WO2000005209A1

WO2000005209A1 - GUAIACOXYPROPANOLAMINES WITH α/β-ADRENERGIC BLOCKING ACTIVITY

Info

Publication number: WO2000005209A1
Application number: PCT/CN1998/000133
Authority: WO
Inventors: Ing-Jun Chen
Original assignee: Lin, Tong-Ho
Priority date: 1998-07-23
Filing date: 1998-07-23
Publication date: 2000-02-03
Also published as: EP1108710A1; EP1108710A4; AU8430098A

Description

现有技术

为了克服直接起作用的周边血管扩张剂所引发的心搏过速倾向，发明人尝试设计了同时具有血管扩张作用及 β -肾上腺素受体阻断活性的化合物。蕃尼罗（ Vanilloid ) 型的 β -阻断剂具有一个愈创木氣基丙醇胺环，而本发明先前所合成的蕃尼罗是属于香荚兰素丙醇胺的衍生物，在一连串的实验中已证明具有 β -肾上腺素受体阻断活性。

另外， Asano, M.，等人于 1990年药理学和实验治疗杂志（ J. Pharmacol. Exp. Ther. )第 296卷第 204— 211 贫提出 YM— 16151 一 1 , Shibasaki, Κ·等人于 1997年一般药理学（ Gen. Pharmac. ) 第 29卷第 545 - 550页提出 YM 430。此两个化合物如下所示，虽然具备 β -肾上腺素受体阻断活性，但是其结构与本发明不同。

发明目的

所以本发明尝试以蕃尼罗为基本核心进行结构修饰，主要是在蕃尼罗的第四位的窿基作修饰，引入具有血管扩张作用的二氩吡啶环。

本发明另外运用各种药理实验证实具有愈创木氣基丙醇胺及苯氣基丙醇胺结构的二氢吡啶衍生物，具备持续性血压下降、竟争 β - 肾上腺素受体及钙离子拮抗剂、产生的血管松弛作用、钙离子通道阻断及 β -肾上腺素受体阻断等活性。

本发明更证实将具有愈创木氨基丙醇胺及笨氨基丙醇胺结构的二氢^啶衍生物作为主成分，添加必要的赋形剂制成各种药物组合物，具有药效。

对附图简要说明

图 1 本发明化合物的心跳及血压反应

( a ) 0.1mg/kg化合物 1

( b ) 0.25mg/kg化合物 1

( c ) 0.5mg/kg化合物 1

( d ) 1.0mg/kg化合物 1

( e ) 2.0mg/kg化合物 1

图 2 心跳及血压反应 1

( a ) 0.5mg/kg化合物

( b ) 0.5mg/kg硝苯地平

图 3 可竟争性地拮抗 L -异丙肾上腺素（ isoproterenol ) 的心跳速率增加作用

1. 对照组 1. 10"⁷M化合物 1

3. 10'⁶M化合物 1 4. 10— ⁵M化合物 1

图 4 可竟争性地拮抗 L -异丙肾上腺素的心跳速率增加作用

1. 对照组 2. 1(Γ⁷Μ化合物 1

3. 10 ⁶Μ化合物 1 4. 10 ⁵Μ化合物 1

图 5 可竟争性地拮抗 L -异丙肾上腺素的气管收缩作用

1. 对照组 2. 10 ⁷Μ化合物 1

3. 10'⁶Μ化合物 1 4. 10·⁵Μ化合物 1

图 6 L -异丙肾上腺素对右心房跳动速率的影响

1. L -异丙肾上腺素 2. 普萘洛尔

3. 凡倪黛尔（ vanidilol ) 4. 化合物 1

图 7 L -异丙肾上腺素对左心房的收缩张力的影响

1. L -异丙肾上腺素 2. 普萘洛尔 . 凡倪黛尔化合物 1

图 8 本发明化合物的气管松弛作用

. L -异丙肾上腺素普萘洛尔

. 硝苯地平凡倪黛尔

. 化合物 1

图 9 本发明化合物的气管松弛作用

. 对照组 2· 10 ^ιυΜ ICI 118， 551 . 10'⁹M ICI 118 4. 10 ⁸M ICF 118, 551 图 10 本发明化合物的气管松弛作用

1. 对照组 2. 1(T⁸M ICF 118， 551 图 11 本发明化合物的受体结合

图 12 β -肾上腺素阻断剂的竟争曲线

1. 化合物 1 2.普萘洛尔

图 13 本发明化合物的受体结合

图 14 β -肾上腺素阻断剂的竟争曲线

1. 化合物 1 2.普萘洛尔

图 15 本发明化合物的心房速率作用

1. 对照组 2. 10 ⁷Μ化合物 1

3. 10·⁶Μ化合物 1 4. 10 ^SM化合物 1 图 16 本发明化合物的心房速率作用

1. 对照组 2. 10 ⁷M化合物 1

3. 10'⁶M化合物 1 4. 10_⁵M化合物 1 图 17 本发明化合物的血管松弛作用

1. 对照组 2.10·⁸Μ化合物 1

3. 10_⁷Μ化合物 1 4. 10_⁶Μ化合物

5. 10 ⁵Μ化合物 1

图 18 Bay K 8644前处理会影响血管松弛作用

1. 对照组 2.10·⁸Μ化合物 1

3. 10·⁷Μ化合物 1 4. 10— ⁶Μ化合物 1

5. 10'⁵Μ化合物 1 图 19 Bay K 8644前处理会影响血管松弛作用

1. 对照组 2. Bay K 8644前处理

图 20 〔³H〕尼群地平（〔³H〕 nitrendipine ) 的受体结合图 21 钙离子阻断剂的竟争曲线，

1. 硝笨地平 2. 化合物 1

图 22 钙离子荧光测定

1. 50mM氯化钾 10 M A23187 3. 5mM EDTA

图 23 钙离子荧光测定

1. 10_⁶mM 化合物 1 50mM 氯化钾

3. 10"⁴M A23187 4. 5mM EDTA 图 24 钙离子荧光测定

1. 对照组 2. 50mM 氯化钾

3. 10'⁸mM 化合物 1 + 50mM氯化钾

4. 10 ⁷mM 化合物 1 + 50mM氯化钾

5. 10 ⁶mM 化合物 1 + 50mM氯化钾

图 25 钙离子荧光测定

1. ΙΟμιη Bay K 8644

图 26 钙离子荧光测定

1. 10_⁶mM 化合物 1 ΙΟμιη Bay K 8644 3. It)-⁴ M A 23187

5mM EDTA 图 27 钙离子荧光测定

1. 对照组 2. ΙΟμιη Bay K 8644

3. 10 ⁸mM 化合物 1 + ΙΟμπι Bay K 8644

4. 10'⁷mM 化合物 1 + ΙΟμπι Bay Κ 8644

5. 10 ⁶mM 化合物 1 + ΙΟμιη Bay K 8644

本发明详细描述

本发明涉及具有愈创木氧基丙醇胺及苯氣基丙醇胺结构的二氢吡啶衍生物，即以式 I 为主结构的化合物，其中 R选用以下四种之

而 R!可任意选自卤素（ X ) 、二氣化氮（ N0₂ ) 、饱和 1 ― 6 碳直链烷基、不饱和 1 ― 6 碳直链烷基之一。 R₂ 可任意选自氢 ( H ) 、甲基

之一； R₃、 R₄可任意选自饱和 1 - 6碳直链烷基、不饱和 1 - 6碳直链烷基之一； R₅可任意选自羟基、饱和 1 - 6破直链烷基、不饱和 1 - 6碳直链烷基之一。

以式 I 为主结构具有愈创木氧基丙醇胺及苯氧基丙醇胺的二氬吡啶衍生物的合成可粗略区分为 4种方法，请参见如下所示化合物的合成方法及本发明部分化合物的结构。

将 4 -羟基- 3 -甲氧基- 1 -苯甲醛溶于氢氣化钠乙醇溶液，加入表氯醇反应后，经减压浓缩，结晶，获得 N - 〔 4 - ( 2 , 3 -环氣基丙氣基） - 3 -甲氣基〕 - 1 -苯甲醛；另以叔丁基胺进行胺化反应，获得 N - 〔4 - ( 2 -羟基- 3 - (丁基氛基）丙氣基）一 3—甲氣基〕 — 1 —苯甲醛。将 N— 〔4— ( 2—羟基— 3— (叔丁基氨基）丙氣基） - 3 -甲氣基〕 - 1 -笨甲醛加入乙酰乙酸甲酯、乙醇、浓氨水进行回流，直接减压浓缩、去除乙醇，剩余的溶液加入饱和碳酸钠溶液，用氯仿萃取后，以柱分离纯化，反复重结晶，获得化合物 1。

当胺化反应选用 2 -甲氣基- 1 -氧乙基氨基苯于相同步骤下可得到纯化的化合物 3。

而原料 4—羟基— 3 -甲氧基- 1 -苯甲醛改用 2 -甲氧基- 1 氣乙基氨基笨比照上述方法可得到纯化的化合物 2。

方法二：

将 2 -氯- 4 -羟基 -笨甲 ^溶于氢氨化钠乙醇溶液加入表氯醇反应后，经减压浓缩，结晶，获得 N - 〔 4 - ( 2 , 3 -环氧基丙氣基）一 2 —氯〕 — 1 一笨甲醛；另以 N — 〔 4 — ( 2 —甲氣基

- 1 -氧乙基氨基笨进行胺化反应，获得 N - 〔4 - ( 2 -羟基- 3 一 ( 2 —甲氧基- 1 —氣乙基氨基笨基）丙氧基〕 - 2 —氯） ― 1 -笨甲^。

将 N— {4 — ( 2 —羟基— 3 — ( 2 -甲氣基— 1 —氣乙基胺基笨基）丙氨基） - 1 -氯 }- 1 -笨甲窿加入乙酰乙酸乙酯、乙醇、浓氨水进行回流，直接减压浓缩、去除乙醇，剩余的溶液加入饱和的碳酸盐溶液，以氯仿萃取后，以柱分离纯化，反复重结晶，获得化合物 7。

