UA125683C2 - Інсектицидний білок, який є токсичним для лускокрилого шкідника, та спосіб контролю шкідників рослин - Google Patents

Інсектицидний білок, який є токсичним для лускокрилого шкідника, та спосіб контролю шкідників рослин Download PDF

Info

Publication number
UA125683C2
UA125683C2 UAA201800782A UAA201800782A UA125683C2 UA 125683 C2 UA125683 C2 UA 125683C2 UA A201800782 A UAA201800782 A UA A201800782A UA A201800782 A UAA201800782 A UA A201800782A UA 125683 C2 UA125683 C2 UA 125683C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
protein
plant
insect
sequence
corn
Prior art date
Application number
UAA201800782A
Other languages
English (en)
Inventor
Метью Річард Брамлетт
Метью Ричард Брамлетт
Кетрін Сегуін
Кэтрин Сегуин
Марк Скотт РОУЗ
Original Assignee
Сінгента Партісіпейшнс Аг
Сингента Партисипейшнс Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сінгента Партісіпейшнс Аг, Сингента Партисипейшнс Аг filed Critical Сінгента Партісіпейшнс Аг
Publication of UA125683C2 publication Critical patent/UA125683C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/32—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Bacillus (G)
    • C07K14/325—Bacillus thuringiensis crystal peptides, i.e. delta-endotoxins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A01N37/44—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and a nitrogen atom attached to the same carbon skeleton by a single or double bond, this nitrogen atom not being a member of a derivative or of a thio analogue of a carboxylic group, e.g. amino-carboxylic acids
    • A01N37/46—N-acyl derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/50—Isolated enzymes; Isolated proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/164—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
    • C12N15/8286—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for insect resistance
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
    • Y02A40/146—Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Description

ПОСИЛАННЯ НА ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ, ПОДАНИЙ В ЕЛЕКТРОННОМУ ВИГЛЯДІ
І0001) Офіційна копія переліку послідовностей подана в електронному вигляді через ЕЕ5-
Уумеь у вигляді переліку послідовностей у форматі АЗСІЇ з назвою файлу "80829-05-І-ОВа-МАТ- 1 бедіївї 5Т251хі", створеного 30 червня 2015 р., такого, що має розмір 310 кілобайт, і поданого одночасно з описом. Перелік послідовностей, який міститься в даному документі у форматі АЗСІЇ, є частиною опису та включений у даний документ за допомогою посилання у всій своїй повноті.
ПЕРЕХРЕСНЕ ПОСИЛАННЯ НА СПОРІДНЕНІ ЗАЯВКИ
І0002| Дана заявка заявляє пріоритет за попередньою заявкою на патент США із порядковим номером 62/187 468, поданою 1 липня 2015 року, яка включена за допомогою посилання у її повному обсязі для всіх цілей.
ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ ВИНАХОДУ
І0003| Даний винахід стосується пестицидних білків і молекул нуклеїнових кислот, які їх кодують, а також композицій і способів контролю шкідників рослин.
ПЕРЕДУМОВИ ВИНАХОДУ
00041 Васійи5 «пигіпдіепзі (ВО є грампозитивною споротвірною грунтовою бактерією, що відрізняється своєю здатністю продукувати кристалічні включення, які особливо токсичні для певних рядів і видів шкідників рослин, у тому числі комах, але нешкідливі для рослин та інших нецільових організмів. Із цієї причини композиції, що містять штами Васіїи5 ІПигіпдіеєпвів5 або їхні інсектицидні білки, можуть використовуватися як прийнятні з погляду охорони навколишнього середовища інсектициди для контролю комах-шкідників, важливих із погляду сільського господарства, або комах-переносників багатьох захворювань людини або тварин.
ЇО00О5| Кристалічні (Стгу) білки з Васійй5 (игіпдіепбізє характеризуються сильною інсектицидною активністю щодо переважно лускокрилих, двокрилих і твердокрилих комах- шкідників. Ці білюи також продемонстрували активність щодо шкідників із рядів Нутепоріега,
Ноторіеєега, Ріїпігарієга, Майорпада та шкідників із рядів підкласу Асаїгі, а також інших груп безхребетних, таких як Метайпеїтіпіпез, РіаєупеїІтіпіпез і Загсотавіїдогрпога (Ееїїев!з5оп, 4). 1993.
Те Васіїйи5 Тпигіпдіепвзі5 Татійу їгеє. В Адмапсей Епдіпеегей Резіїсіде5. Магсе! ОекКкег, Іпс., Мемжм/
Уогк, М.М.) Ці білки спочатку розділили на класи Стгу!Ї - Сгумі переважно на підставі їхньої
Зо інсектицидної активності. Основними класами були специфічні для І ерідорієга (І), специфічні для І ерідорієга та Оірієга (Ії), специфічні для СоіІеоріега (ІІ), специфічні для Оірієега (ІМ) і специфічні для нематод (М) та (МІ). Далі білки розділили на підродини, білкам із вищим ступенем спорідненості в межах кожної родини надали літери для позначення розділу, такі як
СТУЇА, СтуІВ, Сту!С тощо. Ще більш близькоспорідненим білкам у межах кожного розділу надали назви, такі як СгуС(а), СтгуІС(Б) тощо. Терміни "токсин Сту" ї "дельта-ендотоксин" використовувалися взаємозамінно із терміном "білок Сту". Сучасна номенклатура білків і генів
Стгу базується на гомології амінокислотних послідовностей, а не на специфічності щодо цільових комах (Стісктоге еї аі. (1998) МісгобіоІ. Мої. ВіоЇ. Кем. 62:807-813). У цій більш поширеній класифікації кожному токсину надається унікальна назва, що включає первинний ранг (арабська цифра), вторинний ранг (велика літера), третинний ранг (мала літера) і четвертинний ранг (ще одна арабська цифра). У сучасній класифікації в первинному ранзі римські цифри були замінені на арабські цифри. Наприклад, "СгуіА(а)" згідно зі старою номенклатурою на сьогодні має назву "СгуїАа" згідно із сучасною номенклатурою. Згідно з публікацією Ібгайіт еї аї. (2010, Віоепд. Вид5, 1:31-50) токсини Сгу були розділені на шість основних класів згідно з їхньою вибірковістю ураження щодо комахи-хазяїна, та вони включають: групу 1 - лускокрилі (наприклад, Стгу!, СтгуЗ9 і Сту15); групу 2 - лускокрилі та двокрилі (наприклад, Стгуг); групу З - твердокрилі (СтуЗ, Стгу7 і Стув8); групу 4 - двокрилі (Сту4, Стгу10,
Стгу1!1, Стгу16, Стгу17, Стгу19 і Сту20); групу 5 - лускокрилі та твердокрилі (Сту11); ї групу 6 - нематоди (Стгуб). Токсини Стуті, Сгту2, СтуЗ, Сгу10 ї Сгу11 (73-82 кДа) є унікальними, оскільки, ймовірно, вони є результатом природних усічень білків більшого розміру Сту! і Сту4 (130-140 кДа). 0006) Білки Сгу являють собою глобулярні білкові молекули, які накопичуються у вигляді протоксинів у кристалічній формі під час стадії споруляції Ві. Після поїдання шкідником кристали, як правило, розчиняються з вивільненням протоксинів, розмір яких може варіювати, наприклад, від 130-140 кДа у випадку білків Сгу, активних щодо багатьох лускокрилих, таких як
Стгу! і Сгу9, та 60-80 кДа у випадку білків СтуЗ, активних щодо твердокрилих, та білків Сгуг, активних щодо лускокрилих/двокрилих. Після розчинення кристалів в організмі сприйнятливої комахи вивільнені протоксини піддаються обробці протеазами у травному каналі комахи, наприклад трипсином і хімотрипсином, з утворенням протеазастійкої серцевини білкового бо токсину Сгу. У даний протеолітичний процесинг залучається видалення амінокислот із різних ділянок різних протоксинів Сту. Наприклад, протоксини Сту розміром 130-140 кДа, як правило, активуються шляхом протеолітичного видалення М-кінцевого пептиду з 25-30 амінокислот і приблизно половини залишкового білка з С-кінця, результатом чого є утворення зрілого токсину
Стгу розміром приблизно 60-70 кДа. Протоксини розміром 60-80 кДа, наприклад Сгу2 і Сгуз, також піддаються процесингу, але не тією ж мірою, як протоксини більшого розміру. Протоксини меншого розміру, як правило, характеризуються тим, що з М-кінця видаляється така ж або більша кількість амінокислот, ніж у протоксинів більшого розміру, але на С-кінці видаляється менша кількість амінокислот. Наприклад, протеолітична активація представників родини Сгуг, як правило, залучає видалення приблизно 40-50 М-кінцевих амінокислот. Багато білків Сгу є досить токсичними для певних цільових комах, але багато мають вузькі спектри активності.
Ї0007| Білки Сгу, як правило, мають п'ять доменів із консервативною послідовністю та три домени з консервативною структурою (див., наприклад, де Маада еї аї. (2001) Тгтепаз Сепеїйіс5 17:1193-199). Перший домен із консервативною структурою, який називається домен Її, як правило, складається із семи альфа-спіралей і залучений у вставлення в мембрану та утворення пор. Домен іЇ як правило, складається з трьох бета-складчастих шарів, розташованих у конфігурації типу грецький ключ, а домен ПІ, як правило, складається з двох антипаралельних бета-складчастих шарів у вигляді структури "|зеПу-тої!" (де Маада еї аї!., 2001, вище). Домени ЇЇ та Ії залучені в розпізнавання та зв'язування рецепторів і тому вважаються детермінантами специфічності токсину.
ЇО008| Численні комерційно цінні рослини, у тому числі широко поширені сільськогосподарські культури, є сприйнятливими до нападу шкідників рослин, у тому числі комах-шкідників і нематод-шкідників, що призводить до істотного зниження врожайності та якості сільськогосподарських культур. Наприклад, шкідники рослин є головним чинником втрати врожаю важливих світових сільськогосподарських культур. Через пошкодження, спричинені безхребетними шкідниками, у тому числі комахами, щорічні збитки в США становлять приблизно 8 мільярдів доларів. Комахи-шкідники також лягають тягарем на овочівників і плодівників, виробників декоративних квітів, а також власників присадибних господарств. (0009) Комах-шкідників контролюють переважно шляхом інтенсивного застосування хімічних пестицидів, які діють шляхом пригнічення росту комах, перешкоджання живленню або
Ко) розмноженню комах або спричиняють загибель. Засоби для біологічного контролю шкідників, такі як штами Васійїи5 «(пигіпдіепзі5, що експресують пестицидні токсини, такі як білки Сту, також застосовувалися щодо культурних рослин із задовільними результатами, що є альтернативою або доповненням до хімічних пестицидів. Були виділені гени, які кодують деякі з цих білків Стгу, і було показано, що їхня експресія в гетерологічних хазяїнах, таких як трансгенні рослини, забезпечує інший інструмент для контролю економічно важливих комах-шкідників. 0010) Таким чином, можна досягти належного контролю комах, але певні хімічні речовини іноді можуть завдавати шкоди нецільовим корисним комахам, і певні біологічні речовини мають дуже вузький спектр активності. Крім того, тривале використання певних способів хімічного та біологічного контролю підвищує ймовірність розвитку у комах-шкідників стійкості до таких заходів контролю. Частково це послаблялося шляхом застосування різних агротехнічних прийомів, пов'язаних зі стійкістю, однак усе ще зберігається потреба в розробці нових та ефективних засобів для контролю шкідників, які забезпечують економічну користь фермерам і які є прийнятними з погляду охорони навколишнього середовища. Особливо необхідними є засоби для контролю, які цілеспрямовано можуть діяти на ширший спектр економічно важливих комах-шкідників і які забезпечують ефективний контроль ліній комах, що можуть стати стійкими до наявних засобів для контролю комах або є такими.
КОРОТКИЙ ОПИС
0011) З огляду на ці потреби метою даного винаходу є забезпечення нових засобів для контролю шкідників шляхом забезпечення нових ізолятів Васіїйи5 (пигіпдіепвіз (ВО, а також нових генів та пестицидних білків, які можна використовувати для контролю багатьох шкідників рослин.
Ї0012| У даному винаході передбачені композиції та способи надання пестицидної активності бактеріям, рослинам, рослинним клітинам, тканинам і насінню. Зокрема, передбачені химерні гени, що містять нові полінуклеотиди, які кодують білки Сгу, виділені з Ві, і послідовності, значною мірою ідентичні їм, експресія яких приводить до утворення білків, що мають токсичність щодо економічно важливих комах-шкідників, зокрема комах-шкідників, які вражають рослини. Крім того, даний винахід стосується нових білків Сту, одержаних у результаті експресії полінуклеотидів, а також композицій і складів, які містять білки Стгу, що здійснюють токсичний вплив на комах шляхом пригнічення здатності комах-шкідників до 60 виживання, росту та розмноження або шляхом обмеження пошкодження або загибелі культурних рослин, спричинених комахами. Білки Сту за даним винаходом включають нативні білки Сгу і мутантні або варіантні білки Сгу, які містять одну або декілька амінокислотних замін, додавань або делецій. Приклади мутантних білків Сту включають без обмеження такі, піддані мутації, щоб мати ширший спектр активності або більш високу специфічність порівняно з їхніми аналогами, нативними білками Сгу, або такі, піддані мутації, щоб ввести епітоп для вироблення антитіл, які вибірково розпізнають мутантний білок, а не нативний білок, або піддані мутації, щоб модулювати експресію в трансгенному організмі. Нові білки Сгу за даним винаходом мають високу токсичність щодо комах-шкідників. Наприклад, білюи Сгу за даним винаходом можна використовувати для контролю однієї або декількох економічно важливих комах-шкідників, таких як совка-іпсилон (Адгоїїз ірзіюп), кукурудзяний метелик (О5ігіпіа пибріїай5), совка трав'яна (Зродоріега їпидірегаа), американська кукурудзяна совка (Неїїсомегра 7еа), вогнівка цукрової тростини (Оіаїгаєа засспагаїї5), гусінь совки оксамитових бобів (Апіїсагсіа деттаїйаїїв), соєва совка (СПпгузодеїхіз іпсішде5), вогнівка кукурудзяна південно-західна (Оіаїгаєа дгапаїіозега), західна бобова совка (Кіспіа аїрісобіїа), тютюнова совка (Неїйоїйіх міге5сеп5), східний кукурудзяний метелик (Оз5ігіпіа Тигпасаїї5), бавовникова совка (Неїїсомегра агтідега), вогнівка жовта рисова (Спіо 5,ирргеззаїї5), рожева стеблова совка (Зезатіа саІатівії5), вогнівка рисова (Спарпа|осгосів теаїпаїї5) тощо. 0013) У даному винаході також передбачені синтетичні полінуклеотиди, які кодують білки
Сгу за даним винаходом, які мають один або декілька кодонів, оптимізованих для експресії в трансгенних організмах, таких як трансгенні бактерії або трансгенні рослини. 0014) Даний винахід додатково стосується касет експресії та рекомбінантних векторів, які містять полінуклеотид, що кодує білок Сгу за даним винаходом. У даному винаході також передбачені трансформовані бактерії, рослини, рослинні клітини, тканини та насіння, що містять химерний ген, або касету експресії, або рекомбінантний вектор, які використовуються в експресії білка Сту за даним розкриттям у трансформованих бактеріях, рослинах, рослинних клітинах, тканинах та насінні. 0015) Даний винахід також спрямований на виділені штами Васійи5 (пигіпдіепвіз (ВО, що продукують білки Сгу за даним винаходом. Такі штами Ві можуть являти собою ізолят або штам трансгенного Ві, що зустрічаються в природі, які продукують один або декілька білків Сту за даним винаходом. 0016) Даний винахід також стосується способів застосування полінуклеотидів, наприклад, у
ДНК-конструкціях, або химерних генах, або касетах експресії, або рекомбінантних векторах для трансформації та експресії в організмах, у тому числі рослинах та мікроорганізмах, таких як бактерії. Нуклеотидні або амінокислотні послідовності можуть являти собою нативні або синтетичні послідовності, які були сконструйовані для експресії в організмі, у такому як рослина або бактерія, або в одержанні гібридних токсинів Стгу з посиленою пестицидною активністю. Крім того, даний винахід спрямований на способи одержання білків Сгу і на способи застосування послідовностей полінуклеотидів і білків Сту, наприклад, у мікроорганізмах для контролю комах або в трансгенних рослинах для надання захисту від пошкодження комах.
І0017| Інший аспект за даним винаходом включає інсектицидні композиції та склади, що містять білки Сту або штами Васійи5 ІПигіпдіепзі5 за даним винаходом, і способи застосування композицій або складів для контролю популяцій комах, наприклад, шляхом нанесення композицій або складів на уражені шкідниками площі або для профілактичної обробки сприйнятливих до комах площ або рослин для забезпечення захисту від комах-шкідників.
Необов'язково композиції або склади за даним винаходом можуть, додатково до білка Сту або штаму ВІ за даним винаходом, містити інші пестицидні засоби, такі як хімічні пестициди, для збільшення або посилення здатності композиції або складу контролювати комах. 0018) Композиції та способи за даним винаходом використовуються для контролю комах- шкідників, які вражають рослини, зокрема культурні рослини. Композиції за даним винаходом також використовуються для одержання змінених або покращених білків Стгу, які характеризуються пестицидною активністю, або для виявлення наявності білка Сту або нуклеїнових кислот у комерційних продуктах або трансгенних організмах. 0019) Ці та інші ознаки, аспекти та переваги даного винаходу стануть більш зрозумілими з посиланням на наступний докладний опис і формулу винаходу.
КОРОТКИЙ ОПИС ПОСЛІДОВНОСТЕЙ У ПЕРЕЛІКУ ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
00201 5ЕО ІЮ МО:1 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує білок ВТ-0001. 00211 БЕО ІО МО:2 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує білок ВТ-0003.
Ї0022| ЗЕО ІЮ МО:З3 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує білок ВТ-0020. 00231) 5ЕО ІЮ МО:4 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує білок ВТ-0022. бо (0024) 5ЕО ІЮ МО:5 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує білок ВТ-0027.
(00251) ЗЕО І МО:6 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує білок ВТ-0029. 0026) 5ЕО ІО МО:7 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує білок ВТ-0030.
І0027| 5ЕО ІЮ МО:8 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує білок ВТ-0031. (00281) 5ЕО ІЮ МО:9 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує білок ВТ-0201. 0029) 5ЕО ІЮ МО:10 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує білок ВТ-0202.
ІЇ0030| ЗЕО ІЮ МО:11 являє собою кодон-оптимізовану послідовність, що кодує білок ВТ- 0001.
ІЇ0031| ЗЕО ІЮ МО:12 являє собою кодон-оптимізовану послідовність, що кодує білок ВТ- 0003.
І0032| ЗЕО ІЮ МО:13 являє собою кодон-оптимізовану послідовність, що кодує білок ВТ- ого.
ІЇ0033| ЗЕО ІЮ МО:14 являє собою кодон-оптимізовану послідовність, що кодує білок ВТ- 0о22.
Ї0034| 5ЕО ІЮ МО:15 являє собою кодон-оптимізовану послідовність, що кодує білок ВТ- 0027.
ІЇ0035| ЗЕО ІЮ МО:16 являє собою кодон-оптимізовану послідовність, що кодує білок ВТ- 0ог9.
ІЇ0036| ЗЕО ІЮ МО:17 являє собою кодон-оптимізовану послідовність, що кодує білок ВТ- 0030.
І0037| ЗЕО ІЮ МО:18 являє собою кодон-оптимізовану послідовність, що кодує білок ВТ- 0031.
І0038| ЗЕО ІЮ МО:19 являє собою кодон-оптимізовану послідовність, що кодує білок ВТ- 0201.
ІЇ0039| ЗЕО ІЮ МО:20 являє собою кодон-оптимізовану послідовність, що кодує білок ВТ- 0202. 00401) ЗЕО ІЮО МО:21 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує мутантний білок ВТ- 0001. 00411 ЗЕО ІЮО МО:22 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує мутантний білок ВТ- 0003.
Зо (00421) ЗЕО ІЮО МО:23 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує мутантний білок ВТ- ого. 0043) ЗЕО ІЮО МО:24 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує мутантний білок ВТ- 0о22. (0044| ЗЕО ІЮО МО:25 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує мутантний білок ВТ- 0027. 00451) ЗЕО ІЮО МО:26 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує мутантний білок ВТ- 0ог9.
І0046| ЗЕО ІЮО МО:27 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує мутантний білок ВТ- 0030.
І0047| ЗЕО ІЮО МО:28 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує мутантний білок ВТ- 0031. 0048) ЗЕО ІЮО МО:29 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує мутантний білок ВТ- 0201.
І0049| ЗЕО ІЮО МО:30 являє собою нуклеотидну послідовність, що кодує мутантний білок ВТ- 0202. 0050) 5ЕО ІЮ МО:31 являє собою амінокислотну послідовність білка ВТ-0001. 0051 БЕО ІО МО:32 являє собою амінокислотну послідовність білка ВТ-0003. 00521) 5ЕО ІЮ МО:33 являє собою амінокислотну послідовність білка ВТ-0020. 0053) 5ЕО ІЮ МО:34 являє собою амінокислотну послідовність білка ВТ-0022. (0054) 5ЕО ІЮ МО:35 являє собою амінокислотну послідовність білка ВТ-0027. 0055) 5ЕО ІЮ МО:36 являє собою амінокислотну послідовність білка ВТ-0029. 0056) 5ЕО ІО МО:37 являє собою амінокислотну послідовність білка ВТ-0030.
І0057| 5ЕО ІЮ МО:38 являє собою амінокислотну послідовність білка ВТ-0031. 0058) 5ЕО ІЮ МО:39 являє собою амінокислотну послідовність білка ВТ-0201. 0059) 5ЕО ІЮ МО:40 являє собою амінокислотну послідовність білка ВТ-0202. 0060) 5ЕО ІЮ МО:41 являє собою амінокислотну послідовність мутантного білка ВТ-0001.
Ї00О61) БЕО ІЮ МО 42 являє собою амінокислотну послідовність мутантного білка ВТ-0003. 00621) 5ЕО ІЮ МО:43 являє собою амінокислотну послідовність мутантного білка ВТ-0020. 0063) 5ЕО ІЮ МО:44 являє собою амінокислотну послідовність мутантного білка ВТ-0022. бо 00641 5ЕО ІО МО:45 являє собою амінокислотну послідовність мутантного білка ВТ-0027.
0065) 5ЕО ІЮ МО:46 являє собою амінокислотну послідовність мутантного білка ВТ-0029. 0066) 5ЕО ІО МО:47 являє собою амінокислотну послідовність мутантного білка ВТ-0030.
Ї0067| 5ЕО ІО МО:48 являє собою амінокислотну послідовність мутантного білка ВТ-0031. (0068) 5ЕО ІЮ МО:49 являє собою амінокислотну послідовність мутантного білка ВТ-0201. 0069) 5ЕО ІЮ МО:50 являє собою амінокислотну послідовність мутантного білка ВТ-0202.
ДОКЛАДНИЙ ОПИС
І0070| Не передбачається, що даний опис являє собою докладний перелік усіх різних шляхів, за допомогою яких може бути реалізований даний винахід, або всіх ознак, які можна додати до даного винаходу. Наприклад, ознаки, проілюстровані щодо одного варіанта здійснення, можуть бути включені в інші варіанти здійснення, а ознаки, проілюстровані щодо конкретного варіанта здійснення, можуть бути видалені з даного варіанта здійснення. Таким чином, даним винаходом передбачається, що в деяких варіантах здійснення даного винаходу можна виключити або випустити будь-яку ознаку або комбінацію ознак, викладених у даному документі. Крім того, численні варіації та доповнення до різноманітних варіантів здійснення, які пропонуються в даному документі, будуть очевидними для фахівців у даній галузі техніки з огляду на дане розкриття, що не відходить від суті даного винаходу. Отже, наступні описи призначені для ілюстрації деяких конкретних варіантів здійснення за даним винаходом, а не для вичерпного визначення всіх їхніх перетворень, комбінацій і варіацій.
І0071| Якщо не вказано інше, то всі технічні та наукові терміни, які використовуються в даному документі, мають таке значення, що зазвичай зрозуміло фахівцю в даній галузі техніки, до якої належить даний винахід. Термінологія, яка використовується в даному документі в описі даного винаходу, використовується лише для опису конкретних варіантів здійснення та не призначена для обмеження даного винаходу.
Визначення
І0072| Форми однини, використовувані в даному документі та доданій формулі винаходу, включають посилання на множину, якщо в контексті явно не вказано інше. Отже, наприклад, посилання на "рослину" є посиланням на одну або декілька рослин і включає їхні еквіваленти, відомі фахівцям у даній галузі, тощо. Слово "або", використовуване в даному документі, означає будь-який елемент із конкретного переліку, а також включає будь-яку комбінацію
Зо елементів із такого переліку (тобто включає також "ї").
І0073| Термін "приблизно", використовуваний у даному документі, означає наближено, орієнтовано, близько або в районі. Якщо термін "приблизно" використовується разом із числовим діапазоном, то він модифікує даний діапазон, розширюючи межі вище та нижче від указаних числових значень. Загалом термін "приблизно", використовуваний у даному документі, модифікує числове значення вище та нижче від указаного значення шляхом відхилення на 20 відсотків, переважно 10 відсотків вгору або вниз (більше або менше). Що стосується температури, то термін "приблизно" означає -1 "С, переважно 50,5 "С. Якщо термін "приблизно" використовується в контексті даного винаходу (наприклад, у комбінаціях із температурою або значеннями молекулярної маси), то переважним є точне значення (тобто без "приблизно").
І0074| Під "активністю" токсичного білка Сгу за даним винаходом передбачається, що токсичний білок діє як активний під час перорального введення засіб для контролю комах, має токсичну дію або є здатним порушувати або обмежувати живлення комах, що може або не може викликати загибель комахи. Коли токсичний білок за даним винаходом доставляється в організм комахи, як правило, результатом є загибель комахи, або комаха не живиться через джерело, яке робить токсичний білок доступним для комахи.
