPMQE-QFIPXVFZSA-N 7-Ethyl-10-Hydroxy-Camptothecin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CC)=C(CN3C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=C33)=O)C3=NC2=C1 FJHBVJOVLFPMQE-QFIPXVFZSA-N 0.000 claims description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 3
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims description 3
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 claims description 3
- IRHXGOXEBNJUSN-YOXDLBRISA-N Saquinavir mesylate Chemical compound CS(O)(=O)=O.C([C@@H]([C@H](O)CN1C[C@H]2CCCC[C@H]2C[C@H]1C(=O)NC(C)(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)C=1N=C2C=CC=CC2=CC=1)C1=CC=CC=C1 IRHXGOXEBNJUSN-YOXDLBRISA-N 0.000 claims description 3
- 229960002802 bromocriptine Drugs 0.000 claims description 3
- OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N bromocriptine Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@]2(C(=O)N3[C@H](C(N4CCC[C@H]4[C@]3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=C(Br)NC3=C1 OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N 0.000 claims description 3
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims description 3
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 claims description 3
- 229960003542 saquinavir mesylate Drugs 0.000 claims description 3
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 claims description 3
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 38
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 29
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 28
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 20
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 18
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 18
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 18
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- HTQMVQVXFRQIKW-UHFFFAOYSA-N candesartan Chemical compound CCOC1=NC2=CC=CC(C(O)=O)=C2N1CC(C=C1)=CC=C1C1=CC=CC=C1C1=NN=NN1 HTQMVQVXFRQIKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 14
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 11
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 10
- 229940090044 injection Drugs 0.000 description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 8
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 7
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 7
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 7
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052586 apatite Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 6
- VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;fluoride;triphosphate Chemical compound [F-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 5
- -1 isocyanate compound Chemical class 0.000 description 5
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 4
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 230000031891 intestinal absorption Effects 0.000 description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 4
- 239000013557 residual solvent Substances 0.000 description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006087 Silane Coupling Agent Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 3
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 239000006104 solid solution Substances 0.000 description 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005653 Brownian motion process Effects 0.000 description 2
- 229910014497 Ca10(PO4)6(OH)2 Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 2
- 238000005537 brownian motion Methods 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 238000000942 confocal micrograph Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012921 fluorescence analysis Methods 0.000 description 2
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 229920001002 functional polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 2
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 2
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 2
- 229960001008 heparin sodium Drugs 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 2
- VHVPQPYKVGDNFY-ZPGVKDDISA-N itraconazole Chemical compound O=C1N(C(C)CC)N=CN1C1=CC=C(N2CCN(CC2)C=2C=CC(OC[C@@H]3O[C@](CN4N=CN=C4)(OC3)C=3C(=CC(Cl)=CC=3)Cl)=CC=2)C=C1 VHVPQPYKVGDNFY-ZPGVKDDISA-N 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 2
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 2
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 2
- 235000020925 non fasting Nutrition 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 2
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IDRYSCOQVVUBIJ-UHFFFAOYSA-N Erythromycin-B Natural products CC1C(OC2C(C(CC(C)O2)N(C)C)O)C(C)(O)CC(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)C(CC)OC(=O)C(C)C1OC1CC(C)(OC)C(O)C(C)O1 IDRYSCOQVVUBIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005057 Hexamethylene diisocyanate Substances 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001662443 Phemeranthus parviflorus Species 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 229910004283 SiO 4 Inorganic materials 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 229910021536 Zeolite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000692 cap cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 1
- KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N chondroitin sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(O)=O)O1 KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002485 combustion reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- IDRYSCOQVVUBIJ-PPGFLMPOSA-N erythromycin B Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)C)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 IDRYSCOQVVUBIJ-PPGFLMPOSA-N 0.000 description 1
- 229940075383 etoposide injection Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- RRAMGCGOFNQTLD-UHFFFAOYSA-N hexamethylene diisocyanate Chemical compound O=C=NCCCCCCN=C=O RRAMGCGOFNQTLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000010954 inorganic particle Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 229960003088 loratadine Drugs 0.000 description 1
- JCCNYMKQOSZNPW-UHFFFAOYSA-N loratadine Chemical compound C1CN(C(=O)OCC)CCC1=C1C2=NC=CC=C2CCC2=CC(Cl)=CC=C21 JCCNYMKQOSZNPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEIPGWUDWZJWLR-UHFFFAOYSA-N methanol;n-propan-2-ylpropan-2-amine Chemical compound OC.CC(C)NC(C)C LEIPGWUDWZJWLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 239000013081 microcrystal Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011858 nanopowder Substances 0.000 description 1
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010457 zeolite Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
- A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Definitions
- the drug-carrying microparticles can be effectively used for oral, intravenous, subcutaneous, transpulmonary, and nasal administration by adjusting the size of the drug or by appropriately modifying the microparticles. . Functionally, it can be effectively used for selective delivery of drugs to the liver, lungs or inflammatory sites, release control, masking of unpleasant taste or improvement of intestinal absorption.
- fine particles, liposomes, polymer micelles, protospheres (registered trademark), resins or inorganic particles such as silica gel, zeolite, hydroxyapatite (inorganic microspheres, nanospheres) are known.
- the present invention relates to a novel peg-modified hydroxyapatite (hereinafter abbreviated as PEG-modified HAP) obtained by modifying a hydroxyapatite surface with polyethylene glycol (hereinafter abbreviated as PEG or PEG), and its use and production method.
- PEG-modified HAP novel peg-modified hydroxyapatite obtained by modifying a hydroxyapatite surface with polyethylene glycol (hereinafter abbreviated as PEG or PEG), and its use and production method.
- HAP Hydroxyapatite
- a medical base material such as a bone or tooth filling material, a column filler, a drug transporter, or a cell culture platform.
- it is required to chemically modify the surface with a functional polymer or a physiologically active substance.
- the hydroxyl groups on the surface of HAP that serve as a foothold are low in reactivity, and it is difficult to uniformly bind organic compounds such as functional polymers and physiologically active substances.
- the present invention provides a highly safe PEG-modified HAP having a new function by modifying the surface of hydroxyapatite particles with a polyethylene glycol derivative without using a bifunctional linker, and in addition, uses thereof And a manufacturing method thereof.
- the present inventors have conducted intensive studies and have determined that polyethylene glycol is bonded to the surface of HAP with —O (CO) using a polyethylene glycol derivative having a carboxyl group as a terminal functional group.
- DDS drug delivery system
- various drugs are loaded on the novel PEG-modified HAP can be effectively used for oral, intravenous, subcutaneous, pulmonary, and nasal dosage forms.
- the drug can be effectively applied to selective delivery of the drug to the liver, lungs or inflamed sites, release control, masking of unpleasant taste or improvement of intestinal absorption.
- This PEG-modified HAP can be expected to have characteristics such as retention in blood as well as maintaining high mechanical strength inherent to apatite and adsorbability of various substances. Therefore, it can be widely used as a DDS carrier, a column filler for chromatography, an ion exchange medium, a cell culture substrate, an implant, and the like.
- the present invention provides the following (1) to (26).
- (1) A mixture of hydroxyapatite having a particle size of 50 ⁇ m to 10 nm and a polyethylene glycol derivative having a carboxyl group as a terminal functional group, and having a carbon content of 10 to 0.1%.
- (2) A substance having a carbon content of 10 to 0.1%, wherein hydroxyapatite having a particle size of 50 ⁇ m to 10 nm is bonded with a polyethylene glycol derivative having a carboxyl group as a terminal functional group by —O (CO).
- Consists of the substance described in (1) and active pharmaceutical ingredient and consists of a substance having a weight ratio of active pharmaceutical ingredient of 1 to 30%, or consists of the substance described in (1), active pharmaceutical ingredient and pharmaceutical additive Substances with an active pharmaceutical ingredient weight ratio of 1-30%.
- Consisting of the substance described in (2) above and a pharmaceutical active ingredient wherein the weight ratio of the pharmaceutical active ingredient is 1 to 30%, or consisting of the substance described in (2) above, a pharmaceutical active ingredient and a pharmaceutical additive Substances with an active pharmaceutical ingredient weight ratio of 1-30%.
- the active pharmaceutical ingredient has a sequence 5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3 '(SEQ ID NO: 1) 5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3 '(SEQ ID NO: 2) The substance according to (3) or (4) above, which is a double helix siRNA.
- the active pharmaceutical ingredient has a sequence 5'-CUUACGCUGAGUACUUCGATT-3 '(SEQ ID NO: 3) 5'-UCGAAGUACUCAGCGUAAGTT-3 '(SEQ ID NO: 4) The substance according to (3) or (4) above, which is a double helix siRNA.
- the following effects can be achieved.
- a poorly soluble pharmaceutical substance can be handled like a soluble substance by using the PEG-modified HAP of the present invention as a base material, which facilitates drug administration into the body, and further in the body blood The retention is improved.
- Aggregation of HAP particles can be prevented by PEGylation of the HAP surface.
- HAP whose surface is PEGylated as a base material, it is possible to prevent aggregation of particles even for HAP particles loaded with an active ingredient.
- FIG. 3 is a graph showing the particle size distribution of the PEG-modified HAP of Example 1.
- the graph which shows the particle size distribution of the pharmaceutical which consists of PEG modification HAP of Example 2 and clarithromycin.
- the graph which shows the elution density
- FIG. 19 The graph which shows the density
- FIG. 20 The graph which shows the density
- FIG. 21 The graph which shows the density
- the present invention is a PEG-modified HAP having a high safety and a new function obtained by binding a polyethylene glycol derivative to the surface of a hydroxyapatite particle with a monofunctional polyethylene glycol derivative without using a bifunctional linker, and its It relates to uses and manufacturing methods.
- the HAP to be subjected to PEG modification may be a HAP solid having a large number of pores (pores) or a HAP having a very low porosity.
- HAP is a compound having a general composition of Ca 5 (PO 4 ) 3 OH, and CaHPO 4 , Ca 3 (PO 4 ) 2 , and Ca 4 O (PO 4 ) 2 depending on the non-stoichiometry of the reaction.
- 1 called calcium phosphate, such as Ca 10 (PO 4 ) 6 (OH) 2 , CaP 4 O 11 , Ca (PO 3 ) 2 , Ca 2 P 2 O 7 , Ca (H 2 PO 4 ) 2 H 2 O A group of compounds.
