UA127034C2 - Композиція мануронової дикарбонової кислоти - Google Patents
Композиція мануронової дикарбонової кислоти Download PDFInfo
- Publication number
- UA127034C2 UA127034C2 UAA201908582A UAA201908582A UA127034C2 UA 127034 C2 UA127034 C2 UA 127034C2 UA A201908582 A UAA201908582 A UA A201908582A UA A201908582 A UAA201908582 A UA A201908582A UA 127034 C2 UA127034 C2 UA 127034C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- composition
- mannuronic
- mannuronic diacid
- oligosaccharide
- diacid
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 114
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract 5
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 126
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 125
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 38
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 34
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 12
- 238000006864 oxidative decomposition reaction Methods 0.000 claims description 12
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 3
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 101100102516 Clonostachys rogersoniana vern gene Proteins 0.000 claims 1
- 159000000000 sodium salts Chemical group 0.000 claims 1
- -1 dicarboxylic acid oligosaccharide Chemical class 0.000 abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 37
- 239000000047 product Substances 0.000 description 34
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 31
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 28
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 18
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 11
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 10
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 10
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 9
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 8
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 8
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 8
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 7
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 7
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 7
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 7
- AEMOLEFTQBMNLQ-VANFPWTGSA-N D-mannopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-VANFPWTGSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 6
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 6
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 6
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 6
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 6
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 6
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 6
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 6
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 5
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 4
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 4
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 4
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 4
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 230000002025 microglial effect Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 3
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 3
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- GSCHIGXDTVYEEM-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[[3-[6-[[4,5-dihydroxy-3-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxymethyl]-3,4-dihydroxy-5-[3,4,5-trihydroxy-6-[(3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl)oxymethyl]oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-[4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(OCC2C(C(O)C(O)C(OC3C(OC(O)C(O)C3O)CO)O2)OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(COC4C(C(O)C(O)CO4)O)O3)O)C(COC3C(C(O)C(O)CO3)OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)O2)O)OCC(O)C1O GSCHIGXDTVYEEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PZUPAGRIHCRVKN-UHFFFAOYSA-N 5-[5-[3,4-dihydroxy-6-[(3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl)oxymethyl]-5-[3,4,5-trihydroxy-6-[(3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl)oxymethyl]oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-[(3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl)oxymethyl]oxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4-triol Chemical compound OCC1OC(O)C(O)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(COC4C(C(O)C(O)CO4)O)O3)O)C(COC3C(C(O)C(O)CO3)O)O2)O)C(COC2C(C(O)C(O)CO2)O)O1 PZUPAGRIHCRVKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000167854 Bourreria succulenta Species 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- AEMOLEFTQBMNLQ-BZINKQHNSA-N D-Guluronic Acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-BZINKQHNSA-N 0.000 description 2
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012347 Morris Water Maze Methods 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 description 2
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactopyranuronic acid Natural products OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010523 cascade reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 235000019693 cherries Nutrition 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 210000000806 cranial fontanelle Anatomy 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 2
- 230000006386 memory function Effects 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 230000003334 potential effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- URAYPUMNDPQOKB-UHFFFAOYSA-N triacetin Chemical compound CC(=O)OCC(OC(C)=O)COC(C)=O URAYPUMNDPQOKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WVYWICLMDOOCFB-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-2-pentanol Chemical compound CC(C)CC(C)O WVYWICLMDOOCFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 235000019739 Dicalciumphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012029 Fehling's reagent Substances 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical group C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241000764773 Inna Species 0.000 description 1
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 description 1
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 244000246386 Mentha pulegium Species 0.000 description 1
- 235000016257 Mentha pulegium Nutrition 0.000 description 1
- 235000004357 Mentha x piperita Nutrition 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 241000238367 Mya arenaria Species 0.000 description 1
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M Pentobarbital sodium Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)[N-]C1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000014443 Pyrus communis Nutrition 0.000 description 1
- 229920001800 Shellac Polymers 0.000 description 1
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 1
- 208000002847 Surgical Wound Diseases 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000007958 cherry flavor Substances 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- BERDEBHAJNAUOM-UHFFFAOYSA-N copper(I) oxide Inorganic materials [Cu]O[Cu] BERDEBHAJNAUOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006114 decarboxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K dicalcium phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038472 dicalcium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 229910000390 dicalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 210000001951 dura mater Anatomy 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001087 glyceryl triacetate Substances 0.000 description 1
- 235000013773 glyceryl triacetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 1
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 1
- 235000001050 hortel pimenta Nutrition 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011147 inorganic material Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- XMGQYMWWDOXHJM-UHFFFAOYSA-N limonene Chemical compound CC(=C)C1CCC(C)=CC1 XMGQYMWWDOXHJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 206010027175 memory impairment Diseases 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000007968 orange flavor Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- 239000008023 pharmaceutical filler Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000004208 shellac Substances 0.000 description 1
- ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N shellac Chemical compound OCCCCCC(O)C(O)CCCCCCCC(O)=O.C1C23[C@H](C(O)=O)CCC2[C@](C)(CO)[C@@H]1C(C(O)=O)=C[C@@H]3O ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N 0.000 description 1
- 229940113147 shellac Drugs 0.000 description 1
- 235000013874 shellac Nutrition 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- 230000007958 sleep Effects 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 229960002622 triacetin Drugs 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7016—Disaccharides, e.g. lactose, lactulose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/702—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7032—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a polyol, i.e. compounds having two or more free or esterified hydroxy groups, including the hydroxy group involved in the glycosidic linkage, e.g. monoglucosyldiacylglycerides, lactobionic acid, gangliosides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/734—Alginic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/04—Disaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0084—Guluromannuronans, e.g. alginic acid, i.e. D-mannuronic acid and D-guluronic acid units linked with alternating alpha- and beta-1,4-glycosidic bonds; Derivatives thereof, e.g. alginates
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
Даний винахід стосується композиції олігосахариду мануронової дикислоти, що включає мануронову дикислоту формули (III) або її фармацевтично прийнятну сіль, де n - ціле число від 1 до 9, m дорівнює 0, 1 або 2, і m' дорівнює 0 або 1, і де загальна маса мануронової дикислоти, в якій n=1-5, становить 80-95 % від загальної маси композиції, і співвідношення загальної маси мануронової дикислоти, в якій n=1-3, і загальної маси мануронових дикислот, де n=4-7, становить від 1,0 до 3,5.
Description
(57) Реферат:
Даний винахід стосується композиції олігосахариду мануронової дикислоти, що включає мануронову дикислоту формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль, де п - ціле число від 1 до 9, т дорівнює 0, 1 або 2, і т' дорівнює 0 або 1, і де загальна маса мануронової дикислоти, в якій п-1-5, становить 80-95 95 від загальної маси композиції, і співвідношення загальної маси мануронової дикислоти, в якій п-1-3, і загальної маси мануронових дикислот, де п-4-7, становить від 1,0 до 3,5. . он ні Я оно Д-соон о . Що о т ноя й соон п ІННИ он
Формула (І)
Даний винахід стосується оптимального композиції мануронових дикислот, отриманих методом скринінгу біологічної активності, в якому використовується тваринна модель старечої деменції для оцінки впливу різних ступенів полімеризації і співвідношень мануронових дикислот на їх біологічну активність. В результаті, композиція з найкращою біологічною активністю була проаналізована і потрібна речовина була отримана шляхом ультрафільтраційного розділення мембран.
ПОПЕРЕДНІЙ РІВЕНЬ ТЕХНІКИ
Мануроновим дикислотам приділяється велика увага за рахунок їх потенційних лікарських цінностей. Мануронові дикислоти зазвичай отримують багатостадійним способом, використовуючи як сировину альгінову кислоту.
Полісахаридна молекула сировини, альгінова кислота, включає М-сегмент, утворений з О- мануронових кислот, зв'язаних В-1,4-глікозидними зв'язками, (С-сегмент, утворений з 1- гулуронових кислот, зв'язаних а-1,4-глікозидними зв'язками, а також гібридний сегмент Мо, утворений з двох сахаридів. Структурні формули мануронової кислоти і гулуронової кислоти наведені у наступній формулі (1): он ноОоо но он нос р-н й но но... он " -о9
Нн
М: 8-0- мануронова кислота (я: а 5 « гулуронова кислота
Формула (І)
Сегменти М і б можуть бути відокремлені від сировини, альгінової кислоти.
Загальноприйнятий спосіб можна просто описати нижче: альгінова кислота попередньо розкладається з отриманням полісахаридної суміші полімануронової кислоти і полігулуронової кислоти; суміш полісахаридів піддають кислотному осадженню для видалення з неї полігулуронової кислоти; і подальше очищення проводять для отримання гомополімануронової кислоти, що має чистоту 90 95 або більше (далі іменується "М-сегментна проміжна сполука").
Дивіться, наприклад, способи, розкриті в китайській патентній заявці Мо 98806637.8 і
СмМОо2823707.2.
Олігомануронову кислоту можна отримати наступним чином: М-сегментну проміжну сполуку, отриману вище, піддають додатковому ацидолізу шляхом нагрівання в кислому середовищі з отриманням невеликого фрагмента полімеру мануронової кислоти, що має бажаний діапазон молекулярної маси. Крім того, ефективність розкладу може бути покращена способом окисного розкладу; між тим, відновлювальний кінець може бути окислений до сахаринової кислоти з відкритим кільцем, дивіться китайську патентну заявку Мо 200580009396.5 (патентний документ 1), подану Меіїуи Сепд єї аі. і патент США Мо 8,835,03 В2 (патентний документ 2). Для зручності, патентні документи 1 і 2 далі спільно називаються як попередні патенти, які повністю включені у вигляді посилання.
