WO1999047546A1 - Derives d'hydroxyproline - Google Patents

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WO1999047546A1
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salt
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organ
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PCT/JP1998/003993
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Akira Yagi
Takao Shida
Kokushin Ryu
Taiichi Kaku
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Japan Bioproducts Ind. Co., Ltd.
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    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
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    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
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    • C07K5/12—Cyclic peptides with only normal peptide bonds in the ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Definitions

  • the present invention relates to an organ or tissue comprising a hydroxyproline derivative or a salt thereof, a therapeutic agent for tissue damage containing the hydroxyproline derivative or a salt thereof as an active ingredient, and an organ or tissue comprising administration of the hydroxyproline derivative or a salt thereof.
  • the Filatov's method is a tissue treatment method using human placental hydrolyzate, which is said to regenerate elastic fibers and muscle fibers of the blood vessel wall, and is used for chronic diseases such as asthma, rheumatism and hepatitis. It is used to treat intractable diseases or prevent aging.
  • human placenta hydrolyzate contains a physiologically active substance, but its nature is unknown. Due to such problems, the present inventors have separated and purified human placental hydrolyzate in order to identify a physiologically active substance in human placenta hydrolyzate, and have cell proliferating action, cytoprotective action, etc. Hide mouth A xyproline derivative was found.
  • the present invention has been made based on such findings, and it is an object of the present invention to provide a novel hydroxyproline derivative having an action of promoting cell proliferation and a therapeutic agent for organ / tissue disorders containing the hydroxyproline derivative. With the goal. Disclosure of the invention
  • the compound of the present invention is a hydroxyproline derivative represented by the following general formula (1) or (2) or a salt thereof.
  • R represents a hydrogen atom or an alkyl group, and the alkyl group has a hydroxyl group, an amino group, a carboxyl group, an aminocarbonyl group, a guanidino group, a heterocyclic group, a mercapto group, an alkylthio group, or a hydroxyl group. (It may be substituted with a certain phenyl group.)
  • the therapeutic agent for organ and tissue disorders of the present invention contains a hydroxyproline derivative represented by the following general formula (1), (2) or (3) or a salt thereof as an active ingredient. Become.
  • the present invention provides a treatment for organ and tissue disorders comprising administering an effective amount of the hydroxyproline derivative represented by the above general formula (1), (2) or (3) or a salt thereof.
  • the present invention relates to a method and a use of a hydroxyproline derivative represented by the general formula (1), (2) or (3) or a salt thereof for producing a therapeutic agent for organ / tissue disorders.
  • FIG. 1 is a diagram showing the results of fractionation of human placenta hydrolyzate (Runinneck, trade name, manufactured by Nippon Biologicals Ltd.) by HPLC (A) and the cell proliferation activity (B) of each fraction.
  • FIG. 2 is a diagram showing the results of fractionation of Fr.1 by HPLC (A) and the cell proliferation activity of each fraction (B).
  • FIG. 3 is a diagram showing the results of fractionation of Fr.i-3 by HPLC (A) and the cell proliferation activity of each fraction (3).
  • FIG. 4 is a graph showing the cell proliferation activity of the compound of the present invention on BHK-21 cells.
  • FIG. 5 is a graph showing the measurement results of serum liver hepatic enzyme (GPT) of ANIT (a-naphthylisothiocyanate) -treated rats to which the compound of the present invention was administered.
  • FIG. 6 is a graph showing the results of measurement of hepatic escape enzyme (ALP) in serum of ANIT-treated rats to which the compound of the present invention was administered.
  • GPT serum liver hepatic enzyme
  • ALP hepatic escape enzyme
  • FIG. 7 is a graph showing the results of measurement of liver hepatic enzyme (LAP) in serum of A- ⁇ 'IT treated rats to which the compound of the present invention was administered.
  • LAP liver hepatic enzyme
  • FIG. 8 is a graph showing the results of measurement of hepatic escape enzyme ( ⁇ -Gcho P) in serum of AXIT-treated rats to which the compound of the present invention was administered.
  • FIG. 9 is a graph showing the measurement results of serum bilirubin (BIL) in A- ⁇ 'IT treated rats to which the compound of the present invention was administered.
  • BIL serum bilirubin
  • FIG. 10 is a section showing the measurement results of liver hepatic enzyme (GOT) when the compound of the present invention or HGF was added to the primary culture rat hepatocyte medium treated with carbon tetrachloride.
  • GOT liver hepatic enzyme
  • FIG. 11 is a graph showing the results of measurement of hepatic prolapse enzyme (LDH) when the compound of the present invention or HGF was added to the primary culture rat hepatocyte medium treated with carbon tetrachloride. Best mode for carrying out the invention
  • R is a hydrogen atom or an alkyl group:
  • the alkyl group is preferably a lower alkyl group having 1 to 7 carbon atoms. , Straight chain! ;, Any of the branched types: specifically, meth, dityl ,: -fucopi, iso-fucopi, -buti, iso-buti, [er: -buichi, -one-pinch-, -hexiso, i 2, 2-trimethyl propyl, 2-methyl S-pi, 1, i-dimethyl butyl, etc. are shown.
  • Such an alkyl group may be a hydroxyl group, an amino group, a carboxyl group, an amino group, a guanidino g, a heterocyclic group, a butyl group, an alkylthio S or a phenyl group having a hydroxyl group as a substituent.
  • the heterocyclic group may be, for example, imidazolyl, indigo, etc.
  • the aralkylthio group may be, for example, methylthio, ethylthio, etc., and may have a hydroxyl group.
  • Certain funinyl groups include, for example, funinyl and 4-hydroxyfuninyl.
  • the salts of the compounds represented by the general formulas (1), (2) and (3) are not particularly limited as long as they are pharmacologically acceptable and non-toxic.
  • the inorganic acid ⁇ ⁇ acid ⁇ , hydrobromide, phosphoric acid, folic acid, etc .:, organic acid salts (acetate, disuccinic acid ⁇ , malenoic acid ⁇ , fumarate, Malate salt, tartrate salt, etc.), base addition salt, and salt with a pyrotechnic salt (for example, sodium salt, potassium salt, calcium salt, 7monium salt, etc.), and organic base ⁇ (Eg, triethylamine salt, salt with arginine, etc.).
  • the compound represented by the general formulas (1), (2) and 2 has a -carbon and a cyclic structure in the molecule ⁇ , and is based on the asymmetric carbon and -structure, All of the isomers and mixtures thereof are included in the present invention.
  • the compound represented by the general formula (6) is a hydroxyproline (4) in which a hydroxyl group and a carboxyl group are respectively protected by a conventional protecting group, and an amino group by a conventional protecting group.
  • Can be obtained by condensation with an ⁇ -amino acid compound (5) protected by Such condensation can be carried out by a method using a condensing agent such as 30-port hexylcarbodiimide, an active esterification method, or the like. It can be carried out according to any conventional amidation method.
  • Compounds (4) and (5) having a protecting group can also be prepared according to a conventional method.
  • Examples of the above-mentioned ⁇ -amino acid compound include, for example, serine, alanine, arginine, aspartic acid, asparagine, glutamic acid, glutamine, cysteine, glycine, histidine, leucine, isoleucine, lysine, methionine, norolin, orylin.
  • Examples include ditin, threonine, phenylalanine, tyrosine, and tributan.
  • the compound of the present invention represented by the general formula (1) can be obtained by subjecting the thus-obtained compound represented by the general formula (6) to an elimination reaction of a protecting group according to a conventional method.
  • the compound represented by the general formula (6) is first subjected to an elimination reaction of a carboxyl group-protecting group and an amino group-protecting group, and then cyclized according to the above-mentioned amidation method.
  • the compound of the present invention represented by the general formula (3) can be obtained by subjecting the protecting group to an elimination reaction.
  • the compounds represented by the general formulas (2) and (3) can be converted from the compound represented by the general formula (7) and the compound represented by the general formula (8) by the method of Reaction Scheme 12.
  • the compound represented by the formula (9) is obtained, and the compound can be obtained by treating the compound in the same manner as in the cooling step formula 11.
  • the amidation reaction, the cyclization reaction and the like in this reaction scheme can be carried out in the same manner as in Reaction scheme-1.
  • the reaction schemes 1 and 2 depending on the method of the amidation reaction and the cyclization reaction used, the reaction can be carried out without protecting the hydroxyl group.
  • the compounds of the present invention represented by the general formulas (1), (2) and (3) have a cell proliferation activity and a cell protection activity as shown in the examples described later, and are used for organs and tissues affected by the disorder. It is effective in repairing and regenerating cells, and has a remarkable effect especially on the liver (hepatocytes). Therefore, the compound is useful as an agent for treating organ and tissue disorders in various mammals including humans (eg, porcupine, pig, porcupine, hidge, rabbit, monkey, dog, cat, etc.).
  • Specific examples of the expected effects of the compounds of the present invention include:
  • Deviating enzymes from the liver eg, G ⁇ T, GPT, ⁇ -GTP, ALP, L AP, LDH, etc.
  • liver fibrosis Prevent liver fibrosis, inhibit liver fibrous tissue growth, promote absorption of proliferated liver fibrous tissue and interstitial connective tissue,
  • Tissue respiration activation activation of liver succinate dehydrogenase activity, promotion of tissue respiration, activation of hepatocyte metabolism
  • the therapeutic agent for organ / tissue disorders of the present invention is based on the above-mentioned effects and effects, and contains a compound represented by the general formula (1), (2) or (3) or a salt thereof as an active ingredient. And used as a therapeutic agent for humans and mammals. In particular, it is suitably used for diseases based on liver damage. More specifically, examples include suppression of progression from hepatitis to cirrhosis (type A and type B cirrhosis), suppression of progression from cirrhosis to liver cancer, suppression of liver fibrosis, suppression of fatty liver, and the like.
  • the therapeutic agent of the present invention comprises a compound represented by the general formula (1), (2) or (3) or a salt thereof, which is converted into an appropriate pharmacologically acceptable additive (for example, a carrier, a vehicle or a vehicle).
  • an appropriate pharmacologically acceptable additive for example, a carrier, a vehicle or a vehicle.
  • Preparations, diluents, etc. to prepare pharmaceutical preparations such as powders, granules, tablets, capsules, injections, ointments, etc., which can be orally or parenterally Is administered.
  • An effective amount of the compound represented by the general formula (1), (2) or (3) or a salt thereof is compounded in the above preparation.
  • the dosage is adjusted appropriately according to the administration route, symptoms, patient weight or age, etc., but usually 0.5 to 100 mg Zkg per day is administered once or in several divided doses .
  • Industrial applicability for example, a carrier, a vehicle or a vehicle.
  • the compounds of the present invention have cell proliferation activity, cytoprotection, and the like, and are useful for repairing and regenerating damaged organs and tissues.
  • the therapeutic agent for organ and tissue disorders of the present invention comprises the compound of the present invention having the above-mentioned properties as an active ingredient. It is useful for treating organ and tissue disorders, especially liver disorders.
  • the human placenta hydrolyzate used was Laennec (trade name, manufactured by Japan Biologics).
  • Laennec is a preparation prepared by defatting human placenta with acetone and hydrolyzing with hydrochloric acid.
  • Detection wavelength 210, 260 nm
  • the cell proliferation activity of the sample was measured by measuring the proliferation activity of BHK (baby hamster kidney) -21 cells according to a conventional method (see Planta Med. 62, 115-118, 1996, etc.).
  • BHK—21 cells (1 ⁇ 10 4 cells) were transformed into 5% fetal serum When the Eagle minimum medium (Eagle 's minimum essenti al medium ) containing 2 mM glutamine, sample (mu g / m 1 medium) with 3 7 ° C, p H 7. 2, 5% C_ ⁇ 2 / air After culturing for 3 days, the cells were treated with trypsin and 0.02% EDTA, and the cells were removed. A certain amount of the cells was stained with 0.4% trypan blue, and the number of viable cells was counted. ) was set to 100% and the respective activities were compared and examined.
  • Example 1 Example 1
  • the aqueous solution of Laennec was separated into three fractions (Fr. 1-3) by HP LC using three eluents. The results are shown in FIG. 1A.
  • Fr. 1 to 3 cell proliferation activity on BHK-21 cells was measured. The results are shown in FIG. 1B. As shown in FIG. 1B, proliferative activity was observed in Fr.
  • Fr. 1 to 10 the cell proliferation activity against BHK-21 cells was measured. The result is shown in FIG. 2B. As shown in FIG. 2B, proliferative activity was observed at low concentrations (Dose: 6.25, 12.5, 25 ⁇ ) in Fr. Since the activity was observed in Fr. 1 to 3 above, the fraction was further subjected to HP LC, and three fractions (Fr 1-3. 1 to 1-3-3). The results are shown in FIG. 3A.
  • the growth activity was observed at low concentrations (Dose: 6.25, 12.5, 25 ⁇ g). Based on the above results, while monitoring with HP LC, the fraction with a retention time of 3.1 to 3.3 minutes in which cell growth activity was observed was extracted from Laennec (lyophilized 62.7 g) with Cosmosil 75C 18 -PREP. (Column: 4.6 ID x 150 thighs, eluted with water) and fractionated (9.4 g), then S-marked hadex LH-20 column chromatography Compound 1 (6.2 mg) and compound 2 (7.6 mg) were obtained by separation with a mat (column: 3 ID x 85 twigs, eluted with water).
  • Fig. 4 shows the results. As shown in FIG. 4, compound 2 exhibited cell proliferation activity.
  • the above compound 1 was found to be peracil as a result of instrumental analysis.
  • L-serine and trans-hydroxyproline were identified by Chiral HP LC analysis of 5 acid hydrolyzate.
  • compound 2 is represented by the following general formula (3-1): 3′-hydroxydimethyl-41-hydroxypyrrolido [1,2-f] 2 ′, ⁇ ′-pirazazinedione (3, ⁇ Hydroxymethyl-4-hydroxypyrrolido [l, 2-f] 2 ',-piperazinedione).
  • ⁇ -naphthylisothiocyanate 50 mg / kg (solvent: olive oil) 0.5 hours before intraperitoneal administration and 8, 24, 36, 46 hours after administration in rats Then, 1.36 or 6.25 mg Zkg (solvent: physiological saline) of the mouth mouth xip mouth phosphorus derivative of the present invention was injected into the penis vein (0.25 ml, iv) through 6.25 or 25. mg / kg was orally administered (2.0 Oml, po).
  • Blood is collected from the abdominal aorta 47 hours after ANIT treatment, centrifuged (3500 rpm, 15 minutes), and liver feSft enzyme in the collected serum GPT glutamic—pyruvic transaminase ⁇ ALP lalkalineph osphatase), LAP (lactate dehydrogenase) 3 ⁇ 4t ⁇ -GTP ( ⁇ -glutamy ltranferase) concentration and pyrilrubin (bilirubin, BIL) concentration were measured using each measurement kit (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.).
  • a compound of the formula (3) wherein R is a hydroxymethyl hereinafter referred to as “Hyp Ser”
  • a compound of the formula (2) where R is a hydroxymethyl (Hyp Ser) Ser 0H The measurement results are shown in Fig. 5 (GPT), Fig. 6 (ALP), Fig. 7 (LAP), Fig. 8 ( ⁇ -GTP), and Fig. 9 (BIL).
  • the measured values in the figure are the soil standard error of the mean of three animals per group. The significance test was performed using the student t-test. * Means p ⁇ 0.05 and ** means p ⁇ 0.01 for AN I.
  • Hepatocytes were separated by in situ collagenase perfusion according to the method of Nakamura et al. (“Primary culture hepatocyte experiment method”, published by Gakkai Shuppan Center (Japan), 1987, pp. 29). The obtained free hepatocytes (survival rate 88-93%) were diluted to 2.5 ⁇ 10 s cells nom 1 with a medium (WE medium, containing 5% bovine serum) and manufactured by Corning Incorporated.
  • a medium WE medium, containing 5% bovine serum
  • 0.5 ml was added to a 24-well culture plate and cultured at 37 ° C for 24 hours. Then, the medium was replaced with a serum-free medium, 5 mM carbon tetrachloride (final concentration) was added, and each concentration of the hydroxyproline derivative (Hyp Ser and Hyp Ser OH) was added, and the cells were further cultured for 24 hours. Thereafter, the medium was collected, and the concentrations of GOT (glutamic oxaloacetic transaminase) and LDH (lactic dehydrogenase) in the medium were measured using an enzyme assay kit (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). A similar test was carried out using hepatocyte growth factor (HGF), which is known to have a proliferative and protective effect on spores.
  • HGF hepatocyte growth factor
  • test results are shown in Figure 10 (GOT) and Figure 11 (LDH).
  • the measured values in the figure are the standard error of the mean of three samples. Significance test is performed by student t-test. * Means p ⁇ 0.05 and p ⁇ 0.01 for Nintrol.
  • the addition of the hydroxyproline derivative of the present invention reduces the amount of enzyme that escapes from the liver, and the hydroxyproline derivative of the present invention has a hepatocyte protective effect. There was found.

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Description

^田 ドロキシプロリン誘導体 技術分野
本発明はハイ ドロキシプロリン誘導体又はその塩、 ハイ ドロキシプロリ ン誘導体又はその塩を有効成分として含有する臓器 ·組織障害治療剤及び ハイ ドロキシプロリン誘導体又はその塩を投与することからなる臓器 ·組 織障害の治療法に関する。 背景技術
従来、 ヒト胎盤及びその水解物には種々の生理活性物質が含まれている ことが知られている。 例えば、 フィラトフ法（Fi latov' s method)はヒト胎 盤水解物を用いた組織治療法で、 血管壁の弾力線維及び筋線維を再生招来 させるといわれており、 喘息、 リウマチ、 肝炎などの慢性難治性疾患の治 療又は老化防止などに用いられている。
上述のように、 ヒト胎盤水解物には生理活性物質が含まれていると推察 されるが、 その本態は不明である。 このような問題から、 本発明者等は、 ヒト胎盤水解物中の生理活性物質を同定するために、 ヒ卜胎盤水解物を分 離 ·精製したところ、 細胞増殖作用、 細胞保護作用などを有するハイ ド口 キシプロリン誘導体を見出した。
本発明はかかる知見に基づいてなされたもので、 本発明は細胞増殖を促 進する作用を有する新規なハイ ドロキシプロリン誘導体及びハイ ドロキシ プロリン誘導体を含有する臓器 ·組織障害治療剤を提供することを目的と する。 発明の開示
本発明の化合物は、 下記一般式 （ 1 ) 又は （ 2 ) で表されるハイ ドロキ シプロリン誘導体又はその塩である。
Figure imgf000004_0001
(1) (2)
(式中、 Rは水素原子又はアルキル基を示し、 当該アルキル基は水酸基、 アミノ基、 カルボキシル基、 ァミノカルボニル基、 グァニジノ基、 複素環 式基、 メルカプト基、 アルキルチオ基又は水酸基を有することのあるフエ ニル基で置換されていてもよい）
また、 本発明の臓器 ·組織障害治療剤は、 下記一般式 （ 1 ) 、 （2) 又 は （3 ) で表されるハイ ドロキシプロリン誘導体又はその塩を有効成分と して含有することからなる。
HO
Figure imgf000004_0002
(式中、 Rは前記と同じ）
更に、 本発明は、 上記の一般式 （ 1 ) 、 （2) 又は （3 ) で表されるハ イ ドロキシプロリン誘導体又はその塩の有効量を投与することからなる臓 器 ·組織障害の治療法、 及び臓器 ·組織障害治療剤を製造するための一般 式 （ 1 ) 、 （2) 又は （3) で表されるハイ ドロキシプロリン誘導体又は その塩の使用に関する。
なお、 上記の一般式 （ 1 ) 、 （ 2) 又は （ 3) で表されるハイ ドロキシ プロリン誘導^において、 Rがハイ ド Πキシメチル基である 合物が好適 に使用される。 図面の簡単な説明
図 1は、 ヒト胎盤水解物 （ラニンネック、 商品名、 日本生物製 ¾社製） を H P LCで分画した結果 （A) 及び各画分の細胞増殖活性 （B) を示す 図である。
図 2は、 F r. 1 を H P L Cで分画した結果 （A) 及び各画分の細胞增 殖活性 （B) を示す図である。
図 3は、 F r. i — 3を H P L Cで分画した結果 （A) 及び各画分の細 胞増殖活性 (3) を示す図である。
図 4は、 本発明の化合物の B HK— 2 1細胞に対する細胞増殖活性を示 す図である。
図 5は、 本発明の化合物を投与した AN I T ( a-naphthylisothiocyana te)処理ラッ卜の血清中肝逸脱酵素（GPT) の測定結果を示す図である。 図 6は、 本発明の化合物を投与した AN I T処理ラッ 卜の血清中肝逸脱 酵素（AL P)の測定結果を示す図である。
図 7は、 本発明の化合物を投与した A -\' I T処理ラッ 卜の血清中肝逸脱 酵素（LAP)の測定結果を示す図である。
図 8は、 本発明の化合物を投与した AX I T処理ラッ 卜の血清中肝逸脱 酵素（ γ— G丁 P )の測定結果を示す図である。
図 9は、 本発明の化合物を投与した A -ヽ' I T処理ラッ 卜の血清中ビリル ビン（B I L)の測定結果を示す図である。
図 1 0は、 四塩化炭素処理した初代培養ラッ 卜肝細胞培地に本発明の化 合物又は HGFを添加したときの肝逸脱酵素（GOT)の測定結果を示す区 である。
図 1 1は、 四塩化炭素処理した初代培養ラッ ト肝細胞培地に本発明の 合物又は H G Fを添加したときの肝逸脱酵素（ L D H )の測定結杲を示す ϋ である， 発明を実旌するための最良の形態
上記 一 55式 （ 1 ) 、 ί 2； 及び ； 3 ' で表される 合 feにおいて、 R 水素原子又はアルキル基である： 当該ア キル基と ては炭素数 I〜7 の低級アルキル基が好ましく、 直鎖！;、 分岐型のいずれでもよ ： 具体的 に メチ 、 二チル、 ： ーフコピ 、 iso—フコピ儿、 —ブチ 、 iso— ブチ 、 [er:—ブチ儿、 -一ペンチ-、 —へキシソし、 i . 2 , 2— 卜リ メチルブロピル、 2—メチ几ブ Sピ^、 1 , i ージメチルブ 1 ピル等が例 示される。
かかるアルキル基は置換基として、 水酸基、 アミノ基、 カルボキシル基、 アミノ 刀儿 ニル基、 グァニジノ g、 複素澴式基、 ル ブ卜基、 アルキ ルチオ S又は水酸基を有する二とのあるフニ二ル基を有していてもよく、 複素 ¾式基としては例えばィ ミダゾリル、 イ ン ドリ儿などが^示され、 ァ ルキルチオ基としては例えばメチルチオ、 ェチルチオなどが^示され、 水 酸基を有することのあるフニニル基としてはフニニル、 4一ハイ ドロキシ フニニルなどが例示される。
一般式 （ 1 ) 、 （ 2 ) 及び （ 3 ) で表される化合物の塩としては、 薬理 学的に許容され得る無毒性のものであれば特に制限されず、 例えは'、 酸付 加塩としては、 無機酸との^ (^酸^、 臭化水素酸塩、 リン酸 、 流酸塩 等： 、 有機酸との塩 （酢酸塩、 二ハク酸^、 マレノ ン酸^、 フマール酸塩、 リンゴ酸塩、 酒石酸塩等） などが挙げられ、 塩基付加塩こして 、 焦機塩 基との塩 （例えば、 ナトリウム塩、 カリウム塩、 カルシウム塩、 7ンモニ ゥム塩等） 、 有機塩基との^ (例え 、 卜リエチルァミン塩、 アルギニン との塩等） が挙げられる。
—般式 （ 1 ) 、 （ 2 ) 及 ·: 2 : で表される化合 ¾ 分子^に-斉炭素 及び環構造を有しており、 当該不斉炭素及び ¾構造に基づく先学異性 、 幾何異性体、 それらの混合物の全てを本発明の 合 ¾ ^含するものとす る。
—般式 （ 1 ) 、 （ 2 ) 及び ： ' で表される 合物 、 後 ^方 £に りヒ卜胎盤水解物から得る二 もできる :、 一般さ に 化学的合成 に リ調製される かかる調製 £こ ては種々の方法によ り合成する二ごがで き、 例えば、 下記式に示される方法によリ得ることができる
反応工程式 - 化
Figure imgf000007_0001
反 JtS工程式一 2
化
Figure imgf000008_0001
(反応工程式一 1及び 2において、 Rは前記と同じ、 Xは水酸基の保護基、 25 Yはカルボキシル基の保護基、 Zはァミノ基の保護基を示す）
上記の反応工程式一 1において、 一般式 （6 ) で表される化合物は、 水 酸基及びカルボキシル基をそれぞれ慣用の保護基で保護したハイ ドロキシ プロリン （4 ) と慣用の保護基でアミノ基を保護した α—アミノ酸化合物 ( 5 ) とを縮合することにより得ることができる。 かかる縮合は、 ジシク 30 口へキシルカルボジイミ ド等の縮合剤を^いる方法、 活性エステル化法な どの慣用のアミ ド化法に準じて行うことができる。 また、 保護基を有する 化合物 （4 ) 及び （ 5) も常法に準じて調製することができる。 なお、 上 記の α—アミノ酸化合物としては、 例えば、 セリン、 ァラニン、 アルギニ ン、 ァスパラギン酸、 ァスパラギン、 グルタミン酸、 グルタミン、 システ イン、 グリシン、 ヒスチジン、 ロイシン、 イソロイシン、 リシン、 メチォ ニン、 ノ リン、 オル二チン、 卜レオニン、 フエ二ルァラニン、 チロシン、 トリブトフアンなどが例示される。
かくして得られた一般式 （6 ) で表される化合物は、 常法に準じて保護 基の脱離反応に付すことにより一般式 （ 1 ) で表される本発明の化合物が 得られる。
また、 一般式 （6) で表される化合物を、 まずカルボキシル基の保護基 及びアミノ基の保護基の脱離反応に付し、 次いで上記のアミ ド化法に準じ て環化し、 さらに水酸基の保護基の脱離反応に付すことにより一般式 （3) で表される本発明の化合物が得られる。
一般式 （2) 及び （3) で表される化合物は、 反応工程式一 2の方法に より、 一般式 （7) で表される化合物と一般式 （8) で表される化合物か ら一般式 （9) で表される化合物を得、 この化合物を反抗工程式一 1 と同 様にして処理することにより得ることができる。 この反応工程式のアミ ド 化反応、 環化反応などは反応工程式— 1 と同様にして行うことができる。 なお、 反応工程式一 1及び 2において、 使用するアミ ド化反応及び環化 反応の方法によっては、 水酸基を保護することなく反応を行うこともでき る。
本発明の一般式 （ 1 ) 、 （ 2) 及び （3) で表される化合物は後記の実 施例に示されるように細胞増殖活性及び細胞保護作用を有し、 障害を受け た臓器や組織の修復、 再生に有効であり、 特に肝臓 （肝細胞） に対して顕 著な効果を奏する。 従って、 当該化合物はヒトをはじめとする各種哺乳動 物 （例えば、 ゥシ、—ブタ、 ゥマ、 ヒッジ、 ゥサギ、 サル、 ィヌ、 ネコ等） の臓器 ·組織障害治療剤として有用である。 具体的に本発明の化合物が奏 し、 期待される効果を例示すると、 例えば、
①肝からの逸脱酵素 （例えば、 G〇T、 GPT、 γ— GT P、 A L P、 L A P、 L D H等） の抑制、
②ビリルビンの肝取り込み促進、
③肝の保護 （肝実質細胞の変性 *壊死の防止及び抑制） 、
④肝線維化の防止、 肝線維組織増殖抑制、 増殖した肝線維組織 ·間質結合 織の吸収促進、
⑤抗脂肝作用 （肝への脂肪沈着の減少、 肝細胞の脂質変性の改善） 、
⑥組織呼吸賦活作用 （肝のコハク酸脱水素酵素の活性の賦活、 組織呼吸の 促進、 肝細胞の新陳代謝の活性化） 、
⑦肝細胞膜の安定化作用、
などが挙げられる。
本発明の臓器 ·組織障害治療剤は、 上述の作用 ·効果に基づくもので、 一般式 （ 1 ) 、 （2 ) 及び （3 ) で表される化合物又はそれらの塩を有効 成分として含有することからなり、 ヒト及び哺乳動物の治療剤として利用. される。 特に、 肝障害に基づく疾患に好適に利用される。 より具体的には、 肝炎から肝硬変 （甲型及び乙型肝硬変） への進行の抑制、 肝硬変から肝癌 への進行の抑制、 肝線維形成の抑制、 脂肪肝の抑制などが例示される。 本発明の治療剤は、 一般式 （ 1 ) 、 （2 ) 若しくは （3 ) で表される化 合物又はそれらの塩を、 適宜の薬理的に許容される添加剤 （例えば、 担体、 賦形剤、 希釈剤等） などの製薬上必要な成分と混合し、 粉末、 顆粒、 錠剤、 カプセル剤、 注射剤、 軟膏などの態様の医薬製剤に調製され、 当該製剤は 経口的又は非経口的に投与される。 上記製剤中に、 一般式 （ 1 ) 、 （2 ) 若しくは （3 ) で表される化合物又はそれらの塩はその有効量が配合され る。 投与量は投与ルー卜、 症状、 患者の体重あるいは年令などによって適 宜調整されるが、 通常、 1 日当り 0 . 5〜 1 0 0 m g Z k gを 1回又は数 回に分けて投与される。 産業上の利用可能性
本発明の化合物は細胞増殖活性、 細胞保護作用などを有し、 障害を受け た臓器や組織の修復、 再生などに有用である。 本発明の臓器 ·組織障害治 療剤は、 上記の特性を有する本発明の化合物を有効成分とするもので、 各 種臓器 ·組織の障害、 特に肝障害の治療に有用である。 実施例
以下、 実施例及び試験例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、 本 発明はこれらの例に限定されるものではない。
なお、 以下の実験に使用した材料、 装置は以下のとおりである。
①ヒ卜胎盤水解物 .
ヒ卜胎盤水解物は、 ラエンネック （商品名、 日本生物製剤社製） を使用 した。 なお、 ラエンネックはヒト胎盤をアセトンで脱脂し、 塩酸で加水分 解して調製した製剤である。
②高速液体クロマ卜グラフィ一 （H P L C) 分析条件
H P L Cによる分析条件は以下のとおりである。
カラム： C0SM0SIL 5C18-AR (4.6 I.D. x 150 腿）
検出波長： 2 1 0， 2 6 0 n m
流速： 1. O m l / i n
温度： 室温 （ 2 6°C)
三次元クロマト ： Waters 991 J フォトダイォ一ドアレイ検出器
③分析機器
Ή, 13 C - M R ： JEOL Lamdba 500
旋光度： ^JASCO DIP-140
FAB— MS ： JEOL HX-110, マトリックス（グリセロール）
HR- FAB-MS ： JEOL HX-110, マ卜リックス（トリエチレングリコ ール）
ペプチドシーケンサ一 ： Model 470- A (アプライ ド バイオシステム社製） ァミノ酸分析器： 8 3 5型
④細胞増殖活性の測定法
試料の細胞増殖活性は、 常法に準じて、 B HK(baby hamster kidney) — 2 1細胞に対する増殖活性を測定することにより行った（Planta Med. 6 2， 115-118， 1996など参照）。
より詳細には、 B HK— 2 1細胞 （ 1 X 1 04個） を 5 %ゥシ胎児血清 と 2 mMグルタミンを含むイーグル最小限培地（Eagle' s minimum essenti al medium)に、 試料 （μ g/m 1培地） とともに 3 7°C、 p H 7. 2、 5 %C〇2/空気で 3日間培養し、 それをトリプシンと 0.02% EDT Aで処 理して細胞を取り出して、 その細胞の一定量を 0. 4 %トリパンブルーで 染色後、 生細胞数をカウントし、 対照（medium control)の細胞数を 1 00 %としてそれぞれの活性について比較検討した。 実施例 1
ヒト胎盤水解物からの本発明の化合物の単離 ·精製
ラエンネックの水溶液を HP LCにより 3種の溶離液を用いて 3つの画 分 （F r. 1〜3) に分離した。 その結果を図 1 Aに示す。
得られた F r. 1〜3について、 BHK— 2 1細胞に対する細胞増殖活 性を測定した。 その結果を図 1 Bに示す。 図 1 Bに示されるように、 F r. 1に増殖活性が認められた。
上記で F r. 1に活性が認められたので、 当該画分を再度 HP LCに付 し、 水を溶離液に用いて溶出順に 1 0の画分 （F r. 1〜 1 0) に分離し た。 その結果を図 2 Aに示す。
得られた F r. 1〜 1 0について、 B HK— 2 1細胞に対する細胞増殖 活性を測定した。 その結果を図 2 Bに示す。 図 2 Bに示されるように、 F r . 1〜3に低濃度（Dose:6.25， 12.5， 25μ§)で増殖活性が認められた。 上記で F r. 1〜3に活性が認められたので、 当該画分を更に HP LC に付し、 1 0—3M酢酸を溶離液に用いて 3つの画分 （F r 1— 3— 1〜 1 - 3 - 3) に分離した。 その結果を図 3 Aに示す。
得られた 3つの画分について、 BHK— 2 1細胞に対する細胞増殖活性 を測定した。 その結果を図 3 Bに示す。 図 3 Bに示されるように、 F r.
1一 3— 3に低濃度（Dose:6.25, 12.5， 25 μ g)で増殖活性が認められた。 以上の結果に基づき、 HP LCでモニタリングしながら、 細胞増殖活性 の認められた保持時間 3. 1〜3. 3分の画分をラエンネック （凍結乾燥 6 2. 7 g ) から Cosmosil 75C18- PREP (カラム： 4.6 I.D. x 150 腿， 水 で溶出） を用いて分取し （9. 4 g) 、 次いで S印 hadex LH- 20カラムクロ マト （カラム： 3 I.D. X 85腿， 水で溶出） で分離し、 化合物 1 (6. 2 mg) と化合物 2 (7. 6 mg) が得られた。
上記の化合物 2について、 3HK— 2 1細胞に対する細胞増殖活性を測 定した。 その結果を図 4に示す。 図 4に示されるように、 化合物 2には細 胞増殖活性が認められた。 なお、 上記の化合物 1は機器分析の結果、 ゥラ シルであることが判明した。
そこで、 化合物 2について分析したところ、 以下の結果が得られた。
① [a] D=+ 58. 4° (C= 0. 26， 水） ；
②ニンヒドリン反応陽性；
③アミノ酸分析からハイ ドロキシプロリンとセリン（1:1)からなるぺプチ ド、；
④ぺプチドシーケンサーによるアミノ酸配位の検討から、 X末端はブロッ クされていること ；
⑤酸加水分解物の Chiral HP LC分析により、 L—セリン及びトランス 一ハイ ドロキシプロリンを同定。
これらの結果から、 化合物 2は下記の一般式 （ 3— 1 ) で示される 3' —ハイ ドロキジメチルー 4一ハイ ドロキシピロリ ド [ 1， 2— f ] 2' ， δ ' -ピぺラジンジォン（3， -Hydroxymethyl-4-hydroxypyrrolido[l, 2-f]2' ， - piperazinedione)であると推定された。
Figure imgf000013_0001
(3 - 1 ) 更に、 化合物 2の機器分析の測定結果は以下のとおりであり、 .れらの 結果は何れも上記の構造式を支持するものであった。
⑥ FAB— MS m/ z 2 0 1 [M + 1 Ί - ⑦ HT— FAB— MS C,Hl 2.\20, 実測値 2C1.08730
計算値 201.08748
⑤ ' H— NMR ( D M S 0 - d 6 ) ： δ 1.86 (1H， dd， J=12.5, 6.5)， 2.0 5 (1H， dd, J=12.5, 5.0), 3.20 (1H， dd， J=12.5)， 3.56 (1H, dd, J=12. 5, 4.0)， 3.68 (1H， dd, J=10.0, 5.2)， 3.70 (1H， dd, J=10.5, 5.2), 4. 07 (iH, t， J=4.0)， 4.29 (1H, t， J=5.2), 4.36 (1H， dd, J-5.0, 6.0) ⑨！ 3C— NMR (D SO- de) ： o 56.8 (C-2), 37.2 (C- 3)， 66.7 (C - 4)， 53.7 (C-5)， 56.7 (C-3')， 59.8 (-CH20H) 一般式 （ 1 ) 又は （2) で表される化合物において、 Rがハイ ドロキシ メチルの化合物を別途合成し、 これらの化合物の BHK— 2 1細胞に対す る細胞増殖活性を測定したところ、 何れの化合物にも細胞増殖活性が認め られた。 試験例 1
A I T処理ラット血清中肝逸脱酵素の測定
α—ナフチゾレイソチ才シァネー卜（ a— naphthylisothiocyanate、 AN I T) 5 0 mg/k g (溶媒：ォリーブ油）をラット腹腔内に投与する前 0. 5時間及び投与後 8、 24、 3 6、 4 6時間に、 本発明のハイ ド口キシプ 口リン誘導体 1. 36又は 6. 2 5 mgZk g (溶媒： 生理食塩水）を陰茎 静脈（0. 2 5 m l、 i v)より、 6. 2 5又は 2 5 m g / k gを経口（ 2. Om l , p o)より投与した。 AN I T処理後 4 7時間に腹大動脈よリ血 液を採集し、 遠心（ 3 5 00 r p m、 1 5分）した後、 採集された血清中の 肝 feSft酵素 G P T glutamic— pyruvic transaminase) λ AL P lalkalineph osphatase) , LAP (lactate dehydrogenase) ¾t γ— G T P ( γ -glutamy ltranferase)濃度並びにピリルビン（bilirubin, B I L)濃度を各測定キ ット（和光純薬社製）を用いて測定した。 なお、 本発明のハイ ドロキシプロ リン誘導体として、 一般式 （3) において Rがハイ ド口キシメチルの化合 物（Hyp Serという、 以下同様） と一般式 （ 2) において Rがハイ ドロキシ メチルの化合物（Hyp Ser 0Hという、 以下同様）を用いた。 測定結果を図 5 (GPT) 、 図 6 (AL P)、 図 7 (LAP)、 図 8 (γ— G T P)及び図 9 (B I L)に示す。 図中の測定値は一群 3匹の平均値土標準 誤差である。 有意差検定は student t-testにより行い、 AN I丁に対して *は p<0. 05、 * *は p<0. 0 1を意味する。
図に示されるように、 本発明のハイ ドロキシプロリン誘導体を投与する ことにより、 血中肝逸脱酵素量が低減し、 本発明のハイ ドロキシプロリン 誘導体は肝保護作用を有することが判明した。 試験例 2
四塩化炭素（CC し）処理した初代培養ラッ ト肝細胞培地における肝逸脱 酵素の測定
中村らの方法（ 「初代培養肝細胞実験法」 、 学会出版センター （日本） 発行、 1987、 pp. 29)に準じ、 in situ collagenase灌流法により、 肝細胞 を分離した。 得られた遊離肝細胞（生存率 8 8 - 9 3 %)を培地（WE培地、 5%牛血清を含む）で 2. 5 X 1 0s細胞ノ m 1に希釈し、 コーニング社製
24穴培養プレートに 0. 5 m lを加え、 37 °Cで 24時間培養を行った。 その後無血清培地に交換し、 5 mMの四塩化炭素（最後濃度）を加え、 各濃 度のハイ ドロキシプロリン誘導体（Hyp Ser及び Hyp Ser OH)を添加し、 さ らに 24時間培養した。 その後、 培地を収集し、 培地中における GOT(g lutamic- oxaloacetic transaminase)及び L D H (lactic dehydrogenase; 濃度を酵素測定キット（和光純薬社製）を用い測定した。 なお、 比較例とし て、 肝細胞に対して増殖 ·保護作用をすることが知られている肝実質細胞 増殖因子 （HGF) を用い、 同様な試験を行った。
試験結果を図 1 0 (GOT) 及び図 1 1 (LDH) に示す。 図中の測定 値は 3サンブルの平均値士標準誤差である。 有意差検定は student t-test により行い、 ニントロールに対して *は p<0. 0 5、 は p<0. 0 1 を意味する。
図 1 0及び 1 1に示されるように、 本発明のハイ ドロキシプロリン誘導 体を添加することにより、 肝逸脱酵素量が低減し、 本発明のハイ ドロキシ プロリン誘導体は肝細胞保護作用を有することが判明した。

Claims

47546 1 4 請求の範囲 '般式 （ 1 ) 又は （ 2) HO
(1) (2)
(式中、 Rは水素原子又はアルキル基を示し、 当該アルキル基は水酸基、 アミノ基、 カルボキシル基、 ァミノカルボニル基、 グァニジノ基、 複素瑗 式基、 メルカプト基、 アルキルチオ基又は水酸基を有することのあるフエ ニル基で置換されていてもよい）
で表されるハイ ドロキシプロリン誘導体又はその塩。
2. Rがハイ ドロキシメチル基である請求項 1記載の化合物。
3. 一般式 （ 1 ) 、 （2) 又は （3)
Figure imgf000016_0002
(式中、 Rは前記と同じ）
で表されるハイ ドロキシプロリン誘導体又はその塩を有効成分として含有 する臓器 ·組織障害治療剤-
4. 肝障害治療剤である請求項 3記載の臓器 ·組織障害治療剤。
5. Rがハイ ドロキシメチル基である請求項 3又は 4記載の臓器 '組織 /47546
1 5
障害治療剤。
6. 一般式 （ 1 ) (2) 又は (3
H0
Figure imgf000017_0001
(式中、 Rは前記と同じ）
で表されるハイ ドロキシプロリン誘導体又はその塩の有効量を投与するこ とからなる臓器 ·組織障害の治療法。
7. Rがハイ ドロキシメチル基であり、 肝障害の治療法である請求項 6 記載の臓器 ·組織障害の治療法。
8. 臓器 ·組織障害治療剤を製造するための一般式 （ 1 ) 、 （ 2) 又は
(3) で表されるハイ ドロキシプロリン誘導体又はその塩の使用。
HO
Figure imgf000017_0002
(式中、 Rは前記と同じ）
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003097061A1 (fr) * 2002-04-22 2003-11-27 Japan Bioproducts Ind. Co., Ltd. Preparation externe pour maladies allergiques
WO2007129725A1 (ja) * 2006-05-09 2007-11-15 Kyowa Hakko Bio Co., Ltd. 肝障害抑制剤

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070048451A1 (en) * 2005-08-26 2007-03-01 Applied Materials, Inc. Substrate movement and process chamber scheduling
US7432184B2 (en) * 2005-08-26 2008-10-07 Applied Materials, Inc. Integrated PVD system using designated PVD chambers
KR101169701B1 (ko) * 2010-02-26 2012-07-30 (주) 아크스템 자하거 추출물을 함유하는 세포보존제
JP5782638B2 (ja) * 2012-07-09 2015-09-24 株式会社日本生物製剤 眼疾患の予防・治療薬

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH02186994A (ja) * 1989-01-13 1990-07-23 Ajinomoto Co Inc 発酵法によるｌ‐アミノ酸の製造法
JPH0532533A (ja) * 1991-07-25 1993-02-09 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 化粧料
JPH0543408A (ja) * 1991-08-09 1993-02-23 Nippon Zoki Pharmaceut Co Ltd ストレス抵抗性賦与剤

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3832465A (en) * 1971-12-09 1974-08-27 H Ghadimi Injectable amino acid composition commensurate to the anabolic need of the body and method of using same
JP3869874B2 (ja) * 1995-11-15 2007-01-17 大日本住友製薬株式会社 急性肝不全治療剤

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH02186994A (ja) * 1989-01-13 1990-07-23 Ajinomoto Co Inc 発酵法によるｌ‐アミノ酸の製造法
JPH0532533A (ja) * 1991-07-25 1993-02-09 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 化粧料
JPH0543408A (ja) * 1991-08-09 1993-02-23 Nippon Zoki Pharmaceut Co Ltd ストレス抵抗性賦与剤

Non-Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALEXANDROU E N, LIAKOPOULOU-KYRIAKIDES M: "INHIBITION OF ANGIOTENSIN CONVERTING ENZYME BY L-ALANYL-4 OR 5- SUBSTITUTED- L-PROLINES AND THEIR NALPHA-PHOSPHORYL-DERIVATIVES", BIOCHEMISTRY INTERNATIONAL., ACADEMIC PRESS, LONDON., GB, vol. 21, no. 01, 1 January 1990 (1990-01-01), GB, pages 271 - 278, XP002921205, ISSN: 0158-5231 *
AONUMA S, ET AL.: "STUDIES ON HEART .XXI. AMINO ACID SEQUENCE OF ANTIAR- RHYTHMIC PEPTIDE (AAP) ISOLATED FROM ATRIA", JOURNAL OF PHARMACOBIO-DYNAMICS, TOKYO, JP, vol. 05, no. 01, 1 January 1982 (1982-01-01), JP, pages 40 - 48, XP002921206, ISSN: 0386-846X *
CHARPENTIER C, ET AL.: "ANALYSIS OF DIPEPTIDES IN URINE BY GAS CHROMATOGRAPY/MASS SPECTROMETRY: IMPLICATIONS FOR COLLAGEN BREAKDOWN IN IMINODIPEPTIDURIA FOLLOWING A STUDY FO THE DIPEPTIDES BY ELECTRON IMPACT AND CHEMICAL IONIZATION", CLINICA CHIMICA ACTA, ELSEVIER BV, AMSTERDAM, NL, vol. 138, no. 03, 1 January 1984 (1984-01-01), AMSTERDAM, NL, pages 299 - 308, XP002921202, ISSN: 0009-8981, DOI: 10.1016/0009-8981(84)90137-2 *
Chemical Abstracts Service (C A S); 1 January 1957 (1957-01-01), WIELAND T, HEINKE B: "PEPTIDE SYNTHESES. XIII. THE USE OF PHOSPHORUS OXYCHLORIDE IN THE METHOD IN INVOLVING MIXED ANHYDRIDES", XP002921207 *
JANDKE J, SPITELLER G: "DIPEPTIDE ANALYSIS IN HUMAN URINE", JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B: BIOMEDICAL SCIENCES AND APPLICATIONS, ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS, NL, vol. 382, 1 January 1986 (1986-01-01), NL, pages 39 - 45, XP002921203, ISSN: 0378-4347, DOI: 10.1016/S0378-4347(00)83503-3 *
KODAMA H, SUGAHARA K: "ANALYSES OF IMINODIPEPTIDES CONTAINING C-TERMINAL PROLINE OR HYDROXYPROLINE IN BIOLOGICAL SAMPLES BY LIQUID CHROMATOGRAPHY/MASS SEPCTROMETRY", ANALYTICA CHIMICA ACTA, ELSEVIER, AMSTERDAM, NL, vol. 352, no. 01/03, 1 January 1997 (1997-01-01), NL, pages 141 - 153, XP002921204, ISSN: 0003-2670, DOI: 10.1016/S0003-2670(97)00130-X *
ROSEN O., RUBINAUT S., FRIDKIN M.: "THIOLYSIS OF THE 3-NITRO-2-PYRIDINESULFENYL (NPYS) PROTECTING GROUP", INTERNATIONAL JOURNAL OF PEPTIDE AND PROTEIN RESEARCH., MUNKSGAARD, COPENHAGEN., DK, vol. 35., no. 06., 1 June 1990 (1990-06-01), DK, pages 545 - 549., XP000127614, ISSN: 0367-8377 *
See also references of EP1067138A4 *
ZANABONI, G. GRIMM, R. DYNE, K.M. ROSSI, A. CETTA, G. IADAROLA, P.: "Use of capillary zone electrophoresis for analysis of imidodipeptides in urine of prolidase-deficient patients", JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B: BIOMEDICAL SCIENCES AND APPLICATIONS, ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS, NL, vol. 683, no. 1, 9 August 1996 (1996-08-09), NL, pages 97 - 107, XP004044245, ISSN: 0378-4347, DOI: 10.1016/0378-4347(95)00583-8 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003097061A1 (fr) * 2002-04-22 2003-11-27 Japan Bioproducts Ind. Co., Ltd. Preparation externe pour maladies allergiques
WO2007129725A1 (ja) * 2006-05-09 2007-11-15 Kyowa Hakko Bio Co., Ltd. 肝障害抑制剤

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