WO1991018869A1

WO1991018869A1 - Phenyl 4-guanidinobenzoate derivative, process for producing the same, and protease inhibitor containing the same

Info

Publication number: WO1991018869A1
Application number: PCT/JP1991/000773
Authority: WO
Inventors: Yoshiharu Hayashi; Yuji Yamaura
Original assignee: Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha
Priority date: 1990-06-08
Filing date: 1991-06-07
Publication date: 1991-12-12
Also published as: CA2064462A1; JPH0446148A; AU7962091A; EP0486702A1

Description

明細書

4 —グァ二ジノ安息香酸フヱニルエステル誘導体とその製法およびそれらを舍有する蛋白分解酵素阻害剤技術分野

本発明は、新規な 4 一グァニジノ安息香酸フュニルエステル誘導体に関し、さらに詳しくは、蛋白分解酵素阻害活性を有する 4 —グァニジノ安息香酸フヱニルエステル誘導体またはその薬理的に許容される酸付加塩とその製法およびそれを有効成分とする蛋百分解酵素阻害剤に関する。

背景技術

薛炎は、臨床的には急性脬炎と慢性薛炎とに分類される。急性脬炎は、発病の原因あるいは因子が除去されると、臨床的にも生物学的にも塍臓は正常化する。一方、慢性薛炎では、発病の原因または因子が消滅しても組織学的あ ·るいは機能的変化が残存するとされている。塍炎の成因としては、必ずしも明白ではないが、我が国ではアルコール性が最も多く、ついで原因不明（特発性）、胆石性といわれている。

脬炎の発症から進展（播種性血管内凝固、'多臓器障害等）に至る過程は複雑であり、まだ十分には解明されていない。現在のところ薬物療法としては、抗蛋白分解酵素剤が広く適用されている。代表的なものとして、特開昭 51— 138642、特開昭 57— 53454、特開昭 62— 155253および特開昭 63 _ 165357に記載の化合物が知られているが、その効果はまだ十分なものではない。このような状況のもと、複雑な増悪過程にも有効で、しかも-、さらに安全性が高く、より優れた蛋白分解酵素阻害剤の開発が望まれている。

発明の開示

本発明は、従来の抗蛋白分解酵素剤よりもさらに優れた蛋白分解酵素阻害効果を有する物質とその製法、およびそれらを有効成分とする各種の医薬品として有用な蛋白分解酵素阻害剤の開発を目的とする。

本発明者らは、前記の課題を解決するため鋭意研究を重ねた結果、新規な一般式（ I ) に示される 4 ーグァニジノ安息香酸フエニルエステル誘導体が、トリプシン、トロンビン、プラスミン、カリクレイン、ファクタ一 X a、エラスターゼ等の広いスぺクトルの各種セリンプロテア一ゼに対し、強力な胆害活性を有していることを見い出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、一般式（ I )

〔式中、 R¹は水素原子またはハロゲン原子、 R²はトリフルォロメトキシ基、 0C0R³ 、 C NOR⁴)!?⁵またはスチレンスルホニル基. は置換もしくは無置換の C₃-₇シクロアルギル基、 R⁴は水素原子、 d— ₄アルキル基、 Cい ₄アルケニル基または Cll₂C00R⁶、 R⁵は水素原子または C卜 ₄アルキル基、 R⁴¹は水素原子または d— ₄アルキル基を表わす。〕

で示される 4 —グァニジノ安息香酸フヱニルエステル誘導体またはその薬理的に許容される酸付加塩およびそれらを有効成分とする蛋白分解酵素阻害剤を提供するものである。

上記の薬理的に許容される酸付加塩とは、具体的には塩酸塩臭化水素酸塩，ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、硝酸塩等の無機酸の付加塩、酢酸塩、シユウ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、メタルスルフォン酸塩、ェタンスルフォン酸塩、トルエンスルフォン酸塩などの有機酸の付加塩を挙げることができる。

一般式（ I ) の本発明化合物は、例えば、一般式（ Π ) '

で示される 4 —グァニジノ安息香酸もしくはその反応性誘導体と、一般式（ m )

( ffl )

(式中、 R¹および R²は前記と同じ意味を表す。）

で示される化合物をエステル化反応せしめることによって製造することができる。具体的には一般式（ II ) で示される 4 —グァニジノ安息香酸の酸ハロゲン化物、すなわち、 .下記の一般式

(IV) で示される化合物〔例えば、化合物（ Π ) を ^ォニルク口ライドと共に加熱することにより容易に得られる〕

NH

H₂N— C - NH— >— COHal ( IV ) (式中、 Ha l は塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子を表す。）を、ピリジン、トリェチルァミン等の酸結合剤の存在下に、一般式（ 1Π ) の化合物と反応させることによって、一般式（ I ) の本発明化合物を製造することができる。この方法において用いる溶媒としては水性媒体あるいは有機溶媒であり、例えば、エーテル、テトラヒドロフラン等のエーテル系容媒、ベンゼン、トルエン等の芳香族溶媒、ピリジンな-どの複素環系溶媒、 N > N —ジメチルホルムアミド、 N , N —ジメチルァセトアミド、ジメチルスルフォキサイド等の非プロトン性極性溶媒等を挙げることができる。これらのうち、ピリジンが最も好適である力く、ピリジン以外の溶媒を用いる場合は、酸結合剤としてトリェチルァミン、トリブチルァミン、ジメチルァミン、ピリジン等の有機塩基、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム等の無機塩基を用いることができる。

また、別の方法として、一般式（ Π ) で示される 4 —グァニジノ安息香酸と、一般式（ H ) で示される化合物を、例えば、 D C C ( 1 , 3 —ジシクロへキシルカルポジイミド）、 E D C 〔 1 —ェチル一 3— （ 3 —ジメチルァミノプロピル）カルボジィミド塩酸塩）等の脱水剤の存在下に、無溶媒あるいは有機溶媒中で、直接縮合させることもできる。

このような方法によつて得られる一般式（ I ) の本発明化合物は、常法により適宜薬理的に許容される酸付加塩に誘導できる。

具体的に一例を述べれば、得られた一般式（ I ) の化 ^物を炭酸水素ナトリウム水溶液で処理して炭酸塩とし、これを必要 δ

により、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、硝酸塩等の無機酸の塩、酢酸塩、シユウ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、メタンスルフオン酸塩、エタンスルフォン酸塩、トルエンスルフォン酸塩などの有機酸の塩に容易に誘導することが可能である。

次に、本発明化合物について列記するが、これは、本発明の理解を容易にするためであり、本発明がこれによつて限定されるものではないことは言うまでもない。

(1) 2 — トリフルォロメトキシフエニル 4 ーグァニジノベンゾエート

(2) 3 — トリフルォロメトキシフエ二ル 4 —グァニジノベンゾェ一ト

(3) 4 一トリフルォロメトキシフヱニル 4 ーグァニジノベンゾエート

(4) 3 — シクロプロビルカルボニルォキシフエニル 4 ーグァニジノベンゾェ一ト

(5) 3— （ 1 ーメチルシクロプロピルカルボニルォキシ）フエニル 4 ーグァニジノベンゾェ一ト

(6) 3 — シクロブチルカルボニルォキシフエニル 4 —グァニジノベンゾエート

(7) 3 — シクロペンチノレカルボニルォキシフエ二ノレ 4 ーグァ二ジノベンゾェ一ト

(8) 3 — シクロへキシルカルボニルォキシフエニル 4 ーグァニジノベンゾェ一ト

(9) 3— ( 1 — ヒドロキシイミノエチル）フエ二ノレ 4 —グァニジノベンゾエート

(10) 3 — （ 1 —メトキシイミノエチル）フエ二ル 4 — 'グァニジノベンゾェート

(11) 3 — （ 1 —ァリルォキシイミノエチル）フエニル 4 ーグァニジノベンゾェ一ト

02) 3 — （ 1 一カルボキシルメトキシィミノェチル）フエニル

4 ーグァニジノベンゾエート

(13) 3 - ( 1 —メトキシカルボニルメトキシィミノェチル）フェニル 4 一グァニジノベンゾエート

04) 3 — （ 1 一エトキシカルボニルメトキシイミノエチル）フェニル 4 一グァニジノベンゾェ一ト

(19 3 — ヒドロキシィミノメチルフエニル 4 —グァニジノべンゾエート

06) 3 —メトキシィミノメチルフエニル 4 —グァニジノベンゾエート

07) 3 —エトキシィミノメチルフエニル 4 ーグァニジノベンゾエート

08) 3 —メトキシカルポ二ルメトキシィミノメチルフエニル 4 ーグァニジノベンゾェート

09) 3 —エトキシカルボニルメトキシィミノメチルフエニル 4 一グァニジノベンゾェート

IM 2 - ( /? 一スチレンスルフォニルォキシ）フエ二ノレ 4 — グァニジノベンゾエート

(21 ) 3 - ( /5 —スチレンスルフォニルォキシ）フエニル 4 ーグァニジノベンゾエート (22) 4 - ( /? — スチレンスノレフォニルォキシ）フエニル 4 —グァニジノベンゾェ一ト

(23) 2 — クロロー 5 — シクロプロピルカルボニルォキシフエニル 4 ーグァニジノベンゾエート

(24) 3 — クロロー 5 — シクロプロピル力ノレボニルォキシフエニル 4 —グァニジノベンゾエート

(25) 2 — クロ口 _ 5 — ( 1 —メチルシクロプロピルカノレボニルォキシ）フエニル 4 —グァニジノベンゾエート

(26) 3 — クロロー 5 ( 1 ーメチノレシクロプロピル力ル'ボ二ゾレオキシ）フエ二ノレ 4 一グァニジノべンゾエート

(27 ) 3 —プロモー 5 ( 1 —メチルシク口プロピルカルボ二ノレォキシ）フエ二ノレ 4 ーグァニジノベンゾエート

(28) 2 —フルオロー 5 — ( 1 —メチルシクロプロピルカルボニルォキシ）フエニル 4 ーグァニジノベンゾエート

(29) 3 —クロ口一 5 — シクロブチノレカルボニルォキシフエ二ル 4 —グァニジノベンゾエート

(30) 3 — クロ口 _ 5 — シクロペンチルカルボニルォキシフエニル 4 ーグァニジノベンゾエー卜

(31 ) 3 —クロ口一 5 — シクロへキシルカノレボニルォキシフエニル 4 ーグァニジノベンゾエート

(32) 2 —クロ口一 5 — ( 1 — ヒドロキシイミノエチル）フエニル 4 ーグァニジノベンゾエート

(33) 2 — クロロー 5 — ( 1 —メトキシイミノエチル）フエ二ル 4 ーグァニジノベンゾェ一ト

(34) 2 — クロロー 5 — ( 1 —メトキシカルボニルメトキシィミノェチル）フエニル 4 — グァニジノベンゾェ一ト

(35) 2 —クロ口一 3 — （ ^ 一スチレンスルフォニルォキシ）フエニル 4 ーグァニジノベンゾエート

(36) 2 —クロロー 4 一（ ^ 一スチレンスルフォニルォキシ）フエニル 4 ーグァニジノベンゾェ一ト

(37) 2 —クロロー 5 — （ースチレンスルフォニルォキシ）フエニル 4 —グァニジノベンゾエート

(38) 3 —クロ口一 4 一（一スチレンスルフォニルォキシ）フエニル 4 —グァニジノベンゾエート

(39) 3 —クロロー 5 — （ /9 一スチレンスルフォニルォキシ）フエニル 4 —グァニジノベンゾエート

(40) 3 —クロ口一 6 — —スチレンスルフォニルォキシ）フエニル 4 ーグァニジノベンゾエート一般式（ I ) の化合物およびその薬理的に許容される酸付加塩は、トリブシン、トロンビン、プラスミン、ファクター X a およびエラスターゼ等の酵素に対し、極めて強力な阻害作用を有しており、よって、トリブシン組害活性に基づいた急性および慢性薛炎の治療剤、さらに、トロンビン、プラスミン、ファクタ一 X a阻害活性に基づいた出血性疾患および血栓治療剤、また、ェラスターゼ阻害活性に基づいたェラスチン等の蛋白の分解の異常亢進に起因する疾患の治療および/または予防に有用である。

本発明化合物を、これらの疾患の治療剤として前述し，'こ患者に投与する場合は、疾患の種類、症状の程度、患者の年齢、健康状態、体重、同時処置がある場合ならばその種類、処置頻度所望の効果の性質等によって異なり、特に限定はされないが、通常、成人一人一日当り約 5 〜 1000 ig、好ましくは約 10〜500 mgを、経口もしくは非経口的に一日一回もしくはそれ以上投与される。

投与剤型としては、例えば、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、坐剤、注射剤等が挙げられる。製剤化の際は、通常の製剤担体を用い、常法により製造する。

賦形薬としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、ソルビット、結晶セルロース、二酸化ケイ素等を、結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルェーテノレ、ェチノレセノレロース、メチノレセノレ口一ス、アラビアゴム - トラガント、ゼラチン、シユラッタ、ヒドロキシプ口ピルセルロース、ヒドロキシプロビルスターチ、ポリビニルピロリドン等を、崩壌剤としては、例えば、デンプン、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、クェン酸カルシウム、繊維素ダルコン酸カルシウム、デキストリンぺクチン等を、潤滑剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシゥム、タルク、ボリエチレングリコール、シリカ、硬化植物油等を、着色剤としては、医薬品に添加することが許可されているものを、矯味矯臭剤としては、ココア末、ハ 'ン油、芳香酸、桂皮末等を用いることができる。これらの錠剤、顆粒剤には糖衣、ゼラチン衣、その他必要により適宜コ一ティングすることは勿論さしっかえない。

注射剤を調製する場合には、主薬に必要により P H調整剤、緩衝剤、安定化剤、可溶化剤等を添加し、常法により静脈内用注射剤とする。

発明を実施するための最良の形態

次に、本発明の実施例を示すが、本発明がこれらの実施例に限定されるものでないことはいうまでもない。

実施例 1

3 —クロ口一 5 — —スチレンスルフォニルォキシ）フエニル 4 —グァニジノベンゾェ一ト ' メタンスルフォン酸塩

(化合物 3 9 ) の合成 '

H₂N- ( V )

4 —グァニジノベンゾイルク口ライド塩酸塩 1.2 g、 3 —クロロー 5 — （ /8—スチレンスルフォニルォキシ）フエノール 1.6 gおよびピリジン 25 ^の混合物を氷冷下で 30分間攪拌した。反応終了後、ピリジンを減圧下で留去し、次いで、反応生成物を水に溶解し、さらに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて標題化合物（V ) の炭酸塩を得た。得られた結晶を水およびァセトンで順次洗浄し、真空乾燥した。結晶をメタノールに懸濁させ、メタンスルフォン酸 0.25gを加えた後、ジェチルエーテルで希釈し、折出した結晶を真空乾燥し、白色結晶の標題化合物 ( V ) 1.1 gを得た。

' 核磁気共鳴スぺクトル（DMSO— d₆ ； ppm) ： 2.42(s, 3H)、 7.46〜8.17 (m, 18H) 、 10.19 (s, 1H)

赤外線吸収スぺクトル（ KBr ペレツト； cm - ¹ )

1734.2 1684.1 1595.2 1570.1 1437.5 1374.9 1249.0 1211.8 H 1172.1 1117.4 1069.2 1047.9 976.0 884.0 824.8 757.6

兀茶分析

理論値（％) ； CC ： 4488..6633,, HH ： 33..9900,, U ： 6.24

N 7.39， S 11.28

実測値（％) C 48.98, H 3.79, C ： 6.10

N 7.45, S 11.43

下記の反応式に示すように、上記実施例における 3.—クロ口 — 5 — ( /? —スチレンスルフォニルォキシ）フエノールの代わりに相当するフノール誘導体を用いる以外は、全く同様にして表 1 に示す本発明化合物（化合物 3 および化合物 2 ) を得た,

'申

(式中、 R ¹は H、 R²は 4 一トリフルォロメトキシまたは 3 — トリフルォロメトキシを表す。）物性

実施例 2

3 — クロ口一 5 — ( 1 — メチルシクロプロピノレカルボニノレオキシ） Hフエニル 4 ーグァニジノベンゾエート · メタンスルフォン酸塩（化合物 2 6 ) の合成

( VI )

4 ーグァニジノ安息香酸塩酸塩 1.1 gを無水ピリジンおよび D M F ( N , N— ジメチルホルムアミド） ΙΟίώ (混合比 = 1 ： 1 V / V ) に溶解し、一 20てに冷却した後、 D C C ( Ν , Ν - ジシクロへキシルカルボジィミド） 1.1 gを添加し、 15分間攪拌した。続いて 3 — クロロー 5 — （ 1 —メチルシクロプ π ピルカルボニルォキシ）フユノール 1.2 gを加え、反応温度を室温まで除々に上げながら 24時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧下で留去し、水を加えて不溶物を濾別した。得られた水溶液に飽和炭酸水素ナトリゥム水溶液を加えて標題化合物（VI ) の炭酸塩を得た。 .得られた結晶を水およびァセトンで順次洗浄し真空乾燥した。結晶をメタノールに懸濁させ、メタンスルフォン酸 0.2 gを加えた後、ジェチルエーテルで希釈し、折出した結晶を真空乾燥し、白色結晶の標題化合物（VI ) l.O gを得た。 • 核磁気共鳴スぺクトル（DMS0— d₆ ； ppm) ：

0.90〜0.97(m,2H)、 1.32〜1.38(m,5H)、 2.38(s,3H)、 7.21 -

8.17(m, 11H) 、 10.29(s, 1H) 赤外線吸収スぺクトル（ KBr ペレツト； cnT )

1734.3 1684.4 1628.3 1599.4 1570.0 1447.6 1322.3 1268.6 1183.2 1134.0 1074.7 1048.5 848.7 785.2 668.0 553.9

元素分析

理論値（％) C 49.64, H 4.58, C£ ： 7.32

N 8.68, S 6.62

実測値（％) C 49.85, H 4.47, CSt ： 7.18

N 8.50, S 6.75

下記の反応式に示すように、上記実施例における 3 —クロロ — 5 — ( 1 —メチルシクロプロビルカルボニルォキシ）フエノールの代わりに相当するフノール誘導体を用いる以外は、全く同様にして表 2に示す本発明化合物（化合物 3 1 および化合物 1 0 ) を得た。

NH

H₂N

〔式中、 R ,は 3 — C£または H R²は 5 — シクロへキシルカルボニルォキシまたは 3 _ ( 1 —メトキシイミノエチル）を表す。表 2 物性

Cn

製剤例 1

4 —グァニジノ安息香酸 3 — クロ口 — 5 — ( - スチレンスルフォニルォキシ）フエニルエステルメタンスルフォン酸塩

(化合物 3 9 ) 10 g、繊維素ダルコン酸カルシウム（崩壊剤） 400 mg、ステアリン酸マグネシウム（潤滑剤） 200 mg、および結晶セルロース 9. 4 gを常法により混合し、打錠して、一錠中に lOOni の活性成分を舍有する錠剤 100錠を得た。

製剤例 2

4 一グァニジノ安息香酸 3 — クロ口 — 5 — ( /3 — スチレ： ·' 7. ルフォニルォキシ）フエニルエステルメタンスルフォン酸塩

(化合物 3 9 ) 1 gをェタノール 10 に溶解し、バクテリア保留フィルタ一を通して殺菌し、 5 容量ァンプル当りずつ入れることにより、ァンプル当り 50nigの活性成分が舍まれるようにし、アンプルを封管した。アンプルの内容物は適当な容量の希釈液、例えば、 P H 8. 6 のトリス塩酸緩衝液で 2. 5 m こ希釈し注射剤として用いられる。

次に、本発明化合物の薬理作用を実験例によって示す。

薬理実験例 1

本発明化合物（ I ) の代表的化合物（化合物 3 9、 3、 2、 2 6、 3 1、 1 0 ) についての、インビト口でのトリプシン、トロンビン、プラスミン、ファクタ一 X a およびエラスターゼ阻害活性の測定は、特開平 2 — 101017に記載の方法を基本としわずかな変法によって行った。

すなわち、トリプシンについては、ベンゾィル _ Arg - 7 - アミドー 4 —メチルクマリン、トロンビンについては、 Boc— Va】一 Pro— Arg— 7 —アミド一 4 ーメチノレクマリン、ブラスミンについては、 Boc— Val— Leu一 Lys— 7 —ァミド一 4 — メチルクマリン、ファクター X a については、 Boc— 11 e— G 1 u— G — Arg— 7 —アミド一 4 一メチルクマリン、エラスターゼについては、メトキシサクシニノレー Ala— Ala— Pro— Val— 7 — アミドー 4 ーメチルクマリンをそれぞれ基質とし、 50%阻害濃度 ( IC₅₀) を測定した。酵素反応は 0.2M トリス -塩酸緩衝液 (0.02M CaC 、 0.005% トリトン X — 100 を含む）中で行い、トリプシン、トロンビン、プラスミン、ファクタ一 X a については、 pH8.0 、エラスターゼについては、 pH7.2で行った。トリプシンについては、検体液と酵素溶液の混合液を.25ΐで 60 分間インキュベートし、その他の酵素については、 25 °Cで 20分間インキュベートした。なお、比較例 1 として特開昭 51— 138642号記載の化合物、比較例 2 として特開昭 63— 165357号記載の化合物を用いた。結果を表 3 に示す。

表 3 評 iiS 結果

化合物 · 50% 01 害濃度（ I C₅。） (M)

Τ リプシンロンビンプラスミンファクタ一 Xa ラスターセ

39 3.6X10— ¹⁰ 2.1X10"⁸ 1.2X10"⁸ 1.6X10" ⁷ .0X10-⁹ 3 8.4X10- ¹⁰ 3.9X10- ⁸ 1.8X10- ^B 4.4X10 ,9X10" 2 1.7X10-¹⁰ 7.7x10- 8 4.3X10-⁸ 4.3X10 ⁷ .4X10 ⁷

2 6 2.5X10"'⁰ 6.9X10- ⁸ 1.5X10 ― 8 3.4X10 ⁷ ,4X10" 3 1 4.7X10-'° 5.8X10— 7 1.0X10一⁸ 3.6X10 " 3X10" 1 0 5.2X10-'° 1.4X10- 7 6.3X10-⁸ 2.5X10 (' 8X10" 比較例 1 2.5X10- ^B 5.1X N N10-" 1.2X10 - 7 5.6X10 ⁵ 4X10 ³ 比較例 2 9.5X10"⁹ 8.8X10— 7 9.0X10-⁸ 8.5 10 " oxio-⁷ 比較例 1 ：特開昭 51 - 138642号

記載の化合物

CNH . — " CH: • Oil ₃ SO 3 H H_zfT 、- 比蛟例 2 ：特開昭 63 - 165357号

記載の化合物

ゝ CNII《 ίίθ \—

Ν ェ---9-241822-1-- -

上記の実験例から、本発明化合物は、優れたトリプシン、トロンビン、プラスミン、ファクタ一） { a およびエラスターゼなどの酵素に対し、強力な阻害作用を有していることが明らかとなった。

さらに、上記の実験例に用いた本発明化合物について、マウスを用いた静脈投与による急性毒性試験を行なつたところ、本発明化合物の LD₅。値は、いずれも 50〜200mgZkgであった。このように本発明化合物の毒性は十分に低いものであり、医薬品として十分安全に使用できることが確認された。

薬理実験例 2

本発明化合物（ I ) の代表的化合物である化合物 3 9 について、インビボでの薬効を評価するため、ラットにセルレインを 40/¾Zkgを 1 時間間隔で 2回腹腔内に投与して急性浮腫性薛炎を作成し、経口投与に於ける薛炎に対する予防効果を検討した < 実験には Wistar系雄性ラット（体重 300〜350 g ) を用い、実験動物は 3匹を 1群とした。各群とも動物は飽食状態で早朝 8 時から実験を開始した。体重測定後、セルレイン薛炎を作成した。すなわち、 40 /kgのセルレイン（協和'発酵社製）を 1時間間隔で腹腔内に 2回注射し、 2回目のセルレイン投与から 6 時間後に開腹し、腹部大動脈から採血し、ただちに薛臓を摘出した。化合物 3 9を用いてポリビニルビ口リドン製剤（本発明化合物 20重量％、ポリビニルピロリドン 80重量％) を作成し、水溶液 UOmg/ffiC) としてセルレイン投与 15分前に経口投与した。

眩臓は湿重量を測定して対体重比を求めた。比較例として薬理実験例 1 において比較例 1 として用いた特開昭 51— 138642号記載の化合物を用いるほかは上記と全く同様の方法で実験を行つた。結果を表 4 に示す。なお組織学的所見は化合物 3 9 の 10 mg、 50mg、 lOOmgZラット投与群はともに腺房細胞の胞体内に空胞の出現は明らかでなく、間質の浮腫も軽度であった。これらの変化は化合物 3 9の経口投与量を増すにつれ顕著であり、化合物 3 9の塍炎予防効果は明らかであつた。

比較例 1 lOOmgZラット経口投与群も脬炎像の軽減をみるが、その軽減の程度は化合物 3 9 に比べ、軽微であった。

表 4. 評価結果

%脬重量血清ァミラーゼ

( Ιϋ/ ) 無処置群 0.38±0.06 134±11 セルレイン単独投与群 0.88±0.07 817±103 +化合物 39 10mg/kg 0.99±0.16 556±31 +化合物 39 50mg/kg 0.66±0.04 362 ±15 +化合物 39 100mg/kg 0.39±0.06 99±17 +比較例 1 100mg/kg 0.47±0.09 216±7

産業上の利 ffl可能性

本発明の一般式（ I ) の化合物およびその薬理的に許容される酸付加塩は、トリプシン、トロンビン、プラスミン、力リクレイン、ファクター X a、エラスタ一ゼ等の各種セリン ··ロテァーゼに対し、強力な阻害活性を有しており、従って例えば薛炎の治療に有効な抗トリプシン剤、出血性疾患の治療に有効な抗プラスミン剤、血栓の治療に有効な抗トロンビン剤として有用である。またエラスターゼ阻害剤としての新規な用途にも有用である。

Claims

請求の範囲

(1) 一般式（ I )

( I )

〔式中、 R¹は水素原子またはハ口ゲン原子、 R²はトリフルォ口メトキシ基、 0C0R³ 、 C( = N0Bつ!?⁵またはスチレンスルホニル基. R³は置換もしくは無置換の C₃- ₇シクロアルキル基、 R⁴は水素原子、 —₄アルキル基、 Cい ₄アルケニル基または CH_zCO0R^fc、は水素原子または - ₄アルキル基、！?⁶は水素原子または C,-₄アルキル基を表わす。〕

で示される 4 —グァニジノ安息香酸フュニルエステル誘導体またはその薬理的に許容される酸付加塩。

(2) 一般式（ I )

〔式中、 R¹ (ま水素原子またはハ口ゲン原子、 R^zはトリフルォ口メトキシ基、 0C0R³ 、 C NORつ B⁵またはスチレンスルホニル基. R³は置換もしくは無置換の C₃-₇シク口アルキル基、 R⁴は水素原子、 d ₄アルキル基、 — ₄アルケニル基または CH_zC00R⁶、 R⁵は水素原子または — ₄アルキル基、は水素原子または Cい ₄アルキル基を表わす。〕で示される 4 ーグァニジノ安息香酸フユ二ルヱステル誘導体またはその薬理的に許容される酸付加塩を有効成分として含有する蛋白分解酵素阻害剤。

(3) 一般式 H （ Π ) ( Π )

で示される 4 ーグァニジノ安息香酸と一般式（ ΠΙ )

〔式中、 R¹は水素原子またはハロゲン原子、 I？²はトリフルォロメトキシ基、 0C0R³ 、 C( = N0R⁴)R⁵またはスチレンスルホニル基. R³は置換もしくは無置換の C₃-₇シク口アルキル基、 R⁴は水素原子、 C,-₄アルキル基、アルケニル基または CH₂C00R⁶、 R⁵は水素原子または C,-₄アルキル基、 R⁶は水素原子または ₄アルキル基を表わす。〕

で示される化合物を、無溶媒あるいは有機溶媒中で脱水剤の存在下で縮合させることよりなる一般式（ I )

(式中、 R¹および R^zは前記と同じ意味を表わす。）

で示される 4 ーグァニジノ安息香酸フヱニルエステル誘導体の製法。

(4) 一般式（IV)

NH

H₂N- ICI— NH COHal (IV )

(式中、 Hal は塩素、臭素、ヨウ素原子を表わす）

で示される化合物と、一般式（ HI )

HO-

R²

〔式中、は水素原子またはハロゲン原子、 R²はトリフルォロメトキシ基、 0C0R³ 、 C( = N0Bつまたはスチレンスルホニル基, R³は置換もしくは無置換の C_{3 7}シクロアルキル基、 R⁴は水素原子、 d— 4アルキル基、 - 4アルケニル基または CH₂C00R^fc、 R⁵は水素原子または C_{t 4}アルキル基、は水素原子またはアルキル基を表わす。〕

で示される化合物を、酸結合剤の存在下に水性媒体または有機溶媒中で反応させること-よりなる一般式. ( I )

(式中、 B 'および R²は前記と同じ意味を表わす。）

で示される 4 —グァニジノ安息香酸フヱニルエステル誘導体の製法。