- HAP is based on a compound represented by the composition formula of Ca 5 (PO 4 ) 3 OH or Ca 10 (PO 4 ) 6 (OH) 2 , and a part of the Ca component contains Sr, Ba , Mg, Fe, Al, Y, La, Na, K, H, or the like may be substituted. Further, a part of the (PO 4 ) component may be substituted with one or more selected from VO 4 , BO 3 , SO 4 , CO 3 , SiO 4 and the like. Furthermore, a part of the (OH) component may be substituted with one or more selected from F, Cl, O, CO 3 and the like. Moreover, some of each of these components may be defective. Since some of the PO 4 and OH components of apatite in living bones are normally replaced with CO 3 , during the production of this composite biomaterial, mixing of CO 3 from the atmosphere and partial replacement with each component (About 0 to 10% by mass) may be present.
- the HAP may be an isomorphous solid solution, a substitutional solid solution, an interstitial solid solution, or a non-quantitative defect, in addition to normal microcrystals / amorphous crystals.
- the atomic ratio of calcium and phosphorus (Ca / P) is preferably in the range of 1.3 to 1.8, more preferably 1.5 to 1.7.
- the composition and crystal structure of apatite (calcium phosphate compound) in the product is similar to that of apatite present in vertebrate bone. This is because the biocompatibility is higher.
- HAP to be subjected to PEG modification can be prepared by a known method, but commercially available products such as Hydroxyapatite and nanopowder manufactured by Aldrich may be used.
- the “monofunctional polyethylene glycol derivative” used in the present invention a commercially available high-purity monofunctional activated PEG modifier is used, but is not limited thereto. Whether the PEG moiety is linear or branched, or the molecular weight of the PEG moiety can be arbitrarily selected and adjusted according to the purpose.
- anhydrous organic solvents particularly dimethylformamide (DMF), dimethyl sulfoxide (DMSO), acetic acid, acetone, tetrahydrofuran (THF), ethyl acetate, dichloromethane can be used.
- DMF dimethylformamide
- DMSO dimethyl sulfoxide
- THF tetrahydrofuran
- ethyl acetate dichloromethane
- the reaction temperature was from 100 ° C. under ice cooling, the reaction time was 2 to 72 hours, and “monofunctional polyethylene glycol derivative” was used in a large excess (1 to 0.1 g) per 1 g of HAP.
- the remaining excess “monofunctional polyethylene glycol derivative” and the by-product N-hydroxysuccinimide are removed by washing and filtering with the organic solvent used in the reaction, and the insoluble matter is dried under reduced pressure to modify the PEG.
- HAP was obtained.
- the carbon content of the PEG-modified HAP can be adjusted from 0.1 to 10% by adjusting the amount of the PEG-modified reagent, but is preferably around 1 to 3%.
- the PEG-modified HAP of the present invention can be used as a DDS carrier by adsorbing an active pharmaceutical ingredient. Since HAP or PEG has high biocompatibility, it can be safely used for drug delivery into the living body (J Mater Sci. (2000), 11 (2), 67-72). If a specific ligand is bound to the target organ, the drug can be delivered to the target organ more reliably. Also, if the active pharmaceutical ingredient is poorly water-soluble and injectable preparation is impossible or poor intestinal absorption, the active pharmaceutical ingredient is indirectly sub-micron-sized by adsorbing the active pharmaceutical ingredient to the submicron PEG-modified HAP. It can be adjusted and widely applied to the development of injectable preparations and oral absorption improvement. Furthermore, substances obtained by adsorbing RNA, DNA, protein, etc. as active pharmaceutical ingredients to submicron-sized PEG-modified HAP can be applied as promising DDSs for these active pharmaceutical ingredients.
- a substance comprising PEG-modified HAP and an active pharmaceutical ingredient or pharmaceutical additive was prepared by the following method.
- the active pharmaceutical ingredient or pharmaceutical additive is dissolved in a solvent such as class 2-3 DMSO, ethanol (EtOH), acetone or the like described in the guidelines for residual solvents of pharmaceuticals, and 90% by weight of PEG-modified HAP is added to this, After sonication at room temperature, the whole suspension was lyophilized or the solvent was distilled off under reduced pressure to obtain the claimed substance.
- the loading ratio of the active pharmaceutical ingredient or pharmaceutical additive to the PEG-modified HAP can be adjusted to 1 to 30% depending on the active pharmaceutical ingredient or pharmaceutical additive. In particular, about 10% is preferable.
- Adsorption rate 7.4% (w / w) ⁇ HPLC analysis conditions>
- Equipment Waters Alliance 2695 Separations Module, Waters 2487 Dual ⁇ Absorbance Detector Column: Atlantis dC18, particle size 3.0 ⁇ m, 3.9 mm ⁇ 100 mm (Waters)
- A: B 65: 35 (v / v)
- Adsorption rate 7.4% (w / w) ⁇ HPLC analysis conditions>
- Equipment Waters Alliance 2695 Separations Module, Waters 2487 Dual ⁇ Absorbance Detector Column: XBridge C18, particle size 3.5 ⁇ m, 4.6 mm ⁇ 100 mm (Waters)
- Moving layer A: 0.2% diisopropylamine-methanol solution
- B 0.5% ammonium acetate aqueous solution.
- A: B 4: 1 (v / v) Flow rate: 0.9 ml / min, detection wavelength: 263 nm Retention time: 3.0 min
- the fluorescence excitation wavelength was set to 490 nm for the fluorescein labeled product and 550 nm for the rhodamine labeled product.
- the results are shown in FIG. (3) Results From the fluorescence microscope observation, it was found that siRNA was coated on the surface of PEG-modified HAP.
- Plasma collection time point 0.5, 2, 6, 18, 24, 48, 168 hours after administration
- Plasma collection About 0.5 ml of blood is collected from the tail vein using heparin sodium-treated capillaries. Plasma obtained by centrifugation of blood (12000 rpm, 4 ° C., 3 minutes) was stored frozen at ⁇ 20 ° C. until measurement.
- Symptom observation Only the general state is observed, and the specific site and specific tissue are not observed.
- Measurement of plasma concentration Analytical method ⁇ Measurement target: Itraconazole ⁇ Standard substance: Itraconazole Storage condition: cold dark place ⁇ Internal standard substance: loratadine Storage condition: cold dark place ⁇ Analytical condition: LC / MS / MS
- Plasma collection time point 0.5, 2, 6, 12, 24, 48, 168 hours after administration
- Plasma collection About 0.5 ml of blood was collected from the tail vein using a heparin sodium-treated Pasteur pipette. To do. Plasma obtained by centrifugation of blood (8000 ⁇ g, 4 ° C., 3 minutes) was stored frozen at ⁇ 20 ° C. until measurement. (5) Symptom observation: Only the general state is observed, and the specific site and specific tissue are not observed. (6) Measurement of plasma concentration Analysis method ⁇ Measurement object: Clarithromycin ⁇ Standard substance: Clarithromycin Storage condition: Cold and dark place ⁇ Internal standard substance: Erythromycin B Storage conditions: Cold and dark place ⁇ Analysis conditions: LC / MS / MS
- A: B 55: 45 (v / v), flow rate 0.5 ml / min
- Pretreatment 200 ⁇ l of 5% (w / v) sodium carbonate and 4 ⁇ l of ethyl acetate were added to the calibration curve sample, blank sample and measurement sample. 2. The mixture was shaken at room temperature for about 15 minutes and then centrifuged at about 1800 ⁇ g at room temperature for 10 minutes. 3.
- the supernatant (organic layer) was transferred to a 13 ml polypropylene tube (pp). 4). The supernatant was concentrated to dryness (40 ° C., about 30 minutes) under a nitrogen stream. 5). 1 ml of redissolved solution was added to the residue and stirred. 6). 10 ⁇ l was injected into LC / MS / MS.
- FIG. 5 is a graph showing the elution concentration of candesartan as a function of time (minutes). As shown in FIG. 5, the elution of candesartan from the drug substance of candesartan took about one hour, and the elution of candesartan from the substance composed of PEG-modified HAP and candesartan was quick and completed in about 5 minutes.
- FIG. 6 is a graph showing changes in concentration with time (hours) in plasma (plasma) after intravenous injection into rats. As shown in FIG. 6, it is shown that a substance composed of submicron-sized PEG-modified HAP and a poorly water-soluble pharmaceutical candesartan is useful as a novel injection preparation (can be injected intravenously and subcutaneously using a 27G injection needle). It was done.
- FIG. 7 is a graph showing changes in concentration with time (hours) in plasma after oral administration to Rad. As shown in FIG. 7, the substance consisting of PEG-modified HAP and candesartan showed an oral absorbability comparable to a commercially available Blopress®-tablet tablet.
- FIG. 8 is a graph showing changes in concentration with time (hours) in plasma after intravenous injection into rats.
- a substance composed of submicron-sized PEG-modified HAP and a poorly water-soluble drug candesartan cilexetil is useful as a novel injection formulation (can be injected intravenously and subcutaneously using a 27G injection needle). It was shown that.
- FIG. 9 is a graph showing changes in concentration with time (hours) in plasma after oral administration to rats.
- the substance consisting of PEG-modified HAP and candesartan cilexetil exhibited an oral absorbability of about 1.5 times that of a commercially available bropress-tablet tablet.
- FIG. 10 is a graph showing cytotoxicity against A549 cells.
- PEG-modified HAP and 5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3 '(SEQ ID NO: 1) 5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3 '(SEQ ID NO: 2) The material consisting of showed approximately 50% cell viability against A549 human lung cancer cells.
- a strong effect comparable to the positive control shown in FIG. 10C (using HilyMax manufactured by Dojindo Laboratories Co., Ltd.) was shown.
- the negative control shown in B in FIG. 10 showed a cell viability of about 70%.
- FIG. 11 shows a fluorescence micrograph of the cells 4 hours after the addition of the substance consisting of
- FIG. 12 shows a laser confocal micrograph of a substance composed of PEG-modified HAP and simvastatin. It was observed that material particles composed of submicron-sized PEG-modified HAP and simvastatin having a uniform particle size were in Brownian motion.
- FIG. 13 shows a laser confocal micrograph of a substance composed of PEG-modified HAP and nelfinavir mesylate. It was observed that material particles consisting of submicron-sized PEG-modified HAP and nelfinavir mesylate having a uniform particle size were in Brownian motion.
- the PEG-modified HAP of the present invention is used as a base material, even a poorly soluble pharmaceutical substance can be handled like a soluble substance, drug administration into the body is facilitated, and the retention in the blood is further improved. Is planned.
