WO2004000308A1 - 脈管病に関する光物理化学的・診断方法 - Google Patents

脈管病に関する光物理化学的・診断方法 Download PDF

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Isao Sakata
Susumu Nakajima
Yoshinori Nakae
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Hamamatsu Photonics K.K.
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Definitions

  • the present invention relates to a photophysicochemical diagnosis and treatment method for vascular disease (PDT: Pho to dynamic Ther) comprising an iminochlorin aspartic acid derivative or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • PDT Pho to dynamic Ther
  • apy for the treatment of rheumatism, inflammatory keratosis, sentinel lymph nodes (sentine 1 lymph node: hereinafter referred to as SN), and diagnostic agents for cancer metastasis.
  • PDT photophysicochemical diagnosis and treatment
  • a certain porphyrin derivative is administered by intravenous injection, etc., and selectively accumulates in cancer (tumor) tissues.
  • This treatment is a destructive treatment, and utilizes two properties of the porphyrin derivative: selective accumulation in cancer tissue and photosensitization.
  • the present inventors have been diligently studying a porphyrin derivative that can be used for this PDT, and have a single component, which is stable and maintains good accumulation on cancer tissues.
  • Various porphyrin derivatives have been provided which have a high rate of excretion from tissues and have reduced phototoxicity.
  • titanium sapphire lasers (wavelengths above 670 nm and below 600 nm) and semiconductor lasers (670 nm) can be used as porphyrin derivatives of the following formula (I): (I
  • the iminochlorin aspartic acid derivatives represented by the formula (I) and the pharmaceutically acceptable salts thereof particularly the compound which is a sodium salt, namely, ATX-S10 ⁇ Na
  • the compound is a compound that has remarkably high accumulation in cancer tissues and selective accumulation in new blood vessels. Therefore, it has been confirmed that it is extremely effective as a therapeutic agent for PDT for the treatment of tumors and age-related macular degeneration, utilizing its excellent properties, and a patent application has already been filed in that regard. (WO98 / 144445).
  • Rheumatism is classified as one of the collagen diseases with vascular inflammation as the main symptom, and it is said that it may occur due to abnormalities in immunity. No cure has been established. Currently, rheumatism is treated with drugs such as anti-inflammatory drugs, steroids, and anti-rheumatic drugs, and surgery such as artificial joint replacement, but the probability of complete cure is extremely low. Trauner et al. Studied rheumatoid treatment using PDT, and have already filed a patent (US Pat. No. 5,368,841), which is disclosed therein. Due to the low selective accumulation of the photosensitizer and the long residence time in the body, this photosensitizer has a high risk of phototoxicity.
  • inflammatory keratosis causes blood vessels in the dermis of the skin to spread, “Inflammation” caused by the infiltration of all white blood cells into the skin and “keratosis”, the thickening of the skin and thickening of the stratum corneum, occur simultaneously.
  • Treatments include anti-inflammatory drugs such as steroids, epidermal growth inhibitors such as retinoids, and ultraviolet radiation therapy (PUVA therapy), but these are not definitive treatments for complete recovery.
  • 5-aminolevulinic acid hydrochloride 5-aminolevulinic acid hydrochloride
  • 5-ALA is a biosynthetic precursor of protovolphyrin IX, and the compound properties of protoporphyrin IX, that is, low neovascular accumulation, and the longest wavelength absorption edge of 630 nm For this reason, this 5-ALA does not provide a sufficient therapeutic effect.
  • the present inventors have focused on the high selective accumulation of the iminochlorin aspartic acid derivative represented by the formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof in new blood vessels, and We have been conducting a wider range of research on the use of PDT as a therapeutic or diagnostic agent that applies PDT.
  • the sodium salt compound, ATX-S10 • Na has excellent accumulation in inflammatory cells caused by new blood vessels in areas other than cancer and ophthalmology, and is a therapeutic agent for skin diseases utilizing PDT.
  • sentinel lymph node sentinel 1 lymph node, sometimes referred to as SN hereinafter
  • SN sentinel 1 lymph node
  • the dye method and the radioisotope method are used to determine the SN.
  • the dye method and the radioisotope method are used to determine the SN.
  • considerable skill is required to determine the position of the SN using these methods.
  • the present inventors focused on the fluorescent properties of the iminochlorin aspartic acid derivative represented by the formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, and confirmed the existence site of SN and the cancer metastasis.
  • diagnostic agents that can diagnose the presence or absence of cysteine.
  • this compound can be used as a diagnostic agent for confirming the presence of an extremely effective SN and for determining the presence or absence of cancer metastasis, and have completed the present invention.
  • the present invention relates to a therapeutic agent for rheumatism, a therapeutic agent for inflammatory keratosis, and a treatment for sentinel lymph node (SN) using PDT (Photodynamic acid Therapy). It is an object to confirm the existence site and to provide a diagnostic agent for cancer metastasis. Disclosure of the invention
  • Photophysicochemical diagnosis and treatment of vascular disease comprising an iminochlorin aspartic acid derivative or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient
  • PDT Photodynamic Therapy
  • a basic aspect of the present invention is to evaluate the accumulation of an iminochlorinus-partic acid derivative represented by the above formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof on neovascular vessels or tumor cells. It is characterized in that PDT therapy is performed using it.
  • a first specific embodiment of the present invention relates to the use of the iminochlorin aspartic acid derivative represented by the above formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof to produce angiogenesis by PDT.
  • the drug is a therapeutic agent for rheumatism using PDT containing a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • inflammatory keratosis is a disease caused by new blood vessels.
  • Inflammatory keratosis is a prominent inflammatory condition among keratosis, that is, a skin disease mainly consisting of flushing and keratinization.
  • psoriasis or psoriasis There was psoriasis (par ap soriasis), and its treatment had so far had to rely on drugs that exert strong medicinal properties, such as steroids.
  • the iminochlorin aspartic acid derivative represented by the above formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof is transdermally administered, it efficiently accumulates in inflammatory cells under the epidermis of the skin. After confirming that the compound is a compound of formula (I), irradiation of the accumulated compound of formula (I) with laser irradiation and the use of PDT therapy can very effectively treat this disease.
  • the second specific embodiment of the present invention relates to the use of an iminochlorin aspartic acid derivative represented by the above formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, and the use of PDT to induce inflammatory cells under the epidermis of the skin.
  • a method for inducing dyskeratosis and effectively treating inflammatory keratosis, wherein the iminochlorinus-partic acid derivative represented by the above formula (I) or a pharmacologically active agent thereof used in the method is used. It is a therapeutic drug for inflammatory keratosis (skin disease such as psoriasis) using PDT containing an acceptable salt as an active ingredient.
