WO2004094377A1

WO2004094377A1 - 光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの分離方法

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Publication number: WO2004094377A1
Application number: PCT/JP2004/005924
Authority: WO
Inventors: Keiko Kudo; Kozo Tachibana; Koichi Murazumi
Original assignee: Daicel Chemical Industries Ltd.
Priority date: 2003-04-24
Filing date: 2004-04-23
Publication date: 2004-11-04
Also published as: EP1623976A1; CN1809535A; US20060079708A1; KR20050114282A; US7459579B2; JPWO2004094377A1; CN100400510C; EP1623976A4

Abstract

芳香族基を有するジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体の混合物を含有する溶液から、担体と、この担体に担持された多糖誘導体とからなる充填剤を使用する液体クロマトグラフィーにより、光学活性な前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルを分離する。前記多糖誘導体には、多糖の水酸基及びアミノ基の水素原子の一部もしくは全部が、特定のアルキル基を有する芳香族基で一つの水素原子が置換されたカルバモイル基、及び特定のアルキル基を有するベンゾイル基の一種又は二種以上で置換されている多糖誘導体を用いる。本発明によれば、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルをより一層明確に分離することができる。

Description

明細書光学活性なジヒドロキシヘプテン酸ェステルの分離方法技術分野

本発明は、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの分離方法に関し、更に詳しくは、高脂血症や動脈硬化等の予防、治療に有用な、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの分離方法に関する。背景技術

光学異性体は、構造式は同一であるが、原子が空間で異なった配置をとつているために互いに鏡像の関係にある。光学異性体を含有する医薬品の場合では、薬効、毒性の点で顕著な差が見られるケースが良く知られている。このため厚生労働省の医薬品製造指針においては、「当該薬物がラセミ体である場合には、それぞれの異性体について吸収、分布、代謝、排泄動態を検討しておくことが望ましい」と記載されている。

また、片方の光学異性体のみを治療薬として用いると投与量が少なくて済み、単位あたりの薬効向上や、副作用の低減を図ることができる。したがって医薬、生化学関連産業等の分野においては、光学純度の高い光学活性体を調製することが極めて重要な課題となっている。

光学異性体が存在する特定のジヒドロキシヘプテン酸エステノレは、高脂血症及び動脈硬化症等の予防及ぴ治療に非常に有効であることが知られている。このようなジヒドロキシヘプテン酸エステルの製造方法としては、例えば光学分割用充填剤を用いて光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルを工業的に得る方法が知られている（例えば、国際公開 9 5 / 2 3 1 2 5号パンフレツト及び国際公開 0 2 / 3 0 9 0 3号パンフレツト参照）。

し力し、従来用いられていた光学分割用充填剤における前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルの生産性については、検討の余地が残されており、より一層生産性の優れた光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの製造方法が強く望まれていた。

本発明の課題は、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルをより一層明確に分離することのできる方法を提供する事にある。発明の開示

本発明は、前記課題を解決するための手段として、下記一般式 ( 1 ) で表されるジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体の混合物を含有する溶液から、担体と、この担体に担持された多糖誘導体とカらなる充填剤を使用する液体ク口マトグラフィ一により、光学活性な前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルを分離する方法であって、

多糖誘導体は、多糖の水酸基及びァミノ基の水素原子の一部もしくは全部が、下記一般式（2 ) で表される置換基及び一般式（3 ) で表される置換基の一種又は二種以上で置換されていることを特徴とする方法を提供する。

(式中、 A rは、置換基及び縮合環の少なくともいずれかを有していても良い、炭素環芳香族基又は複素琛芳香族基を表し、 R，は、炭素数が 1 ~ 2 0の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、フヱニル基、又は崁素数が 7 ~ 1 8のァラルキル基を表す。）

(式中、 R ₂は、崁素数が 2〜 8の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を表す。）

(式中、 R₂は、炭素数が 2〜 8の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基をす。 ) 図面の簡単な説明

図 1は、本発明に用いられる擬似移動床装置の一例の構成の概略を示す図である。

図 2は、本発明に用いられる擬似移動床装置の他の例の構成の概略を示す図であ。

図 3は、実施例 1のカラムを用いて [R*， S*— （E) ] — （±) — [3— (4 ーフノレオロフェニル）一 1一（1—メチルェチル）一 1H—インドールー 2—ィル] —3， 5—ジヒドロキシ _6—ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 4は、実施例 2のカラムを用いて [R*， S*— (E) ] — (±) — [3— （4 —フノレオロフェニノレ）一 1一（1ーメチノレエチノレ）一 1H— ^ ンドーノレ一 2—ィル] 一 3， 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 5は、実施例 3のカラムを用いて [R*， S*— (E) ] 一（±) — [3— (4 —フノレオロフェ-ノレ）一 1一（1ーメチノレエチノレ）一 1H—インドーノレ _ 2—ィル] —3， 5—ジヒドロキシ _ 6—ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 6は、実施例 4のカラムを用いて [R*， S*— (E) ] 一（±) — [3— (4 ーフノレオロフェェノレ） - 1 - (1ーメチノレエチノレ）一 1 H—インドーノレ一 2—ィル] —3， 5—ジヒドロキシー 6 _ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 7は、実施例 5のカラムを用いて [R*， S*— (E) ] 一（土）一 [3— (4 —フルオロフェエル） - 1 - (1—メチルェチル）一 1 H—インドールー 2—ィル] 一 3, 5—ジヒドロキシー 6—ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 8は、比較例 1のカラムを用いて [R*， S*- (E) ] — (±) — [3— (4 ーフノレオロフェニノレ） - 1 - (1ーメチノレエチノレ） ― 1 H—ィンドール一 2—ィル] -3, 5—ジヒドロキシー 6—ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。 ■

図 9は、比較例 2のカラムを用いて [R*， S*_ (E) ] — （±) — [3— (4 —フルオロフェニル）一 1一（1ーメチルェチル）一 1 H—インドールー 2—ィノレ] 一 3, 5—ジヒドロキシー 6—ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 10は、実施例 1のカラムを用いて [R*， S*— (E) ] 一（土）一 [3— (4一フルオロフェ -ル）一1— (1ーメチルェチル）一 1H—インドールー 2 —ィル] -3, 5—ジヒドロキシー 6—ヘプテン酸ェチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 11は、実施例 2のカラムを用いて [R*， S*— (E) ] — (±) _ [3— (4ーフノレオロフェニノレ） - 1 - (1ーメチノレエチノレ）一 1H—インドーノレ一 2

—ィル] —3, 5—ジヒドロキシー 6—ヘプテン酸ェチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 12は、実施例 3のカラムを用いて [R*， S*— (E) ] — (±) — [3— (4一フルオロフェニル) 一 1一（1ーメチルェチノレ） - 1 H—インドール— 2 一ィル] —3， 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸ェチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 13は、実施例 4のカラムを用いて [R*， S*— (E) ] — (±) — [3— (4ーフノレオロフェニノレ） - 1 - (1ーメチノレエチノレ）一1H—インドーメレー 2 —ィル] —3， 5—ジヒドロキシー 6—ヘプテン酸ェチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 14は、実施例 5のカラムを用いて [R*, S*- (E) ] — (±) — [3— (4ーフノレオ口フエ-ノレ）一 1一（1ーメチノレエチノレ）一 1H—インドーノレ一 2 一ィル] 一 3, 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸ェチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 15は、比較例 1のカラムを用いて [R*， S*— (E) ] — (±) — [3— (4一フル才ロフエニル) - 1 - (1 _メチルェチル) 一 1 H—ィンドール一 2 一ィル] 一 3, 5—ジヒドロキシ _ 6 プテン酸ェチルを分離したときのクロマトグラフである。