І0075)| Термін "ампліфікований", використовуваний у даному документі, означає створення множини копій молекули нуклеїнової кислоти або множини копій, комплементарних молекулі нуклеїнової кислоти, із використанням як матриці щонайменше однієї з молекул нуклеїнових кислот. Системи ампліфікації включають систему на основі полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР), систему на основі лігазної ланцюгової реакції (І СЕ), систему ампліфікації, що базується на послідовності нуклеїнових кислот (МАЗВА, Сапдепе, Міссіссога, Онтаріо), систему на основі
О-бета реплікази, систему ампліфікації, яка базується на транскрипції (ТАБ), та ампліфікацію із заміщенням ланцюгів (ЗОБА). Див., наприклад, Оіадповіїс МоїІесшаг Місгобіоіоду: Ргіпсіріе5 апа
Арріїсайопо5, РЕВБІМС еї аїЇ., Ед., Атегісап босієїу ог Містобіоіоду, УМавпіпдіоп, О.С. (1993).
Продукт ампліфікації називається "ампліконом".
І0076| Терміни "химерна конструкція", або "химерний ген", або "химерний полінуклеотид", або "химерна нуклеїнова кислота" (або подібні терміни), використовувані в даному документі, стосуються конструкції або молекули, що містять два або більше полінуклеотидів різного походження, зібраних в одну молекулу нуклеїнової кислоти. Терміни "химерна конструкція", бо "химерний ген", "химерний полінуклеотид" або "химерна нуклеїнова кислота" стосуються будь-
якої конструкції або молекули, що містить без обмеження (1) полінуклеотиди (наприклад, ДНК), у тому числі регуляторні та кодувальні полінуклеотиди, які разом не зустрічаються у природі (тобто щонайменше один із полінуклеотидів у конструкції є гетерологічним щодо щонайменше одного з його інших полінуклеотидів), або (2) полінуклеотиди, що кодують частини білків, не зв'язані в природі, або (3) частини промоторів, які не зв'язані в природі. Крім того, химерна конструкція, химерний ген, химерний полінуклеотид або химерна нуклеїнова кислота можуть містити регуляторні полінуклеотиди та кодувальні полінуклеотиди, одержані з різних джерел, або можуть містити регуляторні полінуклеотиди та кодувальні полінуклеотиди, одержані з того самого джерела, але розташовані іншим чином, ніж той, що зустрічається в природі. У деяких варіантах здійснення даного винаходу химерна конструкція, химерний ген, химерний полінуклеотид або химерна нуклеїнова кислота містять касету експресії, що містить полінуклеотид за даним винаходом під контролем регуляторних полінуклеотидів, зокрема під контролем регуляторних полінуклеотидів, які функціонують у рослинах або бактеріях.
І0077| "Кодувальна послідовність" являє собою послідовність нуклеїнової кислоти, яка транскрибується в РНК, таку як тЕМА, геЕМА, їКМА, 5пкМА, сенсова РНК або антисенсова РНК.
Переважно РНК потім транслюється в організмі з продукуванням білка.
І0078| Вираз "кодон-оптимізована послідовність", використовуваний у даному документі, означає нуклеотидну послідовність рекомбінантного, трансгенного або синтетичного полінуклеотиду, в якому кодони вибрані так, щоб відображати схильність до певних кодонів, яка може спостерігатися в клітині- або організмі-хазяїні. Як правило, це виконується таким чином, щоб зберегти амінокислотну послідовність поліпептиду, що кодується кодон-оптимізованою нуклеотидною послідовністю. У деяких варіантах здійснення послідовність ДНК рекомбінантної
ДНК-конструкції включає послідовність, яка була кодон-оптимізована для клітини (наприклад, клітини тварини, рослини або гриба), в якій дана конструкція буде експресуватися. Наприклад, у конструкції, яка буде експресуватися в рослинній клітині, може бути кодон-оптимізованою для експресії в рослині вся послідовність або її частина (наприклад, перший елемент для супресії гена або елемент для експресії гена). Див., наприклад, патент США Мо 6121014, включений у даний документ за допомогою посилання.
І0079| "Контроль" комах означає пригнічення шляхом токсичної дії здатності комах-шкідників
Ко) до виживання, росту, живлення або розмноження, або обмеження пошкодження або загибелі культурних рослин, спричинених комахами, або захист максимального потенційного врожаю сільськогосподарської культури під час вирощування за наявності комах-шкідників. "Контроль" комах може означати або може не означати знищення комах, хоча переважно означає знищення комах. 00801 Під час використання в даному описі терміни "містить" або "що містить" указують на наявність викладених ознак, цілих чисел, стадій, операцій, елементів або компонентів, але не виключають наявність або додавання однієї або декількох інших ознак, цілих чисел, стадій, операцій, елементів, компонентів або їхніх груп.
І0081| Перехідна фраза "що складається переважно з" (та її граматичні варіанти), використовувана в даному документі, означає, що обсяг пункту формули винаходу слід інтерпретувати як такий, що охоплює вказані матеріали або стадії, перелічені в даному пункті формули винаходу, а також такі, які суттєво не змінюють основну та нову(с-ї) характеристику(-и) заявленого винаходу. Таким чином, термін "що складається переважно з" у разі використання у пункті формули даного винаходу не призначений для інтерпретації як еквівалент терміна "що містить".
І0082| У контексті даного винаходу "що відповідає" або "відповідає" означає, що, коли амінокислотні послідовності варіантних або гомологічних білків Сту вирівнюють одна з одною, амінокислоти, які "відповідають" певним переліченим положенням у варіантному або гомологічному білку, є такими, які вирівнюються з цими положеннями в еталонному білку, але не обов'язково знаходяться саме в цих числових положеннях відносно конкретної еталонної амінокислотної послідовності за даним винаходом. Наприклад, якщо ЗЕО ІЮ МО:31 є еталонною послідовністю та її вирівнюють із БЕО ІЮ МО:32, то Зегб29 5ЕО ІЮ МО:32 "відповідає" Зегб30
ЗЕО ІЮ МО:З1. 00831 Використовуваний у даному документі термін "білок Сту" означає інсектицидний білок типу кристалічного дельта-ендотоксину з ВасіШи5 ІПигіпдіепбвіз. Термін "білок Сту" може стосуватися протоксинової форми або будь-якого його інсектицидно активного фрагмента або токсину. (0084) "Доставляння" композиції або токсичного білка означає, що композиція або токсичний білок вступають у контакт із комахою, сприяючи пероральному поїданню композиції або бо токсичного білка, що приводить до токсичної дії та контролю комахи. Дану композицію або токсичний білок можна доставляти багатьма відомими способами, у тому числі без обмеження за допомогою експресії у трансгенній рослині, складеної(-их) білкової(-их) композиції(-ій), розпилювальної(-их) білкової(-их) композиції(-ій), матриці з приманкою або за допомогою будь- якої іншої відомої в даній галузі системи доставляння токсину. 00851 Термін "домен" стосується набору амінокислот, консервативних у певних положеннях за довжиною вирівнювання послідовностей еволюційно споріднених білків. Тоді як амінокислоти в інших положеннях гомологів можуть відрізнятися, амінокислоти, що є висококонсервативними в певних положеннях, указують на амінокислоти, які, ймовірно, є необхідними для структури, стабільності або функції білка. Ідентифіковані за їхнім високим ступенем консервативності у вирівняних послідовностях родини гомологів білків, вони можуть використовуватися як ідентифікатори для визначення того, чи належить будь-який поліпептид, що розглядається, до раніше ідентифікованої групи поліпептидів. (0086) "Ефективна для контролю комах кількість" означає ту концентрацію токсичного білка, яка забезпечує пригнічення шляхом токсичної дії здатності комах до виживання, росту, живлення або розмноження, або обмеження спричинених комахами пошкодження або загибелі культурної рослини, або захист максимального потенційного врожаю сільськогосподарської культури під час вирощування за наявності комах-шкідників. "Ефективна для контролю комах кількість" може означати або може не означати знищення комах, хоча переважно вона означає знищення комах.
І0087| Термін "касета експресії", використовуваний у даному документі, означає молекулу нуклеїнової кислоти, здатну керувати експресією щонайменше одного полінуклеотиду, який становить інтерес, такого як полінуклеотид, що кодує білок Сту за даним винаходом, у відповідній клітині-хазяїні, що містить промотор, функціонально пов'язаний із полінуклеотидом, який становить інтерес, що функціонально пов'язаний із сигналом термінації. Як правило, "касета експресії" також містить додаткові полінуклеотиди, необхідні для належної трансляції полінуклеотиду, що становить інтерес. Касета експресії також може містити інші полінуклеотиди, які не потрібні для керування експресією полінуклеотиду, що становить інтерес, але які наявні через відповідні сайти рестрикції для вилучення касети з вектора експресії.
Касета експресії, що містить полінуклеотид(-и), який(-ї) становить(-лять) інтерес, може бути
Зо химерною, що означає те, що щонайменше один із її компонентів є гетерологічним щодо щонайменше одного з її інших компонентів. Касета експресії може також являти собою послідовність, яка зустрічається в природі, але була одержана в рекомбінантній формі, придатній для гетерологічної експресії. Однак, як правило, касета експресії є гетерологічною щодо хазяїна, тобто полінуклеотид, що становить інтерес, у касеті експресії не зустрічається в природі в клітині-хазяїні, і його необхідно було ввести в клітину-хазяїна або предка клітини- хазяїна за допомогою процесу трансформації або процесу схрещування. Експресія полінуклеотиду(-ів), що становить(-лять) інтерес, у касеті експресії зазвичай знаходиться під контролем промотора. У разі багатоклітинного організму, такого як рослина, промотор може також бути специфічним або переважним щодо конкретної тканини або органа або стадії розвитку. Після трансформації в рослину касета експресії або її фрагмент також можуть називатися "вставленим полінуклеотидом" або "полінуклеотидом вставки". (0088) "Ген" визначається в даному документі як одиниця спадковості, що містить один або декілька полінуклеотидів, яка займає певне місце розташування на хромосомі або плазміді та яка містить генетичну інструкцію для певної характеристики або ознаки, властивих організму.
І0089| "Протеаза травного каналу" являє собою протеазу, яка зустрічається в травному тракті комахи в природі. Як правило, дана протеаза бере участь у перетравлюванні поглинених білків. Приклади протеаз травного каналу включають трипсин, який, як правило, розщеплює пептиди з С-кінцевої частини залишків лізину (К) або аргініну (К), і хімотрипсин, який, як правило, розщеплює пептиди з С-кінцевої частини фенілаланіну (Р), триптофану (МУ) або тирозину (У).
І0090| Термін "гетерологічний" у разі використання щодо гена, або полінуклеотиду, або поліпептиду стосується гена, або полінуклеотиду, або поліпептиду, або їхньої частини, який не знаходиться в його природному оточенні (тобто який був змінений шляхом втручання людини).
Наприклад, гетерологічний ген може передбачати полінуклеотид організму одного виду, введений в організм іншого виду. Гетерологічний ген також може передбачати полінуклеотид, нативний щодо організму, але який був змінений певним чином (наприклад, підданий мутації, доданий у вигляді множини копій, зв'язаний із ненативним промоторним або енхансерним полінуклеотидом тощо). Гетерологічні гени додатково можуть передбачати полінуклеотиди генів рослини, які містять СОМА-форми гена рослини; СОМА можуть експресуватися або в сенсовій (з бо одержанням тпЕМА), або антисенсовій орієнтації (з одержанням антисенсового РНК-
транскрипту, комплементарного тЕМА-транскрипту). В одному аспекті даного винаходу гетерологічні гени відрізняються від ендогенних генів рослини тим, що полінуклеотид гетерологічного гена, приєднаний, як правило, до полінуклеотидів, які містять регуляторні елементи, такі як промотори, що не зустрічаються в природі як асоційовані з геном білка, який кодується гетерологічним геном, або з полінуклеотидом гена рослини в хромосомі, або асоційовані з частинами хромосоми, в яких вони не зустрічаються в природі (наприклад, гени експресуються в локусах, у яких вказаний ген у звичайних умовах не експресується). Крім того, "гетерологічний" полінуклеотид стосується полінуклеотиду, що у природі не асоційований із клітиною-хазяїном, в яку його вводять, у тому числі множинних копій, що не зустрічаються в природі, полінуклеотиду, який зустрічається в природі. 0091) "Гомологічна рекомбінація" являє собою обмін ("кросинговер") фрагментами ДНК між двома молекулами ДНК або хроматидами пар хромосом у ділянці ідентичних полінуклеотидів.
Буде зрозуміло, що "подія рекомбінації" в даному документі означає мейотичний кросинговер.
І0092| Послідовність нуклеїнової кислоти є "ІігзокКодонною" щодо еталонної послідовності нуклеїнової кислоти в тому випадку, коли послідовність нуклеїнової кислоти кодує поліпептид, який має таку ж амінокислотну послідовність, що й поліпептид, який кодується еталонною послідовністю нуклеїнової кислоти. Наприклад, 5ЕО ІЮ МО:11 є ізокодонною щодо 5ЕО ІЮ МО: 1, оскільки вони обидві кодують амінокислотну послідовність, представлену в 5ЕО ІЮ МО:31.
І0093| Термін "виділена" молекула нуклеїнової кислоти, полінуклеотид або білок являє собою молекулу нуклеїнової кислоти, полінуклеотид або білок, які більше не знаходяться у своєму природному середовищі. Виділена молекула нуклеїнової кислоти, полінуклеотид або білок за даним винаходом можуть знаходитися в очищеній формі або можуть знаходитися в рекомбінантному хазяїні, такому як трансгенна бактерія або трансгенна рослина. (0094) "Молекула нуклеїнової кислоти" являє собою одно- або двониткову ДНК або РНК, які можуть бути виділені з будь-якого джерела. У контексті даного винаходу молекула нуклеїнової кислоти переважно є сегментом ДНК.
І0095| "Функціонально пов'язаний" стосується асоціації полінуклеотидів на одному фрагменті нуклеїнової кислоти, унаслідок чого функція одного впливає на функцію іншого.
Наприклад, промотор є функціонально пов'язаним із кодувальним полінуклеотидом або
Зо функціональною РНК, коли він може впливати на експресію такого кодувального полінуклеотиду або функціональної РНК (тобто такий кодувальний полінуклеотид або функціональна РНК знаходяться під контролем промотора на рівні транскрипції). Кодувальний полінуклеотид у сенсовій або антисенсовій орієнтації може бути функціонально пов'язаним із регуляторними полінуклеотидами.
І0096| Вирази "пестицидний", "інсектицидний" тощо, використовувані в даному документі, стосуються здатності білка Стгу за даним винаходом забезпечувати контроль шкідливого організму або кількості білка Сгу, що може забезпечувати контроль шкідливого організму, як визначено в даному документі. Таким чином, пестицидний білок Сту може пригнічувати здатність шкідливого організму (наприклад, комахи-шкідника) до виживання, росту, живлення або розмноження або знищувати Її.
І0097| "Рослина" являє собою будь-яку рослину на будь-якій стадії розвитку, зокрема насіннєву рослину. 0098) "Рослинна клітина" являє собою структурну та фізіологічну одиницю рослини, що містить протопласт і клітинну стінку. Рослинна клітина може знаходитися у формі виділеної одиночної клітини, або культивованої клітини, або як частина більш високоорганізованої одиниці, такої як, наприклад, рослинна тканина, орган рослини або ціла рослина. (0099) "Культура рослинних клітин" означає культури структурних одиниць рослини, такі як, наприклад, протопласти, клітини в культурі клітин, клітини рослинних тканин, пилок, пилкові трубки, насінні зачатки, зародкові мішки, зиготи та зародки на різних стадіях розвитку.
І00100| "Рослинний матеріал" стосується листя, стебел, коренів, квітів або частин квітів, плодів, пилку, яйцеклітин, зигот, насіння, живців, клітинних або тканинних культур або будь-яких інших частин, або продуктів рослини.
Ї00101| "Орган рослини" являє собою окрему та візуально структуровану та диференційовану частину рослини, таку як корінь, стебло, листок, квіткова брунька або зародок.
І00102| Вираз "рослинна тканина", використовуваний у даному документі, означає групу рослинних клітин, організованих у структурну та функціональну одиницю. Передбачається будь- яка тканина рослини іп ріапіа або в культурі. Даний термін включає без обмеження цілі рослини, органи рослин, насіння рослин, тканинну культуру та будь-які групи рослинних клітин, організовані у структурні або функціональні одиниці. Використання даного терміна разом із 60 будь-яким специфічним типом рослинної тканини, наведеним вище або іншим чином охопленим даним визначенням, або без нього не призначене для виключення будь-якого іншого типу рослинної тканини. 00103) "Полінуклеотид" стосується полімеру, що складається з великого числа мономерів- нуклеотидів, ковалентно зв'язаних у ланцюг. Такі "полінуклеотиди" включають ДНК, РНК, модифіковані олігонуклеотиди (наприклад, олігонуклеотиди, що містять основи, які не є типовими для біологічної РНК або ДНК, такі як 2'-О-метильовані олігонуклеотиди) тощо. У деяких варіантах здійснення нуклеїнова кислота або полінуклеотид можуть бути однонитковими, двонитковими, багатонитковими або являти собою комбінацію перерахованого.
Якщо не вказано інше, то конкретна нуклеїнова кислота або полінуклеотид за даним винаходом необов'язково містять або кодують комплементарні полінуклеотиди додатково до будь-якого явно вказаного полінуклеотиду. (00104) "Полінуклеотид, що становить інтерес" стосується будь-якого полінуклеотиду, який у разі перенесення в організм, наприклад рослину, надає організму необхідну характеристику, таку як стійкість до комах, стійкість до хвороб, толерантність до гербіцидів, стійкість до антибіотиків, покращена харчова цінність, покращені показники у виробничому процесі, продукування комерційно цінних ферментів або метаболітів або змінена репродуктивна здатність. (00105) Термін "промотор" стосується полінуклеотиду, який зазвичай розташовується вище (5) від полінуклеотиду, що кодує його, який здійснює контроль експресії кодувального полінуклеотиду, забезпечуючи впізнавання РНК-полімеразою та іншими факторами, необхідними для правильної транскрипції. 00106) "Протопласт" є виділеною рослинною клітиною, що не має клітинної стінки або має лише часткову клітинну стінку.
І00107| Термін "рекомбінантний", використовуваний у даному документі, стосується форми нуклеїнової кислоти (наприклад, ДНК або РНК) або білка або організму, яка зазвичай не буде зустрічатися в природі та є такою, що створена шляхом втручання людини. Вираз "молекула рекомбінантної нуклеїнової кислоти", використовуваний у даному документі, являє собою молекулу нуклеїнової кислоти, що містить комбінацію полінуклеотидів, які в природі не зустрічаються разом і є результатом втручання людини, наприклад молекулу нуклеїнової кислоти, що складається з комбінації щонайменше двох полінуклеотидів, гетерологічних один одному, або молекулу нуклеїнової кислоти, яка була штучно синтезована та містить полінуклеотид, що відрізняється від полінуклеотиду, який буде в нормі існувати в природі, або молекулу нуклеїнової кислоти, що містить трансген, штучно введений у геномну ДНК клітини- хазяїна, й асоційовану фланкуючу ДНК геному клітини-хазяїна. Прикладом молекули рекомбінантної нуклеїнової кислоти є молекула ДНК, одержана в результаті вставки трансгена в геномну ДНК рослини, що зрештою може приводити до експресії молекули рекомбінантної РНК або білка в даному організмі. Вираз "рекомбінантна рослина", використовуваний у даному документі, являє собою рослину, яка зазвичай не буде існувати в природі, і вона є результатом втручання людини та містить трансген або гетерологічну молекулу нуклеїнової кислоти, введену в її геном. У результаті такої зміни геному рекомбінантна рослина явно відрізняється від спорідненої рослини дикого типу. (00108) "Регуляторні елементи" стосуються послідовностей, залучених у контроль експресії нуклеотидної послідовності. Регуляторні елементи передбачають промотор, функціонально пов'язаний із нуклеотидною послідовністю, що становить інтерес, і сигнали термінації. Як правило, вони охоплюють також послідовності, необхідні для належної трансляції нуклеотидної послідовності. 001091 Термін "ідентичність", або "ідентичний", або "значною мірою ідентичний" у контексті двох послідовностей нуклеїнових кислот або амінокислотних послідовностей стосується двох або більше послідовностей або підпослідовностей, які характеризуються щонайменше 6095, переважно щонайменше 8095, білош переважно 9095, ще більш переважно 9595 і найбільш переважно щонайменше 9995 ідентичністю нуклеотидних або амінокислотних залишків під час порівняння та вирівнювання для максимальної відповідності, як визначено із застосуванням одного з наступних алгоритмів порівняння послідовностей або шляхом візуальної перевірки.
Переважно значний ступінь ідентичності наявний у межах ділянки послідовностей, яка складається із щонайменше приблизно 50 залишків або основ у довжину, більш переважно у межах ділянки, що складається із щонайменше приблизно 100 залишків або основ, і найбільш переважно послідовностей, значною мірою ідентичних у межах щонайменше приблизно 150 залишків або основ. В особливо переважному варіанті здійснення послідовності є значною мірою ідентичними по всій довжині кодувальних ділянок. Крім того, значною мірою ідентичні послідовності нуклеїнової кислоти або амінокислотні послідовності виконують практично однакову функцію. 00110) Для порівняння послідовностей зазвичай одна послідовність виступає як еталонна послідовність, з якою порівнюють тестовані послідовності. Під час використання алгоритму порівняння послідовностей тестовану та еталонну послідовності вводять у комп'ютер, за необхідності задають координати підпослідовності та задають програмні параметри алгоритму порівняння послідовностей. Потім за допомогою алгоритму порівняння послідовностей на основі заданих програмних параметрів обчислюють відсоткову ідентичність послідовностей для тестованої(-их) послідовності(-ей) відносно еталонної послідовності.
Ї00111| Оптимальне вирівнювання послідовностей для порівняння можна проводити, наприклад, за допомогою алгоритму пошуку локальної гомології згідно зі зтйй 5 Умаїтептап, Аду.
Аррі. Май. 2: 482 (1981), за допомогою алгоритму гомологічного вирівнювання згідно з
МееаІетап 8. УМип5си, у. Мої. Віої. 48: 443 (1970), за допомогою способу пошуку схожості згідно з
Реагзоп а Гіртап, Ргос. Маг. Асай 5сі. ОБА 85: 2444 (1988), за допомогою реалізації даних алгоритмів у комп'ютерних програмах (САР, ВЕ5ТРЇТ, РА5ТА і ТЕА5ТА у пакеті програмного забезпечення М/ізсопвіп сСепеїіс5, Сзепеїіс5 Сотршиїег сгоимр, 575 Зсієпсе Ог., Медісон, Вісконсин) або шляхом візуальної перевірки (загалом див. А!МзиБбеї еї аїЇ. нижче). 00112) Одним із прикладів алгоритму, придатного для визначення відсоткової ідентичності послідовностей і схожості послідовностей, є алгоритм ВІ А5Т, описаний в Аїйї5БспиЇ еї аї.,.). Мо).
Віої. 215: 403-410 (1990). Програмне забезпечення для здійснення аналізів ВІА5Т є загальнодоступним у Національному центрі біотехнологічної інформації (Майопа! Сепіег г
Віоїесппоїоду Іптоптайоп, 0.5. Майопа!І ІГіргагу ої Медісіпе, 8600 КосКмійе РіКе, Бетесда,
Меріленд 20894, США). Даний алгоритм передбачає спочатку ідентифікацію пар послідовностей із найбільшою схожістю (НОР) шляхом ідентифікації коротких "слів" довжиною МУ у запитуваній послідовності, які або збігаються, або відповідають деякому позитивному граничному показнику
Т під час вирівнювання зі "словом" такої самої довжини в послідовності з бази даних. Т називається граничним показником сусіднього "слова" (Акбспиі еї аї., 1990). Ці первинні збіги сусідніх "слів" виступають як затравка для запуску пошуків для виявлення Н5Р більшої довжини, які їх містять. Збіги "слів" потім продовжуються в обох напрямках уздовж кожної
Зо послідовності настільки, наскільки може бути збільшений сукупний показник вирівнювання.
Сукупні показники розраховують із використанням у випадку нуклеотидних послідовностей параметрів М (бал-нагорода, який нараховується за пару залишків, що збігаються; завжди 20) і
М (штрафний бал, який нараховується за залишки, що не збігаються; завжди «0). У випадку амінокислотних послідовностей для розрахунку сукупного показника використовують матрицю замін. Продовження збігів "слів" у кожному напрямку припиняється, у разі якщо сукупний показник вирівнювання знижується на величину Х від його максимального досягнутого значення, при цьому сукупний показник падає до нуля або нижче внаслідок накопичення одного або декількох вирівнювань залишків із від'ємними показниками або у разі досягнення кінця однієї з послідовностей. Параметри алгоритму ВІА5БТ УУ, Т ї Х визначають чутливість і швидкість вирівнювання. Програма ВІА5ТМ (для нуклеотидних послідовностей) використовує за замовчуванням довжину "слова" (М/), що становить 11, очікуване значення (Е), що становить 10, граничне значення, що становить 100, М-5, М- -4, а також порівняння обох ниток. Для амінокислотних послідовностей програма ВГАБТР використовує за замовчуванням довжину "слова" (МУ), що становить 3, очікуване значення (Е), що становить 10, а також матрицю замін
ВГОБИМВбАІ2 (див. Непікоїї 8. Непікоїї, Ргос Маї! Асай. 5сі ОБА 89: 10915 (1989)). 00113) Додатково до розрахунків відсоткової ідентичності послідовності алгоритм ВГАЗТ також виконує статистичний аналіз подібності між двома послідовностями (див., наприклад,
Капіп 5 Айвспиі, Ргтос. Маї!. Асай. сі. ОБА 90: 5873-5787 (1993)). Однією мірою схожості, наданою алгоритмом ВГ А5Т, є найменша сумарна ймовірність (Р(М)), яка передбачає показник імовірності, згідно з яким збіги між двома нуклеотидними або амінокислотними послідовностями будуть спостерігатися випадковим чином. Наприклад, тестована послідовність нуклеїнової кислоти вважається подібною до еталонної послідовності, якщо найменша сумарна ймовірність у разі порівняння тестованої послідовності нуклеїнової кислоти з еталонною послідовністю нуклеїнової кислоти становить менш ніж приблизно 0,1, більш переважно менш ніж приблизно 0,01 і найбільш переважно менш ніж приблизно 0,001. 00114) Іншим показником того, що дві послідовності нуклеїнових кислот значною мірою ідентичні, є те, що дві молекули гібридизуються одна з одною в жорстких умовах. Фраза "гібридизується специфічно з" стосується зв'язування, утворення дуплекса або гібридизації молекули тільки з певною нуклеотидною послідовністю в жорстких умовах, коли така 60 послідовність наявна в складній суміші (наприклад, загальних клітинних) ДНК або РНК.
