WO2007060256A2 - Ahr-mediatoren - Google Patents

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WO2007060256A2
WO2007060256A2 PCT/EP2006/069010 EP2006069010W WO2007060256A2 WO 2007060256 A2 WO2007060256 A2 WO 2007060256A2 EP 2006069010 W EP2006069010 W EP 2006069010W WO 2007060256 A2 WO2007060256 A2 WO 2007060256A2
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skin
ahr
acid
uvb
cell
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Jean Krutmann
Martina Herrmann
Gabriele Vielhaber
Jakob Ley
Oskar Koch
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Symrise Gmbh & Co. Kg
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    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/148—Screening for cosmetic compounds

Definitions

  • the invention relates to methods for finding and assessing agonists of the aryl hydrocarbon receptor (Ah receptor) antagonists, the agonists and antagonists themselves and their uses.
  • Ah receptor aryl hydrocarbon receptor
  • the skin is the largest organ of the human body. Their most important function is the protection of the body against the uncontrolled escape of water on the one hand and against the ingress of harmful chemicals or bacteria and solar radiation on the other hand.
  • Exposing the skin to prolonged exposure to sunlight may cause a variety of injuries.
  • Examples include sunburn, light-induced skin aging and skin cancer. This damaging effect of sunlight is u. a. on the in the
  • Sunlight spectrum contained UVB radiation (280 - 320 nm).
  • UV filter For protection against UV radiation, conventional sunscreens for forming a protective layer on the skin contain substances which absorb and / or reflect the radiation in the range of 280-400 nm (UV filter).
  • photoprotective substances are, for example, inorganic oxides such as zinc oxide or organic UV absorbers such as, for example, cinnamic acid or dibenzoylmethane derivatives.
  • inorganic oxides such as zinc oxide
  • organic UV absorbers such as, for example, cinnamic acid or dibenzoylmethane derivatives.
  • the protective layer formed by them can be easily destroyed by mechanical abrasion, water or detergents. It is therefore desirable, in addition to the UV filters mentioned, to be able to access substances which have a protective effect within the skin.
  • UVB radiation is able to induce changes at the level of the cell membrane, which contribute to the activation of growth receptors such as the epidermal growth factor receptor (EGF-R) and subsequently to tumor formation (Ashida et al. (2003) Exp Dermatol 12: 445; Lirvall et al. (1996) Biosci Rep 16: 227).
  • This EGF-R activation can be inhibited by antioxidant enzymes (Lirvall et al., (1996) Biosci Rep 16: 227).
  • Cyclooxygenases are among the key enzymes of the inflammatory reaction. They catalyze the first step in the synthesis of a number of inflammatory mediators (prostaglandins, prostacyclins, thromboxanes) from arachidonic acid. There are two forms: cyclooxygenase-1 (COX-1) is the constitutive, permanently expressed form, while the expression of COX-2 occurs only after stimulation by cellular signals, eg as a result of tissue damage or inflammation.
  • MMPs Matrix metalloproteinases
  • ECM extracellular matrix
  • MMPs have broad, often overlapping substrate specificity, and when combined, they are capable of breaking down all the extracellular matrix protein components. So far, about 20 MMPs have been identified.
  • MMP-1 collagenase-1
  • MMP-2 gelatinase A
  • MMP-9 gelatinase B
  • MMP-3 play an important role.
  • MMP-1 also cleaves pro-MMP-2 and pro-MMP-9, thereby causing their activation.
  • MMP-2 and MMP-9 belong to the elastin-degrading proteases (A. Thibodeau, Cosmetics & Toiletries 2000, 15 (1 1), 75-82).
  • MMPs have been found that in old skin the content of MMPs is markedly increased compared to young skin (JH Chung et al., J. Invest. Dermatol, 2001, 117, 1218-1224). MMPs also play a crucial role in the premature aging of the skin due to exogenous factors. Thus, in light-aged skin, a further increased level of MMPs could be detected compared to light-protected aged skin (JH Chung et al., J. Invest. Dermatol, 2001, 11, 1218-1224). For both UVA and UVB aIs also for infrared radiation, the induction of matrix metalloproteinases was detected.
  • a chemical oxidizing agent such as dihydroxyacetone is used as the active ingredient, which reacts only with the proteins of the horny layer of the human skin and causes by oxidation of histidine and tryptophan an orange-brown discoloration of this horny layer
  • the hue produced is less sensitive to mechanical effects than make-up, it is often found to be unnatural and unlike a tan to a healthy tanned skin.
  • the usually brown to black-colored melanin pigments are formed in the melanocytes of the skin, transferred to the keratinocytes and cause the color of the skin or hair.
  • the brown-black eumelanins are formed in mammals mainly from hydroxy-substituted aromatic amino acids such as L-tyrosine and L-DOPA, the yellow to red phaeomelanins additionally from sulfur-containing molecules (Cosmetics & Toiletries 1996, 11 1 (5), 43-
  • Tyrosinase L-3,4-Dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) is formed, which in turn is converted by tyrosinase to Dopachrom. The latter is oxidized to melanin via several steps catalyzed by different enzymes.
  • UV-absorbing substances are also used to protect against the UV-induced increase in skin pigmentation.
  • this is a purely physical effect and must be distinguished from the biological effect of skin lightening agents on the cellular melanin formation, which is detectable even in the absence of UV light.
  • UV absorbers do not cause any real whitening of the skin, but merely prevent the increase in skin pigmentation induced by UV light.
  • hydroquinone hydroquinone derivatives such as arbutin, vitamin C, derivatives of ascorbic acid such as z.
  • ascorbyl palmitate kojic acid and derivatives of kojic acid such as Kojiklarizat used.
  • hydroquinone One of the most commonly used skin and hair whiteners is hydroquinone.
  • this compound has a cytotoxic effect on melanocytes and irritating the skin. Therefore, such preparations are e.g. in Europe, Japan and South Africa are no longer allowed for cosmetic applications.
  • hydroquinone is very sensitive to oxidation and difficult to stabilize in cosmetic formulations.
  • Arbutin is a hydroquinone glucoside that hydrolyzes in situ to hydroquinone and is therefore toxicologically as critical as hydroquinone.
  • Vitamin C and ascorbic acid derivatives have only an insufficient effect on the skin. They also do not act directly as tyrosinase inhibitors, but reduce the colored intermediates of melanin biosynthesis.
  • Kojic acid (5-hydroxy-2-hydroxymethyl-4-pyranone) is a tyrosinase inhibitor which inhibits its catalytic activity by chelating the copper atoms of the enzyme; It is used in commercial skin and hair whitening agents but has a high sensitizing potential and causes contact allergies.
  • Gen accession number BC0700800 was previously only a central element in the detoxification of exogenous pollutants known.
  • the receptor mediates the biological response to polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) such as benz [a] pyrene and halogenated PAHs such as 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD).
  • PAHs polycyclic aromatic hydrocarbons
  • TCDD 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin
  • the AhR is a ligand-activated transcription factor that translocates into the nucleus upon binding of a ligand. There, he forms a dimer with another transcription factor, the Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator (ARNT), which binds to regulatory gene sequences and induces transcription of various genes such as CYP1A1 and CYP1B1.
  • AhR activation The consequences of AhR activation are the development of skin tumors (Shimizu et al. (2000) 97: 779), skin irritation and inflammation, the development of allergies, atopic dermatitis and itching and a disruption of skin integrity (Tauchi et al (2005) Mol. Cell Biol. 25: 9360-8; Henley et al., Arch. Biochem. Biophys. (2004) 422: 42-51) and the induction of MMP-1 (collagenase-1) (Murphy et (2004) J. Biol. Chem. 279, 25284-2593).
  • UVB light induces CYP1A1 expression in human keratinocytes and lymphocytes as well as in the mouse hepatoma cell line Hepa-1 (Wei et al., Chem Biol Interact (1999) 118: 127-40).
  • CYP1A1 induction is AhR-dependent.
  • the AhR activation is dependent on the cell type, as will be explained below, so that the effect on mouse hepatoma cells can not be extrapolated to the effect on human skin cells.
  • CYP1A1 can also be induced by AhR-independent pathways (Guigal et al. (2001) Life Sci; 68 (18): 2141-50, Tijet et al. (2006), Mol Pharmacol 69 (1): 140- 153). Therefore, there is no compelling connection between UVB - AhR - CYP1 A1 in melanocytes and keratinocytes.
  • stilbenes are known as ligands of the Ah receptor. Although some of the stilbenes are said to bind to the Ah receptor, they do not cause CYP1A1 induction. These stilbenes include 3, 4,3 ', 5-tetrahydroxystilbene or piceatannol, 2,3', 4,5'-tetrahydroxystilbene or oxyresveratrol and 3,5,4'-trihydoxystilbene or resveratrol, in particular trans- Resveratrol. A photoprotective effect, in particular against UVB radiation, is not described. A disadvantage of the stilbenes is that they are photolabile and often cause endocrine effects. For example, resveratrol is an anti-androgen (Mitchell et al. (1999) Cancer Res. 59: 5892-5895).
  • curcumin inhibits AhR activation by the tobacco carcinogen benz [a] pyrene-7R-frans-7,8-dihydrodiol in oral human keratinocyte cancer cells and ex vivo oral mucosa.
  • curcumin activates the AhR translocation in the absence of the tobacco carcinogen (Rinaldi et al. (2002) Cancer Res. 62, 5451-5456) and thus is not an AhR antagonist in the sense of the invention.
  • i4 // -frans retinoic acid inhibits TCDD-induced AhR activation in normal human keratinocytes without the AhR activity in the absence of TCDD influence.
  • frans-retinoic acid has the considerable disadvantage of enhancing the TCDD-induced expression of MMP-1 (Murphy et al. (2004) J. Biol. Chem. 279, 25284-25293) and is photolabile.
  • Ah receptor modulators AhR agonists and AhR antagonists
  • methods for assessing the efficacy of a substance to be investigated as an AhR antagonist or AhR agonist are provided.
  • An Ah receptor antagonist (AhR antagonist) in the sense of this invention is a substance which
  • Hydrocarbon and more preferably benzy [a] pyrene or 3-methylcholanthrene, does not itself induce induction of an AhR-inducible gene, preferably CYP1A1, and / or induces translocation of AhR from the cytoplasm into the nucleus, and further
  • 4. is preferably photostable.
  • Ah receptor agonist in the sense of this invention is a substance which
  • Photostable in the sense of this invention is a substance which is converted to not more than 10 mol% in one or more other substances when irradiated with UVB radiation (40 W / m 2 ) for 2 hours. Accordingly, for example, AII trans -retinoic acid is not a preferred AhR antagonist since this substance is photolabile.
  • a gene is said to be induced if the concentration of the associated mRNA in the presence of the associated inducer or agonist is significantly (p ⁇ 0.05, Student's t-test) at least 10% higher than in the absence of the inducer or agonist.
  • Ah receptor sequence is deposited under NCBI number BC070080.
  • step ii) if the cell has been exposed to a possible AhR antagonist in step i) treating the exposed cell with UVB radiation or an AhR agonist, and
  • the evaluation method according to the invention now makes it possible for the first time to test substances for their activity as AhR modulator, ie as an Ah receptor agonist or antagonist without having to carry out this test on the body of a living animal or a living test subject, but in an ex In vivo or in vitro approach to achieve a representative assessment of in vivo agonist or antagonist efficacy.
  • the invention thus opens the field of Ah receptor agonists and antagonists for the first time to a systematic research with a low use of material, whereby the results of the assessment can be obtained rapidly for the first time and not, as in the case of treatment on the body of an animal or a subject.
  • the method according to the invention therefore also makes it possible for the first time to systematically search for substances for reducing or preventing translocation of AhR into a cell nucleus, for reducing or preventing UVB-induced or -inducible gene expression, for reducing or preventing polycyclic aromatic hydrocarbons such as in particular TCDD. induced or inducible gene expression, and / or for reducing or preventing UVB-induced or -inducible skin damage, especially skin cancer, skin aging, dermatitis and sunburn.
  • the method according to the invention also makes it possible to systematically test potential AhR agonists and to reproducibly determine their effect on melanin formation in a cell culture.
  • the evaluation method according to the invention makes it possible to test substances whose toxicity has not been or has not been completely verified before the assessment process is carried out.
  • the assessment method according to the invention opens up further substance classes which were previously inaccessible to a test person.
  • the method also supports the selection of suitable agonists and antagonists by allowing the method to standardize and reproducibly select potential agonists and antagonists based on a preselected increase or decrease in the induction of the AhR-inducible gene, preferably CYP1A1.
  • a cell culture a culture consisting of or containing melanocytes and / or keratinocytes is preferably used. It is likewise preferred to use a cell culture of an ex vivo or in vitro skin model. Conveniently, the entire cell culture is treated with the potential AhR agonist or antagonist.
  • the cell culture in preferred embodiments of the invention comprises at least 20 cells, more preferably at least 100 cells, and most preferably at least 200 cells.
  • AhR modulator is then recognized by the fact that in cell group 1 the AhR-inducible gene is induced (AhR agonist) or not induced (AhR antagonist), while in cell group 2 the AhR-inducible gene is induced (positive control).
  • An AhR modulator is also recognized by the fact that in cell group 3 the AhR-inducible gene is induced (AhR antagonist) or not induced (AhR agonist), while in cell group 4 the AhR-inducible gene is not induced (negative control) ,
  • the skilled person understands that the method can also be carried out only with cell groups 1 and 2 or with cell groups 3 and 4.
  • keratinocyte cell culture of human keratinocytes is used as the keratinocyte cell culture.
  • Preferred keratinocytes are HaCaT cells and NCTC2544 keratinocytes.
  • Preferred melanocytes are murine melanocytes, in particular B16 cells.
  • a preferred determination method further comprises the steps:
  • step iv) applying an untreated cell (preferably a preferably murine melanocyte or keratinocyte cell and especially preferably a B16, NCTC2544 or HaCaT cell) from step i) with a preselected compound as described below, preferably of the formula (II) and especially preferably of the formula (X), v) treating the cell acted upon in step iv) with UVB radiation and / or an AhR agonist as in step ii),
  • an untreated cell preferably a preferably murine melanocyte or keratinocyte cell and especially preferably a B16, NCTC2544 or HaCaT cell
  • step iii) determining the induction of the AhR-inducible gene determined in step iii), preferably of CYP1A1, and
  • the determination method according to the invention can be standardized particularly easily in this way and supports it in an advantageously simple manner to achieve AhR antagonists with a preselected minimum antagonistic effect.
  • step ii) and optionally in step v) the applied cells are treated with a polycyclic aromatic hydrocarbon and preferably with TCDD.
  • a polycyclic aromatic hydrocarbon preferably with TCDD.
  • Such an evaluation method according to the invention also makes it possible to analyze whether the assessed AhR antagonist is suitable for detoxification, ie for preventing or suppressing harmful effects of polycyclic aromatic hydrocarbons and in particular for TCDD.
  • the safe and systematic detection of such a detoxifying effect was previously, without the assessment method according to the invention, virtually impossible, as a deliberate, controlled exposure of subjects with polycyclic aromatic hydrocarbons because of the health risks associated with the use of these substances had to be avoided.
  • the invention also provides a screening method for screening a substance library for AhR agonists and AhR antagonists, comprising the steps:
  • the screening method realizes the advantages associated with the assessment method according to the invention. It can be carried out in particular as a high-throughput method with at least 96 samples, it being possible for one or more samples to be control samples, in particular positive and / or negative controls.
  • the samples are preferably arranged together on a support, for example a microtiter plate.
  • An apparatus according to the invention for carrying out a high-throughput screening method according to the invention comprises:
  • the high throughput (HTS) screening device of the invention advantageously reduces the overhead associated with performing a systematic AhR agonist and antagonist search.
  • Their preferably automatic work allows standardization of the experimental conditions, promotes comparability of the evaluation results and thus accelerates the search for agonists and antagonists.
  • FIG. 1 primary dermal melanocytes express this receptor (FIG. 1).
  • FIG. 2 the activation of the receptor with the aid of an AhR modulator surprisingly induces the expression of the tyrosinase, ie the key enzyme of melanin synthesis, by a factor of 2-3 (FIG. 2), and that it subsequently multiplies Melanin regeneration comes (Figure 3).
  • inhibitors of the AhR signaling pathway have a melanin-reducing effect (FIG. 4).
  • the search for AhR agonists and antagonists is therefore particularly directed to the goal of providing agents for protecting or treating animal and preferably human skin.
  • the invention also provides a process for producing a skin protection preparation which comprises mixing an AhR antagonist - preferably an AhR antagonist found by one of the abovementioned processes according to the invention - with a cosmetically and / or pharmaceutically acceptable carrier so that the concentration of the AhR antagonist Antagonists in the mixture is at least twice the required for reducing the induction of an AhR-induced gene minimum concentration, wherein the minimum concentration is determined or determinable by a method according to one of the aforementioned inventive method.
  • the invention accordingly provides a process for producing a skin buffing preparation which comprises mixing an AhR agonist - preferably an AhR agonist found with one of the abovementioned processes according to the invention - with a cosmetically and / or pharmaceutically acceptable carrier so that the concentration of the AhR Agonists in the mixture is at least twice the minimum concentration required to increase the expression of an AhR-inducible gene, wherein the minimum concentration is determined or determinable by a method according to one of the aforementioned methods of the invention.
  • the concentration of AhR antagonists or AhR agonists is preferably not more than 20 times the minimum concentration described above, more preferably not more than 10 times.
  • the methods according to the invention for assessing the effectiveness of an AhR agonist or antagonist make it possible to determine a minimum concentration by carrying out the respective method several times with different concentrations of the respective agonist or antagonist.
  • the methods thus assist in the preparation of a skin tanning preparation by providing a minimum level of concentration essential to the preparation of a skin tanning preparation with high accuracy and high predictive accuracy of human use.
  • the invention also provides a method for assessing the effectiveness of a skin lightener, comprising the steps
  • step i) applying an untreated cell from step i) to a preselected amount of skin whitening standard substance, preferably kojic acid or beta-arbutin,
  • the invention provides a method for assessing the efficacy of a skin tanner comprising the steps
  • a tanning agent standard substance preferably naringin or caffeine
  • steps iii-v are optional.
  • the methods make it possible to achieve the advantages of a method according to the invention for assessing the effectiveness of an AhR antagonist or AhR agonist accordingly, in particular the reproducibility, the possibility of systematically searching for skin brighteners or skin tanners, the high reliability of prognosis for the application on People and the ability to perform the process as a high-throughput process, for example with the aid of the inventive device described above.
  • the possible skin brighteners investigated in the above methods are previously tested for their action as AhR antagonists in a method according to the invention; also, preferably, the possible skin tanning agents investigated in the above methods are previously tested for their action as AhR agonists in a method according to the invention.
  • melanocytes are preferably used, more preferably murine melanocytes.
  • at least 20 cells are advantageously treated.
  • the invention also provides a method of preparing a skin lightening composition comprising mixing a skin lightener with a cosmetically and / or pharmaceutically acceptable carrier such that the concentration of the skin lightener in the mixture is at least twice the minimum concentration required for skin lightening, the minimum concentration determined is with a method of the kind just described.
  • An inventively preferred active ingredient for preparing a skin tanning preparation is formylindolo (3,2b) carbazole, as well as its pharmaceutically acceptable salts and esters.
  • An inventively preferred active ingredient for preparing a skin-lightening preparation is 3'-methoxy-4'-nitroflavone, and its pharmaceutically acceptable salts and esters.
  • R 1 to R 9 are independently hydrogen, hydroxy, alkoxy CRCI 2, CrCl 2 - alkyl, C 2 -C 2 -alkenyl, and
  • the compounds of the formula (II) have surprisingly been found to be very effective Ah receptor antagonists. They can prevent UVB-induced translocation of AhR from the cytoplasm into the cell nucleus in human skin cells. They strongly reduce the AhR-mediated induction of AhR-inducible genes in human skin cells, especially the induction of CYP1A1. They are photostable and in the absence of an AhR-activating substance, in particular of polycyclic aromatic hydrocarbons such as TCDD, do not induce induction of an AhR-inducible gene and do not induce the translocation of AhR from the cytoplasm into the cell nucleus of human skin cells, as opposed to, for example Curcumin and AII trans retinoic acid.
  • the compounds of the formula (II) are therefore particularly suitable as medicaments, in particular for the treatment or prevention of - in particular UVB-induced - skin irritation, skin damage, inflammation of the skin, itching, atopic dermatitis, skin aging, skin cancer, and / or Reduce the MMP content of the skin.
  • the compounds are further, as drugs or in a non-drug form, for example as a cosmetic or in cosmetic preparations, suitable for reducing or preventing translocation of AhR into a nucleus, for reducing or preventing UVB-induced gene expression, and / or for reducing or preventing gene expression induced by AhR agonists such as polycyclic aromatic hydrocarbons and in particular TCDD.
  • the compounds of formula (II) are also useful as sunscreens and especially as UVB protectants.
  • Preferred compounds of the invention are those in which R 1 to R 9, independently, hydrogen, hydroxy, -C 4 alkoxy (branched or unbranched), or represent C 2 -C 4 alkenyl.
  • R 1 to R 9 independently, hydrogen, hydroxy, -C 4 alkoxy (branched or unbranched), or represent C 2 -C 4 alkenyl.
  • R 1 to R 9 Preferably, not more than five and more preferably not more than four of R 1 to R 9 are not hydrogen.
  • the remaining, ie preferably not more than three, radicals may be H or C 1 -C 4 -alkyl (branched or unbranched).
  • Such substituted compounds have been found to be particularly effective AhR antagonists.
  • the compound of the formula (X) also has a skin-whitening effect.
  • the compound of formula (X) does not itself induce induction of an AhR-inducible gene, in particular CYP1A1, nor does it induce translocation of AhR from the cytoplasm into the nucleus under these conditions.
  • the compound of the formula (X) is therefore particularly suitable for the above-described uses of AhR antagonists, and is particularly preferred as a pharmaceutical or component of pharmaceutical or non-pharmaceutical and in particular cosmetic preparations.
  • preparations are also given containing one or more compounds of the formula (II), in particular of the formula (X).
  • the compounds of formula (II) and especially the compound of formula (X) are present in preparations of the invention in an amount sufficient to (a) reduce or prevent translocation of AhR into a nucleus, (b) reduce or prevent UVB induced gene expression, and / or reducing or preventing polycyclic aromatic hydrocarbon, preferably TCDD, induced or inducible gene expression, and / or (d) reducing or preventing UVB-induced or -inducible skin damage, especially skin cancer, skin aging, dermatitis and sunburn ,
  • the compound of the formula (X) is preferably present in an amount sufficient for skin lightening.
  • the preparations according to the invention contain the compound (s) of the formula (II), in particular of the formula (X), preferably in a proportion of at least 0.0001% by weight, based on the total preparation.
  • concentrations in particular for the compound of the formula (X)
  • a reduction in the translocation of the AhR receptor into the cell nucleus of skin cells can be observed, and further the induction of AhR-inducible genes, in particular CYP1A1, for example by polycyclic aromatic hydrocarbons such as TCDD already Significantly reduced and achieved skin lightening.
  • the concentration of the compound (s) of the formula (II), in particular of the formula (X), is preferably from 0.0005 to 15% by weight, particularly preferably from 0.001 to 10% by weight, in particular from 0.01 to 5% by weight. -%, in each case based on the total composition.
  • the compounds of formula (II) when administered to the skin, exert a strong AhR antagonist effect by preventing or reducing the translocation of AhR into the nucleus and, in particular, reducing or inhibiting UVB-induced gene expression, namely CYP1A1 prevent.
  • the preparations may in particular be cosmetic preparations, with sunscreen preparations and after-sun preparations being particularly preferred.
  • the cosmetic or therapeutic formulations of the invention are prepared by conventional methods known per se, such that the compound (s) of the formula (II), in particular of the formula (X), are incorporated into cosmetic or dermatological formulations which are composed as usual and in addition to the skin and hair whitening effect can also serve for the treatment, care and cleansing of the skin or hair.
  • the formulations according to the invention are preferably in the form of an emulsion, eg emulsion of the type W / O (water in oil), O / W (oil in water), W / O / W (water in oil in water), O / W / O ( Oil in water in oil), PIT emulsion, Pickering emulsion, emulsion with a low oil content, micro or nanoemulsion, as a solution, for example in oil (fatty oils or fatty acid esters, in particular C 6 -C 32 fatty acid C 2 - C 3 o-esters) or silicone oil, dispersion, suspension, cream, lotion or milk, depending on the preparation process and ingredients, as a gel (including hydro, hydrodispersion, oleogel), spray (eg pump spray or spray with propellant) or foam or as a soaking solution for cosmetic wipes, as a cleaning agent such as soap, Syndet, liquid washing, showering and bathing preparation, bath products (capsule, oil, tablet,
  • the formulations according to the invention are particularly preferably in the form of an emulsion, in particular in the form of an emulsion of the type W / O, O / W, W / O / W, O / W / O, PIT emulsion, Pickering emulsion, low-emulsion Oil content, micro or nanoemulsion, a gel (including hydro, hydrodispersion, oleogel), a solution, for example in oil (fatty oils or fatty acid esters, especially C 6 -C 32 fatty acid-C 2 -C 30 -Est .er)) or silicone oil, or a spray (eg pump spray or spray with propellant).
  • oil fatty oils or fatty acid esters, especially C 6 -C 32 fatty acid-C 2 -C 30 -Est .er
  • silicone oil eg pump spray or spray with propellant.
  • the (especially topical) cosmetic or therapeutic formulations according to the invention may preferably contain cosmetic and / or dermatological auxiliaries and additives such as are conventionally used in such formulations, for example cooling agents, sunscreen agents (in particular UV filters and / or UV-filtering pigments) , Dyes, pigments that have a coloring effect, antioxidants, preservatives, anti-irritants, softening, moisturizing and / or moisturizing substances (moisturizing regulators, eg glycerine or urea), osmolytes, antimicrobial agents (eg antibacterial agents, bactericides, fungicides) , Virucides, deodorants (eg antiperspirants), surface-active substances (surfactants), emulsifiers, insect repellents (eg DEET, IR 3225, Dragorepel), plant extracts, anti-inflammatory agents (anti-inflammatory Agents), wound healing accelerating substances (eg chitin or chitosan and its derivatives), gel-forming agents,
  • vitamins eg vitamin C and derivatives, tocopherols and derivatives, vitamin A and derivatives
  • 2-hydroxycarboxylic acids eg citric acid, malic acid, L-, D- or DL-lactic acid
  • skin coloring agents eg walnut extracts or dihydroxyacetone
  • skin care and repair agents eg, cholesterol, ceramides, pseudoceramides, creatine and creatine esters
  • skin soothing agents eg, moisturizers, optical brighteners, lubricants, brighteners, fats, oils, saturated fatty acids and their salts, mono- or polyunsaturated fatty acids and their salts , alpha-hydroxy acids, polyhydroxy fatty acids or their derivatives (eg linoleic acid, alpha-lino nitric acid, gamma-linolenic acid or arachidonic acid and their respective natural or synthetic esters), phospholipids, waxes or other conventional ingredients of a cosmetic or dermatological formulation such as alcohols, alkanedio
  • Ingredients (auxiliaries and additives) with which the compound (s) of the formula (II), in particular of the formula (X), can be combined are particularly preferred: Abrasives, anti-dandruff agents, anti-inflammatory agents, antioxidants, antiperspirants, binders, buffers, chelating agents, depilatory agents, surface-active agents, emulsifiers, enzymes, essential oils, plant extracts, fibers, film formers, fixatives, foaming agents, foam stabilizers, foaming inhibitors, Foam boosters, gelling agents, hair care products, hair styling agents, hair relaxers, skin and hair lightening agents, moisturizers, moisturizers, insect repellents, optical brighteners, lubricants, shine agents, polymers, proteins, moisturizers, skin soothing agents, skin relaxants, wrinkle reducing active ingredients, Sunscreen agents, vitamins, oils, waxes, fats, phospholipids, saturated fatty acids and their salts, mono- or polyunsaturated fatty acids and their salts, al
  • auxiliaries and additives may be present in amounts of from 5 to 99% by weight, preferably from 10 to 80% by weight, based on the total weight of the formulation.
  • the amounts of cosmetic or dermatological auxiliaries and perfumes to be used in each case can easily be determined by a person skilled in the art by simple trial and error, depending on the nature of the particular product.
  • the formulations may comprise water in an amount of up to 99.99% by weight, preferably 5 to 80% by weight, based on the total weight of the formulation.
  • Cosmetic or therapeutic formulations according to the invention are preferably such formulations
  • emulsion selected from the group consisting of emulsion, solution, dispersion, suspension, cream, lotion, milk, gel, spray, foam,
  • auxiliaries and additives selected from the group consisting of
  • the formulations containing the compound (s) of the formula (II), in particular of the formula (X), are generally applied in sufficient quantities to the skin and / or hair in the manner customary for cosmetics and dermatics.
  • sunscreen filters UV absorbers, UV filters.
  • UV filters can improve the stability of the compounds of the formula (II) in formulations according to the invention.
  • UV filters can prevent or slow down a discoloration of the compounds of formula (II) caused by sunlight or other light. Both are important, especially in cosmetic formulations.
  • UV filters are therefore used to stabilize the compounds of formula (II), in particular by using one or more UV filters in an amount sufficient to stabilize the compounds of formula (II) in a formulation according to the invention, preferably using the further below (preferred) UV filter.
  • a further aspect of the invention relates to the cosmetic or therapeutic use of one or more compounds of the formula (II) for lightening the skin and / or hair in the presence of a compound or compounds of the formula (II), in particular of the formula (X ) stabilizing amount of one or more UV filters, all of the information given above on the selection of the substituent of course also apply to that extent.