Процес реакції мануронової дикислоти, розкритий у попередніх патентах, може бути представлений наступним рівнянням реакції (І), тобто альдегідна група в положенні Сі мануронової кислоти на відновлювальному кінці полісахариду олігомануронової кислоти окислюється до карбоксильної групи. нс о І | но о да-7 ча оМо Ноти вк но й но-З ше о аж нос се | Ї ни но Он
Формула (Ії)
В описаному вище способі окисного перетворення зазвичай використовуваним окиснювачем є розчин лужного сульфату міді, тобто реагент Фелінга. Попередні патенти просто приймають цей спосіб окислення. Зокрема, в лужному середовищі субстрат реакції, полімануронову кислоту, тобто зазначену вище М-сегментну проміжну сполуку, додають до розчину сульфату міді і піддають реакції на киплячій водяній бані від 15 хвилин до 2 годин. Спосіб використовує іони Су як окиснювач для окислення альдегідної групи, і в реакції утворюється осад оксиду міді цегляно-червоного кольору. Ця реакція часто використовується для ідентифікації зниженого цукру.
Попередні патенти розкривають, що олігоманарні кислоти діють проти хвороби Альцгеймера (А) і цукрового діабету. Патогенез хвороби Альцгеймера і цукрового діабету 2 типу тісно пов'язаний з амілоїдами (Вр-амілоїдом і аміліном). Амілоїди можуть агрегуватися з утворенням білкових олігомерів і можуть додатково агрегуватися з утворенням волокон. Ці білкові агрегати є цитотоксичними, можуть викликати реакцію окислення в клітинах, пошкоджуючи мітохондрії, і можуть викликати каскадну реакцію, таку як запальна відповідь, викликаючи пошкодження великої кількості нейронів і бета-клітин, і, в результаті, призводить до виникнення хвороби
Альцгеймера і діабету 2 типу. Олігоманарні кислоти націлені на амілоїди і протидіють каскадним реакціям, викликаним амілоїдами, і тому мають ефекти запобігання і лікування хвороби
Альцгеймера і діабету 2 типу.
СУТЬ ВИНАХОДУ
Перший аспект цього винаходу належить до композиції олігосахариду мануронової дикислоти, що містить мануронову дикислоту формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль: он ні ие бно (рстеоон т т те
Формула (ПІ) де п дорівнює цілому числу від 1 до 9, т дорівнює 0, 1 або 2, і т' дорівнює 0 або 1, і де, загальна маса мануронових кислот, де п-1-5 становить 80-95 95 від загальної маси композиції, і співвідношення загальної маси мануронових кислот, де п-1-3, до загальної маси мануронових кислот, де п--4-7, становить від 1,0 до 3,5.
Інший аспект даного винаходу стосується фармацевтичної композиції або лікарського засобу, що включає композицію олігосахариду мануронової дикислоти за даним винаходом і, в разі необхідності, відповідний носій.
Наступний аспект цього винаходу стосується способу лікування пацієнта зі старечою деменцією, що включає введення ефективної кількості композиції олігосахариду мануронової дикислоти, заданим винаходом, пацієнту, який цього потребує.
Зо Композицію олігосахариду мануронової дикислоти, за даним винаходом, отримують за способом, відмінним від попереднього рівня техніки. Цей спосіб отримання мас переваги простої реакції, високого вмісту активного інгредієнта і відсутності залишкових реакційних реагентів. Експериментально було продемонстровано, що композиція олігосахариду мануронової дикислоти, за даним винаходом, може інгібувати пошкодження клітин, захищати нервові клітини і збільшити виживаність клітин. У моделі на тваринах композиція олігосахариду мануронової дикислоти, за даним винаходом, може значно покращити навчальні та когнітивні функції щурів з деменцією. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти, за даним винаходом, має потенційні ефекти запобігання і лікування хвороби Альцгеймера.
КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ
На фігурі 1 представлені мас-спектри дисахариду, трисахариду і тетрасахариду в продукті
А.
На фігурі 2 представлені мас-спектри пентасахариду, гексасахариду і гептасахариду в продукті А.
На фігурі З наведено мас-спектри октасахариду, нонасахариду і декасахариду в продукті А.
На фігурі 4 показаний захисний ефект продукту А за різних концентрацій на АВр-індуковане пошкодження нервових клітин.
На фігурі 5 показано захисну дію олігоманурової кислоти з однаковим ступенем полімеризації на АВ-індуковане пошкодження нервових клітин.
На фігурі 6 показана оцінка ефектів від дисахариду до декасахариду на тваринній моделі
АЮ.
Фігура 7 показує вплив олігосахаридних композицій і гексасахариду на кількість разів, коли тварини АО проходять через платформу.
Фігура 8 показує вплив олігосахаридних композицій і гексасахариду на відстань плавання тварин АЮ.
Фігура 9 показує активність від дисахариду до декасахариду і композиції А на моделі спільної культивації клітин.
ДОКЛАДНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
Різні аспекти цього винаходу будуть докладно описані нижче. Однак даний винахід не обмежується цими конкретними варіантами здійснення. Фахівець в даній галузі може внести деякі модифікації та коригування цього винаходу у світлі нижченаведеного суттєвого розкриття, і такі модифікації також охоплюються обсягом цього винаходу.
Композиція олігосахариду мануронової дикислоти
Перший аспект цього винаходу стосується композиції олігосахариду мануронової дикислоти, що включає мануронову дикислоту формули (Ії) або її фармацевтично прийнятну сіль: д он ні Мб. оно -АСОоОН а жі хх 16-х Є є - ООН. п чі н
Формула (ПІ) де п дорівнює цілому числу від 1 до 9, т дорівнює 0, 1 або 2, і т' дорівнює 0 або 1, і де, загальна маса мануронових кислот, де п-1-5 становить 80-95 95 від загальної маси композиції, і співвідношення загальної маси мануронових кислот, де п-1-3, до загальної маси мануронових кислот, де п--4-7 знаходиться в діапазоні від 1,0 до 3,5.
Композиція олігосахариду мануронової дикислоти, за даним винаходом, являє собою суміш мануронових дикислот з різними ступенями полімеризації, і їх основними компонентами є олігосахариди мануронової дикислоти зі ступенем полімеризації від 2 до 10. Згідно з попередніми заявками, найбільш активні сахариди в мануронових дикислотах є пентасахариди та октасахариди, зокрема гексасахариди. Однак, на відміну від відомого рівня техніки, автори винаходу виявили, що додавання менш активного дисахариду до тетрасахариду до найбільш активного пентасахариду до октасахариду дає біологічну активність кращу, ніж активність пентасахариду до октасахариду, за умови розведення концентрацій високоактивних активних сахаридів.
Відповідно до переважного варіанту здійснення в олігосахаридній композиції мануронової дикислоти, за даним винаходом, загальна маса мануронових кислот, де тт -1 або 2, становить не менше 5095 або більше, переважно 60-90 95, більш переважно 70-90 95 від
Зо загальної маси композиції. Зокрема, в композиції олігосахаридів мануронової дикислоти, за даним винаходом, загальна маса мануронових дикислот, де тепт'-1, становить не менше 10 965, переважно 30-40 95 від загальної маси композиції. В іншому переважному варіанті здійснення в композиції олігосахаридів мануронової дикислоти, за даним винаходом, загальна маса мануронових дикислот, де тиепт/'-2, становить не менше 10 95, переважно 30-50 905 від загальної маси композиції.
Відповідно до переважного варіанту здійснення в композиції олігосахаридів мануронової дикислоти, за даним винаходом, загальна маса олігосахаридів мануронової дикислоти, де п--1- 5, становить 80-95 95 від загальної маси композиції.
Відповідно до переважного варіанту здійснення в олігосахаридній композиції мануронової дикислоти, за даним винаходом, загальна маса олігосахаридів мануронової дикислоти, де п-1- 3, становить 20-70 95 від загальної маси композиції.
Відповідно до переважного варіанту здійснення в олігосахаридній композиції мануронової дикислоти, представленої в даному винаході, співвідношення загальної маси олігосахаридів мануронової дикислоти, де п--1-3, до загальної маси олігосахаридів мануронової дикислоти, де п-4-7 1,0 ї 3,5, переважно від 1,0 до 3,0.
Відповідно до переважного варіанту здійснення в олігосахаридній композиції мануронової дикислоти, за даним винаходом, масовими частками олігосахаридів мануронових дикислот з різними ступенями полімеризації в композиції є: 5-25 9о дисахариду, 15-30 95 - трисахариду, 15- 25 95 тетрасахариду, 10-25 9о - пентасахариду. 5-15 Фо - гексасахариду, 3-10 95 - гептасахариду, 2-5595 - октасахариду, 1-5 95 - нонасахариду і 1-595 - декасахариду. Зокрема, масовими відсотками олігосахаридів у композиції є: 10-20 95 - дисахарид, 18-30 95 - трисахарид, 15-25 95 - тетрасахарид, 15-20 95 - пентасахарид, 5-10 95 - гексасахарид, 3-5 95 - гептасахарид, 2-3 95 - октасахарид, 1-3 95 - нонасахарид і 1-3 95 - декасахарид.
У композиції олігосахариду мануронової дикислоти, за даним винаходом, фармацевтично прийнятною сіллю є натрієва або калієва сіль.
Спосіб одержання композиції олігосахариду мануронової дикислоти
Спосіб одержання мануронової дикислоти, за даним винаходом, полягає у наступному.
М-сегментна проміжна сполука, як описано вище, окислюється в цукровому ланцюзі в присутності окиснювача з утворенням окислених олігосахаридів з різними ступенями полімеризації. Окислені олігосахариди характеризуються тим, що мануронові кислоти на відновлювальному кінці олігосахаридів окислюються до цукрових кислот, що мають 3-6 атомів вуглецю.
