WO1997002044A1 - Conservateur pour composition vaccinale - Google Patents

Conservateur pour composition vaccinale Download PDF

Info

Publication number
WO1997002044A1
WO1997002044A1 PCT/FR1996/001042 FR9601042W WO9702044A1 WO 1997002044 A1 WO1997002044 A1 WO 1997002044A1 FR 9601042 W FR9601042 W FR 9601042W WO 9702044 A1 WO9702044 A1 WO 9702044A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
vaccine composition
diol
vaccine
preservative
composition
Prior art date
Application number
PCT/FR1996/001042
Other languages
English (en)
Inventor
Alain Françon
Pierre Heimendinger
Original Assignee
Pasteur Merieux Serums Et Vaccins
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pasteur Merieux Serums Et Vaccins filed Critical Pasteur Merieux Serums Et Vaccins
Priority to AU65219/96A priority Critical patent/AU6521996A/en
Publication of WO1997002044A1 publication Critical patent/WO1997002044A1/fr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/125—Picornaviridae, e.g. calicivirus
    • A61K39/13—Poliovirus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0016—Combination vaccines based on diphtheria-tetanus-pertussis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
    • C12N2730/00011—Details
    • C12N2730/10011—Hepadnaviridae
    • C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
    • C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
    • C12N2760/16234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32611—Poliovirus
    • C12N2770/32634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Definitions

  • the present invention relates to the field of vaccines. More particularly the invention relates to the storage of vaccines.
  • Vaccines are pharmaceutical compositions intended to be administered to humans or animals, by various routes and in particular by parenteral injection. It is therefore necessary to maintain them for as long as possible, free from unwanted microbial agents. As such, the various pharmacopoeias have set standards that vaccine producers must meet. Although a large number of products are known for their antimicrobial activity, few of them, are used in vaccine compositions administered parenterally. In fact, the antigens used in the vaccine compositions consist of fragile biological material. However, a certain number of preservatives, although they possess the required antimicrobial qualities, cannot however be used in vaccines, since they have the drawback of reducing the activity of certain antigens. Others, such as sodium mercurothiolate, have the disadvantage of being produced according to a polluting production process.
  • the object of the invention is therefore to propose a new method for preserving a vaccine composition making it possible to maintain the activity of the antigens present.
  • the invention relates to a method of preserving a vaccine composition, characterized in that it consists in introducing into the vaccine composition 3p-chorphenoxypropane-1.2 diol.
  • the invention also relates to the use of 3p-chlorphenoxypropane-1. 2 diol as a preservative in a vaccine composition.
  • the invention also relates to the use of 3p-chlorphenoxypropane-1,2 diol as stabilizer in a vacinal composition. Indeed, surprisingly, it has been found that 3 p-chlorphenoxypropane-1,2 diol also tends to promote the stability of certain vaccine compositions.
  • the compound 3p-chlorphenoxypropane-1,2 diol also called [3- (4-chlorophenoxy) - 1,2-propanediol], or p-chlorophenyl glycerol ether can be obtained from the company MERCK CLEVENOT which markets it under the name Chlorphenesine with the reference 200 002. Its chemical formula is as follows:
  • the amount of 3p-chlorphenoxypropane-1,2 diol which should be added to the vaccine composition is according to the invention at least 2 g / l. preferably at least 3 g / l. at least 4 g / l. and preferably substantially equal to 5 g / l.
  • the vaccine compositions of the invention also comprise formalin which can be a residue from the process for obtaining at least one of the antigens of the composition, or which can be added specifically for its antimicrobial properties clean.
  • formalin present in the composition are, for example, of the order of 25 m g / l. In this case, it is possible to reduce the amount of 3p-chlorphenoxypropane-1.2 diol used.
  • Vaccine compositions can include all kinds of antigens, whether alone or in combination. They may in particular be viral antigens. We can cite, without being exhaustive, the antigens of hepatitis B, hepatitis A, rabies, polio (type 1, type 2, type 3), diphtheria, tetanus, of the d -
  • the preservative used according to the invention has the advantage of being completely inert; it does not adsorb on plastics or glass and does not cause any change in pH of the vaccine composition, which is an advantage because a drop in pH, for example, can lead to a reduction in the activity of certain antigens.
  • 3p-chl ⁇ henoxypropane-1,2 diol is present in a reconstitution solvent in liquid form of a vaccine composition which is present at least partially in lyophilized form.
  • the reconstituted vaccine composition can be stored in good conditions until its complete use.
  • the solvent may be a liquid whose sole function is the recovery of the lyophilisate or itself be a liquid vaccine composition which is. in addition, before its administration, used to dissolve at least one additional vaccine valence present in lyophilized form.
  • the antimicrobial activity of the preservative according to the invention is tested in aqueous solution, in order to determine the minimum inhibitory, bactericidal and fungicidal concentrations according to the method described in the chapter "Evaluation of the Antimicrobial Activity of Antibiotics in Vitro" of the "Medical Bacteriology", Léon Le MINOR, Michel VERON. FLAMMARION. The following results are obtained as a percentage (m / v) for each germ:
  • results obtained for each germ tested are shown in the table below. These results are expressed in terms of an average decimal logarithmic reduction in the number of microorganisms compared to a peptone control at time T.
  • a vaccine composition comprising a vaccinating dose of each of the following strains of the influenza virus: A / Shangdong, A / Texas, B / Panama.
  • the elements of the vaccine composition are the same as those used in the VAXIGRIP TM vaccine marketed by PASTEUR MERIEUX Sera and Vaccines, with the exception of sodium mercurothiolate which is replaced by the preservative according to the invention.
  • the composition thus obtained also comprises 25 ⁇ g / ml of formaldehyde which is a residue from the process for the manufacture of antigens of the influenza virus.
  • the stability of the vaccine composition obtained is tested comparatively with a preservative according to the invention and without a preservative.
  • the stability of the vaccine composition is assessed by measuring the loss of activity over time of a composition maintained at 37 ° C or 5 ° C.
  • the assay of the activity is carried out by radial immuno-diffusion.
  • the results obtained, summarized in the table below, are expressed as a percentage of activity with respect to time 0.
  • the results obtained show that the preservative used according to the invention also promotes the stability of some of the antigens present in the vaccine composition compared to a vaccine composition devoid of preservative.
  • Vaccine compositions are carried out comprising 1 vaccinating dose of each of the 3 strains of the polio virus (type 1, 2 and 3). as well as in the inactivated polio vaccine marketed by the company PASTEUR MERIEUX Sérums and Vaccines; the usual preservative 2 phenoxyethanol is however replaced by 3p-chlo ⁇ henoxypropane-1,2 diol at different concentrations.
  • the vaccine compositions thus obtained also containing 25 ⁇ g / ml of formalin which constitutes a manufacturing residue, are tested by means of an ELISA test with Antigens D, to verify the maintenance of their activity over time.
  • a vaccine composition comprising the hepatitis B surface antigen, obtained by genetic recombination and expressed in eukaryotic cells (yeasts or mammalian cells) whose composition is similar to that of the Recombivax TM vaccine sold by the company MERCK , with the exception of sodium mercurothiolate which is replaced by 3p-chlo ⁇ henoxypropane-1,2 diol associated or not with formalin.
  • the activity of the vaccine composition obtained is tested, by assaying the Hbs antigens using a kit sold by the company ABBOTT.
  • a vaccine composition comprising 1 vaccinating dose of rabies vaccine containing virus obtained from cell culture, inactivated and purified, presented in the form of a lyophilisate intended to be taken up temporarily with a solvent.
  • the solvent constituted according to the prior art by an aqueous solution of NaCl at 0.4% comprises, according to the invention, 3p-chl ⁇ henoxypropane-1,2 diol at a concentration of 0.4%.
  • the stability of the vaccine composition obtained by taking up the lyophilisate with a solvent containing a preservative according to the invention, with a solvent according to the prior art (that is to say comprising only NaCl), is tested comparatively. and with water, after storage under different conditions.
  • the assays are carried out by radial immunodiffusion (SRD); the results indicated in the table below are expressed as a difference in SRD titer compared to a sample stored at -20 ° C. and the lyophilisate of which is taken up immediately.
  • SRD radial immunodiffusion
  • results obtained show the compatibility of the preservative according to the invention with the rabies vaccine and confirm the possibility of using 3p-chl ⁇ henoxypropane-1,2 diol as a preservative not directly in the liquid vaccine composition, but also in the recovery solvent. lyophilized vaccine.
  • a vaccine composition comprising, per 0.5 ml dose, a vaccinating dose of inactivated rabies vaccine, presented in the form of a lyophilisate intended to be taken up by a solvent.
  • the solvent consists of a 20 mmolar aqueous solution of phosphates and comprising 0.4% NaCl and 3p-chlo ⁇ henoxypropane-1, 2 diol at 0.5%.
  • the pH of the solvent is 7.2.
  • T 0
  • the results obtained show the maintenance of the immunogenicity of the vaccine composition; there is therefore no expressed immunosuppressive effect of 3p-chlo ⁇ henoxypropane-1,2 diol, nor of degradation of the viral antigen in the presence of the preservative according to the invention.
  • a hexavalent vaccine composition comprising
  • Hbs antigen Hepatitis B
  • PRP-T Haemophilus influenzae type b antigen
  • 3p-chl ⁇ henoxypropane-1,2 diol is added to this vaccine composition at different concentrations: 0.125%; 0.25% and 0.5%.
  • the compatibility of the preservative used for each concentration is tested with respect to each of the vaccine valencies of the composition.
  • the tests relating to the maintenance of the activity of hepatitis B and polio valences are carried out according to the methods described in Examples 2 and 3.
  • vaccine compositions identical to those of Example 2 are produced.
  • the quantity of 3p-chl ⁇ henoxypropane-1,2 diol present in each composition is measured by HPLC after storage in different time and temperature conditions. The results obtained are as follows:

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

L'invention est relative à l'utilisation du 3p-chlorphenoxypropane-1,2 diol à titre de conservateur dans une composition vaccinale.

Description

CONSERVATEUR POUR COMPOSITION VACCINALE
La présente mvention est relative au domaine des vaccins. Plus particulièrement l'invention est relative à la conservation des vaccins.
Les vaccins sont des compositions pharmaceutiques destinées à être administrées à l'homme ou à l'animal, par différentes voies et notamment par injection parentérale. Il est donc nécessaire de les maintenir aussi longtemps que possible, dépouvus d'agents microbiens indésirés. A ce titre, les différentes pharmacopées ont fixé des normes que les producteurs de vaccins doivent respecter. Bien qu'un grand nombre de produits soient connus pour leur activité anti-microbienne, peu d'entre eux, cependant, sont utilisés dans les compositions vaccinales administrées par voie parentérale. En effet, les antigènes utilisés dans les compositions vaccinales sont constitués de matériel biologique fragile. Or, un certain nombre de conservateurs, s'ils possèdent bien les qualités anti-microbiennes requises, ne peuvent cependant pas être utilisés dans des vaccins, car ils présentent l'inconvénient de réduire l'activité de certains antigènes. D'autres, tel le mercurothiolate sodique, présentent l'inconvénient d'être fabriqués selon un procédé de production polluant.
L'invention a donc pour but de proposer un nouveau procédé de conservation d'une composition vaccinale permettant de maintenir l'activité des antigènes présents.
Pour atteindre ce but, l'invention a pour objet un procédé de conservation d'une composition vaccinale caractérisé en ce qu'il consiste à introduire dans la composition vaccinale du 3p-chorphenoxypropane-1.2 diol.
L'invention a également pour objet l'utilisation de 3p-chlorphenoxypropane-l. 2 diol comme conservateur dans une composition vaccinale.
On a en effet trouvé que le 3p-chlorphenoxypropane- 1.2 diol, dont l'utilisation comme conservateur dans des formulations cosmétiques était connu, pouvait également être utilisé comme conservateur dans des compositions vaccinales sans affecter l'activité des antigènes présents.
L'invention a également pour objet l'utilisation de 3p-chlorphenoxypropane-l ,2 diol comme stabilisant dans une composition vacinale. En effet, de façon surprenante, on a trouvé que le 3 p-chlorphenoxypropane-1,2 diol avait en outre tendance à favoriser la stabilité de certaines compositions vaccinales.
La présente invention sera mieux comprise à la lecture de la description qui va suivre et des exemples illustrant de façon non limitative un certain nombre de modes de réalisation.
Le composé 3p-chlorphenoxypropane-l,2 diol, encore appelé [3-(4-chlorophenoxy)- 1,2-propanediol], ou éther de p-chlorophenyl glycérol peut être obtenu auprès de la Société MERCK CLEVENOT qui le commercialise sous la dénomination Chlorphenesine avec la référence 200 002. Sa formule chimique est la suivante :
Figure imgf000004_0001
C H O H
C H, O -ce
La quantité de 3p-chlorphenoxypropane-l,2 diol qu'il convient d'ajouter à la composition vaccinale est selon l'invention d'au moins 2 g/l. de préférence au moins 3 g/l. au moins 4 g/l. et de préférence sensiblement égale à 5 g/l.
Selon un mode particulier de réalisation, les compositions vaccinales de l'invention comprennent également du formol qui peut être un résidu du procédé d'obtention de l'un au moins des antigènes de la composition, ou qui peut être rajouté spécifiquement pour ses propriétés antimicrobiennes propres. Les quantités de formol présentes dans la composition sont par exemple de l'ordre de 25 m g/l. Dans ce cas, il est possible de réduire la quantité de 3p-chlorphenoxypropane-1.2 diol utilisé.
II est également possible d'ajouter aux compositions vaccinales contenant du 3p-chlorphenoxypropane-l,2 diol, du chlorure de sodium, à 4%o par exemple.
Les compositions vaccinales peuvent comprendre toutes sortes d'antigènes, qu'ils soient seuls ou en combinaison. Il peut notamment s'agir d'antigènes viraux. On peut citer, sans que la liste soit exhaustive, les antigènes de l'hépatite B, de l'hépatite A, de la rage, de la polio (type 1 , type 2, type 3), de la diphtérie, du tétanos, de la j -
coqueluche, de la grippe, des infections à Haemophilus influenzae type b, de la typhoïde, de la rougeole, de la rubéole, des oreillons, de la varicelle, du zona, de la fièvre jaune, de la Dengue, de l'encéphalite japonaise, de la maladie de Lyme, ou encore des infections à pneumocoques.
Le conservateur utilisé selon l'invention présente l'avantage d'être complètement inerte ; il ne s'adsorbe ni sur les plastiques, ni sur le verre et n'entraîne aucune variation de pH de la composition vaccinale, ce qui est un avantage car une baisse de pH, par exemple, peut entraîner une réduction de l'activité de certains antigènes.
La manière dont le 3p-chlorphenoxypropane-l,2 diol est introduit dans la composition vaccinale, ainsi que le moment de son incoφoration, ne sont pas déterminants au regard de l'invention. Il est possible de partir d'une solution alcoolique relativement concentrée en 3p-chlorphenoxypropane-l,2 diol que l'on dilue dans la composition vaccinale jusqu'à obtention de la concentration finale désirée.
Selon un mode particulier de l'invention, le 3p-chlθφhenoxypropane-l,2 diol est présent dans un solvant de reconstitution sous forme liquide d'une composition vaccinale qui se présente au moins partiellement sous forme lyophilisée.
Ainsi, dans le cas de vaccins multi-doses par exemple, la composition vaccinale reconstituée peut être conservée dans de bonnes conditions jusqu'à son utilisation complète.
Le solvant peut être un liquide dont la seule fonction est la reprise du lyophilisât ou être lui-même une composition vaccinale liquide qui est. en outre, avant son administration, utilisée pour dissoudre au moins une valence vaccinale supplémentaire présente sous forme lyophilisée.
L'activité anti-microbienne du conservateur selon l'invention est testée en solution aqueuse, afin de déterminer les concentrations minimales inhibitrices, bactéricides et fongicides selon la méthode décrite au chapitre "Evaluation de l'Activité Antimicrobienne des antibiotiques in vitro" de l'ouvrage "Bactériologie Médicale", Léon Le MINOR, Michel VERON. FLAMMARION. On obtient pour chaque germe les résultats suivants en pourcentage (m/v) :
Figure imgf000006_0001
On teste l'activité antimicrobienne d'une solution aqueuse contenant 0,5 % de 3p- chlθφhenoxypropane-1,2 diol, 0.4 % de NaCI et du tampon phosphate 20 mmolaire. selon les normes de la Pharmacopée Européenne (EP VIII.14.-1 ).
Les résultats obtenus pour chaque germe testé sont indiqués dans le tableau ci- dessous. Ces résultats sont exprimés en termes de réduction logarithmique décimale moyenne du nombre de microorganismes par rapport à un témoin peptone à l'instant T.
Figure imgf000006_0002
Augmentation infime, non significative par rapport au témoin peptone à l'instant T.
Ces résultats mettent en évidence une activité antimicrobienne d'une solution contenant 0,5 % de 3 p-chlθφhenoxypropane-1.2 diol lui permettant de répondre au critère A de la Pharmacopée Européenne. Exemple 1
On fabrique une composition vaccinale comprenant une dose vaccinante de chacune des souches suivantes du virus de la grippe : A/Shangdong, A/Texas, B/Panama. Les éléments de la composition vaccinale sont les mêmes que ceux utilisés dans le vaccin VAXIGRIP™ commercialisé par PASTEUR MERIEUX Sérums et Vaccins, à l'exception du mercurothiolate sodique qui est remplacé par le conservateur selon l'invention. La composition ainsi obtenue comporte également 25 μg/ml de formol qui est un résidu du procédé de fabrication des antigènes du virus de la grippe. On teste la stabilité de la composition vaccinale obtenue comparativement avec un conservateur selon l'invention et sans conservateur.
La stabilité de la composition vaccinale est appréciée en dosant la perte d'activité au cours du temps d'une composition maintenue à 37°C ou à 5°C. Le dosage de l'activité est effectué par immuno-diffusion radiale. Les résultats obtenus, résumés dans le tableau ci-après, sont exprimés en pourcentage d'activité par rapport au temps 0.
Figure imgf000007_0001
Les résultats obtenus montrent que le conservateur utilisé selon l'invention favorise en plus la stabilité de certains des antigènes présents dans la composition vaccinale par rapport à une composition vaccinale dépourvu de conservateur.
Exemple 2
On réalise des compositions vaccinales comprenant 1 dose vaccinante de chacune des 3 souches du virus de la poliomyélite (type 1 , 2 et 3). de même que dans le vaccin polio inactivé commercialisé par la Société PASTEUR MERIEUX Sérums et Vaccins ; le conservateur habituel 2 phenoxyéthanol est toutefois remplacé par du 3p- chloφhenoxypropane-1,2 diol à différentes concentrations. Les compositions vaccinales ainsi obtenues contenant également 25 μg/ml de formol qui constitue un résidu de fabrication, sont testées au moyen d'un test ELISA aux Antigènes D, pour vérifier le maintien de leur activité au cours du temps.
Les résultats obtenus pour chaque type sont indiqués dans le tableau ci-dessous ; ils sont exprimés de la même façon qu'à l'exemple 1 en pourcentage d'activité.
Figure imgf000008_0001
Etant donné la précision des titrages, les résultats obtenus permettent de considérer que l'ajout du conservateur selon l'invention ne modifie pas globalement la stabilité de la composition vaccinale.
Exemple 3
On prépare une composition vaccinale comportant l'antigène de surface de l'hépatite B, obtenu par recombinaison génétique et exprimé dans des cellules eucaryotes (levures ou cellules de mammifères) dont la composition est semblable à celle du vaccin Recombivax™ commercialisé par la Société MERCK, à l'exception du mercurothiolate sodique qui est remplacé par du 3p-chloφhenoxypropane-l ,2 diol associé ou non à du formol. On teste l'activité de la composition vaccinale obtenue, grâce à un dosage des antigènes Hbs au moyen d'un kit commercialisé par la Société ABBOTT.
Les résultats obtenus sont indiqués ci-après en pourcentage d'activité.
Figure imgf000009_0001
Les résultats obtenus montrent que le conservateur selon l'invention ne modifie pas substantiellement l'activité de la composition vaccinale obtenue.
Exemple 4
On prépare une composition vaccinale comprenant 1 dose vaccinante de vaccin rabique contenant du virus obtenu sur culture cellulaire, inactivé et purifié, présenté sous forme d'un lyophilisât destiné à être repris extemporanément par un solvant.
Le solvant constitué selon l'art antérieur par une solution aqueuse de NaCI à 0,4 % comporte, selon l'invention, du 3p-chlθφhenoxypropane-l,2 diol à une concentration de 0,4 %. On teste, de façon comparative, la stabilité de la composition vaccinale obtenue par reprise du lyophilisât avec un solvant contenant un conservateur selon l'invention, avec un solvant selon l'art antérieur (c'est-à-dire comportant uniquement du NaCI) et avec de l'eau, après stockage dans différentes conditions.
Les dosages sont effectués par immuno-diffusion radiale (SRD) ; les résultats indiqués dans le tableau ci-après sont exprimés en différence de titre SRD par rapport à un échantillon stocké à - 20°C et dont le lyophilisât est repris extemporanément.
Figure imgf000009_0002
Les résultats obtenus montrent la compatibilité du conservateur selon l'invention avec le vaccin rabique et confirment la possibilité d'utiliser le 3p-chlθφhenoxypropane- 1,2 diol comme conservateur non pas directement dans la composition vaccinale liquide, mais également dans le solvant de reprise du vaccin lyophilisé.
Exemple 5
On prépare une composition vaccinale comprenant par dose de 0,5 ml une dose vaccinante de vaccin rabique inactivé, présenté sous forme d'un lyophilisât destiné à être repris par un solvant.
Le solvant est constitué par une solution aqueuse 20 mmolaire en phosphates et comprenant du NaCI à 0,4 % et du 3p-chloφhenoxypropane- 1 ,2 diol à 0,5 %. Le pH du solvant est 7,2.
On vérifie le maintien de l'immunogénicité de la composition vaccinale même si elle n'est pas utilisée immédiatement après la reprise du lyophilisât, lors d'un test NIH qui consiste notamment à immuniser des souris avec la composition vaccinale à tester et à les challenger ensuite avec du virus de la rage. Un tel test est décrit notamment dans la Pharmacopée Européenne 2ème édition 1983, Monographie N° 216.
Les résultats obtenus, exprimés en Ul/ml sont considérés staisfaisants s'ils sont supérieurs à 2,5 Ul/ml.
L'immunisation des souris est réalisée avec des compositions vaccinales dont la reprise du lyophilisât a été effectuée extemporanément (T=0) ou ayant été maintenues 7 jours à 5°C après la reprise du lyophilisât ou encore 48 heures à 25°C. Les résultats obtenus sont les suivants :
Immunisation à T=0 3.65 Ul/ml
Immunisation après maintien 7 jours à 5°C 3, 16 Ul/ml du lyophilisât repris par le solvant
Immunisation après maintien 48 h à 25°C 4,10 Ul/ml du lyophilisât repris par le solvant Un test identique a été réalisé avec une composition vaccinale dépourvue de 3p- chloφhenoxypropane-1,2 diol ; les résultats obtenus sont équivalents.
Les résultats obtenus montrent le maintien de l'immunogénicité de la composition vaccinale ; il n'y a donc pas d'effet immunosuppresseur exprimé du 3p- chloφhenoxypropane- 1 ,2 diol, ni de dégradation de l'antigène viral en présence du conservateur selon l'invention.
Exemple 6
On fabrique une composition vaccinale hexavalente comprenant
- 1 dose vaccinante d'antigène Hbs (Hépatite B) adsorbé sur hydroxyde d'aluminium
- 1 dose vaccinante de vaccin polio (types 1, 2 et 3)
- 1 dose vaccinante de vaccin diphtérique
- 1 dose vaccinante de vaccin tétanique
- 1 dose vaccinante de vaccin coqueluche acellulaire
- 1 dose vaccinante de PRP-T (Antigène de Haemophilus influenzae type b)
On ajoute à cette composition vaccinale du 3p-chlθφhenoxypropane-l,2 diol à différentes concentrations : 0,125 % ; 0.25 % et 0.5 %. On teste la compatibilité du conservateur utilisé pour chaque concentration vis-à-vis de chacune des valences vaccinales de la composition. Les tests relatifs au maintien de l'activité des valences hépatite B et polio sont effectués selon les méthodes décrites aux exemples 2 et 3.
Les résultats obtenus sont les suivants :
Figure imgf000011_0001
L'activité des valences diphtérie, tétanos, coqueluche et PRP-T, a été testée in-vivo avec une composition vaccinale contenant 0,5 % de 3p-chlθφhenoxypropane-l,2 diol, ayant été maintenue 6 semaines à 5°C avant d'être testée. L'immunisation des animaux a conduit au verdict : "conforme" pour chacune des valences testées.
Ces résultats démontrent une bonne compatibilité du conservateur selon l'invention vis-à-vis de chacun des antigènes testés, même lorsqu'ils sont associés dans une composition vaccinale plurivalente, ainsi que le maintien de leur immunogénicité.
Exemple 7
Afin de vérifier la non-dégradation du conservateur selon l'invention, on réalise des compositions vaccinales identiques à celles de l'exemple 2. On dose par HPLC la quantité de 3p-chlθφhenoxypropane-l,2 diol présente dans chaque composition après stockage dans différentes conditions de durée et de température. Les résultats obtenus sont les suivants :
Figure imgf000012_0001
Les résultats obtenus montrent qu'il n'y a pas de dégradation sensible au cours du temps du conservateur utilisé selon la présente invention. Cette non-dégradation a pour conséquence l'avantage que le conservateur selon l'invention n'entraîne pas de variation de pH qui pourrait se traduire par une diminution de l'activité de certains antigènes.

Claims

Revendications
1. Procédé de conservation d'une composition vaccinale, caractérisé en ce qu'il consiste à introduire dans la composition vaccinale du 3p-chθφhenoxypropane- 1,2 diol.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la quantité introduite de 3p-chlθφhenoxypropane-l,2 diol est au moins égale à 2 g/l.
3. Procédé selon une des revendications précédentes, caractérisé en ce que la quantité de 3p-chloφhenoxypropane 1,2 diol est sensiblement égale à 5 g/l.
4. Procédé selon une des revendications précédentes, caractérisé en ce que la composition vaccinale comprend une ou plusieurs valences choisies parmi : l'hépatite A, l'hépatite B, la rage, la polio (type 1, type 2, type 3), la grippe, les infections à Haemophilus influenzae type b, la diphtérie, le tétanos, la coqueluche.
5. Procédé selon une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il consiste en outre à ajouter du formol.
6. Utilisation de 3p-chlθφhenoxypropane-l ,2 diol comme conservateur dans une composition vaccinale.
7. Utilisation de 3p-chlθφhenoxypropane-l,2 diol comme stabilisant dans une composition vaccinale.
8. Utilisation du 3p-chloφhenoxypropane-l,2 diol selon une des revendications 6 ou 7, caractérisée en ce qu'il est associé à du formol.
PCT/FR1996/001042 1995-07-05 1996-07-04 Conservateur pour composition vaccinale WO1997002044A1 (fr)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AU65219/96A AU6521996A (en) 1995-07-05 1996-07-04 Preservative for a vaccine composition

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR95/08323 1995-07-05
FR9508323A FR2736267B1 (fr) 1995-07-05 1995-07-05 Conservateur pour composition vaccinale

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO1997002044A1 true WO1997002044A1 (fr) 1997-01-23

Family

ID=9480849

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR1996/001042 WO1997002044A1 (fr) 1995-07-05 1996-07-04 Conservateur pour composition vaccinale

Country Status (3)

Country Link
AU (1) AU6521996A (fr)
FR (1) FR2736267B1 (fr)
WO (1) WO1997002044A1 (fr)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6110188A (en) * 1998-03-09 2000-08-29 Corvascular, Inc. Anastomosis method

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5391373A (en) * 1992-07-01 1995-02-21 Chanel, Inc. Skin cream composition

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5391373A (en) * 1992-07-01 1995-02-21 Chanel, Inc. Skin cream composition

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
F. M. BERGER ET AL.: "THE EFFECT OF CHLORPHENESIN ON THE IMMUNE RESPONSE.", JOURNAL OF IMMUNOLOGY, vol. 102, no. 4, 1969, BALTIMORE US, pages 1024 - 1031, XP000567814 *
H.Y. WHANG ET AL.: "CHLORPHENESIN:AN ANTIGEN-ASSOCIATED IMMUNOSUPPRESSANT", INFECTION AND IMMUNITY, vol. 2, no. 1, July 1970 (1970-07-01), WASHINGTON US, pages 60 - 64, XP000567816 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6110188A (en) * 1998-03-09 2000-08-29 Corvascular, Inc. Anastomosis method

Also Published As

Publication number Publication date
FR2736267B1 (fr) 1997-08-08
AU6521996A (en) 1997-02-05
FR2736267A1 (fr) 1997-01-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0983087B1 (fr) Composition vaccinale multivalente a porteur mixte
EP2268816B1 (fr) Polynucléotides et polypeptides chimériques permettant la sécrétion d'un polypeptide d'intérêt en association avec des exosomes et leur utilisation pour la production de compositions immunogènes
EP0828511B1 (fr) Composition vaccinale anti-Haemophilus influenzae de type b comprenant du polyribosylribitol phosphate et son procédé de préparation
EP1893228B1 (fr) Polypeptides chimeriques et leurs applications thérapeutiques contre une infection à flaviviridae
EP0560968B1 (fr) Vaccin contre les infections a neisseria meningitidis
EP0088303A2 (fr) Procédé de préparation de complexes polysaccharide-protéine de capsules bactériennes, produits obtenus et compositions immunogènes les contenant
FR2827605A1 (fr) Nouveaux peptides derives de la proteine g du vrs et leur utilisation dans un vaccin
EP1446422B1 (fr) Antigene mycobacterien recombinant de type hemagglutinine de liaison a l'heparine (hbha) methylee
CA2384437C (fr) Compositions acellulaires immunogenes et compositions acellulaires vaccinales contre bacillus anthracis
EP0235474A1 (fr) Antigènes purifiés ayant des propriétés vaccinantes contre B. pertussis, moyens notamment ADNs recombinants pour les produire et compositions de vaccins les contenant
EP1696954B1 (fr) Composition vaccinale adjuvantée par une alkylphosphatidylcholine
WO1997002044A1 (fr) Conservateur pour composition vaccinale
FR2590172A1 (fr) Nouvel antigene commun (psc-a) de pseudomonas aeruginosa protegeant contre l'infection provoquee par cet organisme
FR2730935A1 (fr) Vaccin presentant une immunogenicite accrue
EP1248650A2 (fr) Vaccins adn ameliores pour animaux de rente
EP0949923B1 (fr) Compositions pharmaceutiques stabilisees, a base de quinupristine et de dalfopristine et leur preparation
FR2634125A1 (fr) Composition pharmaceutique a base de superoxyde dismutase
WO2003102170A1 (fr) Souches de bordetella rendues deficientes par attenuation genetique
WO1992019720A1 (fr) Souches recombinantes immunogenes de b. anthracis - compositions immunogenes les contenant
EP0700992B1 (fr) Procédés de culture, d'atténuation de la virulence et de clonage in vitro de parasites du genre Babesia et leurs applications
WO2001093906A1 (fr) Composition adjuvante comprenant la proteine fha ou un fragment de la proteine fha sous forme libre
BE665076A (fr)
WO2015079420A2 (fr) Composition vaccinale pour la prevention et/ou le traitement de leishmanioses, peptides immunogenes et procede d'obtention
EP1161251B1 (fr) Utilisation d'une composition bacterienne comprenant des proteoglycanes de klebsiella pneumoniae et des ribosomes ou des arn ribosomaux bacteriens, pour la preparation d'un medicament pour le traitement des maladies parodontales
CA2460042A1 (fr) Inhibition de la presentation de l'antigene avec des polymeres faiblement catabolises

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AU CA CN JP KR US

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE CH DE DK ES FI FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE

DFPE Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed before 20040101)
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
122 Ep: pct application non-entry in european phase
NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: CA