  • the total amount of UV filters is preferably in the range of 0.1 to 2 wt .-%, in particular 0.2 to 1 wt .-%, based on the total weight of the formulation.
  • the ratio of the total weight fraction of UV filters to the total weight fraction of the compounds of the formula (II) to be used according to the invention or in accordance with the invention is preferably in the range from 100: 1 to 1: 100, particularly preferably in the range from 10: 1 to 1:10, very particularly preferably in the range of 5: 1 to 1: 5.
  • Formulations according to the invention comprising one or more UV filters (sunscreen filters, UV absorbers) preferably have a total proportion of UV filters in the range from 0.1 to 30% by weight, particularly preferably in the range from 0.2 to 20% by weight. -%, most preferably in the range of 0.5 to 15 wt .-%, based on the total weight of the formulation.
  • the formulations according to the invention particularly preferably contain one or more UVB filters, in particular of the types indicated below. It has been shown that the substances of the formula (II) according to the invention and in particular of the formulas (X) with UVB filters advantageously cooperate in preventing UVB-induced skin damage, skin changes and skin cancer.
  • a formulation of the invention contains a total amount of sunscreen actives, i. in particular UV filters and / or inorganic pigments (UV-filtering pigments), so that the formulation according to the invention has an SPF of greater than or equal to 2 (preferably greater than or equal to 5).
  • sunscreen actives i. in particular UV filters and / or inorganic pigments (UV-filtering pigments)
  • UV-filtering pigments i. in particular UV filters and / or inorganic pigments (UV-filtering pigments
  • Formulations according to the invention additionally comprising one or more sunscreen filters can be used in various ways Shapes are present, as they are usually used for sunscreen formulations.
  • sunscreen filters can be used in the form of an oil-in-water (O / W) type emulsion, a gel, a hydrodispersion, or even an aerosol.
  • O / W oil-in-water
  • the formulations according to the invention contain at least one UV-A filter and / or at least one UV-B filter and / or a broadband filter and / or at least one inorganic pigment.
  • Formulations according to the invention preferably comprise at least one UV-B filter or a broadband filter, more preferably at least one UV-A filter and at least one UV-B filter.
  • Suitable UV filters are e.g. organic UV absorbers from the class of 4-aminobenzoic acid and derivatives, salicylic acid derivatives, benzophenone derivatives, dibenzoylmethane derivatives, diphenylacrylates, 3-imidazol-4-yl-acrylic acid and its esters, benzofuran derivatives, benzylidene malonate derivatives, polymers UV absorber containing one or more silicon-organic radicals, cinnamic acid derivatives, camphor derivatives, trianilino-s-triazine derivatives, 2-hydroxyphenylbenzotriazole derivatives, phenylbenzimidazole sulfonic acid derivatives and their salts, menthyl anthranilates, benzotriazole derivatives, indole derivatives ,
  • organic UV absorbers from the class of 4-aminobenzoic acid and derivatives, salicylic acid derivatives, benzophenone derivatives, dibenzoylmethane derivatives
  • UV filters which can be used in the context of the present invention, are preferred, but of course not limiting.
  • UV-B filters such as:
  • Tris (2-ethylhexyl) -4,4 ' , 4 " - (1,3,5-triazine-2,4,6-triyltriimino) tribenzoate ( 2,4,6-trianilino- (p-carbo-2 '-ethylhexyl-1' -oxy) -1, 3,5-triazine) (Uvinul ® T150)
  • Broadband filters such as
  • UV-A filter e.g.
  • UV filters are included
  • particulate UV filters or inorganic pigments which may optionally be hydrophobized, such as the oxides of titanium (TiO 2 ), zinc (ZnO), iron (Fe 2 O 3 ), zirconium (ZrO 2 ), silicon (SiO 2 ), manganese (eg MnO), aluminum (Al 2 Os), Cers (eg Ce 2 Os) and / or mixtures thereof.
  • particularly dermatological formulations according to the invention may advantageously contain dyes and / or color pigments, in particular if they are to be used in the field of decorative cosmetics.
  • the dyes and pigments can be selected from the corresponding positive list of the Cosmetics Regulation or EC List of cosmetic colorants. In most cases, they are identical to the food-approved dyes.
  • Advantageous color pigments are, for example, titanium dioxide, mica, iron oxides (eg Fe 2 O 3 F 3 O 3 , FeO (OH)) and / or tin oxide.
  • Advantageous dyes are, for example, carmine, Berlin blue, chrome oxide green, ultramarine blue and / or manganese violet. Individual coolants preferred for use in the present invention are listed below.
  • cooling agents listed can also be used in combination with one another: L-menthol, D-menthol, racemic menthol, menthone glycerol acetal (trade name: Frescolat ® MGA), menthyl lactate (trade name: Frescolat ® ML, preferably it is at menthyl lactate to L-menthyl lactate, especially L-menthyl-L-lactate), substituted menthyl-3-carboxylic acid amides (eg menthyl-3-carboxylic acid N-ethylamide), 2-isopropyl-N-2,3-trimethylbutanamide, substituted cyclohexanecarboxamides, 3-menthoxypropane-1, 2-diol, 2-
  • menthyl hydroxycarboxylic acid ester eg, menthyl-3-hydroxybutyrate
  • monomenthyl succinate 2-mercaptocyclodecanone
  • menthyl -pyrrolidine- ⁇ -oncarboxylate 2,3-dihydroxy-p-menthane
  • 3,3,5-trimethylcyclohexanone glycerol ketal
  • Preferred cooling active ingredients are: L-menthol, D-menthol, racemic menthol, menthone glycerol acetal (trade name: Frescolat ® MGA), menthyl lactate
  • L-menthyl lactate especially L-menthyl-I-lactate, trade name:
  • menthyl-3-carboxamides for example menthyl-3-carboxylic acid-N-ethylamide
  • 2-isopropyl-N-2,3-trimethylbutanamide substituted
  • Cyclohexanecarboxamides 3-menthoxypropane-1,2-diol, 2-hydroxyethylmenthylcarbonate, 2-hydroxypropylmenthylcarbonate, isopulegol.
  • cooling active ingredients are: L-menthol, racemic menthol, menthone glycerol acetal (trade name: Frescolat ® MGA), menthyl lactate (preferably l-menthyl lactate, in particular L-menthyl L-lactate, trade name: Frescolat ® ML), 3-menthoxypropane-1, 2-diol, 2-hydroxyethylmenthyl carbonate, 2-hydroxypropylmenthyl carbonate.
  • Very particularly preferred cooling agents are: L-menthol,
  • Menthoneglycerol (trade name: Frescolat ® MGA), menthyl
  • L-menthyl lactate in particular L-menthyl L-lactate, trade name: Frescolat ® ML.
  • the use concentration of the cooling active substances to be used is preferably in the concentration range from 0.01 to 20% by weight and more preferably in the concentration range from 0.1 to 5% by weight, based on the total mass of the finished (ready-to-use), preferably topical , cosmetic or therapeutic (pharmaceutical) formulation.
  • the formulations according to the invention for cosmetic (eg dermatological) and / or therapeutic applications may contain suitable further active ingredients for skin and hair whitening.
  • suitable skin- and hair-lightening active ingredients are Kojikladre (5-hydroxy-2-hydroxymethyl-4-pyranone), Kojikladerivate such as Kojikladipalmitat, arbutin, ascorbic acid, ascorbic acid derivatives, hydroquinone, Hydrochinonderivate, resorcinol, sulfur-containing molecules such as glutathione or cysteine, alpha- Hydroxy acids (eg, citric acid, lactic acid, malic acid) and their derivatives, N-acetyl-tyrosine and derivatives, undecenoylphenylalanine, gluconic acid, 4-alkylresorcines, 4- (1-phenylethyl) 1, 3-dihydroxybenzene, chromone derivatives such as aloesin, flavonoids , Thymol derivatives, 1-aminoe
  • the amount of the aforementioned exemplary further active ingredients for skin and hair lightening (one or more compounds) in the formulations according to the invention is then preferably 0.005 to 30% by weight, preferably 0.01 to 20% by weight, particularly preferably 0.01 to 5 wt .-%, based on the total weight of the formulation.
  • Formulations according to the invention in particular if the application is provided in the facial area, it may be advantageous to choose as the dye one or more substances from the following group: 2,4-dihydroxyazobenzene, 1- (2'-chloro-4'-nitro-1 'phenylazo) -2-hydroxynaphthalene,
  • dermatological formulations containing pearlescent pigments are also advantageous for the purposes of the present invention.
  • types of pearlescent gels listed below are preferred:
  • Natural pearlescent pigments e.g.
  • Monocrystalline pearlescent pigments e.g. Bismuth oxychloride (BiOCl)
  • 3rd layer substrate Pigments e.g. Mica / metal oxide
  • pearlescent pigments are, for example, pulverulent pigments or castor oil dispersions of bismuth oxychloride and / or titanium dioxide and also bismuth oxychloride and / or titanium dioxide on mica. Particularly advantageous is e.g. the luster pigment listed under CIN 77163.
  • Pearlescent pigments are available in a variety of known ways.
  • Metal oxides such as silica and the like coat more.
  • SiO 2 particles coated with TiO 2 and Fe 2 O 3 which are sold by Merck and are particularly suitable for the optical reduction of fine wrinkles, are advantageous.
  • iron pearlescent pigments which are prepared without the use of mica.
  • Such pigments are available, for example, under the trade name Sicopearl Kupfer 1000 from BASF.
  • effect pigments which are available under the trade name Metasomes Standard / Glitter in various colors (yellow, red, green, blue) from Flora Tech.
  • the glitter particles are present in mixtures with various auxiliaries and dyes (such as the dyes with the CIN 19140, 77007, 77289, 77491).
  • the dyes and pigments can be present both individually and in a mixture and can be mutually coated with one another, wherein different coating thicknesses generally cause different color effects.
  • the total amount of the dyes and coloring pigments is advantageously selected from the range of e.g. 0.1 wt .-% to 30 wt.%, Preferably selected from 0.5 to 15 wt .-%, in particular from 1, 0 to 10 wt .-%, each based on the total weight of the (cosmetic) formulations.
  • the formulations of the invention may also contain (additional) antioxidants or preservatives.
  • antioxidants or preservatives it is possible to use all antioxidants which are suitable or customary for cosmetic (for example dermatological) and / or therapeutic applications.
  • Antioxidants in the context of the invention are all substances that reduce the amount of free radicals in cells and tissues.
  • Antioxidants are advantageously selected from the group consisting of amino acids (eg glycine, histidine, tyrosine, tryptophan) and their derivatives, imidazoles (eg urocaninic acid) and their derivatives, peptides such as D, L-carnosine, D-carnosine, L-carnosine and their derivatives (eg anserine), carotenoids, carotenes (eg alpha-carotene, beta-carotene, lycopene) and their derivatives, lipoic acid and its derivatives (eg dihydrolipoic acid), aurothioglucose, propylthiouracil and other thiols (eg thioredoxin, glutathione, cysteine, Cystine, cystamine and their glycosyl, N-acetyl, methyl, ethyl,
  • quercetin and its derivatives for example, alpha-
  • Superoxide dismutase, stilbenes and their derivatives eg stilbene oxide, trans-stilbene oxide
  • inventively suitable derivatives salts, esters, ethers, sugars, nucleotides, nucleosides, peptides and lipids
  • antioxidant extracts or fractions of plants such eg Green Tea, Rooibos, Honeybush, Grape, Rosemary, Sage, Melissa, Thyme, Lavender, Olive, Oats, Cocoa, Ginkgo, Ginseng, Licorice, Honeysuckle, Sophora, Pueraria, Pinus, Citrus, Phyllanthus emblica or St. John's Wort, Grape Seeds, Wheat Germ, Phyllantus emblica.
  • coenzymes such as coenzyme Q10, plastoquinone, menaquinone, ubiquinols 1-10, ubiquinones 1-10 or derivatives of these substances.
  • the amount of antioxidants (one or more compounds) in the formulations according to the invention is preferably from 0.01 to 20% by weight, more preferably from 0.05 to 10% by weight, in particular from 0.2 to 5% by weight on the total weight of the formulation.
  • vitamin E and / or its derivatives represent the antioxidant (s)
  • vitamin A or vitamin A derivatives, or carotenes or derivatives thereof constitute the antioxidant (s)
  • their respective concentrations are in the range from 0.001 to 10% by weight, based on the total weight of the formulation , to choose.
  • Formulations of the invention may also contain preservatives.
  • Preservatives which can be used are: all antioxidants suitable or customary for cosmetic (for example dermatological) and / or therapeutic applications, conventional preservatives (for example formaldehyde,
  • Glutaric dialdehyde, parabens e.g., methyl, ethyl, propyl and butylparaben
  • Antiirritants may in this case be all anti-inflammatory or reddening and antipruritic agents which are suitable or customary for cosmetic (eg dermatological) and / or therapeutic applications Be active ingredients. Preference is given to all substances which reduce the amount of cytokines, interleukins, prostaglandins and / or leukotrienes in cells and tissues.
  • steroidal corticosteroid-type anti-inflammatory substances such as Hydrocortisone, dexamethasone, dexamethasone phosphate, methylprednisolone or cortisone, the list being expandable by the addition of other steroidal anti-inflammatory drugs.
  • Non-steroidal anti-inflammatory drugs can also be used.
  • oxicams such as piroxicam or tenoxicam should be mentioned here;
  • Salicylates such as aspirin, disalcide, solprin or fendosal;
  • Acetic acid derivatives such as diclofenac, fenclofenac, indomethacin, sulindac, tolmetin, or clindanac;
  • Fenamates such as Mefenamic, Meclofenamic, Flufenamic or Niflumic;
  • Propionic acid derivatives such as ibuprofen, naproxen, benoxaprofen or pyrazoles such as phenylbutazone, oxyphenylbutazone, febrazone or azapropazone.
  • Natural anti-inflammatory or redness and itch soothing substances can be used.
  • Plant extracts, special highly effective plant extract fractions as well as high-purity active substances isolated from plant extracts can be used. Particularly preferred are extracts, fractions and active substances from chamomile, Aloe vera, Commiphora species, Rubia species, Echinacea species, pastures, fireweed, oats, black and green tea, gingko, coffee, pepper, currant, tomato, vanilla, almonds , as well as pure substances such as Bisabolol, apigenin-7-glucoside, boswellic acid, phytosterols, glycyrrhizic acid, glabridin or licochalkone A.
  • the amount of anti-irritants (one or more compounds) in formulations of the invention is preferably 0.01 to 20 wt .-%, particularly preferably 0.03 to 10 wt .-%, in particular 0.05 to 5 wt .-%, based on the total weight of the formulation.
  • the formulations according to the invention may furthermore contain moisturizing regulators and osmolytes contain.
  • moisturizing regulators sodium lactate, urea, alcohols (in particular 1, 2-pentanediol, 1, 2-hexanediol, 1, 2-octanediol, 1, 2-decanediol and mixtures thereof) , Sorbitol, glycerol, propylene glycol, collagen, elastin or hyaluronic acid, diacyladipate, petrolatum, ectoine, urocaninic acid, lecithin, pantheol, phytantriol, lycopene, algae extract, ceramides, cholesterol, glycolipids, chitosan, chondroitin sulfate, polyamino acids and sugars, lanolin, Lanolin esters, amino acids, alpha-hydroxy acids (eg citric acid, lactic acid
  • compositions according to the invention furthermore advantageously contain antimicrobial agents.
  • antimicrobial agents include:
  • Aryl- or aryloxy-substituted unbranched or mono- and poly-alkyl-branched saturated or one to five-fold unsaturated (up to five double or triple bonds, also mixed en-in compounds) alkanediols, dialdehydes and dicarboxylic acids of chain lengths C 2 to C 40 are particularly preferred Chain lengths C 4 to C 12
  • Oligoglycerinmonoalkylether Bis (mono- / oligoglyceryl) alkyldiethers) and
  • Dicarboxylic acids (mono- and oligoglycerol monoalkyl esters; bis (mono- / oligoglyceryl) alkyl diesters) of the chain lengths C 2 to C 40 .
  • Mono- and oligoglycerides of lanolin, lanolin alcohols and lanolin acids eg glyceryl lanolate, neocerite), glycyrrhytitic acid and derivatives (eg glycyrrhetinyl stearates), natural and synthetic cardenolides (eg digitoxin, dogoxin, digoxygenin, gitoxygenin, strophanthin and strophanthin), natural and synthetic Bufadienolides (eg, Scillaren A, Scillarenin and Bufotalin), sapogenins and steroid sapogenins (eg, amyrins, oleanolic acid, digitonin, gitogenin, tigogenin, and diosgenin), steroid alkaloids, and plant steroidal of animal origin (eg, tomatidine, solanine, solanidine, conessin, batrachotoxin and homobatrachotoxin
  • Mono- and Oligohydroxyfettklaklad the chain lengths C 2 to C 24 (eg, lactic acid, 2-hydroxypalmitic acid), their oligo- and / or polymers and vegetable and animal raw materials containing the same.
  • Acyclic terpenes terpene hydrocarbons (e.g., ocimene, myrcene), terpene alcohols (e.g., geraniol, linalool, citronellol), terpene aldehydes and ketones (e.g., citral, pseudoionone, beta-ionone); Monocyclic terpenes: terpene hydrocarbons (e.g., terpinene, terpinolene limonene), terpene alcohols (e.g., terpineol, thymol, menthol), terpene ketones (e.g., pulegone, carvone); Bicyclic terpenes: terpene hydrocarbons (e.g., caran, pinan, bornan), terpene alcohols (e.g., borneol, isoborneol), terpene ketones (e.g., camphor); Se
  • Antimicrobial peptides and proteins with an amino acid number of 4 to 200 eg Skin Antimicrobial Peptides (SAPs), Lingual Antimicrobial Peptides (LAPs), human beta-defensins (especially h-BD1 and h-BD2), lactoferrins and their hydrolyzates and their derived Peptides, Bactericidal / Permeability Increasing Proteins [BPIs], Cationic Microbial Proteins [CAPs], Lysozyme.
  • Highly suitable carbohydrates or "carbohydrate derivatives" which are also intended to include the term “carbohydrates” in linguistic terms, are sugars and substituted sugars or sugar residue-containing compounds.
  • the sugars include in each case the deoxy and dideoxy forms, N-acetyl-galactosamine, N-acetyl-glucosamine- and sialic acid-substituted derivatives and also sugar esters and ethers. To be favoured
  • Glycosaminoglycans hemicelluloses, substituted cellulose and substituted starch, in particular in each case the hydroxyalkyl-substituted polysaccharides.
  • amylose amylopectin xanthan, alpha-, beta- and gamma-dextrin.
  • the polysaccharides may e.g. consist of 4 to 1,000,000, in particular 10 to 100,000 monosaccharides.
  • those chain lengths are selected which ensure that the active ingredient is soluble in or incorporated into the particular formulation.
  • Sphingolipids such as sphingosine; N-monoalkylated sphingosines; N, N-dialkylated sphingosines; Sphingosine-1-phosphate; Sphingosine-1 sulfate; Psychosine (sphingosine-beta-D-galactopyranoside); sphingosylphosphorylcholine;
  • Lysosulphatides sphingosylgalactosylsulfate; lysocerebroside sulfate); lecithin; sphingomyelin; Sphinganine.
  • Typical antibacterial effective oils include oils of anise, lemon, orange, rosemary, wintergreen, carnation, thyme, lavender, hops, citronella, wheat, lemongrass, cedar, cinnamon, geranium, sandalwood, violet, eucalyptus, peppermint, gum benzoin, basil, fennel , Menthol and Ocmea origanum, Hydastis carradensis, Berberidaceae daceae, Ratanhiae or Curcuma longa.
  • Important antimicrobial substances that can be found in essential oils are, for example, anethole, catechol, camphene, carvacrol, eugenol, eucalyptol, ferulic acid, farnesol, hinokitiol, tropolone, limonene, menthol, methyl salicylate, thymol, terpineol, verbenone, berberine, curcumin, Caryophyllene oxide, nerolodol, geraniol.
  • the amount of antimicrobial agents in the formulations 0.01 to 20 wt .-%, based on the total weight of the formulations, particularly preferably 0.05 to 10 wt .-%.
  • the formulations according to the invention may contain deodorants, ie active substances with a deodorizing and antiperspirant effect.
  • deodorants ie active substances with a deodorizing and antiperspirant effect.
  • odor maskers such as the usual perfume ingredients, antiperspirants based on aluminum, zirconium or zinc salts
  • odor absorbers for example, the phyllosilicates described in the patent publication DE-P 40 09 347, of these in particular montmorillonite, kaolinite, nontronite, saponite, hectorite , Bentonite, smectite, furthermore, for example, zinc salts of ricinoleic acid.
  • bactericidal or bacteriostatic deodorizing substances such.
  • the amount of deodorant and / or antiperspirant active ingredients in the formulations is from 0.01 to 20% by weight, based on the total weight of the formulations, particularly preferably from 0.05 to 10% by weight.
  • the (especially cosmetic) formulations according to the invention can also contain anionic, cationic, nonionic and / or amphoteric surfactants, in particular if crystalline or microcrystalline solids, for example inorganic micropigments, are to be incorporated into the formulations.
  • Anionic surfactants generally have carboxylate, sulfate or sulfonate groups as functional groups. In aqueous solution, they form negatively charged organic ions in an acidic or neutral medium. Cationic surfactants are almost exclusively characterized by the presence of a quaternary ammonium group. In aqueous solution they form positively charged organic ions in an acidic or neutral environment. Amphoteric surfactants contain both anionic and cationic groups and behave accordingly in aqueous solution depending on the pH as anionic or cationic surfactants. They have a positive charge in a strongly acidic environment and a negative charge in an alkaline environment. In the neutral pH range, however, they are zwitterionic. Typical of non-ionic surfactants are polyether chains. Nonionic surfactants do not form ions in an aqueous medium.
  • acylamino acids and their salts
  • Acylglutamates for example sodium acylglutamate, di-TEA-palmitoyl-aspartate and sodium caprylic / capringlutamate
  • Acyl peptides for example palmitoyl-hydrolyzed milk protein, sodium cocoyl-hydrolyzed soy protein and sodium / potassium cocoyl-hydrolyzed collagen,
  • Sarcosinates for example myristoyl sarcosine, TEA-lauroyl sarcosinate, sodium lauroyl sarcosinate and sodium cocoyl sarcosinate,
  • Taurates for example sodium lauroyl taurate and sodium methyl cocoyl taurate
  • Carboxylic acids and derivatives such as
  • lauric acid for example, lauric acid, aluminum stearate, magnesium alkoxide and zinc undecylenate,
  • Ester carboxylic acids for example, calcium stearoyl lactylate, laureth-6 citrate, and sodium PEG-4 lauramide carboxylate,
  • Ether carboxylic acids for example sodium laureth-13 carboxylate and sodium PEG-6 cocamide carboxylate,
  • Phosphoric acid esters and salts such as DEA-oleth-10-phosphate and dilaureth-4-phosphate,
  • Sulfonic acids and salts such as
  • Acyl isothionates e.g. Sodium / ammonium cocoylisethionate
  • alkylarylsulfonates for example sodium, sodium Ci 2- and olefin sulfonate, sodium lauryl and magnesium PEG-3 cocamide sulfate,
  • Sulfosuccinates for example, dioctyl sodium sulfosuccinate, disodium laureth sulfosuccinate, disodium lauryl sulfosuccinate and disodium undecylenamido
  • Sulfuric acid esters such as
  • Alkyl ether sulfate for example, sodium, ammonium, magnesium, MIPA, TIPA laureth sulfate, sodium myreth sulfate and sodium C12-13 pareth sulfate,
  • Alkyl sulfates for example, sodium, ammonium and TEA lauryl sulfate.
  • Quaternary surfactants contain at least one N atom covalently linked to 4 alkyl or aryl groups. This leads, regardless of the pH, to a positive charge. Alkylbetaine, alkylamidopropylbetaine and alkylamidopropylhydroxysulfain are advantageous.
  • the cationic surfactants used can furthermore preferably be selected from the group of quaternary ammonium compounds, in particular benzyltrialkylammonium chlorides or bromides, such as, for example, benzyldimethylstearylammonium chloride, furthermore alkyltrialkylammonium salts, for example cetyltrimethylammonium chloride or bromide, alkyldimethylhydroxyethylammonium chlorides or bromides, dialkyldimethylammonium chlorides or bromides Alkylamidethyltrimethylammonium ether sulfates, alkylpyridinium salts, for example lauryl or cetylpyrimidinium chloride, imidazoline derivatives and compounds having a cationic character, such as amine oxides, for example alkyldimethylamine oxides or alkylaminoethyldimethylamine oxides. Cetyltrimethylammonium salts are particularly advantageous to use.
  • Acyl / dialkylethylenediamine for example sodium acylamphoacetate, dinetrium acylamphodipropionate, disodium alkylamphodiacetate, sodium acyl amphohydroxypropylsulfonate, disodium acylamphodiacetate and sodium acylamphopropionate,
  • N-alkylamino acids for example aminopropylalkylglutamide, alkylaminopropionic acid, sodium alkylimidodipropionate and lauroamphocar- boxyglycinate.
  • Alkanolamides such as cocamide MEA / DEA / MIPA
  • Amine oxides such as cocoamidopropylamine oxide
  • Esters which are formed by esterification of carboxylic acids with ethylene oxide, glycerol, sorbitan or other alcohols,
  • Ethers for example ethoxylated / propoxylated alcohols, ethoxylated / propoxylated esters, ethoxylated / propoxylated glycerol esters, ethoxylated / propoxylated triglyceride esters, ethoxylated propoxylated lanolin, ethoxylated / propoxylated polysiloxanes, propoxylated POE ethers and alkyl polyglycosides such as lauryl glucoside, Decyl glycoside and cocoglyco-sid.
  • Polyglycerol esters diglycerol esters, monoglycerol esters
  • Methyl glucose esters esters of hydroxy acids
  • the surface-active substance (surfactant) or the combination of surface-active substances can be present in a concentration of between 1 and 98% by weight in the formulations according to the invention, based on the total weight of the formulations.
  • Cosmetic e.g., dermatological
  • therapeutic formulations according to the invention which contain the compounds of the formula (I) according to the invention or to be used according to the invention may also be present as emulsions.
  • oil phase (lipid phase) in the formulations according to the invention can advantageously be selected from the following substance group:
  • Mineral oils preferably paraffin oil
  • mineral waxes fatty oils preferably mineral waxes fatty oils, fats, waxes and other natural and synthetic fatty substances, preferably esters of fatty acids with alcohols of low C number, for example with isopropanol, propylene glycol or glycerol, or esters of fatty alcohols with alkanoic acids of low C number or with fatty acids;
  • Alkyl benzoates e.g., mixtures of n-dodecyl, n-tridecyl, n-tetradecyl, or n-pentadecyl benzoate;
  • cyclic or linear silicone oils such as dimethylpolysiloxanes, diethylpolysiloxanes, diphenylpolysiloxanes and mixed forms thereof.
  • esters in particular (a) esters of saturated and / or unsaturated branched and / or unbranched alkanecarboxylic acids having a chain length of 3 to 30 carbon atoms and saturated and / or unsaturated, branched and / or unbranched alcohols of one Chain length of 3 to 30 carbon atoms, (b) esters of aromatic carboxylic acids and saturated and / or unsaturated, branched and / or unbranched alcohols having a chain length of 3 to 30 carbon atoms.
  • ester oils are isopropyl myristate, isopropyl palmitate, isopropyl stearate, isopropyl oleate, n-butyl stearate, n-hexyl laurate, n-decyl laurate, n-decyl oleate, isooctyl stearate, isononyl stearate, isononyl isononanoate, 3,5,5-trimethylhexyl-3,5,5-trimethylhexanoate, 2 Ethylhexylisononanoate, 2-ethylhexyl-3,5,5-trimethylhexanoate, 2-ethylhexyl-2-ethylhexanoate, cetearyl 2-ethylhexanoate, 2-ethylhexyl palmitate, 2-ethylhexyl laurate, 2-hexyldecyl
  • the oil phase can advantageously be selected from the group of branched and unbranched hydrocarbons and waxes, silicone oils, dialkyl ethers, the group of saturated or unsaturated, branched or unbranched alcohols, and fatty acid triglycerides, in particular the triglycerol esters of saturated and / or unsaturated, branched and / or unbranched alkanecarboxylic acids of a chain length of 8 to 24, in particular 12 to 18 carbon atoms.
  • the fatty acid triglycerides can be chosen advantageously from the group of synthetic, semisynthetic and natural oils, for example triglycerides of capric or caprylic acid, apricot kernel oil, avocado oil, cottonseed oil, borage seed oil, thistle oil, peanut oil, gamma-oryzanol, rose hip kernel oil, hemp oil, hazelnut oil, currant seed oil, coconut oil, cherry kernel oil, salmon oil, linseed oil , Corn oil, macadamia nut oil, almond oil, evening primrose oil, mink oil, olive oil, palm oil, palm kernel oil, pecan oil, peach kernel oil, pistachio kernel oil, rapeseed oil, rice germ oil, castor oil, safflower oil, sesame oil, soybean oil, sunflower oil, tea tree oil, grapeseed oil or wheat germ oil, and the like.
  • triglycerides of capric or caprylic acid apricot kernel oil, avocado oil, cottonseed oil,
  • oil phase is selected from the group consisting of 2-ethylhexyl isostearate, octyldodecanol, isotridecyl isononanoate, isoeicosane, 2-ethylhexyl cocoate, C 2-15 Alkyl benzoate, caprylic capric triglyceride and dicaprylyl ether.