"Значною мірою /зв'язується(зв'язуються)" стосується гібридизації комплементарних послідовностей нуклеїнової кислоти-зонда та цільової нуклеїнової кислоти і також охоплює незначні незбіги, які можуть компенсуватися за рахунок зниження жорсткості середовища для гібридизації, щоб досягти необхідного виявлення цільової послідовності нуклеїнової кислоти. 00115) "Жорсткі умови гібридизації" та "жорсткі умови відмивання під час гібридизації" у контексті експериментів із гібридизації нуклеїнових кислот, таких як Саузерн- і нозерн- гібридизація, залежать від послідовності та відрізняються за різних параметрів навколишнього середовища. Довші послідовності специфічно гібридизуються за вищих температур. Докладний посібник із гібридизації нуклеїнових кислот входить у склад Тії55еп (1993) І арогаїогу Тесппіднев іп Віоспетівігу апа Моїіесшіаг Віоіоду-Нургіаігайоп м/йй Мисівіс Асій Ргобрез рай ! сНарієї 2 "Омегмієм ої рііпсірієз ої пубгідігайноп апа Ше вігаіеду ої писієїс асіа ргобе аззауз" ЕІбемівг, Мем/
Уогк. Як правило, умови гібридизації та відмивання високої жорсткості вибирають так, щоб температура була приблизно на 5 "С нижчою від точки плавлення (Тт) для конкретної послідовності за визначеної іонної сили та рН. Як правило, у "жорстких умовах" зонд буде гібридизуватися зі своєю цільовою підпослідовністю, а не з іншими послідовностями. 00116) Значення Тл являє собою температуру (за визначеної іонної сили та рН), за якої 50
Фо цільової послідовності гібридизується із зондом, що абсолютно збігається. Для дуже жорстких умов вибирають температуру, що дорівнює Тт для конкретного зонда. Прикладом жорстких умов гібридизації для гібридизації комплементарних нуклеїнових кислот, які мають більш ніж 100 комплементарних залишків на фільтрі під час Саузерн- або нозерн-блотингу, є 5095 формаміду з 1 мг гепарину за 42 "С, при цьому гібридизацію проводять протягом ночі.
Прикладом умов відмивання високої жорсткості є 0,15 М Масі за 72 "С протягом приблизно 15 хвилин. Прикладом жорстких умов відмивання є відмивання за допомогою 0,2 х 55С за 6570 протягом 15 хвилин (опис буфера 55С див. у бБатьбгоокК нижче). Для видалення фонового сигналу зонда найчастіше відмиванню в умовах високої жорсткості передує відмивання в умовах низької жорсткості. Прикладом умов відмивання середньої жорсткості для дуплекса, що має, наприклад, більш ніж 100 нуклеотидів, є їх 5552 за 45 "С протягом 15 хвилин. Прикладом умов відмивання низької жорсткості для дуплекса, що має, наприклад, більш ніж 100 нуклеотидів, є 4-6х 550 за 40 "С протягом 15 хвилин. Для коротких зондів (наприклад, довжиною від приблизно 10 до 50 нуклеотидів) жорсткі умови, як правило, передбачають концентрації солей, що становлять менш ніж приблизно 1,0 М іонів Ма, як правило, концентрації, які становлять приблизно 0,01-1,0 М іонів Ма (або інших солей) за рН 7,0-8,3, а також температуру, що, як правило, становить щонайменше приблизно 30 "С. Жорстких умов також можна досягати шляхом додавання дестабілізуючих засобів, таких як формамід. Загалом співвідношення сигнал-шум, яке в 2х (або більше) рази перевищує спостережуване для неспорідненого зонда в конкретному гібридизаційному аналізі, вказує на виявлення специфічної гібридизації. Нуклеїнові кислоти, які не гібридизуються одна з одною в жорстких умовах, усе ще є значною мірою ідентичними, якщо білки, які вони кодують, є значною мірою ідентичними. Це відбувається, наприклад, коли копію нуклеїнової кислоти створюють із застосуванням максимальної виродженості кодону, що допускається генетичним кодом.
І00117| Приклади комплексів умов гібридизації/відмивання, які можна використовувати для клонування гомологічних нуклеотидних послідовностей, що значною мірою ідентичні еталонним нуклеотидним послідовностям за даним винаходом, є наступними: еталонна нуклеотидна послідовність переважно гібридизується з еталонною нуклеотидною послідовністю в 7 90 додецилсульфаті натрію (505), 0,5 М МаРо4, 1 мм ЕОТА за 50 "С із відмиванням у 2 х 55С,0,1
Фо 505 за 50 "С, бажаніше в 7 95 додецилсульфаті натрію (505), 0,5 М МаРо4, 1 мм ЕОТА за
С із відмиванням у 1 х 5550, 0,1 95 505 за 50 "С, більш бажано в 7 95 додецилсульфаті натрію (505), 0,5 М МаРО4, 1 мМ ЕОТА за 50 "С із відмиванням у 0,5 х 550, 0,1 95 505 за 50 "С, переважно в 7 96 додецилсульфаті натрію (505), 0,5 М МаРО4, 1 мМ ЕОТА за 50 С із 50 відмиванням у 0,1 х 55С, 0,1 95 505 за 50 "С, більш переважно в 7 95 додецилсульфаті натрію (505), 0,5 М МаРО4, 1 мМ ЕОТА за 50 "С із відмиванням у 0,1 х З55С, 0,1 95 505 за 65 С. 00118) Ще одним показником того, що дві послідовності нуклеїнових кислот або білки є значною мірою ідентичними, є те, що білок, який кодується першою нуклеїновою кислотою, характеризується імунологічною перехресною реактивністю з білком, що кодується другою нуклеїновою кислотою, або специфічно зв'язується з ним. Отже, білок зазвичай значною мірою ідентичний другому білку, наприклад, якщо два білки відрізняються лише консервативними замінами.
ІЇ00119| "Синтетичний" стосується нуклеотидної послідовності, що містить основи або структурні ознаки, які відсутні в природній послідовності. Наприклад, синтетичною вважається штучна послідовність, що кодує білок Стгу за даним винаходом, яка за вмістом ос і нормальним розподілом кодонів більше схожа на гени дводольних або однодольних рослин.
І00120| Використовуваний у даному документі білок Сгу, який є "токсичним" для комахи- шкідника, означає, що білок Сту функціонує як активний під час перорального поглинання засіб для контролю комах для знищення комах-шкідників або білок Сгу здатний порушувати або обмежувати харчування комах або викликати пригнічення росту комахи-шкідника, причому кожний із них може викликати загибель комахи або може не викликати. Коли білок Сту за даним винаходом доставляється в організм комахи або комаха контактує з білком Сгу у разі перорального поглинання, як правило, результатом є загибель комахи, або ріст комахи уповільнюється, або комаха припиняє харчуватися джерелом, яке робить токсичний білок Сту доступним для комахи. (001211) "Трансформація" являє собою процес введення гетерологічної нуклеїнової кислоти в клітину- або організм-хазяїна. Зокрема, "трансформація" означає стабільну інтеграцію молекули
ДНК у геном організму, що становить інтерес.
І00122| "Трансформований/гтрансгенний/рекомбінантний" стосується організму-хазяїна, такого як бактерії або рослини, в який була введена гетерологічна молекула нуклеїнової кислоти. Молекулу нуклеїнової кислоти можна стабільно інтегрувати в геном хазяїна, або ж молекула нуклеїнової кислоти також може бути наявною як позахромосомна молекула. Така позахромосомна молекула може бути такою, що автореплікується. Передбачається, що трансформовані клітини, тканини або рослини охоплюють не тільки кінцевий продукт процесу трансформації, але також і його трансгенне потомство. "Нетрансформований", "нетрансгенний" або "нерекомбінантний" хазяїн стосується організму дикого типу, наприклад бактерії або рослини, які не містять гетерологічну молекулу нуклеїнової кислоти. 00123) Нуклеотиди позначені за їхніми основами за допомогою наступних стандартних скорочень: аденін (А), цитозин (С), тимін (Т) і гуанін (б). Аналогічно амінокислоти описані в даному документі за допомогою наступних стандартних скорочень: аланін (Аїа, А), аргінін «Агу,
ЮК), аспарагін (Азп, М), аспарагінова кислота (Ар, 0), цистеїн (Су; С), глутамін (Сіп, 0), глутамінова кислота (Сіи; Е), гліцин (Су; б), гістидин (Ні, Н), ізолейцин (Пе; 1), лейцин (Гени, У), лізин (Гув; К ), метіонін (Меї; М), фенілаланін (Ре; Е), пролін (Рго; Р), серин (5ег; 5), треонін
Зо (Тиг; Т), триптофан (Тгр; УМ), тирозин (Туг; У) і валін (маї; М).
ІЇ00124| У даному винаході передбачені композиції і способи контролю небезпечних шкідників рослин. Зокрема, даний винахід стосується білків Сгу, які можуть бути виділені з бактерій, таких як Васійи5 (пПигіпдіепві5, які токсичні для комах-шкідників, і полінуклеотидів, що містять нуклеотидні послідовності, що кодують білки Сгу, а також одержання та застосування полінуклеотидів і білків Стгу для контролю комах-шкідників. 00125) Згідно з деякими варіантами здійснення в даному винаході передбачені молекула нуклеїнової кислоти або необов'язково молекула виділеної нуклеїнової кислоти, що містять нуклеотидну послідовність, яка кодує білок Сгу в його протоксиновій формі або його біологічно активний фрагмент або токсиновий фрагмент, де нуклеотидна послідовність (а) характеризується від щонайменше 80 906 до щонайменше 99 905 ідентичністю послідовності з будь-якою із БЕО ІЮ МО:1-10 або їхнім фрагментом, що кодує токсин; або (р) кодує білок, що містить амінокислотну послідовність, яка характеризується від щонайменше 8 095 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності з будь-якою із 5ЗЕО ІЮО МО:31-40 або їхнім токсиновим фрагментом; або (с) являє собою синтетичну послідовність (а) або (Б), яка має кодони, оптимізовані для експресії в трансгенному організмі. В інших варіантах здійснення нуклеотидна послідовність містить будь-яку із ЗЕО ІЮ МО:1-10 або будь-які фрагменти, що кодують токсин, під будь-якою із 5ЕО ІЮ МО:1-10. В інших варіантах здійснення синтетична нуклеотидна послідовність містить будь-яку із БЕО ІЮ МО:11-30 або будь-які фрагменти, що кодують токсин, під будь-якою із зЗЕО ІЮ МО:11-30. 00126) Полінуклеотиди, які є фрагментами полінуклеотидів, що кодують протоксини білків
Стгу, також охоплюються даним винаходом. Під "фрагментом" мається на увазі частина нуклеотидної послідовності, що кодує білок Сгу. Фрагмент нуклеотидної послідовності може кодувати біологічно активну частину білка Стгу, так званий "токсиновий фрагмент", або можуть являти собою фрагмент, який можна використовувати як гібридизаційний зонд або праймер для
ПЛР, із використанням розкритих нижче способів. Молекули нуклеїнової кислоти, які є фрагментами нуклеотидної послідовності, що кодує білок Сгу, містять щонайменше приблизно 15, 20, 50, 75, 100, 200, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1050, 1100, 1150, 1200, 1250, 1300, 1350, 1400, 1450 суміжних нуклеотидів або аж до кількості нуклеотидів, наявних у повнорозмірному білку Стгу, що кодується нуклеотидною послідовністю, 60 розкритою в даному документі (наприклад, 3546 нуклеотидів для 5ЕО ІЮ МО:1), залежно від планованого використання. Під "суміжними" нуклеотидами маються на увазі залишки нуклеотидів, які безпосередньо прилягають один до одного. Ряд фрагментів нуклеотидної послідовності за даним винаходом буде кодувати токсинові фрагменти, які зберігають біологічну активність білка Сгу і, таким чином, зберігають інсектицидну активність. Під "зберігає інсектицидну активність" мається на увазі, що фрагмент буде характеризуватися щонайменше приблизно 30 95, переважно щонайменше приблизно 5095, більш переважно щонайменше приблизно 70 95, ще більш переважно щонайменше приблизно 80 95 інсектицидною активністю білка Сгу. Способи вимірювання інсектицидної активності добре відомі з рівня техніки. Дивись, наприклад, Сларіа і Гапд (1990) 93. Єсоп. Епіотої. 83:2480-2485; Апагемув єї а). (1988) Віоспет. у. 252:199-206; Магтопе еї аї. (1985) 9. ої Есопотіс Епіотоїоду 78:290-293; і патент США Мо 5743477, усі з яких включені в даний документ за допомогою посилання у їхньому повному обсязі.
І00127| Токсиновий фрагмент білка Сту за даним винаходом буде кодувати щонайменше приблизно 15, 25, 30, 50, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 350, 400 і 450 суміжних амінокислот або аж до загальної кількості амінокислот, наявних у повнорозмірному білку Сгу за даним винаходом (наприклад, 1181 амінокислоту для 5ЕО ІЮО МО:31). 00128) У деяких варіантах здійснення молекула нуклеїнової кислоти за даним винаходом містить, складається головним чином або складається з нуклеотидної послідовності, що кодує білок Сгу, який містить амінокислотну послідовність, яка характеризується від щонайменше 80 до до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності з будь-якою із БЕО ІЮ МО:31-40 або їхнім токсиновим фрагментом. У деяких інших варіантах здійснення амінокислотна послідовність містить, складається головним чином або складається з будь-якої із БЕО ІЮ МО:31-40 або їхнього токсинового фрагмента. Таким чином, у деяких варіантах здійснення білки Сгу, які були активовані шляхом протеолітичного процесингу, наприклад, за допомогою протеаз, одержаних із травного каналу комахи, можуть бути охарактеризовані, та ідентифіковані М-кінцеві або С- кінцеві амінокислоти активованого токсинового фрагмента. У даному аспекті даного винаходу фахівець у даній галузі зможе визначити, що, наприклад, токсиновий фрагмент із БЕО ІЮ МО:31, або 5ЕО ІО МО:32, або 5ЕО ІЮ МО:33, ймовірно, містить амінокислоти від приблизно 29 до приблизно 603, або від приблизно 29 до приблизно 624, або від приблизно 29 до приблизно 635
Ко) із «БО ІЮ МО:31, або 5ЕО ІО МО:32, або 5ЕО ІЮ МО:33, або токсиновий фрагмент із ЗЕО ІЮ
МО:34, ймовірно, містить амінокислоти від приблизно амінокислоти 21 до приблизно 606, або від приблизно 21 до приблизно 645, або від приблизно 21 до приблизно 648 із БЕО ІЮ МО:34 тощо. Також в обсязі даного винаходу знаходяться варіанти білка Сту, одержані шляхом уведення або видалення сайтів для процесування протеазами у відповідних положеннях у кодувальній послідовності для забезпечення або усунення протеолітичного розщеплення варіантів білка більшого розміру протеазами комахи, рослини або мікроорганізму. Під кінцевим результатом такої маніпуляції слід розуміти утворення молекул токсинового фрагмента з такою ж або кращою активністю, як й інтактний білок-протоксин Сгу. 00129) У деяких варіантах здійснення за даним винаходом передбачений химерний ген, який містить гетерологічний промотор, функціонально пов'язаний із полінуклеотидом, що містить, складається головним чином або складається з нуклеотидної послідовності, яка кодує білок Сгу, токсичний для лускокрилого шкідника, де нуклеотидна послідовність (а) характеризується від щонайменше 8095 (наприклад, 80 95, 81 95, 82 905, 83 Фо, 84 95, 85 Уо, 86 95, 87 95, 88 9в, 89 95, 90 У, 91 У, 92 У, 93 У, 94 95, 95 У, 96 95, 97 У, 98 95, 99 95, 99,1 95, 99,2 об, 99,3 95, 99,4 95, 99,5 95, 99,6 95, 99,7 95, 99,8 95, 99,9 95) до щонайменше 99 95 (99 95, 99,1 95, 99,2
Фо, 99,3 У, 99,4 95, 99,5 9, 99,6 95, 99,7 Зо, 99,8 95, 99,9 95) ідентичністю послідовності з будь- якою із ЗЕО ІЮ МО:1-10 або їхнім фрагментом, що кодує токсин; або (р) кодує білок, який містить амінокислотну послідовність, що характеризується від щонайменше 80 95 (наприклад, 80 Фо, 81 95, 82 9, 83 Ус, 84 Фо, 85 95, 86 9Уо, 87 95, 88 У, 89 Ус, 90 У, 91 Ус, 92 У, 93 Ус, 94 95, 95 9, 96 95, 97 Фо, 98 95, 99 У, 99,1 У, 99,2 У, 99,3 9, 99,4 95, 99,5 95, 99,6 95, 99,7 У, 99,8 в, 99,9 Фо) до щонайменше 99 95 (99 95, 99,1 95, 99,2 95, 99,3 95, 99,4 95, 99,5 95, 99,6 95, 99,7 95, 99,8 95, 99,9
Фо) ідентичністю послідовності з будь-якою із 5ЕО ІО МО:31-40 або їхнім токсиновим фрагментом; або (с) являє собою синтетичну послідовність (а) або (Б), яка має кодони, оптимізовані для експресії в трансгенному організмі. 00130) В інших варіантах здійснення гетерологічний промотор являє собою промотор, що забезпечує експресію в рослині. Наприклад, без обмеження промотор, що забезпечує експресію в рослині, може бути вибраний із групи промоторів, що складається з промотора убіквітину, вірусу жовтої кучерявості листя цеструму, ТгтрА кукурудзи, О5МАО5 6, гістону НЗ маїсу, 5'-ОТА гена 9 бактеріофага Т3, сахарозосинтетази 1 кукурудзи, алкогольдегідрогенази 1 кукурудзи, бо світлозбирального комплексу кукурудзи, білка теплового шоку кукурудзи, ті! маїсу, малої субодиниці КиВР карбоксилази гороху, актину рису, циклофіліну рису, манопінсинтази Ті- плазміди, нопалінсинтази Ті-плазміди, халкон-ізомерази петунії, багатого на гліцин білка 1 бобів, пататину картоплі, лектину, 355 Самм і малої субодиниці 5-Е9 КиВР карбоксилази.
Ї00131| У додаткових варіантах здійснення білок, що кодується химерним геном, є токсичним для одного або декількох лускокрилих шкідників, вибраних із групи, що складається з кукурудзяного метелика (О5ігіпіа пибіїаій5), совки-іпсилон (Адгоїї5 ірзіоп), совки трав'яної (Зродоріега І гидірегаа), американської кукурудзяної совки (Неїїсомегра 7еа), вогнівки цукрової тростини (Оіаїгаєа засспагаїї5), гусені совки оксамитових бобів (Апіїсагзіа деттаїаїїв5), соєвої совки (Спгузоадеїхіз іпсішде5), вогнівки кукурудзяної південно-західної (Оіаїгаєа дгапаїіозеїІа), західної бобової совки (Кіспіа аїрісобіа), тютюнової совки (Неїйоїпіх мігезсеп5), східного кукурудзяного метелика (О5ггіпіа Тигпасаїї5), бавовникової совки (Неїїсомегра агтідега), вогнівки жовтої рисової (Спо 5ирргеззаїї5), рожевої стеблової совки (Зезатіа саїЇатівіїє) та вогнівки рисової (Спарпа|посгосів теаіїпаїїв). 00132) У додаткових варіантах здійснення полінуклеотид містить, складається головним чином або складається з нуклеотидної послідовності, яка характеризується від щонайменше 80
Фо до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності із «ФЕО ІЮ МО:1 або її фрагментом, що кодує токсин, або характеризується від щонайменше 80 96 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності із ЗЕО ІЮ МО:2 або її фрагментом, що кодує токсин, або характеризується від щонайменше 80 956 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності із 5ЕО ІЮ МО:З або її фрагментом, що кодує токсин, або характеризується від щонайменше 80 95 до щонайменше 99
Фо ідентичністю послідовності із ЗЕО І МО:4 або її фрагментом, що кодує токсин, або характеризується від щонайменше 80 96 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності із
ЗЕО ІЮ МО:5, або характеризується від щонайменше 80 95 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності із «ЕО ІЮ МО:6, або характеризується щонайменше від 80 95 до щонайменше 99
Фо ідентичністю послідовності із ХЕО ІЮ МО:7, або характеризується від щонайменше 80 95 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності із ЗЕО ІЮ МО:8, або характеризується від щонайменше 80 95 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності із ЗЕО ІЮ МО:9, або характеризується від щонайменше 80 96 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності із
ЗЕО ІЮ МО:10. (00133) В інших варіантах здійснення полінуклеотид містить, складається головним чином або складається з будь-якої із ФЕО ІЮ МО:1-10 або їхнього фрагмента, що кодує токсин. (00134) В інших варіантах здійснення полінуклеотид містить, складається головним чином або складається з нуклеотидної послідовності, яка кодує білок, що містить, складається головним чином або складається з амінокислотної послідовності, яка характеризується від щонайменше 80 95 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності з будь-якою із ЗЕО ІЮ
МО:31-40 або їхнім токсиновим фрагментом.
І00135| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із «ЕО ІЮ МО:31. 00136) У додаткових варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 905, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95
БО ідентичністю послідовності із «ЕО ІЮ МО:32.
ЇО0О137| У ще додаткових варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 956, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ЗЕО ІЮ МО:33 або її токсиновим фрагментом. 00138) У додаткових варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або 60 щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЕО ІЮ МО:34 або її токсиновим фрагментом.
Ї00139| У ще додаткових варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 81 956, або щонайменше 82 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 до, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із Ф«ЕО ІЮ МО:35.
І00140| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із «ЕО ІЮ МО:36.
ІЇ00141| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 905, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із «ЗЕО ІЮ МО:37 або її токсиновим фрагментом.
І00142| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або
Ко) щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із «ЕО ІЮ МО:38 або її токсиновим фрагментом.
І00143| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ЗЕО ІЮ МО:39 або її токсиновим фрагментом.
І00144| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або
БО щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЕО ІЮ МО:40.
Ї00145| У деяких варіантах здійснення химерний ген за даним винаходом містить полінуклеотид, що містить, складається головним чином або складається із синтетичної послідовності нуклеотидної послідовності, яка характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше на 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, 60 або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 до, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 до, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності з будь-якою із БЕО ІЮ МО:11-30 або їхнім фрагментом, що кодує токсин, де синтетична послідовність має кодони, оптимізовані для експресії в трансгенному організмі, такому як трансгенна рослина або трансгенні бактерії. В інших варіантах здійснення химерний ген за даним винаходом містить полінуклеотид, що містить, складається головним чином або складається із синтетичної послідовності нуклеотидної послідовності, яка кодує білок, що містить амінокислотну послідовність, яка характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 956, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 до, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,5 95 або щонайменше 99,6 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності з будь-якою із ФБЕО ІЮ МО:31-50 або їхнім токсиновим фрагментом, де синтетична послідовність має кодони, оптимізовані для експресії в трансгенному організмі. У додаткових варіантах здійснення трансгенний організм являє собою трансгенну бактерію або трансгенну рослину.
ІЇ00146| У деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачений синтетичний полінуклеотид, що містить, складається головним чином або складається з нуклеотидної послідовності, яка кодує білок, який є токсичним для лускокрилого шкідника, де нуклеотидна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або
Ко) щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 до, або щонайменше 99,7 956, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності з будь-якою із ЗЕО ІЮ МО:11-30 або їхнім фрагментом, що кодує токсин.
І00147| В інших варіантах здійснення даного винаходу передбачений синтетичний полінуклеотид, що містить, складається головним чином або складається з нуклеотидної послідовності, яка кодує білок, який є токсичним для лускокрилого шкідника, де нуклеотидна послідовність кодує амінокислотну послідовність, яка характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 905, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 956 або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності з будь-якою із 5ЕО ІЮ МО:31-50 або їхнім токсиновим фрагментом.
І00148| Білки Сгу за даним винаходом можуть бути виділені з певних штамів Васійи5
ІШигіпдіепві5 (ВО, таких як СО530, С0537, СО651, С0652, С0724, СО801, С1079 та М2776. Буде зрозуміло, що білки Сту за даним винаходом можуть також бути виділені з інших штамів Ві і що такі штами Ві можуть бути виділені за допомогою стандартних методик і тестовані щодо токсичності для лускокрилого шкідника за даним винаходом. Зазвичай штами Ві можуть бути виділені з будь-якого зразка навколишнього середовища, у тому числі з грунту, рослини, комахи, зернового пилу на елеваторі та інших матеріалів-зразків тощо, наприклад, за допомогою способів, відомих із рівня техніки. Дивись, наприклад, Тгамег5 еї аїЇ. (1987) Аррі.
Епмігоп. Містгобіої. 53:1263-1266; заїенпй еї а. (1969) Сап У. Місторіо!. 15:1101-1104; ОеГисса евї аї. (1981) Сап 3. Місторіої. 27:865-870; та Моітіб5, еї а). (1981) "Те депега Васійй5 апа зрогоїасіорасшШив", у Зіагг еї аї. (еаз.), Тпе РгоКагуоїе5: А Напаросок оп Нарбігаї5, Івбоїайоп, апа
Ідепійісайоп ої Васієтіа, Мої. ІІ, бргіпдег-Мегіод Вепіп НеїдеїІрегд. Після виділення штами Ві можна тестувати щодо їхньої токсичності для лускокрилого шкідника, при цьому можна ідентифікувати білки Стгу, охоплені даним винаходом. Таким чином, у деяких варіантах 60 здійснення даного винаходу передбачений виділений штам Васійи5 ІПигіпдіепбіє (ВО, який продукує білок Сту або рекомбінантний білок Сгу, що містить, складається головним чином або складається з амінокислотної послідовності, яка характеризується від щонайменше 80 95 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності з будь-якою із 5ЕО ІЮ МО: 31-40. В інших варіантах здійснення штам Ві вибраний із групи, що складається з СО530, СО537, СО651, СО652,
Со724, СОо801, С1079 та М2776. У ще додаткових варіантах здійснення білок Сгту або рекомбінантний білок Стгу містить, складається головним чином або складається з будь-якої із
ЗЕО ІЮ МО:З1-40.