  • sentinel lymph nodes are the lymph nodes that first receive lymph flow from a carcinoma and then undergo metastasis of the tumor. Therefore, tumor lymph node metastasis starts with SN metastasis. Recently, the concept that no metastasis has occurred in other lymph nodes without SN metastasis (sentine 1 nodec on cept: SN concept) has been adopted. S en ti ne l nod enavigati on surgery is being performed.
  • the location of the sentinel lymph node can be identified and the presence or absence of cancer metastasis can be determined, the presence or absence of all lymph node cancer metastasis in that symptom can be determined.
  • This SN conc ept has already been clinically applied to breast cancer and malignant melanoma by the dye method or radioisotope method described above.
  • the present inventors have found that by utilizing the fluorescent properties of the porphyrin derivative, the location of SN and the diagnosis of cancer metastasis can be performed with high sensitivity and safety.
  • a third specific embodiment of the present invention relates to an iminoc represented by the formula (I) ⁇
  • a method for confirming the location of sentinel lymph nodes (SN) using PDT and diagnosing cancer metastasis using a phosphorus aspartic acid derivative or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient A PDT-based site-confirming site for SN and a diagnostic agent for cancer metastasis, comprising, as an active ingredient, an iminochlorin aspartic acid derivative represented by the above formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof.
  • the iminochlorin aspartic acid derivative represented by the formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof is a sodium salt (ATX-S 10 -N a) PDT treatment of rheumatism and remedy for rheumatism, inflammatory keratosis treatment and inflammatory keratosis treatment drug, furthermore, SN site confirmation and cancer metastasis It is a diagnostic method, a site confirming the presence of SN and a diagnostic agent for cancer metastasis.
  • FIG. 1 is a graph illustrating the HUVEC survival rate when PDT was performed using ATX—S 10 ⁇ Na of the present invention.
  • FIG. 2 is a photograph of macroscopic findings without laser irradiation in a type I collagen arthritis model mouse (control group) after performing 0 tests.
  • FIG. 3 is a photograph of macroscopic findings 7 days after laser irradiation in a type II collagen arthritis model mouse (test group) after PDT.
  • FIG. 4 is a laser non-irradiation micrograph of a joint tissue section in a type I collagen arthritis model mouse (control group) after performing 0 trials.
  • Fig. 5 1 is a photomicrograph of a joint tissue section of a type I collagen arthritis model mouse (test group) after laser irradiation after laser irradiation.
  • FIG. 6 is a graph showing the cell killing effect on cultured keratinocytes when PDT was performed using ATX—S 10 ⁇ Na of the present invention.
  • AT of the present invention in cultured cells X- S to 10 ⁇ Na was added 50 g / mL, were cultured under the same conditions, then washed with a phosphate buffer, performs, single The one irradiation at 10 JZ cm 2, irradiation after 1, 2, The survival rates of keratinocytes at 3, 6, 12, and 24 hours later were plotted on a graph.
  • FIG. 7 is a fluorescence image 3 hours after immersion ointment containing ATX—S 10 ⁇ Na was applied to a dermatitis model mouse.
  • (A) is a fluorescence image when applying a submerged ointment containing ATX—S10 ⁇ Na
  • (b) is a fluorescence image when applying a submerged ointment that does not contain ATX—S10 ⁇ ⁇ a. It is.
  • FIG. 8 is a cross-sectional microscopic photograph of skin tissue in a dermatitis model mouse obtained by applying 1% ATX_S 10Na (10) immersion ointment to the skin of a mouse treated with TPA, and passing 3 hours.
  • (A) is a photograph after laser irradiation
  • (b) is a photograph without laser irradiation.
  • FIG. 9 is a fluorescence image obtained when Photofrin was administered. In the figure, after 5 minutes and 10 minutes from the upper left. 15 minutes and 20 minutes after middle left. Fluorescent images 25 minutes and 30 minutes after the lower left.
  • FIG. 10 is a fluorescent image when ATX-S10 ⁇ ⁇ a of the present invention was administered. In the figure, after 5 minutes and 10 minutes from the upper left. 15 minutes and 20 minutes after middle left. Fluorescent images 25 minutes and 30 minutes after the lower left. BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
  • the iminochlorin aspartic acid derivative represented by the formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof represented by the formula (I) used as an active ingredient in the present invention is, for example, W098 / 14
  • a first specific embodiment provided by the present invention comprises an iminochlorin spargic acid derivative represented by the formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, particularly a sodium salt thereof (ATX-S10-Na) as an active ingredient: It is a method of treating rheumatism with PDT, and is a therapeutic agent for rheumatism used for its treatment.
  • rheumatoid arthritis which is regarded as an intractable disease, is pathologically proliferative synovitis, formation of subsynovial carcinoma-like tissue (pannus), and cartilage and bone destruction by vannus. It is characterized by clinically causing polyarticular pain, swelling, and dysfunction, and significantly reducing the quality of life of patients over their lifetime. Therefore, the treatment goal for rheumatoid arthritis is to control joint rupture due to proliferative synovitis (pannus). Therefore, as one of the rheumatic treatments, it is necessary to suppress inflammation caused by synovial cells, inhibit angiogenesis, and suppress joint destruction.
  • Test 1 invitro test: PD on umbilical cord vascular endothelial cells (HUVEC)
  • HUVEC human umbilical cord vascular endothelial cells
  • Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC), with media, each we 1 1 per 1.
  • 0 X 10 - 4 were cultured in eel 1 s / we 1 1, there IL one 1/3 (1 ng / (mL) and TNF-a (10 ng / mL) were added to stimulate the cells to be inflammatory.
  • ATX-S10 ⁇ ⁇ a of the present invention was added to 25 ⁇ g / mL and 50 gZmL, respectively, and incubated at 37 ° C for 24 hours.
  • the laser irradiation in cultured cells (respectively 0, 1 5, 30, 50 and l OO JZcm 2 irradiated in) and, HU at 24 hours after laser irradiation VEC viability was measured by the MTT Atsey method.
  • HUVEC Survival was about 10-20%. Survival rates were similar in both the ATX-S 10'Na supplemented groups at 25 g / mL and 50 ng / mL (Fig. 1).
  • a laser-no irradiation group (3 animals per group) was provided.
  • the clinical effects were evaluated by clinical joint scores (Arthritis core: Terrato et al., 1995), mice were perfused and fixed, and joint tissues were collected and stained with Safranin 0 The demineralized tissue specimen was evaluated histologically.
  • ATX—SIO′Na which is an iminochlorin-aspartic acid derivative of the present invention, is extremely effective for rheumatism treatment by PDT therapy.
  • S10 ⁇ Na has high selective accumulation in tumors and inflammatory cells, and its metabolic rate from normal tissues is high, so that the side effects of photosensitivity are significantly reduced.
  • it is a compound that has an absorption band in the long wavelength region (670 nm) where the tissue depth is high, treatment by laser irradiation from outside is also possible.
  • refractory synovitis which is particularly refractory to rheumatoid arthritis
  • intra-articular injection of steroids, arthroscopic synovectomy, or open synovectomy are performed. Is common. Some steroids cannot be repeated intraarticularly, are at risk of infection, and are invasive. In addition, arthroscopic or direct synovectomy requires hospital management, is invasive, and sometimes requires rehabilitation.
  • a second embodiment provided by the present invention is an iminochloriner represented by the formula (I): It is a method for treating inflammatory keratosis (dermatosis such as psoriasis) by PDT containing an acid derivative or a pharmacologically acceptable salt thereof, particularly a sodium salt thereof (ATX-S10 ⁇ Na) as an active ingredient. It is used for the treatment of inflammatory keratosis (dermatosis such as psoriasis).
  • Inflammatory keratosis is a prominent inflammatory condition among keratosis, ie, a condition mainly consisting of flushing and keratinization.
  • psoriasis psoriasis
  • parasorisais psoriatic type
  • Specific clinical features include psoriatic dermatosis, arthritic psoriasis, and pustular psoriasis.
  • the present inventors have found that the iminochlorin aspartic acid derivative represented by the formula (I) provided by the present invention or a pharmacologically acceptable salt thereof, particularly ATX—S 10 ⁇ Na, can be added to inflammatory cells.
  • a hydrophilic ointment was prepared using a hydrophilic ointment base of the Japanese Pharmacopoeia and applied to the skin. After application, the skin was washed and a fluorescent image was taken. As a result, it was confirmed that ATX—S10 * Na had accumulated on the skin.
  • Test 3 (in Vitro test): Confirmation of cell killing effect on keratinized cultured cells
  • Keratinocytes were collected from patients with inflammatory keratosis and cultured at 37 ° C for 24 hours.
  • the ATX- S 10 ⁇ Na of the present invention was added 50 GZmL the cultured cells were cultured under the same conditions, then washed with a phosphate buffer, subjected to the laser one irradiation at 10 J / cm 2, after irradiation The keratinocyte viability was observed over time.
  • the survival state of the cells on the medium before laser irradiation was defined as 100%, and the cell viability at 1, 2, 3, 6, 12 and 24 hours after irradiation was determined.
  • Figure 6 shows the results. After culturing with the addition of ATX-S10 ⁇ Na, the cells were irradiated with laser, and 75% of the keratinocytes had died after 6 hours. Next, using a dermatitis model mouse, ATX The effect of -S10 ⁇ Na was examined by the following test.
  • Test 4 (inViVo test): TPA on mouse skin
  • hydrophilic ointment base described in the Japanese Pharmacopoeia
  • a hydrophilic ointment containing 1% and 10% of ATX-S10 * Na was prepared by a formulation technique widely used in pharmacology.
  • test group was irradiated with a laser beam (irradiation: 100 J / cm 2 and no irradiation), and the skin condition was observed histologically.
  • FIG. 8 shows a cross-sectional micrograph of the skin tissue with and without laser irradiation. Therefore, the iminochlorin aspartic acid derivative of the present invention represented by the formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof, particularly ATX—S10Na, efficiently accumulates in inflammatory cells, It was found that laser irradiation with PDT induced necrosis of inflammatory cells, and was effective in treating inflammatory keratosis.
  • a third specific embodiment of the present invention is a sentinel lymph node using PDT, comprising an iminochlorin aspartic acid derivative represented by the formula (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present inventors have studied the iminochlorin aspartate derivative represented by the formula (I) of the present invention or a pharmacologically acceptable salt thereof, in particular, the fluorescent properties of ATX—S 10 ⁇ Na and tumor cells. Confirmation of the location of the sentinel lymph node and examination of the presence or absence of cancer metastasis were performed according to the following test, utilizing the selective accumulation in the tumor.
  • Test 5 Confirmation of the presence of sentinel lymph nodes in mouse foot pods (footpad) and diagnosis of cancer metastasis
  • Meth-A cancer cells were implanted in the foot of a mouse using male mice (age of 15 to 18 g) of 6 to 8 weeks of age. After transplantation of the cancer cells, 0.02 mg of ATX-S10 * Na was injected into the tumor as a test sample, and continuously administered for up to 30 minutes after administration, to confirm the location of sentinel lymph nodes in the mouse tarsus and cancer Diagnosis of metastases was imaged using a fluorescence imaging system.
  • photofrin was used as a control compound for intravenous administration in the same manner as described above.
  • the imaging conditions by the fluorescent image system are as follows.
  • Excitation light Light source unit (L7212), lens (E5147-06), fiber (A2873)
  • the image image capturing conditions are as follows. S— VHS—>DV—> DV Rap tor (DV Video) Standard setting Image size: 640X480 Frame DV Format
  • FIG. 9 is an image obtained when Photofrin (abbreviated as PF) was administered as a control compound
  • FIG. 10 shows ATX—S 10 ⁇ Na (abbreviated as S 10) of the present invention. It is an image at the time of administration.
  • the site of SN is clarified, and the presence or absence of cancer is determined by biopsy. can do.
  • the present invention relates to an iminochlorin aspartic acid derivative represented by the formula (I), in particular, its sodium salt, ATX—S10 ⁇ Na, has high activity against tumor cells or inflammatory cells.
  • PDT Photothermic acid therapy
  • the present invention provides a therapeutic agent for eumatism, a therapeutic agent for inflammatory keratosis, and a diagnostic agent for confirming the location of sentinel lymph nodes and cancer metastasis.
  • the conventional treatment for rheumatoid arthritis requires hospitalization for surgery and is invasive, whereas the treatment agent of the present invention does not require surgery. Furthermore, it inhibits joint destruction by killing synovial cells that directly cause the disease from the outside of the cell, and its medical contribution is enormous.

Description

脈管病に関する光物理化学的 ·診断方法 技術分野
本発明は、 ィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容さ れる塩を有効成分とする、 脈管病に関する光物理化学的診断 ·治療法 （PDT : Pho t o dyn ami c The r apy)用のリュ一マチ治療薬、炎症性角化 症治療薬、 ならびにセンチネルリンパ節 （s e n t i n e 1 l ymph no d e ：以下 SNという） の存在部位確認および癌転移診断薬に関する。 背景技術
癌の新しい治療法として、 光物理化学的診断 ·治療法 （PDT： Pho t o d yn ami c T e r a y)が行われている。 これはある種のポルフィリン誘 導体を静脈内注射などの方法により投与して、 癌 （腫瘍） 組織に選択的に集積さ せた後、 レーザ一光を照射することにより癌組織のみを選択的に破壊する治療法 であり、 ポルフィリン誘導体が有する癌組織への選択的集積性と、 光増感作用と いう 2つの特性を利用した治療法である。
本発明者らは、 この PDTに使用することができるポルフィリン誘導体につい て鋭意研究を進めてきており、 単一成分であり、 安定的にかつ癌組織に対する良 好な集積性を維持したまま、 正常組織からの排出速度が速く、 光毒性を軽減させ たポルフィリン誘導体の提供を種々行ってきている。
そのなかで、 チタンサファイアレーザー （670 nm以上および 600 nm以 下の波長） ならびに半導体レーザ一 （670 nm) の使用が可能であるポルフィ リン誘導体として次式 （I)： (I
AspOC COAsp
(式中、 A s pはァスパラギン酸残基を表す）
で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体を提供してきている。
この式 （I ) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理 学的に許容される塩のなかでも、 特にナトリウム塩である化合物、 すなわち A T X - S 1 0 · N aと命名された化合物は、 癌組織への集積性、 ならびに新生血管 への選択的集積性が著しく高い化合物である。 したがって、 その優れた特性を利 用して、 腫瘍および加齢性黄斑変性症の治療のための P D T用治療剤として極め て効果的なものであることを確認し、 その点については既に特許出願を完了して いる （WO 9 8 / 1 4 4 5 3号公報）。
ところで、 新生血管に起因する炎症を症状とする病気には様々なものがあり、 リュ一マチ、 炎症性角化症もそのなかに位置する疾患である。
リユーマチは、 血管の炎症を症状の中心とする膠原病のなかの一つに分類され ており、 免疫の異常で起こる場合もあると言われているが、 明確な原因が判って いないため、 的確な治療法が確立されていない。 現在、 リューマチの治療として 抗炎症剤、 ステロイド、 抗リューマチ製剤などの薬物による治療と、 人工関節置 換などの手術による治療が行われているが、 完治する確立は極めて低い。 T r a u n e rらは、 P D Tを応用したリューマチ治療について検討を行い、 その点を 既に特許を出願している （アメリカ特許第 5， 3 6 8 , 8 4 1号） が、 そこに開 示されている光感受性物質の選択的集積性が低いこと、 および体内残留時間が長 いことから、 この光感受性物質では光毒性が見られる危険性が高い。
また、 炎症性角化症は、 皮膚の真皮部分に存在する血管が広がり、 リンパ球な どの白血球が皮膚に侵入することによっておこる 「炎症」 と、 皮膚の表皮が分厚 くなつて角層も分厚くなる 「角化症」 が同時に起こる皮膚症状である。 その治療 法としては、 ステロイドなどの抗炎症剤、 レチノイドなどの表皮増殖抑制剤、 紫 外線療法 （PUVA療法） が実施されているが、 完治に至る決定的な治療法では ない。
近年、 5—アミノレブリン酸塩酸塩 （5— ALA) を用いた PDTによる治療 が有効であることが判ってきている。 しかしながら、 5—ALAはプロ'卜ボルフ ィリン I Xの生合成前駆体であり、 プロトポルフィリン I Xの化合物特性、 すな わち、 新生血管集積性が低いこと、 最長波長吸収端が 630 nmである点などか ら、 この 5— ALAでは充分な治療効果が得られていない。
本発明者らは、 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体また はその薬理学的に許容される塩の有する新生血管への高い選択的集積性に着目し て、 本化合物について PDTを応用した各種治療薬、 あるいは診断薬としての用 途についてさらに幅広い研究を進めてきた。 その結果、 ナトリウム塩である化合 物、 すなわち ATX—S 10 · Naは、 癌や眼科領域以外における新生血管に起 因する炎症細胞への集積性も優れており、 P D Tを応用した皮膚疾患治療薬とし て、 炎症性角化症 （乾癬などの皮膚炎） 治療薬、 あるいは膠原病のひとつである 慢性関節リユーマチに代表されるリユーマチ治療薬として、 極めて有効なもので あることを新たに見いだした。 ところで、 この式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体また はその薬理学的に許容される塩のなかでも、 特にナトリウム塩である化合物、 す なわち ATX— S 10 · Naと命名された化合物は、 適切な励起波長 （400 η mなど） の光を照射すると 670 nmの赤色蛍光を発することが判っており、 腫 瘍部の確定診断にも応用できることを既に開示している。
腫瘍を外科的に切除する手術を実施する場合、 腫瘍部を的確に確定できれば必 要以上に正常組織を切除することもなく、 患者への負担が軽減するとともに Q 0 Lの向上にもつながる。 しかしながら、 癌転移の危険性を考慮して、 外科手術の後に化学療法を実施す ることも多いが、 化学療法は、 副作用の問題があるためできる限り実施しないの が理想である。
そこで最近、 癌転移の有無を判定するため、 腫瘍近傍のリンパ流を最初に受け るリンパ節としてのセンチネルリンパ節 （s e n t i ne 1 l ymph nod e、 以下 SNと記す場合もある） を生検する方法が実施されている。 すなわち、 SNを生検した結果、 SNに癌の転移がなければ、 その周辺に存在するリンパ節 の切除は不要であり、 免疫低下等の後遺症を低減することができる。 また、 外科 手術後の化学療法を実施する確率も低減されることとなる。
現在、 SNを確定するためには、 色素法とラジオアイソトープ法が実施されて いる。 ところが、 生体には脂肪組織が存在すること、 リンパ管が細いことなどか ら、 これらの方法で SNの位置を確定するには、 かなりの熟練を要する。
本発明者らは、 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体また はその薬理学的に許容される塩が有する蛍光特性に着目し、 SNの存在部位の確 認ならびに癌転移の有無を診断し得る診断薬について研究を進めてきた。 その結 果、 この化合物が極めて有効な SNの存在部位の確認、 ならびに癌の転移の有無 診断薬になり得ることを新規に見出し、 本発明を完成させるに至つた。
したがって、 本発明は、 PDT (Pho t odyn ami c The r a py : 光物理化学的診断 ·治療法） を使用した、 リューマチ治療薬、 炎症性角化症治療 薬、 ならびにセンチネルリンパ節 （SN) の存在部位確認、 および癌転移診断薬 を提供することを課題とする。 発明の開示
本発明の基本的な態様は、 次式 （I)： (I
AspOC COAsp
(式中、 As pはァスパラギン酸残基を表す）
で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容され る塩を有効成分とする、 脈管病に関する光物理化学的診断，治療法 （PDT： P h o t o dyn am i c T h e r a p y)用のリューマチ治療薬、炎症性角化症 治療薬であり、 また、 センチネルリンパ節 （s e n t i n e l 1 ymp h n o d e) の存在部位確認および癌転移診断薬である。 すなわち本発明の基本的態様は、 上記式 （I) で示されるィミノクロリンァス パラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩の、 新生血管に対する集積 性、 あるいは腫瘍細胞に対する集積性を利用して、 PDT療法を行う点に特徴を 有するものである。
その新生血管に起因するひとつの病症としてリュ一マチ疾患がある。 したがつ て本発明の第一の具体的態様は、 上記式 （I ) で示されるィミノクロリンァスパ ラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を用い、 PDTによる血管新 生の阻害を行い、 さらには滑膜細胞死により関節の破壊を抑制することによって リューマチを治療する方法であり、 当該方法に使用する、 上記式 （I) で示され るィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有 効成分とする P D Tを用いたリユーマチ治療薬である。
さらに、 新生血管に起因する病症として、 炎症性角化症がある。 炎症性角化症 とは角化症のなかでも炎症症状の著名なもの、 すなわち潮紅と角化とが主体とな つた皮膚疾患である。 そのなかでも、 乾癬 （p s o r i a s i s) あるいは類乾 癬 （p a r ap s o r i a s i s) があり、 その治療はこれまでステロイド製剤 等の強力な薬効を発揮する薬剤に頼らざるを得ない病症であった。 しかしながら 上記式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学 的に許容される塩を経皮的に投与した場合に、 皮膚の表皮下の炎症性細胞に効率 よく集積するものであることを確認し、 この集積された式 （I) の化合物にレー ザ一照射を行い、 PDT療法を用いることにより、 極めて有効に本疾患を治療し 得るのである。
したがって、 本発明の第二の具体的態様は、 上記式 （I) で示されるイミノク ロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を用い、 PDT による皮膚表皮下の炎症性細胞の壌死を誘導し、 効果的な炎症性角化症を治療す る方法であり、 当該方法に使用する上記式 （I) で示されるィミノクロリンァス パラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする PDTを 用いた炎症性角化症 （乾癬等の皮膚病） 治療薬である。 ところで、 センチネルリンパ節 （SN) とは、 癌腫から最初にリンパ流を受け て、 腫瘍の転移を受けるリンパ節である。 したがって腫瘍のリンパ節'転移は SN 転移から始まるものであり、 最近、 SNに転移がなければ他のリンパ節にも転移 は生じていないという概念 （ s e n t i n e 1 nod e c on c e p t : SN c o n c e p t ) が採用されてきており、 s en t i ne l nod e n a v i g a t i on s u r g e r yが行われつつある。
すなわち、 センチネルリンパ節の存在部位を明らかにして、 癌転移の有無の判 定を行うことができれば、 その症状における全リンパ節癌転移の有無の判定が可 能となる。 この S N c o n c e p tは、乳癌や悪性黒色腫では先に述べた色素法 あるいはラジオアイソトープ法により、 既に臨床応用されてきている。 しかしな がら、 本発明者等は、 ポルフィリン誘導体の蛍光特性を利用することにより、 S Nの存在部位の確認、 および癌転移診断が高感度かつ安全になし得ることを見出 した。
したがって、 本発明の第三の具体的態様は、 上記式 （I) で示されるイミノク Ώリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とす る、 PDTを用いたセンチネルリンパ節 （SN) の存在部位確認、 および癌転移 診断を行う方法であり、 当該方法に使用する上記式 （I) で示されるィミノクロ リンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする、 PDTを用いた SNの存在部位確認、 および癌転移診断薬である。
本発明においては、 上記式 （I).で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘 導体またはその薬理学的に許容される塩のなかでも、 そのナトリウム塩である化 合物 （ATX_S 1 0 * Na) が特に効果的なものであることが判明した。 した がって、 本発明の最も具体的な態様は、 式 （I) で示されるィミノクロリンァス パラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩が、 ナトリウム塩 （ATX 一 S 1 0 - N a) である PDTによるリュ一マチの治療方法およびリュ一マチ治 療薬、 炎症性角化症の治療方法および炎症性角化症治療薬、 さらには、 SNの存 在部位確認および癌転移診断方法および S Nの存在部位確認および癌転移診断薬 である。 図面の簡単な説明
第 1図は、 本発明の ATX— S 10 · Naを用いて PDTを実施したときの H UVE C生存率を図示したグラフである。
第 2図は、 ？0丁実施後の 1 I型コラーゲン関節炎モデルマウス （コントロー ル群） におけるレーザー無照射の肉眼所見写真である。
第 3図は、 PDT実施後の I I型コラーゲン関節炎モデルマウス（試験対象群） におけるレーザー照射後 7日の肉眼所見写真である。
第 4図は、 0丁実施後の 1 I型コラーゲン関節炎モデルマウス （コントロー ル群） における関節組織切片のレーザー無照射顕微鏡写真である。
第 5図は、 ？0丁実施後の1 I型コラーゲン関節炎モデルマウス（試験対象群） における関節組織切片のレーザー照射後の顕微鏡写真である。
第 6図は、 本発明の ATX— S 10 · Naを用いて PDTを実施したときの角 化培養細胞に対する殺細胞効果を示したグラフである。 培養細胞に本発明の AT X— S 10 · Naを 50 g/mL添加し、 同条件下で培養した後、 リン酸緩衝 液にて洗浄し、 10 J Z c m2 でレ一ザ一照射を行い、 照射後 1， 2 , 3， 6， 12および 24時間後の各時点における角化細胞の生存率をグラフに表した。 第 7図は、 皮膚炎モデルマウスに ATX— S 10 · N a含有浸水軟膏を塗布し 3時間経過後の蛍光画像である。 （a) は AT X— S 10 · N a含有浸水軟膏を塗 布したときの蛍光画像であり、 （b) は ATX— S 10 ·Ν aを含有しない浸水軟 膏を塗布したときの蛍光画像である。
第 8図は、 TP A処理したマウスの皮膚に 1 %ATX_ S 10 · N a (Π) 浸 水軟膏を塗布し、 3時間経過した皮膚炎モデルマウスにおける皮膚組織の断面顕 微鏡写真である。 （a) はレーザ一照射後の写真であり、 （b) はレーザー無照射 の写真である。
第 9図は、 フォトフリンを投与した場合の蛍光画像である。 図中、 上段左より 5分後、 10分後。 中段左より 15分後、 20分後。 下段左より 25分後、 30 分後の蛍光画像である。
第 10図は、本発明の ATX— S 10·Ν aを投与した場合の蛍光画像である。 図中、 上段左より 5分後、 10分後。 中段左より 15分後、 20分後。 下段左よ り 25分後、 30分後の蛍光画像である。 発明を実施するための最良の形態
以下に、 本発明について、 実施例に代え各試験例により、 それぞれ個々の発明 の態様を詳細に説明する。
本発明で有効成分として使用される式 （I) で示されるィミノクロリンァスパ ラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩は、 例えば、 W098/14
453号公報に記載の方法により製造することができる。 薬理学的に許容される 塩としては、 ナトリウム塩、 カリウム塩、 カルシウム塩等種々の塩が挙げられる が、 そのなかでもナトリウム塩が好ましく、 ナトリウム塩である式 (I) で示さ れるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体は、 ATX— S 10 · N aと命名され た。 本発明が提供する第一の具体的態様は、 式 （I) で示されるイミノクロリンァ スパラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩、 特にそのナトリウム塩 (ATX-S 10 - Na) を有効成分とする P D Tによるリューマチの治療方法 であり、 またその治療に使用するリューマチ治療薬である。
リューマチのなかでも、 難治性疾患とされている慢性関節リューマチは、 病理 学的には増殖性滑膜炎、 滑膜下の肉牙腫様組織 （パンヌス） 形成、 およびバンヌ スによる軟骨、 骨破壊を特徴として、 臨床的には多関節の疼痛、 腫脹、 機能障害 をきたし、 患者の QOLを生涯にわたって著しく低下させる疾患である。 したが つて、 慢性関節リューマチの治療目標は、 増殖性滑膜炎 （パンヌス） による関節 破壌を抑制することにある。 そのために、 リューマチ治療のひとつとしては、 滑 膜細胞による炎症を抑制させると共に、 血管新生を阻害させ、 関節破壊を抑制さ せればよい。
そこで本発明者等は、 I I型コラーゲン関節炎モデルマウスを使用し、 PDT を応用した血管新生阻害および滑膜細胞死誘導による関節破壌の抑制効果を、 以 下の試験により検討した。 試験 1 ( i n v i t r o 試験）：臍帯血管内皮細胞 （HUVEC) に対する PD
T効果についての検討
その第 1段階として、 ヒト臍帯血管内皮細胞 （HUVEC) を使用し、 炎症下 における PDTによる HUVECの細胞死の誘導を検討した。
ヒト臍帯血管内皮細胞（HUVEC)を、培地を用いて、各 we 1 1当たり 1. 0 X 10 - 4 e e l 1 s/we 1 1で培養を行い、 そこに I L一 1 /3 (1 n g/ mL) および TNF— a (l O ng/mL) を加えて刺激して、 炎症状態とさせ た。 ついで、 刺激 1時間後に本発明の ATX— S 1 0 · Ν aをそれぞれ 25 β g /mLおよび 5 0 gZmLを添加して、 37 °Cにて 24時間インキュベートし た。
インキュベート後、 培養細胞にレーザー照射 （それぞれ 0, 1 5, 30， 50 および l O O JZcm2 にて照射） し、 レーザー照射後 24時間目における HU VECの生存率を M T Tアツセィ法により測定した。
そのの結果、 レーザー無照射の HUV ECでは細胞死は認められなかったが、 レーザー照射を行ったいずれの群 （15， 30， 50および 100 J/cm2 に て照射群） においても、 HUVECの生存率は約 10〜20%であった。 生存率 は、 ATX—S 10 ' Naの 25 g/mLおよび 50 n g/mLの添加群の両 者で同等であった （第 1図)。
以上の試験結果から、 ATX— S 10 ·Ν aは、 P D Tを応用することにより、 炎症下における HUVE Cの細胞死を誘導していることが示唆された。 次に、 実際の I I型コラーゲン関節炎モデルマウスを使用し、 PDTを応用し た関節炎に対する ATX— S 10 · Naの効果を以下の試験により検討した。 試験 2 ( i n V i v o試験） ： I I型コラーゲン関節炎モデルマウスに対する P DT効果の検討
6〜8週齢の雄性 DBAZ1マウス （体重 15〜18 g) を使用した。 I I型 コラーゲン関節の誘導は、 以下のとおりのスケジュールで行った。
試験開始日 （0日） に、 抗 I I型コラーゲン抗体カクテル 2mgを腹腔内注射 し、 1日目に同様抗 I I型コラーゲン抗体カクテル 2mgを腹腔内注射した。 次 いで、 2日目および 3日目に LPS (l i p o p o l y s a c c h a r i d e) をそれぞれ 5011 gずつ腹腔内注射し、 I I型コラーゲン関節炎を誘導させた。 試験開始後 5日目に、 I I型コラーゲン関節炎が誘導されていることを確認し て、 試験対象群 （一群 5匹） として、 ATX— S 10 · N aを 5mg/k gあた り静脈内注射し、 投与後 3時間目にレーザ一照射 （照射量： 30 J/cm2 ) を 行った。 なお、 コントロール群としてレーザ一無照射群 （一群 3匹） を設けた。 試験開始後 14日目に、臨床的効果を臨床的関節スコア（Ar t h r i t i s s c o r e : Te r a t o等による、 1995年） により評価すると共に、 マウス を灌流固定して関節組織を採取し、 S a f r a n i n 0染色した脱灰組織標本に ついて、 組織学的に評価した。
その結果、 レーザー無照射のコントロール群においては、 関節炎の発症が継続 して見られ、 その関節スコアは 4であるのに対し （第 2図）、 レーザー照射を行つ た試験対象群では、 関節炎の発症症状が認められず、 関節スコアは 0または 1で あった （第 3図)。
また、 組織学的な評価では、 コントロール群は、 滑膜細胞の著しい浸潤が認め られたのに対し （第 4図）、 試験対象群は、 滑膜細胞の浸潤が抑制されていた （第 5図)。
以上の試験結果から、 本発明のィミノクロリンァスラギン酸誘導体である AT X— S l O ' N aは、 P D T療法により、 リューマチ治療に極めて有効なもので あることが判明した。
従来のポルフィリン誘導体は、 選択的集積性が低く、 正常組織からの代謝速度 が遅いため、 光線過敏症の副作用がみられ、 遮光管理下での治療が必要とされる ものである。 一方、 本発明のィミノクロリンァスラギン酸誘導体である A T X—
S 1 0 · N aは、 腫瘍ならびに炎症性細胞への選択的集積性が高く、 正常組織か らの代謝速度が速いため光線過敏症の副作用は著しく低減されている。 また、 組 織深達度の高い長波長領域 （6 7 0 nm) に吸収帯をもつ化合物であるため、 外 部からのレーザ一照射による治療も可能である。
関節リューマチのなかでも特に難治性の内科的治療抵抗性滑膜炎の治療では、 ステロイド剤の関節内注射、 鏡視下での滑膜切除術、 あるいは直視下滑膜切除術 が行われているのが一般的である。 ステロイド剤の場合は、 関節内に反復投与で きないものもあり、 また感染の危険性があり、 かつ侵襲的である。 また、 鏡視下 あるいは直視下での滑膜切除術は、 入院管理の必要性があり、 侵襲的で、 ときに リハビリテーションも必要性となる。
これに対して本発明が提供する P D Tを利用したリユーマチの治療方法では、 静脈内注射により、 炎症部位の関節に光感受性物質を選択的に集積させ、 関節局 所に皮膚外部からレーザ一照射することによって滑膜細胞の壊死を誘導し、 関節 破壊を抑制させるものであり、 非侵襲的な、 きわめて優れた治療方法である。 本発明が提供する第二の具体的態様は、 式 （I ) で示されるィミノクロリンァ '酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩、 特にそのナトリゥム塩 (ATX-S 10 · Na) を有効成分とする P D Tによる炎症性角化症 （乾癬等 の皮膚病） の治療方法であり、 またその治療に使用する炎症性角化症 （乾癬等の 皮膚病） 治療薬である。
炎症性角化症は、 角化症のなかでも炎症症状の顕著なもの、 すなわち、 潮紅と 角化を主体とする症状である。 その中に乾癬 （p s o r i a s i s) あるいは類 乾癬 （p a r a p s o r i a s i s) があり、 特異的な臨床像として、 乾癬性紅 皮症、 関節症性乾癬、 膿庖性乾癬等があげられる。
本発明者らは本発明が提供する式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギ ン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩、 特に ATX— S 10 · Naが炎 症性細胞に効率よく集積するものである性質を利用し、 この ATX— S 10 · N aを日本薬局方の親水軟膏基剤により親水軟膏を調製し、 皮膚に塗布した。 塗布 後、 皮膚を洗浄し、 蛍光画像を撮像したところ、 皮膚に ATX— S 10 * Naが 集積していることが確認された。
したがって、 この段階でレーザー照射を行えば、 PDT効果により炎症細胞の 壌死を誘導し、 効果的な炎症性角化症の治療を行うことができる。 その点を以下 の試験により確認した。
試験 3 (i n V i t r o試験） ：角化培養細胞に対する殺細胞効果の確認
炎症性角化症患者より角化細胞を採取し、 37°Cにて 24時間培養を行った。 培養細胞に本発明の ATX— S 10 · Naを 50 gZmL添加し、 同条件下で 培養した後、 リン酸緩衝液にて洗浄し、 10 J/cm2 でレーザ一照射を行い、 照射後の角化細胞の生存率を経時的に観察した。
レ一ザ一照射前の培地上における細胞の生存状態を 100 %とし、 照射後 1， 2, 3, 6， 12および 24時間後の各時点における細胞生存率を求めた。 その 結果を第 6図に示した。 ATX—S 10 · N aを添加して培養した後、 レーザー 照射することにより、 角化細胞は 6時間後に 75%が死滅していた。 次に、 皮膚炎モデルマウスを使用し、 PDTを応用した皮膚炎に対する ATX -S 10 · N aの効果を、 以下の試験により検討した。
試験 4 (i n V i V o試験）：マウス皮膚への TP A
ポールアセテート） 処理による皮膚炎の発症と、 ATX—S 10 * Na軟 膏塗布後の P D Tによる治療効果の確認
1) ATX—S 10 · Na軟膏の調製
日本薬局方に記載の親水軟膏基剤を用いて、 製剤学上汎用される製剤技術によ り、 ATX— S 10 * Naを 1 %および 10 %含有する親水軟膏を調製した。
2) 炎症皮膚炎の発症
6〜 8週齢の雄性 DBA/ 1マウス （体重 1 5〜18 g) を使用し、 バリカン および剃刀で剪毛した後、 TPAを塗布し、 皮膚炎を発症させた。
3) 試験対象群として、 皮膚炎を発症した皮膚の該当部位に、 1 %ATX— S 1 0 · N a含有親水軟膏を塗布し、 3時間後に洗浄を行った。 なお、 コントロール 群として ATX— S 10 · N aを含有しない親水軟膏を塗布後、 同様に洗浄を行 つた。 塗布 3時間後に、 蛍光画像を撮像したところ、 試験対象群においてのみ赤 色蛍光が観察され、 皮膚に ATX—S 10 · N aが集積していることが確認され た （第 7図)。
4) PDTによるレーザ一照射
次いで、 試験対象群について、 レーザ一照射 （照射： 100 J/cm2 および 無照射） を行い、 皮膚の状態を組織学的に観察した。
その結果、 レーザーの無照射群では、 TP Aに起因する皮膚疾患 （炎症部位） が継続していたのに対して、 レーザ一照射群では、 炎症部位の顕著な後退が認め られた。 したがって、 本発明の ATX— S 10 · Naは、 PDTを応用すること により、 皮膚炎症を有意に抑制することが確認された。
レーザー照射の有無による皮膚組織の断面顕微鏡写真を第 8図として示した。 したがって、 本発明の式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導 体またはその薬理学的に許容される塩、 特に ATX— S 10 · N aは炎症性細胞 に効率よく集積し、 PDTによるレーザー照射を行うことにより、 炎症細胞の壊 死を誘導し、 効果的な炎症性角化症の治療効果をあげていることが判明した。 本発明の第三の具体的態様は、 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギ ン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする、 PDTを用い たセンチネルリンパ節 (SN) の存在部位の確認および癌の転移を診断する方法 セあり、 またそれに使用する SNの存在部位確認および癌転移診断薬である。 本発明者らは、 本発明の式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘 導体またはその薬理学的に許容される塩、 特に ATX— S 10 · N aの蛍光特性 および腫瘍細胞への選択的集積性を利用した、 そのセンチネルリンパ節の存在部 位の確認、 および癌転移の有無の検討を、 以下の試験にしたがって行った。
試験 5 ：マウス足節（f o o t p ad) のセンチネルリンパ節の存在部位確認お よび癌転移の診断検討
6〜8週齢の雄性08 1マゥス （体重 15〜18 g) を使用し、 マウス足 部に Me t h— A癌細胞を移植した。 癌細胞を移植後、 試験検体として ATX— S 10 * Naの 0. 02mgZ20 1を腫瘍部に注射投与し、 投与後連続的に 30分まで、 マウス足節のセンチネルリンパ節の存在部位確認および癌転移の診 断を、 蛍光画像システムを用いて撮像した。
なお、 ポルフィリン化合物としてフォトフリンを対照化合物として同様静脈投 与し検討を行った。
蛍光画像システムによる撮影条件は以下のとおりである。
カメラ：カラー I CCDカメラ
撮影方法：マイクロニコ一ル f 55mm (F 2. 8)
励起光力ット F : Y52* 2
観察視野： 39 mm
励起光：光源ュニット （L 7212)、 レンズ（E 5147— 06), ファイバ（A 2873)
フィルタ一： XYZ* 2+B39+B 37
投射距離： 145mm
画像画像取り込み条件は以下のとおりである。 S— VHS— >DV— >DV Rap t o r (DV V i d e o) 標準設定 画像サイズ： 640X480 F r ame DV Fo rma t
(明るさ： 128 ;コントラスト： 199 ;色濃度： 192 ;色合い： 128 ; シャープネス： 1)
第 9図は、 対照化合物としてのフォトフリン （PFと略記する） を投与した場 合の画像であり、 第 10図は、 本発明の ATX— S 10 · Na (S 10と略記す る） を投与した場合の画像である。
ATX-S 10 · N aの場合において、 S Nの存在部位が明瞭に観察された。 本 SNを採取して試験管に入れ、 0. 3%トリクロ口酢酸 Z60%Me〇H水 溶液の 5 0 0 Lを添加し、 常温にて 10分間超音波抽出した後、 エツペンドル フチューブに移し、 遠心分離 （8000 g、 10分間、 4°C) した。 上清液を 2 O O L採取して、 96穴平底プレート （Na l g e Nun c 167008) に移し入れ、 蛍光プレニトリ一ダー （Cy t oF 1 uo r 2350、 MI LL
1 PORE) で蛍光強度を測定した。 蛍光強度測定は、 励起波長 420 nm、 蛍 光波長 645 nmにより実施した。 S N内の ATX— S 10 · N a濃度は 10〜
2 OngZmgであり、 微量で検出できることが判った。
したがって、 本発明の式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導 体を利用することにより、 SNの存在部位を明らかにして、 それを生検すること によって、 癌転移の有無を判定することができる。
このセンチネルリンパ節への癌転移の有無を判定しうることは、 全リンパ節癌 転移の有無の判定が可能となるものであり、 その後の診断、 治療方針にひとつの 方向性を与えることができる。 産業上の利用可能性
以上記載のように、 本発明は、 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギ ン酸誘導体、 その中でも特にそのナトリウム塩である ATX— S 10 · Naの腫 瘍細胞あるいは炎症細胞に対する高い選択的な集積性を利用して、 光物理化学的 診断 ·治療法 （PDT： Pho t odyn ami c Th e r apy) による、 リ ユーマチ治療薬、 炎症性角化症治療薬ならびにセンチネルリンパ節の存在部位確 認および癌転移診断薬が提供される。
特に、 リュウマチ治療薬に関しては、 従来の関節リューマチの治療が、 手術の ための入院の必要性と、 侵襲的であるのに対し、 本発明の治療薬は、 手術を必要 とするものではない点、 さらに、 疾患の直接の原因となる滑膜細胞を外部から細 胞死させることにより関節破壊を抑制するものであり、 その医療上の貢献度は多 大なものである。
また、 炎症性角化症治療薬に関しては、 従来の抗炎症剤、 表皮増殖抑制剤、 紫 外線療法 （P UVA療法） は完治に至る決定的な治療法ではなく、 5—アミノレ ブリン酸塩酸塩 （5— A L A) を用いた P D Tによる治療は、 5— A L Aの新生 血管集積性が低いこと、 最長波長吸収端が 6 3 O n mである点などから、 充分な 治療効果が得られていなかった。 それに対し、 本発明治療薬を経皮的に投与した 場合には、 皮膚の表皮下の炎症性細胞に効率よく集積され、 この集積された化合 物にレーザー照射を行い、 P D T療法を用いることにより、 極めて有効に本疾患 を治療し得るものである。
また、 センチネルリンパ節の存在部位を確定し、 癌転移を容易に判定しうるこ とは、 癌患者に対する治療方針を確実に行えるものであり、 その医療上の貢献度 もまた極めて大きなものである。

Claims

請求の範囲
1. 次式 （ I )：
Figure imgf000019_0001
(式中、 As pはァスパラギン酸残基を表す）
で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容さ れる塩を投与して、 光物理化学的診断 ·治療法 （PDT： Pho t o dyn a mi c The r a y) を行うことによるリューマチを治療する方法。
2. 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学 的に許容される塩がナトリゥム塩である請求の範囲第 1項に記載の方法。
3. 請求の範囲第 1項に記載の式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン 酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする P D T用のリュ 一マチ治療薬。
4. 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学 的に許容される塩がナトリウム塩である請求の範囲第 3項に記載のリューマチ 治療薬。
5. PDTによるリューマチ治療のための請求の範囲第 1項に記載の式 （I) で 示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容され る塩の使用方法。 '
6. 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学 的に許容される塩がナトリゥム塩である請求の範囲第 5項に記載の使用方法。
7. 請求の範囲第 1項に記載の式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン 酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を投与して、 PDTを行うことに よる炎症性角化症を治療する方法。
8. 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学 的に許容される塩がナトリゥム塩である請求の範囲第 7項に記載の方法。
9. 請求の範囲第 1項に記載の式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン 酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする PDT用の炎症 性角化症治療薬。
10. 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理 学的に許容される塩がナトリウム塩である請求の範囲第 9項に記載の炎症性角 化症治療薬。
11. PDTによる炎症性角化症治療のための請求の範囲第 1項に記載の式（I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理学的に許容さ れる塩の使用方法。
12. 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理 学的に許容される塩がナトリウム塩である請求の範囲第 11項に記載の使用方 法。
13. 請求の範囲第 1項に記載の式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギ ン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を投与して PDTを行うことに よるセンチネルリンパ節 （s en t i ne l 1 ymp h node) の存在部 位の確認および癌の転移診断する方法。
14. 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理 学的に許容される塩がナトリゥム塩である請求の範囲第 13項に記載の方法。
15. 請求の範囲第 1項に記載の式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギ ン酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする PDT用のセ ンチネルリンパ節 （s e n t i ne l 1 ymp h nod e) の存在部位の確 認および癌転移診断薬。
16. 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理 学的に許容される塩がナトリウム塩である請求の範囲第 15項に記載のセンチ ネルリンパ節 （s e n t i n e l l ymph nod e) の存在部位の確認お よび癌転移診断薬。
17. PDTによるセンチネルリンパ節 （s en t i n e l 1 ymp h n o d e ) の存在部位の確認および癌の転移を診断するための請求の範囲第 1項に記 載の式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理 学的に許容される塩の使用方法。
18. 式 （I) で示されるィミノクロリンァスパラギン酸誘導体またはその薬理 学的に許容される塩がナトリウム塩である請求の範囲第 17項に記載の使用方 法。
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