  • mixtures of C 2 -i benzoate 5 alkyl and 2-ethylhexyl isostearate mixtures of C 2-15 alkyl benzoate and isotridecyl isononanoate and mixtures of C 2 i 5 alkyl benzoate, 2-ethylhexyl isostearate and isotridecyl isononanoate.
  • the hydrocarbons paraffin oil, squalane and squalene can be used advantageously.
  • the oil phase may also contain or consist entirely of cyclic or linear silicone oils, although it is preferable to use an additional content of other oil phase components besides the silicone oil or silicone oils.
  • Cyclomethicone eg decamethylcyclopentasiloxane
  • silicone oils are also advantageously usable, for example undecamethylcyclotrisiloxane, polydimethylsiloxane and poly (methylphenylsiloxane).
  • mixtures of cyclomethicone and Isotridecylisononanoat and from cyclomethicone and 2-Ethylhexylisostearat are particularly advantageous.
  • aqueous phase of inventive formulations present as an emulsion may advantageously comprise alcohols, diols or lower C-number polyols, and also their ethers, preferably ethanol, isopropanol, propylene glycol, glycerol, Ethylene glycol, ethylene glycol monoethyl or monobutyl ether,
  • Hyaluronic acid, guar gum, xanthan gum, hydroxypropyl methylcellulose, or allulose derivatives particularly advantageous from the group of polyacrylates, preferably a polyacrylate from the group of so-called carbopols, for example Carbopols types 980, 981, 1382, 2984, 5984, each individually or in combination, or from the group of polyurethanes, furthermore alpha- or beta-hydroxy acids, preferably lactic acid, citric acid or salicylic acid, besides emulsifiers, which can be advantageously selected from the group of ionic, nonionic, polymeric, phosphate-containing and zwitterionic emulsifiers,
  • Emulsion formulations according to the invention advantageously comprise one or more emulsifiers.
  • O / W emulsifiers can be advantageously selected from the group of polyethoxylated or polypropoxylated or polyethoxylated and polypropoxylated products, for example:
  • alkyl ether sulfates of the general formula RO - (- CH 2 -CH 2 -O-) n -SO 3 -H
  • the polyethoxylated or polypropoxylated or polyethoxylated and polypropoxylated O / W emulsifiers used are particularly advantageously selected from the group of substances having HLB values of from 11 to 18, very particularly advantageously having HLB values of from 14.5 to 15.5 if the O / W emulsifiers have saturated radicals R and R '. If the O / W emulsifiers have unsaturated radicals R and / or R ', or if isoalkyl derivatives are present, the preferred HLB value of such emulsifiers may also be lower or higher.
  • fatty alcohol ethoxylates from the group of ethoxylated stearyl alcohols, cetyl alcohols, cetylstearyl alcohols (cetearyl alcohols). Particularly preferred are:
  • the ethoxylated alkyl ether carboxylic acid or its salt may advantageously be the sodium laureth-1 l-carboxylate.
  • alkyl ether sulfate sodium laureth 1 -4 sulfate can be advantageously used.
  • ethoxylated cholesterol derivative polyethylene glycol (30) cholesteryl ether can be advantageously used. Also polyethylene glycol (25) soybean oil has been proven.
  • sorbitan esters from the group of polyethylene glycol (20) sorbitan monolaurate, polyethylene glycol (20) sorbitan monostearate, polyethylene glycol (20) sorbitan monoisostearate, polyethylene glycol (20) sorbitan monopalmitate, polyethylene glycol (20) sorbitan monooleate.
  • W / O emulsifiers can be used: fatty alcohols having 8 to 30 carbon atoms, monoglycerol esters of saturated and / or unsaturated, branched and / or unbranched alkanecarboxylic acids of a chain length of 8 to 24, in particular 12 to 18 carbon atoms, diglycerol esters saturated and / or unsaturated, branched and / or unbranched alkanecarboxylic acids having a chain length of from 8 to 24, in particular 12 to 18, carbon atoms, monoglycerol ethers of saturated and / or unsaturated, branched and / or unbranched alcohols having a chain length of from 8 to 24, in particular 12 to 18 carbon atoms.
  • Atoms diglycerol ethers of saturated and / or unsaturated, branched and / or unbranched alcohols of a chain length of 8 to 24, in particular 12 to 18 C-atoms, propylene glycol esters of saturated and / or unsaturated, branched and / or unbranched alkanecarboxylic acids of a chain length of 8 to 24, in particular 12 to 18 C-atoms and sorbitan esters of saturated un d / or unsaturated, branched and / or unbranched alkanecarboxylic acids having a chain length of 8 to 24, in particular 12 to 18 carbon atoms.
  • W / O emulsifiers are glyceryl monostearate, glyceryl monoisostearate, glyceryl monomyristate, glyceryl monooleate, diglyceryl monostearate, diglyceryl monoisostearate, propylene glycol monostearate,
  • the total amount of compounds of the formula (II), of UV absorbers and of (further) skin lightening agents in the formulations according to the invention is preferably from 0.0001 to 20% by weight, based on the total weight of the formulation, particularly preferably from 0.0005 to 15% by weight.
  • topical formulations according to the invention are applied in a sufficient amount to the skin and / or the hair in the manner customary for cosmetics.
  • HaCaT keratinocytes were cultured in DMEM medium containing 10% fetal calf serum. The cells were irradiated with UVB radiation in PBS (phosphate buffered saline). For irradiation with UVB we used the lamp TL20W / 12RS, which contains four parallel tubes (Philips, Eindhoven, The Netherlands) and emits most of their energy in the UVB range (290-320 nm). The emission peak of the lamp is 310 nm. Control cells were subjected to the same treatment but were not irradiated. To inhibit the AhR, the cells were treated with the test substances 1 h before irradiation.
  • PBS phosphate buffered saline
  • HaCaT cells were plated on chambered slides at a cell density of 5 x 10 4 cells / well. Some were pretreated with the test substances for 1 h. After 24 h, they were incubated with the plasmid pEGFP-AhR
  • FuGene 6 transfection reagent (Roche, Mannheim, Germany) transfected according to the manufacturer. After a further 24 h, the transfected cells were irradiated with 100 J / m 2 UVB. After 40 minutes, the cells were fixed with 4% paraformaldehyde for 10 minutes and washed with PBS. The slides were dried and incubated with Vectashield Mounting Medium (Vector Laboratories,
  • the AhR coupled to the GFP was visualized using a fluorescence microscope (Olympus, Hamburg,
  • HaCaT cells were irradiated with 100 J / m 2 UVB. Some cells were pretreated 1 h before irradiation with the test substances. After 4 h, the RNA was prepared with the RNeasy kit (Qiagen, Hilden, Germany) according to the manufacturer's instructions. Reverse transcription was performed as described (Arch Toxicol (2005) PMID 16205913). PCR fragments were amplified by real-time PCR in the LightCycler (Roche, Mannheim, Germany).
  • the PCR mix consisted of 1/10 volume of QuantiTect SYBR Green ® PCR Master Mix (Qiagen, Hilden, Germany), 0.5 uM of each primer, 2 .mu.l cDNA and DEPC (diethyl pyrocarbonate) treated H 2 O in a final volume of 20 ul together.
  • the PCR started with an initial 15 minute warming to 95 ° C to activate the DNA polymerase.
  • the PCR conditions were as follows: 40 cycles of 15 sec 94 ° C for denaturation, 25 sec 60 ° C for primer annealing, 30 sec 72 ° C for extension and 2 sec 72 ° C for fluorescence measurement.
  • PCR primers for human CYP1A1 had the following sequences: 5'-TAGACACTGATCTGGCTGCAG for the forward and 5'GGGAAGGCTCCATCAGCATC for the reverse primer (Cancer Res. 1990, 50, 4315), which after amplification formed a 146 bp fragment.
  • the quantification of the PCR products was carried out using a fragment-specific standard curve and was quantified using the LightCycler software 3. Standard curves were prepared with 10 2 to 10 6 CYP1A1 cDNA copies / ⁇ l and amplified as described above.
  • HaCaT cells were irradiated with 100 J / m 2 UVB. Some cells were pretreated 1 h before irradiation with the test substances. After 4 h, the RNA was prepared with the RNeasy kit (Qiagen, Hilden, Germany) according to the manufacturer's instructions. Reverse transcription was performed as described (Arch Toxicol (2005) PMID 16205913). PCR fragments were amplified by real-time PCR in the LightCycler (Roche, Mannheim, Germany).
  • the PCR mix consisted of 1/10 volume of QuantiTect SYBR Green ® PCR Master Mix (Qiagen, Hilden, Germany), 0.5 uM of each primer, 2 .mu.l cDNA and DEPC (diethyl pyrocarbonate) treated H 2 O in a final volume of 20 ul together.
  • the PCR started with an initial 15 minute warming to 95 ° C to activate the DNA polymerase.
  • the PCR conditions were as follows: 40 cycles of 15 sec 94 ° C for denaturation, 25 sec 60 ° C for primer annealing, 30 sec 72 ° C for extension and 2 sec 72 ° C for fluorescence measurement.
  • PCR primers for human CYP1A1 had the following sequences: 5'-TAGACACTGATCTGGCTGCAG for the forward and 5'GGGAAGGCTCCATCAGCATC for the reverse primer (Cancer Res. 1990, 50, 4315), which after amplification formed a 146 bp fragment.
  • the quantification of the PCR products was carried out using a fragment-specific standard curve and was quantified using the LightCycler software 3. Standard curves were prepared at 10 2 to 10 6 CYP1A1 cDNA copies / ul and amplified as described above. Table 1
  • Example 3 Detection of induction of CYP1A1 by AhR activation in murine melanocytes
  • Murine melanocytes of strain C57BL / 6 were expanded in culture (medium: "melanocyte growth medium” (Promocell), 37 ° C, 5% CO2.) Fibroblast growth was inhibited by addition of G418 (day 10-13, 45 ⁇ g / ml).
  • the semiconfluent cells were treated with the AhR agonist FICZ for up to 7 days, untreated cells were carried in parallel, the medium was removed, the cells were lysed, the RNA prepared as described in Example 2, and the content of CYP450 1A1 RNA quantified photometrically using quantitative RT-PCR.
  • MNF 3-methoxy-4-nitroflavone
  • FICZ stimulated AhR translocation into the nucleus in the presence and absence of benz [a] -pyrene.
  • FICZ was generated by irradiating a 5OmM tryptophan solution with a UVB source for 60 minutes.
  • Semiconfluent cultures of primary mouse melanocytes (culture conditions as above) were cultured for 2 days with this FICZ-containing solution.
  • the cells were removed, lysed with 0.1% Triton X100, centrifuged and the melanin content from the lysate pellet after cell disruption with 1 M NH 4 OH (4 h, 85 ° C.) determined photometrically in an ELISA reader at 405 nm , From the absorbance value, that of the blank containing only NH 4 OH was subtracted.
  • the protein content of the lysate supernatants was performed by the Bradford method.
  • the FICZ-treated Melanocytes contained significantly more melanin than the untreated cells (p ⁇ 0.05, Student's t-test) ( Figure 3).
  • Semiconfluent primary mouse melanocytes (culture conditions as above) were further cultured for 7 days with 10 ⁇ M MNF.
  • Cells were harvested, lysed with 0.1% Triton-X100, centrifuged and the melanin content from the lysate pellet after cell digestion with 1 M NH4OH (4 h, 85 ° C) determined photometrically in an ELISA reader at 405 nm. From the absorbance value, that of the blank containing only NH4OH was subtracted.
  • the MNF-treated melanocytes contained significantly less melanin than the untreated cells (p ⁇ 0.05, Student's t-test) ( Figure 4).
  • Formulation 1 "Water in Oil” Emulsion with UVA / B Broadband Protection Formulation 2: “Oil in Water” Emulsion with UVA / B Broadband Protection Formulation 3: “Oil in Water” Emulsion with UVA / B Broadband Protection Formulation 4 : Oil-free sun spray with UVA / B broadband protection Formulation 5: BaIm with UVA / UVB protection
  • Formulation 6 Aerosol Foam with UVB / UVA Protection Formulation 7: Non-Aerosol Foam Formulation 8: Shampoo with UVB Cell Protection Formulation 9: Hair Conditioner with UVB / UVA Protection Formulation 10: Day Cream O / W with UVB Cell Protection Formulation 11: Night Cream W / O with UVB Cell Protection Table 2: Compositions of formulations according to the invention (formulations 1-11)
  • Example 6 Formulation Examples for Skin Whitening
  • Formulation 1 "Water in oil” emulsion with UVA / B broadband protection
  • Formulation 2 “Oil in water” emulsion with UVA / B broadband protection
  • Formulation 3 Skin lightening "oil in water” emulsion with UVA / B broadband protection
  • Formulation 4 Skin lightening oil-free sun spray with UVA / B
  • Formulation 5 skin lightening cream with UVA / UVB protection
  • Formulation 6 skin lightening aerosol foam with UVB / U VA protection
  • Formulation 7 skin lightening non-aerosol foam
  • Formulation 8 Shampoo with hair lightening properties
  • Formulation 9 hair lightening hair conditioner with UVB / UVA protection
  • Formulation 10 Skin Whitening Moisturizer O / W
  • Formulation 1 1 Skin lightening face cream O / W
  • Table 3 Compositions of formulations according to the invention (Formulations 1-1 1)
  • Example 7 Formulation Examples for Skin Tanner In Table 4 below:
  • Formulation 1 Skin Tanning "Water in Oil” Emulsion with UVA / B
  • Broadband protection Formulation 2 Intensive skin tanning "oil in water” emulsion with UVA / B
  • Formulation 3 Skin Tanning "Water in Oil” Emulsion
  • Formulation 4 Skin Tanning "Oil in Water” Emulsion with UVA / B
  • Formulation 5 Skin Tanning "Oil in Water” Cream
  • Formulation 6 Skin Tanning Aerosol Foam with UVB / UVA Protection
  • Formulation 7 Self Tanning Cream O / W
  • Formulation 8 Shampoo with Skin and Hair Tanning Properties
  • Formulation 9 Skin and Hair Tanning Conditioner with UVB / UVA protection formulation 10
  • Skin tanning moisturizer O / W formulation 11 Skin tanning face cream O / W

Abstract

Die Erfindung betrifft Verfahren zum Finden und Beurteilen von Agonisten Antagonisten des Arylkohlenwasserstoffrezeptors (aryl hydrocarbon receptor; AhRezeptor; AhR), die Agonisten und Antagonisten selbst und deren Verwendungen.

Description

AhR-Mediatoren
Die Erfindung betrifft Verfahren zum Finden und Beurteilen von Agonisten Antagonisten des Arylkohlenwasserstoffrezeptors (aryl hydrocarbon receptor; Ah- Rezeptor; AhR), die Agonisten und Antagonisten selbst und deren Verwendungen.
Die Haut ist das größte Organ des menschlichen Körpers. Ihre wichtigste Funktion ist der Schutz des Körpers gegen das unkontrollierte Austreten von Wasser einerseits sowie gegen das Eindringen von schädlichen Chemikalien oder Bakterien sowie von Sonnenstrahlung andererseits.
Wird die menschliche Haut einer lang andauernden Sonnenbestrahlung ausgesetzt, kann dies zum Auftreten einer Vielzahl von Schäden führen.
Beispielhaft seien hier Sonnenbrand, lichtinduzierte Hautalterung und Hautkrebs genannt. Diese schädigende Wirkung des Sonnenlichts wird u. a. auf die in dem
Sonnenlichtspektrum enthaltene UVB-Strahlung (280 - 320 nm) zurückgeführt.
Besonders im Hinblick auf die in der letzten Zeit durch die fortschreitende Zerstörung der Ozonschicht stark zunehmende Intensität des UVB-Anteils im Spektrum des Sonnenlichtes ist ein möglichst umfassender Schutz der Haut gegen UVB-Strahlung erforderlich.
Zum Schutz vor UV-Strahlung enthalten übliche Sonnenschutzmittel zur Ausbildung einer Schutzschicht auf der Haut Substanzen, welche die Strahlung im Bereich von 280-400 nm absorbieren und/oder reflektieren (UV-Filter). Solche photoprotektiven Substanzen sind beispielsweise anorganische Oxide wie Zinkoxid oder organische UV-Absorber wie beispielsweise Zimtsäure- oder Dibenzoylmethan-Derivate. Nachteil dieser Verbindungen ist jedoch, dass die durch sie ausgebildete Schutzschicht durch mechanischen Abrieb, Wasser oder Detergenzien leicht zerstört werden kann. Es ist daher wünschenswert, neben den erwähnten UV-Filtern auch auf Substanzen zugreifen zu können, die eine Schutzwirkung innerhalb der Haut entfalten.
Zur Lösung dieser Aufgabe ist die Kenntnis der molekularen Mechanismen, durch die UVB-Strahlung gesundheitsschädliche Wirkungen an der menschlichen Haut hervorrufen kann, von grundlegender Bedeutung. Entsprechende Untersuchungen haben gezeigt, dass biologische Wirkungen der UVB-Strahlung zum einen darauf zurückgeführt werden können, dass durch UVB-Strahlung strukturelle Veränderungen an den DNS-Molekülen im Zellkern der Hautzellen hervorgerufen werden. Entsprechend werden DNS-Reparaturenzyme zur Photoprotektion eingesetzt (Stege et al. (2000) PNAS 97:1790).
Zum anderen konnte nachgewiesen werden, dass UVB-Strahlung in der Lage ist, Veränderungen auf Ebene der Zellmembran auszulösen, die zu einer Aktivierung von Wachstumsrezeptoren wie dem Epidermal Growth Factor-Rezeptor (EGF-R) und nachfolgend zur Tumorbildung beitragen (Ashida et al. (2003) Exp Dermatol 12:445; Lirvall et al. (1996) Biosci Rep 16:227). Diese EGF-R Aktivierung kann durch antioxidative Enzyme gehemmt werden (Lirvall et al. (1996) Biosci Rep 16:227).
Auch wird die Expression von Cyclooxygenase-2 und Matrixmetalloproteinasen durch UVB- und UVA-Licht induziert (Pentland et al. (1999) Carcinogenesis 20(10): 1939-44). Cyclooxygenasen gehören zu den Schlüsselenzymen der inflammatorischen Reaktion. Sie katalysieren den ersten Schritt der Synthese einer Reihe von Entzündungsmediatoren (Prostaglandine, Prostacycline, Thromboxane) aus Arachidonsäure. Es gibt 2 Formen: Cyclooxygenase-1 (COX- 1 ) ist die konstitutive, dauerhaft expremierte Form, während die Expression von COX-2 nur nach Stimulation durch zelluläre Signale z.B. infolge einer Gewebsschädigung oder -entzündung erfolgt.
Matrixmetalloproteinasen (MMPs) sind Enzyme, die in der Lage sind, die Makromoleküle der extrazellulären Matrix (ECM) proteolytisch abzubauen. MMPs besitzen eine breite, oftmals überlappende Substratspezifität, und in Kombination sind sie fähig, sämtliche Proteinkomponenten der extrazellulären Matrix zu zerlegen. Bisher wurden etwa 20 MMPs identifiziert. In der menschlichen Haut spielen v. a. MMP-1 (Collagenase-1 ), MMP-2 (Gelatinase A), MMP-9 (Gelatinase B) und MMP-3 eine wichtige Rolle. MMP-1 spaltet neben Kollagen-1 und -3 auch Pro-MMP-2 und Pro-MMP-9 und bewirkt dadurch deren Aktivierung. MMP-2 und MMP-9 gehören zu den Elastin abbauenden Proteasen (A. Thibodeau, Cosmetics & Toiletries 2000, 1 15 (1 1 ), 75-82).
Es wurde festgestellt, dass in alter Haut gegenüber junger Haut der Gehalt an MMPs deutlich erhöht ist (J. H. Chung et al., J. Invest. Dermatol, 2001 , 117, 1218-1224). Auch bei der durch exogene Faktoren bedingten vorzeitigen Hautalterung spielen MMPs eine entscheidende Rolle. So konnte in lichtgealterter Haut gegenüber lichtgeschützt gealterter Haut ein nochmals erhöhter Spiegel an MMPs detektiert werden (J. H. Chung et al., J. Invest. Dermatol, 2001 , 1 17, 1218-1224). Sowohl für UVA- und UVB- a Is auch für Infrarot-Strahlung wurde die Induktion von Matrixmetalloproteinasen nachgewiesen. Diese Induktion konnte sowohl in vitro an kultivierten humanen dermalen Fibroblasten als auch in vivo an UV-bestrahlter menschlicher Haut beobachtet werden. Auch die Stimulation mit Tabakrauch führte in humanen dermalen Fibroblasten zu einer Aufregulation der MMP-Expression. Ferner ist häufig, insbesondere aus kosmetischen Gründen, eine Beeinflussung der Hautbräune erwünscht, nach Möglichkeit ohne dass im Zuge der Beeinflussung schädigende Wirkungen auf Hautzellen auftreten. Insbesondere soll eine Hautbräunung auch ohne Einwirkenlassen von UVB-Strahlung auf zu bräunende Haut erreicht werden; ebenso soll eine Hautaufhellung ermöglicht werden.
Versuche, eine solche Bräunung lediglich auf kosmetischem Wege, insbesondere durch Verabreichen topischer Bräunungsmittel bzw. Hautaufhellungsmittel wie Cremes, Emulsionen oder Lotionen zu erreichen, sind bislang wenig erfolgreich geblieben. Zum einen werden herkömmlicherweise als Bräunungsmittel pigmenthaltige Zubereitungen angeboten, wie sie beispielsweise seit langem in Schminkzubereitungen verwendet werden. Als problematisch wird insbesondere empfunden, dass die so hergestellte Bräune durch mechanische Einwirkungen beispielsweise beim Waschen leicht entfernt werden kann, und dass ein natürlicher Braunton einer gesunden gebräunten Haut nur schwer erreichbar ist. In sogenannten „Selbstbräunern" wiederum wird mehrheitlich ein chemisches Oxidationsmittel wie z.B. Dihydroxyaceton als Wirkstoff eingesetzt; dieser Wirkstoff reagiert lediglich mit den Proteinen der Hornschicht der menschlichen Haut und bewirkt durch Oxidation von Histidin und Trytophan eine orange-braune Verfärbung dieser Hornschicht. Der durch diese Oxidation erzeugte Farbton ist zwar unempfindlicher gegenüber mechanischen Einwirkungen als eine Schminke, wird jedoch häufig als unnatürlich und einer Bräunung einer gesunden gebräunten Haut unähnlich empfunden.
Ferner vermittelt die Anwendung herkömmlicher Bräunungsmittel, insbesondere der beschriebenen Pigmetzubereitungen und Selbstbräuner, dem Anwender das unberechtigte Gefühl, durch die rasch und einfach erzielte Hautverfärbung ähnlich geschützt zu sein wie nach natürlicher Hautbräunung, die sich bei
Sonnenbestrahlung entwickelt. Diese Fehleinschätzung führt quasi automatisch zu einer Überschreitung der für die Haut akzeptablen Bestrahlungszeit und verursacht damit besonders schlimme Hautschädigungen. Es ist deshalb versucht worden, die Melaninsynthese der Haut zu stimulieren, ohne dazu Hautschädigungen wie bei Bestrahlung mit UVB-Licht hervorzurufen. Beispielsweise wurde versucht, die von den bekannten Schädigungen der Haut durch UV-Strahlung bewirkte und die Melaninbildung induzierende „SOS- Reaktion" von Hautzellen physiologisch dadurch nachzuahmen, dass man Melanozyten mit bestimmten pTpT-Oligonukleotiden stimuliert. Man hoffte, dadurch eine Erhöhung der Melaninkonzentration in der Haut und damit nicht nur eine natürliche Bräunung sondern gleichzeitig auch die damit verbundene und erwünschte Verbesserung des Sonnenschutzes ohne jede UV-Einwirkung zu erreichen. Diese Untersuchungen haben aber nicht zu praktisch brauchbaren Ergebnissen geführt (vgl. Eller et al. Nature 1994, Vol. 372, Seite 414 ). Neben den bisher unzureichenden Versuchen mit Oligonukleotiden wie pTpT sind bisher keine weiteren Substanzen aufgefunden worden, die das Problem einer besseren Lösung zugeführt hätten. Der Mechanismus, auf welchem Weg die Melaninneubildung in der Haut erfolgt oder besser erfolgen könnte, ohne dass die Zellen bestrahlt und damit zwangsläufig geschädigt werden müssen, sind bisher nicht bekannt geworden. Über ggf. von Melanocyten exprimierte Arylhydrocarbon-Rezeptoren (AhR) ist bisher nur im Zusammenhang mit der Bildung und Ausbreitung von Tumorzellen unter dem Einfluss des extrem toxischen Dioxinderivats 2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) berichtet worden (vgl. Toxicol. Appl. Pharmacol v. 24.06 2005, vgl. unten). Hieraus lassen sich aber für den Fachmann aber keine Schlüsse ziehen, die zur Herstellung eines Mittels zur gefahrlosen Hautbräunung führen könnten. Demzufolge besteht nach wie vor ein sehr großes Bedürfnis nach Bräunungsmitteln, die ohne UVB- Bestrahlung und damit ohne Strahlenschäden und ohne denaturierende Substanzen, welche lediglich eine Verfärbung von Hautproteinen bewirken, durch einfaches Auftragen auf die Haut zu einer Vermehrung des Melanins in den Melanozyten führen, und dadurch ohne weitere Maßnahmen erhöhten Sonnenschutz und gleichzeitig eine von natürlicher Sonnenbräune möglichst nicht zu unterscheidende Hautfarbe erzielen. Andererseits besteht für viele Menschen das Bedürfnis, ihre natürlicherweise dunkle Hautfarbe aufzuhellen oder der Hautpigmentierung vorzubeugen. Dafür sind sehr sichere und wirkungsvolle Haut- und Haaraufhellungsmittel notwendig.
Hautaufhellende Wirkstoffe greifen in irgendeiner Form in den Melaninmetabolismus bzw. -katabolismus ein. Die in der Regel braun bis schwarz gefärbten Melanin-Pigmente werden in den Melanozyten der Haut gebildet, in die Keratinozyten übertragen und verursachen die Färbung der Haut oder der Haare. Die braun-schwarzen Eumelanine werden in Säugetieren hauptsächlich aus hydroxysubstituierten aromatischen Aminosäuren wie L- Tyrosin und L-DOPA, die gelben bis roten Phäomelanine zusätzlich aus schwefelhaltigen Molekülen gebildet (Cosmetics & Toiletries 1996, 11 1 (5), 43-
51 ). Ausgehend von L-Tyrosin wird durch das kupferhaltige Schlüsselenzym
Tyrosinase L-3,4-Dihydroxyphenylalanin (L-DOPA) gebildet, welches wiederum durch Tyrosinase zu Dopachrom umgewandelt wird. Letzteres wird über mehrere, durch verschiedene Enzyme katalysierte Schritte zu Melanin oxidiert.
Viele Haut- und Haaraufhellungsmittel enthalten mehr oder minder starke Tyrosinase-Inhibitoren. Damit wird jedoch nur ein möglicher Weg der Haut- und Haaraufhellung beschritten.
Darüber hinaus werden auch UV-absorbierende Substanzen zum Schutz gegen die durch UV-Licht induzierte Zunahme der Hautpigmentierung eingesetzt. Dies ist jedoch ein rein physikalisch bedingter Effekt und muss unterschieden werden von der biologischen Wirkung hautaufhellender Mittel auf die zelluläre Melanin- Bildung, die auch in Abwesenheit von UV-Licht nachweisbar ist. UV-Absorber bewirken zudem keine echte Hautaufhellung, sondern verhindern lediglich die durch UV-Licht induzierte Zunahme der Hautpigmentierung.
In handelsüblichen kosmetischen oder therapeutischen Haut- und Haaraufhellungsformulierungen werden insbesondere Hydrochinon, Hydrochinonderivate wie z.B. Arbutin, Vitamin C, Derivate der Ascorbinsäure wie z. B. Ascorbylpalmitat, Kojisäure und Derivate der Kojisäure wie z.B. Kojisäuredipalmitat verwendet.
Einer der am häufigsten verwendeten Haut- und Haaraufheller ist Hydrochinon. Diese Verbindung hat jedoch einen zytotoxischen Effekt auf Melanozyten und wirkt irritierend auf die Haut. Daher sind solche Präparate z.B. in Europa, Japan und Südafrika für kosmetische Anwendungen nicht mehr zulässig. Zudem ist Hydrochinon sehr oxidationsempfindlich und nur schwierig in kosmetischen Formulierungen zu stabilisieren.
Arbutin ist ein Hydrochinon-Glucosid, das in situ zu Hydrochinon hydrolysiert und daher toxikologisch ebenso bedenklich ist wie Hydrochinon.
Vitamin C und Ascorbinsäurederivate haben nur eine unzureichende Wirkung auf der Haut. Sie wirken zudem nicht direkt als Tyrosinase-Hemmstoffe, sondern reduzieren die farbigen Zwischenstufen der Melaninbiosynthese.
Kojisäure (5-Hydroxy-2-hydroxymethyl-4-pyranon) ist ein Tyrosinaseinhibitor, der über eine Chelatisierung der Kupferatome des Enzyms dessen katalytische Wirkung hemmt; sie wird in kommerziellen Haut- und Haaraufhellungsmitteln eingesetzt, besitzt jedoch ein hohes sensibilisierendes Potential und verursacht Kontaktallergien.
