WO2000044715A1

WO2000044715A1 - Nouveaux composes d'aralkylguanidine

Info

Publication number: WO2000044715A1
Application number: PCT/JP2000/000293
Authority: WO
Inventors: Hideaki Kagotani; Shusaku Tazawa; Masato Watanabe; Takashi Matoba; Shinobu Oshikiri; Hiroyuki Saeki; Minoru Inoue; Tousaku Miki
Original assignee: Daiichi Radioisotope Laboratories, Ltd.
Priority date: 1999-01-29
Filing date: 2000-01-21
Publication date: 2000-08-03
Also published as: JP2000219674A

Description

明細書新規ァラルキルグァニジン化合物技術分野

本発明は、放射性金属複合体診断薬として有用な新規ァラルキルグァニジン化合物、およびこの化合物を利用した、臨床核医学上有利且つ有用な画像診断の情報を提供できる放射性金属複合体診断薬等の医薬に関する。背景技術

画像診断のイメージングに使用されている放射性化合物は、対象疾患領域の組織や器官を透過する放射線を放出する放射性同位元素により標識されていなければならない。好ましい放射性同位元素として、ョード— 1 2 3及びテクネチウム一 9 9 mなどが挙げられる。これら放射性同位元素のうち、特にテクネチウム一 9 9 mは優れた物理学的特性、すなわち、放射線のガンマ線エネルギーが 1 4 0 k e Vで半減期が 6時間という特性を有するため、放射線イメージング装置による撮像に適しており、臨床核医学上有用な画像診断の情報が得られるとして、ここ数年、当該元素を利用した画像診断薬に関する研究の進歩は著しい。

従来、心臓疾患領域の放射性画像診断薬として、特に交感神経のイメージング剤として、メタョードベンジルグァニジン（'²³ I — M I B G) がミシガン大学、 D.M.Wieland 等（J. Nucl. Med.22 巻、 22-31頁 1981 年）により報告され、以後臨床に供されている。しかしながら、これは高価なョードー 1 2 3で標識された診断薬であるため、ジェネレーターを使用してより安価に容易に入手でき、前記の通り、臨床医学上より有用な画像診断の情報が得られるテクネチウム - 9 9 mで標識された診断薬の開発が進められている。

最近、ペンシルベニア大学， H.F.Kung等（Proceedings of the 45th Annual Mee t i ng No. 955 1 998 年）により、テクネチウム一 9 9 mで標識したベンジルグァニジン化合物が報告された。これは四座配位のジァミンジチオール配位子として、下式 NH SH NH SH

\_/ で表される化合物を用い、この配位子にテクネチウム— 9 9 mが配位したベンダン卜タイプ金属複合体のベンジルグァニジン誘導体である。この化合物をラッ卜に投与したところ、投与後 1 — 4時間で、臓器量当たり投与量の 0 . 1 8〜0 . 2 0 %の心臓への集積が認められることが報告されている。しかし、臨床医学上使用するためには、このレベルの心臓への集積量では十分とは言えない。すなわち、このテクネチウム一 9 9 m金属複合体からなるベンジルグァニジンィ匕合物は、生体投与後の心臓への集積レベルが低いため、臨床医学上有用なイメージング剤としては不十分であり、診断薬として満足できるものではなかった。

また、特開平 7— 9 7 3 6 1号公報及び米国特許 5 6 9 0 9 0 4号（1 9 9 7 年）には、ヒ卜を含むほ乳動物の脳のイメージング剤として、高脂溶性のフエ二ルジアミンジチオール誘導体を利用することが開示されているが、心臓への集積性については全く記載されていない。

従って、心臓への集積レベルが高く、心臓をイメージングするのに優れたテクネチウ厶— 9 9 m金属複合体からなる放射性診断薬の提供が求められており、これを提供することが本発明の課題である。発明の開示

本発明者らは、上記課題を解決すべく、心臓疾患領域イメージングに使用される優れた放射性診断薬を鋭意探索し、ァラルキルグァニジン化合物にフエニルジアミンジチオール構造を組み入れた組み込みタイプの化合物デザインを初めて実現した。そして、この新規化合物は金属複合体形成性を有し、心臓疾患領域のィメージング剤等に使用される配位子として極めて優れたものであることを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち本発明は、次の一般式（ I )、

[式中、 R R ²、 R ³、 R ⁴、 R ⁵、 R ⁶、 1¾ ⁷及び8 ⁸は、それぞれ水素原子又は低級アルキル基を示し、 R ⁹及び R ¹ °はそれぞれ水素原子又は置換もしくは非置換のァリール低級アルキル基を示し、 Xは、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基、水酸基またはアミノ基を示し、 Yは、次の基、

(ここで、 R ' '及び R ^{1 2}はそれぞれ水素原子、低級アルキルォキシカルボニル基又はァリール低級アルキルォキシカルボ二ル基を示し、 nは 1ないし 3の整数を示す）

で示される置換基を示す]

で表される新規ァラルキルグァニジン化合物を提供するものである。

また、本発明は、上記ァラルキルグァニジン化合物と放射性金属からなる放射性金属複合体を有効成分とする放射性診断薬等の医薬を提供するものである。図面の簡単な説明

図 1はテクネチウム— 9 9 m標識複合体調製液の犬におけるイメージング画像を示す図であり、図 2は実施例 8のテクネチウム一 9 9 m標識複合体の腫瘍細胞への取り込みを示す図であり、図 3は実施例 6のレニウム複合体のヒ卜神経芽細胞腫への取り込みに関するミカエリス ·メンテンプロッ卜を示す図であり、図 4 は実施例 6のレニウム複合体のヒ卜神経芽細胞腫への取り込みに関するラインゥエーバー ·バルク逆数プロッ卜を示す図である。発明を実施するための最良の形態

本発明の新規ァラルキルグァニジン化合物、即ち金属複合体の配位子化合物 (以下、「配位子化合物」ということがある）は、上記式（ I ) に示すように四座配位のフエニルジアミンジチオール構造を有するものである。

本発明のァラルキルグァニジン化合物において、一般式（ I ) 中、 FV〜R ⁸で示される水素原子又は低級アルキル基の好ましい例としては、水素原子又はメチル基などが挙げられ、特に、後記式（）で示す通り、 R '〜R ⁸がいずれも水素原子の場合が最も好ましい。

また、一般式（ I ) 中、 R ⁹、 R ' ^Qは、それぞれ水素原子を示すか、またはメルカプ卜基の一般的な保護基である置換もしくは非置換のァリール低級アルキル基を示すが、ここで、置換もしくは非置換ァリール低級アルキル基の好ましい例としては、 4ーメ卜キシベンジル基などを挙げることができる。

一般式）中、 Xで表される置換基は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基、水酸基またはアミノ基を示すが、この中で好ましいものとして、水素原子を例示することができる。

なお、置換基 Xは、フエニル基の 3位から 6位のいずれの位置において置換されていてもよい。一般式（ I ) 中、 Yで表される置換基

12

— (CH₂)_n— ΝΗ丁 ΝΗ - R

N

11

R において、 nは 1ないし 3の整数を示すが、特に、後記式（に）で示されるとおり、 nが 1である場合が最も好ましい。

また、 Yの中で、 R "、 R ^{1 2}は、それぞれ水素原子を示すか、またはアミノ基の一般的な保護基である低級アルキル才キシカルボニル基もしくはァリール低級アルキル才キシカルボ二ル基を示すが、ここで低級アルキル才キシカルボニル基の好ましい例としては、例えば t一ブトキシカルボ二ル基等を挙げることができ、また、ァリール低級アルキル才キシカルボニル基の好ましい例としては、例えばベンジル才キシカルボ二ル基等を挙げることができる。

