WO2005098019A2 - Verfahren und einrichtung zum testen bakterizider wirkung von substanzen - Google Patents

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WO2005098019A2
WO2005098019A2 PCT/CH2005/000197 CH2005000197W WO2005098019A2 WO 2005098019 A2 WO2005098019 A2 WO 2005098019A2 CH 2005000197 W CH2005000197 W CH 2005000197W WO 2005098019 A2 WO2005098019 A2 WO 2005098019A2
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microorganisms
container
suspension
carrier
washing process
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PCT/CH2005/000197
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French (fr)
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Daniel Fäh
Caroline Amberg
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Empa Testmaterialien Ag
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/22—Testing for sterility conditions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/18—Testing for antimicrobial activity of a material

Definitions

  • the present invention relates to a method for testing bactericidal activity of substances and to a device for carrying out this method.
  • Methods of this type can be used to test the bactericidal activity of, for example, disinfectants, antiseptics, detergents, detergent components, etc.
  • Zbl. Bakt. Hyg. I. Abb. Orig. B176, 463-471 (1982) is a method of the type mentioned by Mr. Univ.-Prof. Dr. Walter Koller, Vienna.
  • Germ carriers are used in this process. These are contaminated batiste lobes, which are enclosed between two membrane filters. This system acts as a perfusion chamber. Although the perfusion chamber allows water and the active ingredients dissolved in it to pass into the interior of the system, it prevents bacteria from escaping from the system. After the washing process has been completed, the living germs still present in the system are counted.
  • Bestness Dispi ⁇ to be able to wash clothes after a washing cycle in a washing machine if washing temperatures in the range of 30 to 60 ° C are used.
  • the process and the equipment should also be designed so that semi-quantitative statements about the quality of the washing process can also be made.
  • the method and the device should be designed so that they can be handled in a simple manner.
  • the procedure should also be designed so that the results of such an investigation are available as quickly as possible.
  • the device for performing this method should be designed as a disposable product.
  • FIG. 2 shows the mode of action of some of the substances used in the present method
  • FIG. 3 shows, in a vertical section, a first embodiment of a monitor vessel, which is one of the components of a device for carrying out the present method
  • FIG. 4 shows a top view of the vessel or chamber from FIG. 3
  • FIG. 5 shows a perspective view of a second embodiment of the vessel in the operational state
  • FIG. 6 shows a vertical section and only schematically shows the vessel from FIG. 5, 7 perspective and schematic of the core of the device from FIG. 5,
  • FIG. 8 in an exploded illustration the essential part of the second embodiment of the present device
  • FIG. 11 is a perspective view of the lid of a fifth embodiment of the present
  • FIG. 13 is a side view of a sixth embodiment of the present device.
  • FIG. 14 in a vertical section the lower part of the embodiment of the present device shown in FIG. 13, FIG. 15 in a vertical section the cover of the embodiment of the present device shown in FIG. 13 and FIG. 16 in a view from below or inside the lid from FIG. 15.
  • FIG. 1 shows a diagram of the sequence of the present method for testing the bactericidal action of substances 1.
  • a predetermined or defined number of living microorganisms are exposed to the action of the substance to be tested for a certain period of time.
  • the number of microorganisms still alive after the expiry of the exposure period mentioned is determined and the bactericidal activity of the tested substance is inferred from this number of microorganisms still alive.
  • the living microorganisms, before being exposed to the substance to be tested are placed in a liquid with which they form a suspension.
  • This liquid is expediently a nutrient solution or a physiological saline solution.
  • the substance to be tested is expediently in the form of a solution for the test process or a suspension. These are also called substance liquid 88 below.
  • a device for performing this method also includes, among other things, a vessel 85 (FIG. 1) in which the test method can be carried out.
  • the substance liquid 88 is also located in this test vessel. If, for example, components of a washing process are to be tested, the washroom of a washing machine can represent the test vessel 85 and the wash liquor is the substance liquid 88.
  • the present device also includes a container 90 (FIG. 1, 3 and 4), which serves to take up the test microorganisms, in particular a defined amount of microorganisms. Such a container 90 can also be called a monitor vessel.
  • the microorganism container or monitor vessel 90 comprises a hollow lower part 91 and an essentially flat upper part 92. In the example shown in FIGS. 3 and 4, these components 91 and .92 of the container 90 have a circular outline.
  • the microorganisms float in a liquid 98, which is located in the interior of the lower part 91 of the container 90. As already mentioned, this liquid is expediently a physiological saline solution.
  • the interior of the container 90, which serves to hold the test organisms 98, should have a volume of at least 1 ml.
  • the outside of the upper edge region of the lower container part 91 is provided with a thread 93.
  • the cover 92 has a disk-shaped base body 89.
  • a collar 94 which has the shape of a short cylinder jacket hangs from the edge part of this disk-shaped base body 89 of the container lid 92.
  • the thread 93 is also embodied in the inner surface of this cylinder jacket 94, so that the cover 92 can be screwed onto the lower part 91.
  • holes 95 through which the substance liquid can penetrate into the interior 98 of the container 90 during the interaction between the substance and the microorganisms.
  • a semipermeable membrane 96 is assigned to the underside or inside of the plate-shaped base body 89 of the cover 92, which covers the entire underside of the plate-shaped base body 89 of the cover 92 and thus also the holes 95 in the plate-shaped base body 89 of the cover 92.
  • the membrane 96 is designed such that the substance liquid can penetrate into the interior 98 of the monitor vessel 90 during the interaction and can interact with the microorganisms.
  • the membrane 96 is also designed such that it is impermeable to the test microorganisms, so that the microorganisms cannot leave the container 90 through the holes 95 in the lid 92.
  • a sealing ring 97 is arranged in that corner part of the lid 92 where the collar 94 with the disk-shaped base body 89 of the lid 92 hits. Consequently, the sealing ring 97 can be squeezed between the disk-shaped base body 89 of the cover 92 and the upper edge of the wall of the lower part 91, as a result of which the said gap between the threaded parts 93 is considered sealed for the microorganisms.
  • This perfusion chamber comprises a carrier for the test microorganisms which are enclosed in the perfusion chamber.
  • the perfusion ka mer also includes the aforementioned semipermeable and pore-containing membrane 96, which covers the test organisms attached to the support.
  • germs can be used as test microorganisms in the present method:
  • a defined amount of living microorganisms or of living test germs in pure culture in the case shown in FIG. 1 it is a suspension which contains Enterococcus faecium in an amount of about 10 8 germs, is placed in the container 90 and this container 90 is then closed. Microorganisms of only one type are enclosed in the perfusion chamber 99 of the monitor vessel 90. The monitor vessel 90 is brought into the test vessel 85 and the microorganisms enclosed in the monitor vessel 90 are exposed to the action of the substance liquid 88.
  • the test vessel 85 can be moved, for example shaken, the temperature inside the test vessel 85 can be changed so that its changes have a desired course, and the period of the interaction can expediently be changed ,
  • tetrazolium salt is added to the microorganism suspension 98, which by the enzyme dehydrogenase in the test microorganisms corresponds to the number of those still living Microorganisms is reduced to a colored product, the formazan.
  • the optical density caused by Formazan is then measured. From the result of this measurement, conclusions are drawn on the bactericidal activity of the tested substance and thus also on the number of those test microorganisms which have survived the exposure period of the tested substance 88.
  • the number of those microorganisms that were alive at the start of a test process is usually known because you have chosen or determined this number yourself. After the end of the test process, the number of microorganisms that survived the interaction is determined using the measurement method already mentioned.
  • This detection is an indirect method, i.e. one measures the metabolic activity of those microorganisms that survived the test process. It is important that only the living microorganisms are detected, because only these can multiply later and because only these can pose a health risk
  • the monitor vessel 90 is opened and the microorganism suspension 98 is removed from the monitor vessel 90.
  • the microorganism suspension 98 is placed in a cuvette 86 (FIG. 1). It can be a cuvette 86 which can be used in a photometer (not shown) and which has a volume of 1.5 ml, for example.
  • a liquid medium can be in the cuvette. This medium is a known nutrient solution for the microorganisms.
  • substances can be added to the suspension which are able to neutralize residues, for example of a detergent, in the microorganism suspension 98 or to remove them from the suspension 98.
  • a substance can also be called an inactivating substance.
  • 200 ⁇ l of organ nisms 98 come from the monitor vessel 90 about 600 ⁇ l of liquid, this liquid consisting of the nutrient solution and the inactivating substance.
  • the microorganisms 98 are kept in this liquid for a predetermined period of time, for example 1 hour, and at a predetermined temperature, for example 37 ° C.
  • the tetrazolium salt is added to the suspension.
  • Living microorganisms contain a bacterial enzyme, dehydrogenase. This enzyme is such that it contains the tetrazolium salt according to the number of microorganisms still alive, i.e. according to the activity of the living microorganisms in the suspension to a colored product, the formazan.
  • FIG. 2 schematically shows the process in which the tetrazolium salt is reduced to a colored product, the formazan, in accordance with the number of microorganisms still living in the suspension 98. From the amount of formazan formed and thus also from the intensity of the resulting color, one can deduce the activity of the microorganisms and thus also the number of those microorganisms that have survived the interaction process.
  • optical density or intensity of that light is measured which is caused by the formazan.
  • This measurement can be done with the help of a photometer.
  • the optical density can be measured at a predetermined wavelength, for example 450 nm. From the result of this measurement, conclusions can be drawn about the number of microorganisms which before the test process has survived and therefore also on the bactericidal effect of the tested substance.
  • the measurement of the optical density can also be carried out in a more precise manner, due to the increase in the amount of Formazän during a certain period of time (not shown).
  • the microorganisms present in the suspension are first incubated for a first period, for example of 30 minutes and at a specific temperature, for example of 37 °. This is followed by a first measurement of the optical density.
  • the microorganisms present in the suspension are then incubated for a second and subsequent period, for example 30 minutes, and at a specific temperature, for example 37 °. This is followed by a second measurement of the optical density. In this way, the increase in the amount of formazan can be measured over a certain period of time (e.g. 30 minutes).
  • optical density correlates directly with the bacterial activity or number of bacteria. From the difference between the results of these two measurements, conclusions can be drawn about the number of those microorganisms that have survived the interaction process and thus also about the bactericidal effect of the tested substance.