Es war eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung, den Nachteilen des Standes der Technik abzuhelfen und insbesondere hochwirksame Hautbräuner und Hautaufheller anzugeben, die eine möglichst natürliche Hautbräunung bzw. eine möglichst wirksame Verhinderung einer Hautbräunung bzw. eine Hautaufhellung, jeweils nach Möglichkeit ohne Schädigung von Hautzellen, bewirken sollen.
Es wurde nun überraschend gefunden, dass durch Beeinflussen des Arylkohlenwasserstoff-Rezeptors (AhR) sowohl eine Hautbräunung als auch eine
Hautaufhellung erzielbar ist. Der Arylkohlenwasserstoff-Rezeptor (AhR) (NCBI-
Gen-Akzessionsnummer BC0700800) war bisher lediglich als zentrales Element bei der Detoxifikation von exogenen Schadstoffen bekannt. Der Rezeptor vermittelt die biologische Antwort auf polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe (PAK) wie Benz[a]pyren und halogenierte PAK wie 2,3,7,8- Tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD). Der AhR ist ein Liganden-aktivierter Transkriptionsfaktor, der nach Bindung eines Liganden in den Zellkern transloziert. Dort bildet er ein Dimer mit einem weiteren Transkriptionsfaktor, dem Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator (ARNT), bindet an regulatorische Gensequenzen und induziert die Transkription von verschiedenen Genen wie z.B. CYP1A1 und CYP1 B1. Folgen der AhR-Aktivierung ist die Entwicklung von Hauttumoren (Shimizu et al. (2000) 97:779), Hautirritationen und -entzündungen (Inflammation), die Entwicklung von Allergien, atopischer Dermatitis sowie von Juckreiz und eine Störung der Hautintegrität (Tauchi et al. (2005) Mol. Cell Biol. 25: 9360-8; Henley et al., Arch. Biochem. Biophys. (2004) 422: 42-51 ) sowie die Induktion der MMP-1 (Kollagenase-1 ) (Murphy et al. (2004) J. Biol. Chem. 279, 25284-2593).
UVB-Licht induziert die CYP1A1 -Expression in humanen Keratinozyten und Lymphozyten sowie in der Maus-Hepatoma-Zelllinie Hepa-1 (Wei et al., Chem Biol Interact (1999) 118: 127-40). Jedoch wurde nur für Maus-Hepa-1 -Zellen nachgewiesen, dass die CYP1A1 -Induktion AhR-abhängig ist. Die AhR- Aktivierung ist jedoch, wie weiter unten ausgeführt wird, abhängig vom Zelltyp, so dass nicht von der Wirkung an Maus-Hepatoma-Zellen auf die Wirkung auf humane Hautzellen extrapoliert werden kann. Des weiteren kann CYP1A1 auch durch AhR-unabhängige Wege induziert werden (Guigal et al. (2001 ) Life Sei. ;68(18):2141 -50; Tijet et al. (2006), Mol Pharmacol 69(1 ): 140-153). Daher ist kein zwingender Zusammenhang zwischen UVB - AhR - CYP1 A1 in Melanozyten und Keratinozyten nicht gegeben.
Aus der WO 99/56737 sind Stilbene als Liganden des Ah-Rezeptors bekannt. Einige der Stilbene sollen zwar an den Ah-Rezeptor binden, jedoch keine CYP1A1 -Induktion bewirken. Zu diesen Stilbenen gehören 3, 4,3', 5- Tetrahydroxystilben oder Piceatannol, 2,3',4,5'-Tetrahydroxystilben oder Oxyresveratrol und 3,5,4'-Trihydoxystilben oder Resveratrol, insbesondere trans- Resveratrol. Eine photoprotektive Wirkung, insbesondere gegen UVB-Strahlung, ist nicht beschrieben. Nachteilig an den Stilbenen ist, dass diese photolabil sind und häufig endokrine Wirkungen hervorrufen. Beispielsweise ist Resveratrol ein Anti-Androgen (Mitchell et al. (1999) Cancer Res. 59: 5892-5895).
Henry et al (Mol Pharmacol 55 (1999):716-25) beschreiben 3-methoxylierte Flavone, die in 4-Stellung einen elektronenziehenden Substituenten tragen, als effektive AhR-Antagonisten in Leberzellen. Joiakim et al. (Drug Metab Dispos 31 (2003): 1279-82) zeigten, dass der Jun N-terminal Kinase-Inhibitor Anthra[1 ,9- cd]pyrazol-6(2H)-on die Wirkung des potenten AhR-Agonisten 2,3,7,8- Tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) in humanen Brustepithelzellen hemmen kann.
Die Bindung an den AhR ist zudem abhängig vom Zelltyp. Zhang et al (Environ. Health Perspec. 1 11 (2003): 1877-1882) haben gefunden, dass z.B. Quercetin die Wirkung von AhR in der humanen Brustkrebszelllinie MCF-7 verhindert, jedoch keinen Effekt auf die humane Leberkrebszelllinie HepG2 hat. Ein gegenteiliger Effekt wurde für Luteolin gefunden, welches keinen Effekt auf MCF- 7-Zellen hat, aber als AhR-lnhibitor in HepG2-Zellen wirkt. Auch wurden Unterschiede in der Liganden-Affinität des AhR zwischen humanen Zellen und Nager-Zellen festgestellt (Erna et al. (1994) J. Biol. Chem. 269: 27337-43; Zhang et al (2003), Environ. Health Perspec. 1 11 : 1877-1882).
Verbindungen, die als AhR-Antagonisten in humanen Hautzellen fungieren, sind kaum bekannt. Curcumin hemmt zwar die AhR-Aktivierung durch das Tabak- Karzinogen Benz[a]pyren-7R-frans-7,8-dihydrodiol in oralen humanen Keratinozyten-Krebszellen und in ex vivo Mundschleimhaut. Jedoch aktiviert Curcumin die AhR-T ranslokation in Abwesenheit des Tabak-Karzinogens (Rinaldi et al. (2002) Cancer Res. 62, 5451 -5456) und ist damit kein AhR-Antagonist im Sinne der Erfindung.
Ferner ist bekannt, dass i4//-frans-Retinsäure die TCDD-induzierte AhR- Aktivierung in normalen humanen Keratinozyten hemmt, ohne die AhR-Aktivität in Abwesenheit von TCDD zu beeinflussen. /4//-frans-Retinsäure hat zudem den erheblichen Nachteil der Verstärkung der TCDD-induzierten Expression der MMP-1 (Murphy et al. (2004) J. Biol. Chem. 279, 25284-25293) und ist photolabil.
Erfindungsgemäß werden deshalb Ah-Rezeptor-Modulatoren (AhR-Agonisten und AhR-Antagonisten) sowie Verfahren zum Beurteilen der Wirksamkeit einer zu untersuchenden Substanz als AhR-Antagonist bzw. AhR-Agonist bereitgestellt. Dabei ist ein Ah-Rezeptor-Antagonist (AhR-Antagonist) im Sinne dieser Erfindung eine Substanz, die
1. in Hautzellen, insbesondere in vorzugsweise humanen Melanozyten oder Keratinozyten,
2. die AhR-vermittelte Induktion eines AhR-induzierbaren Gens, vorzugsweise von CYP1A1 , verringert oder verhindert, und dabei
3. in Abwesenheit von UVB-Strahlung und/oder eines AhR-lnduktors bzw - Agonisten, vorzugsweise eines polycyclischen aromatischen
Kohlenwasserstoffs und besonders bevorzugt Benzy[a]pyren oder 3- Methylcholanthren, nicht selbst eine Induktion eines AhR-induzierbaren Gens, vorzugsweise von CYP1A1 , auslöst und/oder die Translokation von AhR aus dem Zytoplasma in den Zellkern induziert, und ferner
4. vorzugsweise photostabil ist.
Ein Ah-Rezeptor-Agonist (AhR-Agonist) im Sinne dieser Erfindung ist eine Substanz, die
1. in Hautzellen, insbesondere in vorzugsweise humanen Melanozyten oder Keratinozyten, 2. die Expression eines AhR-induzierbaren Gens, vorzugsweise von CYP1A1 , induziert, und ferner
3. vorzugsweise photostabil ist.
Photostabil im Sinne dieser Erfindung ist eine Substanz, die bei 2stündiger Bestrahlung mit UVB-Strahlung (40 W/m2) zu nicht mehr als 10 mol% in eine oder mehrere andere Substanzen umgewandelt wird. Dementsprechend ist beispielsweise AII-trans-Retinsäure kein bevorzugter AhR-Antagonist, da diese Substanz photolabil ist.
Im Sinne dieser Erfindung wird ein Gen als induziert bezeichnet, wenn die Konzentration der zugehörigen mRNA in Anwesenheit des zugeordneten Induktors bzw. Agonisten signifikant (p < 0.05, Student's t-test) zumindest 10 % höher ist als in Abwesenheit des Induktors bzw. Agonisten.
Eine Ah-Rezeptor-Sequenz ist beispielsweise hinterlegt unter der NCBI-Nummer BC070080.
Erfindungsgemäß wird nunmehr ein Verfahren bereitgestellt zum Beurteilen der Wirksamkeit eines AhR-Modulators, umfassend die Schritte
i) Beaufschlagen einer Zelle einer ex-vivo- oder in vitro- Melanozyten - und/oder Keratinozyten-Zellkultur oder eines in vitro-Hautmodells, mit einem möglichen AhR-Agonisten bzw AhR-Antagonisten,
ii) wenn die Zelle in Schritt i) mit einem möglichen AhR-Antagonisten beaufschlagt wurde Behandeln der beaufschlagten Zelle mit UVB-Strahlung oder einem AhR-Agonisten, und
iii) Bestimmen der Induktion eines AhR-induzierbaren Gens, vorzugsweise von CYP1A1. Das erfindungsgemäße Beurteilungsverfahren ermöglicht nunmehr erstmals, Substanzen auf ihre Wirksamkeit als AhR-Modulator, also als Ah-Rezeptor- Agonist bzw. -Antagonist zu testen, ohne diesen Test am Körper eines lebenden Tieres oder einer lebenden Versuchsperson vornehmen zu müssen, sondern in einem ex vivo bzw. in vitro-Ansatz eine repräsentative Beurteilung der in vivo- Agonisten- bzw. Antagonistenwirksamkeit zu erreichen. Die Erfindung öffnet das Gebiet der Ah-Rezeptor-Agonisten und -Antagonisten somit erstmals einer systematischen Erforschung unter geringem Einsatz an Material, wobei die Ergebnisse der Beurteilung erstmals rasch gewonnen werden können und nicht, wie bei einer Behandlung am Körper eines Tieres oder eines Probanden, erst nach Entnahme weiterer Proben oder langfristiger Beobachtung behandelter Hautpartien erst sehr spät oder gar nicht gewonnen werden können. Das erfindungsgemäße Verfahren ermöglicht daher auch erstmals die systematische Suche nach Substanzen zum Verringern oder Verhindern einer Translokation von AhR in einen Zellkern, zum Verringern oder Verhindern einer UVB-induzierten oder -induzierbaren Genexpression, zum Verringern oder Verhindern einer durch polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe wie insbesondere TCDD- induzierten oder -induzierbaren Genexpression, und/oder zum Verringern oder Verhindern von UVB-induzierten oder -induzierbaren Hautschäden, insbesondere Hautkrebs, Hautalterung, Hautentzündungen und Sonnenbrand. Ebenfalls ermöglicht das erfindungsgemäße Verfahren, systematisch potentielle AhR- Agonisten zu erproben und ihre Wirkung auf die Melaninbildung in einer Zellkultur reproduzierbar zu bestimmen. Das erfindungsgemäße Beurteilungsverfahren ermöglicht zudem, Substanzen zu erproben, deren Toxizität vor Durchführen des Beurteilungsverfahrens nicht oder nicht vollständig überprüft wurde. Damit erschließt das erfindungsgemäße Beurteilungsverfahren weitere Substanzklassen, die einer Beurteilung an Testpersonen zuvor nicht zugänglich waren. Das Verfahren unterstützt zudem die Auswahl geeigneter Agonisten und Antagonisten, indem das Verfahren erlaubt, potentielle Agonisten und Antagonisten anhand einer vorgewählten Steigerung bzw. Verringerung der Induktion des AhR-induzierbaren Gens, vorzugsweise von CYP1A1 , standardisiert und reproduzierbar auszuwählen. AIs Zellkultur wird vorzugsweise eine Kultur bestehend aus oder enthaltend Melanozyten und/oder Keratinozyten verwendet. Ebenfalls bevorzugt ist es, eine Zellkultur eines ex vivo- oder in vitro-Hautmodells zu verwenden. Zweckmäßigerweise wird die gesamte Zellkultur mit dem potentiellen AhR- Agonisten bzw. -Antagonisten behandelt. Die Zelkultur umfasst in bevorzugten Ausführungsformen der Erfindung zumindest 20 Zellen, stärker bevorzugt zumindest 100 Zellen und besonders bevorzugt zumindest 200 Zellen.
Ein besonders bevorzugtes Verfahren zum Beurteilen der Wirksamkeit eines AhR-Modulators umfasst die Schritte:
i) Bereitstellen von vier Zellgruppen einer in vitro- Melanozyten - und/oder Keratinozyten-Zellkultur oder eines ex-vivo- oder in vitro-Hautmodells enthaltend Keratinozyten sowie optional zusätzlich Melanozyten und weitere Hautzelltypen,
ii) Behandeln der Zellgruppen nach folgendem Schema:
Schritt
1.
2.
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3.
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Ein AhR-Modulator wird dann daran erkannt, dass in Zellgruppe 1 das AhR- induzierbare Gen induziert wird (AhR-Agonist) oder nicht induziert wird (AhR- Antagonist), während in Zellgruppe 2 das AhR-induzierbare Gen induziert wird (Positivkontrolle). Ein AhR-Modulator wird ebenfalls daran erkannt, dass in Zellgruppe 3 das AhR-induzierbare Gen induziert wird (AhR-Antagonist) oder nicht induziert wird (AhR-Agonist), während in Zellgruppe 4 das AhR-induzierbare Gen nicht induziert wird (Negativkontrolle). Der Fachmann versteht, dass das Verfahren auch lediglich mit den Zellgruppen 1 und 2 bzw. mit den Zellgruppen 3 und 4 durchgeführt werden kann.
Soweit im folgenden nichts anderes gesagt ist, wird als Keratinozyten-Zellkultur eine Zellkultur menschlicher Keratinozyten verwendet. Bevorzugte Keratinozyten sind HaCaT-Zellen und NCTC2544-Keratinozyten. Bevorzugte Melanozyten sind murine Melanozyten, insbesondere B16-Zellen.
Ein bevorzugtes Bestimmungsverfahren umfasst ferner die Schritte:
iv) Beaufschlagen einer unbehandelten Zelle (vorzugsweise einer vorzugsweise murinen Melanozyten- oder Keratinozyten-Zelle und insbesondere vorzugsweise einer B16-, NCTC2544- oder HaCaT-ZeIIe) aus Schritt i) mit einer vorgewählten Verbindung wie unten beschrieben, vorzugsweise der Formel (II) und insbesondere vorzugsweise der Formel (X), v) Behandeln der in Schritt iv) beaufschlagten Zelle mit UVB-Strahlung und/oder einem AhR-Agonisten wie in Schritt ii),
vi) Bestimmen der Induktion des in Schritt iii) bestimmten AhR-induzierbaren Gens, vorzugsweise von CYP1A1 , und
vii) Vergleichen der in Schritt iii) und vi) bestimmten Geninduktion.
Das erfindungsgemäße Bestimmungsverfahren ist auf diese Weise besonders leicht standardisierbar und unterstützt es auf vorteilhaft einfache Weise, AhR- Antagonisten mit einer vorgewählen Mindest-antagonistischen Wirkung zu erzielen.
Besonders bevorzugt werden in Schritt ii) und gegebenenfalls in Schritt v) die beaufschlagte(n) Zellen(n) mit einem polyzyklischen aromatischen Kohlenwasserstoff und vorzugsweise mit TCDD behandelt. Ein derartiges erfindungsgemäßes Beurteilungsverfahren ermöglicht auch eine Analyse dazu, ob der beurteilte AhR-Antagonist zusätzlich zur Detoxifizierung, also zum Verhindern oder Unterdrücken schädlicher Auswirkungen polyzyklischer aromatischer Kohlenwasserstoffe und insbesondere von TCDD geeignet ist. Der sichere und systematische Nachweis einer solchen detoxifizierenden Wirkung war zuvor, ohne das erfindungsgemäße Beurteilungsverfahren, praktisch nicht möglich, da eine absichtliche, kontrollierte Exposition von Testpersonen mit polyzyklischen aromatischen Kohlenwasserstoffen wegen des mit der Verwendung dieser Substanzen verbundenen Gsundheitsrisikos vermieden werden musste.
Erfindungsgemäß wird zudem ein Screening-Verfahren angegeben zum Screenen einer Substanzbibliothek auf AhR-Agonisten und AhR-Antagonisten, umfassend die Schritte:
1 ) Bereitstellen einer Probe jeder der Substanzen der Substanzbibliothek, und 2) für jede der in 1 ) bereitgestellten Proben Durchführen eines Verfahrens nach einer der zuvor beschriebenen Arten,
3) Auswählen derjenigen Substanzen als AhR-Antagonisten, bei deren Proben die Induktion eines AhR-induzierbaren Gens um ein vorgewähltes Maß verringert wurde; bzw. Auswählen derjenigen Substanzen als AhR-Agonisten, bei deren Proben die Expression eines AhR-induzierbaren Gens um ein vorgewähltes Maß erhöht wurde.
Das Screening-Verfahren verwirklicht die mit dem erfindungsgemäßen Beurteilungsverfahren verbundenen Vorteile. Es ist insbesondere als Hochdurchsatz-Verfahren mit zumindest 96 Proben durchführbar, wobei eine oder mehrere Proben Kontrollproben sein können, insbesondere Positiv- und/oder Negativkontrollen. Die Proben sind dabei vorzugsweise zusammen auf einem Träger, beispielsweise einer Mikrotiterplatte, angeordnet.
Eine erfindungsgemäße Vorrichtung zum Durchführen eines erfindungsgemäßen Hochdurchsatz-Screeningverfahrens umfasst:
eine Probenaufnahme für zumindest 96 Proben,
Leuchtmittel zum Beaufschlagen der Proben mit UVB-Strahlung,
Mittel zum Bestimmen der Induktion eines AhR-induzierbaren Gens in einer der 96 Proben, und
- Auswertemittel zum Anzeigen der Induktion des AhR-induzierbaren Gens.
Die erfindungsgemäße Hochdurchsatz- (high throughput, HTS)- Screeningvorrichtung verringert auf vorteilhafte Weise den mit der Durchführung einer systematischen AhR-Agonisten und -Antagonisten-Suche verbundenen Aufwand. Durch ihre vorzugsweise selbsttätige Arbeit gestattet sie eine Standardisierung der Versuchsbedingungen, fördert die Vergleichbarkeit der Auswertungsergebnisse und beschleunigt so die Agonisten- und Antagonisten- Suche. Es wurde nunmehr gefunden, dass primäre Hautmelanozyten diesen Rezeptor exprimieren (Figur 1 ). Weiter wurde gefunden, dass die Aktivierung des Rezeptors mit Hilfe eines AhR-Modulators die Expression der Tyrosinase, d.h, des Schlüsselenzyms der Melaninsynthese, überraschenderweise um den Faktor 2-3 zu induzieren vermag (Figur 2), und dass es in Folge zu einer vermehrten Melaninneubildung kommt (Figur 3). Dagegen haben Inhibitoren des AhR- Signalweges eine Melanin-reduzierende Wirkung (Figur 4).
Die Suche nach AhR-Agonisten und -Antagonisten ist daher insbesondere hingeordnet auf das Ziel, Mittel zum Schützen oder Behandeln tierischer und vorzugsweise menschlicher Haut anzugeben. Erfindungsgemäß wird dementsprechend auch ein Verfahren angegeben zum Herstellen einer Hautschutzzubereitung, umfassend das Mischen eines AhR-Antagonisten - vorzugsweise eines mit einem der vorgenannten erfindungsgemäßen Verfahren gefundenen AhR-Antagonisten - mit einem kosmetisch und/oder pharmazeutisch akzeptablen Träger, so dass die Konzentration des AhR-Antagonisten in der Mischung zumindest das Doppelte der zum Verringern der Induktion eines AhR- induzierten Gens erforderlichen Mindestkonzentration beträgt, wobei die Mindestkonzentration bestimmt wird oder bestimmbar ist mit einem Verfahren nach einem der vorgenannten erfindungsgemäßen Verfahren.
Ebenfalls wird erfindungsgemäß dementsprechend ein Verfahren angegeben zum Herstellen einer Hautbäunungszubereitung, umfassend das Mischen eines AhR-Agonisten - vorzugsweise eines mit einem der vorgenannten erfindungsgemäßen Verfahren gefundenen AhR-Agonisten - mit einem kosmetisch und/oder pharmazeutisch akzeptablen Träger, so dass die Konzentration des AhR-Agonisten in der Mischung zumindest das Doppelte der zum Erhöhen der Expression eines AhR-induzierbaren Gens erforderlichen Mindestkonzentration beträgt, wobei die Mindestkonzentration bestimmt wird oder bestimmbar ist mit einem Verfahren nach einem der vorgenannten erfindungsgemäßen Verfahren. In den erfindungsgemäß hergestellten Hautschutzzubereitungen und Hautbräunungsmitteln beträgt die Konzentration an AhR-Antagonisten bzw. AhR- Agonisten vorzugsweise nicht mehr als das 20fache der oben beschriebenen Mindestkonzentration, besonders bevorzugt nicht mehr als das lOfache.
Die erfindungsgemäßen Verfahren zum Beurteilen der Wirksamkeit eines AhR- Agonsten bzw. -Antagonisten ermöglichen die Bestimmung einer Mindestkonzentration, indem das jeweilige Verfahren mehrfach mit unterschiedlichen Konzentrationen des jeweiligen Agonisten bzw. Antagonisten durchgeführt wird. Die Verfahren unterstützen somit das Herstellen einer Hautschutzzubereitung bzw. Hautbräunungszubereitung, indem sie durch Bestimmbarmachen der Mindestkonzentration einen für das Herstellen einer Hautschutzzubereitung bzw. Hautbräunungszubereitung essentiellen Wert mit hoher Genauigkeit und hoher Prognosesicherheit hinsichtlich der Anwendung am Menschen liefern.
Es hat sich nunmehr gezeigt, dass ein erheblicher Anteil der AhR-Antagonisten eine hautaufhellende Wirkung und ein erheblicher Anteil der AhR-Agonisten eine hautbräunende Wirkung besitzen. Erfindungsgemäß wird deshalb auch ein Verfahren zum Beurteilen der Wirksamkeit eines Hautaufhellers angegeben, umfassend die Schritte
i) Beaufschlagen einer Zelle mit einem möglichen Hautaufheller,
ii) Bestimmen des Maßes der Melaninbildung der in Schritt i) behandelten Zelle,
iii) Beaufschlagen einer unbehandelten Zelle aus Schritt i) mit einer vorgewählten Menge einer Hautaufheller-Standardsubstanz, vorzugsweise Kojisäure oder beta-Arbutin,
iv) Bestimmen des Maßes der Melaninbildung der in Schritt iii) behandelten Zelle,
v) Vergleichen der in Schritt ii) und iv) bestimmten Hautaufhellung.
Dabei sind die Schritte iii-v optional. Analog wird erfindungsgemäß ein Verfahren zum Beurteilen der Wirksamkeit eines Hautbräuners angegeben, umfassend die Schritte
i) Beaufschlagen einer Zelle mit einem möglichen Hautbräuner,
ii) Bestimmen des Maßes der Melaninbildung der in Schritt i) behandelten Zelle,
iii) Beaufschlagen einer unbehandelten Zelle aus Schritt i) mit einer vorgewählten Menge einer Hautbräuner-Standardsubstanz, vorzugsweise Naringin oder Coffein,
iv) Bestimmen des Maßes der Melaninbildung der in Schritt iii) behandelten Zelle,
v) Vergleichen der in Schritt ii) und iv) bestimmten Hautbräunung.
Dabei sind die Schritte iii-v optional.
Die Verfahren ermöglichen es, die Vorteile eines erfindungsgemäßen Verfahrens zum Beurteilen der Wirksamkeit eines AhR-Antagonisten bzw. AhR-Agonisten entsprechend zu erzielen, insbesondere die Reproduzierbarkeit, die Möglichkeit, systematisch nach Hautaufhellern bzw. Hautbräunern zu suchen, die hohe Prognosesicherheit für die Anwendung am Menschen und die Möglichkeit, das Verfahren als Hochdurchsatz-Verfahren durchzuführen, beispielsweise mit Hilfe der oben beschriebenen erfindungsgemäßen Vorrichtung. Bevorzugt werden die in den obigen Verfahren untersuchten möglichen Hautaufheller zuvor in einem erfindungsgemäßen Verfahren auf ihre Wirkung als AhR-Antagonisten überprüft; ebenso werden bevorzugt die in den obigen Verfahren untersuchten möglichen Hautbräuner zuvor in einem erfindungsgemäßen Verfahren auf ihre Wirkung als AhR-Agonisten überprüft.
Als Zellen in Schritt i) werden vorzugsweise Melanozyten verwendet, besonders bevorzugt murine Melanozyten. Wie eingangs beschrieben werden zweckmäßigerweise zumindest 20 Zellen, stärker bevorzugt zumindest 100 Zellen und besonders bevorzugt zumindest 200 Zellen behandelt. Entsprechend wird erfindungsgemäß ebenfalls ein Verfahren angegeben zum Herstellen einer Hautaufhellungszubereitung, umfassend das Mischen eines Hautaufhellers mit einem kosmetisch und/oder pharmazeutisch akzeptablen Träger, so dass die Konzentration des Hautaufhellers in der Mischung zumindest das Doppelte der zum Hautaufhellen erforderlichen Mindestkonzentration beträgt, wobei die Mindestkonzentration bestimmt wird mit einem Verfahren der soeben beschriebenen Art.
Ein erfindungsgemäß bevorzugter Wirkstoff zum Herstellen einer Hautbräunungszubereitung ist Formylindolo(3,2b)carbazol, sowie dessen pharmazeutisch verträglich Salze und Ester. Ein erfindungsgemäß bevorzugter Wirkstoff zum Herstellen einer hautaufhellenden Zubereitung ist 3'-Methoxy-4'- nitroflavon, sowie dessen pharmazeutisch verträgliche Salze und Ester.
Erfindungsgemäß wurden einige wertvolle AhR-Antagonisten gefunden, nämlich Verbindungen der Formel (II)
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wobei
R1 bis R9 unabhängig voneinander Wasserstoff, Hydroxy, CrCi2-Alkoxy, CrCi2- Alkyl, C2-Ci2-Alkenyl, und
n = 0 und Y = -CH- oder -C(CH3)-, X = O und die gestrichelte Linie entsprechend entweder eine Doppelbindung oder zwei, oder
n = 1 , Y = O und X = Methylen und gestrichelte Linie zwei Wasserstoffe
bedeuten.
Die Verbindungen der Formel (II) haben sich überraschenderweise als sehr wirkungsvolle Ah-Rezeptor-Antagonisten erwiesen. Sie können in menschlichen Hautzellen die UVB-induzierte Translokation des AhR vom Zytoplasma in den Zellkern verhindern. Sie verringern stark die AhR-vermittelte Induktion von AhR- induzierbaren Genen in menschlichen Hautzellen, insbesondere die Induktion von CYP1A1. Sie sind photostabil und lösen in Abwesenheit einer AhR- aktivierenden Substanz, insbesondere von polyzyklischen aromatischen Kohlenwasserstoffen wie TCDD, keine Induktion eines AhR-induzierbaren Gens aus und induzieren auch nicht die Translokation von AhR aus dem Zytoplasma in den Zellkern menschlicher Hautzellen, im Gegensatz beispielsweise zu Curcumin und AII-trans-Retinsäure.
Die Verbindungen der Formel (II) sind deshalb besonders geeignet als Arzneimittel, insbesondere zum Behandeln von oder zur Vorbeugung gegen -insbesondere UVB-induzierte - Hautreizungen, gegen Hautschäden, Entzündungen der Haut, Juckreiz, atopischer Dermatitis, Hautalterung, Hautkrebs, und/oder zum Verringern des MMP-Gehaltes der Haut. Die Verbindungen sind ferner, als Arzneimittel oder in einer Nicht-Arzneimittel-Form, beispielsweise als Kosmetikum oder in kosmetischen Zubereitungen, geeignet zum Verringern oder Verhindern einer Translokation von AhR in einen Zellkern, zum Verringern oder Verhindern einer UVB-induzierten Genepression, und/oder zum Verringern oder Verhindern einer durch AhR-Agonisten wie polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe und insbesondere TCDD induzierten Genexpression. Die Verbindungen der Formel (II) sind ferner geeignet als Sonnenschutzmittel und insbesondere als UVB-Schutzmittel. Bevorzugte erfindungsgemäße Verbindungen sind solche, bei denen R1 bis R9, unabhängig voneinander, Wasserstoff, Hydroxy, CrC4-Alkoxy (verzweigt oder unverzweigt) oder C2-C4-Alkenyl bedeuten. Vorzugsweise sind nicht mehr als fünf und besonders bevorzugt nicht mehr als vier der Reste R1 bis R9 nicht Wasserstoff. Ist einer der Reste Hydroxy oder d-C4-Alkoxy, so können in bevorzugten Ausführungsformen die übrigen, also vorzugsweise maximal drei Reste gleich H oder d-C4-Alkyl (verzweigt oder unverzweigt) sein. Derart substituierte Verbindungen haben sich als besonders wirksame AhR- Antagonisten erwiesen.