図 16は、比較例 2のカラムを用いて [R*， S*— （E) ] — （土）一 [3— (4ーフノレオ口フエ-ノレ） — 1— (1—メチノレエチノレ）一 1H—インドーノレ一 2 —ィノレ] 一 3, 5—ジヒドロキシー 6 _ヘプテン酸ェチルを分離したときのクロマトグラフである。発明を実施するための最良の形態

本発明では、前記一般式（ 1 ) で表されるジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体の混合物を含有する溶液から、充填剤を使用する液体クロマトグラフィ一により、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルを分離する。前記充填剤には、担体と、この担体に担持された多糖誘導体とからなる充填剤が用いられる。

前記多糖誘導体は、多糖の水酸基及ぴァミノ基の水素原子の一部もしくは全部が、前記一般式（2) で表される置換基及び前記一般式 (3) で表される置換基の一種又は二種以上で置換されている。

前記多糖誘導体は、例えば炭素数が 2〜 8の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を有する安息香酸及びその誘導体や前記アルキル基を有するフエ二ルイソシァナートと多糖の水酸基との間の反応によって、常法に従って合成することができる。

前記安息香酸の誘導体としては、例えば安息香酸の塩化物、安息香酸の酸無水物、安息香酸のエステル等が挙げられる。前記安息香酸、その誘導体、及び前記フエ二ルイソシアナートは、市販品を用いても良く、また常法に従って合成することができる。

前記多糖誘導体のフエニル基における前記アルキル基の位置は特に限定されないが、フエニル基の 4位の炭素原子に前記アルキル基が結合していることが、前記一方の光学異性体の分離効果を高める上で好ましい。また、前記アルキル基の種類は、炭素数が 2〜8であれば特に限定されないが、炭素数が 2〜4のアルキル基であることが、前記一方の光学異性体の分離効果を高める上で好ましい。このようなアルキル基としては、例えばェチル基、イソプロピル基、 n—プチル基、ィソブチル基、 s e c—プチル基等が挙げられる。好ましくは、ェチル基、イソプロピル基、 n―プチノレ基である。

前記多糖としては、天然多糖、天然物変性多糖、合成多糖、及びオリゴ糖のいずれを問わず、光学活性であれば特に制限はない。

前記多糖の具体例としては、 α— 1， 4ーグルカン（アミロース、デンプン、グリコーゲン) 、 β- 1, 4一グルカン (セル口ース) 、 α - 1 , 6一グルカン (デキストラン）、 J3— 1， 3—グルカン（カードラン、ジソフイラン等）、ひ一 1， 3ーグノレ力ン、 ]3— 1， 2—グノレ力ン（C r own Ga l l多糖）、 a — 1, 6—マンナン、 /3— 1， 4一マンナン、 ]3— 1, 2—フラクタン（ィヌリン）、 β- 2, 6—フラクタン (レパン）、 β— 1, 4ーキシラン、 β - 1, 3 ーキシラン、；3— 1, 4—キトサン、 β— 1, 4一 Ν—ァセチノレキトサン（キチン）、 α— 1, 3- 1, 6—グノレカン (ムタン) 、プノレラン、ァガロース、ァノレギン酸等を挙げることができる。

これらの中では、高純度の多糖を容易に入手できるセルロース、アミロース、 β— 1 , 4ーキシラン、 β— 1, 4ーキトサン、キチン、 β - 1, 4一マンナン、ィヌリン、カードラン等が好ましく、特にセルロース、アミロースが好ましい。前記多糖の数平均重合度 ( 1分子中に含まれるピラノース及ぴフラノース等の単糖ユニットの個数の平均数）は 5以上、好ましくは 10以上である。一方、特に上限はないが、 2000以下であること力取り扱いの容易さにおいて好ましく、特に好ましくは 500以下である。

前記オリゴ糖の具体例としては、マルトース、マルトテトラオース、マルトべンタ才ース、マノレトへキサオース、マノレトへプタオース、イソマノレトース、ェノレオース、パラチノース、マルチトール、マルトトリイトール、マルトテトライトール、イソマルチトース、 α—シクロデキストリン、 β—シクロデキストリン、 V—シクロデキストリン等を挙げることができる。本発明に用いられる多糖誘導体において、前記一般式（2 ) 及び（3 ) で示される置換基による前記水素原子の置換度は、通常 1 0〜1 0 0 %であり、好ましくは 3 0〜； L 0 0 %であり、特に好ましくは 8 0 %〜 1 0 0 %である。前記置換度が前記範囲にあること力前記一方の光学異性体の分離効果を高める上で好ましい。

前記置換度は、例えば、前記反応時における前記安息香酸及びその誘導体や前記フヱ-ルイソシアナートの、前記多糖の前記水酸基及びァミノ基に対する当量によって調整することが可能である。また、前記置換度は、例えば置換基導入の前後における炭素、水素及び窒素等の元素の変化を元素分析により調べることによって求めることができる。

前記多糖誘導体における多糖に対する前記置換基の結合の形態は、特に限定されない。例えば、前記多糖誘導体は、同じ置換基が多糖に結合した多糖誘導体であっても良いし、異なる種類の置換基が多糖に結合した多糖誘導体であっても良い。

また、前記多糖誘導体では、多糖に対する前記置換基の分布は均等であっても良いし、偏りがあっても良い。また、単糖ユニットに結合する前記置換基の個数は、全ての単糖ユニットにおいて同じであっても良いし、異なっていても良い。また、単糖ユニットに結合する前記置換基の位置は、単糖ユニットにおける特定の水酸基及びァミノ基の位置であっても良いし、特に規則性がなくても良い。本発明に用いられる担体としては、特に限定されず、カラムに充填される充填剤として通常利用される担体が用いられる。このような担体としては、例えば多？し質の有機担体、多孔質の無機担体、及び多孔質の有機無機ハイブリッド担体等が挙げられる。好ましくは多孔質の無機担体である。

多孔質の有機担体として適当なものには、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、及びポリアクリレート等からなる群から選択される高分子の粒子が挙げられる。多孔質の無機担体として適当なものには、シリカ、アルミナ、マグネシア、ガラス、カオリン、酸化チタン、ケィ酸塩、及びヒドロキシァパタイト等が挙げられる。

多孔質の有機無機ハイプリッド担体として適当なものには、シリカ、アルミナ、マグネシア、酸化チタン等の分子骨格中にアルキル基、フエ-ル基、ビュル基、スチリル基等を含有する物質が挙げられる。特に好ましい担体はシリカゲルである。

シリカゲルは、粒径が 1 0 0 n m〜 1 0 mmであることが好ましく、 1 μ m〜 3 0 0 μ πιであることがより好ましく、 1〜7 5 i mであることがより一層このましい。シリカゲルの表面の孔の平均孔径は 1 11 m〜 1 0 0 μ mであることが好ましく、 5 n ix！〜 5 0 0 n mであることがより好ましい。シリカゲルは、残存シラノールの影響を排除するために表面処理が施されていることが望ましいが、表面処理が全く施されていなくてもよい。

担体に担持される多糖誘導体の担持量は、充填剤に対して通常 1〜8 0質量％であり、好ましくは 5〜 6 0質量％であり、特に好ましくは 2 0〜 4 0質量％である。担持量が 1質量％未満では光学分割を有効に行えないことがあり、また 6 0質量％を超えても段数の減少による分離効率の低下が起こるため好ましくない。なお、前記担持量は、充填剤の質量と充填剤中の多糖誘導体の質量との割合である。

本発明に用いられる充填剤は、前記多糖誘導体を前記担体に担持させることによって得られる。前記多糖誘導体を担体に担持させる方法は、クロマトグラフィ一用の充填剤の調製に通常用いられる方法によって行うことができる。このような方法としては、例えば前記多糖誘導体を前記担体に直接、化学結合する方法、及び多糖誘導体を含有する溶液を担体に塗布してから溶剤を留去する方法等が挙げ'られる。

前記方法において多糖誘導体の溶解に使用される溶剤は、多糖誘導体を溶解させる事ができるものであれば、通常使用されている有機溶剤のいかなるものでも良い。

さらに、担体と担体上の多糖誘導体との間の化学結合、担体上の多糖誘導体同士の化学結合、担体と多糖誘導体との間に介在する第三成分を利用した化学結合、担体上の多糖誘導体への光照射、 V線等の放射線照射、マイクロ波等の電磁波照射による反応、ラジカル開始剤等によるラジカル発生による反応等によって、更なる化学結合を形成させることで、多糖誘導体の担体上における更なる強固な固定化を図ってもよい。

前記充填剤によって分離される光学活性なジヒドロキシヘプテン酸ェステノレは、前記一般式（1 ) で表される。

前記一般式 ( 1 ) におけるとしては、炭素数が 1〜 2 0の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、フエニル基、又はァラルキル基であれば特に限定されない。前記アルキル基は、炭素数が 1〜 2 0であることが好ましく、炭素数が 1 ~ 8であることがより好ましく、炭素数が 2〜5であることがさらに好ましい。

また、前記ァラルキル基の芳香族基は、炭素数が 6〜1 4であることが好ましく、ヘテロ原子及び縮合環のいずれか一方又は両方を有していても良い。前記ァラルキル基のアルキレン基は、炭素数が 1〜4であることが好ましく、直鎖状であっても良いし、分枝状であっても良い。

前記一般式（1 ) における A rとしては、ヘテロ原子を有していても良い芳香族基であり、縮合多環芳香族基を含む。このような A rとしては、例えばフエ二ル基、ナフチル基、インデニル基、ピリジル基、キノリル基、インドリル基等が挙げられる。

また、前記 A rが有していても良い置換基は、本発明の効果を損なわない範囲であれば特に限定されない。このような前記置換基としては、例えばニトロ基等のへテロ原子のみからなる置換基ゃァミノ基、水酸基、アルコキシル基等のへテ口原子を含む置換基、フッ素や塩素等のハロゲン基、及ぴこれらの置換基を有していても良、アルキル基やフエニル基等の炭化水素基等が挙げられる。

前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルの具体例としては、下記構造式（4 ) で表される [R *， S *- (E) ] — (±) — [ 3— ( 4一フルオロフェニル) —1 一 ( 1—メチノレエチノレ）一 1 H—インドーノレ一 2—ィノレ] 一 3， 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸メチル、及び下記構造式 ( 5 ) で表される [R *， S *- (E) ] 一（士）一 [ 3— （4—フルオロフェニル）一1— ( 1ーメチルェチル）一 1 H ーィンドーノレ一 2—イノレ] - 3 , 5ージヒドロキシー 6—ヘプテン酸ェチノレ等が挙げられる。

前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体の混合物は、混合物中の少なくとも一方の光学異性体が前記多糖誘導体で分離される光学異性体を含有するものであれば特に限定されないが、 3 S 5 R体及び 3 R 5 S体であることが好ましい。

また、前記混合物は、 3 S 5 R体と 3 R 5 S体との混合物のように、鏡像異性体の混合物であっても良いし、 3 S 5 R体又は 3 R 5 S体他と 3 S 5 S体又は 3 R 5 R体との混合物のように、ジァステレオマーを含有する混合物であっても良いし、またこれらの混合物であっても良い。

本発明においては、前記充填剤を固定相とし、超臨界流体あるいは一般の溶媒、混合溶媒を移動相として、少なくとも前記一般式 ( 1 ) で表されるジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体を含有する混合溶液を前記固定相に供給して、前記移動相によって固定相中において前記光学異性体を移動させるカラムクロマトグラフィ一によつて、前記光学異性体を分離することができる。本発明では、液体ク口マトグラフィーを適用すること.が、前記光学異性体を分離する上で好ましい。

前記混合溶液には、前記混合物を溶解できる混合溶媒等の溶媒が用いられる。このような溶媒の種類や組成は、溶質の種類や濃度に応じて決められる。前記溶媒には、通常液体ク口マトグラフィ一に用いられる溶媒を用いることができる。混合溶液に用いられる溶媒は、液体クロマトグラフィー及びこれに準ずる方法における移動相、すなわち溶離液であることが、溶離液の再利用を容易にする上で好ましい。前記混合溶液は、前記カラムクロマトグラフィ一によって前記光学異性体に対して分離可能な成分であれば、他の成分を含んでいても良い。

本発明では、通常のカラムクロマトグラフィーによって分離された一方の光学異性体の溶液を採取し、この溶液から溶媒を留去することによつて前記光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルを得ることが可能である。

このような前記光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの製造では、試料の供給及び液体の排出の少なくともいずれかが非連続に行われる回分式クロマトグラフィ一、あるいは試料の供給及び液体の排出が連続して行われる擬似移動床式クロマトグラフィーを用いて前記光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの分離を行うこと力光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの分取生産性を高める上で好ましい。

特に、前記光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルを製造する場合では、擬似移動床式ク口マトグラフィーを用いることがより好ましい。前記擬似移動床式クロマトグラフィーでは、通常この方法で用いられる溶媒を移動相に用いることができる。

前記擬似移動床式クロマトグラフィーは、前記充填剤が充填されている複数のカラムを直列に接続して形成される無端状の管路に溶離液を供給する工程と、前記管路における溶離液の流れ方向において溶離液の供給位置よりも下流側の位置から前記管路を流れる液体の一部を排出する工程（以下「第一の排出工程」とも言う）と、前記管路における溶離液の流れ方向において前記液体の排出位置 (以下「第一の排出位置」とも言う）よりも下流側の位置に前記混合溶液を供給する工程と、前記管路における前記混合溶液の供給位置と前記溶離液の供給位置との間の位置から前記管路を流れる液体の一部を排出する工程（以下「第二の排出ェ程 J とも言い、この工程による液体の排出位置を「第二の排出位置」とも言う）と、前記管路における前記混合溶液中の混合成分の位置に前記混合溶液を供給するように、前記溶離夜の供給位置、前記第一の排出位置、前記混合溶液の供給位置、及び前記第二の排出位置を、これらの位置の相対的な位置関係を保ったまま液体の流れの下流方向へ移動させる工程と、前記管路から排出される液体に含まれる成分を取り出す工程とを含む。

前記擬似移動床式ク口マトグラフィ—において、前記管路では、混合溶液中の、充填剤により吸着されやすい成分（以下「エタストラクト成分」とも言う）と、充填剤により吸着されにくい成分（以下「ラフィネート成分」とも言う) とが、充填剤に吸着される。

エタストラタト成分は、前記管路を移動する速度が、ラフィネート成分の移動速度、及び混合溶液の供給位置の移動速度よりも小さいので、混合溶液の供給位置の上流側に分布する。

一方、ラフイネ一ト成分は、前記管路を移動する速度が、エタストラクト成分の移動速度、及び混合溶液の供給位置の移動速度よりも大きいので、混合溶液の供給位置の下流側に分布する。

混合溶液の供給位置より供給される各成分の濃度は、平衡に達するまで経時的に高まり、エタストラタト成分の濃度分布は混合溶液の供給位置付近を頂点に混合溶液の供給位置よりも上流側に分布する。一方、ラフィネート成分の濃度分布は、混合溶液の供給位置付近を頂点に混合溶液の供給位置よりも下流側に分布する。

経時的に広がった各成分の濃度分布の両端が、各排出位置に到達すると、各成分を含む溶液が前記管路よりそれぞれ排出される。各成分の濃度や分布は、前記カラムの大きさ、充填剤の種類、管路に供給する液体の種類、供給速度、管路から排出される各液体の速度、及び前記供給位置及び排出位置の相対的な位置関係及びその移動速度 (切り替え速度) 等の諸条件により調整される。

なお、前記混合成分は、混合溶液中の前記エタストラクト成分と前記ラフイネ一ト成分とが混在する成分である。また、前記混合成分の位置は、エタストラタト成分とラフィネート成分とが混在している管路中の位置であれば特に限定されないが、エタストラタト成分とラフィネート成分とが等量で混在している位置であることが好ましい。

また、溶離液の供給位置、前記第一の排出位置、前記混合溶液の供給位置、及び前記第二の排出位置の相対的な位置関係は、管路において実質的に等間隔にある位置関係であっても良いし、異なる間隔の位置関係であっても良い。また、これらの位置の移動時期は、管路を流れる液体の成分の分析や、充填剤の種類及び管路中の液体の流速等の諸条件を設定した、コンピュータによるシミュレーンョン等によって決めることができる。

前記擬似移動床式液体ク口マトグラフィ一は、例えば、国際公開第 9 5 Z 2 3 1 2 5号パンフレツトゃ特開平 9一 2 0 6 5 0 2号公報等に開示されている、通常用いられる擬似移動床 ( S MB ) 装置を用いて行うことができる。

以下、図面に基づいて本発明における方法を説明する。

図 1は、本発明に用いられる擬似移動床装置の一例を示す模式図であり、図 2 は本発明に用いられる擬似移動床装置の別の例を示す模式図である。図 1において、前記管路は 1 2体のカラムを直列に接続することによって形成されており、図 2において、前記管路は 8体のカラムを直列に接続することによって形成されている。

それぞれの装置において、図示しないが、カラム同士を接続する全ての管路には、溶離液を供給する管路、混合溶液を供給する管路、及び液体を排出する管路が接続されている。これらの管路からの液体の供給又は液体の排出は、自動弁によって制御されている。

なお、前記カラムの数や大きさは、混合溶液の種類や組成、流量、圧損、装置の大きさ等の要因によって決まるものであり、限定されるものではない。

前記装置を用いる擬似移動床式クロマトグラフィーでは、基本的操作として、次に示す吸着操作、濃縮操作、脱着操作及び溶離液回収操作が連続的に循環して実施される。

( 1 ) 吸着操作

混合溶液中の混合成分が充填剤と接触し、供給される溶離液の流れにより吸着と脱着を繰り返す。充填剤がエタストラクト成分を吸着する度合いは、ラフイネ一ト成分を吸着する度合いよりも大きいため、前記カラム内の移動速度が小さくなる。充填剤がラフィネート成分を吸着する度合いは、エタストラクト成分を吸着する度合いよりも小さいため、力ラム内の移動速度が大きくなり、ラフイネ一ト成分の濃度分布は、前記管路においてェクストラクト成分の濃度分布よりも先行する。

( 2 ) 濃縮操作

主としてェクストラタト成分が吸着している充填床に、ェクストラクト成分を含んだ溶離液が供給されると、充填剤上に残存しているラフィネート成分が追い出され、ェクストラクト成分が濃縮される。

( 3 ) 脱着操作

エタストラタト成分の濃縮時よりも多くの量の溶離液が充填床に供給されると、それまで充填剤に吸着されていたェクストラタト成分が充填剤上から脱離し、力ラム内のェクストラクト成分の移動速度が濃縮操作時のそれよりも大きくなる。

( 4 ) 溶離液回収操作

ラフィネート成分を吸着している充填剤に、ラフィネート成分の吸着時よりも溶離液の供給量が減少すると、管路を移動しているラフイネ一ト成分の移動が抑制される。溶離液の供給量が減少するポイントよりも下流側の充填剤は、溶離液中の成分を吸着し、このような成分を含有しない溶離液が前記ボイントよりも下流側の管路に供給される。

図 1において、 1〜 1 2は充填剤の入った室（吸着室、カラム）であり、相互に直列に連結されている。 1 3は溶離液供給ライン、 1 4はエタストラクト抜き出しライン、 1 5は光学異性体含有液供給ライン、 1 6はラフィネート抜き出しライン、 1 7はリサイクルライン、 1 8はポンプを示す。

図 1で示した吸着室 1〜1 2と各ライン 1 3〜1 6の配置の状態では、吸着室 1〜 3で脱着操作、吸着室 4〜 6で濃縮操作、吸着室 7〜 9で吸着操作、吸着室 1 0〜 1 2で溶離液回収操作がそれぞれ行われている。このような擬似移動床では、一定時間間隔ごとにバルブ操作により各供給液及び抜き出しラインを、管路における液体の流れ方向に吸着室 1室分だけそれぞれ移動させる。

従って、次の吸着室の配置状態では、吸着室 2〜4で脱着操作、吸着室 5〜 7 で濃縮操作、吸着室 8〜1 0で吸着操作、吸着室 1 1 ~ 1で溶離液回収操作がそれぞれ行われるようになる。このような操作を順次行うことによって、光学異性体の混合物の分離処理が連続的に効率よく達成される。

図 1において、ェクストラクト抜き出しライン 1 4から採取されたェクストラクト溶液は、第一流下型薄膜蒸発器、第二流下型薄膜蒸発器、強制型薄膜蒸発器に順次供給することによって濃縮される。蒸発器からの蒸気は、例えば回収槽に収容し、蒸発装置によって組成を調整すると、溶離液として再利用することが可能となる。

前述した蒸発器によつて濃縮された濃縮液は貯留槽に送られ、再結晶や蒸留等の操作を行うと、前記濃縮液から目的の光学活性体が得られる。

なお、ラフィネート抜き出しライン 1 6から採取されたラフィネート溶液は、ラセミ化槽を介して混合溶液と混合されて、前記クロマトグラフィーによる分離に再度供しても良い。

なお、図 1の擬似移動床装置は、エタストラクト成分を製造目的物とする装置であるが、前述した蒸発器や蒸発装置等の機器をラフィネート抜き出しライン 1 6の下流側に接続すると、ラフイネ一ト成分を製造目的物とする装置を構成することが可能である。

また、図 1の擬似移動床装置は、エタストラクト抜き出しライン 1 4及びラフイネ一ト抜き出しライン 1 6の両方に、前記蒸発器や蒸発装置等の機器をそれぞれ設けると、エタストラタト成分及びラフィネート成分の両方を製造目的物とする装置を構成することが可能である。

また、図 2に示した吸着室 1〜8と各ライン 1 3〜1 6の配置の状態では、吸着室 1で溶離液回収操作、吸着室 2〜 5で吸着操作、吸着室 6〜 7で濃縮操作、吸着室 8で脱着操作がそれぞれ行われている。このような擬似移動床では、一定時間間隔ごとにバルブ操作により各供給液及ぴ抜き出しラインを、管路における液体の流れ方向に吸着室 1室分だけそれぞれ移動させる。

従って、次の吸着室の配置状態では、吸着室 2で脱着操作、吸着室 3〜 6で濃縮操作、吸着室 7 ~ 8で吸着操作、吸着室 1で溶離液回収操作がそれぞれ行われるようになる。このような操作を順次行うことによって、光学異性体の混合物の分離処理が連続的に効率よく達成される。

本発明の方法により、ジヒドロキシヘプテン酸エステルの少なくとも一方の光学異性体が効率よく分離することができ、大きな分取生産性をもつて光学活性なジヒドロキシヘプテン酸ェステルを得ることが可能となる。得られる光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルは、医薬品の有効成分として用いることができ。

また、前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルは、医薬品等として有用な下記一般式 ( 6 ) で表される化合物のいずれかの光学異性体や、下記一般式 ( 7 ) で表されるメバロノラクトン系化合物のいずれかの光学異性体を、酸化反応や脱水縮合反応等の公知の反応によって製造する際の中間体として用いることができる。

(式中、 A rは、置換基及び縮合環の少なくともいずれかを有していても良い、灰素環芳香族基又は複素環芳香族基を表し、 R，は、崁素数が 1 ~ 2 0の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、フ Xニル基、又は! ¾素数が 7 ~ 1 8のァラルキル基を表す。）

(式中、 A rは、置換基及び縮合環の少なくともいずれかを有していても良い、茶環芳香族基又は襖素璟芳香族基を表す。）

実施例

以下、本発明を実施例によって詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではなく合成例 1 [R*, S*— (E) ] — (±) — [3— (4一フルオロフェニル) - 1 - (1—メチノレエチル）一 1 H—ィンドール一 2—ィル] 一 3， 5—ジヒド口キシー 6—ヘプテン酸メチルの作製 >

(1) [R*， S*- (E) ] — (±) — [3- (4—フルオロフェ -ル) _ 1一（1 一メチノレエチノレ) 一 1H—インドールー 2—ィル] 一 3 , 5ージヒドロキシー 6 一ヘプテン酸ナトリゥム塩の抽出

下記構造式 (8) で示される [R*， S*— (E) ] — (±) — [3— （4—フルオロフェニル） — 1一（ 1一メチルェチノレ) - 1 H—ィンドール一 2—ィル] -3, 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸ナトリウム塩を、 NOV ART I S製の医薬品 L e s c o 1 (同社の登録商標）からクロ口ホルムカロ熱還流にて抽出した。得られた試料を¹ H— NMR、 COSY, ¹³C_NMR、 HMQC、及び I R によって測定し、得られたスぺクトルから抽出物を特定した。 iH— NMI^ ¹³ C一 NMR、及ぴ I Rで検出されたピークを以下に示す。

'H-NMR (DMSO- d₆) ： δ 1. 30 (m, 1 H， H2 1) , 1. 53 (m, 1 H, H2 1) , 1. 5 5 (d, J = 6. 9Hz, 6I-I, HI 6, HI 7) , 1. 8 9 (m, 1 H, H23) , 2. 09 (m, 1 H, H2 3) , 3. 73 (m, 1 H, H22) ， 4. 23 (m, 1 H， H20) , 4. 88 (m, 1H, H1 5) , 5. 70 (d d, J i= 1 6. 0Hz, J₂=5. 4Hz， 1 H， H I 9) ， 6. 59 (d, J = 15. 7Hz, 1H， H 18) , 7. 0— 7. 6 (m, 8H， H 2-H5, H 10, H 1 1 , H 13， H 14)

¹³C— NMR (DMSO-de) : 21. 5 (C 16, C 17) , 43. 7 (C 23) , 44. 5 (C 24) ， 47. 2 (C I O) , 65. 9 (C 22)， 69. 0 (C 20) ' 1 12. 1 (C 2) ， 115. 4 (C 1 1， C 13) , 116.

9 (C 18) ， 118 7 (C 5) , 119. 6 (C4) , 121. 6 (C3) ， 141. 8 (C 19) 1 59. 8 (C I 2) ， 16 1. 7 (C 8) (なお、 1 13. 0, 127. 7 134. 3, 及び 134. 8は四級炭素の C 1， C 6,

C 7, C 9)

I R (KB r d i s k) : 3000〜 2850 (w, C一 H伸縮）， 158 0 (s， C = 0伸縮） , 1 500 (m, 置換芳香族）， 1345 (m) , 122 0 ( s ) ， 1155 (m) , 1 105 (w) , 970 (w) , 835 (m, p置換芳香族）， 740 (m, 置換芳香族）

(2) [R*， S*— (E) ] — (±) — [3— (4—フルオロフェニル）ー1一（1 —メチノレエチノレ）一 1 H—ィンドール一 2—ィノレ] — 3 , 5ージヒドロキシ一 6 —ヘプテン酸ナトリゥム塩のメチルエステルイ匕

上記（1)で得た [R*， S*— (E) ] — （±) — [3— （4—フルオロフヱニル） - 1 - (1ーメチルェチル）一1H—インドール一 2—ィル] 一 3, 5—ジヒド口キシー 6—ヘプテン酸ナトリゥム塩を、ジメチルホノレムァミド溶液中で、炭酸リチウムを触媒として過剰のヨウ化メチルと反応させ、得られた油性成分をジェチルエーテルにより抽出した。得られた試料を¹ H— NMR、 MS、及び I Rで測定し、得られたスぺクトルから抽出物を特定した。 — NMR及び I Rで検出されたピークを以下に示す。

^-NMR (DMSO-de) ： δ 1. 41 (m， 1 H) ， 1. 59 (d, J =7. 0Hz, 6H) , 2. 30 (d d, J i= 14. 8Hz， J ₂= 8. 6 H z , 1 H) ， 2. 44 (d d, J i= 14. 8Hz, J ₂=4. 3Hz, 1 H) ， 3. 58 ( s， 31- I)， 3. 87 (m, 1 H)， 4. 24 (m, 1 H) , 4. 50 (m, 1H)， 4. 90 (m, 1 H) , 5. 70 (d d, J i= 16. 1Hz, J₂= 5. 8H z， 1 H) , 6. 6 9 (d, J = l 5. 7H z , 1 H) , 7. 0— 7. 6 (m, 8H)

I R (KB r d i s k) : 3 0 5 0〜 28 5 0 (w, C一 H伸縮）， 1 72 0 ( s， C = 0伸縮）， 1 54 5 (m) , 1 500 (m，置換芳香族）， 1 34 5 (m) , 1 2 20 ( s ) ， 1 1 5 5 (m) , 1 1 00 (w) ， 9 7 0 (w) , 8 3 5 (m, p置換芳香族）， 740 (m, 置換芳香族）

<合成例 2 [R*, S*— (E) ] 一（±) — [3— (4一フルオロフェエル) — 1一（1ーメチノレエチノレ）一 1 H—インドーノレ _ 2—ィノレ] - 3, 5—ジヒド口キシー 6—ヘプテン酸ェチルの作製 >

(1) [R*, S*- (E) ] — (±) — [3— (4一フルオロフェエル;) _ 1 _ (1 —メチルェチル） ― 1 H—ィンドール一 2—ィル] - 3, 5ージヒドロキシ一 6 —ヘプテン酸ナトリゥム塩の抽出

合成例 1の（1)と同じ手法により得た。

(2) [R*， S*- (E) ] — (±) — [3— （4—フルオロフェエル）一 1— (1 ーメチノレエチノレ）一 1 H—ィンドール一 2—ィノレ] 一 3， 5ージヒドロキシ一 6 —ヘプテン酸ナトリゥム塩のェチルエステル化

ョゥ化メチルをョゥ化工チルに代えて、合成例 1の（2)と同じ手法により得た。得られた試料を¹ H— NMR、 MS、及び I Rによって測定し、得られたスぺクトルから抽出物を特定した。 — NMR及び I Rで検出されたピークを以下に示す。 aH-NMR (DMSO- d e) δ 1. 1 6 ( t , J ι= 7. 1 H z , J ₂= 7. 1 H z , 3H) , 1. 5 8 ( d， J = 7. 0H z , 6 H) ， 2. 2 9 ( d d， J = 1 4. 8H z , J ₂= 8. 5Hz , 1 H) , 2. 4 2 (d d， J 1 4. 8H z , J =4. 5H z , 1 H) , 3. 4 (m， 1 H) , 3. 8 7 (m， 1 H) , 4. 0 2 (q, J = 7. 0H z , 2 H) , 4. 2 3 (m， 1 H) , 4. 76 (m， 1 H) ， 4. 90 (q, J = 7. 0H z , 1 H) ， 5. 7 2 (d d， J _t= 1 6. 1 H z , J 5. 9H z , 1 H) , 6. 6 2 (d, J = 1 5. 7H z, 1 H) ， 7. 0- 7. 7 (m, 8H) I R (KB r d i s k) : 3050〜2850 (w, C—H伸縮） , 172 0 ( s， C = 0伸縮）， 1550 (m) , 1505 (m, 置換芳香族）， 134 5 (m) , 1220 ( s ) ， 1 155 (m) ， 1 100 (w) , 970 (w) ,

835 (m， ρ置換芳香族）， 740 (m, 置換芳香族）く実施例 1 >

(1) セルローストリス (4ーィソプロピルフエ二ルカルバメート) の合成セルロース 50 gを乾燥ピリジンに分散させ、これに 4—イソプロピルフエ二ルイソシアナ一ト 310 g (セルロース中の水酸基に対して 2. 0当量）を加えて 24時間加熱還流した。反応物をメタノールに注ぎ、生じた白色固体を濾別し、減圧乾燥してセルローストリス（4—イソプロピルフエ二ルカルバメート）を得た。得られた生成物の炭素、水素、及び窒素元素の元素分析の結果を表 1に示す。

(2) 光学異性体分離用充填剤の作製

(1)で得られたセルローストリス（4一イソプロピルフエ二ルカルバメート）をァセトンに溶解させ、得られたァセトン溶液を粒径 20 mのシリカゲルへ均一に振りかけた後、溶剤を留去させることにより、セルローストリス（4ーィソプロピルフェエル力ルバメート）が担持された充填剤を得た。

(3) 光学異性体分離用カラムの作製

(2)で作製した充填剤を、長さ 25 cm、内径 0. 46 cmのステンレス製カラムにスラリ一充填法で充填し、光学異性体分離用カラムを作製した。

(4) [R*， S*- (E) ] _ (±) _ [3— (4—フルオロフェニル) — 1一（1 ーメチルェチル） -1H一^ ンドール一 2—ィル] -3, 5—ジヒドロキシー 6 一ヘプテン酸メチルの光学異性体の分離

前記 (3)で得られた光学異性体分離用カラムを用い、合成例 1で作製した [ R *， S*- (E) ] — (±) — [3— (4—フルオロフェニル）一1— (1ーメチルェチル）一 1H—インドールー 2—ィル] _3， 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸メチルについて液体クロマトグラフィーにより光学分割を行った。この光学分割における保持係数及び分離係数を表 2に、クロマトグラフを図 3に示す。なお、前記液体ク口マトグラフィ一は、測定装置として J AS C O社製 U V— 970を用い、下記の分析条件で行つた。なお、検出されたピークの成分の旋光性を旋光検出器 PDR_Ch i r a 1社製 Ad V a n c e d La s e r P o 1 a r i me t e rによって測定することにより、検出されたピークが光学異性体であることを確認することができる。また、前記保持係数 (k， ) は下記式 (1) 及び（2) 力算出し、前記分離係数（は下記式 (3) から算出した。ぐ分析条件 >

移動相：へキサン / 2—プロパノール =80Z 20 (ν/ν)

¾¾¾： 1. 0 m 1 / i n

カラム温度： 25°C

検出波長： 254 nm

k ι = ( 1— v o) Z v o

(ただし、 V ,は、各光学異性体のょリ早く溶出する溶莨成分の保持容量（保持時間）を示し、 v oはトリー t e r t—ブチルベンゼンの溶出容量（溶出時間）であるデッドボリューム（デッドタイム）を示す。）

k a = ( V a— V o) / v o

(ただし、 _{V 2}は、各光学異性体のより遅く溶出する溶質成分の保持容！：（保持時間）を示し、 V。はトリ一 t e r t—ブチルベンゼンの溶出容量（溶出時間）であるデッドボリューム（デッドタイム）を示す。） or = k 2' / k ι'

(ただし、，及び^ 2は、各光学異性体の溶質成分の保持容量（保持時間）を示し、 ^V

0はトリー ΐ β r ΐ一ブチルベンゼンの溶出容量（溶出時閬）であるデッドボリューム

(デッドイム）を示す _β )

<実施例 2>

(1) セルローストリス（4 _η_ブチルフエ二ルカルバメート）の合成

4ーィソプロピルフエ二ルイソシアナ一トの代わりに 4 _η—ブチルフエエルィソシアナ一トを使用した他は、実施例 1の（1)と同じ手法により合成し、セル口ーストリス (4— η_プチルフエ二ルカルバメート) を得た。得られた生成物の炭素、水素、及び窒素元素の元素分析の結果を表 1に示す。

(2) 光学異性体分離用充填剤の作製

(1)で得られたセルローストリス（4— η—ブチルフエ二ルカノレパメート）を使用した以外は、実施例 1の (2)と同じ手法により光学異性体分離用充填剤を作製した。

(3) 光学異性体分離用カラムの作製

(2)で得られた光学異性体分離用充填剤を使用した以外は、実施例 1の（3)と同じ手法により光学異性体分離用力ラムを作製した。

(4) [R*， S*— (E) ] _ (±) — [3— (4—フルオロフヱニル） -1- (1 ーメチルェチル） — 1 H—インドールー 2—ィル] _3， 5—ジヒドロキシ一 6 一ヘプテン酸メチルの光学異性体の分離

(3)で得られた光学異性体分離用カラムを用い、合成例 1で作製した [R*， S* 一（E) ] — （±) — [3— (4—フルオロフェニル）一1— (1—メチルェチノレ） _ 1 H—インドールー 2—ィル] —3, 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸メチルについて、実施例 1と同様に液体ク口マトグラフィ一により光学分割を行つた。この光学分割における保持係数及び分離係数を表 2に、クロマトグラフを図 4に示す。

<実施例 3〉

(1) セルローストリス ( 4—ェチルフエ二ルカルバメート) の合成

4—イソプロピルフエ-ルイソシアナートの代わりに 4ーェチノレフエニノレイソシアナ一トを使用した他は、実施例 1の（1)と同じ手法により合成し、セルローストリス ( 4 -ェチルフェ二ルカルバメート) を得た。得-られた生成物の炭素、水素、及び窒素元素の元素分析の結果を表 1に示す。

(2) 光学異性体分離用充填剤の作製

(1)で得られたセルローストリス（4—ェチルフエ-ルカルバメート）を使用した以外は、実施例 1の (2)と同じ手法により光学異性体分離用充填剤を作製した。

(3) 光学異性体分離用カラムの作製

(4) [R*, S *- (E) ] 一（±) — [ 3— （4一プノレオ口フエュノレ） _ 1一（1 ーメチルェチル) 一 i H—インドール一 2—ィノレ] - 3 , 5—ジヒドロキシ _ 6 —ヘプテン酸メチルの光学異性体の分離

(3)で得られた光学異性体分離用カラムを用い、合成例 1で作製した [R *， S * 一（E) ] — （±) — [ 3— （4—フルオロフェニル）一 1一（1ーメチルェチル）一 1 H—インドール一 2—ィル] —3， 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸メチルについて、実施例 1と同様に液体クロマトグラフィーにより光学分割を行つた。この光学分割における保持係数及び分離係数を表 2に、クロマトグラフを図 5に示す。ぐ実施例 4 >

(1) セルローストリス（4一 s e c—ブチルフエ二ルカルバメート）の合成 4一イソプロピノレフエ-ノレイソシアナートの代わりに 4一 s e cーブチノレフエ -ルイソシアナ一トを使用した他は、実施例 1の（1)と同じ手法により合成し、セルローストリス（4一 s e c—ブチルフエ二ルカルバメート）を得た。得られた生成物の炭素、水素、及び窒素元素の元素分析の結果を表 1に示す。

(2) 光学異性体分離用充填剤の作製

(1)で得られたセノレローストリス ( 4一 s e c—プチノレフエ二ルカノレバメート）を使用した以外は、実施例 1の (2)と同じ手法により光学異性体分離用充填剤を作製した。

(3) 光学異性体分離用カラムの作製

(2)で得られた光学異性体分離用充填剤を使用した以外は、実施例 1の（3)と同じ手法により作製した。

(4) [R *, S *— （E ) ] — （±) — [ 3— ( 4—フルオロフ工ニル） _ 1ー（1 —メチルェチル） — i H—インドール一 2—ィル] 一 3 , 5—ジヒドロキシー 6 —ヘプテン酸メチルの光学異性体の分離

(3)で得られた光学異性体分離用カラムを用い、合成例 1で作製した [R *， S * _ ( E) ] — (±) _ [ 3— （4一フルオロフヱ-ル）一 1— ( 1—メチルェチル）一 1 H—インドールー 2—ィル] —3 , 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸メチルについて、実施例 1と同様に液体クロマトグラフィーにより光学分割を行つた。この光学分割における保持係数及び分離係数を表 2に、クロマトグラフを図 6に示す。ぐ実施例 5 >

(1) セルローストリス ( 4一イソプチルフエ二ルカルバメート) の合成

4 _イソプロピルフェ二ルイソシァナートの代わりに 4一イソプチルフェ二ノレィソシアナ一トを使用した他は、実施例 1の（1)と同じ手法により合成し、セル口ーストリス（4—イソブチルフエ二ルカルバメート）を得た。得られた生成物の炭素、水素、及び窒素元素の元素分析の結果を表 1に示す。

(2) 光学異性体分離用充填剤の作製

(1)で得られたセルローストリス (4ーィソブチルフエ二ルカルバメート) を使用した以外は、実施例 1の (2)と同じ手法により光学異性体分離用充填剤を作製した。

(3) 光学異性体分離用カラムの作製

(4) [R*, S*_ (E) ] — （±) _ [3— (4—フルオロフェ-ル） - 1- (1 —メチルェチル）一 1 H—インドール一 2—ィル] -3, 5—ジヒドロキシ _6 —ヘプテン酸メチルの光学異性体の分離

(3)で得られた光学異性体分離用カラムを用い、合成例 1で作製した [R*， S* 一（E) ] _ (±) — [3— （4—フルオロフェニル） - 1 - (1—メチルェチル）一 1H—インドール一 2—ィル] —3， 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸メチルについて、実施例 1と同様に液体ク口マトグラフィ一により光学分割を行つた。この光学分割における保持係数及び分離係数を表 2に、クロマトグラフを図 7に示す。合成したポリマ一の元素分析

注轵：カツコ内は理論値ぐ比較例 1>

セルローストリス (4一メチルフエ二ルカルバメート) がシリ力ゲルに担持されている充填剤であるダイセル化学工業（株）製光学異性体分離用充填剤 CH I RALCEL OG (ダイセル化学工業社の登録商標、粒径 20 μ m) を、長さ 25。1!1、内径0.46 c ΐϋのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、光学異性体分離用カラムを作製した。

得られた前記光学異性体分離用カラムを用い、合成例 1で作製した [R*， S* 一（E) ] — (±) — [3— （4—フルオロフェ -ル） — 1— (1ーメチルェチノレ）一 1H—インドール一 2—ィル] —3, 5—ジヒドロキシー 6—ヘプテン酸メチルについて、実施例 1と同様に液体クロマトグラフィーにより光学分割を行つた。この光学分割における保持係数及び分離係数を表 2に、クロマトグラフを図 8に示す。

<比較例 2>

セノレローストリス（4一クロ口フエ；^レ力レバメート）がシリカゲノレに担持されている充填剤であるダイセル化学工業（株）製光学異性体分離用充填剤 CH I RALCEL OF (ダイセル化学工業社の登録商標、粒径 20μιη) を、長さ 25 c_m ¾0.46 cmのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、光学異性体分離用力ラムを作製した。

得られた前記光学異性体分離用カラムを用い、合成例 1で作製した [R*， S* 一（E) ] — (±) — [3— (4—フルオロフヱ-ル）一1— (1—メチルェチノレ）一 1 H—インドーノレ一 2—ィノレ] -3, 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸メチノレについて、実施例 1と同様に液体ク口マトグラフィ一により光学分割を行つた。この光学分割における保持係数及び分離係数を表 2に、クロマトグラフを図 9に示す。表 2 [FT, S*— (E) ] — (±) — [3— （4一フルオロフェニル）一 1— (1一メチルェチル）一 1 H—インド一ルー 2—^ fル] —3, 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプ丁ン酸チルの光学分割の結果 '

<実施例 6〜10>

合成例 1で作製した [R*， S*— (E) ] 一（土）一 [3— （4—フルオロフェニル）一1— (1—メチルェチル）一 1H— ^ ンドーノレ一 2—ィル] 一 3， 5 ージヒドロキシー 6 _ヘプテン酸メチルに代えて、合成例 2で作製した [R*， S *- (E) ] _ (±) — [3— (4—フルオロフェニル） - 1 - (1ーメチルェチル）一 1 H—インドーノレ一 2—イスレ] 一 3， 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸ェチルの光学異性体の分離を、実施例 1〜実施例 5と同様に行った。これらの光学分割における保持係数及び分離係数を表 3に、クロマトグラフを図 10〜図 1 4にそれぞれ示す。