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
- Polyethers (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本発明は、ハイドロキシアパタイト粒子表面をポリエチレングリコール誘導体で修飾することにより、安全性の高い、新たな機能を有するPEG修飾HAPと、それを用いる用途とその製造方法を提供する。本発明のPEG修飾HAPにおいては、粒径が50μm~10nmのハイドロキシアパタイトが、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体と-O(CO)で結合されていて、炭素含量が10~0.1%の物質である。また本発明においては、該物質と医薬品有効成分又は医薬品添加物とからなる物質であり、該医薬品有効成分の重量比が1~30%の物質であり、該物質は、粒径50μm~10nmのハイドロキシアパタイトと、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体の活性エステルとを無水有機溶媒中で処理して得られる。
Description
薬物を担持させる微粒子は、そのサイズを調製することで、又は微粒子を適当に修飾することで、剤形的には、経口、静脈注、皮下注、経肺、経鼻に有効に利用し得る。また、機能的には、薬物の肝臓、肺又は炎症部位等への選択的デリバリー、放出制御、いやな味のマスキング又は腸管吸収の改善等に有効に利用し得る。
このような微粒子としては、リポゾーム、高分子ミセル、プロトスフィア(登録商標)、樹脂又はシリカゲル、ゼオライト、ハイドロキシアパタイト等の無機パーテイクル(無機マイクロスフィア、ナノスフィア)が知られている。本発明は、ハイドロキシアパタイト表面をポリエチレングリコール(以下、ペグ又はPEGと略記する)で修飾した新規ペグ修飾ハイドロキシアパタイト(以下、PEG修飾HAPと略記する)及びその用途と製造方法に関する。
このような微粒子としては、リポゾーム、高分子ミセル、プロトスフィア(登録商標)、樹脂又はシリカゲル、ゼオライト、ハイドロキシアパタイト等の無機パーテイクル(無機マイクロスフィア、ナノスフィア)が知られている。本発明は、ハイドロキシアパタイト表面をポリエチレングリコール(以下、ペグ又はPEGと略記する)で修飾した新規ペグ修飾ハイドロキシアパタイト(以下、PEG修飾HAPと略記する)及びその用途と製造方法に関する。
ハイドロキシアパタイト(以下、HAPと略記する)は、骨や歯の基本成分であり、生体親和性が高く、糖やタンパク質を吸着しやすい性質がある。そのため、HAPは、骨や歯の補填材料等の医療用基材、カラム充填材、薬物輸送担体、あるいは細胞培養基盤として幅広く利用されている。こうしたHAPの特性をさらに生かすために、その表面を機能性高分子や生理活性物質で化学修飾させることが求められている。しかしながら、その足がかりとなるHAP表面の水酸基は、反応性が低く、機能性高分子や生理活性物質等の有機化合物を均一に結合させることが難しい。
アパタイト粒子の化学修飾については、ナノアパタイト粒子にヘキサメチレンジイソシアネートを用いてポリエチレングリコールを結合させた、Liu Qiugらの報告がある(Biomaterials (1998), 19(11-12), 1067-1072)。また、古薗らは、アパタイト粒子にアミノ基を持つシランカップリング剤を結合させ、カルボン酸とアミノ基との縮合反応によりポリアクリル酸を介してシリコーンシートと結合した経皮デバイスの開発に成功している(J Biomed Mater Res. (2001), 56(1),9-16)。さらに、田中らは、2種類以上の官能基を有するシランカップリング剤やイソシアネート化合物を用いて、HAP多孔体表面に反応性の高い有機官能基を導入し、該HAP多孔体表面に有機物質を共有結合させることに成功し、これがクロマトグラフ用カラム充填剤、DDS担体、イオン交換媒体、細胞培養基盤、インプラント等として幅広く利用できることを示した(特開2003-342011号公報)。
しかしこれらは、いずれもその調製過程でバイファンクショナルなリンカー試薬を用いるため、ハイドロキシアパタイト粒子同士の架橋結合が必然的に避けられず、この架橋ハイドロキシアパタイト粒子が、副生成物として混在する問題点がある。また、反応性の高いシランカップリング剤やイソシアネート化合物を使用しているため、残存するこれら反応性官能基の安全性も問題と考えられる。
特開2003-342011号公報
Biomaterials (1998), 19(11-12), 1067-1072
J. Biomed. Mater. Res. (2001), 56(1),9-16
本発明は、バイファンクショナルリンカーを用いず、ハイドロキシアパタイト粒子表面をポリエチレングリコール誘導体で修飾することにより、安全性の高い、新たな機能を有するPEG修飾HAPを提供し、加えてそれを利用する用途とその製造方法を提供することを課題とする。
上記課題を解決するため、本発明者らは、鋭意検討した結果、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体を用いてHAPの表面にポリエチレングリコールを-O(CO)で結合導入することに成功した。さらに、該新規PEG修飾HAPに、各種医薬をローデイングさせたドラッグデリバリーシステム(DDS)は、剤形的には、経口、静脈注、皮下注、経肺、経鼻に、有効に利用し得ること、及び薬物の肝臓、肺又は炎症部位等への選択的デリバリー、放出制御、いやな味のマスキング又は腸管吸収の改善等に有効に応用できることを見出した。
このPEG修飾HAPは、アパタイト固有の高い機械的強度と各種物質吸着能を維持すると共に、血中滞留性等の特性を併せ持つことが期待できる。そのため、DDS担体を始め、クロマトグラフ用カラム充填剤、イオン交換媒体、細胞培養基盤、インプラント等として幅広く利用し得る。
すなわち、本発明は、以下の(1)~(26)を提供するものである。
(1) 粒径が50μm~10nmのハイドロキシアパタイトと、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体からなる混合物であって、炭素含量が10~0.1%の物質。
(2) 粒径が50μm~10nmのハイドロキシアパタイトが、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体と-O(CO)で結合されていて、炭素含量が10~0.1%の物質。
(1) 粒径が50μm~10nmのハイドロキシアパタイトと、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体からなる混合物であって、炭素含量が10~0.1%の物質。
(2) 粒径が50μm~10nmのハイドロキシアパタイトが、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体と-O(CO)で結合されていて、炭素含量が10~0.1%の物質。
(3) 前記(1)記載の物質及び医薬品有効成分からなり、医薬品有効成分の重量比が1~30%の物質、又は、前記(1)記載の物質及び医薬品有効成分および医薬品添加物からなり、医薬品有効成分の重量比が1~30%の物質。
(4) 前記(2)記載の物質及び医薬品有効成分からなり、医薬品有効成分の重量比が1~30%の物質、又は、前記(2)記載の物質及び医薬品有効成分および医薬品添加物からなり、医薬品有効成分の重量比が1~30%の物質。
(4) 前記(2)記載の物質及び医薬品有効成分からなり、医薬品有効成分の重量比が1~30%の物質、又は、前記(2)記載の物質及び医薬品有効成分および医薬品添加物からなり、医薬品有効成分の重量比が1~30%の物質。
(5) 前記(3)又は前記(4)記載の物質から調製される医薬品。
(6) 前記の医薬品有効成分がsiRNA、アプタマー、RNA、DNA、ペプチド又は蛋白質である前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(6) 前記の医薬品有効成分がsiRNA、アプタマー、RNA、DNA、ペプチド又は蛋白質である前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(7) 前記の医薬品有効成分がクラリスロマイシンである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(8) 前記の医薬品有効成分がイトラコナゾールである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(9) 前記の医薬品有効成分がsiRNAである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(8) 前記の医薬品有効成分がイトラコナゾールである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(9) 前記の医薬品有効成分がsiRNAである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(10) サブミクロンサイズのハイドロキシアパタイトと、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体の活性エステルを無水有機溶媒中で処理してサブミクロンサイズの前記(1)又は前記(2)記載の物質を得る方法。
(11) サブミクロンサイズの前記(1)又は前記(2)記載の物質と医薬有効成分又は医薬添加物を有機溶媒中で処理して前記(3)又は前記(4)記載の物質を得る方法。
(11) サブミクロンサイズの前記(1)又は前記(2)記載の物質と医薬有効成分又は医薬添加物を有機溶媒中で処理して前記(3)又は前記(4)記載の物質を得る方法。
(12) 前記の医薬品有効成分がカンデサルタンである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(13) 前記の医薬品有効成分がカンデサルタンシレキセチルである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(13) 前記の医薬品有効成分がカンデサルタンシレキセチルである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(14) 前記の医薬品有効成分が、配列が
5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3'(配列番号1)
5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3'(配列番号2)
である二重螺旋のsiRNAである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(15) 前記の医薬品有効成分が、配列が
5'-CUUACGCUGAGUACUUCGATT-3'(配列番号3)
5'-UCGAAGUACUCAGCGUAAGTT-3'(配列番号4)
である二重螺旋のsiRNAである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3'(配列番号1)
5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3'(配列番号2)
である二重螺旋のsiRNAである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(15) 前記の医薬品有効成分が、配列が
5'-CUUACGCUGAGUACUUCGATT-3'(配列番号3)
5'-UCGAAGUACUCAGCGUAAGTT-3'(配列番号4)
である二重螺旋のsiRNAである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(16) 前記の医薬品有効成分がエトポシドである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(17) 前記の医薬品有効成分がメシル酸ネルフィナビルである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(18) 前記の医薬品有効成分がシンバスタチンである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(19) 前記の医薬品有効成分が7-エチル-10-ヒドロキシ-カンプトテシンである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(17) 前記の医薬品有効成分がメシル酸ネルフィナビルである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(18) 前記の医薬品有効成分がシンバスタチンである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(19) 前記の医薬品有効成分が7-エチル-10-ヒドロキシ-カンプトテシンである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(20) 前記の医薬品有効成分がパクリタキセルである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(21) 前記の医薬品有効成分がメシル酸サキナビルである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(22) 前記の医薬品有効成分がインスリンである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(23) 前記の医薬品有効成分がブロモクリプチンメシル酸塩である前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(21) 前記の医薬品有効成分がメシル酸サキナビルである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(22) 前記の医薬品有効成分がインスリンである前記(3)又は前記(4)記載の物質。