Окиснювачем, який найбільш прийнятний для реакції, за даним винаходом, є озон. Під час реакції, реакція відбувається окисного розкладу цукрового ланцюга, коли в розчин, що містить
М-сегментну проміжну сполуку, вводиться озон. Температура, за якої проводять стадію окислювального розкладу, переважно становить 0-70 "С, більш переважно 10-45 "С. Значення рН, при якому здійснюють стадію окислювального розкладу, описану вище, становить 3-13, переважно 4-10, більш переважно 6-8.
Реакція окислювального розкладу з використанням озону в цьому винаході і окислювальний розклад з використанням лужного сульфату міді (попередні патенти) або кислотний гідроліз в присутності перекису водню і гіпохлориту натрію (китайська патентна заявка Мо 01107952,5) в попередньому рівні техніки всі ці реакції викликають розклад цукрового ланцюга, але структури на відновлювальних кінцях цукрових ланцюгів продуктів розкладу різні: продукт окислювальної розкладу, отриманий у цьому винаході, мануронова дикислота, має структуру дикислоти з 3-6 атомами вуглецю на відновлювальному кінці. Крім того, спосіб, що використовується на стадії окислювального розкладу, за даним винаходом, також має інші переваги: 1) умови реакції є м'якими і ніяких особливих умов реакції не потрібно; 2) використовуваний озон може бути отриманий іп 5йи, і, таким чином, знижується транспортне навантаження при промисловому виробництві; і 3) після реакції озон автоматично розкладається на кисень, і, таким чином, немає ніякої шкоди, викликаної залишковими реагентами реакції або забрудненням навколишнього середовища. Процес реакції показаний У наступному рівнянні (ІМ):
З 1 нн (ів | ють
Воно 1 «о я представляє положення розриву цукрового кільця айо глікозидного зв'язку,
І індукуваного вільними радикапами к Мо | ун І нос. в ши оо с Я я он НО ле -. їй в. ж ОВ осн с а 3
Ви ния яні зво І Я
АК КА, о я | . сне сля ЗООВ нос, - - жі
Оз продовження реакції ик Ко зекон
Продукт піддавали мембранному розділенню пс " оно ру евен для видалення невепиких молекул нижчих і моносахаридів поті є я шт ог; т ог
На схематичній діаграмі наведеного вище рівняння реакції (ІМ) і сполуки формули (1). олігосахарид, в якому т-2 і т'-1, є цукровою кислотою, що містить 6 атомів вуглецю; олігосахарид, в якому т-1 і т'-1 або (т-2 і т'"-0), є цукровою кислотою, що містить 5 атомів вуглецю; олігосахарид, в якому т-1 і т"-0 або (т-0 і т"-1), є цукровою кислотою, що містить 4 атома вуглецю; і олігосахарид, в якому т-0 і т"-0, є цукровою кислотою, що містить З атома вуглецю.
Вищевказаний продукт реакції знесолюють шляхом мембранного поділу, щоб отримати продукт А, як визначено за допомогою РХ-МСОС-структурної перевірки і вимірюванням частки олігосахаридів. Частка олігосахаридів визначається способом ексклюзивної хроматографії на молекулярних ситах у поєднанні з багатокутовою лазерною скатерометрією. Потім продукт А відокремлюють колонковою хроматографією, одержуючи олігосахариди з одинарним ступенем полімеризації від дисахариду до декасахариду. Ці олігосахариди з одинарним ступенем полімеризації порівнюють за біологічною активністю іп мйго та іп мімо. Було виявлено, що гексасахарид має найкращу активність серед 9 олігосахаридів, що є подібним до результатів попередніх патентів, наприклад, результатів олігосахаридної активності, розкритих в попередній патентній заявці, патентний документ 1.
Автори цієї патентної заявки виявили, що коли вищезгадані 9 олігосахаридів, що мають нові структури, поєднані в певному співвідношенні, може бути отримана високоактивна олігосахаридна композиція, що має більш високу активність, ніж найбільш активний гексасахарид. Співвідношення різних олігосахаридів у високоактивній олігосахаридній композиції необхідно комбінувати відповідно до наступних пропорційних співвідношень:
Загальна маса олігосахаридів мануронових дикислот, де п-1-5 у композиції, становить 80-95 95 від загальної маси композиції, а загальна маса олігосахаридів мануронової дикислоти, де п--1-3, становить 20-70 95 загальна маси композиції. Співвідношення загальної маси олігосахаридів мануронової дикислоти, де п--1-3, до загальної маси олігосахаридів мануронової дикислоти, де п-4-7, становить від 1,0 до 3,5, переважно від 1,0 до 3,0.
Даний винахід пропонує формулу для одержання високоактивної композиції олігосахариду мануронової дикислоти.
Композиція олігосахариду мануронової дикислоти, за даним винаходом, може інгібувати пошкодження клітин і захищати нервові клітини. У моделі на тваринах композиція олігосахариду мануронової дикислоти, що пропонується за цим винаходом, може значно поліпшити навчальні та когнітивні функції тварин-моделей деменції. Таким чином. композиція олігосахариду мануронової дикислоти, що пропонується за цим винаходом, має потенційні ефекти запобігання і лікування хвороби Альцгеймера.
У ілюстративному варіанті здійснення спосіб, за даним винаходом, включає в себе наступні стадії: (1) Отримання мануронової дикислоти:
Отримання М-сегментної проміжної сполуки. Як описано вище, М-сегментна проміжна сполука вихідного матеріалу, використовуваного в цьому винаході, може бути отримана за способом, відомим у рівні техніки, наприклад, за способами, розкритими в китайській патентній заявці Мо 98806637.8 і СМО2823707.2. Загальноприйнятий спосіб можна просто описати нижче: альгінова кислота попередньо розкладається з отриманням полісахаридної суміші полімануронової кислоти і полігулуронової кислоти; суміш полісахаридів піддають кислотному осадженню для видалення з неї полігулуронової кислоти; і подальше очищення проводять для отримання гомополімануронової кислоти, що має чистоту 90 95 або більше, тобто М-сегментну проміжну сполуку.
Окислювальний розклад озону. М-сегментну проміжну сполуку розчиняють у відповідній кількості води і перемішують при кімнатній температурі або при нагріванні. Озон безперервно подається для ініціювання реакції. рН реакції можна регулювати до 3-13. переважно 4-10, більш переважно 6-8, шляхом додавання по краплях розведеної соляної кислоти або розведеного розчину МасОН. Температура переважно становить 0-70 "С. більш переважно 10-45 "С. Після завершення реакції, подача озону припиняється і рН доводять до нейтрального.
Розділення та очищення мембран. Отриманий вище продукт реакції формулюють у розчин з концентрацією близько 10 95 і відокремлюють молекулярну мембрану для видалення продуктів розкладу нижче моносахариду і збору ретентату. Застосовувана молекулярна мембрана має
ММУСО 1000-3000 Да, переважно 2000 Да. Зібрану рідину концентрують на роторному випарнику і сушать у вакуумі, отримуючи суміш олігомануронової дикислоти. Виявлено, що ці продукти являють собою композицію, що містить олігосахариди, тобто від дисахариду до бо декасахариду, причому їх вміст знаходиться у певних межах. Три композиції А, В ї С були отримані згідно з вищенаведеним способом. Співвідношення і структури олігосахаридів у цих композиціях були підтверджені в Прикладах 1-3. (2) Отримання олігосахаридів з однаковим ступенем полімеризації
Суміш олігосахаридів, отримана на стадії (1), розчиняють до концентрації приблизно 10 95, відокремлюють на гель-хроматографічній колонці Рб і піддають ультрафіолетовому детектуванню для збору кожного елюйованого компонента. Компоненти, що мають однаковий ступінь полімеризації, об'єднуються. Збирають дев'ять компонентів, від дисахариду до декасахариду, знесолюють за допомогою колонкової гель-хроматографії 510, концентрують на роторному випарнику і сушать у вакуумі. Конкретні способи очищення і отримання показані в прикладі 4. Ці операції з колонковою хроматографією, знесоленням і сушкою відомі фахівцям в даній галузі техніки. 9 олігосахаридів з однаковим ступенем полімеризації оцінювали на фармакологічну активність на моделі старечої деменції на тваринах. Було виявлено, що гексасахарид мав найкращу активність. Докладніше дивіться приклад 4. (3) Порівняння активності олігосахаридних композицій
Олігосахариди з однаковим ступенем полімеризації, отримані на наведеній вище стадії (2), змішують у масових відсотках, як показано в наступній таблиці, для отримання четвертої композиції, тобто композиції О. Співвідношення олігосахаридів у трьох олігосахаридних композиціях А, В і С з вищевказаної стадії (1) і композиції О наведені в наступній таблиці:
Таблиця
Дт ета ев ет рид харид харид | сахарид | сахарид | харид | сахарид | харид харид в 24956 | 2595 | 1995 / 1295 | 995 | 595 | 395 | 296 | 195 оц 595 | з096 | 2095 | 20956 | 595 | 595 | 595 | 595 | 595
Вказані чотири композиції і гексасахарид, очищений на стадії (2), порівнюють за фармакологічною активності. Результати показують, що чотири олігосахаридні композиції А, В,
Сб ії О є значно активнішими, ніж гексасахарид. який мас найкращу активність відносно олігосахаридів з однаковим ступенем полімеризації. Можна бачити, що окремий олігосахарид може створювати синергетичний ефект після змішування. Після змішування менш активні олігосахариди, такі як дисахарид і трисахарид, с активнішими. ніж гексасахариди.