Insbesondere ist bevorzugt die Verbindung der Formel (X)
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Diese Verbindung ermöglichen bereits in sehr niedrigen Einsatzkonzentrationen eine starke Inhibierung des Ah-Rezeptors und verhindern oder verringen bereits in niedrigen Konzentrationen die AhR-vermittelte Induktion AhR-induzierbarer Gene, insbesondere CYP1A1. Die Verbindung der Formel (X) wirkt zudem hautaufhellend. Darüber hinaus bewirkt die Verbindung der Formel (X) in Abwesenheit von UVB-Strahlung nicht selbst eine Induktion eines AhR- induzierbaren Gens, insbesondere von CYP1A1 , und induzieren unter diesen Bedingungen auch nicht die Translokation von AhR aus dem Zytoplasma in den Zellkern. Die Verbindung der Formel (X) ist deshalb besonders geeignet für die oben beschriebenen Verwendungen von AhR-Antagonisten, und ist insbesondere bevorzugt als Arzneimittel oder Bestandteil pharmazeutischer oder nicht-pharmazuetischer und insbesondere kosmetischer Zubereitungen.
Erfindungsgemäß werden ferner Zubereitungen angegeben enthaltend eine oder mehrere Verbindungen der Formel (II), insbesondere der Formel (X). Zweckmäßigerweise liegen die Verbindungen der Formel (II) und insbesondere die Verbindung der Formel (X) in erfindungsgemäßen Zubereitungen vor in einer ausreichenden Menge (a) zum Verringern oder Verhindern einer Translokation von AhR in einen Zellkern, (b) zum Verringern oder Verhindern einer UVB- induzierten Genexpression, und/oder Verringern oder Verhindern einer durch polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe, vorzugsweise TCDD, induzierten oder induzierbaren Genexpression, und/oder (d) Verringern oder Verhindern von UVB-induzierten oder -induzierbaren Hautschäden, insbesondere Hautkrebs, Hautalterung, Hautentzündungen und Sonnenbrand. Die Verbindung der Formel (X) liegt zudem vorzugsweise in einer zur Hautaufhellung ausreichenden Menge vor.
Die erfindungsgemäßen Zubereitungen enthalten die Verbindung(en) der Formel (II), insbesondere der Formel (X), bevorzugt in einem Anteil von zumindest 0,0001 Gew.-%, bezogen auf die gesamte Zubereitung. In diesen Konzentrationen ist insbesondere für die Verbindung der Formel (X) bereits eine Verringerung der Translokation des AhR-Rezeptors in den Zellkern von Hautzellen zu beobachten, und ferner wird die Induktion AhR-induzierbarer Gene insbesondere CYP1A1 , beispielsweise durch polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe wie TCDD bereits signifikant verringert und eine Hautaufhellung erzielt.
Vorzugsweise beträgt die Konzentration der Verbindung(en) der Formel (II), insbesondere der Formel (X), 0,0005 bis 15 Gew.-%, besonders bevorzugt 0,001 bis 10 Gew.-%, insbesondere 0,01 bis 5 Gew.-%, jeweils bezogen auf die gesamte Zusammensetzung. In diesen Konzentrationen entfalten die Verbindungen der Formel (II) bei Applikation auf die Haut eine starke AhR- Antagonisten-Wirkung, indem sie die Translokation von AhR in den Zellkern verhindern oder verringern und insbesondere eine UVB-induzierte Genexpression, namentlich von CYP1A1 , verringern oder verhindern. Die Zubereitungen können insbesondere kosmetische Zubereitungen sein, wobei Sonnenschutzzubereitungen und After-Sun-Zubereitungen besonders bevorzugt sind.
Die erfindungsgemäßen kosmetischen oder therapeutischen Formulierungen werden mit üblichen, an sich bekannten Verfahren hergestellt, dergestalt, dass die Verbindung(en) der Formel (II), insbesondere der Formel (X), in kosmetische oder dermatologische Formulierungen eingearbeitet werden, die wie üblich zusammengesetzt sind und neben der haut- und haaraufhellenden Wirkung auch zur Behandlung, der Pflege und der Reinigung der Haut oder der Haare dienen können.
Die erfindungsgemäßen Formulierungen liegen vorzugsweise vor als Emulsion, z.B. Emulsion des Typs W/O (Wasser in Öl), O/W (Öl in Wasser), W/O/W (Wasser in Öl in Wasser), O/W/O (Öl in Wasser in Öl), PIT-Emulsion, Pickering- Emulsion, Emulsion mit einem geringen Ölgehalt, Mikro- oder Nanoemulsion, als Lösung z.B. in Öl (fette Öle bzw. Fettsäureester, insbesondere C6-C32-Fettsäure- C2-C3o-Ester) oder Silikonöl, Dispersion, Suspension, Creme, Lotion oder Milch, je nach Herstellungsverfahren und Inhaltsstoffen, als Gel (inklusive Hydro-, Hydrodispersions-, Oleogel), Spray (z.B. Pumpspray oder Spray mit Treibmittel) oder auch Schaum oder als Tränkungslösung für kosmetische Tücher, als Reinigungsmittel wie z.B. Seife, Syndet, flüssiges Wasch-, Dusch-, und Badepräparat, Badeartikel (Kapsel, Öl, Tablette, Salz, Badesalz, Seife, etc.), Brausezubereitung, als Hautpflegemittel wie z.B. Emulsion (wie oben beschrieben), Salbe, Paste, Gel (wie oben beschrieben), Öl, Toner, Balsam, Serum, Puder (z.B. Gesichtspuder, Körperpuder), als Maske, als Stift, Stick, RoII- On, Pumpe, Aerosol (schäumend, nicht schäumend oder nach-schäumend), als Deodorant und/oder Antitranspirant, Mundwasser und Munddusche, als Fusspflegemittel (inklusive Keratolytikum, Deodorant), als Insekten abwehrendes Mittel, als Sonnenschutzmittel, als Aftersun-Präparat, als Hauttöner, als Rasiermittel, Aftershave BaIm, Pre- und Aftershave Lotion, als Haarentfernungsmittel, als Haarpflegemittel wie z.B. Shampoo (inklusive 2-in-1 Shampoo, Anti-Schuppen-Shampoo, Babyshampoo, Shampoo für trockene Kopfhaut, Shampookonzentrat), Conditioner, Haarkur, Haarwasser, Haarspülung, Frisiercreme, Pomade, Dauerwell- und Fixierungsmittel, Haarfestiger (Spray), Styling-Aid (z.B. Gel oder Wachs), Haarglättungsmittel (Entkräuselungsmittel, Relaxer), als Blondiermittel, Haarfärbemittel wie z.B. temporäre, direktziehende Haarfärbemittel, semipermanente Haarfärbemittel, permanente Haarfärbemittel, Haartönung, Haaraufheller, Haarconditioner, Haarmousse, Augenpflegemittel, Make-Up, Make-Up-Entferner oder Babyartikel.
Es ist auch vorteilhaft, die Verbindung(en) der Formel (II), insbesondere der Formel (X), in verkapselter Form darzureichen, z.B. in Gelatine, Wachsmaterialien, Liposomen oder Cellulosekapseln.
Besonders bevorzugt liegen die erfindungsgemäßen Formulierungen in Form einer Emulsion, insbesondere in Form einer Emulsion des Typs W/O, O/W, W/O/W, O/W/O, PIT-Emulsion, Pickering-Emulsion, Emulsion mit einem geringen Ölgehalt, Mikro- oder Nanoemulsion, eines Gels (inklusive Hydro-, Hydrodispersions-, Oleogel), einer Lösung z.B. in Öl (fette Öle bzw. Fettsäureester, insbesondere C6-C32-Fett.saure-C2-C30-Est.er)) oder Silikonöl, oder eines Sprays (z.B. Pumpspray oder Spray mit Treibmittel) vor.
Die erfindungsgemäßen (insbesondere topischen) kosmetischen oder therapeutischen Formulierungen, können bevorzugt kosmetische und/oder dermatologische Hilfs- und Zusatzstoffe enthalten, wie sie üblicherweise in solchen Formulierungen verwendet werden, z.B. Kühlwirkstoffe, Sonnenschutzwirkstoffe (insbesondere UV-Filter und/oder UV-filternde Pigmente), Farbstoffe, Pigmente, die eine färbende Wirkung haben, Antioxidantien, Konservierungsmittel, Antiirritantien, weichmachende, anfeuchtende (feuchtigkeitsspendende) und/oder feuchthaltende Substanzen (Feuchthalteregulatoren, z.B. Glycerin oder Harnstoff), Osmolyte, antimikrobielle Wirkstoffe (z.B. antibakterielle Wirkstoffe, Bakterizide, Fungizide), Viruzide, Deodorantien (z.B. schweißhemmende Mittel), oberflächenaktive Substanzen (Tenside), Emulgatoren, Insektrepellents (z.B. DEET, IR 3225, Dragorepel), Pflanzenextrakte, entzündungshemmende Wirkstoffe (entzündungshemmende Mittel), die Wundheilung beschleunigende Stoffe (z.B. Chitin oder Chitosan und dessen Derivate), gelbildende Mittel, filmbildende Substanzen (Filmbildner, z.B. Polyvinylpyrrolidone oder Chitosan oder dessen Derivate), Fixateure, hautglättende Wirkstoffe, faltenreduzierende Wirkstoffe wie beta-Glucan aus Hafer oder Brombeerblatt- oder Sojaextrakt, Vitamine (z.B. Vitamin C und Derivate, Tocopherole und Derivate, Vitamin A und Derivate), 2-Hydroxycarbonsäuren (z.B. Zitronensäure, Apfelsäure, L-, D- oder DL- Milchsäure), Hautfärbungsmittel (z.B. Walnussextrakte oder Dihydroxyaceton), hautpflegende und -reparierende Mittel (z.B. Cholesterol, Ceramide, Pseudoceramide, Creatin und Creatinester), hautberuhigende Mittel, rückfettende Mittel, optisch aufhellende Mittel, Gleitmittel, Glanzmittel, Fette, Öle, gesättigte Fettsäuren und deren Salze, ein- oder mehrfach ungesättigte Fettsäuren und deren Salze, alpha-Hydroxysäuren, Polyhydroxyfettsäuren oder deren Derivate (z.B. Linolsäure, alpha-Linolensäure, gamma-Linolensäure oder Arachidonsäure und deren jeweiligen natürlichen oder synthetischen Ester), Phospholipide, Wachse oder andere übliche Bestandteile einer kosmetischen oder dermatologischen Formulierung wie Alkohole, Alkandiole, Polyole, Polymere, Elektrolyte, organische Lösungsmittel, Silikone, Silikonderivate oder Chelatbildner (z.B. Ethylendiamintetraessigsäure und Derivate), Antischuppenwirkstoffe (Antischuppen-Mittel, z.B. Climbazol, Ketoconazol, Piroctonoleamin, Zink-Pyrithion), Haarpflegemittel, Haarverformungsmittel, Haarglättungsmittel, Enthaarungsmittel, Parfüme, ätherische Öle, Schaumbildner, Schaumstabilisatoren, Schaumbooster, Substanzen zum Verhindern des Schäumens, Verdickungsmittel, Binder, Pflanzenteile (z.B. Fasern) und Pflanzenextrakte (z. B. Arnika, Aloe, Bartflechte, Efeu, Brennnessel, Ginseng, Henna, Kamille, Ringelblume, Rosmarin, Salbei, Schachtelhalm oder Thymian), tierische Extrakte wie z. B. Gelee royale, Propolis, Proteine, Proteinhydrolysate, Hefeextrakte, Hopfen- und Weizenextrakte, Peptide oder Thymusextrakte, Abrasiva (abschleifende Mittel), Puffer, Enzyme.
Bestandsteile (Hilfs- und Zusatzstoffe), mit denen die Verbindung(en) der Formel (II), insbesondere der Formel (X), kombiniert werden können, sind besonders bevorzugt: Abrasiva, Antischuppen-Mittel, entzündungshemmende Mittel, Antioxidantien, schweißhemmende Mittel, Binder, Puffer, Chelatbildner, Enthaarungsmittel, oberflächenaktive Substanzen, Emulgatoren, Enzyme, ätherische Öle, Pflanzenextrakte, Fasern, Filmbildner, Fixateure, Schaumbildner, Schaumstabilisatoren, Substanzen zum Verhindern des Schäumens, Schaumbooster, gelbildende Mittel, Haarpflegemittel, Haarverformungsmittel, Haarglättungsmittel, Wirkstoffe zur Haut- und Haaraufhellung, feuchtigkeitsspendende Mittel, feuchthaltende Substanzen, Insektrepellents, optisch aufhellende Mittel, Gleitmittel, Glanzmittel, Polymere, Proteine, rückfettende Mittel, hautberuhigende Mittel, hautglättende Wirkstoffe, faltenreduzierende Wirkstoffe, Sonnenschutzwirkstoffe, Vitamine, Öle, Wachse, Fette, Phospholipide, gesättigte Fettsäuren und deren Salze, ein- oder mehrfach ungesättigte Fettsäuren und deren Salze, alpha-Hydroxysäuren, Polyhydroxy- fettsäuren, Polyole, Alkandiole, Silikone oder Silikonderivate.
Hilfs- und Zusatzstoffe können in Mengen von 5 bis 99 Gew.-%, vorzugsweise 10 bis 80 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierung, enthalten sein. Die jeweils einzusetzenden Mengen an kosmetischen oder dermatologischen Hilfs- und Zusatzstoffen und Parfüm können in Abhängigkeit von der Art des jeweiligen Produkts vom Fachmann durch einfaches Ausprobieren leicht ermittelt werden.
Ferner können die Formulierungen Wasser in einer Menge bis zu 99,99 Gew.-%, vorzugsweise 5 bis 80 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierung, aufweisen.
Erfindungsgemäße kosmetische oder therapeutische Formulierungen sind vorzugsweise solche Formulierungen,
die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Emulsion, Lösung, Dispersion, Suspension, Creme, Lotion, Milch, Gel, Spray, Schaum,
Tränkungslösung für kosmetische Tücher, Reinigungsmittel, Seife, Syndet, Waschpräparat, Duschpräparat, Badepräparat, Badeartikel, Brausezubereitung, Hautpflegemittel, Salbe, Paste, Öl, Toner, Balsam, Serum, Puder, Maske, Stift, Stick, RoII-On, Pumpe, Aerosol, Deodorant, Antitranspirant, Mundwasser, Munddusche, Fusspflegemittel, Insekten abwehrendes Mittel, Sonnenschutzmittel, Selbstbräunungsmittel, Aftersun-Präparat, Hauttöner, Rasiermittel, Aftershave BaIm, Preshave Lotion, Aftershave Lotion, Haarentfernungsmittel, Haarpflegemittel, Shampoo, Conditioner, Haarkur, Haarwasser, Haarspülung, Frisiercreme, Pomade, Dauerwellmittel, Fixierungsmittel, Haarfestiger, Styling-Aid, Haarglättungsmittel, Blondiermittel, Haarfärbemittel, Haartönung, Haaraufheller, Haarconditioner, Haarmousse, Augenpflege, Make-Up, Make-Up-Entferner und Babyartikel, und/oder
die neben Verbindung(en) der Formel (II), insbesondere der Formel (X), einen oder mehrere Hilfs- und Zusatzstoffe ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus
Abrasiva, Antischuppen-Mittel, entzündungshemmende Mittel, Antioxidantien, schweißhemmende Mittel, Binder, Puffer, Chelatbildner, Enthaarungsmittel, oberflächenaktive Substanzen, Emulgatoren, Enzyme, ätherische Öle, Pflanzenextrakte, Fasern, Filmbildner, Fixateure, Schaumbildner, Schaumstabilisatoren, Substanzen zum Verhindern des Schäumens, Schaumbooster, gelbildende Mittel, Haarpflegemittel, Haarverformungsmittel, Haarglättungsmittel, Wirkstoffe zur Haut- und Haaraufhellung, feuchtigkeitsspendende Mittel, feuchthaltende Substanzen, Insektrepellents, optisch aufhellende Mittel, Gleitmittel, Glanzmittel, Polymere, Proteine, rückfettende Mittel, hautberuhigende Mittel, hautglättende Wirkstoffe, faltenreduzierende Wirkstoffe, Sonnenschutzwirkstoffe, Vitamine, Öle, Wachse, Fette, Phospholipide, gesättigte Fettsäuren und deren Salze, ein- oder mehrfach ungesättigte Fettsäuren und deren Salze, alpha-Hydroxysäuren, Polyhydroxy- fettsäuren, Polyole, Alkandiole, Silikone und Silikonderivate enthalten,
und/oder
die vorgesehen sind für eine Applikation auf das Haar und/oder die Haut. Zur Anwendung werden die Verbindung(en) der Formel (II), insbesondere der Formel (X), enthaltenden Formulierungen in der Regel in der für Kosmetika und Dermatika üblichen Weise auf die Haut und/oder die Haare in ausreichender Menge aufgebracht. Besondere Vorteile bieten dabei solche kosmetischen, dermatologischen und/oder therapeutischen erfindungsgemäßen Formulierungen, die zusätzlich einen oder mehrere Sonnenschutzfilter (UV-Absorber, UV-Filter) umfassen.
In seltenen Fällen kann es zu Verfärbungen und/oder Instabilitäten bei erfindungsgemäße bzw. erfindungsgemäß einzusetzende Verbindungen der Formel (II) enthaltenden Formulierungen kommen, insbesondere wenn diese in wässrig- alkoholischen oder rein alkoholischen Lösungen vorliegen. Überraschenderweise wurde nunmehr gefunden, dass UV-Filter die Stabilität der Verbindungen der Formel (II) in erfindungsgemäßen Formulierungen verbessern können. Insbesondere können UV-Filter eine durch Sonnenlicht oder anderes Licht hervorgerufene Verfärbung der Verbindungen der Formel (II) verhindern oder verlangsamen. Beides ist insbesondere in kosmetischen Formulierungen wichtig. Erfindungsgemäß werden UV-Filter daher verwendet zum Stabilisieren der Verbindungen der Formel (II), insbesondere indem ein oder mehrere UV-Filter in einer zum Stabilisieren der Verbindungen der Formel (II) ausreichenden Menge in einer erfindungsgemäßen Formulierung eingesetzt werden, vorzugsweise unter Verwendung der weiter unten (bevorzugt) genannten UV-Filter. In diesem Zusammenhang betrifft ein weiterer Aspekt der Erfindung die kosmetische oder therapeutische Verwendung einer oder mehrerer Verbindungen der Formel (II) zur Aufhellung von Haut und/oder Haar in Gegenwart einer die Verbindung oder die Verbindungen der Formel (II), insbesondere der Formel (X) stabilisierenden Menge eines oder mehrerer UV-Filter, wobei sämtliche weiter oben gemachten Angaben zur Auswahl des Substituenten natürlich auch insoweit zutreffen. Für die Zwecke der Stabilisierung liegt die Gesamtmenge an UV-Filtern vorzugsweise im Bereich von 0,1 bis 2 Gew.-%, insbesondere 0,2 bis 1 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierung. Das Verhältnis des Gesamtgewichtsanteils an UV-Filtern zum Gesamtgewichtsanteil der erfindungsgemäßen bzw. erfindungsgemäß einzusetzenden Verbindungen der Formel (II) liegt vorzugsweise im Bereich von 100:1 bis 1 :100, besonders bevorzugt im Bereich von 10:1 bis 1 :10, ganz besonders bevorzugt im Bereich von 5:1 bis 1 :5.
Erfindungsgemäße Formulierungen enthaltend einen oder mehrere UV-Filter (Sonnenschutzfilter, UV-Absorber) weisen vorzugsweise einen Gesamtanteil an UV-Filtern auf im Bereich von 0,1 bis 30 Gew.-%, besonders bevorzugt im Bereich von 0,2 bis 20 Gew.-%, ganz besonders bevorzugt im Bereich von 0,5 bis 15 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierung. Besonders bevorzugt enthalten die erfindungsgemäßen Formulierungen einen oder mehre UVB-Filter, insbesondere der unten angegebenen Arten. Es hat sich gezeigt, dass die erfindungsgemäßen Substanzen der Formel (II) und insbesondere der Formeln (X) mit UVB-Filtern vorteilhaft zusammenwirken zum Verhindern von UVB-induzierten Hautschäden, Hautveränderungen und Hautkrebs.
Besonders bevorzugt werden die erfindungsgemäßen bzw. erfindungsgemäß einzusetzenden Verbindungen der Formel (II) und insbesondere der Formel (X) mit wasserlöslichen UV-Filtern kombiniert, in einer bevorzugten Ausgestaltung mit Phenylen-bis-benzimidazyl-tetrasulfonsäure-dinatriumsalz (Neo Heliopan®AP) und/oder 2-Phenylbenzimidazolsulfonsäure (Neo Heliopan®Hydro).
In einer weiteren bevorzugten Ausgestaltung enthält eine erfindungsgemäße Formulierung eine Gesamtmenge an Sonnenschutzwirkstoffen, d.h. insbesondere UV-Filtern und/oder anorganischen Pigmenten (UV-filternden Pigmenten), so dass die erfindungsgemäße Formulierung einen Lichtschutzfaktor von größer oder gleich 2 (bevorzugt größer oder gleich 5) aufweist. Solche erfindungsgemäßen Formulierungen sind besonders zum Schutz von Haut und Haar geeignet.
Erfindungsgemäße Formulierungen umfassend zusätzlich einen oder mehrere Sonnenschutzfilter (UV-Filter, UV-Absorber) können dabei in verschiedenen Formen vorliegen, wie sie z.B. üblicherweise für Sonnenschutzformulierungen eingesetzt werden. So können sie z.B. in Form einer Emulsion vom Typ Öl-inWasser (O/W), eines Gels, einer Hydrodispersion, oder auch eines Aerosols vorliegen.
Vorteilhaft enthalten die erfindungsgemäßen Formulierungen mindestens einen UV-A-Filter und/oder mindestens einen UV-B-Filter und/oder einen Breitband- Filter und/oder mindestens ein anorganisches Pigment. Erfindungsgemäße Formulierungen enthalten bevorzugt mindestens einen UV-B-Filter oder einen Breitband-Filter, weiter besonders bevorzugt mindestens einen UV-A-Filter und mindestens einen UV-B-Filter.
Geeignete UV-Filter sind z.B. organische UV-Absorber aus der Klasse der 4- Aminobenzoesäure und Derivate, Salicylsäure-Derivate, Benzophenon-Derivate, Dibenzoylmethan-Derivate, Diphenylacrylate, 3-lmidazol-4-yl-acrylsäure und deren Ester, Benzofuran-Derivate, Benzylidenmalonat-Derivate, polymere UV-Absorber, enthaltend einen oder mehrere silizium-organische Reste, Zimtsäure-Derivate, Campher-Derivate, Trianilino-s-Triazin-Derivate, 2-Hydroxyphenylbenzotriazol- Derivate, Phenylbenzimidazolsulfonsäure Derivate und deren Salze, Anthranilsäurementhylester, Benzotriazol-Derivate, Indol-Derivate.
Die nachfolgend genannten UV-Filter, die im Sinne der vorliegenden Erfindung eingesetzt werden können, sind bevorzugt, jedoch selbstverständlich nicht limitierend.
Vorteilhafte UV-Filter sind
UV-B-Filter wie z.B.:
• p-Aminobenzoesäure
• p-Aminobenzoesäureethylester (25 Mol) ethoxyliert (INCI-Name: PEG-25 PABA) • p-Dimethylaminobenzoesäure-2-ethylhexylester
• p-Aminobenzoesäureethylester (2 Mol) N-propoxyliert
• p-Aminobenzoesäureglycerinester
• Salicylsäure-homomenthylester (Homosalate) (Neo Heliopan®HMS)
• Salicylsäure-2-ethylhexylester (Neo Heliopan®OS)
• Triethanolaminsalicylat
• 4-lsopropylbenzylsalicylat
• Anthranilsäurementhylester (Neo Heliopan®MA)
• Diisopropylzimtsäureethylester
• p-Methoxyzimtsäure-2-ethylhexylester (Neo Heliopan®AV)
• Diisopropylzimtsäuremethylester
• p-Methoxyzimtsäureisoamylester (Neo Heliopan®E 1000)
• p-Methoxyzimtsäure-diethanolaminsalz
• p-Methoxyzimtsäure-isopropylester
• 2-Phenylbenzimidazolsulfonsäure und Salze (Neo Heliopan®Hydro)
• 3-(4'-Trimethylammonium)-benzyliden-bornan-2-on-methylsulfat
• beta-lmidazol-4(5)-acrylsäure (Urocaninsäure)
• 3-(4'-Sulfo)benzyliden-bornan-2-on und Salze
• 3-(4'-Methylbenzyliden)-D,L-campher (Neo Heliopan®MBC) • 3-Benzyliden-D,L-campher
• N-[(2 und 4)-[2-(oxoborn-3-yliden)methyl]benzyl]-acrylamid-Polymer
• 4,4'-[(6-[4-(1 ,1-Dimethyl)-aminocarbonyl)-phenylamino]-1 ,3,5-triazin-2,4- diyl)diimino]-bis-(benzoesäure-2-ethylhexylester) (Uvasorb®HEB)
• Benzylidenmalonat-Polysiloxan (Parsol®SLX)
• Glyceryl-ethylhexanoat-dimethoxycinnamat
• Dipropylenglykolsalicylat
• Tris(2-etylhexyl)-4,4',4"-(1 ,3,5-triazin-2,4,6-triyltriimino)tribenzoat (= 2,4,6- Trianilino-(p-carbo-2'-ethylhexyl-1 '-oxy)-1 ,3,5-triazin) (Uvinul®T150)
Breitband-Filter wie z.B.
• 2-Ethylhexyl-2-cyano-3,3-diphenylacrylat (Neo Heliopan®303)
• Ethyl-2-cyano-3,3'-diphenylacrylat
• 2-Hydroxy-4-methoxybenzophenon (Neo Heliopan®BB)
• 2-Hydroxy-4-methoxybenzophenon-5-sulfonsäure
• Dihydroxy-4-methoxybenzophenon
• 2,4-Dihydroxybenzophenon
• Tetrahydroxybenzophenon
• 2,2'-Dihydroxy-4,4'-dimethoxybenzophenon
• 2-Hydroxy-4-n-octoxybenzophenon • 2-Hydroxy-4-methoxy-4'-methylbenzophenon
• Natrium-hydroxymethoxybenzophenon-sulfonat
• Dinatrium-2,2'-dihydroxy-4,4'-dimethoxy-5,5'-disulfo-benzophenon
• Phenol, 2-(2H-benzotriazol-2-yl)-4-methyl-6-(2-methyl-3(1 ,3,3,3- tetramethyl-1 -(trimethylsilyl)-oxy)-disiloxyanyl)-propyl), (Mexoryl®XL)
• 2,2'-Methylen-bis-(6-(2H-benztriazol-2-yl)-4-1 ,1 ,3,3-tetramethylbutyl)- phenol), (Tinosorb®M)
• 2,4-bis-[4-(2-ethylhexyloxy)-2-hydroxyphenyl]-1 ,3,5-triazin
• 2,4-Bis-[{(4-(2-Ethyl-hexyloxy)-2-hydroxy}-phenyl]-6-(4-methoxyphenyl)- 1 ,3,5-triazin, (Tinosorb®S)
• 2,4-Bis-[{(4-(3-sulfonato)-2-hydroxy-propyloxy)-2-hydroxy}-phenyl]-6-(4- methoxyphenyl)-1 ,3,5-triazin-Natriumsalz
• 2,4-Bis-[{(3-(2-Propyloxy)-2-hydroxy-propyloxy)-2-hydroxy}-phenyl]-6-(4- methoxy-phenyl)-1 ,3,5-triazin
• 2,4-Bis-[{4-(2-Ethyl-hexyloxy)-2-hydroxy}-phenyl]-6-[4-(2-methoxyethyl- carbonyl)- phenylamino]-1 ,3,5-triazin
• 2,4-Bis-[{4-(3-(2-propyloxy)-2-hydroxy-propyloxy)-2-hydroxy}-phenyl]-6-[4- (2-ethylcarboxyl)-phenylamino]-1 ,3,5-triazin
• 2,4-Bis-[{4-(2-Ethyl-hexyloxy)-2-hydroxy}-phenyl]-6-(1 -methyl-pyrrol-2-yl-)- 1 ,3,5-triazin
• 2,4-Bis-[{4-tris-(trimethylsiloxy-silylpropyloxy)-2-hydroxy}-phenyl]-6-(4- methoxyphenyl)-1 ,3,5-triazin • 2,4-Bis-[{4-(2"-Methylpropenyloxy)-2-hydroxy}-phenyl]-6-(4- methoxyphenyl)-1 ,3,5-triazin
• 2,4-Bis-[{4-(1 ',1 ',1 ',3'5',5',5'-Heptamethylsiloxy-2"-methyl-propyloxy)-2- hydroxy}-phenyl]-6-(4-methoxyphenyl)-1 ,3,5-triazin
UV-A-Filter wie z.B.