(23) 前記の医薬品有効成分がブロモクリプチンメシル酸塩である前記(3)又は前記(4)記載の物質。
本発明によれば、次のような効果を奏することができる。
(1) 難溶性の医薬物質であっても、本発明のPEG修飾HAPを基材に用いることで、可溶性物質のように取り扱うことができ、体内への薬物投与が容易となり、さらに体内血中滞留性の向上が図られる。
(2) HAP表面をPEG化することで、HAP粒子同士の凝集を防止することができる。
(3) 表面をPEG化したHAPを基材に用いることで、有効成分をローディングしたHAP粒子についても、粒子同士の凝集を防止することができる。
(1) 難溶性の医薬物質であっても、本発明のPEG修飾HAPを基材に用いることで、可溶性物質のように取り扱うことができ、体内への薬物投与が容易となり、さらに体内血中滞留性の向上が図られる。
(2) HAP表面をPEG化することで、HAP粒子同士の凝集を防止することができる。
(3) 表面をPEG化したHAPを基材に用いることで、有効成分をローディングしたHAP粒子についても、粒子同士の凝集を防止することができる。
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明は、バイファンクショナルリンカーを用いず、モノファンクショナルポリエチレングリコール誘導体でハイドロキシアパタイト粒子表面にポリエチレングリコール誘導体を結合させて得られた、安全性の高い、新たな機能を有するPEG修飾HAP及びその用途と製造方法に関する。
PEG修飾に付されるHAPは、多数の細孔(気孔)を有するHAP固体であっても良いし、気孔率のあまり高くないHAPでも良い。
本発明は、バイファンクショナルリンカーを用いず、モノファンクショナルポリエチレングリコール誘導体でハイドロキシアパタイト粒子表面にポリエチレングリコール誘導体を結合させて得られた、安全性の高い、新たな機能を有するPEG修飾HAP及びその用途と製造方法に関する。
PEG修飾に付されるHAPは、多数の細孔(気孔)を有するHAP固体であっても良いし、気孔率のあまり高くないHAPでも良い。
HAPは、一般組成をCa5(PO4)3OH、とする化合物であり、その反応の非化学量論性によって、CaHPO4 、Ca3(PO4)2、Ca4O(PO4)2、Ca10(PO4)6(OH)2、CaP4O11、Ca(PO3)2、Ca2P2O7、Ca(H2PO4)2H2Oなどリン酸カルシウムと称される1群の化合物を含む。また、HAPは、Ca5(PO4)3OH、又はCa10(PO4)6(OH)2の組成式で示される化合物を基本成分とするもので、Ca成分の一部分は、Sr、Ba、Mg、Fe、Al、Y、La、Na、K、Hなどから選ばれる1種以上で置換されてもよい。また、(PO4)成分の一部分が、VO4、BO3、SO4、CO3、SiO4等から選ばれる1種以上で置換されてもよい。更に、(OH)成分の一部分が、F、Cl、O、CO3等から選ばれる1種以上で置換されてもよい。また、これらの各成分の一部が欠陥となっていてもよい。生体骨中のアパタイトのPO4及びOH成分の一部は、通常CO3に置換されているため、本複合生体材料の製造中、大気中からのCO3の混入と各成分への一部置換(0~10質量%程度)があってもよい。
なお、HAPは、通常の微結晶・非晶質並びに結晶体の他に、同型固溶体、置換型固溶体、侵入型固溶体であってもよく、非量子論的欠陥を含むものであってもよい。また、この「HAP」中、カルシウム及びリンの原子比(Ca/P)は1.3~1.8の範囲内にあることが好ましく、特に1.5~1.7がより好ましい。原子比が1.3~1.8の範囲内にあると、生成物中のアパタイト(リン酸カルシウム化合物)の組成と結晶構造が、脊椎動物の骨の中に存在するアパタイトと類似の組成と構造をとりうるため、生体親和性がより高くなるからである。
PEG修飾に付されるHAPは、公知の方法で調製することが出来るが、市販のもの、例えばAldrich社製Hydroxyapatite, nanopowderを利用しても良い。
PEG修飾に付されるHAPは、公知の方法で調製することが出来るが、市販のもの、例えばAldrich社製Hydroxyapatite, nanopowderを利用しても良い。
本発明で用いられる「モノファンクショナルポリエチレングリコール誘導体」としては、市販の高純度一官能性活性化PEG修飾剤を用いたがこれに限定するものではない。PEG部分を直鎖にするか分枝にするか、又はPEG部分の分子量等は、目的に応じて任意に選択調節できる。
修飾時の反応溶媒は、無水有機溶媒、特にジメチルホルムアミド(DMF)、ジメチルスルホキサイド(DMSO)、酢酸、アセトン、テトラヒドロフラン(THF)、酢酸エチル、ジクロロメタンが使用できるが、特に医薬品の残留溶媒ガイドラインに記すクラス2~3のジメチルスルホキサイド(DMSO)、アセトンが好ましい。反応温度は、氷冷下から100℃、反応時間は2~72時間、「モノファンクショナルポリエチレングリコール誘導体」は、HAP1gあたり大過剰(1~0.1g)を用いた。反応終了後、残存する過剰の「モノファンクショナルポリエチレングリコール誘導体」及び副生成物のN‐ヒドロキシスクシンイミドを反応に使用した有機溶媒で洗浄ろ過して除き、不溶物を減圧下乾燥して、PEG修飾HAPを得た。PEG修飾HAPの炭素含量は、PEG修飾試薬量を調節することで0.1~10%で調節できるが、特に1~3%前後が好ましい。
修飾時の反応溶媒は、無水有機溶媒、特にジメチルホルムアミド(DMF)、ジメチルスルホキサイド(DMSO)、酢酸、アセトン、テトラヒドロフラン(THF)、酢酸エチル、ジクロロメタンが使用できるが、特に医薬品の残留溶媒ガイドラインに記すクラス2~3のジメチルスルホキサイド(DMSO)、アセトンが好ましい。反応温度は、氷冷下から100℃、反応時間は2~72時間、「モノファンクショナルポリエチレングリコール誘導体」は、HAP1gあたり大過剰(1~0.1g)を用いた。反応終了後、残存する過剰の「モノファンクショナルポリエチレングリコール誘導体」及び副生成物のN‐ヒドロキシスクシンイミドを反応に使用した有機溶媒で洗浄ろ過して除き、不溶物を減圧下乾燥して、PEG修飾HAPを得た。PEG修飾HAPの炭素含量は、PEG修飾試薬量を調節することで0.1~10%で調節できるが、特に1~3%前後が好ましい。
本発明のPEG修飾HAPは、医薬品有効成分を吸着させることで、DDS担体として利用することができる。HAP又はPEGは生体適合性が高いため、生体内への薬物送達にも安心して利用できる(J Mater Sci. (2000), 11(2),67‐72)。
標的器官に特異的なリガンドを結合させれば、より確実に目的とする器官に薬剤を送達することも可能となる。また、医薬品有効成分が難水溶性で注射製剤が不可能又は腸管吸収の悪い場合、サブミクロンサイズのPEG修飾HAPに医薬品有効成分を吸着させることで、間接的に医薬品有効成分をサブミクロンサイズに調整でき、注射製剤の開発及び経口吸収改善に広く応用できる。さらに、サブミクロンサイズのPEG修飾HAPに医薬品有効成分としてRNA、DNA、蛋白質等を吸着させた物質は、それら医薬品有効成分の有望なDDSとして応用可能である。
標的器官に特異的なリガンドを結合させれば、より確実に目的とする器官に薬剤を送達することも可能となる。また、医薬品有効成分が難水溶性で注射製剤が不可能又は腸管吸収の悪い場合、サブミクロンサイズのPEG修飾HAPに医薬品有効成分を吸着させることで、間接的に医薬品有効成分をサブミクロンサイズに調整でき、注射製剤の開発及び経口吸収改善に広く応用できる。さらに、サブミクロンサイズのPEG修飾HAPに医薬品有効成分としてRNA、DNA、蛋白質等を吸着させた物質は、それら医薬品有効成分の有望なDDSとして応用可能である。
PEG修飾HAPと医薬品有効成分又は医薬品添加物とからなる物質は以下の方法で調製した。医薬品有効成分又は医薬品添加物を医薬品の残留溶媒ガイドラインに記すクラス2~3のDMSO、エタノール(EtOH)、アセトン等の溶媒に溶解させ、これに重量比で90%比のPEG修飾HAPを加え、室温下超音波処理後、この懸濁液全量を凍結乾燥又は減圧下溶媒留去して、請求項記載の物質を得た。医薬品有効成分又は医薬品添加物のPEG修飾HAPに対する搭載率は、医薬品有効成分又は医薬品添加物にも依存するが1~30%で調製できる。特に10%前後が好ましい。
以下、実施例によって本発明をさらに詳細に説明するが本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
以下、実施例によって本発明をさらに詳細に説明するが本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
〔PEG修飾HAPの調製〕
(1)PEG修飾HAPの調製
ハイドロキシアパタイト-ナノパウダー〔Aldrich 677418〕200mgのアセトン20ml懸濁液に、ポリエチレングリコール(PEG)修飾剤(NOF社製 SUNBRIGHT ME‐020CS)200mgを加え、30分間超音波(周波数28kHz、出力100W)を照射した。この懸濁液を室温にて18時間攪拌後、遠心分離(9000×g, 20℃,30分間)し、上清をデカンテーションにて除去した。沈殿物をアセトンにて2回洗浄(20ml×2)した後、減圧下、50℃にて18時間乾燥し、PEG修飾HAP 158mgを白色粉末として得た。
(1)PEG修飾HAPの調製
ハイドロキシアパタイト-ナノパウダー〔Aldrich 677418〕200mgのアセトン20ml懸濁液に、ポリエチレングリコール(PEG)修飾剤(NOF社製 SUNBRIGHT ME‐020CS)200mgを加え、30分間超音波(周波数28kHz、出力100W)を照射した。この懸濁液を室温にて18時間攪拌後、遠心分離(9000×g, 20℃,30分間)し、上清をデカンテーションにて除去した。沈殿物をアセトンにて2回洗浄(20ml×2)した後、減圧下、50℃にて18時間乾燥し、PEG修飾HAP 158mgを白色粉末として得た。
(2)残留溶媒、及びPEG修飾率の測定
調製したPEG修飾HAP中の残留溶媒をガスクロマトグラフ(GC)法で、PEG修飾率としてCHN元素分析法で炭素含量を定量した結果を以下に示す。
残留溶媒(アセトン)濃度:< 100μg/g
炭素含量:2.01%
<GC分析条件>
装置:HP‐5890IIシステム (Hewlett Packard製)
カラム:DB‐624 75mm×0.53 mm 膜厚0.3μm
カラム温度:40℃ → 260℃
キャリアガス:ヘリウム 7 psi
検出器:水素炎イオン検出器(FID) 250℃
<CHN元素分析条件>
機器:vario EL III (Elementar AnalysensystemeGmbH)
燃焼炉温度:950℃
還元炉温度:500℃
ヘリウム流量:200 ml/min
酸素流量:30 ml/min
燃焼時間:90 sec
調製したPEG修飾HAP中の残留溶媒をガスクロマトグラフ(GC)法で、PEG修飾率としてCHN元素分析法で炭素含量を定量した結果を以下に示す。
残留溶媒(アセトン)濃度:< 100μg/g
炭素含量:2.01%
<GC分析条件>
装置:HP‐5890IIシステム (Hewlett Packard製)
カラム:DB‐624 75mm×0.53 mm 膜厚0.3μm
カラム温度:40℃ → 260℃
キャリアガス:ヘリウム 7 psi
検出器:水素炎イオン検出器(FID) 250℃
<CHN元素分析条件>
機器:vario EL III (Elementar AnalysensystemeGmbH)
燃焼炉温度:950℃
還元炉温度:500℃
ヘリウム流量:200 ml/min
酸素流量:30 ml/min
燃焼時間:90 sec
(3)粒子径分布測定
調製したPEG修飾HAP 1mgをミリQ水 (15ml)に懸濁し、超音波(周波数28 kHz、出力100W)を5分間照射した後、粒子経測定を行った。[測定機器:HORIBA レーザー回折/散乱式粒子径分布測定装置 LA‐950] 結果を図1に示す。
調製したPEG修飾HAP 1mgをミリQ水 (15ml)に懸濁し、超音波(周波数28 kHz、出力100W)を5分間照射した後、粒子経測定を行った。[測定機器:HORIBA レーザー回折/散乱式粒子径分布測定装置 LA‐950] 結果を図1に示す。
〔PEG修飾HAPとクラリスロマイシンからなる物質の調製〕
(1)PEG修飾HAPとクラリスロマイシンからなる物質の調製
PEG修飾HAP(100mg)にクラリスロマイシン(8mg)のDMSO(2ml)溶液を加えた後、超音波(周波数28kHz、出力100W)を2分間照射した。この懸濁液を凍結乾燥し、白色粉末 108.6 mgを得た。これを更に減圧下、50℃にて36時間乾燥し目的物108.1mgを白色粉末として得た。
