UA48426A - Спосіб визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного тест-об'єкта сироваткою крові хворих людей - Google Patents
Спосіб визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного тест-об'єкта сироваткою крові хворих людей Download PDFInfo
- Publication number
- UA48426A UA48426A UA2001075015A UA200175015A UA48426A UA 48426 A UA48426 A UA 48426A UA 2001075015 A UA2001075015 A UA 2001075015A UA 200175015 A UA200175015 A UA 200175015A UA 48426 A UA48426 A UA 48426A
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- luminescence
- skin
- blood serum
- flap
- preserved
- Prior art date
Links
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 title claims abstract description 45
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 9
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 6
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 14
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 5
- DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N acridine orange free base Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3C=C21 DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 4
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 abstract description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 abstract 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000003777 experimental drug Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- XINQFOMFQFGGCQ-UHFFFAOYSA-L (2-dodecoxy-2-oxoethyl)-[6-[(2-dodecoxy-2-oxoethyl)-dimethylazaniumyl]hexyl]-dimethylazanium;dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].CCCCCCCCCCCCOC(=O)C[N+](C)(C)CCCCCC[N+](C)(C)CC(=O)OCCCCCCCCCCCC XINQFOMFQFGGCQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 208000030381 cutaneous melanoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000005741 malignant process Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
Спосіб визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного тест-об'єкта сироваткою крові хворої людини з використанням клаптя консервованої ксеногенної шкіри як біологічного тест-об'єкта включає попередню інкубацію клаптя консервованої шкіри в сироватці крові з ймовірно високим вмістом речовин - гасників люмінесценції і наступну реєстрацію люмінесцентного світіння. При цьому клапоть консервованої ксеногенної шкіри попередньо зволожують розчином флюорохрому акридину оранжевого на ізотонічному розчині натрію хлориду у розведенні 1:60000 при 20-22 °С протягом 10-15 хв, після чого на поверхню клаптя шкіри на предметному склі наносять 0,05 мл дослідної проби свіжої сироватки крові і досліджують у полі зору люмінесцентного мікроскопа. Висновок про наявність ефекту гасіння люмінесценції роблять за характером зниження інтенсивності люмінесценції у порівнянні з контрольним мікропрепаратом.
Description
Опис винаходу
Винахід стосується біофізики і медицини, і може бути використаним в лабораторній діагностиці, а також при 2 розробці нових медико-біологічних технологій, зокрема, в діагностичному процесі в онкології та ін.
Відомий спосіб визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного тест-об'єкту сироваткою крові хворої людини з використанням клаптя консервованої ксеногенної шкіри як біологічного тест-об'єкту, який включає попередню інкубацію клаптя консервованої шкіри в сироватці крові з імовірно високим вмістом речовин - гасників люмінесценції і наступну реєстрацію люмінесцентного світіння (11. 70 Недоліком відомого способу є недостатня інформативність, оскільки недостатнім є рівень чутливості первинної люмінесценції консервованої ксеногенної шкіри до впливу речовин-гасників. З цією обставиною пов'язані й інші недоліки, а саме недостатній рівень точності діагностичного дослідження.
В основу винаходу поставлено завдання вдосконалити відомий спосіб, в якому шляхом застосування принципу вторинної люмінесценції біологічного тест-об'єкту досягають підвищення чутливості люмінесценції 12 консервованої ксеногенної шкіри до впливу речовин-гасників, а отже підвищення інформативності і точності діагностичного дослідження.
Поставлене завдання вирішують тим, що у відомому способі визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного тест-об'єкту сироваткою крові хворої людини з використанням клаптя консервованої ксеногенної шкіри як біологічного тест-об'єкту, який включає попередню інкубацію клаптя консервованої шкіри в сироватці крові з імовірно високим вмістом речовин - гасників люмінесценції і наступну реєстрацію люмінесцентного світіння, відповідно до винаходу клапоть консервованої ксеногенної шкіри попередньо зволожують розчином флюорохрома акридина оранжевого на ізотонічному розчині натрію хлориду у розведенні 1:60000 при 20-2276 впродовж 10-15 хвилин, після чого на поверхню клаптя шкіри на предметному склі наносять 0,05мл дослідної проби свіжої сироватки крові, після чого мікропрепарат інкубують ще протягом 15 хвилин при 20-227С і досліджують у полі зору люмінесцентного мікроскопу, а висновок про наявність ефекту гасіння люмінесценції « роблять по рівню зниження інтенсивності люмінесценції у порівнянні з контрольним мікропрепаратом.
Перелік фігур:
Фіг.1 ( Фото) Зовнішній вигляд взірця тест-об'єкту люмінесцентного дослідження у вигляді кружечка сухої консервованої шкіри свині. ее,
Фіг.2. Люмінесценція дослідного мікропрепарату клаптя шкіри, інкубованого в сироватці крові хворого із с злоякісним процесом: діаграма інтенсивності люмінесценції Я; "Чорно-білий фотопозитив З
Фіг. З Люмінесценція контрольного мікропрепарату - інтактного клаптя шкіри: с діаграма інтенсивності люмінесценції чорно-білий фотопозитив 3о Спосіб здійснюють таким чином. Два стандартизованих за площею клаптів сухої консервованої ксеногенної З шкіри (контроль і дослід), наприклад, у вигляді плоских кружечків діаметром 0,5 - 1,0см (Фіг.1), зволожують розчином флюорохрома акридина оранжевого на ізотонічному розчині натрію хлориду у розведенні 1:60000.
Зволоження ведуть у посудині, наприклад, бюксі або чашці Петрі, при 20-227С впродовж 10-15 хвилин, після чого « кружечки шкіри поміщають на предметному склі, звільняють від надлишку рідини. На поверхню клаптя З дослідного мікропрепарату наносять О,О05мл свіжої сироватки крові хворої людини, а контрольний препарат с залишають інтактним. Після цього мікропрепарати витримують ще протягом 15 хвилин при 20-227С і
Із» досліджують у полі зору люмінесцентного мікроскопу, звертаючи увагу на яскравість люмінесцентного світіння.
Інтенсивність люмінесценції реєструють або безпосередньо з допомогою фотометричного пристрою, або шляхом попереднього фотографування на фотоплівку в стандартних умовах з наступною фотометрією оброблених фотоемульсійних шарів. Висновок про наявність ефекту гасіння люмінесценції в дослідному шк препараті роблять по рівню зниження яскравості (якісна оцінка) або інтенсивності (кількісний аналіз)
Ге | люмінесценції у порівнянні з контрольним мікропрепаратом. При зниженні інтенсивності люмінесценції в дослідному препараті на 20-2595 і більше, ніж у контролі, роблять висновок про позитивний ефект гасіння шк люмінесценції сироваткою крові хворої людини, а також про наявність в останній речовин - гасників ка 20 люмінесценції, що може бути свідченням наявності в організмі надлишку сполук з властивостями вільних радикалів. ши Приклад 1. Кров для дослідження отримали від хворого Н., 52 років, з діагнозом: Меланома шкіри. Два клаптя сухої консервованої ксеногенної шкіри - контроль і дослід, виготовленої за технологією проф. Бігуняка
В.В. ІЗ), у вигляді плоских кружечків діаметром вмм зволожили розчином флюорохрома акридина оранжевого на 29 ізотонічному розчині натрію хлориду у розведенні 1:60000. Для цього О0,05мл розчину акридину в розведенні в. 1:1000 розбавили 2,95мл ізотонічного розчину натрію хлорида. Зволожували клапті шкіри у чашці Петрі при 207С впродовж 15 хвилин, після чого їх помістили на предметне скло і при допомозі фільтрувального паперу звільнили від надлишку вологи. На клапоть дослідного препарату нанесли О0,05мл сироватки крові пацієнта, а контрольний препарат залишили без змін. Обидва мікропрепарати витримали 15 хвилин при 207С, після чого 60 досліджували у полі зору люмінесцентного мікроскопу.
При візуальному дослідженні порівнювали яскравість люмінесцентного світіння в мікропрепаратах. Як видно на мікрофотографії (Фіг.2), люмінесцентне світіння тест-об'єкту при інкубації його з сироваткою крові хворого з онкопатологією менш яскраве, ніж у контрольному мікропрепарат (Фіг. 3). Фотометричний аналіз виявив значно нижчий рівень інтенсивності люмінесценції при інкубації клаптя шкіри у сироватці хворого (40,9у.0.), ніж у бо контролі (64,8у.0.), тобто ефект гасіння проявився зниженням інтенсивності люмінесценції дослідного мікропрепарату на 23,бу.о., що склало 36,995 і є свідченням значного вмісту у сироватці крові хворого з онкологічною патологією речовин -гасників люмінесценції.
Приклад 2. Запропонованим способом досліджували сироватку крові хворих з різними за походженням доброякісними і злоякісними пухлинними процесами, які перебували на обстеженні і лікуванні в обласному онкологічному диспансері. Обстежено матеріал (сироватка крові) від 41 людини, у тому числі 14 здорових, 12-3 доброякісними і 15 -злоякісними пухлинами. В результаті діагностичного дослідження за запронованим способом у здорових людей і пацієнтів з доброякісними пухлинами рівень гасіння люмінесценції був незначним і практично однаковим. У хворих із злоякісними пухлинами шкіри, шлунка і легень феномен гасіння вторинної люмінесценції 7/0 був вираженим у значно більшій мірі: в середньому на 32-45 95 (Р«0,05).
Таким чином, запропонований спосіб визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного субстрату сироваткою крові хворих людей з використанням клаптя консервованої ксеногенної шкіри як біологічного тест-об'єкту забезпечує більш високий, ніж за способом-прототипом, рівень інформативності і точності діагностичного дослідження. Джерела інформації, які слід взяти до уваги: 1. В.В. Дем'яненко, І.М. Талайчук, ІР.Мисула, Ю.С.Балабан. До застосування феномену гасіння люмінесценції у діагностичній практиці. Здобутки клінічної та експериментальної медицини. Тернопіль:
Укрмедкнига. Випуск 6, 2001.-С. 83. 2. Н. Бігуняк, І.Тураш. Ліофілізований ксенодермотрансплантат як тест-об'єкт визначення гасників люмінесценції у сироватці крові / Міжнародний медичний конгрес студентів і молодих учених, приурочений до 20.19-1 річниці незалежності України (матеріали конгресу) 10 -12 травня 2001 року. Тернопіль, Укрмедкнига, 2001. - б. 194. 3. Спосіб виготовлення ксенодермотрансплантатів. Патент України Мо 10737. А ОМ 1/2; Бігуняк В.В., Лучанко
П.І. Мо 95041596 від 10.04.94. Опубл. 25.12.96. Бюл.Мо 4.
Claims (1)
- 29 Формула винаходу « Спосіб визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного тест-об'єкту сироваткою крові хворої людини з використанням клаптя консервованої ксеногенної шкіри як біологічного тест-об'єкту, який включає попередню со зо інкубацію клаптя консервованої шкіри в сироватці крові з ймовірно високим вмістом речовин - гасників люмінесценції і наступну реєстрацію люмінесцентного світіння, який відрізняється тим, що клапоть ЄМ консервованої ксеногенної шкіри попередньо зволожують розчином флюорохрома акридина оранжевого на « ізотонічному розчині натрію хлориду у розведенні 1:60000 при 20-22 "С впродовж 10-15 хвилин, після чого на поверхню клаптя шкіри на предметному склі наносять 0,05 мл дослідної проби свіжої сироватки крові і (2,0) з5 Витримують при 20-22 "С ще протягом 15 хвилин, після чого досліджують у полі зору люмінесцентного «т мікроскопу, а висновок про наявність ефекту гасіння люмінесценції роблять за характером зниження інтенсивності люмінесценції у порівнянні з контрольним мікропрепаратом.-. и? щ» (ее) щ» іме) 4) 60 б5
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2001075015A UA48426A (uk) | 2001-07-17 | 2001-07-17 | Спосіб визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного тест-об'єкта сироваткою крові хворих людей |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2001075015A UA48426A (uk) | 2001-07-17 | 2001-07-17 | Спосіб визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного тест-об'єкта сироваткою крові хворих людей |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA48426A true UA48426A (uk) | 2002-08-15 |
Family
ID=74216135
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2001075015A UA48426A (uk) | 2001-07-17 | 2001-07-17 | Спосіб визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного тест-об'єкта сироваткою крові хворих людей |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA48426A (uk) |
-
2001
- 2001-07-17 UA UA2001075015A patent/UA48426A/uk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110095608A (zh) | 基于磁性分离和dna自组装的肿瘤外泌体纳米荧光传感器 | |
| CN104316685B (zh) | 一种二乙酰精胺的检测试剂盒及制备方法和应用 | |
| JP2019060880A (ja) | 移植拒絶反応、神経変性疾患又はうつ病と特に関連する潜在的炎症のインビトロ早期検出方法 | |
| CN1099482A (zh) | 检查用敷贴剂及检查方法 | |
| WO2014132150A1 (en) | Rapid identification of organisms in bodily fluids | |
| JP2019533005A (ja) | ナノダイヤモンド粒子及び関連する装置及び方法 | |
| Patterson et al. | Primate Respiratory Mast Cells: Reactions with Ascaris Antigen and anti-Heavy Chain Sera | |
| UA48426A (uk) | Спосіб визначення ефекту гасіння люмінесценції біологічного тест-об'єкта сироваткою крові хворих людей | |
| JP2017129425A (ja) | 抗癌剤の評価方法 | |
| JP7081861B1 (ja) | ＬＩＰに基づいてＵＭＯＤを修飾した尿中のＮｅｕ５Ｇｃを識別する尿路上皮癌の検査用キット、およびその製造方法 | |
| RU2456602C1 (ru) | Способ диагностики злокачественных солидных опухолей и их отдаленных метастазов | |
| US8679761B2 (en) | Method for detection of inflammation in the urinary tract or urethra | |
| JPWO2020195829A1 (ja) | 皮膚の状態を評価する方法 | |
| US20190192698A1 (en) | A method for obtaining indicator signals from a cell | |
| WO2020195829A1 (ja) | 皮膚の状態を評価する方法 | |
| CN103995135B (zh) | 用于特异性蘑菇类过敏原IgE筛查的试纸条及其制备方法 | |
| CN103995133B (zh) | 用于特异性蛋清过敏原IgE筛查的试纸条及其制备方法 | |
| RU2805809C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики почечной и внепочечной гематурии | |
| RU2654710C1 (ru) | Способ определения активности перекисного окисления липидов в ногтевых пластинках | |
| Yadav et al. | Advancements in Body Fluid Analysis in Forensics: Current and Emerging Methods | |
| RU1777080C (ru) | Способ определени наличи злокачественного процесса | |
| RU2197738C1 (ru) | Способ определения группы крови человека в биологических объектах, пораженных патологическими процессами | |
| US5795785A (en) | Method for the diagnosis of human malignant tumors | |
| Kuzmenko et al. | Innovative analysis of blood | |
| RU2117946C1 (ru) | Способ определения трансформированных клеток |