Ї00149| Згідно з деякими варіантами здійснення даного винаходу передбачений необов'язково виділений білок Стгу, який є токсичним для лускокрилого шкідника, де білок містить, складається головним чином або складається з (а) амінокислотної послідовності, яка характеризується від щонайменше 80 95 ідентичністю послідовності до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності з амінокислотною послідовністю, представленою будь-якою із БЕО
ІЮ МО:31-50 або їхнім токсиновим фрагментом; або (Б) амінокислотної послідовності, яка кодується нуклеотидною послідовністю, що характеризується від щонайменше 80 95 ідентичністю послідовності до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності з нуклеотидною послідовністю, представленою будь-якою із БЕО ІЮ МО:11-30 або їхнім фрагментом, що кодує токсин.
Ї00150| В інших варіантах здійснення необов'язково виділений білок Сгу містить, складається головним чином або складається 3 амінокислотної послідовності, яка характеризується від щонайменше 80 906 до щонайменше 99 905 ідентичністю послідовності з будь-якою із ЗЕО ІЮ МО:31-50 або їхнім токсиновим фрагментом. У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 95, або щонайменше 99,7 до, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із зЕО ІЮ
МО:31 або її токсиновим фрагментом. 00151) Амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 9095, або щонайменше
Ко) 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 95, або щонайменше 99,7 до, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із зЕО ІЮ
МО:З1 або її токсиновим фрагментом. 00152) У додаткових варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЕО ІЮ МО: або її токсиновим фрагментом.
ЇО0153| У ще додаткових варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 956, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,695, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із «ФЕО ІЮ МО:33 або її токсиновим фрагментом.
ІЇ00154| В інших варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЕО ІЮ МО:34 або її токсиновим фрагментом.
І00155| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або 60 щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 905,
або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із «ЗЕО ІЮ МО:З35 або її токсиновим фрагментом.
І00156| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЕО ІЮ МО:36 або її токсиновим фрагментом.
І00157| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЗЕО ІЮ МО:37 або її токсиновим фрагментом.
І00158| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 956, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із «ЕО ІЮ МО:38 або її токсиновим фрагментом.
Ї00159| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або
Ко) щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЗЕО ІЮ МО:39 або її токсиновим фрагментом.
ІЇ00160| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 93 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЕО ІЮ МО:40. 00161) У деяких варіантах здійснення амінокислотна послідовність містить, складається головним чином або складається з будь-якої із 5ЕО ІЮ МО:31-50 або їхнього токсинового фрагмента. В інших варіантах здійснення амінокислотна послідовність кодується нуклеотидною послідовністю, що містить, складається головним чином або складається з будь-якої з ЗЕО ІЮ
МО:1-30 або їхнього фрагмента, що кодує токсин. 00162) В інших варіантах здійснення білки Сту є токсичними для лускокрилого шкідника, вибраного з групи, що складається з кукурудзяного метелика (О5ігіпіа пибіїа|й5), совки-іпсилон (Адгоїїз ірзіп), совки трав'яної (Зродорієга Ігидірегда), американської кукурудзяної совки (Неїїсомегра 7єа), вогнівки цукрової тростини (Оіаїгаєа засспагаїй5), гусені совки оксамитових бобів (Апіїсагзіа детітпаїа|йє), соєвої совки (СПгузодеїхіє іпсіцде5), вогнівки кукурудзяної південно-західної (Оіаїгаєа дгапаїйозеїІа), західної бобової совки (Кіспіа аїрісов5іа), тютюнової совки (Неїїоїпі5 мігех5сеп5), східного кукурудзяного метелика (Оз5ігіпіа Гигпасаїї5), бавовникової совки (Неїїсомегра агтідега), вогнівки жовтої рисової (Спо зирргеззаїї5), рожевої стеблової совки (Зезатіа саіатівіі5) та вогнівки рисової (Спарпапосгосів5 теаіпаїїв). 00163) У деяких варіантах здійснення даного винаходу охоплюється рекомбінантний білок
Стгу, який є токсичним для лускокрилого шкідника, де рекомбінантний білок Сгу містить, 60 складається головним чином або складається з (а) амінокислотної послідовності, яка характеризується від щонайменше 80 95 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності з амінокислотною послідовністю, представленою будь-якою із ЗЕБЕО ІЮ МО:41-50 або їхнім токсиновим фрагментом; або (б) амінокислотної послідовності, яка кодується нуклеотидною послідовністю, яка характеризується від щонайменше 80 96 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності з нуклеотидною послідовністю, представленою будь-якою із ЗЕО ІЮ МО:21-30 або їхнім фрагментом, що кодує токсин.
І00164| В інших варіантах здійснення рекомбінантний білок Сту містить, складається головним чином або складається з амінокислотної послідовності, яка характеризується від щонайменше 80 95 до щонайменше 99 95 ідентичністю послідовності з будь-якою із ЗЕО ІЮ
МО:41-50 або їхнім токсиновим фрагментом. У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 8 095, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 95, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99,6 до, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЕО ІЮ МО:41 або її токсиновим фрагментом.
ІЇ00165| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЗЕО ІЮ МО:42 або її токсиновим фрагментом.
Зо ІЇ00166| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЗЕО ІЮ МО:43 або її токсиновим фрагментом.
ІЇ00167| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 9о, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЕО ІЮ МО:44 або її токсиновим фрагментом.
ІЇ00168| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 9о, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЗЕО ІЮ МО:45 або її токсиновим фрагментом.
І00169| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЗЕО ІЮ МО:46 або її токсиновим фрагментом.
І00170| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЗЕО ІЮ МО:47 або її токсиновим фрагментом.
І00171| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЗЕО ІЮ МО:48 або її
Зо токсиновим фрагментом.
І00172| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЗЕО ІЮ МО:49 або її токсиновим фрагментом.
І00173| У ще одних варіантах здійснення амінокислотна послідовність характеризується щонайменше 80 95, або щонайменше 81 95, або щонайменше 82 95, або щонайменше 83 95, або щонайменше 84 95, або щонайменше 85 95, або щонайменше 86 95, або щонайменше 87 95, або щонайменше 88 95, або щонайменше 89 95, або щонайменше 90 95, або щонайменше 91 95, або щонайменше 92 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 94 95, або щонайменше 95 95, або щонайменше 96 95, або щонайменше 97 95, або щонайменше 98 95, або щонайменше 99 95, або щонайменше 99,1 95, або щонайменше 99,2 95, або щонайменше 99,3 95, або щонайменше 99,4 до, або щонайменше 99,5 95, або щонайменше 99, 95, або щонайменше 99,7 95, або щонайменше 99,8 95, або щонайменше 99,9 95 ідентичністю послідовності із ФЗЕО ІЮ МО:50 або її токсиновим фрагментом.
Ї00174| У ще додаткових варіантах здійснення рекомбінантний білок Сгу містить, складається головним чином або складається з амінокислотної послідовності під будь-якою із
ЗЕБЕО 10 МО:41-50 або їхнього токсинового фрагмента. В інших варіантах здійснення рекомбінантний білок Сгу кодується нуклеотидною послідовністю, що містить, складається головним чином або складається з будь-якої із 5ЕО ІЮ МО:21-30 або їхнього фрагмента, що кодує токсин.
І00175| Антитіла, що виробляються у відповідь на імунну стимуляцію нативними або мутантними ВТ-0001, ВТ-0003, ВТ-0020, ВТ-0022, ВТ-0027, ВТ-0029, ВТ-0030, ВТ-0031, ВТ-0201 і ВТ-0202 та подібними або спорідненими білками Сгу , також охоплюються даним винаходом. бо Такі антитіла можуть бути одержані із застосуванням стандартних імунологічних методик одержання поліклональної антисироватки та за необхідності імморталізації клітин, що продукують антитіла, імунізованого організму-хазяїна для одержання джерел моноклональних антитіл. Методики одержання антитіл до будь-якої речовини, що становить інтерес, добре відомі, наприклад, як описано в Нагіому і І апе (1988. Апііроадієз а Іарогаїогу тапиаї. рр. 726. Соїа зргіпд Нагброг І арогайогу) і в содіпуд (Мопосіопа! Апіїбодієв: Ргіпсіріє5 48 ргасіісе.1986. Асадетіс
Ргез5, Іпс., Огіапдо, Р). Даний винахід охоплює інсектицидні білки, які перехресно реагують з антитілами, зокрема моноклональними антитілами, що виробляються проти одного або декількох інсектицидних білків Сгу за даним винаходом.
І00176| Антитіла, одержані згідно з даним винаходом, також використовуються в імунологічних аналізах для визначення кількості або наявності нативних або мутантних ВТ-0001, вт-0003, вт-0020, вт-0022, вТ-0027, вВТ-0029, вВТ-0030, ВТ-0031, ВТ-0201 та ВТ-0202 або спорідненого білка Сгу в біологічному зразку. Такі аналізи також використовуються в одержанні композицій, що містять один або декілька білків Сгу за даним винаходом або споріднених токсичних білків, причому таке одержання проводять із забезпеченням контролю якості. Крім того, антитіла можна використовувати для оцінки ефективності рекомбінантного продукування одного або декількох білків Сгу за даним винаходом або спорідненого білка, а також для скринінгу бібліотек експресії на наявність нуклеотидної послідовності, що кодує один або декілька білків Сту за даним винаходом, або послідовностей, що кодують споріднені білки.
Антитіла також використовуються як афінні ліганди для очищення або виділення будь-якого одного або декількох білків за даним винаходом і споріднених білків. Білки Стгу за даним винаходом і білки, що містять споріднені антигенні епітопи, можуть бути одержані в результаті надекспресії повнорозмірної або часткової послідовності, що кодує весь білок Сту за даним винаходом або споріднений білок або їхню частину, у переважній клітині-хазяїні.
І00177| Вважається, що послідовності ДНК, які кодують нативний білок Стгу за даним винаходом, можна змінювати за допомогою різних способів і що ці зміни можуть приводити до утворення послідовностей ДНК, які кодують білки з амінокислотними послідовностями, що відрізняються від таких, закодованих у нативному білку Сгу за даним винаходом. Білок Сту може бути змінений різними способами з одержанням мутантного білка Сту, у тому числі за допомогою амінокислотних замін, делецій, усічень і вставок однієї або декількох амінокислот,
Ко) включаючи до приблизно 2, приблизно 3, приблизно 4, приблизно 5, приблизно 6, приблизно 7, приблизно 8, приблизно 9, приблизно 10, приблизно 15, приблизно 20, приблизно 25, приблизно 30, приблизно 35, приблизно 40, приблизно 45, приблизно 50, приблизно 55, приблизно 60, приблизно 65, приблизно 70, приблизно 75, приблизно 80, приблизно 85, приблизно 90, приблизно 100, приблизно 105, приблизно 110, приблизно 115, приблизно 120, приблизно 125, приблизно 130, приблизно 135, приблизно 140, приблизно 145, приблизно 150, приблизно 155 або більше амінокислотних замін, делецій або вставок. Способи таких маніпуляцій загалом відомі з рівня техніки. Наприклад, варіанти амінокислотної послідовності нативного білка Сту можуть бути одержані шляхом уведення мутацій у полінуклеотид, який кодує даний білок. Це також можна здійснювати із застосуванням однієї з декількох форм мутагенезу або методу спрямованої еволюції. Згідно з деякими аспектами зміни, що кодуються амінокислотною послідовністю, не будуть істотно впливати на функцію білка. Такі варіанти будуть мати необхідну інсектицидну активність. У деяких варіантах здійснення за даним винаходом нуклеотидні послідовності, представлені 5ЕБО 10 МО: 1-10, змінюють із введенням амінокислотних замін у кодований білок. В інших варіантах здійснення одержаний мутантний білок кодується синтетичним мутантним полінуклеотидом, що містить нуклеотидну послідовність, представлену будь-якою із 5ЕО І МО:21-30. В інших варіантах здійснення мутантні білки містять, складаються головним чином або складаються з амінокислотної послідовності, представленої будь-якою із зЗЕО ІЮ МО:41-50. 00178) Зрозуміло, що здатність інсектицидного білка забезпечувати інсектицидну активність може бути покращена шляхом використання таких методик для композицій за даним винаходом. Наприклад, можна експресувати білок Сгу у клітинах-хазяїнах, які характеризуються високим рівнем помилкового включення основ під час реплікації ДНК, таких як ХІ-1 Неа (Зігаїадепе, Ла-Хойя, Каліфорнія). Після розмноження в таких штамах можна виділяти ДНК (наприклад, шляхом одержання плазмідної ДНК або шляхом ампліфікації за допомогою ПЛР і клонування одержаного ПЛР-фрагмента у вектор), експресувати мутантні послідовності білка
Сту в штамі, що не приводить до утворення мутацій, та ідентифікувати мутовані гени з інсектицидною активністю, наприклад, шляхом здійснення аналізу для тестування інсектицидної активності. Зазвичай білок змішують і використовують в аналізах живлення. Див., наприклад,
Маї!топе сеї аї. (1985) 9У. ої Есопотіс Епіотоіоду 78:290-293. Такі аналізи можуть включати 60 приведення рослин у контакт з одним або декількома шкідниками та визначення здатності рослин до виживання або здатності викликати загибель шкідників. Приклади мутацій, які приводять до підвищення токсичності, можна знайти в Зсппері еї аї. (1998) Місгобіо!. Мої. Віо!.
Вем. 62:775-806.
І00179| Як альтернатива, можуть бути виконані зміни в амінокислотній послідовності за даним винаходом на аміно- або карбокси-кінці, при цьому вони не чинять істотного впливу на активність. Вони можуть включати вставки, делеції або зміни, уведені із застосуванням сучасних способів молекулярної біології, таких як ПЛР, у тому числі ПЛР-ампліфікацій, що забезпечують зміну або розширення послідовності, яка кодує білок, за рахунок включення послідовностей, що кодують амінокислоти, в олігонуклеотиди, використовувані під час ПЛР- ампліфікації. Як альтернатива, додані послідовності, що кодують білок, можуть включати послідовності, які кодують увесь білок, такі, що здебільшого використовуються у рівні техніки для створення злитих білків. Такі злиті білюи найчастіше використовують для (1) підвищення рівня експресії білка, що становить інтерес, (2) для введення зв'язувального домену, ферментативної активності або епітопу для полегшення одного з очищення білка, виявлення білка або інших застосувань в експерименті, відомих із рівня техніки, (3) спрямованої секреції в субклітинну органелу, таку як периплазматичний простір грам-негативних бактерій, або трансляції в ендоплазматичному ретикулумі еукаріотичних клітин, причому в останньому випадку результатом найчастіше є глікозилювання білка. 00180) Білок Сгу за даним винаходом також може бути підданий мутації із введенням епітопу для одержання антитіл, які розпізнають мутантний білок. Таким чином, у деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачений мутований білок Сгу, де амінокислотна заміна в нативному білку Сгу дає мутантний білок Стгу з антигенною ділянкою, що дає змогу відрізняти мутантний білок Сгу від нативного білка Сгу в аналізі на виявлення білків. 00181) У деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачений спосіб одержання антитіла, яке здатне диференціювати мутований білок Стгу і нативний білок Стгу, з якого одержаний мутований білок Стгу, при цьому спосіб передбачає стадії заміни амінокислот в антигенній петлі нативного білка Сту та стимуляції вироблення антитіл, що специфічно розпізнають мутовану антигенну петлю в мутованому білку Сту та не розпізнають нативний білок Сгу. В одному варіанті здійснення антигенну петлю ідентифікують у неконсервативних
Зо ділянках за межами домену І нативного білка Стгу. В іншому варіанті здійснення антигенна петля не є петлею, залученою в розпізнавання рецепторів білків Сту в травному каналі комахи або залученою в активацію білка Сгу під дією протеази.
І00182| Варіанти нуклеотидних та амінокислотних послідовностей за даним винаходом охоплюють також послідовності, одержані в результаті процедур мутагенезу та рекомбінації, таких як ДНК-шафлінг. За допомогою такої процедури одну або декілька різних ділянок, що кодують токсичний білок, можна використовувати для створення нового токсичного білка, що має потрібні властивості. Відповідно, бібліотеки рекомбінантних полінуклеотидів одержують із популяції полінуклеотидів зі спорідненими послідовностями, що містять ділянки послідовності, які характеризуються значним ступенем ідентичності послідовності та можуть піддаватися гомологічній рекомбінації іп міго або іп мімо. Наприклад, із використанням даного підходу мотиви послідовності, що кодують домен, який становить інтерес, можна піддавати шафлінгу між пестицидним геном за даним винаходом та іншими відомими пестицидними генами з одержанням нового гена, що кодує білок із покращеною властивістю, яка становить інтерес, такою як підвищена інсектицидна активність. Стратегії для такого ДНК-шафлінгу відомі з рівня техніки. Див., наприклад, біеттег (1994) Ргос. Май. Асай. сі. ОБА 91:10747-10751; біеттег (1994) Майшге 370:389-391; Статеті єї а. (1997) Маште Віоїесн. 15:436-438; Мооге 6вї аї!. (1997) 9.
Мої. Віої. 272:336-347; 7папо еї а. (1997) Ргос. Маї)!. Асад. 5сі. ОБА 94:4504-4509; Статеті евї аї. (1998) Маїшге 391:288-291 і патенти США МоеМо 5605793 і 5837458. 00183) Обмін доменів або шафлінг є іншим механізмом для одержання змінених білків Сту за даним винаходом. Домени можна обмінювати між білками Сгу, що приводить до гібридних або химерних токсичних білків із покращеною пестицидною активністю або спектром мішеней.
Способи одержання рекомбінантних білків і тестування їх щодо пестицидної активності добре відомі з рівня техніки (див., наприклад, Маїтом еї аї. (2001) Аррі. Епмігоп. Містобіо!. 67:5328-5330; де Маада еї аї. (1996) Аррі. Епмігоп. МісторіоІ. 62:1537-1543; Се єї аї. (1991) 9. ВіоЇ. Спет. 266:17954-17958; 5сПпері еї аї. (1990) 9. Віої. Спет. 265:20923-20930; Вапо еї аї. 91999) Аррі.
Епмігоп. МісторіоІ. 65:2918-2925). У деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачені гібридні білки Сту, що містять на С-кінці амінокислоти з першого білка Стгу за даним винаходом, а на М-кінці - амінокислоти від другого білка Сгу за даним винаходом, відмінного від білка Сгу за даним винаходом.
ІЇ00184| У деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачений рекомбінантний вектор, який містить полінуклеотид, молекулу нуклеїнової кислоти, касету експресії або химерний ген за даним винаходом. В інших варіантах здійснення вектор додатково визначений як плазміда, косміда, фагміда, штучна хромосома, фаг або вірусний вектор. Деякі вектори для використання в трансформації рослин та інших організмів відомі з рівня техніки. 00185) Таким чином, деякі варіанти здійснення даного винаходу стосуються касет експресії, сконструйованих для експресії полінуклеотидів і молекул нуклеїнових кислот за даним винаходом. Вираз "касета експресії", використовуваний у даному документі, означає молекулу нуклеїнової кислоти, яка має щонайменше послідовність контролю, функціонально пов'язану з нуклеотидною послідовністю, що становить інтерес. Таким чином, наприклад, у касетах експресії для експресії в рослині, частині рослини або рослинній клітині передбачені промотори рослин, функціонально пов'язані з нуклеотидними послідовностями, підданими експресії. 00186) Касета експресії, яка містить полінуклеотид, що становить інтерес, може бути химерною, а це означає те, що щонайменше один з її компонентів є гетерологічним щодо щонайменше одного іншого з інших її компонентів. Касета експресії також може являти собою послідовність, що зустрічається в природі, але яка була одержана в рекомбінантній формі, придатній для гетерологічної експресії. Однак, як правило, касета експресії є гетерологічною щодо хазяїна, тобто конкретна послідовність нуклеїнової кислоти в касеті експресії не зустрічається в природі в клітині-хазяїні, та її необхідно було ввести в клітину-хазяїна або предка клітини-хазяїна за допомогою події трансформації.
ІЇ00187| Додатково до промоторів, функціонально пов'язаних із нуклеотидними послідовностями за даним винаходом, касета експресії за даним винаходом може включати також інші регуляторні послідовності. Вираз "регуляторні послідовності", використовуваний у даному документі, означає нуклеотидні послідовності, розташовані вище (5'-некодувальні послідовності), у межах або нижче (3'-некодувальні послідовності) кодувальної послідовності, які впливають на транскрипцію, процесинг або стабільність РНК, або трансляцію асоційованої кодувальної послідовності. Регуляторні послідовності включають без обмеження енхансери, інтрони, лідерні послідовності, що регулюють трансляцію, сигнали термінації та сигнальні послідовності поліаденілювання. 00188) У деяких варіантах здійснення касета експресії за даним винаходом також може включати полінуклеотиди, які кодують інші необхідні ознаки, окрім білків Сту за даним винаходом. Такі касети експресії, що містять пакетовані ознаки, можуть бути використані для створення рослин, частин рослин або рослинних клітин, що мають необхідний фенотип із пакетованими ознаками (а саме молекулярне пакетування). Такі пакетовані комбінації в рослинах також можна створювати за допомогою інших способів, включаючи без обмеження кросбридинг рослин за допомогою будь-якої традиційної методики. У разі "пакетування" шляхом генетичної трансформації рослин нуклеотидні послідовності, що становлять інтерес, можна комбінувати в будь-який момент часу та в будь-якому порядку. Наприклад, трансгенну рослину, що містить одну або декілька необхідних ознак, можна використовувати як мішень для введення додаткових ознак шляхом наступної трансформації. Додаткові нуклеотидні послідовності можна вводити за протоколом котрансформації одночасно з нуклеотидною послідовністю, молекулою нуклеїнової кислоти, конструкцією нуклеїнової кислоти або композицією за даним винаходом, що забезпечуються будь-якою комбінацією касет експресії. Наприклад, якщо будуть вводити дві нуклеотидні послідовності, то їх можна вбудувати в окремі касети (транс), або їх можна вбудувати в одну касету (цис). Експресія полінуклеотидів може керуватися тим самим промотором або різними промоторами. Крім того, відомо, що полінуклеотиди можна "пакетувати" в потрібному місці розташування в геномі за допомогою системи сайт-специфічної рекомбінації. Див., наприклад, публікації міжнародних заявок на патенти МоМо МО 99/25821, УМО 99/25854, МО 99/25840, УМО 99/25855 і МО 99/25853. 00189) Касета експресії також може включати додаткову послідовність, що кодує один або декілька поліпептидів або молекул двониткової РНК (а5КМА), що забезпечують агрономічні ознаки, що становлять інтерес, які переважно приносять користь компанії-виробнику насіння, сільгоспвиробнику або виробнику зерна. Поліпептид, який становить інтерес, може бути будь- яким поліпептидом, що кодується нуклеотидною послідовністю, яка становить інтерес.
Необмежувальні приклади поліпептидів, що становлять інтерес, які є придатними для продукування в рослинах, включають такі, що зумовлюють виникнення агрономічно важливих ознак, таких як стійкість до гербіцидів (що іноді називається також "толерантністю до гербіцидів"), стійкість до вірусів, стійкість до патогенних бактерій, стійкість до комах, стійкість до нематод або стійкість до грибів. Див., наприклад, патенти США МоМо 5569823; 5304730; 60 5495071; 6329504 і 6337431. Поліпептид також може бути таким, що збільшує потужність або врожайність рослин (включаючи ознаки, які дають змогу рослині рости за різних температур, грунтових умов і рівнів сонячного світла та атмосферних опадів), або таким, який дає змогу ідентифікувати рослину, що виявляє ознаку (наприклад, селектовний маркер, колір насіннєвої оболонки тощо), яка становить інтерес. Різноманітні поліпептиди, що становлять інтерес, а також способи введення цих поліпептидів у рослину описані, наприклад, у патентах США МоМо 4761373; 4769061; 4810648; 4940835; 4975374; 5013659; 5162602; 5276268; 5304730; 5495071; 5554798; 5561236; 5569823; 5767366; 5879903, 5928937; 6084155; 6329504 та 6337431; а також у публікації заявки на патент США Мо 2001/0016956. Див. також у всесвітній мережі Інтернет за адресою ІШезсі.зибззех.ас.ик/поте/Меїй Стісктоге/Ві/.
ІЇ00190| У деяких варіантах здійснення даного винаходу також можуть застосовуватися полінуклеотиди, які надають стійкості/толерантності до гербіциду, що інгібує конус наростання або меристему, такого як імідазолінон або сульфонілсечовина. Ілюстративні полінуклеотиди з цієї категорії кодують мутантні ферменти АГ 5 та АНА5Б, як описано, наприклад, у патентах США
МоМо 5767366 і 5928937. Патенти США МоМо 4761373 і 5013659 стосуються рослин, стійких до різних імідазолінонових або сульфонамідних гербіцидів. Патент США Мо 4975374 стосується рослинних клітин і рослин, які містять нуклеїнову кислоту, що кодує мутантну глутамінсинтетазу (95), стійку до інгібування гербіцидами, які, як відомо, інгібують (35, наприклад, фосфінотрицином і метіонінсульфоксиміном. У патенті США Ме 5162602 розкриті рослини, стійкі до інгібування гербіцидами на основі циклогександіону та арилоксифеноксипропанової кислоти.