(1)PEG修飾HAPとクラリスロマイシンからなる物質の調製
PEG修飾HAP(100mg)にクラリスロマイシン(8mg)のDMSO(2ml)溶液を加えた後、超音波(周波数28kHz、出力100W)を2分間照射した。この懸濁液を凍結乾燥し、白色粉末 108.6 mgを得た。これを更に減圧下、50℃にて36時間乾燥し目的物108.1mgを白色粉末として得た。
(2)薬物吸着率の測定
本品10mgにアセトニトリル 1mlを加え、超音波(周波数28 kHz、出力100W)を5分間照射した。この懸濁液を遠心分離(9000×g, 20℃, 3分間)し、上清を更に0.22μmのフィルターにてろ過しHPLC用サンプルとした。HPLC分析より、本品10mg中にクラリスロマイシン0.74mgが含有されていることを確認した。吸着率:7.4%(w/w)
<HPLC分析条件>
機器:Waters Alliance 2695 Separations Module, Waters 2487 Dual λAbsorbance Detector
カラム:Atlantis dC18, particle size 3.0μm, 3.9 mm×100mm(Waters)
移動層:A : 0.67 mol/Lリン酸二水素カリウム試液 B : アセトニトリル。
A:B=65:35(v/v)
流速:1.0 ml/min
検出波長:210 nm
Retention time:7.1 min
本品10mgにアセトニトリル 1mlを加え、超音波(周波数28 kHz、出力100W)を5分間照射した。この懸濁液を遠心分離(9000×g, 20℃, 3分間)し、上清を更に0.22μmのフィルターにてろ過しHPLC用サンプルとした。HPLC分析より、本品10mg中にクラリスロマイシン0.74mgが含有されていることを確認した。吸着率:7.4%(w/w)
<HPLC分析条件>
機器:Waters Alliance 2695 Separations Module, Waters 2487 Dual λAbsorbance Detector
カラム:Atlantis dC18, particle size 3.0μm, 3.9 mm×100mm(Waters)
移動層:A : 0.67 mol/Lリン酸二水素カリウム試液 B : アセトニトリル。
A:B=65:35(v/v)
流速:1.0 ml/min
検出波長:210 nm
Retention time:7.1 min
(3)粒子径分布測定
本品1mgをミリQ水 (15ml)に懸濁し、超音波(周波数28kHz、出力100W)を5分間照射した後、粒子計測定を行った。結果を図2に示す。
本品1mgをミリQ水 (15ml)に懸濁し、超音波(周波数28kHz、出力100W)を5分間照射した後、粒子計測定を行った。結果を図2に示す。
〔PEG修飾HAPとイトラコナゾールからなる物質の調製〕
(1)組成物の調製
PEG修飾HAP(300mg)にイトラコナゾール(24mg)のDMSO(4.8ml)溶液を加えた後、超音波(周波数28kHz、出力100W)を2分間照射した。この懸濁液を凍結乾燥し、白色粉末324.3mgを得た。これをミリQ水(15ml)に懸濁後、コンドロイチン硫酸ナトリウム水溶液 [10mg/ml] (0.3ml)を添加し、超音波(周波数28kHz、出力100W)を2分間照射した。この懸濁液を凍結乾燥し白色粉末322.6mg得た。
(1)組成物の調製
PEG修飾HAP(300mg)にイトラコナゾール(24mg)のDMSO(4.8ml)溶液を加えた後、超音波(周波数28kHz、出力100W)を2分間照射した。この懸濁液を凍結乾燥し、白色粉末324.3mgを得た。これをミリQ水(15ml)に懸濁後、コンドロイチン硫酸ナトリウム水溶液 [10mg/ml] (0.3ml)を添加し、超音波(周波数28kHz、出力100W)を2分間照射した。この懸濁液を凍結乾燥し白色粉末322.6mg得た。
(2)薬物吸着率の測定
本品10mgにアセトニトリル1mlを加え、超音波(周波数28kHz、出力100W)を5分間照射した。この懸濁液を遠心分離(9000×g, 20℃, 3分間)し、上清を更に0.22μmのフィルターでろ過し、HPLC用サンプルとした。HPLC分析より、本品10mg中にイトラコナゾール0.74mgが含有されていることを確認した。吸着率:7.4%(w/w)
<HPLC分析条件>
機器:Waters Alliance 2695 Separations Module, Waters 2487 Dual λAbsorbance Detector
カラム:XBridge C18, particle size 3.5μm, 4.6 mm×100mm(Waters)
移動層:A:0.2% ジイソプロピルアミン-メタノール溶液 B:0.5% 酢酸アンモニウム水溶液。 A:B=4:1(v/v)
流速:0.9 ml/min、検出波長:263 nm
Retention time:3.0 min
本品10mgにアセトニトリル1mlを加え、超音波(周波数28kHz、出力100W)を5分間照射した。この懸濁液を遠心分離(9000×g, 20℃, 3分間)し、上清を更に0.22μmのフィルターでろ過し、HPLC用サンプルとした。HPLC分析より、本品10mg中にイトラコナゾール0.74mgが含有されていることを確認した。吸着率:7.4%(w/w)
<HPLC分析条件>
機器:Waters Alliance 2695 Separations Module, Waters 2487 Dual λAbsorbance Detector
カラム:XBridge C18, particle size 3.5μm, 4.6 mm×100mm(Waters)
移動層:A:0.2% ジイソプロピルアミン-メタノール溶液 B:0.5% 酢酸アンモニウム水溶液。 A:B=4:1(v/v)
流速:0.9 ml/min、検出波長:263 nm
Retention time:3.0 min
(3)粒子径分布測定
本品1mgをミリQ水 (15ml)に懸濁し、超音波(周波数28kHz、出力100W)を5分間照射した後、粒子計測定を行った。結果を図3に示す。
本品1mgをミリQ水 (15ml)に懸濁し、超音波(周波数28kHz、出力100W)を5分間照射した後、粒子計測定を行った。結果を図3に示す。
〔PEG修飾HAPとsiRNAからなる物質の調製〕
(1) PEG修飾HAPと蛍光標識siRNAからなる物質の調製
PEG修飾HAP6mgを量り取り、純水10mlを加えた。混合液を乳化・分散機へ移し、16000rpmで1分間処理し、均一な懸濁液を得た。懸濁液3mlに対し、10mg/ml 蛍光標識siRNA水溶液18μlを加え、十分混合した。
(2) 蛍光顕微鏡観察
本品3mlにグリセリン6mlを加えた。蛍光顕微鏡にてサンプルの観察を行った。蛍光励起波長は、フルオレセイン標識品は490nm、ローダミン標識品は550nmに設定した。結果を図4に示す。
(3) 結果
蛍光顕微鏡観察より、siRNAはPEG修飾HAP表面にコーティングされていることがわかった。
(1) PEG修飾HAPと蛍光標識siRNAからなる物質の調製
PEG修飾HAP6mgを量り取り、純水10mlを加えた。混合液を乳化・分散機へ移し、16000rpmで1分間処理し、均一な懸濁液を得た。懸濁液3mlに対し、10mg/ml 蛍光標識siRNA水溶液18μlを加え、十分混合した。
(2) 蛍光顕微鏡観察
本品3mlにグリセリン6mlを加えた。蛍光顕微鏡にてサンプルの観察を行った。蛍光励起波長は、フルオレセイン標識品は490nm、ローダミン標識品は550nmに設定した。結果を図4に示す。
(3) 結果
蛍光顕微鏡観察より、siRNAはPEG修飾HAP表面にコーティングされていることがわかった。
〔PEG修飾HAPとイトラコナゾールからなる物質をラットに投与した際の血中動態試験〕
(1) 試験目的
PEG修飾HAPとイトラコナゾールからなる物質を、ラットに静脈内及び経口投与し血中濃度の推移を確認し、バイオアベイラビリテイーを算出した。
(2) 被験物質
(1)静脈内投与用
PEG修飾HAPとイトラコナゾールからなる物質の水性懸濁液
保存条件:遮光・室温保存
(2)経口投与用
PEG修飾HAPとイトラコナゾールからなる物質の水性懸濁液
保存条件:遮光・室温保存
(3) 動物
・ 動物種:ラット,系統:SD,性別:雄
・ 例数:n=3
投与時週齢:7週齢
・ 投与時摂餌条件:非絶食
・ 投与量:静脈内投与; 5 mg/2 ml/kg(27G注射針
を使用して静注)
経口投与; 12 mg/4.8 ml/kg
(1) 試験目的
PEG修飾HAPとイトラコナゾールからなる物質を、ラットに静脈内及び経口投与し血中濃度の推移を確認し、バイオアベイラビリテイーを算出した。
(2) 被験物質
(1)静脈内投与用
PEG修飾HAPとイトラコナゾールからなる物質の水性懸濁液
保存条件:遮光・室温保存
(2)経口投与用
PEG修飾HAPとイトラコナゾールからなる物質の水性懸濁液
保存条件:遮光・室温保存
(3) 動物
・ 動物種:ラット,系統:SD,性別:雄
・ 例数:n=3
投与時週齢:7週齢
・ 投与時摂餌条件:非絶食
・ 投与量:静脈内投与; 5 mg/2 ml/kg(27G注射針
を使用して静注)
経口投与; 12 mg/4.8 ml/kg
(4) 採血
血漿採取時点:投与後0.5,2,6,18,24,48,168時間
血漿採取:尾静脈からヘパリンナトリウム処理した毛細管を用いて血液約0.5 mlを採取する。
血液を遠心分離(12000 rpm,4℃,3分間)して得られた血漿は、測定まで-20℃で凍結保存した。
(5) 症状観察:一般状態の観察のみ実施し、特定部位及び特定組織の観察は実施していない。
(6) 血漿中濃度の測定
分析方法
・ 測定対象:イトラコナゾール
・ 標準物質:イトラコナゾール
保存条件:冷暗所
・ 内標準物質:ロラタジン
保存条件:冷暗所
・ 分析条件:LC/MS/MS
血漿採取時点:投与後0.5,2,6,18,24,48,168時間
血漿採取:尾静脈からヘパリンナトリウム処理した毛細管を用いて血液約0.5 mlを採取する。
血液を遠心分離(12000 rpm,4℃,3分間)して得られた血漿は、測定まで-20℃で凍結保存した。
(5) 症状観察:一般状態の観察のみ実施し、特定部位及び特定組織の観察は実施していない。
(6) 血漿中濃度の測定
分析方法
・ 測定対象:イトラコナゾール
・ 標準物質:イトラコナゾール
保存条件:冷暗所
・ 内標準物質:ロラタジン
保存条件:冷暗所
・ 分析条件:LC/MS/MS
(7) LC/MS/MS条件
カラム:CAPCELL PAK C18 MG II, 50mm×4.6mm id, 5mm(資生堂)
移動層:A : 2mmol/L酢酸アンモニウム B : アセトニトリル。
A:B=35:65(v/v)
流速0.5ml/min
イオン源:APCI
極性:正イオン
検出イオン:m/z705.1, 392.1(イトラコナゾール)
m/z383.5, 337.2[ I.S.(インターナルスタンダード)]
(8) 前処理
・ 検量線試料及び測定用試料にI.S.溶液100μlを加え、攪拌した。ブランク試料にはアセトニトリル100μlを加え、攪拌した。
・ アセトニトリル700μlを加え、攪拌した。
・ 約12000×gで10分間(4℃)遠心分離した。
・ 上清5μlをLC/MS/MSに注入した。
カラム:CAPCELL PAK C18 MG II, 50mm×4.6mm id, 5mm(資生堂)
移動層:A : 2mmol/L酢酸アンモニウム B : アセトニトリル。
A:B=35:65(v/v)
流速0.5ml/min
イオン源:APCI
極性:正イオン
検出イオン:m/z705.1, 392.1(イトラコナゾール)
m/z383.5, 337.2[ I.S.(インターナルスタンダード)]
(8) 前処理
・ 検量線試料及び測定用試料にI.S.溶液100μlを加え、攪拌した。ブランク試料にはアセトニトリル100μlを加え、攪拌した。
・ アセトニトリル700μlを加え、攪拌した。
・ 約12000×gで10分間(4℃)遠心分離した。
・ 上清5μlをLC/MS/MSに注入した。
(9) 結果
PEG修飾HAPとイトラコナゾールからなる物質の0.5~24時間でのバイオアベイラビリテイーは、約57%と高い腸管吸収改善効果がみられた。(表1)
同時に行った市販イトリゾール注及びイトリゾールカプセル50の血中動態インビボ試験結果から、経口イトリゾールカプセル50のイトリゾール注に対する0.5~48時間でのバイオアベイラビリテイーは約39%であった。
この結果から、サブミクロンサイズのPEG修飾HAPと難水溶性医薬とからなる物質が、新規注射製剤として及び高い経口吸収を示す優れた経口製剤とし有用であることが示された。
PEG修飾HAPとイトラコナゾールからなる物質の0.5~24時間でのバイオアベイラビリテイーは、約57%と高い腸管吸収改善効果がみられた。(表1)
同時に行った市販イトリゾール注及びイトリゾールカプセル50の血中動態インビボ試験結果から、経口イトリゾールカプセル50のイトリゾール注に対する0.5~48時間でのバイオアベイラビリテイーは約39%であった。
この結果から、サブミクロンサイズのPEG修飾HAPと難水溶性医薬とからなる物質が、新規注射製剤として及び高い経口吸収を示す優れた経口製剤とし有用であることが示された。
