EXTRACTO LIQUIDO DE AGAVES ANTICANCERÍGENO Y/O
RECONSTITUYENTE CELULAR Y GLANDULAR Y PROCEDIMIENTO DE
OBSÜESCIQ-ff DI3L BCTSE≤O
C -3PO DE . τw Εciow La presente invención pertenece al área de la farmacología y se relaciona con un extracto liquido de agaves anticancerigeno y/o reconstituyente celular y glandular y el procedimiento de fabricación del mismo.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Los agaves y los cactos pueden sobrevivir a toda clase de ambientes limitativos, desde los desiertos cálidos y secos hasta las montañas nevadas. Los agaves y los cactos han sido parte de la dieta humana cuando menos desde hace 9,000 años .
A nivel mundial se recolectan, mejoran y comercializan como ornamentales muchas especies de cactos, ya que requieren pocos cuidados y pueden producir flores vistosas. En más de 25 paises se cultivan otras especies de cactos por sus frutos; y varias especies de agaves se usan para producir bebidas. En casi todos los casos; estas plantas pueden tolerar prolongados periodos de sequia. La tolerancia a la sequia de los agaves y los cactos es influenciada por su morfología, anatomía y fisiología.
Los agaves pertenecen al género Agave, que
significa noble (del griego agaue) , fue descrito por primera vez por el botánico sueco y padre de la taxonomía moderna, Carlos Lineo. En 1753, él nombró la primera especie Agave americana . Agave es el género más importante de la familia monocotiledónea Agavaceae y tiene 136 especies. La palabra cacto, género también descrito por Lineo, es ahora el nombre común de la familia dicotiledónea Cactaceae, que cuenta con alrededor de 1600 especies en 122 géneros. El nombre cactus se deriva del griego kaktos que se aplica a una extraña planta espinosa que se encuentra en el sur de Europa y en el norte de África.
Los extractos de varios cactos y agaves cieñen una amplia gama de aplicaciones médicas. Los jugos extraídos de los tallos jóvenes macerados de Opuntia y Lophocereus actualmente tienen una especial importancia ya que se usan como agentes antidiabéticos, para curar úlceras estomacales y enfermedades renales, reumatismo y cáncer.
Los cactos al igual que los agaves contienen esferoides que pueden actuar como hormonas en los humanos y en los animales.
La investigación actual sobre las cactáceas y las agavaceas ha arrojado nueva luz sobre el amplio espectro de utilidad de estas en las ciencias médicas, como se expone a continuación. La Solicitud de Patente WO 93/11779 proporciona un medicamento de un extracto de cacto preparado de Opun tia
Strepacantha que inhibe la ' replicación de virus intracelulares y que inactiva virus extracelulares del grupc del virus del herpes simple, virus de la influenza del grupo mixovirus, virus sincitial respiratorio del grupo parami xovirus y virus de la inmunodeficiencia humana el grupo lentivirus . Los componentes inhibidores del extracto son de naturaleza proteinica y residen principalmente en la pared del cacto (Park S. Nobel; Remarkable Agaves and Cacti, Chapters 1, 2 and 3, First Edition, Oxford University Press Inc., 1998) .
En la Solicitud de' Patente Española P98002287, ahora Patente Española No. 551.779 proporciona un procedimiento de fabricación de un producto liquido para depurar la sangre, reductor de cálculos renales y del ácido úrico, el cual contiene 11.5% en peso de Opuntia ficus indica y la solicitud de Patente Española P0551779 proporciona un procedimiento de obtención de sustancias medicinales naturales que contiene, entre otros componentes combinados, flores' secas de Opun tia Ficus indica (nopal tunero) para el tratamiento de úlceras estomacales. La Patente Estadounidense No. 6,365,198 se relaciona con una preparación farmacéutica para el tratamiento de úlceras gastrointestinales y hemorroides en humanos y animales y un método de preparación de esta composición. La composición preferida consiste de un extracto alcohólico de Huangquin, Huanglian, Hungbo, Optunia
y Pheretrima, disuelto en aceite vegetal, de donde el alcohol es removido esencialmente por evaporación. La composición es entonces empaquetada en cápsulas de gelatina blanda para administración oral o mezclada para su administración oral o mezclada con cera para producir un ungüento adecuado para administración rectal. La Patente Estadounidense No. 6,447,820 se relaciona con composiciones farmacéuticas para la prevención y tratamiento de cicatrices en la piel ya existentes y nuevas en humanos y animales utilizando una aplicación tópica que contiene extractos alcohólicos de Cortex Phellodendri y Opuntia ficus indica en una combinación especifica. La WO 99/13892 proporciona una composición farmacéutica comprendida de extractos de plantas de aplicación en medicina veterinaria para tratar la mastitis en animales bovinos, ovinos y caprinos y su procedimiento de obtención La composición comprende jugo o gel de Aloe vera (sábila) y un extracto acuoso de Agave a trovirens (maguey) entre sus constituyentes. La Patente Estadounidense No. 3,860,710 se relaciona con un método para inhibir la lisis viral en sistemas flora y fauna no humanos con la fracción no citotóxica, obtenido por filtración en gel y la elusión posterior de una fracción primaria correspondiente al tercer pico de la separación cromatográfica determinado espectrométricamente de un extracto de Opun tia ficus indica dializada contra agua. La descripción también se relaciona
:on un producto activo no tóxico y un método para obtener el mismo. La Solicitud de Patente Española No. 2000011691, proporciona una pomada de uso tópico aplicable para la curación de infecciones cutáneas que contiene un 25% de Aloe vera (Sábila) . La Patente Estadounidense No. 6,309,675 se relaciona con una composición farmacéutica que contiene como constituyentes plantaina y Aloe vera útil en el tratamiento de los síntomas de la artritis y otras aflicciones. La composición terapéutica puede tener únicamente plantaina y Aloe vera como constituyentes, donde el contenido de plantaina esta en un intervalo de aproximadamente el 57% al 61% en peso de la composición terapéutica y, el contenido de Aloe vera está en el intervalo de aproximadamente el 39% al 43% en peso de la composición terapéutica. La composición terapéutica también puede comprender otros constituyentes en proporciones especificas. Las Solicitudes de Patente Españolas Nos. NIP95000009 y MXP9503521 proporcionan un composición y subcomposiciones de la misma, constituidas por grupos de moléculas obtenidas de una especie valorable, a partir de un extracto natural de una planta de la familia de las cactáceas, como por ejemplo, la porción aérea de la Opuntia ova ta f Opuntia ingenescens, Opuntia miquelli y otras, sin ser excluyente de otras porciones y plantas, con actividades terapéuticas antiinflamatoria, antipruriginosa y antitérmica local, en seres humanos y animales. La Patente
Japonesa No. JP11049687 proporciona una preparación cutánea que contiene un extracto de Agave americana L . r Agave sisalana Perr . , A. Rígida Mili , etc . , para uso externo que estimula la actividad de la lipasa, estimula la retención de humedad, inhibe de la producción de melamina e inhibe la dermatitis de contacto. La composición contiene 0.1-60 % en peso del extracto y es efectiva para la inhibición de la secreción de grasa de la piel y el cuero cabelludo, para tratar enfermedades de la piel grasosa (por ejemplo, acné y caspa), manos arrugadas, comezón, piel seca, etc. La Patente CN1151303 revela una nueva tecnología para extraer el principio activo para reducir el azúcar en sangre y los nutrientes de un' polvo crudo de Craussuia poitulacea y el uso avanzado de ese proceso para romper paredes celulares con baja concentración de alcohol, ondas ultrasónica y congelamiento y descongelamiento rápidos, y extracción acuosa múltiples veces para incrementar la calidad y el rendimiento. La Patente RU2131259, se relaciona con un fármaco homeopático, el "CORDALON-ARN", el cual contiene, entre otros componentes, Cactus grandifloris , que tiene efecto sobre el sistema nervioso central, músculos y capilares, que mejora la función del músculo liso cruzado, nodulos linfáticos y tejidos glandulares, debido que contrarresta los síntomas de la insuficiencia cardiaca. La Patente RU2162332 se relaciona con un fármaco homeopático que contiene cacto entre sus
componentes para el tratamiento de pacientes con enfermedad carαiaca isquémica, la etapa inicial de insuficiencia cardiaca, hipertensión transitoria, miocardiodistrofia, ritmo aberrante, cardioneurosis en una terapia compleja. La Patente CN1260183 se relaciona con un método de preparación de una preparación de granulos de cacto que incluye; secar y moler un extracto de cacto hasta un material pulverizado, el cual se formula en tabletas para curar la diabetes. La Solicitud Patente Internacional WO 98/29128 se relaciona con sustancias de origen vegetal las cuales tienen actividad biológica no tóxica, extraídas de plantas con metabolismo CAM, como las plantas cactáceas de las familias Crassulacees y Saxifragasees . La invención también se relaciona con el método para obtener esas sustancias, asi como las composiciones que las contienen. Las composiciones están diseñadas para acelerar y amplificar la síntesis de proteínas del choque térmico de células de seres vivos in vivo o in vi tro . La Solicitud de Patente Europea EP 0 706 797 se relaciona con formulaciones terapéuticas para el tratamiento de la inflamación, dolor, prurito e hipertemia local "basadas en coiϊiposiciones de carbohidratos/aminas obtenidas de la familia Cactaceae . La Solicitud de Patente Europea EP 0 770 394 se relaciona con composiciones químicas para el tratamiento de la mastitis bovina, composiciones las cuales son combinaciones de cuatro componentes, entre los que figura
el jugo de Aloe vera , que forman una dosis la cual es inyectada en la porción infectada con mastitis de una ubre de vaca para un mínimo de dos dosis por día durante al menos tres días, lo que da como resultado la cura de la mastitis. Como puede apreciarse en la técnica anterior no hace mención alguna de un extracto combinado de Agave americana y Agave a trovirens que inhiba principalmente la proliferación de lineas celulares de cáncer de colon, cáncer de mama, fribroblastoma, con potencial de acción inhibidora del virus sincitial respiratorio, virus de la inmunodeficiencia humana del grupo de los lentivirus, bacterias de los géneros • Staphylococcus , Streptococcus y Pneumococcus . La presente invención proporciona ese extracto para uso en humanos y veterinario en forma de extracto en si, infusión y té para uso oral y/o tópico en humanos y animales, para tratar el asma, sinusitis, amigdalitis, congestión nasal, infecciones micóticas y cutáneas, dolor de muelas y parásitos intestinales.
SUMARIO DE LA INVENCIÓN
La presente invención tiene como uno de sus objetos principales la .inhibición de la proliferación de líneas celulares del cáncer de colon, del cáncer de mama y fibroblastoma . Un objeto de la invención es proporcionar un métoαc
para la obtención de un extracto combinado de Agave americana y Agave atrovirens que inhibe la proliferación de líneas celulares de cáncer de colon, cáncer de mama, fribroblastoma, con potencial de acción inhibidora del virus sincitial respiratorio, virus de la inmunodeficiencia humana del grupo de los lentivirus, bacterias de los géneros Staphylococcus , Streptococcus y Pneumococcus .
La presente invención tiene como ' otro de sus objetos principales la reconstitución de las células y glándulas afectadas por el cáncer de colon, fribroblastoma y mama, respectivamente.
La presente invención tiene como uno más de sus objetos principales la inhibición del virus sincitial respiratorio del subgrupo Mixovirvs, - agente común de epidemias de bronquiolitis aguda, de broncóneumonía y del catarro común en niños pequeños; virus de la ínmunodeficiéncia humana del grupo de los len tivirus .
Otiro objeto de la invención es erradicar las bacterias de los géneros Staphylococcus , Streptococcus y Pneumococcus, causantes del enfisema pulmonar; asi como el Mycobacterium tuberculosis, causante del enfisema pulmonar.
Los objetos anteriores se logran con los efectos inhibidores de un extracto de Agave americana y Agave a trovirens, el cual es de naturaleza proteínica y que se' obtiene principalmente de la cutícula y salvia de las pencas
hojas, más que de la pared de las plantas agaváceas .
Otro objeto más de la presente invención proporciona un extracto combinado de Agave americana y Agave atrovirens para uso en humanos y veterinario preferiblemente en forma de extracto en si, infusión y té, aunque ' también se contemplan dentro del alcance de la presente invención las formas farmacéuticas del estado de la técnica, como los son las formas orales: tabletas comprimidas, patillas, pildoras, grageas, tabletas en forma de cápsulas (caplets), tabletas de liberación prolongada, tabletas de liberación sostenida, trociscos, cápsulas de gelatina dura, cápsulas de gelatina blanda, granulos, polvos, soluciones, emulsiones, elíxires, jarabes, etc.; parenterales : soluciones, suspensiones y emulsiones inyectables estériles, acuosas y no acuosas, supositorios, óvulos, pesarios, enemas, etc.; tópicas: cremas, ungüentos, geles, pomadas, jaleas, cataplasmas, parches, etc.; inhalantes; rocíos, polvos, gotas, etc.; así como y las formas farmacéuticas para administración ótica, oftálmica y transdérmica las cuales pueden ser preparadas de la forma y en las cantidades y con los vehículos, portadores y excipientes convencionales en la técnica. Véase por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a Edición, Mac Publ . , Easton y Goodman & Gilman, The Pharmacologycal Basis of Therapeutics (Séptima Edición, 1985), ambas de ] as cuales se incorpora aquí como referencia.
Dtro objeto más de la invención es proporcionar un método para obtener extracto combinado de Agave americana y Agave a trovirens, para uso en humanos y veterinario, que inhibe la proliferación de líneas celulares de cáncer de colon, cáncer de mama, fribroblastoma, con potencial de acción inhibidora del virus sincitial respiratorio, virus de la inmunodeficiencia humana del grupo de los lentivirus, bacterias de los géneros Staphylococcus , Streptococcus y Pneumococcus . Un objeto aún más de la presente invención es un extracto o infusión para uso oral y/o tópico en humanos y animales, para tratar el asma, sinusitis, amigdalitis, congestión nasal, infecciones micóticas y cutáneas, dolor de muelas y parásitos intestinales.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
En un primer aspecto la presente invención se relaciona con un método de obtención de un extracto mezclado de Agave americana y Agave a trcvirens . Para esta descripción se entiende que el extracto combinado se obtiene mezclando dos extractos, uno de Agave americana y otro de Agave a trovirens, ambos obtenidos por un proceso similar y de manera simultánea, por lo que, para fines prácticos, únicamente será descrito un método de obtención del extracto con referencia a uno de sus
componentes: el extracto de Agave americana , al que se hará referencia en lo sucesivo como extracto A.
El mejor método preferido hasta ahora para llevar a cabo la obtención del extracto de la presente invención consiste de los siguientes pasos:
(1) . Obtención el extracto A (Αga,vta a az±cana.)
El extracto A se obtiene a través de los siguientes subpasos : (al) Cosechar las hojas o pencas de agave de 4 a 15 años de edad, de manera más preferible de 6 a 13 años de edad y, de manera aún más preferible de 8 a 11 años de edad, lo anterior sobre la base de la etapa de maduración óptima de agave para los fines de la presente invención. (bl) Someter a cocción las pencas de 30 a 180 minutos, de manera más preferible de 60 a 150 minutos y, de manera más preferible aún, de 90 a 120 minutos a una temperatura de 70 a 100WC, de manera más preferible de 75 a 95°C y, de manera aún más preferible de 80 a 90°C con agua potable en una relación del peso de las pencas al volumen de agua de 2:1, de manera más preferible de 3:1 y, de manera aún más preferible, de 4:1.
(el) Triturar las hojas o pencas completas con una trituradora del tipo de tornillo sin fin, siguiendo el étoαo de la Patente Estadounidense No. 2,896,267 de Gustav J.
Nord., et al., titulada "Fabrication of Products From Agave Lechuguilla", la cual se incorpora aquí como referencia en su totalidad, hasta obtener un líquido verde grisáceo con sólidos en suspensión.. (di) Filtrar sobre un tamiz nylon de malla de 100 orificios por cm' y ejerciendo presión suficiente sobre la pasta hasta que deje de fluir filtrado. El filtrado que se obtiene es de color verde grisáceo y de consistencia muy viscosa con un contenido de sólidos de aproximadamente el 5% en volumen, sobre la base del volumen total de la mezcla. (2) Obtención del Extracto B
El extracto B {Agave a trovirens) , se obtiene por el mismo método descrito anteriormente para el extracto A, cor lo cual se obviará. (3) Obtención del extracto combinado
(a3) Mezclar el Extracto A y el Extracto B de la siguiente manera 90% de Extracto A + 10% de Extracto B, de manera más preferible 70% de Extracto A + 30% de Extracto B, de manera aún más preferible 50% de Extracto A + 50% de Extracto B, pero de manera aún más preferible 30% de Extracto A + 70% de Extracto B y, de manera aún más preferible 10% de Extracto A + 90 % de extracto B. Todos los porcentajes están en volumen, a menos que se indique otro cosa; y
(b3) Mezclar el extracto combinado del paso (3) con 10% a 20% de etanol puro al 96%, de manera más preferible αe
~ a 10% de etanol puro al 96% y, de manera más preferible aún αe 1 a 5% de etanol puro al 96%.
La mezcla resultante se almacena en frascos de vidrio color ámbar para protegerlo contra los efectos degradantes de la luz, ya que el extracto es fotosensible.
Los métodos de obtención de la infusión y té no se describen con detalle aquí por ser ampliamente conocidos en la técnica .
Actividad del Extracto Crnihinado de Agave americana y Agave atjxtv±xens
Contra Lineas Celulares de Cáncer y Fibroblastos I-38
La mezcla resultante del paso procedimiento anterior fue sometida a pruebas de inhibición de proliferación celular en las líneas celulares OM-1, Coló 320DM, HT-29 y SW480 de cáncer de colon; MCF-7 y ZR-75-1 de cáncer de mama; y I-38 de f ibroblastoma in vitro, de acuerdo a los métodos y protocolos conocidos por aquellos expertos en la técnica, véanse, por ejemplo Biigny, R. Leguay, J. J. (1978) Technics of cell cultures, Meth. Enzymol . 148:3-16; Sambrook; Fritsch; Maniatis. Molecular Cloning: A laboratory menual, Second Edition, 1989, obteniéndose los resultados que se exponen a continuación en la Tabla.
TABLA Actividad del Extracto Combinado de Agave avπer±cana. y Agave atrαvirens
Contra T.í n as Celulares de Cáncer y Fibroblastos WI-38
Liϊieas Celulares d© C ncer CI 50 C so
O -1 (Cáncer de colon) 1 : 246 1 : 59 1 : 223 1 : 10
Coló 320 DM (Cáncer de colon) 1:282 1:10 HT-29 (Cáncer de colon) 1:286 1:90
SW480 (Cáncer de colon) 1:256 1:93 MCF-7 (Cáncer de mama) 1:653 1:80
ZR-75-1 (Cáncer de mama) 1:470 1:140 1:308 1:102
WI-38 ( Fibroblastoma normal! 1:162 1:10
(72% de inhibición)
extracto combinado se " obtiene una inhibición de la proliferación celular (CI90) de las líneas citadas del 72c Sin embargo también se contempló dentro del alcance de la presente invención que el extracto combinado puede inducir uno o más efectos de inhibición de la proliferación celular, inducción de la diferenciación celular, inducción de apoptosis (muerte celular programada) , fragmentación de ADN o bloque del ciclo celular. Como consecuencia, el extracto combinado de la presente invención tiene un amplio intervalo
de actividad contra células cancerígenas y, en consecuencia, es efectivo en el tratamiento, profilaxis, alivio, defensa contra y/o prevención de cánceres, incluyendo la hipertrofia prostética benigna, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer uterino, leucemia, cáncer ovárico, cáncer endometrial, cáncer de colon, cáncer testicular, enfermedad de Hodgkin, linfoma, rabdosarcoma, neuroblastoma, cáncer pancreático, cáncer pulmonar, tumor cerebral, cáncer de piel, cáncer gástrico, cáncer oral, cáncer hepático, cáncer de laringe, cáncer de vejiga, cáncer tiroide y carcinoma nasofaríngeo.
La dosis, forma y via de administración del extracto dependerán de factores, como: la enfermedad, síndrome, trastorno o padecimiento específico que esté siendo tratado; así como la etapa de avance en que se encuentre el mismo, el sexo, la edad, peso y condiciones generales de salud del paciente y el juicio profesional del médico y/o farmacéutico involucrado (s) en el cuidado del (la) paciente. No obstante se recomienda una dosis general en el intervalo de 10 a 20 mi de extracto combinado y de 20 a 50 gotas de infusión para adultos y, de 5 a 20 mi de extracto combinado y de 10 a 30 gotas de infusión para niños.
Aunque en lo anterior ha sido descrita la forma más preferida de la invención conocida hasta ahora, también se consideran dentro del alcance de la presente invención tocias aquellas modificaciones obvias a la presente invención, que a
cualquier experto en la técnica pudieran ocurrírsele, siendo limitada ésta únicamente por el contenido de las reivindicaciones anexas.
Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por el solicitante para llevar a cabo la presente invención, es que resulta claro de la presente descripción de la invención.