WO2002013874A2 - Verwendung von perfluoralkylhaltigen metallkomplexen als kontrastmittel im mr-imaging zur darstellung von plaques, tumoren und nekrosen - Google Patents

Verwendung von perfluoralkylhaltigen metallkomplexen als kontrastmittel im mr-imaging zur darstellung von plaques, tumoren und nekrosen Download PDF

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Definitions

  • the invention relates to the use of perfluoroalkyl-containing metal complexes which have a critical micelle concentration ⁇ 10 "3 mol / l, a hydrodynamic micelle diameter (2 Rh)> 1 nm and a proton relaxivity in plasma (R 1 )> 10 I / mmol-s , as a contrast medium in MR imaging for the display of plaques, lymph nodes, infarcted and necrotic tissue as well as for the independent display of necrotic tissue and tumor tissue.
  • perfluoroalkyl-containing metal complexes with the properties mentioned for the independent display of plaques, tumors and necrosis with the help of MR imaging are outstandingly suitable and at the same time can also cover the diagnostically important area of infarct and necrosis imaging.
  • Atherosclerosis is the most important and most common pathological change in the arteries with hardening, thickening, loss of elasticity and narrowing of the glade. It is the most common cause of death in the western industrialized nations.
  • Vascular wall changes lead to wall instability, vasoconstriction and clot deposition due to lipid storage, connective tissue growth and calcification with irregular distribution.
  • the cause of the disease are numerous exogenous and endogenous noxa or diseases, such as hypertension, hyperlipidemia, hyperfibrinogenemia, diabetes mellitus, toxins, nicotine, antigen-antibody complexes, inflammation, hypoxia, psychological stress, old age and familial Burden.
  • arteriosclerosis in clinical practice is currently mainly based on angiography as the gold standard.
  • the limitation in all methods based on the measurement of the reduction of the vascular lumen is the early stage of the disease, which is characterized by a thickening of the vascular wall in normal vascular lumen (Glagov S, Zarins CK. Quantitating atherosclerosis. In: Bond MG, Insull W, Glagov S, Chandler AB, Cornhill JF (eds.). Clinical Diagnosis of Atherosclerosis. Quantitative Methods of Evaluation. New York: Springer-Verlag, 1983, 11-35).
  • Another method for the diagnostic assessment of vascular wall and lumen is intravascular or percutaneous ultrasound.
  • Magnetic magnetic resonance imaging is a modern, non-invasive radiological procedure that enables the display of physiological and pathophysiological structures with a very good spatial and temporal resolution.
  • the use of specific contrast agents with selective enrichment in certain tissues and organs can significantly increase the diagnostic value. Contrast agent preparations with selective enrichment in arteriosclerotic plaques could detect the location and degree of the disease at an early stage and thus enable targeted therapy and prophylaxis, and the search for suitable contrast agents therefore began early on.
  • US Pat. No. 4,577,636 claims hematoporphyrin derivatives as contrast agents for the detection of atherosclerotic plaques. Scintigraphy, X-ray, fluorescence and, for paramagnetic metalloporphyrins, NMR spectrometry are mentioned as methods. Gd, Cr, Co, Ni, Ag and Eu are listed as para-magnetic ions. The disadvantage of these compounds is that the porphyrins are deposited in the skin and cause discoloration that can last up to several weeks. In addition, they lead to photosensitization. Furthermore, there is a risk that the metalloporphyrin will lose the metal after a long residence time in vivo.
  • metalloporphyrins (deuteroporphyrins) are claimed for diagnosis and therapy of plaques.
  • the MRI is mentioned as the diagnostic method. It also applies to these porphyrins that they cause discoloration of the skin.
  • TMPyP 111 In- 5,10,15,20-tetrakis (4-N-methyl-pyridinium) -porphyrin
  • Porphyrins tend to deposit in the skin, which leads to photosensitization. Sensitization can last for days, even weeks. This is an undesirable side effect when using porphyrins as diagnostics.
  • the therapeutic index for the porphyrins is only very small, since for Mn-TPPS, for example, an effect only occurs at a dose of 0.2 mmol / kg, but the LD50 is already at 0.5 mmol / kg. Contrast agents for necrosis and infarct imaging that are not derived from the porphyrin scaffold have been described in DE 19744003 (Schering AG), DE 19744004 (Schering AG) and WO 99/17809 (EPIX).
  • Perfluoroalkyl-containing metal complexes are also known as contrast agents for MR imaging.
  • WO 97/26017 (Schering) and WO 99/01161 (Schering) disclose the use of perfluoroalkyl-containing metal complexes as lymphographics.
  • WO 99/01161 also describes the suitability of these compounds for representing the vasal space (blood pool agents).
  • Contrast agents have also been described for the individual imaging of tumors and necrosis using MR imaging.
  • EP 417870 A1 discloses compounds for tumor diagnosis and therapy. It is said that infarcts and ischemia can also be represented. However, there is no experimental confirmation of this statement in the registration.
  • the claimed compounds are chelates of complexes of the types N2S2 and N3S with radioisotopes. Scintigraphy serves as the diagnostic method. In DE 19646762, scintigraphy is also used as a diagnostic method.
  • metal chelates are claimed as radio sensitizers for the therapy of hypoxic tumors and for the diagnosis of hypoxic conditions and necrosis.
  • NMR diagnostics, X-ray diagnostics and radio diagnostics are mentioned as diagnostic methods.
  • German application DE 19824653 claims porphyrins as necrosis-affecting substances for the therapy of tumors.
  • the application states that the compounds accumulate in the necrotic and hypoxic areas of tumors.
  • the compounds can be used for diagnostic purposes in the form of their metal derivatives with paramagnetic ions or radioisotopes.
  • the object of the present invention was to provide contrast media for MR imaging which are suitable both for displaying plaques, lymph nodes, infarcted and necrotic tissue and for independently displaying necrosis and tumors.
  • perfluoroalkyl-containing metal complexes which have a critical micelle formation concentration ⁇ 10 "3 mol / l, a hydrodynamic micelle diameter (2 Rh)> 1 nm and a proton relaxivity in the plasma (R 1 )> 10 1 / mmol s, are very suitable as contrast agents in MR imaging to display plaques, and can also be used to display lymph nodes, infarcted and necrotic tissue as well as for the independent display of necrotic tissue and tumor tissue.
  • Perfluoroalkyl-containing metal complexes which are suitable for the use according to the invention are understood to be amphiphilic compounds which, as the non-polar part, have a perfluoroalkyl side chain in the molecule which is optionally connected to the entire molecule via a lipophilic linker.
  • the polar part The compounds according to the invention are formed by one or more metal complexes and any other polar groups which may be present.
  • these amphiphilic molecules show the properties that are characteristic of classic surfactants (such as sodium dodecyl sulfate, SDS). This is how they reduce the surface tension of the water.
  • the so-called CMC critical micelle formation concentration in mol / l
  • the CMC can be determined by tensiometry. For this purpose, the surface tension is determined depending on the concentration of the substance to be measured.
  • the CMC can be calculated from the course of the surface tension function (c) obtained.
  • the critical micelle formation concentration of the compounds according to the invention must be ⁇ 10 -3 mol / l, preferably ⁇ 10 * 4 mol / l.
  • the amphiphilic compounds according to the invention are associated in solution and are present as aggregates.
  • the size (2 Rh) of such aggregates e.g. micelles, rods, wafers, etc.
  • PCS Photon Correction Spectroscopy
  • the hydrodynamic micelle diameter 2 Rh which must be> 1 nm, therefore serves as the second criterion.
  • Those perfluoroalkyl-containing metal complexes whose 2 Rh is> 3 nm are particularly suitable according to the invention, very particularly preferably> 4 nm.
  • the third criterion is proton relaxivity in plasma (R 1 ) at 40 ° C and a field strength of 0.47 Tesla.
  • the relaxivity which is given in [l / mmol-s], is the quantitative measure for the shortening of the relaxation time T 1 of the protons.
  • the relaxivity must be as possible be high and be> 10 l / mmol-s, preferably> 13 l / mmol-s, particularly preferably> 15 l / mmol-s.
  • the relaxivity R 1 [l / mmol-s] of the MR contrast agents according to the invention was determined using the Minispec P 20 device from Bruker. The measurements were carried out at 40 ° C and a field strength of 0.47 Tesla. 8 measurement points were recorded from each T1 sequence: 180 ° -TI -90 °, inversion recovery. Bovine plasma from Kraeber was used as the medium. The contrast medium concentrations [mmol / l] were between 0.30 and 1.16 in the batches.
  • the compounds of the general formula I according to claims 8 to 11 are used as preferred compounds. These are known compounds which are described in WO 97/26017. Their production can also be found in this WO document. Surprisingly, it has been shown that these compounds are also very suitable as MRI contrast agents for the display of plaques.
  • the metal complexes I-IV, VI and Xl-Xlll (cf. also Table 1) are used as very particularly preferred compounds.
  • preferred compounds are those of the general formula Ia according to Claims 12 to 21. These compounds are known and are described in WO 99/01161. Their use as an MRI contrast medium to display plaques has not yet been described. Of these compounds, the metal complex XIV (cf. Table 1) is very particularly preferably used.
  • R 1 for a hydrogen atom or a metal ion equivalent of atomic numbers 23-29, 42-46 or 58-70
  • R 2 and R 3 for a hydrogen atom, a CrC 7 alkyl group, a benzyl group, a phenyl group, -CH 2 OH or -CH 2 -OCH 3
  • U 2 for the radical L 1 , where L 1 and U 2 can be the same or different independently of one another
  • a 1 is a hydrogen atom, a straight-chain or branched C 1 -C 3 o-alkyl- group which is optionally interrupted by 1-15 oxygen atoms, and / or is optionally substituted with 1-10 hydroxyl groups, 1-2 COOH groups, a phenyl group, a benzyl group and / or 1-5 - OR 9 groups, with R 9 has the meaning of a hydrogen atom or a CrCT-alkyl radical, or -L 1 -R F , L 1 is a straight-chain
  • E represents a terminal fluorine atom, chlorine atom, bromine atom, iodine atom or a hydrogen atom, and any acid groups present can optionally be present as salts of organic and / or inorganic bases or amino acids or amino acid amides.
  • the metal ion of the signaling group must be paramagnetic.
  • Suitable ions are, for example, chromium (III), iron (II), cobalt (II), nickel (II), copper (II), praseodymium (III), neodymium (III), samarium (III ) - and ytterbium (III) ion. Because of their strong magnetic moment, gadolinium (III), terbium (III), dysprosium (III), holmium (III), erbium (III), iron (III) and manganese (II) ions are particularly preferred ,
  • Manganese (II) -, iron (II) -, iron (III) -, praseodymium (III) -, neodymium (III) -, samarium (III) -, gadolinium (III) - and ytterbium (III) - are preferred ions, especially dyspro- sium (III) ions.
  • the alkyl groups R 2 , R 3 , R 9 can be straight-chain or branched. Examples include methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl, n-pentyl, 1-methylbutyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, 1,2-dimethylpropyl.
  • Hydrogen and CrC alkyl groups are preferred for R 2 , R 3 and R 9 , particularly preferably hydrogen and the methyl group.
  • the benzyl group and the phenyl group R 2 , A 1 and B 1 can be substituted in the phenyl ring.
  • the COOH group can be used as a substituent.
  • L 1 and U 2 can be different from one another.
  • the CrC 3 o-alkylene groups U 2 can be straight-chain or branched. Examples include methylene, ethylene, propylene, isopropylene, n-butylene, 1-methylpropylene, 2-methylpropylene, n-pentylene, 1-methylbutylene, 2-methylbutylene, 3-methylbutylene, 1, 2-dimethylpropylene.
  • C 1 -C 10 alkylene groups are preferred, and C 1 -C 4 alkylene groups are particularly preferred.
  • the C 1 -C 30 -alkyl groups A 1 can be straight-chain or branched. Examples include methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl, n-pentyl, 1-methylbutyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, 1,2-dimethylpropyl, n-hexyl.
  • the CrC3o-alkyl groups A 1 can be interrupted by 1-15 oxygen atoms and / or substituted with 1-10 hydroxyl, 1-5 alkoxy or 1-2 COOH groups such as
  • a 1 Hydrogen, chlorine, bromine or iodine atom.
  • Preferred meanings for A 1 are hydrogen, C t -Cio alkyl, C 2 H 4 -O-CH 3, C 3 H 6 -O-CH 3,
  • ⁇ -CH 2 NHCOCH2-0-CH2CH 2 -ß ⁇ -CH2-CH2NHCOCH2-0-CH 2 CH 2 -ß ⁇ -CH 2 - (CH 2 -CH 2 -0) y - (CH2) 3NHCO-CH2-0-CH 2 CH2-ß with y 1-6 ⁇ -CH 2 NHCO (CH2) io-0 -CH2CH -ß ⁇ -CH 2 CH NHCO (CH2) ⁇ 0-O-CH 2 CH 2 -ß ⁇ -CH 2 -0-CH 2 -CH (OC- ⁇ 0 H21) -CH 2 -0-CH 2 CH2-ß
  • radicals L 1 of the compounds mentioned in the examples of the present description of the invention are very particularly preferred according to the invention.
  • the radicals listed above apply to L 1 and the preferred and particularly preferably marked radicals, and also the radicals listed above for the meaning alkylene and optionally preferred and particularly preferred radicals, with the proviso that no ⁇ -nitrogen atom and no terminal ( ß-permanent) S0 2 - or CO group may be present.
  • Preferred radicals B 1 are hydrogen, straight or branched C 1 -C 1 0-AI kylreste, optionally interrupted by 1-5 oxygen atoms, and / or are optionally substituted with 1-5 hydroxy groups, 1-2 COOH groups, a optionally substituted by a COOH group, a phenyl group, a benzyl group and / or 1-5-OR 9 groups, with R 9 in the meaning of a hydrogen atom or a C 1 -C 3 -alkyl radical.
  • R F are straight-chain or branched perfluorinated alkyl radicals of the formula C n F 2n E, where n represents the numbers 4 to 15 and E represents a terminal fluorine atom.
  • the carboxylic acid of formula IIIb already contains the metal ion equivalent R 1 .
  • the carboxylic acid IIIb is reacted with an amine IVb in a coupling reaction to form an amide Ib.
  • the mixture of metal complex carboxylic acid IIIb used in the coupling reaction which optionally contains carboxy and / or hydroxyl groups in protected form, and at least one solubilizing substance in an amount of up to 5, preferably 0.5-2 molar equivalents, based on the metal complex carboxylic acid both prepared in an upstream reaction stage and isolated (for example by evaporation, freeze-drying or spray-drying an aqueous or water-miscible solution of the constituents or by precipitation with an organic solvent from such a solution) and then in DMSO with water-releasing reagent and, if appropriate, a coupling agent.
  • Auxiliary are implemented as well as formed in situ, if necessary, by adding solvent-imparting substance (s) to the DMSO suspension of metal complex carboxylic acid, water-releasing reagent and optionally a coupling auxiliary.
  • the reaction solution prepared by one of these processes is kept for pretreatment (acid activation) for 1 to 24, preferably 3 to 12 hours at temperatures of 0 to 50 ° C., preferably at room temperature.
  • R V i U R F A (IVb) in which the radicals R 3 , L 1 , R F and A 1 have the meanings given above, without solvent or dissolved, for example in dimethyl sulfoxide, alcohols such as, for example, methanol, ethanol, isopropanol or mixtures thereof, formamide, dimethylformamide, Water or mixtures of the solvents listed, preferably in dimethyl sulfoxide, in water or in solvents mixed with water, are added.
  • the reaction solution thus obtained is kept at temperatures from 0 to 70 ° C., preferably 30 to 60 ° C., 1 to 48, preferably 8 to 24 hours.
  • amine in the form of its salts, e.g. use as hydrobromide or hydrochloride in the reaction.
  • a base such as e.g. Triethylamine, diisopropylethylamine, N-methylmorpholine, pyridine, tripropylamine, tributylamine, lithium hydroxide, lithium carbonate, sodium hydroxide or sodium carbonate are added.
  • the protective groups that may still be present are then split off.
  • reaction product is isolated by the methods known to the person skilled in the art, preferably by precipitation with organic solvents, preferably acetone, 2-butanone, diethyl ether, ethyl acetate, methyl t-butyl ether, isopropanol or mixtures thereof. Further purification can be carried out, for example, by chromatography, crystallization or ultrafiltration. Alkali, alkaline earth, trialkylammonium, tetraalkylammonium salts, ureas, N-hydroxyimides, hydroxyaryltriazoles, substituted phenols and salts of heterocyclic amines are suitable as solubilizing substances.
  • Examples include: lithium chloride, lithium bromide, lithium iodide, sodium bromide, sodium iodide, lithium methanesulfonate, sodium methanesulfonate, lithium p-toluenesulfonate, sodium p-toluenesulfonate, potassium bromide, potassium iodide, sodium chloride, magnesium bromide, magnesium chloride, magnesium iodide, tetraethyl amide toluenesulfonate, tetramethylammonium p-toluenesulfonate, pyridinium p-toluenesulfonate, triethylammonium p-toluenesulfonate, 2-morpholinoethylsulfonic acid, 4-nitrophenol, 3,5-dinitrophenol, 2,4-dichlorophenol, N-hydroxysuccinide Hydroxyphthalimide, urea, tetramethylure
  • DCCI Dicyclohexylcarbodiimide
  • EDC 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydroxychloride
  • BOP benzotriazole-1-yloxytris (dimethylamino) phosphonium hexafluorophosphate
  • HBTU 1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate
  • Suitable coupling auxiliaries to be used are all known to the person skilled in the art (Houben-Weyl, Methods of Organic Chemistry, Vol. XV / 2, Georg Thieme-Verlag, Stuttgart, 1974). Examples include 4-nitrophenol, N-hydroxysuccinimide, 1-hydroxybenzotriazole, 1-hydroxy-7-aza-benzotriazole, 3,5-dinitrophenol and pentafluorophenol. 4-nitrophenol and N-hydroxysuccinimide are preferred, the former reagent being particularly preferred.
  • the protective groups are cleaved off according to the processes known to the person skilled in the art, for example by hydrolysis, hydrogenolysis, alkaline saponification of the esters with alkali in aqueous / alcoholic solution at temperatures from 0 ° to 50 ° C, acid saponification with mineral acids or in the case of e.g. tert-Butyl esters with the help of trifluoroacetic acid.
  • hydrolysis, hydrogenolysis, alkaline saponification of the esters with alkali in aqueous / alcoholic solution at temperatures from 0 ° to 50 ° C acid saponification with mineral acids or in the case of e.g. tert-Butyl esters with the help of trifluoroacetic acid.
  • tert-Butyl esters with the help of trifluoroacetic acid.
  • R, A 1 , L 1 and R 3 have the meaning given above, and L 'has the meaning of the group L 1 in which the ⁇ -CH 2 group is still missing, and
  • R 9 represents hydrogen or a methyl group.
  • the acid Vb is activated before the reaction with the amine VIb.
  • R 9 in the meaning of a methyl group an aminolysis is carried out.
  • the compounds of the general formula Vb are commodities (Fluorochem, ABCR) or are produced as disclosed in DE 19603033.
  • the compounds of the formula VIb are commodities (Fluorochem, ABCR) or, as in Houben-Weyl, Methods of Organic Chemistry, XI / 2 nitrogen compounds, Georg Thieme Verlag Stuttgart, 1957, p. 680; JE Rickman and T. Atkins, Am. Chem. Soc, 96: 2268, 1974, 96: 2268; F. Chavez and AD Sherry, J. Org. Chem. 1989, 54: 2990:
  • the compounds of the general formula IVb are prepared in a manner known per se [Helv. Chim. Acta, 77: 23 (1994)] by reducing the compounds of the general formula VII, for example with diborane or lithium aluminum hydride, and splitting off the protective groups.
  • the carboxylic acid of formula II Ix with R 1 in the meaning of hydrogen serves as the starting material - it does not yet contain any metal ion equivalent R 1 .
  • the carboxyl groups are protected by the processes known to the person skilled in the art and a compound of the formula Uly is obtained, where R 5 stands for any protective group and R 5 stands for its precursor.
  • carboxyl protecting group e.g. straight-chain or branched C-j-C ⁇ -
  • Alkyl, aryl and aralkyl groups for example the methyl, ethyl, propyl, butyl, phenyl, benzyl, diphenylmethyl, triphenylmethyl, bis ( ⁇ -nitrophenyl) methyl group and trialkylsilyl groups in question.
  • the t-butyl group is preferred.
  • metal complex obtained from process A or B still contains free COOH groups, these groups can also be present as salts of physiologically compatible inorganic or organic bases.
  • any free carboxy groups still present are then neutralized with the aid of inorganic bases (for example hydroxides, carbonates or bicarbonates) of, for example, sodium, potassium, lithium, magnesium or calcium and / or organic bases, such as primary, secondary and tertiary amines, such as for example ethanolamine, morpholine, glucamine, N-methyl- and N, N-dimethylglucamine, as well as basic amino acids, such as lysine, arginine and ornithine or amides of originally neutral or acidic amino acids.
  • inorganic bases for example hydroxides, carbonates or bicarbonates
  • inorganic bases for example hydroxides, carbonates or bicarbonates
  • organic bases such as primary, secondary and tertiary amines, such as for example ethanolamine, morpholine, glucamine, N-methyl- and N, N-dimethylglucamine, as well as basic amino acids, such as lysine, arginine and ornithine or
  • the metal complexes V, VII, VIII, IX and X are very particularly preferably used.
  • R represents a mono- or oligosaccharide residue bonded via the 1-OH or 1-SH position
  • R F is a perfluorinated, straight-chain or branched carbon chain with the formula -C n F 2n E, in which E represents a terminal fluorine, chlorine, bromine, iodine or hydrogen atom and n represents the numbers 4-30,
  • K represents a metal complex of the general formula IIc
  • R 1 is a hydrogen atom or a metal ion equivalent of
  • R 2 and R 3 independently represent hydrogen, CrC7-alkyl, benzyl, phenyl, -CH 2 OH or -CH 2 OCH 3 and
  • R 4 represents hydrogen or a metal ion equivalent mentioned under R 1 and U 1 -C 6 H 4 represents -0-CH 2 - ⁇ -, where ⁇ represents the binding site at -CO-
  • radical K may be present as salts of organic and / or inorganic bases or amino acids or amino acid amides,
  • K denotes the metal complexes IIc to Vllc, it represents an at least triple-functionalized radical selected from the following radicals a) to j)
  • ⁇ is the binding site of G to the complex K
  • ß is the binding site of G to the radical Y
  • ⁇ is the binding site of G to the radical Z.
  • Y -CH 2 -, ⁇ - (CH 2 ) 1 . 5 means CO-ß, ⁇ -CH 2 -CHOH-CO-ß or ⁇ -CH (CHOH-CH 2 OH) - CHOH-CHOH-CO-ß, where ⁇ represents the binding site to the sugar residue R and ß the binding site to the rest G is For
  • I 1 , m 1 independently of one another are the integers 1 or 2 and p 1 is the integers 1 to 4,
  • the metal ion of the signaling group must be paramagnetic.
  • these are in particular the divalent and trivalent ions of the elements of atomic numbers 23-29, 42-46 and 58-70. Suitable ions are, for example, chromium (III), iron (II), cobalt (II), nickel (II), copper (II), praseodymium (III), neodymium (III), samarium (III ) - and ytterbium (III) ion.
  • gadolinium (III), terbium (III), dysprosium (III), holmium (III), erbium (III), iron (III) and manganese (II) ions are particularly preferred .
  • Manganese (II), iron (II), iron (III), praseodymium (III), neodymium (III), samarium (III), gadolinium (III) and ytterbium (III) ions are preferred , especially dyspro- sium (III) ions.
  • Acidic hydrogen atoms which are optionally present in R 1 that is to say those which have not been substituted by the central ion, can optionally be wholly or partly replaced by cations of inorganic and / or organic bases or amino acids or amino acid amides.
  • Suitable inorganic cations are, for example, lithium ion, potassium ion, calcium ion and in particular sodium ion.
  • Suitable cations of organic bases include those of primary, secondary or tertiary amines, such as, for example, ethanolamine, diethanolamine, morpholine, glucamine, N, N-dimethylglucamine and in particular N-methylglucamine.
  • Suitable cations of amino acids are, for example, those of lysine, arginine and ornithine and the amides of otherwise acidic or neutral amino acids.
  • Particularly preferred compounds of the general formula Ic are those with the macrocycle K of the general formula IIc.
  • the radical U in the metal complex K preferably denotes -CH 2 - or C 6 H 4 -O- CH 2 -CD, where ⁇ stands for the binding site at -CO-.
  • the alkyl groups R 2 and R 3 in the macrocycle of the general formula IIc can be straight-chain or branched. Examples include methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl, n-pentyl, 1-methylbutyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, 1, 2-dimethylpropyl.
  • R 2 and R 3 are preferably, independently of one another, hydrogen or dC 4 alkyl. In a very particularly preferred embodiment, R 2 is methyl and R 3 is hydrogen.
  • the benzyl group or the phenyl group R 2 or R 3 in the macrocycle K of the general formula IIc can also be substituted in the ring.
  • the radical R in the general formula Ic denotes a mono- or oligosaccharide radical or thio sugar radical which is bonded via the 1-OH or 1-SH position, which may also be deoxy sugar according to the invention which instead of one or more OH groups H atom included.
  • R denotes a monosaccharide residue with 5 or 6 carbon atoms, preferably glucose, mannose, galactose, ribose, arabinose or xylose or their deoxy sugar such as 6-deoxygalactose (fucose) or 6-deoxymannose (rhamnose) or their Thio sugar, with glucose, mannose and galactose being particularly preferred.
  • R F is -C n F 2n + ⁇
  • n is preferably the numbers 4-15.
  • the radicals - CF 9 , -C 6 Fi3, -C 8 Fi7, -C 12 F 25 and -C 14 F29 and the radicals of the compounds mentioned in the examples are very particularly preferred.
  • the at least triple-functionalized radical G in the general formula Ic, which represents the “framework”, in a preferred embodiment of the invention means the lysine residue (a) or (b).
  • Y and Z denote the linkers indicated in the general formula Ic, where, independently of one another, Z is the rest
  • ⁇ -CH 2 CO-ß is preferred for Y.
  • R 5 is a metal ion equivalent of atomic numbers 23-29, 42-46, or 58- 70 or a carboxyl protecting group
  • R 2 , R 3 and U have the meaning given
  • R 4 , R 5 and U 1 have the meaning given or a carboxylic acid of the general formula IVi
  • R 5 and R 2 have the meaning given or a carboxylic acid of the general formula Vi or Vii
  • R 5 has the meaning given or a carboxylic acid of the general formula VIII
  • R 5 and U 1 have the meanings mentioned, in optionally activated form with an amine of the general formula IXc
  • G has the meaning of the formulas a) to j) and R, R F , Y, Z, m 1 and p 1 have the meaning given, in a coupling reaction and, if appropriate, subsequent cleavage of any protective groups which may be present to give a metal complex of the general formula Ic or if R 5 has the meaning of a protective group, after splitting off these protective groups in a subsequent step in a manner known per se with at least one metal oxide or metal salt of an element of atomic numbers 23-29, 42-46 or 58-70, and then if Desired, any acidic hydrogen atoms present are substituted by cations of inorganic and / or organic bases, amino acids or amino acid amides.
  • the compounds of the general formula Ic with K in the meaning of a metal complex of the general formula VIIIc and G in the meaning of the formulas k) or I) are prepared by using an amine of the general formula VIIIi in a manner known per se (Vllli)
  • R 5 is a metal ion equivalent of atomic numbers 23-29, 42-46 or 58- 70 or a carboxyl protecting group
  • G has the meaning of the formulas k) or I) and R, R F , Y, Z, m 1 and p 1 have the meanings given, in a coupling reaction and, if appropriate, subsequent cleavage of any protective groups which may be present, to give a metal complex of the general formula Ic or if R 5 has the meaning of a protective group, after splitting off these protective groups in a subsequent step in a manner known per se with at least one metal oxide or metal salt of an element of atomic numbers 23-29, 42-46 or 58-70, and then if desired , any acidic hydrogen atoms present are substituted by cations of inorganic and / or organic bases, amino acids or amino acid amides.
  • the carboxylic acids of the general formulas Mi to VIII used are either known compounds or are prepared by the processes described in the examples. This is how the carboxylic acids are made the general formula III from DE 19652386 known. The production of the carboxylic acids of the general formula IVi can be found in DE 19728954.
  • the precursor for compounds of the general formula VcA is N 3 - (2,6-dioxomorpholinoethyl) -N 6 - (ethoxycarbonylmethyl) -3,6-diaza-octanedioic acid, which is described in EP 263059.
  • the compounds of the general formula VcB are derived from the isomeric diethylenetriamine-pentaacetic acid, which binds via the acetic acid at the middle N atom.
  • This DTPA is described in the patents DE 19507819 and DE 19508058.
  • the perbenzylated sugar acids used as starting materials can be analogous to Lockhoff, Angew. Chem. 1998, 110 No. 24, pp. 3634ff. Getting produced.
  • the production of 1-O-acetic acid from perbenzyl-glucose takes place in two stages, via trichloroacetimidate and reaction with ethyl hydroxyacetate, BF 3 catalysis in THF and subsequent saponification with NaOH in MeOH / THF.
  • the perbenzylated sugar acids used as starting materials can also be prepared by dissolving the perbenzylated 1-OH sugars in a water-immiscible organic solvent and with an alkylating reagent of the general formula Xlc Nu-L-COO-Sg (Xlc),
  • Nu is a nucleofug
  • L is - (CH 2 ) ( ⁇ - 5 ), -CH 2 -CHOH-, -CH (CHOH-CH 2 OH) -CHOH-CHOH-, and Sg represents a protective group
  • the residues -Cl, -Br, -J, -OTs, -OMs, - OS0 2 CF 3 , -OS0 2 C 4 F 9 or -OS0 2 C 8 F 17 can be contained in the alkylation reagent of the general formula Xlc, for example .
  • the protective group is a common acid protective group.
  • the reaction according to the invention can take place at temperatures from 0-50 ° C., preferably from 0 ° C. to room temperature.
  • the reaction times are from 10 minutes to 24 hours, preferably from 20 minutes to 12 hours.
  • the base is either added in solid form, preferably finely powdered, or as a 10-70%, preferably 30-50%, aqueous solution. NaOH and KOH serve as preferred bases.
  • organic water-immiscible solvents, for example toluene, benzene, CF 3 -benzene, hexane, cyclohexane, diethyl ether, tetrahydrofuran, dichloromethane, MTB or mixtures thereof can be used in the alkylation process according to the invention.
  • phase transfer catalysts used in the process according to the invention are the quaternary ammonium or phosphonium salts known for this purpose or also crown ethers such as, for. B. [15] Crown-5 or [18] Crown-6.
  • Quaternary ammonium salts with four identical or different hydrocarbon groups on the cation selected from methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl or isobutyl are preferred.
  • the hydrocarbon groups on Cations must be large enough to ensure good solubility of the alkylation reagent in the organic solvent. According to the invention, particular preference is given to using N (butyl) 4 + -Cr, N (butyl) + -HS ⁇ 4 " , but also N (methyl) 4 + -CI ' .
  • the metal complex XV of Table 1 (Example 1) is used as a very particularly preferred compound of the general formula Ic.
  • R F is a perfluorinated, straight-chain or branched carbon chain with the formula -C n F 2n E, in which E represents a terminal fluorine, chlorine, bromine, iodine or hydrogen atom and n represents the numbers 4-30,
  • K represents a metal complex of the general formula IIId
  • R 1 is a hydrogen atom or a metal ion equivalent of
  • Atomic numbers 23-29, 42-46 or 58-70 means with the proviso that at least two R 1 represent metal ion equivalents
  • R 2 and R 3 are independently hydrogen, -CC 7 alkyl, benzyl, phenyl, -CH 2 OH or -CH 2 OCH 3 and
  • R 4 represents hydrogen or a metal ion equivalent mentioned under R 1 and U 1 -C 6 H 4 -0-CH 2 - ⁇ -, where ⁇ is the binding site to -CO- means or the general formula IVd
  • U 1 -C 6 H 4 represents -0-CH2- ⁇ -, where ⁇ is the binding site at -CO-
  • free acid groups which may be present in the rest K may optionally be present as salts of organic and / or inorganic bases or amino acids or amino acid amides,
  • G represents an at least triple-functionalized residue selected from the following residues a) to g)
  • ⁇ is the binding site of G to the complex K
  • ß is the binding site of G to the radical R
  • ⁇ is the binding site of G to the radical Z.
  • R represents a polar radical selected from the complexes K of the general formulas Ild to VI Id, where R 1 here Is hydrogen atom or a metal ion equivalent of atomic numbers 20, 23-29, 42-46 or 58-70, and the radicals R 2 , R 3 , R 4 , U and U 1 have the meaning given above or the folic acid radical or a -CO -, S0 2 - or a direct bond to the radical G bonded carbon chain with 2-30 C atoms means, straight or branched, saturated or unsaturated, optionally interrupted by 1-10 oxygen atoms, 1-5 - NHCO groups, 1- 5 -CONH groups, 1-2 sulfur atoms, 1-5 - NH groups or 1-2 phenylene groups, optionally with 1-2 OH groups, 1-2 NH 2 groups, 1-2 -COOH groups, or 1-2 - SOsH groups can be substituted or optionally substituted with 1-8 OH groups, 1-5 -COOH groups, 1-2 S0 3
  • the metal ion of the signaling group must be paramagnetic.
  • these are in particular the divalent and trivalent ions of the elements of atomic numbers 23-29, 42-46 and 58-70. Suitable ions are, for example, chromium (III), iron (II), cobalt (II), nickel (II), copper (II), praseodymium (III), neodymium (III), samarium (III ) - and ytterbium (III) ion.
  • gadolinium (III), terbium (III), dysprosium (III), holmium (III), erbium (III), iron (III) and manganese (II) ions are particularly preferred .
  • Manganese (II), iron (II), iron (III), praseodymium (III), neodymium (III), samarium (III), gadolinium (III) and ytterbium (III) ions are preferred , especially dyspro- sium (III) ions.
  • Acidic hydrogen atoms which are optionally present in R 1 that is to say those which have not been substituted by the central ion, can optionally be wholly or partly replaced by cations of inorganic and / or organic bases or amino acids or amino acid amides.
  • Suitable inorganic cations are, for example, lithium ion, potassium ion, calcium ion and in particular sodium ion.
  • Suitable cations of organic bases include those of primary, secondary or tertiary amines, such as, for example, ethanolamine, diethanolamine, morpholine, glucamine, N, N-dimethylglucamine and in particular N-methylglucamine.
  • Suitable cations of amino acids are, for example, those of lysine, arginine and ornithine and the amides of otherwise acidic or neutral amino acids.
  • Particularly preferred compounds of the general formula Id are those with the macrocycle K of the general formulas Ild, 11ld, VdB or Vlld.
  • the radical U in the metal complex K preferably denotes -CH 2 - or C 6 H -0- CH - ⁇ , where ⁇ stands for the binding site at -CO-.
  • the alkyl groups R 2 and R 3 in the macrocycle of the general formula III can be straight-chain or branched. Examples include methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl, n-pentyl, 1-methylbutyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, 1, 2-dimethylpropyl.
  • R 2 and R 3 are preferably independently of one another hydrogen or CrC-alkyl.
  • R 2 is methyl and R 3 is hydrogen.
  • the benzyl group or the phenyl group R 2 or R 3 in the macrocycle K of the general formula III can also be substituted in the ring.
  • the polar radical R in the general formula Id denotes the complex K, which, in addition to a Gd 3 * or Mn 2+ complex, can preferably also be a Ca 2+ complex.
  • Particularly preferred polar radicals R are the complexes K of the general formulas III, III, VdA or VIII. With very particular preference, these R 1 have a metal ion equivalent of atomic numbers 20, 25, 39 or 64.
  • the polar radical R has the following meanings:
  • the polar radical R denotes the folic acid radical.
  • R F - C n F 2 n + ⁇ , n is preferably the numbers 4-15.
  • the radicals - C4F9, -C ⁇ Fi3, -C ⁇ Fi7, -C ⁇ 2 F25 and - Ci4F 2 g are very particularly preferred.
  • the at least triple-functionalized radical G in the general formula Id, which represents the “framework”, in a preferred embodiment of the invention means the lysine residue (a) or (b).
  • R 5 is a metal ion equivalent of atomic numbers 23-29, 42-46 or 58- 70 or a carboxyl protecting group, and R 2 , R 3 and U have the meaning given
  • R 5 and R 2 have the meaning given or a carboxylic acid of the general formula Vk or Vm
  • R 5 has the meaning given
  • R 5 has the meaning given or a carboxylic acid of the general formula VIII
  • R 5 and U 1 have the meanings mentioned, in optionally activated form with an amine of the general formula VIII
  • G, R, Z, R F , m 1 and p 2 have the meaning given, in a coupling reaction and, if appropriate, subsequent cleavage of any protective groups which may be present, to give a metal complex of the general formula Id or if R 5 has the meaning of a protective group, after Cleavage of these protective groups in a subsequent step in a manner known per se with at least one metal oxide or metal salt of an element of atomic numbers 23-29, 42-46 or 58-70, and then, if desired, acidic atoms which may be present by cations of inorganic and / or organic bases, amino acids or amino acid amides.
  • the carboxylic acids of the general formulas IIk to VIIIk used are either known compounds or are prepared by the processes described in the examples. This is how the carboxylic acids are made the general formula IIk known from DE 19652386. The production of the carboxylic acids of the general formula IVk can be found in DE 19728954.
  • the precursor for compounds of the general formula VdA is N 3 - (2,6-dioxomorpholinoethyl) -N 6 - (ethoxycarbonylmethyl) -3,6-diaza-octanedioic acid, which is described in EP 263059.
  • the compounds of the general formula VdB are derived from the isomeric diethylenetriamine-pentaacetic acid, which binds via the acetic acid at the middle N atom.
  • This DTPA is described in the patents DE 19507819 and DE 19508058.
  • the metal complex XVI of Table 1 is used according to the invention as a very particularly preferred compound of the general formula Id.
  • galenical formulations can be used which contain paramagnetic and diamagnetic perfluoroalkyl-containing substances.
  • the paramagnetic and diamagnetic substances are preferably present dissolved in an aqueous solvent.
  • all of the above-mentioned metal complexes of the general formulas I, Ia, Ia, Ib, Ic and / or Id can be used as paramagnetic perfluoroalkyl-containing compounds in the formulations.
  • the diamagnetic perfluoroalkyl-containing substances are of the general formula XX:
  • R F represents a straight-chain or branched perfluoroalkyl radical having 4 to 30 carbon atoms
  • L 2 stands for a linker and B 2 for a hydrophilic group.
  • the linker L 2 is a direct bond, a -SO 2 group or a straight-chain or branched carbon chain with up to 20 carbon atoms, which can be substituted with one or more -OH, -COO " , -SO 3 groups and / or optionally one or more -0-, -S-, -CO-, -CONH-, -NHCO-, -CONR 9 -, -NR 9 CO-, -S0 2 -, -P0 4 -, -NH-, - Contains NR 9 groups, an aryl ring or a piperazine, where R 9 represents a Cr to C 2 o -alkyl radical, which in turn can contain one or more O atoms and / or can be substituted with -COO " or
  • the hydrophilic group B 2 is a mono- or disaccharide, one or more adjacent -COO " or -S0 3 ' groups, a dicarboxylic acid, an isophthalic acid, a picolinic acid, a benzenesulfonic acid, a tetrahydropyranedicarboxylic acid, a 2,6-pyridinedicarboxylic acid , a quaternary ammonium ion, an aminopolycarboxylic acid, an aminodipolyethylene-glycolsulfonic acid, an aminopoiyethylene glycol group, an S0 2 - (CH 2 ) 2 -OH group, a polyhydroxyalkyl chain with at least two hydroxyl groups or one or more polyethylene glycol chains with at least two glycol units, the polyethylene glycol chains being passed through a -OH or - OCH 3 group are terminated, some of which substances are already known, some of which have been newly synthesized for the preparation of the formulations
  • R F represents a straight-chain or branched perfluoroalkyl radical with 4 to 30 carbon atoms and X 1 is a radical selected from the group of the following radicals (n is a number between 1 and 10):
  • Preferred diamagnetic perfluoroalkyl-containing substances are those with a monosaccharide as the hydrophilic group B 2 .
  • Particularly preferred diamagnetic perfluoroalkyl-containing compounds contain a perfluoroalkyl radical Rf with 6 to 12 carbon atoms, a linker L 2 , which represents a -S0 2 group or a straight-chain or branched carbon chain with up to 20 carbon atoms, which in turn is one or more -O-, - CO-, -CONH-, -NHCO-, -CONR-, -NRCO-, -S0 groups or a piperazine, in which R has the meaning given above, and a monosaccharide as the hydrophilic group B 2 .
  • Rf perfluoroalkyl radical
  • L 2 which represents a -S0 2 group or a straight-chain or branched carbon chain with up to 20 carbon atoms, which in turn is one or more -O-, - CO-, -CONH-, -NHCO-, -CONR-, -NRCO-, -S0 groups or a
  • diamagnetic perfluoroalkyl-containing compounds are conjugates of cyclodextrin and perfluoroalkyl-containing compounds. These conjugates consist of ⁇ -, ß- or ⁇ -cyclodextrin and compounds of the general formula XXII
  • a 1 is an adamantane, biphenyl or anthracene molecule
  • L 3 is a linker and R F is a straight-chain or branched perfluoroalkyl radical having 4 to 30 carbon atoms.
  • the linker L 3 is a straight-chain hydrocarbon chain with 1 to 20 carbon atoms, which by one or more oxygen atoms, one or more CO, SO2, CONH, NHCO, CONR, NRCO, NH, NR groups or one Piperazine can be interrupted, where R is a CrC 5 alkyl radical.
  • Preferred compounds are the following compounds:
  • the pharmaceutical formulations of the present invention contain the paramagnetic and diamagnetic perfluoroalkyl-containing compounds in a mixing ratio between 5:95 and 95: 5. Mixing ratios between 40:60 and 60:40 of the two substances are preferred. Both substances are used in millimolar concentrations. Concentrations between 0.5 and 1000 mmol / l solvent are reached.
  • the solvent is preferably water.
  • the metal concentration of the formulations is preferably in a range from 50-250 mmol / l.
  • Mixtures of paramagnetic and diamagnetic perfluoroalkyl-containing compounds in which the perfluoroalkyl chains have a length of 6 to 12 carbon atoms are preferred. Mixtures in which both the paramagnetic and the diamagnetic perfluoroalkyl-containing compounds have a perfluoroalkyl chain with 8 carbon atoms are particularly preferred.
  • the pharmaceutical formulations are prepared by weighing the paramagnetic perfluoroalkyl-containing compounds (component A) and the diamagnetic perfluoroalkyl-containing substances (component B) in mole fractions between 0.05 and 0.95 on component A or B and dissolving them in a suitable solvent.
  • a particularly suitable solvent is water.
  • Common pharmaceutical additives such as buffer solutions and the Ca salt of the complexing agent are then added to this solution in excess.
  • the solutions are stirred vigorously.
  • the solutions at 10 to 100 ° C in be treated with an ultrasonic bath. Another alternative is to treat the solutions with microwaves.
  • solubilizer such as alcohol (e.g. methanol or ethanol) or another water-miscible solvent and then slowly distill it off. The distillation can be carried out under vacuum. The residue is then dissolved in water and the solution is filtered. It is also possible to separately dissolve each component in a solvent, then combine them and proceed as above. It has proven to be advantageous to present a relatively highly concentrated solution (> 100 mmol) of the metal complex (component A) and then to add component B pure and, as mentioned above, to stir the solution or to treat it with ultrasound or microwaves.
  • gadolinium complexes I-XVI listed in Table 1 meet the criteria according to the invention as very particularly preferred compounds.
  • the physical parameters of these metal complexes I-XVI are listed in Table 2.
  • paramagnetic compounds according to the invention of the general formulas I, Ia, Ib, Ic and Id as well as the formulations according to the invention made of paramagnetic and diamagnetic perfluoroalkyl-containing substances are outstandingly suitable as contrast agents in MR imaging for the representation of plaques, tumors and necrosis.
  • the mixture is stirred at room temperature for 12 hours.
  • the solution is poured into a mixture of 200 ml of acetone / 1300 ml of diethyl ether and stirred for 2 hours at room temperature.
  • the precipitate which has precipitated is filtered off and dissolved in a
  • the mixture is stirred at room temperature for 12 hours.
  • the solution is poured into a mixture of 200 ml of acetone / 1300 ml of diethyl ether and stirred for 2 hours at room temperature.
  • the precipitate which has separated out is filtered off, dissolved in a mixture of a little ethanol and chromatographed on silica gel RP-18 (mobile solvent: gradient composed of tetrahydrofuran / acetonitrile / water).
  • Triethylamine dissolved in 200 ml of dichloromethane, added dropwise. The mixture is stirred for 3 hours at 0 ° C., then for 6 hours at room temperature. 300 ml of 5% aqu. Hydrochloric acid and stir well for 15 minutes. The organic phase is separated off, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness in vacuo. The residue is on silica gel (mobile solvent:
  • the mixture is stirred at room temperature for 12 hours.
  • the solution is poured into a mixture of 200 ml of acetone / 1300 ml of diethyl ether and stirred for 2 hours at room temperature.
  • the precipitate which has separated out is filtered off, dissolved in a mixture of a little ethanol / water and chromatographed on silica gel
  • Example 7 4,7-Tris (carboxylatomethyl) -10 - [(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl) -acid-N- (1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H , 5H-3-oxa-perfluorotridecyl) -amide] -1, 4,7,10-tetraazacyclododecane, gadolinium complex
  • tieme intaranaiyse calc .: C 22.15 H 1.30 N 5.17 F 59.57 found: C 22.04 H 1.41 N 5.05 F 59.62
  • Trifluoroacetic acid dissolved and stirred for 5 hours at room temperature. It is evaporated to the dry state in a vacuum and the residue is chromatographed on silica gel RP-18 (mobile solvent: gradient composed of tetrahydrofuran / acetonitrile / water). After evaporation of the product-containing fractions, the residue is dissolved in water and mixed with 5% aqu. Sodium hydroxide solution adjusted to pH 7.2. The solution is filtered and the filtrate freeze-dried. Yield: 10.48 g (91% of theory)
  • the precipitated solid is filtered off and then purified by chromatography (RP-18; eluent: gradient from water / ethanol / acetonitrile).
  • the product obtained is dissolved in a little water and the pH of the solution is adjusted to 7.4 with aqueous sodium hydroxide solution.
  • the product solution is then freeze-dried. Yield: 79.1 g (89% of theory) of a colorless solid. Water content: 10.3%.
  • 6-N- (ethoxycarbonylmethyl) -3,6-diazaoctanedioic acid and stirred for 5 hours at 50 ° C. It is evaporated to dryness in vacuo.
  • the residue is dissolved in 200 ml of water and the pH of the resulting solution is adjusted to 13 by adding 20% aqueous sodium hydroxide solution. The mixture is stirred for 8 hours at 22 ° C. and a pH of 13.
  • the solution is brought to a pH of 7.2 by adding concentrated hydrochloric acid and then evaporated to dryness in vacuo.
  • the residue is chromatographed on silica gel RP-18 (mobile solvent: gradient from water / ethanol / acetonitrile).
  • Example 26 a) 6-N-Benzyloxycarbonyl-2-N- [1, 4,7-tris (carboxylatomethyl) -1, 4,7,10-tetraazacyclododecane] -10- (pentanoyl-3aza 4-oxo-5-methyl-5yl )] - L-lysine [1 - (4-perfluorooctylsulfonyl) piperazine] amide, Gd complex
  • Example 27b 70 g (44.07 mmol) of the title compound from Example 27b are dissolved in 800 ml of ethanol and 8 g of palladium catalyst (10% Pd / C) are added. It is hydrogenated at room temperature. The catalyst is filtered off and the filtrate is evaporated to dryness in vacuo.
  • the precipitated solid is filtered off and then purified by chromatography (silica gel RP-18, mobile solvent: gradient from water / ethanol / acetonitrile). Yield: 31.98 g (43.0% of theory) of a colorless solid. Water content: 3.5%.
  • a stirred suspension of 141.0 g (289 mmol) of the title compound from Example 30b) in 200 ml of dioxane is admixed in portions with a total of 238.5 g (4.26 mol) of finely powdered potassium hydroxide powder at room temperature and with vigorous stirring at the same time.
  • the reaction mixture is mixed with a further 200 ml of dioxane and the suspension thus obtained is subsequently heated to boiling point and a total of 372 ml (3.128 mol) of benzyl bromide are added dropwise at this temperature over a period of two hours.
  • reaction mixture After a reaction time of 4 hours at 110 ° C., followed by 12 hours at room temperature, the reaction mixture is poured slowly into a total of 2.5 liters of ice water for the purpose of working up, and the water phase is subsequently extracted completely with diethyl ether. After washing the ether phase thus obtained and then drying it over sodium sulfate, the salt is filtered off with suction and the diethyl ether is stripped off in vacuo. Excess benzyl bromide is then quantitatively distilled off from the reaction mixture in an oil pump vacuum at an oil bath temperature of 180 ° C.
  • the suspension obtained is then mixed with sufficient acetone until the above-mentioned title compound has completely precipitated, the precipitate is filtered off with suction, dried, taken up in water, filtered off from insoluble dicyclohexylurea and the filtrate is passed through an AMICON® YM-3 ultrafiltration membrane (cut off: 3000 Da) desalted and cleaned of low molecular components. The retentate is then freeze-dried. Yield: 93.0 g (81.6% of theory) as a colorless lyophilisate. H2 ⁇ content (Karl Fischer): 9.53%.
  • Example 31 a) 2-N- [1 -0- ⁇ -D- (5-carbonyl) pentyl-mannopyranose] -6-N- ⁇ 2- [4- (3-oxapropionyl) phenyl] -2- [1, 4 , 7-tris (carboxylatomethyl) -1,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-yl] acetic acid ⁇ -L-lysine [1 - (4-perfluorooctylsulfonyl) piperazine] amide, Gd complex, sodium salt
  • reaction solution of the N-hydroxysuccinimide ester of the title compound from Example 3e) thus obtained is then added dropwise at 22 ° C. with a solution of 4.0 g (4.12 mmol) of the title compound from Example 10Ae) in 15 ml of absolute dimethyl sulfoxide and a further 12 Stirred for hours at room temperature.
  • the reaction solution is added dropwise in 900 ml of acetone at 22 ° C., the title compound precipitating out as a colorless precipitate.
  • the precipitate is filtered off, dissolved in 200 ml of distilled water and then the pH of this solution is adjusted to exactly 7.2 with 1 molar sodium hydroxide solution.
  • the aqueous product solution thus obtained is over a YM3
  • Ultrafiltration membrane (AMICON ®; cut off: 3000 Da) ultrafiltered three times for the purpose of desalination and the separation of low-molecular components. The retentate thus obtained is then freeze-dried.
  • Example 32 3,5-bis-benzyloxycarbonylamino-benzoic acid N- (3-oxa- 1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-perfluorotridecyl) -amide
  • reaction solution After a reaction time of one hour at -15 ° C and two hours at room temperature, the reaction solution is evaporated to dryness in vacuo. The remaining residue is taken up in 300 ml of ethyl acetate and washed twice with 200 ml of saturated sodium bicarbonate solution and once with 300 ml of water. After the organic phase has been dried over sodium sulfate, the salt is filtered off with suction and the ethyl acetate is stripped off in vacuo. The remaining oily residue is purified on silica gel using dichloromethane / hexane / 2-propanol (10: 5: 1) as an eluent.
  • reaction solution is added dropwise at 22 ° C. in 500 ml of acetone, the title compound precipitating out as a colorless precipitate.
  • the precipitate is filtered off, dissolved in 200 ml of distilled water and over a YM3 ultrafiltration membrane (AMICON ®; cut off: 3000 Da) for the purpose of desalination and the separation of low molecular weight Components ultrafiltered three times. The retentate thus obtained is then freeze-dried.
  • AMICON ® YM3 ultrafiltration membrane
  • Amine component as a colorless lyophilisate with a water content of 8.98%.
  • the title compound is added, the precipitate is filtered off with suction, dried, taken up in water, filtered off from insoluble dicyclohexylurea and the filtrate is desalted via an AMICON® YM-3 ultrafiltration membrane (cut off: 3000 Da) and cleaned of low molecular weight constituents. The retentate is then freeze-dried.
  • a stirred suspension of 141.0 g (289 mmol) of the title compound from Example 37a) in 200 ml of dioxane is mixed with a total of 238.5 g (4.26 mol) of finely powdered potassium hydroxide powder at room temperature and with vigorous stirring at the same time.
  • the reaction mixture is mixed with a further 200 ml of dioxane and the suspension thus obtained is subsequently heated to boiling heat and a total of 372 ml (3.128 mol) of benzyl bromide are added dropwise at this temperature over a period of two hours.
  • L-lysine methyl ester dihydrochloride (commercially available from Bachern) and 4.05 g (40.26 mmol) of triethylamine in 100 ml of dimethylformamide is added dropwise to a solution of 27.51 g (36.6 mmol) of the title compound from Example 37c) in 150 ml of dimethylformamide. After the addition has ended, the mixture is stirred for a further hour at 0 ° C. and then overnight at room temperature.

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Abstract

Die Erfindung betrifft die Verwendung von perfluoralkylhaltigen Metallkomplexen, die eine kritische Mizellbildungskonzentration < 10<-3> mol/l, einen hydrodynamischen Mizelldurchmesser (2 Rh) > 1 nm und eine Protonen-Relaxivity im Plasma (R<1>) > 10 l/mmol.s aufweisen, als Kontrastmittel im MR-Imaging sowohl zur Darstellung von Plaques, Lymphknoten, infarziertem und nekrotischem Gewebe als auch zur unabhängigen Darstellung von nekrotischem Gewebe und Tumorgewebe.

Description

Verwendung von perfluoralkylhaltigen Metallkomplexen als Kontrastmittel im MR-Imaging zur Darstellung von Plaques, Tumoren und Nekrosen
Beschreibung
Die Erfindung betrifft die Verwendung von perfluoralkylhaltigen Metallkomplexen, die eine kritische Mizellbildungskonzentration < 10"3 mol/l, einen hydrodynamischen Mizelldurchmesser (2 Rh) > 1 nm und eine Protonen- Relaxivity im Plasma (R1) > 10 I /mmol-s aufweisen, als Kontrastmittel im MR- Imaging sowohl zur Darstellung von Plaques, Lymphknoten, infarziertem und nekrotischem Gewebe als auch zur unabhängigen Darstellung von nekrotischem Gewebe und Tumorgewebe. Es hat sich gezeigt, dass perfluoralkylhaltige Metallkomplexe mit den genannten Eigenschaften für die unabhängige Darstellung von Plaques, Tumoren und Nekrosen mit Hilfe des MR-Imaging hervorragend geeignet sind und gleichzeitig auch den diagnostisch wichtigen Bereich des Infarkt- und Nekroseimaging abdecken können.
Arteriosklerose ist die wichtigste und häufigste krankhafte Veränderung der Arterien mit Verhärtung, Verdickung, Elastizitätsverlust und Lichtungseinengung. Sie stellt die häufigste Todesursache in den westlichen Industrienationen dar. Die Gefäßwandveränderungen führen durch Lipid- Einlagerung, Bindegewebsvermehrung und Verkalkung mit unregelmäßiger Verteilung zur Wandinstabilität, Gefäßverengung und zur Ablagerung von Gerinnseln. Ursache der Erkrankung sind zahlreiche exogene und endogene Noxen bzw. Krankheiten, z.B. Hypertonie, Hyperlipidämie, Hyperfibrinogenämie, Diabetes mellitus, Toxine, Nicotin, Antigen-Antikörper- Komplexe, Entzündungen, Hypoxie, psychischer Streß, Alter und familiäre Belastung. Diese führen zur Störung der Integrität der Gefäßinnenwand, zur Störung der Wachstumskontrolle von glatten Muskelzellen der Gefäßwand und zur Beeinträchtigung des Abbaus gealterter Zellbestandteile. Eine Behandlung der Arteriosklerose selbst ist nicht möglich, das Ziel ärztlicher Bemühungen ist die Vorbeugung durch Verminderung der Risikofaktoren, z.B. mittels Lipidsenker.
Die Diagnose der Arteriosklerose in der klinischen Praxis erfolgt zur Zeit hauptsächlich durch Angiographie als Gold Standard. Die Limitierung bei allen Verfahren, die auf die Messung der Reduktion des Gefäßlumen beruhen, ist jedoch das Frühstadium der Erkrankung, das durch eine Verdickung der Gefäßwand bei normalem Gefäßlumen gekennzeichnet ist (Glagov S, Zarins CK. Quantitating atherosclerosis. In: Bond MG, Insull W, Glagov S, ChandlerAB, Cornhill JF (eds.). Clinical Diagnosis of Atherosclerosis. Quantitative Methods of Evaluation. New York: Springer- Verlag, 1983, 11-35). Eine weitere Methode zur diagnostischen Beurteilung von Gefäßwand und - lumen ist der intravaskuläre oder perkutane Ultraschall.
Die Magnetische Kernspinresonanztomographie (MRT) ist ein modernes, nicht- invasives radiologisches Verfahren, das mit einer sehr guten räumlichen und zeitlichen Auflösung die Darstellung von physiologischen und pathophysiologischen Strukturen ermöglicht. Die Verwendung spezifischer Kontrastmittel mit selektiver Anreicherung in bestimmten Geweben und Organen kann dabei den diagnostischen Wert bedeutend erhöhen. Kontrastmittelzubereitungen mit selektiver Anreicherung in arteriosklerotischen Plaques könnten Lokalisation und Grad der Erkrankung zu einem frühen Zeitpunkt erfassen und damit eine zielgerichtete Therapie und Prophylaxe ermöglichen, und deshalb setzte schon früh die Suche nach geeigneten Kontrastmitteln ein.
So werden in dem US Patent 4,577,636 Hematoporphyrinderivate als Kontrastmittel für die Detektion atherosklerotischer Plaques beansprucht. Als Methoden werden die Szintigraphie, das Röntgen , die Fluoreszenz und für paramagnetische Metalloporphyrine auch die NMR-Spektrometrie genannt. Als para-magnetische Ionen werden Gd, Cr, Co, Ni, Ag und Eu aufgeführt. Nachteil bei diesen Verbindungen ist, daß sich die Porphyrine in der Haut ablagern und Verfärbungen verursachen, die bis zu mehreren Wochen andauern können. Darüber hinaus führen sie zu einer Photosensibilisierung. Weiterhin besteht die Gefahr, daß bei einer langen Verweilzeit in vivo das Metalloporphyrin das Metall verliert.
In der Anmeldung WO 95/ 09856 werden Metalloporphyrine (Deuteropor- phyrine) für Diagnose und Therapie von Plaques beansprucht. Als diagnostische Methode wird das MRI genannt. Auch für diese Porphyrine gilt, daß sie Verfärbungen der Haut hervorrufen .
In der Anmeldung WO 95/09013 werden Konjugate aus spezifisch bindenden Polypeptiden und Metallkomplexen beansprucht. Diese Verbindungen sollen auch an Plaques binden und so deren Diagnose und Therapie ermöglichen. Als diagnostische Methoden werden Szintigraphie, Computertomographie und MRI genannt. Während die Szintigraphie experimentell belegt ist, fehlen Angaben für das MRI.
In dem US Patent 5,807,536 werden markierte Phycocyanine als Kontrastmittel für das Imaging von Plaques beansprucht. Als diagnostische Methoden werden hier Röntgen, Computertomographie, Szintigraphie, SPECT und MRI genannt. Experimentell belegt wird die Szintigraphie.
Aus der Literatur sind zahlreiche Kontrastmittel für das Infarkt- und Nekroseimaging bekannt. Schon früh erfolgten Versuche, die Lokalisation von Infarkten und Nekrosen durch Einsatz von Kontrastmitteln bei nichtinvasiven Verfahren wie Szintigraphie oder Kernspintomographie zu verbessern. In der Literatur nehmen die Versuche, Porphyrine für das Nekroseimaging einzusetzen, einen großen Raum ein. Die erzielten Resultate ergeben jedoch ein widersprüchliches Bild. So beschreiben Winkelman und Hoyes in Nature, 200. 903 (1967), daß sich Mangan-5,10,15,20-Tetrakis(4-sulfonatophenyl)- porphyrin (TPPS) selektiv im nekrotischen Teil eines Tumors anreichert.
Lyon et al. (Magn. Res. Med. 4, 24 (1987)) dagegen beobachteten, daß sich Mangan-TPPS im Körper verteilt, und zwar in Niere, Leber, Tumor und nur zu einem geringen Teil in den Muskeln. Interessant ist dabei, daß die Konzentration im Tumor erst am 4. Tag ihr Maximum erreicht und das auch nur, nachdem die Autoren die Dosis von 0.12 mmol/kg auf 0.2 mmol/kg gesteigert hatten. Die Autoren sprechen daher auch von einer nichtspezifischen Aufnahme des TPPS in den Tumor. Bockhurst et al. wiederum berichten in Acta Neurochir 60, 347 (1994, Suppl.), daß MnTPPS selektiv an Tumorzellen bindet.
Foster et al. (J. Nucl. Med. 26, 756 (1985)) ihrerseits fanden, daß sich 111 In- 5,10,15,20-Tetrakis-(4-N-methyl-pyridinium)-Porphyrin (TMPyP) nicht im nekrotischen Teil, sondern in den lebenden Rändschichten anreichert. Daraus zu folgern, daß eine Porphyrin-Gewebe-Wechselwirkung besteht, ist naheliegend, aber nicht zwingend.
In Circulation Vol. 90, No. 4, Teil 2, Seite 1468, Abstract No. 2512 (1994) berichten Ni et al., daß sie mit einem Mangan-Tetraphenyl-Porphyrin (Mn-TPP) und einem Gadolinium-Mesoporphyrin (Gd-MP) Infarktbereiche darstellen können. In der internationalen Patentanmeldung WO 95/31219 wurden beide Substanzen zum Infarkt- und Nekroseimaging eingesetzt. Die Autoren Marchai und Ni schreiben (siehe Beispiel 3), daß für die Verbindung Gd-MP der Metallgehalt der Infarkt-Niere ähnlich hoch war wie der des nichtinfarzierten Organs, daß er jedoch für das Myokard beim infarzierten Gewebe (Beispiel 1) neunmal so groß war. Erstaunlich war, daß das Verhältnis der Signalintensitäten beim MRI für infarziertes im Vergleich zum gesunden Gewebe in beiden Fällen mit 2.10 bzw. 2.19 vergleichbar hoch war. Weitere Metalloporphyrine sind in der Anmeldung DE 19835082 (Schering AG) beschrieben worden.
Porphyrine neigen dazu, sich in der Haut abzulagern, was zu einer Photosensibilisierung führt. Die Sensibilisierung kann Tage, ja sogar Wochen andauern. Dies ist ein unerwünschter Nebeneffekt bei der Verwendung von Porphyrinen als Diagnostika. Außerdem ist der therapeutische Index für die Porphyrine nur sehr klein, da z.B. für Mn-TPPS eine Wirkung erst bei einer Dosis von 0.2 mmol/kg einsetzt, die LD50 aber bereits bei 0.5 mmol/kg liegt. Nicht vom Porphyringerüst abgeleitete Kontrastmittel für das Nekrose- und Infarkt-Imaging sind in DE 19744003 (Schering AG), DE 19744004 (Schering AG) und WO 99/17809 (EPIX) beschrieben worden.
In DE 19744003 werden oligomere Verbindungen, die aus einem Kern bestehen, an den 1 - 3 Metallkomplexe gebunden sind, beansprucht.
In der Anmeldung 19744004 werden lipophile Metallkomplexe für das Nekrose- und Infarktimaging beansprucht. Zu diesen Verbindungen gehören Metallkomplexe von Polyaminopolycarbonsäuren, Polyaminopolyphosphon- säuren, Porphyrine, Texaphyrine, Sapphyrine, Peptide.
In der EPIX-Anmeldung WO 99/17809 wird die Verwendung von DTPA- Derivaten für das Nekroseimaging beansprucht. Die prominenteste Verbindung ist der Gadoliniumkomplex eines Phosphodiesters der Hydroxymethyl-DTPA (MS-325 ).
Auch perfluoralkylhaltige Metallkomplexe sind als Kontrastmittel für das MR- Imaging bekannt. So offenbaren WO 97/26017 (Schering) und WO 99/01161 (Schering) die Verwendung von perfluoralkylhaltigen Metallkomplexen als Lymphographika. WO 99/01161 beschreibt daneben auch die Eignung dieser Verbindungen zur Darstellung des Vasalraumes (blood-pool-agents).
Auch für die Einzeldarstellung von Tumoren und Nekrosen mittels MR-Imaging sind Kontrastmittel beschrieben worden.
In EP 417870 A1 werden Verbindungen für die Tumordiagnose und -therapie offenbart. Es wird ausgeführt, daß auch Infarkte und Ischämien dargestellt werden können. Eine experimentelle Bestätigung für diese Aussage ist der Anmeldung jedoch nicht entnehmbar. Bei den beanspruchten Verbindungen handelt es sich um Chelate von Komplexen der Typen N2S2 und N3S mit Radioisotopen. Als diagnostische Methode dient die Szintigraphie. In DE 19646762 wird die Szintigraphie ebenfalls als diagnostische Methode eingesetzt. In der Schrift werden Metallchelate als Radiosensitizer zur Therapie hypoxischer Tumore und zur Diagnostik hypoxischer Zustände und Nekrosen beansprucht. Im beschreibenden Teil werden als diagnostische Verfahren die NMR-Diagnostik, die Röntgendiagnostik und die Radiodiagnostik genannt.
In der deutschen Anmeldung DE 19824653 werden Porphyrine als nekroseaffine Substanzen für die Therapie von Tumoren beansprucht. In der Anmeldung wird ausgeführt, daß sich die Verbindungen in den nekrotischen und hypoxischen Arealen von Tumoren anreichern. Die Verbindungen können für diagnostische Zwecke in Form ihrer Metallderivate mit paramagnetischen Ionen bzw. Radioisotopen eingesetzt werden.
Beiden Anmeldungen - DE 19646762 und DE 19824653 - ist gemeinsam, daß die Darstellung von Nekrosen und Tumor nicht unabhängig voneinander erfolgt, sondern daß die Nekrose Teil des Tumors ist.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung war es, Kontrastmittel für das MR-Imaging zur Verfügung zu stellen, die sowohl zur Darstellung von Plaques, Lymphknoten, infarziertem und nekrotischem Gewebe als auch zur unabhängigen Darstellung von Nekrosen und Tumoren geeignet sind.
Überraschenderweise wurde nun gefunden, dass perfluoralkylhaltige Metallkomplexe, die eine kritische Mizellbildungskonzentration < 10"3 mol/l, einen hydrodynamischen Mizelldurchmesser (2 Rh) > 1 nm und eine Protonen- Relaxivity im Plasma (R1) > 10 1/mmol s aufweisen, als Kontrastmittel im MR- Imaging zur Darstellung von Plaques sehr gut geeignet sind. Daneben können diese Verbindungen außerdem sowohl zur Darstellung von Lymphknoten, infarziertem und nekrotischem Gewebe als auch zur unabhängigen Darstellung von nekrotischem Gewebe und Tumorgewebe eingesetzt werden.
Als für die erfindungsgemäße Verwendung geeignete perfluoralkylhaltige Metallkomplexe werden amphiphile Verbindungen verstanden, die als unpolaren Teil eine Perfluoralkylseitenkette im Molekül aufweisen, die ggf. über einen lipophilen Linker mit dem Gesamtmolekül verbunden ist. Der polare Teil der erfindungsgemäßen Verbindungen wird durch ein oder mehrere Metallkomplexe und gegebenenfalls vorhandene weitere polare Gruppen gebildet.
In wässrigen Systemen zeigen diese amphiphilen Moleküle die für klassische Tenside (wie z.B. Natriumdodecylsulfat, SDS) charakteristischen Eigenschaften. So setzen sie die Oberflächenspannung des Wassers herab. Durch Tensiometrie lässt sich die sogenannte CMC (Kritische Mizellbildungs- konzentration in mol/l) bestimmen. Hierzu wird die Oberflächenspannung in Abhängigkeit zu der Konzentration des zu vermessenden Stoffes bestimmt. Die CMC lässt sich aus dem Verlauf der erhaltenen Funktion Oberflächenspannung (c) ausrechnen. Die kritische Mizellbildungskonzentration der erfindungsgemäßen Verbindungen muß < 10"3 mol/l sein, vorzugsweise < 10*4 mol/l.
Die erfindungsgemäßen amphiphilen Verbindungen sind in Lösung assoziiert und liegen als Aggregate vor. Die Größe (2 Rh) derartiger Aggregate (z.B. Mizellen, Stäbchen, Oblaten etc.) lässt sich mit Hilfe der Photon-Correction- Spectroscopy (PCS) bestimmen.
Als zweites Kriterium dient daher der hydrodynamische Mizelldurchmesser 2 Rh, der > 1 nm sein muß. Besonders sind erfindungsgemäß solche perfluoralkylhaltigen Metallkomplexe geeignet, deren 2 Rh > 3 nm beträgt, ganz besonders bevorzugt > 4 nm.
Sowohl die Bestimmung der CMC als auch die Photonenkorrelationsspektroskopie werden in H.-D. Dörfler, „Grenzflächen- und Kolloidchemie", Weinheim, New York, Basel, Cambridge, Tokyo, VSH 1994 beschrieben.
Als drittes Kriterium dient die Protonen-Relaxivity in Plasma (R1) bei 40°C und einer Feldstärke von 0,47 Tesla. Die Relaxivity, die in [l/mmol-s] angegeben wird, ist das quantitative Maß für die Verkürzung der Relaxationszeit T1 der Protonen. Für den erfindungsgemäßen Zweck muß die Relaxivity möglichst hoch sein und > 10 l/mmol-s betragen, vorzugsweise > 13 l/mmol s, besonders bevorzugt > 15 l/mmol-s.
Die Relaxivity R1 [l/mmol-s] der erfindungsgemäßen MR-Kontrastmittel wurde mit dem Gerät Minispec P 20 der Fa. Bruker bestimmt. Die Messungen wurden bei 40 °C und einer Feldstärke von 0,47 Tesla durchgeführt. Von jeder T1- Sequenz : 180° -TI -90°, Inversion Recovery, wurden 8 Meßpunkte aufgenommen. Als Medium diente Rinderplasma der Fa. Kraeber. Die Kontrastmittelkonzentrationen [mmol/l] lagen in den Ansätzen zwischen 0,30 und 1,16.
In einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung werden als bevorzugte Verbindungen die Verbindungen der allgemeinen Formel I gemäß der Ansprüche 8 bis 11 eingesetzt. Dabei handelt es sich um bekannte Verbindungen, die in WO 97/26017 beschrieben sind. Auch deren Herstellung kann dieser WO-Schrift entnommen werden. Überraschenderweise hat sich gezeigt, dass diese Verbindungen auch als MRI-Kontrastmittel zur Darstellung von Plaques sehr gut geeignet sind. Als ganz besonders bevorzugte Verbindungen werden die Metallkomplexe l-IV, VI und Xl-Xlll (vgl. auch Tabelle 1) eingesetzt.
In einer weiteren Ausführungsform der vorliegenden Erfindung werden als bevorzugte Verbindungen solche der allgemeinen Formel la gemäß der Ansprüche 12 bis 21 eingesetzt. Diese Verbindungen sind bekannt und in WO 99/01161 beschrieben. Ihre Verwendung als MRI-Kontrastmittel zur Darstellung von Plaques wurde bisher noch nicht beschrieben. Von diesen Verbindungen kommt ganz besonders bevorzugt der Metallkomplex XIV (vgl. Tabelle 1) zur Anwendung.
In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Erfindung können die makrocyclischen Perfluoralkylverbindungen der allgemeinen Formel Ib
K— N— -RF (Ib) worin K einen Komplexbildner oder einen Metallkomplex der allgemeinen Formel llb
Figure imgf000010_0001
bedeutet, wobei
R1 für ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent der Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58-70, R2 und R3 für ein Wasserstoffatom, eine CrC7-Alkylgruppe, eine Benzyl- gruppe, eine Phenylgruppe, -CH2OH oder -CH2-OCH3, und U2 für den Rest L1, wobei L1 und U2 unabhängig voneinander gleich oder verschieden sein können, steht, A1 ein Wasserstoff atom, eine geradkettige oder verzweigte Cι-C3o-Alkyl- gruppe, die gegebenenfalls unterbrochen ist durch 1-15 Sauerstoffatome, und/oder gegebenenfalls substituiert ist mit 1-10 Hydroxygruppen, 1-2 COOH-Gruppen, einer Phenylgruppe, einer Benzylgruppe und/oder 1-5 - OR9-Gruppen, mit R9 in der Bedeutung eines Wasserstoffatoms oder eines CrCT-Alkylrestes, oder -L1-RF bedeutet, L1 eine geradkettige oder verzweigte CrC3o-Alkylengruppe, die gegebenenfalls unterbrochen ist durch 1-10 Sauerstoffatome, 1-5 -NH-CO- Gruppen, 1-5 -CO-NH- Gruppen, durch eine gegebenenfalls durch eine COOH-Gruppe substituierte Phenylengruppe, 1-3 Schwefelatome, 1-2 -N(B1)-S02- Gruppen, und/oder 1-2 -S02-N(B1)- Gruppen mit B1 in der Bedeutung von A1, eine NHCO-Gruppe, eine CONH-Gruppe, eine N(B1)-S02- Gruppe, oder eine -S02-N(B1)- Gruppe und/oder gegebenenfalls substituiert ist mit dem Rest RF, bedeutet und RF einen geradkettigen oder verzweigten perfluorierten Alkylrest der Formel CnF2nE, wobei n für die Zahlen 4-30 steht und
E für ein endständiges Fluoratom, Chloratom, Bromatom, lodatom oder ein Wasserstoffatom steht, bedeutet, und gegebenenfalls vorhandene Säuregruppen gegebenenfalls als Salze organischer und/oder anorganischer Basen oder Aminosäuren oder Aminosäure- amide vorliegen können, eingesetzt werden.
Da die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Anwendung in der NMR- Diagnostik bestimmt sind, so muß das Metallion der signalgebenden Gruppe paramagnetisch sein. Dies sind insbesondere die zwei- und dreiwertigen Ionen der Elemente der Ordnungszahlen 23-29, 42-46 und 58-70. Geeignete Ionen sind beispielsweise das Chrom(lll)-, Eisen(ll)-, Kobalt(ll)-, Nickel(ll)-, Kupfer(ll)- , Praseodym(lil)-, Neodym(lll)-, Samarium(lll)- und Ytterbium(lll)-ion. Wegen ihres starken magnetischen Moments sind besonders bevorzugt Gadolinium(lll)-, Terbium(lll)-, Dysprosium(lll)-, Holmium(lll)-, Erbium(lll)-, Eisen(lll)- und Mangan(ll)-ionen.
Bevorzugt sind Mangan(ll)-, Eisen(ll)-, Eisen(lll)-, Praseodym(lll)-, Neodym(lll)-, Samarium(lll)-, Gadolinium(lll)-, und Ytterbium(ill)-ionen, insbesondere Dyspro- sium(lll)-ionen.
Die Alkylgruppen R2, R3, R9 können geradkettig oder verzweigt sein. Beispielhaft seien Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, n-Butyl, 1-Methylpropyl, 2- Methylpropyl, n-Pentyl, 1-Methylbutyl, 2-Methylbutyl, 3-Methylbutyl, 1,2- Dimethylpropyl genannt.
Bevorzugt werden für R2, R3 und R9 Wassersoff und CrC -Alkylgruppen, besonders bevorzugt Wasserstoff und die Methylgruppe. Die Benzylgruppe und die Phenylgruppe R2, A1 und B1 können im Phenylring substituiert sein. Als Substituent kommt die COOH-Gruppe in Frage.
Enthält die Verbindung der Formel Ib gleichzeitig die Reste L1 und U2, so können L1 und U2 voneinander verschieden sein.
Die CrC3o-Alkylengruppen U2 können geradkettig oder verzweigt sein. Beispielhaft seien Methylen, Ethylen, Propylen, Isopropylen, n-Butylen, 1-Methylpropy- len, 2-Methylpropylen, n-Pentylen, 1-Methylbutylen, 2-Methylbutylen, 3-Methyl- butylen, 1 ,2-Dimethylproρylen, genannt.
Für U2 in der Bedeutung Alkylen werden C1-C10 Alkylengruppen bevorzugt, besonders bevorzugt sind C1-C4 Alkylengruppen.
Die Cι-C30-Alkylgruppen A1 können geradkettig oder verzweigt sein. Beispielhaft seien Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, n-Butyl, 1-Methylpropyl, 2- Methylpropyl, n-Pentyl, 1-Methylbutyl, 2-Methylbutyl, 3-Methylbutyl, 1,2- Dimethylpropyl, n-Hexyl, genannt.
Die CrC3o-Alkylgruppen A1 können durch 1-15 Sauerstoffatome unterbrochen, und/oder mit 1-10 Hydroxy-, 1-5 Alkoxy- oder 1-2 COOH-Gruppen substituiert sein wie z.B.
C2H4-O-CH3 , C3H6-O-CH3,
C2H4-0-(C2H4-O)t-C2H4-OH, C2H4-0-(C2H4-0)t-C2H4-OCH3 mit t = 0 bis 13
C2H4OH, C3H6OH, C4H8OH, C5H10OH, C6Hι2OH, C7H14OH, sowie ihre verzweigten Isomeren,
CH(OH)CH2OH,
CH(OH)CH(OH)CH2OH, CH2[CH(OH)]u 1CH2OH, mit u1 = 1-10
CH[CH2(OH)]CH(OH)CH2OH,
C2H4CH(OH)CH2OH,
(CH2)sCOOH mit s = 1 bis 15,
C2H4-0-(C2H4-0)rCH2COOH mit t = 0 bis 13,
C2H4-0-(C2H4-0)t-C2H4-CnF2nE mit t = 0 bis 13, n = 4 bis 20 und E = ein Fluor-,
Wasserstoff-, Chlor-, Brom- oder lodatom. Bevorzugte Bedeutungen für A1 sind Wasserstoff, C-t-Cio-Alkyl, C2H4-O-CH3, C3H6-O-CH3,
C2H4-0-(C2H4-0)χ-C2H4-OH, C2H4-0-(C2H4-0)χ-C2H4-OCH3 mit x = 0 bis 5,
Figure imgf000013_0001
CH2[CH(OH)]yCH2OH, mit y = 1-6 CH[CH2(OH)]CH(OH)CH2OH, (CH2)wCOOH mit w = 1 bis 10, C2H4-0-(C2H4-0)x-CH2COOH mit x = 0 bis 5,
C2H4-0-(C2H4-0)x-C2H4-CnF2nE mit x = 0 bis 5, n =4 bis 15 und E = ein Fluoratom.
Enthält die Verbindung der allgmeinen Formel Ib zwei Reste L1-RF, so können diese Reste verschieden voneinander sein.
Für die Reste L1 seien beispielhaft genannt, wobei α für die Bindung an das Stickstoffatom und ß für die Bindung an den Rest RF steht: α-(CH )s-ß it s = 1 - 15 α-CH2-CH2-(0-CH2-CH2-)y-ß mit y = 1 - 6 α-CH2-(0-CH2-CH2-)y-ß mit y = 1 - 6 α-CH2-NH-CO-ß α-CH2-CH2-NH-S02-ß α-CH2-NH-CO-CH2-N(CH2COOH)-Sθ2-ß α-CH2-NH-CO-CH2-N(C2H5)-Sθ2-ß α-CH2-NH-CO-CH2-N(C10H 1 )-S0 -ß α-CH2-NH-C0-CH2-N(C6Hι 3)-Sθ2-ß α-CH2-NH-CO-(CH2)lo-N(C2H5)-Sθ2-ß -CH2-NH-CO-CH2-N(-CH2-C6H5)-Sθ2-ß α-CH2-NH-CO-CH2-N(-CH2-CH2-OH)Sθ2-ß -CH2-NHCO-(CH2) 1 o-S-CH2CH2-ß α-CH2NHCOCH2-0-CH2CH2-ß α-CH2-CH2NHCOCH2-0-CH2CH2-ß α-CH2-(CH2-CH2-0)y-(CH2)3NHC0-CH2-0-CH2CH2-ß mit y = 1-6 α-CH2NHCO(CH2)i o-0-CH CH2-ß α-CH2CH2NHCO(CH2)ιo-0-CH2CH2-ß α-CH2-CgH4-0-CH2CH2-ß wobei die Phenylengruppe 1 ,4 oder 1 ,3 verknüpft ist -CH2-0-CH2-C(CH2-OCH2CH2-C6F13)2-CH2-OCH2-CH2-ß α-CH2-NHCOCH2CH2CON-CH2CH2NHCOCH2N(C2H5)Sθ2C8F-i7ß α-CH2-CH2NHCOCH2N(C2H5)-S02-ß α-CH2-0-CH2-CH(OCι 0H21 )-CH2-0-CH2CH2-ß α-(CH2NHCO)4-CH2θ-CH2CH2-ß -(CH2NHCO)3-CH2θ-CH2CH2-ß α-CH2-OCH2C(CH2OH)2-CH2-0-CH2CH2-ß
Figure imgf000014_0001
α-CH2NHCOCH2N(C6H5)-Sθ2-ß α-NHCO-CH -CH2-ß α-NHCO-CH2-0-CH2CH2-ß α-NH-CO-ß α-NH-CO-CH -N(CH2COOH)-S02-ß α-NH-C0-CH2-N(C2H5)-S02-ß α-NH-CO-CH2-N(C-| 0H 1 )-S02-ß α-NH-CO-CH2-N(C6H-| 3)-S02-ß α-NH-CO-(CH2)ι o-N(C2H5)-Sθ2-ß α-NH-CO-CH2-N(-CH2-C6H5)-Sθ2-ß α-NH-CO-CH2-N(-CH2-CH2-OH)S02-ß α-NH-CO-CH2-ß α-CH2-0-C6H4-0-CH2-CH2-ß α-CH2-C6H4-0-CH2-CH2-ß -N(C2H5)-S02-ß -N(C6H5)-S02-ß α-N(C10H2i)-SO2-ß α-N(C6H13)-S02-ß -N(C2H40H)-S02-ß α-N(CH2COOH)-S02-ß α-N(CH2C6H5)-S02-ß -N-[CH(CH20H) ]-S02-ß α-N-[CH(CH2OH)CH(OH)(CH2OH)]-Sθ2-ß
Bevorzugt werden: α-CH2-0-CH2CH2-ß α-CH2-CH2-(0-CH2-CH2-)y-ß mit y = 1 - 6 -CH2-(0-CH2-CH2-)y-ß mit y = 1 - 6 α-CH -CH2-NH-S02-ß Bsp. 10 α-CH2NHCOCH2-0-CH2CH2-ß α-CH2-CH2NHCOCH2-0-CH2CH2-ß α-CH2-(CH2-CH2-0)y-(CH2)3NHCO-CH2-0-CH2CH2-ß mit y = 1-6 α-CH2NHCO(CH2)io-0-CH2CH -ß α-CH2CH NHCO(CH2)ι 0-O-CH2CH2-ß α-CH2-0-CH2-CH(OC-ι 0H21 )-CH2-0-CH2CH2-ß α-CH2-0-C6H4-0-CH2-CH2-ß α-CH2-C6H4-0-CH2-CH2-ß
Erfindungsgemäß ganz besonders bevorzugt sind die Reste L1 der in den Beispielen der vorliegenden Erfindungsbeschreibung genannten Verbindungen. Für U2 gelten die oben aufgeführten Reste für L1 und die bevorzugt und besonders bevorzugt gekennzeichneten Reste, sowie die für die Bedeutung Alkylen oben aufgeführten und gegebenenfalls bevorzugten und besonders bevorzugten Reste, mit der Maßgabe, daß kein α-ständiges Stickstoffatom und keine endständige (ß-ständige) S02- oder CO-Gruppe vorhanden sein darf.
Bevorzugte Reste B1 sind Wasserstoff, geradkettige oder verzweigte C1-C10-AI- kylreste, die gegebenenfalls durch 1-5 Sauerstoffatome unterbrochen, und/oder gegebenenfalls substituiert sind mit 1-5 Hydroxygruppen, 1-2 COOH-Gruppen, einer gegebenenfalls durch eine COOH-Gruppe substituierte Phenylgruppe, einer Benzylgruppe und/oder 1-5-OR9-Gruppen, mit R9 in der Bedeutung eines Wasserstoffatoms oder eines Cι-C3-AIkylrestes.
Bevorzugte Reste RF sind geradkettige oder verzweigte perfluorierte Alkylreste der Formel CnF2nE, wobei n für die Zahlen 4 bis 15 und E für ein endständiges Fluoratom steht.
Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel Ib
K— N— L-RF I
A (Ib)
mit
K in der Bedeutung eines Komplexbildners oder eines Metallkomplexes der allgemeinen Formel llb
Figure imgf000016_0001
kann nach folgenden Verfahren erfolgen:
Verfahren A.
Die Carbonsäure der Formel lllb enthält bereits das Metallionenäquivalent R1.
Figure imgf000017_0001
(lllb) (IVb) (Ib)
Die gegebenenfalls in situ aktivierte Carbonsäure lllb mit R1 in der Bedeutung eines Metallionenäquivalents wird mit einem Amin IVb in einer Kupplungsreaktion zu einem Amid Ib umgesetzt.
Dieses Verfahren zur Herstellung von Metallkomplexcarbonsäureamiden ist aus DE 19652386 bekannt.
Das in die Kupplungsreaktion eingesetzte Gemisch aus Metallkomplexcarbon- säure lllb, die gegebenenfalls vorhandene Carboxy- und/oder Hydroxygruppen in geschützter Form enthält, und mindestens einem lösungsvermittelndem Stoff in einer Menge bis zu 5, vorzugsweise 0,5-2 Moläquivalenten bezogen auf die Metallkomplexcarbonsäure kann sowohl in einer vorgeschalteten Reaktionsstufe hergestellt und (z.B. durch Eindampfen, Gefriertrocknung oder Sprühtrocknung einer wäßrigen oder mit Wasser mischbaren Lösung der Bestandteile oder durch Fällung mit einem organischen Lösungsmittel aus einer derartigen Lösung) isoliert werden und anschließend in DMSO mit wasserabspaltendem Reagenz und gegegebenenfalls einem Kupplungs- Hilfsstoff umgesetzt werden als auch in situ gegebenenfalls durch Zusatz von lösungsvermittelndem/n Stoff(en) zur DMSO-Suspension von Metallkomplexcarbonsäure, wasserabspaltendem Reagenz und gegebenenfalls einem Kupplungs-Hilfsstoff gebildet werden. Die nach einem dieser Verfahren hergestellte Reaktionslösung wird zur Vorbehandlung (Säureaktivierung) 1 bis 24, vorzugsweise 3 bis 12 Stunden bei Temperaturen von 0 bis 50° C, vorzugsweise bei Raumtemperatur, gehalten.
Anschließend wird ein Amin der allgemeinen Formel IVb
RV i URF A (IVb) worin die Reste R3, L1, RF und A1 die oben angegebenen Bedeutungen haben, ohne Lösungsmittel oder gelöst, zum Beispiel in Dimethylsulfoxid, Alkoholen wie z.B. Methanol, Ethanol, Isopropanol oder deren Gemischen, Formamid, Dimethylformamid, Wasser oder Mischungen der aufgeführten Lösungsmittel, vorzugsweise in Dimethylsulfoxid, in Wasser oder in mit Wasser gemischten Lösungsmitteln, zugesetzt. Zur Amidkupplung wird die so erhaltene Reaktionslösung bei Temperaturen von 0 bis 70° C, vorzugsweise 30 bis 60° C, 1 bis 48, vorzugsweise 8 bis 24 Stunden gehalten.
In einigen Fällen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, das Amin in Form seiner Salze, z.B. als Hydrobromid oder Hydrochlorid in die Reaktion einzusetzen. Zur Freisetzung des Amins wird eine Base wie z.B. Triethylamin, Diisopropylethyl- amin, N-Methylmorpholin, Pyridin, Tripropylamin, Tributylamin, Lithiumhydroxid, Lithiumcarbonat, Natriumhydroxid oder Natriumcarbonat zugesetzt.
Die gegebenenfalls noch vorhandenen Schutzgruppen werden anschließend abgespalten.
Die Isolierung des Reaktionsprodukts erfolgt nach den dem Fachmann bekannten Methoden, vorzugsweise durch Ausfällung mit organischen Lösungsmitteln, vorzugsweise Aceton, 2-Butanon, Diethylether, Essigester, Methyl-t.- butylether, Isopropanol oder deren Mischungen. Die weitere Reinigung kann beispielsweise durch Chromatographie, Kristallisation oder Ultrafiltration erfolgen. Als lösungsvermittelnde Stoffe sind Alkali-, Erdalkali-, Trialkylammonium-, Tetraalkylammoniumsalze, Harnstoffe, N-Hydroxyimide, Hydroxyaryltriazole, substituierte Phenole und Salze von heterocyclischen Aminen geeignet. Beispielhaft genannt seien: Lithiumchlorid, Lithiumbromid, Lithiumjodid, Natrium- bromid, Natriumjodid, Lithiummethansulfonat, Natriummethansulfonat, Lithium- p-toluolsulfonat, Natrium-p-toluolsulfonat, Kaliumbromid, Kaliumjodid, Natriumchlorid, Magnesiumbromid, Magnesiumchlorid, Magnesiumjodid, Tetraethylam- monium-p-toluolsulfonat, Tetramethylammonium-p-toluolsulfonat, Pyridinium-p- toluolsulfonat, Triethylammonium-p-toluolsulfonat, 2-Morpholinoethylsulfon- säure, 4-Nitrophenol, 3,5-Dinitrophenol, 2,4-Dichlorphenol, N-Hydroxysuccin- imid, N-Hydroxyphthalimid, Harnstoff, Tetramethylharnstoff, N-Methylpyrrolidon, Formamid sowie cyclische Harnstoffe, wobei die fünf erstgenannten bevorzugt sind.
Als wasserabspaltende Reagenzien dienen alle dem Fachmann bekannten Mittel. Beispielhaft genannt seien Carbodiimide und Onium-Reagenzien wie z.B. Dicyclohexylcarbodiimid (DCCI), 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)- carbodiimid-hydroxychlorid (EDC), Benzotriazol-1 -yloxytris(dimethylamino)- phosphoniumhexafluorophosphat (BOP) und 0-(Benzotriazol-1-yl)-1, 1,3,3- tetramethyluroniumhexafluorophosphat (HBTU), vorzugsweise DCCI. In der Literatur sind zum Beispiel folgende geeignete Verfahren beschrieben:
♦ Aktivierung von Carbonsäuren. Übersicht in Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Band XV/2, Georg Thieme Verlag Stuttgart, 1974 (und J.Chem. Research (S) 1996, 302).
♦ Aktivierung mit Carbodiimiden. R. Schwyzer u. H. Kappeier, Helv. 46: 1550 (1963).
♦ E. Wünsch et al., B. 100: 173 (1967).
♦ Aktivierung mit Carbodiimiden/Hydroxysuccinimid: J. Am. Chem. Soc. 86: 1839 (1964) sowie J. Org. Chem. 53: 3583 (1988). Synthesis 453 (1972).
♦ Anhydridmethode, 2-Ethoxy-1 -ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinoIin:
B. Belleau et al., J. Am. Chem. Soc, 90: 1651 (1986), H. Kunz et al., Int. J. Pept. Prot. Res., 26: 493 (1985) und J. R. Voughn, Am. Soc. 73: 3547 (1951).
♦ Imidazolid-Methode: B.F. Gisin, R.B. Menifield, D.C. Tosteon, Am. Soc. 91: 2691 (1969).
♦ Säurechlorid-Methoden, Thionylchlorid: Helv., 42: 1653 (1959).
♦ Oxalylchlorid: J. Org. Chem., 29: 843 (1964).
Als gegebenenfalls zu verwendende Kupplungs-Hilfsstoffe sind alle dem Fachmann bekannten geeignet (Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Bd. XV/2, Georg Thieme-Verlag, Stuttgart, 1974). Beispielhaft genannt seien 4- Nitrophenol, N-Hydroxysuccinimid, 1-Hydroxybenzotriazol, 1-Hydroxy-7-aza- benzotriazol, 3,5-Dinitrophenol und Pentafluorphenol. Bevorzugt sind 4-Nitro- phenol und N-Hydroxysuccinimid, besonders bevorzugt ist dabei das erstgenannte Reagenz.
Die Abspaltung der Schutzgruppen erfolgt nach den dem Fachmann bekannten Verfahren, beispielsweise durch Hydrolyse, Hydrogenolyse, alkalische Verseifung der Ester mit Alkali in wässrig-alkoholischer Lösung bei Temperaturen von 0° bis 50° C, saure Verseifung mit Mineralsäuren oder im Fall von z.B. tert.- Butylestern mit Hilfe von Trifluoressigsäure.[Protective Groups in Organic Syn- thesis, 2nd Edition, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, John Wiley and Sons, Inc. New York, 1991], im Falle von Benzylethern mit Wasserstoff/Palladium/Kohle.
Die Herstellung des Ausgangsmaterials, der Verbindungen der Formel lllb,
Figure imgf000020_0001
(lllb), ist aus DE 19652386 bekannt. Die Amine der allgmeinen Formel IVb
R3 N'URF i
A (IVb)
sind Kaufware (Fluorochem, ABCR) oder können nach folgendem Verfahren erhalten werden aus Verbindungen der allgemeinen Formel Vb durch Umsetzung mit einem Amin der allgemeinen Formel VIb und anschließender Reduktion der Verbindungen der allgemeinen Formel VI Ib:
Figure imgf000021_0001
(Vb) (VIb) (Vllb) (IVb)
in denen
R , A1, L1 und R3 die oben genannte Bedeutung haben, und L' die Bedeutung der Gruppe L1 hat, bei der die α-CH2-Gruppe noch fehlt, und
R9 für Wasserstoff oder eine Methylgruppe steht.
Nach den bereits oben für die Aktivierung der Carbonsäure lllb offenbarten in der Literatur beschriebenen Verfahren wird die Säure Vb vor der Umsetzung mit dem Amin VIb aktiviert. Für R9 in der Bedeutung einer Methylgruppe wird eine Aminolyse durchführt.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel Vb sind Kaufware (Fluorochem, ABCR) oder werden, wie in DE 19603033 offenbart, hergestellt.
Die Verbindungen der Formel VIb sind Kaufware (Fluorochem, ABCR) oder können wie in Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, XI/2 Stickstoffverbindungen, Georg Thieme Verlag Stuttgart, 1957, S. 680; J.E. Rickman and T. Atkins, Am. Chem. Soc, 96:2268, 1974, 96:2268; F. Chavez and A.D. Sherry, J. Org. Chem. 1989, 54:2990 beschrieben, hergestellt werden: Die Verbindungen der allgemeinen Formel IVb werden in an sich bekannter Weise [Helv. Chim. Acta, 77: 23 (1994)] durch Reduktion der Verbindungen der allgmeinen Formel VII zum Beispiel mit Diboran oder Lithiumaluminiumhydrid und Abspaltung der Schutzgruppen gewonnen.
Verfahren B.
Als Ausgangsmaterial dient die Carbonsäure der Formel II Ix mit R1 in der Bedeutung von Wasserstoff - sie enthält noch kein Metallionenäquivalent R1. Die Carboxylgruppen werden nach den dem Fachmann bekannten Verfahren geschützt und eine Verbindung der Formel Uly erhalten, wobei R5 für eine beliebige Schutzgruppe und R5 für deren Vorstufe steht.
Figure imgf000022_0001
(lllx) (Uly)
Als Carboxylschutzgruppe kommen z.B. geradkettige oder verzweigte C-j-Cβ-
Alkyl-, Aryl- und Aralkylgruppen, beispielsweise die Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Butyl-, Phenyl-, Benzyl-, Diphenylmethyl-, Triphenylmethyl-, bis(ρ-Nitrophenyl)- methylgruppe sowie Trialkylsilylgruppen in Frage. Bevorzugt ist die t-Butyl- gruppe.
Figure imgf000022_0002
(Uly) (IVb) (ix) Die Umsetzung der geschützten Carbonsäure Uly mit dem Amin der Formel IVb und die Abspaltung der Schutzgruppen erfolgt wie unter Verfahren A beschrieben und in einem Folgeschritt wird die erhaltene Carbonsäure Ix noch mit mindestens einem Metalloxid oder Metallsalz eines Elements der gewünschten Ordnungszahl umgesetzt wie es z.B. in DE 19525924 offenbart ist.
Enthält der aus Verfahren A oder B erhaltene Metallkomplex noch freie COOH- Gruppen, so können diese Gruppen auch als Salze physiologisch verträglicher anorganischer oder organischer Basen vorliegen.
Die Neutralisation eventuell noch vorhandener freier Carboxygruppen erfolgt dann mit Hilfe anorganischer Basen (zum Beispiel Hydroxiden, Carbonaten oder Bicarbonaten) von zum Beispiel Natrium, Kalium, Lithium, Magnesium oder Calcium und/oder organischer Basen wie unter anderem primärer, sekundärer und tertiärer Amine, wie zum Beispiel Ethanolamin, Morpholin, Glucamin, N-Methyl- und N,N-Dimethylglucamin, sowie basischer Aminosäuren, wie zum Beispiel Lysin, Arginin und Ornithin oder von Amiden ursprünglich neutraler oder saurer Aminosäuren.
Erfindungsgemäß werden ganz besonders bevorzugt die Metallkomplexe V, VII, VIII, IX und X (vgl. Tabelle 1) eingesetzt.
Diese Verbindungen der allgemeinen Formel Ib sind als MRI-Kontrastmittel zur Darstellung von Plaques sehr gut geeignet.
In einer anderen bevorzugten Ausführungsform der Erfindung können die perfluoralkylhaltigen Komplexe mit Zuckerresten der allgemeinen Formel Ic
Figure imgf000023_0001
(Ic)
(Y-R)P1
in der R einen über die 1-OH- oder 1-SH-Position gebundenen Mono- oder Oligosaccharidrest darstellt,
RF eine perfluorierte, geradkettige oder verzweigte Kohlenstoffkette mit der Formel -CnF2nE ist, in der E ein endständiges Fluor-, Chlor-, Brom-, Jododer Wasserstoffatom darstellt und n für die Zahlen 4-30 steht,
K für einen Metallkomplex der allgemeinen Formel llc steht,
Figure imgf000024_0001
(llc) in der
R1 ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent der
Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58-70 bedeutet, mit der Maßgabe, daß mindestens zwei R1 für Metallionenäquivalente stehen
R2 und R3 unabhängig voneinander Wasserstoff, CrC7-Alkyl, Benzyl, Phenyl, -CH2OH oder -CH2OCH3 darstellen und
U -C6H4-0-CH2-ω-, -(CH2)ι-5-ω, eine Phenylengruppe, -CH2-NHCO-
CH2-CH(CH2COOH)-C6H4-ω-, -C6H4-(OCH2CH2)o-ι-N(CH2COOH)- CH2-ω oder eine gegebenenfalls durch ein oder mehrere Sauerstoffatome, 1 bis 3-NHCO-, 1 bis 3 -CONH-gruppen unterbrochene und/oder mit 1 bis 3-(CH2)o-5COOH-Gruppen substituierte C1-C12- Alkylen- oder C7-Ci2-C6H4-0-Gruppe darstellt, wobei ω für die Bindungsstelle an -CO- steht, oder der allgemeinen Formel lllc
Figure imgf000025_0001
(lllc)
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat, R4 Wasserstoff oder ein unter R1 genanntes Metallionenäquivalent darstellt und U1 -C6H4-0-CH2-ω- darstellt, wobei ω die Bindungsstelle an -CO- bedeutet
oder der allgemeinen Formel IVc
Figure imgf000025_0002
(IVc)
in der R1 und R2 die oben genannte Bedeutung haben
oder der allgemeinen Formel VcA oder VcB
Figure imgf000025_0003
(VcA)
Figure imgf000026_0001
(VcB) in der R1 die oben genannte Bedeutung hat,
oder der allgemeinen Formel Vlc
ROOC — / — \ — CO— ^A, ROOC— ^ — COOR1
(Vlc) in der R1 die oben genannte Bedeutung hat,
oder der allgemeinen Formel VI Ic
Figure imgf000026_0002
(Vllc) in der R1 die oben genannte Bedeutung hat und
U1 -C6H4-0-CH2-ω- darstellt, wobei ω die Bindungsstelle an -CO- bedeutet
oder der allgemeinen Formel Vlllc
Figure imgf000027_0001
(Vlllc)
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat, und im Rest K gegebenenfalls vorhandene freie Säuregruppen gegebenenfalls als Salze organischer und/oder anorganischer Basen oder Aminosäuren oder Aminosäureamide vorliegen können,
G für den Fall, daß K die Metallkomplexe llc bis Vllc bedeutet, einen mindestens dreifach funktionalisierten Rest ausgewählt aus den nachfolgenden Resten a) bis j) darstellt
(a)
Figure imgf000027_0002
(b)
Figure imgf000027_0003
(c)
Figure imgf000027_0004
(d)
Figure imgf000028_0001
(e)
Figure imgf000028_0002
(f)
Figure imgf000028_0003
(g)
Figure imgf000029_0001
(h)
Figure imgf000029_0002
(0
Figure imgf000029_0003
0)
w^NH-CH — CO — ^ γ k ß
und
G für den Fall, daß K den Metallkomplex VI llc bedeutet, einen mindestens dreifach funktionalisierten Rest ausgewählt aus k) oder I) darstellt,
(k)
Figure imgf000030_0001
(0
α ^CO-CH^CH-CH^CO-^y NH
ß
wobei α die Bindungsstelle von G an den Komplex K bedeutet, ß die Bindungsstelle von G zum Rest Y ist und γ die Bindungsstelle von G zum Rest Z darstellt
Y -CH2-, δ-(CH2)1.5CO-ß, δ-CH2-CHOH-CO-ß oder δ-CH(CHOH-CH2OH)- CHOH-CHOH-CO-ß bedeutet, wobei δ die Bindungsstelle zum Zuckerrest R darstellt und ß die Binduήgsstelle zum Rest G ist für
,y
-N^ ^N-S02-ε
γ-COCH2-N(C2H5)-S02-ε,
γ-COCH2-0-(CH2)2-S02-ε,
Figure imgf000031_0001
oder γ - NHCH2CH2-0-CH2CH2- ε steht, wobei γ die Bindungsstelle von Z zum Rest G darstellt und ε die Bindungsstelle von Z an den perfluorierten Rest RF bedeutet und
I1, m1 unabhängig voneinander die ganzen Zahlen 1 oder 2 bedeuten und p1 die ganzen Zahlen 1 bis 4 bedeutet,
eingesetzt werden.
Da die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Anwendung in der NMR- Diagnostik bestimmt sind, so muß das Metallion der signalgebenden Gruppe paramagnetisch sein. Dies sind insbesondere die zwei- und dreiwertigen Ionen der Elemente der Ordnungszahlen 23-29, 42-46 und 58-70. Geeignete Ionen sind beispielsweise das Chrom(lll)-, Eisen(ll)-, Kobalt(ll)-, Nickel(ll)-, Kupfer(ll)- , Praseodym(lll)-, Neodym(lll)-, Samarium(lll)- und Ytterbium(lll)-ion. Wegen ihres starken magnetischen Moments sind besonders bevorzugt Gadolinium(lll)-, Terbium(lll)-, Dysprosium(lll)-, Holmium(lll)-, Erbium(lll)-, Eisen(lll)- und Mangan(ll)-ionen. Bevorzugt sind Mangan(ll)-, Eisen(ll)-, Eisen(lll)-, Praseodym(lll)-, Neodym(lll)-, Samarium(lll)-, Gadolinium(lll)- und Ytterbium(lll)-ionen, insbesondere Dyspro- sium(lll)-ionen.
In R1 gegebenenfalls vorhandene acide Wasserstoffatome, das heißt diejenigen, die nicht durch das Zentralion substituiert worden sind, können gegebenenfalls ganz oder teilweise durch Kationen anorganischer und/oder organischer Basen oder Aminosäuren oder Aminosäureamide ersetzt sein.
Geeignete anorganische Kationen sind beispielsweise das Lithiumion, das Kaliumion, das Calciumion und insbesondere das Natriumion. Geeignete Kationen organischer Basen sind unter anderem solche von primären, sekundären oder tertiären Aminen, wie zum Beispiel Ethanolamin, Diethanolamin, Morpholin, Glucamin, N,N-Dimethylglucamin und insbesondere N-Methylglucamin. Geeignete Kationen von Aminosäuren sind beispielsweise die des Lysins, des Arginins und des Ornithins sowie die Amide ansonsten saurer oder neutraler Aminosäuren.
Besonders bevorzugte Verbindungen der allgemeinen Formel Ic sind solche mit dem Makrocyclus K der allgemeinen Formel llc.
Der Rest U im Metallkomplex K bedeutet vorzugsweise -CH2- oder C6H4-O- CH2-CD, wobei ω für die Bindungsstelle an -CO- steht.
Die Alkylgruppen R2 und R3 im Makrocyclus der allgemeinen Formel llc können geradkettig oder verzweigt sein. Beispielhaft seien Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, n-Butyl, 1-Methylpropyl, 2-Methylpropyl, n-Pentyl, 1-Methylbutyl, 2- Methylbutyl, 3-Methylbutyl, 1 ,2-Dimethylpropyl genannt. Vorzugsweise bedeuten R2 und R3 unabhängig voneinander Wasserstoff oder d-C4-Alkyl. In einer ganz besonders bevorzugten Ausführungsform steht R2 für Methyl und R3 für Wasserstoff. Die Benzylgruppe oder die Phenylgruppe R2 oder R3 im Makrocyclus K der allgemeinen Formel llc kann auch im Ring substituiert sein.
Der Rest R in der allgemeinen Formel Ic bedeutet einen über die 1-OH- oder 1- SH-Position gebundenen Mono- oder Oligosaccharidrest oder Thiozuckerrest, wobei es sich hierbei erfindungsgemäß auch um Desoxyzucker handeln kann, die anstelle einer oder mehrerer OH-Gruppen ein H-atom enthalten. In einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung bedeutet R einen Monosaccharidrest mit 5 oder 6 C-Atomen, vorzugsweise Glucose, Mannose, Galactose, Ribose, Arabinose oder Xylose oder deren Desoxyzucker wie beispielsweise 6-Desoxygalactose (Fucose) oder 6-Desoxymannose (Rhamnose) oder deren Thiozucker, wobei Glucose, Mannose und Galactose besonders bevorzugt sind.
Von den erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel Ic sind weiterhin solche bevorzugt, in denen RF -CnF2n+ι bedeutet, n steht vorzugsweise für die Zahlen 4-15. Ganz besonders bevorzugt sind die Reste - C F9, -C6Fi3, -C8Fi7, -C12F25 und -C14F29 sowie die Reste der in den Beispielen genannten Verbindungen.
Der mindestens dreifach funktionalisierte Rest G in der allgemeinen Formel Ic, der das „Gerüst" darstellt, bedeutet in einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung den Lysinrest (a) oder (b).
Y und Z bedeuten die in der allgemeinen Formel Ic angegebenen Linker, wobei unabhängig voneinander für Z der Rest
Figure imgf000033_0001
und für Y der Rest δ-CH2CO-ß bevorzugt sind.
Die perfluoralkylhaltigen Metallkomplexe mit Zuckerresten der allgemeinen Formel Ic (K),1-G - (Z-RF)m 1
I (Ic)
(Y-R)P1
mit K in der Bedeutung eines Metallkomplexes der allgemeinen Formeln llc bis Vllc und G in der Bedeutung der Formeln a) bis j), wobei Y, Z, R, RF m1, p1 und I1 die oben genannte Bedeutung haben, werden hergestellt, indem man in an sich bekannter Weise eine Carbonsäure der allgemeinen Formel IN
Figure imgf000034_0001
worin R5 ein Metallionenäquivalent der Ordnungszahlen 23-29, 42-46, oder 58- 70 oder eine Carboxylschutzgruppe bedeutet, und R2, R3 und U die genannte Bedeutung haben
oder eine Carbonsäure der allgemeinen Formel Uli
Figure imgf000034_0002
worin R4, R5 und U1 die genannte Bedeutung haben oder eine Carbonsäure der allgemeinen Formel IVi
Figure imgf000035_0001
worin R5 und R2 die genannte Bedeutung haben oder eine Carbonsäure der allgemeinen Formel Vi oder Vii
Figure imgf000035_0002
(Vi) (Vii)
worin R die genannte Bedeutung hat
oder eine Carbonsäure der allgemeinen Formel Vli
Figure imgf000035_0003
(Vli)
worin R5 die genannte Bedeutung hat oder eine Carbonsäure der allgemeinen Formel Vlli
Figure imgf000036_0001
(Vlli)
worin R5 und U1 die genannten Bedeutungen haben, in gegebenenfalls aktivierter Form mit einem Amin der allgemeinen Formel IXc
H - G - (Z-RF)m 1
I (IXc)
(Y-R)P1
in der G die Bedeutung der Formeln a) bis j) hat und R, RF, Y, Z, m1 und p1 die angegebene Bedeutung haben, in einer Kupplungsreaktion und gegebenenfalls nachfolgender Abspaltung gegebenenfalls vorhandener Schutzgruppen zu einem Metallkomplex der allgemeinen Formel Ic umsetzt oder wenn R5 die Bedeutung einer Schutzgruppe hat, nach Abspaltung dieser Schutzgruppen in einem Folgeschritt in an sich bekannter Weise mit mindestens einem Metalloxid oder Metallsalz eines Elementes der Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58-70 umsetzt, und anschließend, falls gewünscht, gegebenenfalls vorhandene acide Wasserstoffatome durch Kationen anorganischer und/oder organischer Basen, Aminosäuren oder Aminosäureamide substituiert.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel Ic mit K in der Bedeutung eines Metallkomplexes der allgemeinen Formel Vlllc und G in der Bedeutung der Formeln k) oder I) werden hergestellt, indem man in an sich bekannter Weise ein Amin der allgemeinen Formel Vllli
Figure imgf000037_0001
(Vllli)
worin R5 ein Metallionenäquivalent der Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58- 70 oder eine Carboxylschutzgruppe bedeutet,
mit einer, gegebenenfalls aktivierten, Carbonsäure der allgemeinen Formel Xc
HO - G - (Z-RF)m 1
I (Xc)
Figure imgf000037_0002
worin G die Bedeutung der Formeln k) oder I) hat und R, RF, Y, Z, m1 und p1 die angegebenen Bedeutungen haben, in einer Kupplungsreaktion und gegebenenfalls nachfolgender Abspaltung gegebenenfalls vorhandener Schutzgruppen zu einem Metallkomplex der allgemeinen Formel Ic umsetzt oder wenn R5 die Bedeutung einer Schutzgruppe hat, nach Abspaltung dieser Schutzgruppen in einem Folgeschritt in an sich bekannter Weise mit mindestens einem Metalloxid oder Metallsalz eines Elementes der Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58-70 umsetzt, und anschließend, falls gewünscht, gegebenenfalls vorhandene acide Wasserstoffatome durch Kationen anorganischer und/oder organischer Basen, Aminosäuren oder Aminosäureamide substituiert.
Die eingesetzten Carbonsäuren der allgemeinen Formeln Mi bis Vlli sind entweder bekannte Verbindungen oder werden nach den in den Beispielen beschriebenen Verfahren hergestellt. So ist die Herstellung der Carbonsäuren der allgemeinen Formel lli aus DE 19652386 bekannt. Die Herstellung der Carbonsäuren der allgemeinen Formel IVi ist DE 19728954 entnehmbar.
Vorstufe für Verbindungen der allgemeinen Formel VcA ist die N3-(2,6-Dioxo- morpholinoethyl)-N6-(ethoxycarbonylmethyl)-3,6-diaza-octandisäure, die in EP 263059 beschrieben ist.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel VcB leiten sich von der isomeren Diethylentriamin-pentaessigsäure ab, die über die am mittleren N-Atom stehende Essigsäure bindet. Diese DTPA ist in den Patenten DE 19507819 und DE 19508058 beschrieben.
Verbindungen der allgemeinen Formel Vlc leiten sich vom N-(Carboxymethyl)- N-[2-(2,6-dioxo-4-morpholinyl)-ethyl]-glycin ab, dessen Herstellung in J. Am. Oil. Chem. Soc. (1982), 59 (2), 104-107, beschrieben ist.
Verbindungen der allgemeinen Formel Vllc leiten sich von der 1-(4- Carboxymethoxybenzyl)-ethylendiamin-tetraessigsäure ab, die im Patent US 4,622,420 beschrieben ist.
Die als Ausgangsstoffe eingesetzten perbenzylierten Zuckersäuren können analog Lockhoff, Angew. Chem. 1998, 110 Nr. 24, S. 3634ff. Hergestellt werden. So erfolgt z.B. die Herstellung der 1-O-Essigsäure von Perbenzyl- Glucose über 2 Stufen, via Trichloracetimidat und Umsetzung mit Hydroxyessigsäureethylester, BF3-Katalyse in THF und anschließender Verseifung mit NaOH in MeOH/THF.
In einem vorteilhafteren Verfahren können die als Ausgangsstoffe eingesetzten perbenzylierten Zuckersäuren auch hergestellt werden, indem die perbenzylierten 1-OH-Zucker in einem mit Wasser nicht mischbaren organischen Lösungsmittel gelöst und mit einem Alkylierungsreagenz der allgemeinen Formel Xlc Nu-L-COO-Sg (Xlc),
worin Nu ein Nucleofug bedeutet, L -(CH2) (ι-5), -CH2-CHOH-, -CH(CHOH- CH2OH)-CHOH-CHOH- ist, und Sg eine Schutzgruppe darstellt,
in Gegenwart einer Base und gegebenenfalls eines Phasentransfer-Katalysators umgesetzt werden. Als Nucleofug können im Alkylierungsreagenz der allgemeinen Formel Xlc beispielsweise die Reste -Cl, -Br, -J, -OTs, -OMs, - OS02CF3, -OS02C4F9 oder -OS02C8F17 enthalten sein. Bei der Schutzgruppe handelt es sich um eine übliche Säureschutzgruppe. Diese Schutzgruppen sind dem Fachmann gut vertraut (Protective Groups in Organic Syntheses, second Edition, T.W.Greene and P.G.M. Wuts, John Wiley & Sons Inc., New York 1991).
Die erfindungsgemäße Umsetzung kann bei Temperaturen von 0-50°C, vorzugsweise von 0°C bis Raumtemperatur erfolgen. Die Reaktionszeiten betragen von 10 Minuten bis 24 Stunden, vorzugsweise von 20 Minuten bis 12 Stunden.
Die Base wird entweder in fester Form, vorzugsweise fein gepulvert, oder als 10-70%ige, vorzugsweise 30-50%ige, wäßrige Lösung zugesetzt. Als bevorzugte Basen dienen NaOH und KOH.
Als organische, nicht mit Wasser mischbare Lösungsmittel können im erfindungsgemäßen Alkylierungsverfahren beispielsweise Toluol, Benzol, CF3- Benzol, Hexan, Cyclohexan, Diethylether, Tetrahydrofuran, Dichlormethan, MTB oder deren Gemische eingesetzt werden.
Als Phasentransfer-Katalysatoren dienen im erfindungsgemäßen Verfahren die für diesen Zweck bekannten quartären Ammonium- oder Phosphoniumsalze oder auch Kronenether wie z. B. [15]-Krone-5 oder [18]-Krone-6. Vorzugsweise kommen quartäre Ammoniumsalze mit vier gleichen oder verschiedenen Kohlenwasserstoffgruppen am Kation, ausgewählt aus Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl oder Isobutyl in Frage. Die Kohlenwasserstoffgruppen am Kation müssen groß genug sein, um eine gute Löslichkeit des Alkylie- rungsreagenzes im organischen Lösungsmittel zu gewährleisten. Erfindungsgemäß besonders bevorzugt wird N(Butyl)4+-Cr, N(Butyl) +-HSθ4 ", aber auch N(Methyl)4 +-CI' eingesetzt.
Als ganz besonders bevorzugte Verbindungen der allgemeinen Formel Ic wird erfindungsgemäß der Metallkomplex XV der Tab. 1 (Beispiel 1) eingesetzt.
In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Erfindung finden die perfluoralkylhaltigen Komplexe mit polaren Resten der allgemeinen Formel Id Anwendung
(K),1-G - (Z-RF)m 1
I (Id)
(R) /pP
in der
RF eine perfluorierte, geradkettige oder verzweigte Kohlenstoffkette mit der Formel -CnF2nE ist, in der E ein endständiges Fluor-, Chlor-, Brom-, Jododer Wasserstoffatom darstellt und n für die Zahlen 4-30 steht,
K für einen Metallkomplex der allgemeinen Formel lld steht,
Figure imgf000040_0001
(lld) in der
R1 ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent der
Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58-70 bedeutet, mit der Maßgabe, daß mindestens zwei R1 für Metallionenäquivalente stehen,
R2 und R3 unabhängig voneinander Wasserstoff, Cι-C7-Alkyl, Benzyl, Phenyl, -CH2OH oder-CH2OCH3 darstellen und
U -C6H4-0-CH2-ω-, -(CH2)ι-5-ω, eine Phenylengruppe, -CH2-NHCO-
CH2-CH(CH2COOH)-C6H4-ω-, -C6H4-(OCH2CH2)o-ι-N(CH2COOH)- CH2-ω oder eine gegebenenfalls durch ein oder mehrere Sauerstoffatome, 1 bis 3-NHCO-, 1 bis 3 -CONH-gruppen unterbrochene und/oder mit 1 bis 3
-(CH2)o-5θ OH-Gruppen substituierte CrC12-Alkylen- oder C7-C12- C6H -0-Gruppe darstellt, wobei ω für die Bindungsstelle an -CO- steht, oder der allgemeinen Formel II Id
Figure imgf000041_0001
(Hld) in der R1 die oben genannte Bedeutung hat, R4 Wasserstoff oder ein unter R1 genanntes Metallionenäquivalent darstellt und U1 -C6H4-0-CH2-ω- darstellt, wobei ω die Bindungsstelle an -CO- bedeutet oder der allgemeinen Formel IVd
Figure imgf000042_0001
(IVd) in der R1 und R2 die oben genannte Bedeutung haben
oder der allgemeinen Formel VdA oder VdB
Figure imgf000042_0002
(VdA)
Figure imgf000042_0003
(VdB)
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat,
oder der allgemeinen Formel Vld
ROOC- -CO^^ «
:N' N:
RΌOC- -COOR1
(Vld) in der R1 die oben genannte Bedeutung hat, oder der allgemeinen Formel VI Id
Figure imgf000043_0001
(Vlld)
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat und
U1 -C6H4-0-CH2-ω- darstellt, wobei ω die Bindungsstelle an -CO- bedeutet
und im Rest K gegebenenfalls vorhandene freie Säuregruppen gegebenenfalls als Salze organischer und/oder anorganischer Basen oder Aminosäuren oder Aminosäureamide vorliegen können,
G einen mindestens dreifach funktionalisierten Rest ausgewählt aus den nachfolgenden Resten a) bis g) darstellt
(a)
Figure imgf000043_0002
(b)
Figure imgf000043_0003
(c)
Figure imgf000044_0001
(d)
Figure imgf000044_0002
(e)
Figure imgf000044_0003
(0
Figure imgf000045_0001
(g)
X" "\
HN N NH
ß
Figure imgf000045_0002
wobei α die Bindungsstelle von G an den Komplex K bedeutet, ß die Bindungsstelle von G zum Rest R ist und γ die Bindungsstelle von G zum Rest Z darstellt
für y— N: :N-sθ2-ε
γ-C(0)CH20(CH2)2-ε,
steht, wobei γ die Bindungsstelle von Z zum Rest G darstellt und ε die Bindungsstelle von Z an den perfluorierten Rest RF bedeutet
R einen polaren Rest ausgewählt aus den Komplexen K der allgemeinen Formeln lld bis VI Id darstellt, wobei R1 hier ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent der Ordnungszahlen 20, 23-29, 42-46 oder 58-70 bedeutet, und die Reste R2, R3, R4, U und U1 die oben angegebene Bedeutung aufweisen oder den Folsäurerest oder eine über -CO- , S02- oder eine direkte Bindung an den Rest G gebundene Kohlenstoffkette mit 2-30 C-Atomen bedeutet, geradlinig oder verzweigt, gesättigt oder ungesättigt, gegebenenfalls unterbrochen durch 1-10 Sauerstoffatome, 1-5 - NHCO-Gruppen, 1-5 -CONH-Gruppen, 1-2 Schwefelatome, 1-5 - NH-Gruppen oder 1-2 Phenylengruppen, die gegebenenfalls mit 1-2 OH-Gruppen, 1-2 NH2-Gruppen, 1-2 -COOH-Gruppen, oder 1-2 - SOsH-Gruppen substituiert sein können oder gegebenenfalls substituiert mit 1-8 OH-Gruppen, 1-5 -COOH- Gruppen, 1-2 S03H-Gruppen, 1-5 NH2-Gruppen, 1-5 C1-C4- Alkoxygruppen, und I1, m\ p2 unabhängig voneinander die ganzen Zahlen 1 oder 2 bedeuten.
Da die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Anwendung in der NMR-Dia- gnostik bestimmt sind, muß das Metallion der signalgebenden Gruppe paramagnetisch sein. Dies sind insbesondere die zwei- und dreiwertigen Ionen der Elemente der Ordnungszahlen 23-29, 42-46 und 58-70. Geeignete Ionen sind beispielsweise das Chrom(lll)-, Eisen(ll)-, Kobalt(ll)-, Nickel(ll)-, Kupfer(ll)-, Praseodym(lll)-, Neodym(lll)-, Samarium(lll)- und Ytterbium(lll)-ion. Wegen ihres starken magnetischen Moments sind besonders bevorzugt Gadolinium(lll)-, Terbium(lll)-, Dysprosium(lll)-, Holmium(lll)-, Erbium(lll)-, Eisen(lll)- und Mangan(ll)-ionen. Bevorzugt sind Mangan(ll)-, Eisen(ll)-, Eisen(lll)-, Praseodym(lll)-, Neodym(lll)-, Samarium(lll)-, Gadolinium(III)- und Ytterbium(lll)-ionen, insbesondere Dyspro- sium(lll)-ionen.
In R1 gegebenenfalls vorhandene acide Wasserstoffatome, das heißt diejenigen, die nicht durch das Zentralion substituiert worden sind, können gegebenenfalls ganz oder teilweise durch Kationen anorganischer und/oder organischer Basen oder Aminosäuren oder Aminosäureamide ersetzt sein.
Geeignete anorganische Kationen sind beispielsweise das Lithiumion, das Kaliumion, das Calciumion und insbesondere das Natriumion. Geeignete Kationen organischer Basen sind unter anderem solche von primären, sekundären oder tertiären Aminen, wie zum Beispiel Ethanolamin, Diethanolamin, Morpholin, Glucamin, N,N-Dimethylglucamin und insbesondere N-Methylglucamin. Geeignete Kationen von Aminosäuren sind beispielsweise die des Lysins, des Arginins und des Ornithins sowie die Amide ansonsten saurer oder neutraler Aminosäuren.
Besonders bevorzugte Verbindungen der allgemeinen Formel Id sind solche mit dem Makrocyclus K der allgemeinen Formeln lld, llld, VdB oder Vlld.
Der Rest U im Metallkomplex K bedeutet vorzugsweise -CH2- oder C6H -0- CH -ω, wobei ω für die Bindungsstelle an -CO- steht.
Die Alkylgruppen R2 und R3 im Makrocyclus der allgemeinen Formel lld können geradkettig oder verzweigt sein. Beispielhaft seien Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, n-Butyl, 1-Methylpropyl, 2-Methylpropyl, n-Pentyl, 1-Methylbutyl, 2- Methylbutyl, 3-Methylbutyl, 1 ,2-Dimethylpropyl genannt. Vorzugsweise bedeuten R2 und R3 unabhängig voneinander Wasserstoff oder CrC -Alkyl.
In einer ganz besonders bevorzugten Ausführungsform steht R2 für Methyl und R3 für Wasserstoff. Die Benzylgruppe oder die Phenylgruppe R2 oder R3 im Makrocyclus K der allgemeinen Formel lld kann auch im Ring substituiert sein.
Der polare Rest R in der allgemeinen Formel Id bedeutet in einer bevorzugten Ausführungsform den Komplex K, wobei dieser vorzugsweise neben einem Gd3*- oder Mn2+-Komplex auch ein Ca2+-Komplex sein kann. Besonders bevorzugt sind als polare Reste R die Komplexe K der allgemeinen Formeln lld, llld, VdA oder Vlld. Ganz besonders bevorzugt weisen diese als R1 ein Metallionenäquivalent der Ordnungszahlen 20, 25, 39 oder 64 auf.
In einer anderen bevorzugten Ausführungsform hat der polare Rest R die folgenden Bedeutungen:
-C(0)CH2CH2S03H
-C(O)CH2OCH2CH20CH2CH2OH
-C(O)CH2OCH2CH20H
-C(0)CH2OCH2CH(OH)CH2OH
-C(0)CH2NH-C(0)CH2COOH
-C(0)CH2CH(OH)CH OH
-C(O)CH2OCH2C00H
-SO2CH2CH C00H
-C(O)-C6H3-(m-C00H)2
-C(O)CH20(CH2)2-C6H3-(m-C00H)2
-C(O)CH20-C6H4-m-S03H
-C(0)CH2NHC(0)CH2NHC(0)CH2θCH2COOH
-C(O)CH2OCH2CH20CH2COOH
-C(O)CH2OCH2CH(0H)CH2θ-CH2CH2OH
-C(O)CH20CH2CH(0H)CH2θCH2-CH(OH)-CH20H
-C(0)CH2S03H
-C(O)CH2CH2C00H
-C(0)CH(OH)CH(OH)CH2OH
-C(0)CH20[(CH2)2θ]ι-9-CH3
-C(0)CH20[(CH2)20]ι-9-H
-C(O)CH20CH(CH20H)2 -C(0)CH2OCH(CH2θCH2COOH)2
-C(0)-C6H3-(m-OCH2COOH)2
-CO-CH20-(CH2)2θ(CH2)2θ-(CH2)20(CH2)2θCH3
vorzugsweise -C(0)CH20[(CH2)2θ]4-CH3.
In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform bedeutet der polare Rest R den Folsäurerest.
Von den erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel Id sind weiterhin solche bevorzugt, in denen RF -CnF2n+ι bedeutet, n steht vorzugsweise für die Zahlen 4-15. Ganz besonders bevorzugt sind die Reste — C4F9, -CβFi3, -CβFi7, -Cι2F25 und — Ci4F2g.
Der mindestens dreifach funktionalisierte Rest G in der allgemeinen Formel Id, der das „Gerüst" darstellt, bedeutet in einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung den Lysinrest (a) oder (b).
Z bedeutet die in der allgemeinen Formel Id angegebenen Linker, wobei der Rest
r— N: :N-so,-ε
bevorzugt ist.
Die perfluoralkylhaltigen Metallkomplexe mit polaren Resten der allgemeinen Formel Id
(K),1-G - (Z-RF)m 1
I (Id)
(R) /pP2
in der K, G, R, Z, R ϊF1", I ι1 ,
Figure imgf000049_0001
die oben angegebene Bedeutung haben, werden hergestellt, indem man in an sich bekannter Weise eine Carbonsäure der allgemeinen Formel llk
Figure imgf000050_0001
worin R5 ein Metallionenäquivalent der Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58- 70 oder eine Carboxylschutzgruppe bedeutet, und R2, R3 und U die genannte Bedeutung haben
oder eine Carbonsäure der allgemeinen Formel Ulk
Figure imgf000050_0002
worin R4, R5 und U1 die genannte Bedeutung haben
oder eine Carbonsäure der allgemeinen Formel IVk
Figure imgf000051_0001
(IVk)
worin R5 und R2 die genannte Bedeutung haben oder eine Carbonsäure der allgemeinen Formel Vk oder Vm
Figure imgf000051_0002
(Vk) (Vm)
worin R5 die genannte Bedeutung hat
oder eine Carbonsäure der allgemeinen Formel VIk
Figure imgf000051_0003
(VIk)
worin R5 die genannte Bedeutung hat oder eine Carbonsäure der allgemeinen Formel Vllk
Figure imgf000052_0001
(Vllk)
worin R5 und U1 die genannten Bedeutungen haben, in gegebenenfalls aktivierter Form mit einem Amin der allgemeinen Formel Vllld
H -G - (Z-RF)m 1
I (Vllld)
(R)P2
in der G, R, Z, RF, m1 und p2 die angegebene Bedeutung haben, in einer Kupplungsreaktion und gegebenenfalls nachfolgender Abspaltung gegebenenfalls vorhandener Schutzgruppen zu einem Metallkomplex der allgemeinen Formel Id umsetzt oder wenn R5 die Bedeutung einer Schutzgruppe hat, nach Abspaltung dieser Schutzgruppen in einem Folgeschritt in an sich bekannter Weise mit mindestens einem Metalloxid oder Metallsalz eines Elementes der Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58-70 umsetzt, und anschließend, falls gewünscht, gegebenenfalls vorhandene acide Wasserstoffatome durch Kationen anorganischer und/oder organischer Basen, Aminosäuren oder Aminosäureamide substituiert.
Die eingesetzten Carbonsäuren der allgemeinen Formeln llk bis Vllk sind entweder bekannte Verbindungen oder werden nach den in den Beispielen beschriebenen Verfahren hergestellt. So ist die Herstellung der Carbonsäuren der allgemeinen Formel llk aus DE 19652386 bekannt. Die Herstellung der Carbonsäuren der allgemeinen Formel IVk ist DE 19728954 entnehmbar.
Vorstufe für Verbindungen der allgemeinen Formel VdA ist die N3-(2,6- Dioxomorpholinoethyl)-N6-(ethoxycarbonylmethyl)-3,6-diaza-octandisäure, die in EP 263059 beschrieben ist.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel VdB leiten sich von der isomeren Diethylentriamin-pentaessigsäure ab, die über die am mittleren N-Atom stehende Essigsäure bindet. Diese DTPA ist in den Patenten DE 19507819 und DE 19508058 beschrieben.
Verbindungen der allgemeinen Formel Vld leiten sich vom N-(Carboxymethyl)- N-[2-(2,6-dioxo-4-morpholinyl)-ethyl]-glycin ab, dessen Herstellung in J. Am. Oil. Chem. Soc. (1982), 59 (2), 104-107, beschrieben ist.
Verbindungen der allgemeinen Formel VI Id leiten sich von der 1-(4- Carboxymethoxybenzyl)-ethylendiamin-tetraessigsäure ab, deren Herstellung im Patent US 4,622,420 beschrieben worden ist.
Als ganz besonders bevorzugte Verbindung der allgemeinen Formel Id wird erfindungsgemäß der Metallkomplex XVI der Tab. 1 eingesetzt.
In einer anderen bevorzugten Ausführungsform der Erfindung können galenische Formulierungen eingesetzt werden, die paramagnetische und diamagnetische perfluoralkylhaltige Substanzen enthalten. Vorzugsweise liegen die paramagnetischen und diamagnetischen Substanzen in einem wässrigen Lösungsmittel gelöst vor.
Als paramagnetische perfluoralkylhaltige Verbindungen können in den Formulierungen erfindungsgemäß alle vorstehend genannten Metallkomplexe der allgemeinen Formeln I, la, Ib, Ic und/oder Id eingesetzt werden. Die diamagnetischen perfluoralkylhaltigen Substanzen sind solche der allgemeinen Formel XX:
RF- L2- B2 (XX)
worin RF einen geradkettigen oder verzweigten Perfluoralkylrest mit 4 bis 30 Kohlenstoffatomen darstellt, L2 für einen Linker und B2 für eine hydrophile Gruppe steht. Der Linker L2 ist eine direkte Bindung, eine -Sθ2-Gruppe oder eine geradkettige oder verzweigte Kohlenstoffkette mit bis zu 20 Kohlenstoffatomen, welche mit ein oder mehreren -OH, -COO", -SO3-Gruppen substituiert sein kann und/oder gegebenenfalls ein oder mehrere -0-, -S-, -CO-, -CONH-, -NHCO-, -CONR9-, -NR9CO-, -S02-, -P04-, -NH-, -NR9-Gruppen, einen Arylring oder ein Piperazin enthält, wobei R9 für einen Cr bis C2o- Alkylrest steht, welcher wiederum ein oder mehrere O-Atome enthalten kann und/oder mit -COO" oder S0 -Gruppen substituiert sein kann.
Die hydrophile Gruppe B2 ist ein Mono- oder Disaccharid, eine oder mehrere benachbarte -COO" oder -S03 '-Gruppen, eine Dicarbonsäure, eine Isophthalsäure, eine Picolinsäure, eine Benzolsulfonsäure, eine Tetra- hydropyrandicarbonsäure, eine 2,6-Pyridindicarbonsäure, ein quartäres Ammoniumion, eine Aminopolycarbonsäure, eine Aminodipolyethylen- glycolsulfonsäure, eine Aminopoiyethylengiycolgruppe, eine S02-(CH2)2-OH- Gruppe, eine Polyhydroxyalkylkette mit mindestens zwei Hydroxylgruppen oder eine oder mehrere Polyethylenglycolketten mit mindestens zwei Glycoleinheiten, wobei die Polyethylenglycolketten durch eine -OH oder - OCH3-Gruppe terminiert sind. Derartige Substanzen sind teilweise bereits bekannt, teilweise wurden solche Substanzen zur Herstellung der erfindungsgemäßen Formulierungen neu synthetisiert. Bekannte perfluoralkylhaltige Substanzen und deren Herstellung werden in den folgenden Publikationen beschrieben:
J. G. Riess, Journal of Drug Targeting, 1994, Vol. 2, pp. 455-468; J. B. Nivet et al., Eur. J. Med. Chem., 1991, Vol. 26, pp. 953-960; M.-P. Krafft et al., Angew. Chem., 1994, Vol. 106, No. 10, pp. 1146-1148; M. Lanier et al., Tetrahedron Letters, 1995, Vol. 36, No. 14, pp. 2491-2492; F. Guillod et al., Carbohydrate Research, 1994, Vol. 261, pp. 37-55; S. Achilefu et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1995, Vol. 70, pp. 19-26; L. Clary et al., Tetrahedron, 1995, Vol.51, No.47, pp. 13073-13088; F. Szoni et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1989, Vol. 42, pp. 59-68; H. Wu et al., Supramolecular Chemistry, 1994, Vol. 3, pp. 175-180;
F. Guileri et al., Angew. Chem. 1994, Vol. 106, No. 14, pp. 1583-1585; M.-P. Krafft et al., Eur. J. Med. Chem., 1991, Vol. 26, pp.545-550;
J. Greiner et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1992, Vol.56, pp. 285-293; A. Milius et al., Carbohydrate Research, 1992, Vol. 229, pp. 323-336; J. Riess et al., Colloids and Surfaces A, 1994, Vol. 84, pp. 33-48;
G. Merhi et al., J. Med. Chem., 1996, Vol. 39, pp. 4483-4488;
V. Cirkva et al., Jounal of Fluorine Chemistry, 1997, Vol. 83, pp. 151-158;
A. Ould Amanetoullah et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1997, Vol. 84, pp.
149-153;
J. Chen et al., Inorg. Chem., 1996, Vol. 35, pp. 1590-161;
L. Clary et al., Tetrahedron Letters, 1995, Vol. 36, No. 4, pp. 539-542;
MM. Chaabouni et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1990, Vol. 46, pp. 307-
315;
A. Milius et al., New J. Chem., 1991, Vol. 15, pp.337-344;
M.-P. Krafft et al., New J. Chem., 1990, Vol. 14, pp. 869-875;
J.-B. Nivet et al., New J. Chem., 1994, Vol. 18, pp. 861-869;
C. Santaella et al., New J. Chem., 1991, Vol. 15, pp.685-692;
C. Santaella et al., New J. Chem., 1992, Vol. 16, pp.399-404;
A.Milius et al., New J. Chem., 1992, Vol. 16, pp. 771-773;
F. Szönyi et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1991, Vol. 55, pp. 85-92;
C. Santaella et al., Angew. Chem., 1991, Vol. 103, No. 5, pp. 584-586;
M.-P. Krafft et al., Angew. Chem., 1993, Vol. 105, No. 5, pp. 783-785;
EP 0548096 B1.
Die Herstellung der neuen perfluoralkylhaltigen Substanzen erfolgt analog der obengenannten literaturbekannten Verbindungen und ist in den Beispielen beschrieben. Es handelt sich dabei um Substanzen der allgemeinen Formel XXI
RF- X1 (XXI) worin RF einen geradkettigen oder verzweigten Perfluoralkylrest mit 4 bis 30 Kohlenstoffatomen darstellt und X1 ein Rest ausgewählt aus der Gruppe der folgenden Reste ist (n ist dabei eine Zahl zwischen 1 und 10):
Figure imgf000056_0001
Figure imgf000057_0001
Figure imgf000057_0002
OH o
Figure imgf000057_0003
Figure imgf000058_0001
0^°3
Figure imgf000058_0002
Bevorzugte diamagnetische perfluoralkylhaltige Substanzen sind solche mit einem Monosaccharid als hydrophiler Gruppe B2.
Besonders bevorzugte diamagnetische perfluoralkylhaltige Verbindungen enthalten einen Perfluoralkylrest Rf mit 6 bis 12 Kohlenstoffatomen, einen Linker L2, welcher eine -S02-Gruppe oder eine geradkettige oder verzweigte Kohlenstoffkette mit bis zu 20 Kohlenstoffatomen darstellt, die wiederum ein oder mehrere -O-, -CO-, -CONH-, -NHCO-, -CONR-, -NRCO-, -S0 -Gruppen oder ein Piperazin enthält, worin R die oben angegebene Bedeutung hat, und ein Monosaccharid als hydrophile Gruppe B2.
Weitere geeignete diamagnetische perfluoralkylhaltige Verbindungen sind Konjugate aus Cyclodextrin und perfluoralkylhaltigen Verbindungen. Diese Konjugate bestehen aus α-, ß- oder γ-Cyclodextrin und Verbindungen der allgemeinen Formel XXII
A1-L3-RF (XXII)
worin A1 für ein Adamantan-, Biphenyl- oder Anthracenmolekül, L3 für einen Linker und RF für einen geradkettigen oder verzweigten Perfluoralkylrest mit 4 bis 30 Kohlenstoffatomen steht. Der Linker L3 ist eine geradkettige Kohlenwasserstoffkette mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen, welche durch ein oder mehrere Sauerstoffatome, ein oder mehrere CO-, SO2-, CONH-, NHCO-, CONR-, NRCO-, NH-, NR-Gruppen oder ein Piperazin unterbrochen sein kann, wobei R ein CrC5-Alkylrest ist.
Bevorzugte Verbindungen sind die folgenden Verbindungen:
Figure imgf000060_0001
Figure imgf000060_0002
Figure imgf000060_0003
Figure imgf000060_0004
Figure imgf000061_0001
Figure imgf000061_0002
Die galenischen Formulierungen der vorliegenden Erfindung enthalten die paramagnetischen und diamagnetischen perfluoralkylhaltigen Verbindungen in einem Mischungsverhältnis zwischen 5:95 und 95:5. Bevorzugt sind Mischungsverhältnisse zwischen 40:60 und 60:40 der beiden Substanzen. Beide Substanzen werden in millimolaren Konzentrationen verwendet. Es werden Konzentrationen zwischen 0.5 und 1000 mmol/l Lösungsmittel erreicht. Das Lösungsmittel ist bevorzugt Wasser. Die Metallkonzentration der Formulierungen liegt bevorzugt in einem Bereich von 50 - 250 mmol/l.
Bevorzugt sind Mischungen aus paramagnetischen und diamagnetischen perfluoralkylhaltigen Verbindungen, bei denen die Perfluoraikylketten eine Länge von 6 bis 12 Kohlenstoffatomen haben. Besonders bevorzugt sind Mischungen, bei denen sowohl die paramagnetischen als auch die diamagnetischen perfluoralkylhaltigen Verbindungen eine Perfluoralkylkette mit 8 Kohlenstoffatomen aufweisen.
Die Herstellung der galenischen Formulierungen erfolgt dadurch, daß die paramagnetischen perfluoralkylhaltigen Verbindungen (Komponente A) und die diamagnetischen perfluoralkylhaltigen Substanzen (Komponente B) in Molenbrüchen zwischen 0.05 und 0.95 an Komponente A oder B eingewogen und in einem geeigneten Lösungsmittel gelöst werden. Ein besonders gut geeignetes Lösungsmittel ist Wasser. Dieser Lösung werden dann übliche galenische Zusätze wie z.B. Pufferlösungen und das Ca-Salz des Komplexbildners im Überschuß zugegeben. Bei 10 bis 100°C werden die Lösungen stark gerührt. Alternativ können die Lösungen bei 10 bis 100°C in einem Ultraschallbad behandelt werden. Eine weitere Alternative besteht darin, daß man die Lösungen mit Mikrowellen behandelt.
Bei Stoffen, die sich als Einzelkomponenten nicht in Wasser lösen, erweist es sich als vorteilhaft, einen Lösungsvermittler wie Alkohol (z.B. Methanol oder Ethanol) oder ein anderes mit Wasser mischbares Lösungsmittel zuzusetzen und dieses dann langsam abzudestillieren. Die Destillation kann unter Vakuum erfolgen. Der Rückstand wird anschließend in Wasser gelöst und die Lösung filtriert. Es ist auch möglich, jede Komponente für sich in jeweils einem Lösungsmittel getrennt zu lösen, dann zusammenzufügen und wie oben weiterzuverfahren. Als vorteilhaft hat es sich erwiesen, eine relativ stark konzentrierte Lösung (> 100 mmol) des Metallkomplexes (Komponente A) vorzulegen und dann Komponente B pur zuzugeben und wie oben erwähnt die Lösung zu Rühren oder mit Ultraschall bzw. Mikrowellen zu behandeln.
Zusammenfassend ist festzustellen, dass als ganz besonders bevorzugte Verbindungen die in Tabelle 1 aufgeführten Gadoliniumkomplexe l-XVI die erfindungsgemäßen Kriterien erfüllen. Die physikalischen Parameter dieser Metallkomplexe l-XVI sind in Tab. 2 aufgeführt.
Sowohl die erfindungsgemäßen paramagnetischen Verbindungen der allgemeinen Formeln I, la, Ib, Ic und Id als auch die erfindungsgemäßen Formulierungen aus paramagnetischen und diamagnetischen perfluoralkylhaltigen Substanzen eignen sich in hervorragender Weise als Kontrastmittel im MR-Imaging zur Darstellung von Plaques, Tumoren und Nekrosen.
Tabelle 1 : Erfindungsgemäß ganz besonders bevorzugt verwendete Metallkomplexe
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Tabelle 2:
Physikochemische Parameter der erfindungsgemäß verwendeten Komplexe gemäß Tabelle 1
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CMC: kritische Mizellbildungskonzentration 2 Rh: hydrodynamischer Mizelldurchmesser R1: Relaxivity Ausführungsbeispiele
Beispiel 1
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-Oxa-perfluortridecansäure-N-(2-methoxy)-ethyl- amid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 4,51 g (60 mmol) 2-MethoxyethyIamin und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3
Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmit- tel: Dichlormethan/Aceton= 20:1) chromatographiert.
Ausbeute: 30,28 g (91 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elem€ taranalyse: ber.: C 31,10 H 2.44 2,42 F 55,76 gef.: C 30,87 H 2,58 N 2,35 F 55,51
b) N-(2-Methoxyethyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluortride- cylamin
30 g (51,79 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 1a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetrahydro- furan) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml
Ethanol/50 ml 10 %ϊger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2 Propanol= 20:1).
Ausbeute: 26,93 g (92 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 31.87 H 2.85 N 2,48 F 57,14 gef.: C 31.69 H 3.10 N 2,27 F 56,88
1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(2- methoxyethyl)-N-(1H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluortridecyl)- amid]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
(Metallkomplex X)
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyclododecan-1,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31 ,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 8,98 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 1b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 15,14 g (81 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 5,7 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 34,70 H 3,77 N 7,14 F 27,44 Gd 13,36 gef.: C 34,51 H 3,94 N 7,02 F 27,25 Gd 13,18 Beispiel 2
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluortridecansäure-N-(2,3-dihydroxypro- pyl)-amid Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 5,47 g (60 mmol) 2,3- Dihydroxypropylamin und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3
Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmit- tel: Dichlormethan/Ethanol= 15:1) chromatographiert.
Ausbeute: 29,70 g (87 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 30,32 H 2,20 N 2,36 F 54,35 gef.: C 30,12 H 2,41 N 2,18 F 54,15
b) N-(2,3-Dihydroxypropyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluor- tridecyl)-amin
30 g (48,8 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 2a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 50 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 300 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Va- kuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus
300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 60°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 Mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesium- sulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/Methanol= 15:1). Ausbeute: 24,07 g (85 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes Elementaranalyse: ber.: C 31,05 H 2,61 N 2,41 F 55,66 gef.: C 31.91 H 2,78 N 2,33 F 55,47
1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(2,3- dihydroxypropyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluortridecyl)- amid]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex (Metallkomplex V)
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyclododecan-1,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 9,21 g(15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 2b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raum- temperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer
Mischung aus wenig EthanoiVWasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/AcetonitrilΛ/Vasser). Ausbeute: 16,09 g (85 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 6,3 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 34,26 H 3,64 N 7,05 F 27,10 Gd 13,19 gef.: C 34,12 H 3,83 N 6,91 F 26,88 Gd 12,93 Beispiel 3
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-(5-hydroxy-3-oxa- pentyl)-amid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 6,25 g (60 mmol)
5-Hydroxy-3-oxa-pentylamin und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der
Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 15:1) chromatographiert. Ausbeute: 32,20 g (92 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: 0 31,54 H 2.65 N 2,30 F 53,01 gef.: C 31.61 H 2,84 N 2,14 F 52,85
b) N-(5-Hydroxy-3-oxa-pentyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-per- fluortridecyl)-amin
30 g (49,24 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 3a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf
0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 10 Stunden bei 50°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 Mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2-Propanol=
20:1).
Ausbeute: 26,09 g (89 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 32,28 H 3,05 N 2,35 F 54,25 gef.: C 32,12 H 3,21 N 2,18 F 54,09
c) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(5-hy- droxy-3-oxa-pentyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluortri- decyl)-amid]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex (Metallkomplex VIII)
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 9,45 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 3b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1 -ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig EthanoiVWasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrof uran/Acetonitril/Wasser).
Ausbeute: 16,10 g (84 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 5,7 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 34,83 H 3,84 N 6,96 F 26,76 Gd 13,03 gef.: C 34,65 H 3,96 N 6,84 F 26,62 Gd 12,91
Beispiel 4
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-(2-hydroxyethyl)-amid Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 3,66 g (60 mmol) 2-Aminoethanol und 6,07 g (60 mmol)
Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel:
Dichlormethan/Aceton= 20:1) chromatographiert. Ausbeute: 28,90 g (89 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 29,75 H 2,14 N 2,48 F 57,14 gef.: C 29,61 H 2,29 N 2,37 F 57,01
N-(2-Hydroxyethyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluortride- cyl)-amin
28 g (49,54 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 4a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Va- kuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus
300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 10 Stunden bei 50°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesium- sulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2 Propanol= 15:1). Ausbeute: 25,12 g (92 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 30,50 H 2,56 N 2,54 F 58,59 gef.: C 30,32 H 2,71 N 2,48 F 58,43 c) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(2-hy- droxyethyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluortridecyl)- amin-amid]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 8,75 g (15,88 mmol) der Titelverbin- düng aus Beispiel 4b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel
RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 16,81 g (91 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 7,2 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 34,08 H 3,64 N 7,23 F 27,77 Gd 13,52 gef.: C 33,91 H 3,82 N 7,14 F 27,58 Gd 13,41
Beispiel 5
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäureamid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt
12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 200 ml Dichlormethan gelöst. Dann wird bei 0°C Ammoniakgas für ca. 2 Stunden in die Lösung geleitet. Man rührt 4 Stunden bei 0°C nach, anschließend 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 20:1) chromatographiert. Ausbeute: 27,85 g (93 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 27,66 H 1.55 N 2,69 F 61.97 gef.: 0 27,49 H 1,72 N 2.54 F 61.81
1 H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecylamin, Hydrochlorid
27 g (51 ,8 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 5a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 400 ml Ethanol/100 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 60°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein und kristallisiert den Rückstand aus wenig Ethanol/Diethylether um. Ausbeute: 26,75 g (95 % d. Th.) eines farblosen, kristallinen Feststoffes
Eleme ϊntaranalys« ber.: C 26,51 H 2,04 N 2.58 F 59,41 Cl 6,52 gef.: C 26,37 H 2.21 N 2.46 F 59,25 Cl. 6,38
3,6,9,12, 15-Pentaoxahexadecansäure-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H- 3-oxa)-perfluortridecyl)-amid
Zu 26,5 g (48,74 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 5b und 14,8 g
(146,2 mmol) Triethylamin, gelöst in 300 ml Dichlormethan tropft, gibt man bei 0°C 14,24 g (50 mmol) 3,6,9,12, 15-Pentaoxahexadecansäurechlorid und rührt 3 Stunden bei 0°C. Man gibt 300 ml 5 % ige aqu. Salzsäure zu und rührt 30 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlor- methan/Aceton: 20:1).
Ausbeute: 32,03 g (87 % d. Th.) eines farblosen Öls
Elementaranalyse: ber.: C 36,57 H 4,00 N 1,85 F 42,75 gef.: C 36,46 H 4,12 N 1.76 F 42,53
d) N-(3,6,9,12,15-Pentaoxahexadecyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H-3-oxa)-per- fluortridecyl)-amin
31 g (41 ,03 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 5c werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 25 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf
0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2 Propanol= 15:1). Ausbeute: 27,68 g (91 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 37,26 H 4.35 N 1,89 F 43,56 gef.: C 37,11 H 4,51 N 1.73 F 43,41
e) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)- 10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N- 3,6,9,12, 15-pentaoxa)-hexadecyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3- oxa)-perfluortridecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadolinium- komplex (Metallkomplex VII) 10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31 ,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 11 ,77 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 5d zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an
Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser).
Ausbeute: 18,05 g (84 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 6,2 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 37,28 H 4,47 N 6,21 F 23,87 Gd 11 ,62 gef.: C 37,11 H 4,61 N 6,03 F 23,64 Gd 11,42
Beispiel 6
a) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(12- amino-3,6,9-trioxa-dodecyl)-amid]- 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadolini- umkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1 ,35 g (31 ,76 mmol) Lithiumchlorid und 3,66 g (31 ,76 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 3,51 g (17 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt 5 Stunden bei 15 °C. Zur Abtrennung des Harnstoffes wird die Lösung filtriert. Zum Filtrat gibt man 14,66 g (60 mmol) 1 ,12-Diamino-3,6,9-trioxa-dodecan und 2,02 g (20 mmol) Triethylamin zu und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 1500 ml Diethylether/50 ml n-
Butanol und rührt 30 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Gradient aus
Tetrahydrofuran/AcetonitriiYWasser).
Ausbeute: 12,66 g (69 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers
Wassergehalt: 3,5 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 30,16 H 4,54 N 8.49 F 27,96 Gd 13,61 gef.: C 30,02 H 4,68 N 8.35 F 27,81 Gd 13,45
b) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N-
3,6,9,16-tetraoxa-13-aza-14-oxo-Cι9-C26-hepta-decafluor)-hexacosyl]-amid}- 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex (Metallkomplex IX)
11,3 g (21,64 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure, 0,85 g (20 mmol) Lithiumchlorid und 4,95 g (43 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden bei 25 °C in 150 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 6,19 g (30 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt 5 Stunden bei 15 °C. Zur Abtrennung des Harnstoffes wird die Lösung filtriert.
Zum Filtrat gibt man 12,5 g (10,82 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 6a und 3,29 g (32,47 mmol) Triethylamin zu und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 1300 ml Diethylether/100 ml Aceton und rührt 30 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Gradient aus
Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 13,01 g (90 % d. Th.) Wassergehalt: 6,7 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 36,86 H 4.30 N 7,34 F 24,17 Gd 11,77 gef.: C 36,68 H 4.41 N 7,25 F 24,03 Gd 11,55
Beispiel 7 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl)-amid]-1 ,4,7,10-tetraaza- cyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1 -(carboxymethylcarboa- moyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid und 3,66 g (31,76 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 3,51 g (17 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt 5 Stun- den bei 15 °C. Zur Abtrennung des Harnstoffes wird die Lösung filtriert. Zum
Filtrat gibt man 8,63 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 5b und 5,06 g (50 mmol) Triethylamin zu und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 1500 ml Diethylether/100 ml Aceton und rührt 30 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/ Aceto- nitril/Wasser). Ausbeute: 13,86 g (78 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 9,3 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 33,28 H 3,42 N 7,51 F 28,87 Gd 14,05 gef.: C 33,12 H 3,61 N 7,37 F 28,69 Gd 13,89
Beispiel 8
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-(2,3,4,5,6-penta- hydroxy)-hexylamid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 10,87 g (60 mmol) Glucamin und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 150 ml Dichlormethan/150 Dioxan getropft . Man rührt
3 Stunden bei 0°C, anschließend 8 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 400 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die orga- nische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Methanol= 5:1) chromatographiert.
Ausbeute: 30,71 g (78 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 31,55 H 2.94 N 2,04 F 47,13 gef.: C 31,44 H 3,09 N 1.97 F 47,01
b) N-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)-N-1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa- perfluortridecyl)-amin
30 g (43,77 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 8a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 50 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 48 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 500 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 500 ml Ethanol/100 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 15 Stunden bei 60°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 400 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 5 mal mit je 400 ml Chloroform. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/Methanol= 3:1).
Ausbeute: 19,69 g (67 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 32,20 H 3,30 N 2,09 F 48,11 gef.: C 32,05 H 3,43 N 1.97 F 47,93
c) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N- 2,3,5,6-penthydroxy)-hexyl-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-per- fluortridecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex 10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 15,88 g ( 15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 8b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an
Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser).
Ausbeute: 16,10 g (79 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 6,3 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 36,64 H 3,93 N 6,55 F 25,17 Gd 12,26 gef.: C 34,49 H 4,13 N 6,48 F 25,03 Gd 12,11
Beispiel 9
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-(2,2-dimethyl-5-hy- droxy-1 ,3-dioxepan-6-yl)-amid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 9,67 g (60 mmol) 5-Amino-2,2-dimethyl-1 ,3-dioxepan-6-ol und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft . Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 5 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml Wasser zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel:
Dichlormethan/Aceton= 15:1) chromatographiert. Ausbeute: 27,62 g (85 % d. Th.) Elementaranalyse: ber.: C 34,30 H 3,03 N 2,11 F 48,54 gef.: C 34,15 H 3.19 N 2,04 F 48,37
b) N-(1-Hydroxymethyl-2,3-dihydroxypropyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl)-amin
27 g (40,58 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 9a werden in 300 ml
Tetrahydrofuran gelöst und 26 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 20 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 300 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml Ethanol/100 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 6 Stunden bei 60°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 400 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 5 mal mit je 250 ml Chloroform. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/Methanol= 6:1).
Ausbeute: 20,09 g (81 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 31.44 H 2,97 N 2.29 F 52,83 gef.: C 31.26 H 3.11 N 2.18 F 52,67
c) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N-1 - hydroxymethyl-2,3-dihydroxypropyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3- oxa-perfluortridecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1 ,35 g
(31 ,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 9,71 g (15,88 mmol) der Titelverbin- dung aus Beispiel 9b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 13,40 g (69 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 9,1 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 34,37 H 3,79 N 6,87 F 24,41 Gd 12,86 gef.: C 34,18 H 3,95 N 6,71 F 24,25 Gd 12,70
Beispiel 10
a) Perfluoroctylsulfonsäure-N-[(2-benzyloxycarbonylamino)-ethyl]-amid
40 g (173,4 mmol) 1-Benzyloxycarbonylamino-2-aminoethan, Hydrochlorid, 87,1 g (173,4 mmol) Perfluoroctylsulfofluorid und 35,42 g (350 mmol) Triethylamin werden 10 Stunden auf 80°C erwärmt. Man kühlt auf Raumtemperatur ab und gibt direkt auf eine Kieselgelsäule zur chromatographischen Aufreinigung (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 20:1). Ausbeute: 42,22 g (36 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Eleme taranalyse: ber.: C 31,97 H 1,94 N 4,14 F 47,75 S 4.74 gef.: C 31,83 H 2.11 N 4,03 F 47,63 S 4,63
b) Perfluoroctylsulfonsäure-N-[(2-amino)-ethyl]-amid
30 g (44,36 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 10a werden in 300 ml Methanol gelöst und 5 g Palladiumkatalysator (10 % Pd/C) zugegeben, man hydriert über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert zum Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein. Ausbeute: 24.05 g (quantitativ) eines farblosen Feststoffes
tieme intaranaiyse: ber.: C 22,15 H 1.30 N 5,17 F 59,57 gef.: C 22,04 H 1.41 N 5,05 F 59,62
c) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-[(2-per- fluoroctylsulfonylamino)-ethyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1 ,35 g
(31 ,76 mmol) Lithiumchlorid und 3,66 g (31 ,76 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 3,51 g (17 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt 5 Stunden bei 15 °C. Zur Abtrennung des Harnstoffes wird die Lösung filtriert. Zum Filtrat gibt man 8,61 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 10b und 2,02 g (20 mmol) Triethylamin zu und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 1500 ml Diethylether/100 ml Aceton und rührt 30 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/ Aceto- nitril/Wasser).
Ausbeute: 15,76 g (86 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 6,5 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 30,19 H 3,06 N 8,50 F 27,99 Gd 13,63 S 2,78 gef.: C 30,03 H 3,18 N 8,41 F 27,81 Gd 13,50 S 2,61
Beispiel 11 a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-(2-benzyloxy- carboxylamino-ethyl]-amid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt
12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 13,84 g (60 mmol) 1-Benzyloxycarbonylamin-2-amino- ethan, Hydrochlorid und 12,14 g (120 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 5
Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 20:1) chromatographiert.
Ausbeute: 33,30 g (83 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 37,84 H 2,74 N 4,01 F 46,25 gef.: C 37,67 H 2,89 N 3,88 F 46,11
b) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-[(2-amino)-ethyl]- amid
30 g (42,96 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 11a werden in 500 ml Methanol gelöst und 5 g Palladiumkatalysator (10 % Pd/C) zugegeben, man hydriert über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert zum Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein. Ausbeute: 24,24 g (quantitativ) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 29,80 H 2,32 N 4,96 F 57,24 gef.: C 29,67 H 2,41 N 4,88 F 57,15 c) 1 ,4,7-Tris-(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-[3-aza- 6-oxa-4-oxo-(C9-Ci6-heptadecafluor)-hexadecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraaza- cyclododecan- Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1 -(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyclododecan-1,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31 ,76 mmol) Lithiumchlorid und 3,66 g (31 ,76 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 3,51 g (17 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt 5 Stun- den bei 15 °C. Zur Abtrennung des Harnstoffes wird die Lösung filtriert. Zum
Filtrat gibt man 8,96 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 11b und 2,02 g (20 mmol) Triethylamin zu und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 1500 ml Diethylether/100 ml Aceton und rührt 30 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/ Aceto- nitril/Wasser).
Ausbeute: 15,31 g (82 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 6,3 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 33,71 H 3,51 N 8,34 F 27,46 Gd 13,37 gef.: C 33,61 H 3,63 N 8,17 F 27,31 Gd 13,20
Beispiel 12
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluorundecansäure-N-[(2-hydroxy)-ethyl]- amid
Zu 24,25 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecan- säure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 3,66 g (60 mmol) Ethanolamin und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 20:1) chromatographiert. Ausbeute: 24,86 g (93 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 30,98 H 2,60 N 3.01 F 53,09 gef.: C 30,71 H 2,81 N 2,87 F 52,82
b) N-(2-Hydroxyethyl)-N-1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluorunde- cyl)-amin
24 g (51,59 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 12a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 12 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stun- den bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den
Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2-Propanol= 20:1).
Ausbeute: 20,95 g (90 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 31,94 H 3.13 N 3.10 F 54,73 gef.: C 31.71 H 3,31 N 3.01 F 54,58
c) 1 ,4,7-Tris-(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-[(2-hy- droxy)-ethyl-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H— 3oxa)-perfluorundecyl]- amid}-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan- Gadoliniumkomplex 10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethylj-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 8,98 g (15,88 mmol) der Titelverbin- düng aus Beispiel 12b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel
RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser).
Ausbeute: 14,01 g (83 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Elementaranalyse: ber.: C 35,03 H 3,98 N 7,91 F 23,24 Gd 14,79 gef.: C 34,85 H 4,19 N 7,75 F 23,05 Gd 14,58
Beispiel 13
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluorundecansäure-N-(3,6,9,12-tetraoxa- tridecyl)-amid
Zu 24,25 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluorundecan- säure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne ein- gedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 12,44 g (60 mmol) 3,6,9,12-Tetraoxa-tridecylamin und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan, getropft. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 15:1) chromatographiert. Ausbeute: 31 ,61 g (90 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 37,33 H 4,29 N 2,29 F 40,40 gef.: C 37,15 H 4.41 N 2,12 F 40,18 b) N-(3,6,9,12-Tetraoxatridecyi)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-per- . fluorundecyl)-amin
31 g (50,7 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 13a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 32 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Va- kuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus
300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesium- sulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2-Propanol= 20:1). Ausbeute: 28,17 g (93 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 38,20 H 4,72 N 2.34 F 41.34 gef.: C 38,05 H 4.83 N 2,40 F 41,50
c) 1 ,4,7-Tris-(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-
[(3,6,9, 12-tetraoxa)-tridecyl-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3oxa)-per- fluorundecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan- Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1 ,35 g
(31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 9,49 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 13b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dann 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyi-1,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stun- den bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig EthanolΛ/Vasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 16,13 g (84 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 37,75 H 4,67 N 6,95 F 20,43 Gd 13,01 gef.: C 37,91 H 4,81 N 6,83 F 20,60 Gd 13,15
Beispiel 14
a) 2-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl)-amino-essig- säure-t.butylester
Zu 32,0 g (58,65 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 5b und 24,89 g (180 mmol) Kaliumcarbonat in 300 ml Acetonitril tropft man bei 50 °C 6,523 g (40 mmol) Bromessigsäure-t.butylester zu und rührt 3 Stunden bei dieser Temperatur. Man gibt 300 ml Dichlormethan zu, filtriert von den ausgefalle- nen Salzen ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein. Der
Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlor- methan/2-Propanol= 20:1). Ausbeute: 28,11 g (57 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 34,80 H 3,24 N 2,25 F 51.98 gef.: C 34,98 H 3,31 N 2,20 F 52,16
b) 1 ,4,7-Tris-(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-
[(t.butyloxycarbonylmethyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3oxa)-per- fluortridecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan- Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1 ,35 g
(31 ,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 9,87 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 14a zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dann 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stun- den bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/AcetonitrilΛVasser). Ausbeute: 16,64 g (85 % d. Th.) Elementaranalyse: ber.: C 36,04 H 3,92 N 6,82 F 26,19 Gd 12,72 gef.: C 35,92 H 3,83 N 6,91 F 26,29 Gd 12,84
c) 1 ,4,7-Tris-(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-[(carb- oxymethyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3oxa)-perfluortridecyl]-amid}- 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan- Gadoliniumkomplex
10 g (8,11 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 14b werden in 50 ml
Trifluoressigsäure gelöst und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofu- ran/Acetonitril/Wasser). Nach dem Eindampfen der produkthaltigen Fraktio- nen wird der Rückstand in Wasser gelöst und mit 5 %iger aqu. Natronlauge auf pH 7,2 gestellt. Die Lösung wird filtriert und das Filtrat gefriergetrocknet. Ausbeute: 10,48 g (91 % d. Th.)
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 33,06 H 3,28 N 7,01 F 26,94 Gd 13,12 Na 1 ,92 gef.: C 33,19 H 3.40 N 7,20 F 27,14 Gd 13,25 Na 2,00
Beispiel 15
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfiuortridecansäure-N-(2-hydroxyethyl)- amid
Zu 32 g (56,61 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 4a gibt man 2,96 g (74 mmol) Natriumhydrid (aus 60 % Natriumhydrid in Parafinöl) in 300 ml Tetra- hydrofuran und rührt 3 Stunden bei Raumtemperatur unter Stickstoff. Man tropft 7,67 g (74 mmol) Bromessigsäure-t.butylester, gelöst in 20 ml Tetra- hydrofuran, zu und rührt 5 Stunden bei 50 °C. Man gibt 50 ml Methanol zu und dampft im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan(/2-PropanoI= 20:1).
Ausbeute: 23,46 g (61 % d. Th.) Elementaranalyse: ber.: C 35,36 H 3,26 N 2,06 F 47,54 gef.: C 35,52 H 3,40 N 2.17 F 47,40
b) N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl)-N-[4- t.butyloxycarbonyl-3-oxa)-butyl]-amin
35,0 g (51 ,52 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 15a werden in 300 ml
Tetrahydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8
Stunden bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rück- stand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2-Propa- nol= 20:1). Ausbeute: 31,88 g (93 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 36,10 H 3,64 N 2.11 F 48,54 gef.: C 35,90 H 3,75 N 2.20 F 48,71
c) 1 ,4,7-Tris-(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-[(4- t.butyloxycarbonyl-3-oxa)-butyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3oxa)- perfluortridecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1 ,35 g (31 ,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 10,57 g ( 15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 15b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dann
7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin zu. Es wird
12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine
Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei
Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an
Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus
Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 16,63 g (82 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 36,68 H 4,10 N 6,58 F 25,29 Gd 12,31 gef.: C 36,81 H 4,20 N 6,41 F 25,40 Gd 12,19
1 ,4,7-Tris-(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N-(4- carboxy-3-oxa)-butyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3oxa)-perfluortri- decyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
12 g (9,40 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 15c werden in 50 ml Trif- luoressigsäure gelöst und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofu- ran/Acetonitril/Wasser). Nach dem Eindampfen der produkthaltigen Frak- tionen wird der Rückstand in Wasser gelöst und mit 5 %iger aqu. Natronlauge auf pH 7,2 gestellt. Die Lösung wird filtriert und das Filtrat gefriergetrocknet.
Ausbeute: 11,41 g (92 % d. Th.) Wassergehalt: 5,8 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 33,82 H 3,49 N 6,76 F 25,98 Gd 12,65 Na 1,85 gef.: C 33,95 H 3,60 N 6,88 F 26,15 Gd 12,49 Na 1,93 Beispiel 16
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-(2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl)-amid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 32,62 g (60 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 5b und
6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel
(Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 15:1) chromatographiert. Ausbeute: 52,87 g (91 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 28,50 H 1 ,49 N 1,38 F 63,87 gef.: C 28,65 H 1.61 N 1 ,50 F 64,01
b) N-Bis-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluortridecyl)-amin
52 g (51 ,42 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 16a werden in 500 ml Tetrahydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetrahydro- furan) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 400 ml
Ethanol/70 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 400 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 400 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an
Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2-Propanol= 20:1). Ausbeute: 47,18 g (92 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes Elementaranalyse: ber.: C 28,90 H 1.72 N 1,40 F 64,77 gef.: C 30,03 H 1.81 N 1.55 F 65,00
c) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-bis-(1 H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl)-amid]-1 ,4,7,10-tetraaza- cyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyclododecan-1,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 15,84 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 16b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dann
7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an
Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/AcetonitrilΛ/Vasser). Ausbeute: 20,95 g (82 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 32,10 H 2.82 N 5.22 F 40,14 Gd 9,77 gef.: C 29,87 H 2,91 N 5.09 F 40,28 Gd 9,98
Beispiel 17
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-(5-hydroxy-3-oxa- pentyl)-amid
Zu 32 g (52,52 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 3a gibt man 2,80 g (70 mmol) Natriumhydrid (aus 60 % Natriumhydrid in Parafinöl) in 300 ml Tetra- hydrofuran und rührt 3 Stunden bei Raumtemperatur unter Stickstoff. Man tropft 9,68 g (70 mmol) Bromessigsäure-t.butylester gelöst in 20 ml Tetra- hydrofuran zu und rührt 5 Stunden bei 50 °C. Man gibt 50 ml Methanol zu und dampft im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan(/2-Propanol= 20:1). Ausbeute: 19,31 g (59 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 32,76 H 2,91 N 2.25 F 51,82 gef.: C 32,98 H 2,99 N 2,36 F 51,98
b) N-(3,6-Dioxa-heptyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfIuortride- cyl)-amin
32 g (51 ,34 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 17a werden in 300 ml Tetra- hydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetrahydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml Et- hanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an
Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2-Propanol= 20:1). Ausbeute: 28,47 g (91 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 33,51 H 3.31 N 2,30 F 53,01 gef.: C 33,63 H 3,41 N 2,21 F 52,87
c) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(3,6- dioxa)-heptyl-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl)- amid]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex 10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyclododecan-1,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 9,68 g ( 15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 17b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dann
7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an
Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 16,09 g (83 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 35,41 H 3,96 N 6,88 F 26,45 Gd 12,88 gef.: C 35,57 H 4.11 N 6.72 F 26,58 Gd 12,97
Beispiel 18
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-(hexyl)-amid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt
12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 6,07 g (60 mmol) nHexylamin und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5
%ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 20:1) chromatographiert. Ausbeute: 30,95 g (89 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 35,72 H 3,33 N 2.31 F 53,35 gef.: C 35,60 H 3,45 N 2.43 F 53,63
b) N-(Hexyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl)-amin
31 g (51,21 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 18a werden in 300 ml Tetra- hydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetrahydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abge- kühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur
Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2-Propanol= 20:1). Ausbeute: 28,16 g (93 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 36,56 H 3,75 N 2.37 F 54,62 gef.: C 36,40 H 3.82 N 2,27 F 54,81
c) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N-(hexyl)- N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl]-amid}-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31 ,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 10,98 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 18b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dann 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei
Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 16,29 g (84 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 36,94 H 4,19 N 6.99 F 26,85 Gd 13,07 gef.: C 37,18 H 4.31 N 7,18 F 26,67 Gd 13,19
Beispiel 19
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-[(10- t.butyloxycarbonyl)-decyl]-amid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 15,45 g (60 mmol) 11-Amino-undecansäure-t.butylester und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan, getropft.
Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 20:1) chromatographiert.
Ausbeute: 42,04 g (92 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 42,58 H 4.76 N 1,84 F 42,41 gef.: C 42,74 H 4,90 N 1.73 F 42,61
b) N-(10-t.Butyloxycarbonyl-decyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa- perfluortridecyl)-amin g (51,21 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 19a werden in 300 ml Tetra- hydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetrahydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 400 ml
Ethanol/70 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 350 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 400 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an
Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2-Propanol= 20:1). Ausbeute: 34,84 g (91 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 43,38 H 5,12 N 1,87 F 43,20 gef.: C 43,22 H 5,23 N 1,96 F 43,33
1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N-(10- t.butyloxycarbonyl)-decyl-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluor- tridecyl]-amid}-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1,35 g (31 ,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 11,87 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 19b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dann 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1 -ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei
Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 17,92 g (83 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 40,65 H 4.89 N 6,18 F 23,76 Gd 11,57 gef.: C 40,81 H 4.99 N 6,32 F 23,94 Gd 11,73
d) 1 ,4,7-Tris-(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N-(10- carboxy)-decyl-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3oxa)-perfluortridecyl]- amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex, Natriumsalz
12 g (8,83 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 19c werden in 50 ml Trif- luoressigsäure gelöst und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofu- ran/Acetonitril/Wasser). Nach dem Eindampfen der produkthaltigen Fraktionen wird der Rückstand in Wasser gelöst und mit 5 %iger aqu. Natron- lauge auf pH 7,2 gestellt. Die Lösung wird filtriert und das Filtrat gefriergetrocknet.
Ausbeute: 12,48 g (92 % d. Th.) Wassergehalt: 6,2 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 38,07 H 4.34 N 6,34 F 24,37 Gd 11,87 Na 1,73 gef.: C 37,89 H 4,44 N 6,22 F 24,51 Gd 12,01 Na 1,80
Beispiel 20
a) 15-Benzyl-3,6,9,12,15-Pentaoxa-hexadecylsäure-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3oxa)-perfluortridecyl)-amid
Zu 19,67 g (57,45 mmol) 15-Benzyl-3,6,9,12,15-Pentaoxahexadecylsäure in
250 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 32,62 g (60 mmol) 1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa- perfluor-tridecylamin, Hydrochlorid und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 20:1) chromatographiert. Ausbeute: 44,91 g (94 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 41.89 H 4.12 N 1.68 F 38,84 gef.: C 42,02 H 4,25 N 1.83 F 39,07
b) N-15-Benzyl-3,6,9,12,15-pentaoxa-hexadecyl)-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3oxa)-perfluortridecyl)-amin
43 g (51 ,72 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 20a)werden in 400 ml
Tetrahydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetra- hydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 400 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 350 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 400 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2-Propanol=
20:1). Ausbeute: 39,32 g (93 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 42,60 H 4.12 N 1.68 F 38,84 gef.: C 42,45 H 4,23 N 1 ,57 F 38,99
c) 1 ,4,7-Tris-(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N-(15- benzyl-3,6,9,12,15-pentaoxa)-hexadecyl-N-(1H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)- tridecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1-(carboxymethylcarbo- amoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan- 1 ,4,7-triessigsäure und 1 ,35 g
(31 ,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 12,98 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 20b) zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dann 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine
Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser).
Ausbeute: 18,84 g (83 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 40,34 H 4,51 N 5,88 F 22,60 Gd 11,00 gef.: C 40,50 H 4,62 N 5.76 F 22,73 Gd 11,16
d) 1 ,4,7-Tris-(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N-(14- hydroxy -3,6,9, 12-tetraoxa)-tetradecyl-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3- oxa)- perfluortridecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadolini- umkomplex
12 g (8,40 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 20c werden in 150 ml Methanol gelöst und 1 ,0 g Palladiumkatalysator (10 % Pd/C) zugegeben, man hydriert über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert zum Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein.
Ausbeute: 10,13 g (95 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 38,80 H 4,61 N 1,10 F 25,45 Gd 12,39 gef.: C 38,87 H 4,73 N l,20 F 25,58 Gd 12,50 Beispiel 21 a) 2-N-Trifluoracetyl -6-N- benzyloxycarbonyl-L-lysin
100,0 g (356,7mmol) 6-N-Benzyloxycarbonyl-L-lysin werden in einer Mischung aus 1000 ml Trifluoressigsäureethylester und 500 ml Ethanol gelöst und 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft zur Trockne ein und kristallisiert den Rückstand aus Diisopropylether.
Ausbeute: 128,9 g (96 % der Theorie ) eines farblosen kristallienen Pulvers.
Schmelzpunkt: 98,5 °C .
Elementaranalyse : ber.: C 51,07 H 5.09 N 7,44 F 15,14 gef.: C 51,25 H 5,18 N 7,58 F 15,03
b) 2-N-Trifluoracetyl -6-N- benzyloxycarbonyl-L-lysin [1-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu 125,0 g (332,0mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21a) und 188,7 g (332,0 mmol) 1- Perfluoroctylsulfonylpiperazin (hergestellt nach DE 19603033 ) in 750 ml Tetrahydrofuran ,gibt man bei 0°C 164,2 g (0,664 mmol) EEDQ ( 2- Ethoxy-1 ,2-dihydrochinolin -1 -carbonsäureethylester) zu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel ( Laufmittel: Dichlormethan / Methanol = 20:1 ) . Ausbeute : 286,0 g (93% der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Schmelzpunkt: 92 °C . Elementaranalyse: ber.: C 36,30 H 2,83 N 6,05 F 41.01 S 3,46 gef.: C 36,18 H 2,94 N 5,98 F 40,87 S 3,40
c) 6-N- Benzyloxycarbonyl-L-lysin-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In eine Lösung aus 280,0 g (302,2mol ) der Titelverbindung aus Beispiel 21b) in 2000ml Ethanol, leitet man bei 0°C für eine Stunde Ammoniak-Gas ein. Man rührt anschließend 4 Stunden bei 0°C. Es wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand aus Wasser ausgerührt . Man filtriert den Feststoff ab und trocknet im Vakuum bei 50 °C .
Ausbeute: 243,5 g (97 % der Theorie ) eines amorphen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 37,60 H 3,28 N 6,75 F 38,89 S 3,86 gef.: C 37,55 H 3,33 N 6,68 F 38,78 S 3,81
d) 6-N-Benzyloxycarbonyl - 2-N-[1 -0-α-D -carbonylmethyl-(2,3,4,6-tetra-0- benzyl-mannopyranose]-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu einer Lösung aus 100,0 g (120,4 mol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c), 72,1 g (120,4 mol) 1-0-α-D-Carboxymethyl -2,3,4,6-tetra-0-benzyl- mannopyranose und 13,86 g (120,4 mol) N-Hydroxysuccinimid, gelöst in 500 ml Dimethylformamid , gibt man bei 0°C 41,27g (200,0 mmol ) N,N -
Dicyclohexylcarbodiimid hinzu. Man rührt 3 Stunden bei 0°C und anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel . (Laufmittel : Dichlormethan/Ethanol = 20 :1) .
Ausbeute: 136,1 g (87 % der Theorie ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 57,32 H 4,89 N 4.31 F 24,86 S 2.47 gef.: C 57,38 H 5,07 N 4,22 F 24,78 S 2,39
e) 2-N-[1 -0-α-D-Carbonylmethyl-mannopyranose]-L-lysin-1 -[(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
130,0 g (100,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21 d) werden in 2000 ml Ethanol gelöst und es werden 10,0 g Palladium Katalysator (10% Pd / C ) hinzu gegeben. Man hydriert 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein . Ausbeute : 91,7 g (quantitativ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 34,07 H 3,63 N 6,11 S 3,50 F 35,24 gef.: C 33,91 H 3,72 N 6,04 S 3,40 F 35,31
f) 6-N-[1 ,4,7-Tris (carboxylatomethyl) ]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-10-N- (pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl) ]-2-N-[1-0-α-D-carbonylmethyl- mannopyranose]-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid,Gd- Komplex (Metallkomplex XV)
50,0 g (54,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21 e) , 6,28 g (54,55 mmol) N-Hydroxysuccinimid , 4,62 g (109,0 mol ) Lithiumchlorid und 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-Tris (carboxylatomethyl )-10- (carboxy - 3-aza-4-oxo-5- methyl-pent-5-yl )-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gd-Komplex, werden unter leichter Erwärmung in 400 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10°C gibt man 16,88 g (81 ,8 mol) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt (RP-18 Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril) .
Ausbeute: 75,9 g (91 ,0 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt : 8,6 % . Elementaranalyse (auf wasserfreie Substanz berechnet): ber.: C 35,34 H 4.09 N 8,24 S 2.10 F 21,12 Gd 10,28 gef.: C 35,28 H 4.15 N 8,19 S 2.15 F 21.03 Gd 10,14
Beispiel 22
a) 6-N-[1 ,4,7-Tris (carboxylatomethyl]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-10-N- (pentanoyl -3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl) ]-2-N-[1 -O-α-D-carbonylmethyl- mannopyranose]-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd- Komplex
50,0 g (54,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21 e) , 6,28g (54,55mmol) N-Hydroxysuccinimid , 4,62g (109,0 mol ) Lithiumchlorid und 34,35g (54,55 mol) 1,4,7-Tris (carboxylatomethyl )-10- (carboxy - 3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5-yl )- 1, 4,7,10-tetraazacyclododecan,Gd-Komplex , werden unter leichter Erwärmung in 400 ml Dimethylsulfoxid gelöst . Bei 10 °C gibt man 16,88g (81,8 mmol) N,N- Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rürt 10 Minuten . Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt (RP-18 Laufmittel: Gradient aus Wasser /Ethanol / Acetonitril. Ausbeute: 76,0 g (92,0 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs . Wassergehalt: 6,88 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 34,90 H 3,93 N 8,32 S 2,12 F 21,33 Gd 10,38 gef.: C 34,81 H 4,02 N 8,27 S 2.09 F 21.22 Gd 10,19
Beispiel 23
a) 2-[4-3-Oxapropionsäureethylester ]-phenylessigsäuremethylester
Zu 200,0 g (1204,0 mmol) 4-Hydroxyphenylessigsäuremethylester , 212,0 g (2000,0 mmol ) Natriumcarbonat in 2000 ml Aceton gibt man 233,8 g (1400,0 mmol ) 2-Bromessigsäureethylester und kocht 5 Stunden unter Rückfluß. Man filtriert den Feststoff ab und dampft im Vakuum zur Trockene ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert. (Laufmittel : n-Hexan / Essigsäureethyester = 15:1).
Ausbeute: 288,5 g (95,0 % der Theorie) eines farblosen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 61,90 H 6,39 gef.: C 61.75 H 6,51
b) 2-[4-3-Oxapropionsäureethylester )]-phenyl-2-bromessigsäuremethylester
Zu 285,0 g (1130,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 23a) , gelöst in 2000 ml Tetrachlorkohlenstoff, gibt man 201,0 g (1130,0 mmol) N-Bromsuccinimid und 100,0 mg Dibenzoylperoxid und kocht acht Stunden unter Rückfluß. Man kühlt im Eisbad , filtriert das ausgefallene Succinimid ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Der Rückstand wird an Kieselgel gereinigt (Laufmittel: n-Hexan / Aceton = 15 : 1).
Ausbeute: 359,2 g (96,0 % der Theorie) eines farblosen zähen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 47,28 H 4.57 Br 24,16 gef.: C 47,19 H 4,71 Br 24,05
c) 2-[4-(3-Oxapropionsäureethylester)]-phenyl-2-[1 -(1 ,4,7, 10- tetraazacyclododecan -1 -yl]-essigsäuremethylester
Zu 603,0 g (3500,0 mmol) 1,4,7,10- Tetraazacyclododecan, in 6000 ml Chloroform gibt man 350,0 g (1057,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 23b) und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man extrahiert 3 mal mit jeweils 3000 ml Wasser, trocknet die organische Phase über Magnesiumsulfat und dampft im Vakuum zur Trockene ein. Der Rückstand wird ohne weitere Aufreinigung in die nächste Reaktion (Beispiel 23d) eingesetzt . Ausbeute : 448,0 g (quantitativ) eines zähen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 59,70 H 8.11 N 13,26 gef.: C 59,58 H 8,20 N 13,18
d) 2-[4-(3-Oxapropionsäure)]-phenyl-2-[1 ,4,7-tris(carboxmethyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan-10-yl]-essigsäure 445,0 g (1053,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 23c) und 496,0 g (5270,0 mmol) Chloressigsäure werden in 4000 ml Wasser gelöst . Man stellt mit 30 %iger wässriger Natronlauge auf einen pH-Wert von 10 und rührt 8 Stunden bei 70°C. Anschließend stellt man den pH-Wert der Reaktionslösung durch Versetzen mit 30 %iger wässriger Natronlauge auf 13 ein und kocht 30 Minuten unter Rückfluß. Die Lösung wird im Eisbad gekühlt und durch Zugabe von konz. Salzsäure auf einen pH-Wert von 1 gestellt. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein. Der Rückstand wird in 4000 ml Methanol aufgenommen und eine Stunde bei Raumtemperatur ausgerührt. Man filtriert vom ausgefallenen Kochsalz ab, dampft das Filtrat zur Trockene ein und reinigt den Rückstand an RP-18 C (Laufmittel : Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril). Ausbeute : 403,0 g (69,0 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 10,2 % . Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 51,98 H 6,18 N 10,10 gef.: C 51,80 H 6,31 N 10,01
e) 2-[4-(3-Oxapropionsäure)]-phenyl- 2-[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan-10-yl]-essigsäure, Gd-Komplex
Zu 400 g (721 ,3 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 23d) in 2000 ml Wasser gibt man 130,73 g (360,65 mmol) Gadoliniumoxid und rührt 5 Stunden bei 80°C. Die Lösung wird filtriert und das Filtrat gefriergetrocknet. Ausbeute: 511 g (quantitativ) eines amorphen Feststoffs. Wassergehalt : 11 ,0 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 40,67 H 4.41 N 7,98 Gd 22,19 gef.: C 40,51 H 4.52 N 8,03 Gd 22,05
f) 6-N-[2-[4-(3-Oxapropionyl )-phenyl]-2-[1 ,4,7-tris (carboxylatomethyl )- 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan -10-yl]-essigsäure)]-2-N-(1 -O-α-D- carbonylmethyl-mannopyranose)-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl )-piperazin]- amid, Gd-Komplex, Natiumsalz
50,0 g (54,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21 e) , 6,28 g (54,55 mmol ) N-Hydroxysuccinimid , 4,62 g (109,0 mmol ) Lithiumchlorid und 38,66 g (54,55 mmol). der Titelverbindung aus Beispiel 23e) werden unter leichter Erwärmung in 400 ml Dimethylsulfoxid gelöst . Bei 10 °C gibt man 16,88 g (81 ,8 mmol) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt (RP-18; Laufmittel: Gradient aus Wasser/Ethanol/Acetonitril). Man löst das erhaltene Produkt in wenig Wasser und stellt mit wässriger Natronlauge den pH-Wert der Lösung auf 7,4 ein. Anschließend wird die Produktlösung gefriertrocknet. Ausbeute: 79,1 g (89% der Theorie) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 10,3 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 36,86 H 3.77 N 6.88 S 1.97 F 19,82 Gd 9,65 gef.: C 36,75 H 3,8 N 6,80 S 2,03 F 19,75 Gd 9,57
Beispiel 24
a) 6-N-[1 ,4,7-Tris(t butyloxycarbonylmethyl)-10-carboxymethyl-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan-10-carbonylmethyl]-2-N-(1 -0-α-D-carbonylmethyl- mannopyranose)-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
15,0 g (26,19 mmol) 1,4,7-Tris(t-butyloxycarbonylmethyl)-10-carboxymethyl- 1,4,7,10-tetraazacyclododecan , 24,0 g (26,19 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21 e) und 3,01 g (26,19 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden in 150 ml Dimethylformaid gelöst und bei 0°C 8,25 g (40,0 mmol ) N,N- Dicyclohexylcarbodiimid zugegeben. Man rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Der ausgefallene Harnstoff wird abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert.
(Laufmittel: Dichlormethan / Methanol = 20:1).
Ausbeute: 35,45 g (92,0 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 44,08 H 5.69 N 7,62 F 21.95 S 2,18 gef.: C 44,01 H 5,81 N 7.53 F 21.87 S 2,03
b) 6-N-[1 ,4,7-Tris (carboxylatomethyl]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-10- carbonylmethyl-] -2-N -[1-0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose]-L-lysin-[1-
(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex
30,0 g (20,39 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 24a) werden in 50 ml Chloroform gelöst und 300 ml Trifluoressigsäure zugegeben. Man rührt 10 Minuten bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und der Rückstand in 300 ml Wasser gelöst. Man gibt 3,69 g (10,19 mmol) Gadoliniumoxid zu und rührt 5 Stunden bei 80 °C. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und an Kieselgel gereinigt ( RP-18; Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril) . Ausbeute: 11 ,0 g (37,0 % der Theorie) eines farblosen und amorphen Feststoffs.
Wassergehalt : 11 ,3 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 34,62 H 3,87 N 7,69 F 22,16 S 2,20 Gd 10,97 gef.: C 34,57 H 3,95 N 7.60 F 22,05 S 2,13 Gd 10,90
Beispiel 25
a) 6-N-[3,6,9-Tris (carboxymethyl) -3,6,9-triazaundecandisäure-1 -carboxy-11 ■ oyl]-2-N-[1-0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose]-L-lysin-[1-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid Zu 24,0 g (26.19 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21 e), gelöst in 100 ml Dimethylformaid / 30ml Pyridin, gibt man 12,10 g (30,0 mmol) 3-N-(2,6- Dioxomorpholinoethyl)-6-N-(ethoxycarbonylmethyl)-3,6-diazaoctandisäure und rührt 5 Stunden bei 50 °C. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein. Der Rückstand wird in 200 ml Wasser gelöst und der pH-Wert der resultierenden Lösung durch Zugabe von 20% iger wässriger Natronlauge auf 13 gestellt. Man rührt 8 Stunden bei 22 °C und einem pH-Wert von 13. Die Lösung wird durch Zugabe von konz.Salzsäure auf einen pH-Wert von 7,2 gebracht und anschließend im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel RP-18 chromatographiert ( Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril).
Ausbeute : 17,26 g (51,0 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 9,3 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 37,19 H 4,21 N 7,59 F 25,00 S 2,48 gef.: C 37,10 H 4,30 N 7,48 F 25,07 S 2,42
b) 6-N-[3,6,9-Tris (carboxylatomethyl) -3,6,9-triazaundecandisäure-1 -carboxy- 11 -oyl]-2-N-[1 -0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose]-L-lysin-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex, Natriumsalz
Zu 10,0 g (7,74 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 25a) in 100 ml Wasser gibt man 1 ,40 g (3,87 mmol) Gadoliniumoxid und rührt 2 Stunden bei 70 °C. Die Lösung wird filtriert. Das Filtrat mit 2N Natronlauge auf einen pH-Wert von 7,4 gestellt und gefriergetrocknet.
Ausbeute: 11 ,36 g (quantitativ) eines amorphen Feststoffs.
Wassergehalt : 10,5 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 32,72 H 3,43 N 6,68 S 2,18 Gd 10,71 Na 1,57 F 22,00 gef.: C 32,65 H 3,51 N 6,71 S 2,08 Gd 10,61 Na 1,68 F 21.87
Beispiel 26 a) 6-N-Benzyloxycarbonyl-2-N-[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan]-10-(pentanoyl-3aza 4-oxo-5-methyl-5yl)]-L-lysin-[1 -( 4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex
50,0 g (60,20 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c), 6,93 g (60,20 mmol) N-Hydroxysuccinimid, 5,09 g ( 120,0 mmol ) Lithiumchlorid und 37,91 g (60,20 mmol ) 1 ,4,7-Tris[ carboxylatomethyl )-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan- 10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl), Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 400 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10 °C gibt man 20,63 g (100,0 mmol) N,N- Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur . Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18; Laufmittel: Gradient aus Wasser/ Ethanol /Acetonitril ).
Ausbeute: 75,53 g (87,0 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt : 10,1 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 37,48 H 3,84 N 8,74 S 2.22 F 22,39 Gd 10,90 gef.: C 37,39 H 4,02 N 8.70 S 2.16 F 22,29 Gd 10,75
b) 2-N-[1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-Gd- Komplex, 10-(pentanoyl-3-aza-^-oxo-5-methyl-5-y l)-L-lysin-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
70,0 g (48,53 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 21 d) werden in 500 ml Wasser / 100 ml Ethanol gelöst , mit 5,0 g Palladium Katalysator ( 10% Pd / C ) versetzt und solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm) hydriert, bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Anschließend saugt man vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (zweimal mit jeweils 75 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses und farbloses Öl erhalten. Ausbeute: 63,5 g (quantitativ ). Wassergehalt: 9,8 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 37,48 H 3,84 N 8,74 S 2.22 F 22,39 Gd 10,90 gef.: C 37,39 H 4,03 N 8,65 S 2.20 F 22,31 Gd 10,78
c) 6-N-(1-0-α-D-Carbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose)-2-N- [1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gd-Komplex-
10-(pentanoyl-3-aza-4oxo-5-methyl-5yl)]-L-lysin-[ 1 -(4-perfluoroctylsulfonyl )- piperazin]-amid
50,0 g (38,22 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 26b) , 4,40 g (38,22 mmol ) N-Hydroxysuccinimid, 3,39 g (80,0 mmol) Lithiumchlorid und 22,88 g (38,22 mmol) 1 -0-α-D-Carboxymethyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose werden unter leichter Erwärmung ( 30 bis 40 °C ) in 400 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10°C gibt man 10,32 g (50,0 mmol) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man giesst die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18 , Laufmittel: Gradient aus Wasser /Ethanol / Acetonitril).
Ausbeute: 64,25 g (89,0 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt: 10,9 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 46,42 H 4,54 N 6,67 S 1.70 F 17,10 Gd 8,33 gef.: 046,36 H 4,71 N 6,60 S 1.61 F 17,19 Gd 8,21
d) 6-N-(1-0-α-D-Carbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose)-2-N- [1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,8,10-tetraazacyclododecan-10-(pentanoyl- 3-aza-4oxo-5-methyl-5yl)]-L-lysin-[ 1 -(4-perfluoroctylsulfonyl )-piperazin]- amid, Gd-Komplex
60,0 g (31 ,77 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 26c) werden in 500 ml Ethanol gelöst und mit 6,0 g Palladium Katalysator (10% Pd/C ) versetzt. Es wird solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm) hydriert, bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Anschließend saugt man vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (zweimal mit jeweils 150 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein.
Ausbeute: 48,55 g ( quantitativ) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt : 3,9 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 35,37 H 4.02 N 8,25 S 2,10 F 21,13 Gd 10,29 gef.: C 35,28 H 4.13 N 8.17 S 2,03 F 21,05 Gd 10,20
Beispiel 27
a) 1 ,7-Bis-(benzyloxycarbonyl)- 4-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl]-amino] - acetyl]-1 ,4,7, 10 tetraazacyclododecan)
Zu 50,0 g (113,5 mmol ) 1,7-Bis(benzyloxycarbonyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan und 66,42 g ( 113,5 mmol ) 2-(N-Ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl)-aminoessigsäure (hergestellt nach DE 19603033 ) in 300 ml Tetrahydrofuran, gibt man bei 0°C 49,46 g (200,0 mmol ) EEDQ (2-Ethoxy- 1 ,2-dihydrochinolin-1 -carbonsäureethylester) hinzu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel : Dichlormethan /Methanol =20:1). Ausbeute: 65,2 g (57 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Elementaranalyse: ber.: C 42,91 H 3,80 N 6,95 F 32,05 S 3,18 gef.: C 42,85 H 3,90 N 6,87 F 31,98 S 3,15
b) 1 ,7-Bis-( benzyloxy )-4-[2-(N-ethyl-N-perf luoroctylsulfonyl)-amino]- acetyl-10- [1 -O-α-D - carbonylmethyl - 2,3,4,6-tetra-O-benzyl -mannopyranose ] -
1,4,7,10- tetraazacyclododecan Zu 60,0 g (59,53 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 27a) und 35,64 g (59,53 mmol) 1-0-α-D- Carboxymethyl -2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranose, hergestellt nach..DE 19728954., in 300ml Tetrahydrofuran, gibt man bei 0°C 24,73 g (100 mmol EEDQ (2-Ethoxy-1,2-dihydrochinolin -1- carbonsäureethylester) hinzu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel : Dichlormethan /Methanol = 20:1 ) . Ausbeute: 76,6 g (81 ,0 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Elementaranalyse: ber.: C 54,44 H 4,70 N 4,41 F 20,33 S 2.02 gef.: C 54,37 H 4,81 N 4,35 F 20,27 S 1.96
c) 1 -[2-(N-Ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl )-amino]-acetyl-7-(1 -O-α-D- carbonylmethyl- mannopyranose )-1 ,4,7, 10- tetraazacyclododecan
70 g (44,07 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 27b werden in 800 ml Ethanol gelöst und 8 g Palladium Katalysator ( 10% Pd/C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein .
Ausbeute: 42,3 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 35,04 H 3,99 N 7,30 F 33,65 S 3,34 gef.: C 35,15 H 4,13 N 7,13 F 33,48 S 3,26
d) 1 ,7-Bis-[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7, 10 - tetraazacyclododecan-Gd- Komplex-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl)-4-[2-(N-ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-10-( 1-O-α-D - carbonylmethyl- mannopyranose )- 1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan
20 g (20,84 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 27c), 5,09g (120 mmol) Lithiumchlorid und 37,78 g (60 mmol ) 1 ,4,7-Tris ( carboxylatomethyl ) - 10- pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl )- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan ,Gd- Komplex werden unter leichter Erwärmung in 400 ml Dimethylsulfoxid gelöst.
Bei 10°C gibt man 29,67 g (120 mmol) EEDQ hinzu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18 , Laufmittel: Gradient aus
Wasser / Ethanol / Acetonitril ).
Ausbeute : 13,2 g (29,0 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt: 11 ,8% .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 36,31 H 4,34 N 9,62 S 1,47 F 14,79 Gd 14,41 gef.: C 36,24 H 4,27 N 9,58 S 1,51 F 14,85 Gd 14,25
Beispiel 28
a) 1 ,7-Bis(benzyloxycarbonyl)-4-[2-(N-Ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]- acetyl-10-[pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl-[1,4,7-tris(carboxylatomethyl) -Gd-Komplex. 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-yl]-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan.
50,0 g (49,61 mmol )der Titelverbindung aus Beispiel 27a) , 5,71 g ( 49,61 mmol) N-Hydroxysuccinimid, 4,24 g (100 mmol ) Lithiumchlorid und 31,24 g ( 49,61 mmol) und 1,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-(pentanoyl-3-aza-oxo-5- methyl-5-yl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 350 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10°C gibt man 15,47 g (75 mmol ) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 2000 ml Aceton und rührt 10 Minuten .Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel : Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ).
Ausbeute : 65,1 g (81,0 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt : 7,9 % . Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 40,79 H 4,11 N 8,65 S 1,98 F 19,94 Gd 9,72 gef.: C 40,71 H 4,20 N 8,58 S 2.03 F 19,87 Gd 9,68
b) 1-[2-(N-Ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]- acetyl - 7{(-pentanoyl-3-aza-4- oxo-5-methyl-5yl)-10 -[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7, 10-tetra- azacyclododecan, Gd-Komplex]}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan.
60,0 g ( 37,05 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 28a) werden in 600 ml
Ethanol gelöst und 6,0 g Palladium Katalysator (10% Pd / C) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das
Filtrat im Vakuum zur Trockene ein.
Ausbeute: 50,06 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt : 3,9 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 34,67 H 4.03 N 10,37 S 2.37 F 23,90 Gd 11,64 gef.: C 34,58 H 4.15 N 10,28 S 2.30 F 23,84 Gd 11,57
c) 1 -[2-(N-Ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino] -acetyl-4, 10 - bis [1 -O-α-D - carbonylmethyl- 2,3,4,6-tetra - O - benzyl - mannopyranose] -7- {(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)-[1 ,4,7-tris ( carboxylatomethyl ) -
1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan - 10-yl] -Gd-Komplex} -1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan
40,0 g (29,60 m mol ) der Titelverbindung aus Beispiel 28b) , 2,54 g (60,0 mmol ) Lithiumchlorid und 44,9 g ( 75,0 mmol ) 1-O-α-D -Carboxymethyl - 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranose werden unter leichter Erwärmung in 300 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10°C gibt man 24,73 g ( 100,0 mmol ) EEDQ hinzu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel : Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ). Ausbeute: 31 ,98 g (43,0 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt : 3,5 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 53,06 H 5,05 N 5,57 S 1.28 F 12,85 Gd 6,26 gef.: C 52,95 H 5.19 N 5,48 S 1,23 F 12,77 Gd 6,14
d) 1 -[2-(N-Ethyl-N-perf luoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-4, 10 - bis [1 -O-α-D - carbonylmethyl- 2,3,4,6-tetra - O - benzyl - mannopyranose] -7- {(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)-[1 ,4,7-tris ( carboxylatomethyl ) - 1,4,7,10- tetraazacyclododecan - 10-yl]- Gd-Komplex} -1,4,7,10- tetraazacyclododecan
30,0 g ( 11 ,94 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 28c) werden in 300 ml Ethanol / 30 ml Wasser gelöst und 4,0 g Palladium Katalysator ( 10% Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur, filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 21 ,39 g ( quantitativ ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 3,4 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: 036,87 H 4.39 N 7.82 S 1.79 F 18,03 Gd 8,78 gef.: C 36,80 H 4,50 N 7,85 S 1.68 F 17,91 Gd 8,70
Beispiel 29
a) 6-N-[3,6-Bis(carboxymethyl)-octan-1,8- dicarbonsäure- 1-earboxy-8-oyl]-2- N-(1 -O-α-D- carboxymethyl - mannopyranose )-lysin - [1 -(4perfluoroctylsulfonyl ) -piperazin ] - amid Zu 27,5 g (30,0 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 21 e) , gelöst in 300 ml Dimethylformamid / 100ml Pyridin.gibt man 25,62 g (100,0 mmol ) Ethylendiamin-N, N, N', N' - tetraessigsäuredianhydrid und rührt 5 Stunden bei 50°C. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein. Der Rückstand wird in 300 ml Wasser gelöst , durch Zugabe von 20% iger wässriger Natronlauge auf einen pH Wert von 10 gestellt und anschließend wird die basische Produktlösung durch Zugabe von. konz. Salzsäure auf einen pH Wert von 3 gebracht und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel RP-18 chromatographiert ( Laufmittel : Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ). Ausbeute : 18,22 g (51 ,0 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt : 7,9 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 36,31 H 3,98 N 7,06 F 27,12 S 2,69 gef.: C 36,23 H 4,07 N 6,98 F 27,05 S 2.62
b) 6-N-[3,6-Bis (carboxylatomethyl )-octan-1 ,8-dicarbonsäure - 1 - carboxylato-8-oyl-] - 2-N-(1 -O-α-D- carboxymethyl - mannopyranose ) -L-lysin - [1-(4-perfluoroctylsulfonyl ) -piperazin ] - amid , Mn-Komplex, Natriumsalz
10 g ( 8,397 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 29a) werden in 200 ml Wasser gelöst. Man gibt 965 mg ( 8,397 mmol ) Mangan ( II ) carbonat zu und rührt 3 Stunden auf 60°C. Die Lösung wird mit 5% iger wässriger Natronlauge auf einen pH Wert von 7,4 gestellt, filtriert und anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute : 10,52 g ( 99,0 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt : 7,8 % .
Elementaranalyse ( berechnet auf wasserfreie Substanz ): ber.: C 34,16 H 3,50 N 6,64 S 2,53 F 25,52 Mn 4,34 Na 1,82 gef.: C 34,06 H 3,61 N 6,58 S 2,47 F 25,47 Mn 4,30 Na 1,97
Beispiel 30
a) 1 ,2,3,4,6-Penta-0-acetyl-α,ß-D-mannopyranose Auf analoge Weise, wie in der Literatur beschrieben [M.L. Wolfrom und A.Thompson in Methods in Carbohydrate Chemistry (R.L Whistler, M.L. Wolfrom and J.N. BeMiller, Eds.), Academic Press, New York, Vol.ll, 53 , pp. 211-215, (1963)] liefert die Umsetzung von 150 g (832.5 mmol) α,ß-D-
Mannopyranose mit einem Gemisch aus 1500 ml absolutem Pyridin und 1500 ml Essigsäureanhydrid nach Aufarbeitung 315 g (96,7 %) der oben genannten Titelverbindung als Rohprodukt in Form eines viskosen und farblosen Öls. Durch 1H-NMR-spektroskopische Untersuchung der so erhaltenen Titelverbindung konnte das α zu ß- Verhältnis beider Anomeren mit 4:1 bestimmt werden. Auf eine Trennung der α,ß-Anomeren der oben genannten Titelverbindung kann zur Durchführung der nachfolgenden Reaktionsschritte verzichtet werden. Elementaranalyse: ber.: C 49,21 H 5,68 gef.: C 49,12 H 5,78
b) 1-0-α-D-(5-Ethoxycarbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0-acetyl-mannopyranose
Auf analoge Weise, wie in der Literatur für die Synthese von Aryl Glycopyranosiden beschrieben [J. Conchie und G.A. Lewy in Methods in Carbohydrate Chemistry (R.L. Whistler, M.L. Wolfrom and J.N. BeMiller, Eds.), Academic Press, New York, Vol.ll , 90, pp. 345-347, ( 1963 )] führt die Umsetzung von 156,2 g (400 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21a) als α, ß-Anomerengemisch mit 67 ml ( 400 mmol ) 6-Hydroxy-hexansäureethylester und 60,8 ml (520 mmol) Zinn-IV-chlorid in insgesamt 600 ml 1,2-Dichlorethan nach säulenchromatographischer Aufreinigung (Eluent: Hexan/ Essigsäure- ethylester 2:1) zur Bildung von 100,05 g (51 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und viskoses Öl. Durch 1H-NMR-spektroskopische Untersuchung der so erhaltenen Titelverbindung konnte gezeigt werden, daß es sich bei der oben genannten Titelverbindung ausschließlich um das reine α- Anomere handelt. Elementaranalyse: ber.: C 52,94 H 6,77 gef.: C 52,80 H 6,78
c) 1-0-α-D-(5-Carboxy)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose
Eine gerührte Suspension von 141,0 g ( 289 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 30b) in 200 ml Dioxan wird bei Raumtemperatur und unter gleichzeitigem kräftigen Rühren portionsweise mit insgesamt 238,5 g ( 4,26mol ) fein gepulvertem Kaliumhydroxydpulver versetzt . Zur Erhöhung der Rührfähigkeit wird das Reaktionsgemisch mit weiteren 200 ml Dioxan versetzt und die so erhaltene Suspension im Anschluß zur Siedehitze erhitzt und bei dieser Temperatur mit insgesamt 372 ml ( 3,128 mol ) Benzylbromid über einen Zeitraum von zwei Stunden tropfenweise versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 4 Stunden bei 110 °C gefolgt von 12 Stunden bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch zum Zwecke der Aufarbeitung in insgesamt 2,5 Liter Eiswasser langsam eingegossen und die Wasserphase im Anschluß vollständig mit Diethylether extrahiert. Nach dem Waschen der so erhaltenen Etherphase und dem anschließenden Trocknen derselbigen über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Diethylether im Vakuum abgezogen. Überschüssiges Benzylbromid wird anschließend im Ölpumpenvakuum quantitativ bei einer Ölbadtemperatur von 180 °C aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert. Der so erhaltene, harzig-ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/Hexan (1:10) als Eluent gereinigt. Ausbeute: 172,2, g (91,0 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines farblosen und äußerst viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 75,68 H 7,16 gef.: C 75,79 H 7.04
d) 6-N-Benzyloxycarbonyl-2-N-[1 -O-α-D -(5-carbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0- benzyl-mannopyranose]-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]- amid 100,0 g (134,0 mmol) der unter Beispiel 30c) hergestellten Carbonsäure und 32,4 g (281,4 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden in 500 ml Dimethylformamid gelöst und bei 0°C mit insgesamt 58,0 g (281 ,4 mmol) N,N'- Dicyclohexylcarbodiimid portionsweise versetzt und es wird 3 Stunden bei dieser Temperatur nachgerührt. Zu der so hergestellten Aktivester-Lösung gibt man eine auf 0°C gekühlte Lösung von 111 ,3 g (134,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c) , gelöst in 300 ml Dimethylformamid tropfenweise hinzu und rührt 2 Stunden bei 0°C sowie 12 h bei Raumtemperatur. Zur Aufarbeitung filtriert man vom ausgefallenen Dicyclohexylharnstoff ab und zieht das Lösungsmittel anschließend bis zur Trockne ab. Der so erhaltene Rückstand wird anschließend an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan / Ethanol 20:1 ; die Durchführung der Chromatographie erfolgt unter Verwendung eines Solvensgradienten mit kontinuirlicher Zunahme des Ethanolanteils). Ausbeute: 132,5 g ( 67,4 % d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen und stark viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 54.02 H 4.88 N 3.82 F 22.01 S 2.19 gef.: C 53.87 H 4.85 N 4.02 F 22.55 S 2.06
e) 2-N-[1 -O-α-D -(5-Carbonyl)pentyl-mannopyranose]-L-lysin-[1-(4 -perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-ami
In 800 ml Ethanol werden 120,0 g (81,77 mmol) der unter 30d) hergestellten Verbindung gelöst, mit 4,5 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt und solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm) hydriert, bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist (ca. 8
Stunden). Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (ca. 200 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses und farbloses Öl erhalten. Ausbeute: 78,5 g (98,7 % d. Th.). Elementaranalyse: ber.: C 37.04 H 4.25 N 5.76 F 33.20 S 3.30 gef.: C 36.96 H 4.85 N 5.41 F 34.13 S 3.22 f) 2-N-[1 -0-α-D-(5-Carbonyl)pentyl-mannopyranose]-6-N-[1 ,4,7-tris-
(carboxylatomethyl )-10-(-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl- pentanoyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan]-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex
99,8 g (158,4 mmol; 2.2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 30e) des in der Patentanmeldung DE 19728954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-1 - methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 6,7 g wasserfreies Lithiumchlorid (158,4 mmol) werden bei 40 C° in 800 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst . Bei dieser Temperatur wird im Anschluss mit insgesamt 18,2 g (158,4 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 70,0 g (71,96 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 30e), gelöst in 250 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 32,7 g ( 158,4 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off : 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute: 93,0 g (81,6 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat. H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 9,53 % .
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 37.15 H 4.39 N 7.96 F 20.38 S 2.02 Gd 9.92 gef.: C 36.92 H 4.50 N 7.68 F 19.77 S 1.91 Gd 10.08
Beispiel 31 a) 2-N-[1 -0-α-D-(5-Carbonyl)pentyl-mannopyranose]-6-N-{2-[4-(3- oxapropionyl )-phenyl]-2-[1 ,4,7-tris-(carboxylatomethyl )-1,4,7,10- tetraazacyclododecan-10-yl]-essigsäure}-L-lysin-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl )-piperazin]-amid, Gd-Komplex, Natiumsalz
Eine gerührte Suspension von 5,0 g (9.06 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 23e) in 15 ml absolutem Dimethylsulfoxid wird bei 70°C mit 0,68 g (15,9 mmol) Lithiumchlorid versetzt. Nach 30 minütigem Rühren bei 70°C wird die nun klare Reaktionslösung portionsweise mit insgesamt 1,83 g (15,9 mmol) N- Hydroxysuccinimid versetzt und das Reaktionsgemisch noch 1 Stunde bei dieser Temperatur gehalten. Nach dem Abkühlen auf 0°C wird mit 4,52 g (23,85 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und die Reaktionslösung noch 1 weitere Stunde bei 0°C, gefolgt von 12 Stunden bei 22°C, gerührt. Die so erhaltene Reaktionslösung des N-Hydroxysuccinimidesters der Titelverbindung aus Beispiel 3e) wird nun bei 22°C tropfenweise mit einer Lösung von 4,0 g (4,12 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 10Ae) in 15 ml absolutem Dimethylsulfoxid versetzt und weitere 12 Stunden bei Raumtemperatur nachgerührt. Zur Aufarbeitung wird die Reaktionslösung bei 22°C in 900 ml Aceton eingetropft, wobei die Titelverbindung als farbloser Niederschlag ausfällt. Der Niederschlag wird abgesaugt, in 200 ml destilliertem Wasser gelöst und anschließend mit 1 molarer Natronlauge der pH-Wert dieser Lösung auf genau 7,2 eingestellt. Die so erhaltene wässrige Produktlösung wird über eine YM3-
Ultrafiltrationsmembran (AMICON ® ;cut off : 3000 Da) zum Zwecke des Entsalzens und der Abtrennung von niedermolekularen Bestandteilen dreimal ultrafiltriert. Das so erhaltene Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 6,33g (92,4 % d. Th., bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente) als farbloses Lyophilisat mit einem Wassergehalt von 7,38 %. Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 38.48 H 4.13 N 6.65 F 19.16 S 1.90 Gd 9.33 Na 1.36 gef.: C 39.52 H 4.12 N 6.67 F 19.70 S 1.89 Gd 9.30 Na 1.41
Beispiel 32 a) 3,5-Bis-benzyloxycarbonylamino-benzoesäure-N-(3-oxa- 1 H,1 H,2H,2H,4H,4H, 5H,5H-perfluortridecyl)-amid
In einem Lösungsmittelgemisch aus 125 ml trockenem Tetrahydrofuran und 125 ml trockenem Dioxan werden 20g (47,5 mmol) 3,5- Bisbenzyloxycarbonylamino-benzoesäure (Synthese gemäß nachfolgender Literaturstelle: Skulnick, Harvey I.; Johnson, Paul D.; Aristoff, Paul A.; Morris, Jeanette K.; Lovasz, Kristine D.; et al.; J.Med.Chem.; 40; 7; 1997; 1149-1164 ) sowie 4,78 g (47,5 mmol) Triethylamin gelöst. Nach dem Abkühlen auf -15°C tropft man unter Rühren eine Lösung von 6,56g (48 mmol) Chlorameisensäure- isobutylester in 30 ml trockenem Tetrahydrofuran langsam hinzu, wobei die Innentemperatur unterhalb von -10°C zu halten ist. Nach einer Reaktionszeit von 15 Minuten bei -15°C tropft man eine Lösung von 58,6 g (47,5 mmol) 1- Amino-1 H,1 H,2H,2H,4H,4H, 5H,5H-3-oxo-perfluor-tridecan und 4,78 g (47,5 mmol) Triethylamin in 100ml trockenem Tetrahydrofuran bei -20°C hinzu. Nach einer Reaktionszeit von einer Stunde bei -15°C sowie zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in 300 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 200 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 300 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Dichlormethan/Hexan/2-Propanol (10:5:1) als Eluent gereinigt. Ausbeute: 36,2 g (82,5% d. Th.) der Titelverbindung als farbloses Öl.. Elementaranalyse: ber.: C 46,82 H 3,27 N 4,55 F 34,97 gef.: C 47,21 H 3,31 N 4,61 F 34,48
b) 3,5-Di-amino-benzoesäure-N-(3-oxa-1 H,1 H,2H,2H,4H,4H, 5H.5H- perfluortridecyl)]-amid In 300 ml Ethanol werden 30,0 g ( 32,4 mmol) des unter 32a) hergestellten Amids gelöst und mit 1 ,2 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt. Man hydriert solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm), bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (ca. 300 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses , gelbliches Öl erhalten.
Ausbeute: 20, 12 g (94,8 % d. Th.). Elementaranalyse: ber.: C 36,66 H 2,77 N 6,41 F 49,28 gef.: C 36,07 H 2,87 N 6,23 F 49,43
c) 3-N-[-(1-0-α-D-Carbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose)- 5-amino-benzoesäure-N-(3-oxa-1H,1H,2H,2H,4H,4H, 5H.5H- perfluortridecyl)-amid
10,95 g (18,30 mmol) 1-Carboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-0-benzyl-α-D- mannopyranosid [ Darstellung wie in der Patentschrift DE 19728954 C1 beschrieben] werden in 150 ml Dimethylformamid gelöst und mit insgesamt 2,09 g (18,3 mmol) N-Hydroxysuccinimid versetzt. Man kühlt auf 0°C ab und gibt 3,78 g (18,3 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid zu . Es wird eine Stunde bei 0°C und anschließend 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man kühlt auf 0°C ab und tropft innerhalb von 3 h eine Lösung aus 24,0 g (36,6 mmol, 2 Molequivalente bezogen auf eingesetzte Carbonsäure) der unter Beispiel 32b) beschriebenen Diaminoverbindung, gelöst in 350 ml Dimethylformamid langsam hinzu. Anschließend rührt man noch eine Stunde bei 0°C, dann über Nacht bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand in 300 ml Essigsäureethylester aufgenommen. Man filtriert vom ausgefallenem Harnstoff ab und wäscht das Filtrat 2 mal mit je 100 ml 5 %iger wässriger Soda-Lösung. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 13:1). Man erhält 16,8 g (74,3 % d. Th., bezogen auf eingesetzte Carbonsäure) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Durch Erhöhung der Polarität der Eluentzusammensetzung auf n-Hexan/lsopropanol 5:1 werden in den nachfolgenden Chromatographiefraktionen insgesamt 10,15 g an nicht umgesetzter Diaminoverbindung 32b) wiedergewonnen, welche erneut nach oben genannter Reaktionsvorschrift umgesetzt werden können. Elementaranalyse: ber.: C 54,42 H 4,40 N 3,40 F 26,13 gef.: C 54,32 H 4,49 N 3,48 F 25,94
d) 3-N-[-(1-0-α-D-Carbonylmethyl-mannopyranose)]-5-amino-benzoesäure- N-(3-oxa-1 H,1 H,2H,2H,4H,4H, 5H,5H-perfluortridecyl)-amid
In analoger Weise wie für die Synthese der Titelverbindung aus Beispiel 32b) beschrieben, liefert die Hydrogenolyse von 12,0 g (9,70 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 32c), unter Verwendung von 0,5 g Pearlman- Katalysator (Pd 20 %, C) in einem Ethanol/Wasser (9:1) -Gemisch nach Aufarbeitung 8,08 g (96,7 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines gelblich gefärbten und viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 37,64 H 3,28N 4,88 F 37,49 gef.: C 37,32 H 3.17 4.97 F 37,55
e) 3-N-(1-0-α-D-Carbonylmethyl-mannopyranose)-5-N-{2-[4-(3-oxapropionyl )-phenyl]-2-[1 ,4,7-tris-(carboxylatomethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan- 10-yl]-essigsäure}-benzoesäure-N-(3-oxa-1 H,1 H,2H,2H,4H,4H, 5H.5H- perfluortridecyl)-amid,Gd-Komplex, Natiumsalz
13,6 g (19,2 mmol; 2.2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 32d) ) des unter Beispiel 23Ae) beschriebenen Gd-Komplexes und 0,81 g wasserfreies Lithiumchlorid (19,2 mmol) werden bei 40 C° in 100 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 2,2 g (19,2 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 7,5g (8,7 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 32d), gelöst in 50 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 3,96 g ( 19,2 mmol) N.N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 11 ,51 g (84,5 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 6,77 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 40,05 H 3,94 N 6,29 F 20,71 Gd 10,08 Na 1,47 gef.: C 39.98 H 4.00 N 6,3 1 F 20,73 Gd 10.11 Na 1,42
Beispiel 33
a) 3,5-Bis-(benzyloxycarbonylamino)-1 -{N-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]}-benzamid
In einem Lösungsmittelgemisch aus 60 ml trockenem Tetrahydrofuran und 70 ml trockenem Dioxan werden 10g (23,75 mmol) 3,5-Bis-benzyloxycarbonylamino- benzoesäure (Synthese gemäß nachfolgender Literaturstelle: Skulnick, Harvey I.; Johnson, Paul D.; Aristoff, Paul A.; Morris, Jeanette K.; Lovasz, Kristine D.; et al.; J.Med.Chem.; 40; 7; 1997; 1149-1164 ) sowie 2,39 g (23,75 mmol) Triethylamin gelöst. Nach dem Abkühlen auf -15°C tropft man unter Rühren eine Lösung von 3,28g (24 mmol) Chlorameisensäureisobutylester in 20 ml trockenem Tetrahydrofuran langsam hinzu, wobei die Innentemperatur -10°C nicht überschreitet. Nach einer Reaktionszeit von 15 Minuten bei -15°C tropft man eine Lösung von 23,0 g (23,75 mmol) Perfluoroctylsulfonylpiperazin und 2,39 g (23,75 mmol) Triethylamin in 50 ml trockenem Tetrahydrofuran bei -20°C hinzu. Nach einer Reaktionszeit von einer Stunde bei -15°C sowie zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in 200 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 100 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 300 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Dichlormethan/Hexan/2-Propanol (15:5:1) als Eluent gereinigt. Ausbeute: 18,35 g (79,6 % d. Th.) der Titelverbindung als farbloses Öl.. Elementaranalyse: ber.: C 43,31 H 2,80 N 5,77 F 33,27 S 3,30 gef.: C 43,21 H 2,75 N 5,61 F 33,38 S 3,22
b) 3,5-Di-amino-1 -{N-[1 -(4-perf luoroctylsulfonyl)-piperazin]}-benzamid
In 100 ml Ethanol werden 9,70 g ( 10,0 mmol) des unter 33a) hergestellten Amids gelöst und mit 0,4 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt. Man hydriert solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm), bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (ca. 150 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses , gelbliches Öl erhalten. Ausbeute: 6,9 g (98,2 % d. Th.). Elementaranalyse: ber.: C 32,49 H 2.15 N 7,98 F 45,98 S 4,56 gef.: C 32,56 H 2.17 N 8,09 F 45,63 S 4,61
c) 5-Amino- 3-N-(1-0-α-D-Carbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl- mannopyranose)-benzoesäure-N-[1 -(4-perfluoroctylsuIfonyl)- piperazin]-amid
5,48 g (9,15 mmol) 1-Carboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-0-benzyl-α-D- mannopyranosid [ Darstellung wie in der Patentschrift DE 19728 954 C1 beschrieben] werden in 100 ml Dimethylformamid gelöst und mit insgesamt 1,04 g (9,15 mmol) N-Hydroxysuccinimid versetzt.. Man kühlt auf 0°C ab und gibt 1,89 g (9,15 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid zu . Es wird eine Stunde bei 0°C und anschließend 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach dem erneuten Abkühlen auf 0°C tropft man innerhalb von 3 h eine Lösung aus 12,85 g (18,30 mmol, 2 Molquivalente bezogen auf eingesetzte Carbonsäure) der unter Beispiel 33b) beschriebenen Diaminoverbindung, gelöst in 250 ml Dimethylformamid langsam hinzu. Anschließend rührt man noch eine Stunde bei 0°C, dann über Nacht bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand in 100 ml Essigsäureethylester aufgenommen. Man filtriert vom ausgefallenem Harnstoff ab und wäscht das Filtrat zweimal mit je 100 ml 5 %iger wässriger Soda-Lösung. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 13:1). Man erhält 8,14 g (69,4 % d. Th., bezogen auf eingesetzte Carbonsäure) der
Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Durch Erhöhung der Polarität der Eluentzusammensetzung während der Chromatographie auf 6:1 (n- Hexan/Isopropanol) werden in den nachfolgenden Chromatographiefraktionen noch insgesamt 4,36 g an nicht umgesetzter Diaminoverbindung 33b) wiedergewonnen, welche erneut nach oben genannter Reaktionsvorschrift umgesetzt werden können.
Elementaranalyse: ber.: C 51,49 H 4,01 N 4.37 F 25,17 S 2,50 gef.: C 51.60 H 4.19 N 4,28 F 25,14 S 2,44
d) 5-Amino- 3-N-(1 -0-α-D-Carbonylmethyl-mannopyranose)-benzoesäure-N-[1 - (4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid
In analoger Weise wie für die Synthese der Titelverbindung aus Beispiel 33b) beschrieben, liefert die Hydrogenolyse von 6,4 g (5,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 33c), unter Verwendung von 0,3 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) in einem Ethanol/Wasser (8:1) -Gemisch nach Aufarbeitung 4,43 g (96,2 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines gelblich gefärbten und viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 35,15 H 2,95 N 6,07 F 35,01 S 3,48 gef.: C 35,32 H 3,02 N 5,89 F 35,05 S 3,58
e) 3-N-(1 -0-α-D-Carbonylmethyl-mannopyranose)-5-N-[1 ,4,7- tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan]-benzoesäure-N-[1 -(4-perf luoroctylsulfonyl)- piperazin]- amid, Gd-Komplex
5,54 g (8,8 mmol; 2.2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 33d) ) des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy- 1 -methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 0,37 g wasserfreies Lithiumchlorid (8,8 mmol) werden bei 40 C° in 60 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1 ,01 g (8.8 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 3,7 g (4,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 13Ad), gelöst in 40 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 1,82 g ( 8,8 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute: 5,36 g (87,4 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat. H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 6,77 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 36,01 H 3,61 N 8,22 F 21,05 Gd 10,25 S 2,09 gef.: 035,87 H 3,70 N 8,22 F 20,91 Gd 10,18 S 2.16
Beispiel 34
a) 1,4,7-Triazaheptan-1,7-bis-(2-N-trifluoracetyl -6-N- benzyloxycarbonyl-L- ϊysin)-diamid
100 g (107,9 mmol) der unter Beispiel 21a) hergestellten Carbonsäure und 26,1 g (226,59 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden in 500 ml Dimethylformamid gelöst und bei 0°C mit insgesamt 46,7 g (226,59 mmol) N,N'- Dicyclohexylcarbodiimid portionsweise versetzt und es wird 3 Stunden bei dieser Temperatur nachgerührt. Zu der so hergestellten Aktivester-Lösung gibt man eine auf 0°C gekühlte Lösung von 5,57 g (53,95 mmol) Diethylentriamin , gelöst in 60 ml Dimethylformamid tropfenweise hinzu und rührt 2 Stunden bei 0°C sowie 12 h bei Raumtemperatur. Zur Aufarbeitung filtriert man vom ausgefallenen Dicyclohexylharnstoff ab und zieht das Lösungsmittel anschließend bis zur Trockne ab. Der so erhaltene Rückstand wird anschließend an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan / Ethanol 15:1 ; die Durchführung der Chromatographie erfolgte unter Verwendung eines Solvensgradienten mit kontinuierlicher Zunahme des Ethanolanteils).
Ausbeute: 26,0 g ( 58,8 % d.Th., bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente ) der Titelverbindung in Form eines farblosen und stark viskosen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 52,74 H 5.78 N 11,96 F 13,90 gef.: C 52,66 H 5,89 N 11,88 F 14,02
b) 1 ,4,7-Triazaheptan-1 ,7-Bis-(2-N-trifluoracetyl -6-N- benzyloxycarbonyl-L- lysin)-diamid-4-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl In eine Lösung aus 20 g (24,4 mmol) des unter 34a) hergestellten Diamids, gelöst in einem Gemisch aus 150 ml Tetrahydrofuran und 15 ml Chloroform, werden bei 0°C und unter Stickstoffatmosphäre 16,18 g (27,0 mmol) 2-[N-Ethyl- N-perfluoroctylsulfonyl)- aminoessigsäure (Darstellung gemäß: DE 19603033 ), gelöst in 50 ml Tetrahydrofuran , hinzugegeben. Anschließend gibt man bei 0 °C insgesamt 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2- dihydrochinolin] portionsweise hinzu und läßt über Nacht bei Raumtemperatur rühren und engt anschließend im Vakuum ein. Das verbleibende Öl wird wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 15:1). Man erhält 24,74 g (72,4 % d. Th., bezogen auf eingesetztes sec- Amin) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 42,01 H 3,96 F 31,19 N 8,00 S 2.29 gef.: C 41.92 H 4.07 F 31.22 N 7,87 S 2,34
c) 1 ,7-Bis-(6-N- benzyloxycarbonyl-L-lysin)-diamid-4-[2-(N-ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-1,4,7-triazaheptan
In 100 ml Ethanol werden 22,0 g (15,7 mmol) der unter Beispiel 34b) hergestellten Titelverbindung gelöst und man leitet bei 0°C in diese Lösung für 40 Minuten Ammoniakgas ein. Anschließend wird weitere 4 Stunden bei 0°C gerührt sowie 3 Stunden bei Raumtemperatur und engt bei 40°C Badtemperatur im Vakuum zur Trockne ein. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Dichlormethan/Hexan/2-Propanol (20:10:1) als Eluent gereinigt
Ausbeute: 12.92 g (98,4 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl. Elementaranalyse: ber.: C 44,22 H 4,64 N 9,38 S 2,68 F 27,03 gef.: C 44,31 H 4,72 N 9.30 S 2,74 F 26,99 d) 1 ,7-Bis-[6-N- benzyloxycarbonyl-2-N-(1 -0-α-D-carbonylmethyl-2,3,4,6-tetra- 0-benzyl-mannopyranose)-L-lysin]-diamid-4-[2-(N-ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-1 ,4,7-triazaheptan
5,47 g (9,15 mmol) 1-Carboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-0-benzyl-α-D- mannopyranosid [ Darstellung wie in der Patentschrift DE 19728 954 C1 beschrieben] werden in 80 ml Dimethylformamid gelöst und mit insgesamt 1 ,05 g (9,15 mmol) N-Hydroxysuccinimid versetzt.. Man kühlt auf 0°C ab und gibt 1,9 g (9,15 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid zu . Es wird eine Stunde bei 0°C und an- schließend 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man kühlt auf 0°C ab und tropft innerhalb von 3 h eine Lösung aus 7,65g (9,15 mmol) der unter Beispiel 34e) beschriebenen Aminoverbindung, gelöst in 50 ml Dimethylformamid langsam hinzu. Anschließend rührt man noch eine Stunde bei 0°C, dann über Nacht bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand in 100 ml Essigsäureethylester aufgenommen. Man filtriert vom ausgefallenem Harnstoff ab und wäscht das Filtrat zweimal mit je 50 ml 5 %iger wässriger Soda-Lösung. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 20:1). Man erhält 17,01 g (78,9 % d. Th., bezogen auf eingesetzte Carbonsäure) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 59,13 H 5,43 N 4,76 F 13,71 S 1,36 gef.: C 59,22 H 5,39 N 4,85 F 13,70 S 1.40
e) 1 ,7-Bis-[2-N-(1 -0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose)-L-lysin]-diamid-4-[2- (N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-1,4,7-triazaheptan
In 150 ml Ethanol werden 15,0 g ( 6,36 mmol) des unter 34d) hergestellten Amids gelöst und mit 0,5 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt. Man hydriert solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm), bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (ca. 100 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses , gelbliches
Öl erhalten.
Ausbeute: 8,54 g (97,2% d. Th.).
Elementaranalyse: ber.: C 39,13 H 5,04 N 8.11 F 23,38 S 2,32 gef.: C 39,07 H 4.98 N 8.18 F 23,40 S 2.30
f) 1 ,7-Bis-[2-N-(1 -0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose)-6-N-[1 ,4,7- tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)-1 ,4,7, 10- tetraazacyclododecan]-L-lysin]-diamid-4-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)- amino]-acetyl-1 ,4,7-triazaheptan , Digadolinium-Komplex
Eine gerührte Suspension von 5,7 g (9.06 mmol) des in der Patentanmeldung DE 19728954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10- (4-Carboxy-1 -methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7- triessigsäure in 75 ml absolutem Dimethylsulfoxid wird bei 70°C mit 0,68 g (15,9 mmol) Lithiumchlorid versetzt. Nach 30 minütigem Rühren bei 70°C wird die nun klare Reaktionslösung portionsweise mit insgesamt 1,83 g (15,9 mmol) N- Hydroxysuccinimid versetzt und das Reaktionsgemisch noch 1 Stunde bei dieser Temperatur gehalten. Nach dem Abkühlen auf 0°C wird mit 4,52 g (23,85 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und die Reaktionslösung noch 1 weitere Stunde bei 0°C, gefolgt von 12 Stunden bei 22°C, gerührt. Die so erhaltene Reaktionslösung des N-Hydroxysuccinimidesters des Gd-Komplexes der 10-(4- Carboxy-1 -methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7- triessigsäure wird nun bei 22°C tropfenweise mit einer Lösung von 2,84 g (2,06 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 34e) in 15 ml absolutem Dimethylsulfoxid versetzt und weitere 12 Stunden bei Raumtemperatur nachgerührt. Zur Aufarbeitung wird die Reaktionslösung bei 22°C in 500 ml Aceton eingetropft, wobei die Titelverbindung als farbloser Niederschlag ausfällt. Der Niederschlag wird abgesaugt, in 200 ml destilliertem Wasser gelöst und über eine YM3-Ultrafiltrationsmembran (AMICON ® ; cut off : 3000 Da) zum Zwecke des Entsalzens und der Abtrennung von niedermolekularen Bestandteilen dreimal ultrafiltriert. Das so erhaltene Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 4,80g (89,6 % d. Th., bezogen auf die eingesetzte
Aminkomponente) als farbloses Lyophilisat mit einem Wassergehalt von 8,98 %.
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 38.28 H 4.84 N 9,68 F 12,40 S 1.23 Gd 12,07 gef.: C 38,20 H 4.91 N 9,77 F 12,45 S 1.19 Gd 12,10
Beispiel 35
a) 1 ,7-Bis (benzyloxycarbonyl)- 4-{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5- [1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid}-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan
In eine Lösung von 10,75 g (24,4 mmol) 1,7-Bis-[benzyloxycarbonyl]-1,4,7,10- tetraazacyclododecan , gelöst in einem Gemisch aus 150 ml Tetrahydrofuran und 15 ml Chloroform, werden bei 0°C und unter Stickstoffatmosphäre 16,56 g (24,4 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 35e) , gelöst in 150 ml Tetrahydrofuran hinzugegeben. Anschließend gibt man bei 0°C insgesamt 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin] portionsweise hinzu und läßt über Nacht bei Raumtemperatur rühren und engt anschließend im Vakuum ein. Das verbleibende Öl wird wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 12:1). Man erhält 17,22 g (64,3 % d. Th., bezogen auf eingesetztes sec- Amin) des Monoamids sowie 3,8 g (8,8 % d. Th.) des Diamids als Nebenprodukt. Die Titelverbindung wird in Form eines farblosen Öls isoliert. Elementaranalyse: ber.: C 43,41 H 3,92 F 29,18 N 7,59 S 2.60 gef.: C 43,52 H 4,07 F 29,24 N 7,67 S 2.55
b) 1 ,7-Bis (benzyloxycarbonyl)- 4-{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5- [1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid}-10-[1 -0-α-D-(5-carbonyl)- pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose]-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan
10,0 g (13,4 mmol) der unter Beispiel 30c) hergestellten Carbonsäure und 3,24 g (28,1 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden in 100 ml Dimethylformamid gelöst und bei 0°C mit insgesamt 5,8 g (28,1 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid portionsweise versetzt und es wird 3 Stunden bei dieser Temperatur nachgerührtZu der so hergestellten Aktivester-Lösung gibt man eine auf 0°C gekühlte Lösung von 14,83 g (13,4 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 35a) , gelöst in 100 ml Dimethylformamid tropfenweise hinzu und rührt 2 Stunden bei 0°C sowie 12 h bei Raumtemperatur. Zur Aufarbeitung filtriert man vom ausgefallenen Dicyclohexylharnstoff ab und zieht das Lösungsmittel anschließend bis zur Trockne ab. Der so erhaltene Rückstand wird anschließend an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan / Essigsäureethylester 20:1 ; die Durchführung der Chromatographie erfolgte unter Verwendung eines Solvensgradienten mit kontinuierlicher Zunahme des Essigsäureethylesteranteils) .
Ausbeute: 18,3 g ( 78,2 % d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen und stark viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 55,11 H 5.03 N 4.82 F 18,52 S 1,84 gef.: C 54.87 H 4.85 N 4.92 F 18.55 S 1.86
c) 1 -{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid}-7-[1-0-a-D-(5-carbonyl)-pentyl-mannopyranose]-
1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan
In 150 ml Ethanol werden 17,0 g (9,75 mmol) der unter 34b) hergestellten Verbindung gelöst, mit 1,0 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt und solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm) hydriert, bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (zweimal mit jeweils 75 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses und farbloses Öl erhalten.
Ausbeute: 10,76 g (99,0 % d. Th.).
Elementaranalyse: ber.: C 38,78 H 4.61 N 7.54 F8.97 S 2.88 gef.: C 38,86 H 4.65 N 7.41 F 29,02 S 2,92
d) 1 ,7-Bis-[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7, 10- tetraazacyclododecan- Gd-Komplex-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl)-4-[2-(N-ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl]-amino]-acetyl-2-oxa-acetyl]-10-[1 -O-α-D- 6- carbonylpentyl-mannopyranose ] -1,4,7,10 tetraazacyclododecan
24,86 g (39,46 mmol; 4,4 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente 35c) des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-1-methyl-2- oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 1,67 g wasserfreies Lithiumchlorid (39,46 mmol) werden bei 40 C° in 200 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 4,53g (39,46 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 10,0 g (8,97 mmol) der
Titelverbindung aus Beispiel 34c), gelöst in 100 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 8,14 g ( 39,46 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten
Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off :3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 16,37 g (79,3 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat H20-Gehalt (Karl-Fischer): 7,65 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: 0 38,01 H 4.61 N 9,58 F 13,81 S 1.37 Gd 13,45 gef.: C 37.92 H 4.55 N 9.58 F 13.77 S 1.31 Gd 13.48
e) 3-0xa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-mono-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid
25 g (44,0 mmol) 1 -Perfluoroctylsulfonylpiperazin werden in 150 ml Tetrahydrofuran gelöst und bei Raumtemperatur mit insgesamt 5,1 g (44,0 mmol) Diglycolsäureanhydrid versetzt und die so erhaltene Reaktionslösung für 12 h am Rückfluss gekocht. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird bis zur Trockne eingeengt und der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Dichlormethan /2-Propanol (16:1) als Eluent gereinigt Ausbeute: 27,94 g (92,8 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines farblosen und viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 58,52 H 4,27 N 1,98 S 2,26 F 22,80 gef.: C58.42 H 4,41 N 1 ,80 S 2,28 F 23,02
Beispiel 36
a) 1 ,7-Bis (benzyloxycarbonyl)- 4-{3-(oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5- -[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid}-10-[1 -O-ß-D-6- carbonylpentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-glucopyranose]-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan)
In 750 ml trockenem Tetrahydrofuran werden 68,5 g ( 91 ,79 mmol) 1- Carboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-0-benzyl-α-D-mannopyranosid [ Darstellung wie in der Patentschrift DE 19728954 C1 beschrieben] gelöst und anschließend 9,25 g (91 ,79 mmol) Triethylamin hinzugegeben. Nach dem Abkühlen der Reaktionslösung auf -15°C bis -20°C tropft man bei dieser Temperatur unter Rühren eine Lösung von 12,64 g (92,5 mmol) Chlorameisensäureisobutylester in 150 ml trockenem Tetrahydrofuran langsam hinzu, wobei die Zutropfgeschwindigkeit so zu wählen ist, daß eine Innentemperatur von -10°C nicht überschritten wird. Nach einer Reaktionszeit von 15 Minuten bei -15°C tropft man anschließend eine Lösung von 101,6 g (91,79 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 35a) und 9,25 g (91 ,79 mmol) Triethylamin , als Lösung in 500 ml trockenem Tetrahydrofuran bei -20°C langsam hinzu. Nach einer Reaktionszeit von einer Stunde bei -15°C sowie zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockne eingeengt Der verbleibende Rückstand wird in 450 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 300 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 400 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Dichlormethan/Hexan/2-Propanol (10:20:1) als Eluent gereinigt. Ausbeute: 130,6 g ( 81 ,6 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl. Elementaranalyse: ber.: C 55,11 H 5,03 N 4,82 F 18,52 S 1,84 gef.: C 55,20 H 5,09 N 4,91 F 18,48 S 1.80
b)1 -{3-Oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid}-7-[1 -0-α-D-(5-carbonyl)-pentyl-mannopyranose]-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan
In 1000 ml Ethanol werden 110,0 g (63,08 mmol) der unter 36a) hergestellten Verbindung gelöst, mit 5,0 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt und bis zur quantitativen Aufnahme an Wasserstoff hydriert. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht mit Ethanol nach und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als zähes und farbloses Öl erhalten. Ausbeute: 92,61 g (99,5 % d. Th.). Elementaranalyse: ber.: C 52,10 H 5,12 N 5,70 F 21,89 S 2.17 gef.: C 52,20 H 5,09 N 5,71 F 21,87 S 2,20 c) 1 ,7-Bis-[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl- pentanoyl)-4-{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid}-10-[1-0-α-D-(5-carbonyl)-pentyl- mannopyranose]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Digadolinium-Komplex
55,4 g [ 88,0 mmol; 4,4 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Diaminkomponente aus Beispiel 33d) ] des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy- 1 -methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 3,7 g wasserfreies Lithiumchlorid (88,0 mmol) werden bei 40 C° in 500 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 10,1 g (88,0 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 29,5 g (20,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 36b), gelöst in 200 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 18,2 g ( 88,0 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet Ausbeute: 35,96 g (76,9 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 5,98 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 38,01 H 4,61 N 8,22 F 13,81 Gd 13,45 S 1,37 gef.: C 37,87 H 4,70 N 8,22 F 13,90 Gd 13.48 S 1,36
Beispiel 37 a) 5-(Ethoxycarbonyl)pentyl-2,3,4,6-tetra-0-acetyl-α-D-mannopyranosid
Auf analoge Weise, wie in der Literatur für die Synthese von Arylglycopyranosiden beschrieben [J. Conchie und G.A. Lewy in Methods in Carbohydrate Chemistry (R.L. Whistler, M.L Wolfrom and J.N. BeMiller, Eds.), Academic Press, New York, Vol.ll , 90, pp. 345-347, ( 1963 )] führt die Umsetzung von 156,2 g (400 mmol) D-Mannosepentaacetat als α, ß-(α, ß- Verhältnis = 4:1 ) -Anomerengemisch [ zur Synthese von 1 ,2,3,4,6-Penta-O- acetyl-α,ß-D-mannopyranose vgl.: M.LWolfrom und A.Thompson in Methods in Carbohydrate Chemistry (R.L. Whistler, M.L. Wolfrom and J.N. BeMiller, Eds.), Academic Press, New York, Vol.ll, 53 , pp. 211-215, (1963)] mit 67 ml ( 400 mmol ) 6-Hydroxy-hexansäureethylester und 60,8 ml (520 mmol) Zinn-IV-chlorid in insgesamt 600 ml 1 ,2-Dichlorethan nach säulenchromatographischer Aufreinigung (Eluent: Hexan/ Essigsäureethylester 2:1) zur Bildung von 100,05 g (51 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und viskoses Öl. Durch 1H-NMR-spektroskopische Untersuchung der so erhaltenen Titelverbindung konnte gezeigt werden, daß es sich bei der oben genannten Titelverbindung ausschließlich um das reine α-Anomere handelt. Elementaranalyse: ber.: C 52,94 H 6,77 gef.: C 52,80 H 6,78
b) 5-(Carboxy)pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-α-D-mannopyranosid
Eine gerührte Suspension von 141,0 g ( 289 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 37a) in 200 ml Dioxan wird bei Raumtemperatur und unter gleichzeitigem kräftigen Rühren portionsweise mit insgesamt 238,5 g ( 4,26mol ) fein gepulvertem Kaliumhydroxydpulver versetzt . Zur Erhöhung der Rührfähigkeit wird das Reaktionsgemisch mit weiteren 200 ml Dioxan versetzt und die so erhaltene Suspension im Anschluß zur Siedehitze erhitzt und bei dieser Temperatur mit insgesamt 372 ml ( 3,128 mol ) Benzylbromid, über einen Zeitraum von zwei Stunden, tropfenweise versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 4 Stunden bei 110 °C gefolgt von 12 Stunden bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch zum Zwecke der Aufarbeitung in insgesamt 2,5 Liter Eiswasser langsam eingegossen und die Wasserphase im Anschluß vollständig mit Diethylether extrahiert. Nach dem Waschen der so erhaltenen Etherphase und dem anschließenden Trocknen der Etherphase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Diethylether im Vakuum abgezogen. Überschüssiges Benzylbromid wird anschließend im Ölpumpenvakuum quantitativ bei einer Ölbadtemperatur von 180 °C aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert. Der so erhaltene, harzig-ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/Hexan (1:10) als Eluent gereinigt. Ausbeute: 172,2, g (91 ,0 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines farblosen und äußerst viskosen Öls Elementaranalyse: ber.: C 75,68 H 7.16 gef.: C 75,79 H 7,04
c) 5-[(Carboxy)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-α-D-mannopyranosid-]N- hydroxysuccinimidester
60,0 g (91 ,5 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 37b) werden in 750 ml
Dimethylformamid gelöst und mit insgesamt 10,4 g (91 ,5 mmol) N- Hydroxysuccinimid versetzt.. Man kühlt auf 0°C ab und gibt 18,9 g (91 ,5 mmol)
Dicyclohexylcarbodiimid zu . Es wird eine Stunde bei 0°C und anschließend 4
Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und der verbleibende Rückstand mit 100 ml Essigsäureethylester versetzt und auf 0°C abgekühlt. Es wird vom ausgefallenem Harnstoff abfiltriert und das erhaltene Filtrat im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der so erhaltene, harzig-ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von
Essigsäureethylester/Hexan (1 :20) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 61 ,23 g (89,0 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines farblosen und viskosen Öls . Elementaranalyse: ber.: 070,29 H 6,57 N 1,86 gef.: C 70,39 H 5,64 N 1.91 d) 2,6-Bis-{ 6-Nε -2-Nα-[-[1 -0-α-D-6-carbony-pentyl-(2,3,4,6-tetra-O-benzyl)- mannopyranose}-L-lysin}-methylester
In eine auf 0°C gekühlte Lösung aus 4,26 g (18,30 mmol; 0,5 Molequivalente bezogen auf eingesetzte Carbonsäure) L-Lysinmethylester-dihydrochlorid (kommerziell erhältlich bei der Firma Bachern) und 4,05 g (40,26 mmol) Triethylamin in 100 ml Dimethylformamid tropft man eine Lösung von 27,51 g (36,6 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 37c) in 150 ml Dimethylformamid hinzu. Nach beendeter Zugabe rührt man noch eine Stunde bei 0°C nach und dann über Nacht bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand in 300 ml Essigsäureethylester aufgenommen. Man filtriert vom ausgefallenem Harnstoff ab und wäscht das Filtrat zweimal mit je 100 ml 5 %iger wässriger Soda-Lösung. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n- Hexan/Isopropanol 25:1). Man erhält 39,56 g (75,4 % d. Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 72,88 H 7,31 N 1,95 gef.: C 72,90 H 7.29 N 2,02
e) 2,6-Bis-[ 6-Nε -2-Nα-[1 -0-α-D -6-carbony-pentyl-(2,3,4,6-tetra-0-benzyl)- mannopyranose]]-L-lysin
In 150 ml Ethanol werden 30,0 g (20,92 mmol) der unter Beispiel 37d) hergestellten Verbindung gelöst Man gibt dann die Lösung von 4 g (100,0 mmol) Natriumhydroxid in 10 ml destilliertem Wasser dazu und rührt 3 Stunden bei 50°C. Nach dem Dünnschichtchromatogramm ist die Verseifung quantitativ. Man engt im Vakuum zur Trockne ein und nimmt den verbliebenen Rückstand in 300 ml Essigsäureethylester auf und extrahiert die organische Phase zweimal mit je 100 ml verdünnter, wässriger Citronensäurelösung.Nach dem Trocknen über Natriumsulfat wird filtriert und man engt im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n- Hexan/Isopropanol 13:1). Man erhält 25,56 g (88,5 % d. Th.,) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 72,88 H 7.31 N 1,95 gef.: C 72,78 H 7,33 N 1.96
f) 2,6-Bis-[ 6-Nε -2-Nα-[1 -0-α-D -6-Carbony-pentyl-(2,3,4,6-tetra-0-benzyl)- mannopyranose]-L-lysin]-N-hydroxysuccinimidester
14,0 g (9,15 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 37e) werden in 100 ml Dimethylformamid gelöst und mit insgesamt 1,04 g (9,15 mmol) N- Hydroxysuccinimid versetzt.. Man kühlt auf 0°C ab und gibt 1,89 g (9,15 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid zu . Es wird eine Stunde bei 0°C und anschließend 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wird anschließend im Vakuum abgezogen und der verbleibende Rückstand mit 100 ml Essigsäureethylester versetzt und auf 0°C abgekühlt. Es wird vom ausgefallenem Harnstoff abfiltriert und das erhaltene Filtrat im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der so erhaltene, harzig-ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/n-Hexan (1 :20) als Eluent gereinigt Ausbeute: 12,94 g (92,4 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines farblosen und viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 71.40 H 7,05 N 2,74 gef.: C 71.39 H 7,14 N 2,81
g) 2,6-N,N -Bis[1 -O-α-D -(6-carbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl- mannopyranose]-L-lysin-1 ,7-(1 ,4,7-triazaheptan)-diamid
In eine auf 0°C gekühlte Lösung von 0,47 g (4,57 mmol) Diethylentriamin in 25 ml Dimethylformamid tropft man eine Lösung aus 14,0 g (9,15 mmol; 2
Molequivalente bezogen auf das eingesetzte Amin) der Titelverbindung aus Beispiel 37f) in 100 ml Dimethylformamid langsam hinzu. Nach beendeter Zugabe rührt man noch eine Stunde bei 0°C nach und dann über Nacht bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand in 200 ml Essigsäureethylester aufgenommen. Man filtriert vom ausgefallenem Harnstoff ab und wäscht das Filtrat zweimal mit je 50 ml 5 %iger wässriger Soda-Lösung. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 25:1). Man erhält 9,53 g (71 ,4 % d. Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 72,79 H 7,42N 3,36 gef.: C 72,90 H 7,39 N 3,32
h) 2-N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-6-N- (benzyloxycarbonyl)-L-lysin-methylester
20,8 g (35,6 mmol) der 2-[N-Ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-aminoessigsäure sowie 3,60 g (35,6 mmol) Triethylamin werden in 200 ml Dimethylformamid gelöst und es werden 4,09 g (35,6 mol) N-Hydroxysuccinimid hinzugegeben. Man kühlt auf 0°C ab und gibt 7,34 g (35,6 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid zu. Es wird eine Stunde bei 0°C und anschließend 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man kühlt auf 0°C ab und tropft innerhalb von 10 Minuten eine Lösung aus 11 ,77g (35,6 mmol) 6-N-Benzyloxycarbonyl-L-lysin-methylester- hydrochlorid und 4,0 g (40,0 mmol) Triethylamin in 100 ml Dimethylformamid hinzu. Man rührt eine Stunde bei 0°C, dann über Nacht bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand in 100 ml Essigsäureethylester aufgenommen. Man filtriert vom ausgefallenem Harnstoff ab und wäscht das Filtrat 2 mal mit je 100 ml 5 %iger aqu. Soda-Lösung. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/Essigsäureethylester 20:1). Man erhält 27,43 g (88,0 % d. Th.) eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 38,41 H 3,45 N 4,80 F 36,89 S 3,66 gef.: C 38,45 H 3,38 N 4,88 F 37,02 S 3.71 i) 2-Nα- {[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl]-amino-acetyl}-6-Nε- (benzyloxycarbonyl)-L-lysin
In 150 ml Ethanol werden 25,0 g (28,55 mmol) der unter Beispiel 37h) hergestellten Verbindung gelöst. Man gibt dann die Lösung von 4 g (100,0 mmol) Natriumhydroxid in 10 ml destilliertem Wasser dazu und rührt 3 Stunden bei 50°C. Nach dem Dünnschichtchromatogramm ist die Verseifung quantitativ. Man engt im Vakuum zur Trockne ein und nimmt den verbliebenen Rückstand in 300 ml Essigsäureethylester auf und extrahiert die organische Phase zweimal mit je 100 ml verdünnter, wässriger Citronensäurelösung.Nach dem Trocknen über Natriumsulfat wird filtriert und man engt im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n- Hexan/Isopropanol 10:1). Man erhält 22,73g (92,4 % d. Th.,) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 37,64 H 3,28 N 4.88 F 37,49 S 3.72 gef.: C 37,65 H 3,38 N 4.88 F 37,52 S 3,73
j) 1,4,7-Triazaheptan-4-{2-N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-
6-N-benzyloxycarbonyl}-L-lysin-amid-1,7-bis{2,6-N,N -bis[1-0-α-D-(5-carbonyl)- pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyImannopyranose]-L-lysin-diamid}
In 250 ml trockenem Tetrahydrofuran werden 15,33 g (17,8 mmol) der
Titelverbindung aus Beispiel 37i) sowie 1,80 g (17,8 mmol) Triethylamin gelöst. Nach dem Abkühlen der Reaktionslösung auf -15°C bis -20°C tropft man bei dieser Temperatur unter Rühren eine Lösung von 4,92 g (35,6 mmol) Chlorameisensäureisobutylester , gelöst in 50 ml trockenem Tetrahydrofuran , langsam hinzu, wobei die Zutropfgeschwindigkeit so zu wählen ist, daß eine Innentemperatur von -10°C nicht überschritten wird. Nach einer Reaktionszeit von 15 Minuten bei -15°C tropft man anschließend eine Lösung von 52,0 g (17,8 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 37g) und 1,80g (17,8 mmol) Triethylamin, in 300 ml trockenem Tetrahydrofuran bei -20°C langsam hinzu. Nach einer Reaktionszeit von einer Stunde bei -15°C sowie zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockne eingeengt Der verbleibende Rückstand wird in 500 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 200 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 200 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/ n-Hexan (1 :20) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 54,6 g ( 81,6% d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl .
Elementaranalyse: ber.: C 65,09 H 6,45 N 3,72 F 8.58 S 0,85 ge : C 65,13 H 4.41 N 3,69 F 8.52 S 0.90
k) 1,4,7-Triazaheptan-4-{2-N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl}- L-lysin-amid-1,7-bis{2,6-N,N -bis[1-0-α-D-(5-carbonyl)-pentyl-mannopyranose]- L-lysin-diamid}
In 500 ml Ethanol werden 50,0 g (13,28 mmol) der unter 37j) hergestellten Verbindung gelöst, mit 4,0 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt und solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm) hydriert, bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (ca.400 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses und farbloses Öl erhalten. Ausbeute: 26,85 g (93,0 % d. Th.). Elementaranalyse:
ber.: C 45,85 H 6,35 N 6.44 F 14,86 S 1.47 gef.: C 45.76 H 6.35 N 6.41 F 14,92 S 1.39 I) 1,4,7-Triazaheptan-4-{2-N-[2-(N-ethyI-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl- 6-N-[1,4,7-tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)- 1 ,4,7, 0-tetraazacyclododecan}-L-lysin-amid-1 ,7-bis{2,6-N,Nv-bis[1 -0-α-D-(5- carbonyl)-pentyl-mannopyranose]-L-lysin-diamid},Gadolinium-Komplex
5,54 g (8,8 mmol; 2.2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 37k) ) des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy- 1 -methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 0,37 g wasserfreies Lithiumchlorid (8,8 mmol) werden bei 40 C° in 60 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1,01 g (8.8 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 1,84 g (4,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 37k), gelöst in 40 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 1 ,82 g ( 8,8 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 8,77g (78,7 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 4,43 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 43,98 H 5,97 N 7.54 F 11,59 Gd 5,64 S 1,15 ge : 043,97 H 6,02 N 7,62 F 11,61 Gd 10.18 S 1,15
Beispiel 38 a) 2-Nα-6-Nε-Bis-[1 -O-α-D - Carbonylmethyl- 2,3,4,6-tetra - O - benzyl - mannopyranose] -L-lysin]-methylester
10,95 g (18,30 mmol) 1-Carboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-0-benzyl-α-D- mannopyranosid [ Darstellung wie in der Patentschrift DE 19728
954 C1 beschrieben] werden in 150 ml Dimethylformamid gelöst und mit insgesamt 2,09 g (18,3 mmol) N-Hydroxysuccinimid versetzt. Man kühlt auf 0°C ab und gibt 3,78 g (18,3 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid zu . Es wird eine Stunde bei 0°C und anschließend 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man kühlt auf 0°C ab und tropft innerhalb von einer Stunde eine Lösung aus 2,13 g (9,15 mmol; 0,5 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Carbonsäure) L- Lysinmethylester-dihydrochlorid (kommerziell erhältlich bei der Firma Bachern) und 2,02 g (20,13 mmol) Triethylamin in 70 ml Dimethylformamid hinzu. Nach beendeter Zugabe rührt man noch eine Stunde bei 0°C nach und dann über Nacht bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand in 300 ml Essigsäureethylester aufgenommen. Man filtriert vom ausgefallenem Harnstoff ab und wäscht das Filtrat zweimal mit je 100 ml 5 %iger wässriger Soda-Lösung. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 25:1). Man erhält 10,05 g (82,3 % d. Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 71.94 H 6,79 N 2,10 get: C 71.90 H 6,79 N 2,09 b) 2-Nα-6-Nε-Bis-[1 -O-α-D - Carbonylmethyl- 2,3,4,6-tetra - O - benzyl - mannopyranose]-L-lysin Auf analogem Wege, wie im Beispiel 37e) für die Synthese der dort relevanten Titelverbindung beschrieben, führt die Methylesterverseifung von 15 g (11,23 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 38a) zur Bildung von 13,89 g (93,6 % d. Th.) an oben genannter Titelverbindung in Form eines farblosen und viskosen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 71.80 H 6,71 N 2,12 get: C 71.84 H 6,69 N 2,15
c) 2-Nα-6-Nε-Bis-[1 -O-α-D - carbonylmethyl- 2,3,4,6-tetra - O - benzyl - mannopyranose]-L-lysin-N-hydroxysuccinimidester
12,09 g (9,15 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 38b) werden in 100 ml Dimethylformamid gelöst und mit insgesamt 1,04 g (9,15 mmol) N- Hydroxysuccinimid versetzt. Man kühlt auf 0°C ab und gibt 1,89 g (9,15 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid zu . Es wird eine Stunde bei 0°C und anschließend 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wird anschließend im Vakuum abgezogen und der verbleibende Rückstand mit 100 ml Essigsäureethylester versetzt und auf 0°C abgekühlt Es wird vom ausgefallenem Harnstoff abfiltriert und das erhaltene Filtrat im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der so erhaltene, harzig-ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/ n-Hexan (1 :20) als Eluent gereinigt
Ausbeute: 12,24 g (94,4 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines farblosen und viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 70,27 H 6,47 N 2.96 get: C 70,31 H 6.44 N 3,01
d) 6-N-Benzyloxycarbonyl-2-N-{[2,6-N,N*-bis(1-0-α-D-carbonylmethyl- 2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose)]-L-lysyl-}-L-lysin-[1-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
19,0 g (13,4 mmol) des unter Beispiel 38c) hergestellten Carbonsäure-N- Hydroxysuccinimidesters werden in 75 ml Dimethylformamid gelöst und bei 0°C mit einer auf 0°C gekühlten Lösung von 11 ,13 g (13,4 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c)) , gelöst in 50,0 ml Dimethylformamid , tropfenweise versetzt . Man rührt die resultierende Reaktionslösung noch 2 Stunden bei 0°C sowie 12 h bei Raumtemperatur. Zur Aufarbeitung filtriert man vom ausgefallenen Dicyclohexylharnstoff ab und zieht das Lösungsmittel anschließend bis zur Trockne im Vakuum ab. Der so erhaltene Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert [Laufmittel: Dichlormethan / Ethanol 28:1 ; die Durchführung der Chromatographie erfolgt hier unter Verwendung eines Solvensgradienten mit einem ,im Chromatographieverlauf kontinuierlich zunehmenden , Anteil an der eingesetzten polaren Eluentkomponente (hier: Ethanol) ].
Ausbeute: 25,28 g ( 88,4 % d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen und stark viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 59,10 H 5,34 N 3.94 F 15,13 S 1.50 get: C 59,18 H 5.35 N 4.02 F 15.15 S 1.56
e) 2-N-{[2,6-N,N'-bis(1-0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose)]-L-lysyl-L-lysin- [1 -(4-perf luoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In 200 ml Ethanol werden 20,0 g (9,37 mmol) der unter 38d) hergestellten Verbindung gelöst, mit 1 ,5 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt und solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm) hydriert, bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (zweimal mit je ca. 100 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses und farbloses Öl erhalten. Ausbeute: 11,62 g (97,0 % d. Th.). Elementaranalyse: ber.: C 38.50 H 4.65 N 6,57 F 25,25 S 2.51 get: C 38.46 H 4.65 N 6.51 F 25.23 S 2,52
f) 6-N-[1,4,7-tris (carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl- pentanoyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan)-2-N -{[2,6-N,N -bis(1 -O-α-D carbonylmethyl-mannopyranose)]-L-lysyl}-L-lysin-[1-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex 9,98 g (15,84 mmol; 2.2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 38e) des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-1- methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 0,67 g wasserfreies Lithiumchlorid (15,84 mmol) werden bei 40 C° in 100 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1,82 g (15,84 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 9,19 g (7,19 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 38e), gelöst in 50 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 3,27 g ( 15,84 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und und dabei gleichzeitig von möglichen , noch vorhandenen niedermolekularen Bestandteilen , gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet Ausbeute: 11 ,85 g (87,2 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat. H20-Gehalt (Karl-Fischer): 5,54 % Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 38,12 H 4,64 N 8.15 F 20.38 S 1.70 Gd 8,32 get: C 38,16 H 4.59 N 8,18 F 20,37 S 1.68 Gd 8,28
Beispiel 39
a) 1 ,7-Bis(benzyloxycarbonyl)-4-(3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H- perf luortridecanoyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan
In eine Lösung von 10,75 g (24,4 mmol) 1,7-Bis-[benzyloxycarbonyl]-1,4,7,10- tetraazacyclododecan , gelöst in einem Gemisch aus 150 ml Tetrahydrofuran und 15 ml Chloroform, werden bei 0°C und unter Stickstoffatmosphäre 12,74 g (24,4 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 39g) , gelöst in 150 ml Tetrahydrofuran hinzugegeben. Anschließend gibt man bei 0°C insgesamt 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin] portionsweise hinzu und läßt über Nacht bei Raumtemperatur rühren und engt anschließend im Vakuum ein. Das verbleibende Öl wird wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 16:1). Man erhält 15,89 g (69,0 % d. Th., bezogen auf eingesetztes sec- Amin) des Monoamids sowie 3,8 g (8,8 % d. Th.) des Diamids als Nebenprodukt. Die Titelverbindung wird in Form eines farblosen Öls isoliert. Elementaranalyse: ber.: C 45,77 H 3,95 F 34,19 N 5,93 get: C 45,72 H 4.01 F 34,22 N 5,88
b) 1 ,7-Bis(benzyloxycarbonyl)-4-(3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H- perfluortridecanoyl)-10-[1-S-α-D-(2-carbonyl)-ethyl-2,3,4,6-tetra-O-acetyl- mannopyranose]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan
7,09 g (13,4 mmol) vom 3-(2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-1-thio-α-D-mannopyranosyl)- propionsäure-N-hydroxysuccinimidester (Darstellung gemäß: J. Haensler et al., Bioconjugate Chem.4, 85, (1993); Chipowsky, S., and Lee.Y.C (1973) , Synthesis of 1-thio-aldosides; Carbohydrate Research 31, 339-346 ) werden in 100 ml Dimethylformamid gelöst und bei 0°C mit einer auf 0°C vorgekühlten Lösung von 12,65 g (13,4 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 39a) , gelöst in 100 ml Dimethylformamid, tropfenweise versetzt. Man rührt 2 Stunden bei 0°C sowie 12 h bei Raumtemperatur. Zur Aufarbeitung zieht man das Lösungsmittel im Vakuum bis zur Trockne ab und chromatographiert den so erhaltenen Rückstand anschließend an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan /
Essigsäureethylester 20:1 ; die Durchführung der Chromatographie erfolgte unter Verwendung eines Solvensgradienten mit kontinuierlicher Zunahme des Essigsäureethylesteranteils). Ausbeute: 16,23 g ( 88,9 % d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen und stark viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 46.70 H 436 N 4.11 F 23,69 S 2,35 get: C 46,66 H 4.35 N 4.12 F 23,65 S 2,30
c) 1 -(3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecanoyl)-7-[1 -S-α-D-(2-carbonyl)- ethyl-2,3,4,6-tetra-0-acety l-mannopyranose]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan
In 150 ml Ethanol werden 15,0 g (11 ,0 mmol) der unter 39b) hergestellten Verbindung gelöst, mit 1,0 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt und solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm) hydriert, bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (zweimal mit jeweils 75 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses und farbloses Öl erhalten. Ausbeute: 11 ,56 g (96,0 % d. Th.). Elementaranalyse: ber.: C 40,59 H 4.33 N 5,12 F 29,50 S 2.93 get: C 40,63 H 4.35 N 5,11 F 29,52 S 2.92
d) 1 -(3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecanoyl)-7-[1 -S-α-D-(2-carbonyl)- ethyl-mannopyranose]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan
10,0 g (9,13 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 39c) werden 100 ml absolutem Methanol suspendiert und bei 5 °C mit einer katalytischen Menge Natriummethanolat versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 3h bei Raumtemperatur zeigt die Dünnschichtchromatographische Kontrolle (Eluent: Chloroform / Methanol 4:1) des Reaktionsverlaufs bereits quantitative Umsetzung an. Zum Zwecke der Aufarbeitung wird die nun klare Reaktionslösung durch Versetzen mit Amberlite IR 120 ( H+-Form )- Kationenaustauscherharz neutralisiert, vom Austauscher abgesaugt, mit Methanol nachgewaschen und das so erhaltene methanolische Filtrat im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der erhaltene ölige Rückstand wird durch Säulenchromatographie an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan / n- Hexan/Essigsäureethylester 15:20:1 ; die Durchführung der Chromatographie erfolgte unter Verwendung eines Solvensgradienten mit kontinuierlicher Zunahme des Essigsäureethylesteranteils) gereinigt.Nach 1H-NMR- spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung, konnte anhand der Größe der Kopplungskonstanten von Jιι = 0,9 Hz eindeutig auf das Vorliegen der α- Konfiguration am anomeren Zentrum der D-Mannopyranose geschlossen werden. Die vorliegende α -Konfiguration ist die am Anomeriezentrum ausschließlich vorliegende Konfiguration, d.h. die Menge an möglicherweise gebildetem und ß-konfiguriertem Anomeren der Titelverbindung liegt somit unterhalb der 1H-NMR-spektroskopischen Nachweisgrenze. Die oben genannte Titelverbindung wurde demnach nur in Form des reinen α-konfigurierten Anomeren dargestellt. Ausbeute: 8,28 g ( 98,0 % d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen und stark viskosen Öls. Elementaranalyse : ber.: C 37,59 H 4,24 N 6,05 F 34,85 S 3,46 get: C 37,57 H 4,28 N 6,02 F 34,85 S 3,44
e) 1 -(3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecanoyl)-7-[1 -S-α-D-(2- carbony l)-ethyl-mannopyranose]-4, 10-bis[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)- 10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)]-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan, Digadolinium-Komplex
Amid-Konjugat des 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecans mit[1 ,7-Bis- [Gadoliniumkomplex von 10-(4-Carboxy-1 -methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure] ; 3-(2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-1 -thio-α-D- mannopyranosyl)-propionsäure
2,48 g [(3,94 mmol); 4,4 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Diaminkomponente 39d)] des in der Patentanmeldung DE 197 28 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-1-methyl-2- oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 167 mg wasserfreies Lithiumchlorid (3,94 mmol) werden bei 40 C° in 40 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 453. mg (3,94 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 980 mg (0,895 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 19Ad), gelöst in 10 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 814 mg ( 3,946 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute: 1 ,32 g (69,1 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat. H20-Gehalt (Karl-Fischer): 7,65 % Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 37,43 H 4,45 N 9,12 F 15,02 S 1.49 Gd 14,63 get: C 37,42 H 4,50 N 9,18 F 15,07 S 1.51 Gd 14,58
f) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecansäure-t-butylester
25,0 g (53,8 mmol) 1H,1H,2H,2H-Perfluoro-1-decanol [kommerziell erhältlich bei der Firma Lancaster] werden in 250 ml absolutem Toluol gelöst und bei Raumtemperatur mit einer katalytischen Menge ( ca. 0,75 g ) Tetra-n-butyl- ammoniumhydrogensulfat versetzt. Anschließend gibt man bei 0°C insgesamt 7,55 g (134,6 mmol; 2,5 equ. Bezogen auf die eingesetzte Alkoholkomponente) fein gepulvertes Kaliumhydroxidpulver hinzu, gefolgt von 15,73 g (80,7 mmol; 1 ,5 equ. Bezogen auf die eingesetzte Alkoholkomponente) Bromessigsäure- tert.-butylester und lässt noch 2 Stunden bei 0°C nachrühren..Die so erhaltene Reaktionslösung wird für 12 h bei Raumtemperatur gerührt und zum Zwecke der Aufarbeitung wird mit insgesamt 500 ml Essigsäureethylester und 250 ml Wasser versetzt. Die org. Phase wird abgetrennt und zweimal mit Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und das Solvens im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/Hexan (1:10) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 26,3 g ( 84,6% d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl Elementaranalyse: ber.: C 33,23 H 2,61 F 55,85 gef.: C 33,29 H 2,61 F 55,90
g) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecancarbonsäure
20,0 g (34,58 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 39f) werden in 200 ml eines Gemisches, bestehend aus Methanol und 0,5 molarer Natronlauge im Verhältnis von 2:1 unter Rühren bei Raumtemperatur suspendiert und anschließend auf 60 °C erwärmt. Nach einer Reaktionszeit von 12 h bei 60 °C wird das nun klare Reaktionsgemisch zur Aufarbeitung durch Versetzen mit Amberlite IR 120 ( H+-Form )-Kationenaustauscherharz neutralisiert, vom Austauscher abgesaugt und das so erhaltene methanolisch-wässrige Filtrat im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der erhaltene amorph-ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/n-Hexan (1:3) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 16,0 g ( 88,6% d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl Elementaranalyse: ber.: C 27,60 H 1,35 F 61,85 get: C 27,58 H 1.36 F 61,90
Beispiel 40
a) 6-Benzyloxycarbonyl-2-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L- lysin-methylester Zu 8,0 g (24,4 mmol) ε-Carbonyloxybenzyl-L-lysinmethylester Hydrochlorid (kommerziell erhältlich bei der Firma Bachern), gelöst in einem Gemisch aus 150 ml Tetrahydrofuran ,15 ml Chloroform und 2,62 g (26,0 mmol) Triethylamin , werden bei 0°C und unter Stickstoffatmosphäre 16,18 g (27,0 mmol) 2-[N-Ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-aminoessigsäure (Darstellung gemäß: DE 19603033) , gelöst in 50 ml Tetrahydrofuran , tropfenweise hinzugegeben. Anschließend gibt man bei 0°C insgesamt 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2- Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin] portionsweise hinzu und * ässt über Nacht bei Raumtemperatur rühren. Man engt anschließend im Vakuum ein und chromatographiert das verbleibende Öl an Kieselgel (Laufmittel: n-Hexan / Isopropanol 15:1). Man erhält 17,0 g (79,6 % d. Th., bezogen auf eingesetztes prim.- Amin) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 38,41 H 3,45 F 36,89 N 4,80 S 3,66 get: C 38,42 H 3,47 F 36,92 N 4,87 S 3.64
b) 2-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin-methylester
In 200 ml Ethanol werden 15,0 g (20,23 mmol) der unter Beispiel 40a) hergestellten Verbindung gelöst, mit 800 mg Pearlman-Katalysator (Pd 20 % auf Aktivkohle) versetzt und bis zur Aufnahme der berechneten Menge Wasserstoff hydriert. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als farbloses Öl erhalten.
Ausbeute: 14,68 g (97,9 % d.Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 32,40 H 3.26 F 43,56 N 5,67 S 4,32 get: C 32,42 H 3,27 F 43,60 N 5,67 S 4,34
c) 6-(1 -0-α-D-carbonyImethyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose) 2-[2- (N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin-methylester In 500 ml trockenem Tetrahydrofuran werden 21,31 g (35,6 mmol) 1- Carboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-0-benzyl-α-D-mannopyranosid [ Darstellung wie in der Patentschrift DE 19728954 C1 beschrieben] sowie 3,60 g (35,6 mmol) Triethylamin gelöst. Nach dem Abkühlen der Reaktionslösung auf -15°C bis- 20°C tropft man bei dieser Temperatur unter Rühren eine Lösung von 4,92 g (35,6 mmol) Chlorameisensäureisobutylester in 75 ml trockenem Tetrahydrofuran langsam hinzu, wobei die Zutropfgeschwindigkeit so zu wählen ist, % äss eine Innentemperatur von -10°C nicht überschritten wird. Nach einer Reaktionszeit von 15 Minuten bei -15°C tropft man anschließend eine Lösung von 26,39 g (35,6 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 40b) und 3,60g ( 35,6 mmol) Triethylamin, in 100 ml trockenem Tetrahydrofuran bei -20°C langsam hinzu. Nach einer Reaktionszeit von einer Stunde bei -15°C sowie zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in 250 ml Essigsäure- ethylester aufgenommen und zweimal mit je 100 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 200 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/n-Hexan (1:10) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 38,12 g ( 81 ,0 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl
Elementaranalyse: ber.: C 49,92 H 3,92 N 2.53 F 29,18 S 2.90 get: C 49,99 H 4.11 N 2,69 F 29,22 S 3.01
d) 6-(1 -0-α-D-carbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose) 2-[2- (N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin
In 250 ml Methanol werden 27,65 g (20,92 mmol) der unter Beispiel 40c) hergestellten Verbindung gelöst. Man gibt dann die Lösung von 4,0 g (100,0 mmol) Natriumhydroxid in 10 ml destilliertem Wasser dazu und rührt 3 Stunden bei 50°C. Nach Kontrolle des Reaktionsverlaufes mittels Dünnschichtchromatographie ist die Methylesterverseifung bereits quantitativ erfolgt. Man engt im Vakuum zur Trockne ein und nimmt den verbliebenen Rückstand in 300 ml Essigsäureethylester auf und extrahiert die organische Phase zweimal mit je 100 ml verdünnter, wässriger Citronensäurelösung.Nach dem Trocknen über Natriumsulfat wird filtriert und im Vakuum zur Trockne eingeengt. Der erhaltene Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/Chloroform/lsopropanol 15:10:1). Man erhält 24,31g (88,9 % d. Th.,) der Titelverbindung in Form eines farblosen und viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 51,46 H 4,70 N 3,21 F 24,71 S 2,45 get: C 51.49 H 4,71 N 3.19 F 24,72 S 2,41
e) 6-(1-0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose) 2-[2-(N-ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin
20,0 g (15,30 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 40d) werden in einer Mischung .bestehend aus 250 ml 2-Propanol und 25 ml Wasser, gelöst und mit 1,0 g Palladiumkatalysator (10 % Pd auf Aktivkohle) versetzt. Man hydriert für 12 Stunden bei Raumtemperatur und einem Wasserstoffdruck von einer Atmosphäre. Es wird vom Katalysator abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 200 ml Methanol gelöst und das Reaktionsprodukt durch Versetzen mit insgesamt 800 ml Diethylether zur Fällung gebracht. Nach dem Absaugen des so erhaltenen Feststoffs wird dieser im Vakuum bei 50°C getrocknet
Ausbeute: 14,32 g (99,0 % d. Th.) eines amorphen Feststoffes.
Elementaranalyse: ber.: C 35,56 H 3,84 N 4.44 S 3,39 F 34,15 get: C 35,58 H 3,81 N 4.45 S 3,40 F 34,17
f) 6-(1-0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose) 2-[2-(N-ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin-N-{2-hydroxy-prop-3-yl-[1,4,7- tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-yl]}-amid, Gd- Komplex
7,48 g (7,91 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 40e) werden bei 40 °C in 50 ml Dimethylsulfoxid gelöst und es wird 1 ,00 g (8,70 mol) N-Hydroxysuccinimid hinzugegeben. Man kühlt auf 20°C ab und gibt 1,795 g (8,7 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid hinzu. Es wird eine Stunde bei 20°C und anschließend 4 Stunden bei 40°C gerührt. Anschließend tropft man bei dieser Temperatur innerhalb von 10 Minuten eine Lösung aus 4,53 g (7,91 mmol) des Gadolinium- Komplexes von 10-(2-Hydroxy-3-aminopropyl)-4,7, 10-tris(carboxymethyl)- 1,4,7,10-tetraazacyclododecanin [ zur Darstellung vergleiche: WO 97/02051] in 20 ml Dimethylsulfoxid hinzu. Man rührt eine Stunde bei 40°C, dann über Nacht bei Raumtemperatur. Die so erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute: 9,71 g (81 ,7 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat. H20-Gehalt (Karl-Fischer): 3,97 % Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 35,16 H 4,16 N 7,45 F 21.48 Gd 10,46 S 2,13 get: C 35,17 H 4.20 N7,42 F 21,49 Gd 10.48 S 2,09
Beispiel 41
a) 6-N-[1-0-α-D-(5-carbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose]- 2N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin-methylester
5,23 g (8,0 mmol) des in Beispiel 30c) beschriebenen 5-(Carboxy)pentyl- 2,3,4,6-tetra-0-benzyl-α-D-mannopyranosids,1,3 g (8,0 mmol) 1-Hydroxy- benzotriazol und 2,6 g (8,0 mmol) 2-(1H-Benzotriazol-1-yi)-1,1,3,3-tetramethyl- uronium tetrafluorborat (TBTU; Peboc Limited, UK) werden in 75 ml DMF gelöst und 15 Minuten gerührt. Diese Lösung wird anschließend mit 5,16 ml (30 mmol) N-Ethyldiisopropylamin und mit 5,93 g (8,0 mmol) des unter Beispiel 40b) beschriebenen Amins versetzt und 1 ,5 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Zur Aufarbeitung zieht man das Lösungsmittel im Vakuum bis zur Trockne ab und chromatographiert den so erhaltenen Rückstand anschließend an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan / Essigsäureethylester 30:1 ; die Durchführung der Chromatographie erfolgte unter Verwendung eines Solvensgradienten mit kontinuierlicher Zunahme des Essigsäureethylesteranteils). Ausbeute: 9,70 g ( 88,0 % d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen und stark viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 52,29 H 4.97 N 3,05 F 23,43 S 2.33 get: C 52,33 H 4.95 N 3.12 F 23,50 S 2,30
b) 6-N-[1 -0-α-D-(5-carbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl- mannopyranose]- 2N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L- lysin
In 150 ml Methanol werden 9,0 g (12,40 mmol) der unter Beispiel 41a) hergestellten Verbindung gelöst. Man gibt dann die Lösung von 2,48 g (62,0 mmol) Natriumhydroxid in 15 ml destilliertem Wasser dazu und rührt 3 Stunden bei 50°C. Nach Kontrolle des Reaktionsverlaufes mittels Dünnschichtchromatographie ist die Methylesterverseifung nach oben genannter Reaktionszeit bereits quantitativ erfolgt. Man engt im Vakuum zur Trockne ein und nimmt den verbliebenen Rückstand in 300 ml Essigsäureethylester auf und extrahiert die organische Phase zweimal mit je 100 ml verdünnter, wässriger Citronensäurelösung.Nach dem Trocknen über Natriumsulfat wird filtriert und im Vakuum zur Trockne eingeengt. Der erhaltene Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-
Hexan/Chloroform/Isopropanol 25:10:1). Man erhält 15,88 g (93,9 % d. Th.,) der Titelverbindung in Form eines farblosen und stark viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 51.95 H 4.88 N 3.08 F 23,67 S 2,35 get: C 51.99 H 4.91 N 3,09 F 23,70 S 2.33
c) 6-N-[1 -0-α-D-(5-carbonyl)-pentyl-mannopyranose]- 2N-[2-(N-ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin
13,0 g (9,52 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 41b) werden in einer Mischung bestehend aus 150 ml 2-Propanol und 25 ml Wasser gelöst und es werden 1,0 g des Palladiumkatalysators (10 % Pd auf Aktivkohle) hinzugegeben. Man hydriert für 12 Stunden bei 1 Atmosphäre Wasserstoffdruck und Raumtemperatur. Es wird vom Katalysator abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der erhaltene Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan / Chloroform / Isopropanol 15: 10: 1 ) . Man erhält 9,09 g (95,1 % d. Th.,) der Titelverbindung in Form eines farblosen und stark viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 37,10 H 4,22 N 4.19 F 32,18 S 3.10 get: C 37,09 H 4,21 N 4.19 F 32,20 S 3,13
d) 6-N-[1 -0-α-D-(5-carbonyl)-pentyl-mannopyranose]- 2N-[2-(N-ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin-N-{2-hydroxy-prop-3-yl-[1,4,7- tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-yl]}-amid, Gd- Komplex
7,93 g (7,91 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 41c) werden bei 40 °C in 75 ml Dimethylsulfoxid gelöst und es wird mit 1 ,00 g (8,70 mol) N- Hydroxysuccinimid versetzt. Man kühlt auf Raumtemperatur ab und gibt insgesamt 1 ,795 g (8,7 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid hinzu. Es wird eine Stunde bei 20°C und anschließend 4 Stunden bei 40°C gerührt. Zu dieser Lösung des Aktivesters der Titelverbindung aus Beispiel 41c) tropft man anschließend bei 40°C innerhalb von 10 Minuten eine Lösung , bestehend aus 4,53 g (7,91 mmol) des Gadolinium-Komplexes von 10-(2-Hydroxy-3- aminopropyl)-4,7,10-tris(carboxymethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecanin [ zur Darstellung vergleiche: WO 97/02051], in 20 ml Dimethylsulfoxid hinzu. Man rührt eine Stunde bei 40°C, dann über Nacht bei Raumtemperatur. Die so erhaltene Suspension wird anschließend mit der ausreichenden Menge eines Gemisches aus Aceton / 2-Propanol ( 2:1) bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, mit Essigsäureethylester nachgewaschen, getrocknet, in Wasser aufgenommen, vom unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet
Ausbeute: 9,71 g (78,8 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat. H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 6,65 % Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 36,97 H 4,52 N 7.19 F 20,71 Gd 10,08 S 2,06 get: C 37,02 H 4,50 N 7,22 F 20,69 Gd 10.08 S 2,09
Beispiel 42
a) 6-N-{4-[2,3-Bis-(N,N-bis(t-butyloxycarbonylmethyl)-amino)-propyl]-phenyl}-3- oxa-propionyl-2-N-(1 -α-D-carbonylmethyl-mannopyranose) L-Iysin-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
5,25 g (7,72 mmol) des Tetra-t.bu-esters der 'Tyr-EDTA-Carbonsäure" und 781 mg (7,72 mmol) Triethylamin werden in 50 ml Methylenchlorid gelöst. Bei -15°C tropft man eine Lösung aus 1,16 g (8,5 mmol) Chlorameisensäureisobutylester in 10 ml Methylchlorid innerhalb 5 Minuten hinzu und rührt noch weitere 20 Minuten bei -15°C. Anschließend kühlt man die Lösung auf -25°C ab und tropft eine Lösung , bestehend aus 7,07 g (7,72 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 30e) und 2,12 g (21 ,0 mmol) Triethylamin, in 70 ml Tetrahydrofuran innerhalb von 30 Minuten hinzu und rührt im Anschluß noch 30 Minuten bei - 15° C und anschließend noch über Nacht bei Raumtemperatur nach. Zur Aufarbeitung wird das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und der verbleibende ölige Rückstand in 250 ml Chloroform aufgenommen. Man extrahiert die Chloroformphase zweimal mit je 100 ml einer 10 %igen wässrigen Ammoniumchlorid-Lösung, trocknet die organische Phase über Magnesium- sulfat und dampft im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Ethanol= 20:1). Ausbeute: 9,60 g (79,0 % d. Th.) eines farblosen und sehr zähen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 46,39 H 5,55 N 5,32 F 20,45 S 2,03 get: C 46,42 H 5,51 N 5,29 F 20,49 S 2,09
b) 6-N-{4-[2,3-Bis-(N,N-bis(caboxymethyl)-amino)-propyl]-phenyl}-3-oxa- propionyl-2-N-(1 -α-D-carbonylmethyl-mannopyranose) L-Iysin-[1 -(4- ρerfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In 150 ml Methanol werden 9,0 g (5,70 mmol) der unter Beispiel 42a) hergestellten Verbindung gelöst. Man gibt dann die Lösung von 4,0 g (100,0 mmol) Natriumhydroxid in 25 ml destilliertem Wasser dazu und rührt 6 Stunden bei 60°C. Nach Kontrolle des Reaktionsverlaufes mittels Dünnschichtchromatographie ist die Verseifung des tetra-t.-butylesters nach oben genannter Reaktionszeit bereits quantitativ erfolgt. Man engt im Vakuum zur Trockne ein und nimmt den verbliebenen Rückstand in 50 ml Dimethylsulfoxid in der Wärme auf und anschließend wird mit der ausreichenden Menge eines Gemisches aus Aceton / Essigsäureethylester (1:1) bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der so erhaltene Niederschlag abgesaugt, mit Essigsäureethylester gut nachgewaschen, getrocknet, in Wasser aufgenommen, der pH-Wert der Produktlösung mittels 1 molarer Salzsäure auf 3,5 eingestellt, von möglicherweise vorliegenden unlöslichen Bestandteilen abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off: 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute: 6,76 g (87,6 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat H20-Gehalt (Karl-Fischer): 3,30 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 39,89 H 4,09 N 6,20 F 23,84 S 2,37 get: C 39,92 H 4,15 N 6,22 F 23,92 S 2,29
c) 6-N-{4-[2,3-Bis-(N,N-bis(carboxylatomethyl)-amino)-propyl]-phenyl}-3-oxa- propionyl-2-N-(1 -α-D-carbonylmethyl-mannopyranose) L-Iysin-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Mn-Komplex, Dinatriumsalz
3,0 g (2,22 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 42b) werden in 150 ml eines Wasser/Ethanol (3:1)-Gemisch in der Siedehitze gelöst und bei 80°C portionweise mit 0,25 g (2,22 mmol) Mangan-ll-carbonat versetzt. Anschließend wird die so erhaltene Reaktionslösung für 5 Stunden unter Rückfluß gekocht. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird das Lösungsmittelgemisch im Vakuum vollständig abgezogen und der verbleibende Rückstand in einem Gemisch aus 200 ml destilliertem Wasser /n-Butanol (1:1) gelöst Unter kräftigem Rühren wird durch Versetzen mit 1 N Natronlauge ein pH-Wert von 7,2 eingestellt. Nach dem vollständigen Abziehen des n-Butanols im Vakuum wird die verbleibende wässrige Phase über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute: 3,19 g (99,0 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 5,08 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 37,23 H 3,54 F22.25 Mn 3,78 N 5,79 Na 3,17 S 2,21 get: C 37,30 H 3,49 F 22,29 Mn 3,81 N 5,76 Na 3,19 S 2.18
Beispiel 43
a) 3-Benzyloxycarbonylamino-glutarsäure-[1-(4-ρerfluoroctylsulfonyl)-piperazin]- monoamid Eine gerührte Lösung von 25,0 g ( 94,96 mmol) 3 -N-(Benzyloxcarbonyl)- glutarsäure-anhydrid [ Synthese gemäß : Hatanaka, Minoru; Yamamoto, Yu-ichi; Nitta, Hajime; Ishimaru, Toshiyasu; TELEAY; Tetrahedron Lett; EN; 22; 39; 1981; 3883-3886;] in 150 ml absolutem Tetrahydrofuran wird unter Rührem mit einer Lösung von 53,97 g (95,0 mmol) 1 -Perfluoroctylsulfonylpiperazin in 150 ml Tetrahydrofuran tropfenweise versetzt und die so erhaltene Reaktionslösung für 12 h am Rückfluss gekocht. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird bis zur Trockne eingeengt und der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Dichlormethan /2-Propanol (20:1) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 75,80 g (96,0% d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines farblosen und viskosen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 36,11 H 2.67 N 5.05 S 3,86 F 38,84 get: C 36,12 H 2,61 N 5,08 S 3,88 F 38,82
b) 3-Amino-glutarsäure-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-monoamid
In 300 ml Ethanol werden 31 ,50 g (37,88 mmol) der unter 43b) hergestellten Verbindung gelöst, mit 2,5g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt und bis zur quantitativen Aufnahme von Wasserstoff bei 1 Atmosphäre Wasserstoffdruck hydriert. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht mit Ethanol nach und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als weißlich-gelbes, viskoses Öl erhalten. Ausbeute: 25,22 g (95,5 % d. Th.) Elementaranalyse: ber.: C 29,28 H 2,31 N 6,03 S 4,06 F 46,31 get: C 29,32 H 2,29 N 6,08 S 4,08 F 46,28
c) 3-N-(1-α-D-carbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose)- glutarsäure-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-monoamid 21,52 g (18,96 mmol) 1-Carboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-0-benzyl-α-D- mannopyranosid [ Darstellung wie in der Patentschrift DE 19728 954 C1 beschrieben] werden bei Raumtemperatur in 100 ml absolutem Dimethylformamid gelöst und bei 0 °C mit 2,56 g (22,2 mmol) N- Hydroxysuccinimid, gefolgt von 4,55 g (22,2 mmol) Dicyclohexylcarbodimid versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 60 Minuten bei 0 °C und 3 Stunden bei 22 °C filtriert man vom unlöslichen Dicyclohexylharnstoff ab und tropft die so erhaltene klare Aktivesterlösung der oben genannten Titelverbindung bei 0 °C langsam zu einer gerührten Lösung von 13,22 g (18,96 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43b) . gelöst in 100 ml Dimethylformamid. Nach einer
Reaktionszeit von 12 Stunden bei Raumtemperatur wird das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und der der verbleibende Rückstand in 300 ml Essigsäureethylester aufgenommen, es wird vom Harnstoff abfiltriert und das organische Filtrat zweimal mit je 100 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonat- lösung sowie einmal mit 100 ml 10%iger wässriger Citronensäurelösung und einmal mit 200 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/ n-Hexan (1:15) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 21,39 g ( 88,3 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl .
Elementaranalyse: ber.: C 49,81 H 4.10 N 3,29 F 25,27 S 2,51 get: C 49,89 H 4,11 N 3.32 F 25,22 S 2.51
d) 3-N-(1 -α-D-carbonylmethyl-mannopyranose)-glutarsäure-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-monoamid
19,55 g (15,30 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 43c) werden in einer Mischung .bestehend aus 250 ml 2-Propanol und 25 ml Wasser, gelöst und mit 1,5 g Palladiumkatalysator (10 % Pd auf Aktivkohle) versetzt. Man hydriert für 12 Stunden bei Raumtemperatur und einem Wasserstoffdruck von einer Atmosphäre. Es wird vom Katalysator abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zur
Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 200 ml Methanol gelöst und das
Reaktionsprodukt durch Versetzen mit insgesamt 800 ml Diethylether zur
Fällung gebracht. Nach dem Absaugen des so erhaltenen Feststoffs wird dieser im Vakuum bei 40°C getrocknet.
Ausbeute: 17,49 g (97,5 % d. Th.) eines amorphen Feststoffes.
Elementaranalyse: ber.: C 32,73 H 3,08 N 4,58 S 3,49 F 35,20 get: C 32,68 H 3,15 N 4,55 S 3,50 F 35,17
e) 3-N-(1 -α-D-carbonylmethyl-mannopyranose)-glutarsäure-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid-5-N-{2-hydroxy-prop-3-yl-[1,4,7- tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-yl]}-amid, Gd- Komplex
14,43 g (15,84 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 43d) und 0,67 g wasserfreies Lithiumchlorid (15,84 mmol) werden bei 40 C° in 100 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1,82 g (15,84 mmol) N-Hydroxysuccinimid und einer Lösung von 9,08 g (15,84 mmol) des Gadolinium-Komplexes von 10-(2-Hydroxy-3-aminopropyl)-4,7,10- tris(carboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyclododecanin [ zur Darstellung vergleiche: WO 97/02051], in 50 ml Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 3,27 g ( 15,84 mmol) N,N*-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und und dabei gleichzeitig von möglichen , noch vorhandenen niedermolekularen Bestandteilen , gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 18,71g (80,2 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat. H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 4,87 % .
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 34,24 H 3.83 N 7,61 F 21,92 S 2.18 Gd 10,67 get:- C 34,26 H 3.79 N 7.58 F 21,87 S 2,18 Gd 10,68
Beispiel 44
a) 1 ,7,-Bis(benzyloxycarbonyl)-4-{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 - (4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid}-10-[2,6-N,N*-bis(1 -O-α-D- carbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose)]-L-lysyl-1 ,4,7, 10- tetraazacyclododecan
In eine Lösung aus 27,0 g (24,4 mmol) des unter Beispiel 35a) hergestellten sec. Amins, in einem Gemisch aus 150 ml Tetrahydrofuran und 15 ml
Chloroform, werden bei 0°C und unter Stickstoffatmosphäre 33,04g (25,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 18c) , gelöst in 250 ml Tetrahydrofuran hinzugegeben.Anschließend gibt man bei 0°C insgesamt 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin] portionsweise hinzu und ' ässt über Nacht bei Raumtemperatur rühren . Man engt anschließend im Vakuum zur Trockne ein und das verbleibende Öl wird wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 25:1). Man erhält 45,87 g (78,0 % d. Th., bezogen auf eingesetztes sec- Amin) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 59,30 H 5.39 F 13,40 N 4,65 S 1.33 get: C 59,32 H 5,37 F 13,37 N 4,70 S 1,34
b) 1 -{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid}-7-[2,6-N,N'-bis(1-0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose)]-
L-lysyl-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan In 250 ml Ethanol werden 24,1 g (10,0 mmol) der unter Beispiel 44a) hergestellten Titelverbindung gelöst und mit 1 ,4 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt. Man hydriert bis zur quantitativen Aufnahme an Wasserstoff, saugt dann vom Katalysator ab, wäscht mit Ethanol gut nach und engt im Vakuum zur Trockne ein. Das Produkt wird als gelblich gefärbtes und äusserst viskoses Öl erhalten. Ausbeute: 12,80 g (90,1 % d. Th.) . Elementaranalyse: ber.: C 39,72 H 4,89 F 22,73 N 7,88 S 2.26 get: C 39,72 H 4.87 F 22,77 N 7,90 S 2.24
c) 1 -{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid}-7-[2,6-N,N,-bis(1-0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose)]-L- lysyl-4, 10-bis[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl- pentanoyl)]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan, Digadolinium-Komplex
5,54 g [8,8 mmol; 2.2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 44b) ] des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy- 1 -methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und wasserfreies Lithiumchlorid ( 0,37 g , 8,8 mmol) werden bei 40 C° in 60 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1 ,01 g (8.8 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 5,68 g (4,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 44b), gelöst in 40 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 1,82 g ( 8,8 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 8,52g (80,6 % d. Th.; bezogen auf die eingesetzte
Diaminkomponente) als farbloses Lyophilisat.
H 0-Gehalt (Karl-Fischer): 6.09 % .
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 38,61 H 4,76 N 9,53 F 12,21 Gd 11.89 S 1,12 get: C 38,57 H 4,82 N 9,52 F 12,21 Gd 11,93 S 1,15
Beispiel 45
a) 1 ,7-Bis(benzyloxycarbonyl)-4-{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid}-10-{2,6-N,N'-bis(1-O-α-D-(5-carbonyl)- pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose)}-L-lysyl-1 ,4,7, 10- tetraazacyclododecan
In eine Lösung aus 27,0 g (24,4 mmol) des unter Beispiel 35a) hergestellten sec. Amins, in einem Gemisch aus 150 ml Tetrahydrofuran und 15 ml Chloroform, werden bei 0°C und unter Stickstoffatmosphäre 35,80 g (25,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 37e) , gelöst in 250 ml Tetrahydrofuran hinzugegeben.Anschließend gibt man bei 0°C insgesamt 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin] portionsweise hinzu und läßt über Nacht bei Raumtemperatur rühren . Man engt anschließend im Vakuum zur Trockne ein und das verbleibende Öl wird wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 20:1). Man erhält 49,48 g (80,4 % d. Th., bezogen auf eingesetztes sec- Amin) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 60,47 H 5,79 F 12,80 N 4,44 S 1,27 get: C 60,52 H 5,77 F 12,77 N 4,50 S 1.30 b) 1 -{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid}-7-[2,6-N,NN-bis(1-0-α-D-(5-carbonyl)-pentyI- mannopyranose)]-L-Jysyl-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan
In 250ml Ethanol werden 25,2 g (10,0 mmol) der unter Beispiel 45a) hergestellten Titelverbindung gelöst und mit 1 ,8 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt Man hydriert bis zur quantitativen Aufnahme an Wasserstoff, saugt dann vom Katalysator ab, wäscht mit Ethanol gut nach und engt im Vakuum zur Trockne ein. Das Produkt wird als gelblich gefärbtes und äusserst viskoses Öl erhalten.
Ausbeute: 14,11 g (92,5 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 49,60 H 7,20 F21.17 N 7,34 S 2.10 get: C 49,62 H 7.17 F 21,20 N 7,30 S 2.14
c) 1 -{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid}-7-[2,6-N,N'-bis(1-0-α-D-(5-carbonyl)-pentyl-mannopyraηose)]- L-lysyl-4,10-bis[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl- pentanoyl)]-1,4,7,10-tetraazacyclododecan,Digadolinium-Komplex
5,54 g [8,8 mmol; 2.2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 45b) ] des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy- 1 -methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und wasserfreies Lithiumchlorid ( 0,37 g , 8,8 mmol) werden bei 40 C° in 60 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1 ,01 g (8.8 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 6,10 g (4,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 45b), gelöst in 40 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 1,82 g ( 8,8 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute: 9,26 g (84,0 % d. Th.; bezogen auf die eingesetzte Diaminkomponente) als farbloses Lyophilisat H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 5,89 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 40,52 H 5,16 N 9,15 F 11,72 Gd 11.41 S 1,16 ge : C 40,57 H 5,20 N 9,12 F 11,69 Gd 11,43 S 1,18
Beispiel 46
a)6-N-t-Butyloxycarbonyl-2-N-benzyloxycarbonyl-L-lysin-[1-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
19,02 g (50,0 mmol) α-N-(Benzyloxycarbonyl)-ε-N'-(tert.butyloxycarbonyl)-L- lysin (kommerziell erhältlich bei der Firma Bachern) werden in 150ml absolutem Tetrahydrofuran gelöst. Man gibt 8,31 g (50,0 mmol) Carbonyldiimidazol und 5,o3g (50,0 mmol) Triethylamin, gelöst in 75 ml trockenem Tetrahydrofuran.bei 0°C tropfenweise hinzu und lässt 10 Minuten bei dieser Temperatur nachrühren. Anschließend tropft man eine Lösung von 48,42 g (50,0 mmol ) Perfluoroctylsulfonylpiperazin und 5,03 g (50,0 mmol) Triethylamin in 250 ml trockenem Tetrahydrofuran bei 0°C hinzu. Nach Rühren über Nacht zieht man das Tetrahydrofuran im Vakuum ab und das verbleibenden Öl wird wird an
Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan / lsopropanol 15:1). Man erhält 49,48 g (80,4 % d. Th., bezogen auf eingesetztes sec- Amin) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 40,01 H 3,79 N 6,02 F 34,70 S 3.45 get: C 40,07 H 3,82 N 6,02 F 34,67 S 3.48
b)6-N-t-Butyloxycarbonyl-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-ρiperazin]-amid 30,0g (32,2 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 46a) werden in 300ml Isopropanol gelöst und mit 1 ,5 g Pearlman-Katalysator (20%Palladiumhydroxid auf Kohle) versetzt.Man hydriert für 10 Stunden bei Raumtemperatur, wobei nach Kontrolle des Reaktionsverlaufes mittels Dünnschichtchromatographie die Hydrogenolytische Abspaltung der Benzyloxycarbonyl-Schutzgruppe nach der oben genannten Reaktionszeit bereits quantitativ erfolgt ist. Man filtriert vom Katalysator ab und engt das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein. Der verbliebene Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert. (Laufmittel:n-Hexan/lsopropanol 25:1). Man erhält 25,13g (98,0%d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 34,68 H 3,67 F 40,55 N 7,03 S 4.03 get: C 34,72 H 3,70 F 40,60 N 7,01 S 3,98
c) 6-N-t-Butyloxycarbonyl-2-N-[1-S-α-D-(2-carbonyl)-ethyl-2,3,4,6-tetra-0-acetyl- mannopyranose]-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In 300ml trockenem Tetrahydrofuran werden 15,53 g (35,60 mmol) der 3- (2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-1 -thio-α-D-mannopyranosyl)-propionsäure (Darstellung gemäß: J. Haensler etal., Bioconjugate Chem. 4,85 , (1993); Chipowsky,S.,and Lee.Y.C (1973),Synthesis of 1-thio-aldosides; Carbohydrate Research 31,339- 346 , sowie 3,60 g (35,60 mmol) Triethylamin gelöst. Nach dem Abkühlen der Reaktionslösung auf -15°C bis -20°C tropft man bei dieser Temperatur unter Rühren eine Lösung von 4,92g (35,60 mmol) Chlorameisensaureisobutylester in 75 ml trockenem Tetrahydrofuran langsam hinzu, wobei die Zutropfgeschwindigkeit so zu wählen ist, daß eine Innentemperatur von -10°C nicht überschritten wird.Nach einer Reaktionszeit von 15 Minuten bei -15°C tropft man anschließend eine Lösung von 28,35 g (35,60 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 42b) und 3,60 g (35,60 mmol) Triethylamin.in 200 ml trockenem Tetrahydrofuran bei 20°C langsam hinzu. Nach einer Reaktionszeit von einer Stunde bei -15°C sowie zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockene eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in 250 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 100 ml gesättigter
Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 200 ml Wasser gewaschen.
Nach dem trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von
Essigsäureethylester/ n-Hexan (1:25) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 34,21 g (79,1% d.Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl. Elementaranalyse: ber.: C 39,54 H 4,23 N 4,61 F 26,58 S 5.28 get: C 39,49 H 4,21 N 4.59 F 26,52 S 5,31
d) 6-N-t-Butyloxycarbonyl-2-N-[1-S-α-D-(2-carbonyl)-ethyl-mannopyranose]-L- lysin-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
29,93 g (24,64 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 46c) werden in 400 ml absolutem
Methanol suspendiert und bei 5 °C mit einer katalytischen Menge Natriummethanolat versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 3h bei
Raumtemperatur zeigt die dünnschichtchromatographische Kontrolle (Eluent: Chloroform/ Methanol = 9:1) des Reaktionsverlaufs bereits quantitative Umsetzung an. Zum Zwecke der Aufarbeitung wird die nun klare Reaktionslösung durch Versetzen mit Amberlite® IR 120 (H+-Form)- Kationenaustauscherharz neutralisiert, vom Austauscher abgesaugt und das so erhaltene methanolische Filtrat im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der erhaltene amorphe Rückstand wird durch Chromatographie an Kieselgel unter Verwendung von 2-Propanol/Essigsäureethylester/ n-Hexan (1:1:15) als Eluent gereinigt. Ausbeute: 23,42 g (90,8 % d.Th.) eines farblosen und viskosen Öls. Elementaranalyse : ber.: C 36,72 H 4,14 N 5,35 F 30,85 S 6.13 get: C 36,69 H 4,11 N 5,35 F 30,82 S 6.11 e) 2-N-[1 -S-α-D-(2-carbonyl)-ethyl-mannopyranose]-L-lysin-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
20,93 g (20,0 mmol) Titelverbindung aus Beispiel 46d) werden in einem
Gemisch aus 50 ml Trifluoressigsäure und 100 ml Dichlormethan bei 0°C unter kräftigem Rühren gelöst und für 10 Minuten bei dieser Temperatur gerührt. Anschließend dampft man im Vakuum zur Trockne ein und nimmt den Rückstand in 150 ml Wasser auf. Der pH-Wert dieser wässrigen Produktlösung wird durch die tropfenweise Zugabe von 2 molarer wässriger Natronlauge auf 9,5 eingestellt Die wässrige Produktlösung wird über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off : 3000 Da) entsalzt und dabei gleichzeitig von möglichen, noch vorhandenen , niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute: 17,79 g (94,2 % d.Th.) des freien Amins als farbloses Lyophilisat. H20-Gehalt (Karl-Fischer): 3,09 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 34,26 H 3,73 N 5.92 F 34,12 S 6.77 get: C 34,26 H 3,79 N 5,88 F 34,07 S 6,80
f) 2-N-[1-S-α-D-(2-carbonyl)-ethyl-mannopyranose]-6-N-[1 ,4,7- tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan]-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gadolinium-Komplex
5,54 g [(8,8 mmol, 2,2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 46e)] des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-1- methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 0,37 g wasserfreies Lithiumchlorid (8,8 mmol) werden bei 40°C in 60 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1 ,01 g (8,8 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 3,78 g (4,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 46e), gelöst in 40 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 1,82 g (8,8 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet Ausbeute: 5,17 g (83,0 % d.Th.) als farbloses Lyophilisat. H20-Gehalt (Karl-Fischer): 4,43 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.:C 35,45 H 4,07 N 8,09 F20.72 Gd 10,09 S 4.11 gef.:C 35,50 H 4,01 N 8,12 F 20,6 Gd 10,13 S 4.14
Beispiel 47
a)' 6-N-Benzyloxycarbonyl-2-N-(1-0-ß-D-carbonyImethyl-2,3,4,6-tetra-0- benzylglucopyranose)- L-Iysin-[1 -(4-perf luoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
8,02 g (13,4 mmol) der in der Patentanmeldung DE 19728954 C1 unter Beispiel 46a) beschriebenen Titelverbindung [1-Carboxymethyloxy-2,3,4,6-tetra- O-benzyl-ß-D-glucopyranosid] und 3,24 g (28,14 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden in 100 ml Dimethylformamid gelöst und bei 0°C mit insgesamt 5,80 g (28,14 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid portionsweise versetzt. Es wird 3 Stunden bei dieser Temperatur nachgerührt. Zu der so hergestellten Aktivesterlösung gibt man eine auf 0°C gekühlte Lösung von 11 ,13 g (13,4 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c), gelöst in 50 ml Dimethylformamid, tropfenweise hinzu und rührt 2 Stunden bei 0°C sowie 12 Stunden bei Raumtemperatur. Zur Aufarbeitung filtriert man vom ausgefallenen Dicyclohexylharnstoff ab und zieht das Lösungsmittel anschließend bis zur Trockne ab. Der so erhaltene Rückstand wird anschließend an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/Ethanol, 20:1; die Durchführung der Chromatographie erfolgte unter Verwendung eines Solvensgradienten mit kontinuierlicher Zunahme des Ethanolgehalts).
Ausbeute: 12,67 g (67,0 % d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen und stark viskosen Öls. Elementaranalyse: ber.:C 52,77 H 4,50 N 3,97 F 22,89 S 2.27 get.C 52,75 H 4,61 N 3.98 F 22,94 S 2.26
b) 2-N-(1-0-ß-D-carbonylmethyl-glucopyranose)- L-lysin-[1-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In 100 ml Ethanol werden 11,52 g (8,17 mmol) der unter 47a) hergestellten
Verbindung gelöst, mit 0,5 g Pearlman-Katalysator (Pd 20% , C) versetzt und solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm) hydriert, bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (dreimal mit jeweils ca.
40ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses und farbloses Öl erhalten. Ausbeute: 7,36 g (98,4 % d.Th.) .
Elementaranalyse: ber.:C 34,07 H 3,63 N 6,11 F 35,24 S 3,50 gef. :C 34,11 H 3,59 N 6.08 F 35,23 S 3.52
c) 2-N-(1-0-ß-D-carbonylmethyl-glucopyranose)-6-N-[1,4,7- tris(carboxylatomethyl)-10-(aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan]- L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]- amid, Gd-Komplex
9,98 g [(15,84 mmol; 2,2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte
Aminkomponente aus Beispiel 47b)] des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-1- methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 0,67 g (15,84 mmol) wasserfreies Lithiumchlorid werden bei 40°C in 80 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1 ,82 g (15,84 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 7,25 g (7,19 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 47b), gelöst in 30 ml absolutem Dimethylsulfoxid.versetzt Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 3,27 g (15,84 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off :3000Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute: 9,11 g (83,0 %d.Th.) als farbloses Lyophilisat H20-Gehalt (nach Karl-Fischer) : 4,02 % .
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber. C 35,37 H 4,02 N 8,25 F 21,13 S 2,10 Gd 10,29 get:C 35,42 H 4.07 N 8.18 F 21,09 S 2,06 Gd 10,34
Beispiel 48
a) 2-N-Trifluoracetyl-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In 100 ml Ethanol werden 10,0 g (11 ,46 mmol) der unter 21b) hergestellten Verbindung gelöst, mit 1 ,0 g Peariman- Katalysator (Pd 20% / C) versetzt und bis zur quantitativen Aufnahme an Wasserstoff hydriert. Man saugt vom
Katalysator ab, wäscht mit Ethanol nach und engt im Vakuum zur Trockne ein.
Die Titelverbindung wird als zähes und farbloses Öl erhalten. Ausbeute: 8,85 g
(97,5 %d.Th.). Elementaranalyse: ber.: C 30,31 H 2.54 N 7.07 F 47,95 S 4.05 get: C 30,36 H 2.50 N 7,11 F 47,99 S 4,00 b) 2-N-Trifluoracetyl-6-N-[1-0-α-D-(5-carbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl- mannopyranose]-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In eine auf 0°C gekühlte Lösung aus 29,0 g (36,6 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 48a) und 4,05 g (40,26 mmol) Triethylamin in 100 ml Dimethylformamid tropft man eine Lösung von 27,51 g (36,6 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 37c) in 150ml Dimethylformamid hinzu. Nach beendeter Zugabe rührt man noch eine Stunde bei 0°C nach und dann über Nacht bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand in 300 ml Essigsäureethylester aufgenommen. Man filtriert von unlöslichen Bestandteilen ab und wäscht das Filtrat zweimal mit je 100 ml 5%iger wässriger Soda-Lösung. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/ Isopropanol 25:1 ). Man erhält 42,05 g (80,4 % d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 50,42 H 4.51 N 7,96 F 26,59 S 2.24 get: C 50,38 H 4,50 N 7,91 F 26,62 S 2,20
c) 6-N-[1-0-α-D-(5-Carbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranose]-L- lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In 150ml Ethanol werden 20,0 g (14,0 mmol) der unter Beispiel 48b) hergestellten Verbindung gelöst. Man gibt dann die Lösung von 2,8 g (70,0 mmol) Natriumhydroxid in 25 ml destilliertem Wasser dazu und rührt 0,5 Stunden bei 50°C. Nach dem Dünnschichtchromatogramm ist die Schutzgruppenabspaltung zu diesem Zeitpunkt bereits quantitativ erfolgt. Man engt im Vakuum zur Trockene ein und entfernt Spuren von Wasser durch mehrmaliges Kodestillieren mit Ethanol. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/ Isopropanol 20:1). Man erhält 16,66 g (89,3% d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 52,25 H 4,91 N 4,20 F 24,22 S 2.41 get: C 52,30 H 4,90 N 4.18 F 24,22 S 2,38
d) 6-N-[1 -0-α-D-(5-Carbonyl)-pentyl-mannopyranose]-L-lysin-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In 150 ml eines 10:1 Gemisches aus Ethanol und Wasser werden 15,0 g (11,25 mmol) der unter 48c) hergestellten Verbindung gelöst und mit 1 ,0 g Pearlman- Katalysator (Pd 20% / C) versetzt . Anschließend wird bis zur quantitativen Aufnahme an Wasserstoff bei Raumtemperatur und unter einer Atmosphäre Wasserstoffdruck hydriert . Man saugt vom Katalysator ab, wäscht mit Ethanol/Wasser (10:1) nach und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als zähes und farbloses Öl erhalten. Ausbeute: 10,77 g (98,4 %d.Th.). Elementaranalyse: ber.: C 37,04 H 4,25 N 5,76 F 33,20 S 3.30 get: C 37,06 H 4,20 N 5,81 F 33,19 S 3,30
e) 6-N-[1-0-α-D-(5-Carbonyl)-pentyl-mannopyranose]-2-N-[1 ,4,7- tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan]-L-lysin-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd- Komplex
5,54 g [(8,8 mmol; 2,2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 48d)] des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-1- methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 0,37 g (8,8 mmol) wasserfreies Lithiumchlorid werden bei 40° C in 60 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1,01 g (8,8 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 3,89 g (4,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 48d), gelöst in 60ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 1,82 g (8,8 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Utrafiltrationsmembran (cut off : 3000Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 4,81 g (75,9 %d.Th.) als farbloses Lyophilisat. H20-Gehalt (Karl-Fischer): 8,98 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 37,15 H 4,39 N 7.96 F 20,38 Gd 9,92 S 2.02 get: C 37,27 H 4,40 N 8,02 F 20,31 Gd 10.00 S 1.98
Beispiel 49
a) 1 ,7-Bis(benzyloxycarbonyl)-4-(1 -0-ß-D-carbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-0- benzyl-galactopyranose)-10-{3-oxa-pentan-1 ,5-dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid}-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan
In eine Lösung aus 27,0 g (24,4 mmol) des unter Beispiel 35a) hergestellten sec. Amins, in einem Gemisch aus 150 ml Tetrahydrofuran und 15 ml Chloroform, werden bei 0°C und unter Stickstoffatmosphäre 35,80 g (25,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 37e) , gelöst in 250 ml Tetrahydrofuran, hinzugegeben.Anschließend gibt man bei 0°C insgesamt 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-Ethoxy-1 -ethoxycarbonyl-1 ,2-dihydrochinolin] portionsweise hinzu und läßt über Nacht bei Raumtemperatur rühren . Man engt anschließend im Vakuum zur Trockene ein und das verbleibende Öl wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/lsopropanol 20:1). Man erhält 32,11 g (78,0 % d. Th. , bezogen auf eingesetztes sec- Amin) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 54,09 H 4,72 F 19,14 N 4,98 S 1.90 get: C 54,12 H 4.77 F 19,17 N 5,03 S 1,90 b) 1 -(1 -0-ß-D-carbonylmethyl-galactopyranose)-7-{3-oxa-pentan-1 ,5- dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid}-1 ,4,7, 10- tetraazacyclododecan
In 250 ml Ethanol werden 30,0 g (17,77 mmol) der unter Beispiel 49a) hergestellten Titelverbindung gelöst und mit 3,0 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, / C) versetzt. Man hydriert bis zur quantitativen Aufnahme an Wasserstoff, saugt dann vom Katalysator ab, wäscht mit Ethanol gut nach und engt im Vakuum zur Trockene ein. Das Produkt wird als gelblich gefärbtes und äusserst viskoses Öl erhalten.
Ausbeute: 17,89 g (95,1 % d. Th.) .
Elementaranalyse: ber.: C 36,30 H 4.09 F 30,50 N 7,94 S 3,03 get: C 36,26 H 4,12 F 30,46 N 7,90 S 3,04
c) 1 -(1 -0-ß-D-carbonylmethyl-galactopyranose)-7-{3-oxa-pentan-1 ,5- dicarbonsäure-1 -oyl-5-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid}-4,10- bis[1,4,7-tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)-
1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, di-Gadolinium- Komplex
5,54 g [8,8 mmol; 4,4 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 49b) ] des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy- 1 -methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 0,37 g ( 8,8 mmol) wasserfreies Lithiumchlorid werden bei 40 C° in 60 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1 ,01 g (8.8 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 2,11 g (2,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 49b), gelöst in 25 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 1 ,82 g ( 8,8 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen , von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off : 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet. Ausbeute: 3,29 g (72,2 % d. Th.; bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente) als farbloses Lyophilisat. H20-Gehalt (Karl-Fischer): 5,99 % . Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 36,84 H 4,37 N 9,82 F 14,15 Gd 19,63 S 1,40 get: C 36,87 H 4,40 N 9,82 F 14,09 Gd 19,59 S 1,38
Beispiel 50
a) 3-(1-0-α-D-2,3,4,6-Tetra-0-benzyl-mannopyranose)-2-N-benzyloxycarbonyI- L-serin-methylester
In 500 ml trockenem Acetonitril werden 21 ,42 g (39,61 mmol) 2,3,4,6-Tetra-O- benzyl- α-D-mannopyranose (Darstellung gemäß: F. Kong et al., J. Carbohydr. Chem. ; 16; 6 ; 1997 ; 877-890 ) gelöst. Nach dem Abkühlen der Reaktionslösung auf 5°C tropft man bei dieser Temperatur unter Rühren langsam eine Lösung von 13,23 g (59,52 mmol) Trifluormethansulfonsäure- trimethylsilylester in 30 ml Acetonitril , gefolgt von einer Lösung aus 20,06 g (79,21 mmol) N-Benzyloxycarbonyl-L-serinmethylester ( kommerziell erhältlichbei der Firma Bachern) in 50 ml Acetonitril , hinzu , wobei die Zutropfgeschwindigkeit so zu wählen ist, daß eine Innentemperatur von 10°C nicht überschritten wird. Nach einer Reaktionszeit von 15 Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in 250 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 100 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 200 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester / n- Hexan (1 :5) als Eluent gereinigt Ausbeute: 23,60 g (76,8 % d.Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses Öl. Elementaranalyse: ber.: C 71,21 H 6,37 N 1.81 get: C 71,19 H 6,41 N 1,79
b) 3-(1-0-α-D-2,3,4,6-Tetra-0-benzyl-mannopyranose)-2-N-benzyloxycarbonyl- L-serin
In einem Gemisch bestehen aus 20 ml Methanol, 20 ml Wasser und 50 ml Tetrahydrofuran werden 10,0 g (12,90 mmol) der unter Beispiel 50a) hergestellten Verbindung gelöst. Man gibt dann 0,47 g (19,35 mmol) Lithiumhydroxid, gelöst in in 25 ml destilliertem Wasser, bei Raumtemperatur hinzu und rührt anschließend für 6 Stunden bei 60°C. Nach Kontrolle des Reaktionsverlaufes mittels Dünnschichtchromatographie (Eluent: Methylenchlorid / Methanol 10:1) ist die Verseif ung des Methylesters aus Beispiel 30a) nach oben genannter Reaktionszeit bereits quantitativ erfolgt . Zum Zwecke der Aufarbeitung engt man die Produktlösung im Vakuum zur Trockne ein und nimmt den verbleibenden Rückstand in 250 ml Essigsäureethylester in der Wärme auf (ca. 60°C). Anschließend wird die so erhaltene Essigsäureethylesterphase zweimal mit jeweils 50 ml einer 15 %igen wässrigen Salzsäure gewaschen , sowie einmal mit 100 ml destilliertem Wasser. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/ Essigsäureethylester 5:1). Man erhält 8,40 g (85,7 % d.Th.) der Titelverbindung in Form eines farblosen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 70,94 H 6,22 N 1,84 get: C 70,97 H 6,30 N 1.78 c) 3-(1-0-α-D-2,3,4,6-Tetra-0-benzyl-mannopyranose-2-N-benzyloxycarbonyl- L-serin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)piperazin]-amid
Zu 13,86 g (24,40 mmol) 1- Perfluoroctylsulfonylpiperazin (hergestellt nach DE 19603033 ) , gelöst in einem Gemisch aus 150 ml Tetrahydrofuran und 15 ml Chloroform , werden bei 0°C und unter Stickstoffatmosphäre 20,57 g (27,0 mmol) der nach Beispiel 50b) dargestellten Carbonsäure, gelöst in 50 ml Tetrahydrofuran , tropfenweise hinzugegeben. Anschließend gibt man bei 0°C insgesamt 18,0 g (36,60 mmol) EEDQ [2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1 ,2- dihydrochinolin] portionsweise hinzu und läßt über Nacht bei Raumtemperatur rühren. Zum Zwecke der Aufarbeitung engt man die Reaktionslösung im Vakuum ein und chromatographiert das zurückbleibende , äußerst viskose Öl an Kieselgel unter Verwendung eines n-Hexan / Isopropanol (15:1) — Gemisches als Eluentsystem. Man erhält 17,0 g (79,6 % d. Th., bezogen auf eingesetztes prim.- Amin) der Titelverbindung in Form eines farblosenund viskosen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 51,53 H 4,23 N 3,15 F 25,65 S 2,41 get: C 51,48 H 4,27 N 3.10 F 25,71 S 2,35
d) 3-(1 -0-α-D-Mannopyranose)-L-serin-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)piperazin]- amid
In 200 ml Ethanol werden 15,0 g (11 ,41 mmol) der gemäß Beispiel 50c) dargestellten Verbindung gelöst und mit 1 ,5 g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt . Anschließend wird die Reaktionslösung solange bei
Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm) hydriert, bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist ( ca. 8 Stunden ). . Zum Zwecke der Aufarbeitung saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (zweimal mit je ca. 100 ml) und engt das produktenthaltende ethanolische Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses und farbloses Öl erhalten. Ausbeute: 8,79 g (94,0 % d. Th.). Elementaranalyse: ber.: C 30,78 H 3.20 N 5,13 F 39,41 S 3,91 get: C 30,87 H 3.14 N 5,19 F 39,50 S 3,88
e) 3-(1 -0-α-D-Mannopyranose)-2-N-[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4- oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan]-L-serin-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex
Eine gerührte Suspension von 5,7 g [9,06 mmol ; entsprechend 1 ,5 Molequivalenten bezüglich der eingesetzten Titelverbindung (primäres Amin) aus Beispiel 50d) ] des in der Patentanmeldung DE 19728954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-1 -methyl-2- oxo-3-azabutyl)-1, 4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure in 75 ml absolutem Dimethylsulfoxid wird bei 70°C mit 0,68 g (15,9 mmol) Lithiumchlorid versetzt. Nach 30 minütigem Rühren bei 70°C wird die nun klare Reaktionslösung portionsweise mit insgesamt 1,83 g (15,9 mmol) N-
Hydroxysuccinimid versetzt und das Reaktionsgemisch noch 1 Stunde bei 70 °C gehalten. Nach dem Abkühlen der Reaktionslösung auf 10°C wird mit 4,52 g (23,85 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und die Reaktionslösung noch 1 weitere Stunde bei 0°C, gefolgt von 12 Stunden bei 22°C, gerührt. Die so erhaltene Lösung des N-Hydroxysuccinimidesters des Gd-Komplexes der 10-(4- Carboxy-1 -methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7- triessigsäure wird nun bei 22°C tropfenweise mit einer Lösung von 4,94 g (6,03 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 30d) , in 15 ml absolutem Dimethylsulfoxid , versetzt und weitere 12 Stunden bei Raumtemperatur nachgerührt. Zur Aufarbeitung wird die Reaktionslösung bei 22°C in ein
Lösungsmittelgemisch , bestehend aus 250 ml Aceton und 250 ml 2-Propanol , langsam eingetropft, wobei sich die Titelverbindung nach 12 Stunden bei 10 °C vollständig als leicht gelblich gefärbtes Öl abgesetzt hat. Man dekantiert vorsichtig vom überstehenden Eluentgemisch ab und nimmt das ölige Produkt in 200 ml destilliertem Wasser auf, wobei dieses vollständig in Lösung geht, so daß eine leicht gelblich gefärbte wässrige Lösung der oben genannten Titelverbindung erhalten wird. Im Anschluß wird die wässrige Produktlösung zuerst über einen Membranfilter filtriert und danach , zum Zwecke des Entsalzens und der Abtrennung von niedermolekularen Bestandteilen , über eine YM3-Ultrafiltrationsmembran (AMICON ® ; cut off : 3000 Da) dreimal ultrafiltriert. Das so erhaltene Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 8,63 g (80,2 % d. Th., bezogen auf die eingesetzte Titelverbindung aus Beispiel 30d) als farbloses Lyophilisat mit einem Wassergehalt von 7,65
%.
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: 033,57 H 3,80 N 7,83 F 22,57 Gd 10,99 S 2,24 get: C 33,57 H 3,76 N 7.82 F 22,63 Gd 11,06 S 2,18
Beispiel 51
a) 6-N-Benzyloxycarbonyl-2-N-[0-ß-D-galactopyranosyl (1 →4)-gluconosyl]-L- lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu einer gerührten Lösung von 4,98 g (6,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c) in 40 ml absolutem Dimethylsulfoxid wird bei Raumtemperatur eine Lösung von 13,3 g (37,2 mmol ) 0-ß-D-Galactopyranosyl-(1 → 4)-D-glucono- 1,5-lacton [ Lactobionolacton ; Darstellung gemäß : (a) Williams, T.J.; Plessas, N.R., Goldstein, I.J. Carbohydr. Res. 1978, 67, Cl. (b) Kobayashi, K.; Sumitomo, H.; Ina, Y. Polym. J. 1985, 17, 567, (c) Hiromi Kitano.Katsuko Sohda, and Ayako Kosaka, Bioconjugate Chem. 1995, 6 131-134 ] in 40 ml absolutem Dimethylsulfoxid tropfenweise addiert. Die so erhaltene Reaktionslösung wird anschließend für 14 Stunden bei 40°C gerührt. Zur Aufarbeitung wird bei Raumtemperatur mit 500 ml absolutem 2-Propanol versetzt und der entstehende farblose Niederschlag mittels einer G4-Fritte abgesaugt und gut mit insgesamt 250 ml absolutem 2-Propanol nachgewaschen. Der so erhaltene Feststoff wird nun in 300 ml destilliertem Wasser gelöst und über eine YM3-
Ultrafiltrationsmembran (AMICON ® ;cut off : 3000 Da) insgesamt dreimal ultrafiltriert. Durch den dreimaligen Ultrafiltrationsvorgang werden sowohl die Überschüsse an Lactobionolacton als auch .möglicherweise noch vorhandene, niedermolekulare Bestandteile vom gewünschten Produkt abgetrennt. Der in der Ultrafiltrationsmembran verbleibende Rückstand wird im Anschluß vollständig in 300 ml destilliertem Wasser gelöst und gefriergetrocknet. Ausbeute: 6,51 g (92,7 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat Wassergehalt: 10,03 % Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 38,98 H 4.05 N 4,79 F 27,58 S 2,74 get: C 39,04 H 4,09 N 4,82 F 27,61 S 2,71
b) 2-N-[0-ß-D-galactopyranosyl (1→4)-gluconosyl]-L-lysin-[1-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In 100 ml Ethanol werden 5,0 g (4,27 mmol) der unter 51a) hergestellten Verbindung gelöst, mit 0,5g Pearlman-Katalysator (Pd 20 %, C) versetzt und bis zur quantitativen Aufnahme von Wasserstoff bei 1 Atmosphäre Wasserstoffdruck hydriert. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht mit Ethanol nach und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als farbloses und , viskoses Öl erhalten. Ausbeute: 4,36 g (98,5 % d. Th.). Elementaranalyse : ber.: 034,76 H 3.99 N 5.40 F 31,51 S 3,09 get: C 34,78 H 4,04 N 5,34 F 31.51 S 3,15
c) 2-N-[0-ß-D-galactopyranosyl (1→4)-gluconosyl]-6-N-[1,4,7- tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)-1 ,4,7, 10- tetraazacyclododecan]-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex
5,54 g [(8,8 mmol; 2,2 Molequivalente bezogen auf die eingesetzte Aminkomponente aus Beispiel 51b) ] des in der Patentanmeldung DE 19728 954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-1- methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 0,37 g (8,8 mmol) wasserfreies Lithiumchlorid werden bei 40° C in 60 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 1 ,01 g (8,8 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 3,85 g (4,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 31 Ab), gelöst in 60ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit 1,82 g (8,8 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton/2-Propanol (1 :1) bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt und der Niederschlag abgesaugt . Der so erhaltene Niederschlag wird im Anschluß in 300 ml Wasser aufgenommen und es wird vom unlöslichen Dicyclohexylharnstoff abfiltriert . Das Filtrat wird über eine AMICON® YM-3 Utrafiltrationsmembran (cut off : 3000Da) dreimal ultrafiltriert. Durch den durchgeführten dreimaligen Ultrafiltrationsvorgang werden sowohl die Überschüsse an Gd-Komplex als auch .möglicherweise noch vorhandene, niedermolekulare Bestandteile vom gewünschten Produkt abgetrennt. Der in der Ultrafiltrationsmembran verbleibende Rückstand wird im Anschluß vollständig in 500 ml destilliertem Wasser gelöst und gefriergetrocknet.
Ausbeute: 4,64 g (70,4 %d.Th.) als farbloses Lyophilisat.
H20-Gehalt (Karl-Fischer): 10,08 % .
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 35,70 H 4.22 N 7,65 F 19,59 Gd 9,54 S 1.95 get: C 35,77 H 4,17 N 7,71 F 19,61 Gd 9,60 S 1,99
Beispiel 52
a) 2-N-Trifluoracetyl-6-N-benzyloxycarbonyl-lysin
100 g (356,7 mmol ) 6-N-Benzyloxycarbonyl-lysin werden in einer Mischung aus 1000 ml Trifluoressigsäureethylester / 500 ml Ethanol gelöst und 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft zur Trockene ein und kristallisiert den Rückstand aus Diisopropylether.
Ausbeuten 28,9 g (96 % der Theorie ) eines farblosen kristallienen Pulvers.
Elementaranalyse: ber. C 51.07 H 5,09 F 15,14 N 7,44 ge C 51.25 H 5,18 F 15,03 N 7,58
b) 2-N-Trifluoracetyl-6-N-benzyloxycarbonyl-lysin- [1-(4-perfluoroctylsulfonyl ) piperazin]-amid
Zu 125 g ( 332 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 52a) und 188,7g ( 332 mmol ) 1-Perfluoroctylsulfonyl - piperazin , (hergestellt nach DE 19603033 ) in 800 ml Tetrahydrofuran, gibt man bei 0Q C 164,2 g ( 0,664 mmol ) EEDQ (2- Ethoxy-1 ,2-dihydrochinolin-1 -carbonsäureethylester ) zu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel : Dichlormethan / Methanol =20:1) Ausbeute: 286 g (93 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 36,30 H 2,83 F 41,01 N 6,05 S 3,46 get C 36,18 H 2,94 F 40,87 N 5,98 S 3,40
c) 6-N- Benzyloxycarbonyl- lysin - [1- ( 4- perfluoroctylsulfonyl )- piperazin] - amid
In eine Lösung aus 280 g ( 302,2 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 52b) in 2000 ml Ethanol, leitet man bei 09 C für eine Stunde Ammoniak-Gas ein. Man rührt anschließend 4 Stunden bei 0e C. Es wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand aus Wasser ausgerührt. Man filtriert den Feststoff ab und trocknet im Vakuum (509 C ). Ausbeute : 243,5 g ( 97 % der Theorie ) eines amorphen Feststoffs. Elementaranalyse:
ber. C 37,60 H 3,28 F 38,89 N 6,75 S 3,86 gef. C 37,15 H 3,33 F 38,78 N 6,68 S 3,81
d) 6-N- Benzyloxycarbonyl- 2-N- (3,6,9,12,15- pentaoxahexadecanoyl ) - lysin [1- (4- perfluoroctylsulfonyl ) - piperazin ] - amid
Zu 50 g (60,20 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 52c) und 7,10 g ( 70 mmol ) Triethylamin, gelöst in 350 ml Dichlormethan, tropft man bei 09 C eine Lösung aus 19,93 g ( 70 mmol ) 3,6,9,12,15 Pentaoxahexadecansäurechlorid [ dargestellt nach Liebigs Ann. Chem. (1980), (6), 852-62] in 50 ml Dichlormethan und rührt 3 Stunden bei 09 C. Man gibt 200 ml 5% ige aqu Salzsäure zu und rührt 5 Minuten bei Raumtemperatur. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert ( Laufmittel: Dichlormethan / Aceton = 15:1 Ausbeute: 53,7 g (93% der Theorie ) eines farblosen, zähen Öls.
Elementaranalyse:
ber. C 33,83 H 4,94 F 3,34 N 5,84 S 33,69 gef. C 33,75 H 5,05 F 3.29 N 5,78 S 33,75
e) 2-N-(3,6,9,12,15- pentaoxahexadecanoyl ) - lysin [1-(4- perfluoroctylsulfonyl ) -piperazin ] - amid 50 g ( 52,15 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 52d) werden in 500 ml Ethanol gelöst und 6 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. 5 Ausbeute: 43,0 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 27,68 H 5,01 F 39,17 N 6,79 S 3,89 gef. C 27,60 H 5,13 F 39,09 N 6,68 S 3,81
f) 6-N-[1 ,4,7-Tris (carboxylatomethyl) -1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan-10 -( pentanoyl- 3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ] - 2-N- (3,6,9,12,15- 15 pentaoxahexadecanoyl )-lysin [1-(4-perfluoroctylsulfonyl )-piperazin ]-amid, Gd- Komplex
20 g ( 24,25 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 52e), 2,79 g (24,25 mmol ) N- Hydroxysuccinimid, 2,12 g ( 50 mmol ) Lithiumchlorid und 15,27g (24,25
20 mmol ) 1 ,4,7-Tris ( carboxylatomethyl) - 10 -[ (3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ]- pentansäure]- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 200 ml Dimethylsulfoxid gelöst Bei 109 C gibt man 8,25 g ( 40 mmol ) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml
25 Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chomatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ).Ausbeute: 28,21 g (81 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 11,0 %
30
Elementaranalyse ( auf wasserfreie Substanz berechnet ) ber. C 31.78 H 4,84 F 22,49 N 8,78 S 2,23 Gd 10,95 get C 31.74 H 4,98 F 22,39 N 8,69 S 2,15 Gd 10,87
Beispiel 53
a) 6-N-[3,9 - Bis( t butyloxycarbonylmethyl )-3,6,9- triazaundecan -1,11- dicarbonsäure bis ( t butylester ) - 6- carbonylmethyl] -2-N- [3,6,9,12,15- pentaoxahexadecanoyl )- lysin- [ 1-( 4- perfluoroctylsulfonyl ) - piperazin] - amid
Zu einer Lösung aus 20 g ( 24,08 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 52e) , 14,88 g ( 24,08 mmol ) 3,9- bis ( t butyloxycarbonylmethyl - 3,6,9 - triazaundecan - 1 ,11 - dicarbonsäure - bis ( t butylester ) und 2,77 g (24,08 mmol ) N - Hydroxysuccinimid, gelöst in 150 ml Dimethylformamid, gibt man bei 0S C 8,25 g (40 mmol ) N,N- Dicyclohexylcarbodiimid zu. Man rührt 3 Stunden bei 09 C, anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chomatographiert am Kieselgel (Laufmittel: = Dichlormethan / Ethanol = 20:1 ). Ausbeute: 31,61 g ( 91% der Theorie ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse :
ber. C 40,80 H 6,71 F 22,39 N 6,80 S 2.22 gef. C 40,72 H 6,82 F 22,30 N 6,75 S 2,14 b) 6-N-[6- Carbonylmethyl - 3,9- bis (carboxylatomethyl )-3,6,9- triazaundecandicarbonsäure-1 -carboxy-11 -carboxylato-]-2-N-(3,6,9, 12,15- pentaoxahexadecanoyl)-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl) - piperazin]-amid, Gd- Komplex, Natriumsalz ,
30 g (20,8 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 53a) werden in 300 ml Trifluoressigsäure gelöst und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft zur Trockene ein, nimmt den Rückstand in 300 ml Wasser auf und stellt mit 10% iger aqu. NaOH auf einen pH Wert von 2,5. Anschließend gibt man 3,77 g (10,4 mmol ) Gadoliniumoxid zu und rührt 3 Stunden bei 609 C. Man läßt auf Raumtemperatur kommen und stellt mit Natronlauge auf einen pH Wert von 7,4. Es wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand an Kieselgel RP- 18 aufgereinigt (Laufmittel: Gradient aus Wasser / Acetonitril ). Ausbeute: 19,18 g ( 67% der Theorie ( eines farblosen, amorphen Feststoffs. Wassergehalt 9,8 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 28,80 H 4,25 F 23,47 N 7,12 S 2,33 Gd 11 ,48 Na 1 ,67 get C 28,67 H 4,34 F 23,38 N 7,03 S 2,27 Gd 11 ,37 Na 1 ,74
Beispiel 54
a) Lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl - piperazin ]-amid
20 g ( 24,08 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 52c) werden in 300 ml Ethanol gelöst und 4 g Palladium- Katalysator ( 10% Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 16,77 g ( quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse : ber. C 31.04 H 3,04 F 46,38 N 8,04 S 4.60 gef. C 30,97 H 3,15 F 46,31 N 7,98 S 4,51
b) 2,6-N,N '-Bis [1 ,4,7-tris (carboxylatomethyl)-l ,4,7, 10-tetraazacyclododecan- 10-( pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl )]-lysin-[1 -(4-perf luoroctylsulfonyl- piperazin ]-amid, Gd-Komplex (Metallkomplex XVI)
10 g (14,36 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 54a), 3,34 g (29 mmol ) N- Hydroxysuccinimid, 2,54 g ( mmol ) Lithiumchlorid und 18,26 g (29 mmol ) 1,4,7-Tris ( carboxylatomethyl )-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl ) 1,4,7,10- tetraazacyclododecan-Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 200 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 109 C gibt man 12,38 g (60 mmol ) N,N- Dicyclohexlcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt (Kiesel- gel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ). Ausbeute : 19,02 g ( 69 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs Wassergehalt : 11 ,3 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 35,03 H 4,04 F 16,82 N 10,21 S 1,67 Gd 16,38 gef. C 34,96 H 4,13 F 16,74 N 10,16 S 1,61 Gd 16,33
Beispiel 55
a) 2-[4-(3-Oxapropionsäureethylester) ]-phenylessigsäuremethylester Zu 200 g (1,204 mol ) 4-Hydroxyphenylessigsäuremethylester, 212 g (2 mol)
Natriumcarbonat in 2000 ml Aceton gibt man 233,8 g (1,4 mol) 2-
Bromessigsäure-ethylester und kocht 5 Stunden unter Rückfluß. Man filtriert den
Feststoff ab und dampft im Vakuum zur Trockene ein. Der Rückstand wird an
Kieselgel chromatographiert ( Laufmittel: -n-Hexan / Essigsäureethylester =
15:1 ).
Ausbeute : 288,5 g (95 % der Theorie ) eines farblosen Öls.
Elementaranalyse : ber. C 61,90 H 6,39 gef. C 61,75 H 6,51
b) 2-[4-(3-Oxapropionsäureethylester) ]-phenyl-2-bromessigsäuremethylester
Zu 285 g (1,13 mol ) der Titelverbindung aus Beispiel 55a), gelöst, in 2000 ml Tetrachlorkohlenstoff, gibt man 201 g (1,13 mol ) N-Bromsuccinimid und 100 mg Dibenzylperoxid und kocht 8 Stunden unter Rückfluß. Man kühlt im Eisbad, filtriert das ausgefallene Succinimid ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Der Rückstand wird an Kieselgel gereinigt (Laufmittel:-n-Hexan / Aceton = 15:1 ). Ausbeute : 359,2 g (96% derTheorie ) eines farblosen, zähen Öls.
Elementaranalyse :
ber. C 47,28 H 4,57 Br 24,16 gef. C 47,19 H 4,71 Br 24,05
c) 2-[4-(3-Oxapropionsäureethylester)]-phenyl-2-[1 -(1 ,4,7, 10- tetraazacyclododecan 7-yl ]-essigsäuremethylester
Zu 603 g (3,5 mol) 1,4,7,10-Tetraazacyclododecan in 6000 ml Chloroform gibt man 350 g (1 ,057 mol) der Titelverbindung aus Beispiel 55b) und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man extrahiert 3 mal mit 3000 ml Wasser, trocknet die organische Phase über Magnesiumsulfat und dampft im Vakuum zur Trockene ein. Der Rückstand wird ohne weitere Aufreinigung in die nächste Reaktion (3d) eingesetzt. Ausbeute: 448 g (quantitativ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse :
ber. C 59,70 H 8,11 N 13,26 gef. C 59,58 H 8,20 N 13,18
d) 2-[4-(3-Oxapropionsäure)]-phenyl-2-[1 ,4,7-tris( carboxymethyl) -1 ,4,7, 10- tetraaza-cyclododecan-10-yl]-essigsäure
445 g (. 1 ,053 mol ) der Titelverbindung aus Beispiel 55c) und 496 g ( 5,27 mol) Chloressigsäure werden in in 4000 ml Wasser gelöst. Man stellt mit 30% iger aqu.Natronlauge auf einen pH Wert von 10. Man erhitzt auf 70Q C und hält den pH-Wert durch Zugabe von 30% iger aqu.Natronlauge auf pH 10. Man rührt 8 Stunden bei 709 C. Man stellt anschließend auf einen pH Wert von 13 und kocht 30 Minuten unter Rückfluß. Die Lösung wird im Eisbad gekühlt und durch Zugabe von konz.Salzsäure auf einen pH Wert von 1 gestellt. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein. Der Rückstand wird in 4000 ml Methanol aufgenommen und eine Stunde bei Raumtemperatur ausgerührt. Man filtriert vom ausgefallenem Kochsalz ab, dampft das Filtrat zur Trockene ein und reinigt den Rückstand an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Wasser/ Ethanol /Acetonitril ). Ausbeute: 403 g (69 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 10,2 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 51,98 H 6,18 N 10,10 gef. C 51,80 H 6,31 N 10,01
e) 2-[4-(3-Oxaproponsäure)]-phenyl-2-[1 ,4,7-tris( carboxymethyl) -1 ,4,7, 10- tetraaza-cyclododecan-10-yl]-essigsäure, Gd-Komplex
Zu 400 g (721 ,3 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 55d) in 2000 ml Wasser gibt man 130,73 g (360,65 mmol) Gadoliniumoxid und rührt 5 Stunden bei 809 C. Die Lösung wird filtriert und das Filtrat gefriergetrocknet. Ausbeute: 511 g (quantitativ ) eines amorphen Feststoffs. Wassergehalt: 11 ,0 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 40,67 H 4,41 Gd 22,19 N 7,98 gef. C 40,51 H 4,52 Gd 22,05 N 8,03
f) 2,6-N,N '-Bis{2-[4-(3-oxapropionyl)-phenyl]-2-[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan-10-yl]-essigsäure]-lysin-[4-perfluor-octylsulfonyl)- piperazin] -amid, Digadolinium-Komplex, Dinatriumsalz
10 g (14,36 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 54a) 3,45 g ( 30 mmol ) N- Hydroxysuccinimid, 2,54 g ( 60 mmol ) Lithiumchlorid und 21 ,26 g ( 30 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 4Be werden unter leichter Erwärmung in 250 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 109 C gibt man 16,51 g (80 mmol) N.N- Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei
Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 2000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser/ Ethanol / Acetonitril ) Man löst in wenig Wasser, stellt mit Natronlauge auf einen pH Wert von 7,4 und gefriergetrocknet Ausbeute: 21,02 g ( 69% der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 11 ,2 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz
ber. C 37,36 H 3,66 F 15,22 Gd 14,82 N 7,92 Na 2,17 S 1,51 gef. C 37,28 H 3,74 F 15,14 Gd 14,75 N 8,03 Na 2,23 S 1,46
Beispiel 56
a) 2,6-N,N' - Bis [ 6-carbonylmethyl-3,9-bis (t butyloxycarbonylmethyl ) 3,6,9- triazaundecan-1,11-dicarbonsäure-bis (t butylester )]-lysin-[1-(4- perfluoroctylsulfonyl)- piperazin ]-amid
Zu einer Lösung aus 10 g (14,36 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 54a), 18,53 g (30 mmol) 3,9-Bis(t butyloxycarbonylmethyl) -6-carboxymethyl-3,6,9- triazaundecan -
1,11-dicarbonsäure-bis(t butylester) und 3,45 g (30 mol) N-Hydroxysuccinimid gelöst in 150ml Dimethylformaid gibt man bei 09 C 10,32 g ( 50 mmol ) N,N Dicyclohexylcarbodiimid zu. Man rührt 3 Stunden bei 0S C, anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan / Ethanol = 20:1 ) Ausbeute: 19,60 g ( 72 % der Theorie ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse
ber. C 49,41 H 6,75 F17,03 N 7,39 S 1,69 get C 49,35 H 6,82 F16.92 N 7,32 S 1,62
b) 2,6-N,N-Bis [6-carbonylmethyl-3,9-bis (carboxylatomethyl)-3,6,9- triazaundecandicarbonsäure-1 -carboxy-11 -carboxylato-lysin-[1 -(4- perfluoroctylsulfonyl )-piperazin]-amid,Gd-Komplex, Natriumsalz]
15 g ( 7,91 mol ) der Titelverbindung aus Beispiel 56a) werden in 50 ml Chloroform gelöst und 200 ml Trifluoressigsäure zugegeben. Man rührt 10 Minuten bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und der Rückstand in 150 ml Wasser gelöst Man gibt 2,87g (7,91 mmol) Gadoliniumoxid zu und rührt
5 Stunden bei 809 C. Man läßt auf Raumtemperatur abkühlen und stellt mit 2N Natronlauge auf pH 7,4. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und an RP-18 gereinigt ( Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ) Ausbeute: 8,11 g ( 57% der Theorie ) eines farblosen amorphen Feststoffs. Wassergehalt: 9,6%
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 30,70 H 3.08 Gd 17,48 N 7.78 Na 2,56 S 1,78 get C 30,58 H 3.19 Gd 17,42 N 7,71 Na 2,68 S 1,72
Beispiel 57
a) 6-N-Benzyloxycarbonyl-2-N-[6-carboxylmethyl-3,9-bis(t butyloxycarbonylmethyl)-
3,6,9-triazaundecan-1 ,11-dicarbonsäure-bis(t butylester)]-lysin-[1 (4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu einer Lösung aus 20 g (24,08 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 52c), 14,88 g (24,08 mmol) 3,9-Bis(t butyloxycarbonylmethyl) -6-carboxymethyl-3,6,9- triazaun-decan-1 ,11-dicarbonsäure-bis (t butylester ) und 2,88 g (25mol) N- Hydroxysuccinimid gelöst in 100 ml Dimethylformamid gibt man bei 09 C 8,25 g 40 mol)N,N-Dicyclo- hexylcarbodiimid zu. Man rührt 3 Stunden bei 09 C, anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenem Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert am Kieselgel (Laufmittel: Dichlor- Methan / Ethanol = 20:1). Ausbeute: 27,21 g (79 % der Theorie ) eines zähen Öls
Elementaranalyse :
ber. C 47,03 H 5,64 F 22,58 N 6,85 S 2,24 gef. C 46,94 H 5,58 F 22,65 N 6,84 S 2,31
b) 2-N-[Carbonylmethyl-3,9-bis (t butyloxycarbonylmethyl)-3,6,9-triazaundecan- 1,11 -dicarbonsäure-bis(t butylester)]-lysin-[1 -(4-perlfluoroctylsulfonyl)-piperazin]- amid
25 g (17,48 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 57a) werden in 350 ml Ethanol gelöst und 5 g Palladium -Katalysator (10% Pd / C) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 22,66 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse :
ber. C 44,48 H 5,75 F 24,92 N 7,56 S 2,47 gef. C 44,59 H 5,81 F 25,03 N 7,46 S 2,52 c) 6-N-[1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-10- (pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl)]-2-N-[6-carbonylmethyl-3,9-bis (t butyloxycarbonylmethyl) 3,6,9-triazaundecan-1,11-dicarbonsäure bis (t butylester )]- lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl) -piperazin-]-amid , Gd - Komplex
20 g (15,43 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 57b), 1,78 g (15,43 mmol) N-Hydroxysuccininmid, 1,48 g (35 mmol) Lithiumchlorid und 9,72 g ( 15,43 mmol)1,4,7-Tris ( carboxylatomethyl )-10-( 3-aza-4oxo-5methyl-5yl )- pentansäure-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 150 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 109 C gibt man 5,16 g (25 mmol) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur . Man gießt die Lösung in 2500 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wir abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ). Ausbeute: 22,94 g (78 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 7,9 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 42,22 H 5,29 F 16,95 Gd 8,25 N 8,82 S 1,68 gef. . C 42,15 H 5,41 F 16,87 Gd 8,13 N 8,70 S 1,60
d) 6-N-[1 ,4,7-Tris (carboxylatomethyl)-l ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-10- (3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)]-2-N-[6-carbonylmethyl-3,9- bis(carboxylatomethyl) 3,6,9-triazaundecan dicarbonsäure -carboxy-11- carboxylato-z]-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Digadoliniumkomplex, Natriumsalz
20 g (10,49 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 57c) werden in 200 ml
Trifluoressigsäure gelöst. Man rührt 60 Minuten bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und der Rückstand in 150 ml Wasser gelöst Man gibt 1 ,90 g ( 5,25 mmol ) Gadoliniumoxid zu und rührt 5 Stunden bei 80Q C. Man läßt auf Raumtemperatur abkühlen und stellt mit Natronlauge auf einen pH Wert von 7,4. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und an Kieselgel RP-18 gereinigt.( Laufmittel : Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril )
Ausbeute: 11 ,89 g (61 % der Theorie) eines farblosen amorphen Feststoffs. Wassergehalt: 10,2 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz ) ber. C 32,97 H 3,47 F 17,39 Gd 16,93 N 9,05 Na 1,24 S 1,73 gef. C 32,90 H 3,53 F 17,31 Gd 16,87 N 8,92 Na 1 ,33 S 1,67
Beispiel 58
a) 5,6-Bis (benzyloxy)-3 oxa-hexansäure-t butylester
100 g (376,2 mmol) 1 ,2-Di-O-benzyl-glycerin [ hergestellt nach Chem. Phys. Lipids (1987) , 43(2), 113-277 ] und 5g Tetrabutylammoniumhdrogensulfat werden in einer Mischung aus 400 ml Toluol und 200 ml 50 % iger aqu.Natronlauge gelöst. Bei 09 C tropft man über 30 Minuten 78g (400 mmol) 2- Bromessigsäure-t butylester zu und rührt anschließend 3 Stunden bei 09 C. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert. (Laufmittel: N-Hexan /Aceton=20:1).
Ausbeute: 133,4 g (94 % der Theorie ) eines farblosen Öls.
Elementaranalyse:
ber. C 71,48 H 7,82 gef. C 71,61 H 7,92 b) 5,6-Bis (benzyloxy)-3-oxa-hexansäure
130 g ( 336,4 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 58a) werden in 200 ml Dichlormethan gelöst und bei 09 C 100 ml Trifluoressigsäure zugesetzt. Man rührt 4 Stunden bei Raumtemperatur und dampft anschließend zur Trockene ein. Der Rückstand wird aus Pentan / Diethylether kristallisiert. Ausbeute: 102,2 g (92 % der Theorie ) eines wachsartigen Feststoff
Elementaranalyse: ber. C 69,07 H 6,71 gef. C 69,19 H 6,82
c) 6-N-Benzyloxycarbonyl-2-N-[1,4,7-tris ( carboxylatomethyl ) 1,4,7, 10- tetraazacyclo- dodecan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl )]-lysin-[1 -(4-perf luor- octylsulfonyl )-piperazin]-amid, Gd-Komplex
50 g (60,20 m mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 52c) 6,93 g (60,20 mmol) N-Hydroxysuccinimid, 5,09 g (120 mmol) Lithiumchlorid und 37,91 g (60,20 mmol) 1,4,7-Tris (carboxylatomethyl ) -1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-10- pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl ), Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 400 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10s C gibt man 20,63 g (100 mmol) N,N- Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ). Ausbeute: 75,53 g ( 87 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 10,1 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz ) ber. C 37,48 H 3,84 F 22,39 Gd 10,90 N 8,74 S 2,22 gef. C 37,39 H 4,02 F 22,29 Gd 10,75 N 8,70 S 2,22
d) 2-N-[1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclodOdecan-10- (pentanoyl- 3aza-4-oxo-5methyl-5yl]-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid, Gd-komplex
70 g (48,53 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 58c) werden in 500 ml Wasser/100ml Ethanol gelöst und 5 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein Ausbeute: 63,5 g ( quantitativ ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt : 9,8 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 37,48 H 3,84 F 22,39 Gd 10,90 N 8,74 S 2.22 gef C 37,39 H 4,03 F 22,31 Gd 10,78 N 8,65 S 2.20
e) 6-N-[5,6-Bis ( benzyloxy )-3-oxahexanoyl]-2-N-[1 ,4,7-tris (carboxylatomethyl)- 1 ,4,710-tetraazacyclododecan-10-(pentanoyl-3aza-4-oxo-5-methyl-5yl)] -lysin-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex
10 g (7,64 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 58d), 3,30 g (10 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 7b, 0,85 g (20 mmol) Lithiumchlorid und 1,15 g (10 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden unter leichter Erwärmung in 150 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 109 C gibt man 3,10 g (15mmol) N,N - Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt 8 Stunden bei Raumtemperatur. Die Reaktionslösung wird in 2000 ml Aceton gegossen und der ausgefallene Niederschlag isoliert. Die Titelverbindung wird an Kieselgel RP-18 aufgereinigt ( Laufmittel : Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ). Ausbeute: 11 ,14 g ( 90 % der Theorie ) eines farblosen, amorphen Feststoffs. Wassergehalt: 4,3 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 41.51 H 4,29 F 19,93 N 7,78 Gd 9,70 S 1,98 gef. C 41.45 H 4,38 F 19,84 N 7,70 Gd 9,58 S 1,90
f) 6-N-(5,6,-Dihydroxy-3-oxahexanoyl)-2-N-[1 ,4,7-tris carboxylatomethyl)- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan-10-pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-lysiri [1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex
10g (6,17 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 58e) werden in 200 ml Ethanol gelöst und 3 g Palladium-Katalysator ( 10% Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 8,89 g (quantitativ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 3,1 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 35,03 H 3,99 F 22,42 Gd 10,92 N 8,75 S 2,23 gef. C 34,95 H 4,12 F 22,30 Gd 10,78 N 8,71 S 2,18 Beispiel 59
a) 6-N-Benzyloxycarbonyl-2-N[-5,6-bis(benzyloxy)-3-oxa-hexanoyl]-lysin-[1-(4- perfluor-octylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu einer Lösung aus 20 g (24,08 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 52c), 9,91 g (30 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 7b und 3,45 g (30 mmol) N- Hydroxysuccinimid, gelöst in 100 ml Dimethylformamid, gibt man bei 09 C 9,28 g (45 mmol) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zu. Man rührt 3 Stunden bei O9 C, anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel ( Laufmittel : Dichlor-methan / Ethanol = 20:1) Ausbeute:24,50 g ( 89 % der Theorie ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse:
ber. C 47,29 H 4,14 F 28,26 N 4,90 S 2,81. get C 47,14 H 4,26 F 28,17 N 4,91 S 2,69
b) 2-N-(5,6-Dihydroxy-3-oxahexanoyl) -lysin-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid
20 g (17,5 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 52d) werden in 300 ml Ethanol gelöst und 5 g Palladium -Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 17,65 g ( quantitativ ) eines farblosen Feststoff.
Elementaranalyse: ber. C 44,05 H 4,10 F 32,02 N 5,55 S 3,18 gef. C 43,96 H 4,21 F 31,94 N 5,48 S 3,24
c) 6-N-[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-10- (pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl)]- lysin-[1-(4-perlfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid , Gd-Komplex
15 g (14,87 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 59b) 1,73 g (15 mmol) N- Hydroxysuccinimid, 1 ,27 g ( 30 mmol.) Lithiumchlorid und 9,48 g ( 15 mmol ) 1,4,7-Tris ( carboxylatomethyl )-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)-pentansäure - 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gd-komplex werden unter leichter Erwärmung in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 109 C gibt man 5,16 g ( 25 mol ) N.N- Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur.Man gießt die Lösung in 1500 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallenen Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18 Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ).
Ausbeute: 19,28 g ( 80 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 10,3 % Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 41,51 H 4,29 F 19,93 Gd 9,70 N 7,78 S 1,98 gef. C 41,37 H 4,40 F 19,88 Gd 9,58 N 7,67 S 1,85
Beispiel 60
a) 6-N-Benzyloxycarbonyl-2-N-[2,6-N,N'-bis( benzyloxycarbonyl)-lysyl]-lysin-[1- (4-perfluoroctylsulfonyl )-piperazin]-amid 20 g (24,08 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 52c) und 2,53 g (25 mmol) Triethylamin werden in 200 ml Tetrahydrofuran (THF) gelöst und 14,46 g (27 mmol) Di-N,N'-Z-Lysinparanitrophenolesterzugegeben.Man rührt 5 Stunden bei 509 C. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel. Laufmittel:Dichlormethan / Methanol = 20:1). Ausbeute: 28,07 g (95% der Theorie) eines farblosen Feststoff.
Elementaranalyse:
ber. C 46,99 H 4,19 F 26,32 N 6,85 S 2,61 gef. C 47,08 H 4,32 F 26,21 N 6,75 S 2,54
b) 2-N-( Lysyl )-lysin - [1-(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid, Trihydrobromid
Zu 25 g (20,37 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 60a) gibt man 100 ml Brom-wasserstoffsäure in Eisessig (48 %) und rührt 2 Stunden bei 409 C. Man kühlt auf 09 C ab, tropft 1500 ml Diethylester zu und filtriert den ausgefallenen Feststoff ab. Nach Trocknen im Vakuum (609 C) erhält man 21,52 g (99 % der Theorie) leicht gelb gefärbten, kristallinen Feststoff.
Elementaranalyse:
ber. C 27,01 H 3,40 Br. 22,46 F 30,26 N 7,87 S 3,00 gef. C 26,92 H 3,53 Br. 22,15 F 30,14 N 7,69 S 2,87
c) 6-N-[1 ,4,7-Tris(Carboxylatomethyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-10- (pentanoyI-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl)]-2-N-]2,6-N,N - bis[1 ,4,7-tris carboxylatomethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-(pentanoyl- 3-aza-4-oxo- 5-methyl-5yl)]-lysyl ]-lysin-[ 1-(4-perfluoroctylsulfonyl )-piρerazin]-amid , Trigadolinium-Komplex
31,49 g (50 mmol) 1,4,7-Tris(Carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-) 5-yl)- pentansäure, Gd-Komplex
6,91 g ( 60 mmol) N-Hydroxysuccinimid und 4,24 g (100 mmol) Lithiumchlorid werden in 350 ml Dimethylsulfoxid unter leichten Erwärmen gelöst.Bei 109 C gibt man 16,51 g (80 mmol) N,N- Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt 5 Stunden bei 10Q C. Zu dieser Mischung gibt man 10 g (9,37 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 60b) und 3,03 g ( 30 mmol ) Triethylamin und rührt 12 Stunden bei 609 C. Man läßt auf Raumtemperatur abkühlen und gießt die Mischung in 3000 ml Aceton. Der ausgefallene Niederschlag wird abfiltriert, an Kieselgel RP-18 gereinigt ( Laufmittel : Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril). Ausbeute: 16,7 g ( 67% der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt : 7,9 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 36,58 H 4,43 F 12,14 Gd 17,74 N 11,06 S 1,14 gef. C 36,47 H 4,54 F 12,03 Gd 17,65 N 10,95 S 1,21
Beispiel 61
a) 1 ,7-Bis ( benzyloxycarbonyl )-4-(3,6,9, 12,15-pentaoxahexadecanoyl)- 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan
Zu 18,13 g ( 68,1 mmol) 3,6,9,12, 15-Pentaoxahexadecansäure und 30 g ( 68,1 mmol) 1 ,7 Di-Z-Cyclen hergestellt nach Z.Kovacs und A. D. Sherry, J.Chem. Soc .ehem. Commun. (1995),2,185, in 300 ml Tetrahydrofuran, gibt man bei 0S C 24,73 g (100 mmol) EEDQ ( 2-Ethoxy-1 ,2-dihydrochinolin-1 - carbonsäureethylester) zu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan / Methanol = 20:1) Ausbeute: 19,13 g (42 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs
Elementaranalyse:
ber. C 61,03 H 7,61 N 8,13 gef. C 60,92 H 7,75 N 8,04
b) 1 ,7-Bis ( benzyloxycarbonyl)-4-(3,6,9, 12,15-pentaoxahexadecanoyl)-10- (2H,2H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridecanoyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan
Zu 18 g (26,91 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 61a) und 14,05 g (26,91 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluortridecansäure, hergestellt nach DE 19603033, in 300 ml Tetrahydrofuran, gibt man bei 09 C 12,36 g (50 mmol) EEDQ (2-Ethoxy-1,2-dihydrochinolin-1 -carbonsäureethylester) zu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel : Dichlormethan / Methanol = 20:1 ) Ausbeute: 21 ,51 g ( 67% der Theorie ) eines farblosen Feststoffs
tiementar anaiyse :
ber. C 47,32 H 4,82 F 27,07 N 4,70 gef. C 47,26 H 5,01 F 26,94 N 4,59
c) 1 - (3,6,9,12,15-Pentaoxahexadecanoyl)-7-(2H,2H,4H,4H,5H,5H-3- oxaperfluortridecanoyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan 20 g (16,77 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 52d) werden in 200 ml Ethanol gelöst und 2,5 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute:15,5 g ( quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse :
ber. C 40,27 H 4,90 F 34,93 N 6,06 get C 40,15 H 4,99 F 34,87 N 5,94
d) 1 ,7-Bis(1 ,4,7-tris (carboxylatomethyl)-l ,4,7,10-tetraazacyclododecan-10- (pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-4-(3,6,9, 12,15-pentaoxahexadecanoyl)- 10-(2H,2H,4H,4H,5H,5H,-3-oxaperfluortridecanoyl)-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan , Gd-Komplex
15 g (16,22 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 61c), 4,60 g (40 mmol ) N-
Hydroxysuccinimid, 3,39 g (80 mmol) Lithiumchlorid und 25,19 g ( 40 mmol)
1,4,7-Tris
( carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl) pentansäure, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 300 ml Dimethylsulfoxid gelöst Bei 109 C gibt man 24,73 g (100 mmol ) EEDQ zu und rührt anschließend über Nacht bei
Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10
Minuten.
Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt Kieselgel RP-18) Laufmittel: Gradient aus Wasser /
Ethanol / Acetonitril ).
Ausbeute: 19.86 g (57 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs Wassergehalt: 11,3 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz ) ber. C 38,58 H 4,74 F 15,04 Gd 14,64 N 9,13 gef. 0 38,47 H 4,91 F 14,95 Gd 14,57 N 9,04
Beispiel 62
a) 3,5-Dinitrobenzoesäure-1 -[(4-perfluoroctysulfonyl)-piperazin ]-amid
Zu 20 g (35,2 mmol) und 8,1 g (80 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml
Dichlormethan tropft man bei 09 C eine Lösung aus 8,76 g (38 mmol) 3,5- Dinitrobenzoylchlorid in 55 ml Dichlormethan und rührt 3 Stunden bei 09 C. Man gibt 200 ml 5% ige aqu.Salzsäure zu und rührt 5 Minuten bei Raumtemperatur.
Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im
Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert ( Laufmittel: Dichlormethan / Aceton =15:1 )
Ausbeute: 24,96 g ( 93% der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 29,35 H 1,45 F 42,37 N 7,35 S 4,21 gef. C 29,28 H 1,61 F 42,15 N 7,25 S 4,15
b) 3,5 Diaminobenzoesäure-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
20 g (26,23 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 62a) werden in 400 ml Ethanol gelöst und 6 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben.Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 18,43 g (quantitativ) eines Cremefarbenen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 32,49 H 2,15 F 45,98 N 7,98 S 4,57 gef. C 32,29 H 2,35 F 45,69 N 7,81 S 4,40
c) 3,5-N,N* -Bis[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan- 10- (pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-)]-benzoesäure-[1-(4-perfluoroctyl- sulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex
10 g (14,24 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 62b), 3,45 g (30 mmol) N-
Hydroxysuccinimid, 2,54 g ( 60 mol ) Lithiumchlorid und 18,89 g (30 mmol)
1,4,7-Tris (carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl )-pentansäure, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 200 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 109 C . gibt man 10,32 g (50 mmol) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 2000 ml
Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel:
Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ). Ausbeute: 19,74 g (72 % der
Theorie) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt: 11 ,8 %
Elementaranalyse: ( berechnet auf wasserfreie Substanz )
ber. C 35,55 H 3,72 F 16,77 Gd 16,33 N 10,18 S 1,67 gef. C 35,48 H 3,84 F 16,58 Gd 16,24 N 10,07 S 1,58 Beispiel 63
a) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecancarbonsäure-t-butylester
25,0 g (53,8 mmol) 1H,1H,2H,2H-Perfluoro-1-decanol [kommerziell erhältlich bei der Firma Lancaster] werden in 250 ml absolutem Toluol gelöst und bei Raumtemperatur mit einer katalytischen Menge ( ca. 0,75 g ) Tetra-n-butyl- ammoniumhydrogensulfat versetzt. Anschließend gibt man bei 0°C insgesamt 7,55 g (134,6 mmol; 2,5 equ. bezogen auf die eingesetzte Alkoholkomponente) fein gepulvertes Kaliumhydroxidpulver hinzu, gefolgt von 15,73 g (80,7 mmol; 1,5 equ. bezogen auf die eingesetzte Alkoholkomponente) Bromessigsäure- tert.-butylester und lässt noch 2 Stunden bei 0°C nachrühren. Die so erhaltene Reaktionslösung wird für 12 h bei Raumtemperatur nachgerührt und zum Zwecke der Aufarbeitung wird mit insgesamt 500 ml Essigsäureethylester und 250 ml Wasser versetzt. Die org. Phase wird abgetrennt und zweimal mit Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und das Solvens im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/Hexan (1:10) als Eluent gereinigt. Ausbeute: 26,3 g ( 84,6% d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl . Elementaranalyse: ber.: C 33,23 H 2,61 F 55,85 get: C 33,29 H 2,61 F 55,90
b) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecancarbonsäure
20,0 g (34,58 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 63a) werden in 200 ml eines Gemisches, bestehend aus Methanol und 0,5 molarer Natronlauge im Verhältnis von 2:1 unter Rühren bei Raumtemperatur suspendiert und anschließend auf 60 °C erwärmt. Nach einer Reaktionszeit von 12 h bei 60 °C wird das nun klare Reaktionsgemisch zur Aufarbeitung durch Versetzen mit Amberlite® IR 120 ( H+-Form )-Kationenaustauscherharz neutralisiert, vom Austauscher abgesaugt und das so erhaltene methanolisch-wässrige Filtrat im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der erhaltene amorph-ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/n-Hexan (1 :3) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 16,0 g ( 88,6% d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl . Elementaranalyse: ber.: C 27,60 H 1,35 F 61,85 get: C 27,58 H 1.36 F 61,90
c) 1 ,7-Bis{[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)- 10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl- pentanoyl)]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan}-diethylentriamin, Digadoiinium- Komplex
2,48 g [(3,94 mmol); 2,05 Molequivalente bezogen auf eingesetztes Diethylentriamin] des in der Patentanmeldung DE 19728954 C1 unter Beispiel 31h) beschriebenen Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-1-methyl-2-oxo-3- azabutyl)-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7-triessigsäure und 167 mg wasserfreies Lithiumchlorid (3,94 mmol) werden bei 40 C° in 40 ml absolutem Dimethylsulfoxid unter Rühren gelöst und bei dieser Temperatur mit insgesamt 453 mg (3,94 mmol) N-Hydroxysuccinimid versetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die so erhaltene Reaktionslösung mit 814 mg ( 3,946 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt und für 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Suspension des Aktivestetrs wird anschließend mit 198,3 mg (1,92 mmol) Diethylentriamin, gelöst in 5 ml absolutem Dimethylsulfoxid, versetzt und für 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Zum Zwecke der Aufarbeitung wird das Reaktionsgemisch mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet
Ausbeute: 1 ,85 g (72,7 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat.
H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 3.89 % .
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: 038,03 H 5,24 N 13,73 Gd 23,71 get: 037,98 H 5,20 N 13,69 Gd 23,78
d) 1 ,7-Bis{[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl- pentanoyl)]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan}-4-(3-oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H- perfluortridecanoyl)-diethylentriarnin .Digadolinium-Komplex
In eine Lösung von 3,23 g (2,44 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 63c), in einem Gemisch aus 30 ml Dimethylsulfoxid und 3 ml Tetrahydrofuran, werden bei 50°C und unter Stickstoffatmosphäre 1 ,27 g (2,44 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 63b) , gelöst in einem Gemisch aus 15 ml Tetrahydrofuran und 15 ml Dimethylsulfoxid , tropfenweise hinzugegeben. Anschließend gibt man bei 0 °C insgesamt 1,80 g (3,66 mmol) EEDQ [2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2- dihydrochinolin] portionsweise hinzu und läßt über Nacht bei Raumtemperatur rühren . Die erhaltene Reaktionslösung wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung der oben genannten Titelverbindung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichen Bestandteilen abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) ultrafiltriert, was sowohl zur vollständigen Entsalzung , als auch zur Reinigung der Titelverbindung von niedermolekularen Bestandteilen dient. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 3,54 g (79,4 % d. Th.) als farbloses Lyophilisat.
H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 5,87 % .
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 35,43 H 4,07 N 9,95 F 17,64 Gd 17,18 gef.: C 35,42 H 4,01 N 9,89 F 17,67 Gd 17,18
Beispiel 64
a) 2-N-Trifluoracetyl -6-N- benzyloxycarbonyl-L-lysin
100,0 g (356,7mmol) 6-N-Benzyloxycarbonyl-L-lysin werden in einer Mischung aus 1000 ml Trifluoressigsäureethylester und 500 ml Ethanol gelöst und 24
Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft zur Trockne ein und kristallisiert den Rückstand aus Diisopropylether.
Ausbeuten 28,9 g (96 % der Theorie ) eines farblosen kristallienen Pulvers.
Schmelzpunkt: 98,5 °C . Elementaranalyse : ber.: C 51.07 H 5,09N 7,44 F 15,14 get: C 51,25 H 5,18N 7,58 F 15,03
b) 2-N-Trifluoracetyl -6-N- benzyloxycarbonyl-L-lysin [1-(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid
Zu 125,0 g (332,0mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 52a) und 188,7 g (332,0 mmol) 1- Perfluoroctylsulfonylpiperazin (hergestellt nach DE 19603033 ) in 750 ml Tetrahydrofuran ,gibt man bei 0°C 164,2 g (0,664 mmol) EEDQ ( 2- Ethoxy-1 ,2-dihydrochinolin -1 -carbonsäureethylester) zu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel ( Laufmittel: Dichlormethan / Methanol = 20:1 ) . Ausbeute : 286,0 g (93% der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Schmelzpunkt: 92 °C . Elementaranalyse: ber.: C 36,30 H 2,83 N 6,05 F 41,01 S 3,46 get: C 36,18 H 2,94 N 5,98 F 40,87 S 3,40 c) 6-N- Benzyloxycarbonyl-L-lysin-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In eine Lösung aus 280,0 g (302,2mol ) der Titelverbindung aus Beispiel 52b) in 2000ml Ethanol, leitet man bei 0°C für eine Stunde Ammoniak-Gas ein. Man rührt anschließend 4 Stunden bei 0°C. Es wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand aus Wasser ausgerührt . Man filtriert den Feststoff ab und trocknet im Vakuum bei 50 °C . Ausbeute: 243,5 g (97,0 % der Theorie) eines amorphen Feststoffs. Elementaranalyse: ber.: C 37,60 H 3,28 N 6,75 F 38,89 S 3,86 get: C 37,55 H 3,33 N 6,68 F 38,78 S 3,81
d) L-Lysin-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
In 1000 ml Ethanol werden 200,0 g (240,8 mmol) der unter 64c) hergestellten
Verbindung gelöst, mit 5,0 g Pearlman-Katalysator (Pd 20% , C) versetzt und solange bei Raumtemperatur unter einer Wasserstoffatmosphäre (1 atm) hydriert, bis keine Wasserstoffaufnahme mehr zu beobachten ist. Man saugt vom Katalysator ab, wäscht gründlich mit Ethanol nach (dreimal mit jeweils ca.
100 ml) und engt im Vakuum zur Trockne ein. Die Titelverbindung wird als stark viskoses und gelblich gefärbtes Öl erhalten. Ausbeute: 162,5 g (96,9 % d.Th.) .
Elementaranalyse: ber. C 31.04 H 3,04 N 8,05 F 46,38 S 4.60 gef. C 31,11 H 3.09 N 8,08 F 46,33 S 4.62
e) 6N-2N-Bis-{4-[2,3-bis-(N,N-bis(t-butyloxycarbonylmethyl)-amino)-propyl]- phenyl}-3-oxa-propionyl-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid 5,25 g (7,72 mmol) der 4-[2,3-Bis-(N,N-bis(t-butyloxycarbonylmethyl)-amino)- propyl]-phenyl}-3-oxa-propionsäure und 781 ,0 mg (7,72 mmol) Triethylamin werden in 50 ml Methylenchlorid gelöst. Bei -15°C tropft man eine Lösung aus 1,16 g (8,5 mmol) Chlorameisensaureisobutylester in 10 ml Methylchlorid innerhalb 5 Minuten hinzu und rührt noch weitere 20 Minuten bei -15°C. Anschließend kühlt man die Lösung auf -25°C ab und tropft eine Lösung , bestehend aus 2,68 g (3,86 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 64d) und 2,12 g (21,0 mmol) Triethylamin, in 70 ml Tetrahydrofuran innerhalb von 30 Minuten hinzu und rührt im Anschluß noch 30 Minuten bei -15° C und anschließend noch über Nacht bei Raumtemperatur nach. Zur Aufarbeitung wird das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und der verbleibende ölige Rückstand in 250 ml Chloroform aufgenommen. Man extrahiert die Chloroformphase zweimal mit je 100 ml einer 10 %igen wässrigen Ammoniumchlorid-Lösung, trocknet die organische Phase über Magnesiumsulfat und dampft im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Ethanol= 20:1).
Ausbeute: 5,37 g (68,8 % d. Th.) eines farblosen und sehr zähen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 52,27 H 6,43 N 5,54 F 15,97 S 1,59 get: C 52,22 H 6,51 N 5,49 F 15,99 S 1,63
f) 6N-2N-Bis-{4-[2,3-bis-(N,N-bis(carboxylatomethyl)-amino)-propyl]-phenyl}-3- oxa-propionyl-L-lysin-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl)-plperazin]-amid, Octa- Natriumsalz
5,0 g ( 2,47 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 64e) werden in 60 ml absolutem Dichlormethan gelöst. Anschließend wird bei 0°C mit insgesamt 75 ml Trif luoressigsäure tropfenweise versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 12 Stunden bei Raumtemperatur wird im Vakuum bis zur Trockne eingeengt Der verbleibende Rückstand wird mit 100 ml Wasser versetzt und erneut im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der so erhaltene Rückstand wird in 200 ml destilliertem Wasser gelöst und die wässrige Produktlösung der oben genannten Titelverbindung zweimal mit jeweils 60 ml Diethylether extrahiert. Die resultierende wässrige Produktlösung wird durch Versetzen mit Wasser auf ein Gesamtvolumen von 300 ml aufgefüllt ,von unlöslichen Bestandteilen abfiltriert und das Filtrat über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) ultrafiltriert, was sowohl zur vollständigen Entsalzung , als auch zur Reinigung der Titelverbindung von niedermolekularen Bestandteilen dient. Das Retentat wird wird durch Versetzen mit Wasser auf ein Gesamtvolumen von 200 ml aufgefüllt und mit 15 % iger Natronlauge wird der pH-Wert dieser Lösung anschließend auf 10,0 eingestellt. Die basische , wässrige Produktlösung wird im Anschluss gefriergetrocknet.
Man erhält 4,0 g (92,8 % d. Th) der Titelverbindung in Form des Octa- Natriumsalzes als amorphes Lyophilisat. Wassergehalt: 5,37 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 38,46 H 3,28 N 6,41 F 18,47 S 1,83 Na 10,52 get: C 38,42 H 3,31 N 6,39 F 18,51 S 1,87 Na 10,38
g) 6N-2N-Bis-{4-[2,3-bis-(N,N-bis(carboxymethyl)-amino)-propyl]-phenyl}-3- oxa-propionyl-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Di- Mangankomplex, Tetra-Natriumsalz
1 ,94 g (1 ,11 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 64f) werden in 100 ml destilliertem Wasser gelöst und die resultierende Lösung wird durch Versetzen mit 1 molarer wässriger Salzsäure auf einen pH-Wert von 4,0 gebracht. Bei 80 °C wird nun portionweise mit 0,25 g (2,22 mmol) Mangan-ll-carbonat versetzt. Anschließend wird die so erhaltene Reaktionslösung für 5 Stunden unter
Rückfluß gekocht. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird der pH-Wert der wässrigen Produktlösung unter kräftigem Rühren durch Versetzen mit 1 N Natronlauge auf 7,2 eingestellt und über eine AMICON® YM-3 Ultrafiltrationsmembran (cut off 3000 Da) entsalzt und von niedermolekularen
Bestandteilen gereinigt. Das Retentat wird anschließend gefriergetrocknet.
Ausbeute: 1 ,80 g (92,0 % d. Th.) der Titelverbindung als farbloses Lyophilisat.
H2θ-Gehalt (Karl-Fischer): 7,28 % .
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 38,07 H 3,25 F 18,28 Mn 6,22 N 6,34 Na 5,20 S1,81 get: C 38,01 H 3,29 F 18,29 Mn 6,21 N 6,36 Na 5,28 S 1.78
Beispiel 65
a) 6-N-(Benzyloxycarbonyl)-2-N - [(N-pteroyl) - L-glutaminyl]-Iysin-[1-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
20 g ( 45,31 mmol ) Folsäure werden in 300 ml Dimethylsulfoxid gelöst und bei 109 C 9,49 g (46 mmol ) N,N -Dicyclohexylcarbodiimid zugegeben .Man rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Zu dieser Mischung gibt man 29,1 g ( 35 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 52c) und 20 ml Pyridin und rührt 3 Stunden bei 509 C. Es wird auf Raumtemperatur abgekühlt und eine Mischung aus 1500 ml Diethylether/ 1500 ml Aceton zugeben. Der ausgefallene Niederschlag wird abfiltriert und an
(RP-18) gereinigt (Laufmittel =Gradient aus Wasser / Ethanol / Tetrahydrofuran). Ausbeute : 21 ,59 g ( 38 % der Theorie), gelber Feststoff. Wassergehalt : 2,1 %
Elementaranalyse :(berechnet auf wasserfreie Substanz).
ber. C 43,10 H 3,54 F 25,76 N 11,29 S 2.56 gef. C 43,02 H 3,62 F 25,68 N 11 ,21 S 2.48
b) 2-N-[( N-Pteroyl)-L-glutaminyl ]-lysin-[1-(4- perfluoroctylsulfonyl ) piperazin ]-amid
Zur 20 g ( 15,95 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 65a) gibt man 200 ml Bromwasserstoffsäure in Eisessig ( 48 % ) und rührt 2 Stunden bei 409 C. Man kühlt auf 0S C ab , tropft 2000 ml Diethylether zu und filtriert den ausgefallenen
Feststoff ab. Nach Trocknen im Vakuum ( 609 C ) erhält man 18,96 g (99 % der Theorie) eines gelb gefärbten, kristallinen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 37,01 H 3.27 Br 6,65 F 26,90 N 12,83 S 2.67 gef. C 36,91 H 3,42 Br 6,31 F 29,75 N 12,72 S 2,56
c) 6-N-[1 ,4,7-Tris (carboxylatomethyl)-l ,4,7,10 -tetraazacyclododecan -10-(pentanoyl-3-aza-4oxo-5-methyl-5yl]-2-N-[(N-pteroyl]-L-glutaminyl] lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid , Gd-Komplex
0,92 g (8 mmol)N-Hydroxysuccinimid, 0,68 g (16 mol ) Lithiumchlorid und 5,04 g (8 mmol) 1 ,4,7-Tris( carboxylatomethyl-10-(3-aza-^-oxo-5-methyl-5-yl)- 1,4,7-10-tetraazacyclododecan, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 80 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10Q C gibt man 2,06 g ( 10 mol ) N , N - Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend 3 Stunden bei Raumtemperatur. Zu dieser Reaktionslösung gibt man 5 g (4,16 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 65b) und 10 ml Pyridin, Man rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 1000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chomatographie gereinigt ( Kieselgel R P -18, Laufmittel : Gradient aus Wasser /Ethanol /Acetonitril. Man löst in etwas Wasser, stellt den pH Wert mit Natronlauge auf 7,4 und gefriergetrocknet. Ausbeute : 3,87 g ( 53 % der Theorie ) eines gelben Feststoffs Wassergehalt: 5,8 %,
Elementaranalyse : ( auf wasserfreie Substanz berechnet )
ber. C 38,36 H 3.74 F 18,42 Gd 8,97 N 12,78 Na 1,31 S 1.83 gef. C 38,28 H 3,85 F 18,33 Gd 8,85 N 12,69 Na 1,42 S 1.75
Beispiel 66 a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluortridecansäure-N-(2,3- dihydroxypropyl)-amid Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 5,47 g (60 mmol) 2,3- Dihydroxypropylamin und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Ethanol= 15:1) chromatographiert.
Ausheute: 29,70 g (87 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 30,32 H 2,20 N 2,36 F 54,35 get: C 30,12 H 2.41 N 2.18 F 54,15 b) N-(2,3-Dihydroxypropyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa- perfluortridecyl)-amin
30 g (48,8 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 66a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 50 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetrahydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 300 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 60°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 Mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/Methanol= 15:1).
Ausbeute: 24,07 g (85 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 31.05 H 2.61 N 2,41 F 55,66 get: C 31,91 H 2,78 N 2,33 F 55,47
c) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(2,3- dihydroxypropyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)- perfluortridecyl)-amid]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1 - (carboxymethylcarboamoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7- triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 9,21 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 66b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 16,09 g (85 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 6,3 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 34,26 H 3,64 N 7,05 F 27,10 Gd 13,19 get: C 34,12 H 3,83 N 6,91 F 26,88 Gd 12,93
Beispiel 67
1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl)-amid]-1,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex 10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1- (carboxymethylcarboamoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7- triessigsäure und 1 ,35 g (31 ,76 mmol) Lithiumchlorid und 3,66 g (31 ,76 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 3,51 g (17 mmol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt 5 Stunden bei 15 °C. Zur Abtrennung des Harnstoffes wird die Lösung filtriert. Zum Filtrat gibt man 8,63 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 68b und 5,06 g (50 mmol) Triethylamin zu und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 1500 ml Diethylether/100 ml Aceton und rührt 30 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/ AcetonitrilΛ/Vasser).
Ausbeute: 13,86 g (78 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers
Wassergehalt: 9,3 % Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 33,28 H 3,42 N 7,51 F 28,87 Gd 14,05 get: C 33,12 H 3,61 N 7.37 F 28,69 Gd 13,89
Beispiel 68 a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäureamid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der "Rückstand wird in 200 ml Dichlormethan gelöst. Dann wird bei 0°C Ammoniakgas für ca. 2 Stunden in die Lösung geleitet. Man rührt 4 Stunden bei 0°C nach, anschließend 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 20: 1 ) chromatographiert.
Ausbeute: 27,85 g (93 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 27,66 H 1.55 N 2.69 F 61.97 ge : C 27,49 H 1.72 N 2.54 F 61.81 b) 1 H, 1 H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecylamin, Hydrochlorid
27 g (51,8 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 68a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetrahydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 400 ml Ethanol/100 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 60°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein und kristallisiert den Rückstand aus wenig Ethanol/Diethylether um.
Ausbeute: 26,75 g (95 % d. Th.) eines farblosen, kristallinen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 26,51 H 2,04 N 2,58 F 59,41 Cl 6,52 get: C 26,37 H 2.21 N 2.46 F 59,25 Cl. 6,38
c) 3,6,9,12,15-Pentaoxahexadecansäure-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H- 3-oxa)-perfluortridecyl)-amid
Zu 26,5 g (48,74 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 68b und 14,8 g (146,2 mmol) Triethylamin, gelöst in 300 ml Dichlormethan tropft, gibt man bei 0°C 14,24 g (50 mmol) 3,6,9,12, 15-Pentaoxahexadecansäurechlorid und rührt 3 Stunden bei 0°C. Man gibt 300 ml 5 % ige aqu. Salzsäure zu und rührt 30 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton: 20:1).
Ausbeute: 32,03 g (87 % d. Th.) eines farblosen Öls
Elementaranalyse: ber.: C 36,57 H 4,00 N 1.85 F 42,75 get: C 36,46 H 4.12 N 1.76 F 42,53
d) N-(3,6,9,12,15-Pentaoxahexadecyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H-3-oxa)- perfluortridecyl)-amid 31 g (41,03 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 68c werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 25 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetrahydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 8 Stunden bei 40°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2 Propanol= 15:1).
Ausbeute: 27,68 g (91 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 37,26 H 4,35 N 1.89 F 43,56 get: C 37,11 H 4.51 N 1.73 F 43,41
e) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N-
3,6,9,12, 15-pentaoxa)-hexadexyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3- oxa)-perfluortridecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan,
Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1- (carboxymethy!carboamoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7- triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 11,77 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 68d zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser). Ausbeute: 18,05 g (84 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers Wassergehalt: 6,2 %
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 37,28 H 4.47 N 6,21 F 23,87 Gd 11,62 get: C 37,11 H 4.61 N 6,03 F 23,64 Gd 11,42
Beispiel 69
a) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure-N-(5-hydroxy-3-oxa- pentyl)-amid
Zu 30 g (57,45 mmol) 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecansäure in 300 ml Dichlormethan gibt man 8,90 g (70 mmol) Oxalylchlorid und rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 100 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C zu einer Lösung aus 6,25 g (60 mmol)
5-Hydroxy-3-oxa-pentylamin und 6,07 g (60 mmol) Triethylamin, gelöst in 200 ml Dichlormethan getropft. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 300 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt 15 Minuten gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 15:1) chromatographiert.
Ausbeute: 32,20 g (92 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: 0 31 ,54 H 2,65 N 2,30 F 53,01 get: 031,61 H 2.84 N 2,14 F 52,85
b) N-(5-Hydroxy-3-oxa-pentyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa- perfluortridecyl)-amin
30 g (49,24 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 69a werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 31 ml 10 M Borandimethylsulfid (in Tetrahydrofuran) zugegeben. Man kocht 16 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 200 ml Methanol zugetropft, anschließend wird im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in einer Mischung aus 300 ml Ethanol/50 ml 10 %iger aqu. Salzsäure aufgenommen und 10 Stunden bei 50°C gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein, nimmt den Rückstand in 300 ml 5 %iger aqu. Natronlauge auf und extrahiert 3 Mal mit je 300 ml Dichlormethan. Die organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/2-Propanol= 20:1).
Ausbeute: 26,09 g (89 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 32,28 H 3,05 N 2.35 F 54,25 get: C 32,12 H 3,21 N 2,18 F 54,09
c) 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(5- hydroxy-3-oxa-pentyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H. 4H, 5H, 5H-3-oxa)- perfluortridecyl)-amid]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
10 g (15,88 mmol) vom Gadoliniumkomplex der 10-[1- (carboxymethylcarboamoyl)-ethyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-1 ,4,7- triessigsäure und 1,35 g (31,76 mmol) Lithiumchlorid werden bei 60 °C in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Man kühlt auf 15 °C ab und gibt 9,45 g (15,88 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 69b zu. Man rührt 10 Minuten und gibt dan 7,42 g (30 mmol) 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydrochinolin zu. Es wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man gießt die Lösung in eine Mischung aus 200 ml Aceton /1300 ml Diethylether und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab, löst ihn in einer Mischung aus wenig Ethanol/Wasser und chromatographiert an Kieselgel RP-18 (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/Acetonitril/Wasser).
Ausbeute: 16,10 g (84 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Pulvers
Wassergehalt: 5,7 % Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 34,83 H 3,84 N 6,96 F 26,76 Gd 13,03 get: C 34,65 H 3,96 N 6,84 F 26,62 Gd 12,91
Beispiel 70 a) 1 ,2,3,4,6-Penta-O-acetyl- ,ß -D-mannopyranose
Auf analoge Weise, wie in der Literatur beschrieben [M.L.Wolfrom und A.Thompson in Methods in Carbohydrate Chemistry (R.L. Whistler, M.L. Wolfrom and J.N. BeMiller, Eds.), Academic Press, New York, Vol.ll, 53 , pp. 211-215, (1963)] liefert die Umsetzung von 150 g (832.5 mmol) α ,ß -D- Mannopyranose mit einem Gemisch aus 1500 ml absolutem Pyridin und 1500 ml Essigsäureanhydrid nach Aufarbeitung 315 g (96,7 %) der oben genannten Titelverbindung als Rohprodukt in Form eines viskosen und farblosen Öls. Durch 1H-NMR-spektroskopische Untersuchung der so erhaltenen Titelverbindung konnte das α zu ß -Verhältnis beider Anomeren mit 4:1 bestimmt werden. Auf eine Trennung der α ,ß -Anomeren der oben genannten Titelverbindung kann zur Durchführung der nachfolgenden Reaktionsschritte verzichtet werden. Elementaranalyse: ber.: C 49,21 H 5,68 get: C 49,12 H 5,78
b) 6-[1 -0-α-(2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-D-mannopyranosyl)-hexansäureethylester]
Auf analoge Weise, v/ie in der Literatur für die Synthese von Aryl Glycopyranosiden beschrieben [J. Conchie und G.A. Lewy in Methods in Carbohydrate Chemistry (R.L. Whistler, M.L. Wolfrom and J.N. BeMiller, Eds.) , Academic Press, New York, Vol.ll , 90 , pp. 345-347, ( 1963 )] führt die Umsetzung von 156,2 g ( 400 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 70a als α , ß -Anomerengemisch mit 67 ml ( 400 mmol ) 6-Hydroxy-hexansäureethylester und 60,8 ml (520 mmol) Zinn-IV-chlorid in insgesamt 600 ml 1 ,2-Dichlorethan nach säulenchromatographischer Aufreinigung (Eluent: Hexan/ Essigsäureethylester 2:1) zur Bildung von 100,05 g (51 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und viskoses Öl. Durch 1H-NMR- spektroskopische Untersuchung der so erhaltenen Titelverbindung konnte gezeigt werden, daß es sich bei der oben genannten Titelverbindung ausschließlich um das reine α -Anomere handelt. Elementaranalyse: ber.: C 52,94 H 6,77 gef.: C 52,80 H 6,78
c) 6-[1 -0-α -(2,3,4,6-Tetra-0-benzy!-D-mannopyranosyl)-hexansäure
Eine gerührte Suspension von 141 ,0 g ( 289 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 70b in 200 ml Dioxan wird bei Raumtemperatur und unter gleichzeitigem kräftigen Rühren portionsweise mit insgesamt 238,5 g ( 4,26mol ) fein gepulvertem Kaliumhydroxydpulver versetzt . Zur Erhöhung der Rührfähigkeit wird das Reaktionsgemisch mit weiteren 200 ml Dioxan versetzt und die so erhaltene Suspension im Anschluß zur Siedehitze erhitzt und bei dieser Temperatur mit insgesamt 372 ml ( 3,128 mol ) Benzylbromid über einen Zeitraum von zwei Stunden tropfenweise versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 4 Stunden bei 110 ° C gefolgt von 12 Stunden bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch zum Zwecke der Aufarbeitung in insgesamt 2,5 Liter Eiswasser langsam eingegossen und die Wasserphase im Anschluß vollständig mit Diethylether extrahiert. Nach dem Waschen der so erhaltenen Etherphase und dem anschließenden Trocknen der selbigen über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Diethylether im Vakuum abgezogen. Überschüssiges Benzylbromid wird anschließend im Ölpumpenvakuum quantitativ bei einer Ölbadtemperatur von 180 ° C aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert. Der so erhaltene, harzig-ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/Hexan (1 :10) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 172,2, g (91 ,0 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines farblosen und äußerst viskosen Öls
Elementaranalyse: ber.: C 75,68 H 7,16 gef.:" C 75,79 H 7,04
d) 6-[1 -O- -(2,3,4,6-Tetra-0-benzyl~D-mannopyranosyl)~hexansäure-N-(3- oxa-1 H,1 H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyi)-amid
In 1200 ml trockenem Tetrahydrofuran werden 100g (134 mmol) der in Beispiel 70c beschriebenen Säure sowie 13.5 g (134 mmol) Triethylamin gelöst. Nach dem Abkühlen auf -15°C tropft man unter Rühren eine Lösung von 18.45 g (135 mmol) Chlorameisensaureisobutylester in 200 ml trockenem Tetrahydrofuran langsam hinzu, wobei die Innentemperatur -10°C nicht überschreitet. Nach einer Reaktionszeit von 15 Minuten bei -15°C tropft man eine Lösung von 165.5 g (134 mmol) 1-Amino-1H,1H,2H,2H-perfluorodecan und 13.5 g (134 mmol) Triethylamin in 250 ml trockenem Tetrahydrofuran bei -20°C hinzu. Nach einer Reaktionszeit von einer Stunde bei -15°C sowie zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in 300 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 400 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 500 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Dichlormethan/Hexan/2-Propanol (10:5:1) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 143,8 g (86,9 % d. Th.)
Elementaranalyse: ber.: C 57,38 H 4,98 N 1 ,13 F 26.15 get: C 57,30 H 5,44 N 1 ,01 F 26,25
e) 6-[1-0-α -D-mannopyranosyl)-hexansäure N-(3-oxa- 1 H,1 H^H^H^H^H.δH.δH-perfluortridecy -amid
40,0 g (32,38 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 70d werden in 750 ml 2- Propanol gelöst und mit 2,0 g Palladium-Katalysator (10 % Pd/C) versetzt. Die Reaktionslösung wird für 12 Stunden bei 22°C und 1 Atmosphäre Wasserstoffdruck hydriert. Anschließend filtriert man vom Katalysator ab und engt das Filtrat zur Trockne ein. Der verbleibende Rückstand wird in 300 ml Dimethylsulfoxid aufgenommen und aus der so erhaltenen Produktlösung erhält man durch Versetzen mit insgesamt 1000 ml Diethylether nach dem Absaugen des ausgefallenen Feststoffes 21 ,52 g (88,0 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und kristallines Pulver mit dem Zersetzungsschmelzpunkt von 88,5 ° C.
Elementaranalyse : ber.: C 36,01 H 5,92 N 1.75 F 40,34 get: C 36,07 H 6,08 N 1.76 F 40,66 f) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex I und 6-[1-0-α -D- mannopyranosyl)-hexansäure N-(3-oxa-1 H,1 H,2H,2H,4H,4H,5H,5H- perfluortridecyl)-amid
Zu 35 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (280 mmol/L) gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA) gibt man 3,17 g (4,2 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 70e und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 98 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 71 a) 1 -O-α -D-[(1 -Perfluoroctylsulfonylpiperazin-4-carbonyl)-pentyl-5]-2,3,4,6- tetra-O-benzyl-mannopyranose
In 800 ml eines Gemisches aus Tetrahydrofuran/Acetonitril (Mischungsverhältnis 7:3) werden 74,59 g (100 mmol) der in Beispiel 71c beschriebenen Säure sowie 10,11 g (100 mmol) Triethylamin gelöst. Anschließend wird bei Raumtemperatur tropfenweise mit 500 ml einer Tetrahydrofuran lösung von 58.0 g (102.0 mmol) 1 -Perfluoroctylsulfonylpiperazin; 10,11g (100 mmol) Triethylamin und 16.84 g (110 mmol) 1-Hydroxybenzotriazol versetzt. Die so erhaltene Reaktionslösung wird , bei -5 ° C mit einer Lösung von 22,7 g (110 mmol ) Dicyclohexylcarbodiimid, gelöst in 100 ml Tetrahydrofuran, versetzt und anschließend bei -5 ° C noch für zwei weitere Stunden gerührt. Nach dem Auftauen der Reaktionslösung, wird bei Raumtemperatur weitere 12 Stunden gerührt, vom ausgefallenen Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das erhaltene Filtrat im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in 600 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 300 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie zweinmal mit je 300 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Dichlormethan/Aceton/2-Propanol (16:2:1) als Eluent gereinigt
Ausbeute: 113,01 g (79,8 % d. Th.) eines farblosen und viskosen Öls Elementaranalyse: ber.: C 58,52 H 4,27 N 1.98 S 2.26 F 22,80 gef.: C 58,42 H 4,41 N 1.80 S 2.28 F 23,02
b) 1 -0-α -D-[(1 -Perfluoroctylsulfonyl-piperazin-4-carbonyl)-pentyl-5]- mannopyranose
50 g (35,30 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 71a werden in einer Mischung bestehend aus 500 ml 2-Propanol und 50 ml Wasser gelöst und 2 g Palladiumkatalysator (10 % Pd auf Aktivkohle) hinzugegeben. Man hydriert für 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird vom Katalysator abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 200 ml Methanol gelöst und das Reaktionsprodukt durch Versetzen mit insgesamt 800 ml Diethylether zur Fällung gebracht. Nach dem Absaugen des so erhaltenen Feststoffs wird dieser im Vakuum bei 50° C getrocknet.
Ausbeute: 29,51 g (99 % d. Th.) eines amorphen Feststoffes Elementaranalyse: ber.: C 34,13 H 3,46 N 3,32 S 3,80 F 38,23 ge : C 34,28 H 3,81 N 3,25 S 3,80 F 38.01
c) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex II und 1-O-α -D-[(1- PerfIuoroctylsulfonyl-piperazin-4-carbonyl)-pentyl-5]-mannopyranose
Zu 47 ml einer Lösung des Metallkomplexes II (250 mmol/L) gelöst in 0,45 % aqu. Natriumchloridlösung) gibt man 9,92 g (11 ,75 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 71b und erwärmt für 10 Minuten in der Mikrowelle. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt, durch ein 0,2 //m-Filter filtriert und das Filtrat in vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 250 mmol Gd/L).
Beispiel 72
a) 2-Acetamido-2-deoxy-1 ,3,4,6-(tetra-0-benzyl)-α ,ß -D-glucopyranose Zu einer gerührten Suspension von 20.16 g ( 700 mmol; 80 % ig in Mineralöl) Natriumhydrid in 150 ml Dimethylsulfoxid gibt man bei Raumtemperatur insgesamt 24,0 g (108,5 mmol) 2-Acetamido-2-deoxy-α ,ß -D-glucopyranose, gelöst in 500 ml absolutem Dimethylsulfoxid , tropfenweise hinzu. Anschließend läßt man noch 120 Minuten bei Raumtemperatur nachrühren und tropft dann 159,5 g (1 ,26 mol) Benzylchlorid hinzu. Die so erhaltene Reaktionslösung wird im Anschluß für weitere 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Zur Aufarbeitung wird die Reaktionslösung langsam in 1 ,5 Liter Eiswasser eingegossen und anschließend erschöpfend mit Diethylether extrahiert. Die vereingten Diethyletherphasen werden im Anschluß zweimal mit je 600 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie zweimal mit je 800 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/Hexan (1 : 5) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 48,68 g ( 73,6 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines viskosen und farblosen Öls
Elementaranalyse: ber.: C 70,92 H 6,45 N 6,89 ge : C 71.43 H 6,44 N 7,02
b) 1-0-Benzyl-3,4,6-tri-0-benzyl-2-amino-2-deoxy-α ,ß -D-glucopyranose
30.0- g ( 49,2 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 72a werden in einer Mischung aus 750 ml Methanol und 215 ml Wasser suspendiert und bei Raumtemperatur mit insgesamt 440 ml (49,2 mmol) einer 0,112 molaren wässrigen Perchlorsäurelösung tropfenweise versetzt. Nach beendeter Zugabe wird die Reaktionslösung noch 10 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und die so erhaltene, nun homogene, Reaktionslösung wird im Anschluß im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Durch Versetzen des verbleibenden öligen Rückstandes mit einer Mischung aus gleichen Teilen Hexan und Dichlormethan wird dieser zur Kristallisation gebracht. Das kristalline Reaktionsprodukt wird abgesaugt, mit Hexan gewaschen und im Vakuum bei Raumtemperatur getrocknet. Ausbeute: 27,08g (86 % d. Th.) an oben genannter Titelverbindung in Form ihres Perchlorates, welches als farblose, kristalline Verbindung vorliegt. Schmelzpunkt : 180,5 - 181 ,5 ° C
Elementaranalyse: ber.: C 63,68 H 5,98 N 2,19 Cl 5.54 get: C 63,43 H 6,04 N 2,02 Cl 5.71
c) 1 ,3,4,6-Tetra-0-benzyl-2-desoxy-2-[acetyl-(2-amino-N-ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl)-amino]-1-α ,ß -D-glucopyranose
In 350 ml trockenem Tetrahydrofuran werden 20,8 g (35,6 mmol) der 2-[N-Ethyl- N-perfluoroctylsulfonyl)-aminoessigsäure sowie 3,60 g (35,6 mmol) Triethylamin gelöst. Nach dem Abkühlen der Reaktionslösung auf -15°C bis -20°C tropft man bei dieser Temperatur unter Rühren eine Lösung von 4,92 g (35,6 mmol) Chlorameisensaureisobutylester in 75 ml trockenem Tetrahydrofuran langsam hinzu, wobei die Zutropfgeschwindigkeit so zu wählen ist, daß eine Innentemperatur von -10°C nicht überschritten wird. Nach einer Reaktionszeit von 15 Minuten bei -15°C tropft man anschließend eine Lösung von 22,78 g (35,6 mmol) des Perchlorats (Titelverbindung aus Beispiel 72b und 3,60g ( 35,6 mmol) Triethylamin, in 100 ml trockenem Tetrahydrofuran bei -20°C langsam hinzu. Nach einer Reaktionszeit von einer Stunde bei -15°C sowie zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in 250 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 100 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 200 ml Wasser gewaschen. Nach, dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/Hexan (1 :5) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 33,3 g ( 84,6% d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl
Elementaranalyse: ber.: C 49,92 H 3,92 N 2,53 F 29,18 S 2,90 get: C 49,99 H 4.11 N 2,69 F 29,22 S 3,01 d) 2-Desoxy-2-[acetyl-(2-amino-N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-1 -α ,ß -D-glucopyranose
20,0 g ( 18,06 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 72c werden in 250 ml 2- Propanol gelöst und mit 1,5 g Palladium-Katalysator (10 % Pd/C) versetzt. Die
Reaktionslösung wird für 12 Stunden bei 22°C und 1 Atmosphäre
Wasserstoffdruck hydriert. Anschließend filtriert man vom Katalysator ab und engt das Filtrat zur Trockne ein. Der verbleibende Rückstand wird in 300 ml
Dimethylsulfoxid aufgenommen und aus der so erhaltenen Produktlösung erhält man durch Versetzen mit 750 ml einer Mischung aus gleichen Teilen
Diethylether und Essigsäureethylester nach dem Absaugen des ausgefallenen
Feststoffes 12,65g (93,8 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und kristallines Pulver. Die oben genannte Titelverbindung liegt als α
/ß -Anomerengemisch vor, wobei das Verhältnis bezüglich der beiden möglichen Anomeren durch 1H-NMR-spektroskopische Untersuchungen zu ca. 1:1,2 bestimmt wurde. Demnach handelt es sich bei der Titelverbindung um ein fast annähernd gleichverteiltes α /ß -Anomerengemisch .
Schmelzpunkt: 132,5 - 133 ° C.
Elementaranalyse: ber.: C 28,97 H 2.57 N 3,75 F 43,27 S 4,30 get: C 29,09 H 2,56 N 3,84 F 43,36 S 4,42
e) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex XIV und 2-Desoxy-2- -[acetyl-(2-amino-N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-1 -α ,ß -D- glucopyranose
Zu 51 ml einer Lösung des Metallkomplexes XIV (300 mmol/L), gelöst in 0,45 %iger Natriumchloridlösung (pH 7,4 / 0,25 mg/L CaNa3DTPA) gibt man eine Lösung aus 4,90 g (6,57 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 3d, gelöst in 200 ml Ethanol, zu und rührt 2 Stunden bei 50°C. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockne eingeengt und der Rückstand mit dest. Wasser auf insgesamt 153 ml aufgefüllt. Man rührt 10 Minuten bei 40°C und filtriert über ein 0,2 /m Filter. Das Filtrat wird in vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L). Beispiel 73
a) 1 ,2,3,4,6-Penta-O-acetyl-α -D-glucopyranose
Auf analoge Weise, wie zur Synthese der Titelverbindung 70a beschrieben, liefert die Umsetzung von 100 g (555,0 mmol) α -D-Glucopyranose mit einem Gemisch aus 1000 ml absolutem Pyridin und 1000 ml Essigsäureanhydrid nach Aufarbeitung und Umkristallisation aus 95 %igem wässrigem Ethanol 190,6 g (88,0 %) der oben genannten Titelverbindung als farblose und kristalline Verbindung. Durch 1H-NMR-spektroskopische Untersuchung der so erhaltenen Titelverbindung konnte das α zu ß -Verhältnis von beiden möglichen Anomeren mit D 98:2 bestimmt werden. Demnach handelt es sich bei der Titelverbindung um das ausschließlich α -konfigurierte Anomere.
Schmelzpunkt : 110,5 ° C
Elementaranalyse: ber.: C 49,21 H 5,68 get: C 49,24 H 5,68
b) 5-(Ethoxycarbonyl)pentyl -2,3,4,6-tetra-O-acetyl-α -D-glucopyranosid
Auf analoge Weise, wie bei der Synthese der Titelverbindung aus Beispiel 70b beschrieben, liefert die Umsetzung von 130,0 g ( 332,8 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 4a) mit 55.8 ml ( 332,8 mmol ) 6-Hydroxy- hexansäureethylester und 50,6 ml (520 mmol) Zinn-IV-chlorid in 500 ml 1,2- Dichlorethan nach säulenchromatographischer Aufreinigung (Eluent : Hexan/Essigsäureethylester 2:1) 101 ,85 g (62,4 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und viskoses Öl. Nach 1H-NMR-spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung konnte anhand der Größe der Kopplungskonstanten von J1ι =8,8 Hz eindeutig auf das Vorliegen der ß - Konfiguration am anomeren Zentrum geschlossen werden, welche zudem die einzig vorliegende Konfiguration am Anomeriezentrum darstellt. Somit konnte die oben genannte Titelverbindung nur in Form des ß -konfigurierten Anomeren dargestellt werden.
Elementaranalyse: ber.: C 52,94 H 6,77 get: C 52,77 H 6,70
c) 5-(Carboxy)pentyl -2,3,4,6-tetra-O-benzyl-α -D-glucopyranosid
Eine gerührte Suspension von 100,0 g (204,96 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 73b in 150 ml Dioxan wird bei Raumtemperatur und unter gleichzeitigem, kräftigen Rühren portionsweise mit insgesamt 169,14 g ( 3,02 mol ) fein gepulvertem Kaliumhydroxydpulver versetzt . Zur Erhöhung der Rührfähigkeit wird das Reaktionsgemisch mit weiteren 150 ml Dioxan versetzt und die so erhaltene Suspension im Anschluß zur Siedehitze erhitzt und bei dieser Temperatur mit insgesamt 264 ml (2,218 mol) Benzylbromid über einen Zeitraum von zwei Stunden tropfenweise versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 4 Stunden bei 110 ° C gefolgt von 12 Stunden bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch zum Zwecke der Aufarbeitung in insgesamt 2,0 Liter Eiswasser langsam eingegossen und die Wasserphase im Anschluß vollständig mit Diethylether extrahiert. Nach dem Waschen der so erhaltenen Etherphase und dem anschließenden Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Diethylether im Vakuum abgezogen. Überschüssiges Benzylbromid wird anschließend im Ölpumpenvakuum quantitativ bei einer Ölbadtemperatur von 180° C aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert. Der so erhaltene , verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/Hexan (1:10) als Eluent gereinigt
Ausbeute: 128,8 g (84,3 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines farblosen und äußerst viskosen Öls Elementaranalyse: ber.: C 75,68 H 7,16 get: C 75,66 H 7,23
d) 2,3,4,6-Tetra-O-benzyl-l -0-ß-D-[6-hexansäure-N-(3-oxa-1 H,1 H,2H,2H,4H, 4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid]-glucopyranose In 825 ml trockenem Tetrahydrofuran werden 68,5 g ( 91,79 mmol) der in Beispiel 73c beschriebenen Säure sowie 9,25 g (91 ,79 mmol) Triethylamin gelöst. Nach dem Abkühlen der Reaktionslösung auf -15°C bis -20°C tropft man bei dieser Temperatur unter Rühren eine Lösung von 12,64 g (92,5 mmol) Chlorameisensaureisobutylester in 150 ml trockenem Tetrahydrofuran langsam hinzu, wobei die Zutropfgeschwindigkeit so zu wählen ist, daß eine Innentemperatur von -10°C nicht überschritten wird. Nach einer Reaktionszeit von 15 Minuten bei -15°C tropft man anschließend eine Lösung von 46.40 g (91,79 mmol) 1H.1H, 2H,2H-heptadecafluoro-1-(2-aminoethyoxy)-decan und 9,25 g (91 ,79 mmol) Triethylamin , als Lösung in 200 ml trockenem Tetrahydrofuran bei -20°C langsam hinzu. Nach einer Reaktionszeit von einer Stunde bei -15°C sowie zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in 250 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 300 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 400 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Dichlormethan/Hexan/2-Propanol (10:5:1) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 104,7 g (92,4% d. Th.) der o. g. Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl
Elementaranalyse: ber.: C 57,38 H 4,98 N 1.13 F 26,15 get: C 57,27 H 5,09 N 1 ,11 F 26,08
e) 1-O-ß -D-[6-Hexansäure-N-(3-oxa-1 H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H- perfluortridecyl) -amid]-glucopyranose
40,0 g (32,38 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 73d werden in 750 ml 2- Propanol gelöst und mit 2,0 g Palladium-Katalysator (10 % Pd/C) versetzt. Die Reaktionslösung wird für 12 Stunden bei 22°C und 1 Atmosphäre Wasserstoffdruck hydriert. Anschließend filtriert man vom Katalysator ab und engt das Filtrat zur Trockne ein. Der verbleibende Rückstand wird in 300 ml Dimethylsulfoxid aufgenommen und aus der so erhaltenen Produktlösung erhält man durch Versetzen mit insgesamt 1000ml Diethylether und nachfolgendem Absaugen des ausgefallenen Feststoffes 22,05 g (90,2 % d. Th.) der Titelverbindung als farbloses und kristallines Pulver mit einem Zersetzungsschmelzpunkt von 122-124 ° C.
Elementaranalyse : ber.: C 36,01 H 5,92 N 1.75 F 40,34 get: C 36,07 H 6,08 N 1,76 F 40,66
f) Herstellung einer Formulierung aus der Titelverbindung des Beispieles 12 aus WO 99/01161 (1 ,4,7-Tris{1 ,4,7-tris(N-carboxylatomethyl)-10-(N-1 - methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-1 ,5-diyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gd-Komplex}-10-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyI- 1,4,7,10-tetraazacyclododecan) und 1-O-ß -D-[6-Hexansäure-N-(3-oxa- 1 H,1 H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid]-glucopyranose
Zu 37 ml einer Lösung des 1,4,7-Tris{1,4,7-tris(N-carboxylatomethyl)-10-(N-1- methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-1 ,5-diyl]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan, Gd- Komplex} -10-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecans (300 mmol/L) gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA) gibt man 20,29 g (25,9 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 73e und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 111 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man .filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 74
a) 1 -0-(1 H,1 H,2H,2H-Perfluorodecyl)-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl)-α-D-mannopyranos
Die Umsetzung von 50 g (128,09 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 70a, welche als 4:1 Gemisch bezüglich der α , ß -Anomeren eingesetzt wird, mit einer
Lösung von 75,84 g (128,1 mmol ) 1-Hydroxy-1 H,1H,2H,2H-perfluorodecan in 150 ml 1 ,2-Dichlorethan sowie insgesamt 19,47 g (166,53 mmol ) Zinn-IV- chlorid, in Analogie wie für die Synthesen der Titelverbindungen aus den Beispielen 1b) und 4b) beschrieben.führt nach Aufarbeitung und säulenchromatographischer Reinigung (Eluent: Hexan/Essigsäureethylester, 2:1) zur Bildung von 74,2 g ( 63.4 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines viskosen und farblosen Öls. Nach 1H-NMR-spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung , konnte anhand der Größe der Kopplungskonstanten von Jι,2 = 1.3 Hz eindeutig auf das Vorliegen der α - Konfiguration am anomeren Zentrum geschlossen werden, welche zudem die ausschließlich vorliegende Konfiguration am Anomeriezentrum ist, so x ass demnach die oben genannte Titelverbindung nur in Form des reinen α - konfigurierten Anomeren dargestellt werden konnte.
Elementaranalyse: ber.: C 44,65 H 2,53 F 35,32 get: C 44,77 H 2,61 F 35,09
b) 1-0-(1H,1 H,2H,2H-Perfluorodecyl)-α -D-mannopyranose
25 g (27,33 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 74a werden 400 ml absolutem Methanol suspendiert und bei 5 ° C mit einer katalytischen Menge Natriummethanolat versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 3h bei Raumtemperatur zeigt die Dünnschichtchromatographische Kontrolle (Eluent: Chloroform / Methanol 9:1) des Reaktionsverlaufs bereits quantitative Umsetzung an. Zum Zwecke der Aufarbeitung wird die nun klare Reaktionslösung durch Versetzen mit Amberlite IR 120 ( H+-Form )- Kationenaustauscherharz neutralisiert, vom Austauscher abgesaugt und das so erhaltene methanolische Filtrat im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der erhaltene kristalline Rückstand wird durch zweimaliges Umkristallisieren aus Ethanol gereinigt. Nach 1H-NMR-spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung, konnte anhand der Größe der Kopplungskonstanten von J-ι,2 = 1.0 Hz eindeutig auf das Vorliegen der α -Konfiguration am anomeren Zentrum geschlossen werden. Die vorliegende α -Konfiguration ist die am Anomeriezentrum ausschließlich vorliegende Konfiguration, , d.h. die Menge an möglicherweise gebildetem ß -konfigurierten Anomeren der Titelverbindung liegt unterhalb der 1H-NMR-spektroskopischen Nachweisgrenze. Die oben genannte Titelverbindung wurde demnach nur in Form des reinen α -konfigurierten Anomeren dargestellt. Ausbeute: 16,2 g (94,6 % d. Th.) eines farblosen und kristallinen Feststoffes Schmelzpunkt: 172-174 ° C unter Zersetzung. Elementaranalyse : ber.: C 30,69 H 2,41 F 51 ,57 get: C 30,57 H 2,48 F 51.65
c) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex II und 1-0- (1 H,1 H,2H,2H-Perfluorodecyl)-α -D-mannopyranose
Zu 50 ml einer Lösung des Metallkomplexes II (150 mmol/L), gelöst in 0,45 %iger Natriumchloridlösung (pH 7,4 / 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man eine Lösung aus 2,01 g (3,21 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 74b, gelöst in 200 ml Ethanol zu und rührt 2 Stunden bei 50°C. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockne eingeengt und der Rückstand mit dest. Wasser auf insgesamt 75 ml aufgefüllt. Man rührt 10 Minuten bei 40°C und filtriert über ein 0,2 μm Filter. Das Filtrat wird in vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 75
a) l-0-(1 H,1 H,2H,2H-Perfluorododecyl)-2,3,4,6-tetra-0-acetyl-α -D- mannopyranose
Die Umsetzung von 35 g (89,66 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 70a, welche als 4:1 Gemisch bezüglich der α , ß -Anomeren eingesetzt wird, mit einer Lösung von 50,60 g (89,7 mmol) 1-Hydroxy-1H,1 H,2H,2H-perfluorododecan in 100 ml 1 ,2-Dichlorethan sowie insgesamt 13,63 g (16,61 mmol) Zinn-IV-chlorid, in Analogie wie für die Synthesen der Titelverbindungen aus den Beispielen 1b), 4b) und 5b) beschrieben, führt nach Aufarbeitung und säulenchromatographischer Reinigung (Eluent: Hexan/Essigsäureethylester= 2:1) zur Bildung von 62.49 g ( 68.7 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines viskosen und farblosen Öls. Nach 1 H-NMR- spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung , konnte anhand der Größe der Kopplungskonstanten von J1ι2 = 1.4 Hz eindeutig auf das Vorliegen der α - Konfiguration am anomeren Zentrum geschlossen werden, welche zudem die ausschließlich vorliegende Konfiguration am Anomeriezentrum ist, so daß demnach die oben genannte Titelverbindung nur in Form des reinen α - konfigurierten Anomeren dargestellt werden konnte.
Elementaranalyse: ber.: C 42,62 H 2,28 F 39,32 get: C 42,55 H 2,38 F 39,40
b) 1 -0-(1 H,1 H,2H,2H-Perfluorododecyl)-α - D-mannopyranose
25 g (24,64 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 75a werden 400 ml absolutem Methanol suspendiert und bei 5 ° C mit einer katalytischen Menge Natriummethanolat versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 3h bei Raumtemperatur zeigt die dünnschichtchromatographische Kontrolle (Eluent: Chloroform/Methanol=9:1) des Reaktionsverlaufs bereits quantitative Umsetzung an. Zum Zwecke der Aufarbeitung wird die nun klare Reaktionslösung durch Versetzen mit Amberlite IR 120 (H+-Form)- Kationenaustauscherharz neutralisiert, vom Austauscher abgesaugt und das so erhaltene methanolische Filtrat im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der erhaltene kristalline Rückstand wird durch zweimaliges Umkristallisieren aus einem Gemisch aus 2-Propanol /Ethanol (1:1) gereinigt. Nach 1H-NMR- spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung , konnte anhand der Größe der Kopplungskonstanten von J-ι,2 = 0.9 Hz eindeutig auf das Vorliegen der α - Konfiguration am anomeren Zentrum geschlossen werden. Die vorliegende α - Konfiguration ist die am Anomeriezentrum ausschließlich vorliegende Konfiguration, d.h. die Menge an möglicherweise gebildetem ß -konfigurierten Anomeren der Titelverbindung liegt unterhalb der 1 H-NMR-spektroskopischen Nachweisgrenze. Die oben genannte Titelverbindung wurde demnach nur in Form des reinen α -konfigurierten Anomeren dargestellt. Ausbeute: 16,96 g (90,8% d. Th.) eines farblosen und kristallinen Feststoffes Schmelzpunkt : 187-188 ° C unter Zersetzung. Elementaranalyse : ber.: C 29,77 H 2,08 F 54,93 get: C 29,70 H 2,28 F 54,83
c) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex VI und 1-0- (1 H,1 H,2H,2H-Perfluorododecyl)-α -D-mannopyranose
Zu 52 ml einer Lösung des Metallkomplexes VI (180 mmol/L) gelöst in 0,45 % aqu. Natriumchloridlösung, gibt man 1 ,70 g (2,34 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 75b und erwärmt für 10 Minuten in der Mikrowelle. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt, durch ein 0,2 m-Filter filtriert und das Filtrat in vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 180 mmol Gd/L)
Beispiel 76
a) 2,3,4,6-Tetra-0-acetyl)-1-0-α-D-[3,6,9-trioxa-(Ci2-C19-heptadecafluor)- nonadecyl]-mannopyranose
Die Umsetzung von 20 g ( 51 ,23 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 70a, welche als 4:1 Gemisch bezüglich der , ß -Anomeren eingesetzt wird, mit einer Lösung von 30,54 g (51 ,23 mmol ) 1 -Hydroxy- tris-(1H,1H,2H,2H-0)- 1H,1H,2H,2H-perfluorodecan in 100 ml 1 ,2-Dichlorethan sowie insgesamt 5,98 g (51 ,23 mmol ) Zinn-IV-chlorid, in Analogie wie für die Synthesen der Titelverbindungen aus den Beispielen 1b), 4b) und 5b) beschrieben, führt nach Aufarbeitung und säulenchromatographischer Reinigung (Eluent : Hexan/Essigsäureethylester= 1:1) zur Bildung von 34,22 g (72,1 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines viskosen und farblosen Öls. Nach 1H-NMR-spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung , konnte anhand der Größe der Kopplungskonstanten von J1ι2 = 1.1 Hz eindeutig auf das Vorliegen der α -Konfiguration am anomeren Zentrum geschlossen werden, welche zudem die ausschließlich vorliegende Konfiguration am Anomeriezentrum ist, so daß demnach die oben genannte Titelverbindung nur in Form des reinen α -konfigurierten Anomeren dargestellt werden konnte. Elementaranalyse: ber.: C 38,89 H 3,81 F 34,86 get: C 39,02 H 3,77 F 34,90
b) 1-O-α -D-[3,6,9-Trioxa-(Cι2-Cιg-heptadecafluor)-nonadecyl]- mannopyranose
20 g ( 21 ,58 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 76a werden 350 ml absolutem Methanol suspendiert und bei 5 ° C mit einer katalytischen Menge Natriummethanolat versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 3h bei Raumtemperatur zeigt die dünnschichtchromatographische Kontrolle (Eluent: Chloroform/Methanol= 6:1) des Reaktionsverlaufs bereits quantitative Umsetzung an. Zur Aufarbeitung wird die nun klare Reaktionslösung durch Versetzen mit Amberlite IR 120 ( H+ - Form )- Kationenaustauscherharz neutralisiert, vom Austauscher abgesaugt und das so erhaltene methanolische Filtrat im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der erhaltene kristalline Rückstand wird durch zweimaliges Umkristallisieren aus einem Gemisch aus Essigsäureethylester/2-Propanol/Ethanol (1 :0.5:1 ) gereinigt. Nach 1H-NMR- spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung konnte anhand der Größe der Kopplungskonstanten von Jι,2 = 1.0 Hz eindeutig auf das Vorliegen der α - Konfiguration am anomeren Zentrum geschlossen werden. Die vorliegende α - Konfiguration ist die am Anomeriezentrum ausschließlich vorliegende Konfiguration, d.h. die Menge an möglicherweise gebildetem ß -konfigurierten Anomeren der Titelverbindung liegt unterhalb der 1 H-NMR-spektroskopischen Nachweisgrenze. Die oben genannte Titelverbindung wurde demnach nur in Form des reinen α -konfigurierten Anomeren dargestellt.
Ausbeute: 15,20 g ( 92,9 % d. Th. ) eines farblosen, kristallinen Feststoffes Schmelzpunkt: 141° C . Elementaranalyse : ber.: C 34.84 H 3.59 F 42.58 get: C 34.72 H 3.66 F 42.67
c) Herstellung einer Formulierung aus der Titelverbindung des Beispieles 68 und 1-O-α -D-[3,6,9-Trioxa-(Ci2-Cι9-heptadecafluor)-nonadecyl]- mannopyranose Zu 38 ml einer Lösung der Titelverbindung des Beispieles 68 (300 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 3,71 g (4,89 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 76b und führt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 114 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 77
a) 2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-1 -α-D-[3-thiopropionsäure-N-(3-oxa- 1H,1H,2H,2H,4H, 4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid]-mannopyranose
In 500 ml trockenem Tetrahydrofuran werden 25,0 g (57,28 mmol); [Darstellung gemäß:
Ponpipom, Mitree M.; Bugianesi, Robert L.; Robbins, James O; Doebber, T. W.; Shen, T. Y.; J.Med.Chem.; 24; 12; 1981 ; 1388-1395 ] 3-(Tetra-0-acetyl-α -D- mannopyranosylmercapto)- propionsäure sowie 5,77g ( 57,28 mmol) Triethylamin gelöst. Nach dem Abkühlen der Reaktionslösung auf -15°C bis - 20°C tropft man bei dieser Temperatur unter Rühren eine Lösung von 7,82 g (57,28 mmol) Chlorameisensaureisobutylester in 100 ml trockenem Tetrahydrofuran langsam hinzu, wobei die Zutropfgeschwindigkeit so zu wählen ist, daß eine Innentemperatur von -10°C nicht überschritten wird. Nach einer Reaktionszeit von 15 Minuten bei -15°C tropft man im Anschluß eine Lösung von 29,05 g (57,28 mmol) 1H,1H, 2H,2H-heptadecafluoro-1-(2-aminoethyoxy)- decan und 5,77g ( 57,28 mmol) Triethylamin, als Lösung in 200 ml trockenem Tetrahydrofuran bei -20°C langsam hinzu. Nach einer Reaktionszeit von einer Stunde bei -15°C sowie zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockne eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in 250 ml Essigsäureethylester aufgenommen und zweimal mit je 200 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie einmal mit 300 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und der Essigsäureethylester im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Dichlormethan/Hexan/2-Propanol (8:5:1) als Eluent gereinigt.
Ausbeute: 44,90 g (84,7% d. Th.) der oben genannten Titelverbindung als farbloses und stark viskoses Öl.
Elementaranalyse: ber.: C 37,63 H 3,48 N 1 ,51 S 3,46 F 34,89 get: 0 37,77 H 3,37 N 1,61 S 3,57 F 35,21
b) 1 -α-D-[3-thiopropionsäure-N-(3-oxa-1 H,1 H,2H,2H,4H,4H,5H,5H- perfluortridecyl) -amid]-mannopyranose
30 g (32,41 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 77a werden 400 ml absolutem Methanol suspendiert und bei 5 ° C mit einer katalytischen Menge Natriummethanolat versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 3h bei Raumtemperatur zeigt die dünnschichtchromatographische Kontrolle (Eluent: Chloroform/Methanol= 9:1) des Reaktionsverlaufs bereits quantitative Umsetzung an. Zur Aufarbeitung wird die nun klare Reaktionslösung durch Versetzen mit Amberlite IR 120 (H+-Form )-Kationenaustauscherharz neutralisiert, vom Austauscher abgesaugt und das so erhaltene methanolische Filtrat im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der erhaltene kristalline Rückstand wird durch Umkristallisieren aus einem Gemisch aus Essigsäureethylester/Methanol (0.5:1) gereinigt. Nach 1H-NMR- spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung , konnte anhand der Größe der Kopplungskonstanten von Jι,2 = 1.1 Hz eindeutig auf das Vorliegen der α - Konfiguration am anomeren Zentrum geschlossen werden. Die vorliegende α - Konfiguration ist die am Anomeriezentrum ausschließlich vorliegende Konfiguration, d.h. die Menge an möglicherweise gebildetem ß -konfigurierten Anomeren der Titelverbindung liegt unterhalb der 1 H-NMR-spektroskopischen Nachweisgrenze. Die oben genannte Titelverbindung wurde demnach nur in Form des reinen α -konfigurierten Anomeren dargestellt.
Ausbeute: 23,76 g (96,8 % d. Th. ) eines farblosen und kristallinen Feststoffes
Schmelzpunkt: 113 - 114.5 ° C
Elementaranalyse : ber.: C 33,30 H 3,19 N 1.85 S 4.23 F 42,64 get: C 33,21 H 3,26 N 1.96 S 4,08 F 42,77 c) Herstellung einer Formulierung aus der Titelverbindung aus Beispiel 66 und 1 -α -D-[3-thiopropionsäure-N-(3-oxa-1 H,1 H,2H,2H,4H,4H,5H,5H- perfluortridecyl)-amid]-mannopyranose
Zu 47 ml einer Lösung der Titelverbindung aus Beispiel 66 (330 mmol/L), gelöst in 0,45 %iger Natriumchloridlösung (pH 7,4 / 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man eine Lösung aus 27,41 g (36,19 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 77b, gelöst in 200 ml Ethanol, zu und rührt 2 Stunden bei 50°C. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockne eingeengt und der Rückstand mit dest. Wasser auf insgesamt 155 ml aufgefüllt. Man rührt 10 Minuten bei 40°C und filtriert über ein 0,2 μm Filter. Das Filtrat wird in vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 78
a) 2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-1 -ß -D-[3,6,9-trioxa-(Cι -Cι9-heptadecafluor)- nonadecyl]-glucopyranosyluronsäure
20,2 g (50,85 mmol) Methyl (1-bromo-2,3,4-tri-0-acety-α -D- glucopyranosid)uronat [Darstellung gemäß: Pelzer; Hoppe-Seyler's Z. Physiol.Chem.; 314; 1949; 234, 237 sowie Goebel; Babers; J.Biol.Chem.; 111 ; 1935; 347, 350 und Bollenback et al.; J.Amer.Chem.Soc; 77; 1955; 3310, 3313.] und 60,64 g (101 ,7 mmol) 3,6,9-Trioxa-(Cι2-C19-heptadecafluor)- nonadecan-1-ol werden in 250 ml wasserfreiem Acetonitril gelöst und bei Raumtemperatur mit 13,0 g frisch gefälltem Silberoxid versetzt. Nach einer Reaktionszeit von 12 Stunden bei Raumtemperatur wird von den unlöslichen Silbersalzen abfiltriert, die Salze gut mit Dichlormethan nachgewaschen und das so erhaltene Filtrat im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der verbleibende Rückstand wird durch Säulenchromatographie gereinigt (Eluent: Hexan/Essigsäureethylester= 3:1).
Ausbeute: 22,99 g (53,3 % d. Th. ) der oben genannter Titelverbindung als farbloses, hoch viskoses Öl
Elementaranalyse: ber.: C 41 ,05 H 3,92 F 38,06 get: C 41.20 H 3,76 F 38,22
b) 1 -0-ß-D-[3,6,9-trioxa-(Ci2-Cι9-heptadecafluor)-nonadecyl]- glucopyranosyluronsäure
10,0 g (11 ,78 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 78a werden in 200 ml eines Gemisches, bestehend aus Methanol und 0,5 molarer Natronlauge im Verhältnis von 2:1 unter rühren bei Raumtemperatur suspendiert . Nach einer Reaktionszeit von 12 h bei Raumtemperatur wird das nun klare Reaktionsgemisch zur Aufarbeitung durch Versetzen mit Amberlite IR 120 ( H+- Form )-Kationenaustauscherharz neutralisiert, vom Austauscher abgesaugt und das so erhaltene methanolisch-wässrige Filtrat im Vakuum bis zur Trockne abgezogen. Der erhaltene kristalline Rückstand wird durch Umkristallisieren aus einem Gemisch aus Essigsäureethylester/Methanol (0,25:1) gereinigt. Nach 1H- NMR-spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung, konnte anhand der Größe der Kopplungskonstanten von Jι>2 = 9,2 Hz eindeutig auf das Vorliegen der ß -Konfiguration am anomeren Zentrum geschlossen werden. Die vorliegende ß -Konfiguration ist die am Anomeriezentrum ausschließlich vorliegende Konfiguration, d.h. die Menge an möglicherweise gebildetem ß - konfigurierten Anomeren der Titelverbindung liegt unterhalb der 1 H-NMR- spektroskopischen Nachweisgrenze. Die oben genannte Titelverbindung wurde demnach nur in Form des reinen ß -konfigurierten Anomeren dargestellt.
Schmelzpunkt: 78,5 ° C Elementaranalyse: ber.: C 34,21 H 3,26 F 41 ,81 get: C 34,38 H 3,26 F 41.90
c) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex I und 1-O-ß -D-[3,6,9- trioxa-(Cι2-Cι9-heptadecafluor)-nonadecyl]-glucopyranosyluronsäure
Zu 38 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (280 mmol/L) , gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 19,18 g (24,83 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 78b und füllt mit 0,9 %iger aqu.
Kochsalzlösung auf insgesamt 53,2 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 200 mmol Gd/L).
Beispiel 79
a) 6-(2-Oxa-1 H,1 H,3H,3H,4H,4H-perfluordecyl)-01,02,03,04-diisopropyliden- α -D-galactopyranose
Zu einer gerührten Suspension von 2,01 g ( 70,0 mmol; 80 % ig in Mineralöl) Natriumhydrid in 25 ml Dimethylformamid gibt man bei Raumtemperatur insgesamt 12,15 g (46,66 mmol) O1, O2 ,0 3,04 -diisopropyliden-α - Galactopyranose [Darstellung gemäß: Levene; Meyer; J.Biol.Chem.; 64; 1925; 473 sowie McCreath; Smith; J.Chem.Soα; 1939; 387, 389 und Freudenberg; Hixon; Chem.Ber.; 56; 1923; 2119, 2122] gelöst in 200 ml absolutem Dimethylformamid, tropfenweise hinzu. Anschließend läßt man noch 120 Minuten bei Raumtemperatur nachrühren und tropft im Anschluß dann insgesamt 30,09 g (48,0 mmol) 1-Brom-1H,1H,2H,2H-perfluorododecan, gelöst in 150 ml absolutem Dimethylformamid langsam hinzu. Die so erhaltene Reaktionslösung wird im Anschluß für weitere 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Zur Aufarbeitung wird die Reaktionslösung langsam in 1 Liter Eiswasser eingegossen und anschließend erschöpfend mit Diethylether extrahiert. Die vereingten organischen Phasen werden im Anschluß zweimal mit je 200 ml gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sowie zweimal mit je 200 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird vom Salz abgesaugt und das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen. Der verbleibende ölige Rückstand wird an Kieselgel unter Verwendung von Essigsäureethylester/Hexan (1 :10) als Eluent gereinigt. Ausbeute: 29,8 g (79,3 % d. Th.) der oben genannten Titelverbindung in Form eines viskosen, farblosen Öls
Elementaranalyse: ber.: C 35,75 H 2,87 F 49,47 ge : C 35,64 H 2,98 F 49,54 b) 6-(2-Oxa-1 H,1 H,3H,3H,4H,4H-perfluordecyl)-α -D-galactopyranose
20 g (24,8 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 79a werden mit 300 ml einer 1 %igen wässrigen Schwefelsäurelösung versetzt und für 3 Stunden bei 80 ° C gerührt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird durch Versetzen mit wässriger Bariumhydroxydlösung neutralisiert und im Anschluß vom ausgefallenen Bariumsulfat abfiltriert und die so erhaltene klare wässrige Produktlösung gefriergetrocknet. Durch 1H-NMR-spektroskopischer Untersuchung der Titelverbindung, konnte eindeutig das Vorliegen beider möglicher Konfigurationen am anomeren Zentrum gezeigt werden, wobei das vorliegende α /ß -Konfigurationsverhältnis nach 1H-NMR-spektroskopischer Untersuchung mit 1 :1,4 (α :ß ) am Anomeriezentrum bestimmt wurde. Die oben genannte Titelverbindung wurde demnach nur in Form des 1 :1,4 (α :ß )- Anomerengemisches isoliert, d.h. auf eine Anomerentrennung wurde verzichtet. Ausbeute: 15,28 g (98,4 % d. Th.) der o. g. Titelverbindung als farbloses Lyophilisat
Elementaranalyse (bezogen auf wasserfreie Substanz): ber.: C 35,75 H 2,87 F 49,47 get: C 35,64 H 2,98 F 49,54
c) Herstellung einer Formulierung aus der Titelverbindung des Beispieles 67 und 6-(2-Oxa-1 H,1 H, 3H,3H,4H,4H-perfluordecyl)-α -D-galactopyranose
Zu 43 ml einer Lösung der Titelverbindung des Beispieles 67 (250 mmol/L), gelöst in 0,45 %iger Natriumchloridlösung (pH 7,4 / 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man eine Lösung aus 1 ,68 g (2,69 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 79b, gelöst in 200 ml Ethanol, zu und rührt 2 Stunden bei 50°C. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockne eingeengt und der Rückstand mit dest. Wasser auf insgesamt 107,5 ml aufgefüllt. Man rührt 10 Minuten bei 40°C und filtriert über ein 0,2 μm Filter. Das Filtrat wird in vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 80 a) 1 -0-α-D-[(1 -perfluoroctylsulfonylpiperazin-4-carbonyl-)-methyl]- mannopyranose
30 g (52,8 mmol) 1 -Perfluoroctylsulfonylpiperazin (Herstellung beschrieben in DE 196 03 033) und 31 ,73 g (53 mmol) 2,3,4,6-Tetra-O-benzyl-α -D- carboxymethyl-mannopyranose (Herstellung beschrieben in DE 197 28 954) werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst. Bei 0°Cgibt man 24,73 g (100 mmol) EEDQ (=1 ,2-Dihydro-2-ethoxychinolin-1 -carbonsäureethylester) zu und rührt 3 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand durch Flash- Chromatographie an Kieselgel gereinigt (Laufmittel: Hexan/ Essigester= 10:1). Die produkthaltigen Fraktionen werden zur Trockne eingedampft, der Rückstand in einer Mischung aus 200 ml Methanol/150 ml Dichlormethan gelöst und 8 Stunden über Palladium/Kohle (10 % Pd/C 2 g) hydriert. Man filtriert vom Hydrierungskatalysator ab und dampft das Filtrat zur Trockne ein. Der Rückstand wird aus Aceton/ Diethylether umkristallisiert.
Ausbeute: 30,39 g (73 % d. Th.) eines wachsartigen farblosen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 30,47 H 2,68 F 40,96 N 3,55 S 4,07 ge : C 30,61 H 2,75 F 41,10 N 3,46 S 4,12
b) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex I und 1-0-α-D-[(1- perfluoroctylsulfonylpiperazin-4-carbonyl-)-methyl]-mannopyranose
Zu 32 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (280 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 4,71 g (5,97 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 80a und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 55 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μ Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 200 mmol Gd/L).
Beispiel 81 a) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecansäure, Natriumsalz
20 g (38,3 mmol) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecansäure (Herstellung beschrieben in DE 196 03 033) werden in 300 ml Ethanol gelöst und 7,7 ml 5 N aqu. Natronlauge zugegeben. Man dampft zur Trockne ein und trocknet den Rückstand im Vakuum-Trockenschrank (8 Stunden 60°C).
Ausbeute: 20,85 g (quantitativ) eines farblosen , kristallinen Pulvers
Elementaranalyse: ber.: C 26,49 H 1,11 F 59,35 Na 4,22 get: C 26,60 H 1,19 F 59,47 Na 4,30
b) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex I und 3-Oxa- 2H,2H,4H,4H, 5H,5H-perfluortridecansäure, Natriumsalz
Zu 32 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (280 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 2,09 g (3,84 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 81a und führt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 90 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
c) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex I und 3-Oxa- 2H,2H,4H,4H, 5H,5H-perfluortridecansäure, Natriumsalz
Zu 32 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (280 mmol/L) gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA) gibt man 1,00 g (1,84 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 81a und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 90 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
d) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex I und 3-Oxa- 2H,2H,4H,4H, 5H,5H-perfluortridecansäure, Natriumsalz
Zu 32 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (280 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 0,54 g (1,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 81a und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 90 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 82
a) 1 -Perf luoroctylsulfonyl-4-(3,6,9, 12,15-pentaoxahexadecanoyl)-piperazin
20 g (35,2 mmol) Perfluoroctylsulfonylpiperazin (siehe Beispiel 80a) werden in 300 ml Dichlormethan gelöst und 5,06 g (50 mmol) Triethylamin zugegeben. Man" kühlt auf 0°C und tropft innerhalb von 20 Minuten 14,24 g (50 mmol) 3,6,9,12, 15-Pentaoxahexansäurechlorid zu und rührt 3 Stunden bei 0°C. Man setzt 400 ml 5 %ige aqu. Salzsäure zu und rührt gut durch. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel= Dichlormethan/ Methanol: 15:1).
Ausbeute: 26,44 (92 % d. Th.) eines wachsartigen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 33,83 H 3,58 N 3,43 F 39,55 S 3,93 get: C 33,96 H 3,66 N 3,50 F 39,67 S 3,82 b) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex I und 1- Perfluoroctylsulfonyl-4-(3,6,9,12,15-pentaoxahexadecanoyl)-piperazin
Zu 47 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (280 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA) , gibt man 4,61 g (5,64 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 82a und führt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 66 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 200 mmol Gd/L).
Beispiel 83
a) 1 H,1 H,2H,2H-Perfluordecyl-p-toluolsulfonsäureester
20 g (43,1 mmol) 1 H,1 H,2H,2H-Perfluordecanol werden in 200 ml Pyridin gelöst und bei 0°C portionsweise 9,53 g (50 mmol) p-Toluolsulfonsäurechlorid zugegeben. Man rührt 5 Stunden bei Raumtemperatur. Die Lösung wird in 1000 ml Eiswasser gegossen und 10 Minuten gerührt. Der Niederschlag wird abfiltriert, mit viel Wasser gewaschen und anschließend aus Aceton umkristallisiert. Ausbeute: 22,04 g (97 % d. Th.) eines farblosen kristallinen Feststoffes
Elementaranalyse: ber.: C 22,78 H 0,76 F 61 ,26 S 6,08 get: C 22,89 H 0,70 F 61 ,39 S 6,15
b) C18-C25-Heptadeca-fluor-3,6,9,12,15-pentaoxa-pentacosan-1-ol
20 g (37,94 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 83a, 35,74 g (150 mmol)
Pentaethylenglycol und 1 g 18-Krone-6 werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und 10,1 g (180 mmol) feingepulvertes Kaliumhydroxid zugegeben. Man rührt 10 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Feststoff ab und engt das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/ Methanol= 15:1).
Ausbeute: 5,45 g (21 % d. Th.) eines farblosen, viskosen Öls
Elementaranalyse: ber.: C 35,10 H 3,68 F 47,19 get: 0 35,22 H 3,77 F 47,10
c) Herstellung einer Formulierung aus der Titelverbindung des Beispieles 69 und Ci8-C 5-Heptadeca-fluor-3,6,9,12,15-pentaoxa-pentacosan-1 -ol
Zu 53 ml einer Lösung der Titelverbindung des Beispieles 69 (310 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Natriumchloridlösung), gibt man 44,98 g (65,72 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 83b und erwärmt für 10 Minuten in der Mikrowelle. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt, durch ein 0,2 μm-Filter filtriert und das Filtrat in vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 310 mmol Gd/L).
Beispiel 84
a) . N,N-Bis(8-hydroxy-3,6,-dioxa-octyl)-perfIuoroctylsulfonsäureamid
15 g (29,23 mmol) Perfluoroctylsulfonsäureamid und 22,16 g (87,7 ml) 9- (Tetrahydropyran-2-yl)-3,6,9-trioxa-nonylchlorid werden in 200 ml Acetonitril gelöst. Man gibt 41 ,46 g (300 mmol) Kaliumcarbonat und 1 g (6 mmol) Kaliumjodid zu und kocht 10 Stunden unter Rückfluß. Der Feststoff wird abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 400 ml Ethanol gelöst und 30 ml 10 % aqu. Salzsäure zugegeben. Man rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird mit Natronlauge auf pH 7 gestellt und die Lösung im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/Methanol= 10:1). Ausbeute: 11 ,38 g (51 % d. Th.) eines farblosen, viskosen Öls Elementaranalyse: ber.: C 31.46 H 3,43 N 1,83 F 42,30 S 4,20 ge : C 31 ,59 H 3,50 N 1.90 F 42,46 S 4,08
b) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex I und N,N-Bis(8- hydroxy-3,6,-dioxa-octyl)-perfluoroctylsulfonsäureamid
Zu 37 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (280 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 7,91 g (10,36 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 84a und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 104 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 85
a) N,N-Bis(t-butyloxycarbonylmethyl)-perfluoroctylsulfonsäureamid
20 g (38,97 mmol) Perfluoroctylsulfonsäureamid und 20,73 g (150 mol) Kalium- carbpnat werden in 200 ml Aceton suspendiert und 17,56 g (90 mmol) Bromessigsäure-tert.-butylester zugegeben. Man kocht 3 Stunden unter Rückfluß. Der Feststoff wird abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n- Hexan/Essigester= 10:1). Ausbeute: 23,53 g (83 % d. Th.) eines farblosen, wachsartigen Feststoffs Elementaranalyse: ber.: C 33,02 H 3,05 F 44,40 N 1 ,93 S 4,41 get: C 33,19 H 3,11 F 44,30 N 1 ,99 S 4,32
b) N,N-Bis(carboxymethyl)-perfluoroctylsulfonsäureamid, Dinatriumsalz 23g (31 ,62 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 85a werden in 300 ml Trifluoressigsäure gelöst und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein und kristallisiert den Rückstand aus Aceton um. Die Kristalle werden abgesaugt und im Vakuum bei 50°C getrocknet. Ausbeute: 17,7 g (91 % d. Th.) eines farblosen, kristallinen Pulvers
17 g (27,63 mmol) der so erhaltenen Di-Säure werden in 100 ml Wasser/300 ml Ethanol gelöst und 9,2 ml 3 N aqu. Natronlauge zugegeben. Man rührt 20 Minuten bei Raumtemperatur und dampft anschließend im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird im Vakuum (60°C / 8 Stunden) getrocknet. Ausbeute: 18,2 g farbloses, kristallines Pulver
Elementaranalyse: ber.: C 21,87 H 0,61 N 2,12 F 49,00 S 4,86 Na 6,98 get: C 22,00 H 0,70 N 2,20 F 49,17 S 4,93 Na 7,10
c) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex II und N,N- Bis(carboxymethyl)-perfluoroctylsulfonsäureamid, Dinatriumsalz
Zu 41 ml einer Lösung des Metallkomplexes II (250 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 2,89 g (4,39 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 85b und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 52 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 200 mmol Gd/L).
Beispiel 86
a) 1 H,1 H,2H,2H-Perfluordodecyl-schwefelsäuremonoester, Natriumsalz
10 g (17,73 mmol) 1H,1 H,2H,2H-Perfluordodecanol werden in 300 ml
Chloroform gelöst und bei 0°C 2,82 g (17,73 mmol) Schwefeltrioxid-Pyridin-
Komplex zugegeben. Man rührt eine Stunde bei 0°C und dampft anschließend im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird in 300 ml Ethanol gelöst und mit 17,8 ml 1N aqu. Natronlauge versetzt. Die Lösung wird zur Trockne eingedampft und der Rückstand im Vakuum getrocknet (60°C / 2 h).
Ausbeute: 11 ,81 g (quantitativ)
Elementaranalyse: ber.: C 21.64 H 0,61 F 59,89 Na 3,45 S 4,81 get: C 21.70 H 0,72 F 60,00 Na 3,57 S 4,92
b) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex VI und 1 H,1H,2H,2H- Perfluordodecyl-schwefelsäuremonoester, Natriumsalz
Zu 38 ml einer Lösung des Metallkomplexes VI (290 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Natriumchloridlösung), gibt man 4,90 g (7,35 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 86a und erwärmt für 10 Minuten in der Mikrowelle. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt, durch ein 0,2 //m-Filter filtriert und das Filtrat in vials abgefüllt. Eine so hergestellt Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 290 mmol Gd/L).
Beispiel 87
a) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluorpentadecansäure, Natriumsalz
10 g-(16,07 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluorpentadecansäure werden in 300 ml Ethanol gelöst und mit 16,1 ml 1 N aqu. Natronlauge versetzt. Die Lösung wird zur Trockne eingedampft und der Rückstand im Vakuum getrocknet (60°C/2h).
Ausbeute: 10,35 g (quantitativ) eines farblosen amorphen Pulvers
Elementaranalyse: ber.: C 26,10 H 0,94 F 61.94 Na 3,57 get: C 26,22 H 1 ,00 F 62,05 Na 3,66 b) Herstellung einer Formulierung aus der Titelverbindung des Beispieles 66 und 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluorpentadecansäure, Natriumsalz
Zu 45 ml einer Lösung der Titelverbindung des Beispieles 66 (270 mmol/L), gelöst in 0,45 %iger Natriumchloridlösung (pH 7,4 / 0,25 mg/L CaNa3DTPA) , gibt man eine Lösung aus 3,36 g (5,21 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 87a, gelöst in 200 ml Ethanol, zu und rührt 2 Stunden bei 50°C. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockne eingeengt und der Rückstand mit dest. Wasser auf insgesamt 122 ml aufgefüllt. Man rührt 10 Minuten bei 40°C und filtriert über ein 0,2 μm Filter. Das Filtrat wird in vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 88
a) Ethylendiamin-N,N-tetraessigsäure-N-(1 H,1 H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa- perfluortridecyl)-monoamid
Zu 30 g (117,1 mmol) EDTA-Bisanhydrid suspendiert in 200 ml Dimethylformamid und 50 ml Pyridin gibt man bei 50°C portionsweise 10,14 g (20 mmol) 1 H,1H,2H,2H,4H,4H, 5H,5H-3-oxa-perfluortridecylamin zu und rührt 6 Stunden bei 50°C. Man gibt 10 ml Wasser zu, rührt 10 Minuten bei 50°C und dampft den Rückstand zur Trockne ein. Der Rückstand wird in wenig Wasser aufgenommen und mit Eisessig auf pH 4 gebracht. Der unlösliche Niederschlag wird abfiltriert und an RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Acetonitril/Wasser/Gradient).
Ausbeute: 9,58 g (61 % d. Th.) eines farblosen Feststoffs
Wassergehalt: 8 % Elementaranalyse: ber.: C 33,64 H 3,59 N 5,35 F 41 ,12 ge : C 33,51 H 3,69 N 5,44 F 41.24 b) Ethylendiamin-N,N-tetraessigsäure-N-(1 H,1 H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa- perfluortridecyl)-monoamid, Calciumsalz, Natriumsalz
9,0 g (11 ,46 mmol) der Titelsubstanz aus Beispiel 88a werden in 300 ml Wasser suspendiert und 11 ,4 ml 1-N-aqu. Natronlauge zugegeben. Anschließend gibt man 1 ,15 g (11 ,46 mmol) Calciumcarbonat zu und rührt 5 Stunden bei 50°C. Die Lösung wird filtriert und das Filtrat gefriergetrocknet.
Ausbeute: 9,7 g (100 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Feststoffs
Wassergehalt: 7,5 % Elementaranalyse: ber.: C 31 ,25 H 2,98 N 4,97 F 38,20 Na 2,72 Ca 4,74 get: 0 31 ,40 H 3,09 N 5,10 F 38,07 Na 2,81 Ca 4,82
c) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex I und Ethylendiamin- N,N-tetraessigsäure-N-(1H,1 H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridecyl)- monoamid, Calciumsalz, Natriumsalz
Zu 43 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (280 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 2,54 g (3,01 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 88b und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 121 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 89
a) 1 H,1 H,2H,2H-Perfluordecyl-(2,2-dimethyl-5-hydroxy-1 ,3-dioxepan-6-yl)- ether
30 g (64,64 mmol) 1 H,1 H,2H,2H-PerfluordecanoI werden in 200 ml Tetrahydrofuran gelöst und bei 0°C 1 ,68 g (70 mmol) Natriumhydrid zugesetzt. Man rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur, dann 4 Stunden bei 60°C. Die Lösung wird in einen Metallautoklaven gegeben, dann 9,31 g (64,64 mmol) 2,2- Dimethyl-1 ,3,6-trioxabicyclo[5.1.0]octan zugegeben und anschließend 10 Stunden auf 150°C erwärmt. Die Reaktionslösung wird auf eiswasser gegossen und 2 mal mit Diethylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden zur Trockne eingedampft und der Rückstand and Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 10:1)
Ausbeute: 16,12 g (41 % d. Th.) eines farblosen Feststoffs
Elementaranalyse: ber.: C 33,57 H 2,82 F 53,10 get: C 33,69 H 2,90 F 53,35
b) 1 H,1 H,2H,2H-Perfluordecyl-(1 -hydroxymethyl-2,3-dihydroxypropyl)-ether
15 g (24,66 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 89a werden in 300 ml Ethanol gelöst und 30 ml 10%ige aqu. Salzsäure zugegeben. Man erhitzt 5 Stunden unter Rückfluß. Es wird mit Natronlauge auf pH 7 gestellt, dann zur Trockne eingeengt und der Rückstand an RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Acetonitril/Wasser/ Gradient).
Ausbeute: 12,75 g (91 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes
Wassergehalt: 4,5 %
Elementaranalyse: ber.: C 29,59 H 2,31 F 56,84 get: C 29,48 H 2,37 F 56,99
c) Herstellung einer Formulierung aus der Titelverbindung des Beispieles 12 aus WO 99/01161 (1 ,4,7-Tris{1 ,4,7-tris(N-carboxylatomethyl)-10-(N-1 - methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-1 ,5-diyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan,
Gd-Komplex}-10-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl- 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan) und 1 H,1 H,2H,2H-Perfluordecyl-(1- hydroxymethyl-2,3-dihydroxypropyl)-ether Zu 37 ml einer Lösung des 1,4,7-Tris{1,4,7-tris(N-carboxylatomethyl)-10-(N-1- methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-1 ,5-diyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gd- Komplex}-! 0-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan (300 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 9,46 g (16,65 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 89b und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 111 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 90
a) 1 H,1 H,2H,2H-Perfluordecyl-[1 ,2-bis(2,2-dimethyl-1 ,3-dioxoIan-4-yl)-2- hydroxyethyl]-ether
30 g (64,64 mmol) 1H,1H,2H,2H-Perfluordecanol werden in 200 ml Tetrahydrofuran gelöst und bei 0°C 1 ,68 g (70 mmol) Natriumhydrid zugesetzt. Man rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur, dann 4 Stunden bei 60°C. Die Lösung wird in einen Metallautoklaven gegeben, dann 15,78 g (64,64 mmol) 1,2- Bis-(2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)-oxiran zugegeben und anschließend 10 Stunden auf 150°C erwärmt. Die Reaktionslösung wird auf eiswasser gegossen und 2 mal mit Diethylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden zur Trockne eingedampft und der Rückstand and Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 10:1)
Ausbeute: 14,2 g (31 % d. Th.) eines farblosen Feststoffs
Elementaranalyse: ber.: C 37,30 H 3,56 F 45,59 get: C 37,48 H 3,66 F 45,71
b) 1 H,1 H,2H,2H-Perfluordecyl-[1 ,2-bis(1 ,2-dihydroxy-ethyl)-2-hydroxyethyl]-ether
14 g (19,76 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 90a werden in 300 ml Ethanol gelöst und 30 ml 10%ige aqu. Salzsäure zugegeben. Man erhitzt 5 Stunden unter Rückfluß. Es wird mit Natronlauge auf pH 7 gestellt, dann zur Trockne eingeengt und der Rückstand an RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Acetonitril/Wasser/ Gradient).
Ausbeute: 10,55 g (85 % d. Th.) eines farblosen Feststoffes Wassergehalt: 3,2 %
Elementaranalyse: ber.: C 30,59 H 2,73 F 51.41 get: C 30,73 H 2,81 F 51.58
c) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex 11 und 1H,1H,2H,2H- Perfluordecyl-[1,2-bis(1,2-dihydroxy-ethyl)-2-hydroxyethyl]-ether
Zu 41 ml einer Lösung des Metallkomplexes II (300 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 11,98 g (19,07 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 90b und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 64 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μ Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 200 mmol Gd/L).
Beispiel 91
a) PerfIuoroctylsulfonsäure-N,N-bis[(8-schwefelsäure-monoester, Natriumsalz)-3,6-dioxaoctyl]-amid
13,54 g (17,73 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 84a werden in 300 ml Chloroform gelöst und bei 0°C 2,82 g (17,73 mmol) Schwefeltrioxid- Pyridin- Komplex zugegeben. Man rührt eine Stunde bei 0°C und dampft anschließend im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird in 300 ml Ethanol gelöst und mit 17,8 ml 1N aqu. Natronlauge versetzt. Die Lösung wird zur Trockne eingedampft und der Rückstand im Vakuum getrocknet (60°C / 2 h). Ausbeute: 17,15 g (quantitativ) Elementaranalyse: ber.: C 24,83 H 2,50 F 33,83 N 1.45 S 9,94 Na 4,75 get: C 24,96 H 2,62 F 33,97 N 1 ,53 S 10,05 Na 4,86
b) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex I und Perfluoroc- tylsulfonsäure-N,N-bis[(8-schwefelsäure-monoester, Natriumsalz)-3,6- dioxaoctyl]-amid
Zu 43 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (380 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 142,29 g (147,06 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 91a und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 164 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 92
a) 2-(2H,2H,3H,3H,5,5H,6H,6H-1 ,4,-Dioxaperfluortetradec-1 -yl)-bernstein- säurediethylester
30 g (59,03 mmol) 1 H,1 H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluortridecanol werden in 300 ml Tetrahydrofuran und bei 0°C 1 ,68 g (70 mmol) Natriumhydrid zugegeben. Mna rührt eine Stunde bei 0°C, anschließend 5 Stunden bei 40°C. In diese 40°C heiße Lösung tropft man innerhalb von 10 Minuten 20,25 g (80 mmol) 2-Brom-Bemsteinsäurediethylester zu und rührt anschließend 12 Stunden bei dieser Temperatur. Man gibt 500 ml Eiswasser zu und extrahiert 2 mal mit 300 ml Diethylether. Die vereinigten organischen Phasen werden im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n-Hexan/Ethanol=20:1):
Ausbeute: 12,05 g (30 % d. Th.) Elementaranalyse: ber.: C 35,31 H 3,11 F 47,47 gef.: C 35,19 H 3.20 F 47,59
b) 2-(2H,2H,3H,3H,5H,5H,6H,6H-1 ,4-dioxa-perfluortetradec-1-yl)-bersteinsäure, Dinatriumsalz
Zu 11,5 g (16,90 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 92a, gelöst in 300 ml Methanol, gibt man 50 ml 3-N-aqu. Natronlauge und refluxiert 8 Stunden. Man dampft zur Trockne ein und nimmt den Rückstand in 300 ml Wasser auf. Man extrahiert die wässrige Phase 2 mal mit 300 ml Diethylether. Man säuert die wässrige Phase mit konz. Salzsäure auf pH 1 an und extrahiert 2 mal mit 300 ml Chloroform. Die vereinigten Chloroformphasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in 300 ml Wasser gelöst und mit 5 %iger aqu. Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Anschließend wird gefriergetrocknet.
Ausbeute: 10,50 g (93 % d. Th.) eines farblosen, amorphen Feststoffs
Wassergehalt: 5,7 %
Elementaranalyse: ber.: C 28,76 H 1 ,66 F 48,33 Na 6,88 get: C 28,88 H 1.71 F 48,25 Na 6,95
c) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex II und 2-(2H,2H,3H,3H, 5H,5H,6H,6H-1 ,4-dioxa-perfluortetradec-1 -yl)-bernsteinsäure, Dinatriumsalz
Zu 57 ml einer Lösung des Metallkomplexes II (300 mmol/L) , gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 1 ,14 g (1 ,71 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 92b und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 154 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L). Beispiel 93
a) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluortridecansäure-N-(succin-2-yl)-amid
Zu 20 g (38,30 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluortridecansäure und 9,21 g (80 mmol) N-Hydroxysuccinimid- gelöst in 150 ml Dimethylformamid gibt man bei 0°C 16,51 g (80 mmol) N.N'-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt 3 Stunden bei dieser Temperatur. Zu der so hergestellten Aktivester-Lösung gibt man eine auf 0°C gekühlte Lösung von 5,10 g (38,30 mmol) L-Asparaginsäure gelöst in 300 ml 5 %iger aqu. Natriumcarbonat-Lösung zu und rührt 2 Stunden bei 0°C. Man gießt auf 500 ml Eiswasser, filtriert vom ausgefallenen Dicyclohexylharnstoff ab und stellt mit konz. Salzsäure auf pH 1. Man extrahiert 3 mal mit 300 ml Chloroform. Die vereinigten, organischen Phasen werden zur Trockne eingeengt und der Rückstand an RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Acetonitril/Wasser/Gradient). Die so erhaltene Disäure wird in 400 ml Wasser gelöst und mit 1N aqu. Natronlauge auf pH 7,4 gestellt. Man filtriert und das Filtrat wird gefriergetrocknet.
Wassergehalt: 6,3 % Ausbeute: 21 ,13 g (81 % d.Th.) eines farblosen amorphen Pulvers
Elementaranalyse: ber.: C 28,21 H 1.48 N 2.06 F 47,41 Na 6,75 ge : C 28,30 H 1.53 N 2,11 F 47,53 Na 6,83
b) Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex XIV und 2H,2H,4H,4H, 5H,5H-3-Oxa-perfluortridecansäure-N-(succin-2-yl)-amid
Zu 37 ml einer Lösung des Metallkomplexes XIV (300 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 422 mg (0,62 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 93a und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 111 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L). Beispiel 94
Herstellung einer Formulierung aus der Titelverbindung des Beispieles 67 und Perfluoroctansulfonsäure, Natriumsalz
Zu 43 ml einer Lösung der Titelverbindung des Beispieles 67 (250 mmol/L), gelöst in 0,45 %iger Natriumchloridlösung (pH 7,4 / 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man eine Lösung aus 1 ,34 g (2,69 mmol) Perfluoroctansulfonsäure, Natriumsalz, gelöst in 200 ml Ethanol, zu und rührt 2 Stunden bei 50°C. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockne eingeengt und der Rückstand mit dest. Wasser auf insgesamt 108 ml aufgefüllt. Man rührt 10 Minuten bei 40°C und filtriert über ein 0,2 μm Filter. Das Filtrat wird in vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 95
Herstellung einer Formulierung aus der Titelverbindung des Beispieles 68 und Perfluordecansulfonsäure, Natriumsalz
Zu 49 ml einer Lösung der Titelverbindung des Beispieles 68 (310 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Natriumchloridlösung) , gibt man 3,03 g (5,06 mmol) Perfluordecansulfonsäure, Natriumsalz und erwärmt für 10 Minuten in der Mikrowelle. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt, durch ein 0,2 μm- Filter filtriert und das Filtrat in vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 310 mmol Gd/L).
Beispiel 96 a) (1 H,1 H,2H,2H-Perfluordecyl)-5-[(1 ,3-dicarboxy, Dinatriumsalz)-phenyl]- ether
Zu 20 g (80,62 mmol) Trinatriumsalz von 5-Hydroxy-isophtalsäure in 300 ml Dimethylformamid gibt man 42,5 g (80,62 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 14a und rührt 10 Stunden bei 60°C. Man gießt auf 1500 ml Eiswasser und stellt mit konz. Salzsäure auf pH 1. Man extrahiert 3 mal mit 300 ml Chloroform. Die vereinigten, organischen Phasen werden eingedampft und der Rückstand an RP-18 chromatographiert (Laufmittel: Acetonitril/Wasser/Gradient). Die so aufgereinigte Disäure wird in 400 ml Wasser gelöst und der pH mit 1 N aqu. Natronlauge auf pH 7,4 gebracht. Man filtriert und das Filtrat wird gefriergetrocknet.
Ausbeute: 20,05 g (37 % d. Th.) eines farblosen amorphen Feststoffs
Wassergehalt: 5,0 % Eiementaranalyse: ber.: C 32,16 H 1,05 F 48,05 Na 6,84 ge : C 32,30 H 1.15 F 48,20 Na 6,95
b) Herstellung einer Formulierung aus der Titelverbindung des Beispieles 12 aus WO 99/01161 (1 ,4,7-Tris{1 ,4,7-tris(N-carboxylatomethyl)-10-(N-1- methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-1 ,5-diyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gd-Komplex}-10-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl- 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan) und (1 H,1 H,2H,2H-Perfluordecyl)-5-[(1 ,3- dicarboxy, Dinatriumsalz)-phenyl]-ether
Zu 51 ml einer Lösung des 1 ,4,7-Tris{1 ,4,7-tris(N-carboxylatomethyl)-10-(N-1- methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-1 ,5-diyl]-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gd- Komplex}-10-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-1 ,4,7,10- tetraazacyclododecan (300 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA), gibt man 6,86 g (10,2 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 96a und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 153 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 97
Herstellung einer Formulierung aus Metallkomplex XIV und 3-Oxa-2H,2H, 4H,4H, 5H,5H-perfluortridecansäure, Natriumsalz
Zu 4 ml einer Lösung des Metallkomplexes XIV (320 mmol/L), gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNasDTPA), gibt man 434 mg (0,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 80a und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 12,8 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 98
a) (Adamant-1 -yl)-3-oxa-propionsäure-t-butylester
Zu 15,22 g (100 mmol) 1 -Adamantanol in 300 ml 50 % aqu. Kalilauge, 200 ml Toluol gibt man bei 0°C 29,26 g (150 mmol) Bromessigsäure-tert. Butylester zu und rührt 2 Stunden kräftig durch. Man gießt auf 1500 ml Wasser und extrahiert 2 mal mit 300 ml Diethylether. Die vereinigten organischen Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: n- Hexan/Diethyleether 20:1).
Ausbeute: 21 ,58 g (81 % d. Th.) eines viskosen, farblosen Öls Elementaranalyse: ber.: C 72,14 H 9,84 get: C 72,26 H 9,95 b) (Adamant-1 -yl)-3-oxa-propionsäure
20 g (75 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 98a werden bei 0°C in 200 ml Trifluoressigsäure gelöst und 8 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft zur Trockne ein und kristallisiert den Rückstand aus Diisopropylether um.
Ausbeute: 14,68 g (93 % d. Th.) farblose Blättchen
Elementaranalyse: ber.: C 68,55 H 8,63 get: C 68,41 H 8,74
c) 1 -(Perfluoroctylsulfonyl)-4-[(adamant-1 -yl)-oxapropionyl]-piperazin
14 g (66,6 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 98b und 37,50 g (66,6 mmol) 1-Perfluoroctylsulfonyl-piperazin werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und bei 0°C 32,15 g (130 mmol) 1 ,2 Dihydro-2-ethoxychinolin-1- carbonsäureethylester (=EEDQ) zugegeben. Man rührt 5 Stunden bei Raumtemperatur. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel:
Dichlormmethan/Diethylether= 30:1).
Ausbeute: 43,05 g (85 % d. Th.) eines farblosen Feststoffs
Elementaranalyse: ber.: C 37,90 H 3,31 N 3,68 S 4,22 F 42,47 get: C 38,04 H 3,42 N 3,49 S 4,11 F 42,30
d) Zubereitung aus 0,5 Teilen Metallkomplex I und 0,5 Teilen Einschlußverbindung aus ß -Cyclodextrin-Hydrat und 1-(
Perfluoroctylsulfonyl)-4-[(adamant-1-yl)-oxapropionyl]-piperazin
Zu 32 ml einer Lösung des Metallkomplexes l (280 mmol/L) gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA) gibt man 6,81 g (8,96 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 98c, 10,33 g (8,96) aus ß - Cyclodextrinmonohydrat und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 98 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Gd-Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 99
a) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecansäure-N-(1-adamantyl)-amid
Zu 15,12 g (100 mmol) 1-Amino-adamantan, 52,21 (100 mmol) 3-Oxa- 2H,2H,4H,4H, 5H,5H-Perfluortridecansäure und 11,51 g (100 mmol) N- Hydroxysuccinimid, glöst in 300 ml Tetrahydrofuran gibt man bei 0°C 30,95 g (150 mmol) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid. Man rührt 2 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat zur Trockne ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 30:1).
Ausbeute: 54,4 g (83 % d. Th.) eines wachsartigen Feststoffs
Elementaranalyse: ber.: C 40,32 H 3,38 N 2.14 F 49,28 ge : C 40,47 H 3,49 N 2,03 F 49,09
b) Zubereitung aus 0,6 Teilen Metallkomplex II und 0,4 Teilen Einschlußverbindung aus ß -Cyclodextrin-Hydrat und 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H- perfluortridecansäure-N-(1-adamantyl)-amid
Zu 41 ml einer Lösung des Metallkomplexes II (250 mmol/L) gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA) gibt man 4,48 g (6,83 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 99a und 7,87 g (6,83 mmol) ß - Cyclodextrinmonohydrat und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 103 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Gd-Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L).
Beispiel 100
a) 2-[N-(Ethyl)-N-(perfIuoroctylsulfonyl)-amino]-essigsäure-N-(adamantyl)- amid
Zu 15,12 g (100 mmol) 1-Aminoadamantan, 58,52 g (100 mmol) N-(Ethyl)-N- (perfluoroctylsulfonyl)-aminoessigsäure und 11 ,51 g (100 mmol) N- Hydroxysuccinimid, gelöst in 300 ml Tetrahydrofuran gibt man bei 0°C 30,95 g (150 mmol) N,N-Dicyclohyexylcarbodiimid. Man rührt 2 Stunden bei 0°C, anschließend 6 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat zur Trockne ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Aceton= 30:1).
Ausbeute: 55,65 g (79 % d. Th.) eines amorphen Feststoffs Elementaranalyse: ber.: C 37,51 H 3,29 F 45,85 N 1.99 S 4,55 get: C 37,64 H 3,41 F 45,99 N 2,12 S 4,43
b) Zubereitung aus 0,6 Teilen Metallkomplex I und 0,4 Teilen Einschluß- Verbindung aus ß -Cyclodextrin-Hydrat und 2-[N-(Ethyl)-N-(perfluoroctyl- sulfonyl)-amino]-essigsäure-N-(1 -adamantyl)-amid
Zu 32 ml einer Lösung des Metallkomplexes I (280 mmol/L) gelöst in 0,45 % aqu. Kochsalzlösung (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa3DTPA) gibt man 4,20 g (5,97 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 100a und 6,88 g (5,97 mmol) aus ß - Cyclodextrinmonohydrat und füllt mit 0,9 %iger aqu. Kochsalzlösung auf insgesamt 90 ml auf. Man erwärmt 2 Stunden bei 60°C im Ultraschallbad. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit aqu. 2 N Natronlauge auf pH 7,4 eingestellt. Man filtriert durch ein 0,2 μm Filter und füllt das Filtrat in vials ab. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für biologische Experimente eingesetzt werden. (Die Gd-Konzentration beträgt 100 mmol Gd/L). Beispiel 101
a) 6-N- a)Benzyloxycarbonyl- 2-N- (3,6,9,12- tetraoxatridecanoyl ) - lysin [1- (4- perfluoroctylsulfonyl ) - piperazin ] - amid
Zu 50 g (60,20 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel lc und 7,10 g ( 70 mmol ) Triethylamin, gelöst in 350 ml Dichlormethan, tropft man bei 0° C eine Lösung aus 16,85 g (70 mmol) 3,6,9,12 Tetraoxatridecansäurechlorid in 50 ml Dichlormethan und rührt 3 Stunden bei 0° C. Man gibt 200 ml 5% ige aqu Salzsäure zu und rührt 5 Minuten bei Raumtemperatur. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert ( Laufmittel: Dichlormethan / Aceton = 15:1 Ausbeute: 30,94 g (92% der Theorie ) eines farblosen, zähen Öls.
Hlementa ranaryse:
ber. C 40,63 H 4,19 F 31,21 N 5,41 S 3,10 gef. C 40,75 H 4,08 F 31,29 N 5,58 S 3,25
b) 2-N-(3,6,9,12- tetraoxatridecanoyl ) - lysin [l-(4- perfluoroctylsulfonyl ) -piperazin ] 53.96g ( 52,15 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 101a werden in 500 ml Ethanol gelöst und 6 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 43,0 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 36,01 H 4,14 F 35,86 N 6,22 S 3,56 gef. C 36,20 H 4,23 F 35,99 N 6,38 S 3,71
c) 6-N-[l,4,7-Tris (carboxylatomethyl) -1,4,7,10- tetraazacyclododecan- 10 -( pentanoyl- 3- aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ] - 2-N- (3,6,9,12- tetraoxatridecanoyl )-lysin [l-(4- perfluoroctylsulfonyl )-piperazin ]-amid, Gd-Komplex 21,84 ( 24,25 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 101b, 2,79 g (24,25 mmol ) N- Hydroxysuccimmid, 2,12 g ( 50 mmol ) Lithiumchlorid und 15,27g (24,25 mmol ) 1,4,7-Tris ( carboxylatomethyl) - 10 -[ (3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ]- pentansäure]- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex
werden unter leichter Erwärmung in 200 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10° C gibt man 8,25 g ( 40 mmol ) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chomatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetomtril ).Ausbeute: 28,21 g (81 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 11,0 %
Elementaranalyse ( auf wasserfreie Substanz berechnet ) ber. C 36,53 H 4,33 F 21,36 N 8,34 S 2,12 Gd 10,40 gef. C 36,64 H 4,48 F 21,39 N 8,29 S 2,15 Gd 10,57
Beispiel 102
a) 6-N- Benzyloxycarbonyl- 2-N- (propyl-3-sulfbnsäure) - lysin [1- (4- perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid
Zu 50 g (60,20 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel lc und 7,10 g ( 70 mmol ) Triethylamin, gelöst in 250 ml ,trockenem Tetrahydrofuran, tropft man bei 50° C eine Lösung aus 7,33g (60 mol ) Propansulton in 50 ml Tetrahydrofuran und rührt 3 Stunden bei 60° C. Man gibt 200 ml 5% i ge aqu Salzsäure zu und rührt 5 Minuten bei Raumtemperatur. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert ( Laufmittel: Dichlormethan / Aceton = 15:1 Ausbeute: 45,16g (79 % der Theorie ) eines farblosen, zähen Öls.
Elementaranalyse:
ber. C 36,56 H 3,49 F 33,90 N 5,88 S 6,73 gef. C 36,72 H 3,35 F 33,79 N 5,78 S 6,75 b) 2-N-(propyl-3-sulfonsäure )- lysin [l-(4- perfluoroctylsulfonyl ) -piperazin ] -amid
49,68 g ( 52,15 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 102a werden in 500 ml Ethanol gelöst und 6 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 42,69 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
blementai ranalyse: ber. C 30,81 H 3,32 F 39,46 N 6,84 S 7,83 gef. C 30,64 H 4,1 F 39,29 N 6,68 S 7,89
c) 6-N-[l,4,7-Tris (carboxylatomethyl) -1,4,7,10- tetraazacyclododecan- 10 -( pentanoyl- 3- aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ] - 2-N- (propyl-3-sulfonsäurel )-lysin [l-(4- perfluoroctylsulfonyl )-piperazin ]-amid, Gd-Komplex
19,85 g ( 24,25 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 102b, 2,79 g (24,25 mmol ) N- Hydroxysuccimmid, 2,12 g ( 50 mmol ) Lithiumchlorid und 15,27g (24,25 mmol ) 1,4,7-Tris ( carboxylatomethyl) - 10 -[ (3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ]- pentansäure]- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 200 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10° C gibt man 8,25 g ( 40 mmol ) N,N- Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chomatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril). Ausbeute: 28,13 g (81 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 11,0 %
Elementaranalyse ( auf wasserfreie Substanz berechnet ) ber. C 33,27 H 3,70 F 22,36 N 8,73 S 4,44 Gd 10,89 gef. C 32,41 H 3,88 F 22,49 N 8,69 S 4,35 Gd 10,97 Beispiel 103
a) 6-N- Benzyloxycarbonyl- 2-N,N-bis (propyl-3-sulfonsäure)- lysin [1- (4-per- fluoroctylsulfonyl ) - piperazin ] - amid
Zu 50 g (60,20 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel lc und 12,14 g ( 120 mmol ) Triethylamin, gelöst in 250 ml trockenem Tetrahydrofuran tropft man bei 50° C eine Lösung aus 14,65 g ( 120 mmol ) 1,3-Propansulton in 100 ml Tetrahydrofuran und rührt 3 Stunden bei 60° C. Man gibt 400 ml 5% ige aqu Salzsäure zu, rührt 5 Minuten bei Raumtemperatur, versetzt mit Natriumchlorid., trennt die organische Phase ab, trocknet sie über Magnesiumsulfat und dampft sie im Vakuum zur Trockene .ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert ( Laufmittel: Dichlormethan / Aceton = 15:1 Ausbeute: 52,24 g (81 % der Theorie ) eines farblosen, zähen Öls. Elementaranalyse:
ber. C 35,76 H 3,66 F 30,05 N 5,21 S 8,95 gef. C 35,75 H 3,55 F 30,19 N 5,08 S 9,04
b) 2-N,N bis(propyl-3-sulfonsäure) - lysin [l-(4- perfluoroctylsulfonyl ) -piperazin ] - amid
53,74 g ( 52,15 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 103a werden in 500 ml Ethanol gelöst und 6 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 49,06 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
ülementai ranalyse:
ber. C 30,64 H 3,54 F 34,33 N 5,96 S 10,23 gef. C 30,69 H 3,71 F 34,19 N 6,08 S 10,38
c) 6-N-[l,4,7-Tris (carboxylatomethyl) -1,4,7,10- tetraazacyclododecan- 10 -( entanoyl- 3- aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ] - 2-N,N bis(propyl-3-sulfonsäure )-lysin [l-(4- perfluoroctylsulfonyl )-piperazin ]-amid, Gd-Komplex, Dinatriumsalz 38,76 g ( 24,25 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 103b 2,79 g (24,25 mmol ) N- Hydroxysuccinimid, 2,12 g (50 mmol) Lithiumchlorid und 15,27g (24,25 mmol ) 1,4,7-Tris (carboxylatomethyl) -10-[(3-aza-4-oxo-5- methyl-5-yl) ]- pentansäure]- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 200 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10° C gibt man 8,25 g ( 40 mmol ) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfϊltriert und anschließend durch Chomatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetomtril ). Ausbeute: 31,63 g (81 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 11,0 %
Elementaranalyse ( auf wasserfreie Substanz berechnet ) ber.: C 32,07 H 3,57 F 20,06 N 7,83 S 5,97 Gd 9,76 Na 2,86 gef. C 31,94 H 3,48 F 20,19 N 7,69 S 5,85 Gd 9,87 Na 2,99
Beispiel 104
a) N-Trifluoracetyl- L-glutaminsäure-5-benzylester
100 g (421,5 mmol ) L-Glutaminsäure-5-benzylester werden in einer Mischung aus 1000 ml Trifluoressigsäureethylester / 500 ml Ethanol gelöst und 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft zur Trockene ein und kristallisiert den Rückstand aus Diisopropylether. Ausbeute: 140,47 g (96 % der Theorie ) eines farblosen kristallienen Pulvers.
Elementara inalyse:
ber. C 50,46 H 4,23 F 17,10 N 4,20 gef. C 51,35 H 4,18 F 17,03 N 4,28
b) 2-N-TrMuoacetyl-L-glutaminsäure-5-berιzylester-N-bis(2-hydroxyemyl)-amid
Zu einer Lösung aus 24,9 g ( 24,08 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 104a , 2,53 g (24,08 mmol ) Diethanolamin und 2,77 g (24,08 mmol ) N - Hydroxysuccinimid, gelöst in 150 ml Dimethylformamid, gibt man bei 0° C 8,25 g (40 mmol ) N,N- Dicyclohexylcabodiimid zu. Man rührt 3 Stunden bei 0° C, anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chomatographiert am Kieselgel (Laufmittel: = Dichlormethan
Ethanol = 20:1 ).
Ausbeute: 9,11 g ( 90% der Theorie ) eines zähen öls.
Elementaranalyse :
ber. C 51,43 H 5,51 F 13,56 N 6,66 gef. C 51,22 H 5,41 F 13,40 N 6,75
c) N-Trifluoracetyl-L-glutaminsäure-N bis(2-hydroxyethyi)-monoamid
21,92 g ( 52,15 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 104b werden in 500 ml Ethanol gelöst und 3 g Palladium-Katalysator (10 % Pd/C) zugegeben. Man hydriert bei
Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur
Trockene ein.
Ausbeute: 43,0 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 40,01 H 5,19 F 17,26 N 8,48 gef. C 39,84 H 5,13 F 17,09 N 8,68
c) Trifluoracetyl-L-glutanιinsäure-N-bis(2-hy{koxyethyl)-amid-5-[l ~(4- ρerfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu 10,96g ( 33,2 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 104a und 18,87g ( 33,2 mmol ) 1- Perfluoroctylsulfonyl - piperazin , Oiergestellt nach DE 19603033 ) in 80 ml Tetrahydrofuran, gibt man bei 0° C 16,42 g ( 66,4 mmol ) EEDQ (2-Ethoxy-l,2- dihydrochinolin-1-carbonsäureethylester ) zu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Lauf mittel : Dichlormethan / Methanol =20:1) Ausbeute: 30,93 g (93 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 39,61 H 2,89 F 35,66 N 6,19 S 3,54 gef. C 39,68 H 2,74 F 35,81 N 6,13 S 3,40 e) L-Glutaminsäure-N- bis(2-hydroxyethyl)-amid-5- [l-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin] - amid04in 200 ml Ethanol, leitet man bei 0° C für eine Stunde Ammoniak-Gas ein. Man rührt anschließend 4 Stunden bei 0° C. Es wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand aus Wasser ausgerührt. Man filtriert den Feststoff ab und trocknet im Vakuum (50° C ). Ausbeute : 26,55 g ( 97 % der Theorie ) eines amorphen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 41,12 H 2,89 F 35,66 N 6,19 S 3,54 gef. C 41,15 H 2,83 F 35,78 N 6,28 S 3,71
f) N-[1,4,7-Tris (carboxylatomethyl) -1,4,7,10- tetraazacyclododecan- 10 -( pentanoyl- 3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ] -L-glutaminsäure-N-bis(2-hydroxyethyl)-amid-5- [l-(4- perfluoroctylsulfonyl )-piperazin ]-amid, Gd-Komplex
211,96 g ( 24,25 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 104e, 2,79 g (24,25 mmol ) N- Hydroxysuccinimid, 2,12 g ( 50 mmol ) Lithiumchlorid und 15,27g (24,25 mmol ) 1,4,7-Tris ( carboxylatomethyl) - 10 -[ (3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ]- pentansäure]- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 200 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10° C gibt man 8,25 g ( 40 mmol ) N,NDicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chomatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ).
Ausbeute: 27,43 g (81 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 11,0 %
Elementaranalyse ( auf wasserfreie Substanz berechnet ) ber. C 34,41 H 3,83 F 23,13 N 9,03 S 2,30 Gd 11,26 gef. C 34,34 H 3,98 F 23,29 N 9,19 S 2,15 Gd 11,07
Beispiel 105 a) N -Trifluoracetyl-L-glutaminsäure-5-benzyte^^ amid[
Zu einer Lösung aus 8,03g ( 24,08 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 104a , 3,98 g ( 24,08 mmol ) Dimethyl-bis(l,l-dihydroymethyl)-amin und 2,77 g (24,08 mmol ) N - Hydroxysuccinimid, gelöst in 150 ml Dimethylformamid, gibt man bei 0° C 8,25 g (40 mmol ) N,N- Dicyclohexylcabodiimid zu. Man rührt 3 Stunden bei 0° C, anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert am Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/ Ethanol = 20:1 ). Ausbeute: 110,53 g ( 91% der Theorie ) eines zähen Öls.
Eiementai ranalyse : ber. C 50,00 H 5,66 F 11,86 N 7,18 gef. C 50,17 H 5,82 F 11,80 N 7,15
b) N-Trifluoracetyl-L-glutaminsäure-5-benzylester- [l-(4- perfluoroctylsulfonyl ) -piperazin ] - amid
25,05 g ( 52,15 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 105a werden in 500 ml Ethanol gelöst und 6 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben, hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 20,36 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 40,00 H 5,42 F 14,60 N 7,18 gef. C 40,10 H 5,53 F 14,69 N 7,28
c) N-Trifluoracetyl-L.glutaminsäure-N-dimethyl-bis(l, l-dihydroxymethyl)-amid-5— [l-(4- perfluoroctylsuffonyl ) piperazin]-amid Zu 12,96 g ( 33,2 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 105b und 18,87g ( 33,2 mmol ) 1- Perfluoroctylsulfonyl - piperazin , (hergestellt nach DE 19603033 ) in 800 ml Tetrahydrofuran, gibt man bei 0° C 16,42 g ( 66,4 mmol ) EEDQ (2-Ethoxy-l,2-dihydrochinolin-l- carbonsäureethylester ) zu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Lauf mittel : Dichlormethan / Methanol =20:1) Ausbeute: 28,42 g (91% der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber. C 31,93 H 3,00 F 40,40 N 5,96 S 3,41 gef. C 32,08 H 2,94 F 40,57 N 5,88 S 3,31
d) L-Glutaminsäure-N-[dimemyl-bis(l,l-dmydroxymemyl)]-amid-5-[(l- 4-perfluoroctylsul- fonyl )- piperazin] — amid
In eine Lösung aus 28,41 g ( 30,2 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 105c in 200 ml Ethanol, leitet man bei 0° C für eine Stunde Ammoniak-Gas ein. Man rührt anschließend 4 Stunden bei 0° C. Es wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand aus Wasser ausgerührt. Man filtriert den Feststoff ab und trocknet im Vakuum (50° C ). Ausbeute : 24,74 g ( 97 % der Theorie ) eines amorphen Feststoffs. Elementaranalyse:
ber. C 32,71 H 3,46 F 38,24 N 6,63 S 3,80 gef. C 32,75 H 3,33 F 38,38 N 6,68 S 3,81
e) 2-N-[l,4,7-Tris (carboxylatomethyl) -1,4,7,10- tetraazacyclododecan-10 -( pentanoyl- 3- aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ] -L-glutaminsäure-N-[dimethyl-bis(l,l-dihydroxymethyl)- amid]-5- [l-(4-perfluoroctylsulfonyl )-piperazin ]-amid, Gd-Komplex
20,48 g ( 24,25 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 105d 2,79 g (24,25 mmol ) N- Hydroxysuccinimid, 2,12 g ( 50 mmol ) Lithiumchlorid und 15,27g (24,25 mmol ) 1,4,7-Tris ( carboxylatomethyl) - 10 -[ (3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ]- pentansäure]- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 200 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10° C gibt man 8,25 g ( 40 mmol ) N,N-Dicyclohexylcarbo- diimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chomatographie gereinigt (Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus
Wasser/Ethanol/Acetonitril).
Ausbeute: 29,05 g (83% der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt: 11,0 %
Elementaranalyse ( auf wasserfreie Substanz berechnet ) ber. C 34,12 H 3,91 F 22,38 N 8,73 S 2,22 Gd 10,90 gef. C 34,24 H 3,98 F 22,39 N 8,69 S 2,15 Gd 10,87
Beispiel 106
a) N-Trifluormemylacetyl-L-glutanιinsäure-5-benzylester-[l-(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid
Zu 11,06 g ( 33,2 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 104a und 18,87g ( 33,2 mmol ) 1- Perfluoroctylsulfonyl - piperazin , (hergestellt nach DE 19603033 ) in 80 ml Tetrahydrofuran, gibt man bei 0° C 16,42 g ( 66,4 mmol ) EEDQ (2-Ethoxy-l,2- dihydrochinolin-1-carbonsäureethylester ) zu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Lauf mittel : Dichlormethan / Methanol =20:1) Ausbeute: 27,28 g (93 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 35,35 H 2,40 F 43,01 N 4,76 S 3,63 gef. C 35,48 H 2,51 F 42,87 N 4,73 S 3,50
b) N-Trifluoracetyl-L-glutanώιsäure-5-[l-[4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
21,92 g ( 52,15 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 106a werden in 500 ml Ethanol gelöst und 3 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 41,37 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber. C 28,76 H 1,91 F 47,89 N 5,30 S 4.04 gef. C 28,84 H 2,03 F 47,79 N 5,28 S 4,19
c) N-Trifluoace1 l-L-glutaminsäure-N-bis(2-hyά^oxyemyl)-amid-5-[l-(4-perfluoroctyl- sulfonyl)-piperazin]-amid
Zu einer Lösung aus 24,9 g ( 24,08 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 106a , 2,53 g (24,08 mmol ) Diethanolamin und 2,77 g (24,08 mmol ) N - Hydroxysuccimmid, gelöst in 150 ml Dimethylformamid, gibt man bei 0° C 8,25 g (40 mmol ) N,N-Dicyclohexylcarbo- diimid zu. Man rührt 3 Stunden bei 0° C, anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chomatographiert am Kieselgel (Laufmittel: = Dichlormethan / Ethanol = 20:1 ). Ausbeute: 9,11 g ( 90% der Theorie ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse :
ber. C 31,37 H 2,75 F 43,15 N 6,36 S 3,64 gef. C 31,22 H 2,61 F 43,30 N 6,25 S 3,81
d) L-Glutaminsäure-N- bis(2-hydroxyethyl)-amid-5- [1- ( 4- perfluoroctylsulfonyl )- piperazin] - amid
In eine Lösung aus 26,61 g ( 30,22 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 106c in 200 ml Ethanol, leitet man bei 0° C für eine Stunde Ammoniak-Gas ein. Man rührt anschließend 4 Stunden bei 0° C. Es wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand aus Wasser ausgerührt. Man filtriert den Feststoff ab und trocknet im Vakuum (50° C ). Ausbeute : 23,93 g ( 97 % der Theorie ) eines amorphen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 30,89 H 3,09 F 39,56 N 6,86 S 3,93 gef. C 30,75 H 3,13 F 39,78 N 6,75 S 3,81 e) N-[1,4,7-Tris (carboxylatomethyl) -1,4,7,10- tetraazacyclododecan- 10 -( pentanoyl- 3-aza- 4-oxo-5-methyl-5-yl)] -L-glutaminsäure-N-bis(2-hydroxyethyl)-amid-5- [ 1 -(4-perfluor- octylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex
16,43 g ( 24,25 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 106d, 2,79 g (24,25 mmol ) N- Hydroxysuccinimid, 2,12 g ( 50 mmol ) Lithiumchlorid und 15,27g (24,25 mmol ) 1,4,7-Tris ( carboxylatomethyl) - 10 -[ (3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ]- pentansäure]- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 200 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10° C gibt man 8,25 g ( 40 mmol ) N,NDicyclohexylcarbodümid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chomatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ). Ausbeute: 28,10 g (83 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 11,0 %
Elementaranalyse ( auf wasserfreie Substanz berechnet ) ber. C 34,41 H 3,83 F 23,13 N 9,03 S 2,30 Gd 11,26 gef. C 34,44 H 4,98 F 23,19 N 8,89 S 2,15 Gd 11,17
Beispiel 107
a) N-Trifluoracetyl-glutaminsäure-5-benzylester-[l-(4-ρerfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid
Zu 11,06g ( 33,2 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 104a und 18,87g ( 33,2 mmol ) 1-
Perfluoroctylsulfonyl - piperazin , (hergestellt nach DE 19603033 ) in 80 ml
Tetrahydrofuran, gibt man bei 0° C 16,42 g ( 66,4 mmol ) EEDQ (2-Ethoxy-l,2- dihydrochinolin-1 -carbonsäureethylester ) zu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel :
Dichlormethan / Methanol =20:1)
Ausbeute: 27,28 g (93 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 35,35 H 2,40 F 43,01 N 4,76 S 3,63 gef. C 35,48 H 2,54 F 42,87 N 4,73 S 3,40 b) N-TrMuoraceryl-L-glutaminsäure-5-[l-[4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
21,92 g ( 52,15 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 107a werden in 500 ml Ethanol gelöst und 3 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 41,37 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
ülementa ranalyse:
ber. C 28,76 H 1,91 F 47,89 N 5,30 S 4.04 gef. C 28,84 H 1,81 F 47,79 N 5,28 S 4.16
Beispiel 108
a) 6-N-Benzyloxycarbonyl - 2-N-(2,3,4,5-pentahydroxy-hexanoyl)L-lysin-[l-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu einer Lösung aus 100,0 g (120,4 mol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c), in 500 ml trockenem Tetrahydrofuran tropft man bei 50° C eine Lösung aus 21,45 g (120,4 mol) 5-
Gluconolacton in 50 ml Tetrahydrofuran. Man rührt 3 Stunden bei 60° C und anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel .
(Laufmittel : Dichlormethan/Ethanol = 20 :1) .
Ausbeute: 98,37 g (82 % der Theorie ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 38,10 H 3,70 F 32,02 N 5,55 S 3,18 gef:: C 38,22 H 3,79 F 32,02 N 5,42 S 3,29
b) 2-N-(2,3,4,5-pentahyα oxy-hexanoyl)-L-lysin-l-[(4-perfluoroctylsulfonyl)-pipera2in]-amid 100,9 g (100,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 108a) werden in 2000 ml Ethanol gelöst und es werden 10,0 g Palladium Katalysator (10% Pd / C ) hinzu gegeben. Man hydriert 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das
Filtrat im Vakuum zur Trockne ein .
Ausbeute : 87,46 g (quantitativ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 32,96 H 3,57 N 6,41 S 3,67 F 36,93 gef.: C 32,91 H 3,72 N 6,34 S 3,50 F 36,78
f) 6-N-[l,4,7-Tris (carboxylatomethyl) ]-l,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-N-(pentanoyl-3- aza-4-oxo-5-methyl-5-yl) ]-2-N-[l-O-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose]-L-lysin-[l-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid,Gd-Komplex
50,0 g (54,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21e) , 6,28 g (54,55 mmol) N-
Hydroxysuccimmid , 4,62 g (109,0 mol ) Lithiumchlorid und 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-Tris
(carboxylatomethyl )-10- (carboxy - 3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5-yl )-l,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex, werden unter leichter Erwärmung in 400 ml
Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10°C gibt man 16,88 g (81,8 mol) N,N-
Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt (RP-18 Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril) .
Ausbeute: 75,9 g (91,0 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt : 8,6 % .
Elementaranalyse (auf wasserfreie Substanz berechnet): ber.: C 35,34 H 4,09 N 8,24 S 2,10 F 21,12 Gd 10,28 gef.: C 35,28 H 4.15 N 8,19 S 2,15 F 21.03 Gd 10,14
Beispiel 109
a) 6-N-Benzyloxycarbonyl - 2-N-(2,3,4,5-pentahydroxy-hexanoyl)L-lysin-[l-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu einer Lösung aus 100,0 g (120,4 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c), und 12,18 g (120,4 mmol) Triethylamin in 500 ml trockenem Tetrahydrofuran tropft man bei 50° C eine Lösung aus 21,45 g (120,4 mol) 5-Gluconolacton in 50 ml Tetrahydrofuran. Man rührt 3
Stunden bei 60° C und anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Dann gibt man 400 ml
5 % ige aqu.
Salzsäure dazu, rührt 5 Minuten bei Raumtemperatur, versetzt mit Natriumchlorid, trennt die organische Phase ab, trocknet sie über Magnesiumsulfat, dampft sie im Vakuum zur
Trockene ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel .
(Laufmittel : Dichlormethan/Ethanol = 20 :1) .
Ausbeute: 100,97 g (82 % der Theorie ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 37,58 H 3,45 F 31,58 N 5,48 S 3,14 gef: C 37,72 H 3,59 F 31,72 N 5,42 S 3,29
b) 2-N-(2,3,4,5-pentahyά^oxy-hexanoyl)-L-lysin-l-[(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
100,9 g (100,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 108a) werden in 2000 ml Ethanol gelöst und es werden 10,0 g Palladium Katalysator (10% Pd / C ) hinzu gegeben. Man hydriert 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das
Filtrat im Vakuum zur Trockne ein .
Ausbeute : 87,46 g (quantitativ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 32,96 H 3,57 N 6,41 S 3,67 F 36,93 gef: C 32,91 H 3,72 N 6,34 S 3,50 F 3678
c) 6-N-[l,4,7-Tris (carboxylatomethyl) ]-l,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-N-(pentanoyl-3- aza-4-oxo-5-methyl-5-yl) ]-2-N-[l-O-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose]-L-lysin-[l-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid,Gd-Komplex
50,0 g (54,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21e) , 6,28 g (54,55 mmol) N- Hydroxysuccinimid , 4,62 g (109,0 mol ) Lithiumchlorid und 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-Tris (carboxylatomethyl )-10- (carboxy - 3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5-yl )-l,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex, werden unter leichter Erwärmung in 400 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10°C gibt man 16,88 g (81,8 mol) N,N- Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt (RP-18 Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril) . Ausbeute: 75,9 g (91,0 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt : 8,6 % .
Elementaranalyse (auf wasserfreie Substanz berechnet): ber.: C 35,34 H 4,09 N 8,24 S 2,10 F 21,12 Gd 10,28 gef: C 35,28 H 4,15 N 8,19 S 2,15 F 21.03 Gd 10,14
Beispiel 110
a) 6-N-BenzyloxycarbonyI - 2-N-[l-0-α-D -carbonylmethyl-(2,3,4,6-tetra-O-benzyl glucopyranose]-L-lysin-[l-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu einer Lösung aus 100,0 g (120,4 mol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c), 72,1 g
(120,4 mol) 1-O-α-D-Carboxymethyl - 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-glucopyranose und 13,86 g
(120,4 mol) N-Hydroxysuccinimid, gelöst in 500 ml Dimethylformamid , gibt man bei 0°C
41,27g (200,0 mmol ) N,N - Dicyclohexylcarbodiimid hinzu. Man rührt 3 Smnden bei 0°C und anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel .
(Laufmittel : Dichlormethan/Ethanol = 20 :1) .
Ausbeute: 136,1 g (87 % der Theorie ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 57,32 H 4,89 N 4.31 F 24,86 S 2,47 gef.: C 57,48 H 5,04 N 4,20 F 24,69 S 2,38
b) 2-N-[l-0-α-D-Carbonylmemylglucopyranose]-L-lysin-l-[(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid
130,0 g (100,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 110a) werden in 2000 ml Ethanol gelöst und es werden 10,0 g Palladium Katalysator (10% Pd / C ) hinzu gegeben. Man hydriert 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das
Filtrat im Vakuum zur Trockne ein .
Ausbeute : 91,7 g (quantitativ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 34,07 H 3,63 N 6,11 S 3,50 F 35,24 gef: C 33,92 H 3,71 N 6,02 S 3,42 F 35,33 c) 6-N-[l,4,7-Tris (carboxylatomethyl) ]- 1,4,7, 10-tetraazacyclododecan- 10-N-(pentanoyl-3- aza-4-oxo-5-methyl-5-yl) ]-2-N-[l-O-α-D-carbonylmethyl-glucopyranose]-L-lysin-[l-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid,Gd-Komplex
50,0 g (54,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 110b) , 6,28 g (54,55 mmol) N-
Hydroxysuccinimid , 4,62 g (109,0 mol ) Lithiumchlorid und 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-Tris
(carboxylatomethyl )-10- (carboxy - 3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5-yl )-l,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex, werden unter leichter Erwärmung in 400 ml
Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10°C gibt man 16,88 g (81,8 mol) N,N-
Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt (RP-18 Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril) .
Ausbeute: 75,9 g (91,0 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt : 8,6 % .
Elementaranalyse (auf wasserfreie Substanz berechnet): ber.: C 35,34 H 4,09 N 8,24 S 2,10 F 21,12 Gd 10,28 gef.: C 35,26 H 4,18 N 8,14 S 2,158 F 21.01 Gd 10,13
Beispiel 111
a) 6-N-Benzyloxycarbonyl - 2-N-[l-0-α-D -carbonylmethyl-(2,3,4,6-tetra-O-benzyl- galactopyranose]-L-lysin-[l-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu einer Lösung aus 50,0 g (60,2 mol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c), 36,05 g (60,2 mmol) 1-O-α-D-Carboxymethyl - 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-galactopyranose und 6,93 g (60,2 mmol) N-Hydroxysucciriimid, gelöst in 500 ml Dimethylformamid , gibt man bei 0°C 20,64 g (100,0 mmol ) N,N - Dicyclohexylcarbodiimid hinzu. Man rührt 3 Stunden bei 0°C und anschheßend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel . (Lauf mittel : Dichlormethan/Ethanol == 20 :1) . Ausbeute: 68,1 g (87 % der Theorie ) eines zähen Öls. Elementaranalyse: ber.: C 57,32 H4.89 N 4,31 F 24,86 S 2,47 gef: C 57,47 H 5,05 N 4,19 F 24,72 S 2,29
b) 2-N-[l-0- -D-Carbonylmemyl-galactopvranose]-L-lysin-l-[(4-peιfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid
65,0 g 50,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel lila) werden in 1000 ml Ethanol gelöst und es werden5,0 g Palladium Katalysator (10% Pd / C ) hinzu gegeben. Man hydriert 12
Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im
Vakuum zur Trockne ein .
Ausbeute : 45,85 g (quantitativ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 34,07 H 3,63 N 6,11 S 3,50 F 35,24 gef.: C 33,93 H 3,74 N 6,01 S 3,39 F 35,05
fc 6-N-[l,4,7-Tris (carboxylatomethyl) ]-l,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-N-(pentanoyl-3- aza-4-oxo-5-methyl-5-yl) ]-2-N-[l-O-α-D-carbonylmethyI-galactopyranose3-L-Iysin-[l-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid,Gd-Komplex
50,0 g (54,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel lllb) , 6,28 g (54,55 mmol) N-
Hydroxysuccinimid , 4,62 g (109,0 mol ) Lithiumchlorid und 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-Tris
(carboxylatomethyl )-10- (carboxy - 3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5-yl )-l,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex, werden unter leichter Erwärmung in 400 ml
Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10°C gibt man 16,88 g (81,8 mol) N,N-
Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chromatographie gereinigt (RP-18 Lauf mittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril) .
Ausbeute: 37,95 g (91,0 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt : 8,6 % .
Elementaranalyse (auf wasserfreie Substanz berechnet): ber.: C 35,34 H 4,09 N 8,24 S 2,10 F 21,12 Gd 10,28 gef.: C 35,22 H 4,17 N 8.18 S 2,19 F 20.91 Gd 10,12 Beispiel 112
a) N-Trifluoracetyl- L-glutaminsäure-mono-benzylester
100 g (421,5 mmol ) L-Glutaminsäure-mono-benzylester werden in einer Mischung aus 1000 ml Trifluoressigsäureethylester / 500 ml Ethanol gelöst und 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft zur Trockene ein und kristallisiert den Rückstand aus Düsopropylether. Ausbeute: 140,47 g (96 % der Theorie ) eines farblosen kristallienen Pulvers.
Elementaranalyse:
ber. C 50,46 H 4,23 F 17,10 N 4,20 gef. C 51,35 H 4,18 F 17,03 N 4,28
b) 2-N-Trifluoacetyl-L-glutammsäure-mono-benzylester-5-N-(methyI)-N-(2,3,4,5,6-ρentahy- droxyhexyl)~amid
Zu einer Lösung aus 24,9 g ( 24,08 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 112a , 2x g (24,08 mmol ) N-Methylglucamin und 2,77 g (24,08 mmol ) N - Hydroxysuccinimid, gelöst in 150 ml Dimethylformamid, gibt man bei 0° C 8,25 g (40 mmol ) N,N- Dicyclohexylcabodiimid zu. Man rührt 3 Stunden bei 0° C, anschließend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chomatographiert am Kieselgel (Laufmittel: = Dichlormethan / Ethanol = 20:1 ). Ausbeute: 9,xx g ( 89% der Theorie ) eines zähen öls.
Elementaranalyse :
ber. C 51,43 H 5,51 F 13,56 N 6,66 gef. C 51,22 H 5,41 F 13,40 N 6,75
c) N-Trifluoracetyl-L-glutaminsäure-N -(memyl)-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)-amid
21,9xxg ( 52,15 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 112b werden in 500 ml Ethanol gelöst und 3 g Palladium-Katalysator (10 % Pd / C ) zugegeben. Man hydriert bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein. Ausbeute: 43,0 g (quantitativ ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 40,01 H 5,19 F 17,26 N 8,48 gef. C 39,84 H 5,13 F 17,09 ^ N 8,68
d) Trifluoraceryl-L-glutaminsäure-5-N-(memyl)-N-(2,3,4,5,6-pent^ydroxyhexyl)-amid-[l- (4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amidpiperazin]-amid
Zu 10,96g ( 33,2 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 112c und 18,87g ( 33,2 mmol ) 1- Perfluoroctylsulfonyl - piperazin , (hergestellt nach DE 19603033 ) in 80 ml Tetrahydrofuran, gibt man bei 0° C 16,42 g ( 66,4 mmol ) EEDQ (2-Ethoxy-l,2- dihydrochinolin-1 -carbonsäureethylester ) zu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel : Dichlormethan / Methanol =20:1) Ausbeute: 28,67 g (92 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 39,61 H 2,89 F 35,66 N 6,19 S 3,54 gef. C 39,68 H 2,74 F 35,81 N 6,13 S 3,40
e) L-Glutanήnsäure-5-N-(methyl)-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)-amid-- [1- ( 4- perfluoroctylsulfonyl )- piperazin] - amid
In eine Lösung aus 28,36 g ( 30,22 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 112d in 200 ml Ethanol, leitet man bei 0° C für eine Stunde Ammoniak-Gas ein. Man rührt anschheßend 4 Stunden bei 0° C. Es wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand aus Wasser ausgerührt. Man filtriert den Feststoff ab und trocknet im Vakuum (50° C ). Ausbeute : 24,19 g ( 95 % der Theorie ) eines amorphen Feststoffs.
Elementaranalyse:
ber. C 41,12 H 2,89 F 35,66 N 6,19 S 3,54 gef. C 41,15 H 2,83 F 35,78 N 6,28 S 3,71 f) N-[1,4,7-Tris (carboxylatomethyl) -1,4,7,10- tetraazacyclododecan- 10 -(pentanoyl- 3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ] -L-glutaminsäure-5-N-(methyl)-N-(2,3,4,5,6-pntahydroxyhexyl)- amid-5- [l-(4-perfluoroctylsulfonyl )-piperazin ]-amid, Gd-Komplex
20,43 g ( 24,25 mmol ) der Titelverbindung aus Beispiel 112e 2,79 g (24,25 mmol ) N- Hydroxysuccinimid, 2,12 g ( 50 mmol ) Lithiumchlorid und 15,27g (24,25 mmol ) 1,4,7-Tris ( carboxylatomethyl) - 10 -[ (3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ]- pentansäure]- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex werden unter leichter Erwärmung in 200 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10° C gibt man 8,25 g ( 40 mmol ) N,NDicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschheßend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschließend durch Chomatographie gereinigt ( Kieselgel RP-18, Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril ).Ausbeute: 28,45 g (79 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt: 11,0 %
Elementaranalyse ( auf wasserfreie Substanz berechnet ) ber. C 34,41 H 3,83 F 23,13 N 9,03 S 2,30 Gd 11,26 gef. C 34,34 H 3,98 F 23,29 N 9,19 S 2,15 Gd 11,07
Beispiel 113
a) 6-N-Benzyloxycarbonyl - 2-N-[l -0-α-D -carbonylmethyl-(2,3,4 -tri O benzyl-glucuron- säme-benzylester]-L-lysin-[l-(4-perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid
Zu einer Lösung aus 100,0 g (120,4 mol) der Titelverbindung aus Beispiel 21c), 73,77 g (120,4 mol) 1-O-α-D-Carboxymethyl - 2,3,4-tri-O-benzyl-glucuronsäure-benzylester und 13,86 g (120,4 mol) N-HyαYoxysuccinirnid, gelöst in 500 ml Dimethylformamid , gibt man bei 0°C 41,27g (200,0 mmol ) N,N - Dicyclohexylcarbodümid hinzu. Man rührt 3 Stunden bei 0°C und anschheßend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel . (Laufmittel : Dichlormethan/Ethanol = 20 :1) .
Ausbeute: 147,58 g (86 % der Theorie ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 52,25 H 4,31 N 3,93 F 22,66 S 2,45 gef.: C 52,38 H 4,17 N4.12 F 22,78 S 2,39
b) 2-N-[l-0-α-D-Carbonylmethyl-glucuronsäure]-L-lysin-l-[(4-perfluoroctylsulfonyl)- piperazin]-amid
142,52 g (100,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 113a) werden in 2000 ml Ethanol gelöst und es werden 10,0 g Palladium Katalysator (10% Pd / C ) hinzu gegeben. Man hydriert 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das
Filtrat im Vakuum zur Trockne ein .
Ausbeute : 93,06 g (quantitativ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 33,56 H 3,36 N 6,02 S 3,45 F 34,71 gef.: C 33,31 H 3,42 N 6,04 S 3,40 F 35,51
c) 6-N-[l,4,7-Tris (carboxylatomethyl) ]-l,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-N-(pentanoyl-3- aza-4-oxo-5-methyl-5-yl) ]-2-N-[l-O-α-D-carbonylmethyl-glucuronsäure]-L-lysin-[l-(4- perfluoroctylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Komplex , Natriumsalz
50,76 g (54,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 113b) , 6,28 g (54,55 mmol) N-
Hydroxysuccinimid , 4,62 g (109,0 mol ) Lithiumchlorid und 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-Tris
(carboxylatomethyl )-10- (carboxy - 3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5-yl )- 1,4,7, 10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex, werden unter leichter Erwärmung in 400 ml
Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10°C gibt man 16,88 g (81,8 mol) N,N-
Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschheßend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschheßend durch Chromatographie gereinigt (RP-18 Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril) .
Ausbeute: 75,14,9 g (88,0 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs.
Wassergehalt : 8,6 % .
Elementaranalyse (auf wasserfreie Substanz berechnet): ber.: C 34,53 H 3,80 N 8,05 Na 1,47 S 2,05 F 20,63 Gd 10,05 gef: C 34,38 H 3.95 N 8,19 Na 1,63 S 2,15 F 20.83 Gd 10,14 Beispiel 114
a) 6-N-Benzyloxycarbonyl)- 2--[2-(N-emyl-N-peιfluorocrylsulfonyl]-amino] -acetyl-L-lysin
31,82,0 g (113,5 mmol ) 6-N-BenzyIoxycarbonyl)-L-lysin und 66,42 g ( 113,5 mmol ) 2-(N-
Ethyl-N- perfluoroctylsulfonyl)-aminoessigsäure (hergestellt nach DE 19603 033 ) in 300 ml
Tetrahydrofuran, gibt man bei 0°C 49,46 g (200,0 mmol ) EEDQ (2-Ethoxy-l,2- dihydrochinohn-1 -carbonsäureethylester) hinzu und rührt über Nacht bei Raumtemperatur.
Man dampft im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel
:Dichlormethan /Methanol =20:1).
Ausbeute: 55,79 g (58 % der Theorie ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 36.85 H 3,09 N 4,96 F 38,11 S 3,78 gef.: C 36,85 H 3,19 N 4,87 F 38,28 S 3,95
b) 6-N-Benzyloxycarbonyl - 2-N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl--L- lysin- N-methyl-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxy-hexyl)-amid
Zu einer Lösung aus 51,02 g (60,2 mol) der Titelverbindung aus Beispiel 114a), 11,75 g
(60,2 mol) N-methyl-glucamin und 6,93 g (60,2 mol) N-Hydroxysuccinimid, gelöst in 250 ml
Dimethylformamid , gibt man bei 0°C 20,64g (100,0 mmol ) N,N -Dicyclohexylcarbodiimid hinzu. Man rührt 3 Stunden bei 0°C und anschheßend über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert vom ausgefallenen Harnstoff ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert an Kieselgel .
(Lauf mittel : Dichlormethan/Ethanol = 20 :1) .
Ausbeute: 53,05 g (86 % der Theorie ) eines zähen Öls.
Elementaranalyse: ber.: C 38,68 H 4,03 N 5,47 F 31,52 S 3,13 gef.: C 38,49 H 4,17 N 5,32 F31,70 S 3,29 c) 2-N-[2-(N-emyl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin-N-memyl-N- pentahydroxy-hexyl)-amid
102,48g (100,0 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 114b) werden in 2000 ml Ethanol gelöst und es werden 10,0 g Palladium Katalysator (10% Pd / C ) hinzu gegeben. Man hydriert 12 Stunden bei Raumtemperatur. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft das
Filtrat im Vakuum zur Trockne ein .
Ausbeute : 89,06 g (quantitativ) eines farblosen Feststoffs.
Elementaranalyse: ber.: C 33,72 H 3,96 N 6,29 S 3,60 F 36,26 gef: C 33,91 H 3,82 N 6,14 S 3,47 F 36,31
d) 6-N-[l,4,7-Tris (carboxylatomethyl) ]-l, 4,7,10-tetraazacy clododecan-10-N-(pentanoyI-3- aza-4-oxo-5-memyl-5-yl) ]-2-N-[2-(N-e yl-N-perfluoroctylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysm- N-methyl-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxy-hexyl)-amid, Gd-Komplex 48,58 g (54,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 114) , 6,28 g (54,55 mmol) N- Hydroxysuccinimid , 4,62 g (109,0 mol ) Lithiumchlorid und 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-Tris (carboxylatomethyl )-10- (carboxy - 3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5-yl )-l,4,7,10- tetraazacyclododecan, Gd-Komplex, werden unter leichter Erwärmung in 400 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Bei 10°C gibt man 16,88 g (81,8 mol) N,N -Dicyclohexylcarbodiimid zu und rührt anschheßend über Nacht bei Raumtemperatur. Man gießt die Lösung in 3000 ml Aceton und rührt 10 Minuten. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und anschheßend durch Chromatographie gereinigt (RP-18 Laufmittel: Gradient aus Wasser / Ethanol / Acetonitril) .
Ausbeute: 73,27 g (89,4 % der Theorie) eines farblosen Feststoffs. Wassergehalt : 8,6 % .
Elementaranalyse (auf wasserfreie Substanz berechnet): ber.: C 35,18 H 4,23 N 4,23 S 2,13 F 21,50 Gd 10,47 gef: C 35,28 H4,15 N 4.19 S 2,18 F 21.33 Gd 10,61 Beispiel 115: MRT-Darstellunq von arteriosklerotischen Plaques nach intravenöser Gabe erfindunqsqemäßer Metallkomplexe
In Kaninchen mit genetisch induzierter Arteriosklerose (Watanabe-Kaninchen) konnte 5-60 min sowie 24 h und 48 h nach intravenöser Applikation von 25 /mol Gd/kg KGW der erfindungsgemäßen Verbindungen in T-j -gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen (TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, Flipwinkel α 15°) ein deutliches Enhancement in den arteriosklerotischen Plaques beobachte werden. Die gesunde Gefäßwand zeigte keine oder nur geringe Kontrastmittelaufnahme und verzeichnete daher auch keinen oder nur geringen Signalanstieg in den T1 -gewichteten Aufnahmen. Aufgrund des Kontrastes zwischen signalreichem Plaque und signalarmer gesunder Gefäßwand war eine Diagnose der arteriosklerotischen Gefäßwandveränderungen möglich.
Die Abbildungen in Fig. 1 zeigen MR-Aufnahmen der Aorta vor, sowie 24 h und 48 h nach intravenöser Applikation von 25 /mol Gd/kg KGW des Metallkomplexes XV in Watanabe-Kaninchen (genetisch induzierte Arteriosklerose). Die T-| -gewichteten Gradienten-Echo-Aufnahmen (1.5 T; TR: 11.1 ms, TE: 4.3 ms; NA: 2; Matrix: 213*256; Schichtdicke: 1.0 mm) verdeutlichen einen starken Signalanstieg im arteriosklerotischen Plaque. Die Lokalisation der Plaques, besonders im Aortenbogen sowie an den Gefäßabgängen, wurde mittels Sudan-3-Färbung bestätigt.
Beispiel 116: MRT-Darstellung von arteriosklerotischen Plaques nach intravenöser Gabe des Metallkomplexes XV in Ratten, sowie Korrelation des post mortem Images mit Sudan HI-Färbung
Die Abbildungen in Fig. 2 zeigen MR-Aufnahmen der Aorta vor, sowie 35, 60 min und 24 h nach intravenöser Applikation von 10 //mol Gd/kg KGW des Gad Metallkomplexes XV in Watanabe-Kaninchen (genetisch induzierte Arteriosklerose). Die T-| -gewichteten Gradienten-Echo-Aufnahmen (MPRage; 1.5 T; TR: 11.1 ms, TE: 4.3 ms; NA: 2; Matrix: 213*256; Schichtdicke: 1.0 mm) verdeutlichen einen starken Signalanstieg im arteriosklerotischen Plaque. Die Lokalisation der Plaques, besonders im Aortenbogen sowie an den Gefäßabgängen, wurde mittels Sudan-3-Färbung bestätigt. Anschließend wurde die MR-Bildgebung des in Agar eingebetteten Präparates erneut mit einer T-|- gewichteten Gradientenechosequenz (MPRage; 1.5 T; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, Flipwinkel α 15°; NA: 2; Matrix: 213*256) sowie einer Spin-Echo-Sequenz (1.5 T; TR: 400 ms, TE: 15 ms; NA: 16; Matrix: 256*256) untersucht (post mortem Image). Dabei zeigte sich eine hervorragende Korrelation der Aortenabschnitte mit starkem Signalanstieg und den angefärbten Plaques, die eine Aufnahme der erfindungsgemäßen Verbindungen in den arteriosklerotischen Plaques belegt.
Beispiel 117: Infarkt-Darstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Metallkomplexes XV in Ratten
Die Abbildungen in Fig. 3 zeigen MR-Aufnahmen des Herzen (in vivo und post mortem) 24 h nach intravenöser Applikation von 100 //mol Gd/kg KGW des Metallkomplexes XV in Ratten akut induziertem Herzinfarkt. Die T-| -gewichteten Spin-Echo-Aufnahmen (1.5 T; TR: 400 ms, TE: 6 ms; NA: 4; Matrix: 128*128; Schichtdicke: 2.5 mm) verdeutlichen den starken Signalanstieg im Infarktareal. Die erfolgreiche Induktion eines akuten Myokardinfarkts wurde mittels NBT- Färbung bestätigt.
Metallkomplex XV, 100 mol/kg i.V.; T1-SE, TR/TE 400/6 ms; Pfeil: Myokardinfarkt.
Beispiel 118: Infarkt-Darstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Metallkomplexes I in Ratten
Die Abbildungen in Fig. 4 zeigen MR-Aufnahmen des Herzen (in vivo und post mortem) 24 h nach intravenöser Applikation von 100 //mol Gd/kg KGW des Metallkomplexes I in Ratten akut induziertem Herzinfarkt. Die T-j -gewichteten Spin-Echo-Aufnahmen (1.5 T; TR: 400 ms, TE: 6 ms; NA: 4; Matrix: 128*128; Schichtdicke: 2.5 mm) verdeutlichen den starken Signalanstieg im Infarktareal. Die erfolgreiche Induktion eines akuten Myokardinfarkts wurde mittels NBT- Färbung bestätigt.
Beispiel 119: Lvmphknotendarstellunq MRT) nach intravenöser Gabe des Metallkomplexes XV in VX2-Tumor tragenden Kaninchen
Die Abbildungen in Fig. 5 zeigen MR-Aufnahmen von iliakalen Lymphknoten präkontrast sowie bis 24 h nach intravenöser Applikation von 200 //mol Gd/kg KGW des
Metallkomplexes XV in Kaninchen mit i.m. implantiertem VX2-Tumor. Die T-|- gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen (1.5 T; Sequenz: MPRange; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, 15°) verdeutlichen den starken Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe. Zonen ohne Signalanstieg innerhalb des Lymphknoten wurde als Metastasen diagnostiziert und histologisch (H/E- Färbung der Lymphknotenschnitte) bestätigt. Zu späten Zeitpunkten (24 h) nach Kontrastmittelapplikation konnte dagegen überraschenderweise eine Signalumkehr beobachtet werden. Der Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe war reduziert, wohingegen die Metastase jetzt einen deutlichen Signalanstieg aufwies.
Überraschenderweise konnte bereits unmittelbar nach Applikation ein deutliches Enhancement des Primärtumors (besonders der Peripherie) beobachtet werden. Zu späteren Zeitpunkten (24 h p.i.) breitet sich dieses Enhancement auch Richtung Tumorzentrum aus.
Beispiel 120: Tumordarstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Metallkomplexes I in VX2-Tumortraqenden Kaninchen
Die Abbildungen der Fig. 6 zeigen MR-Aufnahmen eines iliakalen Lymphknoten sowie des Primärtumors (i.m. implantierter VX2-Tumor) präkontrast, 60 min sowie 20 h nach intravenöser Applikation von 100 //mol Gd/kg KGW von
Metallkomplex I in Kaninchen. Die T-| -gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen
(1.5 T; Sequenz: MPRange; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, 15°) verdeutlichen den starken Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe.
Zu einem frühen Zeitpunkt nach Applikation (60 min p.i.) kann ein deutliches Enhancement des Primärtumors (besonders der Peripherie) beobachtet werden.
Im weiteren Zeitverlauf (20 h p.i.) weitet sich der Signalanstieg auch auf zentralere Regionen des Tumors aus.
Besonders bemerkenswert ist das Enhancement einer pathologischen Struktur
(evt. Sekundärtumor oder Nekrose) auf der kontralateralen Seite, die erst in der späten Aufnahme sichtbar wird („late enhancement").
Metallkomplex X
Beispiel 121: Infarkt-Darstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in Ratten
Die Abbildungen in Fig. 7 zeigen MR-Aufnahmen des Herzen (in vivo und post mortem) 6 h nach intravenöser Applikation von 100 //mol Gd/kg KGW eines polaren Gd-chelates mit perfluorierter Seitenkette (Metallkomplex X) in Ratten mit akut induziertem Herzinfarkt. Die T- -gewichteten, EKG-getriggerten Spin- Echo-Aufnahmen (1.5 T; TR (effektiv): 400 ms, TE: 12 ms; NA: 4; Matrix: 128*128; Schichtdicke: 2.5 mm) verdeutlichen den starken Signalanstieg im Infarktareal. Die erfolgreiche Induktion eines akuten Myokardinfarkts wurde mittels NBT-Färbung bestätigt.
Beispiel 122: Organverteilung (einschließlich Lymphknotenanreicherung) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in Ratten
Nach intravenöser Applikation von 100 //mol Gesamtgadolinium/kg KGW eines polaren Gd-chelates mit perfluorierter Seitenkette (Metallkomplex X) in Ratten wurde 24 Stunden nach Applikation der Metallgehalt in verschiedenen Organen sowie in den Lymphknoten (gepoolt als mesenteriale und periphere Lymphknoten) bestimmt (MW, n=2).
Figure imgf000311_0001
Beispiel 123: Lymphknotendarstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in Ratten
Die Abbildungen in Fig. 8 zeigen beispielhaft MR-Aufnahmen von iliakalen Lymphknoten präkontrast sowie bis 60 min nach intravenöser Applikation von 100 / mol Gd/kg KGW von Metallkomplex X in Ratten. Die T-| -gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen (1.5 T; Sequenz: MPRange; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, α 15°) verdeutlichen den starken Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe bereits zu sehr frühen Zeitpunkten nach Injektion. So betrug das Enhancement 263 % zum Zeitpunkt 15 min p.i. und 254 % zum Zeitpunkt 60 min p.i..
Beispiel 124: Lymphknotendarstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in VX2-
Tumor-tragenden Kaninchen
Die Abbildungen in Fig. 9 zeigen beispielhaft MR-Aufnahmen von iliakalen Lymphknoten präkontrast sowie bis 60 min nach intravenöser Applikation von 200 //mol Gd/kg KGW von Metallkomplex X in Kaninchen mit i.m. implantiertem VX2-Tumor. Die T-| -gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen (1.5 T; Sequenz: MPRange; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, 15°) verdeutlichen den starken Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe. Das Enhancement im gesunden Lymphknotengewebe betrug 382 % zum Zeitpunkt 15 min p.i. und 419 % zum Zeitpunkt 60 min p.i.. Zonen ohne Signalanstieg innerhalb des Lymphknoten wurde als Metastasen diagnostiziert und histologisch (H/E- Färbung der Lymphknotenschnitte) bestätigt. Das Verhältnis der Signalintensitäten gesundes Lymphknotengewebe zu Metastase betrug 3.0 zum Zeitpunkt 15 min p.i. und 3.4 zum Zeitpunkt 60 min p.i. Überraschenderweise konnte bereits unmittelbar nach Applikation ein deutliches Enhancement nicht nur der Lymphknoten, sondern auch des Primärtumors (besonders der Peripherie) beobachtet werden (15 min p.i.: 277 %). Zu späteren Zeitpunkten (bis 24 h p.i.) breitet sich dieses Enhancement auch Richtung Tumorzentrum aus (24 h p.i.: 217 %). Metallkomplex V
Beispiel 125: Infarkt-Darstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in Ratten
Die Abbildungen in der Fig. 10 zeigen MR-Aufnahmen des Herzen (in vivo und post mortem) 24 h nach intravenöser Applikation von 100 //mol Gd/kg KGW eines polaren Gd-chelates mit perfluorierter Seitenkette (Metallkomplex V) in Ratten mit akut induziertem Herzinfarkt. Die T-| -gewichteten, EKG-getriggerten Spin-Echo-Aufnahmen (1.5 T; TR (effektiv): 400 ms, TE: 12 ms; NA: 4; Matrix: 128*128; Schichtdicke: 2.5 mm) verdeutlichen den starken Signalanstieg im Infarktareal. Die erfolgreiche Induktion eines akuten Myokardinfarkts wurde mittels NBT-Färbung bestätigt.
Beispiel 126: Organverteilung (einschließlich Lymphknotenanreicherung) nach intravenöser Gabe des
Kontrastmittels in Ratten
Nach intravenöser Applikation von 200 //mol Gesamtgadolinium/kg KGW eines polaren Gd-chelates mit perfluorierter Seitenkette (Metallkomplex V) in Ratten wurde 24 Stunden nach Applikation der Metallgehalt in verschiedenen Organen sowie in den Lymphknoten (gepoolt als mesenteriale und periphere Lymphknoten) bestimmt (MW, n=2).
Figure imgf000314_0001
Beispiel 127 : Lymphknotendarstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in Ratten
Die Abbildungen in Fig. 11 zeigen beispielhaft MR-Aufnahmen von iliakalen Lymphknoten präkontrast sowie bis 60 min nach intravenöser Applikation von 200 //mol Gd/kg KGW von Metallkomplex V in Ratten. Die T-j -gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen (1.5 T; Sequenz: MPRange; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, α 15°) verdeutlichen den starken Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe bereits zu sehr frühen Zeitpunkten nach Injektion. So betrug das Enhancement 147 % zum Zeitpunkt 15 min p.i. und 230 % zum Zeitpunkt 60 min p.i.. Beispiel 128: Lymphknotendarstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in VX2-
Tumor-tragenden Kaninchen
Die Abbildungen in Fig. 12 zeigen beispielhaft MR-Aufnahmen von iliakalen Lymphknoten präkontrast sowie bis 60 min nach intravenöser Applikation von 200 / mol Gd/kg KGW von Metallkomplex V in Kaninchen mit i.m. implantiertem VX2-Tumor. Die T-j -gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen (1.5 T; Sequenz: MPRange; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, α 15°) verdeutlichen den starken Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe. Das Enhancement im gesunden Lymphknotengewebe betrug 246 % zum Zeitpunkt 15 min p.i. und 282 % zum Zeitpunkt 60 min p.i.. Zonen ohne Signalanstieg innerhalb des Lymphknoten wurde als Metastasen diagnostiziert und histologisch (H/E- Färbung der Lymphknotenschnitte) bestätigt. Das Verhältnis der Signalintensitäten gesundes Lymphknotengewebe zu Metastase betrug 2.5 zum Zeitpunkt 15 min p.i. und 1.7 zum Zeitpunkt 60 min p.i.
Überraschenderweise konnte bereits unmittelbar nach Applikation ein deutliches Enhancement nicht nur der Lymphknoten, sondern auch des Primärtumors (besonders der Peripherie) beobachtet werden (15 min p.i.: 350 %). Zu späteren Zeitpunkten (bis 24 h p.i.) breitet sich dieses Enhancement auch Richtung Tumorzentrum aus (24 h p.i.: 106 %).
Metallkomplex XIV
Beispiel 129: Infarkt-Darstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in Ratten
Die Abbildungen in Fig. 13 zeigen MR-Aufnahmen des Herzen (in vivo und post mortem) 3 h nach intravenöser Applikation von 100 //mol Gd/kg KGW eines polaren Gd-chelates mit perfluorierter Seitenkette (Metallkomplex XIV) in Ratten mit akut induziertem Herzinfarkt. Die T-| -gewichteten, EKG-getriggerten Spin- Echo-Aufnahmen (1.5 T; TR (effektiv): 400 ms, TE: 12 ms; NA: 4; Matrix: 128*128; Schichtdicke: 2.5 mm) verdeutlichen den starken Signalanstieg im Infarktareal. Die erfolgreiche Induktion eines akuten Myokardinfarkts wurde mittels NBT-Färbung bestätig
Beispiel 130: Organverteilung (einschließlich Tumor- und Lymphknotenanreicherung) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in Prostatakarzinom- tragenden Ratten
Nach intravenöser Applikation von 200 //mol Gesamtgadolinium/kg KGW eines polaren Gd-chelates mit perfluorierter Seitenkette (Metallkomplex XIV) in Ratten (Cop-Inzucht, mit 12 Tage zuvor i.m. implantiertem Prostatakarzinom Dunning R3327 MAT-Lu) wurde 10 Minuten, 1 und 24 Stunden nach Applikation der Metallgehalt in verschiedenen Organen, im Tumor sowie in den Lymphknoten (gepoolt als mesenteriale und periphere Lymphknoten) bestimmt (MW ± SD, n=3). Metallkomplex XIV
Gd-Konzentration f/miol/l] % Dosis
10min p.i. 1h p .i. 24h p. i. 10min p.i. 1h p i. 24h p .i.
Leber 192 ± 12 147 ± 7 64 ± 4 2.62 ± 0.11 2.04 ± 0.15 0.96 ± 0.05
Milz 200 ± 13 123 ± 10 69 ± 5 0.13 + 0.01 0.08 ± 0.01 0.06 ± 0.00
Pankreas 191 ± 14 139 ± 26 25 ± 1 0.35 ± 0.02 0.21 ± 0.05 0.03 ± 0.01
Niere 761 ± 60 1181 ± 232 338 ± 49 1.76 ± 0.14 2.84 + 0.61 0.81 ± 0.09
Lunge 603 + 30 415 ± 39 44 + 4 1.04 ± 0.02 0.80 ± 0.06 0.09 ± 0.01
Herz 320 ± 8 190 ± 15 19 ± 0 0.32 ± 0.01 0.19 ± 0.01 0.02 ± 0.00
Gehirn 38 ± 6 22 ± 2 4 ± 4 0.10 ± 0.03 0.06 ± 0.00 0.01 ± 0.01
Muskel**** 93 ± 5 56 ± 3 8 ± 1 0.06 ± 0.02 0.04 ± 0.00 0.00 ± 0.00
Tumor 246 ± 25 266 ± 87 56 ± 4 0.25 ± 0 05 0.37 ± 0.14 0.04 ± 0.01
Femur 115 ± 3 81 ± 10 9 ± 1 0.39 ± 0.02 0.28 ± 0.03 0.03 ± 0.00 mes. LK 291 ± 29 179 ± 16 50 ± 6 0.08 ± 0.01 0.05 ± 0.01 0.02 ± 0.00 periph. LK 284 ± 19 254 ± 14 51 ± 5 0.13 ± 0.00 0.14 ± 0.02 0.02 ± 0.00
Magen (entleert) 244 ± 17 165 ± 21 19 ± 2 0.56 ± 0.07 0.40 ± 0.05 0.05 ± 0.00
Darm (entleert) 242 ± 15 201 ± 32 36 ± 5 1.55 ± 0.09 1.16 ± 0.22 0.26 ± 0.04
Blut ** 957 ± 38 575 ± 56 22 ± 1 26.73 ± 0.84 16.13 ± 1.77 0.61 ± 0.03
Restköroer * 419 ± 27 392 ± 25 42 ± 0 70.71 ± 2.74 64.27 ± 5.50 6.81 ± 0.16
Harn 0-24 h - - 619 ± 19 - - 79.86 ± 3.13
Faeces 0-24 h - - 781 ± 611 - - 6.00 ± 4.91
Summe der Organe*** 80.06 ± 2.84 72.94 _ 5.83 9.21 ± 0.27
Bilanz*** 95.07 ± 2.41
Blutproben sind im Restkörper enthalten * 58ml Blut/kg KGW
'* Bilanz ohne Blutwerte, da diese im Rest orper enthalten "** nur Gewebealiquot
Beispiel 131: Lymphknotendarstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in
Meerschweinchen
Die Abbildungen in Fig. 14 zeigen beispielhaft MR-Aufnahmen von iliakalen und inguinalen Lymphknoten präkontrast sowie bis 24 h nach intravenöser Applikation von 200 //mol Gd/kg KGW von Metallkomplex XIV in Meerschweinchen mit stimulierten Lymphknoten (Freund Adjuvant). Die T-|- gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen (2.0 T; TR 10 ms, TE 5 ms, α 40°) verdeutlichen den starken Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe bereits zu sehr frühen Zeitpunkten nach Injektion. So betrug das Enhancement 127 % zum Zeitpunkt 60 min p.i.. Beispiel 132: Lymphknotendarstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in VX2-t
Tumor-tragenden Kaninchen
Die Abbildungen in Fig. 15 zeigen beispielhaft MR-Aufnahmen von iliakalen Lymphknoten präkontrast sowie bis 23 h nach intravenöser Applikation von 200 //mol Gd/kg KGW von Metallkomplex XIV in Kaninchen mit i.m. implantiertem VX2-Tumor. Die T-j -gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen (1.5 T; Sequenz: MPRange; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, α 15°) verdeutlichen den starken Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe. Das Enhancement im gesunden Lymphknotengewebe betrug 297 % zum Zeitpunkt 10 min p.i. und 269 % zum Zeitpunkt 60 min p.i.. Zonen ohne Signalanstieg innerhalb des Lymphknoten wurde als Metastasen diagnostiziert und histologisch (H/E- Färbung der Lymphknotenschnitte) bestätigt. Das Verhältnis der Signalintensitäten gesundes Lymphknotengewebe zu Metastase betrug 5.1 zum Zeitpunkt 10 min p.i. und 1.9 zum Zeitpunkt 60 min p.i.
Überraschenderweise konnte bereits unmittelbar nach Applikation ein deutliches Enhancement nicht nur der Lymphknoten, sondern auch des Primärtumors (besonders der Peripherie) beobachtet werden (15 min p.i.: 594 %). Zu späteren Zeitpunkten (bis 24 h p.i.) breitet sich dieses Enhancement auch Richtung Tumorzentrum aus (120 min p.i.: 162 %).
Metallkomplex III
Beispiel 133: Infarkt-Darstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in Ratten
Die Abbildungen in Fig. 16 zeigen MR-Aufnahmen des Herzen (in vivo und post mortem) 22 h nach intravenöser Applikation von 100 //mol Gd/kg KGW eines polaren Gd-chelates mit perfluorierter Seitenkette (Metallkomplex III) in Ratten mit akut induziertem Herzinfarkt. Die T-j -gewichteten, EKG-getriggerten Spin- Echo-Aufnahmen (1.5 T; TR (effektiv): 400 ms, TE: 12 ms; NA: 4; Matrix: 128*128; Schichtdicke: 2.5 mm) verdeutlichen den starken Signalanstieg im Infarktareal. Die erfolgreiche Induktion eines akuten Myokardinfarkts wurde mittels NBT-Färbung bestätigt..
Beispiel 134: Organverteilung (einschließlich Lymphknotenanreicherung) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in Ratten
Nach intravenöser Applikation von 200 //mol Gesamtgadolinium/kg KGW eines polaren Gd-chelates mit perfluorierter Seitenkette (Metallkomplex III) in Ratten wurde 24 Stunden nach Applikation der Metallgehalt in verschiedenen Organen sowie in den Lymphknoten (gepoolt als mesenteriale und periphere Lymphknoten) bestimmt (MW, n=2).
Figure imgf000320_0001
Beispiel 135: Lymphknotendarstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in Ratten
Die Abbildungen in Fig. 17 zeigen beispielhaft MR-Aufnahmen von iliakalen Lymphknoten präkontrast sowie bis 60 min nach intravenöser Applikation von 200 //mol Gd/kg KGW von Metallkomplex III in Ratten. Die Ti -gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen (1.5 T; Sequenz: MPRange; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, α 15°) verdeutlichen den starken Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe bereits zu sehr frühen Zeitpunkten nach Injektion. So betrug das Enhancement 320 % zum Zeitpunkt 15 min p.i. und 401 % zum Zeitpunkt 60 min p.i.. Beispiel 136 Lymphknotendarstellung (MRT) nach intravenöser Gabe des Kontrastmittels in VX2- Tumor-tragenden Kaninchen
Die Abbildungen in Fig. 18 zeigen beispielhaft MR-Aufnahmen von iliakalen Lymphknoten präkontrast sowie bis 60 min nach intravenöser Applikation von 200 / mol Gd/kg KGW von Metallkomplex III in Kaninchen mit i.m. implantiertem VX2-Tumor. Die T-j -gewichteten Gradientenecho-Aufnahmen (1.5 T; Sequenz: MPRange; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, α 15°) verdeutlichen den starken Signalanstieg im gesunden Lymphknotengewebe. Das Enhancement im gesunden Lymphknotengewebe betrug 195 % zum Zeitpunkt 15 min p.i. und 233 % zum Zeitpunkt 60 min p.i.. Zonen ohne Signalanstieg innerhalb des Lymphknoten wurde als Metastasen diagnostiziert und histologisch (H/E- Färbung der Lymphknotenschnitte) bestätigt. Das Verhältnis der Signalintensitäten gesundes Lymphknotengewebe zu Metastase betrug 1.9 zum Zeitpunkt 15 min p.i. und 1.8 zum Zeitpunkt 60 min p.i.
Überraschenderweise konnte bereits unmittelbar nach Applikation ein deutliches Enhancement nicht nur der Lymphknoten, sondern auch des Primärtumors (besonders der Peripherie) beobachtet werden (15 min p.i.: 232 %).

Claims

Patentansprüche
1. Verwendung von perfluoralkylhaltigen Metallkomplexen, die eine kritische Mizellbildungskonzentration <10"3 mol/l, einen hydrodynamischen Mizelldurchmesser (2 Rh) > 1 nm und eine Protonen-Relaxivity im Plasma (R1) > 10 l/mmol-s aufweisen, als Kontrastmittel im MR-Imaging zur Darstellung von Plaques.
2. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß die Metallkomplexe auch als MRI-Kontrastmittel zur Darstellung von Lymphknoten eingesetzt werden.
3. Verwendung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Metallkomplexe auch als MRI-Kontrastmittel zur Darstellung von infarziertem und nekrotischem Gewebe eingesetzt werden.
4. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Metallkomplexe auch als MRI-Kontrastmittel zur unabhängigen Darstellung von Nekrosen und Tumoren eingesetzt werden.
5. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß
Metallkomplexe eingesetzt werden, deren Mizellbildungskonzentration
< 10"4 mol/l ist.
6. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß
Metallkomplexe eingesetzt werden, deren hydrodynamischer Mizelldurchmesser > 3 nm ist, vorzugsweise > 4 nm.
7. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß
Metallkomplexe eingesetzt werden, die eine Protonen-Relaxivity im Plasma von > 13 l/mmol-s, vorzugsweise > 15 l/mmol-s, aufweisen.
8. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass als perfluoralkylhaltige Metallkomplexe die Verbindungen der allgemeinen Formel I
RF-L-K I worin
RF eine perfluorierte, geradkettige oder verzweigte Kohlenstoffkette mit der Formel -CnF2nE ist, in der
E ein endständiges Fluor-, Chlor-, Brom-, Jod- oder
Wasserstoffatom darstellt und n für die Zahlen 4 - 30 steht,
L eine direkte Bindung, eine Methylengruppe, eine -NHCO-Gruppe, eine Gruppe
1
R
(CH2)-NHCOCH2— (CH2) - N— S02—
(Bitte in Formel R1 in Ra abändern!) wobei p die Zahlen 0 bis 10, q und u unabhängig voneinander die
Zahlen 0 oder 1 und Ra ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe, eine -CH2-OH- Gruppe, eine -CH2-Cθ2H-Gruppe oder eine C2-Ci5-Kette ist, die gegebenenfalls unterbrochen ist durch 1 bis 3 Sauerstoffatome, 1 bis 2 >CO-Gruppen oder eine gegebenenfalls substituierte Arylgruppe und/oder substituiert ist mit 1 bis 4 Hydroxylgruppen, 1 bis 2 C-|-C4-Alkoxygruppen, 1 bis 2 Carboxygruppen, eine Gruppe -SO3H- bedeuten,
oder eine geradkettige, verzweigte, gesättigte oder ungesättigte C2- C30- Kohlenstoffkette ist, die gegebenenfalls 1 bis 10 Sauerstoffatome, 1 bis 3 -NRa-Gruppen, 1 bis 2 Schwefelatome, ein Piperazin, eine -CONRa-Gruppe, eine -NRaCO-Gruppe, eine -SO2-
Gruppe, eine -NRa-Cθ2-Gruppe, 1 bis 2 -CO-Gruppen, eine Gruppe
__ CO — N — T — - N(Ra) — S02 — RF odΘr 1 bis 2 gegebenenfalls
I substituierte Aryle enthält und/oder durch diese Gruppen unterbrochen ist, und/oder gegebenenfalls substituiert ist mit
1 bis 3 -ORa-Gruppen, 1 bis 2 Oxogruppen, 1 bis 2 -NH-CORa-Gruppen, 1 bis 2 -CONHRa-Gruppen, 1 bis 2 -(CH2)p-Cθ2H-Gruppen, 1 bis 2
Gruppen -(CH2)p-(0)q-CH2CH2-RF, wobei
Ra, RF und p und q die oben angegebenen Bedeutungen haben und
T eine C2-Cιo_Kette bedeutet, die gegebenenfalls durch 1 bis 2
Sauerstoffatome oder 1 bis 2 -NHCO-Gruppen unterbrochen ist,
für einen Komplexbildner oder Metallkomplex oder deren Salze organischer und/oder anorganischer Basen oder Aminosäuren oder Aminosäureamide steht, und zwar für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel II
Figure imgf000325_0001
in der Rc> R"1 und B unabhängig voneinander sind und
Rc die Bedeutung von Ra hat oder -(CH2)m"l-"RF bedeutet, wobei m 0, 1 oder 2 ist und L und RF die o.g. Bedeutung haben,
R"! unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent der Ordnungszahlen 22 - 29, 42-46 oder 58-70 bedeutet,
B -OR oder
Figure imgf000325_0002
bedeutet, wobei R1 > L, RF und Rc die o. g. Bedeutungen haben,
oder
für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel III
COgZ1
Figure imgf000325_0003
^ COsZ1
^ (III) in der Rc und R1 die oben genannten Bedeutungen aufweisen und RD die Bedeutung von Ra hat oder für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel IV
Figure imgf000326_0001
in der R"! die oben genannte Bedeutung hat oder für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel V
.1
-CO, Z
Figure imgf000326_0002
in der R"! die oben genannte Bedeutung hat und o und q für die Ziffern O oder 1 stehen und die Summe o + q = 1 ergibt, oder für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel VI
Figure imgf000327_0001
in der R"! die oben genannte Bedeutung hat oder für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel VII
Figure imgf000327_0002
in der R1 und B die oben genannten Bedeutungen haben oder
für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel VIII
Figure imgf000327_0003
in der Rc und R1 die oben genannten Bedeutungen haben und RD die o.g. Bedeutung von Ra hat. oder für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel IX
Figure imgf000328_0001
in der Rc und R1 die oben genannten Bedeutungen haben,
oder für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel X
Figure imgf000328_0002
in der Rc und R1 die oben genannten Bedeutungen haben,
oder für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel XI
Figure imgf000329_0001
in der R1 p und q die oben genannte Bedeutung haben und RD die Bedeutung von Ra hat. oder für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel Xll
Figure imgf000329_0002
in der L RF und 2> die oben genannten Bedeutungen haben, oder
für einen Komplexbildner oder Komplex der allgemeinen Formel Xlll
Figure imgf000329_0003
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat, eingesetzt werden.
9. Verwendung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel I eingesetzt werden, in der L für
-CH2-ß α-CH2CH2-ß α-(CH2)s-ß s = 3 - 15 α-CH2-0-CH2CH2-ß α-CH2-(0-CH2-CH2-)t-ß t = 2 - 6 α-CH -NH-CO-ß -CH2-NH-CO-CH2-N(CH2COOH)-S02-ß α-CH2-NH-CO-CH2-N(C2H5)-SO2-ß α-CH2-NH-CO-CH2-N(C-| 0H21 )-S02-ß α-CH2-NH-CO-CH2-N(C6H"| 3)-S02-ß α-CH2-NH-CO-(CH2)io-N(C2H5)-Sθ2-ß -CH2-NH-CO-CH2-N(-CH2-C6H5)-Sθ2-ß α-CH2-NH-CO-CH2-N(-CH2-CH2-OH)Sθ2-ß α-CH2-NHCO-(CH2)ι o-S-CH2CH2-ß α-CH2NHCOCH2-0-CH2CH2-ß α-CH NHCO(CH2)i o-0-CH2CH2-ß α-CH2-C6H4-0-CH2CH2-ß -CH2-0-CH2-C(CH2-OCH2CH2-C6Fi3)2-CH2-OCH2-CH2-ß α-CH2-NHCOCH2CH2CON-CH2CH2NHCOCH2N(C2H5)Sθ2C8F17
I
CH2-CH2NHCOCH2N(C2H5)-SO2-ß α-CH -O-CH2-CH(OCι 0H21 )-CH2-0-CH2CH -ß α-(CH2NHCO)4-CH2θ-CH2CH2-ß -(CH2NHCO)3-CH2θ-CH2CH2-ß α-CH2-OCH2C(CH2OH)2-CH2-0-CH2CH2-ß
Figure imgf000330_0001
(Bitte hier in diese Formel a und ß einfügen, wir können nicht auf die F. zugreifen! α-CH2NHCOCH2N(C6H5)-Sθ2-ß -NHCO-CH2-CH2-ß α-NHCO-CH2-O-CH CH2-ß α-NH-CO-ß α-NH-CO-CH2-N(CH2COOH)-S02-ß α-NH-CO-CH2-N(C2H5)-Sθ2-ß α-NH-CO-CH2-N(C-| 0H21 )-S0 -ß α-NH-CO-CH2-N(C6H-| 3)-S02-ß -NH-CO-(CH2)ιo-N(C2H5)-Sθ2-ß α-NH-CO-CH2-N(-CH2-C6H5)-S02-ß α-NH-CO-CH2-N(-CH2-CH2-OH)Sθ2-ß -NH-CO-CH2-ß α-CH2-0-C6H4-O-CH2-CH2-ß α-CH2-C6H4-0-CH2-CH2-ß α-N(C H5)-Sθ2-ß α-N(C6H5)-S02-ß α-N(Cι0H2l)-SO -ß α-N(C6H13)-SO2-ß α-N(C2H4OH)-SO2-ß α-N(CH2COOH)-SO2-ß α-N(CH2C6H5)-S02-ß α-N-[CH(CH2OH)2]-SO2-ß α-N-[CH(CH20H)CH(CH20H)]-S02-ß steht und worin die Bindungsstelle zum Komplexbildner oder
Metallkomplex K und ß die Bindungsstelle zum Fluorrest darstellt.
10. Verwendung nach Anspruch 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der Formel I eingesetzt werden, in der n in der Formel -CnF2nE für die Zahlen 4-15 steht und/oder E in dieser Formel ein Fluoratom bedeutet.
11. Verwendung nach einem der Ansprüche 8 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass die folgenden Verbindungen eingesetzt werden:
- Gadolinium-Komplex von 10-[1 -Methyl-2-oxo-3-aza-5-oxo-{4-perfluoro- octylsulfonyl-piperazin-1-yl}-pentyl]-1,4,7-tris(carboxymethyl)-1,4,7,10- tetraazacyclododecan , - Gadolinium-Komplex von 10-[2-Hydroxy-4-aza-5-oxo-7-oxa-10,10,11,11 , 12,12, 13, 13, 14, 14, 15, 15, 16, 16, 17, 17-heptadecaf luorheptacecyl]-1 ,4,7- tris(carboxymethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan,
- Gadolinium-Komplex von 10-[2-Hydroxy-4-aza-5,9-dioxo-9-{4-perfluoroc- tyl)-piperazin-1 -yl}-nonyl]-1 ,4,7-tris(carboxymethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacy- clododecan,
- Gadolinium-Komplex von 10-[2-Hydroxy-4-aza-5-oxo-7-aza-7-(perfluor- octyl-sulfonyl)-nonyl]-1 ,4,7-tris(carboxymethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclodo- decan,
- Gadolinium-Komplex von 10-[2-Hydroxy-4-oxa-1 H,1 H,2H,3H,3H,5H,5H, 6H,6H-perf luor-tetradecyl]-1 ,4,7-tris(carboxymethyl)-1 ,4,7, 10-tetraaza- cyclododecan,
- Gadolinium-Komplex von 10-[2-Hydroxy-4-aza-5-oxo-7-oxa-10,10,11 ,11 , 12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,19,19-henicosafluor-nonade- cyl]-1 ,4,7-tris(carboxymethyl)-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan,
- Gadolinium-Komplex von 10-[2-Hydroxy-4-aza-5-oxo-11 -aza-11 -(perfluor- octylsulfonyl)-tridecyl]-1 -4-7-tris(carboxymethyl) 1 ,4,7,10-tetraazacyclodo- decan,
- Gadolinium-Komplex von 10-[2-Hydroxy-4-aza-5-oxo-7-aza-7-(perfluor- octylsulfonyl)-8-phenyl-octyl]-1 -4-7-tris(carboxymethyl)-1 ,4,7,10-tetraaza- cyclododecan.
12. Verwendung nach einem der Ansprüche 1-7, dadurch gekennzeichnet, dass als perfluoralkylhaltige Metallkomplexe die Verbindungen der allgemeinen Formel la
A - RF (la) worin
• A ein Molekülteil ist, der 2 - 6 Metallkomplexe enthält, die direkt oder über einen Linker an ein Stickstoffatom einer ringförmigen Gerüstkette gebunden sind und
RF eine perfluorierte, geradkettige oder verzweigte Kohlenstoffkette mit der Formel -CnF2nE ist, in der
E ein endständiges Fluor-, Chlor-, Brom-, Jod- oder Wasserstoffatom darstellt und n für die Zahlen 4 - 30 steht,
wobei das Molekülteil A die folgende Struktur aufweist:
K
I
Figure imgf000333_0001
I K wobei
q1 eine Zahl 0, 1 , 2 oder 3 ist,
• K für einen Komplexbildner oder Metallkomplex oder deren Salze organischer und/oder anorganischer Basen oder Aminosäuren oder Aminosäureamide steht,
• X eine direkte Bindung zur Perfluoralkylgruppe, eine Phenylengruppe oder eine C-|-C-|o-Alkylenkette ist, die gegebenenfalls 1 - 15 Sauerstoff-, 1 - 5
Schwefelatome, 1 - 10 Carbonyl-, 1 - 10 (NRd)-, 1 - 2 NRdSO2-, 1 - 10 CONRd-, 1 Piperidin-, 1 - 3 SO2-, 1 - 2 Phenylengruppen enthält oder gegebenenfalls durch 1 - 3 Reste RF substituiert ist, worin Rd für ein Wasserstoffatom, eine Phenyl-, Benzyl- oder eine C-ι-C-15-Alkylgruppe steht, die gegebenenfalls 1 - 2 NHCO-, 1 - 2 CO-Gruppen,
1 - 5 Sauerstoffatome enthält und gegebenenfalls durch 1 - 5 Hydroxy-, 1-5
Methoxy-, 1 - 3 Carboxy-, 1 - 3 RF-Reste substituiert ist
V eine direkte Bindung oder eine Kette der allgemeinen Formel lla oder lila ist:
O ß-NH CH2)k-(Z),-(CH2)m-C— α
,1
R (lla)
Figure imgf000334_0001
worin
1 Re ein Wasserstoffatom, eine Phenylgruppe, eine Benzylgruppe oder eine C-J-C7 Alkylgruppe ist, die gegebenenfalls substituiert ist mit einer Carboxy-, einer Methoxy- oder einer Hydroxygruppe,
ιW eine direkte Bindung, eine Polyglycolethergruppe mit bis zu 5 Glycoleinheiten oder ein
Molekülteil der allgemeinen Formel IVa ist
-CH(Rh)- (IVa) worin Rn eine C-j-Cy-Carbonsäure, eine Phenylgruppe, eine Benzylgruppe oder eine -(CH2)ι .5-NH-K-Gruppe ist,
■ die Bindung an das Stickstoffatom der Gerüstkette, ß die Bindung zum
Komplexbildner oder Metallkomplex K darstellt,
■ und in der die Variablen k und m für natürliche Zahlen zwischen 0 und 10 und I für 0 oder 1 stehen,
und wobei
• D eine CO- oder Sθ2-Gruppe ist,
eingesetzt werden.
13. Verwendung nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel la eingesetzt werden, in der q die Zahl 1 ist.
14. Verwendung nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel la eingesetzt werden, in der der Molekülteil X eine Alkylenkette ist, die 1 - 10 CH2CH2O- oder 1 - 5
COCH2NH-Gruppen enthält, eine direkte Bindung oder eine der folgenden
Strukturen
0 C2H5 II r 5 γ -CH2-0-(CH2)2— 5 . γ -CH2-N N--SS0022—— δδ , γ-(CH2)10-N-C-CH2-N-SO
C2H5 H
γ-(CH2)10-O-(CH2)2- δ
Figure imgf000336_0001
Figure imgf000336_0002
wobei γ an D und δ an R bindet.
15. Verwendung nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel la eingesetzt werden, in der V ein Molekülteil mit einer der folgenden Strukturen ist
Figure imgf000336_0003
II j α - C-CH -NH-ß , α- C -CH-NH — ß CH3 CH(CH3)2
π COOH O CH9C00H
TT I » I
«-C-CH2-CH-NH- ß , α-C-CH2-CH-NH- ß , O α-C-CH-NH-ß (CH2)4-NH-K
16. Verwendung nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel la eingesetzt werden, in der K einen Komplex der allgemeinen Formel Va, Via, Vlla oder Villa darstellt
Figure imgf000337_0001
Figure imgf000337_0002
Figure imgf000338_0001
Figure imgf000338_0002
(Villa)
wobei
R1 unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent der Elemente der Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58- 70 ist,
R8 ein Wasserstoffatom oder eine geradkettige, verzweigte, gesättigte oder ungesättigte Cι-C3o-Alkylkette ist, die gegebenenfalls substituiert ist durch 1 -5 Hydroxy-, 1 - 3 Carboxy- oder 1 Phenylgruppe(n) und/oder gegebenenfalls durch 1 - 10 Sauerstoffatome, 1 Phenylen- oder 1 Pheny- lenoxygruppe unterbrochen ist
R6 ein Wasserstoff atom, ein geradkettiger oder verzweigter C1-C7- Alkylrest, ein Phenyl- oder Benzylrest ist,
R7 ein Wasserstoffatom, eine Methyl- oder Ethylgruppe ist, die gegebenenfalls substituiert ist durch eine Hydroxy- oder Carboxygruppe, • U3 eine gegebenenfalls 1 - 5 Imino-, 1 - 3 Phenylen-, 1 - 3 Phenylenoxy-, 1 - 3 Phenylenimino-, 1 - 5 Amid-, 1 - 2 Hydrazid-, 1 - 5 Carbonyl-, 1 - 5 Ethylenoxy-,
1 Harnstoff-, 1 Thiohamstoff-, 1 - 2 Carboxyalkylimino-, 1 - 2 Estergruppen, 1 - 10 Sauerstoff-, 1 - 5 Schwefel- und/oder 1 - 5 Stickstoffatome enthaltende und/oder gegebenenfalls durch 1 - 5 Ηydroxy-, 1 - 2 Mercapto-, 1 - 5 Oxo-, 1 - 5 Thioxo-,
1 - 3 Carboxy-, 1 - 5 Carboxyalkyl-, 1 - 5 Ester- und/oder 1 - 3 Amino- gruppen substituierte, geradkettige, verzweigte, gesättigte oder ungesättigte C-|-C20-Alkylengruppe ist, wobei die gegebenenfalls enthaltenen
Phenylengruppen durch 1 - 2 Carboxy-, 1 - 2 Sulfon- oder 1 - 2 Hydroxygruppen substituiert sein können
• T1 für eine -CO-ß, -NHCO-ß oder -NHCS-ß-Gruppe steht, wobei ß die Bindungsstelle an V darstellt.
17. Verwendung nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, dass die für U3 stehende C-j-C20-Alkylenkette die Gruppen
-CH2NHCO-, -NHCOCH20-, -NHCOCH2OC6H4-, -N(CH2C02H)-,
-CH OCH2-,
-NHCOCH2C6H4-, -NHCSNHC6H -, -CH2OC6H4-, -CH2CH20- βnthält und/oder durch die Gruppen -COOH, -CH2COOH substituiert ist.
18. Verwendung nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, dass U3 für eine
-CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -C6H4-, -C6H10-, -CH2C6H4-, -CH2NHCOCH2CH(CH2Cθ2H)-C6H4-, -CH2NHCOCH2OCH2-, -CH2NHCOCH2C6H4-gruppe steht.
19. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel la eingesetzt werden, in der K eine der folgenden Strukturen aufweist:
Figure imgf000340_0001
Figure imgf000340_0002
20. Verwendung nach einem der Ansprüche 12 bis 19, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel la eingesetzt werden, in der die Perfluoralkylkette R -CßF-o, -CβF-jy, -C-|nF21 oder -C-|2F25 ist.
21. Verwendung nach einem der Ansprüche 12 bis 20, dadurch gekennzeichnet, dass der Gadolinium-Komplex von 1 ,4,7-Tris{1 ,4,7-tris(N-(carboxylatomethyl)- 10-[N-1-methyl-3,6-diaza-2,5,8-trioxooctan-1 ,8-diyl)]-1 , 4,7,10-tetraaza- cyclododecan, Gd-Komplex}-10-[N-2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluor- tridecanoylj- 1,4,7,10-tetraazacyclododecan eingesetzt wird.
22. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass als perfluoralkylhaltige Metallkomplexe die Verbindungen der allgemeinen Formel Ib
A I K— N— L-RF (Ib)
worin
K einen Komplexbildner oder einen Metallkomplex der allgemeinen Formel llb
Figure imgf000341_0001
wobei R1 für ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent der
Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58-70,
R2 und R3 für ein Wasserstoff atom, eine CrC7-Alkylgruppe, eine Benzylgruppe, eine Phenylgruppe, -CH2OH oder -CH2-OCH3, U2 für den Rest L1, wobei aber L1 und U2 unabhängig voneinander gleich oder verschieden sein können, steht, bedeutet, A1 ein Wasserstoff atom, eine geradkettige oder verzweigte CrC30-Alkyl- gruppe, die gegebenenfalls unterbrochen ist durch 1-15 Sauerstoffatome, und/oder gegebenenfalls substituiert ist mit 1-10 Hydroxygruppen, 1-2 COOH-Gruppen, einer Phenylgruppe, einer Benzylgruppe und/oder 1-5 - OR9-Gruppen, mit R9 in der Bedeutung eines Wasserstoffatoms oder eines CrC -Alkylrestes, oder -L1-RF bedeutet, L1 eine geradkettige oder verzweigte Cι-C3o-Alkylengruppe, die gegebenenfalls unterbrochen ist durch 1-10 Sauerstoffatome, 1-5 -NH-CO- Gruppen, 1-5 -CO-NH- Gruppen, durch eine gegebenenfalls durch eine COOH-Gruppe substituierte Phenylengruppe, 1-3 Schwefelatome, 1-2 -N(B1)-S02- Gruppen, und/oder 1-2 -S02-N(B1)- Gruppen mit B1 in der Bedeutung von A1, eine NHCO-Gruppe, eine CONH-Gruppe, eine N(B1)-S02- Gruppe, oder eine -S02-N(B1)- Gruppe und/oder gegebenenfalls substituiert ist mit dem Rest RF, bedeutet und RF einen geradkettigen oder verzweigten perfluorierten Alkylrest der Formel CnF2nE, wobei n für die Zahlen 4-30 steht und
E für ein endständiges Fluoratom, Chloratom, Bromatom, lodaton oder ein Wasserstoffatom steht, bedeutet, und gegebenenfalls vorhandene Säuregruppen gegebenenfalls als Salze organischer und/oder anorganischer Basen oder Aminosäuren oder Aminosäureamide vorliegen können,
eingesetzt werden.
23. Verwendung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ib eingesetzt werden, in der R2, R3 und R9 unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine C1-C4- Alkylgruppe bedeuten.
4. Verwendung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ib eingesetzt werden, in der A1 Wasserstoff, einen CrCi5-Alkylrest, die Reste C2H4-0-CH3 , C3H6-0-CH3,
C2H4-0-(C2H4-0)rC2H4-OH ,
C2H4-0-(C2H4-0)t-C2H4-OCH3,
C2HOH, C3HβOH, C4H8OH, C5H10OH, C6H12OH, C7H4OH,
CH(OH)CH2OH,
CH(OH)CH(OH)CH2OH, CH2[CH(OH)]u 1CH2OH,
CH[CH2(OH)]CH(OH)CH2OH,
C2H4CH(OH)CH2OH,
(CH2)sCOOH,
C2H4-0-(C2H4-0)t-CH2COOH oder
C2H4-0-(C2H4-0)t-C2H4-CnF2nE bedeutet, wobei s für die ganzen Zahlen 1 bis 15, t für die ganzen Zahlen 0 bis 13, u1 für die ganzen Zahlen 1 bis 10, n für die ganzen Zahlen 4 bis 20 steht, und
E für ein Wasserstoff-, Fluor-, Chlor-, Brom- oder lodatom sowie, falls möglich, ihre verzweigten Isomeren.
25. Verwendung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ib eingesetzt werden, in der A1 Wasserstoff, C Cιo-Alkyl, C2H4-0-CH3, C3H6-O-CH3,
C2H4-0-(C2H4-0)x-C2H4-OH, C2H4-0-(C2H4-0)x-C2H4-OCH3, C2H4θH, CsHßOH, CH2[CH(OH)]yCH2OH, CH[CH2(OH)]CH(OH)CH2OH, (CH2)wCOOH, C2H4-0-(C2H4-0)x-CH2COOH, C2H4-0-(C2H4-0)χ-C2H4-CnF2nE bedeutet, wobei x für die ganzen Zahlen 0 bis 5, y für die ganzen Zahlen 1 bis 6, w für die ganzen Zahlen 1 bis 10, n für die ganzen Zahlen 4 bis 15 und
E für ein Fluoratom steht, sowie, falls möglich, ihre verzweigten Isomeren.
26. Verwendung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ib eingesetzt werden, in der L1 α-(CH2)s-ß α-CH2-CH2-(0-CH2-CH2-)y-ß α-CH2-(0-CH2-CH2-)y-ß, α-CH2-NH-CO-ß -CH2-CH2-NH-S02-ß -CH2-NH-CO-CH2-N(CH2COOH)-Sθ2-ß α-CH2-NH-C0-CH2-N(C2H5)-S02-ß α-CH2-NH-CO-CH -N(Cι 0H21 )-S02-ß α-CH2-NH-CO-CH2-N(C6H-| 3)-S02-ß α-CH2-NH-CO-(CH2)ιo-N(C2H5)-Sθ2-ß α-CH2-NH-CO-CH2-N(-CH2-C6H5)-S02-ß α-CH2-NH-C0-CH2-N(-CH2-CH2-0H)S02-ß α-CH2-NHCO-(CH2)ιo-S-CH CH2-ß
(X-CH2NHCOCH2-0-CH2CH2-ß -CH2-CH2NHCOCH2-0-CH2CH2-ß α-CH2-(CH2-CH2-0)r(CH2)3NHCO-CH2-0-CH2CH2-ß -CH2NHCO(CH2)i o-0-CH2CH2-ß -CH2CH2NHCO(CH2)ι 0-O-CH2CH2-ß -CH2-C6H4-0-CH2CH2-ß wobei die Phenylengruppe 1 ,4 oder 1 ,3 verknüpft ist α-CH2-0-CH2-C(CH2-OCH2CH2-C6F-|3)2-CH2-OCH2-CH2-ß α-CH2-NHCOCH2CH2CON-CH2CH2NHCOCH2N(C2H5)Sθ2C8F-|7ß α-CH2-CH2NHCOCH2N(C2H5)-S02-ß α-CH -0-CH2-CH(OC10H21 )-CH2-0-CH2CH2-ß α-(CH NHCO)4-CH2θ-CH2CH2-ß α-(CH2NHCO)3-CH2θ-CH2CH2-ß α-CH2-OCH2C(CH2OH)2-CH2-0-CH2CH2-ß
Figure imgf000345_0001
α-CH2NHC0CH2N(C6H5)-S02-ß α-NHCO-CH2-CH2-ß α-NHCO-CH2-0-CH2CH2-ß α-NH-CO-ß α-NH-CO-CH2-N(CH2COOH)-Sθ2-ß α-NH-C0-CH2-N(C2H5)-S02-ß α-NH-CO-CH2-N(C-| 0H21 )-S02-ß α-NH-CO-CH2-N(C6Hι 3)-S02-ß α-NH-CO-(CH2)ι o-N(C2H5)-Sθ2-ß α-NH-C0-CH2-N(-CH2-C6H5)-S02-ß α-NH-CO-CH2-N(-CH2-CH2-OH)S02-ß -NH-CO-CH2-ß α-CH2-0-C6H4-0-CH2-CH2-ß -CH2-C6H4-0-CH2-CH2-ß α-N(C2H5)-S02-ß α-N(C6H5)-S02-ß -N(C10H2l)-SO -ß -N(C6H13)-S02-ß α-N(C2H4OH)-S02-ß α-N(CH2COOH)-S02-ß α-N(CH2C6H5)-S02-ß α-N-[CH(CH 0H)23-S02-ß α-N-[CH(CH2OH)CH(OH)(CH2OH)]-S02-ß bedeutet, wobei s für die ganzen Zahlen 1 bis 15 und y für die ganzen Zahlen 1 bis 6 steht.
27. Verwendung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ib eingesetzt werden, in der L1 -CH2-0-CH2CH2-ß, α-CH2-CH2-(0-CH2-CH2-)y-ß, α-CH2-(0-CH2-CH2-)y-ß, α-CH2-CH2-NH-S02-ß, Bsp. 10 α-CH2NHCOCH2-0-CH2CH2-ß, α-CH2-CH2NHCOCH2-0-CH CH2-ß, α-CH2-(CH2-CH2-0)y-(CH2)3NHCO-CH2-0-CH2CH2-ß, α-CH2NHCO(CH2)ι o-0-CH2CH2-ß, α-CH2CH2NHCO(CH2)ι o-0-CH2CH2-ß, α-CH2-0-CH2-CH(OC-| 0H21 )-CH2-0-CH2CH2-ß, α-CH2-0-C6H4-0-CH2-CH2-ß oder -CH2-C6H -0-CH2-CH2-ß bedeutet, wobei y für die ganzen Zahlen 1 bis 6 steht.
28. Verwendung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ib eingesetzt werden, in der RF einen geradkettigen oder verzweigten perfluorierten Alkylrest der Formel CnF2nE bedeutet, wobei n für die Zahlen 4 bis 15 steht und E für ein endständiges Fluoratom steht.
29. Verwendung nach einem der Ansprüche 22 bis 28, dadurch gekennzeichnet, dass die folgenden Verbindungen eingesetzt werden:
- 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-(2,3- dihydroxypropyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluor- tridecyl)-amid]-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
- 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)säure-N-(3,6,9, 12,15-pentaoxa)-hexadecyl)-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)- perfluortridecyl]-amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
- 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-N-5- hydroxy-3-oxa-pentyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)- perfluortridecyl]-amid}-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex - 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)-säure-[N- 3,6,9,15-tetraoxa-12-aza-15-oxo-Cι7-C 6-hepta-decafluor)hexacosyl]- amid}-1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex
- 1 ,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl]-säure-N-(2- methoxyethyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa)-perfluortridecyl]- amid}-1 ,4,7, 10-tetraazacyclododecan, Gadoliniumkomplex.
30. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass als perfluoralkylhaltige Metallkomplexe die Verbindungen mit Zuckerresten der allgemeinen Formel Ic
(K), -G - (Z-RF)m 1
I (Ic)
(Y-R)P1
in der
R einen über die 1-OH- oder 1-SH-Position gebundenen Mono- oder Oligosaccharidrest darstellt,
RF eine perfluorierte, geradkettige oder verzweigte Kohlenstoffkette mit der Formel -CnF2nE ist, in der E ein endständiges Fluor-, Chlor-, Brom-, Jododer Wasserstoffatom darstellt und n für die Zahlen 4-30 steht,
K für einen Metallkomplex der allgemeinen Formel llc steht,
Figure imgf000347_0001
(llc) in der R1 ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent der
Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58-70 bedeutet, mit der Maßgabe, daß mindestens zwei R1 für Metallionenäquivalente stehen
R2 und R3 unabhängig voneinander Wasserstoff, d-C7-Alkyl, Benzyl, Phenyl, -CH2OH oder -CH2OCH3 darstellen und
U -C6H4-0-CH2-ω-, -(CH2)ι-5-ω, eine Phenylengruppe, -CH2-NHCO-
CH2-CH(CH2COOH)-C6H4-ω-, -C6H4-(OCH2CH2)o-ι-N(CH2COOH)- CH2-ω oder eine gegebenenfalls durch ein oder mehrere Sauerstoffatome, 1 bis 3-NHCO-, 1 bis 3 -CONH-gruppen unterbrochene und/oder mit 1 bis 3-(CH2)0-5COOH-Gruppen substituierte d-Cι2-Alkylen- oder C7-Ci2-C6H -0-Gruppe darstellt, wobei ω für die Bindungsstelle an -CO- steht, oder der allgemeinen Formel lllc
Figure imgf000348_0001
(lllc)
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat, R4 Wasserstoff oder ein unter R1 genanntes Metallionenäquivalent darstellt und U1 -C6H4-0-CH2-ω- darstellt, wobei ω die Bindungsstelle an -CO- bedeutet
oder der allgemeinen Formel IVc
Figure imgf000349_0001
(IVc)
in der R1 und R2 die oben genannte Bedeutung haben
oder der allgemeinen Formel VcA oder VcB
Figure imgf000349_0002
(VcA)
Figure imgf000349_0003
(VcB)
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat,
oder der allgemeinen Formel Vlc
ROOC — / \ — CO — ^
J:N N^
ROOC — ^ COOR1
(Vlc) in der R1 die oben genannte Bedeutung hat, oder der allgemeinen Formel Vllc
Figure imgf000350_0001
(Vllc)
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat und
U1 -C6H4-0-CH2-ω- darstellt, wobei ω die Bindungsstelle an -CO- bedeutet
oder der allgemeinen Formel VI llc
Figure imgf000350_0002
(Vlllc)
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat,
und im Rest K gegebenenfalls vorhandene freie Säuregruppen gegebenenfalls als Salze organischer und/oder anorganischer Basen oder Aminosäuren oder Aminosäureamide vorliegen können,
G für den Fall, daß K die Metallkomplexe llc bis Vllc bedeutet, einen mindestens dreifach funktionalisierten Rest ausgewählt aus den nachfolgenden Resten a) bis j) darstellt (a)
Figure imgf000351_0001
ß
Figure imgf000351_0002
(c) α
Figure imgf000351_0003
(d)
Figure imgf000351_0004
Figure imgf000352_0001
Figure imgf000352_0002
(h)
Figure imgf000353_0001
(i)
Figure imgf000353_0002
0) ^NH-CH — CO — ^Y k ß
und
G für den Fall, daß K den Metallkomplex VI llc bedeutet, einen mindestens dreifach funktionalisierten Rest ausgewählt aus k) oder I) darstellt,
(k)
Figure imgf000353_0003
(I)
Figure imgf000354_0001
wobei die Bindungsstelle von G an den Komplex K bedeutet, ß die Bindungsstelle von G zum Rest Y ist und γ die Bindungsstelle von G zum Rest Z darstellt
Y -CH2-, δ-(CH2)(1-5)CO-ß, δ-CH2-CHOH-CO-ß oder δ-CH(CHOH-CH2OH)- CHOH-CHOH-CO-ß bedeutet, wobei δ die Bindungsstelle zum Zuckerrest R darstellt und ß die Bindungsstelle zum Rest G ist
Z für
T— N: :N-so^-ε
γ-COCH2-N(C2H5)-S02-ε,
γ-COCH2-0-(CH2)2-S02-ε,
Figure imgf000354_0002
oder γ - NHCH2CH2-0-CH2CH2- ε steht, wobei γ die Bindungsstelle von Z zum Rest G darstellt und ε die Bindungsstelle von Z an den perfluorierten Rest RF bedeutet und
I1, m1 unabhängig voneinander die ganzen Zahlen 1 oder 2 bedeuten und p die ganzen Zahlen 1 bis 4 bedeutet,
eingesetzt werden.
31. Verwendung nach Anspruch 30, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ic eingesetzt werden, in der R einen Monosaccharidrest mit 5 bis 6 C-Atomen oder dessen Desoxy- Verbindung darstellt, vorzugsweise Glucose, Mannose oder Galactose.
32. Verwendung nach Anspruch 30, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ic eingesetzt werden, in der R2 und R3 unabhängig voneinander Wasserstoff oder C -C4-Alkyl bedeuten und/oder E in der Formel -CnF2nE ein Fluoratom bedeutet.
33. Verwendung nach Anspruch 30, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ic eingesetzt werden, in der G den Lysinrest (a) oder (b) darstellt.
34. Verwendung nach Anspruch 30, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ic eingesetzt werden, in der Z
Y-N:^ -S02-ε
bedeutet, wobei γ die Bindungsstelle von Z zum Rest G darstellt und ε die Bindungsstelle von Z an den perfluorierten Rest RF bedeutet und/oder Y δ-CH2CO-ß bedeutet, wobei δ die Bindungsstelle zum Zuckerrest R darstellt und ß die Bindungsstelle zum Rest G darstellt.
35. Verwendung nach Anspruch 30, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Ic eingesetzt werden, in der U im Metallkomplex K -CH2- oder -C6H -0-CH2-ω darstellt, wobei ω für die Bindungsstelle an -CO- steht.
36. Verwendung nach Anspruch 30, dadurch gekennzeichnet, dass der Gadolinium-Komplex von 6-N-[1,4,7-Tris(carboxylatomethyl)- 1,4,7,10- tetraazacyclododecan-10-N-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N- [1-0-α-D-carbonylmethyl-mannopyranose]-L-lysin-[1-(4-perfluoroctylsulfo- nyl)-piperazin]-amid eingesetzt wird.
37. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass als perfluoralkylhaltige Metallkomplexe die Verbindungen mit polaren Resten der allgemeinen Formel Id
Figure imgf000356_0001
I (Id)
(R)P2
in der
RF eine perfluorierte, geradkettige oder verzweigte Kohlenstoffkette mit der Formel -CnF2nE ist, in der E ein endständiges Fluor-, Chlor-, Brom-, Jododer Wasserstoffatom darstellt und n für die Zahlen 4-30 steht,
K für einen Metallkomplex der allgemeinen Formel lld steht,
Figure imgf000356_0002
(lld) in der
R1 ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent der
Ordnungszahlen 23-29, 42-46 oder 58-70 bedeutet, mit der Maßgabe, daß mindestens zwei R für Metallionenäquivalente stehen
R2 und R3 unabhängig voneinander Wasserstoff, CrC7-Alkyl, Benzyl, Phenyl, -CH2OH oder -CH2OCH3 darstellen und
U -C6H4-0-CH2-ω-, -(CH2)ι-5-ω, eine Phenylengruppe, -CH2-NHCO-
CH2-CH(CH2COOH)-C6H4-ω-, -C6H4-(OCH2CH2)o-rN(CH2COOH)- CH2-ω oder eine gegebenenfalls durch ein oder mehrere Sauerstoffatome, 1 bis 3-NHCO-, 1 bis 3 -CONH-gruppen unterbrochene und/oder mit 1 bis 3
-(CH2)0-5COOH-Gruppen substituierte C Cι2-Alkylen- oder C7-Cι2- C6H4-0-Gruppe darstellt, wobei ω für die Bindungsstelle an -CO- steht, oder der allgemeinen Formel llld
Figure imgf000357_0001
(llld) in der R1 die oben genannte Bedeutung hat, R4 Wasserstoff oder ein unter R1 genanntes Metallionenäquivalent darstellt und U1 -C6H4-0-CH2-ω- darstellt, wobei ω die Bindungsstelle an -CO- bedeutet oder der allgemeinen Formel IVd
Figure imgf000357_0002
(IVd) in der R1 und R2 die oben genannte Bedeutung haben
oder der allgemeinen Formel VdA oder VdB
Figure imgf000358_0001
(VdA)
Figure imgf000358_0002
(VdB)
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat,
oder der allgemeinen Formel Vld
ROOC — s. / \ -CO— ^ t-
J N N: RΌOC — ^ -COOR1
(Vld) in der R1 die oben genannte Bedeutung hat,
oder der allgemeinen Formel Vlld
Figure imgf000358_0003
(Vlld)
in der R1 die oben genannte Bedeutung hat und
U1 -C6H4-0-CH2-ω- darstellt, wobei ω die Bindungsstelle an -CO- bedeutet und im Rest K gegebenenfalls vorhandene freie Säuregruppen gegebenenfalls als Salze organischer und/oder anorganischer Basen oder Aminosäuren oder Aminosäureamide vorliegen können,
G einen mindestens dreifach funktionalisierten Rest ausgewählt aus den nachfolgenden Resten a) bis g) darstellt
Figure imgf000359_0001
Figure imgf000359_0002
Figure imgf000359_0003
Figure imgf000360_0001
(e)
Figure imgf000360_0002
Figure imgf000360_0003
(g)
Figure imgf000360_0004
Figure imgf000361_0001
α α
wobei die Bindungsstelle von G an den Komplex K bedeutet, ß die Bindungsstelle von G zum Rest R ist und γ die Bindungsstelle von G zum Rest Z darstellt
für y— N :N-S0?-ε
γ-C(0)CH20(CH2)2-ε,
steht, wobei γ die Bindungsstelle von Z zum Rest G darstellt und ε die Bindungsstelle von Z an den perfluorierten Rest Rf bedeutet R einen polaren Rest ausgewählt aus den Komplexen K der allgemeinen Formeln lld bis Vlld darstellt, wobei R1 hier ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent der Ordnungszahlen 20, 23-29, 42-46 oder 58-70 bedeutet, und die Reste R2, R3, R4, U und U1 die oben angegebene Bedeutung aufweisen oder den Folsäurerest oder eine über -CO- , S02- oder eine direkte Bindung an den Rest G gebundene Kohlenstoffkette mit 2-30 C-Atomen bedeutet, geradlinig oder verzweigt, gesättigt oder ungesättigt, gegebenenfalls unterbrochen durch 1-10 Sauerstoffatome, 1-5 - NHCO-Gruppen, 1-5 -CONH-Gruppen, 1-2 Schwefelatome, 1-5 - NH-Gruppen oder 1-2 Phenylengruppen, die gegebenenfalls mit 1-2 OH-Gruppen, 1-2 NH2-Gruppen, 1-2 -COOH-Gruppen, oder 1-2 - S03H-Gruppen substituiert sein können oder gegebenenfalls substituiert mit 1-8 OH-Gruppen, 1-5 -COOH- Gruppen, 1-2 S03H-Gruppen, 1-5 NH2-Gruppen, 1-5 C1-C4- Alkoxygruppen, und I1, m1, p2 unabhängig voneinander die ganzen Zahlen 1 oder 2 bedeuten.
eingesetzt werden.
38. Verwendung nach Anspruch 37, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Id eingesetzt werden, in der K für einen Metallkomplex der allgemeinen Formel lld, llld, VdB oder Vlld steht.
39. Verwendung nach Anspruch 37, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Id eingesetzt werden, in der der polare Rest R die Bedeutung des Komplexes K hat, vorzugsweise der Komplexe K der allgemeinen Formeln lld, llld, VdA oder Vlld.
40. Verwendung nach Anspruch 37, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Id eingesetzt werden, in der der polare Rest R folgende Bedeutungen hat:
-C(0)CH2CH2S03H
-C(0)CH2θCH2CH2θCH2CH2OH
-C(0)CH2OCH2CH2OH
-C(0)CH2OCH2CH(OH)CH2OH
-C(0)CH2NH-C(0)CH2COOH
-C(0)CH2CH(OH)CH2OH
-C(0)CH2OCH2COOH
-SO2CH2CH2COOH
-C(0)-C6H3-(m-COOH)2 -C(0)CH20(CH2)2-C6H3-(m-COOH)2
-C(0)CH20-C6H4-m-S03H
-C(0)CH2NHC(0)CH2NHC(0)CH2OCH2COOH
-C(0)CH2OCH2CH2OCH2COOH
-C(0)CH2OCH2CH(OH)CH20-CH2CH2OH
-C(0)CH2OCH2CH(OH)CH2OCH2-CH(OH)-CH2OH
-C(0)CH2S03H
-C(0)CH2CH2COOH
-C(0)CH(OH)CH(OH)CH2OH
-C(0)CH20[(CH2)20]ι-9-CH3
-C(0)CH20[(CH2)20]ι-9-H
-C(0)CH2OCH(CH2OH)2
-C(0)CH2OCH(CH2OCH2COOH)2
-C(0)-C6H3-(m-OCH2COOH)2
-CO-CH20-(CH2)20(CH2)2O-(CH2)20(CH2)2OCH3
vorzugsweise -C(0)CH20[(CH2)20]4-CH3.
41. Verwendung nach Anspruch 37, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Id eingesetzt werden, in der der polare Rest R der Folsäurerest ist.
42. Verwendung nach Anspruch 37, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Id eingesetzt werden, in der G den Lysinrest (a) oder (b) darstellt.
43. Verwendung nach Anspruch 37, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindungen der allgemeinen Formel Id eingesetzt werden, in der U im Metallkomplex K die Gruppe -CH2- oder -C6H -0-CH2-ω darstellt, wobei ω für die Bindungsstelle an -CO- steht.
44. Verwendung nach einem der Ansprüche 37-43, dadurch gekennzeichnet, dass der Gadolinium-Komplex von 2,6-N,N'-Bis[1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)- 1 ,4,7,10-tetraazacyclododecan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]- lysin-[1 -(4-perfluoroctylsulfonyl-piperazin]-amid eingesetzt wird.
45. Verwendung nach einem der Ansprüche 1-7, dadurch gekennzeichnet, dass als perfluoralkylhaltige Metallkomplexe galenische Formulierungen eingesetzt werden, die paramagnetische perfluoralkylhaltige Metallkomplexe der allgemeinen Formeln I, la, Ib, Ic und/oder Id und diamagnetische perfluoralkylhaltige Substanzen beinhalten, vorzugsweise gelöst in einem wässrigen Lösungsmittel.
46. Verwendung nach Anspruch 45, dadurch gekennzeichnet, dass als diamagnetische perfluoralkyhaltige Substanzen solche der allgemeinen Formel XX verwendet werden:
RF-L2-B2 (XX) worin RF einen geradkettigen oder verzweigten Perfluoralkylrest mit 4 bis 30 Kohlenstoffatomen darstellt, L2 für einen Linker und B2 für eine hydrophile Gruppe steht.
47. Verwendung nach Anspruch 46, dadurch gekennzeichnet, dass der Linker L2 eine direkte Bindung, eine -S02-Gruppe oder eine geradkettige oder verzweigte Kohlenstoffkette mit bis zu 20 Kohlenstoff atomen ist, welche mit einer oder mehreren -OH, -COO", -S03-Gruppen substituiert sein kann und/oder gegebenenfalls eine oder mehrere -O-, -S-, -CO-, -CONH-, -NHCO-, - CONR9-, -NR9CO-, -S02-, -P04 "-, -NH-, -NR9-Gruppen, einen Arylring oder ein Piperazin enthält, wobei R9 für einen d- bis C20-Alkylrest steht, welcher wiederum ein oder mehrere O-Atome enthalten kann und/oder mit -COO" oder S03-Gruppen substituiert sein kann.
48. Verwendung nach Anspruch 46, dadurch gekennzeichnet, dass die hydrophile Gruppe B2 ein Mono- oder Disaccharid, eine oder mehrere benachbarte -COO" oder -S03 "-Gruppen, eine Dicarbonsäure, eine Isophthalsäure, eine Picolinsäure, eine Benzolsulfonsäure, eine Tetrahydropyrandicarbonsaure, eine 2,6-Pyridindicarbonsäure, ein quartäres Ammoniumion, eine Aminopolycarbonsäure, eine Aminodipolyethylenglycolsulfonsäure, eine Aminopolyethylenglycolgruppe, eine S02-(CH2)2-OH-Gruppe, eine Polyhydroxyalkylkette mit mindestens zwei Hydroxylgruppen oder eine oder mehrere Polyethylenglycolketten mit mindestens zwei Glycoleinheiten ist, wobei die Polyethylenglycolketten durch eine -OH oder -OCH3-Gruppe terminiert sind.
49. Verwendung nach Anspruch 45, dadurch gekennzeichnet, dass als diamagnetische perfluoralkylhaltige Substanzen Konjugate aus -, ß-, oder γ-Cyclodextrin und Verbindungen der allgemeinen Formel XXII eingesetzt werden:
A2- L3-RF (XXII) worin A2 für ein Adamantan-, Biphenyl- oder Anthracenmolekül, L3 für einen Linker und RF für einen geradkettigen oder verzweigten Perfluoralkylrest mit 4 bis 30 Kohlenstoffatomen steht; und wobei der Linker L3 eine geradkettige Kohlenwasserstoffkette mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen ist, welche durch ein oder mehrere Sauerstoffatome, ein oder mehrere CO-, S02-, CONH-, NHCO-, CONR10-, NR10CO-, NH-, NR -Gruppen oder ein Piperazin unterbrochen sein kann, wobei R1ü ein Cι-C5-Alkylrest ist.
50. Verwendung nach Anspruch 45, dadurch gekennzeichnet, dass als diamagnetische perfluoralkylhaltige Substanzen solche der allgemeinen Formel XXI eingesetzt werden:
RF- X1 (XXI) worin RF einen geradkettigen oder verzweigten Perfluoralkylrest mit 4 bis 30 Kohlenstoffatomen darstellt und X1 ein Rest ausgewählt aus der Gruppe der folgenden Reste ist (n ist dabei eine Zahl zwischen 1 und 10):
Figure imgf000366_0001
Figure imgf000366_0002
Figure imgf000367_0001
Figure imgf000367_0002
Figure imgf000367_0003
Figure imgf000367_0004
Figure imgf000368_0001
Figure imgf000368_0002
Figure imgf000368_0003
O COO
-S-N
0 COO"
Figure imgf000369_0001
O /S°3
Figure imgf000369_0002
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