〔PEG修飾HAPとクラリスロマイシンからなる物質をラットに投与した際の血中動態試験〕
(1) 試験目的
PEG修飾HAPとクラリスロマイシンからなる物質を、ラットに静脈内及び皮下投与し血中濃度の推移を確認した。
(2) 被験物質
(1)静脈内投与用
PEG修飾HAPとクラリスロマイシンからなる物質の水性懸濁液
保存条件:遮光・室温保存
(2)皮下投与用
PEG修飾HAPとクラリスロマイシンからなる物質の水性懸濁液
保存条件:遮光・室温保存
(3)動物
・ 動物種:ラット,系統:SD,性別:雄
・ 例数:n=3
投与時週齢:7週齢
・ 投与時摂餌条件:非絶食
・ 投与量:静脈内投与; 1 mg/ml/kg(27G注射針を使用して静注)
皮下投与; 2 mg/2 mL/kg(27G注射針を使用して皮下注)
(1) 試験目的
PEG修飾HAPとクラリスロマイシンからなる物質を、ラットに静脈内及び皮下投与し血中濃度の推移を確認した。
(2) 被験物質
(1)静脈内投与用
PEG修飾HAPとクラリスロマイシンからなる物質の水性懸濁液
保存条件:遮光・室温保存
(2)皮下投与用
PEG修飾HAPとクラリスロマイシンからなる物質の水性懸濁液
保存条件:遮光・室温保存
(3)動物
・ 動物種:ラット,系統:SD,性別:雄
・ 例数:n=3
投与時週齢:7週齢
・ 投与時摂餌条件:非絶食
・ 投与量:静脈内投与; 1 mg/ml/kg(27G注射針を使用して静注)
皮下投与; 2 mg/2 mL/kg(27G注射針を使用して皮下注)
(4) 採血
血漿採取時点:投与後0.5,2,6,12,24,48,168時間
血漿採取:尾静脈からヘパリンナトリウム処理したパスツールピペットを用いて血液約0.5 mlを採取する。
血液を遠心分離(8000×g,4℃,3分間)して得られた血漿は、測定まで-20℃で凍結保存した。
(5) 症状観察:一般状態の観察のみ実施し、特定部位及び特定組織の観察は実施していない。
(6) 血漿中濃度の測定
分析方法
・ 測定対象:クラリスロマイシン
・ 標準物質:クラリスロマイシン
保存条件:冷暗所
・ 内標準物質:エリスロマイシンB
保存条件:冷暗所
・ 分析条件:LC/MS/MS
血漿採取時点:投与後0.5,2,6,12,24,48,168時間
血漿採取:尾静脈からヘパリンナトリウム処理したパスツールピペットを用いて血液約0.5 mlを採取する。
血液を遠心分離(8000×g,4℃,3分間)して得られた血漿は、測定まで-20℃で凍結保存した。
(5) 症状観察:一般状態の観察のみ実施し、特定部位及び特定組織の観察は実施していない。
(6) 血漿中濃度の測定
分析方法
・ 測定対象:クラリスロマイシン
・ 標準物質:クラリスロマイシン
保存条件:冷暗所
・ 内標準物質:エリスロマイシンB
保存条件:冷暗所
・ 分析条件:LC/MS/MS
(7) LC/MS/MS条件
カラム:Atlantis dC18 3mm, 4.6mm ID x 75mm(ウオーターズ)
ガードカラム:Atlantis dC18 3mm, 4.6mm ID x 20mm(ウオーターズ)
移動層:A: 20mmol/Lギ酸アンモニウム B : アセトニトリル。
A:B=55:45(v/v),流速0.5ml/min
イオン源:ESI
極性:正イオン
検出イオン:m/z748.6, 158.2(クラリスロマイシン)
m/z718.6, 158.3[ I.S.(インターナルスタンダード)]
(8) 前処理
1. 検量線試料、ブランク試料及び測定用試料に5%(w/v)炭酸ナトリウム200μl及び酢酸エチル4μlを添加した。
2. 室温で約15分間振とうした後、約1800 x g、室温、10分間で遠心分離した。
3. 上清(有機層)を13mlポリプロピレン製(p.p.)チューブに移した。
4. 上清を窒素気流下濃縮乾固(40度C、約30分)した。
5. 残渣に再溶解溶液1mlを添加後、攪拌した。
6. 10μlをLC/MS/MSに注入した。
カラム:Atlantis dC18 3mm, 4.6mm ID x 75mm(ウオーターズ)
ガードカラム:Atlantis dC18 3mm, 4.6mm ID x 20mm(ウオーターズ)
移動層:A: 20mmol/Lギ酸アンモニウム B : アセトニトリル。
A:B=55:45(v/v),流速0.5ml/min
イオン源:ESI
極性:正イオン
検出イオン:m/z748.6, 158.2(クラリスロマイシン)
m/z718.6, 158.3[ I.S.(インターナルスタンダード)]
(8) 前処理
1. 検量線試料、ブランク試料及び測定用試料に5%(w/v)炭酸ナトリウム200μl及び酢酸エチル4μlを添加した。
2. 室温で約15分間振とうした後、約1800 x g、室温、10分間で遠心分離した。
3. 上清(有機層)を13mlポリプロピレン製(p.p.)チューブに移した。
4. 上清を窒素気流下濃縮乾固(40度C、約30分)した。
5. 残渣に再溶解溶液1mlを添加後、攪拌した。
6. 10μlをLC/MS/MSに注入した。
〔PEG修飾HAPとカンデサルタンからなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:7.4 %(w/w)
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:7.4 %(w/w)
〔PEG修飾HAPとカンデサルタンシレキセチルからなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:6.3 %(w/w)
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:6.3 %(w/w)
〔PEG修飾HAPと
5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3'(配列番号1)
5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3'(配列番号2)
からなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例4と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
蛍光分析法により確認した。吸着率:20 %(w/w)
5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3'(配列番号1)
5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3'(配列番号2)
からなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例4と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
蛍光分析法により確認した。吸着率:20 %(w/w)
[PEG修飾HAPと
5'-CUUACGCUGAGUACUUCGATT-3'(配列番号3)
5'-UCGAAGUACUCAGCGUAAGTT-3'(配列番号4)
からなる物質の調製]
(1) 組成物の調製
実施例4と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
蛍光分析法により確認した。吸着率:20 %(w/w)
5'-CUUACGCUGAGUACUUCGATT-3'(配列番号3)
5'-UCGAAGUACUCAGCGUAAGTT-3'(配列番号4)
からなる物質の調製]
(1) 組成物の調製
実施例4と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
蛍光分析法により確認した。吸着率:20 %(w/w)
[PEG修飾HAPとエトポシドからなる物質の調製]
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:8.0 %(w/w)
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:8.0 %(w/w)
〔PEG修飾HAPとメシル酸ネルフィナビルからなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:7.4 %(w/w)
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:7.4 %(w/w)
〔PEG修飾HAPとシンバスタチンからなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:7.9 %(w/w)
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:7.9 %(w/w)
〔PEG修飾HAPと7-エチル-10-ヒドロキシ-カンプトテシンからなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:6.8 %(w/w)
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:6.8 %(w/w)
〔PEG修飾HAPとパクリタキセルからなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:7.4 %(w/w)
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:7.4 %(w/w)
〔PEG修飾HAPとメシル酸サキナビルからなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:8.0 %(w/w)
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:8.0 %(w/w)
〔PEG修飾HAPとインスリンからなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例4と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:12.7 %(w/w)
(1) 組成物の調製
実施例4と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:12.7 %(w/w)
〔PEG修飾HAPとカンデサルタンからなる物質のパドル法による溶出試験〕
(結果)
図5は、カンデサルタンの時間(分)による溶出濃度を示すグラフである。
図5に示すように、カンデサルタン医薬品原薬からのカンデサルタンの溶出は、およそ一時間を要するのに比べ、PEG修飾HAPとカンデサルタンからなる物質からのカンデサルタンの溶出は早く、およそ5分で完了した。
(結果)
図5は、カンデサルタンの時間(分)による溶出濃度を示すグラフである。
図5に示すように、カンデサルタン医薬品原薬からのカンデサルタンの溶出は、およそ一時間を要するのに比べ、PEG修飾HAPとカンデサルタンからなる物質からのカンデサルタンの溶出は早く、およそ5分で完了した。
〔PEG修飾HAPとカンデサルタンからなる物質をラットにi.v.(静脈注射)投与した際の血中動態試験〕
(結果)
図6は、ラットに静脈注射後のプラズマ(血漿)中の時間(時)による濃度変化を示すグラフである。
図6に示すように、サブミクロンサイズのPEG修飾HAPと難水溶性医薬カンデサルタンからなる物質が、新規注射製剤(27G注射針を使用して静注及び皮下注可能)として有用であることが示された。
(結果)
図6は、ラットに静脈注射後のプラズマ(血漿)中の時間(時)による濃度変化を示すグラフである。
図6に示すように、サブミクロンサイズのPEG修飾HAPと難水溶性医薬カンデサルタンからなる物質が、新規注射製剤(27G注射針を使用して静注及び皮下注可能)として有用であることが示された。
〔PEG修飾HAPとカンデサルタンからなる物質をラットにpo.(経口)投与した際の血中動態試験〕
(結果)
図7は、ラッドに経口投与後のプラズマ中の時間(時)による濃度変化を示すグラフである。
図7に示すように、PEG修飾HAPとカンデサルタンからなる物質は、市販のブロプレス(登録商標)-タブレット錠に匹敵する経口吸収性を示した。
(結果)
図7は、ラッドに経口投与後のプラズマ中の時間(時)による濃度変化を示すグラフである。
図7に示すように、PEG修飾HAPとカンデサルタンからなる物質は、市販のブロプレス(登録商標)-タブレット錠に匹敵する経口吸収性を示した。
〔PEG修飾HAPとカンデサルタンシレキセチルからなる物質をラットにi.v.投与した際の血中動態試験〕
(結果)
図8は、ラットに静脈注射後のプラズマ中の時間(時)による濃度変化を示すグラフである。
図8に示すように、サブミクロンサイズのPEG修飾HAPと難水溶性医薬カンデサルタンシレキセチルからなる物質が、新規注射製剤(27G注射針を使用して静注及び皮下注可能)として有用であることが示された。
(結果)
図8は、ラットに静脈注射後のプラズマ中の時間(時)による濃度変化を示すグラフである。
図8に示すように、サブミクロンサイズのPEG修飾HAPと難水溶性医薬カンデサルタンシレキセチルからなる物質が、新規注射製剤(27G注射針を使用して静注及び皮下注可能)として有用であることが示された。
〔PEG修飾HAPとカンデサルタンシレキセチルからなる物質をラットにpo.投与した際の血中動態試験〕
(結果)
図9は、ラットに経口投与後のプラズマ中の時間(時)による濃度変化を示すグラフである。