Стійкості надає змінена ацетил-коензим А-карбоксилаза (АСсСаза). 00191) Поліпептиди, які кодуються нуклеотидними послідовностями, що надають стійкості до гліфосату, також є придатними для даного винаходу. Див., наприклад, патент США Мо 4940835 і патент США Мо 4769061. У патенті США Мо 5554798 розкриті трансгенні рослини маїсу, стійкі до сгліфосату, стійкості яким надає ген зміненої 5-енолпірувіл-3- фосфошикіматсинтази (ЕРБР). (00192) Також є придатними полінуклеотиди, що кодують стійкість до фосфонових сполук, таких як глюфосинат амонію або фосфінотрицин, а також піридинокси- або феноксипропіонових кислот і циклогексанонів. Див. заявку на європейський патент Мо 0242246. Див. також патенти
США МоМо 5879903, 5276268 і 5561236.
Зо 00193) Інші придатні полінуклеотиди включають такі, що кодують стійкість до гербіцидів, які інгібують фотосинтез, таких як триазин і бензонітрил (ген нітрилази). Див. патент США Мо 4810648. Додаткові придатні полінуклеотиди, які кодують стійкість до гербіцидів, включають такі, що кодують стійкість до 2,2-дихлорпропіонової кислоти, сетоксидиму, галоксифопу, імідазолінонових гербіцидів, сульфонілсечовинних гербіцидів, триазолопіримідинових гербіцидів, 5-триазинових гербіцидів і бромоксинілу. Також придатними є полінуклеотиди, що надають стійкості до інгібіторів ферменту протокс або які забезпечують підвищену стійкість до захворювань рослин; підвищену толерантність до несприятливих умов навколишнього середовища (видів абіотичного стресу), у тому числі без обмеження до засухи, надмірного охолодження, надмірного нагрівання, або надмірної засоленості грунту, або екстремальної кислотності або лужності; а також зміни будови або розвитку рослин, у тому числі зміни строків розвитку. Див., наприклад, публікацію заявки на патент США Мо 2001/0016956 і патент США Мо 6084155.
І00194| Додаткові придатні полінуклеотиди включають такі що кодують пестицидні (наприклад, інсектицидні) поліпептиди. Ці поліпептиди можуть бути одержані в кількостях, достатніх для контролю, наприклад, комах-шкідників (тобто в кількостях, що забезпечують контроль комах). Вважається, що необхідна для контролю комах або інших шкідників кількість пестицидного поліпептиду, який продукується в рослині, може варіювати залежно від сорту, типу шкідника, факторів навколишнього середовища тощо. Полінуклеотиди, що використовуються для надання додаткової стійкості до комах або шкідників, включають, наприклад, такі, що кодують токсини, ідентифіковані в організмах Васійй5. Полінуклеотиди, що містять нуклеотидні послідовності, які кодують білки Стгу Васійи5 (игіпдіепвіз (ВО із декількох підвидів, були клоновані, і було виявлено, що рекомбінантні клони токсичні для личинок лускокрилих, двокрилих і твердокрилих комах. Приклади таких інсектицидних білків Ві включають білки Сгу, такі як СтуїАа, СтутАБб, СтгутАс, Сту1!В, Сту1С, Стгу10, СтуїЕа, Стуї1Ра,
СтузА, СтузА, Сту9В, Сту9С тощо, а також вегетативні інсектицидні білки, такі як Мір1, Мір2, Мірз тощо. Повний список одержаних із Ві білків знаходиться у мережі Інтернет у номенклатурній базі даних токсинів Васійй5 «(пигіпдіепзі5, підтримуваній університетом Сассекса (див. також
СтісКтоге еї а!. (1998) Містобіої!. Мої. Віої. Нем. 62:807-813). 00195) Поліпептиди, придатні для продукування в рослинах, додатково включають такі, що бо поліпшують перетворення зібраних рослин або частин рослин на комерційно використовуваний продукт або інакше сприяють йому, у тому числі, наприклад, такі, що забезпечують підвищений або змінений уміст або розподілення вуглеводів, покращені властивості зброджуваності, підвищений уміст олії, підвищений уміст білка, покращену засвоюваність та підвищений уміст нутрицевтиків, наприклад, підвищений уміст фітостеролу, підвищений уміст токоферолу, підвищений уміст станолу або підвищений уміст вітамінів. Поліпептиди, що становлять інтерес, також включають, наприклад, такі, що зумовлюють зниження вмісту небажаного компонента в зібраному врожаї, наприклад, фітинової кислоти або ферментів, які розщеплюють цукри, або сприяють цьому. Під "таким, що зумовлює" або "таким, що сприяє" розуміють, що поліпептид, який становить інтерес, може прямо або опосередковано сприяти наявності ознаки, що становить інтерес (наприклад, шляхом збільшення розщеплення целюлози за допомогою гетерологічного ферменту целюлази). 00196) У деяких варіантах здійснення поліпептид сприяє поліпшенню засвоюваності їжі або корму. Ксиланази являють собою ферменти, що розщеплюють геміцелюлозу, які посилюють руйнування клітинних стінок рослин, що приводить до кращого використання твариною поживних речовин рослини. Це приводить до збільшення темпів росту та конверсії корму. Також можна знижувати в'язкість кормів, що містять ксилан. Гетерологічне продукування ксиланаз у рослинних клітинах також може сприяти перетворенню лігноцелюлози на зброджувані цукри під час промислового перероблення.
ІЇ00197| Були ідентифіковані та охарактеризовані численні ксиланази з грибкових і бактеріальних мікроорганізмів (див., наприклад, патент США Мо 5437992; Соцдпіїп еї аї. (1993) "Ргосеєдіпаз ої Ше бесопа ТВІСЕЇ БЗутровзішт оп Тгісподепта геезеї СеїшШавзе5 апа ОіНег
Нуайгоїазев" Евроо; Боштіпеп ап Веїпікаіпеп, ейд5. (1993) Еоипадайоп їог ВіоїесНпіса! апа
Іпдивійа! Рептепіайоп Резвеагсі 8:125-135; публікацію заявки на патент США Мо 2005/0208178 і публікацію згідно з РСТ Мо УМО 03/16654). Зокрема, у Т. геезеі були ідентифіковані три специфічні ксиланази (ХМ1-І, ХМ -П ї ХМІ--ПІ) (ТепКапеп еї аї. (1992) Епгуте Містоб. Тесппої. 14:566; Тогтгопеп еї а!. (1992) Віо/ГесппоЇоду 10:1461 та Хи єї аї. (1998) Аррі. Місгобіо!. Віотесппої. 49:718).
І00198| В інших варіантах здійснення поліпептид, що використовується для даного винаходу, може являти собою фермент, що розщеплює полісахариди. Рослини за даним
Зо винаходом, що виробляють такий фермент, використовуються для одержання, наприклад, зброджуваної сировини для біологічної переробки. У деяких варіантах здійснення ферменти, що використовуються для способу зброджування, включають альфа-амілази, протеази, пулуланази, ізоамілази, целюлази, геміцелюлази, ксиланази, циклодекстринглюкозилтрансферази, ліпази, фітази, лакази, оксидази, естерази, кутинази, фермент, що гідролізує гранульований крохмаль, та інші глюкоамілази. 00199) Ферменти, які розщеплюють полісахариди, включають ферменти, що розщеплюють крохмаль, такі як а-амілази (ЕС 3.2.1.1), глюкуронідази (Е.С. 3.2.1.131); екзо-1,4-а-О-глюканази, такі як амілоглюкозидази та глюкоамілази (ЕС 3.2.1.3), В-амілази (ЕС 3.2.1.2), а-глюкозидази (ЕС 3.2.1.20) та інші екзоамілази; ферменти, які діють на зв'язки в місцях розгалуження крохмалю, такі як а) ізоамілаза (ЕС 3.2.1.68), пулуланаза (ЕС 3.2.1.41) тощо; Б) целюлази, такі як екзо-1,4-3-целобіогідролаза (ЕС 3.2.1.91), екзо-1,3-В-Ю-глюканаза (ЕС 3.2.1.393, Д- глюкозидаза (ЕС 3.2.1.21); с) І-арабінази, такі як ендо-1,5-а-І-арабіназа (ЕС 3.2.1.99), а- арабінозидази (ЕС 3.2.1.55) тощо; а) галактанази, такі як ендо-1,4-8-О-галактаназа (ЕС 3.2.1.89), ендо-1,3-В-О-галактаназа (ЕС 3.2.1.90), а-галактозидаза (ЕС 3.2.1.22), В-галактозидаза (ЕС 3.2.1.23) тощо; е) мананази, такі як ендо-1,4-В8-ЮО-мананаза (ЕС 3.2.1.78), ВД-манозидаза (ЕС 3.2.1.25), а-манозидаза (ЕС 3.2.1.24) тощо; Її) ксиланази, такі як ендо-1,4-В-ксиланаза (ЕС 3.2.1.8), В-Ю-ксилозидаза (ЕС 3.2.1.37), 1,3-8-ЮО-ксиланаза тощо; і 9) інші ферменти, такі як а-І - фукозидаза (ЕС 3.2.1.51), а-І -рамнозидаза (ЕС 3.2.1.40), леваназа (ЕС 3.2.1.65), інуланаза (ЕС 3.2.1.7) тощо. В одному варіанті здійснення а-амілаза являє собою синтетичну а-амілазу,
Ату/97Е, описану в патенті США Мо 8093453, включеному в даний документ за допомогою посилання у всій своїй повноті.
І00200| Додаткові ферменти, які можна використовувати згідно із даним винаходом, включають протеази, такі як протеази грибів і бактерій. Протеази грибів включають без обмежень такі, одержані з Аз5регоййи5, Тгісподегта, Мисог і КПігориб5, таких як А. підег, А. ажатиогі, А. огу/ає і М. тіепеї. У деяких варіантах здійснення поліпептиди за даним винаходом можуть являти собою ферменти целобіогідролази (СВН) (ЕС 3.2.1.91). В одному варіанті здійснення фермент целобіогідролаза може являти собою СВНІ або СВНІ2. 002011) Інші ферменти, які використовуються згідно з даним винаходом, включають без обмеження геміцелюлази, такі як манази та арабінофуранозидази (ЕС 3.2.1.55); лігнінази; 60 ліпази (наприклад, Е.С. 3.1.1.3), глюкозооксидази, пектинази, ксиланази, трансглюкозидази,
альфа-1,6-глюкозидази (наприклад, Е.С. 3.2.1.20); естерази, такі як естераза ферулової кислоти (ЕС 3.1.1.73) та ацетилксиланестерази (ЕС 3.1.1.72); а також кутинази (наприклад, Б.С. 3.1.1.74). (00202) Молекули двониткової РНК, що використовуються в даному винаході, включають без обмеження такі, які пригнічують експресію цільових генів у комах. Передбачається, що використовуване в даному документі словосполучення "супресія гена" у сукупності стосується будь-яких добре відомих способів зниження рівнів білка, що продукується в результаті транскрипції гена в тЕМА та подальшої трансляції тЕМА. Також мається на увазі, що супресія гена означає зниження експресії білка з гена або кодувальної послідовності, у тому числі посттранскрипційну супресію гена та транскрипційну супресію. Посттранскрипційна супресія гена опосередкована гомологією всієї або частини тЕМА, що транскрибується з гена або кодувальної послідовності, які є мішенями для супресії, та відповідної двониткової РНК, що використовується для супресії, та означає значуще та вимірюване зниження кількості доступної
ТЕМА, наявної в клітині для зв'язування рибосомами. РНК, що транскрибується, може знаходитися в сенсовій орієнтації для забезпечення ефекту, що називається косупресією, в антисенсовій орієнтації для забезпечення ефекту, що називається антисенсовою супресією, або в обох орієнтаціях з одержанням а52ЕМА для забезпечення ефекту, що називається РНК- інтерференцією (КМАЇї). Транскрипційна супресія опосередкована наявністю в клітині а5ЕМА, засобу, що забезпечує супресію гена, яка демонструє значну ідентичність послідовності з промоторною послідовністю ДНК або комплементарною їй ниткою, для забезпечення ефекту, що називається супресією промотора в транс-положенні. Супресія гена може бути ефективною щодо нативного гена рослини, асоційованого з ознакою, наприклад, для забезпечення в рослинах знижених рівнів білка, що кодується нативним геном, або підвищеними або зниженими рівнями зміненого метаболіту. Супресія гена також може бути ефективною щодо генів-мішеней у шкідниках рослин, які можуть ковтати або контактувати з рослинним матеріалом, що містить засоби для забезпечення супресії гена, спеціально сконструйованого для пригнічення або супресії експресії однієї або декількох гомологічних або комплементарних послідовностей у клітинах шкідника. Такі гени-мішені для супресії можуть кодувати незамінний білок, основна функція якого вибрана з групи, що складається з формування м'язів, утворення
Зо ювенільного гормону, регуляції ювенільного гормону, регуляції та транспорту іонів, синтезу травних ферментів, підтримання мембранного потенціалу клітини, біосинтезу амінокислот, деградації амінокислот, утворення сперми, синтезу феромонів, сприйняття феромонів, формування антен, формування крил, формування кінцівок, розвитку та диференціації, формування яєць, дозрівання личинок, утворення травних ферментів, синтезу гемолімфи, підтримання постійності складу гемолімфи, передавання нервових імпульсів, клітинного ділення, енергетичного обміну, дихання та апоптозу. 00203) У деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачена трансгенна клітина- хазяїн, відмінна від клітини людини, що містить полінуклеотид, молекулу нуклеїнової кислоти, химерний ген, касету експресії або рекомбінантний вектор за даним винаходом. Трансгенна клітина-хазяїн, відмінна від клітини людини, може включати без обмежень рослинну клітинну, дріжджову клітину, бактеріальну клітину або клітину комахи. Відповідно, у деяких варіантах здійснення даний винахід передбачає бактеріальну клітину, вибрану з родів Васійив5,
Вгемірасійи5, Сіовійдіит, Хепогнардив, Рпоїюогтарадив, Равівшіа, ЕзсНегісніа, Рееидотопав,
Егміпіа, Зеїтайа, Кіебзієїа, ЗаіІтопеїЇа, РавзієшейПа, Хапіпотопа5, бігеріотусев, ВПі2орішйт,
Аподорзейдотопав, МеїПпуїорпіїйш5, Адгорасієгит, Асеїобасієг, Іасіобрасіїйи5, АпПгобасіег,
А?оіобасіег, І еисоповіос або АїЇсаїїдепе5. Таким чином, наприклад, як засоби для біологічного контролю комах можна одержувати білки Сту за даним винаходом шляхом експресії химерного гена, що кодує білки Сгу за даним винаходом у бактеріальній клітині. Наприклад, у деяких варіантах здійснення передбачена клітина Васійни5 (Пигіпдіепбі5, що містить химерний ген за даним винаходом. 00204) У додаткових варіантах здійснення даного винаходу передбачається трансгенна рослинна клітина, що являє собою клітину дводольної рослини або клітину однодольної рослини. У додаткових варіантах здійснення клітина дводольної рослини вибрана з групи, що складається з клітини сої, клітини соняшнику, клітини томата, клітини культурного різновиду капусти, клітини бавовнику, клітини цукрового буряка та клітини тютюну. У додаткових варіантах здійснення клітина однодольної рослини вибрана з групи, що складається з клітини ячменю, клітини маїсу, клітини вівса, клітини рису, клітини сорго, клітини цукрової тростини та клітини пшениці. У деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачається сукупність клітин дводольних рослин або клітин однодольних рослин, що експресують білок Сгу за даним 60 винаходом, який кодується химерним геном за даним винаходом. В інших варіантах здійснення клітини в сукупності розташовані поряд з утворенням апопласта, і їх вирощують в умовах природного сонячного світла. 00205) В інших варіантах здійснення даного винаходу інсектицидний білок Сгу за даним винаходом експресується у вищому організмі, наприклад рослині. У даному випадку трансгенні рослини, експресуючи ефективні кількості інсектицидного білка, захищають себе від шкідників рослин, таких як комахи-шкідники. Коли комаха починає живитися на такій трансгенній рослині, вона також поїдає інсектицидний білок Сгу, що експресується. Це може утримувати комаху від подальшого вгризання в рослинну тканину або навіть може завдавати шкоди комасі або знищувати її. Полінуклеотид за даним винаходом вставляють у касету експресії, яка потім стабільно інтегрується в геном рослини. В інших варіантах здійснення полінуклеотид включений у непатогенний вірус, що самореплікується. Рослини, трансформовані згідно з даним винаходом, можуть являти собою однодольні або дводольні рослини, і вони включають без обмеження кукурудзу (маїс), сою, рис, пшеницю, ячмінь, жито, овес, сорго, просо, соняшник, сафлор, цукровий буряк, бавовник, цукрову тростину, олійний рапс, люцерну, тютюн, різновиди арахісу, овочеві культури, у тому числі батат, квасолю, горох, цикорій, латук, качанну капусту, цвітну капусту, броколі, ріпу, моркву, баклажан, огірок, редьку, шпинат, картоплю, томат, спаржу, цибулю, часник, різновиди дині, перець, селеру, гарбуз великоплідний, гарбуз звичайний, цукіні, плодові культури, включаючи яблуню, грушу, айву, сливу, вишню, персик, нектарин, абрикос, суницю, виноград, малину, ожину, ананас, авокадо, папаю, манго, банан, і спеціалізовані рослини, такі як Агарідорзі5, а також деревні рослини, такі як хвойні та листяні дерева. Переважно рослини за даним винаходом являють собою культурні рослини, такі як маїс, сорго, пшениця, соняшник, томат, хрестоцвіті, різновиди перцю, картопля, бавовник, рис, соя, цукровий буряк, цукрова тростина, тютюн, ячмінь, олійний рапс тощо. 00206) Після того як потрібний полінуклеотид був введений у конкретний вид рослини шляхом трансформації, за допомогою традиційних методик розмноження він може передаватися в межах даного виду або переходити в інші різновиди того самого виду, зокрема такі, що включають комерційні різновиди.
І00207| Полінуклеотид за даним винаходом експресується в трансгенних рослинах, зумовлюючи тим самим біосинтез відповідного білка Сту в трансгенних рослинах або у формі
Зо протоксину, або у формі зрілого токсину. Таким чином одержують трансгенні рослини з поліпшеним захистом урожаю за наявності натиску комах. Для експресії в трансгенних рослинах може бути необхідною модифікація та оптимізація нуклеотидних послідовностей за даним винаходом. Хоча в багатьох випадках гени мікроорганізмів можуть бути експресовані в рослинах на високих рівнях без модифікації, низький рівень експресії в трансгенних рослинах може бути зумовлений нуклеотидними послідовностями мікроорганізмів, що мають кодони, які не є переважними в рослинах. Як відомо з рівня техніки, для живих організмів характерні певні переваги щодо частоти використання кодонів, і тому кодони нуклеотидних послідовностей, описані в даному винаході, можуть бути змінені згідно з характерними для рослин перевагами зі збереженням при цьому амінокислот, які кодуються ними. Крім того, високий рівень експресії в рослинах, наприклад рослинах кукурудзи, найкраще досягається у випадку кодувальних послідовностей, які характеризуються щонайменше приблизно 35 95 умістом ОС, або щонайменше приблизно 45 95, або щонайменше приблизно 50 95, або щонайменше приблизно 60 95. Нуклеотидні послідовності мікроорганізмів, які характеризуються низьким умістом ОС, можуть експресуватися в рослинах на недостатньому рівні у зв'язку з наявністю мотивів АТТТА, які можуть дестабілізувати транскрипти, і мотивів ААТААА, які можуть зумовлювати неналежне поліаденілювання. Хоча певні послідовності генів можуть належним чином експресуватися як у видах однодольних, так і дводольних рослин, послідовності можна модифікувати з урахуванням певних переваг щодо кодонів і переваг щодо вмісту С для однодольних або дводольних рослин, оскільки було показано, що ці переваги відрізняються (Миїтау еї аі. Мисі. Асіає Кев. 17:477-498 (1989)). Крім того, нуклеотидні послідовності піддають скринінгу на наявність неправильних сайтів сплайсингу, які можуть викликати усічення транскрипту. Усі зміни, які необхідно виконати в межах нуклеотидних послідовностей, такі як ті, що описані вище, виконують із застосуванням добре відомих методик сайт-спрямованого мутагенезу, ПЛР і конструювання синтетичних генів за допомогою способів, описаних, наприклад, у патентах США
МоМо 5625136; 5500365 і 6013523. (00208) У деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачені синтетичні кодувальні послідовності або полінуклеотид, одержані згідно з процедурою, розкритою в патенті США Мо 5625136, включеному в даний документ за допомогою посилання. У цій процедурі використовують переважні для маїсу кодони, тобто один кодон, який найчастіше кодує дану бо амінокислоту в маїсі. Переважний для маїсу кодон, що кодує конкретну амінокислоту, може бути визначений, наприклад, на підставі відомих послідовностей генів маїсу. Наприклад, дані про частоту використання кодонів у маїсу для 28 генів із рослин маїсу можна знайти в Миггау еї аї.,
Мисівіїс Асід5 Незеатсп 17:477-498 (1989), розкриття якого включено в даний документ за допомогою посилання. Спеціально наведені як приклад синтетичні послідовності за даним винаходом, одержані із застосуванням кодонів, оптимізованих для маїсу, представлені під будь- якою із «ЕО ІЮ МО: 11-30. Відомо, що кодони, оптимізовані для експресії в рослині одного виду, також будуть виявляти свою функцію в рослинах інших видів, але, ймовірно, не тією ж мірою, як у виді рослини, для якої кодони були оптимізовані. Таким чином нуклеотидні послідовності можуть бути оптимізовані для експресії в будь-якій рослині. Слід розуміти, що вся нуклеотидна послідовність або будь-яка її частина можуть бути оптимізованими або синтетичними. Тобто полінуклеотид може містити нуклеотидну послідовність, яка частково є нативною послідовністю та частково є послідовністю з оптимізованими кодонами.
І00209| Для ефективної ініціації трансляції може бути необхідною модифікація послідовностей, що прилягають до ініціюючого метіоніну. Наприклад, їх можна модифікувати шляхом включення послідовностей, які, як відомо, є ефективними в рослинах. «Чо5пПі запропонував придатну консенсусну послідовність для рослин (МАК 15:6643-6653 (1987), а
СіІопестесп пропонує додаткову консенсусну послідовність, що є ініціатором трансляції (каталог 1993/1994, сб. 210). Ці консенсусні послідовності є придатними для використання з нуклеотидними послідовностями за даним винаходом. Послідовності вбудовують у конструкції, що містять нуклеотидні послідовності, вище та включно АТО (при цьому друга амінокислота залишається немодифікованою) або альтернативно вище та включно ТС, що розташовується після АТО (із можливістю модифікування другої амінокислоти трансгена). 00210) Послідовності, що кодують новий білок Сгу за даним винаходом, або у вигляді їхньої нативної послідовності, або у вигляді синтетичних послідовностей, як описано вище, можуть бути функціонально пов'язані з багатьма промоторами для експресії в рослинах, включаючи конститутивні, індуковані, регульовані в часі, регульовані в процесі розвитку, хімічно регульовані, тканинопереважні і тканиноспецифічні промотори, для одержання молекул рекомбінантних ДНК, тобто химерних генів. Вибір промотора буде розрізнятися залежно від часових і просторових вимог для експресії, а також залежно від цільових видів. Таким чином,
Зо переважною є експресія нуклеотидних послідовностей за даним винаходом у листках, у квітконіжках або стеблах, у колоссі, у суцвіттях (наприклад, колосках, волотях, початках тощо), у коренях або паростках. Однак у багатьох випадках потрібен захист від більш ніж одного типу комахи-шкідника, і відповідно бажаною є експресія у декількох тканинах. Хоча, як було показано, багато промоторів із дводольних рослин функціонують в однодольних рослинах, і навпаки, у міру можливості промотори дводольних вибирають для експресії у дводольних рослинах, а промотори однодольних вибирають для експресії в однодольних рослинах. Однак не існує будь-яких обмежень щодо походження вибраних промоторів, достатньо того, що вони є функціональними в керуванні експресією нуклеотидних послідовностей у потрібній клітині. (00211) Придатні конститутивні промотори включають, наприклад, промотор СаМмМ 355 (5ЕО
ІЮО МО:1546; Одеї! єї аїЇ., Маїште 313:810-812, 1985); промотор АІб669 Агабрідорзіє (ЗЕО ІЮ
МО:1652; дивись публікацію згідно з РСТ Мо УМО 04081173А2); промотор Шрі 1 маїсу (Спгібїепзеп еї аї., Ріапі Мої. Віої. 18:675-689, 1992); актину рису (МеБЕїгоу еї аї., Ріапі СеїІ 2:163-171, 1990);
РЕМИ (І аві єї аї!., Тнеог. Аррі. Сепеї. 81:581-588, 1991); 195 Саму (Міївзоп еї аї., Ріузіої!. Ріапі 100:456-462, 1997); 2052 (де Раїег єї аї., Ріапі У Мометрбег; 2(6):837-44, 1992); убіквітину (Співіепзеп еї аї., Ріапі Мої. Віої. 18: 675-689, 1992); циклофіліну рису (Виспйої? еї аї., Ріапі Мо!
ВіоІ. 25(5):837-43, 1994); гістону НЗ маїсу (І ереїй еї аІ., Мої. Сеп. Сепеї. 231: 276-285, 1992); актину 2 (Ап еї аї., Ріапі 9. 10(1);5107-121, 1996), конститутивний промотор кореневого кінчика
СТ2 (5ЕО ІЮ МО:1535; див. також заявку згідно з РСТ Мо 1 /2005/000627) і синтетичний Зирег
МАЗ5 (МІ еї аї., Те Ріапі дошттаї 7: 661-76, 1995). Інші конститутивні промотори включають такі з патентів США МоМо 5659026, 5608149; 5608144; 5604121; 5569597: 5466785; 5399680; 5268463 і 5608142. Мо!їес. Віо!.
І00212| Тканиноспецифічні або тканинопереважні промотори, які використовуються для експресії послідовностей, що кодують новий білок Сгу за даним винаходом, у рослинах, зокрема маїсі, являють собою промотори, що керують експресією в корені, паренхімі, листку або пилку.
Придатні тканиноспецифічні промотори включають, але без обмеження, специфічні для листків промотори (Ггакі як описані, наприклад, у Хататоїйо еї аї., Ріапі .). 12:255-265, 1997; Кмоп еї аї.,
Ріапі РНузіої!. 105:357-67, 1994; Мататоїо еї аї., Ріапі Сеї! Рпувзіої. 35:773-778, 1994; Ссюоюг еї аї.,
Ріапі У). 3:509-18, 1993; Огосо вї аї., Ріапі Мої. Вісі. 23:1129-1138, 1993; та Маїхцока еї аї., Ргос.