方法三：

将 5 -氯水杨^溶于氫氧化钠乙醇溶液加入表氯醇反应后，经减压浓缩，结晶，获得 N - 〔 2 - ( 2 , 3 -环氣基丙氣基） - 5 -氯〕 - 1 -苯甲醛；另以叔丁基胺进行胺化反应，获得 N - {2 - 〔2 -羟基— 3 - (叔丁基氨基）丙氡基〕 - 5 -氯} - 1 —苯甲菘。将 N— {2 — 〔2 —羟基— 3 ― (叔丁基氨基）丙氣基〕 — 5 —氯}一 1 -苯甲醛加入乙酕乙酸乙酯、乙醇、浓氨水进行回流，直接减压浓缩、去除乙醇，剩佘的溶液加入饱和的碳酸钠溶液，以氯仿萃取后，以柱分离纯化，反复重结晶，获得化合物 4。

当胺化反应选用正丁基胺时于相同步骤下可得到纯化的化合物 5。选用 2 -甲氧基- 1 -氨乙基胺基笨于相同步骤下可得到纯化的化合物 6。

方法四: 将 5 -硝基水杨醛溶于氩氧化钠乙醇溶液加入表氯醇反应后，经减压浓缩，结晶，获得 N - 〔2 - ( 2, 3 -环氣基丙氣基）

- 5 -硝基〕 - 1 -苯甲醛；另以正丁基胺进行胺化反应，获得 N -{2 - ( 2 —羟基— 3 — (正丁基氨基）丙氣基） — 5—氯}一 1 - 苯甲醛。将 N — {2 — ( 2 -羟基- 3 - (叔丁基氨基）丙氣基- 5 -氯 }_ 1 -笨甲醛, 加入乙酰乙酸乙酯、乙醇、浓氨水进行回流，直接减压浓缩、去除乙醇、剩余的溶液加入饱和的碳酸盐溶液，以氯仿萃取后，以柱分离纯化，反复重结晶，获得化合物 8。当胺化反应选用 2 -甲氣基- 1 -氣乙基氨基苯于相同步骤下可得到纯化的化合物 9。

至于 2 -甲氧基- 1 -氣乙基氨基苯的制备方法，可采取下列方式；将 2 -甲氣基苯盼与二溴乙烷加热后添加氩氣化钠，继续加热反应后，经减压浓缩，结晶，获得 2 -甲氣基- 1 -氣乙基溴苯。

将 2 - 甲氣基- 1 -氧乙基溴苯与酜亚胺钾（ Potassium phthalimide ) 混合后，以二甲基甲酰胺溶解，持续反应后，静置过液，经重结晶可获得 2 -甲氧基 - 1 -氣乙基酜亚胺笨。

将 2 -甲氣基- 1 -氨乙基酜亚胺苯与肼水合物加热反应后，即得 2 -甲氣基- 1 -氣乙基氛基苯。

该合成产物于纯化结晶后分别测定元素分柝、质谱（ MS 红外光谱（ IR ) 、氢核磁共振光谱（ - NMR， CDCI₃ ) 、紫外吸收（ UV ) 等物理化学资料。并以适当的实验模式来评估药理活性作用，以确定化合物活性。

本发明化合物必要时添加各种赋形剂、载体，或稀释剂与制药上可容许酸的加成盐形成具有药效的组合物。这样的制剂可为供口服给药、直肠施用的固体剂型、液体剂型，或非经肠道使用的注射剂型，或直接涂敷患处的软膏剂型。这样的固体剂型是按照熟知的制剂方法制备的并可添加淀粉、羧甲基纤维素钠之类崩散剂，乙醇、甘油等粘合剂，或硬脂酸镁、轧糖等。也可制成锭剂或充填于胶嚢或制成栓剂之类固体制剂。使用本发明化合物的水溶液、盐溶液可用磷酸盐类緩冲液调整酸碱度使其 pH值至适当程度，而且可添加助剂、乳化剂制成注射剂或其他液剂。本发明化合物或制药上可容许酸的加成盐与各种基质相混合按公知的制剂方法亦可制成软膏剂型。以本发明化合物为主成分所制备的药物组合物可施用于哺乳类动物产生主成分的药效，一般投药剂量可随症状需要调配，通常为每人每次 50到 300mg , 每天 3次。

药理活性：

本发明化合物可经由下列药理实验证实是否具有 β 受体及钙离子拮抗活性，对 β -肾上腺素结合受体的选择性及是否具有内在的拟交感神经活' ϋ ( intrinsic sympathomimetic activity, ISA ) ；这样的化合物对气管及血管具有扩张作用；以雷射细胞仪（ ACAS 570 ) 测量血管平滑肌 A7r5细胞内钙离子浓度的变化。

大鼠活体心跳、血压作用

选用重 200 ~ 300g雄性大鼠（ Wistar品系），经由笨巴比妥钠腹腔麻醉，进行气管切开术，并插入导管保持呼吸顺畅。在左股静脉以聚乙烯管进行插管以利药物的施予；并利用三路活塞，一端连接装有注射药品的注射筒；另一端连接装有生理盐水的注射筒，在给药后可马上注入一些生理盐水以免药物滞留于聚乙烯管中影响实验准确性。

左股动脉也以聚乙烯管进行插管，同样使用三路活塞，一端接肝素溶液，当聚乙烯管中发现有栓塞时可用于疏通管路；另一端连接抛弃式隔膜圓顶（ Disposable Diaphragm Dome, Tal019 ) , 然后连接到换能器，经放大器，由记录器记录全身性动脉压、平均动脉压与心跳速率，以此方式可进行药物对大鼠的血压及心跳作用的评估。大鼠经由股静脉施予 0.1、 0.25 . 0.5、 1.0、 2.0mg/kg等不同剂量的化合物 1后，比较其心跳、血压作用的差异。另外以其他组大鼠，经由股静脉分别施予 1.0mg/kg化合物 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 后，比较其心跳、血压作用的差异。

结果：

正常血压的大鼠施用不同剂量的化合物 1，如图 1 ( a ) ~ ( e ) 所示可引起长达约 1小时的心跳减慢及持续性血压下降反应，此心跳减慢及降血压作用与剂量呈正比。在此实验中，给予 0.5mg/kg硝苯地平如图 2 ( b )所示可引起显著的血压下降反应，在此同时会产生反弹性的心跳上升。而化合物 1如图 2 ( a )所示并无此现象发生反而会使心跳减慢，故可避免产生像二氫吡啶类钙离子阻断剂所产生的反弹性心跳上升的副作用。化合物 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9的心跳、血压作用都标示于表 1。 ^ \ 本发明化合物的 pKi值化合物血压下降心跳減少主动脉松驰

(lmg/kg;mmHg) (lmg/kg;次 /分钟) (10 一 ⁸ ； % )

1 70±3 30±2 30±3

2 75±2 35±4 40±4

3 78±5 37±5 41±2

4 76±6 33±3 35±5

5 74±4 32±4 33±2

6 80±3 35±5 45±4

7 82±6 40±2 45±5

8 80±3 40±4 43±3

9 85±6 40±5 47土 2

大鼠离体心房、气管实验

( 1 ) 大鼠离体右心房实验：

参考 Chen, I. J.等人于 1993年一般药理学（ Gen. Pharmacol. ) 第 24卷第 1425― 1433页，和 Sheu, M. M.等人于 1997年药理学第 54卷第 211 - 224页的方法并加以修改。

选用重 200 - 300g的大鼠，处死后剪断颈动脉放血，迅速将整个心脏取出，置于室温（ 20 ~ 25 。C ) 已通有混合气（ 95 % 0₂ + 5 % C0₂ ) 的生理盐水（ Kreb's ) 溶液中，将左右心房分离开来。取自发性跳动的右心房，两端以蛙心夹夹住，一端固定于底部，置入 10毫升生理盐水溶液的组织浴器中，温度维持在 37 。C , 另一端则连接测力换能器 ( force transducer ) , 经由记录器（ COULBOURN AT-High-Speed Videograph ) 记录右心房等长收缩张力及跳动频率。标本给予 250毫克之间的张力，待平衡后进行以下实验：

( a ) β -肾上腺素阻断作用

当右心房自律性跳动速率达一稳定状态后，累积给予 1 X 10- ^1G〜3 x 10—⁸ML -异丙肾上腺素引起心跳速率持续上升，由此可得到一条累积剂量反应曲线；接着以生理盐水（ Kred's ) 溶液将 L― 异丙肾上腺素洗掉，使右心房心跳速率回到稳定状态，重新平衡至少 60分钟后，加入不同浓度的 10·⁷、 10-⁶、 1(Γ⁵ Μ 化合物 1 , 30分钟后再次累积给予 1 X 10"¹⁰~3 X 10 ⁸ML -异丙肾上腺素，由此可再得一条新的累积剂量曲线。 L -异丙肾上腺素浓度由 1 X 10 ¹⁰M 开始^予，以 0.5 log为单位增加其浓度，总共给予六种浓度；累积投药间隔则为在前一种浓度达最大作用时即给予下一次浓度，其时间间隔约为 3 ~ 5分钟，并可求出其 EC₅o值。再利用斜率可得到化合物 1的卩 ₂值。另外对其他组大鼠，分别施予化合物 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9后，求出其 pA₂值。

( b ) pA₂值的计算：

根据 Arunlakshana, O.等人于 1959年英国药理学杂志（ Br. J. Pharmacol. ) ，第 14卷第 48 - 57页提出的方法，以测试化合物浓度的对数值为横座标，达到相同作用的拮抗剂与作用剂剂量比率 (dose ratio)-¹!*的对数值为纵座标，将所得数据作图并进行线性回归，可得一回归直线的橫座标截距值，即为此测试化合物的 pA₂值，公式如下：

pA₂= - Log KB Log(DRADJ =1^ 〔 B〕 - LogKB

DRADJ (校正的剂量比率） =DR (剂量比率）

CF (校正因子）

〔B〕：测试化合物的摩尔浓度

KB : 测试化合物的平衡解离常数

n：斜率值 DR : 实验组的 EC₅₀除以对照组的 EC_S0

CF：第二或第三次控制组曲线的 EC₅o除以第一次控制組曲线的 EC₅₀

〔 C〕化合物对氯化钙（ CaCl₂ ) 引起右心房自律性跳动速率增加的影响

大鼠右心房于生理盐水（ Kreb's ) 溶液中平衡至少 60 分钟，当自律性跳动速率达一稳定状态后，累积施予 3.0 、 6.0、 9.0mM不同浓度氯化钙，观察右心房自律性跳动的速率变化。然后右心房再以生理盐水溶液多次洗涤，重新平衡至少 60分钟后，施予 10·⁷、 10_⁶、 1(Γ⁵Μ不同浓度的化合物 1 , 30分钟后再次累积施予不同浓度 3.0、 6.0 、 9.0mM 氯化钙观察右心房自律性跳动速率变化。比较有无化合物 1存在下，氯化钙对右心房自律性跳动速率变化的影响。

( 2 ) 大鼠离体左心房实验：

由大鼠离体右心房实验分离得到不会自发性跳动的左心房，于相同条仵下以波宽 lmses 略大于闽值电压约 1 仗特的方形波刺激左心房引起收缩反应。刺激频率 1Hz , 休息张力 0.5克重。待 60分钟平衡后进行以下实验：

( a ) 累积浓度反应曲线的完成：同离体右心房的实验方式； ( b ) pA₂值的计算：同离体右心房实验的计算方法。

结果

化合物对3 -肾上腺素受体活性：

利用大白鼠离体右心房的自律性跳动劝能，累积施予 1 X 10· ¹⁰ ~ 3 X 10_⁶M不同剂量的 L -异丙肾上腺素可见心房速率持续上升，由此可得到一条累积剂量反应曲线。在 10·⁷、 10-⁶、 1(Γ⁵Μ不同浓度的化合物 1 , 如图 3所示可竟争性地拮抗 L -异丙肾上腺素的心跳速率增加作用，且可使 L -异丙肾上腺素的累积浓度反应曲线呈现剂量相关地由左向右平行移动。

另外以电刺激的大白鼠离体左心房，累积施予 L ―异丙肾上腺素可以增加收缩力；同样地， 10-⁷、 10'⁶ , 1(Γ⁵Μ浓度化合物 1如图 4所示可竟争性拮抗 L -异丙肾上腺素的心收缩力增加作用，且对 L -异丙肾上腺素的累积浓度反应曲线呈现剂量相关的由左向右平行移动。

在大白鼠离体右心房实验中化合物 1的 ρΑ₂值为 7.21±0.32；而在左心房的心收缩力实验得到的 ρΑ₂值则为 6.91±0.26 , 而其他化合物较详细的 ρΑ₂值及回归线斜率值都标示于表 2。

( 3 ) 天竺鼠离体气管实验：

选用重 350 ~ 500k 的天竺鼠，于实验前 18 - 24小时先行给予腹腔注射 5mg/kg利血平（ reserpine ) , 以避免实验过程中加入的苯氨基苄胺 ( phenoxybenzamine )如 O'Donnell和 Wanstall(1979) 所提出的导致内源性儿茶盼胺的释出。将天竺鼠处死后，沿着颈部，取下长约 4公分气管，置于室温下已通有混合气（ 95 % 0₂ + 5 % C0₂ ) 的生理盐水（ Kreb's ) 溶液培养中，仔细地去除周围組织，接着将气管剪成每一转有三至四个软骨环结的螺旋形，如 Constantine ( 1965 ) 所提出方法将其等分，两端以蛙心夹夹住，一端固定于底部，置入 20毫升生理盐水（ Kreb's )溶液的组织溶器中，温度维持在 37 ' , 另一端则连接测力换能器，经由记录器 ( COULBOURN AT ― High-Speed Videograph ) 记录等长收缩张力，标本给予 1.5g的张力，待平衡后进行以下实验。

( a ) 累积浓度反应曲线：

实验中气管先以 50μπι笨氧基苄胺作用 30分钟，以防止周围神经元摄取 ( extraneuronal uptake ) 而减少如 O'Donnell 和 Wanstall(1976)所提出的 L -异丙肾上腺素的作用，接着以生理盐水（ Kreb's ) 溶液反复清洗 20 分钟，然后以 10_⁶M 卡巴胆碱 ( carbachol ) 引起天竺鼠的气管的收缩，达到最大高度时，每一等分气管完成二次 L -异丙肾上腺素的累积浓度反应曲线，其中第一次曲线不加入测试化合物做为对照组；而第二次曲线则先加入化合物 1作用 30分钟后再进行累积浓度反应曲线，此即为实验组。

( b ) pA₂值的计算：同离体右心房实验的计算方法。

结杲

化合物对 β₂肾上腺素受体活性：

以 10_⁶Μ 卡巴胆碱引起天竺鼠离体气管收缩作用，待达到稳定状态后，累积施予 L -异丙肾上腺素可以得到气管张力松弛曲线，而实验前处理 10-⁷、 1(Γ⁶、 1(Γ⁵Μ化合物 1如图 5所示可竟争性地抑制 L -异丙肾上腺素的作用，且拮抗 L -异丙肾上腺素的累积浓度反应曲线呈现剂量相同的由左向右平行移动。在天竺鼠离体气管实验中化合物 1的 ρΑ₂值为 7.09±0.54 , 而其他化合物较详细的 ρΑ₂值及回归线斜率值都标示于表 2。

( 4 ) 大白鼠离体心房直接作用的探讨：参照 Kaumann,A. J.等人于 1980 年 Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol.第 311卷第 205— 218 页以及第 237— 248页提出的方法加以修改，选用重 200 ~ 300克大白鼠，于实验前 24小时腹腔注射 5mg/kg利血平，以排空内源性的儿茶酚胺。实验前将大白鼠处死，迅速取下心脏置于室温且已通有混合气的生理盐水 ( Kreb's ) 溶液培养瓜中，仔细分离出左、右心房。接着比照上述实验方法，记录累积性施予 10— ^1QM ~ 3 X 10— ⁶M化合物 1对右心房的影响。

结果

化合物 1 的型： β₂型受体选择性：

βΐ 型： β2 型受体选择性比例，是由右心房与气管平均 ρΑ2 值的差值馭负对数而获得，此乃参照 Baird， R.C.等人于 1972年药物药理学杂志（ J. Pharm. Pharmacol ) 第 24卷第 880— 885 页的方法。化合物 1 的作用在右心房为气管的 1.32 倍，凡倪黛尔 ( vanidilol ) 的作用在右心房为气管的 0.98倍，而普萘洛尔的作用在右心房较气管强 1.7 倍。显示化合物 1 与凡倪黛尔及普萘洛尔一样，对 β型受体不具有选择性。

( 5 ) 天竺鼠离体气管直接作用的探讨：

参照 Kaumann, A. J.等人于 1980年 Naunyn― Schmiedeberg's Arch. Pharmacol.第 311卷第 205— 218 页以及第 237— 248页提出的方法加以修改，选用重 350 ~ 500 克天竺鼠，于实验前 18 ~ 24 小时腹腔注射 5mg/kg利血平，以排空内源性的儿茶酚胺。实验前将天竺鼠处死，接着迅速取下气管置于室温约 22 ~ 25 °C且已通有混合气（ 95 % 0₂ + 5 % C0₂ ) 的生理盐水（ Kreb's ) 溶液培养瓜。而评估气管的内在活性是依照 Tesfamarlam, B.等人于 1994 年 Br. J.Pharmacol., 第 112卷第 55— 58 页提出的方法加以修改，首先累积加入 1(Γ⁷、 10"⁶ . 1(Γ⁵ Μ化合物 1于组织槽，观测对气管的作用，再以生理盐水（ Kreb's )溶液多次洗涤，待组织重新平衡后 60分钟，施予 ICI 118 , 551，经作用 30分钟后，再次施予相同浓度的化合物 1，观察是否具有气管的内在的拟交感活性。结果

化合物 1 内在的拟交感神经活性：

累积性地增加化合物 1 浓度，观察经利血平作用后大白鼠离体右心房的跳动频率和左心房的收缩张力变化，如图 6及图 Ί 所示 L -异丙肾上腺素的累积施予与其剂量相关地增加右心房跳动速率和左心房的收缩张力；化合物 1 并不能增加跳动速率和收缩张力，反而当剂量达到 10―⁵摩尔浓度或以上时抑制了跳动速率和收缩张力；普萘洛尔也会抑制跳动速率和收缩张力，而此种抑制作用与浓度增加成正相关，当剂量增加到 10— ⁴ ~ 10— ³摩尔浓度时则导致組织里不活动或不兴奋状态，然而高达到 3 X 10 ⁴摩尔浓度的阿替洛尔（ atenolol ) 则几乎没有心房抑制作用。另外，以利血平作前处理的天竺鼠离体气管累积施予 10— ^1Q ~ 3 X 10 ⁶M L -异丙肾上腺素或 10— ¹⁰ ~ 3 X 10—⁶M凡倪黛尔、 10— ¹⁰ ~ 3 X 10 ⁶M硝苯地平，及 10— ^1Q ~ 3 X 10 ⁶化合物 1，可分别产生剂量相关性的气管松驰作用。

但是如图 7 所示普萘洛尔的累积施予则不会产生任何松弛作用。为证实化合物 1产生气管松弛作用是否与 β₂型受体有关，以 10 — ^1Q、 10 ^{_ 9}、 10— ⁸Μ β₂型受体的选择性拮抗剂 ICI 118 , 551前处理天竺鼠离体气管 30分钟，如图 9所示发现可竟争性地拮抗化合物 1的作用，并使化合物 1的累积浓度反应曲线呈剂量相关性的平行右移。另外，如图 10所示向以利血平作前处理的天竺鼠离体气管累积施予 10 ^{_ 1G} ~ 3 X 10—⁶M硝苯地平引起的气管松弛作用不被 10 ^{_ 8}M的 ICI 118 , 551拮抗，证实硝苯地平产生的气管松弛作用与 β₂型受体无关。

( 6 ) 大鼠离体胸主动脉实验：

选用 300 - 500克的 Wistar大鼠处死后，再迅速取下胸主动脉，置于冰冷的生理盐水（ Kreb's ) 溶液中，去除血管壁周围的脂肪结締組织，再将胸主动脉剪成约 5mm长的环形，以两根 "己" 字型的白金丝上下穿过胸主动脉环上下固定，接着将胸主动脉置于 10 亳升、 37 下且已通有（ 95 % 0₂ + 5 % CO_z ) 混合气的组织槽中，一端固定于組织槽底部，另一端则接上测力换能器经由记录器记录其等长收缩。给予标本 1克张力，平衡 60分钟后进行以下实验。

( a ) 化合物 1对 75mM KCl引起胸主动脉收缩的影响：令胸主动脉于组织槽中达成平衡后，将组织槽中正常生理盐水 ( Kreb' s ) 溶液替换成含有 75mM KC1的高钾溶液，使血管产生收缩作用，至少记录 35分钟后，以正常生理盐水溶液多次洗涤，经重新平衡，使血管最少休息 60分钟后，加入 10— ⁸、 10—⁷、 10 一 ⁶、 10― ⁵M不同浓度的化合物 1 , 经 30分钟后再次以 75mM KCI引起血管收缩；以此方式比较有无化合物 1 处理过的胸主动脉对 75mM KC1产生的收缩作用的差异。

结果

化合物 1的离体血管松弛试验：

化合物 1对 75mM KC1引起胸主动脉收缩的影响：大鼠的离体胸主动脉以 75mM 高钾溶液引起收缩。待血管收缩达稳定状态后，如图 20、 23所示加入 10— ⁸ , 10— ⁷， 10— ⁶ , 10— ⁵M不同浓度化合物 1，可产生剂量相关性的血管松弛作用。另外将 10— ⁸M化合物 1 、 2、 3、 4、 5 、 6、 7、 8 、 9的收缩作用标示于表 1 。

( b ) BayK8644前处理对化合物 1 的血管松弛作用的影响：将 Ο.ΐμπι Bay K 8644加入组织槽中， 10分钟后再加入 70mM 高钾溶液引起胸主动脉收缩，待血管收缩达平稳状态，分别加入 10 ^{- 8}、 10—⁷、 10— ⁶、 10—^SM单一剂量不同浓度的化合物 1观察其对高钾溶液所引起主动脉收缩的影响。

结果

Bay K 8644对化合物 1的血管松弛作用的影响：

以 Ο.ΐμπι Bay K 8644前处理胸主动脉 10分钟后，加入高钾溶液引起血管收缩，待血管收缩达平稳状态，再加入 10— ⁸、 10 _ ⁷、 10 一 ⁶、 10— ⁵Μ化合物 1。结果如图 21 、 22所示以 Bay Κ 8644 前处理会影响化合物 1之血管松弛作用。

( 7 ) 对 β受体结合特性的探讨：

( a ) 在 4 °C下进行细胞膜的制备：参考 Muzzin等人（ 1992 ) 的方法加以修改，取出老鼠心脏及肺脏置于冰冷的三羟甲基氣基甲烷（ Tris ) 緩冲溶液，接着分离心室、肺脏且将其称重并置于 20倍体积的冰冷三羟甲基氨基甲烷緩冲溶液，以 Polytron匀浆器每次 15秒，攬碎 3 ~ 4次进行匀浆，匀浆以纱布加压过滤，馭滤液离心 12分钟（ 700g ) , 将上清液接着离心 12分钟（ 10，000g ) ，第二次上清液再离心 15分钟（ 29，000g ) ；最后得到的沉淀将其再悬浮在尽量少体积的三羟甲基氨基甲烷 ( Tris ) 缓冲溶液，接着采用 Brodford ( 1976 ) 的方法，用牛血清白蛋白（ BSA ) 当作标准品，以蛋白质分析染料测定膜中蛋白质的含量，再以三羟甲基氨基甲烷緩冲溶液稀释使蛋白质浓度维持在 ΙΟΟμΙ中含有蛋白质 200 ~ 250μ§ 。

三羟甲基氨基甲烷緩冲溶液 ρΗ7.4

250mM 蔗糖

50mM 三羟甲基氛基甲烷

ImM 氯化镁

) , Petrus等人（ 1988 ) 及 Muzzin 等人（ 1974 ) 的方法加以修改，取 ΙΟΟμΙ膜、 50μ1 〔 ³H〕 CGP - 12177、 50μ1不同浓度的测试化合物；普萘洛尔，化合物 1 , 凡倪黛尔，使终体积为 250μ1 , 置于 25 °C下振荡，反应 60分钟，反应完成后加入 1毫升冰冷的三羟甲基氛基甲烷緩冲溶液，以终止结合反应，接着使用 Millipore过滤装置及 Whatman GF/C玻璃纤维加压快速过滤，再以 5毫升冰冷的三羟甲基氨基甲烷緩冲溶液冲洗三次，将连同有细胞膜的滤纸于 60 °C烘箱干燥 3小时后，加入 5毫升液态闪烁计数液，用 Beckman LS6500 rackbeta液体闪烁计数器来测定放射性活性强度。

( 8 ) 对钙离子受体结合特性的探讨：

( a ) 在 4 t:下进行细胞膜的制备：

参考 Tamazawa等人（ 1986 ) 的方法加以修改，取出老鼠的大脑皮质置于冰冷的 0.85 %氯化钠（ NaCl )溶液，接着将大脑皮质称重置于 9 倍体积的冰冷 50mM 三羟甲基氛基甲烷-盐酸（ Tris- HC1 )溶液及 10mg EDTA(pH7.7), 以匀浆机（电动 Teflon 匀浆机），进行匀浆化，每次 15秒，搅碎 3 - 4次后，匀浆液以砂布加压过滤，取滤液离心 10 分钟（ 900g ) , 取上清液接着离心 20 分钟

( 18.000g ) , 第二次上清液再离心 15分钟（ 29,000 ) 。将所得的沉淀用 50mM 三羟甲基氨基甲烷 -盐酸溶液及 O.lmM EDTA

( pH7.7 ) 冲洗二次，最后得到的沉淀将其再次悬浮在相同的三羟甲基氛基甲烷 -盐酸緩冲溶液中并保存在 - 80 "C , 接着采用 Bradford ( 1976 ) 的方法，用牛血清蛋白（ BSA ) 当作标准品，以蛋白质分析染料测定膜中蛋白质的含量，再以三羟甲基氨基甲烷- 盐酸緩冲溶液稀释使蛋白质浓度維持在 4mg/ml 。

( b ) 受体结合分柝：

依照 Gould等人（ 1982 ) 的方法加以修改，取 ΙΟΟμΙ 〔 ³Η〕尼群地平（ nitrendipine ) 、 ΙΟΟμΙ 三羟甲基氨基甲烷 -盐酸

( Tris-HCl ) 緩冲溶液、 200μ1膜、 ΙΟΟμΙ不同浓度的化合物 1 , 硝苯地平，凡倪黛尔等测试化合物使终体积为 500μ1 , 置于 25 下振荡，黑暗中反应 60分钟，接着使用过滤器（ Millipore过滤装置）及过滤管（ Whatman GF/C玻璃纤维）加压快速过滤，再以 4亳升冰冷的 50mM 三羟甲基氛基甲烷-盐酸（ Tris-HCl ) , O.lmM EDTA ( pH 7.7 ) 冲洗 4次，将连同有细胞膜的滤纸于 70 °C烘干箱干燥 1 小时，加入 4 毫升液态闪烁计数液，用计数器（ Bechman LS6500 rackbet 液体闪烁计数器）来测定放射性活性强度。

( 9 ) 细胞内钙离子荧光法测定实验：

( a ) 细胞培养：

源自于美国典型培养物保藏中心的初生大白鼠（ American type culture collection, CRL 1446 CRL 1446 ) , ( RockvilleMD ) 胸主动脉血管平滑肌细胞林（克隆细胞系 A7r5 ) ，培养于内含 10 %胎牛血清、 10000U/ml 青霉素 G 及 10mg/ml 链霉素的培养基 ( Dulbecco's 修饰的 Eagle's培养基， DMEM ) 培养液中，并置于混合气（ 95 % 0₂ + 5 % C0₂ ) 及 37 °C恒温之培养箱内。细胞每周以含有 1 %胰蛋白酶的培养液解吸之后进行传代培养，当细胞达到汇合时，完成此阶段实验。

( b ) A7r5细胞内钙离子（〔 Ca^{2 +}〕 i ) 浓度的测量

如上述准备细胞，细胞内游离钙离子浓度是利用荧光显示剂

( fluo 3-AM ) 测量，细胞分别以造影及行扫描。首先于 A7r5细胞的培养液内加入 5μπι氟湄荧光显示剂（ fluo 3-AM， Calbiochem, 美国）染色，放置于 37 °C含 5 %二氣化碳（ C0₂ ) 下 1 小时后，再以含钙离子的生理盐水（ Tyrode's ) 溶液冲洗三次以洗去细胞外多余的氟湄荧光显示剂。以 ACAS 570 激光细胞（ laser cytometer, Meridian Insruments Inc., USA ) 测量细胞内钙离子浓度的变化。首选用位相光学显微镜找到单一 A7r5细胞，再以激光荧光扫描来确认细胞内氟湄荧光显示剂的荧光强度。氟湄荧光显示剂（ fluo 3-AM ) 的荧光强度以氩气激光在波长 488nm下，每 30秒间隔作影像扫描。电脑可将荧光影像依其强弱转换成负值影像（ pseudogray ) 。加入 50mM 氯化钾后扫描 125 秒，当作基础值之后，用生理盐水

( Tyrode's ) 洗捽后，分别加入 10— ⁸、 10— ⁷、 10— ⁶M化合物 1 各扫描 300秒后再加入 50mM 氯化钾来记录其细胞内钙离子浓度变化。

细胞内游离的钙离子浓度和荧光比例呈正相关，此二者的关系可利用方程式〔 Ca²⁺〕 = Kd(F-F_min) /(F_max -F)。 Kd是氟湄荧光显示剂（ fluo 3-AM ) 的解离常数（ 320nM ) ；加入 1(Γ⁴Μ无氟钙离子载体溴 ( nonfluoroscent Ca²⁺ ionophore 4--bromo-A-23187 ) 到细胞中可以得到最大荧光值（ F_max ) ；细胞内再加入 5mM 乙二胺四乙酸（ EDTA ) 以移除细胞内外的游离钙离子，可得到最低荧光值 ( F_min ) 。另外以 Bay K 8644 ( 10μΜ ) 钙离子通道活化剂取代先前的氯化钾，以相同的步骤不同浓度（ 10— ⁸， 10 " ⁷ , 10— ⁶Μ ) 进行观察化合物 1对 Bay Κ 8644 (10m)使细胞内钙离子浓度增加的拮抗作用。

结果

化合物 1对 β型受体的结合如图 11 及图 13所示，以 0.003 ~ 80nM不同浓度的〔 ³H〕 CGP - 12177作剂量相关性受体结合研究，显示〔 ³H〕 CGP 一 12177结合到大白鼠心室、胂脏膜可达饱和状态，另外，如图 11及图 13所示以 Scatchard ( 1949 )的分析方法来决定受体亲和力及结合位置数目，在 25 °C情况下，得到心室及肺脏膜的平衡解离常数 ( Kd ) 为 0·16±0·03 ； 1.75±0.50 ( ηΜ ) ；受体最大结合密度

( Bmax ) 为 43.1±2.6， 294·5±20·4 ( fmol/m 蛋白）。数据表示方式为平均值士标准误差，而〔 ³H〕 CGP - 12177的受体结合达到稳定状态大约在 20分钟内且可以持至 90分钟。

如图 12及图 14所示 β ―肾上腺素阻断剂在大白鼠心室、胂脏膜 β型受体的竟争曲线，其 pki数值标示于表二， β型肾上腺素阻断剂抑制〔³H〕 CGP - 12177对心室 Pi型、肺脏 ₂型受体的结合，其药效强度顺序为普萘洛尔》化合物 1。

化合物 1的钙离子阻断作用：

( a ) 化合物 1对氯化钙（ CaCl₂ ) 引起心房跳动速率变化的影响：

在生理盐水（ Kreb's ) 溶液中累积施予 3.0,6.0， 9.0mM 氯化钙，发现心房速率在 3.0, 6.0, 9.0mM氯化钙时会产生浓度相关性增加，如图 15、 19在 1(Γ⁷、 1(Γ⁶、 1(Γ⁵Μ不同浓度化合物 1存在下，可发现累积施予 3.0， 6.0， 9.0mM氯化钙所引起的心房速率增加作用被抑制，亦即在相同氯化钙浓度下，心房速率已无法达到相同的增加强度。

( b ) 化合物 1对钙离子受体的结合研究：

如图 20所示，以 0.001~10nM不同浓度的〔 ³H〕尼群地平作剂量相关性受体结合研究，显示〔³H〕尼群地平结合到大鼠大脑皮质腊可达饱和状态，另外以 Scatchard ( 1949 ) 的分析方法来决定受体亲和力及结合位置数目，在 25 °C情况下，得到大脑皮质膜的平衡解离常数（ Kd )为 0·16±0·03 ( ηΜ )；受体最大结合密度（ B_max ) 为 13·7±0·78 ( fmol/mg蛋白）。数据表示方式为平均值土标准误差，而〔 ³H〕尼群地平的受体结合达到稳定状态大约在 20 分钟内且可以持续至 90分钟。

如图 21所示钙离子阻断剂在大白鼠大脑皮质膜钙离子受体的竟争曲线，其 pki数值标示于表 3 , 钙离子阻断剂抑剂〔 ³H〕尼群地平对大脑皮质钙离子受体的结合，其药效强度顺序为硝笨地平 >化合本发明化合物的心跳、血压作用化合物 [³H]尼群地平 [³H]CGP-12177 [³H]CGP-12177

(钙） (βι) (β₂) pKi pKi pKi

1 7.86±0.38 6.61±0.46 6.20±0.55 硝苯地平 8.70±0·25 NT NT

普萘洛尔 NT 9.12±0.14 8.61±0.|

( c ) 细胞内钙离子荧光测定法：

分别以 50mM氯化钾（ KC1 )及 l(^m BayK8644加入氟湄荧光显示剂（ fluo3-AM ) 染色过的 A7r5细胞，以荧光测定法测定细胞内钙离子浓度变化。结果如图 22、图 25所示氯化钾及 Bay K 8644 均能引发钙离子内流入 A7r5细胞，而使细胞内钙离子浓度增加，产生钙离子（〔 Ca²⁺〕 i ) 升高波峰。接下来细胞分别先以 10 ^{_ 8}、 10 _ ^Ί、 10— ⁶Μ化合物 1反应 5分钟后再加入氯化钾或 Bay K 8644 , 结杲如图 26、图 27所示显示 KC1及如图 26、图 27所示 Bay K 8644 钙离子内流作用被明显抑制，此时已较无明显钙离子（〔 Ca²⁺〕 i ) 升高波峰出现。其中化合物 1对 Bay K 8644所引起的细胞内钙离子浓度上升的抑制作用大于对氯化钾的抑制作用，而且化合物 1的抑制作用呈现反应与浓度相关曲线。

实施例 1 化合物 1的合成

取 8克氫氣化钠溶于 100ml无水乙醇，另取 1摩尔的 4 -羟基 - 3 -甲氣基- 1 一笨甲醛溶于上述含氢氣化钠乙醇溶液中，于室温之下搅拌。之后再加入 5摩尔的表氯醇于室温之下反应。以薄层层柝确定反应完全。经减压浓缩，浓缩液以硅胶充填的管柱分离，以己烷：乙酸乙酯 =1 : 9为洗脱液，得到白色粗结晶。再以己烷反复做重结晶，即得纯化的 N — 〔 4 一（ 2 , 3 -环氣基丙氣基） - 3 —甲氣基〕 ― 1 —苯甲餒。

取等摩尔 N— 〔4 — ( 2 , 3 -环氣基丙氧基） - 3 —甲氣基〕 - 1 -笨甲餒与叔丁基胺，溶于 100ml 无水乙醇中，于微温下进行胺化反应、经搅拌过夜后静置，可得到固状的白色结晶，经过甲醇重结晶之后，即可得纯化的化合物 N -{4- ( 2 -羟基- 3 - (叔丁基氨基）丙氧基） - 3 -甲氣基 }- 1 -苯甲醛。

取 0.01摩尔 N - {4 — ( 2 -羟基- 3 -（叔丁基氨基）丙氣基） — 3 —甲氣基 }— 1 —笨甲^，加入含有 2.4亳升（ 0.02摩尔）的乙酰乙酸甲酯（ methylacetoacetate ) , 15毫升乙醇及 10毫升浓氛水的溶液加热，并于 55 " 下回流反应 15小时，将反应所得的溶液直接减压浓缩、抽干以去除乙醇，剩余的溶液加入 50毫升饱和的碳酸钠溶液并以氯仿多次萃取。将所得的有机层干燥、过滤并浓缩，把得到的油层加入乙醇-盐酸混合液，然后以管柱（甲醇：乙酸乙酯 =3:7 ) 分离纯化，先以乙酸乙酯柝出微黄的白色结晶，再以甲醇：乙酸乙酷 =1:9作反复重结晶，即可得纯化的化合物 1。

所得化合物 1的结构式为 C₂5H₃₆0₇IV₂HC1 , 经由质谱仪分析后所得分子量为 513。 'H'KMR₍e'DC^"6 _(S'9H'₃

XCH₃) , 2.33 (s, 6H, 2XCH₃) , 3.00-3.45 (m,21i, CH₂-NH) , 3.65 (s, 6H, CO-OCH₃X2) , 3.77 (s, 3H, OCH₃) , 3.93-4.14 (ra, 2H.

Ar-OCH₂) ,4.53(m,lH,CH-OH) ,4.94 ( s,lH,Ar-CH<) ' 5.45 (brs'lH,

可叉換, - 1J-) ,6.33-6.87 (m,3II, Ar)， 8.33 (br s, III, 可置換' CH_rNH-C) ,9.28 (brs, 1H,可置換，OH) ： lR(KBr)： 3360, 2950,

1710, 1655, 】440, 1380 cm"' ' MS m/s: 513(扫描 FAB+). 分析 (C₂₅H„0₇N₂.HC1) C, H, N.

依照化学实验分柝数据得知化合物 1为（ 4 - {4- 〔 2 -羟基- 3 一（叔丁基氨基）丙氣基〕一 3 -甲氣基}苯基） - 2 , 6 —二甲基一 3， 5 —二甲酯基— 1 , 4 —二氩吡啶。

实施例 2 化合物 2的合成将 0.2摩尔 2 —甲氣基盼 ( 2 - Methoxyphenol )及 0.4摩尔二溴乙烷在三颈瓶中加热至沸腾，用搅拌子加以搅拌 30 分钟，加入 125ml的 1.6N 氩氣化钠，再加热搅拌分层。于加热过夜后，运用薄层层柝测定反应完全，经氯仿反复萃取出有机层。

用 300ml 的 2N 氫氧化钠洗涤有机层，加入无水疏酸镁静置过夜，于过滤后减压浓缩。用硅胶充填的管柱用己烷：乙酸乙酯 =9:1 为洗脱液分离，可得第一中间产物 2 -甲氧基 - 1 -氡乙基溴笨。

将等摩尔的 § 亚胺钾与上述步骤获得的 2 -甲氧基- 1 -氣乙基笨，以二甲基甲酰胺溶解，在 5分钟内提高温度至摄氏 55度，持续此温度 30分钟后，降温至室温，反复以氯仿萃取有机层。以 0.2Ν 的氢氣化钠加以洗涤后，添加无水硫酸镁，静置过夜去除残余的水，经过滤后减压浓缩。以再结晶的方式可得第二中间产物 2 -甲氣基- 1 -氣乙基酞亚胺笨。

取等摩尔 2 -甲氡基- 1 -氧乙基酞亚胺笨与肼水合物以无水乙醇溶解，加热至沸腾并持续 45分钟。加入适量 18 %的盐酸，可产生白色的沉淀物，再持续加热沸腾 1 小时。过滤后，以无水乙醇洗涤，将滤液减压浓缩后，再以 20 %的氩氣化钠洗涤。经氯仿萃取该有机层，加入无水硫酸镁静置、过夜、再次过滤，减压浓缩后即获得 2 -甲氣基- 1 -氧乙基氨基笨。

另取 8克氩氨化钠溶于 100ml无水乙醇中，将 1摩尔的 4 -羟基- 3 -甲氡基- 1 -笨甲醛溶于该乙醇溶液，于室温下搅拌，再加入 5摩尔的表氯醇进行反应，运用薄层层柝测定反应完全，经减压浓缩，以硅胶充填的管柱运用己烷：乙酸乙酯 =9 : 1为洗脱液分离，再以己烷反复重结晶，获得纯化的 N - 〔 4 - ( 2 , 3 -环氡基丙氧基） — 3 -甲氯基〕 — 1 —苯甲醛。

取等摩尔 2 -甲氣基- 1 -氣乙基氛基笨及上步骤所得之化合物，溶于 100ml 无水乙醇，于微温下进行胺化反应。搅拌、静置后迚夜，可获得固状的黄白色结晶，经甲醇再结晶，即为纯化的化合物 N - {4- ( 2 —羟基— 3 — ( 2 —甲氣基— 1 —氣乙基氨基笨基）丙氣基） — 3 —甲氧基 }— 1 —苯甲醛。取 0.01摩尔 N—{4- ( 2—羟基— 3— ( 2—甲氣基— 1 —氣乙基氨基笨基）丙氨基） - 3 -甲氣基 }- 1 -苯甲醛加入含 2.4毫升 ( 0.02摩尔）的乙酰乙酸甲酯（ methylacetoacetate ) , 15毫升乙醇及 10毫升浓氨水的溶液加热，并于 55。C下回流反应 15小时，将反应所得的溶液直接减压浓缩、抽干乙醇，剩余的溶液加入 59毫升饱和的碳酸溶液，并以氯仿萃取多次，将所得的有机层干燥、过滤并浓缩，然后以管柱分离纯化（甲醇：乙酸乙酯 =1 : 9 ) ，即可得纯化的化合物 2。

所得化合物 2的结构式为 C₃₍,H₃₈0₉N₂，经由质谱仪分析后所得分子量为 570。

Ή-NMR (CDClj) δ: 2.26 (s, 6H, 2

XCHj) , 2.50-2.89 (m, 4H, C¾-NH-C¾) ,3.56 (ε, 6H, 2XC0- OCH₃ ) , 3.68-3.74 ( d,6H,2 X OCH, ) , 3.86-4.05 ( m,4H,2 X Ar- OC ) ,4.4 (s,m,Ca-〇H)，4.83 (s,lH,Ar-CH<) ,6.84-7.37 (m, 7H,

Ar-iL) , 8.33 ( s, 1H, - H- ) ： MS m/s:570( FAB¹).

分析（CJO^OJ^. ^H'

依照化学实验分柝数据得知化合物 2为 4 - {{Ν-{4- ί 2 -羟基 - 3 - ( 2 -甲氧基- 1 -氡乙基氛基笨基）丙氣基〕 — 3 —甲氨基 } 苯基 }}— 2 , 6 —二甲基— 3 , 5 —二甲酯基— 1 , 4—二氢吡啶。

实施例 3 化合物 3的合成

取 8克氫氧化钠溶于 100ml无水乙醇，另取 1摩尔的 4 -羟基 - 3 -甲氧基- 1 -笨甲醛溶于上述含氢氧化钠乙醇溶液中，于室温之下搅拌。之后再加入 5摩尔的表氯醇于室温之下反应，以薄层层柝确定反应完全。经减压浓缩，浓缩液以硅胶充填的管柱分离，以己烷：乙酸乙酯 = 1： 9为洗脱液，得到白色粗结晶。再以己烷反复做重结晶，即得纯化的 N - [4 - ( 2 , 3 -环氣基丙氡基） 3 -甲氧基】一 1 —苯甲醛。

取等摩尔 N - [4 - ( 2 , 3 -环氣基丙氣基） - 3 —甲氧基】 - 1 —笨甲醛与 2 —甲氧基一 1 -氡乙基氛基苯，溶于 100ml无水乙醇中，于微温下进行胺化反应。经搅拌过夜后静置，可得到固状的白色结晶，经过甲醇重结晶之后，即可得纯化的化合物 N - [4 - ( 2 一羟基— 3 — ( 2—甲氣基一 1 -氩乙基氨基笨基）丙氣基]- 3 - 甲氣基） - 1 -苯甲醛。

取 0.01摩尔 N— 〔4一（ 2 —羟基— 3— ( 2—甲氧基— 1一氣乙基氨基笨基）丙氨基〕 - 3 -甲氧基） - 1 -苯甲醛，加入 2.4 ^：升（ 0.02摩尔） 2倍摩尔数的乙酰乙酸乙酯， 15毫升乙醇及 10 毫升浓氨水的溶液加热，并于 55 Γ下回流反应 15小时，将反应所得的溶液直接减压浓缩、抽干以去除乙醇，剩余的溶液加入 50毫升饱和的碳酸钠溶液并以氯仿多次萃驭。将所得的有机层干燥、过滤并浓缩，把得到的油层加入乙醇-盐酸混合液，然后以管柱（甲醇：乙酸乙酯 = 3： 7 ) 分离纯化，先以乙酸乙酯析出微黄的白色结晶，再以甲醇：乙酸乙酯 = 1 : 9作反复重结晶，即可得纯化的化合物 3。

所得化合物 3的结构式为 C₃₂H₄₂0₉N₂, 经由质谱仪分柝后所得分子量为 598。

CO-OCH.CHj ) , 2.33 (s, 6H,2xCH ) .2.50-2.89 ( m, 4H, C¾- H- C ₂) , 3.45 (m, 4H, 2 x CO-OCHJCHJ ) ' 3.78-3.84 ( d, 6Ii, 2X

OCH,) ,3.88-3.92 (m, H, 2XAr-OC¾) ,4.09-4.12 (m, 1H, CH- OH) ,4.95 (s' IH, Ar-CH<) ,5.73 ( r s, IB, 可置換， -NH-) ,6.76- 6.91(m, 7H,Ar); S ra/s: 598 (扫描 FAB')..分析 (C^H^CV^C'H'N.

依照化学实验分柝数据得知化合物 3为 4 - [[N - [ ( 2 -羟基 - 3 - ( 2—甲氧基 - 1 -氧乙基氨基笨基）丙氣基 j- 3 -甲氧基）笨基） — 2, 6—二甲基— 3 , 5—二乙酯基— 1 , 4—二氢吡啶。

实施例 4 化合物 4的合成

取 8克氩氧化钠溶液溶于 100ml无水乙醇，另馭 1摩尔的 5 - 氯水杨醛溶于上述含氫氣化钠乙醇溶液中，于室温下搅拌。之后再加入 5摩尔的表氯醇于室温下反应，以薄层层柝确定完全反应。经减压浓缩，浓缩液以硅胶充填的管柱分离，以己烷：乙酸乙酯= 1 ： 9 为洗脱液，得到白色粗结晶。再以己烷反复重结晶，即得纯化的 N

-[2, ( 2 , 3 —环氡基丙氣基） - 5 —氯]— 1 —苯甲醛。

取等摩尔 N— [2, ( 2, 3 -环氣基丙氡基） — 5 —氯 j— 1 — 苯甲醛与叔丁基胺，溶于 100ml 无水乙醇中，于微温下进行胺化反应。以管柱（甲醇：乙酸乙酯 = 1 : 1 ) 分离纯化，可得到固状的白色结晶，经过甲醇重结晶之后，即可得到纯化的化合物 N - [2 - ( 2 —羟基— 3 - （叔丁基氛基）丙氡基） - 5 -氯】— 1 —苯甲醛。

取 0.01摩尔 N - [2 - ( 2 -羟基 - 3 -叔丁基氨基）丙氧基- 5 ―氯】— 1 一笨甲^，加入含有 2.4毫升（ 0.02摩尔）的乙酰乙酸乙酯， 15毫升乙醇及 10毫升浓氨水的溶液加热，并于 55 °C下回流反应 15小时，将反应所得的溶液直接减压浓缩、抽干以去除乙醇，剩余的溶液加入 50毫升或饱和的碳酸溶液并以氯仿多次萃取。将所得的有机层干燥、过滤并浓缩，把得到的油层加入乙醇-盐酸混合液，然后以管柱（甲醇：乙酸乙酯 = 3 : 7 ) 分离纯化，先以乙酸乙酯柝出微黄的白色结晶，再以甲醇：乙酸乙酯 = 1： 9作反复重结晶，即可得纯化的化合物 4。

所得化合物 4的结构式为 C₂₆H₃₇0₆N₂C1，经由质谱仪分柝后所得分子量为 508.5。 'H-N IKCDCl^US-U s' ,

3XC¾) , 1.36 (m, 6H, 2xCO-OCH₂CH₃) , 2.29-2.30(d, 6H, 2X

C¾)， 2.69-2.98 (m, 2H, CH_rNH) , 3.46-3.76 ( s, 4H, 2XCO- OCHiCH .3.88- .23(m, 2H, Ar-(X¾₂), 4.27(s, 1H, CH-OH), 5.21

(s, IH, Ar-CH ) ,5.74 (br s, 1H, 可換， -NH-) , 6.67-7.54 (m, 3H,

Ar) · MS m/s: 508.5 (扫描 FAB ). 分析（CaH C ^C C, H, N. '

依照化学实验分柝数据得知化合物 4为 4 -{{2 - [2 -羟基- 3 ― (叔丁基氨基）丙氣基 ]— 5 -氯}笨基 }}- 2 , 6 —二甲基— 3 , 5 -二乙酯基— 1 , 4 —二氢吡啶。

实施例 5 化合物 5的合成

取 8克氩氣化钠溶液于 100ml无水乙醇，另取 1摩尔的 5 -氯水杨醛溶于上述含氢氣化钠乙醇溶液中，于室温下搅拌。之后再加入 5摩尔的表氯醇于室温下反应，以薄层层析确定反应完全。经减压浓缩，浓缩液以硅胶充填的管柱分离，以己烷：乙酸乙酯 = 1 : 9为洗脱液，得到白色粗结晶。再以己烷反复做重结晶，即得纯化的 N -[2 一（ 2, 3—环氣基丙氨基） - 5 -氯】— 1 —苯甲醛。

取等摩尔 N— [2— ( 2, 3 -环氣基丙氨基） — 5—氯】— 1— 苯甲醛与叔丁基胺，溶于 100ml 无水乙醇中，于微温下进行胺化反应。以管柱（甲醇：乙酸乙酯 = 1 : 1 ) 分离纯化，可得到固状的白色结晶，经过甲醇重结晶之后，即可得纯化的化合物 N - {2 - ( 2 一羟基— 3— (正丁基氨基）丙基 1- 5—氯） — 1 —苯甲醛。

取 0.01摩尔 N - {2 - （ 2 -羟基- 3 - (正丁基氨基）丙氣基）一 5 -氯}— 1 一笨甲菘，加入含有 2.4毫升（ 0.02摩尔）的乙酰乙酸乙酯， 15毫升乙醇及 10毫升浓氨水的溶液加热，并于 55 下回流反应 15小时，将反应所得的溶液直接减压浓缩、抽干以去除乙醇，剩余的溶液加入 50毫升饱和的碳钠溶液并以氯仿多次萃取。将所得的有机层干燥、过滤并浓缩，把得到的油层加入乙醇-盐酸混合液，然后以管柱（甲醇：乙酸乙酯 = 3 : 7 ) 分离纯化，先以乙酸乙酯柝出微黄的白色结晶，再以甲醇：乙酸乙酯 = 1： 9作反复重结晶，即可得纯化的化合物 5。

所得化合物 5的结构式为 C₂₆I- I₃₇0₆ N₂C1，经由质谱仪分柝后所得分子量为 508.5。

¹ H-N R (CDClj) 6:l.ll-1.22(m,7H,

N-C¾C¾CH_:t¾) ,1.22-1.29 ( , 6H, 2 X CO-OCHJCHJ ) , 2.04 (s,

6H, 2 x CH) ), 2.17-2.71 ( ra, 4 C¾- H-C¾), 3.4( m,4H,2x CO-0

CHjCH,) .3.97^1.14 (in, 2H, Ax-OCH_;) , 4.3-4.5 (m, lll.-CH-OH) ,

5.33 ( s, 1H, Ar-CH<) , 6.65-7.27 ( ra, 3H, A · MS m/s: 508.5 (扫描

FAB*)-分析（CiAA^Cl) C, H, N.

依照化学实验分析数据得知化合物 5为 4 -{{2 -[2 -羟基- 3 一（正丁基氨基）丙氧基】 - 5 氯 }苯基 }}— 2 , 6 -二甲基— 3, 5 -二乙酯基一 1， 4一二氫咬。

实施例 6 化合物 6的合成取 8克氫氣化钠溶于 100ml无水乙醇，另馭 1摩尔的 5 -氯水杨醛溶于上述含氬氣化钠乙稃溶液中，于室温下搅拌。之后再加入 5 摩尔的表氯醇于室温下反应，以薄层层柝确定反应完全。经减压浓缩，浓缩液以硅胶充填的管柱分离，以乙烷：乙酸乙酯: = 1 : 9为洗脱液，得到白色粗结晶。再以己烷反复做重结晶，即得纯化的 N - [2 一（ 2, 3—环氨基丙氡基） — 5—氯]— 1 —苯甲醛。

取等摩尔 N— [2— ( 2， 3—环氣基丙氣基） — 5 -氯】— 1 — 苯甲醛与正丁基胺，溶于 100ml 无水乙醇中，于微温下进行胺化反应。以管柱（甲醇：乙酸乙酯） == 1： 1分离纯化，可得到固状的白色结晶，经过甲醇重结晶之后，即可得纯化的化合物 N -{2 - ( 2 一羟基- 3 - （正丁基氨基）丙氨基） - 5 -氯 j - 1 -苯甲菘。

馭 0.01摩尔 N - {2 - ( 2 -羟基- 3 - (正丁基氛基）丙氣基）一 5 -氯]— 1 一笨甲醛，加入含有 2.4毫升（ 0.02摩尔）的乙酰乙酸乙酯， 15毫升乙醇及 10毫升浓氨水的溶液加热，并于 55 °C下回流反应 15小时，将反应所得的溶液直接减压浓缩、抽干以去除乙醇，剩余的溶液加入 50毫升饱和的碳酸溶液并以氯仿多次萃馭。将所得的有机层干燥、过滤并浓缩，把得到的油层加入乙醇-盐酸混合液，然后以管柱（甲醇：乙酸乙酯 = 3: 7 ) 分离纯化，先以乙酸乙酯柝出微黄的白色结晶，再以甲醇：乙醇乙酯 = 1 : 9作反复重结晶，即可得純化的化合物 6。

所得化合物 6的结构式为 C₃₁H₃₍₎0₈N₂C1 , 经由质谱仪分析后所得分子量为 602.5。

' ^lH-NMR(CDCl，） δ:】 .17-1.28 ( m, 6H,

2XCO-OCH ¾.) , 2.27-2.29 (m,6H, XC¾) , 2.50-2. »9 ( m, 4H,

C¾-N11-CU,) ,3.67-3.77 ( ra, 4H, 2 X CO-OGH₂CH, ) ,3.84 (s,3H,

C¾)， 3.85-4.14 (m, 4H, 2XAr-OC¾) , 4.26-4.33 (m, 1H, CH-

OH) ,5.3 (s, 1H, Ar-CU<) ,5.6 (brs, 1H,可置換， -NH-) _>6η\.

^{7 16} ( ^m> ⁷¾ ^Ar) · ^MS ms: 602.5 (扫描 FAB*). ^析（Q^t^O'N^Cl)

C, H, N.

依照化学实验分柝数据得知化合物 6为 4 -{{2 -[2 -羟基- 3 - （ 2 -甲氨基 - 1 -氧乙基氨基苯基）丙氣基】- 5 -氯}苯基 }} - 2, 6 —二甲基— 3， 5— —二乙酯基— 1 , 4 —二氢吡啶。

实旄例 7 化合物 7的合成

馭 8克氫氧化钠溶于 100ml无水乙醇，另取 1摩尔的 2 -氯- 4 -羟基苯甲醛溶于上述含氩氣化钠乙醇溶液中，于室温下搅拌。之后再加入 5摩尔的表氯醇于室温下反应，以薄层层析确定反应完全。经减压浓缩，浓缩液以硅胶充填的管柱分离，以乙烷：乙酸乙酯 = 1 : 9为洗脱液，得到白色粗结晶。再以乙烷反复做重结晶，即得纯化的 N - [4 - ( 2 , 3 —环氣基丙氣基） — 2 —氯〗— 1 —苯甲醛。

取等摩尔 N— [4 — ( 2 , 3 —环氣基丙氣基） - 2 -氯 j- 1 - 笨甲醛与 2 —甲氣基- 1 -氧乙基氨基苯，溶于 100ml无水乙醇中，于微温下进行胺化反应。经搅拌过夜后静置，可得到固状的白色结晶，经过甲醇重结晶之后，即可得纯化的化合物 N -{4 - ( 2 -羟基 - 3 - ( 2 —甲氣基- 1 -氨乙基氛基笨基）丙氡基） - 2 -氯】 — 1 —笨甲窿。

取 0.01摩尔 N— {4— ( 2 —羟基— 3— ( 2 —甲氣基一 1 一氣乙基氨基笨基）丙氧基） - 2 -氯 }- 1 -笨甲窿加入 2.4毫升（ 0.02 摩尔） 2倍摩尔数的乙酰乙酸乙酯， 15毫升乙醇及 10毫升浓氛水的溶液加热，并于 55 " 下回流反应 15小时，将反应所得的溶液直接减压浓缩、抽干以去除乙醇，剩余的溶液加入 50毫升铯和的碳酸钠溶液并以氯仿多次萃馭。将所得的有机层干燥、过滤并浓缩，把得到的油层加入乙醇-盐酸混合液，然后以管柱（甲醇：乙酸乙酯 = 3 : 7 ) 分离纯化，先以乙酸乙酯柝出微黄的白色结晶，再以甲醇：乙酸乙酯 = 1： 9作反复重结晶，即可得纯化的化合物 7。

所得化合物 7的结构式为 C₃₁H₃₍₎0₈N₂C1 , 经由质谱仪分柝后所得分子量为 602.5。 'H-_NMR_{(CDCL3) S}丄 .L^^H,

2XC0-0C¾C¾) , 2.04 (_m, 611, 2xC ) , 2,29-2.50 (_m, _4H,

C -NH- C¾)、 3.82-3.86 (_m, 411, 2 x CO-OCH₂CH, ) , 3.87-3.98

(m, 3H; OCUJ , 4.06-4.24 (m, 411, 2χΑτ-Ο0¾) ' 4.6 (_m> JH, CH-OH) ,5.31. (s.lH, Ar-CH<) ,5.75 (brs.lH,可置換, -NH-) ' 6.73-6.98 ( m, 7H, Ar ) . MS m/s: 602.5 (扫描 FAB'). 分析

C, H， N. 依照化学实验分柝数据得知化合物 7为 4 -{{N -{4 -[2 -羟基- 3 - ( 2—甲氧基 - 1 -氣乙基氛基苯基）丙氡基 ]- 3 -氯}苯基}}— 2, 6—二甲基一 3, 5 -二乙酯基一 1 , 4—二氢吡啶。

实施例 8 化合物 8的合成

取 8克氩氧化钠溶于 100ml无水乙醇，另取 1摩尔的 5 -硝基水杨醛溶于上述含氢氣化钠乙醇溶液中，于室温下搅拌。之后再加入 5摩尔的表氯醇于室温下反应，以薄层层柝确定反应完全。经减压浓缩，浓缩液以硅胶充填的管柱分离，以己烷：乙酸乙酯 = 1 : 9为洗脱液，得到白色粗结晶。再以乙烷反复重结晶，即得纯化的 N - [2 一（ 2， 3—环氣基丙氣基） — 5—硝基 }— 1 -笨甲醛。

取等摩尔 N— [2— ( 2, 3 -环氣基丙氡基） - 5—硝基 }一 1 -苯甲醛与叔丁基胺，溶于 100ml 无水乙醇中，于微温下进行胺化反应。以管柱（甲醇：乙酸乙酯 = 1： 1 ) 分离纯化，可得到固状的白色结晶，经过甲醇重结晶之后，即可得纯化的化合物 N -{2 - ( 2 -羟基- 3 - (正丁基氨基）丙氣基） - 5 -硝基 } - 1 -苯甲窿。

取 0.01摩尔 N - {2 - ( 2 -羟基- 3 - (正丁基氛基）丙氣基） - 5—硝基 }一 1 —苯甲醛，加入含有 2.4毫升（ 0.02摩尔）的乙酰乙酸乙酯， 15毫升乙醇及 10毫升浓氛水的溶液加热，并于 55 °C下回流反应 15小时，将反应所得的溶液直接减压浓缩、抽干以去除乙醇，剩余的溶液加入 50毫升饱和的碳酸钠溶液并以氯仿多次萃取。将所得的有机层干燥、过滤并浓缩，把得到的油层加入乙醇-盐酸混合液，然后以管柱（甲醇：乙酸乙酯 = 3: 7 ) 分离纯化，先以乙酸乙酯析出微黄的白色结晶，再以甲醇：乙酸乙酯 = 1： 9作反复重结晶，即可得纯化的化合物 8。

所得化合物 8的结构式为 C₂₆H₃₇0₈N₃, 经由质谱仪分柝后所得分子量为 519。 'H-NMRCCDCl^l.M-l.^ (s, 9H, 3

XCH₃),1.17-1.24(_m, 6H.2X CO-OCH₂C¾ ), 2.05( d, 6H,2 X C ) .

2.33-2.34 Cm, 4H, C¾-NH) , 2.85-2.98 (m, 4H.2XCO-0 CH,CH₃),

3.98· .Π( m, 2H, Ar-OCH₂), 4.24-4.26 (₅, 1H, CH-OH), 5.39(_s, 1H，

Ar-CH<) ' 6.82-8.H Cm, 3H, Ar) . MS m/s: 519 ( 扫描 FAB*). 分析

依照化学实验分析数据得知化合物 8为 4 - U2 -[2 -羟基- 3 -(正丁基氨基）丙氣基】— 5 -硝基]苯基 }}- 2 , 6 -二甲基 - 3， -二乙酯基— 1 , 4 —二氫吡啶。

实施例 9 化合物 9的合成

取 8克氢氨化钠溶于 100ml无水乙醇，另取 1摩尔的 5 -硝基水杨醛溶于上述含氢氧化钠乙醇溶液中，于室温下搅拌。之后再加入摩尔的表氯醇于室温下反应，以薄层层柝确定完全反应。经减压浓缩，浓缩液以硅胶充填的管柱分离，以己烷：乙酸乙酯 = 1 : 9为洗脱液，得到白色粗结晶。再以己烷反复重结晶，即得纯化的 N - [2 一（ 2， 3 -环氧基丙氣基） — 5—硝基 }— 1 —笨甲醛。

取等摩尔 N— [2 — ( 2， 3 —环氧基丙氧基） — 5 —硝基 }- 1 -苯甲窿与 2 -甲氧基- 1 -氣乙基氛基笨，溶于 100ml无水乙醇中，于微温下进行胺化反应。经搅拌过夜后静置，可得到固状的白色结晶，经过甲醇重结晶之后，即可得纯化的化合物 N -{2 - ( 2-羟基- 3 -[2 —甲氣基- 1 -氣乙基氨基笨基）丙氧基】- 5 -硝基 } — 1 —苯甲醛。

取 0.01摩尔 N— [2— ( 2—羟基— 3— ( 2—甲氣基— 1 —氣乙基氨基笨基）丙氣基） - 5 -硝基 }- 1 -苯甲醛，加入含有 2.4 毫升（ 0.02摩尔）的乙酰乙酸乙酯， 15毫升乙醇及 10毫升浓氛水的溶液加热，并于 55 " 下回流反应 15小时，将反应所得的溶液直接减压浓缩、抽干以去除乙醇，剩余的溶液加入 50毫升饱和的破酸钠溶液并以氯仿多次萃馭。将所得的有机层干燥、过滤并浓缩，把得到的油层加入乙醇-盐酸混合液，然后以管柱（甲醇：乙酸乙酯 = 3 : 7 ) 分离纯化，先以乙酸乙酯析出微黄的白色结晶，再以甲醇：乙酸乙酯 = 1 : 9作反复重结晶，即可得纯化的化合物 9。

所得化合物 9的结构式为 C₃₁H₃₅O₁₀N₃，经由质谱仪分柝后所得分子量为 609。

'H-NMR(CDCI₃) 5:1.14-1.28 (m, 6H, 2

XCO-OCHJCHJ) , 2.04 (s, 6H,-2XC¾) , 2.22-2.33 (m, 4H, Cilr

； NH- CH , 3.40-3.60 (m, 4H,2xCO-OCH₂CH,) ,3.83-3.85 (s, 3H,

OCH, ), 3.99-4.13 (m,4H, 2 Ar-OC¾ ) , 4.3 ( m, 1H, CH-OH ),5.41

(s, lH,Ar-CU<),6.5(brs, lH, 可置換， -NH-), 6.82-8.12(ra, 7H,

Ar) · MS mis: 609 (扫描 FAB". 分析 (Ο₃₁Η ₅Ο₁₀Ν) C， H, N. 依照化学实施分柝数据得知化合物 9为 4 - {{2 - [2 -羟基- 3 - （ 2 -甲氣基- 1 -氣乙基氛基笨基）丙氣基 j- 5 -硝基 }笨基 }} — 2, 6 —二甲基— 3 , 5 —二乙酯基— 1 , 4 —二氢^啶。

实施例 10 化合物 10的合成

取 8克氬氣化钠溶于 100ml无水乙醇，另取 1摩尔的 4 -羟基 - 3 -甲氣基- 1 -苯甲醛溶于上述含氢氧化钠乙醇溶液中，于室温下搅拌。其后比照实施例 3的方法，再加入 5摩尔的表氯醇于室温下反应，以薄层层柝确定反应完全。添加肼水合物、 2倍摩尔数的乙酰乙酸乙酯可得到固状的白色结晶，经过甲醇重结晶之后，即可得纯化的化合物 10。

所得化合物 10 的结构式为 C₃₂H₄₂0₉N₂，经由质谱仪分柝后所得分子量为 598。化合物 10为 4 -{{N —[3 - [2 一羟基— 3 — ( 2 -甲氣基- 1 -氧乙基氛基苯基）丙氣基】- 4 -甲氧基】苯基 }}- 2, 6 —二甲基— 3, 5—二乙酯基— 1， 4—二氢吡啶。 (57)摘要本发明涉及具有愈创木氨基丙醇胺及苯氡基丙醇胺结构的二氫吡啶衍生物，即以式 I为主结构的化合物，其中各取代基如说明书中所述。其具备持续性血压下降、竟争 β -肾上腺素受体及钙离子拮抗剂活性、产生血管松驰作用、钙离子通道阻断及 β肾上腺素受体阻断等活性。

坡伐克达牙斯文加士其尼兰别拉布尼里

联尼克尔斯斯达亚克亚兰夫昂韦

坦坦斯邦亚和

坦多巴

以下内容仅供参考

在按照 PCT所公布的国际申请小册子首页上所采用的 PCT成员国国家代码如下

权利要求一种具有愈创木氣基丙醇胺及笨氣基丙醇胺结构的二氢吡啶衍

, 即以式 I为主结构的化合物，其中 R选自以下四种之一，

而可任意选自卤素、二氣化氮、饱和 1 - 6碳直链烷基、不饱和 1 - 6碳直链烷基之一， R₂可任意选自氢、甲基、

之一； R₃、 R₄可任意选意自饱和 1 - 6碳直链烷基、不饱和 1 - 6 破直链烷基之一， R₅可任意选自羟基、饱和 1 - 6碳直链烷基、不饱和 1 - 6破直链烷基之一。

2. 一种具备竟争 β肾上腺素受体活性的药物组合物，其以式 I化合物为主成分，必要时添加各种赋形剂或稀释剂。

3. 一种具有钙离子通道阻断剂活性的药物组合物，其以式 I 化合物为主成分，必要时添加各种赋形剂或稀释剂。

4. 一种具有持续性血压下降活性的药物组合物，其以式 I 化合物为主成分，必要时添加各种赋形剂或稀释剂。

5. 一种具有血管松驰作用活性的药物组合物，其以式 I化合物为主成分，必要时添加各种賦形剂或稀释剂。

6. 一种生产具有愈创木氣基丙醇胺及笨氣基丙醇胺结构的二氢吡啶衍生物的方法，包括将已取代的苯甲 ^溶于氫氧化钠乙醇溶液，加入表氯醇反应后，进行胺化反应，加入酯化合物、乙醇、浓氨水进行回流、直接减压浓缩、去除乙醇、剩余的溶液加入饱和的破酸盐溶液，以氯仿萃馭后，以管柱分离纯化，反复重结晶，获得化合物。 7. 如权利要求 6所述的生产方法，可选用丁基胺基、 2 -甲氨基 - 1 -氣乙基氨基苯进行胺化反应。

Claims

具有愈创木氧基丙醇胺及

苯氧基丙醇胺结构的二氢吡啶衍生物发明领域

本发明涉及一

(guaiacoxypropanolamine)

( phenoxypropanolamine ) 结构的二氢吡啶衍生物，具备持续性血压下降、竟争 β-肾上腺素受体及钙离子拮抗剂、产生血管松弛作用、及钙离子通道阻断及 β-肾上腺素受体阻断等活性。

发明背景

重度或恶性高血压病人使用硝苯地平（ nifedipine ) 可迅速降低其血压，但作用太快或太强则有心搏过速的副作用出现。后来发现在施予血管扩张剂的同时给予病人 β -肾上腺素阻断剂，则可抑制因交感神经兴奋所引发的心搏过速作用。临床上的报告已经证明在心绞痛及高血压的治疗上，联合使用钙离子拮抗剂及 β -肾上腺素阻断剂的治疗劝效优于使用单一药物治疗的效杲，参见 Fitzsimons , T. J. 于 1987年高血压杂志（ J. Hypertens. ) , 第 5卷第 S11 — S15页。

对于大部分原发性高血压的病人，其周边血管阻力通常比正常人为高。虽然直接血管扩张剂可以降低阻力，但这些药物却会产生一些不良的副作用，例如：反射性心脏刺激导致感压受体活化，并通过血管收缩、心搏过速及心脏输出量的增加来减少降压作用。已有发明报告指出 β -肾上腺素阻断剂可抑制因施予血管扩张剂而导致交感神经的兴奋所引起的心搏过速。

硝苯地平是一种具有二氢吡啶环的周边血管扩张剂，具有对心脏血管的作用，包括血管扩张，其作用是通过直接抑制血管平滑肌细胞膜钙离子内流产生的。理论上，同时合并使用钙离子拮抗剂及 β - 肾上腺素阻断剂可能会产生两种分别不同的心脏抑制作用。然而已有报告指出，硝苯地平对高血压患者会增加心跳及肾素，而这些增加的作用会被同时施予普萘洛尔（ propranolol ) 而被抑制。再者，也同时观察到在血压方面会产生协同作用，使血压降得更低。确认— -本