図9に示すように、PEG修飾HAPとカンデサルタンシレキセチルからなる物質は、市販のブロプレス-タブレット錠のおよそ1.5倍の経口吸収性を示した。
(結果)
図9は、ラットに経口投与後のプラズマ中の時間(時)による濃度変化を示すグラフである。
図9に示すように、PEG修飾HAPとカンデサルタンシレキセチルからなる物質は、市販のブロプレス-タブレット錠のおよそ1.5倍の経口吸収性を示した。
〔PEG修飾HAPと
5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3'(配列番号1)
5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3'(配列番号2)
からなる物質のin vitro細胞毒性評価試験〕
(結果)
図10は、A549細胞に対する細胞毒性を示すグラフである。
図10中、Aに示すように、PEG修飾HAPと
5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3'(配列番号1)
5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3'(配列番号2)
からなる物質は、A549ヒト肺癌細胞に対しおよそ50%細胞生存率を示した。図10中Cに示すポジテイブコントロール(株式会社同仁化学研究所製HilyMaxを使用)に匹敵する強い効果を示した。一方図10中、Bに示すネガテイブコントロールでは、およそ70%細胞生存率を示した。
5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3'(配列番号1)
5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3'(配列番号2)
からなる物質のin vitro細胞毒性評価試験〕
(結果)
図10は、A549細胞に対する細胞毒性を示すグラフである。
図10中、Aに示すように、PEG修飾HAPと
5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3'(配列番号1)
5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3'(配列番号2)
からなる物質は、A549ヒト肺癌細胞に対しおよそ50%細胞生存率を示した。図10中Cに示すポジテイブコントロール(株式会社同仁化学研究所製HilyMaxを使用)に匹敵する強い効果を示した。一方図10中、Bに示すネガテイブコントロールでは、およそ70%細胞生存率を示した。
〔PEG修飾HAPと
蛍光ラベル化5'-CUUACGCUGAGUACUUCGATT-3'(配列番号3)
5'-UCGAAGUACUCAGCGUAAGTT-3'(配列番号4)
からなる物質のA549細胞へのトランスフェクション試験と蛍光顕微鏡観察〕
(結果)
A549ヒト肺癌細胞に、PEG修飾HAPと
蛍光ラベル化5'-CUUACGCUGAGUACUUCGATT-3'(配列番号3)
5'-UCGAAGUACUCAGCGUAAGTT-3'(配列番号4)
からなる物質を添加後、4時間経過後の細胞の蛍光顕微鏡写真を図11に示す。
蛍光ラベル化5'-CUUACGCUGAGUACUUCGATT-3'(配列番号3)
5'-UCGAAGUACUCAGCGUAAGTT-3'(配列番号4)
からなる物質のA549細胞へのトランスフェクション試験と蛍光顕微鏡観察〕
(結果)
A549ヒト肺癌細胞に、PEG修飾HAPと
蛍光ラベル化5'-CUUACGCUGAGUACUUCGATT-3'(配列番号3)
5'-UCGAAGUACUCAGCGUAAGTT-3'(配列番号4)
からなる物質を添加後、4時間経過後の細胞の蛍光顕微鏡写真を図11に示す。
〔PEG修飾HAPとエトポシドからなる物質をラットにi.v.投与した際の動態試験〕
(結果)
表3に示すようにサブミクロンサイズのPEG修飾HAPと難水溶性医薬エトポシドからなる物質は市販のエトポシド注射薬(ベプシド注)と比較し、エトポシドが肝臓に高く集積することが認められた。
(結果)
表3に示すようにサブミクロンサイズのPEG修飾HAPと難水溶性医薬エトポシドからなる物質は市販のエトポシド注射薬(ベプシド注)と比較し、エトポシドが肝臓に高く集積することが認められた。
〔PEG修飾HAPとシンバスタチンからなる物質の顕微鏡観察〕
(結果)
PEG修飾HAPとシンバスタチンからなる物質のレーザー共焦点顕微鏡写真を図12に示す。粒径のそろったサブミクロンサイズのPEG修飾HAPとシンバスタチンからなる物質粒子がブラウン運動している様子が観察された。
(結果)
PEG修飾HAPとシンバスタチンからなる物質のレーザー共焦点顕微鏡写真を図12に示す。粒径のそろったサブミクロンサイズのPEG修飾HAPとシンバスタチンからなる物質粒子がブラウン運動している様子が観察された。
〔PEG修飾HAPとメシル酸ネルフィナビルからなる物質の顕微鏡観察〕
(結果)
PEG修飾HAPとメシル酸ネルフィナビルからなる物質のレーザー共焦点顕微鏡写真を図13に示す。粒径のそろったサブミクロンサイズのPEG修飾HAPとメシル酸ネルフィナビルからなる物質粒子がブラウン運動している様子が観察された。
(結果)
PEG修飾HAPとメシル酸ネルフィナビルからなる物質のレーザー共焦点顕微鏡写真を図13に示す。粒径のそろったサブミクロンサイズのPEG修飾HAPとメシル酸ネルフィナビルからなる物質粒子がブラウン運動している様子が観察された。
〔PEG修飾HAPとブロモクリプチンメシル酸塩からなる物質の調製〕
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:4.2 %(w/w)
(1) 組成物の調製
実施例2又は実施例3と類似の方法により調製した。
(2) 薬物吸着率の測定
実施例2又は実施例3と類似の方法により確認した。吸着率:4.2 %(w/w)
本発明のPEG修飾HAPを基材に用いれば、難溶性の医薬物質であっても、可溶性物質のように取り扱うことができ、体内への薬物投与が容易となり、さらに体内血中滞留性の向上が図られる。
Claims (23)
- 粒径が50μm~10nmのハイドロキシアパタイトと、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体からなり、炭素含量が10~0.1%の物質。
- 粒径が50μm~10nmのハイドロキシアパタイトが、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体と-O(CO)で結合されていて、炭素含量が10~0.1%の物質。
- 請求項1記載の物質及び医薬品有効成分又は医薬品添加物からなり、医薬品有効成分の重量比が1~30%の物質。
- 請求項2記載の物質及び医薬品有効成分又は医薬品添加物からなり、医薬品有効成分の重量比が1~30%の物質。
- 請求項3又4記載の物質から調製される医薬品。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がsiRNA、アプタマー、RNA、DNA、ペプチド又は蛋白質であるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がクラリスロマイシンであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がイトラコナゾールであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がsiRNAであるところの請求項3又は4記載の物質。
- サブミクロンサイズのハイドロキシアパタイトと、末端官能基としてカルボキシル基を有するポリエチレングリコール誘導体の活性エステルを無水有機溶媒中で処理してサブミクロンサイズの請求項1又は2記載の物質を得る方法。
- サブミクロンサイズの請求項1又は2記載の物質と医薬有効成分又は医薬添加物を有機溶媒中で処理して請求項3又は4記載の物質を得る方法。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がカンデサルタンであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がカンデサルタンシレキセチルであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分が、
5'-GUGAAGUCAACAUGCCUGCTT-3'(配列番号1)
5'-GCAGGCAUGUUGACUUCACTT-3'(配列番号2)
であるところの請求項3又は4記載の物質。 - 請求項3又は4記載の医薬品有効成分が
5'-CUUACGCUGAGUACUUCGATT-3'(配列番号3)
5'-UCGAAGUACUCAGCGUAAGTT-3'(配列番号4)
であるところの請求項3又は4記載の物質。 - 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がエトポシドであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がメシル酸ネルフィナビルであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がシンバスタチンであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分が7-エチル-10-ヒドロキシ-カンプトテシンであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がパクリタキセルであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がメシル酸サキナビルであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がインスリンであるところの請求項3又は4記載の物質。
- 請求項3又は4記載の医薬品有効成分がブロモクリプチンメシル酸塩であるところの請求項3又は4記載の物質。
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2008-015444 | 2008-01-25 | ||
JP2008015444 | 2008-01-25 | ||
JP2008153764 | 2008-06-12 | ||
JP2008-153764 | 2008-06-12 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
WO2009093713A1 true WO2009093713A1 (ja) | 2009-07-30 |
Family
ID=40901216
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PCT/JP2009/051122 WO2009093713A1 (ja) | 2008-01-25 | 2009-01-23 | ペグ修飾ハイドロキシアパタイト及びそれを基材とする医薬とその製造方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20090324725A1 (ja) |
JP (1) | JP2010018772A (ja) |
WO (1) | WO2009093713A1 (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106374032A (zh) * | 2016-11-14 | 2017-02-01 | 中国科学院半导体研究所 | 单晶体声波器件及制备方法 |
PL427351A1 (pl) * | 2018-10-10 | 2019-07-29 | Politechnika Wrocławska | Materiały ceramiczne w postaci powierzchniowo modyfikowanych cząstek oraz sposób ich wytwarzania |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1997003106A1 (en) * | 1995-07-07 | 1997-01-30 | Shearwater Polymers, Inc. | Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications |
JP2001172511A (ja) * | 1999-12-15 | 2001-06-26 | Nof Corp | リン酸カルシウム−高分子複合体、製造方法及び用途 |
WO2003018690A1 (fr) * | 2001-08-27 | 2003-03-06 | Center For Advanced Science And Technology Incubation, Ltd. | Composition renfermant de fines particules supportant un principe biologiquement actif ou dont ledit principe actif est maintenu par de telles particules, et procede de preparation |