なお、置換基 Yは、フエニル基の 3位から 6位のいずれの位置において置換されていてもよい。

一般式（ I ) で表される化合物の中で特に好ましいものとして、次の式（に）

[式中、丫'は、次の基一 12

CHフ NH- NH-R

N

11

R (ここで、 R'¹および R'²は、それぞれ前記した意味を有する）で示される置換基であり、 X、 R⁹および R'°は前記した意味を有する] で表される新規ァラルキルグァニジン化合物を挙げることができる。

上記の一般式（ I ) 表わされるァラルキルグァニジン化合物は、種々の方法で製造できるが、その一例を示せば以下のとおりである。

製造法 1 ：

一般式（ I )で表される化合物のうち、 R'〜R⁸がいずれも水素原子で、かつ、 nが 1である化合物（ l a) は、例えば以下の式で示される方法により合成できる。

(II) (in)

(IV) (V)

(la)

(式中、 R ⁹'および R ¹ °'はいずれも置換もしくは非置換ァリール低級アルキル基を示し、 R ¹¹ 'および R ¹²'はいずれも低級アルキル才キシカルボニル又はァリール低級アルキル才キシカルボニルを示し、 R⁹、 R '。、 R' '、 R ¹²および Xは、いずれも前記した意味を有する）

この方法を実施するには、まず、式（I I) で表されるァミノベンゾニ卜リルを出発物質とし、これに塩基性条件下（例えば卜リエチルァミンの存在下）、クロロアセチルクロリドを反応させて中間化合物（I I I) とする。次いで、この化合物（I I I) に、 H.F.Kung 等（J. Med. Chem. 40 巻 9-17 頁 1997 年）の記載に順じて合成した R⁹'置換のアミノエチルメルカブタンを、塩基性条件下（例えば卜リエチルァミンの存在下）で反応させて化合物（IV) を合成する。

更に、ボラン還元により化合物（IV) 中のアミド基の還元と二卜リル基のアミノメチル基への変換を行い、化合物（V) を得る。最後に、この化合物（V) に、 H g C I ₂、卜リメチルァミンの存在下、 R "'、 R '²'で置換されたチ才ゥレアを反応させ、さらに必要に応じて、例えば卜リフル才ロ酢酸及びメタンスルフォン酸等による緩和な条件で脱保護することにより、目的の化合物（ l a) とすることができる。

なお、上記反応の出発物質である化合物（I I) は、例えば、以下の方法（a) または（b) のいずれかの方法に従い合成できる。

方法（a)；

E.M.Grivsky等 (Ind. Chim. Beige. 39 巻 490-500 頁 1974 年）の方法に順じて合成できるハロゲン置換のニトロベンゾニ卜リル化合物（VI) を、下式に従い、塩基性条件下（例えば卜リエチルァミンの存在下）で R '°'置換のメルカプタンと置換反応を行わせ、化合物（VI I) とする。この化合物（VI I) を F e—塩酸で還元することにより、化合物（I I) が得られる。

(VI) (VII) (II)

(式中、 R^{1 Q}'および Xは前記した意味を有する）

方法 (b) ；

P—ァミノベンゾニ卜リル（化合物（VIII)) を、例えば、硝酸銀触媒を用いてョード化して化合物（）となし、次いで、これをパラジウム化合物の存在下、 R⁴置換のメルカブタンと置換反応させて化合物（ΙΓ) を得ることができる。ここで、パラジウム化合物としては、例えば卜リス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（0) (以下「P d ₂d b a₃」と略す）、 1， Γ一ビス（ジフエニルフォスフイノ）フエ口セン（以下、「d p p f 」と略す）等が用いられる。

R¹⁰'-SH, Et₃N, Pd₂(dba)₃, dppf

(ID (式中、 R'°'および Xは前記した意味を有する）

化合物（II) の二卜リル基の置換位置により、方法（a) と方法（b) を使い分けることができるが、ィ匕合物（II) が p—ァミノベンゾニ卜リル誘導体（|に）の場合には、前記方法（a) よりも方法（b) を採用することが好ましい。製造法 2 ：

—般式（ I ) で示される化合物のうち、 R⁷および R⁸の一方あるいは両方が低級アルキルであってもよい化合物（ I b)は、製造法 1で述べた中間化合物（III) を出発物質として下式に従い合成できる。

(HI) (X)

(XII) (xiii)

(式中、？?⁷'ぉょび1^⁸'は、水素原子または低級アルキル基を示すが、共に水素原子となることはなく、 R⁹、 R'°、 R''、 R， ²、 R⁹'、 R'。'、 R¹''、 R'²'および Xはいずれも前記した意味を有する）

上記反応は、次のようにして実施される。すなわち、まず化合物（III) にへキサメチレンテ卜ラミンを反応させ、次いで塩酸処理して化合物（X) とする。一方、別に R⁹'置換のメルカブタンに R⁷'、 R⁸'置換のプロモ酢酸を反応させ、これを酸クロリドに誘導した化合物（XI) を調製する。ここで、ィ匕合物（XI) の原料例を示すと、 R⁹'置換のメルカブタンとしては（4ーメ卜キシフエニル）メタンチオール等が挙げられ、 R⁸'置換のプロモ酢酸としては 2—プロモー 2—メチルプロパノイツクアツシド等が挙げられる。

得られた化合物（XI) と前記化合物（X) とを塩基性条件下（例えば卜リエチルァミンの存在下）で反応させ、化合物（XI I) とする。更に、得られた化合物 (XII) を、製造法 1で示したと同様に、ボラン還元して化合物（XIII) とし、最後にこれをチォゥレアと反応させ、必要に応じて脱保護することにより、目的の化合物（ I b) とすることができる。

一般式（ I ) で表される化合物のうち、 πが 2および 3である化合物は、公知化合物から前記方法（a) に準じ、 E. M. G r i v s k y等の方法に従い、二卜口ベンゾニ卜リル化合物（V I — 1 ) を合成した後、下式に従いァミノべンゾニ卜リル（II— 1 ) へと導き、製造法 1 と同様にして合成できる。

(VI-1) (VII-2) (II-1)

(式中、 n iは 2または 3の数を示し、 R'°'は前記した意味を有する）このようにして調製された本発明のァラルキルグァニジン化合物（ I ) は、配位子化合物として、放射性金属と反応させることにより放射性金属複合体を得ることが可能である。この場合、配位子化合物は必要に応じて放射性金属との反応の直前に調製するとより好ましい結果が得られる。複合体の形成に好ましい放射性金属としては、例えば、テクネチウム一 9 9 m、放射性レニウム 1 8 6 / 1 8 8等を挙げることができる。

本発明の放射性金属複合体の調製は、テクネチウム 9 9— m金属複合体を例にとると、後記実施例 8〜1 0で示す通り、過テクネチウム酸ナトリウムと前記の配位子化合物の溶液を、エチレンジァミン四酢酸ニナ卜リゥ厶と塩化第一スズの還元剤の共存下、反応させるなどの方法により実施出来る。場合により、テクネチウ厶— 9 9 m—金属複合体の安定化剤としてァスコルビン酸を添加すると、より好ましい。得られたテクネチウム— 9 9 m—金属複合体は、場合により、液体クロマ卜グラフィなどの方法により分離精製し、純度 9 8— 9 9 %以上で得ることが可能である。

かくして得られる本発明のテクネチウム— 9 9 m—金属複合体の構造は不明な部分もあるが、テクネチウム— 9 9 m—金属複合体の代わりに、非放射性レニゥ厶金属複合体を調製して得られた結果から、以下のような構造であると推定される。

構造を調べるための上記試験は、後記実施例 6 ~ 7で示すように、前記の配位子化合物の溶液にトリクロ口才キソビス卜リフエニルフォスフィンレニウムを加えて反応させ、これをシリカゲルカラムクロマ卜グラフィで分離精製して、レニゥ厶金属複合体の 1 Z 2コハク酸塩 · 1水和物を得、その構造を元素分析、マススぺクトルで解析することにより行われた。この解析により判明したレニウム金属複合体の構造式は次のとおりである。

1/2(CH₂COOH)₂ » H₂0 そして、テクネチウム一 9 9 m—金属複合体とレニウム金属複合体の高速液体クロマ卜グラフィ測定における保持時間の比較から、テクネチウム— 9 9 m—金属複合体はレニウム金属複合体と同様な構造をもつことが明らかにされたことから、テクネチウム一 9 9 m—金属複合体は上記の構造と推定されたのである。上記のテクネチウム一 9 9 m—金属複合体は、実施例 8〜1 0に示す通り、調製後、約 6時間まで安定であることが確認され、安定に生体に投与することが可能であるため、例えば生体内の心臓疾患領域、腫瘍疾患領域等のイメージングに用いられる放射性診断薬等の医薬として優れた性質を有するものである。

本発明の医薬のうち、放射性診断薬は、例えば静脈注射などの非経口投与方法により投与することが可能であり、その投与量としては、核医学的にイメージングに必要且つ充分な放射線量を決定することが可能である。ヒ卜を対象として、例えば、放射性金属としてテクネチウム— 9 9 mを使用した場合、通常は 1 一 5 O m C iの放射能量の範囲を有することが好ましい。

また、本発明の放射性診断薬の調製に当たっては、例えば、マクロゴール、シクロデキス卜リンなどの可溶化剤、あるいは、例えば、ァスコルビン酸などの安定化剤、また必要に応じて、例えば、酸、アルカリ、緩衝剤などの P H調節剤や、例えば、塩化ナトリウムなどの等張化剤などを配合していてもよい。更に、本発明の放射性診断薬は、各種の配合剤と共に、用時調製用のキットの形態でも提供が可能である。

一方、放射性レニウム 1 8 6ノ1 8 8を用いて調製した放射性レニウム 1 8 6 / 1 8 8金属複合体は、放射性治療薬、例えば転移性骨癌の痛みの緩和剤などとしての使用が可能である。

この放射性治療薬は、前記放射性診断薬と同様に投与および調製することがでさる。実施例

次に、実施例および試験例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらにより制約されるものではない。実施例 1

1 - [3 - (N, Ν' -d i - t e r t—ブトキシカルボニルダァニジノメチル） — 2— (4—メ卜キシベンジルチオ）フエニルァミノ] 一 2— [2— (4—メトキシベンジルチオ）ェチルァミノ] ェタン（化合物 DR D 26 9 ) の合成：

(1 ) 2 - (4—メ卜キシベンジルチオ） — 3—二卜口ベンゾニ卜リルの合成 (反応 a) ；

エタノール】 6m Iに 2—クロ口一 3—二卜口ベンゾニ卜リル 4. 8 g (26. 3 mm 0 1 )、 4—メ卜キシベンジルメルカプタン 4. 05 g (26. 3 mm o I ) およびトリェチルァミン 2. 66 g (26. 3 mm 0 I ) を加え 6時間加熱還流した。一夜放置し析出した結晶を濾取し、エタノールで洗浄し目的とする黄色結晶 5. 62 gを得た（収率 7 1 %)。

m p. 1 4 1 - 1 43 °C

I R (KB r) : 2230 cm-¹

(2) 3—アミノー 2— （4ーメ卜キシベンジルチオ）ベンゾニ卜リルの合成

(反応 b)；

含水エタノール（エタノール 50m I +蒸留水 1 5m l ) に、 2— (4—メ卜キシベンジルチオ） — 3—二卜口ベンゾニ卜リル 5. 1 8 g (1 7. 24 mm 0 1 )、鉄粉（1 00me s h) 1 0. 4 gおよび濃塩酸 1. 7m lを加え 3時間加熱還流した。反応後、ジクロロメタン：エタノール（1 : 1 ) 混液 1 00m I X 2で抽出し、抽出液を減圧留去した。残渣をシリ力ゲルクロマ卜グラフィー（溶媒：ジクロロメタン：メタノール =9 ：〗）で精製し目的化合物である淡黄色結晶 4. 49 gを得た（収率 97%)。

m p. 7 1 - 76 °C

I R (K B r ) : 3470 (NH)， 3370 (N H)，

2230 (C N) cm-'

(3) 3—クロロアセタミドー 2— (4—メ卜キシベンジルチオ）ベンゾニトリルの合成（反応 c)；

テ卜ラヒドロフラン 45m lおよびエーテル 1 Om Iの混液に、 3—ァミノ - 2 - (4—メ卜キシベンジルチオ）ベンゾニ卜リル 4. 74 g (1 7. 56m mo I )および卜リエチルァミン 2. 22 g (2 1. 59 mmo I )を加えた後、クロロアセチルクロライド 2. 48 g (2 1. 95 mmo I ) を滴下し室温で 1 時間撹拌した。その後 2夜放置後、炭酸ナトリウム溶液（炭酸ナトリウム 1. 27 g + 蒸留水 5 Om l ) を加えて中和し、ジクロロメタン 7 Om Iで抽出した。更に水層をジクロロメタン 25 m I X 2で抽出した。有機層を合わせて、水洗し硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルクロマ卜グラフィー（溶媒：酢酸ェチル）で精製し目的画分より得た結晶を酢酸ェチルで再結晶し淡褐色プリズム晶 5. 38 gを得た（収率 88%)。

m p . 95 - 97 °C

I R (KB r) : 3290 (ΝΗ)' 2230 (CN)，

1 690 (CO) cm-¹

(4) 2— (4—メ卜キシベンジルチオ）一 3— [[2— （4—メ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] ァセタミド] ベンゾニ卜リルの合成（反応 d) ; エタノール 1 0 m Iに、 3—クロロアセタミドー 2— (4—メ卜キシベンジルチ才）ベンゾニ卜リル 1. 1 4 g (3. 3 mm 0 I ), 卜リエチルァミン 0. 3 6 g (3. 6mmo I ) および 2— ( 4—メトキシベンジルチオ）ェチルァミン 0. 66 g (3. 35mmo I ) を加え、 5時間加熱還流した。反応後、ェタノールを減圧留去し、ジクロロメタン 1 00m Iおよび蒸留水 50m Iを加え抽出し、硫酸ナトリウム乾燥後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (溶媒：酢酸ェチル）で精製して褐色油状物 1. 40 gを得た（収率 84%)。

I R (K B r )： 3320 (N H), 3240 (N H),

2230 (C N), 1 700 (CO) c m-'

(5) 1 - [3—アミノメチルー 2— (4—メ卜キシベンジルチオ）フエニルァミノ] — 2— [2— (4—メ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] ェタンの合成（反応 e )；

アルゴン気流下、無水テ卜ラヒドロフラン 1 5m Iに 1規定ボランーテ卜ラヒドロフラン錯体溶液 20. 7m lを加え、その後、 2— (4—メ卜キシベンジルチ才） — 3— [[2— （4ーメ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] ァセタミド] ベンゾニ卜リル 1. 40 g (2. 7 6 mm 0 I ) をテ卜ラヒドロフラン 20m l に溶解させた溶液を滴下し、外温 70°Cで 5時間加熱還流した。その後 2規定塩酸 1 5m Iを加え、反応を停止させ、更に 2規定塩酸 1 5m I、エタノール 1 0 mを加えて 75°Cで 5時間加熱した。冷却後、 4規定水酸化ナトリウム溶液 20 m Iで中和し、ジクロロメタン 50 mし同 20m l、同 20m lで抽出し食塩水で 2回洗浄した。硫酸ナ卜リムで乾燥後、減圧濃縮し残渣をシリカゲルクロマ卜グラフィ一（溶媒：ジクロロメタン：メタノール =9 ： 1 ) で精製し黄色油状物 0. 58 gを得た（収率 42%)。

I R (K B r )： 3360 (b r o a d, NH) cm-¹

(6) 1 一 [3— （N， N ' — d i — t e r t—ブトキシカルボニルダァニジノメチル） — 2— (4—メ卜キシベンジルチオ）フエニルァミノ] — 2—