• 4-lsopropyldibenzoylmethan
• Terephthalyliden-dibornansulfonsäure und Salze (Mexoryl®SX)
• 4-t-Butyl-4'-methoxy-dibenzoylmethan (Avobenzon) / (Neo Heliopan®357)
• Phenylen-bis-benzimidazyl-tetrasulfonsäure-dinatriumsalz (Neo Heliopan®AP)
• 2,2'-(1 ,4-Phenylen)-bis-(1 H-benzimidazol-4,6-disulfonsäure), Mononatriumsalz
• 2-(4-Diethylamino-2-hydroxybenzoyl)-benzoesäure-hexylester (Uvinul® A PlUS)
• Indanylidenverbindungen gemäß DE 100 55 940 (= WO 02/38537)
Besonders zur Kombination geeignete UV-Filter sind dabei
• p-Aminobenzoesäure
• 3-(4'-Trimethylammonium)-benzyliden-bornan-2-on-methylsulfat
• Salicylsäure-homomenthylester (Neo Heliopan®HMS)
• 2-Hydroxy-4-methoxy-benzophenon (Neo Heliopan®BB) • 2-Phenylbenzimidazolsulfonsäure (Neo Heliopan®Hydro)
• Terephthalyliden-dibornansulfonsäure und Salze (Mexoryl®SX)
• 4-tert.-Butyl-4'-methoxydibenzoylmethan (Neo Heliopan®357)
• 3-(4'-Sulfo)benzyliden-bornan-2-on und Salze
• 2-Ethylhexyl-2-cyano-3,3-diphenylacrylat (Neo Heliopan®303)
• N-[(2 und 4)-[2-(oxoborn-3-yliden)methyl]benzyl]-acrylamid-Polymer
• p-Methoxyzimtsäure-2-ethylhexylester (Neo Heliopan®AV)
• p-Aminobenzoesäureethylester (25 Mol) ethoxyliert (INCI-Name: PEG-25 PABA)
• p-Methoxyzimtsäure-isoamylester (Neo Heliopan®E1000)
• 2,4,6-Trianilino-(p-carbo-2'-ethylhexyl-1 '-oxy)-1 ,3,5-triazin (Uvinul®T150)
• Phenol, 2-(2H-benzotriazol-2-yl)-4-methyl-6-(2-methyl-3(1 ,3,3,3- tetramethyl-i-(trimethylsilyl)-oxy)-disiloxyanyl)-propyl), (Mexoryl®XL)
• 4,4'-[(6-[4-(1 ,1-Dimethyl)-aminocarbonyl)-phenylamino]-1 ,3,5-triazin-2,4- diyl)-diimino]-bis- (benzoesäure-2-ethylhexylester), (UvasorbHEB)
• 3-(4'-Methylbenzyliden)-D,L-campher (Neo Helipan®MBC)
• 3-Benzylidencampher
• Salicylsäure-2-ethylhexylester (Neo Helipan®OS)
• 4-Dimethylaminobenzoesäure-2-ethylhexylester (Padimate O)
• Hydroxy-4-methoxy-benzophenon-5-sulfonsäure und Na-SaIz • 2,2'-Methylen-bis-(6-(2H-benztriazol-2-yl)-4-1 ,1 ,3,3-tetramethylbutyl)- phenol), (Tinosorb®M)
• Phenylen-bis-benzimidazyl-tetrasulfonsäure-dinatriumsalz (Neo Heliopan®AP)
• 2,4-Bis-[{(4-(2-Ethyl-hexyloxy)-2-hydroxy}-phenyl]-6-(4-methoxyphenyl)- 1 ,3,5-tιϊazin, (Tinosorb®S)
• Benzylidenmalonat-Polysiloxan (Parsol®SLX)
• Menthylanthranilat (Neo Heliopan®MA)
• 2-(4-Diethylamino-2-hydroxybenzoyl)-benzoesäure-hexylester (Uvinul® A Plus)
• Indanylidenverbindungen gemäß DE 100 55 940 (= WO 02/38537)
Es können darüber hinaus partikuläre UV-Filter oder anorganische Pigmente eingesetzt werden, die gegebenenfalls hydrophobisiert sein können, wie die Oxide des Titans (TiO2), Zinks (ZnO), Eisens (Fe2O3), Zirkoniums (ZrO2), Siliziums (SiO2), Mangans (z.B. MnO), Aluminiums (AI2Os), Cers (z.B. Ce2Os) und/oder deren Mischungen.
Erfindungsgemäße, insbesondere dermatologische Formulierungen können ferner vorteilhaft Farbstoffe und/oder Farbpigmente enthalten, insbesondere wenn sie im Bereich der dekorativen Kosmetik verwendet werden sollen. Die Farbstoffe und -pigmente können aus der entsprechenden Positivliste der Kosmetikverordnung bzw. der EG-Liste kosmetischer Färbemittel ausgewählt werden. In den meisten Fällen sind sie mit den für Lebensmittel zugelassenen Farbstoffen identisch. Vorteilhafte Farbpigmente sind beispielsweise Titandioxid, Glimmer, Eisenoxide (z.B. Fe2θ3 Fβ3θ4, FeO(OH)) und/oder Zinnoxid. Vorteilhafte Farbstoffe sind beispielsweise Carmin, Berliner Blau, Chromoxidgrün, Ultramarinblau und/oder Manganviolett. Einzelne zur Verwendung im Rahmen der vorliegenden Erfindung bevorzugte Kühlwirkstoffe sind nachfolgend aufgelistet. Der Fachmann kann die nachfolgende Liste um eine Vielzahl weiterer Kühlwirkstoffe ergänzen; die aufgelisteten Kühlwirkstoffe können auch in Kombination miteinander eingesetzt werden: L-Menthol, D-Menthol, racemisches Menthol, Menthonglycerinacetal (Handelsname: Frescolat®MGA), Menthyllactat (Handelsname: Frescolat®ML, vorzugsweise handelt es sich bei Menthyllactat um L-Menthyllactat, insbesondere L-Menthyl-L-Iactat), substituierte Menthyl-3-carbonsäureamide (z.B. Menthyl-3- carbonsäure-N-ethylamid), 2-lsopropyl-N-2,3-trimethylbutanamid, substituierte Cyclohexancarbonsäureamide, 3-Menthoxypropan-1 ,2-diol, 2-
Hydroxyethylmenthylcarbonat, 2-Hydroxypropylmenthylcarbonat, N-
Acetylglycinmenthylester, Isopulegol, Menthylhydroxycarbonsäureester (z.B. Menthyl-3-hydroxybutyrat), Monomenthylsuccinat, 2-Mercaptocyclodecanon, Menthyl^-pyrrolidin-δ-oncarboxylat, 2,3-Dihydroxy-p-menthan, 3,3,5- trimethylcyclohexanonglycerinketal, 3-Menthyl-3,6-di- und -trioxaalkanoate, 3- Menthyl methoxyacetat, Icilin.
Bevorzugte Kühlwirkstoffe sind: L-Menthol, D-Menthol, racemisches Menthol, Menthonglycerinacetal (Handelsname: Frescolat®MGA), Menthyllactat
(vorzugsweise L-Menthyllactat, insbesondere L-Menthyl-I-Iactat, Handelsname:
Frescolat®ML), substituierte Menthyl-3-carbonsäureamide (z.B. Menthyl-3- carbonsäure-N-ethylamid), 2-lsopropyl-N-2,3-trimethylbutanamid, substituierte
Cyclohexancarbonsäureamide, 3-Menthoxypropan-1 ,2-diol, 2- Hydroxyethylmenthylcarbonat, 2-Hydroxypropylmenthylcarbonat, Isopulegol.
Besonders bevorzugte Kühlwirkstoffe sind: L-Menthol, racemisches Menthol, Menthonglycerinacetal (Handelsname: Frescolat®MGA), Menthyllactat (vorzugsweise L-Menthyllactat, insbesondere L-Menthyl-L-Iactat, Handelsname: Frescolat®ML), 3-Menthoxypropan-1 ,2-diol, 2-Hydroxyethylmenthylcarbonat, 2- Hydroxypropylmenthylcarbonat. Ganz besonders bevorzugte Kühlwirkstoffe sind: L-Menthol,
Menthonglycerinacetal (Handelsname: Frescolat®MGA), Menthyllactat
(vorzugsweise L-Menthyllactat, insbesondere L-Menthyl-L-Iactat, Handelsname: Frescolat®ML).
Die Einsatzkonzentration der einzusetzenden Kühlwirkstoffe liegt je nach Substanz vorzugsweise im Konzentrationsbereich von 0,01 bis 20 Gew.-% und besonders bevorzugt im Konzentrationsbereich von 0,1 bis 5 Gew.-%, bezogen auf die Gesamtmasse der fertigen (anwendungsbereiten), vorzugsweise topischen, kosmetischen oder therapeutischen (pharmazeutischen) Formulierung.
Bevorzugt können die erfindungsgemäßen Formulierungen für kosmetische (z.B. dermatologische) und/oder therapeutische Anwendungen geeignete weitere Wirkstoffe zur Haut- und Haaraufhellung enthalten. Vorteilhafte haut- und haaraufhellende Wirkstoffe sind insoweit Kojisäure (5-Hydroxy-2-hydroxymethyl- 4-pyranon), Kojisäurederivate wie z.B. Kojisäuredipalmitat, Arbutin, Ascorbinsäure, Ascorbinsäurederivate, Hydrochinon, Hydrochinonderivate, Resorcin, schwefelhaltige Moleküle wie z.B. Glutathion oder Cystein, alpha- Hydroxysäuren (z.B. Zitronensäure, Milchsäure, Apfelsäure) und deren Derivate, N-Acetyl-Tyrosin und -Derivate, Undecenoylphenylalanin, Gluconsäure, 4- Alkylresorcine, 4-(1 -Phenylethyl)1 ,3-dihydroxybenzol, Chromon-Derivate wie Aloesin, Flavonoide, Thymolderivate, 1-Aminoethylphosphinsäure, Thioharnstoffderivate, Ellagsäure, Nicotinamid (Niacinamid), Zinksalze wie z.B. Zinkchlorid oder -gluconat, Thujaplicin und -Derivate, Triterpene wie Maslinsäure, Sterole wie Ergosterol, Benzofuranone wie Senkyunolid, Vinyl- und Ethylgujacol, Dionsäuren wie Octodecendionsäure und Azelainsäure, Inhibitoren der Stickstoffoxid-Synthese wie z.B. L-Nitroarginin und dessen Derivate, 2,7- Dinitroindazol oder Thiocitrullin, Metallchelatoren (z.B. alpha-Hydroxyfettsäuren, Palmitinsäure, Phytinsäure, Lactoferrin, Huminsäure, Gallensäure, Gallenextrakte, Bilirubin, Biliverdin, EDTA, EGTA und deren Derivate), Retinoide, Sojamilch und -extrakt, Serin-Protease-Inhibitoren oder Liponsäure oder andere synthetische oder natürliche Wirkstoffe zur Haut- und Haaraufhellung, wobei letztere auch in Form eines Extrakts aus Pflanzen, wie z.B. Bearberry-Extrakt, Reis-Extrakt, Papaya-Extrakt, Süßholzwurzel-Extrakt (Licorice Extrakt) oder daraus angereicherte Bestandteile wie Glabridin oder Licochalkon A, Artocarpus- Extrakt, Extrakt von Rumex- und Ramulus-Arten, Extrakte aus Kieferarten (Pinus) und Extrakte aus Vitis-Arten oder daraus angereicherte Stilbenderivate, Extrakt aus Saxifraga, Maulbeer, Scutelleria oder/und Trauben verwendet werden.
Die Menge der vorgenannten beispielhaften weiteren Wirkstoffe zur Haut- und Haaraufhellung (eine oder mehrere Verbindungen) in den erfindungsgemäßen Formulierungen beträgt dann vorzugsweise 0,005 bis 30 Gew.-%, bevorzugt 0,01 bis 20 Gew.-%, besonders bevorzugt 0,01 bis 5 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierung.
Erfindungsgemäße Formulierungen (insbesondere, wenn die Anwendung im Gesichtsbereich vorgesehen ist), kann es vorteilhaft sein als Farbstoff eine oder mehrere Substanzen aus der folgenden Gruppe zu wählen: 2,4- Dihydroxyazobenzol, 1-(2'Chlor-4'-nitro-1 '-phenylazo)-2-hydroxynaphthalin,
Ceresrot, 2-(4-Sulfo-1-naphthylazo)-1-naphthol-4-sulfosäure, Calciumsalz der 2- Hydroxy-1 ,2'-azonaphthalin-1 '-sulfosäure, Calcium- und Bariumsalze der 1 -(2- Sulfo-4-methyl-1-phenylazo)-2-naphthylcarbonsäure, Calciumsalz der 1-(2-Sulfo- 1-naphthylazo)-2-hydroxynaphthalin-3-carbonsäure, Aluminiumsalz der 1-(4- Sulfo-1-phenylazo)-2-naphthol-6-sulfosäure, Aluminiumsalz der 1 -(4-Sulfo-1- naphthylazo)-2-naphthol-3,6-disulfosäure, 1 -(4-Sulfo-1 -naphthylazo)-2-naphthol- 6,8-disulfosäure, Aluminiumsalz der 4-(4-Sulfo-1-phenylazo)-1-(4-sulfophenyl)-5- hydroxy-pyrazolon-3-carbonsäure, Aluminium- und Zirkoniumsalze von 4,5- Dibromfluorescein, Aluminium- und Zirkoniumsalze von 2,4,5,7- Tetrabromfluorescein, 3',4',5',6'-Tetrachlor-2,4,5,7-tetrabromfluorescein und sein Aluminiumsalz, Aluminiumsalz von 2,4,5,7-Tetraiodfluorescein, Aluminiumsalz der Chinophthalon-disulfosäure, Aluminiumsalz der Indigo-disulfosäure, rotes und schwarzes Eisenoxid (Colour Index Nummer (CIN): 77491 (rot) und 77499 (schwarz)), Eisenoxidhydrat (CIN: 77492), Manganammoniumdiphosphat und Titandioxid. Ferner vorteilhaft sind öllösliche Naturfarbstoffe, wie z.B. Paprikaextrakte, ß- Carotin oder Cochenille.
Vorteilhaft im Sinne der vorliegenden Erfindung sind ferner dermatologische Formulierungen mit einem Gehalt an Perlglanzpigmenten. Bevorzugt sind insbesondere die im folgenden aufgelisteten Arten von Perlglanzpgimenten:
1. Natürliche Perlglanzpigmente, wie z.B.
- „Fischsilber" (Guanin/Hypoxanthin-Mischkristalle aus Fischschuppen) und - „Perlmutt" (vermahlene Muschelschalen)
2. Monokristalline Perlglanzpigmente wie z.B. Bismuthoxychlorid (BiOCI)
3. Schicht-Substrat Pigmente: z.B. Glimmer / Metalloxid
Basis für Perlglanzpigmente sind beispielsweise pulverförmige Pigmente oder Ricinusöldispersionen von Bismutoxychlorid und/oder Titandioxid sowie Bismutoxychlorid und/oder Titandioxid auf Glimmer. Insbesondere vorteilhaft ist z.B. das unter der CIN 77163 aufgelistete Glanzpigment.
Die Liste der genannten Perlglanzpigmente soll selbstverständlich nicht limitierend sein. Im Sinne der vorliegenden Erfindung vorteilhafte
Perlglanzpigmente sind auf zahlreichen, an sich bekannten Wegen erhältlich.
Beispielsweise lassen sich auch andere Substrate außer Glimmer mit weiteren
Metalloxiden beschichten, wie z.B. Silica und dergleichen mehr. Vorteilhaft sind z.B. mit TiO2 und Fe2O3 beschichtete SiO2-Partikel („Ronaspheren"), die von der Firma Merck vertrieben werden und sich besonders für die optische Reduktion feiner Fältchen eignen.
Es kann darüber hinaus von Vorteil sein, gänzlich auf ein Substrat wie Glimmer zu verzichten. Besonders bevorzugt sind Eisenperlglanzpigmente, welche ohne die Verwendung von Glimmer hergestellt werden. Solche Pigmente sind z.B. unter dem Handelsnamen Sicopearl Kupfer 1000 bei der Firma BASF erhältlich. Besonders vorteilhaft sind ferner auch Effektpigmente, welche unter der Handelsbezeichnung Metasomes Standard / Glitter in verschiedenen Farben (yellow, red, green, blue) von der Firma Flora Tech erhältlich sind. Die Glitterpartikel liegen hierbei in Gemischen mit verschiedenen Hilfs- und Farbstoffen (wie beispielsweise den Farbstoffen mit den CIN 19140, 77007, 77289, 77491 ) vor.
Die Farbstoffe und Pigmente können sowohl einzeln als auch im Gemisch vorliegen sowie gegenseitig miteinander beschichtet sein, wobei durch unterschiedliche Beschichtungsdicken im allgemeinen verschiedene Farbeffekte hervorgerufen werden. Die Gesamtmenge der Farbstoffe und farbgebenden Pigmente wird vorteilhaft aus dem Bereich von z.B. 0,1 Gew.-% bis 30 Gew.%, vorzugsweise von 0,5 bis 15 Gew.-%, insbesondere von 1 ,0 bis 10 Gew.-% gewählt, jeweils bezogen auf das Gesamtgewicht der (kosmetischen) Formulierungen.
Die erfindungsgemäßen Formulierungen können auch (zusätzliche) Antioxidantien oder Konservierungsmittel enthalten. Als Antioxidantien oder Konservierungsmittel können alle für kosmetische (z.B. dermatologische) und/oder therapeutische Anwendungen geeigneten oder gebräuchlichen Antioxidantien verwendet werden.
Antioxidantien im Sinne der Erfindung sind alle Substanzen, die die Menge an freien Radikalen in Zellen und Geweben senken. Vorteilhaft werden Antioxidantien gewählt aus der Gruppe bestehend aus Aminosäuren (z.B. Glycin, Histidin, Tyrosin, Tryptophan) und deren Derivate, Imidazole (z.B. Urocaninsäu- re) und deren Derivate, Peptide wie D,L-Carnosin, D-Carnosin, L-Carnosin und deren Derivate (z.B. Anserin), Carotinoide, Carotine (z.B. alpha-Carotin, beta- Carotin, Lycopin) und deren Derivate, Liponsäure und deren Derivate (z.B. Dihydroliponsäure), Aurothioglucose, Propylthiouracil und andere Thiole (z.B. Thioredoxin, Glutathion, Cystein, Cystin, Cystamin und deren Glycosyl-, N- Acetyl-, Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Amyl-, Butyl- und Lauryl-, Palmitoyl-, Oleyl-, gamma-Linoleyl-, Cholesteryl-, Glyceryl-, und Oligoglycerylester) sowie deren Salze, Dilaurylthiodipropionat, Distearylthiodipropionat, Thiodipropionsäure und deren Derivate (Ester, Ether, Peptide, Lipide, Nukleotide, Nukleoside und Salze) sowie Sulfoximinverbindungen (z.B. Buthioninsulfoximine, Homocyste- insulfoximin, Buthioninsulfone, Penta-, Hexa-, Heptathioninsulfoximin) in sehr geringen verträglichen Dosierungen (z.B. pmol bis μmol/kg), ferner (Metall)-Che- latoren (z.B. alpha-Hydroxyfettsäuren, Palmitinsäure, Phytinsäure, Lactoferrin, alpha-Hydroxysäuren (z.B. Zitronensäure, Milchsäure, Apfelsäure), Huminsäure, Gallensäure, Gallenextrakte, Tannine, Bilirubin, Biliverdin, EDTA, EGTA und deren Derivate), ungesättigte Fettsäuren und deren Derivate (z.B. gamma-Li- nolensäure, Linolsäure, Ölsäure), Folsäure und deren Derivate, Ubichinon und Ubichinol und deren Derivate, Vitamin C und Derivate (z.B. Ascorbylpalmitat, Mg- Ascorbylphosphat, Ascorbylacetat, Ascorbylglucosid), Tocopherole und Derivate (z.B. Vitamin E-acetat), Vitamin A und Derivate (Vitamin A-palmitat) sowie Koniferylbenzoat des Benzoeharzes, Rutinsäure und deren Derivate, Flavonoide und deren glykosylierte Vorstufen, insbesondere Quercetin und dessen Derivate z.B. alpha-Glucosylrutin, Rosmarinsäure, Carnosol, Carnosolsäure, Resveratrol, Kaffeesäure und deren Derivate, Sinapinsäure und deren Derivate, Ferulasäure und deren Derivate, Curcuminoide, Chlorogensäure und deren Derivate, Retinoide, Ursolsäure, Levulinsäure, Butylhydroxytoluol, Butylhydroxyanisol, Nordihydroguajakharzsäure, Nordihydroguajaretsäure, Trihydroxybutyrophenon, Harnsäure und deren Derivate, Mannose und deren Derivate, Zink und dessen Derivate (z.B. ZnO, ZnSθ4), Selen und dessen Derivate (z.B. Selenmethionin),
Superoxid-Dismutase, Stilbene und deren Derivate (z.B. Stilbenoxid, Trans- Stilbenoxid) und die erfindungsgemäß geeigneten Derivate (Salze, Ester, Ether, Zucker, Nukleotide, Nukleoside, Peptide und Lipide) dieser genannten Wirkstoffe oder antioxidativ wirksame Extrakte oder Fraktionen von Pflanzen wie z.B. Grüntee, Rooibos, Honeybush, Traube, Rosmarin, Salbei, Melisse, Thymian, Lavendel, Olive, Hafer, Kakao, Ginkgo, Ginseng, Süßholz, Geißblatt, Sophora, Pueraria, Pinus, Citrus, Phyllanthus emblica oder Johanniskraut, Traubenkernen, Weizenkeimen, Phyllantus emblica.
Weiterhin sind geeignet Coenzyme, wie z.B. Coenzym Q10, Plastochinon, Menachinon, Ubichinole 1 -10, Ubichinone 1 -10 oder Derivate dieser Stoffe. Die Menge der Antioxidantien (eine oder mehrere Verbindungen) in den erfindungsgemäßen Formulierungen beträgt vorzugsweise 0,01 bis 20 Gew.-%, besonders bevorzugt 0,05 bis 10 Gew.-%, insbesondere 0,2 bis 5 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierung.
Sofern Vitamin E und/oder dessen Derivate das oder die Antioxidantien darstellen, ist es vorteilhaft, deren jeweilige Konzentrationen aus dem Bereich von 0,001 bis 10 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierung, zu wählen.
Sofern Vitamin A, bzw. Vitamin-A-Derivate, bzw. Carotine bzw. deren Derivate das oder die Antioxidantien darstellen, ist es vorteilhaft, deren jeweilige Konzentrationen aus dem Bereich von 0,001 bis 10 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierung, zu wählen.
Erfindungsgemäße Formulierungen können auch Konservierungsmittel enthalten.
Als Konservierungsmittel können eingesetzt werden: alle für kosmetische (z.B. dermatologische) und/oder therapeutische Anwendungen geeigneten oder ge- bräuchlichen Antioxidantien, klassische Konservierungsmittel (z.B. Formaldehyd,
Glutardialdehyd, Parabene (z.B. Methyl-, Ethyl-, Propyl- und Butylparaben),
Dibromdicyanobutan, Imidazolidinylharnstoffe („Germall"), Isothiazolinone
(„Kathon"), Methylchlorthiazolidin, Methylthiazolidin, organische Säuren (z.B.
Benzoesäure, Sorbinsäure, Salicylsäure) sowie deren Salze und Ester, Propoinsäure und Ameisensäure und deren Salze, Glycole z.B. Propylenglycol,
1 ,2-Dihydroxyalkane), pflanzliche Konservierungshelfer wie z.B. Lantadin A,
Caryophyllen, Hesperidin, Diosmin, Phellandren, Pigenin, Quercetin, Hypericin,
Aucubin, Diosgenin, Plumbagin, Corlilagin etc.
Weiterhin kann der Einsatz von Antiirritantien in erfindungsgemäßen Formulierungen vorteilhaft sein. Antiirritantien können hierbei alle für kosmetische (z.B. dermatologische) und/oder therapeutische Anwendungen geeigneten oder gebräuchlichen entzündungshemmenden bzw. rötungs- und juckreizlindernden Wirkstoffe sein. Bevorzugt werden alle Substanzen, die die Menge an Zytokinen, Interleukinen, Prostaglandinen und/oder Leukotrienen in Zellen und Geweben senken.
Vorteilhaft werden als entzündungshemmende bzw. rötungs- und juckreizlindernde Wirkstoffe steroidale entzündungshemmende Substanzen vom Kortikosteroiden-Typ, wie z.B. Hydrocortison, Dexamethason, Dexamethasonphosphat, Methylprednisolon oder Cortison eingesetzt, wobei die Auflistung durch Zusatz weiterer steroidaler Entzündungshemmer erweiterbar ist. Auch nichtsteroidale Entzündungshemmer können eingesetzt werden. Beispielhaft erwähnt werden sollen hier Oxicame wie Piroxicam oder Tenoxicam; Salicylate wie Aspirin, Disalcid, Solprin oder Fendosal; Essigsäure-Derivate wie Diclofenac, Fenclofenac, Indomethacin, Sulindac, Tolmetin, oder Clindanac; Fenamate wie Mefenamic, Meclofenamic, Flufenamic oder Niflumic; Propionsäure-Derivate wie Ibuprofen, Naproxen, Benoxaprofen oder Pyrazole wie Phenylbutazon, Oxyphenylbutazon, Febrazon oder Azapropazon. Alternativ können natürliche entzündungshemmende bzw. rötungs- und juckreizlindernde Stoffe eingesetzt werden. Einsetzbar sind Pflanzenextrakte, spezielle hochwirksame Pflanzenextrakt-Fraktionen sowie aus Pflanzenextrakten isolierte hochreine Wirksubstanzen. Besonders bevorzugt sind Extrakte, Fraktionen und Wirksubstanzen aus Kamille, Aloe vera, Commiphora-Arten, Rubia-Arten, Echinacea-Arten, Weiden, Weidenröschen, Hafer, schwarzem und grünem Tee, Gingko, Kaffee, Pfeffer, Johannisbeere, Tomate, Vanille, Mandeln, sowie Reinsubstanzen wie u.a. Bisabolol, Apigenin-7-glucosid, Boswelliasäure, Phytosterole, Glycyrrhizinsäure, Glabridin oder Licochalkon A.
Die Menge der Antiirritantien (eine oder mehrere Verbindungen) in erfindungsgemäßen Formulierungen beträgt vorzugsweise 0,01 bis 20 Gew.-%, besonders bevorzugt 0,03 bis 10 Gew.-%, insbesondere 0,05 bis 5 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierung.
Die erfindungsgemäßen Formulierungen (insbesondere topischen kosmetischen Formulierungen) können desweiteren Feuchthalteregulatoren und Osmolyte enthalten. Als Feuchthalteregulatoren („moisturizer") finden z. B. folgende Stoffe Verwendung: Natriumlactat, Harnstoff, Alkohole (inbesondere 1 ,2-Pentandiol, 1 ,2-Hexandiol, 1 ,2-Octandiol, 1 ,2-Decandiol und deren Mischungen), Sorbit, Glycerin, Propylenglykol, Kollagen, Elastin oder Hyaluronsäure, Diacyladipate, Petrolatum, Ectoin, Urocaninsäure, Lecithin, Pantheol, Phytantriol, Lycopen, Algen-Extrakt, Ceramide, Cholesterol, Glykolipide, Chitosan, Chondroitinsulfat, Polyaminosäuren und -zucker, Lanolin, Lanolinester, Aminosäuren, alpha- Hydroxysäuren (z.B. Zitronensäure, Milchsäure, Äpfelsäure) und deren Derivate, Zucker (z.B. Inositol), alpha-Hydroxy-Fettsäuren, Phytosterole, Triterpensäuren wie Betulinsäure oder Ursolsäure, Algenextrakte. Als Osmolyte können z.B. eingesetzt werden: Zuckeralkohole (myo-lnositol, Mannitol, Sorbitol), quaternäre Amine wie Taurin, Cholin, Betain, Betain-Glycin, Ectoin, Diglycerolphosphat, Phosphorylcholin, Glycerophosphorylcholine, Aminosäuren wie Glutamin, Glycin, Alanin, Glutamat, Aspartat oder Prolin, Phosphatidylcholin, Phosphatidylinositol, anorganische Phosphate, sowie Polymere der genannten Verbindungen wie Proteine, Peptide, Polyaminosäuren und Polyole.
Die erfindungsgemäßen Formulierungen (z.B. topische kosmetische Formulierungen) enthalten weiterhin vorteilhaft antimikrobielle Wirkstoffe. Als Beispiele seien genannt:
Aryl- oder Aryloxy-substituierte, unverzweigte oder ein und mehrfach alkylverzweigte gesättigte oder ein bis fünffach ungesättigte (bis zu fünf Doppeloder Dreifachbindungen, auch gemischte En-In-Verbindungen) Fettalkohole, - aldehyde und -säuren der Kettenlängen C2 bis C40.
Aryl- oder Aryloxy-substituierte unverzweigte oder ein und mehrfach alkylverzweigte gesättigte oder ein bis fünffach ungesättigte (bis zu fünf Doppeloder Dreifachbindungen, auch gemischte En-In-Verbindungen) Alkandiole, Dialdehyde und Dicarbonsäuren der Kettenlängen C2 bis C40, besonders bevorzugt sind die Kettenlängen C4 bis C12 Mono- und Oligoglyceride (bis 4 Glycerin-Einheiten) Aryl- oder Aryloxy- substituierter unverzweigter oder ein und mehrfach alkylverzweigter gesättigter oder ein bis fünffach ungesättigter (bis zu fünf Doppel- oder Dreifachbindungen, auch gemischte En-In-Verbindungen) Fettalkohole (Mono- und Oligoglycerinmonoalkylether), Fettsäuren (Mono- und
Oligoglycerinmonoalkylester), Alkandiole (Mono- und
Oligoglycerinmonoalkylether; Bis(mono-/oligoglyceryl)alkyldiether) und
Dicarbonsäuren (Mono- und Oligoglycerinmonoalkylester; Bis(mono- /oligoglyceryl)-alkyldiester) der Kettenlängen C2 bis C40.
Fettsäureester unverzweigter oder ein und mehrfach alkylverzweigter gesättigter oder ein bis fünffach ungesättigter (bis zu fünf Doppel- oder Dreifachbindungen, auch gemischte En-In-Verbindungen), ggf. auch Aryl- oder Aryloxy-substituierter Carbonsäuren der Kettenlängen C2 bis C4o mit unverzweigten oder ein und mehrfach alkylverzweigten gesättigten oder ein bis fünffach ungesättigten (bis zu fünf Doppel- oder Dreifachbindungen, auch gemischte En-In-Verbindungen), ggf. auch Aryl- oder Aryloxy-substituierten ein- bis sechswertigen Fettalkoholen der Kettenlängen C2 bis C4o.
Pflanzliche und tierische Fettsäureschnitte, enthaltend unverzweigte oder ein und mehrfach alkylverzweigte gesättigte oder ein bis fünffach ungesättigte (bis zu fünf Doppel- oder Dreifachbindungen, auch gemischte En-In-Verbindungen), Fettalkohole, -aldehyde und -säuren der Kettenlängen C2 bis C4o (z.B. Kokosfettsäuren, Palmkernfettsäuren, Wollwachssäuren).
Mono- und Oligoglyceride des Lanolins, von Lanolinalkoholen und Lanolinsäuren (z.B. Glyceryl Lanolat, Neocerit), Glycyrrhezitinsäure und Derivate (z.B. Glycyrrhetinyl Stearate), natürliche und synthetische Cardenolide (z.B. Digitoxin, Dogoxin, Digoxygenin, Gitoxygenin, Strophanthin und Strophanthidin), natürliche und synthetische Bufadienolide (z.B. Scillaren A, Scillarenin und Bufotalin), Sapogenine und Steroid-Sapogenine (z.B. Amyrine, Oleanolsäure, Digitonin, Gitogenin, Tigogenin und Diosgenin), Steroid-Alkaloide pflanzlichen und tierischen Ursprungs (z.B. Tomatidin, Solanin, Solanidin, Conessin, Batrachotoxin und Homobatrachotoxin).
Ein- und mehrfach halogenierte Nitrile, Dinitrile, Trinitrile oder Tetranitrile.
Mono- und Oligohydroxyfettsäuren der Kettenlängen C2 bis C24 (z.B. Milchsäure, 2- Hydroxypalmitinsäure), deren Oligo- und/oder Polymere sowie pflanzliche und tierische Rohstoffe dieselben enthaltend.
Acyclische Terpene: Terpenkohlenwasserstoffe (z.B. Ocimen, Myrcen), Terpenalkohole (z.B. Geraniol, Linalool, Citronellol), Terpenaldehyde und -ketone (z.B. Citral, Pseudoionon, beta-lonon); Monocyclische Terpene: Terpenkohlenwasserstoffe (z.B. Terpinen, Terpinolen Limonen), Terpenalkohole (z.B. Terpineol, Thymol, Menthol), Terpenketone (z.B. Pulegon, Carvon); Bicyclische Terpene: Terpenkohlenwasserstoffe (z.B. Caran, Pinan, Bornan), Terpenalkohole (z.B. Borneol, Isoborneol), Terpenketone (z.B. Campher); Sesquiterpene: Acyclische Sesquiterpene (z.B. Farnesol, Nerolidol), Monocyclische Sesquiterpene (z.B. Bisabolol), Bicyclische Sesquiterpene (z.B. Cadinen, Seiinen Vetivazulen, Guajazulen), Tricyclische Sesquiterpene (z.B. Santalen), Diterpene (z.B. Phytol), Tricyclische Diterpene (z.B. Abietinsäure), Triterpene (Squalenoide; z.B. Squalen), Tetraterpene.
Ethoxylierte, propoxylierte oder gemischt ethoxylierte/propoxylierte kosmetische Fettalkohole, Fettsäuren und Fettsäureester der Kettenlängen C2 bis C40 mit 1 bis 150 E/O- und/oder P/O-Einheiten.
Antimikrobielle Peptide und Proteine mit einer Aminosäurezahl von 4 bis 200, z.B. Skin Antimicrobial Peptides (SAPs), Lingual Antimicrobial Peptides (LAPs), humane beta-Defensine (insbes. h-BD1 und h-BD2), Lactoferrine und deren Hydrolysate sowie daraus gewonnene Peptide, Bactericidal/Permeability Increasing Proteins [BPIs], Cationic Microbial Proteins [CAPs], Lysozym. Gut geeignete Kohlenhydrate oder „Kohlenhydrat-Derivate", die sprachlich kurzgefasst auch unter die Bezeichnung „Kohlenhydrate" fallen sollen, sind Zucker und substituierte Zucker oder Zuckerreste enthaltende Verbindungen. Zu den Zuckern zählen insbesondere auch jeweils die Desoxy- und Didesoxy- Formen, N-Acetyl-Galactosamin-, N-Acetyl Glucosamin- und Sialinsäure- substituierte Derivate sowie Zuckerester und -ether. Bevorzugt werden
a) Monosaccharide, darunter insbesondere Pentosen und Hexosen, b) Disaccharide, darunter insbesondere Saccharose, Maltose, Lactobiose, c) Oligosaccharide, darunter besonders die Tri- und Tetrasaccharide und d) Polysaccharide, darunter besonders Stärke, Glykogen, Cellulose, Dextran, Tunicin, Inulin, Chitin, insbesondere Chitosane, Chitinhydrolysate, Alginsäure und Alginate, Pflanzengumme, Körperschleime, Pektine, Mannane, Galactane, Xylane, Araban, Polyosen, Chondroitinsulfate, Heparin, Hyaluronsäure und
Glycosaminoglykane, Hemicellulosen, substituierte Cellulose und substituierte Stärke, insbesondere jeweils die hydroxyalkylsubstituierten Polysaccharide.
Besonders geeignet sind Amylose Amylopektin, Xanthan, alpha-, beta- und gamma-Dextrin. Die Polysaccharide können z.B. aus 4 bis 1.000.000, insbesondere 10 bis 100.000 Monosacchariden bestehen. Vorzugsweise werden jeweils solche Kettenlängen gewählt, die gewährleisten, dass der Wirkstoff in der jeweiligen Formulierung löslich oder in sie einzuarbeiten ist.
Sphingolipide wie Sphingosin; N-Monoalkylierte Sphingosine; N,N-Dialkylierte Sphingosine; Sphingosin-1 -Phosphat; Sphingosin-1 -Sulfat; Psychosin (Sphingosin-beta-D-Galactopyranosid); Sphingosylphosphorylcholin;
Lysosulfatide (Sphingosylgalactosylsulfat; Lysocerebrosidsulfat); Lecithin; Sphingomyelin; Sphinganin.
Es können auch sogenannte "natürliche" antibakterielle Wirkstoffe eingesetzt werden, meist handelt es sich hierbei um ätherische Öle. Typische antibakteriell wirksame Öle sind beispielsweise Öle aus Anis, Zitrone, Orange, Rosmarin, Wintergrün, Nelke, Thymian, Lavendel, Hopfen, Citronella, Weizen, Zitronengras, Zedernholz, Zimt, Geranium, Sandelholz, Veilchen, Eukalyptus, Pfefferminz, Gum benzoin, Basilikum, Fenchel, Menthol sowie Ocmea origanum, Hydastis carradensis, Berberidaceae daceae, Ratanhiae oder Curcuma longa.
Wichtige antimikrobiell wirksame Substanzen, die in ätherischen Ölen gefunden werden können sind beispielsweise Anethol, Catechol, Camphen, Carvacrol, Eugenol, Eucalyptol, Ferulasäure, Farnesol, Hinokitiol, Tropolon, Limonen, Menthol, Methylsalicylat, Thymol, Terpineol, Verbenon, Berberin, Curcumin, Caryophyllenoxid, Nerolodol, Geraniol.
Es können auch Gemische der genannten Wirksysteme oder Wirkstoffe sowie Wirkstoffkombinationen, die diese Wirkstoffe enthalten, verwendet werden.
Vorzugsweise beträgt die Menge an antimikrobiellen Wirkstoffen in den Formulierungen 0,01 bis 20 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierungen, besonders bevorzugt 0,05 bis 10 Gew.-%.
Die erfindungsgemäßen (insbesondere kosmetischen, einschließlich der dermatologischen) Formulierungen können Deodorantien enthalten, d.h. Wirkstoffe mit deodorierender und schweißhemmender Wirkung. Hierzu zählen beispielsweise Geruchsüberdecker, wie die gängigen Parfümbestandteile, Antiperspirantien auf Basis von Aluminium-, Zirkonium- oder Zinksalzen, Geruchsabsorber, beispielsweise die in der Patentoffenlegungsschrift DE-P 40 09 347 beschriebenen Schichtsilikate, von diesen insbesondere Montmorillonit, Kaolinit, Nontronit, Saponit, Hectorit, Bentonit, Smectit, ferner beispielsweise Zinksalze der Ricinolsäure. Dazu zählen ebenfalls bakterizide bzw. bakteriostatische deodoriende Substanzen, wie z. B. Hexachlorophen, 2,4,4'- Trichlor-2'hydroxydiphenylether (Irgasan), 1 ,6-Di-(4-chlorphenylbiguanido)-hexan (Chlorhexidin), 3,4,4'-Trichlorcarbanilid, sowie die in den Patentoffenlegungsschriften DE-37 40 186, DE-39 38 140, DE-42 04 321 , DE-42 29 707, DE-42 29 737, DE-42 37 081 , DE-43 09 372, DE-43 24 219 beschriebenen wirksamen Agenzien, und kationaktive Substanzen enthalten, wie z. B. quaternäre Ammoniumsalze und Geruchsabsorber, wie z. B. Grillocin® (Kombination von Zinkrizinoleat und verschiedenen Zusätzen) oder Triethylcitrat, gegebenenfalls in Kombination mit lonenaustauschharzen.
Vorzugsweise beträgt die Menge an desodorierenden und/oder antitranspiranten Wirkstoffen in den Formulierungen 0,01 bis 20 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierungen, besonders bevorzugt 0,05 bis 10 Gew.-%.
Die erfindungsgemässen (insbesondere kosmetischen) Formulierungen können, insbesondere wenn kristalline oder mikrokristalline Festkörper, beispielsweise anorganische Mikropigmente in die Formulierungen eingearbeitet werden sollen, auch anionische, kationische, nichtionische und/oder amphotere Tenside enthalten.
Anionische Tenside weisen als funktionelle Gruppen in der Regel Carboxylat-, Sulfat- oder Sulfonatgruppen auf. In wässriger Lösung bilden sie im sauren oder neutralen Milieu negativ geladene organische Ionen. Kationische Tenside sind beinahe ausschließlich durch das Vorhandensein einer quaternären Ammoniumgruppe gekennzeichnet. In wässriger Lösung bilden sie im sauren oder neutralen Milieu positiv geladene organische Ionen. Amphotere Tenside enthalten sowohl anionische als auch kationische Gruppen und verhalten sich demnach in wässriger Lösung je nach pH-Wert wie anionische oder kationische Tenside. Im stark sauren Milieu besitzen sie eine positive und im alkalischen Milieu eine negative Ladung. Im neutralen pH-Bereich hingegen sind sie zwitterionisch. Typisch für nicht-ionische Tenside sind Polyether-Ketten. Nicht-ionische Tenside bilden in wässrigem Medium keine Ionen.
A. Anionische Tenside
Vorteilhaft zu verwendende anionische Tenside sind Acylaminosäuren (und deren Salze), wie Acylglutamate, beispielsweise Natriumacylglutamat, Di-TEA-palmitoyl- aspartat und Natrium Capryl/ Capringlutamat,
Acylpeptide, beispielsweise Palmitoyl-hydrolysiertes Milchprotein, Natrium Cocoyl-hydrolysiertes Soja Protein und Natrium-/ Kalium Cocoyl- hydrolysiertes Kollagen,
Sarcosinate, beispielsweise Myristoyl Sarcosin, TEA-Iauroylsarcosinat, Natriumlauroylsarcosinat und Natriumcocoylsarkosinat,
Taurate, beispielsweise Natriumlauroyltaurat und Natriummethylcocoyltaurat,
Acyllactylate, Lauroyllactylat, Caproyllactylat
- Alaninate
Carbonsäuren und Derivate, wie
beispielsweise Laurinsäure, Aluminiumstearat, Magnesiumalkanolat und Zinkundecylenat,
Ester-Carbonsäuren, beispielsweise Calciumstearoyllactylat, Laureth-6 Citrat und Natrium PEG-4 Lauramidcarboxylat,
Ether-Carbonsäuren, beispielsweise Natriumlaureth-13 Carboxylat und Natrium PEG-6 Cocamide Carboxylat,
Phosphorsäureester und Salze, wie beispielsweise DEA-Oleth-10-Phosphat und Dilaureth-4 Phosphat,
Sulfonsäuren und Salze, wie
Acyl-isothionate, z.B. Natrium-/ Ammoniumcocoyl-isethionat,
Alkylarylsulfonate, Alkylsulfonate, beispielsweise Natriumcocosmonoglyceridsulfat, Natrium Ci2- u Olefin-sulfonat, Natriumlaurylsulfoacetat und Magnesium PEG-3 Cocamidsulfat,
Sulfosuccinate, beispielsweise Dioctylnatriumsulfosuccinat, Dinatriumlaureth- sulfosuccinat, Dinatriumlaurylsulfosuccinat und Dinatriumundecylenamido
MEA-Sulfosuccinat
sowie
Schwefelsäureester, wie
Alkylethersulfat, beispielsweise Natrium-, Ammonium-, Magnesium-, MIPA, TIPA-Laurethsulfat, Natriummyrethsulfat und Natrium C12-13 Parethsulfat,
Alkylsulfate, beispielsweise Natrium-, Ammonium- und TEA- Laurylsulfat.
B. Kationische Tenside
Vorteilhaft zu verwendende kationische Tenside sind
- Alkylamine,
- Alkylimidazole,
- Ethoxylierte Amine und
- Quaternäre Tenside.
RNH2CH2CH2COO" (bei pH=7)
RNHCH2CH2COO- B+ (bei pH=12) B+ = beliebiges Kation, z.B. Na+
- Esterquats
Quaternäre Tenside enthalten mindestens ein N-Atom, das mit 4 Alkyl- oder Arylgruppen kovalent verbunden ist. Dies führt, unabhängig vom pH Wert, zu einer positiven Ladung. Vorteilhaft sind Alkylbetain, Alkylamidopropylbetain und Alkylamidopropylhydroxysulfain. Die verwendeten kationischen Tenside können ferner bevorzugt gewählt werden aus der Gruppe der quaternären Ammoniumverbindungen, insbesondere Benzyltrialkyl-ammoniumchloride oder - bromide, wie beispielsweise Benzyldimethylstearyl-ammoniumchlorid, ferner Alkyltrialkylammoniumsalze, beispielsweise Cetyltrimethylammoniumchlorid oder - bromid, Alkyldimethylhydroxy-ethylammoniumchloride oder -bromide, Dialkyldimethylammoniumchloride oder -bromide, Alkylamidethyltrimethyl- ammoniumethersulfate, Alkylpyridiniumsalze, beispielsweise Lauryl- oder Cetylpyrimidiniumchlorid, Imidazolinderivate und Verbindungen mit kationischem Charakter wie Aminoxide, beispielsweise Alkyldimethylaminoxide oder Alkylaminoethyldimethylaminoxide. Vorteilhaft sind insbesondere Cetyltrimethyl- ammoniumsalze zu verwenden.
C. Amphotere Tenside
Vorteilhaft zu verwendende amphotere Tenside sind
Acyl-/dialkylethylendiamin, beispielsweise Natriumacylamphoacetat, Dina- trium-acylamphodipropionat, Dinatriumalkylamphodiacetat, Natriumacyl- amphohydroxy-propylsulfonat, Dinatriumacylamphodiacetat und Natrium- acylamphopropionat,
N-Alkylaminosäuren, beispielsweise Aminopropylalkylglutamid, Alkyl- aminopropionsäure, Natriumalkylimidodipropionat und Lauroamphocar- boxyglycinat.
D. Nicht-ionische Tenside
Vorteilhaft zu verwendende nicht-ionische Tenside sind
Alkohole,
Alkanolamide, wie Cocamide MEA/ DEA/ MIPA, Aminoxide, wie Cocoamidopropylaminoxid,
Ester, die durch Veresterung von Carbonsäuren mit Ethylenoxid, Glycerin, Sorbitan oder anderen Alkoholen entstehen,
Ether, beispielsweise ethoxylierte/propoxylierte Alkohole, ethoxylierte/ propoxylierte Ester, ethoxylierte/ propoxylierte Glycerinester, ethoxylierte/ propoxy-lierte Cholesterine, ethoxylierte/ propoxylierte Triglyceridester, ethoxyliertes prop-oxyliertes Lanolin, ethoxylierte/ propoxylierte Polysiloxane, propoxylierte POE-Ether und Alkylpolyglycoside wie Laurylglucosid, Decylglycosid undCocoglyco-sid.
- Sucrose (Saccharose)-ester, -ether
Polyglycerinester, Diglycerinester, Monoglycerinester
Methylglucosester, Ester von Hydroxysäuren
Vorteilhaft ist ferner die Verwendung einer Kombination von anionischen und/oder amphoteren Tensiden mit einem oder mehreren nicht-ionischen Tensiden.
Die oberflächenaktive Substanz (Tensid) bzw. die Kombination der oberflächenaktiven Substanzen kann in einer Konzentration zwischen 1 und 98 Gew.-% in den erfindungsgemäßen Formulierungen vorliegen, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierungen.
Erfindungsgemäße kosmetische (z.B. dermatologische) oder therapeutische Formulierungen, die die erfindungsgemäßen bzw. erfindungsgemäß einzusetzenden Verbindungen der Formel (I) enthalten, können auch als Emulsionen vorliegen.
Die Ölphase (Lipidphase) in den erfindungsgemäßen Formulierungen (insbesondere topischen kosmetischen Formulierungen) kann vorteilhaft gewählt werden aus folgender Substanzgruppe:
Mineralöle (vorteilhaft Paraffinöl), Mineralwachse fette Öle, Fette, Wachse und andere natürliche und synthetische Fettkörper, vorzugsweise Ester von Fettsäuren mit Alkoholen niedriger C- Zahl, z.B. mit Isopropanol, Propylenglykol oder Glycerin, oder Ester von Fettalkoholen mit Alkansäuren niedriger C-Zahl oder mit Fettsäuren;
Alkylbenzoate (z.B. Gemische von n-Dodecyl-, n-Tridecyl-, n-Tetradecyl- oder n-Pentadecylbenzoat);
cyclische oder lineare Silikonöle wie Dimethylpolysiloxane, Diethylpolysiloxane, Diphenylpolysiloxane sowie Mischformen daraus.
Vorteilhaft einsetzbar sind (natürliche oder synthetische) Ester, insbesondere (a) Ester aus gesättigten und/oder ungesättigten verzweigten und/oder unverzweigten Alkancarbonsäuren einer Kettenlänge von 3 bis 30 C-Atomen und gesättigten und/oder ungesättigten, verzweigten und/oder unverzweigten Alkoholen einer Kettenlänge von 3 bis 30 C-Atomen, (b) Ester aus aromatischen Carbonsäuren und gesättigten und/oder ungesättigten, verzweigten und/oder unverzweigten Alkoholen einer Kettenlänge von 3 bis 30 C-Atomen. Bevorzugte Esteröle sind Isopropylmyristat, Isopropylpalmitat, Isopropylstearat, Isopropyloleat, n- Butylstearat, n-Hexyllaurat, n-Decyllaurat, n-Decyloleat, Isooctylstearat, Isononylstearat, Isononylisononanoat, 3,5,5-Trimethylhexyl-3,5,5- trimethylhexanoat, 2-Ethylhexylisononanoat, 2-Ethylhexyl-3,5,5-trimethylhexanoat, 2-Ethylhexyl-2-ethylhexanoat, Cetearyl-2-ethylhexanoat, 2 -Ethylhexylpalmitat, 2- Ethylhexyllaurat, 2-Hexyldecylstearat, 2-Octyldecylpalmitat, 2-Octyldodecyl- palmitat, Oleyloleat, Oleylerucat, Erucyloleat, Erucylerucat sowie synthetische, halbsynthetische und natürliche Gemische solcher Ester, z.B. Jojobaöl.
Ferner kann die Ölphase vorteilhaft gewählt werden aus der Gruppe der verzweigten und unverzweigten Kohlenwasserstoffe und -wachse, der Silikonöle, der Dialkylether, der Gruppe der gesättigten oder ungesättigten, verzweigten oder unverzweigten Alkohole, sowie der Fettsäuretriglyceride, namentlich der Triglycerinester gesättigter und/oder ungesättigter, verzweigter und/oder unverzweigter Alkancarbonsäuren einer Kettenlänge von 8 bis 24, insbesondere 12 bis 18 C-Atomen. Die Fettsäuretriglyceride können vorteilhaft gewählt werden aus der Gruppe der synthetischen, halbsynthetischen und natürlichen Öle, z.B. Triglyceride der Caprin- oder Caprylsäure, Aprikosenkernöl, Avocadoöl, Baumwollsamenöl, Borretschsamenöl, Distelöl, Erdnussöl, Gamma-Oryzanol, Hagebuttenkernöl, Hanföl, Haselnussöl, Johannisbeersamenöl, Kokosöl, Kirschkernöl, Lachsöl, Leinöl, Maiskeimöl, Makadamianussöl, Mandelöl, Nachtkerzenöl, Nerzöl, Olivenöl, Palmöl, Palmkernöl, Pekannussöl, Pfirsichkernöl, Pistazienkernöl, Rapsöl, Reiskeimöl, Rizinusöl, Safloröl, Sesamöl, Sojaöl, Sonnenblumennöl, Teebaumöl, Traubenkernöl oder Weizenkeimöl, und dergleichen mehr. Auch beliebige Abmischungen solcher Öl- und Wachskomponenten sind vorteilhaft einsetzbar. In manchen Fällen ist es auch vorteilhaft, Wachse, beispielsweise Cetylpalmitat, als alleinige Lipidkomponente der Ölphase einzusetzen, vorteilhaft wird die Ölphase gewählt aus der Gruppe, die besteht aus 2-Ethylhexylisostearat, Octyldodecanol, Isotridecylisononanoat, Isoeicosan, 2-Ethylhexylcocoat, Ci2-15-Alkylbenzoat, Capryl-Caprinsäure-triglycerid und Dicaprylylether. Besonders vorteilhaft sind Mischungen aus Ci2-i5-Alkyl- benzoat und 2-Ethylhexylisostearat, Mischungen aus Ci2-15-Alkylbenzoat und Isotridecylisononanoat sowie Mischungen aus Ci2-i5-Alkylbenzoat, 2-Ethyl- hexylisostearat und Isotridecylisononanoat. Auch die Kohlenwasserstoffe Paraffinöl, Squalan und Squalen lassen sich vorteilhaft verwenden. Vorteilhaft kann die Ölphase ferner einen Gehalt an cyclischen oder linearen Silikonölen aufweisen oder vollständig aus solchen Ölen bestehen, wobei es allerdings bevorzugt ist, außer dem Silikonöl oder den Silikonölen einen zusätzlichen Gehalt an anderen Ölphasenkomponenten zu verwenden. Cyclomethicon (z.B. Decamethylcyclopentasiloxan) kann vorteilhaft als Silikonöl eingesetzt werden. Aber auch andere Silikonöle sind vorteilhaft verwendbar, beispielsweise Undecamethylcyclotrisiloxan, Polydimethylsiloxan und Poly(methyl-phenylsiloxan). Besonders vorteilhaft sind ferner Mischungen aus Cyclomethicon und Isotridecylisononanoat sowie aus Cyclomethicon und 2-Ethylhexylisostearat.
Die wässrige Phase von als Emulsion vorliegenden erfindungsgemäsen Formulierungen (insbesondere topischen kosmetischen Formulierungen) , kann vorteilhafterweise umfassen: Alkohole, Diole oder Polyole niedriger C-Zahl, sowie deren Ether, vorzugsweise Ethanol, Isopropanol, Propylenglykol, Glycerin, Ethylenglykol, Ethylenglykol-monoethyl- oder -monobutylether,
Propylenglykolmonomethyl, -monoethyl- oder -monobutylether,
Diethylenglykolmonomethyl- oder -monoethylether und analoge Produkte, ferner Alkohole niedriger C-Zahl, z.B. Ethanol, Isopropanol, 1 ,2-Propandiol, Glycerin sowie insbesondere ein oder mehrere Verdickungsmittel, welches oder welche vorteilhaft gewählt werden können aus der Gruppe Siliciumdioxid, Aluminiumsilikate wie z.B. Bentonite, Polysaccharide bzw. deren Derivate, z.B. Hyaluronsäure, Guarkernmehl, , Xanthangummi, Hydroxypropyl-methylcellulose, oder Allulose-Derivate, besonders vorteilhaft aus der Gruppe der Polyacrylate, bevorzugt ein Polyacrylat aus der Gruppe der sogenannten Carbopole, beispielsweise Carbopole der Typen 980, 981 , 1382, 2984, 5984, jeweils einzeln oder in Kombination, oder aus der Gruppe der Polyurethane, weiterhin alpha- oder beta-Hydroxysäuren, vorzugsweise Milchsäure, Zitronensäure oder Salicylsäure, daneben Emulgatoren, welche vorteilhaft ausgewählt werden können aus der Gruppe der ionischen, nichtionischen, polymeren, phosphathaltigen und zwitterionischen Emulgatoren,
Als Emulsion vorliegende erfindungsgemäße Formulierungen umfassen vorteilhaft einen oder mehrere Emulgatoren. O/W-Emulgatoren können beispielsweise vorteilhaft gewählt werden aus der Gruppe der polyethoxylierten bzw. polypropoxylierten bzw. polyethoxylierten und polypropoxylierten Produkte, z.B.:
- der Fettalkoholethoxylate
- der ethoxylierten Wollwachsalkohole,
- der Polyethylenglycolether der allgemeinen Formel R-O-(-CH2-CH2-O-)n-R',
- der Fettsäureethoxylate der allgemeinen Formel R-COO-(-CH2-CH2-O-)n-H,
- der veretherten Fettsäureethoxylate der allgemeinen Formel
R-COO-(-CH2-CH2-O-)n-R',
- der veresterten Fettsäureethoxylate der allgemeinen Formel R-COO-(-CH2-CH2-O-)n-C(O)-R',
- der Polyethylenglycolglycerinfettsäureester
- der ethoxylierten Sorbitanester
- der Cholesterinethoxylate
- der ethoxylierten Triglyceride
- der Alkylethercarbonsäuren der allgemeinen Formel
R-COO-(-CH2-CH2-O-)n-OOH, wobei n eine Zahl von 5 bis 30 darstellt,
- der Polyoxyethylensorbitolfettsäureester,
- der Alkylethersulfate der allgemeinen Formel R-O-(-CH2-CH2-O-)n-SO3-H
- der Fettalkoholpropoxylate der allgemeinen Formel R-O-(-CH2-CH(CH3)-O-)n-H
- der Polypropylenglycolether der allgemeinen Formel
R-O-(-CH2-CH(CH3)-O-)n-R'
- der propoxylierten Wollwachsalkohole,
- der veretherten Fettsäurepropoxylate R-COO-(-CH2-CH(CH3)-O-)n-R'
- der veresterten Fettsäurepropoxylate der allgemeinen Formel
R-COO-(-CH2-CH(CH3)-O-)n-C(O)-R'
- der Fettsäurepropoxylate der allgemeinen Formel
R-COO-(-CH2-CH(CH3)-O-)n-H,
- der Polypropylenglycolglycerinfettsäureester
- der propoxylierten Sorbitanester - der Cholesterinpropoxylate
- der propoxylierten Triglyceride
- der Alkylethercarbonsäuren der allgemeinen Formel
R-O-(-CH2-CH(CH3)-O-)n-CH2-COOH,
- der Alkylethersulfate bzw. die diesen Sulfaten zugrundeliegenden Säuren
der allgemeinen Formel R-O-(-CH2-CH(CH3)-O-)n-Sθ3-H,
- der Fettalkoholethoxylate/propoxylate der allgemeinen Formel R-O-Xn-Ym-H
- der Polypropylenglycolether der allgemeinen Formel R-O-Xn-Ym-R'
- der veretherten Fettsäurepropoxylate der allgemeinen Formel R-COO-Xn-Ym-R'
- der Fettsäureethoxylate/propoxylate der allgemeinen Formel R-COO-Xn-Ym-H.
Erfindungsgemäß besonders vorteilhaft werden die eingesetzten polyethoxylierten bzw. polypropoxylierten bzw. polyethoxylierten und polypropoxylierten O/W- Emulgatoren gewählt aus der Gruppe der Substanzen mit HLB-Werten von 11 bis 18, ganz besonders vorteilhaft mit HLB-Werten von 14,5 bis 15,5, sofern die O/W- Emulgatoren gesättigte Reste R und R' aufweisen. Weisen die O/W-Emulgatoren ungesättigte Reste R und/oder R' auf, oder liegen Isoalkylderivate vor, so kann der bevorzugte HLB-Wert solcher Emulgatoren auch niedriger oder darüber liegen.