JP2004522712A (ja) * | 2000-11-14 | 2004-07-29 | ネクター セラピューティックス エイエル,コーポレイション | ヒドロキシアパタイト標的化ポリ(エチレングリコール)および関連重合体 |
WO2005082405A1 (ja) * | 2004-02-26 | 2005-09-09 | Japan Science And Technology Agency | たんぱく性薬物の注射用徐放性微粒子製剤およびその製造法 |
JP2006028041A (ja) * | 2004-07-13 | 2006-02-02 | Ltt Bio-Pharma Co Ltd | 核酸含有ナノ粒子 |
JP2006230343A (ja) * | 2005-02-28 | 2006-09-07 | Tokyo Medical & Dental Univ | 遺伝子導入のための分子複合体 |
WO2006109635A1 (ja) * | 2005-04-06 | 2006-10-19 | Kabushiki Kaisha Sangi | 腸管吸収用抗腫瘍剤 |
WO2007116965A1 (ja) * | 2006-04-12 | 2007-10-18 | Toray Industries, Inc. | グラフトポリマーとカルシウム化合物とを含む微粒子 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7829074B2 (en) * | 2001-10-18 | 2010-11-09 | Nektar Therapeutics | Hydroxypatite-targeting poly(ethylene glycol) and related polymers |
-
2009
- 2009-01-23 WO PCT/JP2009/051122 patent/WO2009093713A1/ja active Application Filing
- 2009-01-23 JP JP2009013585A patent/JP2010018772A/ja active Pending
- 2009-01-23 US US12/358,486 patent/US20090324725A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1997003106A1 (en) * | 1995-07-07 | 1997-01-30 | Shearwater Polymers, Inc. | Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications |
JP2001172511A (ja) * | 1999-12-15 | 2001-06-26 | Nof Corp | リン酸カルシウム−高分子複合体、製造方法及び用途 |
JP2004522712A (ja) * | 2000-11-14 | 2004-07-29 | ネクター セラピューティックス エイエル,コーポレイション | ヒドロキシアパタイト標的化ポリ(エチレングリコール)および関連重合体 |
WO2003018690A1 (fr) * | 2001-08-27 | 2003-03-06 | Center For Advanced Science And Technology Incubation, Ltd. | Composition renfermant de fines particules supportant un principe biologiquement actif ou dont ledit principe actif est maintenu par de telles particules, et procede de preparation |
WO2005082405A1 (ja) * | 2004-02-26 | 2005-09-09 | Japan Science And Technology Agency | たんぱく性薬物の注射用徐放性微粒子製剤およびその製造法 |
JP2006028041A (ja) * | 2004-07-13 | 2006-02-02 | Ltt Bio-Pharma Co Ltd | 核酸含有ナノ粒子 |
JP2006230343A (ja) * | 2005-02-28 | 2006-09-07 | Tokyo Medical & Dental Univ | 遺伝子導入のための分子複合体 |
WO2006109635A1 (ja) * | 2005-04-06 | 2006-10-19 | Kabushiki Kaisha Sangi | 腸管吸収用抗腫瘍剤 |
WO2007116965A1 (ja) * | 2006-04-12 | 2007-10-18 | Toray Industries, Inc. | グラフトポリマーとカルシウム化合物とを含む微粒子 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
QING LIU ET AL.: "Composite biomaterials with chemical bonding between hydroxyapatite filler particles and PEG/PBT copolymer matrix", JOURNAL OF BIOMEDICAL MATERIALS RESEARCH, vol. 40, no. 3, 1998, pages 490 - 497 * |
QING LIU ET AL.: "Surface modification of nano- apatite by grafting organic polymer", BIOMATERIALS, vol. 19, 1998, pages 1067 - 1072 * |
YOSHINORI KAKIZAWA ET AL.: "Block copolymer- coated calcium phosphate nanoparticles sensing intracellular environment for oligodeoxynucleotide", JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE, vol. 97, 2004, pages 345 - 356 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2010018772A (ja) | 2010-01-28 |
US20090324725A1 (en) | 2009-12-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Lee et al. | In situ gold nanoparticle growth on polydopamine-coated 3D-printed scaffolds improves osteogenic differentiation for bone tissue engineering applications: in vitro and in vivo studies | |
Chen et al. | A photothermal-triggered nitric oxide nanogenerator combined with siRNA for precise therapy of osteoarthritis by suppressing macrophage inflammation | |
Matson et al. | Nanostructure-templated control of drug release from peptide amphiphile nanofiber gels | |
Kawaguchi et al. | Preparation of carbon nanotube-alginate nanocomposite gel for tissue engineering | |
WO2008066507A2 (en) | Nanotube devices for targeted delivery of therapeutic molecules | |
Bhattacharyya et al. | Niclosamide-conjugated polypeptide nanoparticles inhibit Wnt signaling and colon cancer growth | |
Ryabenkova et al. | Mechanism of hydrogen-bonded complex formation between ibuprofen and nanocrystalline hydroxyapatite | |
BR112014009753B1 (pt) | Nanopartícula biocompatível funcionalizada e respectivo uso | |
CN110538345B (zh) | 生物材料及其制备方法和在骨修复中的应用 | |
Wu et al. | Transforming sustained release into on-demand release: Self-healing guanosine–borate supramolecular hydrogels with multiple responsiveness for Acyclovir delivery | |
EP2994153A1 (de) | Peptide und peptid-wirkstoff-konjugate für renales targeting | |
CN117545468A (zh) | 胶束复合物和包含其的药物载体 | |
Zhang et al. | Efficient delivery of triptolide plus a miR-30-5p inhibitor through the use of near infrared laser responsive or CADY modified MSNs for efficacy in rheumatoid arthritis therapeutics | |
CN114767655A (zh) | 一种两性离子功能化的生物可降解口服纳米载药系统及应用 | |
CN113004536A (zh) | 一种金属-氨基酸/肽配位聚合物及其应用 | |
Stanisz et al. | Evaluation of cilazapril release profiles with the use of lignin-based spherical particles | |
WO2009093713A1 (ja) | ペグ修飾ハイドロキシアパタイト及びそれを基材とする医薬とその製造方法 | |
Xu et al. | Antisenescence ZIF-8/resveratrol Nanoformulation with potential for enhancement of bone fracture healing in the elderly | |
Yao et al. | Alginate-modified mesoporous bioactive glass and its drug delivery, bioactivity, and osteogenic properties | |
KR101788610B1 (ko) | 의약용 단백질의 지속방출을 위한 약물전달체 및 이의 제조방법 | |
CN108888773B (zh) | 自组装球形药物纳米制剂及其制备方法与用途 | |
Yang et al. | Meticulously engineered three-dimensional-printed scaffold with microarchitecture and controlled peptide release for enhanced bone regeneration | |
Rao et al. | Nanosponges: a multifunctional drug delivery system | |
CN112074303A (zh) | 通过点击化学反应的用作填充剂或药物载体的注射制剂组合物 | |
Yang et al. | Preparation and in vitro evaluation of doxorubicin loaded alendronate modified hollow gold nanoparticles for bone-targeted chemo-photothermal therapy |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application |
Ref document number: 09703709 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |
|
NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: DE |
|
122 | Ep: pct application non-entry in european phase |
Ref document number: 09703709 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |