WO2003089655A1 - Vorrichtung zur probenrückhaltung bei biosensoren - Google Patents

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WO2003089655A1
WO2003089655A1 PCT/DE2003/001353 DE0301353W WO03089655A1 WO 2003089655 A1 WO2003089655 A1 WO 2003089655A1 DE 0301353 W DE0301353 W DE 0301353W WO 03089655 A1 WO03089655 A1 WO 03089655A1
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Alexander Schwock
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Bcs Bio- Und Chemosensoren Gmbh
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    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54393—Improving reaction conditions or stability, e.g. by coating or irradiation of surface, by reduction of non-specific binding, by promotion of specific binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing

Definitions

  • the invention relates to a device for reusable and continuously measuring biosensors, which makes it possible, with little technical effort, to keep a sufficient amount of analyte solution in front of the active element over the entire measuring time.
  • a miniaturized flow analysis system disclosed in DE-PS 44 10 224 works to generate a defined flow of measuring media with a flow channel designed as a capillary throttle, to which a pressure vessel with a variable volume is connected.
  • DE-OS 100 09 467 relates to an enzymatic-electrochemical flow measuring device for determining glucose in urine. Especially with such samples from flowing media that only occur for a short time, it is necessary to collect a sufficient amount of analyte solution and make it available for the measurement. In the aforementioned case, the sample is collected in a beaker (urine beaker), which is associated with additional effort for the user and often with inconvenience.
  • a beaker urine beaker
  • the object of the invention was therefore to provide a device for reusable or continuously measuring biosensors at low cost and with little technical outlay, which makes it possible, primarily in flowing analyte solutions, to ensure a defined amount of analyte is supplied to the sensor in sufficient quantity and over the entire measuring time and To protect the active element from drying out and mechanical stress at the same time
  • a drip catcher which is arranged at a defined constant distance above the active surface of the biosensor and fixes an analyte space in which the analyte solution also adheres to the active surface of the sensor vertical position of the sensor is held.
  • Advantageous embodiments of the device according to the invention result from the features of subclaims 2 to 4.
  • an analyte space is created in which the analyte is held in the volume above the active sensor surface by pure adhesive forces and can thus be measured.
  • the device according to the invention With the aid of the device according to the invention, a sufficiently large amount of sample from analyte stocks is passed to the active sensor element and held in front of it for the period of time required for the measuring process.
  • the device according to the invention is constructed in such a way that the volume taken up does not flow away from the sensor due to the action of the adhesive forces even when the sensor is in a vertical position. This defined analyte guidance to the sensor and the resulting sample retention are of crucial importance above all for flowing analyte stocks. Since the drip catcher according to the invention realizes a laminar flow of the analyte in front of the detection element when used in turbulent flowing media, it not only ensures reproducible measurement conditions on the active sensor element but also minimizes the mechanical load.
  • the device according to the invention brings about an additional stiffening of the sensor in the region of the active element, as a result of which further mechanical stabilization of the sensors is achieved. It is a further particular advantage of the device according to the invention that, with simple handling, it guarantees defined analyte guidance to the sensor in both standing and flowing analyte solutions and thus high measuring accuracy and reproducibility of the measuring results.
  • Fig. 1 shows a biosensor with a drip catcher according to the invention in plan view
  • Fig. 2 shows a side view of a biosensor with a drip catcher according to the invention
  • 3a shows a biosensor with a drip catcher according to the invention in a front view
  • 3b shows a biosensor with a multi-part drip catcher according to the invention consisting of a cover and side parts in a front view
  • FIG. 4 shows a biosensor with a drip catcher according to the invention with a defined constant distance from the sensor surface
  • Fig. 5a a closed drip catcher according to the invention in plan view
  • 5b shows a drip catcher according to the invention with a network structure in plan view.
  • the biosensor consists of a carrier with sensor structure 1, an active surface 2 and the drip catcher 3 according to the invention.
  • the drip catcher 3 completely covers the entire active surface 2 of the sensor.
  • FIGS. 3a and 3b show different embodiments of the drip catcher 3. While FIG. 3a shows a one-piece drip catcher, FIG. 3b shows a multi-part drip catcher 3 consisting of the drip catch cover 3.1 and drip catch side parts 3.2.
  • the analyte room 4 is highlighted in both figures.
  • FIGS. 4 shows the biosensor with the defined distance 5 between the inside of the drip cover 3.1 and the active surface 2 of the carrier with sensor structure 1. From the associated view of FIGS. 1 and 2 it can be seen that the drip 3 extends over the entire area active surface 2 of the sensor extends. It can be seen in FIGS. 3 and 4 that the distance 5 maintains a constant size. This distance 5 and the length of the drip catcher 3 over the active surface 2 are selected as a function of the properties of the analyte medium, in particular with regard to its viscosity, wetting behavior and adhesiveness, and finally define the size of the analyte volume retained by adhesion.
  • the distance 5 must not be too large, on the one hand, so that the adhesive forces are sufficient to hold the analyte volume, which is the size of a drop, on the other hand, it must not be too small, to enable simple and safe cleaning of the active sensor surface 2 by rinsing.
  • the sample inflow takes place either only through the channel formed between the carrier with sensor structure 1 and the drip cover 3.1 with the distance 5 in a defined direction or additionally through the permeable introduced into the surface of the drip 3 by perforation, slits or the use of permeable materials Openings.
  • 5a shows a closed drip catcher 3, into which additional permeable openings can be introduced in a known manner.
  • 5b shows a comparable drip catcher 3 with a lattice structure in plan view. The response time of the sensor can be significantly reduced.
  • the drip catcher according to the invention is preferably produced from suitable polymer materials and can be processed by mechanical processing steps such as milling, filing or
  • the drip catcher according to the invention is preferably fixed on them by gluing, pressing or clip connections.

Abstract

Die Erfindung betrifft eine als Tropfenfänger (3) gestaltete Vorrichtung für mehrfach verwendbare und kontinuierlich messende Biosensoren zur Gewährleistung einer definierten Analytführung an den Sensor in ausreichender Menge und über die gesamte Messzeit. Der Tropfenfänger (3) ist in einem definiert konstanten Abstand (5) über der gesamten aktiven Fläche (2) des Trägers mit Sensorstruktur (1) angeordnet und schafft einen Analytraum (4), der eine Analytlösung durch Adhäsion über der aktiven Sensorfläche (2) auch in senkrechter Stellung des Sensors zurückhält. In dem Analytraum wird der Analyt durch reine Adhäsionskräfte im Volumen über der aktiven Sensorfläche auch bei denkrechter Stellung des Sensors gehalten und kann so vermessen werden. Bei einfacher Handhabung ist in stehenden und in fließenden, insbesondere turbulenten Analytlösungen, eine definierte Analytführung an den Sensor und damit eine hohe Messgenauigkeit und Reproduzierbarkeit der Messergebnisse gewährleistet. Durch das Halten der Probenmenge auch nach Beendigung des Kontaktes mit der Probelösung wird der Sensor gleichzeitig vor Austrocknung geschützt.

Description

Vorrichtung zur Probenrückhaltung bei Biosensoren
Die Erfindung betrifft eine Vorrichtung für mehrfach verwendbare sowie für kontinuierlich messende Biosensoren, die es mit geringem technischen Aufwand möglich macht, eine ausreichende Menge Analytlösung über die gesamte Messzeit vor dem aktiven Element bereitzuhalten.
Es ist bekannt, die Analytkonzentrationen in Flüssigkeiten mit Hilfe entsprechend ausgelegter Sensoren zu bestimmen. Derartige, vorrangig im medizinisch-biochemischen Bereich eingesetzten und häufig nach dem Durchflussprinzip arbeitenden kontinuierlichen Systeme benötigen in der Regel größere Mengen an zu analysierender Flüssigkeit und liefern nur bedingt reproduzierbare Messergebnisse. Darüber hinaus ist der manuelltechnische Aufwand vergleichsweise hoch.
So wird z.B. in dem in der DE-OS 42 27 323 beschriebenen halbautomatischen Verfahren und der Durchflussmessanordnung nach dem Absaugen der im Durchflusskanal befindlichen Reinigungs- und/oder Pufferlösung und dem gleichzeitigen Ansaugen von Luft die Messflüssigkeit manuell zugeführt und so letztlich unter konstanten Fließbedingungen gemessen. Ein in der DE-PS 44 10 224 offenbartes miniaturisiertes Durchflussanalysensystem zur Erzeugung eines definierten Messmedien-Flusses arbeitet mit einem als Kapillardrossel ausgebildeten Fließkanal, an den ein Druckbehälter mit veränderbarem Volumen angeschlossen ist.
Gegenstand der DE-OS 100 09 467 ist eine enzymatisch-elektrochemische Durchflussmesseinrichtung zur Glucosebestimmung im Urin. Besonders bei solchen nur kurzzeitig vorkommenden Proben aus strömenden Medien ist es erforderlich, eine ausreichende Menge an Analytlösung aufzufangen und für die Messung bereitzustellen. Im vorgenannten Fall erfolgt das Auffangen der Probe in einem Becher (Urinbecher), was mit einem zusätzlichen Aufwand für den Anwender und oft mit Unannehmlichkeiten verbunden ist.
Die bisher beschriebenen technischen Lösungen für kontinuierlich messende Biosensoren zur erforderlichen Bereitstellung ausreichender Mengen Analytlösung am aktiven Element und für den gesamten Messzeitraum basieren durchweg auf Systemen zur minimierten Probenaufnahme aus Analytvorräten mittels Kapillarwirkung. Dies trifft zum Beispiel für den in der DE-OS 101 12 298 beschriebenen Messkammeraufsatz zu, dessen konstruktive Gestaltung so gewählt ist, dass ausschließlich Kapillarkräfte zur Wirkung kommen, d.h. der Analyt wird eingesaugt. Von einer vergleichbaren Kapillarwirkung zur Erzeugung dünner Flüssigkeitsfilme wird in der DE-OS 101 42 788 berichtet. Als weitere Beispiele für derartige kapillare Transport- und Wirkprinzipien bei Biosensoren sollen die US 5.120.420, US 5.264.103 und EP 1 113 264 zitiert werden.
Vor allem den letztgenannten Kapillarsystemen haftet der eindeutige Mangel an, dass sie für Messungen in fließenden bzw. strömenden Analytlösungen nicht oder nur bedingt geeignet sind.
Aufgabe der Erfindung war es deshalb, kostengünstig und mit geringem technischen Aufwand eine Vorrichtung für mehrfach verwendbare bzw. kontinuierlich messende Biosensoren bereitzustellen, die es ermöglicht, vorrangig in fließenden Analytlösungen eine definierte Analytfuhrung an den Sensor in ausreichender Menge und über die gesamte Messzeit zu gewährleisten und das aktive Element gleichzeitig vor Austrocknung und mechanischer Belastung zu schützen
Die Aufgabe der Erfindung wird gemäß den Merkmalen des Anspruches 1 durch einen Tropfenfänger gelöst, der in einem definiert-konstanten Abstand über der aktiven Fläche des Biosensors angeordnet ist und einen Analytraum fixiert, in dem die Analytlösung durch Adhäsion über der aktiven Oberfläche des Sensors auch in senkrechter Stellung des Sensors gehalten wird. Vorteilhafte Ausgestaltungen der erfindungsgemäßen Vorrichtung ergeben sich aus den Merkmalen der Unteransprüche 2 bis 4.
Durch das Auf- bzw. Anbringen des erfindungsgemäßen Tropfenfängers in definiertem Abstand über der aktiven Fläche des Trägers mit Sensorstruktur wird ein Analytraum geschaffen, in dem der Analyt durch reine Adhäsionskräfte im Volumen über der aktiven Sensorfläche gehalten wird und so vermessen werden kann.
Mit Hilfe der erfindungsgemäßen Vorrichtung wird eine ausreichend große Probenmenge aus Analytvorräten zu dem aktiven Sensorelement geleitet und vor diesem über den für den Messvorgang erforderlichen Zeitraum gehalten. Die erfindungsgemäße Vorrichtung ist dabei so konstruiert, dass das aufgenommene Volumen durch die Wirkung der Adhäsionskräfte auch bei senkrechter Stellung des Sensors nicht von diesem abfließt. Diese definierte Analytfuhrung an den Sensor und die bewirkte Probenrückhaltung sind dabei vor allem für fließende Analytvorräte von entscheidender Bedeutung. Da beim Einsatz in auch turbulent fließenden Medien durch den erfindungsgemäßen Tropfenfänger ein laminarer Fluß des Analyten vor dem Detektionselement realisiert wird, gewährleistet er nicht nur reproduzierbare Messbedingungen am aktiven Sensorelement sondern minimiert die mechanischer Belastung. Durch das Halten der Probenmenge auch nach Benendigung des Kontaktes mit der Probelösung wird der Sensor gleichzeitig vor Austrocknung geschützt. Bei Biosensoren auf flexiblen oder semiflexiblen Sensoren bewirkt die erfindungsgemäße Vorrichtung eine zusätzliche Versteifung des Sensors im Bereich des aktiven Elementes, wodurch eine weitere mechanische Stabilisierung der Sensoren erreicht wird. Es ist ein weiterer besonderer Vorzug der erfindungsgemäßen Vorrichtung, dass diese bei einfacher Handhabung sowohl in stehenden als auch in fließenden Analytlösungen eine definierte Analytfuhrung an den Sensor und damit eine hohe Messgenauigkeit und Reproduzierbarkeit der Messergebnisse gewährleistet.
Im folgenden werden Ausführungsformen der erfindungsgemäßen Vorrichtung anhand von Zeichnungen näher erläutert. Dabei zeigen
Fig. 1 Einen Biosensor mit erfindungsgemäßem Tropfenfänger in Draufsicht
Fig. 2 Einen Biosensor mit erfindungsgemäßem Tropfenfänger in Seitenansicht
Fig. 3a Einen Biosensor mit erfindungsgemäßem Tropfenfänger in Frontansicht Fig. 3b Einen Biosensor mit einem mehrteiligen erfindungsgemäßen Tropfenfänger bestehend aus einer Abdeckung und Seitenteilen in Frontansicht
Fig. 4 Einen Biosensor mit erfindungsgemäßem Tropfenfänger mit definiert konstantem Abstand zur Sensoroberfläche
Fig. 5a Einen geschlossenen erfindungsgemäßen Tropfenfänger in Draufsicht
Fig. 5b Einen erfindungsgemäßen Tropfenfänger mit Netzstruktur in Draufsicht.
Wie aus den Figuren 1 und 2 ersichtlich ist, besteht der Biosensor aus einem Träger mit Sensorstruktur 1 , einer aktiven Fläche 2 und dem erfindungsgemäßen Tropfenfänger 3. Der Tropfenfänger 3 überdeckt dabei vollständig die gesamte aktive Fläche 2 des Sensors. Die Figuren 3a und 3b zeigen unterschiedliche Ausführungsformen des Tropfenfängers 3. Während in Fig. 3a ein einteilig ausgebildeter Tropfenfänger dargestellt ist, zeigt Fig. 3b einen mehrteiligen Tropfenfänger 3 bestehend aus der Tropfenfänger-Abdeckung 3.1 und Tropfenfänger-Seitenteilen 3.2. Zusätzlich ist in beiden Figuren der Analytraum 4 hervorgehoben.
Fig. 4 zeigt den Biosensor mit dem definierten Abstand 5 zwischen der Innenseite der Tropfenfänger-Abdeckung 3.1 und der aktiven Fläche 2 des Trägers mit Sensorstruktur 1. Aus der dazugehörigen Ansicht der Figuren 1 und 2 ist ersichtlich, dass sich der Tropfenfänger 3 über die gesamte aktive Fläche 2 des Sensors erstreckt. In der Figuren 3 und 4 wird deutlich, dass der Abstand 5 eine konstante Größe beibehält. Dieser Abstand 5 und die Länge des Tropfenfängers 3 über der aktiven Fläche 2 werden in Abhängigkeit von den Eigenschaften des Analytmediums, vor allem in Bezug auf dessen Viskosität, Benetzungsverhalten und Adhäsionsvermögen, gewählt und definieren schließlich die Größe des durch Adhäsion zurückgehaltenen Analytvolumens. Der Abstand 5 darf einerseits nicht zu groß sein, damit die Adhäsionskräfte zum Halten des Analytvolumens, das die Größe eines Tropfens hat, ausreichen, andererseits darf er nicht zu klein sein, um eine einfache und sichere Reinigung der aktiven Sensorfläche 2 durch Spülen zu ermöglichen. Der Probenzufluss erfolgt entweder nur durch den zwischen dem Träger mit Sensorstruktur 1 und der Tropfenfänger-Abdeckung 3.1 gebildeten Kanal mit dem Abstand 5 in definierter Richtung oder zusätzlich durch in die Oberfläche des Tropfenfängers 3 durch Perforation, Schlitze oder den Einsatz von permeablen Materialien definiert eingebrachte permeable Öffnungen. Fig. 5a zeigt einen geschlossenen Tropfenfänger 3, in den zusätzliche permeable Öffnungen auf bekannte Art und Weise eingebracht werden können. Die Fig. 5b zeigt einen vergleichbaren Tropfenfänger 3 mit Gitterstruktur in Draufsicht. Die Ansprechzeit des Sensors kann dadurch wesentlich verkürzt werden.
Der erfindungsgemäße Tropfenfänger wird vorzugsweise aus geeigneten Polymermaterialien hergestellt und kann dabei durch mechanische Bearbeitungsschritte wie Fräsen, Feilen oder
Bohren bzw. durch Spritzgießen oder Tiefziehen aus einem Stück gefertigt oder aus mehreren Einzelteilen zusammengesetzt sein.
Der erfindungsgemäße Tropfenfänger wird nach der Herstellung der Biosensoren bevorzugt durch Kleben, Pressen oder Clip-Verbindungen auf diesen fixiert.
BEZUGSZEICHENAUFSTELLUNG
1 Träger mit Sensorstruktur
2 aktive Fläche
3 Tropfenfänger
3.1 Tropfenfänger-Abdeckung
3.2 Tropfenfänger-Seitenteile
4 Analytraum
5 Abstand der aktiven Fläche 2 zur Tropfenfänger-Abdeckung 3.1

Claims

Patentansprüche
1. Vorrichtung für mehrfach verwendbare und kontinuierlich messende Biosensoren zur Gewährleistung einer definierten Analytfuhrung an den Sensor in ausreichender Menge und über die gesamte Messzeit, dadurch gekennzeichnet, dass die Vorrichtung ein spezifisch gestalteter Tropfenfänger (3) ist, der in definiert konstantem Abstand (5) über der gesamten aktiven Fläche (2) des Trägers mit Sensorstruktur (1 ) angeordnet ist und einen Analytraum (4) schafft, der eine Analytlösung durch Adhäsion über der aktiven Sensorfläche (2) auch in senkrechter Stellung des Sensors zurückhält.
2. Vorrichtung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass der definierte Abstand (5) zwischen der aktiven Fläche (2) des Trägers mit Sensorstruktur (1 ) und der Oberfläche der Tropfenfänger-Abdeckung (3.1 ) und die Gesamtlänge des Tropenfängers (3) über der aktiven Fläche (2) des Trägers mit Sensorstruktur (1) das aus dem Analytvorrat abtrennbare und durch Adhäsion gehaltene Probevolumen bestimmen, wobei der Abstand (5) abhängig von den Eigenschaften des Analyten mindestens 0,5 mm beträgt.
3. Vorrichtung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass der Tropfenfänger (3) aus geeigneten Polymermaterialien in einem Stück gefertigt oder aus mehreren Einzelteilen (3.1 ; 3.2) zusammengesetzt ist und wahlweise dessen Oberfläche durch Perforation, Schlitze oder den Einsatz permeabler Materialien zusätzliche, definiert eingebrachte Öffnungen enthält.
4. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass der Tropfenfänger (3) durch Kleben, Pressen oder Clip-Verbindungen auf dem Träger mit Sensorstruktur (1 ) befestigt ist und so die aktive Fläche (2) des Sensors (1) vor dem Austrocknen und mechanischer Belastung schützt.
PCT/DE2003/001353 2002-04-22 2003-04-22 Vorrichtung zur probenrückhaltung bei biosensoren WO2003089655A1 (de)

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