[2— （4ーメ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] ェタンの合成（反応 f )；

ジメチルホルムアミド 3 m Iに、一 1 0。Cで 1 一 [3—アミノメチルー 2—（4 ーメ卜キシベンジルチオ）フエニルァミノ] — 2— [2 - (4—メ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] ェタン 0. 58 g (1. 1 7 mm 0 I ), B o cチ才尿素 0. 32 g (1. 1 7 mm o I ) および卜リエチルァミン 0. 1 2 g (1. 1 7 mm o I ) を加えた。その後、塩化第二水銀 0. 32 g (1. 1 7 mm o I ) を加え、 30分間撹拌した。次いで 0°Cで 1時間、室温で 3時間撹拌した。その後、酢酸ェチル 30m I加えて析出物を濾去し、更に酢酸ェチルで洗浄した。ろ液を食塩水で洗浄、硫酸ナトリウム乾燥後、減圧濃縮し残渣をシリカゲルクロマ卜グラフィー（溶媒；酢酸ェチル：へキサン =2 ： 1、ジクロロメタン：メタノール =99 : 1 ) で粗精製し、更に分取用 T LC (溶媒：ジクロロメタン：メタノール =9 ： 1 ) で精製して黄色油状物 0. 20 gを得た（収率 23%)。

得られた標記化合物の構造式および物性は以下のとおりである。

I R ( f i l m) : 3330 (ΝΗ)， 1 720 (CO) cm -，

H - N M R (90 MH z, C D C I ₃) :

(5 1. 46 (9 H， s， 3 C H₃), 1. 48 (9 H， s，

3 CH₃)， 2. 59 - 2. 87 (6 H， m， 3 CH₂)，

3. 1 8 - 3. 09 (2 H, m, CH₂)， 3. 66 (2 H，

s， S-CH₂), 3. 76 (8 H， s， CH₃OX 2，

S— CH₂)， 4. 59 - 4. 65 (2 H, m，一 Chh— ): 6. 59 - 7. 26 ( 1 2 H, m， P h， N H)

MS (FA B) ： m/z 740 (M + H) +

I

実施例 2

1 - [5 - (N, N' -d i - t e r t—ブトキシカルボニルダァニジノメチル） — 2— （4—メ卜キシベンジルチオ）フエニルァミノ] — 2— [2— (4ーメ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] ェタンの合成（化合物 DRC 1 1 2) :

実施例 1の反応 a〜f に準じ、 4—クロ口— 3—二トロベンゾニ卜リルを出発原料として、淡黄色油状物である 1 _ [5— (N， N' _d i — t e r t—ブ卜キシカルボニルダァニジノメチル）一 2— (4—メ卜キシベンジルチオ）フエ二ルァミノ] 一 2— [2— （4—メ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] エタンを得た。

R (f i l m) ： 3340 cm- (NH)， 1 730 (CO) cm- ¹ ' H - NMR (9 OMH z， CDC I ₃) ：

δ 1 . 48 (9 H， s， CH₃)， 1. 52 (9 H， s， CH₃),

2. 56 - 2. 83 (6 H s， m, — CH₂ -）， 3. 08 (2 H_; b r , CH₂)， 3. 65 (2 H, s， S— CH₂)， 3. 75 (6 H, s， OCH₃)， 3. 79 (2 H， s， S - CH₂)，

4. 47 (2 H, d， CH₂— NH)， 6. 54- 7. 25

( 1 1 H， m， P h)

MS (FAB)： m/z 740 (M + H) ⁺

5

実施例 3

1 — [4— (N， N ' — d i— t e r t—ブ卜キシカルボニルダァニジノメチル）ー2— （4—メ卜キシベンジルチオ）フエニルァミノ] — 2— [2— (4—メ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] ェタンの合成（化合物 DR E 1 0 295) :

(1 ) 4—ァミノ— 3—ョードベンゾニ卜リルの合成；

エタノール 50 m Iに 4ーァミノベンゾニ卜リル 5.907 g(50mmo 1 )、硫酸銀 1 5. 55 g (50 mm 0 I ) およびヨウ素 1 2. 7 g (50 mm o I ) を加え、室温で 1時間攪拌した。反応後、溶媒を減圧留去した。残渣にジクロ口 1 5 メタンおよび 2規定水酸化ナトリウム溶液を加えて抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥後、ジクロロメタンを減圧留去することにより目的とする紫色の結晶 1 1. 64 gを得た（収率 95%)„

I R ( f i I m) ： 2220 cm-' (C N)

Ή - NMR (90MH z, CDC I ₃) ：

2 0 δ 4. 65 (2 H, b r， NH)， 6. 71 (1 H， d， P h，

J = 8. 54 H z), 7. 34 (1 H, d t , J = 1. 7 1 H z ,

J = 8. 54 H z ), 7. 89 ( 1 H, d， P h， J = 1. 7 1 H z )

(2) 4—ァミノ— 3 _ (4—メ卜キシベンジルチオ）ベンゾニ卜リルの合成；アルゴン気流下、 N—メチル— 2—ピロリジノン 60 m I に、 P d₂d b a₃ 366 m g (0. 4 mm o I ), d p p f 887 m g (1. 6mmo l )、 4一アミノー 3—ョードベンゾニ卜リル 4. 881 g (20 mm 0 I ) および卜リエチルァミン 5. 575 m l (4 Ommo I ) を加えて攪拌し、その溶液に 4—ァミノ— α—トルエンチオール 2. 786m l ( 20 mm o I ) を滴下し、 60°C で 2時間加熱した。反応後、溶媒を減圧留去し、残渣にジクロロメタンと飽和食塩水を加えて抽出し、その後チ才硫酸ナトリウムを加え洗浄した。硫酸マグネシゥ厶乾燥後、溶媒を減圧留去し、残渣をフラッシュクロマ卜グラフィ（溶媒；ジクロロメタン）に供し、目的とする化合物を得た（赤褐色油状物、 5. 5055

I R (f i I m)： 3460, 3360 (NH)， 2220 c m_' (C N)

1 H - N M R (90 MH z, C D C I ₃) :

(5 3. 77 (3 H, s， CH₃0 -）， 3. 83 (2 H, s，

一 CH₂— ), 4. 80 (2 H, b r， N H₂)， 6. 59 - 7. 42 (7 H， m， P h, N H)

(3) 1 - [4 - (N, N' — d i — t e r t—ブトキシカルボニルダァニジノメチル）一 2— (4—メ卜キシベンジルチオ）フエニルァミノ] 一 2 — [2— （4ーメ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] ェタン（1 3) の合成；

実施例 1の反応 c〜f に準じ、 4ーァミノ— 3— (4—メ卜キシベンジルチオ）ベンゾニ卜リルから、黄色油状物である目的化合物を得た。

R ( f i I m) : 3340 c m ¹ (N H)， 1 725 (CO) cm—¹ ¹ H-NM R (C DC l ₃)：

(5 1 . 4 7 ( s， 9 H, C H₃ x 3), 1 . 5 1 ( s， 9 H， C H₃x 3)， 2. 5 6 - 2. 84 (m， 6 H, 一 CH₂ - x 4)， 3. 0 0 — 3. 2 7 (m, 2 H，一 C H₂— )， 3. 6 6 (s， 2 H，

— C H₂— )， 3. 7 6 ( s， 3 H， OM e x 3), 3. 7 7 ( s , 3 H， OM e x 3 ), 3. 8 2 ( s , 2 H，一 C H₂—）， 4. 44 (d， 2 H, 一 C H₂ -， J =4. 88), 6. 7 0 - 7. 2 6

(m, 1 1 H， P h)

M S (F A B) : m/z 74 0 (M+ H) ⁺ 実施例 4

1 - [5 - (N, N' - d i - t e r t—ブトキシカルボニルダァニジノメチル）一 2— [2 - (4ーメ卜キシベンジルチオ） — 2—メチルプロピルァミノ] ェタン（D R C 1 0 7) の合成：

( 1 ) 3—ァセタミドー 4 _ (4ーメ卜キシベンジルチオ）ベンゾニ卜リルの合成；

3—クロロアセタミドー 4一（4—メ卜キシベンジルチオ）ベンゾニ卜リソレ 4. 3 8 g ( 1 2. 6 4mm o l )、へキサメチレンテ卜ラミン 1 . 7 7 g ( 1 2. 64 mm 0 I ) をクロ口ホルム 2 0 m lに加え、室温で 4 0時間放置した。次いでヨウ化カリウム 2. 1 0 g ( 1 2. 64 mm 0 I ) を加えて、室温で 2時間攪拌し、その後 2 2時間室温で放置した。反応液を減圧濃縮し、濃縮物に 5 %塩酸エタノール 80m Iを加えて、 5. 5時間加熱還流した。冷却後、反応液を減圧濃縮し、残渣に重曹を加えて中和し、クロ口ホルム：エタノール（2 : 1 ) 混液で抽出した。抽出物を水で洗浄し、硫酸マグネシウムにより乾燥後、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルクロマ卜グラフィ（溶媒：酢酸ェチル）に供し、目的物である淡褐色結晶 0. 6 7 gを得た（収率 1 6%)。 (2) 4— （4—メ卜キシベンジルチオ） — 3— {[2— (4—メ卜キシベンジルチオ） —2—メチルプロピオンアミド] ァセタミド} ベンゾニ卜リルの合成；

無水テトラヒドロフラン 1 0m I に、 3—ァセタミドー 4— (4—メ卜キシべンジルチオ）ベンゾニ卜リル 0. 65 (2. Ommo l )、卜リエチルァミン 0. 22 g (2. 2 mm 0 I )、 2 - ( 4ーメ卜キシベンジルチオ） — 2—メチルプ口ピオニルクロライド 0. 57 g (2. 2mmo I ) を加え、室温で一時間半攪拌した。反応後、クロ口ホルム：エタノール（= 2 ： 1 ) 5 Om lを加え、 1 % 炭酸カリウム溶液で中和後抽出し、更にクロ口ホルム：エタノール（=2 : 1 ) 50m lで抽出した。抽出した有機層を合わせて水洗し、硫酸マグネシウム乾燥後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶媒；酢酸ェチル）を用いて精製し、目的とする淡褐色油状物 1. 1 O gを得た（収率 1 00%)。

(3) 1 一 [5—アミノエチル— 2— （4ーメ卜キシベンジルチオ）フエニルァミノ] — 2— [2— (4—メ卜キシベンジルチオ）一 2—メチルプロピルァミノ] ェタンの合成；

アルゴン気流下、無水テ卜ラヒドロフラン 2 Om Iに、 4— (4—メ卜キシべンジルチオ） — 3— {[2— （4ーメ卜キシベンジルチオ） — 2—メチルプロピオンアミド] ァセタミド} ベンゾニ卜リル 1. 1 0 g (2. Ommo I ) を溶解させた後、 1規定ボラン—テ卜ラヒドロフラン錯体溶液 1 5m l (1 5mmo I ) を加え、 5時間加熱還流した。次いで、 2規定塩酸 6 Om Iおよびエタノール 1 Om lを加え、 75°Cで 3時間加熱した。冷却後、 4規定水酸化ナトリウム溶液 40m lを加えて中和し、クロ口ホルムで抽出した。水洗および硫酸ナトリウムによる乾燥後、減圧乾固し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶媒；ジクロロメタン：メタノール = 1 0 : 1 ) で精製して目的化合物である淡黄色の油状物 0. 72 gを得た（収率 69%)。

(4) 1 - [5 - (N, N' — d i — t e r t—プ卜キシカルボニルダァニジノメチル）一 2— [2 - (4—メ卜キシベンジルチオ） — 2—メチルプロピルァミノ] ェタンの合成；

ジメチルホルムアミド 1. 5m lに、 1 — [5—アミノエチルー 2— （4—メ卜キシベンジルチオ）フエニルァミノ] — 2— [2— （4—メ卜キシベンジルチ才） — 2—メチルプロピルァミノ] ェタン 0. 279 g (0. 53 mm 0 I )、 Ν， Ν' — d i — (t e r t—ブ卜キシカルボニル）チ才ゥレアおよび卜リエチルァミン 0. 1 23 g (0. 1 22mmo I ) を加え、 — 1 0°Cで攪拌しつつ塩ィ匕水銀 0. 1 44 g (0. 53mmo I ) を加えて 30分間反応させ、次いで 0 °Cで〗 0分間反応させた。その後、酢酸ェチル 2 Om Iを加えて析出物を濾去した。その濾液を水および食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムにより乾燥後、減圧乾固した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶媒；へキサン：酢酸ェチル

= 1 : 1 ) で精製し、目的化合物である褐色油状物 0. 1 95 gを得た（収率 4 8%)„

I R ( f i I m) ： 3330 cm- ' (ΝΗ)， 1 720 (CO) cm-'

H - NMR (90MH z, CDC I ₃) ：

δ 1. 34 (6 H， s， CH₃)， 1. 48 (9 H， s， CH₃)，

1. 52 (9 H， s , C H₃), 2. 55 (2 H, s，

- C H ₂- N H), 2. 65 - 3. 1 5 (4 H， m， CH₂)， 3. 64 (2 H， s, S— CH₂)， 3. 75 (6 H， s , Om e), 3. 7 9 (2 H， s， S— C H₂)， 4. 5 7 (2 H， d， C H₂-N H), 6. 5 3 - 7. 1 6 ( 1 1 H, m， P h) 実施例 5

1 — [4—クロ口— 5— (N， Ν' —ジ— t e r t—ブトキシカルボニルグァニジノメチル） — 2— (4—メ卜キシベンジルチオ）フエニルアミノ] — 2— [2— (4—メ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] ェタン (D R D 1 50) の合成：

( 1 ) 2， 4—ジクロロ— 5—ニトロべンゾイツクアシッドの合成；氷浴下、濃硫酸 3 m Iに 2， 4—ジクロロ安息香酸 0. 9 5 5 gを加えて撹拌した。その溶液に、発煙硝酸 0. 9 8m Iを 1 0回に分け滴下した。滴下後、約 3 0分室温で撹拌した。冷却後、氷水を加え、約一時間撹拌した。その懸濁液を濾取し、冷水で洗い目的化合物 1 . 1 5 gを得た（収率 9 7%)。

I R ( f i I m)： 3 2 00 c m- ¹

' H— NM R (DM S O- d ₆)：

δ 8. 1 0 ( s， 1 H， P h)， 8. 5 0 ( s， 1 H， P h)

(2) 2， 4ージクロロー 5—ニトロベンゾニ卜リルの合成；

上記（1 ) で得た 2， 4—ジクロロ— 5—ニトロべンゾイツクアシッドから、 E. M. G r i V s k yらの方法（前掲）に従って合成した（収率 5 6 %)„ I R (K B r) ： 2 2 4 0 c m-¹

' H - NM R (C DC I ₃) ：

6 7. 80 (s， 1 H， P h)， 8. 2 7 ( s， 1 H， P h)

(3) 1 — [4一クロ口— 5 _ (N， N ' —ジ— t e r t—プ卜キシカルボニルグァニジノメチル） — 2— (4—メ卜キシベンジルチオ）フエニルアミノ] 一 ₂ 一 [ ₂ 一（₄ーメ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] ェタンの合成；実施例 1の合成法に従い、 2， 4—ジクロ口— 5—二卜口ベンゾニ卜リルを出発原料として a〜f の反応を行い褐色油状物である 1 ー [4—クロロー 5— (N， N ' —ジ— t e r t—プ卜キシカルボニルダァニジノメチル） — 2— （4—メ卜キシベンジルチオ）フエニルァミノ] — 2— [2 - (4ーメ卜キシベンジルチオ）ェチルァミノ] エタンを得た。

I R ( f i I m) ： 3340 cm"¹ (N H), 1 7 30 cm"¹

1 H - N M R (C DC I ₃) :

δ 1. 48 (9 H, s， CH₃)， 1. 52 (9 H， s， CH₃)，

2. 58 - 3. 1 6 (8 H, m， Ch , N H₂), 3. 64 (2 H， s， CH₂)， 3. 76 (6 H， s， OCH₃)，

3. 82 (2 H， s， CH₂)， 4. 63 (2 H, s， CH₂)， 6. 69 — 7. 2 7 (1 0 H， m, P h)

実施例 6

2— [2— （5—グァニジノメチルー 2—メルカプトフエニルァミノ）ェチルァミノ] エタンチォレー卜才キソレニウム 0. 5コハク酸塩 1水和物 (化合物 D R C〗 1 2の才キソレニウム体）の合成：

実施例 2で得た化合物 300 m g (4. 05 X 1 0— ⁴mo I ) にトリフル才口酢酸 4. 05 m Iおよびァニソ一ル 1 3 2 Ai Iを加えた溶液に、メタンスルホン酸 1. 22m l を滴下し、 0°C で 1時間反応させた。反応液を減圧濃縮した溶液に、水 20m I とジェチルエーテル 40m l を加えて水層を抽出した後、水を減圧留去して薄黄色油状物 2— [2 - (5—グァニジノメチル— 2—メルカプ卜フエニルァミノ）ェチルァミノ] エタンチ才一ルを得た。

この油状物に、メタノール 20m l、 1規定酢酸ナトリウムのメタノール溶液 40m l、トリクロ口才キソビス卜リフエニルフォスフィンレニウム 337. 5 mg (4. 05 X 1 0_⁴mo l ) を加え、 3 時間還流した。この反応液を約 5m lに濃縮し、逆相 C— 1 8 シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出液： 2 Om コハク酸水溶液 Zエタノール =70 30)で単離することにより、薄黄褐色の残渣を得た。この残渣にメタノールノジメチルスルホキシド（=50 50) 約 3 m Iを加え、逆相 C一 1 8 シリカゲルカラムクロマ卜グラフィー (溶出液：メタノールノ水 = 1 0/90, メタノール水 =95/5 の順に展開）で精製し、黄褐色沈殿物の 2— [2- (5—グァニジノメチルー 2—メルカプ卜フエニルァミノ）ェチルァミノ] エタンチ才レー卜才キソレニウム 0. 5コハク酸塩 1水和物 [= M · 0. 5 (Ch COOH) 2 · H₂0] 20. 5m g (3. 56 X 1 0—⁵ mo l ) を得た。

本化合物を薄層クロマトグラフィー（薄層板： KC 1 8 F、展開溶媒：メタノール水酢酸 =80ノ20Z1 ) で分析したところ、 R il O. 69 ±0. 04に単一のスポッ卜を認め、坂口試薬を用いた呈色反応に対して陽性であった。本化合物のマススペクトルにおいて m/z == 500 (M + H) +のピークを観測した。元素分析の結果は以下のとおりであった。

実測値 /%

C, 29. 48 ; H, 3. 97 ; N, 1 2. 00

計算値 /% (C₁₄H₂₃N ₅0₄ R e S₂)

C, 29. 2 1 ; H， 4. 03 ; N， 1 2. 1 6

以上のことから、合成したレニウム複合体は、才キソレニウムコアと 2— [2 ― (5—グァニジノメチルー 2—メルカプトフエニルァミノ）ェチルァミノ] ェタンチオールが 1 ： 1の組成比をもつ単核化合物であることが明らかとなった。また、 2— [2- (5—グァニジノメチル— 2—メルカプトフエニルァミノ）ェチルァミノ] エタンチオールを配位子とするテクネチウム一 99m 標識複合体と上記のレニウム複合体の高速液体クロマ卜グラフィー測定を行い、保持時間を比較したところ、テクネチウム— 99m 標識錯体は 8. 4分、レニウム体は 7. 9分とほぼ同一の保持時間であった。この結果、テクネチウム一 99m標識複合体の構造は、レニウム複合体と同様であることが示唆された。

<高速液体クロマ卜グラフィ一測定条件 >

カラム： TS K g e l ODS 1 20 T 4. 6 mmX 25 cm 溶媒：（2 OmM N a H₂P0₄ a q. TH F=95/5) /

E t OH=60/40

；迷： 0. 5 m I / m i n

検出波長： 254 n m 実施例 7

2— [2— (4—グァニジノメチルー 2—メルカプトフエニルァミノ）ェチルァミノ] エタンチォレー卜才キソレニウム卜リフル才ロ酢酸塩（化合物 D R E 295の才キソレニウム体）の合成：

実施例 3で得た化合物 1 55mg (2. 09 X 1 0— ⁴mo l ) にトリフル才口酢酸 2. 09m Iおよびァニソール 69 Iを加えた溶液に、メタンスルホン酸 0. 627 m lを滴下し、 0°C で 1時間反応させた。反応液を減圧濃縮した後、水 1 Om lとジェチルエーテル 20m l を加えて水層を抽出し、水を減圧留去して薄黄色油状物 2— [2— （4ーグァニジノメチルー 2—メルカプトフエニルァミノ）ェチルァミノ] エタンチオールを得た。

この油状物に、メタノール 1 Om I、 1規定水酸化ナトリウムのメタノール溶液 9m l、卜リクロロォキソビス卜リフエニルフォスフィンレニウム 1 74. 8mg (2. 1 0 X 1 0"⁴mo I ) を加え、 24時間還流した。この反応液を約 2m I に濃縮した後、ジメチルスルホキシド 1 m Iを加え、この溶液を逆相 C - 1 8 シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出液：メタノール/水卜リフル才ロ酢酸 =30 70ノ 0. 1 ) で単離した後、メタノールージェチルエーテルで再結晶を行い、褐色沈殿物の 2— [2 - (4ーグァニジノメチルー 2—メルカプ卜フエニルァミノ）ェチルァミノ] エタンチ才レート才キソレニウム卜リフル才ロ酢酸塩 [= M ' C F₃COOH] 1 05. 0 mg ( 1. 7 1 X 1 0一⁴ m 0 I ) を得た。

本化合物を薄層クロマ卜グラフィー（薄層板： KC 1 8 F、展開溶媒：メタノ —ル Z水ノ酢酸 =80/20 1 ) で分析したところ、 R il O. 74 ±0. 02に単一のスポッ卜を認め、坂口試薬を用いた呈色反応に対して陽性であった。本化合物のマススペクトルにおいて 2 = 500 (M+H) ⁺のピークを観測し、赤外吸収スぺク卜ルにおいて 930 cm— 'にレニウム一酸素二重結合に由来する吸収を観測した。元素分析の結果は以下のとおりであつた。

実測値％

C, 27. 46 ; H, 3. 23 ; N, 1 1. 4 1

計算値 Z% (C'₄Hi₉N₅0₃F₃R e S₂)

C， 27. 45 ; H， 3. 1 3 ; N， 1 1. 43

以上のことは、合成したレニウム複合体は、才キソレニウムコアと 2— [2— (4ーグァニジノメチルー 2—メルカプトフエニルァミノ）ェチルァミノ] エタンチオールが 1 ： 1の組成比をもつ単核化合物であることを示す。

また、 2— [2— （4ーグァニジノメチルー 2—メルカプトフエニルァミノ）ェチルァミノ] エタンチオールを配位子とするテクネチウム一 99 m標識複合体と上記のレニウム複合体の高速液体クロマトグラフィー測定を行い、保持時間を比較したところ、テクネチウム— 9 9m 標識錯体は 6. 5分、レニウム体は 6. 0分とほぼ同一の保持時間であった。この結果、テクネチウム— 9 9m 標識複合体の構造はレニウム複合体と同様であることが示唆された（高速液体クロマ卜グラフィー測定条件は実施例 6と同じ）。実施例 8

テクネチウム— 99m標識複合体の調製（^99mT c— DR D 269) :

実施例 1で得た化合物 1 2mg (1 6 Aimo I ) を卜リフル才ロ酢酸 0. 1 6 m Iに溶解させた後、ァニソール 5. 1 I、メタンスルフォン酸 48 t Iを加え室温で約一時間撹拌した。反応後、卜リフル才ロ酢酸を減圧留去した。残渣に水 5 m Iを加え、ジェチルエーテル 1 0m Iで洗浄し、水層を減圧留去した。その残渣を 1. O Nおよび 0. 1 Nの N aOH溶液を用いて中和し、 l O OmM燐酸ナトリウム緩衝液（P H 7. 0) に溶解し、 0. 3〜0. 5mg/m lの濃度とした。

この溶液 2. Om lに対し、 6 OmC i Iの過テクネチウム酸ナトリウム溶液 0. 5m lおよび 1. OmgZm Iのエチレンジァミン四酢酸ニナ卜リウ厶と 0. 1 mg/m Iの塩化第一スズを含む溶液 0. 5 m Iを加えて混合し、約 1 05°Cで 30分間加熱後、室温で 1 5分間放冷した。その後、混合比が 20 mM 燐酸ナトリウム溶液 ZTH F=95 5である溶液とエタノールを 60/40の割合で混合し、これを移動相として H P LCを用いて標識液を分離精製した。また、テクネチウム錯体安定化剤としてァスコルビン酸を 1 Omg添加した。

この分取溶液に酸素を通気し、有機溶媒を除去し、約1 00〜1 50 〇 1 m lに希釈して 0. 22 Aimのメンプランフィルターで濾過し、実施例 1の化合物とテクネチウム— 99 mとの複合体調製液を製した。この調製液の純度は、メタノール/水ノ酢酸 =80 20/1を展開溶媒として KC 1 8の薄層板を用いる T LCで分析した。テクネチウム— 99m標識複合体の R f値は約 0. 5、 H P LCによる保持時間は 7. 6分、純度は、 99%以上であった。結果を表 1 に示す。実施例 9

テクネチウム一 99 m標識複合体の調製（^99mT c -DR D l 1 2)：実施例 2で得られた化合物を用い、実施例 6と同様にしてテクネチウム— 99 m標識複合体調製液を製した。このテクネチウム一 99 m標識複合体の R f値は約 0. 5、 H P LCによる保持時間は 8. 0分、純度は、 99%以上であった。結果を併せて表 1に示す。実施例 1 0

テクネチウム— 99m標識複合体の調製（^99mT c— DR E 295) :

実施例 3で得られた化合物を用い、実施例 8と同様にしてテクネチウム一 99 m標識複合体調製液を製した。テクネチウム一 99 m標識複合体の R f値は約 0. 5、 H P LCによる保持時間は 6. 7分、純度は、 99%以上であった。結果を併せて表 1に示す。実施例 1 1

テクネチウム一 99 m標識複合体の調製（^99mT c -DR D 1 07)：実施例 4で得られた化合物を用い、実施例 8と同様にしてテクネチウム— 99 m標識複合体調製液を製した。テクネチウム— 99 m標識複合体の R f値は約 0. 4、 H P LCによる保持時間は 1 3. 2分、純度は、 98%以上であった。結果を併せて表 1 に示す。実施例 1 2

テクネチウム— 99 m標識複合体の調製（^99mT c -D R D 1 50) ：実施例 5で得られた化合物を用い、実施例 8と同様にしてテクネチウム一 99 m標識複合体調製液を製した。テクネチウム— 99 m標識複合体の R f 値は約 0. 5、 H P L Cによる保持時間は 1 4 . 7分、純度は、 9 9 %以上であった。結果を併せて表 1 に示す。

試験例 1

テクネチウム一 9 9 m複合体のラッ卜における体内動態：

実施例 8〜 1 2で得た各テクネチウム— 9 9 m標識複合体調製液を、それぞれ 3 0 Iずつ、予めチ才ペン卜バルビタールで麻酔を施した S D系雄ラッ卜（8 週齢 1 8 0〜2 2 0 g体重）の大腿静脈より投与した。投与後ラッ卜を屠殺し、投与後の放射能の体内動態を計測した。その結果を、実施例 8で得たテクネチウ厶— 9 9 m標識複合体については表 2に、実施例 9で得た同複合体については表 3に、実施例 1 0で得た同複合体については表 4に、実施例 1 1で得た同複合体については表 5に、実施例 1 2で得た同複合体については表 6に、それぞれ示した。表 2 99m_T c -DRD 269の体内分布 %Dose/g

* %Doseで示す。実施例〗の化合物とテクネチウム— 99mとの複合体調製液（^99mT c— D R D 269) は、心臓への集積率は約 1. 7%Do s eZgと高く、 2時間後でも約 1 %D o s e/gであり、心臓に保持されている。また、肝臓への集積が低い点や心臓/血液比が高い点などから画像上より心臓の描出が鮮明になることが期待される。肺や血液への集積率は低く、時間を追う毎に減少している。また他の臓器に関しては副腎へ集積し保持されている。肝臓、腎臓へは初期に高い集積が見られるが、肝臓から小腸、腎臓から尿へと経時的に集積率は移行し、肝胆道系および尿から体外へ排出され、体内に蓄積されないことを示している。

表 3 'Τ c - DRC 1 12の体内分布 %Dose/g

2分 5分 30分 1 2 0分

'し、臓 1. 0 8 1. 0 5 1. 0 8 1. 09 肺臓 0. 8 6 0. 6 0 0. 5 9 0. 55 肝臓 4. 4 9 4. 6 6 4. 0 2 2. 1 6 脾臓 0. 7 8 0. 6 2 0. 4 3 0. 1 7 腎臓 1 6. 9 5 1 6. 1 2 5. 0 0 1. 13 副腎 1 - 9 6 1. 7 5 1. 3 4 1. 37 小腸 0. 8 8 0. 8 5 2. 0 6 5. 08

血液 0. 1 8 0. 1 2 0. 0 8 0. 06 尿 * 0. 1 0 0. 7 7 14. 9 4 24. 58 甲状腺 * 0. 0 6 0. 0 5 0. 0 5 0. 04

心血比 5. 8 8 8. 8 2 1 2. 8 6 1 9. 06

心 Z肺比 1. 2 6 1. 7 5 1. 8 3 1. 98

* %Doseで示す。実施例 2の化合物とテクネチウム— 99 mとの複合体調製液（^99mT c— D R C 1 1 2) は、心臓への集積率が約 1 %Do s e/gと高く、さらに 2時間後の集積率も 1 %Do s eZgであり、心臓に保持されている。肝臓は実施例 1の化合物とテクネチウム一 9 9 mとの複合体（^99mT C - D R D 269) に比べて高い集積率である。

表 4 ⁹⁹ "'Τ c DRE295の体内分布 %Dose/g

* %Doscで示す。実施例 3の化合物とテクネチウム— 99 mとの複合体調製液（^99mT c _DR E 295) は、初期の集積率については実施例 1の化合物とテクネチウム— 99 mとの複合体調製液（^99mT c— D R D 269) と同程度であり、さらにこれらの標識体の中で最も心臓に保持される傾向が見られた。表 5 'T c— DRC 107の体内分布 %Dose/g

* %Doseで示す。実施例 4の化合物とテクネチウム— 99 mとの複合体調製液（^99mT c— D R C 1 07 )は、心臓への集積率は実施例 1〜 3の複合体に比べて低値であつたが、肺臓、肝臓、血液からの速やかな消失が認められた。表 6 ^99mT c - DRD150の体内分布 %Dose/g

* %Doseで示す。実施例 5の化合物とテクネチウム一 99 mとの複合体調製液（^99mT c— DR D 1 50) は、初期の心臓への集積率は比較的良好であり、 2時間後においても保持される傾向が認められた。肺臓、血液からの消失は速やかであった。試験例 2

テクネチウム一 99 m標識複合体調製液の犬におけるイメージング：予めペン卜バルピタール注射液で麻酔を施したビーグル犬（才ス、体重 1 5 K g)の橈側皮静脈より、実施例 8で得た^{99 m}T c - DR D 269複合体調製液（実施例 1の化合物とテクネチウム一 99 mとの複合体） 74 MB qを投与した。 P R I SM 2000 (ァカメラ）により投与後 1 70分で S P E CT収集し、撮像を行った。図 1 に示したように、心筋が描出され、心筋シンチグラムを行うための薬剤として有用であることが示唆された。試験例 3

テクネチウム一 99 m複合体の腫瘍細胞への総取り込みの検討：

基本的には B u c k 等（Ca n c e r R e s. 45 巻 6366 頁 1 9 85 年）及び Ma r t i n 等（J . N u c に Me d. 37 巻 4 号 6 S 頁 1 99 6 年）による方法に従い、ヒ卜神経芽細胞腫 S K— N— S H及びラッ卜副腎髄質褐色細胞腫 PC 1 2を用いて、腫瘍へのテクネチウム— 99m複合体の取り込みをァッセィした。

ヒト神経芽細胞腫の S K_N - S H 細胞及びラット副腎髄質褐色細胞腫の P C 1 2細胞は 0. 5 X 1 0⁶ e e l I s /w e I Iで、 6ゥエルプレー卜に播種し、 3日間培養した後に実験に用いた。細胞への取り込みは、各培養細胞と実施例 8で得られたテクネチウム— 99 m標識複合体（^99mT c _DR D 269)を、 37°C、 5%炭酸ガスインキュベータ内で 30分間反応させることにより行った。反応終了後、細胞を冷 P B S (-）で洗浄し、 0. 1 N水酸化ナトリウムにて可溶化させた細胞をチューブに回収した。回収した細胞の放射能をァカウンターで測定して、テクネチウム— 99 m標識複合体の取り込みを検討した。

その結果は図 2に示すとおりであり、テクネチウム— 99m複合体は腫瘍細胞に取り込まれることが明らかになつた。試験例 4

ヒ卜神経芽細胞腫 S K-N-S Hを用いた実施例 6のレニゥ厶複合体の取リ込み：

取り込みのアツセィは、基本的には試験例 3と同様に、 B u c k等及び Ma r t i n等による方法に従った。ヒ卜神経芽細胞腫 S K— N— S Hを 0. 5 X 1 0 ⁶ c e I I s/we I I にて 6ゥエルプレー卜に播種し、培養液を 1 0% (v/ V) ゥシ胎児血清を含む R PM I 1 640培地とし、 37°C、 5%炭酸ガスインキュベータ一内で培養した。以下インキュベーションは、プレインキュベーションを含めて、 37°C、 5%炭酸ガスインキュベーター内で実施した。 3日間の培養後、培地を除去し、アール平衡塩液（E B S S) にて洗浄した。新たに E B S Sを添加し、 30分間プレインキュベーションしてから、実施例 6のレニウム複合体（0、 0. 1、 1、 1 0 ^Μ) を添加し、 1 0分間インキュベーションして取リ込みのァッセィを行なつた。

反応後に、冷リン酸緩衝液（P B S (—））で洗浄し、 0. 3 Νの水酸化ナ卜リウ厶にて細胞を溶解後、回収した細胞の放射能を τカウンターにて計測した。その結果を図 3に示す。縦軸は、レニウム複合体が S K— N— S Hに取り込まれた速度とし、横軸は、レニウム複合体の濃度としてミカエリス ·メンテンプロッ卜を示した。

また、同プロッ卜をラインウェーバー ·バルク逆数プロッ卜に変換したものを図 4に示した。

以上の結果から、実施例 6のレニウム複合体は、 i n V i t r oでヒ卜神経芽細胞腫 S K— N_S Hに取り込まれることが明らかになった。産業上の利用可能性

本発明のテクネチウム— 99 m—金属複合体のラッ卜における体内動態の結果は上記試験例 1に示すとおりであり、テクネチウム一 99 m—金属複合体は心臓への集積率が高く、適当な時間心臓に保持され、その後、体外に排泄されることが判明した。

また、体内分布における血液中の放射性濃度が低く、心臓/血液比が従来のィメージング剤と比べ非常に大きいことから、イメージング上鮮明な心臓の描出が可能であり、放射性診断薬として好ましい性質を有することが明らかとなった。そして、本発明のテクネチウム金属複合体の調製液をビーグル犬に投与し、心臓のイメージングを行つたところ、図 1に示した通り、鮮明な心臓の撮像が得られ、放射性画像診断薬としての有用性が示された。

更に、本発明のテクネチゥ厶もしくはレニゥ厶金属複合体の放射性画像診断薬または放射性治療薬としての有用性は、上記試験例 3および 4で示す通り、ヒ卜神経芽細胞腫 S K— N_ S H およびラット副腎髄質褐色細胞腫 P C 1 2細胞を用いたアツセィによって示された。

すなわち、試験例 3及び 4における本発明の金属複合体を用いたアツセィの結果では、図 2〜4に示す通り腫瘍細胞への集積が認められ、ヒ卜神経芽細胞腫 S K-N-S H およびラッ卜副腎髄質褐色細胞腫 PC 1 2に取り込まれることが明らかになり、腫瘍疾患領域のィメ一ジング剤として有用であることが示された。

以上の結果から、本発明のテクネチウムまたはレニウム金属複合体は、画像診断薬として有用なものであり、また、腫瘍疾患領域のイメージング剤としても有用なものである。

Claims

請求の範囲次の一般式（ I )、

[式中、 R R²、 R³、 R R⁵、 R⁶、 R ⁷及びは、それぞれ水素原子又は低級アルキル基を示し、 R ⁹及び R ¹ °はそれぞれ水素原子又は置換もしくは非置換のァリール低級アルキル基を示し、 Xは、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基、水酸基またはアミノ基を示し、 Yは、次の基、

(ここで、 R ¹¹及び R ' ²はそれぞれ水素原子、低級アルキル才キシカルボニル基又はァリール低級アルキル才キシカルボ二ル基を示し、 nは 1ないし 3の整数を示す）

で示される置換基を示す]

で表される新規ァラルキルグァニジン化合物。

2. R '、 R²、 R³、 R\ R⁵、 R R ⁷及び R ⁸がいずれも水素原子であり、 nが 1である請求項 1に記載のァラルキルグァニジン化合物。

3. R ⁹および R '。がいずれも 4ーメ卜キシベンジル基であり、 R ''および R ¹²がいずれも tーブ卜キシカルボニル基である請求項 1または請求項 2に記載のァラルキルグァニジン化合物。

4. R⁹、 R'°、 R''および R '²が、いずれも水素原子である請求項 1または請求項 2に記載のァラルキルグァニジン化合物。

5. 請求項 1ないし 4のいずれかの項に記載のァラルキルグァニジン化合物と放射性金属からなる放射性金属複合体。

6. 放射性金属がテクネチウム一 99 mである請求項 5に記載の放射性金属複合体。

7. 放射性金属がレニウム— 1 86 1 88である請求項 5に記載の放射性金属複合体。

8. 請求項 5記載の放射性金属複合体を含有する医薬。

9. 放射性画像診断薬である請求項 8に記載の医薬。

1 0. 心臓疾患領域のイメージングに使用される請求項 9に記載の放射性画像診断薬。

1 1. 腫瘍疾患領域のイメージングに使用される請求項 9に記載の放射性画像診断薬。

1 2. 放射性金属がテクネチウム一 99 mである請求項 9ないし 1 1のいずれかの項に記載の放射性画像診断薬。

1 3. 放射性治療薬である請求項 8に記載の医薬。

1 4. 放射性金属がレニウム— 1 86 1 88である請求項 1 3に記載の放射性治療薬。