Es ist von Vorteil, die Fettalkoholethoxylate aus der Gruppe der ethoxylierten Stearylalkohole, Cetylalkohole, Cetylstearylalkohole (Cetearylalkohole) zu wählen. Insbesondere bevorzugt sind:
Polyethylenglycol(n)stearylether (Steareth-n) mit n = 13-20,
Polyethylenglycol(n)cetylether (Ceteth-n) mit n = 13-20,
Polyethylenglycol(n)isocetylether (Isoceteth-n) mit n = 13-20, Polyethylenglycol(n)cetylstearylether (Ceteareth-n), mit n = 13-20,
Polyethylenglycol(m)isostearylether (Isosteareth-m) mit m = 12-20,
Polyethylenglycol(k)oleylether (Oleth-k) mit k = 12-15,
Polyethylenglycol(12)laurylether (Laureth-12),
Polyethylenglycol(12)isolaurylether (Isolaureth12).
Es ist ferner von Vorteil, die Fettsäureethoxylate aus folgender Gruppe zu wählen:
Polyethylenglycol(n)stearat, mit n = 20-25
Polyethylenglycol(m)isostearat mit m = 12-25
Polyethylenglycol(k)oleat mit k = 12-20
Als ethoxylierte Alkylethercarbonsäure bzw. deren Salz kann vorteilhaft das Natriumlaureth-1 1-carboxylat verwendet werden. Als Alkylethersulfat kann Natrium Laureth 1 -4 sulfat vorteilhaft verwendet werden. Als ethoxyliertes Cholesterinderivat kann vorteilhaft Polyethylenglycol(30)Cholesterylether verwendet werden. Auch Polyethylenglycol(25)Sojasterol hat sich bewährt.
Als ethoxylierte Triglyceride können vorteilhaft die Polyethylenglycol(ΘO) Evening Primrose Glycerides verwendet werden (Evening Primrose = Nachtkerze).
Weiterhin ist von Vorteil, die Polyethylenglycolglycerinfettsäureester aus der Gruppe Polyethylenglycol(n)glyceryllaurat mit n = 20-23 Polyethylenglycol(6)glycerylcaprat/caprinat, Polyethylenglycol(20)glyceryloleat, Polyethylenglycol(20)glycerylisostearat, Polyethylenglycol(18)glycerylole- at/cocoat zu wählen.
Es ist ebenfalls günstig, die Sorbitanester aus der Gruppe Polyethylen- glycol(20)sorbitanmonolaurat, Polyethylenglycol(20)sorbitanmonostearat, PoIy- ethylenglycol(20)sorbitanmonoisostearat, Polyethylenglycol(20)sorbitan- monopalmitat, Polyethylenglycol(20)sorbitanmonooleat zu wählen.
Als vorteilhafte W/O-Emulgatoren können eingesetzt werden: Fettalkohole mit 8 bis 30 Kohlenstoffatomen, Monoglycerinester gesättigter und/oder ungesättigter, verzweigter und/oder unverzweigter Alkancarbonsäuren einer Kettenlänge von 8 bis 24, insbesondere 12 bis 18 C-Atomen, Diglycerinester gesättigter und/oder ungesättigter, verzweigter und/oder unverzweigter Alkancarbonsäuren einer Kettenlänge von 8 bis 24, insbesondere 12 bis 18 C-Atomen, Monoglycerinether gesättigter und/oder ungesättigter, verzweigter und/oder unverzweigter Alkohole einer Kettenlänge von 8 bis 24, insbesondere 12 bis 18 C-Atomen, Diglycerinether gesättigter und/oder ungesättigter, verzweigter und/oder unverzweigter Alkohole einer Kettenlänge von 8 bis 24, insbesondere 12 bis 18 C-Atomen, Propylenglycol- ester gesättigter und/oder ungesättigter, verzweigter und/oder unverzweigter Alkancarbonsäuren einer Kettenlänge von 8 bis 24, insbesondere 12 bis 18 C- Atomen sowie Sorbitanester gesättigter und/oder ungesättigter, verzweigter und/oder unverzweigter Alkancarbonsäuren einer Kettenlänge von 8 bis 24, insbesondere 12 bis 18 C-Atomen.
Insbesondere vorteilhafte W/O-Emulgatoren sind Glycerylmonostearat, Glycerylmonoisostearat, Glycerylmonomyristat, Glycerylmonooleat, Diglyceryl- monostearat, Diglycerylmonoisostearat, Propylenglycolmonostearat,
Propylenglycolmonoisostearat, Propylenglycolmonocaprylat,
Propylenglycolmonolaurat, Sorbitanmonoisostearat, Sorbitanmonolaurat, Sorbitanmonocaprylat, Sorbitanmonoisooleat, Saccharosedistearat, Cetylalkohol, Stearylalkohol, Arachidylalkohol, Behenylalkohol, Isobehenylalkohol, Selachylalkohol, Chimylalkohol, Polyethylenglycol(2)stearylether(Steareth-2), Glycerylmonolaurat, Glycerylmonocaprinat, Glycerylmonocaprylat.
Es können auch Gemische der genannten Wirksysteme verwendet werden.
Vorzugsweise beträgt die Gesamtmenge an Verbindungen der Formel (II), an UV-Absorbern und an (weiteren) hautaufhellenden Mitteln in den erfindungsgemäßen Formulierungen 0,0001 bis 20 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Formulierung, besonders bevorzugt 0,0005 bis 15 Gew.-%.
Zur Anwendung werden die erfindungsgemäßen topischen Formulierungen in der für Kosmetika üblichen Weise in ausreichender Menge auf die Haut und/oder die Haare in aufgebracht.
Die Erfindung wird nachfolgend anhand der Beispiele weiter beschrieben, ohne dass diese Beispiele den durch die Patentansprüche definierten Schutzbereich einschränken sollen. Sofern nicht anders angegeben beziehen sich alle Angaben auf das Gewicht.
Beispiel 1 : Herstellung der Verbindung der Formel (X)
1 g (6,15 mmol) Isoeugenol wurde in eine Mischung aus 1500 ml_ Wasser und 100 ml_ Aceton gegeben und bei Raumtemperatur (ca. 20°C) mit 1 1 mg Horseradish Peroxidase (Sigma Aldrich) versetzt. Anschließend wurde eine Mischung aus 10 ml_ Wasser und 0,21 ml_ 50%igem Wasserstoffperoxid (3,1 mmol) zugetropft. Nach einer Nachreaktionszeit von etwa 3 h bei Raumtemperatur (ca. 20°C) wurde die Reaktion beendet und die organische Phase mittels mehrfacher Extraktion mit einem organischen Lösungsmittel abgetrennt. Nach dem Einengen wurden 850 mg Rückstand erhalten, der zu etwa 80% die Verbindung der Formel (X) enthielt. Zu analytischen Zwecken wurde der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Hexan / Essigester: 2 / 1 (v/v)), wobei 350 mg der hochreinen Verbindung der Formel (X) erhalten wurden (Reinheit > 98%). Die Struktur der Verbindung der Formel (X) wurde mittels MS und NMR bestätigt.
Beispiel 2: Nachweis der UVB-ausgelösten AhR-lnduktion in humanen Keratinozyten sowie die Wirkung von AhR-Antagonisten
Zellkultur und Bestrahlung
HaCaT - Keratinozyten wurden in DMEM Medium mit 10% fetalem Kälberserum kultiviert. Die Bestrahlung der Zellen mit UVB-Strahlung erfolgte in PBS (mit Phosphat gepufferte Kochsalzlösung). Zur Bestrahlung mit UVB benutzten wir die Lampe TL20W/12RS, welche vier parallele Röhren enthält (Philips, Eindhoven, Niederlande) und den Grossteil ihrer Energie im UVB Bereich (290- 320 nm) emittiert. Der Emissionspeak der Lampe liegt bei 310 nm. Kontrollzellen wurden der gleichen Behandlung unterzogen, jedoch nicht bestrahlt. Um den AhR zu inhibieren, wurden die Zellen 1 h vor der Bestrahlung mit den Testsubstanzen behandelt.
Transfektion von HaCaT Zellen mit dem pEGFP-AhR Plasmid
HaCaT Zellen wurden auf gekammerten Objektträgern mit einer Zelldichte von 5 x 104 Zellen/Kammer ausplattiert. Einige wurden 1 h mit den Testsubstanzen vorbehandelt. Nach 24 h wurden diese mit dem Plasmid pEGFP-AhR mittels
FuGene 6 Transfektionsreagens (Roche, Mannheim, Duetschland) laut Angabe des Herstellers transfiziert. Nach weiteren 24 h wurden die transfizierten Zellen mit 100 J/m2 UVB bestrahlt. Nach 40 min wurden die Zellen 10 min lang mit 4% Paraformaldehyd fixiert und mit PBS gewaschen. Die Objektträger wurden getrocknet und mit Vectashield Mounting Medium (Vector Laboratories,
Burlingame, CA, USA) eingedeckelt. Der an das GFP gekoppelte AhR wurde mittels eines Fluoreszenzmikroskops sichtbar gemacht (Olympus, Hamburg,
Deutschland) und mit einer digitalen Kamera ColorViewXS (Olympus) photographiert. RNA Präparation, cDNA Synthese und real time RT-PCR
HaCaT-Zellen wurden mit 100 J/m2 UVB bestrahlt. Einige Zellen wurden 1 h vor der Bestrahlung mit den Testsubstanzen vorbehandelt. Nach 4 h wurde die RNA mit dem RNeasy kit (Qiagen, Hilden, Deutschland) nach den Vorschriften des Herstellers präpariert. Die reverse Transkription wurde wie beschrieben durchgeführt (Arch Toxicol (2005) PMID 16205913). PCR-Fragmente wurden mittels real-time PCR im LightCycler (Roche, Mannheim, Deutschland) amplifiziert. Der PCR Mix setzte sich aus 1/10 Volumen des QuantiTect® SYBR Green PCR Master Mixes (Qiagen, Hilden, Deutschland), 0.5 μM des jeweiligen Primers, 2 μl cDNA und DEPC (diethylpyrocarbonat) behandeltem H2O in einem Endvolumen von 20 μl zusammen. Die PCR begann mit einer initialen 15 minütigen Erwärmung auf 95°C zur Aktivierung der DNA-Polymerase. Die PCR- Konditionen waren wie folgt: 40 Zyklen von 15 sec 94° C zur Denaturierung, 25 sec 60° C zur Primer Anlagerung, 30 sec 72° C zur Extension und 2 sec 72° C zur Fluoreszenzmessung. PCR-Primers für humanes CYP1A1 hatten die folgenden Sequenzen: 5'-TAGACACTGATCTGGCTGCAG für den forwärts und 5'-GGGAAGGCTCCATCAGCATC für den Rückwärts-Primer (Cancer Res. 1990, 50, 4315), welche nach Amplifikation ein 146 bp Fragment bildeten. Die Quantifizierung der PCR Produkte geschah über eine fragmentspezifische Standardkurve und wurde mit der LightCycler Software 3 quantifiziert. Standardkurven wurden mit 102 to 106 CYP1A1 cDNA Kopien/μl hergestellt und wie oben beschrieben amplifiziert.
Ergebnisse
Der Standard 3-Methoxy-4-Nitroflavon hemmte die AhR-Translokation in den Zellkern in An- und Abwesenheit von UVB-Licht und zeigte damit die It. Literatur erwartete Wirkung.
Quantifizierung von CYP1A1 mittels RNA Präparation, cDNA Synthese und real time RT-PCR
HaCaT-Zellen wurden mit 100 J/m2 UVB bestrahlt. Einige Zellen wurden 1 h vor der Bestrahlung mit den Testsubstanzen vorbehandelt. Nach 4 h wurde die RNA mit dem RNeasy kit (Qiagen, Hilden, Deutschland) nach den Vorschriften des Herstellers präpariert. Die reverse Transkription wurde wie beschrieben durchgeführt (Arch Toxicol (2005) PMID 16205913). PCR-Fragmente wurden mittels real-time PCR im LightCycler (Roche, Mannheim, Deutschland) amplifiziert. Der PCR Mix setzte sich aus 1/10 Volumen des QuantiTect® SYBR Green PCR Master Mixes (Qiagen, Hilden, Deutschland), 0.5 μM des jeweiligen Primers, 2 μl cDNA und DEPC (diethylpyrocarbonat) behandeltem H2O in einem Endvolumen von 20 μl zusammen. Die PCR begann mit einer initialen 15 minütigen Erwärmung auf 95°C zur Aktivierung der DNA-Polymerase. Die PCR- Konditionen waren wie folgt: 40 Zyklen von 15 sec 94° C zur Denaturierung, 25 sec 60° C zur Primer Anlagerung, 30 sec 72° C zur Extension und 2 sec 72° C zur Fluoreszenzmessung. PCR-Primers für humanes CYP1A1 hatten die folgenden Sequenzen: 5'-TAGACACTGATCTGGCTGCAG für den forwärts und 5'-GGGAAGGCTCCATCAGCATC für den Rückwärts-Primer (Cancer Res. 1990, 50, 4315), welche nach Amplifikation ein 146 bp Fragment bildeten. Die Quantifizierung der PCR Produkte geschah über eine fragmentspezifische Standardkurve und wurde mit der LightCycler Software 3 quantifiziert. Standardkurven wurden mit 102 to 106 CYP1A1 cDNA Kopien/μl hergestellt und wie oben beschrieben amplifiziert. Tabelle 1
Figure imgf000069_0001
* relativ zur Kontrolle (PBS ohne Testsubstanzen mit 0,1 % DMSO, UVB- bestrahlt) Die erfindungsgemäße Verbindung der Formel (X) hemmte die Induktion von CYP1A1 infolge der AhR-Aktivierung in Anwesenheit von UVB-Licht.
Beispiel 3: Nachweis der Induktion von CYP1A1 durch AhR-Aktivierung in murinen Melanozyten
Melanozyten der Maus des Stammes C57BL/6 wurden in Kultur expandiert (Medium: „Melanocyte growth medium" (Promocell), 37°C, 5% CO2). Fibroblastenwachstum wurde durch Zugabe von G418 (Tag10 -13, 45μg/ml) inhibiert. Um den AhR zu modulieren, wurden die semikonfluenten Zellen bis zu 7 Tagen mit dem AhR-Agonisten FICZ behandelt. Unbehandelte Zellen wurden parallel mitgeführt. Anschließend wurde das Medium abgenommen, die Zellen lysiert, die RNA wie in Beispiel 2 beschrieben präpariert und der Gehalt von CYP450 1A1 RNA mit quantitativer RT-PCR photometrisch bestimmt.
Ergebnis: Die Menge an CYP450 1A1 mRNA in den Zellen wird durch dieses Vorgehen signifikant erhöht im Vergleich zu unbehandelten Zellen (p < 0.05, Student's t-test). Transfektion von Melanozyten mit dem pEGFP-AhR Plasmid
Primäre Maus-Melanozyten-Zellen wurden auf gekammerten Objektträgern ausplattiert. Einzelne Kammern wurden für 1 h mit den Testsubstanzen behandelt. Nach 24 h wurden die Zellen mit dem Plasmid pEGFP-AhR transfiziert. Nach weiteren 40 min wurden die Zellen fixiert. Die Objektträger wurden fluoreszenzmikroskopisch ausgewertet. Sichtbar wird die Translokation des an das GFP gekoppelten, daher grünfluoreszierenden AhR vom Zytoplasma in den Zellkern.
Ergebnisse
3-Methoxy-4-Nitroflavon (MNF) hemmte die AhR-Translokation in den Zellkern in An- und Abwesenheit von Benz-[a]-pyren.
FICZ stimulierte die AhR-Translokation in den Zellkern in An- und Abwesenheit von Benz-[a]-pyren.
Beispiel 4: Modulation der Melaninsynthese mit AhR-Modulatoren
Verstärkung der Melaninsynthese mit FICZ
FICZ wurde durch eine 60-minütige Bestrahlung einer 5OmM Tryptophanlösung mit einer UVB-Quelle generiert. Semikonfluente Kulturen primärer Maus- Melanozyten (Kulturbedingungen wie oben) wurden für 2 Tage mit dieser FICZ- haltigen Lösung kultiviert. Die Zellen wurden abgenommen, mit 0,1 % Triton- X100 lysiert, zentrifugiert und der Melaningehalt aus dem Lysat-Pellet nach Zellaufschluss mit 1 M NH4OH (4 h, 85°C) photometrisch in einem ELISA-Reader bei 405 nm bestimmt. Von dem Absorptionwert wurde der des Leerwerts, welcher nur NH4OH enthielt, subtrahiert. Parallel wurde der Proteingehalt der Lysat- Überstände nach der Bradford-Methode durchgeführt. Die FICZ-behandelten Melanozyten enthielten signifikant mehr Melanin als die unbehandelten Zellen (p < 0.05, Student's t-test) (Fig. 3).
Inhibition der Melaninsynthese mit MNF
Semikonfluente primäre Maus-Melanozyten (Kulturbedingungen wie oben) wurden für 7 Tage mit 10 μM MNF weiter kultiviert. Die Zellen wurden abgenommen, mit 0,1 % Triton-X100 lysiert, zentrifugiert und der Melaningehalt aus dem Lysat-Pellet nach Zellaufschluss mit 1 M NH4OH (4 h, 85°C) photometrisch in einem ELISA-Reader bei 405 nm bestimmt. Von dem Absorptionwert wurde der des Leerwerts, welcher nur NH4OH enthielt, subtrahiert.
Ergebnis: Die MNF-behandelten Melanozyten enthielten signifikant weniger Melanin als die unbehandelten Zellen (p < 0.05, Student's t-test) (Fig. 4)
Beispiel 5: Formulierungsbeispiele
Formulierung 1 : „Wasser in Öl"-Emulsion mit UVA/B-Breitbandschutz Formulierung 2: „Öl in Wasser" -Emulsion mit UVA/B-Breitbandschutz Formulierung 3: „Öl in Wasser" -Emulsion mit UVA/B-Breitbandschutz Formulierung 4: Ölfreies Sonnenspray mit UVA/B-Breitbandschutz Formulierung 5: BaIm mit UVA/UVB-Schutz
Formulierung 6: Aerosol-Schaum mit UVB/UVA-Schutz Formulierung 7: Nicht-Aerosol-Schaum Formulierung 8: Shampoo mit UVB-Zellschutz Formulierung 9: Haar-Conditioner mit UVB/UVA -Schutz Formulierung 10: Tagescreme O/W mit UVB-Zellschutz Formulierung 11 : Nachtcreme W/O mit UVB-Zellschutz Tabelle 2: Zusammensetzungen erfindungsgemäßer Formulierungen (Formulierungen 1-11)
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Beispiel 6: Formulierungsbeispiele für Hautaufheller
In nachfolgender Tabelle 3 bezeichnen:
Formulierung 1 : „Wasser in Öl"-Emulsion mit UVA/B-Breitbandschutz Formulierung 2: „Öl in Wasser"-Emulsion mit UVA/B-Breitbandschutz Formulierung 3: Hautaufhellende „Öl in Wasser"-Emulsion mit UVA/B- Breitbandschutz Formulierung 4: Hautaufhellendes ölfreies Sonnenspray mit UVA/B-
Breitbandschutz
Formulierung 5: Hautaufhellender BaIm mit UVA/UVB-Schutz
Formulierung 6: Hautaufhellender Aerosol-Schaum mit UVB/U VA-Schutz
Formulierung 7: Hautaufhellender Nicht-Aerosol-Schaum
Formulierung 8: Shampoo mit haaraufhellenden Eigenschaften
Formulierung 9: Haaraufhellender Haar-Conditioner mit UVB/UVA -Schutz
Formulierung 10: Hautaufhellende Feuchtigkeitscreme O/W
Formulierung 1 1 : Hautaufhellende Gesichtscreme O/W
Tabelle 3: Zusammensetzungen erfindungsgemäßer Formulierungen (Formulierungen 1-1 1 )
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Beispiel 7: Formulierungsbeispiele für Hautbräuner In nachfolgender Tabelle 4 bedeuten:
Formulierung 1 : Hautbräunende „Wasser in Öl"-Emulsion mit UVA/B-
Breitbandschutz Formulierung 2: Intensiv-hautbräunende „Öl in Wasser"-Emulsion mit UVA/B-
Breitbandschutz
Formulierung 3: Hautbräunende „Wasser in Öl"-Emulsion Formulierung 4: Hautbräunende „Öl in Wasser"-Emulsion mit UVA/B-
Breitbandschutz
Formulierung 5: Hautbräunende „Öl in Wasser"-Creme Formulierung 6: Hautbräunender Aerosol-Schaum mit UVB/UVA-Schutz Formulierung 7: Selbstbräunungscreme O/W Formulierung 8: Shampoo mit haut- und haarbräunenden Eigenschaften Formulierung 9: Haut- und haarbräunender Conditioner mit UVB/UVA -Schutz Formulierung 10 Hautbräunende Feuchtigkeitscreme O/W Formulierung 11 Hautbräunende Gesichtscreme O/W
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Claims

Patentansprüche
1. Verfahren zum Beurteilen der Wirksamkeit eines AhR-Agonisten bzw. AhR-Antagonisten, umfassend die Schritte i) Beaufschlagen einer Zelle einer ex-vivo- oder in vitro- Melanozyten - und/oder Keratinozyten-Zellkultur oder eines in vitro-Hautmodells, mit einem möglichen AhR-Agonisten bzw AhR-Antagonisten, ii) wenn die Zelle in Schritt i) mit einem möglichen AhR-Antagonisten beaufschlagt wurde Behandeln der beaufschlagten Zelle mit UVB-Strahlung oder einem AhR-Agonisten, und iii) Bestimmen der Induktion eines AhR-induzierbaren Gens, vorzugsweise von CYP1A1.
2. Verfahren nach Anspruch 1 , ferner umfassend die Schritte iv) Beaufschlagen einer unbehandelten Zelle aus Schritt i) mit einer vorgewählten Verbindung gemäß einem der Ansprüche 10 bis 13, vorzugsweise der Formel
(X), v) Behandeln der in Schritt iv) beaufschlagten Zelle mit UVB-Strahlung wie in Schritt ii), vi) Bestimmen der Induktion des in Schritt iii) bestimmten AhR-induzierbaren Gens, vorzugsweise von CYP1 A1 , und vii) Vergleichen der in Schritt iii) und vi) bestimmten Geninduktion.
3. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 2, wobei in Schritt ii) und gegebenenfalls in Schritt v) die beaufschlagte(n) Zellen(n) mit einem polyzyklischen aromatischen Kohlenwasserstoff und vorzugsweise mit TCDD behandelt werden.
4. Verfahren zum Screenen einer Substanzbibliothek auf AhR-Agonisten bzw. Antagonisten, umfassend die Schritte:
1 ) Bereitstellen einer Probe jeder der Substanzen der Substanzbibliothek, und 2) für jede der in 1 ) bereitgestellten Proben Durchführen eines Verfahrens nach einem der Ansprüche 1 bis 3,
3) Auswählen derjenigen Substanzen als AhR-Antagonisten, bei deren Proben die Induktion eines AhR-induzierbaren Gens um ein vorgewähltes Maß verringert wurde, bzw. Auswählen derjenigen Substanzen als AhR-Agonisten, bei deren Proben die Expression eines AhR-induzierbaren Gens um ein vorgewähltes Maß erhöht wurde.
5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass das Verfahren als Hochdurchsatz-Verfahren mit zumindest 96 Proben durchgeführt wird.
6. Vorrichtung zum Durchführen eines Hochdurchsatz-Screeningverfahrens nach Anspruch 5, umfassend: eine Probenaufnahme für zumindest 96 Proben, Leuchtmittel zum Beaufschlagen der Proben mit UVB-Strahlung, - Mittel zum Bestimmen der Induktion eines AhR-induzierbaren Gens in einer der 96 Proben, und
Auswertemittel zum Anzeigen der Induktion des AhR-induzierbaren Gens.
7. Verfahren zum Herstellen einer Hautschutzzubereitung, umfassend das Mischen eines AhR-Agonisten und/oder -Antagonisten mit einem kosmetisch und/oder pharmazeutisch akzeptablen Träger, so dass die Konzentration des AhR-Agonisten bzw. -Antagonisten in der Mischung zumindest das Doppelte der zum Verringern der Induktion eines AhR-induzierten Gens erforderlichen Mindestkonzentration beträgt, wobei die Mindestkonzentration bestimmt wird mit einem Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5.
8. Verfahren zum Beurteilen der Wirksamkeit eines Hautaufhellers bzw. Hautbräuners, umfassend die Schritte i) Beaufschlagen einer Zelle mit einem möglichen Hautaufheller bzw. Hautbräuner, ii) Bestimmen des Maßes der Melaninbildung der in Schritt i) behandelten Zelle, iii) Beaufschlagen einer unbehandelten Zelle aus Schritt i) mit einer vorgewählten Menge a)einer Verbindung der Formel (X), wenn die Wirksamkeit eines Hautaufhellers beurteilt werden soll, und b) mit Formylindolo(3,2b)carbazol, wenn die Wirksamkeit eines Hautbräuners beurteilt werden soll, iv) Bestimmen des Maßes der Melaninbildung der in Schritt iii) behandelten Zelle, v) Vergleichen der in Schritt ii) und iv) bestimmten Hautaufhellung.
9. Verfahren zum Herstellen einer Hautaufhellungszubereitung, umfassend das Mischen eines Hautaufhellers mit einem kosmetisch und/oder pharmazeutisch akzeptablen Träger, so dass die Konzentration des Hautaufhellers in der Mischung zumindest das Doppelte der zum Hautaufhellen erforderlichen Mindestkonzentration beträgt, wobei die Mindestkonzentration bestimmt wird mit einem Verfahren nach Anspruch 8.
10. Verbindung der Formel (II)
Figure imgf000096_0001
wobei
R1 bis R9 unabhängig voneinander Wasserstoff, Hydroxy, CrCi2-Alkoxy, C1-C12-
Alkyl, C2-Ci2-Alkenyl, und n = 0 und Y = -CH- oder -C(CH3)-, X = O und die gestrichelte Linie entsprechend entweder eine Doppelbindung oder zwei Wasserstoffe, oder n = 1 , Y = O und X = Methylen und gestrichelte Linie zwei Wasserstoffe bedeuten.
1 1. Verbindung nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, dass R1 bis R9, unabhängig voneinander, Wasserstoff, Hydroxy, CrC4-Alkoxy oder C2-C4-Alkenyl bedeuten.
12. Verbindung nach einem der Ansprüche 10 bis 11 , dadurch gekennzeichnet, dass zumindest 5 der Reste R1 bis R9 Wasserstoff sind.
13. Verbindung nach einem der Ansprüche 10 bis 12 mit der Formel (X)
Figure imgf000097_0001
14. Zubereitung enthaltend, in einem pharmazeutisch und/oder kosmetisch akzeptablen Träger, eine Verbindung nach einem der Ansprüche 10 bis 13 oder einer nach einem der Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5 oder 8 ausgewählte Verbindung in einer ausreichenden Menge zum
(a) Verringern oder Verhindern einer Translokation von AhR in einen Zellkern,
(b) Verringern oder Verhindern einer UVB-induzierten oder -induzierbaren Genexpression, (c) Verringern oder Verhindern einer durch polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe, vorzugsweise TCDD, induzierten oder induzierbaren Genexpression, und/oder
(d) Verringern oder Verhindern von UVB-induzierten oder -induzierbaren Hautschäden, insbesondere Hautkrebs, Hautalterung, Hautentzündungen und Sonnenbrand.
15. Zubereitung nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindung die Formel (X) hat und in einer zur Hautaufhellung ausreichenden Menge vorliegt.
16. Zubereitung nach einem der Ansprüche 14 bis 15, enthaltend die Verbindung der Formel (II) in einem Anteil von zumindest 0,0001 Gew.-%, bezogen auf die gesamte Zubereitung.
17. Zubereitung nach einem der Ansprüche 14 bis 16, ferner enthaltend einen UVA- und/oder einen UVB-Filter.
18. Zubereitung nach einem der Ansprüche 14 bis 17, dadurch gekennzeichnet, dass die Zubereitung eine kosmetische Zubereitung ist, vorzugsweise ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus einer Sonnencreme, Hautschutzlotion, After-Sun-Lotion
19. Arzneimittel, bestehend aus, bestehend im wesentlichen aus oder umfasend
- eine Verbindung nach einem der Ansprüche 10 bis 13 oder
- eine Zubereitung nach einem der Ansprüche 14 bis 18 oder
- ei ne nach einem der Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5 oder 8 ausgewählte Verbindung.
20. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 10 bis 13 zum Herstellen eines Arzneimittels.
21. Verwendung nach Anspruch 20, wobei das Arzneimittel eingerichtet ist zum (a) Verringern oder Verhindern einer Translokation von AhR in einen Zellkern, (b) Verringern oder Verhindern einer UVB-induzierten oder -induzierbaren Genexpression,
(c) Verringern oder Verhindern einer durch polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe, vorzugsweise TCDD, induzierten oder induzierbaren Genexpression, und/oder (d) Verringern oder Verhindern von UVB-induzierten oder -induzierbaren Hautschäden, insbesondere Hautkrebs, Hautalterung, Hautentzündungen und Sonnenbrand.
22. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 10 bis 13 und/oder einer nach einem Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 5 und 8 ausgewählten Verbindung als AhR-Antagonist, und vorzugsweise zum (a) Verringern oder Verhindern einer Translokation von AhR in einen Zellkern, (b) Verringern oder Verhindern einer UVB-induzierten oder -induzierbaren Genexpression,
(c) Verringern oder Verhindern einer durch polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe, vorzugsweise TCDD, induzierten oder induzierbaren Genexpression, und/oder (d) Verringern oder Verhindern von UVB-induzierten oder -induzierbaren Hautschäden, insbesondere Hautkrebs, Hautalterung, Hautentzündungen und Sonnenbrand.
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