<比較例 3及び 4〉

合成例 1で作製した [R*， S*_ (E) ] — (±) — [3— （4—フルオロフェ -ル） - 1 - (1ーメチノレエチル）一 1H—インドール一 2 fル] —3， 5 —ジヒドロキシー ₆—ヘプテン酸メチルに代えて、合成例 2で作製した [R*， S *- (E) ] — （±) — [3— （4一フルオロフェニル） - 1 - (1—メチルェチル）一1H—インドール一 2—ィノレ] —3， 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸ェチルの光学異性体の分離を、比較例 1及び比較例 2と同様に行った。これらの光学分割における保持係数及び分離係数を表 3に、クロマトダラフを図 15及び図 16にそれぞれ示す。表 3 [R*, S*- (E) ] - (±) - [3— （4一フルオロフェニル）一 1一（1一メチルェチル）一 1 H—インドールー 2—ィル]一 3, 5—ジヒドロキシ一 6—へプ亍ン酸ェテルの光学分割の結桊

ぐ実施例 11 >

実施例 1の (2)で得られた光学異性体分離用充填剤を内径 1. 0 cm、長さ 10 cmのステンレス製カラム 8本にスラリ一充填法で充填し、小型擬似移動床式装置に取り付け、合成例 1で作製した [R*， S*- (E) ] — (±) _ [3— (4 —フ /レオ口フエ二ノレ）一1— (1—メチノレエチノレ）一 iH—インドーノレ一 2—ィル] — 3 , 5—ジヒドロキシ _ 6—ヘプテン酸メチルの分取を行つた。小型擬似移動床式装置の操作条件、及び得られたラフイネ一ト成分の生産性を表 4に示す。また、前記小型擬似移動床式装置による [R*， S*- (E) ] — (±) — [3 ― (4—フノレォロフエ-ノレ） _1一（1—メチノレエチノレ）一 1H—インドーノレ一 2—ィル] 一 3, 5—ジヒドロキシ _ 6—ヘプテン酸メチルの分取条件を以下に示す。く分取条件〉

移動相：へキサンノ 2—プロパノール =80/20 (v/v)

力ラム温度： 40 °C

検出波長： 254 nm

混合溶液の濃度： 5 g/L (溶媒は移動相と同じ）

<実施例 12〜実施例 15 >

実施例 2〜実施例 5の（2)で得られた光学異性体分離用充填剤のそれぞれを使用した以外は、実施例 11と同様に、小型擬似移動床式装置による [R*， S*— (E) ] 一（±) — [ 3— （4一フルオロフヱノレ）ー 1一（1ーメチルェチル） — 1 H—インドールー 2—ィル] 一 3 , 5—ジヒドロキシ一 6—ヘプテン酸メチルの分取を行った。小型擬似移動床式装置の操作条件、及び得られたラフイネ一ト成分の生産性を表 4に示す。

<比較例 5〉

比較例 2で用意した光学異性体分離用充填剤を使用した以外は、実施例 1 1と同様に、小型擬似移動床式装置による [R*， S *— (E) ] _ (±) — [ 3— ( 4 —フノレォロフエ-ノレ）一1— ( 1—メチノレエチノレ）一 1 H—インドーノレ一 2—ィル] 一 3， 5—ジヒドロキシー 6—ヘプテン酸メチルの分取を行った。小型擬似移動床式装置の操作条件、及び得られたラフイネ一ト成分の生産性を表 4に示す。なお、比較例 1で用意した光学異性体分離用充填剤は、単カラムによる前記液体ク口マトグラフィ一において分離が不十分であったため、前記光学異性体分離用充填剤については、前記小型擬似移動床式装置への適用を実施しなかった。表 4

*：光学巽性体分離用充填剤 1 kg当たリが 1 日に処理可能なラセミ体の質量 <実施例 1 6 >

実施例 1の (2)で得られた光学異性体分離用充填剤を実施例 1 1と同様に充填した小型擬似移動床式装置を用いて、合成例 2で作製した [R*， S *- (E) ] 一 (土) 一 [ 3 - ( 4—フルオロフェエル）一 1一 ( 1ーメチルェチノレ) 一 1 H 一インドール一 2—ィル] 一 3， 5—ジヒドロキシー 6—ヘプテン酸ェチルの分取を行った。小型擬似移動床式装置の操作条件及び得られたラフイネ一ト成分の生産性を表 5に示す。

<実施例 1 7〜実施例 2 0 >

実施例 2〜実施例 5の (2)で得られた光学異性体分離用充填剤のそれぞれを、実施例 1 2〜実施例 1 5と同様に充填した小型擬似移動床式装置をそれぞれ用いて、

[R*， S *— (E) ] — (±) — [ 3— ( 4—フルオロフヱ-ル）一 1— ( 1— メチルェチル） —i H—インドール一 2—ィル] 一 3， 5—ジヒドロキシー 6— ヘプテン酸ェチルの分取を行つた。小型擬似移動床式装置の操作条件及び得られたラフィネート成分の生産性を表 5に示す。

<比較例 6 >

比較例 2で用意した光学異性体分離用充填剤を実施例 1 6と同様に充填した小型擬似移動床式装置を用いて、 [R *, S *— ( E) ] — (±) — [ 3— （4ーフルオロフェニル）ー 1一（1ーメチルェチル）一 1 H—インドールー 2—ィル] — 3， 5—ジヒドロキシー 6—へプテン酸ェチルの分取を行つた。小型擬似移動床式装置の操作条件及び得られたラフイネ一ト成分の生産性を表 5に示す。

なお、比較例 1で用意した光学異性体分離用充填剤は、単カラムによる前記液体ク口マトグラフィ一において分離が不十分であったため、前記光学異†生体分離用充填剤については、前記小型擬似移動床式装置への適用を実施しなかった。表 5

*：光学異性体分離用充填剤 i kg当たりが 1 日に処理可能なラセミ体の莨量

産業上の利用可能性

本発明により、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルをより一層明確に分離することができ、また、より一層大きな分取生産性をもって製造することができる。

Claims

請求の範囲

1 . 下記一般式 ( 1 ) で表されるジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体の混合物を含有する： N溶—— 液から、担体と、この担体に担持された多糖誘導体とからなる充填剤を使用する体一 =ク口マトグラフィ一により、光学活性な前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルを分離する方法であって、

前記多糖誘導体は、多糖の水酸基及びァミノ基の水素原子の一部もしくは全部が、下記一般式 ( 2 ) で表される置換基及び一般式（3 ) で表される置換基の一種又は二種以上で置換されていることを特徴とする方法。

(式中、 A rは、置換基及び縮合環の少なくともいずれかを有していても良い、炭素環芳香族基又は複素琛芳香族基を表し、 R，は、炭素数が 1〜 2 0の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、フ: L二ル基、又は崁素数が 7〜 1 8のァラルキル基を表す。〉

2

(式中、 R ₂は、 |¾素数が 2〜 8の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を表す。）

(式中、 R ₂は、炭素数が 2 ~ 8の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を表す。）

2 . 前記多糖誘導体は、セルロース又はアミロースであることを特徴とする請求項 1記載の方法。

3 . 前記多糖誘導体の前記アルキル基は、前記一般式（2 ) 又は前記一般式（3 ) におけるフエニル基の 4位の炭素原子に結合していることを特徴とする請求項 1 又は 2に記載の方法。

4 . 前記多糖誘導体の前記アルキル基は、ェチル基、イソプロピル基、 n—ブチル基、ィソブチル基、又は s e c—ブチル基であることを特徴とする請求項 3記載の方法。

5 . 前記液体ク口マトグラフィ一は、擬似移動床式クロマトグラフィーであることを特徴とする請求項 1〜 4のいずれか一項に記載の方法。