Май. Асад. Осі. ОСОБА 90:9586-9590, 1993), переважні для насіння промотори (наприклад, із 60 специфічних для насіння генів (Зітоп, еї аї., Ріапі Мої. Віої. 5. 191, 1985; 5сопеїйй, еї аї., 9. Віої.
Спет. 262: 12202, 1987; Ва57с7уп5кКі, еї аї., Ріапі Мої. Віої. 14: 633, 1990), промотори альбуміну із бразильського горіха (Реагзоп' еї аї., Ріапі Мої. Віої. 18: 235-245, 1992), легуміну (ЕП5, еї аї.
Ріапі Мої. Віої. 10: 203-214, 1988), глютеліну (рис) (ТаКаїма, еї аІ., Мої. Сеп. Сепеї. 208: 15-22, 1986; ТаКаїма, єї аІ., РЕВЗ5 І ейів5. 221: 43-47, 1987), зеїну (МаїхкКе еї аї., Ріапі Мої Віої, 143).323-32 1990), парА (5іаїІрего, еї а!., Ріапіа 199: 515-519, 1996), БРА пшениці (АїІбапієїа!, Ріапі Сеїї, 9: 171-184, 1997), олеозину соняшнику (Сиптітпіп5, еїаІ.,, Ріапі Мої. ВіоІї. 19: 873-876, 1992)|, специфічні для ендосперму промотори Інаприклад, І МУМ ії НМУУ пшениці, глютеніну-1 (Мої Сеп
Сепеї 216:81-90, 1989; МАВ 17:461-2), гліадинів а, Б ії д пшениці (ЕМВОЗ3:1409-15, 1984), промотор І ячменю, гордеїну В1, С, О ячменю (Пвеог Аррі Сеп 98:1253-62, 1999; Ріапі .) 4:343- 55, 1993; Мої Сеп Сепеї 250:750-60, 1996), ООЕ ячменю (Мепа 6ї аї., ТНе Ріапі дошигпаї, 116(1): 53-62, 1998), Ві22 (ЕРО9106056.7), синтетичний промотор (Місепіе-Саграіфоза єї аї., Ріапі 4). 13: 629-640, 1998), промотор проламіну МЕРЗЗ рису, глобуліну СІБ-1 рису (Уми еї аї., Ріапі СеїЇ
Рпузіоіоду 39(8) 885-889, 1998), альфа-глобуліну КЕВ/ОНР-1 рису (МакКавзе еї аї. Ріапі Мої. Віо|. 33: 513-522, 1997), РР АОР-глюкози рису (Тгап5 Кез 6:157-68, 1997), промотор гена родини Е5К маїсу (Ріапі У 12:235-46, 1997), гамма-кафірину сорго (Ріапі Мої. Віо! 32:1029-35, 1996)|, зародок- специфічні промотори Інаприклад, О5НІ рису (зай еї аї., Ргос. Маїї. Асад. Зсі. ОБА, 93: 8117- 8122), КМОХ (Розіта-Наагзта ої аї, Ріапі Мої. Віої. 39:257-71, 1999), олеозину рису (уми еї аї, ».
Віоспет., 123:386, 1998)), квітка-специфічні промотори Інаприклад, АЇРКРА, хален-синтази (сНи5А) (Мап дег Меєег, вї аї., Ріапі Мої. Вісі. 15, 95-109, 1990), І АТ52 (Туеї! євї аЇ., Мої. Сеп Сепеї. 217:240-245; 1989), апетала-3; репродуктивних тканин рослини Інаприклад, промотори ОБМАЮО5 (заявка на патент США Мо 2007/0006344)|. (00213) Нуклеотидні послідовності за даним винаходом також можуть експресуватися під контролем промоторів, які регулюються хімічним шляхом. Це забезпечує можливість синтезу білків Сту за даним винаходом тільки у випадку оброблення культурних рослин індукувальними хімічними речовинами. Приклади такої технології хімічної індукції експресії генів докладно описані в публікації заявки ЕР 0332104 і патенті США Мо 5614395. В одному варіанті здійснення хімічно регульований промотор являє собою промотор РЕ-1а тютюну.
І00214| Інша категорія промоторів, які використовуються в даному винаході, включає промотор, який індукується пораненням. Були описані численні промотори, які експресуються в
Зо ділянках поранення, а також у ділянках інфікування фітопатогеном. В ідеальному випадку такий промотор повинен активуватися тільки локально в ділянках інвазії комах, і таким чином інсектицидні білюи накопичуються лише в клітинах, де необхідний синтез інсектицидних білків для знищення комахи-шкідника, що нападає. Приклади промоторів цього типу включають такі промотори, описані у ЗЇаптога еї аІ. Мої. Сеп. Сепеї. 215:200-208 (1989), Хи єї аї. Ріапі Мо!ес.
ВіоІ. 22:573-588 (1993), | одетапп єї аї. Ріапі Сеї! 1:151-158 (1989), ВоНптеїієг 8 І ейіє, Ріапі
Моїес. Віої. 22:783-792 (1993), Нігек єї а. Ріапії Моїес. Віої. 22:129-142 (1993), і УМагег еї а. Ріапі
У. 3:191-201 (1993). (00215) Необмежувальні приклади промоторів, що зумовлюють тканиноспецифічні патерни експресії, які використовуються в даному винаході, включають специфічні для зеленої тканини, специфічні для кореня, специфічні для стебла або специфічні для квітки. Промотори, які є придатними для експресії в зеленій тканині, включають множину промоторів, які здійснюють регуляцію генів, що беруть участь у фотосинтезі, і багато з них були клоновані як з однодольних, так і з дводольних рослин. Одним із таких промоторів є промотор РЕРС маїсу з гена фосфоенолкарбоксилази (Ниазреїй 5 СгцЇа, Ріапі Моїес. ВіоїІ. 12:579-589 (1989)). ІншИМ промотором специфічної для кореня експресії є промотор, описаний де Егатопа (РГЕВЗ 290:103- 106 (1991) або в патенті США Мо 5466785). ІншИЙ промотор, який використовується в даному винаході, являє собою специфічний для стебла промотор, описаний у патенті США Мо 5625136, який у природних умовах керує експресією гена ігрА маїсу.
ІЇ00216| Додатково до вибору придатного промотора конструкціям для експресії інсектицидного токсину в рослинах необхідний відповідний термінатор транскрипції, який буде функціонально пов'язаний нижче від гетерологічної нуклеотидної послідовності. Декілька таких термінаторів доступні та відомі в даній галузі техніки (наприклад, ті із Самум, Е9 із гро5). У контексті даного винаходу можна використовувати будь-який доступний термінатор, про який відомо, що він функціонує в рослинах.
І00217| У касети експресії, описані в даному винаході, можна вводити множину інших послідовностей. Вони передбачають послідовності, які, як показано, посилюють експресію, такі як інтронні послідовності (наприклад, із АНІ і бгоп7еї) і вірусні лідерні послідовності (наприклад, із ТММ, МСММ і АММ).
І00218| Переважним може бути націлювання експресії нуклеотидних послідовностей за бо даним винаходом у різні клітинні локалізації в рослині. У деяких випадках може бути бажаною локалізація в цитозолі, тоді як в інших варіантах здійснення переважною може бути локалізація у певній субклітинній органелі. Для здійснення даного винаходу на практиці можна використовувати будь-який механізм націлювання генних продуктів, наприклад, у рослинах, і, як відомо, такі механізми існують у рослинах, і послідовності, що регулюють функціонування таких механізмів, були описані доволі докладно. Були охарактеризовані послідовності, які забезпечують націлювання генних продуктів в інші компартменти клітини. Амінокінцеві послідовності можуть зумовлювати націлювання білка, що становить інтерес, у будь-який компартмент клітини, такий як вакуоля, мітохондрія, пероксисома, білкові тільця, ендоплазматичний ретикулум, хлоропласт, крохмальне зерно, амілопласт, апопласт або клітинна стінка рослини (наприклад, Опдег еї. а). Ріапі Моїес. Віої. 13: 411-418 (1989); Ноде!з ві. а!. (1985) Ргос. Маї!. Асад. 5сі. ОБА 82: 6512-651; патент США Мо 7102057; УМО 2005/096704, усі з яких включені в даний документ за допомогою посилання. Необов'язково сигнальна послідовність може являти собою М-кінцеву сигнальну послідовність із м/аху, М-кінцеву сигнальну послідовність із гамма-зеїну, домен, що зв'язує крохмаль, С-кінцевий домен, який зв'язує крохмаль, послідовність, що націлює в хлоропласт, яка забезпечує доставляння зрілого білка в хлоропласт (Соптаї еї. а. (1988) 9. Віої. Спет. 263: 15104-15109; мап деп Вгоеск, евї. аї. (1985) Маїйге 313: 358-363; патент США Мо 5639949), або сигнальну послідовність секреції з клітин алейронового шару (Коепіег 5 Но, Ріапі СеїІ 2: 769-783 (1990)). Крім того, амінокінцеві послідовності разом із карбоксикінцевими послідовностями зумовлюють націлювання генних продуктів у вакуолю (Зпіп5Ппі еї. аі. (1990) Ріапі Моїес. Віої. 14: 357-368). В одному варіанті здійснення вибрана сигнальна послідовність включає відомий сайт розщеплення, і під час конструювання злиття враховуються будь-які амінокислоти після сайту(-ів) розщеплення, необхідні для розщеплення. У деяких випадках ця вимога може бути виконана шляхом додавання невеликої кількості амінокислот між сайтом розщеплення та АТО трансгена або, як альтернатива, шляхом заміщення деяких амінокислот у межах послідовності трансгена. Такі методики конструювання добре відомі з рівня техніки й однаково застосовні до будь-якого клітинного компартмента.
І00219| Буде зрозуміло, що описані вище механізми націлювання в клітині можна застосовувати не тільки в поєднанні з когнатними для них промоторами, але також у поєднанні
Зо з гетерологічними промоторами, так що специфічне завдання націлювання в клітині здійснюється під транскрипційним контролем промотора, що характеризується патерном експресії, відмінним від такого для промотора, з якого одержаний націлювальний сигнал.
Трансформація рослин
І00220| Процедури здійснення трансформації рослин є добре відомими (та загальноприйнятими у рівні техніки та описані в літературі з усіх поглядів. Необмежувальні приклади способів трансформації рослин включають трансформацію за допомогою доставляння нуклеїнових кислот, опосередкованого бактеріями (наприклад, через
АдгоБрасіегішт), доставляння нуклеїнових кислот, опосередкованого вірусами, доставляння нуклеїнових кислот, опосередкованого карбідом кремнію або мікроголками з нуклеїновими кислотами, доставляння нуклеїнових кислот, опосередкованого ліпосомами, мікроін'єкцію, бомбардування мікрочастинками, трансформацію, опосередковану фосфатом кальцію, трансформацію, опосередковану циклодекстринами, електропорацію, трансформацію, опосередковану наночастинками, обробку ультразвуком, інфільтрацію, поглинання нуклеїнових кислот, опосередковане РЕС, а також будь-який інший електричний, хімічний, фізичний (механічний) або біологічний механізм, який забезпечує введення нуклеїнової кислоти в рослинну клітину, включаючи будь-яку їх комбінацію. Загальні посібники щодо різноманітних способів трансформації рослин, відомих у даному рівні техніки, включають МікКі еї аї. (Ргоседигев ог Іпігодисіпд Еогеідп ОМА іпіо Ріапіє" у Меїйодз5 іп Ріапі МоїІесціаг Віоіосду апа
ВіотесппоЇоду, СІїСК, В. К. і Тпотрзоп, 4. Е., Еаз. (СКС Ргезв5, Іпс., Воса Каїйоп, 1993), раде5 67- 88) і Какожослгу-Тго|апому5Ка (Сеїї. Мої. Віо!. І еїї. 7:849-858 (2002)). (002211) Для трансформації, опосередкованої Адгорасіегішт, придатними є бінарні вектори або вектори, які несуть щонайменше одну граничну послідовність Т-ЮОМА, тим часом як для прямого перенесення генів (наприклад, за допомогою бомбардування частинками тощо) є придатним будь-який вектор, і при цьому можна використовувати лінійну ДНК, що містить тільки конструкцію, яка становить інтерес. У випадку прямого перенесення генів можна використовувати трансформацію за допомогою одного виду ДНК або котрансформацію (Зеспоснег" єї а!., Віоїесппоіоду 4:1093-1096 (1986)). У випадку як прямого перенесення генів, так і перенесення, опосередкованого Адгобасіегішт, трансформацію зазвичай (але необов'язково) виконують із селектовним маркером, який може являти собою засіб для позитивного вибору 60 (фосфоманозоізомеразу), що забезпечує стійкість до антибіотика (канаміцину, гігроміцину або
Зо метотрексату) або гербіциду (гліфосату або глюфосинату). Проте вибір селектовного маркера не є критично важливим для даного винаходу.
І00222| Трансформація, опосередкована АдгоБрасіегішт, є широко використовуваним способом трансформації рослин, у зв'язку з його високою ефективністю трансформації та у зв'язку з його широким застосуванням щодо багатьох різних видів. Як правило, трансформація, опосередкована Адгобасіегішт, передбачає перенесення бінарного вектора, що несе чужорідну
ДНК, яка становить інтерес, у відповідний штам Адгобасіегійт, що може залежати від набору мії-генів штаму-хазяїна Адгорасіегішт, розташованого або на корезидентній Ті-плазміді, або у хромосомі (ОКпезх еї аї. (1993) Ріапі СеїЇ 5:159-169). Перенесення рекомбінантного бінарного вектора в Адгобасіегішт можна виконувати за допомогою методики трибатьківського схрещування з використанням ЕбспПегіспіа соїї, яка несе рекомбінантний бінарний вектор, хелперного штаму Е. соїї, що несе плазміду, яка здатна мобілізувати рекомбінантний бінарний вектор у цільовому штамі Адгобасієегцт. Як альтернатива, рекомбінантний бінарний вектор можна переносити в Адгорасіегішт шляхом трансформації нуклеїновою кислотою (Нобїдеп 5
М ШПтіїгег (1988) Мисієїс Асіа5 Нев. 16:9877).
І00223| Дводольні, а також однодольні можна трансформувати з використанням
Адгорасіегішт. Способи для опосередкованої Адгобасіегішт трансформації рису включають добре відомі способи для трансформації рису, такі як описані в будь-чому з наступного: заявка на європейський патент ЕР 1198985 А1, АІдетйа апа Ноддез (Ріапіа 199: 612-617, 1996); Снап еї а. (Ріапі Мої Віо! 22 (3): 491-506, 1993), Нівї єї аї. (Ріапі У 6 (2): 271-282, 1994), розкриття яких включені в даний документ за допомогою посилання, немов вони повністю викладені. У випадку трансформації кукурудзи переважним способом є описаний або в Іхпіда еї аї. (Маї. Віоїесппої 14(6): 745-50, 1996), або у Егате еї аї. (Ріапі Рпузіої 129(1): 13-22, 2002), розкриття яких включені в даний документ за допомогою посилання, немов вони повністю викладені. Указані способи також описані як приклад у В. Уепез еї аї., Тесппідце5 Тог бепе Тгапвтег, у Тгапздепіс
Ріапів, Мої. 1, Епдіпеегіпду апа Шії2гайоп, єдв. 5. Ю. Кипа і В. Ми, Асадетіс Ргезз (1993) 128-143 і в Роїгуки5 Аппи. Кему. Ріапі Рпузіої. Ріапі Моїес. Віо!. 42 (1991) 205-225). Нуклеїнові кислоти або конструкт, що підлягають експресії, переважно клонують у вектор, який є придатним для трансформації Адгобасіегійт іштегасіеп5, наприклад рВіп19 (Вемап еї аї., Мисі. Асіа5 Кев. 12
Зо (1984) 8711). Агробактерії трансформовані таким вектором, у подальшому можна використовувати у відомому способі трансформації рослин, таких як рослин, що використовуються як модель, такі як Агарідорзі5, або сільськогосподарських культур, таких як, наприклад, рослини тютюну, наприклад, за допомогою занурення подрібнених листків або нарубаних листків у розчин агробактерій і подальшого культивування їх у придатному середовищі. Трансформація рослин за допомогою Адгобрасіегішт їшптеїасіеп5 описана, наприклад, Надеп апа УМіШтійгег у Мисі. Асій Кевх. (1988) 16, 9877, або відома, зокрема, із Е. КЕ.
МУпіе, Месіог5 ог Сепе Тгапвіег іп Ніднег Ріапіє; у Тгапздепіс Ріапі5, Мої. 1, Епдіпеегіпд апа
МШігайоп, ев. 5. О. Кипа і В. ММи, Асадетіс Ргезв, 1993, рр. 15-38. (00224| Трансформація рослини за допомогою рекомбінантного Адгорасієгішт зазвичай включає спільне культивування АдгоБрасіегішт з експлантатами рослини та проводиться відповідно до способів, добре відомих із рівня техніки. Трансформовану тканину регенерують на селективному середовищі, що містить маркер стійкості до антибіотиків або гербіцидів між граничними послідовностями Т-ОМА бінарної плазміди. (00225) Як обговорювалося вище, інший спосіб здійснення трансформації рослин, частин рослин і рослинних клітин включає впровадження інертних або біологічно активних частинок у рослинні тканини та клітини. Див., наприклад, патенти США МоМо 4945050; 5036006 і 5100792.
Загалом цей спосіб включає впровадження в рослинні клітини інертних або біологічно активних частинок в умовах, ефективних для проникнення крізь зовнішню поверхню клітини та можливості включення в її внутрішню частину. Під час використання інертних частинок вектор можна вводити в клітину шляхом покривання частинок вектором, що містить нуклеїнову кислоту, яка становить інтерес. Альтернативно клітина або клітини можуть бути оточені вектором таким чином, щоб вектор переносився у клітину слідом за частинкою. Біологічно активні частинки (наприклад, висушену дріжджову клітину, висушену бактерію або бактеріофаг, кожен(кожна) з яких містить(-ять) одну або декілька нуклеїнових кислот, які підлягають введенню) також можна впроваджувати в рослинну тканину.
І00226| В інших варіантах здійснення полінуклеотид за даним винаходом можна безпосередньо вводити в геном пластид шляхом трансформації. Основна перевага трансформації пластид полягає в тому, що пластиди, як правило, здатні експресувати бактеріальні гени без істотної модифікації, причому пластиди здатні експресувати декілька бо відкритих рамок зчитування під контролем одного промотора. Технологія трансформації пластид докладно описана в патентах США МоМо 5451513, 5545817 і 5545818, у заявці згідно з
РСТ Мо УМО 95/16783 та в МевВгіае еї а. (1994) Ргос. Маїї. Асад. Зсі. ОБА 91, 7301-7305. Основна методика трансформації хлоропластів включає введення ділянок клонованої пластидної ДНК, що фланкують селектовний маркер, разом із геном, що становить інтерес, у придатну цільову тканину, наприклад, із застосуванням біолістики або трансформації протопластів (наприклад, трансформації, опосередкованої хлоридом кальцію або РЕС). Фланкувальні ділянки розміром 1- 1,5 т.о., які називаються націлювальними послідовностями, сприяють гомологічній рекомбінації з геномом пластид і таким чином забезпечують заміщення або модифікацію специфічних ділянок пластому. Спочатку як селектовний маркер для трансформації можна застосовувати точкові мутації в 165 ГАМА і генах гре12 хлоропластів, що надають стійкості до спектиноміцину або стрептоміцину (мар, 7., НаідиКіем'с7, Р., і Маїїда, Р. (1990) Ргос. Май). Асай. сі. ОБА 87, 8526-8530; єтацйб, У. М., і Маїїда, Р. (1992) Ріапі Сеї! 4, 39-45). Наявність сайтів клонування між даними маркерами дає змогу створювати вектор, націлений на пластиди, для введення чужорідних генів (5Фациб, 9.М., і Маїїда, Р. (1993) ЕМВО .. 12, 601-606). Суттєве підвищення частоти трансформації можна одержати шляхом заміщення рецесивних генів ГЕМА або г-білка, що забезпечують стійкість до антибіотиків, на домінантний селектовний маркер, бактеріальний ген аайА, що кодує фермент аміноглікозид-3'-аденілтрансферазу, що знешкоджує спектиноміцин (5маб, 7., і Маїїда, Р. (1993) Ргос. Маї). Асад. зЗсі. ОБА 90, 913-917). Раніше цей маркер успішно використовували для трансформації геному пластид зеленої водорості
Спіатудотопазєх геїіппагайії з високою частотою (Соїд5сптід-Сіептопі, М. (1991) Мисі. Асіаз Везв. 19:4083-4089). Інші селектовні маркери, які використовують для трансформації пластид, відомі з даного рівня техніки, і вони включені в обсяг даного винаходу. Як правило, для досягнення стану, за якого всі пластиди є однаковими, необхідно близько 15-20 циклів поділу клітин після трансформації. Під час експресії в пластидах, за якої гени вставлені за допомогою гомологічної рекомбінації у всі декілька тисяч копій кільцевого пластидного геному, наявного в кожній рослинній клітині, використовують перевагу великої кількості копій порівняно з генами, що експресуються в ядрі, що допускає рівні експресії, які легсо можуть перевищувати 10 905 загальної кількості розчинних рослинних білків. В одному варіанті здійснення полінуклеотид за даним винаходом може бути вставлений у вектор, націлений на пластиди, і введений у геном
Зо пластид потрібної рослини-хазяїна шляхом трансформації. Таким чином, можна одержати рослини, гомопластичні щодо геномів пластид, які містять нуклеотидну послідовність за даним винаходом, здатні експресувати полінуклеотид на високому рівні.
І00227| Способи відбору трансформованих трансгенних рослин, рослинних клітин або культур рослинних тканин є звичайними в рівні техніки та можуть застосовуватися в способах даного винаходу, передбачених у даному документі. Наприклад, рекомбінантний вектор за даним винаходом також може включати касету експресії, що містить нуклеотидну послідовність селектовного маркера, який можна використовувати для відбору трансформованої рослини, частини рослини або рослинної клітини. Термін "селектовний маркер", використовуваний у даному документі, означає нуклеотидну послідовність, яка у разі експресії надає відмінного фенотипу рослині, частині рослини або рослинній клітині, що експресує даний маркер, і таким чином дає змогу відрізняти ці трансформовані рослини, частини рослин або рослинні клітини від тих, які не мають маркера. Така нуклеотидна послідовність може кодувати або селектовний маркер, або маркер, що піддається скринінгу, залежно від того, чи надає маркер ознаку, за якою можна провести відбір за допомогою хімічних засобів, таких як селективний засіб (наприклад, антибіотик, гербіцид тощо), або від того, чи є маркер просто ознакою, яку можна ідентифікувати шляхом спостереження або тестування, такого як скринінг (наприклад, ознакою, що визначається в К-локусі). Звісно, існує багато прикладів придатних селектовних маркерів, які відомі з рівня техніки та можуть використовуватися в касетах експресії, описаних у даному документі.
ІЇ00228| Приклади селектовних маркерів включають без обмежень нуклеотидну послідовність, що кодує пео або прі, які надають стійкості до канаміцину, 5418 тощо (Роїгуки5 еї аІ. (1985) Мої. Сеп. Сепеї. 199:183-188); нуклеотидну послідовність, яка кодує Баг, що надає стійкості до фосфінотрицину; нуклеотидну послідовність, яка кодує змінену /-5- енолпірувілшикімат-З-фосфатсинтазу (ЕР5Р), що надає стійкості до гліфосату (Ніпспеє еї аї. (1988) Віоїеси. 6:915-922); нуклеотидну послідовність, яка кодує нітрилазу, таку як рхп із
КіІерзіеІа о7аєпає, що надає стійкості до бромоксинілу (ЗіаїКег еї аї. (1988) бсіепсе 242:419- 423); нуклеотидну послідовність, яка кодує змінену ацетолактатсинтазу (АГ5), що надає стійкості до імідазолінону, сульфонілсечовини або інших хімічних речовин, що інгібують АЇ 5 (заявка на європейський патент ЕР Мо 154204); нуклеотидну послідовність, яка кодує стійку до бо метотрексату дигідрофолатредуктазу (ОНЕК) (ТпйШеї еї аЇ. (1988) 9. Віої. Спет. 263:12500-
12508); нуклеотидну послідовність, що кодує далапондегалогеназу, яка надає стійкості до далапону; нуклеотидну послідовність, що кодує манозо-б-фосфатізомеразу (яка також називається фосфоманозоіїзомеразою (РМІ)), що надає здатності до метаболізму манози (патенти США МоМо 5767378 і 5994629); нуклеотидну послідовність, яка кодує змінену антранілатсинтазу, що надає стійкості до 5-метилтриптофану; або нуклеотидну послідовність, яка кодує прі, що надає стійкості до гігроміцину. Фахівець у даній галузі здатен вибрати придатний селектовний маркер для використання в касеті експресії за даним винаходом. (00229) Додаткові селектовні маркери включають без обмеження нуклеотидну послідовність, яка кодує ВД-глюкуронідазу або цідА (505), що кодує фермент, для якого відомі різні хромогенні субстрати; нуклеотидну послідовність К-локусу, що кодує продукт, який регулює продукування антоціанінових пігментів (червоного кольору) у рослинних тканинах (ОеїПарогіа еї аї., "МоІесшаг сіопіпу ої Ше таї?е В-п| аіПеїе Бу мапзрозоп-їіаддіпуд мій Ас," 263-282, у Спготозоте БігисішШге апа Еипсійоп: Ітрасі ої Мем Сопсерів, 181п 5іадієгї Сепеїїсв Зутрозійт (Сивіаїзоп 8 Арреї!5 едв5.,
Ріепит Ргез55 1988)); нуклеотидну послідовність, яка кодує Д-лактамазу, фермент, для якого відомі різні хромогенні субстрати (наприклад, РАБАС, хромогенний цефалоспорин) (Змйісійе (1978) Ргос. Маї). Асад. сі. ОБА 75:3737-3741); нуклеотидну послідовність, яка кодує хуЇЕ, що кодує катехолдіоксигеназу (7иКомеКу єї аі. (1983) Ргос. Май). Асад. 5сі. ОБА 80:1101-1105); нуклеотидну послідовність, яка кодує тирозиназу, фермент, здатний окиснювати тирозин до роРА та допахінону, який, зі свого боку, конденсується з утворенням меланіну (Каї? еї а!. (1983)
У. Сп. МісгоріоІї. 129:2703-2714); нуклеотидну послідовність, яка кодує ВД-галактозидазу, фермент, для якого існують хромогенні субстрати; нуклеотидну послідовність, яка кодує люциферазу (Ішх), що забезпечує виявлення за допомогою біолюмінесценції (Оу" еї аї. (1986)
Зсієпсе 234:856-859); нуклеотидну послідовність, яка кодує екворин, який може бути застосований у виявленні чутливої до кальцію біолюмінесценції (Ргазпег еї аї!. (1985) Віоспет.