Таким чином, даний винахід стосується способу одержання високоактивної композиції олігосахариду мануронової дикислоти, що включає реакцію окислювального розкладу з
Зо використанням М-сегментної проміжної сполуки як сировини в присутності озону, а також розділення і очищення продукту реакції за допомогою ультрафільтрації мембрани. Процес одержання включає простий процес виробництва та високий вихід, і продукт реакції може бути легко очищений для отримання продукту, що має гарну активність. Автори винаходу також розкривають діапазони масових відсотків і співвідношення річних олігосахаридів у високоактивній композиції. Важливість процесу отримання, що надається цим винаходом, полягає в тому, що отримують мануронову дикислоту, що має нову структуру, тобто, дикислотний залишок, що має б можливих структур на відновлювальному кінці цукрового ланцюга, і, що отримана композиція олігосахаридів містить помірні співвідношення різних олігосахаридів і має значну біологічну активність.
Даний винахід також стосується лікарського засобу або медичного препарату, що містить композицію олігосахариду мануронової дикислоти, як описано вище, і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій або наповнювач.
Способи одержання комбінованих олігосахаридних лікарських засобів, що містять активні інгредієнти в різних співвідношеннях, відомі або очевидні фахівцям в даній галузі техніки з розкриття цього винаходу, наприклад, як описано в Кетіпдіоп'5 Рпагтасешііса! Зсіепсе5, Магійп,
ЕМ., ед., Маск Рибіїєпіпд Сотрапу, 19 ей. (1995). Способи отримання фармацевтичної композиції включають введення відповідних фармацевтичних наповнювачів, носіїв, розріджувачів тощо.
Фармацевтичний препарат, за даним винаходом, отримують за відомим способом, включаючи звичайне змішування, розчинення або висушування.
Фармацевтична композиція, за даним винаходом, може бути введена пацієнту різними шляхами, придатних для вибраного способу введення, такими як перорально або парентерально (внутрішньовенним, внутрішньом'язовим, місцевим або підшкірним способом).
Відповідно, комбінований лікарський засіб, за даним винаходом, можливо вводити системно, наприклад, перорально, в комбінації з рФбармацевтично прийнятним носієм, таким як інертний розчинник або харчовий носій. Він може бути фасований в желатинові капсули з твердою або м'якою оболонкою або спресований в таблетки. Для перорального терапевтичного введення активна сполука, за даним винаходом, може бути включена з одним або кількома допоміжними речовинами і використана у формі таблеток, таблеток, що розпадаються у ротовій порожнині, троше, капсул, еліксирів, суспензій, сиропів, пастилок тощо. Такі композиції і препарати повинні містити щонайменше 0,1 95 активної сполуки. Співвідношення композицій і препаратів може, звичайно, варіювати і може перебувати в діапазоні від приблизно 1 95 до приблизно 99 95 за масою від даної стандартної лікарської форми. Кількість активної сполуки в таких терапевтично корисних композиціях є таким, що може бути отриманий ефективний рівень дозування.
Таблетки, троше, пігулки, капсули тощо можуть також містити зв'язуючу речовину, таку як трагакантова камедь, аравійська камедь, кукурудзяний крохмаль або желатин; наповнювач, такий як дикальцію фосфат; дезінтегруючий агент, такий як кукурудзяний крохмаль, картопляний крохмаль, альгінова кислота тощо; змащуючі речовини, такі як стеарат магнію; і підсолоджувач, такий як сахароза, фруктоза, лактоза або аспартам; або ароматизатор, такий як м'ята перцева, олія грушанки або вишневий ароматизатор. Коли стандартна лікарська форма є капсулою, вона може містити, крім матеріалів вищевказаного типу, рідкий носій, такий як рослинна олія або поліетиленгліколь. Різні інші матеріали можуть бути представлені як покриття чи для іншої зміни фізичної форми твердої стандартної лікарської форми. Наприклад, таблетки, пігулки або капсули можуть бути покриті желатином, воском, шелаком або цукром. Сиропи або еліксири можуть містити активну сполуку, сахарозу або фруктозу як підсолоджувач. метилпарабен або пропилпарабен які консервант, барвник і ароматизатор, такий як вишневий або апельсиновий аромат. Зазвичай, будь-який матеріал, який використовується для приготування будь-якої стандартної лікарської форми, повинен бути фармацевтично
Зо прийнятним і нетоксичним у використовуваних кількостях. Крім того, активна сполука може бути включена в сполуки з уповільненим вивільненням і пристрої з уповільненим вивільненням.
Активна сполука може також вводитися внутрішньовенно або внутрішньочеревно шляхом інфузії або ін'єкції. Розчини активної сполуки або її солі можуть бути отримані у воді, необов'язково змішаній з нетоксичною поверхнево-активною речовиною. Дисперсії також можуть бути отримані в гліцерині, рідких поліетиленгліколях, триацетині, їх сумішах і в оліях. За звичайних умов зберігання і використання ці препарати містять консервант для запобігання росту мікроорганізмів.
Фармацевтичні лікарські форми, придатні для ін'єкції або інфузії, можуть включати стерильні водні розчини або дисперсії або стерильні порошки активного інгредієнта (необов'язково інкапсульовані в ліпосоми), призначені в препараті для приготування стерильного розчину або дисперсії, придатних для ін'єкцій або інфузій, безпосередньо перед введенням. У всіх випадках кінцева лікарська форма повинна бути стерильною, рідкою і стабільною в умовах виробництва і зберігання. Рідким носієм може бути розчинник або рідке дисперсійне середовище, що включає, наприклад, воду, етанол, поліол (наприклад, гліцерин, пропіленгліколь, рідкий поліетиленгліколь тощо), рослинні олії, нетоксичний гліцерид і відповідні їх суміші. Належну плинність можна підтримувати, наприклад, шляхом утворення ліпосом, підтриманням необхідного розміру частинок у разі дисперсії або використанням поверхнево-активних речовин.
Дія проти мікроорганізмів може бути забезпечена різними антибактеріальними («І протигрибковими засобами, наприклад, парабенами, хлорбутанолом, фенолом, сорбіновою кислотою, тимеросалом тощо. У багатьох випадках бажано включати ізотонічні агенти, наприклад, цукри, буфери або хлорид натрію. Пролонгована абсорбція ін'єкційних композицій може бути забезпечена шляхом використанням агентів, що затримують абсорбцію, наприклад, моностеарата алюмінію і желатину.
Стерильні розчини для ін'єкцій готують шляхом включення активної сполуки в необхідній кількості у відповідний розчинник з різними іншими інгредієнтами, зазначеними вище, за необхідності, з подальшою стерилізованою фільтрацією. У разі стерильних порошків для приготування стерильного розчину для ін'єкцій переважними способами приготування є вакуумне висушування і висушування виморожуванням, що дають порошок активного інгредієнта плюс будь-який додатковий бажаний інгредієнт з його раніше стерильно- бо фільтрованого розчину.
Відповідні тверді носії включають тонкодисперсні тверді речовини (наприклад, тальк, глину, мікрокристалічну целюлозу, діоксид кремнію, оксид алюмінію тощо). Корисні рідкі носії включають воду, етанол, етиленгліколь або суміш вода-етанол/етиленгліколь. Комбінований лікарський засіб, за даним винаходом, може бути розчинений або диспергований в носії в ефективній кількості, необов'язково з допомогою нетоксичного поверхнево-активної речовини.
Ад'юванти (такі як ароматизатори) і додаткові антимікробні агенти можуть бути додані для оптимізації властивостей для даного застосування.
Загущувачі (такі як синтетичні полімери, жирні кислоти, солі і складні ефіри жирних кислот, жирні спирти, модифіковані целюлози або модифіковані неорганічні матеріали) також можуть бути використані з рідкими носіями для формування паст для нанесення покриттів, гелів, мазей, мила тощо, які можуть безпосередньо наноситься на шкіру користувача.
Терапевтично необхідна кількість сполуки або її суміші залежить не тільки від сполуки рег зе, але і від способу введення, природи захворювання, що підлягає лікуванню, від віку і стану пацієнта, насамкінець, залежно від рішення лікаря.
Зазначені вище препарати можуть бути присутніми в стандартній лікарські формі, яка с фізично дискретною одиницею, що містить одиничну дозу, і придатна для введення в організм людини й інших ссавців. Стандартною лікарською формою може бути капсула або таблетка, або безліч капсул, або таблеток. Кількість стандартної дози активного інгредієнта може змінюватися або регулюватися від приблизно 0,1 до приблизно 1000 мг або більше, залежно від конкретного лікування.
Модель на тваринах і етапи оцінки ефективності та активності 1. Тваринна модель для оцінки ефективності проти АО: Модель АЮ індукується односторонньою внутрішньошлуночковою ін'єкцією АВ, а поведінка навчання та пам'яті щурів
Ар-моделі оцінюють за допомогою тесту водяного лабіринту Морріса.
Використовують самців щурів Умізїаг, кожен з яких важить від 180 до 220 г. Рандомізація: контрольна група, модельна група та групи дозування, 14 тварин на групу. Щурів анестезують внутрішньочеревно ін'єкцією пентобарбіталу натрію (40 мг/кг) і фіксують на стереотаксичному апараті. Шкіра зазвичай готується, стерилізується, розрізається і оголюється передня фонтанель. Ділянка СА гіпокампа розташована в положенні "3,0 мм після передньої фонтанелі, 2,2 мм поруч з вістрем і 2,8 мм під твердою мозковою оболонкою", як описано в стереотаксичній карті мозку щурів, Хіптіпуд Вао апа Зіушп Зпи, Веїйіпо, Реоріеєз5 Медісаї!
Рибіївпіпд Ноизе, 1991, 28. Для модельної групи і груп дозування 5 мкл агрегованого АВ (АВ1-40 готують в розчині РВЗ до 1,4 мг/мл і інкубують в інкубаторі при 37 "С протягом 5 днів до утворення агрегованого стану) повільно вводять в праву ділянку САТ гіпокампа з голкою мікрошприця, вертикальною відносно черепа, зі швидкістю потоку 1 мкл/хв. Після завершення ін'єкції голка залишається на 5 хв, так що АВ може бути достатньо диспергованим. Потім голка повільно знімається. Хірургічний розріз зашивають, і тварин утримують в теплі для відновлення.
Контрольна група отримує таку ж процедуру, за винятком того, що вводять таку ж кількість стерильного РВ5. Відповідний лікарський засіб вводять за 7 днів до операції, і введення продовжують до кінця експерименту.
Тест на водний лабіринт Морріса проводять на 11 день після операції.
Тест на навігацію місця: кожна група щурів тренується один раз на день протягом 5 днів поспіль, тобто проходить тест на навігацію місця. Реєструється час, необхідний тваринам для пошуку платформи (тобто латентні спасіння). Щури, які не можуть знайти платформу приблизно за 90 с, направляються плавати до платформи по прямій лінії і стоять на платформі протягом 30 с, щоб стимулювати їх навчання і пам'ять.
Тестування просторового зонда: на другий день після закінчення навігаційного тестування місця платформа знімається, і щурів поміщають у воду з місця входу. Записується кількість разів, коли тварини проходять через платформу, і відсоток відстані плавання в квадранті, де розташована платформа відносно загальної відстані. Оцінюються функції навчання та пам'яті тварин. 2. Модель для оцінки життєздатності клітин: 5Н-5У5У клітини (клітини нейробластоми) засівають в 96-лунковий планшет (3000 клітин/лунка). Через 24 години середовище видаляють і додають лікарський засіб для попередньої обробки протягом 0,5 години (сформульований у безсироватковому культуральному середовищі З повторності на дозу) Потім додають агрегований АВІ1-42 (АВ1-42 формулюють у розчині РВЗ до 1 мг/мл і інкубують в інкубаторі при 4 "С протягом 24 год. до утворення агрегованого стану, при кінцевій концентрації 2 мкМ) і інкубують протягом 48 годин. Життєздатність клітин визначається за допомогою ССКВ.
Переваги даного винаходу додатково проілюстровані наступними необмежуючими бо прикладами. Однак конкретні матеріали і їх кількості, а також інші експериментальні умови, що використовуються в прикладах, не повинні розглядатися як обмежуючі даний винахід. Частини, співвідношення, відсотки тощо у цьому винаході всі виражені за масою, якщо не вказано інше.
ПРИКЛАДИ
Приклад 1:
Стадія 1): Отримання суміші олігосахаридів мануронової дикислоти
М-сегментну проміжну сполуку отримують за способом, розкритим у попередніх патентах.
Конкретні операції просто описані нижче: 5 кг альгінату натрію формулювали в -- 10 95 розчин, і рН доводили до приблизно 3,0 додаванням розведеної соляної кислоти. Розчин нагрівали до 80 "С і перемішували. Давали провзаємодіяти протягом 10 год., перш ніж нагрівання припиняли.
Після охолодження до кімнатної температури рН доводять до 9,0 додаванням Маон і додатково доводять до 2,85 шляхом додавання розведеної соляної кислоти. Розчин центрифугували при 5000 об/хв протягом 10 хв. Супернатант збирали і доводили до рН 1,0 додаванням НСІ. Після центрифугування осад збирали, концентрували на роторному випарнику і сушили у вакуумі, отримуючи 1500 г М-сегментної проміжної сполуки. 500 г М-сегментної проміжної сполуки зважували і розчиняли в дистильованій воді для приготування розчину в об'ємі 5 л. Розчин доводили до рН 6,5 за допомогою МаонН і нагрівали на водяній бані при контролюванні температури реакції 75 "С. Швидкість газового потоку на виході з кисневого балона і потужність генератора озону регулювали таким чином, щоб озон надходив в реакційний розчин при масовій концентрації потоку 8 г/год. Через 4 год. взаємодії подачу озону припиняли і додавали відповідну кількість води, щоб регулювати концентрацію розчину приблизно до 10 95. Розчин фільтрували через ультрафільтраційну мембрану з відсіченням молекулярної маси 2000 Да для збору ретентата. Зібрану рідину концентрували на роторному випарнику і висушували у вакуумі з отриманням 350 г мануронової дикислоти, продукту А.
Стадія 2): Аналіз співвідношень і структур олігосахаридів з різними ступенями полімеризації в мануроновій дикислоті, продукті А 100 мг вищевказаної висушеної мануронової дикислоти, продукту А, точно зважували. розчиняли у воді до концентрації 10 мг/мл і пропускали через мембрану 0,22 мкм для отримання розчину досліджуваного зразка. Співвідношення олігосахаридів з різними ступенями полімеризації в композиції визначали за допомогою молекулярно-екслюзивної хроматографії
Зо зирегдех реріїде (СЕ Со.) в поєднанні з багатокутовим лазерним світлорозсіюванням (МАЇ 5,
Умуай Со.). Умови експерименту були наступними:
Хроматографічна колонка: Зирегаех рерііде 10/30005І
Рухома фаза: 0,1 моль/л Масі
Об'єм вприскування: 10 мкл
Швидкість потоку: 0,3 мл/хв
Результати випробувань: від дисахариду до декасахариду були представлені ст.пол. (ступінь полімеризації) 2 - ст.пол. 10, відповідно, ст.пол. 2 становив 19 95, ст. пол. З становив 25 905, ст. пол. 4 становив 22 95, ст.пол. 5 становив 13 95, Ярб становив 9 95, ст.пол. 7 становив б 95, ст.пол. 8 становив 3 95, ст.пол. 9 становив 2 95, ст.пол. 10 становив 1 95.
Стадія 3): РХ-МС аналіз структур олігосахаридів з різними ступенями полімеризації в мануроновій дикислоті, продукті А
Умови експерименту:
Хроматографічна колонка: Зирегаех рерііде 10/30005І
Рухома фаза: 20 95 метанол «з 80 95 80 ммоль/л МНаАс
Швидкість потоку: 0,1 мл/хв
Температура колонки: 25:0,8 "С.
Умови мас-спектрометрії: Адіепі 6540 ОТОРЕ; джерело іонів: напруга зіткнення Н5БІ 120 В; режим негативного іона. Ширина отриманого сигналу (т/2) становила 100-1000.
Мас-спектри олігосахаридів з різними ступенями полімеризації наведені на фігурах 1-3.
Було проведено співвіднесення різних піків сигналів в мас-спектрах, що підтверджують молекулярні структури всіх олігосахаридів у продукті А, тобто структуру, показану у формулі (1). Співвіднесення сигналів і структури, відповідні сигналам, наведені в Таблиці 1 нижче.
Таблиця 1 6 дикислотних структур олігосахаридів з різними ступенями полімеризації в продукті А та їх співвідношення маси до заряду у мас-спектрах мо зененююстени | ККУ ДОН Цих в нс рмула Гм туме рум метр мА рум-т т рм-грдм-2р м-гр- нд и юю сон (СеНвОв)пСеНіоОв м нороє он н «Я ЖЖ оно | но соон | (СеНвОв)пС5НгО? "І ово Соон СвНавОв)пСаНвОбв
ЛЕМ рдки ееене жі твернянн ж ті н н нос, он «Перл ет зв ви!тт ою юю ях воло вв ред ення я ее ня нія т оосвюні пе
З наведеного вище мас-спектрометричного структурного аналізу було виявлено, що мануронову кислоту на відновлювальному кінці цукрового ланцюга в продукті А окислюють до структури цукрової кислоти (дивіться Формулу ІІ), яка може бути структурою мануронової кислоти, що включає 6 атомів вуглецю (тет -3), з вмістом приблизно 10-30 95, або продуктом декарбоксилювання мануронової кислоти, тобто цукрової кислотою, що містить 5 атомів вуглецю (таепт'-2) (30-50 90) і цукрову кислоту, що містить 4 атома вуглецю (птяпт'-1) (30-40 95).
Стадія 4) Оцінка фармакологічної активності 1. Захисний ефект продукту А на Ар-індуковане пошкодження нервових клітин
Тест проводили згідно з "моделлю для оцінки життєздатності клітин", і експериментальна процедура була наступною: ЗН-5У5У клітини (клітини нейробластоми) висівали в 96-лунковий планшет (3000 клітин/лунку). Через 24 години середовище видаляли і для груп, які отримували дозу, додавали 10 мкл на лунку лікарського засобу (10 мг/мл) для попередньої обробки протягом 0,5 години (сформульованого в безсироватковому культуральному середовищі; З повторності на дозу). Потім агрегований АВ 1-42 (АВ1-42 формували в розчині РВ5 до 1 мг/мл і інкубували в інкубаторі при 4 "С протягом 24 год. для утворення агрегованого стану з кінцевою концентрацією 2 мкМ) додавали і інкубували протягом 48 годин. Життєздатність клітин визначали за допомогою ССКВ.
Результати показали, що обробка клітин ЗН-5У5М 2 мкМ АВІ1-42 може викликати значне пошкодження клітин і знизити життєздатність клітин через 48 годин, тоді як 25. 50 і 100 мкг / мл продукту А може значно інгібувати АВ-індуковане зниження життєздатності клітин. Наведені вище результати показують, що продукт А може захистити нервові клітини від токсичних ефектів АВ при низькій концентрації (25 мкг/мл), середній концентрації (50 мкг/мл) і високій концентрації (100 мкг/мл).
Приклад 2:
Зважували 100 г М-сегментої проміжної сполуки з Прикладу 1 і розчиняли в дистильованій воді, щоб отримати розчин в об'ємі 0,8 л. Розчин доводили до рН 4,0 за допомогою Маон, і реакцію проводили за кімнатної температури (25 "С). Швидкість газового потоку на виході з
Зо кисневого балона і потужність генератора озону були відрегульовані таким чином, щоб озон подавався в реакційний розчин зі швидкістю потоку масової концентрації 1 г/год. Через 10 годин реакції подачу озону припиняли і додавали відповідну кількість води для регулювання концентрації розчину до приблизно 1595. Розчин фільтрували через ультрафільтраційну мембрану з відсіченням молекулярної маси 1000 Да для збору ретентату. Зібрану рідину концентрували на роторному випарнику і висушували під вакуумом з отриманням 80 г мануронової дикислоти, продукту В.
Співвідношення олігосахаридів з різними ступенями полімеризації в продукті В визначали методом молекулярної ексклюзивної хроматографії Зирегадех реріїде (ЗЕ Со.) у поєднанні з багатокутовим лазерним світлорозсіюванням (МАГ 5, Умуай Со.). Метод вимірювання був таким же, як у прикладі 1. Результати випробувань: від дисахариду до десасариду були представлені ст.пол. 2 - ст.пол. 10, відповідно: ст.пол. 2 становив 24 95, ст.пол. З - 25 90, ст.пол. 4 - 19 965, ст.пол. 5 - 12 905, ст.пол. 6 - 9 95, ст.пол. 7-5 95, арв - З Фо, ст.пол. 9 - 2 Фо, ст.пол. 10 - 1 Об.
Приклад 3:
Зважували 100 г М-сегментної проміжної сполуки з Прикладу 1 і розчиняли в дистильованій воді для приготування розчину в об'ємі 1,5 л. Розчин доводять до рН 9,0 за допомогою Маон, і реакцію проводять на водяній бані при 45 "С. Швидкість потоку газу на виході з кисневого балона і потужність генератора озону були відрегульованими таким чином, щоб озон подавався в реакційний розчин зі швидкістю потоку масової концентрації З г/год. Після 2 годин взаємодії подачу озону припиняли і додавали відповідну кількість води для регулювання концентрації розчину до приблизно 5595. Розчин фільтрували через ультрафільтраційну мембрану з відсіченням молекулярної маси 3000 Да для збору ретентата. Зібрану рідину концентрували на роторному випарнику і висушували у вакуумі з отриманням 60 г мануронової дикислоти, продукту С.
Співвідношення олігосахаридів з різними ступенями полімеризації в продукті С визначали за методом молекулярної ексклюзивної хроматографії Зирегдех реріїде (СН Со.) в поєднанні з багатокутовим лазерним світлорозсіюванням (МАЇ 5, Умуай Со.). Метод вимірювання був таким же, як у прикладі 1. Результати випробувань: від дисахариду до декасахариду були представлені ст.пол. 2 - ст.пол. 10, відповідно: ст.пол. 2 становив 8 95, ст.пол. 3-20 95, ст.пол. 4- 28 906, ст.пол. 5-19 95, ст.пол. 6-13 95, ст.пол. 7-6 905, ст.пол. 8-3 905, ст.пол. 9-2 Ов і ст.пол. 10-1 Фо.
Приклад 4:
Стадія 1) Одержання олігосахариду мануронової дикислоти з однаковим ступенем полімеризації був наступним: 1. Приготування зразка: 300 г мануронової дикислоти, продукту А, отриманого в прикладі 1. розчиняють у воді для приготування 1000 мл концентрованого розчину, який поміщають у холодильник при 4 "С, до використання. Для кожного використання 50 мл розчину розбавляли водою у співвідношенні 1:22, а потім фільтрували з відсмоктуванням через ультрафільтраційну мембрану 0,22 мкм.
Зо 2. Умови хроматографічного розділення: Хроматограф - АКТА риге 150 (придбаний у СЕ
Со.), обладнаний УФ-детектором і автоматичним колектором. Хроматографічна колонка для розділення: 1,2 кг Віосбе! Рб (придбаний у компанії Віо-Кай Со.) змішували з деіонізованою водою, вакуумно дегазували, вручну завантажували в скляну колонку (внутрішній діаметр: 10 см), промивали 10 об'ємами колонки чистої води. Шар хроматографічної колонки був стабільним, а висота складала 1,0 м. Потім рухому фазу змінювали до 0,02 М розчину Масі і після врівноваження з 10 об'ємами колонки починали завантаження зразка. 3. Завантаження і розділення: швидкість потоку насоса була встановлена на рівні 1 мл/хв.
Після того, як 100 мл розчину зразка закачували до верхньої частини колони через власний насос хроматографа, його перемикали на рухому фазу і елюювали при швидкості потоку 5 мл/хв. Після відтоку мертвого об'єму води починали автоматичний збір і збирали по 50 мл на одну пробірку. 4. Завантаження зразків повторювали, і після 20 повторів завантаження препарату, однакові фракції об'єднували, концентрували на роторному випарнику і ліофілізували отримуючи в цілому 9 олігосахаридів з однаковим ступенем полімеризації від дисахариду до декасахариду.
Стадія 2) Оцінка фармакологічної активності
Фармакологічну активність олігосахаридів олігомануронової кислоти з однаковим ступенем полімеризації оцінювали наступним чином: 1. Захисна дія олігосахаридів на АрВ-індуковане пошкодження нервових клітин Експеримент проводили таким же чином, як описано в Прикладі 1, і олігосахаридні розчини готували в концентрації 10 мг/мл.
Результати показали, що обробка клітин 5Н-5У5У 2 мкМ АВ1-42 може викликати значне пошкодження клітин і знижувати життєздатність клітин через 48 юдин, тоді як всі олігосахариди мануронових дикислот з однаковим ступенем полімеризації мають тенденцію інгібувати Ар- індуковане пошкодження клітин. Олігосахариди мануронової дикислоти зі ступенем полімеризації 4-10 (кінцева концентрація лікарських засобів 25 мкг/мл) можуть значно захистити нервові клітини від токсичних ефектів АВ, в яких олігосахариди з чотирма ступенями полімеризації 5-8 мали кращі ефекти, і гексасахарид мав найкращу активність; дивіться Фігуру 5. 2. Вплив олігосахаридів на здатність навчання і порушення пам'яті у моделі щурів, що бо індукується правою внутрішньошлуночковою ін'єкцією АВ1-40
Експериментальну процедуру проводили на 10 г кожного від дисахариду до декасахариду згідно з методом для "тваринної моделі для оцінки ефективності проти АЮ".
Через велику кількість олігосахаринових кислот з однаковим ступенем полімеризації експеримент був завершений декількома партіями. Порівняння і оцінку ефективності різних олігосахаридів проводили шляхом обчислення відсотка від кількості разів, коли тварини в кожній групі проходили через платформу, відносно кількості разів, коли контрольні тварини з імітованою операцією проходили через платформу. Результати показали, що кількість проходів через платформу значно зменшилася в модельній групі в порівнянні з контрольною групою з імітованою операцією. Кожен олігосахарид з однаковим ступенем полімеризації мав тенденцію до збільшення кількості проходів через платформу. Олігосахариди мануронових дикислот з однаковим ступенем полімеризації 4-10 можуть істотно збільшити кількість проходів через платформу, в яких олігосахариди з чотирма ступенями полімеризації 5-8 мали кращі ефекти, а гексасахарид мав найкращу активність; дивіться Фігуру 6.
Приклад 5
Оцінку фармакологічної активності проводили між композиціями і гексасахаридом для вивчення синергічного ефекту олігосахаридів з різними ступенями полімеризації в композиціях і діапазоном співвідношень олігосахаридів.
Приготування зразка: Олігосахариди мануронової дикислоти з однаковим ступенем полімеризації, отримані в Прикладі 4, були точно зважені від дисахариду до декасахариду за ступенем полімеризації. Вага кожного використовуваного сахариду була наступною: 0,5 г дисахариду, 3,0 г трисахариду, 2,0 г тетрасахариду, 2,0 г пентасахарида. 0.5 г гексасахариду, 0,5 г гептасахариду, 0,5 г октасахариду, 0,5 г нонасахариду 0,5 г декасахариду. їх змішували для отримання 10 г композиції продукту 0.
Співвідношення олігосахаридів у продуктах А, В ії С, отриманих у Прикладах 1, 2 і 3, відповідно, і продукт 0, отриманий у цьому прикладі, наведені нижче в таблиці 2.
Таблиця 2
Відсотки олігосахаридів у продуктах олігосахаридної композиції мануронової дикислоти
Співвідно- ення диСа- | триса- гетраса-|пентаса-| гекса- гептаса-| октаса- | нонаса- | декаса-
Комбінації харид | харид | харид | харид |сахаридІі харид | харид | харид | харид
В | 2495 | 2595 | 1995 | 1295 | 995 | 595 | 395 | 295 | 195 0 | 595 | 3095 | 2095 | 2095 | 595 | 595 | 595 | 595 | 595 10 г кожного з вищенаведених зразків А, В, С ії ОО використовували для порівняння фармакологічної активності цих композицій і гексасахариду (6Т) згідно з методом, описаним в
Зо "тваринній моделі для оцінки ефективності проти АЮ".
В експерименті, порівняно з контрольної групою з імітованою операцією, тварини в модельній групі демонстрували значну тривалість затримки пошуку платформи, що вказувало на успішне оцінювання моделювання. У порівнянні з модельною групою кожна група дозування значно скоротила затримку пошуку платформи.
Надавався один день відпочинку після закінчення навчання навігації. Потім платформу знімали і провели просторовий тестовий зонд, щоб спостерігати, скільки разів тварини проходили через платформу і відсоток відстані плавання в квадранті, де платформа спочатку була розташована, відносно загальної відстані, і оцінювали функцію пам'яті тварин. Результати показали, що кількість проходів через платформу значно знижувалася в модельній групі і значно збільшувалася в групах дозування в порівнянні з контрольною групою з імітованими операціями, як показано на Фігурі 7. Відсоток відстані плавання в квадранті, де платформа спочатку розташовувалася, відносно загальної відстані, показала аналогічну тенденцію до кількості проходів через платформу. У порівнянні з контрольною групою з імітованими операціями відсоток відстані плавання в квадранті, де платформа спочатку була розташована, щодо загальної відстані, була значно зменшена в модельній групі і була значно збільшена в групах дозування, як показано на Фігурі 8.
Результати експериментів показали, що відповідна фармакологічна активність олігосахаридних композицій А, В, С і О все ще була дуже сильною на 4-й день і сильнішою, ніж активність гексасахариду з однаковим ступенем полімеризації, що свідчить про синергізм між олігосахаридами в композиціях.
Приклад 6
Для подальшої оцінки активності різних олігосахаридів з однаковим ступенем полімеризації та композицій використовували методику спільного культивування клітин.
Відповідні кількості олігосахаридів з однаковим ступенем полімеризації, отримані в Прикладі 4, і продукт А олігосахаридної композиції, отриманий в Прикладі 1, точно зважували і розчиняли в РВ5 для приготування розчинів досліджуваного лікарського засобу в концентрації 10 мг/мл.
Експеримент зі спільного культивування клітин був практично таким же, як і спосіб культивування клітин, описаний у Прикладі 1 і Прикладі 4. Основна відмінність полягає в тому, що метод спільного культивування клітин імітує взаємодію різних клітин іп мімо. Враховуючи, що іп мімо клітини можуть взаємодіяти одна з одною через сигнальний шлях, щоб бути ближче до середовища іп мімо, і моделювати взаємодію між різними клітинами під час розвитку АЮ, мікрогліальні клітини були введені під час культивування. Конкретна експериментальна процедура полягала в наступному: клітини ЗН-5У5У (клітини нейробластоми) висівали в 24- лунковий планшет (12000 клітин/лунку), а клітини ВУ-2 (мікрогліальні клітини) висівали у верхню камеру при концентрації 15000 клітин/лунка. Через 24 години середовище видаляли, і розчини досліджуваного лікарського засобу додавали до нижньої камери для отримання кінцевої концентрації лікарського препарату 25 мкг/мл. Після 0,5 год. обробки (утворений в безсироватковому культуральному середовищі; З повторення на один розчин лікарського препарату) додавали агрегований АВ1-42 (АВ1-42 був утворений в розчині РВ5 до 1 мг/мл і інкубували в інкубаторі при 4 "С протягом 24 годин до утворення агрегованого стану при кінцевій концентрації 2 мкМ) і інкубували протягом 48 годин. Життєздатність клітин 5Н-5У5М в нижній камері була виявлена за допомогою ССКЗ8В.
Через 48 годин модельну групу порівнювали з нормальною контрольною групою. Попередні демонстрували значне пошкодження і зниження виживаності клітин. Групи дозування показали ефект інгібування АВ-індукованого пошкодження клітин. Зокрема, активність продукту А була значно кращою, ніж активність інших 9 олігосахаридів з однаковим ступенем полімеризації, як показано на Фігурі 9. Модель спільно культивованих клітин може ідентифікувати різницю в
Зо активності між композицією та олігосахаридами з однаковим ступенем полімеризації можливо тому, що синергічний ефект може виникати між цитокінами, що виділяються з мікрогліальних клітин, і олігосахаридами з різними ступенями полімеризації в композиції, тим самим збільшуючи активність олігосахаридної композиції.
Claims (17)
1. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти, що включає мануронову дикислоту формули (ІІЇ) або її фармацевтично прийнятну сіль: і І | он " а ій о | -чсоон но й у ж. І п їй сон Он ; формула (І) де п дорівнює цілому числу від 1 до 9, т дорівнює 0, 1 або 2 і т' дорівнює 0 або 1, і де загальна маса мануронових дикислот, де п-1-5, становить 80-95595 від загальної маси композиції; і співвідношення загальної маси мануронової дикислоти, де п-1-3, від загальної маси мануронової дикислоти, де п--4-7, складає від 1,0 до 3,5.
2. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за п. 1, в якій загальна маса мануронової дикислоти, де теп"-1 або 2, становить не менше 50 95 або більше, переважно 60-90 95, більш переважно 70-90 95 від загальної маси композиції.
3. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за п. 2, в якій загальна маса мануронової дикислоти, де тяет'"-1, становить не менше 1095, переважно 30-40 95 від загальної маси композиції.
4. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за п. 1, в якій загальна маса мануронових дикислот, де птят'-2, становить не менше 1095, переважно 30-50 95 від загальної маси композиції.
5. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за п. 1, в якій загальна маса мануронових дикислот, де п--1-5, становить 80-95 95 від загальної маси композиції.
6. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за п. 1, в якій загальна маса мануронових дикислот, де п--1-3, становить 20-70 95 від загальної маси композиції.
7. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за п. 1, в якій співвідношення загальної маси мануронової дикислоти, де п--1-3, від загальної маси мануронової дикислоти, де п-4-7, становить від 1,0 до 3,5.
8. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за п. 7, в якій співвідношення загальної маси мануронової дикислоти, де п--1-3, від загальної маси мануронової дикислоти, де п-4-7, становить від 1,0 до 3,0.
9. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за будь-яким одним з пп. 1-8, в якій масові відсотки мануронової дикислоти з різними ступенями полімеризації в композиції становлять: 5- 25 95 - дисахарид, 15-30 95 - трисахарид, 15-25 95 - тетрасахарид, 10-25 95 - пентасахарид, 5- 95 - гексасахарид, 3-10 95 - гептасахарид, 2-5 95 - октасахарид, 1-5 95 - нонасахарид, і 1-5 95 - 15 декасахарид.
10. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за п. 9, в якій масові відсотки мануронової дикислоти з різними ступенями полімеризації в композиції складають: 10-20 Фо - дисахарид, 18- ЗО до - трисахарид, 15-25 95 - тетрасахарид, 15-20 95 - пентасахарид, 5-10 9Ф5 - гексасахарид, 3- 5 до - гептасахарид, 2-3 95 - октасахарид, 1-3 95 - нонасахарид, і 1-3 95 - декасахарид.
11. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за будь-яким одним з пп. 1-10, в якій фармацевтично прийнятна сіль являє собою натрієву сіль або калієву сіль.
12. Фармацевтична композиція, що включає ефективну кількість композиції олігосахариду мануронової дикислоти за будь-яким одним з пп. 1-11, і, за необхідності, відповідний носій.
13. Застосування композиції олігосахариду мануронової дикислоти за будь-яким одним з пп. 1- 11 для виготовлення лікарського засобу проти старечої деменції.
14. Композиція олігосахариду мануронової дикислоти за будь-яким одним 3 пп. 1-11 для застосування як лікарського засобу проти старечої деменції.
15. Спосіб лікування пацієнта зі старечою деменцією, що включає введення ефективної кількості композиції олігосахариду мануронової дикислоти за будь-яким одним з пп. 1-11 Зо пацієнту, який цього потребує.
16. Спосіб отримання оолігосахариду мануронової дикислоти та її композиції шляхом окислювального розкладання озоном, де спосіб включає стадію контактування озону з гомополімануроновою кислотою, за якою отримують компоненти або композицію, визначену в будь-якому одному з пп. 1-11.
17. Спосіб за п. 16, в якому реакцію окислення проводять за температури переважно 0-70 "С, більш переважно 10-45 "С; при цьому стадію окислювального розкладання проводять при рН 3- 13, переважно 4-10, більш переважно 6-8.
щі МО чЕВе (ОВО ви Свв ПОКОВ МН -е ! чини ї міо смол. 1 ! ! Ї Ма щя ! ІА І Е ща і зане . во БО лю 3 б Зо ЗО об мо Б; Мб ої МО МО 30 мо аю ою Інтенеманк» зів йо сзівеЕнеання: заки до зартцу тих) а "Б БсаВ ВЕК ака, МО БСВМЕЗ ЕрджеВО ТУ МОВА ! ЗІ її їла ХХІ? щі що ст.пол. З ЩЕ у жа ва т р : ; З -ш НО ЯЗ а я 0 їв о ще яю Б 5 5 ж Я щБ о яю бо І Інтемеснанесть піків до спідвіднашщення жа до заряду Пе хуй "Б ЯМ село ю аю. З ЗЕВИВІ кове ЯН Я Щі ат СЕ ще заг я і 15 з но ст.поп. 4 Її: ! Б У ; і тут ! ща З і ще В ірекокдвлхконон в вмиктркика ускикено ііикннклннкк Я ккнккнкн у однини улни и свого ооо» ня осевенй , еекюсобктвзвомовою а бю не 5 6 ям о ява тю б бю ес ча інтенеивнішть пи до спвнудненеква ме до заотду ле
Фіг. 1 хін БВ ееве ЯВИ) ші. 2) всвпху Верн ййОМ 01 23.8 ІК ще 12 ій - | вою із) ст. пол. 5 | і БІ схову а ; хух зд 534 зо | Не ві» нн пон ! робки ; нко дн, стю ння нянні ОО МО 8 ЯМ Мо 85 НО жо ще ее мо ово же 95 в 2 об Інтансивність пін до співвідношення маси до заряду ст ше М ев оНОо а юшеь птн) Беру ша г і т венг є ст. пол. б | ! 4 з І шві і зані ! Е ! А Уа В Я пжнннкнйдкнннккккюрнккккікккювукннкккннкй діккккккккюккадіннккненнктннкйккй у жкннккнннйк Кікннкдиккнной У фнкнйккцнйк й ійккусннккннн в акнкктктунн ккккнк учню кнкккуккнк кре нкцрек що мб бю Об не МО 06 Зою а МБ оо Мо ЗО аб їн РБО М 120 інтезсивність ча до співеднаціення маен до заряду (МК) вро Брак ія) КУ ФЕе ів. ПКУ ЯсвАє» Різжеще Су ФОІ 8 14 песни і. 1 ІЛ пе ст. пол. 7 ! ія ке В 1 а пе роя НЯ ОН ЗМО БО ЖМНО 395 26 Же Ме ОО їмо Б МмюЮ Фо Бе б І ню івтенсявність піків до співвідношення маси до ряду т
Фіг. 2
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2016113879 | 2016-12-30 | ||
| PCT/CN2017/118843 WO2018121559A1 (zh) | 2016-12-30 | 2017-12-27 | 甘露糖醛二酸的组合物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA127034C2 true UA127034C2 (uk) | 2023-03-22 |
Family
ID=62706915
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201908582A UA127034C2 (uk) | 2016-12-30 | 2017-12-27 | Композиція мануронової дикарбонової кислоти |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US11384111B2 (uk) |
| EP (1) | EP3563853A4 (uk) |
| JP (1) | JP6977059B2 (uk) |
| KR (1) | KR102539060B1 (uk) |
| CN (1) | CN108283647B (uk) |
| AU (1) | AU2017385332B2 (uk) |
| BR (1) | BR112019013459A2 (uk) |
| CA (1) | CA3048554C (uk) |
| EA (1) | EA201991615A1 (uk) |
| MA (1) | MA47179A (uk) |
| MY (1) | MY192462A (uk) |
| PH (1) | PH12019550107A1 (uk) |
| UA (1) | UA127034C2 (uk) |
| WO (1) | WO2018121559A1 (uk) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110652516A (zh) * | 2018-06-29 | 2020-01-07 | 上海绿谷制药有限公司 | 甘露糖醛二酸的组合物在治疗帕金森氏症中的应用 |
| CN110652523A (zh) * | 2018-06-29 | 2020-01-07 | 上海绿谷制药有限公司 | 甘露糖醛二酸的组合物在治疗血管性痴呆症中的应用 |
| CN110652525A (zh) * | 2018-06-29 | 2020-01-07 | 上海绿谷制药有限公司 | 甘露糖醛二酸的组合物在治疗炎症中的应用 |
| CN110652526A (zh) * | 2018-06-29 | 2020-01-07 | 上海绿谷制药有限公司 | 甘露糖醛二酸的组合物在治疗糖尿病中的应用 |
| CN110652517A (zh) * | 2018-06-29 | 2020-01-07 | 上海绿谷制药有限公司 | 褐藻胶寡糖二酸的组合物 |
| CN112336742A (zh) * | 2019-08-06 | 2021-02-09 | 上海绿谷制药有限公司 | 甘露糖醛酸寡糖治疗Th1主导相关疾病的用途 |
| CN112336861A (zh) * | 2019-08-06 | 2021-02-09 | 上海绿谷制药有限公司 | 通过调节氨基酸水平治疗阿尔茨海默病的方法 |
| CN112336876A (zh) * | 2019-08-06 | 2021-02-09 | 上海绿谷制药有限公司 | 用于识别阿尔茨海默病患者中的糖类药物敏感性患者的方法 |
| CN112336860A (zh) * | 2019-08-06 | 2021-02-09 | 上海绿谷制药有限公司 | 通过调节肠道微生物治疗阿尔茨海默病的方法 |
| CN112741838A (zh) * | 2019-10-31 | 2021-05-04 | 上海绿谷制药有限公司 | 含有褐藻胶寡糖二酸的药用组合物 |
| CN110755440B (zh) * | 2019-11-20 | 2023-02-28 | 中国海洋大学 | 川芎嗪和甘露糖醛酸的组合物在用于制备治疗血栓性疾病和神经系统疾病的药物中的应用 |
| CN113244445A (zh) * | 2021-05-24 | 2021-08-13 | 广州市尚信净化工程有限公司 | 一种氧化亚铜-氧化刺槐豆胶抗菌凝胶 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1562050A (zh) | 2004-03-24 | 2005-01-12 | 中国海洋大学 | 褐藻酸寡糖在抗痴呆、抗糖尿病中的应用 |
| CN100508985C (zh) | 2004-03-24 | 2009-07-08 | 中国海洋大学 | 褐藻胶寡糖及其衍生物及其制备方法和用途 |
| JP2016108474A (ja) * | 2014-12-08 | 2016-06-20 | 栄治 松村 | オリゴ糖の製造方法およびオリゴ糖 |
| CN106344592A (zh) * | 2015-07-17 | 2017-01-25 | 上海绿谷制药有限公司 | 还原端1位为羧基的甘露糖醛酸寡糖及其衍生物在治疗帕金森氏症中的应用 |
| CN106344595B (zh) * | 2015-07-17 | 2020-06-19 | 上海绿谷制药有限公司 | 褐藻胶寡糖及其衍生物在制备治疗疼痛药物中的应用 |
| CN106344594A (zh) | 2015-07-17 | 2017-01-25 | 上海绿谷制药有限公司 | 褐藻胶寡糖及其衍生物在治疗炎症中的应用 |
| CN106344593B (zh) * | 2015-07-17 | 2020-01-10 | 上海绿谷制药有限公司 | 褐藻胶寡糖及其衍生物在制备治疗血管性痴呆药物中的应用 |
| CN106349298B (zh) * | 2015-07-17 | 2021-02-09 | 上海绿谷制药有限公司 | 褐藻胶寡糖及其衍生物在改善睡眠障碍中的应用 |
-
2017
- 2017-12-27 WO PCT/CN2017/118843 patent/WO2018121559A1/zh unknown
- 2017-12-27 KR KR1020197022102A patent/KR102539060B1/ko active IP Right Grant
- 2017-12-27 JP JP2019556407A patent/JP6977059B2/ja active Active
- 2017-12-27 BR BR112019013459A patent/BR112019013459A2/pt unknown
- 2017-12-27 US US16/474,928 patent/US11384111B2/en active Active
- 2017-12-27 MY MYPI2019003786A patent/MY192462A/en unknown
- 2017-12-27 CA CA3048554A patent/CA3048554C/en active Active
- 2017-12-27 MA MA047179A patent/MA47179A/fr unknown
- 2017-12-27 EA EA201991615A patent/EA201991615A1/ru unknown
- 2017-12-27 AU AU2017385332A patent/AU2017385332B2/en active Active
- 2017-12-27 EP EP17888733.7A patent/EP3563853A4/en active Pending
- 2017-12-27 UA UAA201908582A patent/UA127034C2/uk unknown
- 2017-12-28 CN CN201711467596.6A patent/CN108283647B/zh active Active
-
2019
- 2019-06-27 PH PH12019550107A patent/PH12019550107A1/en unknown
-
2022
- 2022-07-08 US US17/860,468 patent/US20220356202A1/en active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MY192462A (en) | 2022-08-22 |
| CA3048554C (en) | 2022-11-29 |
| JP6977059B2 (ja) | 2021-12-08 |
| US11384111B2 (en) | 2022-07-12 |
| US20200385417A1 (en) | 2020-12-10 |
| AU2017385332A1 (en) | 2019-07-18 |
| MA47179A (fr) | 2019-11-06 |
| CN108283647A (zh) | 2018-07-17 |
| EP3563853A4 (en) | 2021-01-06 |
| US20220356202A1 (en) | 2022-11-10 |
| AU2017385332B2 (en) | 2020-10-29 |
| EP3563853A8 (en) | 2020-06-17 |
| BR112019013459A2 (pt) | 2019-12-31 |
| KR102539060B1 (ko) | 2023-06-02 |
| WO2018121559A8 (zh) | 2023-03-30 |
| NZ754947A (en) | 2021-03-26 |
| JP2020507619A (ja) | 2020-03-12 |
| CA3048554A1 (en) | 2018-07-05 |
| KR20190101420A (ko) | 2019-08-30 |
| CN108283647B (zh) | 2021-01-15 |
| EP3563853A1 (en) | 2019-11-06 |
| PH12019550107A1 (en) | 2020-06-01 |
| EA201991615A1 (ru) | 2019-12-30 |
| WO2018121559A1 (zh) | 2018-07-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA127034C2 (uk) | Композиція мануронової дикарбонової кислоти | |
| US10213456B2 (en) | Alginate oligosaccharides and the derivatives thereof as well as the manufacture and the use of the same | |
| CH638819A5 (de) | Inklusionskomplex des cyclodextrins mit indomethacin und verfahren zur herstellung des komplexes. | |
| US11464794B2 (en) | Composition of alginic oligosaccharic diacids | |
| EP0379161A2 (de) | Verwendung alkylierter Polyethylenimine als gallensäureadsorbierende Arzneimittel sowie pharmazeutische Präparate | |
| US20180207195A1 (en) | Oxidized a-1,4-oligoglucuronic acid, and preparation method therefor and uses thereof | |
| NZ754947B2 (en) | Composition of mannuronic diacid | |
| CN110652516A (zh) | 甘露糖醛二酸的组合物在治疗帕金森氏症中的应用 | |
| EA041420B1 (ru) | Композиции маннуроновой дикислоты, способы ее получения и использования | |
| US11406651B2 (en) | Use of mannuronic diacid composition in treatment of vascular dementia | |
| US11406653B2 (en) | Use of mannuronic diacid composition in treatment of pain | |
| CN110183311A (zh) | 一种异戊烯基芪及其在制备治疗炎症性疾病药物中的用途 |