  • the container 90 is designed in such a way that it can be accommodated inside a washing machine 85 without being significantly damaged during the washing process.
  • the container 90 is made of a material which is mechanically very stable, which can be machined, which is autoclavable (at least up to +121 ° C / 1 atm) and which is washing machine and tumble proof.
  • the interior of the container should have a volume of at least 1 to 1.5 ml, which is used to hold the sample or test material.
  • a predetermined or defined amount of living test microorganisms 98 is filled into the monitor vessel 90, this monitor vessel 90 is brought together with the textile laundry into a washing machine 85 and subjected to a washing cycle. As a result, the test microorganisms 98 are exposed to the same influences of the washing process as the textile washing.
  • the washing machine 85 can be, for example, a household machine or an industrial washing machine. After the washing cycle has ended, the number of microorganisms still living is determined in one of the measurement methods already described.
  • FIGS. 5 to 8 A second embodiment of the present device is shown in FIGS. 5 to 8. It comprises a container 1, which is designed such that it has a hollow base body 2.
  • This container base body 2 can have the shape of a cuboid, a cube, a sphere, etc., for example.
  • the base body 2 of the container 1 is disc-like.
  • the hollow base body 2 of the container 1 of the first embodiment of the present device comprises an upper part 3 and a lower part 4, which also as Halves 3 and 4 of the container 1 can be designated.
  • the base body of each of the container halves 3 and 4 has the shape of a thick disk with a cylindrical circumferential surface 5.
  • the base body of each of the container halves 3 and 4 also has two opposing disk-shaped and parallel large surfaces 6 and 7 , In each of the large areas 6 and 7 of the container halves 3 and 4 there is a recess 8 and 9 respectively.
  • the depth of the recesses 8 and 9 in one of the container halves 3 and 4 is smaller than the thickness of the disk-shaped container half 3 and 4, respectively, in such a way that an intermediate wall 10 between the bottom of the recesses 8 and 9 in the respective container halves 3 and 4, respectively 4 is present.
  • the respective recesses 8 and 9 in one of the container halves 3 and 4 are delimited by an annular edge part 11.
  • This edge part has an inner side surface 37.
  • the intermediate wall 10 is in one piece with the edge part 11 of the pane 3 or 4 in question.
  • Those sections 12 and 13 of the annular edge parts 11 of the hollow container halves 3 and 4 as described, which face each other, are provided with a thread known per se, so that the container halves 3 and 4 can be detachably connected to one another with the aid of this thread.
  • This thread is advantageously designed so that one and a half turns are enough to open or close the housing 2.
  • Openings 14 are made in the intermediate wall 10 of the relevant pane 3 or 4, which connect the depressions 8 and 9 in the respective disk-shaped container half 3 or 4 with one another in terms of flow.
  • these connection openings 14 are designed as slots in the intermediate wall 10, which run radially away from the center of the intermediate wall 10.
  • connection openings 14 with a different shape of their contour can be made in the intermediate wall 10 be executed.
  • the interior of the container 1 is defined by the inner recesses 9 which open towards one another in the halves 3 and 4 of the container.
  • the aforementioned openings 14 connect the interior 9 of the container 1 with its surroundings, in particular with the depressions 8 lying on the outside of the container halves 3 and 4.
  • the interior 9 of the container 1 should have a volume of at least 1 to 1.5 ml, which is used to hold the sample material.
  • an active unit or a perfusion chamber 20 of the present device includes, among other things, a carrier 15 for the test microorganisms.
  • This carrier 15 can be a piece of paper, for example. Or the carrier 15 can be designed as a lobule, which is made of a textile material, for example cotton.
  • the carrier 15 has the shape of a disk, for example made of one of the materials mentioned, this disk having a circular edge. The diameter of this disk-shaped carrier 15 is dimensioned such that the edge portion of the same on the practically cylindrical. Inner wall 37 of the cavity 9 rests in the container 1.
  • the perfusion chamber 20 of the present invention also includes disks 21 and 22 (FIG. 3), which are made of a material that is normally used for so-called sterile filters.
  • the pore size of these sterile filters can be, for example, 0.2-0.4 micrometers.
  • Sterile filters usually exist from nitrocellulose and they are very brittle. That is why they are exposed to a high risk of damage in the event of mechanical loads which occur in the machine when vibrating.
  • the disks 21 and 22 have practically the same diameter as the carrier 15, so that they can also find space in the interior 9 of the container 1.
  • the filter disks 21 and 22 run practically parallel to one another and to the carrier 15 for the test microorganisms.
  • One of the filter disks 21 and 22 is assigned to one of the large-area sides of the carrier 15 for the test microorganisms.
  • the respective filter disk 21 or 22 lies between the bottom 35 of the inner recess 9 in the relevant container half 3 or 4 and the O-ring 16 or 17 assigned to it.
  • one of the filter disks 21 or 22 rests directly on one of the large areas of the carrier 15 for the test microorganisms, so that the O-rings 16 and 17 are located between the outside of the filter disk 21 or 22 and the bottom 35 of the relevant inner recess 9.
  • FIG. 8 shows this first embodiment of the present device in an exploded illustration. As stated, this first embodiment of the present device is intended to be housed in a washing machine.
  • Fig. 9 shows a third embodiment of the present device.
  • This embodiment of the present device can be used in those cases in which the wash liquor or another liquid can only flow through the present device.
  • this third facility is practical table executed the same as the second version of this facility.
  • the respective container half 3 or 4 of the third embodiment is provided with a nozzle 24.
  • the respective nozzle 24 is connected to the interior 9 of the respective container half 3 or 4 in terms of flow.
  • a known nipple 25 can be screwed into the respective socket 24 with its threaded end.
  • the opposite end part of the nipple 25 is designed to attach a hose through which the liquid can be introduced into the device according to FIG. 9 or can be carried out from it.
  • the perfusion chamber 30 of this device also includes the carrier 15 for the microorganisms already described. However, this carrier 15 is enclosed in a sheath 31, which is a further component of this perfusion chamber 30.
  • the sleeve 31 has essentially the shape of a piece of tubing. This is made of a material from which dialysis tubing is normally made. In the present case, sections of such dialysis tubes 31 should have the largest possible pores. The maximum size of the pores in the tubes 31, which can consist, for example, of regenerated cellulose, is 50,000 Daltons. The exchange of liquid through such membranes is therefore much slower than with the sterile filters described above. If such membrane tubes 31 are used, the microorganisms can be brought onto the carrier 15 as powder or likewise distributed in a liquid.
  • the tube section 31 is sealed in its end regions in a manner that is bacteria-proof, namely at an appropriate distance from the carrier 15. This can be done, for example, with the aid of clips.
  • Weldable dialysis tubes 31 made of PVDF are also available, but the pore size is the same. ben is 12,000 daltons. In addition, they are not as flexible and resilient as the cellulose membrane hoses 31.
  • the end parts of the hose section 31, as shown in the illustrated case can be closed by constricting the end parts of the hose section 31 with the aid of a suitable cord .32.
  • the hose piece 31 is arranged in an open housing 33 made of a stable material.
  • This housing 33 can be designed as a can-like plastic vessel with large slots or holes.
  • the housing 33 is designed as a jacket of a cylinder, the outer parts of this cylinder jacket being open so that the washing liquid can flow through the housing 33.
  • This housing 33, together with the perfusion chamber 30 mentioned and arranged in this housing 33, is accommodated in a washing machine or similar. Because the bottom areas of the housing 33 are open, the washing liquid can flow through the housing and thereby reach the microorganisms on the carrier 15 in the casing 31.
  • the perfusion chamber 30 is held in the interior of the housing 33 with the aid of holding means 34 known per se.
  • Those sections of the cord 32 already mentioned which protrude from the sheath 31 and whose ends are fastened on or in the wall of the housing 33 can serve as the holding means 34.
  • the cover 51 of a fifth embodiment of the present device 50 is shown in perspective. 12 shows in a vertical section the lower part 52 of this fourth embodiment of the present device 50.
  • both the base body of the cover 51 and the base body of the lower part 52 have a U-shaped cross section.
  • the inside of the side wall of the cover 51 and the outside of the side wall of the Lower part 52 are provided with corresponding and already described thread halves, so that the cover 51 can be screwed onto the lower part 51.
  • the cover 51 is provided with the openings 14 already described.
  • a semipermeable, pore-containing membrane 53 rests on a carrier 54 and this arrangement is located in the interior of the cavity 55 in the lower part 52.
  • the membrane 53 is permeable to water and detergents.
  • FIG. 13 shows a fifth embodiment of the present device in a side view.
  • This embodiment also has a cover 61 and a lower part 62.
  • both the cover 61 and the lower part 62 are of the same design as the cover 51 and the lower part 51 of the fourth embodiment of this device.
  • FIG. 14 shows in a vertical section the lower part 62 of the embodiment of the present device shown in FIG. 13.
  • the inner wall 73 of this lower part 62 has the shape of the shell of a spherical cap.
  • slot-shaped openings 14 are made which extend from the central region 74 of the spherical cap bottom to the upper edge 75 of the lower part 62.
  • a radially projecting collar 76 is formed on the outside of the lower part 62 approximately at the height of the spherical cap bottom 74.
  • the cover 61 is shown in a vertical section. 16 shows the cover 61 in a view from below or from the inside. In the bottom 66 of the
  • Lid 61 are perpendicular to the bottom surface 69 and parallel to each other bores 67 which are distributed over the surface of the bottom 66. These bores 67 extend between the large outer surface 68 and the bottom surface 69 of the cover 61.
  • the bottom surface 69 is flat. Only in the edge area of the bottom surface 69 is an annular GE groove 70 executed, in which a seal 71 is located.
  • This seal 71 can be designed as an O-ring.
  • the diameter of the groove 70 is dimensioned such that the bottom of this groove 70 lies opposite the upper edge 75 of the lower part 62 when the cover 61 is screwed onto the lower part 62. Consequently, the sealing ring 71 is also opposite the upper edge of the lower part 62, so that the sealing ring 71 is squeezed between the upper edge of the lower part 62 and the bottom of the groove 70.
  • This perfusion chamber 80 also includes a disk 81, which is made of a material that is normally used for so-called sterile filters.
  • the pore size of this sterile filter can be, for example, 0.2-0.4 micrometers.
  • Sterile filters are usually made of nitrocellulose and are very brittle. They are exposed to a high risk of damage in the case of mechanical loads that occur in the machine when vibrating. Therefore, such washers 81 must be housed in one of the containers disclosed herein while performing the present method.
  • the disk 81 has practically the same diameter as the interior space in the bottom region of the cover 61, so that the disk 81 can be accommodated in the interior of the cover 61.
  • Your edge area lies on the seal 71.
  • the edge part of this disk 81 is pressed together in a sealing manner between the upper edge 75 of the lower container part 62 and the seal 71.
  • the perfusion chamber 80 further includes a carrier for the test microorganisms.
  • This carrier can be of the type described above. This carrier is attached to that side of the disk 81 which faces the interior 73 of the container 60 which is delimited in the form of a cap.
  • the following test germs which are also prescribed by European Standard No. 1276, are often used in laboratory washing tests: • Staphylococcus aureus,
  • test germs are often used in laboratory washing tests, but are not required by European Standard No. 1276: • Enterococcus faecalis (Streptococcus faecalis),
  • a defined amount of living microorganisms or of living test germs is placed on the carrier in pure culture.
  • the test nuclei to be used can float in a liquid or they can be in powder form. Drops of the liquid or predetermined amounts of the powder are placed on the carrier.
  • the microorganisms can be fixed on the support before being introduced into the washing process. This can be done, for example, with the aid of a gel, e.g. Alginate gels are made.
  • the bacteria are embedded in the gel in the piece of fabric so that they remain fixed on the carrier.
  • the microorganisms can be preserved or stabilized on the carrier before being introduced into the washing process, for example dried by freeze-drying.
  • the carrier prepared in this way is sealed in the perfusion chamber so that it is bacteria-proof. Microorganisms of only one type are enclosed in the perfusion chamber.
  • the perfusion chamber is so tight that the microorganisms nisms cannot escape from the perfusion chamber, but the washing liquid can nevertheless come into contact with the microorganisms. If the perfusion chamber is inside the container, the microorganisms are enclosed therein.
  • the container is brought together with the textile laundry into a household washing machine and washed with the textile laundry.
  • the perfusion chamber 30 is designed as the tube piece described, this is first fastened in the housing 33, the housing 33 is then brought together with the textile laundry into a household washing machine and washed with the textile laundry.
  • the carrier is removed from the perfusion chamber from the container and the number of microorganisms still living after the completion of the washing process is determined.
  • the effect or quality of the washing process is inferred from the difference between the original quantity of living microorganisms and the microorganisms still living after the washing process.
  • a carrier for the microorganisms for example a cloth rondelle
  • this carrier is first removed from the cage or container and washed out in a physiological solution.
  • the kill rate can be read directly after the washing process or washing cycle, for example using a color indicator. This detection can be carried out relatively easily. Or the kill rate can be measured based on ATP activity. An ATP determination is carried out by direct measurement of the liquid or by means of "swabs" in the luminometer. The number of microorganisms that have survived the washing process can, however, also be determined using so-called gene probes.
  • Gene probes are produced by VIT-Vermicon, for example.
  • the surviving microorganisms could also be measured using other methods such as impedance (from BioMerieux or from SyLab), optoelectric counting (from FOSS), solid phase cytometry (from ChemScan), ImmunoMagneticSeparation / IMS (from DYNAL).
  • the determination of the quality of the washing process is based on the ratio between the number of those microorganisms that were alive at the beginning of the washing process and the number of those microorganisms that were still alive at the end of the washing process. Such an evaluation can also be carried out on a computer using a suitable program.
  • the present method and the present facilities are intended to enable the effectiveness of the substances used in the detergent and thus the effectiveness of the washing process to be checked with internal control during operation in the simplest and fastest possible manner. This method and these facilities can be used by detergent, bleach, washing machine manufacturers and in Large laundries and in relevant research institutes are used.
  • the targeted test laundry can, for example, also be the textile material that must not be washed at more than 60 ° C. These are, for example, color-sensitive fabrics, wool, silk, synthetic fibers, etc.
  • this method and these devices are suitable for the microbiological assessment of new products such as machines, programs, detergents etc. and for the microbiological assessment of washing processes within the large laundry.
  • a possibly semi-quantitative statement about the germ killing rate in a washing cycle of a washing machine can be made within a few hours with a minimal amount of preparation.
  • the facilities also allow a quick assessment of the actual washing process and the corresponding influencing factors such as temperature, time, detergents and mechanical stress. No samples need to be taken from the machine during the washing process.

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Abstract

Das Verfahren zur Prüfung des mikrobiellen Belastungsgrades von Textilwäsche nach einem Washzyklus ist dadurch gekennzeichnet, dass eine definierte Menge von lebendigen Mikroorganismen zusammen mit der Textilwäsche gewaschen wird, dass die Anzahl der nach Beendigung des Waschprozesses noch lebenden Mikroorganismen ermittelt wird und dass aus der Differenz zwischen der ursprünglichen Menge lebender Mikroorganismen und jener Menge von Mikroorganismen, welche nach dem Waschprozess noch lebend sind, die Effektivität bzw. die Qualität des Waschprozesses ermittelt wird. Die Einrichtung zur Durchführung dieses Verfahrens umfasst unter anderem einen Behälter (90), in welchem die Mikroorganismen in der Weise verschlossen sind, dass die Waschflüssigkeit in diesen Behälter (90) eindringen kann, dass jedoch die Mikroorganismen diesen Behälter nicht verlassen können.

Description

Verfahren und Einrichtung zum Testen bakterizider Wirkung von Substanzen
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zum Testen bakterizider Wir- kung von Substanzen sowie eine Einrichtung zur Durchführung dieses Verfahrens.
Verfahren dieser Gattung können zum Testen der bakteriziden Wirkung beispielsweise von Desinfektionsmitteln, antiseptischen Mitteln, Waschmitteln, Waschmittelkomponenten usw. verwendet werden. In Zbl. Bakt. Hyg., I.Abt. Orig. B176, 463-471 (1982) ist ein Verfahren der genannten Gattung durch Herrn Univ.-Prof. Dr. Walter Koller, Wien, publiziert worden. In diesem Verfahren werden Keimträger verwendet. Dies sind kontaminierte Batistläppchen, welche zwischen zwei Membranfiltern eingeschlossen sind. Dieses System wirkt als Perfusionskammer. Die Perfusionskammer erlaubt zwar den durchtritt von Wasser und der in diesem gelösten Wirkstoffe in das Innere des Systems, sie verhindert jedoch den Austritt von Bakterien aus dem System. Nach dem Ab- schluss des Waschprozesses werden die im System noch vorhandenen lebenden Keime gezählt. Diese Zählung kann nur mit Mitteln durchgeführt werden, welche lediglich in dazu eingerichteten Laboratorien vorhanden sind. Die Resultate solcher Untersuchungen liegen mit dem klassischen Platten-Zähl- Verfahren erst in ein bis zwei Tagen vor, was für praktische Zwecke eine zu lange Zeitspanne darstellt. Mit den neuesten Analysegeräten kann das Auszählen zwar beschleunigt werden, doch die Anschaffung solcher Geräte erfor- dert grosse Investitionen.
Die Erfindung hat sich zur Aufgabe gestellt, ein Verfahren sowie eine Einrichtung zur Durchführung dieses Verfahrens anzugeben, welche es ermöglichen, Aussagen über den mikrobiellen Belastungsgrad von Textilwäsche, bzw. Aus- sagen über den bakteriellen Verschmutzungsgrad (= Hygienestatus) von Tex-
Bestätigungskopiθ tilwäsche nach einem Waschzyklus in einer Waschmaschine machen zu können, wenn Waschtemperaturen im Bereich von 30 bis 60°C zur Anwendung kommen. Das Verfahren und die Einrichtung sollen ferner so gestaltet sein, dass auch semiquantitative Aussagen über die Qualität des Wasch prozesses gemacht werden können. Zugleich sollen das Verfahren und die Einrichtung so gestaltet sein, dass sie in einer einfachen Weise gehandhabt werden können. Das Verfahren soll auch so gestaltet sein, dass die Resultate einer solchen Untersuchung möglichst kurzfristig vorliegen. Die Einrichtung zur Durchführung dieses Verfahrens soll als ein Einwegprodukt ausgeführt sein.
Die genannten Aufgaben werden beim Verfahren der eingangs genannten Gattung erfindungsgemäss so gelöst, wie dies im kennzeichnenden Teil des Patentanspruchs 1 definiert ist.
Die genannten Aufgaben werden erfindungsgemäss auch anhand einer Einrichtung gelöst, welche im kennzeichnenden Teil des Patentanspruchs 8 definiert ist.
Nachstehend werden Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung anhand der beiliegenden Zeichnungen näher erläutert. Es zeigt: Fig. 1 ein Schema des-vorliegenden Verfahrens,
Fig. 2 die Wirkungsweise einiger der im vorliegenden Verfahren benutzter Stoffe , Fig. 3 in einem vertikalen Schnitt eine erste Ausführung eines Monitorgefässes, welches einen der Bestandteile einer Einrichtung zur Durchführung des vorliegenden Verfahrens darstellt,
Fig. 4 in Draufsicht das Gefäss bzw. die Kammer aus Fig. 3 Fig. 5 perspektivisch eine zweite Ausführung des Gefässes im betriebsbereiten Zustand, Fig. 6 in einem vertikalen Schnitt und nur schematisch das Gefäss aus Fig. 5, Fig. 7 perspektivisch und schematisch den Kern der Einrichtung aus Fig. 5, Fig. 8 in einer explodierten Darstellung den wesentlichen Teil der zweiten Ausführung der vorliegenden Einrichtung,
Fig. 9 in explodierter Darstellung eine dritte Ausführung der vorliegenden Ein- richtung,
Fig. 10 schematisch eine vierte Ausführung der vorliegenden Einrichtung,
Fig. 11 perspektivisch den Deckel einer fünften Ausführung der vorliegenden
Einrichtung,
Fig. 12 in einem vertikalen Schnitt den Unterteil der fünften Ausführung der vor- liegenden Einrichtung,
Fig. 13 in einer Seitenansicht eine sechste Ausführung der vorliegenden Einrichtung,
Fig. 14 in einem vertikalen Schnitt den Unterteil der in Fig. 13 gezeigten Ausführung der vorliegenden Einrichtung, Fig. 15 in einem vertikalen Schnitt den Deckel der in Fig. 13 gezeigten Ausführung der vorliegenden Einrichtung und Fig. 16 in einer Ansicht von unten bzw. innen den Deckel aus Fig. 15.
Fig. 1 zeigt ein Schema des Ablaufes des vorliegenden Verfahrens zum Testen bakterizider Wirkung von Substanzen 1. In diesem Verfahren wird eine vorgegebene bzw. definierte Anzahl von lebenden Mikroorganismen der Einwirkung der zu testenden Substanz während einer bestimmten Zeitspanne ausgesetzt. Die Anzahl der nach Ablauf der genannten Einwirkungszeitspanne noch lebenden Mikroorganismen wird ermittelt und aus dieser Anzahl der noch lebenden Mikroorganismen wird auf die bakterizide Wirkung der getesteten Substanz geschlossen. Die lebenden Mikroorganismen, bevor sie der Einwirkung der zu testenden Substanz ausgesetzt werden, werden in eine Flüssigkeit gebracht, mit der sie eine Suspension bilden. Diese Flüssigkeit ist zweckmässigerweise eine Nährlösung oder eine physiologische Kochsalzlösung. Die zu testende Substanz liegt für den Testprozess zweckmässigerweise in Form einer Lösung oder einer Suspension vor. Diese werden nachstehenden auch Substanzflüssigkeit 88 genannt.
Eine Einrichtung zur Durchführung dieses Verfahrens umfasst unter anderem auch ein Gefäss 85 (Fig. 1), in welchem das Testverfahren durchgeführt werden kann. In diesem Testgefäss befindet sich auch die Substanzflüssigkeit 88. Wenn beispielsweise Komponenten eines Waschprozesses getestet werden sollen, so kann der Waschraum einer Waschmaschine das Testgefäss 85 darstellen und die Waschlauge ist die Substanzflüssigkeit 88. Die vorliegende Ein- richtung umfasst auch einen Behälter 90 (Fig. 1 , 3 und 4), welcher zur Aufnahme der Testmikroorganismen, insbesondere einer definierten Menge von Mikroorganismen dient. Ein solcher Behälter 90 kann auch als Monitorgefäss genannt werden.
Der Mikroorganismenbehälter bzw. Monitorgefäss 90 umfasst einen hohlen Unterteil 91 und einen im wesentlichen planen Oberteil 92. Im in Fig. 3 und 4 dargestellten Beispiel weisen diese Bestandteile 91 und .92 des Behälters 90 einen kreisförmigen Umriss. Die Mikroorganismen schweben in einer Flüssigkeit 98, welche sich im Innenraum des Unterteiles 91 des Behälters 90 befindet. Diese Flüssigkeit ist, wie bereits erwähnt, zweckmässigerweise eine physiologische Kochsalzlösung. Der Innenraum des Behälters 90, welcher zur Aufnahme der Testorganismen 98 dient, soll ein Volumen von mindestens 1 ml aufweisen.
Die Aussenseite des oberen Randbereichs des Behälterunterteils 91 ist mit ei- nem Gewinde 93 versehen. Der Deckel 92 weist einen scheibenförmigen Grundkörper 89 auf. Von der Randpartie dieses scheibenförmigen Grundkörpers 89 des Behälterdeckels 92 hängt ein Kragen 94 herab, welcher die Form eines kurzen Zylindermantels hat. In der Innenfläche dieses Zylindermantels 94 ist ebenfalls das Gewinde 93 ausgeführt, sodass der Deckel 92 auf dem Unter- teil 91 aufgeschraubt sein kann. Im scheibenförmigen Grundkörper 89 des Dek- kels 92 sind Löcher 95 ausgeführt, durch welche die Substanzflüssigkeit während der Interaktion zwischen der Substanz und den Mikroorganismen in das Innere 98 des Behälters 90 eindringen kann.
Im Inneren 98 des hohlen Behälterunterteils 91 müssen die Testmikroorganismen während der genannten Interaktion eingeschlossen bleiben, damit die Resultate der Tests nicht verfälscht werden. Der Unter- bzw. Innenseite des plattenförmigen Grundkörpers 89 des Deckels 92 ist eine semipermeable Membrane 96 zugeordnet, welche die gesamte Unterseite des plattenförmigen Grund- körpers 89 des Deckels 92 und somit auch die Löcher 95 im plattenförmigen Grundkörper 89 des Deckels 92 zudeckt. Die Membrane 96 ist so ausgeführt, dass die Substanzflüssigkeit während der Interaktion in das Innere 98 des Mo- nitorgefässes 90 eindringen und mit den Mikroorganismen in Interaktion treten kann. Die Membrane 96 ist jedoch auch so ausgeführt, dass sie für die Testmi- kroorganismen undurchlässig ist, sodass die Mikroorganismen den Behälter 90 durch die Löcher 95 im Deckel 92 nicht verlassen können.
Damit die Testmikroorganismen den Hohlraum im Behälterunterteil 91 durch den Spalt zwischen dem Unterteil 91 und dem Deckel 92 des Behälters 90 nicht verlassen können, ist ein Dichtungsring 97 in jener Eckpartie des Deckels 92 angeordnet, wo sich der Kragen 94 mit dem scheibenförmigen Grundkörper 89 des Deckels 92 trifft. Folglich kann der Dichtungsring 97 zwischen dem schei- berrförmigen Grundkörper 89 des Deckels 92 und dem oberen Rand der Wand des Unterteiles 91 gequetscht sein, wodurch der genannte Spalt zwischen den Gewindeteilen 93 für die Mikroorganismen als abgedichtet gilt.
Es ist jedoch auch denkbar, dass es im Inneren des Behälters 90 eine aktive
Einheit gibt, welche als eine Perfusionskammer (nicht dargestellt) ausgeführt ist. Diese Perfusionskammer umfasst einen Träger für die Testmikroorganis- men, welche in der Perfusionskammer eingeschlossen sind. Die Perfusions- ka mer umfasst ferner die bereits erwähnte semipermeable und Poren aufweisende Membrane 96, welche die auf dem Träger angebrachten Testorganismen zudeckt.
Im vorliegenden Verfahren können beispielsweise die folgenden Keime als Testmikroorganismen verwendet werden:
- Escherichia coli,
- Candida glabrata,
- Enterococcus faecium, - Enterococcus faecalis,
- Staphylococcus epidermidis und
- Bacillus subtilis.
Eine definierte Menge von lebenden Mikroorganismen bzw. von lebenden Test- keimen in Reinkultur, im in Fig. 1 dargestellten Fall ist es eine Suspension, welche Enterococcus faecium in einer Menge von etwa 108 Keime enthält, wird in den Behälter 90 gebracht und dieser Behälter 90 wird hiernach verschlossen. Mikroorganismen nur einer Art werden in der Perfusionskammer 99 des Moni- torgefässes 90 eingeschlossen. Das Monitorgefäss 90 wird in das Testgefäss 85 gebracht und die im Monitorgefäss 90 eingeschlossenen Mikroorganismen werden der Einwirkung der Substanzflüssigkeit 88 ausgesetzt. Während dieser Interaktion zwischen der Substanzflüssigkeit 88 und den Mikroorganismen 98 kann das Testgefäss 85 bewegt, z.B. geschüttelt werden, die Temperatur im Inneren des Testgefässes 85 kann so geändert werden, dass ihre Änderungen einen gewünschten Verlauf aufweisen, und die Zeitspanne der Interaktion kann zweckmässigerweise geändert werden.
Der Mikrooganismen-Suspension 98 wird nach Ablauf der Einwirkungszeitspanne Tetrazoliumsalz beigemengt, welches durch das Enzym Dehydrogena- se in den Testmikroorganismen entsprechend der Anzahl der noch lebenden Mikroorganismen zu einem farbigen Produkt, dem Formazan, reduziert wird. Hierauf erfolgt eine Messung der durch Formazan verursachten optischen Dichte. Aus dem Resultat dieser Messung werden Rückschlüsse auf die bakterizide Wirkung der getesteten Substanz und somit auch auf die Anzahl jener Testmikroorganismen gezogen, welche die Einwirkungszeitspanne der getesteten Substanz 88 überlebt haben.
Die Anzahl jener Mikroorganismen, welche am Anfang eines Testprozesses lebend waren, ist normalerweise bekannt, weil man diese Anzahl selbst gewählt bzw. bestimmt hat. Nach Beendigung des Testprozesses wird die Anzahl der Mikroorganismen, welche die Interaktion überlebt haben, im bereits erwähnten Messverfahren ermittelt. Bei dieser Detektion handelt es sich um eine indirekte Methode, d.h. man misst die Stoffwechselaktivität jener Mikroorganismen, welche den Testprozess überlebt haben. Es ist wichtig, dass nur die noch lebenden Mikroorganismen erfasst werden, weil nur diese sich später vermehren können und weil nur diese ein Gesundheitsrisiko darstellen können
Zur Durchführung der Messung wird das Monitorgefäss 90 geöffnet und die Mikroorganismen-Suspension 98 wird dem Monitorgefäss 90 entnommen. Die Mikroorganismen-Suspension 98 wird in eine Küvette 86 (Fig. 1) gebracht. Es kann sich um eine Küvette 86 handeln, welche in einem Photometer (nicht dargestellt) einsetzbar ist und welche beispielsweise ein Volumen von 1,5 ml hat. In der Küvette kann sich ein flüssiges Medium befinden. Dieses Medium ist eine an sich bekannte Nährlösung für die Mikroorganismen.
In einem weiteren Schritt dieses Verfahrens können Substanzen der Suspension beigemischt werden, welche in der Lage sind, Rückstände z.B. eines Waschmittels in der Mikroorganismensuspension 98 zu neutralisieren oder diese aus der Suspension 98 zu entfernen. Eine solche Substanz kann auch als Inaktivierungssubstanz genannt werden. Beispielsweise kann auf 200 μl Orga- nismen 98 aus dem Monitorgefäss 90 etwa 600 μl Flüssigkeit kommen, wobei diese Flüssigkeit aus der Nährlösung und aus der Inaktivierungssubstanz besteht. Die Mikroorganismen 98 werden in dieser Flüssigkeit während einer vorbestimmten Zeitspanne, beispielsweise von 1 Stunde, und bei einer vorgege- benen Temperatur, beispielsweise von 37° C, gehalten.
Nach einer solchen Vorbehandlung der Suspension bzw. nach einer solchen Inkubationszeit kann jener Abschnitt des vorliegenden Verfahrens beginnen, welcher zur eigentlichen Beurteilung der Qualität des betreffenden Waschzy- klusses führt. Zu diesem Zweck wird Tetrazoliumsalz der Suspension beigemischt. Lebende Mikroorganismen enthalten ein bakterielles Enzym, die Dehy- drogenase. Dieses Enzym ist derart, dass es das Tetrazoliumsalz entsprechend der Anzahl der noch lebenden Mikroorganismen, d.h. entsprechend der Aktivität der lebenden Mikroorganismen in der Suspension zu einem farbigen Produkt, dem Formazan, reduzieren kann. Fig. 2 zeigt schematisch den Vorgang, in welchem das Tetrazoliumsalz entsprechend der Anzahl der noch lebenden Mikroorganismen in der Suspension 98 zu einem farbigen Produkt, dem Formazan, reduziert wird. Aus der Menge des gebildeten Formazans und somit auch aus der Intensität der dabei entstandenen Farbe schliesst man auf die Aktivität der Mikroorganismen und somit auch auf die Anzahl jener Mikroorganismen, welche den Interaktionsprozess überlebt haben.
Im nächsten Schritt des vorliegenden Verfahrens wird jene optischen Dichte bzw. Intensität jenes Lichtes gemessen, welche bzw. welches durch das For- mazan verursacht wird. Diese Messung kann mit Hilfe eines Photometers erfolgen. Die optische Dichte kann bei einer vorbestimmten Wellenlänge von beispielsweise 450 nm gemessen werden. Aus dem Resultat dieser Messung können Rückschlüsse auf die Anzahl der Mikroorganismen gezogen werden, wel- ehe den Testprozess überlebt haben und somit auch auf die bakterizide Wirkung der getesteten Substanz.
Die Messung der optischen Dichte kann jedoch auch in einer genaueren Weise durchgeführt werden, und zwar aufgrund der Zunahme der Formazän-Menge während einer bestimmten Zeitspanne (nicht dargestellt). Die in der Suspension vorhandenen Mikroorganismen werden zunächst während einer ersten Zeitspanne, beispielsweise von 30 Minuten und bei einer bestimmten Temperatur, beispielsweise von 37°, bebrütet. Hiernach erfolgt eine erste Messung der opti- sehen Dichte. Dann werden die in der Suspension vorhandenen Mikroorganismen während einer zweiten und darauf folgenden, Zeitspanne, beispielsweise von 30 Minuten, und bei einer bestimmten Temperatur, beispielsweise von 37°, bebrütet. Hierauf erfolgt eine zweite Messung der optischen Dichte. Auf diese Weise kann die Zunahme der Formazan-Menge während einer bestimmten Zeitspanne (z.B. von 30 Minuten) gemessen werden. Die Zunahme der optischen Dichte korreliert direkt mit der bakteriellen Aktivität bzw. Bakterienzahl. Aus der Differenz zwischen den Resultaten dieser zwei Messungen werden Rückschlüsse auf die Anzahl jener Mikroorganismen gezogen, welche den In- teraktionsprozess überlebt haben und somit auch auf die bakterizide Wirkung der getesteten Substanz.
Wenn es sich um Testen von Waschkomponenten handelt, dann soll der mikro- bielle Belastungsgrad von Textilwäsche nach einem Waschzyklus bzw. φe Hygienewirkung eines Waschprozesses, d.h. die Abnahme der Anzahl von Bakte- rien während einem Waschprozess in einer Textilwaschmaschine 85 ermittelt werden. Für solche Tests ist der Behälter 90 so ausgeführt, dass er im Inneren einer Waschmaschine 85 untergebracht sein kann, ohne dass er während dem Waschprozess einen nennenswerten Schaden nimmt. Der Behälter 90 ist aus einem Material, welches mechanisch sehr stabil ist, welches sich mechanisch bearbeiten lässt, welches autoklavierbar (zumindest bis +121 °C/1 Atm) ist und welches Waschmaschinen- und tumblerfest ist. Der Innenraum des Behälters soll ein Volumen von mindestens 1 bis 1 ,5 ml aufweisen, welcher zur Aufnahme des Probe- bzw. Testmaterials dient.
Eine vorgegebene, bzw. definierte Menge von lebendigen Testmikroorganismen 98 wird in das Monitorgefäss 90 gefüllt, dieses Monitorgefäss 90 wird zusammen mit der Textilwäsche in eine Waschmaschine 85 gebracht und einem Waschzyklus unterworfen. Dadurch werden die Testmikroorganismen 98 denselben Einflüssen des Waschprozesses wie die Textilwäsche ausgesetzt. Die Waschmaschine 85 kann beispielsweise eine Haushaltsmaschine oder eine Industriewaschmaschine sein. Nach Beendigung des Waschzyklusses wird die Anzahl der noch lebenden Mikroorganismen in einem der bereits beschriebenen Messverfahren ermittelt. Aus der Differenz zwischen der definierten anfänglichen Menge der in den Waschzyklus eingebrachten lebenden Mikroorga- nismen und der Menge der nach dem Waschzyklus noch lebenden Mikroorganismen wird auf den Effekt bzw. auf die Qualität des Waschprozesses bzw. der im Waschprozess verwendeten Waschmittel, Waschmittelkomponenten oder Waschverfahren geschlossen. Je weniger Mikroorganismen nach einem Waschzyklus noch lebend sind, um so wirksamer verlief der Waschzyklus, um so kleiner ist der mikrobielle Belastungsgrad der Textilwäsche nach einem Waschzyklus und um so grösser ist die Hygienewirkung des Waschprozesses.
Eine zweite Ausführung der vorliegenden Einrichtung ist in Fig. 5 bis 8 dargestellt. Sie umfasst einen Behälter 1 , welcher so ausgebildet ist, dass er einen hohlen Grundkörper 2 aufweist. Dieser Behältergrundkörper 2 kann beispielsweise die Form eines Quaders, eines Würfels, einer Kugel usw. haben. Im dargestellten Fall ist der Grundkörper 2 des Behälters 1 scheibenähnlich.
Der hohle Grundkörper 2 des Behälters 1 der ersten Ausführung der vorliegen- den Einrichtung umfasst einen Oberteil 3 und einen Unterteil 4, welche auch als Hälften 3 bzw. 4 des Behälters 1 bezeichnet werden können. Bei dieser Ausführungsform hat der Grundkörper jeder der Behälterhälften 3 bzw. 4 die Form einer dicken Scheibe mit einer zylinderförmigen Mantelfläche 5. Der Grundkörper jeder der Behälterhälften 3 bzw. 4 weist ferner zwei einander gegenüberliegen- de scheibenförmige und parallel zueinander liegende Grossflächen 6 und 7 auf. In der jeweiligen Grossfläche 6 bzw. 7 der Behälterhälften 3 und 4 ist je eine Vertiefung 8 bzw. 9 ausgeführt. Die Tiefe der Vertiefungen 8 und 9 in einer der Behälterhälften 3 bzw. 4 ist kleiner als die Dicke der scheibenförmigen Behälterhälfte 3 bzw. 4, und zwar derart, dass eine Zwischenwand 10 zwischen den Boden der Vertiefungen 8 und 9 in der jeweiligen Behälterhälften 3 bzw. 4 vorhanden ist.
Im Umfangsbereich ist die jeweilige Vertiefung 8 und 9 in einer der Behälterhälften 3 bzw. 4 durch eine ringförmige Randpartie 11 begrenzt. Diese Rand- partie hat eine innenliegenden Seitenfläche 37. Die Zwischenwand 10 ist mit der Randpartie 11 der betreffenden Scheibe 3 bzw. 4 einstückig. Jene Abschnitte 12 und 13 der ringförmigen Randpartien 11 der wie beschrieben ausgehöhlten Behälterhälften 3 und 4, welche einander zugewandt sind, sind mit einem an sich bekannten Gewinde versehen, sodass die Behälterhälften 3 und 4 mit Hilfe dieses Gewindes miteinander lösbar verbunden werden können. Vorteilhaft ist dieses Gewinde so ausgeführt, dass anderthalb Umdrehungen genügen, um das Gehäuse 2 zu öffnen oder zu schliessen.
In der Zwischenwand 10 der betreffenden Scheibe 3 bzw. 4 sind Öffnungen 14 ausgeführt, welche die Vertiefungen 8 und 9 in der jeweiligen scheibenförmigen Behälterhälfte 3 bzw. 4 strömungsmässig miteinander verbinden. Im dargestellten Fall sind diese Verbindungsöffnungen 14 als Schlitze in der Zwischenwand 10 ausgeführt, welche radial vom Zentrum der Zwischenwand 10 weglaufen. Neben diesen Schlitzen 14 oder alternativ dazu können in der Zwi- schenwand 10 Verbindungsöffnungen 14 mit einer anderen Form ihrer Kontur ausgeführt sein. Der Innenraum des Behälters 1 ist durch die sich gegeneinander hin öffnenden innenliegenden Vertiefungen 9 in den in den Behälterhälften 3 und 4 definiert. Die genannten Öffnungen 14 verbinden den Innenraum 9 des Behälters 1 mit seiner Umgebung, insbesondere mit den an der Aussenseite der Behälterhälften 3 und 4 liegenden Vertiefungen 8.
Der Innenraum 9 des Behälters 1 soll ein Volumen von mindestens 1 bis 1 ,5 ml aufweisen, welcher zur Aufnahme des Probematerials dient. Im Innenraum 9 befindet sich eine aktive Einheit bzw. eine Perfusionskammer 20 der vorliegen- den Einrichtung. Diese Perfusionskammer 20 umfasst unter anderem einen Träger 15 für die Testmikroorganismen. Dieser Träger 15 kann beispielsweise ein Stück Papier sein. Oder der Träger 15 kann als ein Läppchen ausgeführt sein, welches aus einem Textilstoff, beispielsweise aus Baumwolle ist. Im dargestellten Fall hat der Träger 15 die Form einer Scheibe beispielsweise aus einem der genannten Materialien, wobei diese Scheibe einen kreisförmigen Rand aufweist. Der Durchmesser dieses scheibenförmigen Trägers 15 ist so bemessen, dass die Randpartie desselben an der praktisch zylinderförmigen. Innenwand 37 des Hohlraumes 9 im Behälter 1 anliegt. In diesem Randbereich 37 befindet sich je eine O-Ring 16 bzw. 17 zu je einer Seite des Trägers 15. Der Durchmesser des Querschnittes dieser O-Ringe 16 und 17 ist so bemessen, dass die O-Ringe 16 und 17 zwischen dem Träger 15 für die Testmikroorganismen und dem Boden 35 der inneren Vertiefung 9 in den Behälterhälften 3 und 4 gequetscht sind, sodass keine Flüssigkeit zwischen der zylinderförmigeji Innenwand 37 des Behälterhohlraumes 9 und dem Rand des Trägers 15 flie- ssen kann.
Zur Perfusionskammer 20 der vorliegenden Erfindung gehören auch Scheiben 21 und 22 (Fig. 3), welche aus einem Material sind, welches normalerweise für sogenannte Sterilfilter verwendet wird. Die Porengrösse dieser Sterilfilter kann beispielsweise 0.2-0.4 Mikrometer betragen. Sterilfilter bestehen normalerweise aus Nitrozellulose und sie sind sehr brüchig. Deswegen sind sie bei mechanischen Belastungen, welche in der Maschine beim Schwingen auftreten, einer hohen Beschädigungsgefahr ausgesetzt. Die Scheiben 21 und 22 haben praktisch denselben Durchmesser wie der Träger 15, sodass sie im Inneren 9 des Behälters 1 ebenfalls Platz finden können. Die Filterscheiben 21 und 22 verlaufen praktisch parallel zueinander sowie zum Träger 15 für die Test- Mikroorganismen.
Je eine der Fiiterscheiben 21 bzw. 22 ist einer der grossflächigen Seiten des Trägers 15 für die Test-Mikroorganismen zugeordnet. Im in Fig. 6 dargestellten Fall liegt die jeweilige Filterscheibe 21 bzw. 22 zwischen dem Boden 35 der inneren Vertiefung 9 in der betreffenden Behälterhälfte 3 bzw. 4 und dem dieser zugeordneten O-Ring 16 bzw. 17. In diesem Fall ist je eine Filterscheiben 21 und 22 der Innenseite bzw. dem Boden 35 der jeweiligen Zwischenwand 10 der Behälterhälften 3 bzw. 4 zugeordnet und die jeweilige Filterscheibe 21 bzw. 22 verdeckt dabei die Öffnungen 14 in der Zwischenwand 10 vom Inneren 9 des Behälters 1 her. Es ist jedoch auch denkbar, dass je eine der Filterscheiben 21 bzw. 22 auf einer der Grossflächen des Trägers 15 für die Test- Mikroorganismen unmittelbar aufliegt, sodass die O-Ringe 16 und 17 sich zwi- sehen der Aussenseite der betreffenden Filterscheibe 21 bzw. 22 und dem Boden 35 der betreffenden inneren Vertiefung 9 befinden.
Fig. 8 zeigt diese erste Ausführung der vorliegenden Einrichtung in explodierter Darstellung. Wie dargelegt, ist diese erste Ausführung der vorliegenden Ein- richtung dazu bestimmt, dass sie in einer Waschmaschine untergebracht wird.
Fig. 9 zeigt eine dritte Ausführung der vorliegenden Einrichtung. Diese Ausführung der vorliegenden Einrichtung kann in jenen Fällen verwendet werden, in welchen die Waschlauge oder eine andere Flüssigkeit durch die vorliegende Einrichtung nur durchfliessen kann. Im Inneren ist diese dritte Einrichtung prak- tisch gleich ausgeführt, wie die zweite Ausführung dieser Einrichtung. Anstelle der äusseren Ausnehmungen bzw. Vertiefungen 8 der zweiten Ausführungsform ist die jeweilige Behälterhälfte 3 bzw. 4 der dritten Ausführungsform mit einem Stutzen 24 versehen. Der jeweilige Stutzen 24 ist an das Inneren 9 der jeweiligen Behälterhälfte 3 bzw. 4 strömungsmässig angeschlossen. In den jeweiligen Stutzen 24 kann ein an sich bekannter Nippel 25 mit seinem Gewindeende eingeschraubt sein. Die gegenüberliegende Endpartie des Nippels 25 ist zum Aufstecken eines Schlauches ausgeführt, durch welchen die Flüssigkeit in die Einrichtung gemäss Fig. 9 eingeführt bzw. aus dieser ausgeführt werden kann.
Fig. 10 zeigt eine noch weitere Ausführungsmöglichkeit der vorliegenden Einrichtung. Die Perfusionskammer 30 dieser Einrichtung umfasst ebenfalls den bereits beschriebenen Träger 15 für die Mikroorganismen. Dieser Träger 15 ist jedoch in einer Hülle 31 eingeschlossen, welche einen weiteren Bestandteil dieser Perfusionskammer 30 darstellt. Die Hülle 31 hat im wesentlichen die Form eines Schlauchstückes. Dieses ist aus einem Material, aus welchem normalerweise Dialyse-Schläuche hergestellt werden. Im vorliegenden Fall sollen Abschnitte solcher Dialyse-Schläuche 31 möglichst grosse Poren haben. Die ma- ximale Grosse der Poren in den Schläuchen 31 , welche beispielsweise aus regenerierter Zellulose bestehen können, beträgt 50000 Daltons. Der Flüssigkeitsaustausch erfolgt durch solche Membranen also sehr viel langsamer als bei den vorstehend beschriebenen Sterilfiltern. Werden solche Membranschläuche 31 verwendet, so können die Mikroorganismen als Pulver oder ebenfalls verteilt in einer Flüssigkeit auf dem Träger 15 gebracht sein.
Das Schlauchstück 31 ist in seinen Endbereichen bakteriendicht verschlossen, und zwar in einem zweckmässigen Abstand vom Träger 15. Dies kann beispielsweise mit Hilfe von Klammern gemacht werden. Auch verschweissbare Dialyse-Schläuche 31 aus PVDF sind erhältlich, doch die Porengrösse dersel- ben liegt bei 12000 Daltons. Zudem sind sie nicht so geschmeidig und belastbar wie die Zellulosemembran-Schläuche 31. Ferner können die Endpartien des Schlauchstückes 31 , wie im dargestellten Fall gezeigt, durch Einschnüren der Endpartien des Schlauchstückes 31 mit Hilfe einer geeigneten Schnur .32 ver- schlössen sein.
Da das Material des Schlauches 31 eine verhältnismässig geringe Festigkeit aufweist, ist das Schlauchstück 31 in einem offenen Gehäuse 33 aus einem stabilen Material angeordnet. Dieses Gehäuse 33 kann als ein dosenähnliches Kunststoffgefäss mit grossen Schlitzen oder Löchern ausgeführt sein. Im dargestellten Fall ist das Gehäuse 33 als Mantel eines Zylinders ausgeführt, wobei die Ehdpartien dieses Zylindermantels offen sind, damit die Waschflüssigkeit durch das Gehäuse 33 strömen kann. Dieses Gehäuse 33 wird samt der genannten und in diesem Gehäuse 33 angeordneten Perfusionskammer 30 in ei- ner Waschmaschine oder ähnlich untergebracht. Weil die Bodenbereiche des Gehäuses 33 offen sind, kann die Waschflüssigkeit durch das Gehäuse hindurchströmen und dabei bis zu den Mikroorganismen auf dem Träger 15 in der Hülle 31 gelangen. Um zu verhindern, dass die Perfusionskammer 30 aus dem Gehäuse 33 herausrutscht, ist die Perfusionskammer 30 im Inneren des Ge- häuses 33 mit Hilfe von an sich bekannten Haltemitteln 34 gehalten. Als Haltemittel 34 können jene Abschnitte der bereits erwähnten Schnur 32 dienen, welche von der Hülle 31 abstehen und deren Enden an bzw. in der Wand des Gehäuses 33 befestigt sind.
In Fig. 11 ist der Deckel 51 einer fünfte Ausführung der vorliegenden Einrichtung 50 perspektivisch dargestellt. Fig. 12 zeigt in einem vertikalen Schnitt den Unterteil 52 dieser vierten Ausführung der vorliegenden Einrichtung 50. Im vertikalen Schnitt weisen sowohl der Grundkörper des Deckels 51 als auch der Grundkörper des Unterteiles 52 einen U-förmigen Querschnitt auf. Die Innen- seite der Seitenwand des Deckels 51 und die Aussenseite der Seitenwand des Unterteiles 52 sind mit sich korrespondierenden und bereits beschriebenen Gewindehälften versehen, sodass sich der Deckel 51 auf den Unterteil 51 aufschrauben lässt. Der Deckel 51 ist mit den bereits beschriebenen Öffnungen 14 versehen. Im dargestellten Fall liegt eine semipermeable, Poren aufweisende Membrane 53 auf einem Träger 54 und diese Anordnung befindet sich im Inneren des Hohlraumes 55 im Unterteil 52. Die Membrane 53 ist durchlässig für Wasser und Detergentien.
Fig. 13 zeigt in einer Seitenansicht eine fünfte Ausführung der vorliegenden Ein- richtung. Diese Ausführungsform weist ebenfalls einen Deckel 61 sowie einen Unterteil 62 auf. Im wesentlichen sind sowohl der Deckel 61 als auch der Unterteil 62 gleich ausgebildet wie der Deckel 51 und der Unterteil 51 der vierten Ausführungsform dieser Einrichtung.
Fig. 14 zeigt in einem vertikalen Schnitt den Unterteil 62 der in Fig. 13 gezeigten Ausführung der vorliegenden Einrichtung. Die Innenwand 73 dieses Unterteiles 62 hat die Form des Mantels einer Kalotte. In der Wand eines solchen Unterteiles 62 sind schlitzförmige Öffnungen 14 ausgeführt, welche sich vom mittleren Bereich 74 des Kalottenbodens gegen den oberen Rand 75 des Un- terteiles 62 erstrecken. Ungefähr auf der Höhe des Kalottenbodens 74 ist ein radial abstehender Kragen 76 an der Aussenseite des Unterteiles 62 angeformt.
Fig. 15 und 16 zeigen eine weitere Möglichkeit der Ausführung des Deckels 61.
In Fig. 11 ist der Deckel 61 in einem vertikalen Schnitt dargestellt. Fig. 16 zeigt den Deckel 61 in einer Ansicht von unten bzw. von innen. Im Boden 66 des
Deckels 61 sich senkrecht zur Bodenoberfläche 69 und parallel zueinander verlaufende Bohrungen 67 ausgeführt, welche über die Fläche des Bodens 66 verteilt sind. Diese Bohrungen 67 erstrecken sich zwischen der grossen Au- ssenfläche 68 und der Bodenoberfläche 69 des Deckels 61. Die Bodenoberflä- ehe 69 ist plan. Nur im Randbereich der Bodenoberfläche 69 ist eine ringförmi- ge Nut 70 ausgeführt, in welcher sich eine Dichtung 71 befindet. Diese Dichtung 71 kann als ein O-Ring ausgeführt sein. Der Durchmesser der Nut 70 ist so bemessen, dass der Boden dieser Nut 70 dem oberen Rand 75 des Unterteiles 62 gegenüber liegt, wenn der Deckel 61 auf dem Unterteil 62 aufgeschraubt ist. Folglich liegt auch der Dichtring 71 gegenüber dem oberen Rand des Unterteiles 62, sodass der Dichtring 71 zwischen dem oberen Rand des Unterteiles 62 und dem Boden der Nut 70 gequetscht ist.
Im Innenraum 73 dieses Behälters 60 befindet sich eine aktive Einheit bzw. eine Perfusionskammer 80 der vorliegenden Einrichtung. Zu dieser Perfusionskammer 80 gehört unter anderem auch eine Scheibe 81 , die aus einem Material ist, welches normalerweise für sogenannte Sterilfilter verwendet wird. Die Porengrösse dieses Sterilfilters kann beispielsweise 0.2 - 0.4 Mikrometer betragen. Sterilfilter bestehen normalerweise aus Nitrozellulose und sie sind sehr brüchig. Sie sind bei mechanischen Belastungen, welche in der Maschine beim Schwingen auftreten, einer hohen Beschädigungsgefahr ausgesetzt. Deswegen müssen solche Scheiben 81 während der Durchführung des vorliegenden Verfahrens in einem der hier offenbarten Behälter untergebracht sein.
Die Scheibe 81 hat praktisch denselben Durchmesser wie der Inήenraum im Bodenbereich des Deckels 61 , sodass die Scheibe 81 im Inneren des Deckels 61 Platz finden kann. Ihre Randpartie liegt auf der Dichtung 71 auf. Nach dem Aufschrauben des Deckels 61 auf den Behälterunterteil 62 ist die Randpartie dieser Scheibe 81 zwischen dem oberen Rand 75 des Behälterunterteiles 62 und der Dichtung 71 dichtend zusammengepresst. Die Perfusionskammer 80 umfasst ferner einen Träger für die Testmikroorganismen. Dieser Träger kann einer der vorstehend beschriebenen Art sein. Dieser Träger ist an jene Seite der Scheibe 81 angebracht, welche dem kalottenförmig begrenzten Innenraum 73 des Behälters 60 zugewandt ist. Bei Labor-Waschversuchen werden häufig die folgenden Test-Keime verwendet, welche auch durch die Europäische Norm Nr. 1276 vorgeschrieben sind: • Staphylococcus aureus,
• Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa und
• Enterococcus hirae.
Bei Labor-Waschversuchen werden häufig die folgenden Testkeime verwendet, welche durch die Europäische Norm Nr. 1276 jedoch nicht vorgeschrieben sind: • Enterococcus faecalis (Streptococcus faecalis),
• Enterococcus faecium,
• Candida albicans und • Trichophyton mentagrophytes (Dermatophyt).
Im vorliegenden Verfahren wird eine definierte Menge von lebenden Mikroorganismen bzw. von lebenden Testkeimen in Reinkultur auf den Träger gebracht. . Die zu verwendenden Testkeime können in einer Flüssigkeit schweben oder sie können in Pulverform vorliegen. Tropfen der Flüssigkeit oder vorgegebenen Mengen des Pulvers werden auf den Träger gebracht. Die Mikroorganismen können vor dem Einbringen in den Waschprozess auf dem Träger fixiert werden. Dies kann beispielsweise mit Hilfe eines Gels, z.B. Alginat-Gels erfolgen. Die Bakterien sind auf dem Stoffstück im genannten Gel eingebettet, damit sie auf dem Träger fixiert bleiben. Ferner können die Mikroorganismen vor dem Einbringen in den Waschprozess auf dem Träger konserviert bzw. stabilisiert werden, beispielsweise getrocknet durch Gefriertrocknen.
Der so präparierte Träger wird in der Perfusionskammer bakteriendicht verschlossen. Mikroorganismen nur einer Art werden in der Perfusionskammer eingeschlossen. Die Perfusionskammer ist so dicht, dass zwar die Mikroorga- nismen aus der Perfusionskammer nicht entweichen können, dass aber trotzdem die Waschflüssigkeit mit den Mikroorganismen in Kontakt kommen kann. Falls die Perfusionskammer sich im Inneren des Behälters befindet, so sind die Mikroorganismen darin eingeschlossen. Der Behälter wird zusammen mit der Textilwäsche in eine Haushalt-Waschmaschine gebracht und mit der Textilwäsche gewaschen. Falls die Perfusionskammer 30 als das beschriebene Schlauchstück ausgeführt ist, so wird dieses im Gehäuse 33 zunächst befestigt, das Gehäuse 33 wird dann zusammen mit der Textilwäsche in eine Haushalt- Waschmaschine gebracht und mit der Textilwäsche gewaschen.
Nach Beendigung des Waschprozesses wird der Träger aus der Perfusionskammer aus dem Behälter herausgenommen und die Anzahl der nach der Beendigung des Waschprozesses noch lebenden Mikroorganismen wird ermittelt. Aus der Differenz zwischen der ursprünglichen Menge von lebendigen Mikroor- ganismen und den nach dem Waschprozess noch lebenden Mikroorganismen wird auf den Effekt bzw. auf die Qualität des Waschprozesses geschlossen.
Bei der Detektion nach dem Waschen ist es wichtig, dass nur die noch lebenden Zellen erfasst werden, weil nur diese sich später vermehren können und weil nur diese ein Gesundheitsrisiko darstellen können. Falls ein Träger für die Mikroorganismen, beispielsweise eine Stoffrondelle, verwendet wird, so wird dieser Träger zunächst aus dem Käfig bzw. Behälter herausgenommen und in einer physiologischen Lösung ausgewaschen. Die Abtötungsrate kann direkt nach dem Waschprozess bzw. Waschzyklus beispielsweise anhand eines Farbindikators abgelesen werden. Diese Detektion kann verhältnismässig einfach durchgeführt werden. Oder die Abtötungsrate kann anhand der ATP- Aktivität gemessen werden. Eine ATP-Bestimmung wird durch Direktmessung der Flüssigkeit oder mittels „Swabs" im Luminometer durchgeführt. Die Anzahl der Mikroorganismen, welche den Waschprozess überlebt haben, kann jedoch auch mit Hilfe sogenannter Gensonden ermittelt werden. Gensonden werden beispielsweise von VIT-Vermicon produziert. Die überlebenden Mikroorganismen könnten aber auch mit anderen Methoden wie z.B. Impedanz (von BioMerieux oder von SyLab), optoelektrischer Zählung (von FOSS), Fest- phasenzytometrie (von ChemScan), ImmunoMagneticSeparation / IMS (von DYNAL) gemessen werden.
Im Prinzip wäre es auch möglich, wässrige Proben auf Agarplatten zu geben und zu bebrüten. Bei dieser Methode liegen die Resultate jedoch erst nach 2-3 Tagen vor. Die Resultate einer solchen Auswertungsmethode sind dafür aber präzise. Die Personalkosten sind bei dieser Methode hoch.
Die Ermittlung der Qualität des Wasch prozesses basiert auf dem Verhältnis zwischen der Anzahl jener Mikroorganismen, welche am Anfang des Waschprozesses lebend waren und der Anzahl jener Mikroorganismen, welche am Ende des Waschprozesses noch lebend sind. Eine solche Auswertung kann auch anhand eines dazu geeigneten Programmes in einem Computer durchgeführt werden.
Viele Hersteller setzen ihren Waschmitteln bleichende und / oder gleichzeitig bakterizid wirkende Stoffe zu, welche Mikroorganismen wirksam bekämpfen sollen. Diese Hersteller sollten mindestens betriebsintem wissen, ob ihre Zusatzstoffe während dem Waschen Keime wirklich abtöten bzw. in welchem Grad das Abtöten der Keime erfolgt. Das vorliegende Verfahren sowie die vorliegenden Einrichtungen sollen ermöglichen, die Prüfung der Wirksamkeit der im Waschmittel eingesetzten Stoffe und somit auch die Wirksamkeit des Waschprozesses bei interner Kontrolle im Betrieb in einer möglichst einfachen und schnellen Weise durchzuführen. Dieses Verfahren und diese Einrichtungen können bei Waschmittel-, Bleichmittel-, Waschmaschinenproduzenten sowie in Grosswäschereien und in betreffenden Forschungsinstituten Anwendung finden. Die anvisierte Test-Wäsche kann beispielsweise auch jenes Textilgut sein, das nicht bei mehr als 60°C gewaschen werden darf. Hier handelt es sich beispielsweise um farbsensible Stoffe, Wolle, Seide, Kunstfasern u.a. Ferner sind dieses Verfahren und diese Einrichtungen zur mikrobiologischen Beurteilung von neuen Produkten wie Maschinen, Programmen, Detergentien etc. sowie zur mikrobiologischen Beurteilung von Waschprozessen innerhalb der Grosswäschereien geeignet. Mit Hilfe der vorliegenden Einrichtungen kann mit einem minimalen präparativem Aufwand innerhalb von Stunden eine unter Umständen auch semiquantitative Aussage über die Keim-Abtötungsrate in einem Waschzyklus einer Waschmaschine gemacht werden. Die Einrichtungen erlauben ferner eine schnelle Beurteilung des eigentlichen Waschprozesses und der entsprechenden beeinflussenden Faktoren wie Temperatur, Zeit, Detergentien und mechanische Belastung. Es müssen keine Proben während des Waschprozes- ses aus der Maschine entnommen werden.

Claims

Patentansprüche
1. Verfahren zum Testen bakterizider Wirkung von Substanzen, dadurch gekennzeichnet, dass eine vorgegebene, bzw. definierte Anzahl von lebenden Mikroorganismen der Einwirkung einer mit Bakterien belasteten Flüssigkeit ausgesetzt wird, welche die Substanz mit der bakteriziden Wirkung enthält, dass die Anzahl der nach Ablauf einer bestimmten Einwirkungszeitspanne noch lebenden Mikroorganismen ermittelt wird und dass daraus auf die bakterizide Wirkung der getesteten Substanz geschlossen wird.
2. Verfahren nach Patentanspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass eine definierte Menge von lebendigen Mikroorganismen zusammen mit Textilwäsche gewaschen wird, dass die Anzahl der nach Beendigung des Waschprozesses noch lebenden Mikroorganismen ermittelt wird und dass aus der Differenz zwi- sehen der ursprünglichen Menge lebender Mikroorganismen und jener Menge von Mikroorganismen, welche nach dem Waschprozess noch lebend gebliebenen, die Effektivität bzw. die Qualität des Waschprozesses, insbesondere der bakteriziden Wirkung der getesteten Substanz ermittelt wird.
3. Verfahren nach Patentanspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass eine definierte Menge von Mikroorganismen auf einen Träger gebracht wird, beispielsweise durch Tropfen oder in Form von Pulver, dass die Mikroorganismen vor dem Einbringen des Trägers in den Waschprozess auf dem Träger fixiert werden, beispielsweise mit Hilfe eines Gels und/oder dass die Mikroorganismen vor dem Einbringen des Trägers in den Waschprozess konserviert werden, beispielsweise durch Gefriertrocknen und dass die Anzahl der den Waschprozess überlebenden Mikroorganismen durch die sogenannte Biolumineszenz- Methode oder mit Hilfe sogenannter Gensonden ermittelt werden kann.
4. Verfahren nach Patentanspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass die lebenden Mikroorganismen in eine Flüssigkeit gebracht werden, mit der sie eine Suspension bilden, wobei diese Flüssigkeit eine Nährlösung sein kann, dass die zu testende Substanz in Form einer Lösung oder einer Suspension in den Test- prozess eingebracht werden kann, dass der Lösung oder der Suspension nach Ablauf der Einwirkungszeitspanne Tetrazoliumsalz beigemengt wird, dass das Tetrazoliumsalz durch das Enzym Dehydrogenase in den Testmikroorganismen entsprechend der Anzahl der noch lebenden Mikroorganismen zu einem farbigen Produkt, dem Formazan, reduziert wird, dass darauf eine Messung der durch Formazan verursachten optischen Dichte erfolgt und dass aus dem Resultat dieser Messung Rückschlüsse auf die bakterizide Wirkung der getesteten Substanz und somit auch auf die Anzahl jener Testmikroorganismen gezogen werden, welche die Einwirkungszeitspanne der getesteten Substanz überlebt haben.
5. Verfahren nach Patentanspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass aufgrund der Zunahme der Formazan-Menge nach einer Bebrütungszeitspanne Rückschlüsse auf die Anzahl der Mikroorganismen gezogen werden, welche die Einwirkungszeitspanne der getesteten Substanz überlebt haben, dass die Rückschlüsse aufgrund der Messung optischer Dichte gezogen werden, dass die in der Suspension bzw. in der Nährlösung vorhandenen Mikroorganismen während einer ersten Zeitspanne, beispielsweise von 30 Minuten, bebrütet werden, wonach eine erste Messung der optischen Dichte erfolgt, dass die in der Suspension bzw. in der Nährlösung vorhandenen Mikroorganismen während einer darauf folgenden, zweiten Zeitspanne, beispielsweise von 30 Minuten, bebrütet werden, dass darauf eine zweite Messung der optischen Dichte erfolgt, und dass aus der Differenz zwischen den Resultaten der Messungen der optischen Dichte Rückschlüsse auf die bakterizide Wirkung der getesteten Substanz gezogen werden.
6. Verfahren nach Patentanspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass Substanzen, welche Waschmittelrückstände entfernen bzw. neutralisieren können, der Suspension zugegeben werden bevor das Tetrazoliumsalz dieser Suspension zugegeben wird, dass die Mikroorganismen in dieser Suspension während ei- ner vorbestimmten Zeitspanne, beispielsweise von 1 Stunde, und bei einer vorgegebenen Temperatur, beispielsweise von 37° C, gehalten werden und dass das Tetrazoliumsalz erst nach dieser Inkubationszeit der Suspension zugegeben wird.
7. Einrichtung zur Durchführung des Verfahrens nach Patentanspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass ein Behälter vorgesehen ist, in welchem die Test- Mikroorganismen eingeschlossen sind, dass dieser Behälter so ausgeführt ist, dass die Flüssigkeit mit den Mikroorganismen im Behälter in Kontakt gelangen kann und dass die Mikroorganismen während dem Testprozess aus dem Be- hälter nicht entweichen können.
8. Einrichtung nach Patentanspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass der Behälter einen hohlen Grundkörper aufweist, dass der Behälter aus einem Material ist, der chemisch und physikalisch stabil ist, dass der Grundkörper des Be- hälters zumindest eine Öffnung aufweist, welche den Innenraum des Behälters mit seiner Umgebung verbindet, dass die Öffnung durch eine Wand aus einem Material verdeckt sein kann, dass eine definierte Menge von Mikroorganismen auf einem Träger angebracht ist und dass dieser Träger sich im Inneren des Behälters befindet.
9. Einrichtung nach Patentanspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass der Behälter im wesentlichen scheibenförmig ist, dass zumindest eine Öffnung in zumindest einer der Grossflächen des hohlen scheibenförmigen Grundkörpers des Behälters ausgeführt ist.
10. Einrichtung nach Patentanspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass in mindestens einer Grossfläche des hohlen Behältergrundkörpers zumindest je eine Öffnung ausgeführt ist, dass der Innenseite der jeweiligen grossflächigen Wand des Behälters ein Sterilfilter zugeordnet ist und dass die Mikroorganismen sich zwischen diesen zwei Sterilfiltern befinden, welche praktisch parallel zueinander angeordnet sind.
11. Einrichtung gemäss Patentanspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass sie ferner ein Photometer und eine Küvette zur Aufnahme jener Suspension um- fasst, welche dem Behälter (90) entnommen worden ist.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7628823B2 (en) * 2007-01-22 2009-12-08 Washing Systems, Llc Method of testing for ATP load in commercial laundry and for data tracking the results
EP3461906A1 (de) * 2017-09-29 2019-04-03 Meducomp GmbH Vorrichtung und verfahren zur mikrobiologischen prüfung von waschmaschinen
WO2019063840A1 (de) * 2017-09-29 2019-04-04 MEDUCOMP GmbH Vorrichtung und verfahren zur mikrobiologischen prüfung von waschmaschinen

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102006019561A1 (de) * 2006-04-27 2007-10-31 Clariant International Limited Flotationsreagenz für silikathaltige Mineralien
WO2020026181A1 (en) * 2018-08-01 2020-02-06 Abu Rabia Rasmiya Method and modular, ecological product to organize equipment for hygienic dishwashing
CN113933459A (zh) * 2021-09-18 2022-01-14 中国日用化学研究院有限公司 一种织物洗涤剂除菌性能的测试评价方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2031457A (en) * 1978-09-25 1980-04-23 Baylor College Medicine Staining and analysis of bacteria
US5252484A (en) * 1988-11-29 1993-10-12 Minnesota Mining And Manufacturing Company Rapid read-out biological indicator
US5948633A (en) * 1997-08-07 1999-09-07 Disney; Loren Method for determining the effect of a chemical compound on microorganisms growing in continous culture
US6146843A (en) * 1998-08-31 2000-11-14 Cornell Research Foundation, Inc. Method and apparatus for the use of sentinel microorganism
WO2003016450A1 (en) * 2001-08-14 2003-02-27 Lonza Inc. Laundry sanitizer containing partially halogenated hydantoins

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3472900A (en) * 1966-07-18 1969-10-14 Baird Chem Ind Preparation of trialkylamines
JPS5545400A (en) * 1978-09-25 1980-03-31 Baylor College Medicine Staining composition and method of bacteria
US5073488A (en) * 1988-11-29 1991-12-17 Minnesota Mining And Manufacturing Company Rapid method for determining efficacy of a sterilization cycle and rapid read-out biological indicator
FI91977C (fi) * 1991-01-24 1994-09-12 Orion Yhtymae Oy Menetelmä mikro-organismien määrittämiseksi ja erottamiseksi

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2031457A (en) * 1978-09-25 1980-04-23 Baylor College Medicine Staining and analysis of bacteria
US5252484A (en) * 1988-11-29 1993-10-12 Minnesota Mining And Manufacturing Company Rapid read-out biological indicator
US5948633A (en) * 1997-08-07 1999-09-07 Disney; Loren Method for determining the effect of a chemical compound on microorganisms growing in continous culture
US6146843A (en) * 1998-08-31 2000-11-14 Cornell Research Foundation, Inc. Method and apparatus for the use of sentinel microorganism
WO2003016450A1 (en) * 2001-08-14 2003-02-27 Lonza Inc. Laundry sanitizer containing partially halogenated hydantoins

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7628823B2 (en) * 2007-01-22 2009-12-08 Washing Systems, Llc Method of testing for ATP load in commercial laundry and for data tracking the results
EP3461906A1 (de) * 2017-09-29 2019-04-03 Meducomp GmbH Vorrichtung und verfahren zur mikrobiologischen prüfung von waschmaschinen
WO2019063840A1 (de) * 2017-09-29 2019-04-04 MEDUCOMP GmbH Vorrichtung und verfahren zur mikrobiologischen prüfung von waschmaschinen

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