Віорпуб. Нев. Сотт. 126:1259-1268); або нуклеотидну послідовність, яка кодує зелений флуоресцентний білок (Мієад7 еї аї!. (1995) Ріапі СеїЇ Керогів5 14:403-406). Фахівець у даній галузі здатен вибрати придатний селектовний маркер для використання в касеті експресії за даним винаходом.
І00230| Додатково, як добре відомо з рівня техніки, цілі трансгенні рослини можна
Зо регенерувати із трансформованих рослинних клітин, культур рослинних тканин або культивованих протопластів за допомогою будь-якої із багатьох відомих методик. Регенерація рослин із рослинних клітин, культури рослинної тканини або культивованих протопластів описана, наприклад, в Емапз еї аї. (Напароок ої Ріапі СеїЇ Сикиге5, Мої. 1, МасМмійап Рибіїєпіпод
Со. Мем/ МогК (1983)) і Мабвії І. К. (еа.) (СеїЇ Сийиге апа 5отаїйіс СеїЇ Сепеїіс5 ої Ріапі5, Асаай.
Ргезв, Опапао, Мої. І (1984), ії Мої. ІІ (1986)). 002311) Крім того, вищеописані властивості генів, забезпечені за допомогою методів генної інженерії у трансгенному насінні та рослинах, частинах рослини або рослинних клітинах за даним винаходом, можуть передаватися шляхом статевого розмноження або вегетативного росту та, відповідно, можуть підтримуватися та спадково передаватися рослинам-нащадкам. Як правило, під час підтримування та спадкового передавання використовують відомі сільськогосподарські способи, розроблені для відповідності конкретним цілям, такі як збір урожаю, сівба або обробка. (002321) Відповідно, полінуклеотид можна вводити в рослину, частину рослини або рослинну клітину за допомогою будь-якого з кількох способів, добре відомих із рівня техніки, як описано вище. Відповідно, не додержуються будь-якого конкретного способу введення одного або декількох полінуклеотидів у рослину, а, навпаки, можна використовувати будь-який спосіб, що забезпечує стабільну інтеграцію одного або декількох полінуклеотидів у геном рослини. Якщо потрібно ввести більш ніж один полінуклеотид, то відповідні полінуклеотиди можна зібрати як частину однієї молекули нуклеїнової кислоти або як окремі молекули нуклеїнових кислот і можна розташувати в межах тієї самої або різних молекул нуклеїнових кислот. Відповідно, введення полінуклеотидів у клітину, що становить інтерес, можна здійснювати під час однієї події трансформації, під час окремих подій трансформації або, наприклад, у рослини у вигляді частини протоколу схрещування.
І00233| Додаткові варіанти здійснення даного винаходу включають зібрані продукти, одержані з трансгенних рослин або їхніх частин за даним винаходом, а також перероблений продукт, одержаний із даних зібраних продуктів. Зібраний продукт може являти собою цілу рослину або будь-яку частину рослини, як розкрито в даному документі. Таким чином, у деяких варіантах здійснення необмежувальні приклади зібраного продукту включають насінину, плід, квітку або її частину (наприклад, пиляк, приймочку тощо), листок, стебло тощо. В інших 60 варіантах здійснення перероблений продукт включає без обмежень борошно тонкого помелу,
борошно грубого помелу, олію, крохмаль, крупу тощо, одержані із зібраної насінини або іншої частини рослини за даним винаходом, при цьому вказана насінина або інша частина рослини містять молекулу нуклеїнової кислоти/полінуклеотид/нуклеотидну послідовність за даним винаходом. (00234) В інших варіантах здійснення даного винаходу передбачений екстракт із трансгенної насінини або трансгенної рослини за даним винаходом, при цьому екстракт містить молекулу нуклеїнової кислоти, полінуклеотид, нуклеотидну послідовність або токсичний білок за даним винаходом. Екстракти з рослин або частин рослин можна одержати згідно з процедурами, добре відомими з рівня техніки (див. де Іа Тоїте еї аї!., Роса, Адгіс. Епмігоп. 2 (1):84-89 (2004);
Сшцідеї, Мисієїс Асіаз Вев. 22 (9): 1772-1773 (1994); Піріоп еї аї., Роса Адгіс. Іттип. 12:153-164 (2000)).
Інсектицидні композиції
І00235| У деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачена інсектицидна композиція, що містить білок Сту за даним винаходом у прийнятному з погляду сільського господарства носії. Вираз "прийнятний із погляду сільського господарства носій", використовуваний у даному документі, може включати природний або синтетичний, органічний або неорганічний матеріал, який об'єднаний з активним білком Сгту для сприяння його застосуванню щодо рослини або її частини або в рослині або її частині. Приклади прийнятних із погляду сільського господарства носіїв включають без обмеження порошки, дусти, пелети, гранули, аерозолі, емульсії, колоїди та розчини. Прийнятні з погляду сільського господарства носії додатково включають без обмеження інертні компоненти, диспергувальні засоби, поверхнево-активні речовини, допоміжні засоби, речовини для підвищення клейкості, клейкі речовини, зв'язувальні речовини або їх комбінації, які можна використовувати у складах, що використовують у сільському господарстві. Такі композиції можна застосовувати будь-яким способом, за допомогою якого пестицидні білки або інші засоби для контролю шкідників приводять у контакт із шкідниками. Відповідно, композиції можна наносити на поверхні рослин або частини рослин, у тому числі на насіння, листя, квіти, стебла, бульби, коріння тощо. В інших варіантах здійснення рослина, що продукує білок Сгу за даним винаходом, іп ріапіа являє собою сільськогосподарський носій білка Сгу, що експресується.
Зо 00236) У додаткових варіантах здійснення інсектицидна композиція містить бактеріальну клітину або трансгенну бактеріальну клітину за даним винаходом, при цьому бактеріальна клітина або трансгенна бактеріальна клітина продукує білок Сту за даним винаходом. Таку інсектицидну композицію можна одержати шляхом висушування, ліофілізації, гомогенізації, екстрагування, фільтрування, центрифугування, осадження або концентрування культури
ВасшШив ІПигіпдіепвіз (ВО. Такі культури Ві можна піддавати відбиранню з групи штамів Ві, що складається з СО537, СО651, С0652, С0724, СОо801, С1079 і М2776, описаних нижче в прикладах, або трансгенних культур Ві. У додаткових варіантах здійснення композиція містить від приблизно 1 95 до приблизно 99 95 за вагою білка Сгу за даним винаходом.
І00237| Білки Сгу за даним винаходом можна використовувати в комбінації з іншими засобами для контролю шкідників для збільшення спектра цільових шкідників або для запобігання стійкості комах або керування нею. Відповідно, у деяких варіантах здійснення даного винаходу передбачена композиція, що забезпечує контроль одного або декількох шкідників рослин, при цьому композиція містить перший білок Сту за даним винаходом і другий засіб для контролю шкідників, відмінний від першого білка Сту. В інших варіантах здійснення композиція являє собою склад для місцевого нанесення на рослину. У ще одних варіантах здійснення композиція являє собою трансгенну рослину. У додаткових варіантах здійснення композиція являє собою комбінацію, що передбачає склад і трансгенну рослину, на яку він наноситься. У деяких варіантах здійснення склад містить перший білок Сгу за даним винаходом, якщо трансгенна рослина містить другий засіб для контролю шкідників. В інших варіантах здійснення склад містить другий засіб для контролю шкідників, якщо трансгенна рослина містить перший білок Стгу за даним винаходом. (00238) У деяких варіантах здійснення другий засіб для контролю шкідників може являти собою засіб, вибраний із групи, що складається з хімічного пестициду, такого як інсектицид, інсектицидного білка Васіййє5 Ійигіпдіепоіє (ВО, інсектицидного білка Хепогпарацв», інсектицидного білка РІПоїотпарацих5, інсектицидного білка Вгемірасійй5 Іагегозрогив, інсектицидного білка Васійи5 5рпаеєгісив5, інгібіторів протеаз (як серинових, так і цистеїнових типів), лектинів, альфа-амілази, пероксидази, холестериноксидази та молекули двониткової
РНК (азЕеМА). (00239) В інших варіантах здійснення другий засіб для контролю шкідників являє собою 60 хімічний пестицид, вибраний із групи, що складається з піретроїдів, карбаматів, неонікотиноїдів,
блокаторів натрієвих каналів нейронів, інсектгицидних макроциклічних лактонів, антагоністів гамма-аміномасляної кислоти (САВА), інсектицидних сечовин і міметиків ювенільного гормону.
В інших варіантах здійснення хімічний пестицид вибраний із групи, що складається з абамектину, ацефату, ацетаміприду, амідофлумету (5-1955), авермектину, азадирахтину, азинфос-метилу, біфентрину, бінфеназату, бупрофезину, карбофурану, хлорфенапіру, хлорфлуазурону, хлорпірифосу, хлорпірифос-метилу, хромафенозиду, клотіанідину, цифлутрину, бета-цифлутрину, цигалотрину, лямбда-цигалотрину, циперметрину, циромазину, дельтаметрину, діафентіурону, діазинону, дифлубензурону, диметоату, діофенолану, емамектину, ендосульфану, есфенвалерату, етипролу, фенотикарбу, феноксикарбу, фенпропатрину, фенпроксимату, фенвалерату, фіпронілу, флонікаміду, флуцитринату, тау- флювалінату, флуфенериму (ШК-50701), флуфеноксурону, фонофосу, галофенозиду, гексафлумурону, імідаклоприду, індоксакарбу, ізофенфосу, луфенурону, малатіону, метальдегіду, метамідофосу, метидатіону, метомілу, метопрену, метоксихлору, монокротофосу, метоксифенозиду, нітіазину, новалурону, новіфлумурону (ХОЕ-007), оксамілу, паратіону, паратіон-метилу, перметрину, форату, фозалону, фосмету, фосфамідону, піримікарбу, профенофосу, піметрозину, піридалілу, пірипроксифену, ротенону, спіносаду, спіромезифену (В5М 2060), сульпрофосу, тебуфенозиду, тефлубензурону, тефлутрину, тербуфосу, тетрахлорвінфосу, тіаклоприду, тіаметоксаму, тіодикарбу, тіосултап-натрію, тралометрину, трихлорфону та трифлумурону, алдикарбу, оксамілу, фенаміфосу, амітразу, хінометіонату, хлоробензилату, цигексатину, дикофолу, дієнохлору, етоксазолу, феназаквіну, оксиду фенбутатину, фенпропатрину, фенпіроксимату, гекситіазоксу, пропаргіту, піридабену та тебуфенпіраду. У ще інших варіантах здійснення хімічний пестицид вибраний із групи, що складається з циперметрину, цигалотрину, цифлутрину та бета-цифлутрину, есфенвалерату, фенвалерату, тралометрину, фенотикарбу, метомілу, оксамілу, тіодикарбу, клотіанідину, імідаклоприду, тіаклоприду, індоксакарбу, спіносаду, абамектину, авермектину, емамектину, ендосульфану, етипролу, фіпронілу, флуфеноксурону, трифлумурону, діофенолану, пірипроксифену, піметрозину та амітразу.
І00240| У додаткових варіантах здійснення другий засіб для контролю шкідників може являти собою один або декілька із будь-якого числа інсектицидних білків Васійи5 (пигіпдієпвів, у тому числі без обмеження білок Сгу, вегетативний інсектицидний білок (МІР) та інсектицидні химерні варіанти будь-якого з вищеперелічених інсектицидних білків. В інших варіантах здійснення другий засіб для контролю шкідників являє собою білок Сгу, вибраний із групи, що складається з СтуїАа, СтутАБ, СтутАс, СтутАй, СтуїтАе, СтутАтТ, СтутАд, СтутАпй, СтутАї, СтутАЇ,
Стуї!Ва, Сту1вВЬ, Сту!Вс, СтуїВа, СтуїВе, Стуї!Ві, Сту1їВо9, Сту!Ви, СтуїВі, СтуїСа, Сту1СбЬ, Сту!ра, Сту1орр, СтутОс, Стуїра, СтуїЕа, СтутЕБ, СтуїРа, Стуї1Рр, СтуїсСса, Суто, Сутїсс,
СтуїНа, СтуїНЬ, СтуїНс, СтутПа, СтулІв, СтутіІс, СтутіЯа, СтутІе, Стутії, СтутІід, Стуїда, Сту19р,
Стутус, Стуїуа, СтуїКа, Стуїїа, Сту!Ма, СтуїМа, Сту!МЬ, СтугАа, СтугАБ, СтугАс, СтугАа,
СтугАеє, СтугАЇї, Сту2гА9д, СтугАН, СтугАї, СтугАЇ), СтугАК, СтугАї, СтугВа, СтуЗзАа, СтуЗВа, СтузвВ,
СтуЗСа, Студ4Аа, СтудВа, Сту4Са, СтудСр, Студбс, СтубАа, СтубБАБ, СтубБАс, СтубБАй, СтубВа, СтубСа, Стубра, СтубЕа, СтубАа, СтубВа, Сту/Аа, Сту7АБ, Сту7Ас, Сту/Ва, Сту7ВЬ, Сту7Са,
Сту7Ср, Сту/Ора, Сту7/Еа, Сту/Ра, Сту/РЬ, Сту/Сса, Сту/ср, Сту/сс, Сту7Сса, Сту/На, Стула,
Сту7Уча, Сту/Ка, Сту/КЬ, Сту//а, СтувАа, СтувАЬ, СтувАс, СтувАй, СтувВа, Сту8Вр, Стув8Вс,
СтувСа, Стувра, СтувОр, СтувЕа, СтувЕРа, Стувса, СтувНа, Стувіа, Стувіб, Стувуа, СтувКа,
Стувко, Стуві а, СтувМа, СтувМа, СтувРа, СтувОа, СтувВа, Стувбза, СтувТа, СтудАа, СтуЗ9Ва,
Сту9ЗвВЬ, СтудСа, Студра, СтузОр, СтудОс, СтудЕа, Сту9ЕБ, Сту9Ес, СтуЗЕй, СтуЗ9Ее, Студ9гЕа,
СтуЗд9са, СтутбОАа, Стут1Аа, Сту!1Ва, Сту11ВБЬ, Стут12Аа,СтуїЗАа, Сту1ї4Аа, Сту14АБ, Стуї5Аа,
СтутбАа, Сту17Аа, Сту1!8Аа, Сту18Ва, Сту!8Са, Сту19Аа, Сту19Ва, Сту19Са, СтугоДа, СтугоВа,
СтугіАа, СтугіВа, СтугіСа, Стугіра, Сту21іЕа, СтугіГРа, СтугіСа, СтугіНа, Стуг2Аа, Стуг2 АБ,
Стуг2Ва, Стуг2вВБ, СтугзАа, СтугіАа, СтугаВа, СтугіСа, Стуг5Аа, СтугбАа, Стуг7Аа, Стуг8влАа, СтугЗАа, СтугоВа, СтуЗзОАа, СтуЗзОоВа, СтуЗзоСа, Стузора, СтузОрьЬ, СтуЗзОЕа, Стузога,
Стузоса,СтуЗзіАа, СтуЗз1 Ар, СтуЗз1тАс, СтуЗзт Ай, СтуЗзгАа, СтуЗз2АБВ, СтуЗз2Ва, СтуЗз2гСа, СтуЗз2СЬь,
Стузгра, СтуЗз2Еа, СтуЗ2ЕБ, СтуЗз2Ра, Стуз2гОса, СтуЗз2аНа, Стуз2НЬ, СтузЗагіІа, СтуЗзгоа, СтуЗ2Ка,
СтузЗаІ а, Стуз2Ма, СтуЗз2МЬ, Стуз2аМа, СтуЗзгоОа, СтуЗз2гРа, СтуЗзгдОа, СтуЗз2Ва, СтуЗз2г5а, СтуЗ2 Та,
СтузгОа, СтузЗАа, СтуЗзаАа, СтуЗ4Ар, СтузаАс, СтуЗзаВа, СтузбАа, СтуЗзБАБ, СтузБАс, СтуЗоВа, СтуЗбАа, СтуЗ37Аа, СтуЗзвАа, СтуЗзУАа, СтудоАа, СтудоВа, СтудоСа, Студора, Студ 1Аа, Сту4т АБ,
Студ1Ва, Сту42Аа, СтудЗАа, СтудЗВа, Сту4ЗСа, Сту43СЬ, СтудЗбс, СтудаАа, Студб5Аа, Сту4бАа
Сту4бАБ, Сту47Аа, СтудвАа, Сту4вАБ, Студ9Аа, Сту49АБр, СтубоАа, СтубОВа, СтубіАа, СтубглАа,
Стуб2Ва, СтубзЗАа, Стуб5ЗАБ, Стуб4Аа, Стуб4 Ар, СтубзаВа, Стубб5Аа, СтуббАа, Стуб7Аа, Стуб7 Ар,
СтубвАа, Стубз9Аа, Стуб9Ва, СтубоАа, СтубоВа, СтубіАа, Стуб2Аа, СтубЗАа, Стуб4Аа, СтуббАа,
СтгуббАа, Стгуб7Аа, СтгубвАа, СтубоАа, Стуб9АБ, Сту70Аа, Сту7/ОВа, Сту7ОВб, Сту/1Аа, Сту72Аа і
Сту7ЗАа. (002411 У додаткових варіантах здійснення другий засіб для контролю шкідників являє собою вегетативний інсектицидний білок Мір3, вибраний із групи, що складається з МірзАа1, МірзАа2г,
МірЗАаЗз, МірзАа4, мМірзАа5, МірзАаб, МірзАа7, МірзАав, МірзАа9, МірзАа10, МірзАа11, МірзАа12,
МірзАа13, МірзАа14, МірзАа15, МірзАа16, МірзАа17, МірзАа18, МірзАа19, МірзАаг20, МірзАа?д1,
МірзАа22, МірзАаг, МірзАаг24, МірзАаг25, МірзАа26б, МірзАа27, МірзАа28, МірзАаг29, МірзАазо,
МірзАаз1, МірзАаз2, МірзАа33, МірзАа34, МірзАаз5, МірзАаз6б, МірзАаз7, МірзАаз8, МірзАаз9,
МірзАа40, МірзАа41, МірзАа42, МірзАа43, МірзАа44, МірзАБІ, МірзАБ2, МірзАс1, Мірзда!,
Мірздаг, мМірзАеї!, МірзАйп, МірзАїТ2, МірзАїЗ, МірзА91, МірзАд2, МірзАдЗ НМ117633, МірзАадя4,
МірзА9д5, МірзАН'т, МірзВа!, МірзВа?2, мірзвь1, мірЗзвЬ2 і МірзвЬ3.
І00242| У ще додаткових варіантах здійснення перший білок Сгу за даним винаходом і другий засіб для контролю шкідників коекспресуються в трансгенній рослині. Такої коекспресії декількох пестицидних компонентів у тій самій трансгенній рослині можна досягнути шляхом одержання рослини, створеної за допомогою методів генної інженерії, яка містить і експресує всі необхідні гени. Як альтернатива, батьківська рослина 1 може бути одержана за допомогою методів генної інженерії для експресії білка Сгу за даним винаходом. Друга батьківська рослина 2 може бути одержана за допомогою методів генної інженерії для експресії другого засобу для контролю шкідників. Шляхом схрещування батьківської рослини 1 з батьківською рослиною 2 одержують рослин-нащадків, які експресують усі гени, введені в батьківські рослини 1 і 2. (00243) В інших варіантах здійснення даного винаходу передбачається трансгенна рослина з пакетованими ознаками, стійка до зараження шкідниками рослин, що містить послідовність
ДНК, яка кодує а5КМА для супресії основного гена в організмі цільового шкідника, та послідовність ДНК, яка кодує білок Стгу за даним винаходом, що виявляє біологічну активність проти цільового шкідника. Було повідомлено, що а5КМА є неефективними проти певних лускокрилих шкідників (Каіадорої еї аїЇ. 2002. 9. Віої. Спет. 277:468-494), ймовірно, через високий показник рН у середній кишці, що дестабілізує Я45ЕМА. Отже, у деяких варіантах здійснення, в яких цільовий шкідник є лускокрилим шкідником, білок Сту за даним винаходом функціонує для транзієнтного зниження показника рН у середній кишці, який забезпечує
Зо стабілізацію О5КМА, що спільно поглинається, роблячи 45ЕМА ефективною в сайленсингу генів- мішеней.
І00244| Крім забезпечення композиції в даному винаході передбачаються способи продукування білка Сгу, токсичного для лускокрилого шкідника. Такий спосіб передбачає культивування трансгенної клітини-хазяїна, відмінної від клітини людини, яка містить полінуклеотид, або химерний ген, або молекулу нуклеїнової кислоти, або рекомбінантний вектор за даним винаходом, в умовах, за яких клітина-хазяїн продукує білок, токсичний щонайменше для лускокрилого шкідника. У деяких варіантах здійснення трансгенна клітина- хазяїн, відмінна від клітини людини, являє собою рослинну клітину. У деяких інших варіантах здійснення рослинна клітина являє собою клітину маїсу. В інших варіантах здійснення умови, за яких вирощують рослинну клітину або клітину маїсу, включають природне сонячне світло. В інших варіантах здійснення трансгенна клітина-хазяїн, відмінна від клітини людини, являє собою бактеріальну клітину. У ще одних варіантах здійснення трансгенна клітина-хазяїн, відмінна від клітини людини, являє собою дріжджову клітину. (00245) В інших варіантах здійснення способу лускокрилий шкідник вибраний із групи, що складається з кукурудзяного метелика (Оз5ігіпіа пибіїа|і5), совки-іпсилон (Адгоїй5 ірзіоп), совки трав'яної (Зродорієга Ігидірегаа), американської кукурудзяної совки (Неїїсомегра 7еа), вогнівки цукрової тростини (Оіаїгаєа засспагаїї5), гусені совки оксамитових бобів (Апіїсагбіа деттацаї в), соєвої совки (СПпгузодеїхіє іпсішде5), вогнівки кукурудзяної південно-західної (Оіаїгаєа дгапаїозеїІа), західної бобової совки (Ріспіа аїЇбБісоб5іа), тютюнової совки (Неїїоїйів мігебзсепв), східного кукурудзяного метелика (О5ггіпіа Типпасаїї5), бавовникової совки (Неїїсомегра агтідега), вогнівки жовтої рисової (Спо 5ирргеззаїї5), рожевої стеблової совки (безатіа саїатівіів), вогнівки рисової (Спарпа|осгосі5 теаіпаїїв) та будь-якої їх комбінації. (00246) У додаткових варіантах здійснення способу химерний ген містить будь-яку із ЗЕО ІЮ
МО:1-140. У ще одних варіантах здійснення продукований білок містить амінокислотну послідовність під будь-якою із БЕО ІЮ МО: 31-40.
І00247| У деяких варіантах здійснення способу химерний ген містить нуклеотидну послідовність, кодон-оптимізовану для експресії в рослині. В інших варіантах здійснення химерний ген містить будь-яку із 5ЕБЕО ІЮ МО:11-20. У додаткових варіантах здійснення продукований білок містить амінокислотну послідовність під будь-якою із БЕО ІЮ МО:31-50.
І00248| У додаткових варіантах здійснення даного винаходу передбачений спосіб одержання стійкої до шкідників (наприклад, стійкої до комах) трансгенної рослини, який передбачає введення в рослину полінуклеотиду, химерного гена, рекомбінантного вектора, касети експресії або молекули нуклеїнової кислоти за даним винаходом, що містять нуклеотидну послідовність, яка кодує білок Сту за даним винаходом, де нуклеотидна послідовність експресується в рослині, за рахунок чого рослині надається стійкість щонайменше до лускокрилого шкідника, й одержання стійкої до шкідників трансгенної рослини. У деяких варіантах здійснення стійка до шкідників трансгенна рослина є стійкою до щонайменше кукурудзяного метелика (Об5ігіпіа пибрійаійв) або совки-іпсилон (Адгоїії5 ірбіоп) порівняно з контрольною рослиною, у якої відсутній полінуклеотид, химерний ген, рекомбінантний вектор, касета експресії або молекула нуклеїнової кислоти за даним винаходом. У деяких варіантах здійснення введення досягається шляхом трансформації рослини. В інших варіантах здійснення введення досягається шляхом схрещування першої рослини, яка містить химерний ген, рекомбінантний вектор, касету експресії або молекулу нуклеїнової кислоти за даним винаходом, із другою рослиною, що відрізняється. 00249) У деяких варіантах здійснення трансгенна рослина за даним винаходом, стійка до щонайменше кукурудзяного метелика (Об5ігіпіа пибіїаійє) або совки-іпсилон (Адгоїї5 ірзійоп), додатково є стійкою до щонайменше однієї додаткової комахи, де додаткова комаха включає без обмеження совку трав'яну (Зродорієга іїидірегда), американську кукурудзяну совку (Неїїсомегра 7єа), вогнівку цукрової тростини (Оіаїгаєа засспагаїї5), гусінь совки оксамитових бобів (Апіісагзіа деттайаїїй5), соєву совку (Спгузодеїхі5 іпсіцдев5), вогнівку кукурудзяну південно- західну (Оіаїгаєа дгапаїозеїІа), західну бобову совку (Ріспіа аїІрісоз5іа), тютюнову совку (Неїоїпіб мігезсеп5), східного кукурудзяного метелика (Оз5ігіпіа гигпасаїї5), бавовникову совку (Неїїсомегра аптідега), вогнівку жовту рисову (Спіїо зирргеззаїї5), рожеву стеблову совку (Зезатіа саІатівіів) або вогнівку рисову (Спарпа|осгосі5 теадіпаїї5) та будь-яку їх комбінацію.
І00250| У додаткових варіантах здійснення передбачений спосіб контролю щонайменше лускокрилої комахи-шкідника, такої як кукурудзяний метелик (О5ігіпіа пибіїаійє) або совка- іпсилон (Адгоїї5 ірзіп), при цьому спосіб передбачає доставляння в організм комах ефективної кількості білка Сту за даним винаходом. Для ефективного впливу білок Стгу спочатку потрапляє в
Зо організм комахи пероральним шляхом. Однак білок Сгу може доставлятися в організм комахи за допомогою багатьох відомих способів. Способи доставляння білка в організм комахи пероральним шляхом включають без обмеження забезпечення білка (1) у трансгенній рослині, при цьому комаха з'їдає (поглинає) одну або декілька частин трансгенної рослини, поглинаючи таким чином поліпептид, що експресується в трансгенній рослині; (2) у складеній білковій композиції(-ях), яку(-ї) можна наносити, наприклад, на поживне середовище комах або включати в його склад; (3) у білковій композиції(-ях), які можна наносити на поверхню, наприклад, шляхом обприскування поверхні частини рослини та які потім з'їдаються комахою через те, що комаха з'їдає одну або декілька підданих обприскуванню частин рослини; (4) у матриці приманки або (5) за допомогою будь-якої іншої відомої з рівня техніки системи доставляння білків. Таким чином, для доставляння токсичних білків Стгу за даним винаходом можна використовувати будь- який спосіб перорального доставляння в організм комахи. У деяких конкретних варіантах здійснення білок Сту за даним винаходом доставляють в організм комахи пероральним шляхом, при цьому комаха поїдає одну або декілька частин трансгенної рослини.
І00251| В інших варіантах здійснення білок Сту за даним винаходом доставляють в організм комахи пероральним шляхом, при цьому комаха поїдає одну або декілька частин рослини, підданих обприскуванню композицією, що містить білки Сту за даним винаходом. Доставляння композицій за даним винаходом на поверхню рослини можна здійснювати за допомогою будь- якого способу нанесення сполук, композицій, складів тощо на поверхні рослин, відомого фахівцям у даній галузі техніки. Деякі необмежувальні приклади доставляння на рослину або її частину або приведення в контакт із ними включають обприскування, обпилювання, посипання, розпилювання, зрошення туманом, дрібнодисперсне розприскування, розкидання, просочування, вприскування в грунт, введення в грунт, змочування (наприклад, оброблення коренів, грунту), заглиблення, поливання, нанесення покриття, вбирання в листя або стебла, внесення в міжряддя або оброблення насіння тощо та їх комбінації. Ці та інші процедури приведення рослини або її частини в контакт зі сполукою(-ами), композицією(-ями) або складом(-ами) добре відомі фахівцям у даній галузі техніки.
І00252| У додаткових варіантах здійснення даного винаходу передбачається спосіб контролю стійкої до СтутАБб лускокрилої комахи, що передбачає доставляння в організм комахи ефективної кількості інсектицидного білка, який характеризується щонайменше 80 95 60 ідентичністю із БЕО ІЮО МО:31 або 5ЕО ІО МО:32. В інших варіантах здійснення стійка до СтутлАБ комаха являє собою вогнівку цукрової тростини (Оіаїгаєа 5засспагаїїє). У ще одних варіантах здійснення інсектицидний білок містить 5ЕО ІЮ МО:З31, 5ЕО ІЮ МО:32, 5БЕО ІЮ МО:41 або 5ЕО ІЮ
МО:42. (00253) В інших варіантах здійснення даного винаходу передбачається спосіб запобігання розвитку стійкості у популяції цільової лускокрилої комахи-шкідника до білка СтутАб, що експресується в трансгенній рослині, який передбачає пакетування в трансгенній рослині додатково до білка СтуТтАБ другого інсектицидного білка, що характеризується щонайменше 80
Фо ідентичністю із 5ЕО ІЮО МО:31 або 5ЕО ІЮ МО:41. У деяких варіантах здійснення цільова лускокрила комаха-шкідник являє собою вогнівку цукрової тростини (Оіаїгаєа засспагаїї5). У ще одних варіантах здійснення другий інсектицидний білок містить зХЕО ІЮ МО:31, 5ЕО ІЮ МО:32,
ЗЕО ІЮ МО:41 або 5ЕО ІО МО:42. (00254) У деяких варіантах здійснення даний винахід охоплює спосіб надання фермеру засобів для контролю лускокрилих шкідників, при цьому спосіб передбачає постачання або продаж фермеру рослинного матеріалу, такого як насінина, при цьому рослинний матеріал містить полінуклеотид, химерний ген, касету експресії або рекомбінантний вектор, здатні експресувати білок Сгу за даним винаходом у рослині, що вирощується з насінини, як описано вище.
І00255| Варіанти здійснення даного винаходу можна краще зрозуміти з посиланням на наступні приклади. Передбачається, що попередній і наступний опис варіантів здійснення даного винаходу та різні варіанти здійснення не обмежують формулу винаходу, а, точніше, ілюструють її. Таким чином, буде зрозуміло, що формула винаходу не обмежується конкретними подробицями цих прикладів. Фахівцям у даній галузі техніки буде зрозуміло, що інші варіанти здійснення даного винаходу можуть бути здійснені на практиці без відхилення від суті та обсягу даного розкриття, обсяг якого визначається доданою формулою винаходу.
ПРИКЛАДИ
Приклад 1. Ідентифікація активних штамів Ві (00256) Ізоляти ВасшШив5 (игіпдіепбіє культивували зі спор, що були присутні в наявних колекціях, і підтримували на чашках із ТЗ ж агар із додаванням пеніциліну. Кожний ізолят вирощували в аеробних умовах в 24-лункових планшетах із глибокими лунками протягом
Зо приблизно 10 днів за 28 "С до споруляції, яку підтверджували за допомогою забарвлення розчином кумасі синього/оцтової кислоти та візуалізації за допомогою мікроскопа. Після споруляції як розчинні, так і нерозчинні фракції тестували, щоб визначити активність щодо видів лускокрилих, що становлять інтерес. Фракції тестували в біологічному аналізі контамінації поверхні, під час якого фракціями покривали штучне поживне середовище для культивування великої кількості видів. Кожний ізолят піддавали скринінгу щодо щонайменше чотирьох видів лускокрилих, у тому числі Неїїсомегра 7еа (американська кукурудзяна совка), Адгоїї5 ірзіп (совка-іпсилон), О5ігіпіа пибіїаїїз (кукурудзяний метелик) і Зродоріега Ігидірегаа (совка трав'яна), із розміром вибірки, що становила 12 новонароджених личинок. Тривалість кожного аналізу становила приблизно 7 днів за кімнатної температури; планшети оцінювали щодо смертності, а також інгібування росту личинок. Спостережуване підвищення смертності на 30 95 порівняно з негативним контролем вважалося показником активності. На основі результатів первинного тестування на комахах для подальшого аналізу відібрали штами СО530, 20537, СО651, СО652, сСо724, СО801, С1079 та М2776.
Приклад 2. Збирання та аналіз геному
І00257| Гени сгу із Ві за даним винаходом ідентифікували в штамах, ідентифікованих у прикладі 1, з використанням підходу повногеномного секвенування. Коротко кажучи, ДНК
Васіїйй5 розрізали за допомогою ультразвукового приладу 52 від Сомагі5 (Сомагів, Іпс., Вобурн,
Массачусетс) із застосуванням програми ОМА 400Ббр з таким налаштуванням: робочий режим: 1095; інтенсивність: 4; цикли/мпульс: 200. ДНК обробляли за допомогою модуля для репарації кінців/'додавання ЗА-хвоста МЕВвМехкю Ойгатм (Мем/ Епдіапа Віоїав», Іпс. Іпсвіч, Массачусетс).
Індексні адаптери 1-57 від Віооб5сіепсе (1-27 Бразилія, 28-57 США, Велика Британія та
Швейцарія) лігували із використанням МЕВ Оціск Гідайоп "м згідно з описом постачальника (Мехм/
Епдіапа Віоїабв», Іпс. Іпсвіч, Массачусетс). Продукти лігування очищали з використанням гранул
Адепсошції АМРиге ХР згідно з описом постачальника (ВесКтап Сошйег, Іпс., Індіанаполіс,
Індіана). (00258) Бібліотеку розділяли на фракції за розміром наступним чином: змішували 50 мкл зразка зі 45 мкл 75 95 суміші гранул (25 95 гранул АМРиге та 75 95 розчину Масі/РЕС від
ТекмМома, Мо за кат. Р.4136). Суміш перемішували та поміщали на магнітну підставку. Одержаний супернатант переносили в нову лунку та додавали 45 мкл 50 95 суміші гранул (50 95 гранул бо АМРитге і 50 95 розчину Масі/РЕС від ТекМома, Мо за кат. Р4136). Дану суміш перемішували та поміщали на магнітну підставку. Одержаний супернатант видаляли та гранули промивали 80 95 етанолом. Додавали 25 мкл елюювального буфера (ЕВ) і суміш поміщали на магнітну підставку.
Одержаний кінцевий супернатант видаляли та поміщали в пробірку на 1,5 мл. Цей спосіб давав змогу одержувати бібліотеки з діапазоном розмірів ДНК 525 пар основ (п. 0.) (вставка плюс адаптер). (00259) Відсортовану за розміром ДНК-бібліотеку ампліфікували з використанням КАРА
Віозувієт НІіРі Ної 5іапй (Кара Віозувієтв5, Іпс., Вілмінгтон, Массачусетс) із використанням наступних умов проведення циклів: (98 "С, 45 с|; 12 х 98 "С, 15 с,60"С, 30 с, 727, 30 сі; (72 "С, 1 хв... Кожна реакційна суміш містила: 5 мкл ДНК-бібліотеки, 1 мкл універсальних праймерів від Віозсіеєпсе (25 мкМ), 18 мкл стерильної води, 1 мкл індексованих праймерів від
Віозсіепсе (25 мкМ), 25 мкл 2Х полімерази КАРА НІРі. (00260) Бібліотеки аналізували на біоаналізаторі Адіїепі 2100 (Адіепі ТесппоЇодіе5, Санта-
Клара, Каліфорнія) із застосуванням високочутливих чипів для визначення діапазону розмірів і середнього розміру вставок у бібліотеці. Усі бібліотеки піддавали секвенуванню спарених кінців (РЕ) (100 циклів на зчитуваний фрагмент; 12-24 бібліотек на доріжку) у системі секвенування
Нібед 2500 із використанням стандартних протоколів секвенування від виробника (Шитіпа, Іпс.,
Сан-Дієго, Каліфорнія).
І00261| Розробляли інструмент для проведення розрахунків щодо Васійи5, щоб ідентифікувати та охарактеризувати ймовірні гени Сгу-подібного білка для розставляння пріоритетів щодо напрямів додаткових лабораторних тестів.
І00262| Збирання й аналіз геному, а також аналіз геномної бібліотеки, описаний вище, привели до ідентифікації у штамах Васійиз5 ІПигіпдіепві5 п'яти Сгтгу1-подібних генів, що виявляють токсичність щодо щонайменше кукурудзяного метелика (Оз5ігіпіа пибіїаійє) або совки-іпсилон (Адгоїї5 ірзіоп). Ідентифікаційні характеристики Сгу1-подібних генів і білків наведені в таблиці 1.
Таблиця 1
Гени/білки Сгу, ідентифіковані в штамах Васійи5 (пигіпдієепвів
Найближчий
Штам Назва представник | Молекулярна | Нуклеотидна | Амінокислотна білка/гена родини Сту маса (кДа) послідовність, | послідовність,
ЗЕО ІЮ МО: ЗЕО І МО: сової | втоог6о | Суюь | 1331 | 6 | 36 о с1079 | втоозї | Супь 80 | щБ8 | 38 о Мм2776 | втогої | Сума | 1320 | 9 | 39
Приклад 3. Експресія білків Ві у рекомбінантних клітинах-хазяїнах (00263) Експресія в Васійи5. Білки Сгу, описані в прикладі 2, експресували в штам сгузіаї! тіпи5 (що не продукує білок Сгу) Васійн5 (пигіпдіепвіє (ВО, у якого відсутня спостережувана вихідна інсектицидна активність, за допомогою човникового вектора, позначеного рсСІВ5б634", сконструйованого для експресії як в Е. соїї, так і в Ві. Вектор рСІВ5634" містить промотор
СтутАс, який керує експресією клонованого гена Сгу Ві, і маркер стійкості до еритроміцину.
Касетами експресії, що містять послідовність, що становить інтерес, яка кодує Сгу, трансформували клітину-хазяїна штаму Ві за допомогою електропорації та проводили відбір трансгенних штамів Ві на чашках з агаром, що містить еритроміцин. Відібрані трансгенні штами
Ві вирощували до фази споруляції в середовищах ТЗ за 28 "С протягом 4-5 днів. Клітинні осади збирали та промивали декілька разів перед солюбілізацією в карбонатному буфері з високим рН (50 мМ), що містив 2 мМ ОТ. (00264) Експресія в Е. соїї. Білки Сту експресували в штамах Е. соїї, використовуючи вектори рЕТ2ва або рЕТ29а (Мегск КОСаА, Дармштадт, Німеччина). Конструкції трансформували за допомогою електропорації та проводили відбір трансгенних клонів Е. соїї на чашках з агаром, що містить канаміцин. Відібрані трансгенні штами Е. соїї вирощували та індукували експресію білка Сту шляхом індукції за допомогою ІРТО за 28 "С. Клітини ресуспендували в карбонатному буфері з високим рН (50 мМ), що містив 2 мМ ОТТ, а потім руйнували з використанням гомогенізатора Місгойчідіс5 ІМ-1. (00265) Аналіз експресії. Одержані в результаті клітинні лізати з трансгенних штамів або Ві, або Е. соїї висвітлювали шляхом центрифугування та зразки аналізували щодо чистоти за допомогою 505-РАСЕ та електрофореграми, використовуючи систему ВіоКай Ехрегіоп зузіет (Віогад, Негсшевз, Каліфорнія). Концентрації загального білка визначали за допомогою аналізу за Бредфордом або Тпепто 660. Очищені білки Сту потім тестували в описаних нижче біологічних аналізах.
Приклад 4. Активність білків Сту в біологічних аналізах 00266) Білки Сту, одержані в прикладі 3, тестували щодо одного або декількох наступних видів лускокрилих шкідників із використанням відомого в даній галузі способу біологічного аналізу зі згодовуванням штучного раціону: кукурудзяний метелик (ЕСВ; Ов5ііпіа пибіїаїїв), совка-іпсилон (ВСМУ; Адгоїї5 ірзіюп), вогнівка цукрової тростини (5СВ; Оіаїгаєа засспагів), совка трав'яна (ГАМУ; 5родорієга идірегаа), американська кукурудзяна совка (СЕМУ; Неїїсомегра 7вєа), гусінь совки оксамитових бобів (МВС; Апіїсагзіа деттаїаїї5), соєва совка (ЗВІ; Реецйдорісивіа іпсіцдепв), вогнівка кукурудзяна південно-західна (ЗМУСВ; Оіаїгаєа дгапаїйозеїа), західна бобова совка (МУВСМУ; Біпіасовіа аїрісозіа), тютюнова совка (ТВМУ; Неїїоїіб мігезсепв), східний кукурудзяний метелик (АСВ; Озініпіа штпасаїїв5), бавовникова совка (СВМУ; Неїїсомегра аптідега), вогнівка жовта рисова (558; Спіо зирргеззаїї5), рожева стеблова совка (РОВ; 5езатіа іпієгепв), совка східна лугова (ОДМУ; Муйітпа зерагаїа) і рисова вогнівка (ВІ Е; Спарнаосгосівз теаіпаї!5).
І00267| Рівну кількість білка у вигляді розчину наносили на поверхню штучного поживного середовища для комах (Віозегм, Іпс., Френчтаун, Нью-Джерсі) у 24-лункових планшетах. Після висихання поверхні поживного середовища в кожний планшет додавали личинок видів комах, що підлягали тестуванню. Планшети запечатували та витримували в навколишніх умовах лабораторії з урахуванням температури, освітлення та відносної вологості. Група позитивного контролю складалася з личинок, що піддавалися впливу дуже активного штаму Васійн5 дикого типу із широким спектром дії. Групи негативного контролю складалися з личинок, що піддавалися впливу поживного середовища для комах, обробленого тільки буферним розчином,
Зо і личинок на необробленому поживному середовищі для комах; тобто тільки на поживному середовищі. Смертність визначали через приблизно 120 годин та оцінювали в балах порівняно з контролями. (00268) Результати показані в таблиці 2, де "-" означає відсутність активності порівняно з контрольною групою, "-/-" означає 0-10 95 активність порівняно з контролем (ця категорія також включала 0 95 смертність під час сильного інгібування росту личинок), "-" означає 10-25 95 активність порівняно з контролем, "ї-" означає 26-75 95 активність порівняно з контролем, а "я-" означає 76-100 95 активність порівняно з контролем. Позначення "пі" у таблиці 2 означає, що вказаний білок не тестували щодо цього конкретного шкідника.
Таблиця 2
Результати біологічного аналізу з використанням білків Сту 10110 БілоксСувВТ 7/1
РАМ Ї - Її - | - ЇЇ - її 5 Їх 1-1 - 1-1
СЕМ | -нЇ - | - | я 1-1 1-1
ЕсВ о | я | ня з | вп 13611311 во | я які ноя - 03175017 1601131 ов | ня які ня я 331 нн, 1 0 50101031
МВС ЇЇ пої пбоїЇ я-не| я-| пі нею пі | - | -н-я | бі
Ві | | кр на я б я | 1101171 но вом | я 131 5117-01 61 1 11-01 вм зн як ян 3 1 | 61 6 11-01
АСВ | я | як я 10011701175 нн 1
ФА І я - 1 51000111 1611111
Приклад 5. Білки Сгу, активні щодо стійких до СтутАБб комах
00269) Хоча дуже поширене використання трансгенних культур, що експресують білки Сту, забезпечує контроль, що не має аналогів, певних лускокрилих комах-шкідників, існує реальна загроза того, що у цільових комах-шкідників може розвиватися стійкість до такої технології. До сьогодні вже існують звіти про існування польової стійкості, що призводить до втрати контролю або до суттєвого зниження ефективності контролю через інтенсивне використання трансгенних культур, що експресують білки Сту, щонайменше в чотирьох випадках: у випадку совки трав'яної (Зродорієга иадірегда) до СтуїтЕ кукурудзи в Пуерто-Рико (5іогег єї аІ. 2010. У. Есоп. Епіотої. 103:1031-1038), стеблової кукурудзяної вогнівки (Ви55єеоіа Тиса) до СтутАб кукурудзи у
Південній Африці (Мап Веперигу. 2007. У. Ріапі 5оїЇ. 24:147-151), молі бавовникової (Ресііпорпога доззурієПа) до Сту1тАс бавовнику в Індії (Опигца 8. Зціаг. 2011. Іпаіїа Резі Мападе.
Зсі. 67:898-903) і західного кукурудзяного жука (Оіаргоїіїса мігдіїїега) до СтуЗВЬ1 кукурудзи у
Сполучених Штатах Америки. Інші комахи-шкідники можуть також мати потенціал щодо розвитку економічно значущих рівнів стійкості до білків Сгу, що використовуються на сьогодні на комерційній основі в трансгенних культурах. Наприклад, пап еї аї. (2013. 9. Іпмей. Раїної. 112:267-272) проводили скринінг зібраної з полів вогнівки цукрової тростини (5СВ; Оіайгаєа зассопагаїї5) щодо стійкості та виявили її у восьми особин із 191 СВ, які мали основні алелі стійкості до СтутАБ рослин кукурудзи. Із цих восьми особин 2Папоа еї аї. у лабораторії вивели і додатково відібрали стійкі до СтутАр популяції 5СВ. 2папо еї аЇ. також визначили, що стійкі до
СтулАЬ 5СВ характеризувалися високим ступенем перехресної стійкості до інших білків Сгу, у тому числі до СтуїАа і СтутАс, та середнім ступенем перехресної стійкості до СтуїР.
І002701| Вогнівка цукрової тростини є основним лускокрилим шкідником кукурудзи у середніх широтах південного регіону Сполучених Штатів Америки та Південної Америки. Таким чином, важливим є виявлення білків Сту, які мають механізми дії, відмінні від дії білків Сгу, які на сьогодні використовують на ринку як засоби керування стійкістю комах. Особливо використовуваними є білки, які характеризуються високою ефективністю щодо стійких до
СтутАБ комах.
І00271| Певні білки Сту за даним винаходом тестували на ефективність щодо стійкої до
СтутАБ вогнівки цукрової тростини, описаної 2йапд еї аЇ. (вище). Як сприйнятливі до СтутлАБб (дикого типу), так і стійкі до СтутлА6 5СВ оцінювали, по суті, одночасно, як описано Папа 6ї а).
Зо Результати, показані в таблиці 3, свідчать про те, що ВТ-0001 і ВТ-0003 є високоефективними щодо стійких до СтутїАбБ комах. Це особливо несподівано, оскільки ВТ-0003 їі ВТ-0001 характеризуються відповідно 93 ії 87 відсотковою ідентичністю з СтгуїАа; білком, який був неефективний щодо стійкої до СтгутАБ вогнівки цукрової тростини через перехресну стійкість, як продемонстрували 2Папо еї аї.
Таблиця З
Активність білків Сту щодо стійких до СтутАБб комах 11111001 Відсотоксмертності8бОВ.д7/://///:/3;/:З:! о Негативнийконтрольїї /-/-/ | (71277777 Ї77771111111110111111сС1
Негативнийконтроль?2ї//-/:/ | ' 8 2 4м(Крр ЇЇ 7777770 х "Фактична" смертність, як визначено 2Папо еї а. (вище), становила 100965. (00272) Зокрема, даний результат для білка ВТ-0003 є несподіваним, оскільки більш ніж 80
Фо білка являє собою послідовність СгуїЛа, яка характеризується відмінностями лише за трьома амінокислотами від СтуїАа! у ділянці від положення 2003-1176 у 5ЕО ІЮО МО:31, як показано в таблицях 4А і 48 нижче. Відмінності за амінокислотами показані буквеними змінами. Однакові амінокислоти показані точкою ("7"). Цікаво відзначити, що амінокислотна послідовність нативного ВТ-0003 являє собою гібридну молекулу СтутАй з амінокислот положень 1-202 і
СтуїАа з амінокислот положень 203-1176. Таким чином, очевидно, що перші 202 амінокислоти та/або мутації за трьома амінокислотами в ділянці, що складається з положень 2003-1176, відповідають за ефективність щодо стійких до СтутАбБ комах.
І00273| Таким чином, за даними результатами видно, що як ВТ-0001, так і ВТ-0003 забезпечують засоби обмеження розвитку стійкості до наявних трансгенних культур, що містять білок СгутАБб, або засоби боротьби зі стійкими до СтгутАбБ комахами, зокрема, в тропічних регіонах, де певні аспекти біологічного циклу шкідників, такі як покоління, що перекриваються, у період вегетації сприяють розвитку стійкості.
Таблиця 4А. Вирівнювання послідовності ВТ-0003 з СтутАпІ і СтуїАа! вт-000Зрго 1 МЕІМММОМОСУРУМСІ ММУРЕЇЕП ЕССВІЗМОМТРІБІБІ ТОРІ ЗЕ
СтуїАаї 1 ОММР..Е.1.....50..ММАЕОЕТОМ.. 0000000.
ВтТ-000Зрго 51 МРОАДСаРМ а м аИагМаРБЗОМрАРАОМЕОГІМОВІАЕАУАМТАЇОБЇ.
СтутТАНІ 51 ........сннненинниичнине
СтуїАаї 51 ...........М...ЛЕ.......-РМ.І........Е.ЕА..0..58. вт-000Зрго 101 ЕМАВУМАТМАТАРАЕМЕКАРООРЕЇ ВЕАЇІ ВТОЕТАТЕТУІЗОИВІБМІ КІ
СтутТАНІ 101 .............ссіннише
СтуїАаї 101.1 З5МІ.О1..Е5.В8...АО.ТМ.А...ЕМ...МОММЗАЇ ТТА.РІОСАМ втТ-000Зрго 151 ОТРЕМОЇГ І ЗМЕАОАДАМІ НІ БІГ НОМЕР, ОВБМ авт ТУМММММОІ ТЕС
СтутТАНІ 151 ...........іннише
СтуїАаї! 151 .ММО.Р...ОММ....000.М.0..5М.......ЮАА..ЗА.....ВІ.. втТ-000Зрго 201 ТУ ТОМАМАМУМТа! ЕВУМ РОЗА ОММУВУМОГАВЕЇ ТІ ТМ ОІМАЇ ЕЗ5МУ
СтутТАНІ 201 ............нни. Р.
СтутАаї 201 М.........нннннннннннннннннн втТ-000Зрго 251 ОБВАМУРІВТУБОЇ ТВЕІМТМРМЛЕМЕравзЕВамАОВІЕОМІВОРНІ МОЇ.
СтутТАНІТ 251 ............. 3. (3.85...
СтутАа! 251 ........ннннниншининине
ВтТ-000Зрго 301 МЗПІИТОУМНАСЕМУМУ БНО ТАРУ ЕЗаРЕБАЕРІ ЕЕМАСМААРРУ-Ї.
СтутАНІ 301 ........А...ММ.......М...........Т...М.ТМ.....ООВІ
СтутАа! 301 ..........сннннннннннннит.
ВтТ-000Зрго 350 МБ Тагаієвті 55РІ УААН ИЗаРММОЄСЕМ ОСТЕР ЗЕАБІ ТТМІ Р
СтутАНІ 351 АОС ОММ..ОСССТЕООО-РЕМІ....О).5......- Ам Т-55....
СтутАа! 350 ...........ссннннннннннниниє
ВтТ-000Зрго 400 ТІМАОВИаТМО5І ОМІРРООМЗ5МРРААСