WO2001000802A2 - Teilsequenzen der gene des primär- und sekundärmetabolismus aus corynebacterium glutamicum - Google Patents
Teilsequenzen der gene des primär- und sekundärmetabolismus aus corynebacterium glutamicum Download PDFInfo
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- WO2001000802A2 WO2001000802A2 PCT/EP2000/005853 EP0005853W WO0100802A2 WO 2001000802 A2 WO2001000802 A2 WO 2001000802A2 EP 0005853 W EP0005853 W EP 0005853W WO 0100802 A2 WO0100802 A2 WO 0100802A2
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- corynebacterium glutamicum
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
Definitions
- the present invention is concerned with the production processes for primary and secondary metabolites with the aid of a genetically modified organism.
- This invention consists of partial sequences of genes which encode anabolic and catabolic enzymes from Corynejacterium glutamicu and of their use for the microbial production of metabolites.
- the concentrations of the metabolites are usually well balanced in living cells and do not exceed a certain limit. However, under some growth conditions or as a result of a genetic modification, they can be formed in excess and excreted in the culture medium. Relatively cheap substances can be used as a carbon source for cell growth. With the help of the biochemical potential of the cells (in most cases of microbial origin) or the enzymes, these inexpensive substances can be converted into a broad spectrum of more valuable substances. Microorganisms are used in particular for the fermentative production of metabolites for sales purposes. Microorganisms can be genetically modified in their biosynthetic pathways to optimize their biosynthetic capacity for certain metabolites, and this results in higher synthesis performances.
- Genetic engineering means that the number of copies or the speed of transcription of certain genes is increased for certain synthetic routes. However, one must first identify the appropriate target genes for this improvement. We now describe the target genes and partial sequences thereof, which were identified by cloning the DNA and subsequent sequencing with the aim of improving the strain.
- Part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence that is shown in SEQ ID NO. 1 or from this sequence SEQ ID NO. 1 by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence which is shown in SEQ ID NO. 2 or from this sequence SEQ ID NO. 2 by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence which is shown in SEQ ID NO. 3 or from this sequence SEQ ID NO. 3 derived by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence which is shown in SEQ ID NO. 4 or from this sequence SEQ ID NO. 4 derived by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence which is shown in SEQ ID NO. 5 or from this sequence SEQ ID NO. 5 derived by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence which is shown in SEQ ID NO. 6 or from this sequence SEQ ID NO. 6 derived by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence which is shown in SEQ ID NO. 7 or from this sequence SEQ ID NO. 7 derived by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence which is shown in SEQ ID NO. 8 or from this sequence SEQ ID NO. 8 derived by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence which is shown in SEQ ID NO. 9 or from this sequence SEQ ID NO. 9 derived by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence which is shown in SEQ ID NO. 10 or from this sequence SEQ ID NO. 10 derived by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention consists of a gene fragment with a nucleotide sequence which is shown in SEQ ID NO. 11 or from this sequence SEQ ID NO. 11 derived by substitution, insertion or deletion of up to 20% of the nucleotides.
- Another part of the invention is the use of the nucleotide sequence SEQ ID NO. 1 or SEQ ID NO. 2 or SEQ ID NO. 3 or SEQ ID NO. 4 or SEQ ID NO. 5 or SEQ ID NO. 6 or SEQ ID NO. 7 or SEQ ID NO. 8 or SEQ ID NO. 9 or SEQ ID NO. 10 or SEQ ID NO. 11 for the construction of genetically modified microorganisms.
- the complete genes can be produced using conventional techniques such as hybridization, starting from the gene fragments disclosed above. These genes can be used to construct recombinant host organisms that enable the biosynthesis of valuable organic products such as amino acids, fatty acids, carbohydrates, vitamins and cofactors. The biological activity of these genes is disclosed in the experimental part of this description. With the help of these genes, it becomes possible to avoid bottlenecks in the biosynthesis of organic products and thus increase the synthesis performance of microbial systems.
- Another aspect of this invention is an expression vector with at least one of the above-mentioned polynucleotides.
- the expression vector functionally connects one or more of these polynucleotides to regulatory units such as promoters, terminators, ribosomal binding sites and the like.
- An expression vector usually includes other units such as gene markers and replication sections.
- Another aspect of the invention is the host cell transformed with an expression vector.
- Any prokaryontic microorganism can be used for genetic modification, preferably Corynebacterium and Bacillus species, but also any eukaryotic microorganism, preferably yeast strains of the genus ⁇ shbya, Candida, Pichia, Saccharomyce ⁇ and Hansenula.
- Another aspect of the invention is a method for preparing and purifying a polypeptide, which consists of the following steps:
- the DNA from the genome of Corynebacterium glutamicum ATCC 13032 can be obtained by standard methods, e.g. von Altenbuchner, J. and Cullu, J. (1984, Mol. Gen. Genet. 195: 134-138).
- the genome library can be constructed from it with any cloning vector, e.g. pBluesc ⁇ pt II KS- (Strategagen) or ZAP Express TM (Stratagene), according to standard regulations (e.g. Sambrook, J. et al. (1989) Molecular clonmg: a laboratory manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press). Any fragment size can be used, preferably 5au3AI fragments with a length of 1 kb, which can be integrated into cloning vectors with digested BamHI.
- E. coli clones can be selected from the genome library produced in Example 1.
- E. coli cells are cultivated according to standard methods in suitable media (e.g. LB supplemented with 100 mg / 1 ampicillm), and then the plasmid DNA can then be isolated. If genome fragments are cloned from the DNA of Corynebacterium glutamicum m pBluescript II KS- (see Example 1), the DNA can be sequenced using the oligonucleotides 5'-AATTAAC-CCTCACTAAAGGG-3 'and 5' -GTAATACGACTCACTATAGGGC-3 '.
- nucleotide sequences can e.g. using the BLASTX algorithm (Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-410). In this way, one can discover new sequences and elucidate the function of these new genes.
- Example 3 When analyzing the E. coli clones as described in Example 2, which was followed by the analysis of the sequences obtained in Example 3, one was found Sequence as shown with SEQ ID NO. 1 is described. When using the BLASTX algorithm (see example 3), this sequence resulted in poorness with fatty acid synthases from different organisms. The greatest similarity was with a fragment with 519 base pairs for the fatty acid synthase from Corynebacterium ammoniaee ⁇ (NRDB Q04846, 68% agreement at the amino acid level).
- Example 3 When analyzing the E. coli clones, as described in Example 2 and followed by the analysis of the sequences obtained in Example 3, a sequence was found which was identified as SEQ ID NO. 2 is described. When using the BLASTX algorithm (see Example 3), this sequence showed similarity to phytoene dehydrogenases from different organisms. The greatest similarity was found with the phytoene dehydrogenase from Methanobacte ⁇ um thermoautotrophicu (NRDB 027835; 37% agreement at the amino acid level).
- Example 3 When analyzing the E. coli clones, as described in Example 2 and followed by the analysis of the sequences obtained in Example 3, a sequence was found which was identified as SEQ ID NO. 3 is described. When using the BLASTX algorithm (see Example 3), this sequence showed similarity to alcohol dehydrogenases from different organisms. The greatest similarity was found with the alcohol dehydrogenase from Bacillus stearothermophilus (NRDB P42327; 50% agreement at the amino acid level).
- Example 3 When analyzing the E coli clones, as described in Example 2 and which was followed by the analysis of the sequences obtained in Example 3, a sequence was found which was identified as SEQ ID NO. 5 is described. When using the BLASTX algorithm (see Example 3), this sequence showed similarity to phosphoglycerate mutases 2 from different organisms ; 54% agreement at the level of amino acids).
- Example 3 When the E coli clones were analyzed as described in Example 2 and followed by the analysis of the sequences obtained in Example 3, a sequence was found which was identified as SEQ ID NO. 6 is described. When using the BLASTX algorithm (see Example 3), this sequence showed similarity to xylulose casings from different organisms. The greatest similarity was found with a fragment consisting of 633 base pairs for the xylulose kmase from Streptomyces rubiginosus (NRDB P27156; 48% agreement at the amino acid level).
- Example 2 When analyzing the E coli clones, as described in Example 2 and which was followed by the analysis of the sequences obtained in Example 3, a sequence was found which was identified as SEQ ID NO. 8 is described. When using the BLASTX algorithm (see example 3), this sequence showed similarity with guano's pentaphophate synthetases from different organisms. The greatest similarity was found with a fragment consisting of 606 base pairs for the Guanos pentaphophate synthetase from Streptomyces coelicolor (NRDB 086656; 70% agreement at the amino acid level)
- Example 13 When analyzing the E. coli clones, as described in Example 2 and followed by the analysis of the sequences obtained in Example 3, a sequence was found which was identified as SEQ ID NO. 9 is described. When using the BLASTX algorithm (see Example 3), this sequence showed similarity to NTRB homologues from different organisms. NTRB is a transcriptional gene that is involved in the regulation of nitrogen assimilation. The greatest similarity was found with a 645 base pair fragment for NTRB from Mycobacte ⁇ um leprae (NRDB Q50049, 61% match at the amino acid level).
- NRDB Q50049 Mycobacte ⁇ um leprae
- Example 3 In the analysis of the E. coli clones as described in Example 2 and which was followed by the analysis of the sequences obtained in Example 3, a sequence was found which was identified as SEQ ID NO. 10 is described. When using the BLASTX algorithm (see Example 3), this sequence showed similarity to m fS from different organisms. Ni fS is involved in nitrogen purification. The greatest similarity was found with a fragment consisting of 594 base pairs for mfS from Mycobacte ⁇ um l eprae (NRDB Q49690, 62% agreement at the amino acid level).
- Example 3 When analyzing the E. coli clones, as described in Example 2 and followed by the analysis of the sequences obtained in Example 3, a sequence was found which is SEQ ID NO. 11 is described. When using the BLASTX algorithm (see Example 3), this sequence showed similarity to mfU from different organisms. NifU is involved in stick scaffixing. The greatest similarity was found with a 339 base pair fragment for mfU from Mycobacte ⁇ u l eprae (NRDB Q49683, 61% match at the amino acid level).
- Organism Corynebacterium glutamicum (6) Description of the sequence: SEQ ID NO. 5:
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Abstract
Die vorliegende Erfindung befaßt sich mit Herstellungsverfahren für Primär- und Sekundärmetabolite mit Hilfe gentechnisch veränderter Organismen.
Description
Teilsequenzen der Gene des Primär- und Sekundärmetabolismus aus Cσrynebacterium glutaml cma und ihr Einsatz zur mikrobiellen Herstellung von Primär- und Sekundärmetaboliten
Beschreibung
Die vorliegende Erfindung befaßt sich mit den Herstellungsverfahren für Primär- und Sekundärmetabolite mit Hilfe eines gentech- nisc veränderten Organismus. Diese Erfindung besteht in Teilsequenzen von Genen, die anabolische und katabolische Enzyme aus Corynejacterium glutamicu kodieren, und aus ihrem Einsatz zur mikrobiellen Herstellung von Metaboliten.
Die Konzentrationen der Metabolite sind in lebenden Zellen gewöhnlich gut ausbalanciert und überschreiten nicht eine gewisse Grenze. Unter manchen Wachstumsbedingungen oder als Folge einer gentechnischen Veränderung können sie allerdings im Überschuß gebildet und in das Kulturmedium ausgeschieden werden. Für das Zellwachstum kann man relativ billige Stoffe als Kohlenstoff- quelle verwenden. Mit Hilfe des biochemischen Potentials der Zellen (in den meisten Fällen mikrobiellen Ursprungs) oder der Enzyme lassen sich diese preiswerten Stoffe in ein breites Spektrum wertvollerer Substanzen umwandeln. Zur fermentativen Herstellung von Metaboliten zu Verkaufszwecken setzt man insbesondere Mikroorganismen ein. Mikroorganismen lassen sich durch gentechnische Veränderung der Biosynthesewege in ihrer Biosynthe- seleistung auf bestimmte Metabolite hin optimieren, und man erzielt dadurch höhere Syntheseleistungen. Gεntechnische Verände- rung meint hier, daß die Anzahl der Kopien oder die Geschwindigkeit der Transkription bestimmter Gene für bestimmte Synthesewege erhöht ist. Allerdings muß man die geeigneten Zielgene für diese Verbesserung zuerst identifizieren. Wir beschreiben nun im folgenden die Zielgene und Teilsequenzen davon, die durch Klonen der DNA und anschließende Sequenzierung mit dem Ziel der Stammverbesserung identifiziert wurden.
Ein Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz , die in der SEQ ID NR. 1 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 1 durch Substitution, Inser- tion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz, die in der SEQ ID NR. 2 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 2 durch Substitution, In- sertion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz, die in der SEQ ID NR. 3 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 3 durch Substitution, Insertion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz, die in der SEQ ID NR. 4 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 4 durch Substitution, Insertion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz, die in der SEQ ID NR. 5 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 5 durch Substitution, Insertion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz, die in der SEQ ID NR. 6 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 6 durch Substitution, Insertion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz, die in der SEQ ID NR. 7 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 7 durch Substitution, Insertion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz, die in der SEQ ID NR. 8 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 8 durch Substitution, Insertion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz, die in der SEQ ID NR. 9 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 9 durch Substitution, Insertion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz, die in der SEQ ID NR. 10 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 10 durch Substitution, Insertion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht in einem Genfragment mit einer Nucleotidsequenz, die in der SEQ ID NR. 11 beschrieben ist oder sich von dieser Sequenz SEQ ID NR. 11 durch Substitution, Insertion oder Deletion von bis zu 20 % der Nucleotide ableitet.
Ein weiterer Teil der Erfindung besteht im Einsatz der Nucleotidsequenz SEQ ID NR. 1 oder SEQ ID NR. 2 oder SEQ ID NR. 3 oder SEQ ID NR. 4 oder SEQ ID NR. 5 oder SEQ ID NR. 6 oder SEQ ID NR. 7 oder SEQ ID NR. 8 oder SEQ ID NR. 9 oder SEQ ID NR. 10 oder SEQ ID NR. 11 zur Konstruktion genetisch modifizierter Mikroorganismen.
Die vollständigen Gene lassen sich mit Hilfe konventioneller Techniken wie Hybridisierung herstellen, wobei man von den oben offenbarten Genfragmenten ausgeht. Diese Gene lassen sich einsetzen zur Konstruktion rekombinater Wirtsorganismen, die die Biosynthese wertvoller Bioprodukte, wie Aminosäuren, Fettsäuren, Kohlenhydrate, Vitamine und Kofaktoren ermöglichen. Die biologische Aktivität dieser Gene wird im experimentellen Teil dieser Beschreibung offenbart. Mit Hilfe dieser Gene wird es möglich, Engpässe bei der Biosynthese von Bioprodukten zu umgehen und so die Syntheseleistung mikrobieller Systeme zu steigern.
Ein weiterer Gesichtspunkt dieser Erfindung besteht in einem Expressions-Vektor mit zumindest einem der oben erwähnten Poly- nucleotide. Der Expressions-Vektor verbindet funktioneil eines oder mehrere dieser Polynucleotide mit regulatorischen Einheiten wie Promotoren, Terminatoren, ribosomale Bindungsstellen und dergleichen. Gewöhnlich gehören zu einem Expressions-Vektor weitere Einheiten wie Genmarker und Replikationsabschnitte .
Ein weiterer Gesichtspunkt der Erfindung besteht in der mit einem Expressions-Vektor transformierten Wirtszelle.
Zur gentechnisehen Veränderung kann man jeden beliebigen proka- ryontisehen Mikroorganismus verwenden, vorzugsweise Corynebacte- rium- und Bacillus-Arten, aber auch jeden beliebigen eukaryonti- schen Mikroorganismus , vorzugsweise Hefestämme der Gattung Äshbya , Candida , Pichia , Saccharomyceε und Hansenula .
Ein weiterer Gesichtspunkt der Erfindung besteht in einer Methode zur Herstellung und Reinigung eines Polypeptids, die in folgenden Schritten besteht:
(a) Kultivierung der Wirtszelle aus Anspruch 3 unter Bedingungen, die für die Expression des Peptids geeignet sind; und
(b) Gewinnung des Polypeptids aus der Wirtszellkultur .
In den folgenden Beispielen wird die Erfindung detaillierter beschrieben .
Beispiel I
Herstellung einer Genombibliothek von Corynebacterium glutamicum ATCC 13032
Die DNA aus dem Genom von Corynebacterium glutamicum ATCC 13032 läßt sich nach Standardmethoden gewinnen, die z.B. von Altenbuch- ner, J. und Cullu , J. (1984, Mol. Gen. Genet. 195:134-138) beschrieben sind. Die Genom-Bibliothek läßt sich daraus mit jedem beliebigen Klonierungsvektor , z.B. pBluescπpt II KS- (Strata- gene) oder ZAP Express™ (Stratagene) , nach Standardvorschriften gewinnen (z.B. Sambrook, J. et al . (1989) Molecular clonmg: a laboratory manual , Cold Spring Harbor Laboratory Press). Jede beliebige Fragmentgröße kann man dabei verwenden, vorzugsweise 5au3AI-Fragmente mit einer Länge von 1 kb, die sich m Klonie- rungsvektoren mit verdautem BamHI einbinden lassen.
Beispiel 2
Analyse der Nuclemsäuresequenzen der Genombibliothek
Aus der im Beispiel 1 hergestellten Genombibliothek kann man einzelne E. coli-Klone auswählen. E. coli-Zellen werden nach Standardmethoden in geeigneten Medien kultiviert (z.B. LB ergänzt mit 100 mg/1 Ampicillm) , und danach läßt sich dann die Plasmid- DNA isolieren. Klont man Genomfragmente aus der DNA von Corynebacterium glutamicum m pBluescript II KS- (siehe Beispiel 1), läßt sich die DNA mit Hilfe der Oligonucleotide 5'- AATTAAC- CCTCACTAAAGGG-3 ' und 5 ' -GTAATACGACTCACTATAGGGC-3 ' sequenzieren.
Beispiel 3
Computeranalyse der isolierten Nuclemsäuresequenzen
Die Nucleotidsequenzen lassen sich z.B. mit Hilfe des BLASTX-Algorithmus (Altschul et al . (1990) J. Mol. Biol . 215: 403-410) aneinanderfügen. Auf diesem Weg kann man neuartige Sequenzen entdecken und die Funktion dieser neuartigen Gene aufklären.
Beispiel 4
Identifizierung eines E. coli-Klons mit einem Genfragment für die Fettsäuresynthase (2.3.1.85)
Bei der Analyse der E. coli-Klone, wie sie im Beispiel 2 beschrieben wurde, an die sich die im Beispiel 3 beschriebene Analyse der dabei erhaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine
Sequenz, wie sie mit SEQ ID NR. 1 beschrieben ist. Bei der Anwendung des BLASTX-Algorithmus (siehe Beispiel 3) ergab diese Sequenz Ärmlichkeit mit Fettsauresynthasen aus verschiedenen Organismen. Die größte Ähnlichkeit war mit einem Fragment mit 519 Basenpaaren f r die Fettsauresynthase aus Corynebacterium ammo- niageneε gegeben (NRDB Q04846, 68% Übereinstimmung auf der Stufe der Aminosäuren) .
Beispiel 5
Identifizierung eines E. coIi-Klons mit dem Gen für die Phytoen- Dehydrogenase (EC 1.3.-.-)
Bei der Analyse der E. coli-Klone, wie sie im Beispiel 2 be- schrieben wurde und an die sich die im Beispiel 3 beschriebene Analyse der dabei erhaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine Sequenz, die als SEQ ID NR. 2 beschrieben ist. Bei der Anwendung des BLASTX-Algorithmus (siehe Beispiel 3) zeigte diese Sequenz Ähnlichkeit mit Phytoen-Dehydrogenasen aus verschiedenen Organis- men. Die größte Ähnlichkeit ergab sich mit der Phytoen-Dehydro- genase aus Methanobacteπum thermoautotrophicu (NRDB 027835; 37% Übereinstimmung auf der Stufe der Aminosäuren) .
Beispiel 6
Identif zierung eines E coli-Klons mit dem Gen für die Alkohol- Dehydrogenase (EC 1.1.1.1)
Bei der Analyse der E. coli-Klone , wie sie im Beispiel 2 be- schrieben wurde und an die sich die im Beispiel 3 beschriebene Analyse der dabei erhaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine Sequenz, die als SEQ ID NR. 3 beschrieben ist. Bei der Anwendung des BLASTX-Algorithmus (siehe Beispiel 3) zeigte diese Sequenz Ähnlichkeit mit Alkohol-Dehydrogenasen aus verschiedenen Organis- men. Die größte Ähnlichkeit ergab sich mit der Alkohol-Dehydroge- nase aus Bacillus stearothermophilus (NRDB P42327; 50% Übereinstimmung auf der Stufe der Aminosäuren) .
Beispiel 7
Identifizierung eines E. coli-Klons mit einem Genfragment für ein Homologes der Adenosylmethιonm-8-Amιno-7-oxononanoat-Amιnotrans- ferase (EC 2.6.1.62)
Bei der Analyse der E. coli-Klone , wie sie im Beispiel 2 beschrieben wurde und an die sich die im Beispiel 3 beschriebene Analyse der dabei erhaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine
Sequenz, die als SEQ ID NR. 4 beschrieben ist. Bei der Anwendung des BLASTX-Algorichmus (siehe Beispiel 3) zeigte diese Sequenz Ähnlichkeit mit Adenosylmethionin-8-Am no-7-oxononanoat-Arru.no- transferasen aus verschiedenen Organismen. Die größte Ähnlichkeit ergab sich mit einem aus 342 Basenpaaren bestehenden Fragment für die Adenosylmethιonιn-8-amιno-7-oxononanoat-Ammotransferase aus Erwinia herbicola (NRDB P53656; 40% Übereinstimmung auf der Stufe der Aminosäuren) .
Beispiel 8
Identifizierung eines E. coli-Klons mit einem Genfragment für ein Homologes der Phosphoglycerat-Mutase 2 (EC 5.4.2.1)
Bei der Analyse der E coli-Klone, wie sie im Beispiel 2 beschrieben wurde und an die sich die im Beispiel 3 beschπeoene Analyse der dabei erüaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine Sequenz, die als SEQ ID NR. 5 beschrieben ist. Bei der Anwendung des BLASTX-Algorithmus (siehe Beispiel 3) zeigte diese Sequenz Ähnlichkeit mit Phosphoglycerat-Mutasen 2 aus verschiedenen Organismen Die größte Ähnlichkeit ergab sich mit einem aus 204 Basenpaaren bestehenden Fragment für die Phosphoglycerat-Mutase 2 aus -coiacter um tuJberculosis (NRDB P71724; 54% Übereinstimmung auf der Stufe αer Aminosäuren) .
Beispiel 9
Identifizierung eines E coli-Klons mit einem Genfragment für die Xylulose-Kmase (EC 2 7 1.17)
Bei der Analyse der E coli-Klone, wie sie im Beispiel 2 beschrieben wurde und an die sich die im Beispiel 3 beschriebene Analyse der dabei erhaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine Sequenz, die als SEQ ID NR. 6 beschrieben ist. Bei der Anwendung des BLASTX-Algorithmus (siehe Beispiel 3) zeigte diese Sequenz Ähnlichkeit mit Xylulose-K asen aus verschiedenen Organismen. Die größte Ähnlichkeit ergab sich mit einem aus 633 Basenpaaren bestehenden Fragment für die Xylulose-Kmase aus Streptomyces rubiginosus (NRDB P27156; 48% Übereinstimmung auf der Stufe der Aminosäuren) .
Beispiel 10
Identifizierung eines E coli-Klons mit einem Genfragment für eine Fettsaure-CoA-Ligase für langkettige Fettsäuren (EC 6.2.1.3)
Bei der Analyse der E coli-Klone , wie sie im Beispiel 2 beschrieben wurde und an die sich die im Beispiel 3 Geschriebene Analyse der dabei erhaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine Sequenz, die als SEQ ID NR. "" bescnπeßen ist Bei der Anwendung des BLASTX-Algorithmus (siehe Beispiel 3) zeigte diese Sequenz Ähnlichkeit mit Fettsaure-CoA-Ligasen für langkettige Fettsauren aus verschiedenen Organismen Die größte Ähnlichkeit ergab s ch mit einem aus 369 Basenpaaren bestehenden Fragment f r die Fett- saure-CoA-Ligase für langkettige Fettsauren aus Archaeoglobus fulgidus (NRDB 030302 48% Übereinstimmung auf der Stufe der Aminosäuren) .
Beispiel 11
Identifizierung eines E. coli-Klons mit einem Genfragment für die Guanos pentapnophat-Synthetase
Bei der Analyse der E coli-Klone , wie sie im Beispiel 2 beschrieben wurde und an die sich die im Beispiel 3 beschπecene Analyse der dabei erhaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine Sequenz, die als SEQ ID NR. 8 beschrieben ist. Bei der Anwendung des BLASTX-Algorithmus (siehe Beispiel 3) zeigte diese Sequenz Ähnlichkeit m t Guanos pentaphophat-Synthetasen aus verschiedenen Organismen. Die größte Ähnlichkeit ergab sich mit einem aus 606 Basenpaaren bestehenden Fragment für die Guanos pentapho- phate-Synthetase aus Streptomyces coelicolor (NRDB 086656; 70% Übereinstimmung auf der Stufe der Aminosäuren)
Beispiel 12
Identifizierung eines E coli-Klons mit einem Genfragment für ein NTRB-Homologes
Bei der Analyse der E. coli-Klone , wie sie im Beispiel 2 be- schrieben wurde und an die sich die im Beispiel 3 beschriebene Analyse der dabei erhaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine Sequenz, die als SEQ ID NR. 9 beschrieben ist. Bei der Anwendung des BLASTX-Algorithmus (siehe Beispiel 3) zeigte diese Sequenz Ähnlichkeit mit NTRB-Homologen aus verschiedenen Organismen. NTRB ist ein Reguiatorgen für die Tanskription, das an der Regulierung der Stickstoffassimilat on beteiligt ist Die größte Ähnlichkeit ergab sich mit einem aus 645 Basenpaaren bestehenden Fragment f r NTRB aus Mycobacteπum leprae (NRDB Q50049, 61% Übereinstimmung auf der Stufe der Aminosäuren) .
Beispiel 13
Identifizierung eines E coli-Klons, der ein n fS-Homologes enthalt
Be der \nalyse der E. coli-Klone, wie sie im Beispiel 2 beschrieben wurde und an die sich die im Beispiel 3 beschπeoene Analyse der dabei erhaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine Sequenz, die als SEQ ID NR. 10 beschrieben ist. Bei der Anwendung des BLASTX-Algorithmus (siehe Beispiel 3) zeigte diese Sequenz Ähnlichkeit mit m fS aus verschiedenen Organismen. Ni fS ist an der Stickstofflx erung beteiligt. Die größte Ähnlichkeit ergab sich mit einem aus 594 Basenpaaren bestehenden Fragment für mfS aus Mycobacteπum l eprae (NRDB Q49690, 62% Übereinstimmung auf der Stufe der Aminosäuren) .
Beispiel 14
Identifiz erung eines E coli-Klons, der ein nifU-Homologes ent- halt
Bei der Analyse der E . coli-Klone, wie sie im Beispiel 2 beschrieben wurde und an die sich die im Beispiel 3 beschriebene Analyse der dabei erhaltenen Sequenzen anschloß, fand sich eine Sequenz, die als SEQ ID NR. 11 beschrieben ist. Bei der Anwendung des BLASTX-Algorithmus (siehe Beispiel 3) zeigte diese Sequenz Ähnlichkeit mit mfU aus verschiedenen Organismen. NifU ist an der Stickscoffixierung beteiligt Die größte Ähnlichkeit ergab sich mit einem aus 339 Basenpaaren bestehenden Fragment für mfU aus Mycobacteπu l eprae (NRDB Q49683, 61% Übereinstimmung auf der Stufe der Aminosäuren) .
Sequenz liste
(I) Allgemeine Angaben
(1) Anmelder.
(A) Name BASF-LYNX Bioscience AG (B) Straße: Im Neuenheimer Feld 515
(C) Stadt: Heidelberg
(D) Land. Deutschland
(E) Postleitzahl: 69120
(F) Telephon 06221/4546 (G) Telefax. 06221/454770
[ 2 ) Titel Sequenzen der Gene für den Primär- und Sekundärmetabolismus im Corynebacterium glutamicum und ihr Einsatz zur mikrobiellen Herstellung von Primär- und Sekundärme abo liten
'3) Anzahl der Sequenzen: 11
[4) Art der mit dem Computer lesbaren Form:
(A) Datenträger: Diskette
(B) Computer: IBM PC kompatibel
(C) Betriebssystem: Windows NT
(D) Software: MicrosoftΘword 97 SR-1
(I) Angaben zur SEQ ID N . 1:
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 693 Basenpaare
(B) Art: Nucleinsäure
(C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA
(3) hypothetisch: nein
(4) Antisense: nein
(5) Herkunft:
(A) Organismus: Corynejbacte ium glutamicum
(6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 1:
CTGTTNCCCGGGGGATCAGATTCACNGGGTCNGCCAGTGAAGTCGACGGTGATTGGCGCGGATGC TGCCTGCTCGCGAACAGTGGAAGTTGCCTGGGACAGCAGTTTCTCTGCAATTTCTTGGGTGGAGT AGGTTTCCACGCCTGCTTCTTCAGCTGCCTTGACCAAAGGATCGTTGCCGCCCATGAGGCCGGTG CCGCGAACCCAACCGATGTGAGCGTGCACGAGGGAGGTGTGTGCTCCCCATGCAGCTTGCTCTGC GTTCCAACGGGTAACCACGGCGTCGAGAGCTGCCTTGGATTCACCGTATGCACCATCGCCACCGA AGCGTCCACGGTTTGGTGAACCTGGGATGACCACGTGCAGGCGGTGACCCACGTTGATGGAGGAG CCCAATGGCGCAAGACCTGCGATGAGGCGCTCAACAGACCAGAGCAGAAGTCGCATCTGGGATTC TGCTGTGGCCTGCATCTGCATGGATCCGGACACGCGAGGTGCCGCGAATGGGAACAGCAAGGTAN GGACCAAACTGGCTTGACCAGCTTGGATGCNCGTGACGGNGGTGGCTGTCGATCCACCCAGTTGA TGATGGCTCGATGTCTGATANGACTAAGTTACCGCACGATCACAGTGCTGCCTGCCGNTGCGGAA CGTCCTANNANTCTTGAGAATTCAGCCGNCTGGCCGAGTTGAN
(I) Angaben zu SEQ ID NR. 2:
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 1869 Basenpaare
(B) Typ: Nucleinsäure
(C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA (3) hypothetisch: nein
(4) Antisense: nein
( 5 ) Herkunft :
(B) Organismus: Corynebacterium glutamicum
(6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 2:
ACAATCAATGTCATGACCAGCGGTGATCCAAAATTAATTACGCTTCGTTCCCGCAATAACAAAGT TGTCGAAATAACAGATGCCCGTGATCGTGCTTTCATTAAGCAGGCTGATGAGCTGATCGTGAAGA TCGACAAACTGCTTGAGAGCAAAAGAAAAAAGTCCCGTTAAGTCCGATCCACACTGTTGTCCCCG CGGAGACGCTTGAGCACGTTTTCTGCAGAGATCAAACACATAGATACGCCCACCCCTGGAACTGT GGTGTCACCTGCGTCATACAGGCCATCTACTTTGCGGGATTTGTTAGAACCCCTAAAGAACGCCG ATTGTGCCAGGGTGTGTGAGGGGCCAATGGACCCGCCGCTCCAGGAGTTGTATCGGTCTGCGAAG TCGGCAGGGCCGATGGTGCGCTGCACAACAATGCGGCTTTCCAAACCATCAATGCCAGCCCATCG CCCAATTTGAGCCACTGCTGCTATTGCGATCCGGCCCACCATGTCAGATTCTTCTCCGTAAGCGG ACCCGTGACCAATGGAGACATCGGCGGGTACTGGGACCAGGATGAAGAGGTTCTCGTGGCCTTCG GGTGCGGCATCGGAATCTGTTGCGGAGGTCTTGGAGATCTAGATGGATTCTGAAGCCGGGAATTC TGGGGTGGAGCCGTCGAAAACTTTGCGGAAATCTTCGTCCCAGTCGGAGGAAAAAGCAGGGTGTG CTCCCCCTTCACGCCTGCCAAAACCAGCACAGTACTGAGGCCGGGTTGTTTGTTCTTCCAGCTCG TCTCCGGCTTCGCGCACAACGAAGCAGGTAGGAGTTGGGTTTCGGTGTGGTGCTGATCAGCGCAG CTGATCACGATATCGGCTTCGATGAACTCTGAGCCGACTTGGACGCCTGTGGCGTTTCGGCCTTG GGTGGTGATTGCGCTGACGGGGGTGCCGAGGTGGAGGACGGCGTCGTCGATAAGCGAAATTAGTG CCTTGATGAAGGCGGTGAAGCCGCCTCGGGGATAGGAGACGCCTTGGACGAGGTCGGTGTGGCTC ATGAGGTGATAGAGCGCCGGGGTGTGCGAAGGGTCTGAGGAGAGGAAAACTGCGGGGTAGCTTAA GATTTGGCGCAGTTTTGTATCGCGGAATTGGGTGTTGACCTTGACTTTTAGCGAGGTCGACAGGC TTGCTAGAAGTTTGGGTAAAAGGCGCAGCATGCCGGGGCTTAAGTATGGGATGAAGTTGGTGAAG TTGGTGTAGAGGAAGCCGTCGATGGCCAGGTTGTAGACCTGTGTGGCGGAGTCGATATAGGTGCG CAGTTTGGCGCCGGCGCCGGGTTCGCGGGATTCGAAAAGCTCGGCCATCGCATCGATGTCGGAGG TGACGTCGATGAATTCGCCGTGGTCGTCGATGACGCGGTAGGCGGGTTCAAGTGGCACGAGGTCG AGGTGGTCGTCGATGGAGGTGCCGCAGAGCTTAAAGAAGTGGGACATGGCGTCGGGCATGAGGTA CCAGCTGGGGCCGGTGTCCCAGCGGAAGCCGTCGAGTTCGAAGGTCCCGGCGCGGCCGCCGAGGT GCTCGTTTTGTTCGACGAGGTGGACTTCATATCCTTCGCGTAAGAGCAGTGCGGTGGTGGCTAGT CCTGCTAGTCCCCCGCCGATGACCACTGCTTTTGTCATTTTTGAAACACTTCTTTCCACATTGCT TTGGTTGCCAGGCTGGCTTTTTTCATAGACGGCACCCGAATCCGCCCGTTTTTTAAGTCTTCGAG
GGACGCGGATTCCAGGTTGTCCACGAGGCAACCGTAGAGATCGGTCGCGGCGCGCACACCGGTTC GCGCGCCAAATGGCAGCAGCGGAATGCTCAGCCGGGCGGCATCCAAATC
( I ) Angaben zur SEQ ID NR . 3 :
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 1035 Basenpaare
(B) Typ: Nucleinsäure (C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA
(3) hypothetisch: nein (4) Antisense: nein
(5) Herkunft:
(C) Organismus: Corynebacterium glutamicum
(6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 3:
ATGACCACTGCTGCACCCCAAGAATTTACCGCTGCTGTTGTTGAAAAATTCGTTCATGACGTGAC CGTGAAGGATATTGACCTTCCAAAGCCAGGGCCACACCAGGCATTGGTGAAGGTACTCACCTCCG GCATTTGCCACACCGACCTCCACGCCTTGGAGGGCGATTGGCCAGTAAAGCCGGAACCACCATTC GTACCAGGACACGAAGGTGTAGGTGAAGTTGTTGAGCTCGGACCAGGTGAACACGATGTGAAGGT CGGCGATATTGTCGGCAATGCGTGGCTCTGGTCAGCGTGTGGCACCTGCGAATACTGCATCACCG GCAGGGAAACTCAGTGCAACGAAGCTGAGTATGGTGGCTACACCCAAAATGGATCCTTCGGCCAG TACATGCTGGTGGATACCCGTTACGCCGCTCGCATCCCAGACGGCGTGGACTACCTCGAAGCAGC ACCAATTCTGTGTGCAGGCGTGACTGTCTACAAGGCACTCAAAGTCTCTGAAACCCGCCCGGGCC AATTCATGGTGATCTCCGGTGTCGGCGGACTTGGCCACATCGCAGTCCAATACGCAGCGGCGATG GGCATGCGTGTCATTGCGGTAGATATTGCCGATGACAAGCTGGAACTTGCCCGTAAGCACGGTGC GGAATTTACCGTGAATGCGCGTAATGAAGATTCAGGCGAAGCTGTACAGAAGTACACCAACGGTG GCGCACACGGCGTGCTTGTGACTGCAGTTCACGAGGCAGCATTCGGCCAGGCACTGGATATGGCT CGACGTGCAGGAACAATTGTGTTCAACGGTCTGCCACCGGGAGAGTTCCCAGCATCCGTGTTCAA CATCGTATTCAAGGGCCTGACCATCCGTGGATCCCTCGTGGGAACCCGCCAAGACTTGGCCGAAG CGCTCGATTTCTTTGCACGCGGACTAATCAAGCCAACCGTGAGTGAGTGCTCCCTCGATGAGGTC AATGGTGTGCTTTACCGCATGCGAAACGGCAAGATCGATGGTCGTGTGGCGATTCGTTTC
(I) Angaben zur SEQ ID NR. 4:
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 1002 Basenpaare (B) Typ: Nucleinsäure
(C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA
(3) hypothetisch: nein (4) Antisense: nein
(5) Herkunft:
!D) Organismus: Corynebacterium glutamicum
6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 4:
AAGTGGAGCTCGCGCGCCTGCAGGTCGACACTAGTGGATCAGAGGCATACTCCGGCGGACTCACC TACTCCGGACACCCACTTGCAGTAGCACCCGCCAAGGCAGCGCTGGAGATTTACGCGGAAGGAGA GATCATTCCACGCGTAGCTCGACTTGGCGCTGAACTGATCGAACCTCGCCTTCGTGAACTAGCGG AAGAAAACGTAGCGATCGCTGACGTGCGGGGCATCGGATTCTTCTGGGCAGTGGAGTTCAATGCA GACGCCACTGCCATGGCTGCCGGTGCTGCAGAATTCAAGGAACGCGGCGTGTGGCCGATGATCTC CGGCAACCGATTCCACATCGCGCCGCCGCTGACCACCACTGATGACGAATTGGTAGCACTGCTGG ACGCGGTGGAAGCTGCAGCCCAAGCTGTCGAGCTGACCTTCGCTGGGGCGTTGTTCTAAGTTTTC TAGATAACAAGGCCAGCACAGACCACCATNTCTACGACCCCAAAAACCGACTCCAAGCTCCGCGG CGACNAANCCGCGCTCGCGCCACCGACCAAGCAGCCGGTCCAGGTTTAAAGATTTTGCTTTTCGA CGCTCCCCTCCACCTCATTCAATGCGGCGGAAGGGATTTCCTTGCATGTTTAAGCCTATAGGAAA AAGTGTTTGCATATCACCCTTGTATTCCAACACTTGAGCGGGTAGANTGGGTGGTAACNACCCNG GGAAAGGGGGAAGACACCATGAGCATCNCCACNCACNTCCAAGCNCTCNCCACAGCANTCAACGC CATCNACAACCATTTGGNCAGCATGCTCNAACATNGTGTTCNCCCANAACAATANANGGCNTNNA NCCCGACTCANCNCCTANAANACNCCTTCACCACACGCCNCCTTCGNCCCCAAACCAAACCCTCG CCNAAGCNCAACNCGCCACNCATTNGCTCCCCNCCTCNTNNATACCTNCCNCCCTTCGGATATCN AGCANGCGCCNCACCGNTCATTTNCCN
(I) Angaben zur SEQ ID NR. 5:
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 1007 Basenpaare (B) Typ: Nucleinsäure
(C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA (3) hypothetisch: nein (4) Antisense: nein
15) Herkunft:
(E) Organismus: Corynebacterium glutamicum
(6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 5:
TCCCNATTGGGTACCTTACCTGGTACCCACCCGGGTGGAAAATCGATGGGCCCGCGGCCGCTCTA GAAGTACTCTCGAGAAGCTTTTTGAATTCTTTGGATCCGAGCTGAACACATGGGTGATGTTTTTT TGAACCAGCACTGAGGCTGCGCTGGCCGCCTGTTGAAAGCCCAGGTCAGACAGCTCTGTGTCCAA TTGTCCCTGCATTCGGGACGTGGCGTTGTATTCAGTCTGCCCGTGTCGGAGCAGAATCAGGCGAC GAGTCACAGGACTACCTCTTAATCGTCCTCGTAGCCAGGCTCGTATTCAGCTGGCAAAGGTGGGA GTTCATCAATGCTGTCGATGTTGCGGATATCCGCCTCATCAGACCAGGAGGATNCACGCNTGAAG GTTTCAAGTCCTTCAATTTCAATGAGTGGGCAGTCNCGGTACAGACNATCCANTCCGTATAACTC GCGCTCTGCCTGTCGCTGAACGTGGATAACAACCNATCCGTAGTCAAGGAGAACCCAACNGTTTT CGCGGTTGCCTTCACGGCGCTTAGGCTCGAAACCAGCCTTGGTCATCTNCATCTTCGATCTCCTC NACAATGGCGCCCACCTTGGCGCTCATTTGTCCGCAGATGCAACNACNAANCAATTCTCGTGATT GNCGATCACTGTCNNAAACATCCAATNACAGCGATGTCNNCNGCCTTTCTTTTCNTGCCGCTGCT TTCGCCNCCATGGTCCCGAAGCCGATCGANTCCTCCATNTGCANATCAAAATTCNNTAAANCAGC TNCNTGTNGTTCCNCACCCNCTTTTTANGGTCCGAAACCNACCCTNCNGAAANAATCCCCACGTC AACCTTCCCTNTTTCCCNCTANACCGGGTGATTCNCCTACTTTNGGNTCGAATTTAAACTTTTNA NCANATTTCCTCTNGTTTTGGGCCTTGGGATCATTCCCCTATTCGATCCTNCTGGTCAAAAATTG GGNTTNGGCTATTCTTCNCCACCCCCCANGGA
(I) Angaben zur SEQ ID NR. 6:
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 748 Basenpaare (B) Typ: Nucleinsäure
(C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA (3) hypothetisch: nein
(4) Antisense: nein
(5) Herkunft:
(F) Organismus: Corynebacterium glutamicum
(6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 6:
TTGANNCNTTNNNGGAGCTCCCCGCGGTGGCGGCCGCTCTAGAACTAGTGGATCGACACGCTGAC ATCACCAGGCTGCAAATCAAGGCCAAGCGCAGCCGCAGCATTATCTCCCGTGCCTGCAGCAACTT TCACTCCACCTGGAGTTGTTCCCGCAATCGCATTTGGGGCCAGGAGTTCAGGAAGTTCCACCTCA TGGCCCAGCGCCAAGGCAGCTAGATCGGTGCGCCACGCACGATCACGCGTGCTGTAGTAGCCCGT TCCAGAAGCATCACCATGGTCGGTGACTTTGCGTCCGCGTCCCATCAAATGCCAGGTGAGGAAAT CATGAGGCAACATCACCGACGCCGTGCGCGCTGCATTTTCTGGTTCATGATCACGCATCCACCGC ATTTTGGTGGCAGTTAAAGAAGCAACATACACACTTCCCGTGGCATCTACCGCAGCCTGATCGCC GCCGATCTCCTCATTGAGATCCAACGCAGCCTGGGCAGAACGAGTGTCATTCCATAACAACGCCG GGCGAACGATTTCATCGTTTTCATCCAACGCCACCATGCCGTGCTGCTGGCCTGCAATAGATACA
GCGTCCGCGCGTTCTAACAACCCCTCGGTAGCTTGATCCAGCGCAGCGATCCACGCACGTGGATC TACTTCGACCCGTTCGGGGTGACTCGCGCGGCTTCGTCGATACCTGGCCGGTGGCGGCGTCACAA GCAAAAGCCTTGCAGGAATGGGTGGGAACTATC
( I ) Angaben zur SEQ ID N . 7 :
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 648 Basenpaare (B) Typ: Nucleinsäure
(C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA
(3) hypothetisch: nein (4) Antisense: nein
( 5 ) Herkunft : (G) Organismus: Corynebacterium glutamicum
(6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 7:
TGCAGCCCGGGGGATCACCGACGCCAAGGCTACGTAGGAATCCCCTTCCCCGACACCATCGTGCG CATCGCAAACCCAGAAAACCTCGACGAAACCATGCCCGACGGCAGCGAAGGCGAAGTCCTAGTCA AGGGCCCACAGGTGTTCAAGGGTTACCTCAACCAGGAAGAAGCCACCAAGAACAGCTTCCACGGC GAGTGGTACCGCACCGGCGACGTCGGAGTGATGGAAGAAGACGGGTTCATCCGCCTAGTTGCTCG CATCAAGGAAGTCATCATCACTGGCGGTTTCAACGTGTACCCAGCTGAGGTTGAAGAAGTCCTCG CAGAGCACCCAGACATTGAAGATTCCGCAGTCGTTGGTATCCCGCGTGAAGACGGCTCCGAAAAC GTCGTTGCTGCATCACTTTGGTGGAAGGTGCAGCGCTGGATCCGGATGGCCTGAAGGAATTCGCC GCAAGAACCTACCCGCTCAAGGTTCCGCGCACTTTCTACCACTTTGAGGAGATGCCGCGGGATCA GATGGCAAGATTAGGCGTCGTGAAGTGCANGCGGAGTTGTTGAAGAACTCGGCAGTNACGCCGAT TAAGAGGTCAGTTTCCAAATGGCACTTACCAATTGGNCTAGTTACCCCCANAAGCATTTTGAGGG TTCCACTTTTACCCAGTGGGNTGTGTGATCCTNT
;i) Angaben zur SEQ ID NR.
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 698 Basenpaare
(B) Typ: Nucleinsäure (C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA
(3) hypothetisch: nein (4) Antisense: nein
( 5 ) Herkunft :
(H) Organismus: Corynebacterium glutamicum
(6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 8:
GCAGCCCGGGGGATCCTTGGTGNCACCACCCTGGACATGCTCAAGATGGAACAGCAAATCGACTC CCTGGCACCAGGCGATGCGAAGCGCTACATGCACCACTACAACTTCCCTCCATACTCCACCGGTG AAACCGGTCGTGTGGGCTCACCAAAGCGCCGCGAAATCGGCCACGGTGCACTTGCAGAACGCGCA GTTTTGCCAGTAATCCCATCCCGTGAGGAATTCCCATACGCAATCCGTCAGGTCTCTGAAGCTCT GGGCTCCAACGGCTCCACCTCCATGGGCTCTGTCTGTGCATCCACTCTGTCCCTGTACAACGCTG GTGTTCCACTGAAGGCACCTGTTGCAGGTATCGCCATGGGACTTGTTTCCGGTGAAATCGACGGC AAGACCGAGTACGTTGCACTGACCGACATCCTCGGCGCAGAAGACGCATTCGGCGACATGGACTT CAAGGTTGCCGGCACCGCAGACTTCATACCGNACTTCAGCTGGACACCAAGCTGGACNGCATTCC TTCAAGGTGCTCTCCGATGCGCTTGAGCANGCACGCGATNCCGACTGACATCTGAACACATGGCT GATGTATCAACGGACCTTGATGAGATGAGCAAGTTCGTTCTGCATACCACCGNGAAATCCCATGG CAAAATCGNGACTGTCGACCAAGGGTAGACATTACGCTTTACNATTCG
(I) Angaben zur SEQ ID NR. 9:
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 1159 Basenpaare
(B) Typ: Nucleinsäure (C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA
(3) hypothetisch: nein (4) Antisense: nein
(5) Herkunft:
(I) Organismus: Corynebacterium glutamicum
(6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 9:
TTNANNCGTTTGGAGCTCCCCGCGGTGGCGGCCGCTCTAGAACTAGTGGATCACACAAAATGATT AGATTGTGTGCGAATTCATCCAATTGCTGTCTATATGCAGTACGCATGGCAACACTATAAGGCGA TAATGGTATTTCTGCAGGCCTAAAACACCCCTTTAAGATTGAATCACCTAATAATGGGGGATAGC CAACTATTGGCGGGGGTAAGT
ATTAAATTAACTACCCTCCGGAGTTTTCCATTTCTGCGCCTTTAGGAACAGTGGCATCCTCAGGA TCGTCCAACCAGCCATCTGGAAGTGCCACCTTTGCAGGAGCGCCCTGTCGACCTCGTGCACCTTC CGCGTCCTCTGCCTTGGCGGTGRAGTCAGCCCATGGTGCTAGGAGATCCTCAAGCTCCACATAGG TGGAAACCTTGGCCAGATTGGAGCGGAATTCGCCGCCAACAGGGAAACCGCGCAGGTCCAACCCA TGTGCTTACGCAGATCGCGCAGCCCCTTGGTTTCGCCATCATGCTGCATGAGGAGTTCTGCGTGG CGCAGGATGATTTGGGTAACTTCGCCGAAGGTAGGCTCCTCTGGGATTTCTTCTCCACGAACAGC
AGCAGCAGCTCAGCAAAGAGCCAAGGCCTGCCCAGGCAACCACgGCCCAACCACGACGCCATCGC AGCCAGTTTGCTCCATCATGCGCGTTGCATCGGATGCCGCGAAAATATCGCCATTGCCCAAAACT GGGATGCCGGTATCTGCCAAATGCTCYTTCAGGCGCGCGATCTYGTTCCAATCAGCCTCACCGGA ATAGCGCTGCGCCGCAGTGCGGGCGTGAAGCGCTACGGACTTCGCGCCGGCGTCGACAGCAATGC GTCCAGCATCCAAGTGAGTATGGTGCTCATCATCAATACCAACGCGGAACTTCACCGTCACCGGA ATGTCCGTGCCTTCCGTAGCCTTCACAGCCGCGGAAACGATGTTTTCAAACAAACGGCGCTTGTA AGGAATCGCAGAACCGCCACCCCGGCGCGTGACCTTTGGAACCGGGCAGCCAAAGTTCATATCAA TATGATCCCCCGGGCTGCAGGAATTCGATATCAAGCTTATCGATACCGTCGACCTCGAGGGGGGG CCCGGTACCCAGCTTGTGTTCCAANGGNTCCAA
(I) Angaben zur SEQ ID NR. 10:
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 761 Basenpaare
(B) Typ: Nucleinsäure
(C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA
(3) hypothetisch: nein
(4) Antisense: nein
(5) Herkunft:
(J) Organismus: Corynebacterium glutamicum
(6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 10:
TTGAANCCTTANNGGAGCTCCACCGCGGTGGCGGCCGCTCTAGAACTAGTGGATCTCGATTCACT CGAGCTTGATGAAACTGTCAAGGTCGTTGCCTTCACTCACCAGTCCAATGTGACCGGTGCTGTGG CTGATGTTCCAGAGTTGGTTCGTCGTGCCAAGGCTGTCGGCGCTCTCACGGTGCTTGATGCGTGC CAGTCTGTTCCTCATATGCCAGTGAATTTCCACGAGCTGGATGTAGATTTCTCTGCATTCTCTGG CCATAAGATGCTGGGACCTGCAGGCGTGGGCGTTGTGTATGCAAAGTCCCCAATCTTGGATGAAC TGCCACCATTTTTGACTGGTGGTTCCATGATTGAAGTTGTCACCATGGAGGGTTCCACCTACGCT GCCGCACCTCAACGTTTTGAGGCCGGCACGCAGATGACCAGCCAGGTTGTGGGCTTGGGTGCTGC CGTGGACATGCTGAATGAAATCGGTATGGAAGCAATCGCAGCNGCATGAGCACGCATTGACTGCT TACGCGTTGGAAAAGCTCACGGCAATTAAAGGGACTAACCATTGCTGGTCCTTTTGACTGCAGAG CATCGCGGNGGTGCAATCAGCTTCNGTGTCNANGGCATTCACCNACACGATCTANGGCAAAGTGC TTGACCATCAGGGCGTGAATATTCCGNGTCGGGCACCACTGTGCGTGGGCCTGCACCGCANCATT GAACGTNCAATNGNANACAAGAGCATTTTTCTATCTCTATTACACC
(I) Angaben zur SEQ ID NR. 11:
(1) Sequenzcharakteristika:
(A) Länge: 791 Basenpaare
(B) Typ: Nucleinsäure
(C) Strangtyp: Doppelstrang
(D) Topologie: linear
(2) Molekülart: DNA
(3) hypothetisch: nein
(4) Antisense: nein
:5) Herkunft:
(K) Organismus: Corynebacterium glutamicum
(6) Beschreibung der Sequenz: SEQ ID NR. 11:
TTGACCCTTTAGCTGGGTACCGGGCCCCCCCTCGAGGTCGACGGTATCGATAAGCTTGATATCGA ATTCCTGCAGCCCGGGGGATCTTCATCGCCAACAAACTGACCGCGGGAAACGATCATCTTCTCAA ATTCTGTGAGCTTTTCCAGCGCCTTGTCGACGGGTTGGCCCACGATCTCCTCGGCCATAACGGAC GTGGAGGCCTGGCTGATTGAGCAACCAACTGCTTCGTAGGAGACGTCCTCCACGGTGGAGCCGTC CTCAGACAGCTTCACGCGCAGAGTCAATTCGTCGCCACAAGAAGGGTTGACGTGGTGAACCTCAG CATCGAAAGGATCCCGAAGGCCCTTGTGCTGTGGGTTTTTGTAGTGGTCCAGGATCACCTCCTGG TACATCTGCTCAAGGTTCATTACTCAACTCCAAAGAATTGCTTGGCCTTCTCGATCGCTGCCGCG AGGCGGTCGATTTCTTCGAAGGTGTTATAGAGATAGAAAGATGCTCTTGCTGTCGATTGTACCGT TCATGCTGCGGTGCACGGCCACGCGCAGTGGTGGNCGACGCCGGATATTCACGCCCTGATCGTCA AGCACTTGGCCTAANCGTGTGGGTGAATGCCTCGACACCGAACTGATGCACCGGCGNCTGCTNTN CATCAAAAGGACCANCNATGGGTAAGTCCTTAATGCCGNGAGCTTTTCAACGCGTAAGCAGGTAA TGCNNCTATGCNCTGCGATGNTTTCATACCGATTNNTTAAGANTNTCCCCGGNGTNCCCNANCCC NAAACTGGTTN
Claims
1. Ein gereinigtes Polynucleotid mit einer Nukleinsäuresequenz , die aus der folgenden Gruppe ausgewählt ist: SEQ ID NR. 1, SEQ ID NR. 2, SEQ ID NR. 3, SEQ ID NR. 4, SEQ ID NR. 5, SEQ ID NR. 6, SEQ ID NR. 7, SEQ ID NR. 8, SEQ ID NR. 9, SEQ ID NR. 10, SEQ ID NR. 11.
2. Ein Expressions-Vektor mit einem dem Anspruch 1 entsprechenden Polynucleotid.
3. Eine Wirtszelle, die mit dem Expressions-Vektor aus Anspruch 2 transformiert ist.
4. Eine Methode zur Herstellung und Reinigung eines Polypeptids, die aus folgenden Schritten besteht:
(a) Kultivierung der Wirtszelle aus Anspruch 3 unter Bedin- gungen, die für die Expression des Peptids geeignet sind; und
(b) Gewinnung des Polypeptids aus der Wirtszellkultur.
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Publications (2)
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Cited By (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6680187B2 (en) | 2000-09-13 | 2004-01-20 | Degussa Ag | Nucleotide sequences coding for the PTSI protein |
| US6680186B2 (en) | 2000-07-01 | 2004-01-20 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which encode plsC gene |
| US6689587B2 (en) | 2000-11-10 | 2004-02-10 | Degussa Ag | Polynucleotides encoding the nadC gene and methods of producing nicotinic acid or nicotinic acid derivatives |
| US6692946B2 (en) | 2000-11-10 | 2004-02-17 | Degussa Ag | Polynucleotides encoding the nadA gene and methods of producing nicotinic acid or nicotinic acid derivatives |
| US6759224B2 (en) | 2000-09-09 | 2004-07-06 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the sahH gene |
| US6812006B2 (en) | 2000-08-10 | 2004-11-02 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the lysR3 gene |
| US6812016B2 (en) | 2000-09-02 | 2004-11-02 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the metY gene |
| US6815196B2 (en) | 2000-09-02 | 2004-11-09 | Degussa Ag | Nucleotide sequences encoding o-succinylhomoserine sulfhydrylase |
| US6875586B2 (en) | 2000-08-10 | 2005-04-05 | Degussa Ag | Nucleotide sequences coding for the luxR gene |
| US6893852B1 (en) | 1999-07-02 | 2005-05-17 | Ajinomoto Co., Inc. | Dna encoding sucrose pts enzyme II |
| US6902916B2 (en) | 2000-08-10 | 2005-06-07 | Degussa Ag | Nucleotide sequences coding for the 1ysR1 gene |
| US6942996B2 (en) | 2000-08-02 | 2005-09-13 | Degussa Ag | Isolated polynucleotide from Corynebacterium encoding a homocysteine methyltransferase |
| US6958228B2 (en) | 2000-08-02 | 2005-10-25 | Degussa Ag | Nucleotide sequence which code for the metH gene |
| US7038034B2 (en) | 2000-09-09 | 2006-05-02 | Degussa Ag | Nucleotide sequences coding for the Dep33 efflux protein |
| US7067288B2 (en) | 2000-07-04 | 2006-06-27 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the mdhA gene |
| US7105321B2 (en) | 2000-08-26 | 2006-09-12 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the ccpA2 gene |
| US7468262B2 (en) | 2003-05-16 | 2008-12-23 | Ajinomoto Co., Inc. | Polynucleotides encoding useful polypeptides in corynebacterium glutamicum ssp. lactofermentum |
| EP2319919A1 (de) | 2001-06-21 | 2011-05-11 | Verenium Corporation | Nitralasen |
| DE102018008670A1 (de) * | 2018-10-26 | 2020-04-30 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Bereitstellung von Malonyl-CoA in coryneformen Bakterien sowie Verfahren zur Hestellung von Polyphenolen und Polyketiden mit coryneformen Bakterien |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10028236A1 (de) | 2000-06-07 | 2001-12-13 | Rauch Landmaschfab Gmbh | Zentrifugalstreuer, insbesondere Düngerstreuer |
| EP1315825A2 (de) * | 2000-09-09 | 2003-06-04 | Degussa AG | Nukleotidsequenzen die für das gpmb gen codieren |
| DE10154180A1 (de) | 2001-11-05 | 2003-05-15 | Basf Ag | gene die für genetische Stabilitäts-, genexpressions-und Faltungsproteine codieren |
-
1999
- 1999-06-25 DE DE1999129365 patent/DE19929365A1/de not_active Withdrawn
-
2000
- 2000-06-23 AU AU64289/00A patent/AU6428900A/en not_active Abandoned
- 2000-06-23 WO PCT/EP2000/005853 patent/WO2001000802A2/de active Application Filing
Non-Patent Citations (5)
Cited By (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6893852B1 (en) | 1999-07-02 | 2005-05-17 | Ajinomoto Co., Inc. | Dna encoding sucrose pts enzyme II |
| US6680186B2 (en) | 2000-07-01 | 2004-01-20 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which encode plsC gene |
| US7067288B2 (en) | 2000-07-04 | 2006-06-27 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the mdhA gene |
| US6958228B2 (en) | 2000-08-02 | 2005-10-25 | Degussa Ag | Nucleotide sequence which code for the metH gene |
| US6942996B2 (en) | 2000-08-02 | 2005-09-13 | Degussa Ag | Isolated polynucleotide from Corynebacterium encoding a homocysteine methyltransferase |
| US6902916B2 (en) | 2000-08-10 | 2005-06-07 | Degussa Ag | Nucleotide sequences coding for the 1ysR1 gene |
| US7173105B2 (en) | 2000-08-10 | 2007-02-06 | Degussa Ag | Nucleotide sequences coding for the LuxR gene |
| US6812006B2 (en) | 2000-08-10 | 2004-11-02 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the lysR3 gene |
| US6875586B2 (en) | 2000-08-10 | 2005-04-05 | Degussa Ag | Nucleotide sequences coding for the luxR gene |
| US7105321B2 (en) | 2000-08-26 | 2006-09-12 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the ccpA2 gene |
| US6812016B2 (en) | 2000-09-02 | 2004-11-02 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the metY gene |
| US6815196B2 (en) | 2000-09-02 | 2004-11-09 | Degussa Ag | Nucleotide sequences encoding o-succinylhomoserine sulfhydrylase |
| US7038034B2 (en) | 2000-09-09 | 2006-05-02 | Degussa Ag | Nucleotide sequences coding for the Dep33 efflux protein |
| US6759224B2 (en) | 2000-09-09 | 2004-07-06 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the sahH gene |
| US6680187B2 (en) | 2000-09-13 | 2004-01-20 | Degussa Ag | Nucleotide sequences coding for the PTSI protein |
| US7160703B2 (en) | 2000-09-14 | 2007-01-09 | Degussa Ag | Nucleotide sequences coding for the PtsI protein |
| US6689587B2 (en) | 2000-11-10 | 2004-02-10 | Degussa Ag | Polynucleotides encoding the nadC gene and methods of producing nicotinic acid or nicotinic acid derivatives |
| US6692946B2 (en) | 2000-11-10 | 2004-02-17 | Degussa Ag | Polynucleotides encoding the nadA gene and methods of producing nicotinic acid or nicotinic acid derivatives |
| EP2319919A1 (de) | 2001-06-21 | 2011-05-11 | Verenium Corporation | Nitralasen |
| EP2327766A1 (de) | 2001-06-21 | 2011-06-01 | Verenium Corporation | Nitralasen |
| EP2327767A1 (de) | 2001-06-21 | 2011-06-01 | Verenium Corporation | Nitralasen |
| US7468262B2 (en) | 2003-05-16 | 2008-12-23 | Ajinomoto Co., Inc. | Polynucleotides encoding useful polypeptides in corynebacterium glutamicum ssp. lactofermentum |
| US7695946B2 (en) | 2003-05-16 | 2010-04-13 | Ajinomoto Co., Inc. | Polynucleotides encoding useful polypeptides in Corynebacterium glutamicum ssp. lactofermentum |
| US7696315B2 (en) | 2003-05-16 | 2010-04-13 | Ajinomoto Co., Inc. | Polynucleotides encoding useful polypeptides in Corynebacterium glutamicum ssp. lactofermentum |
| DE102018008670A1 (de) * | 2018-10-26 | 2020-04-30 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Bereitstellung von Malonyl-CoA in coryneformen Bakterien sowie Verfahren zur Hestellung von Polyphenolen und Polyketiden mit coryneformen Bakterien |
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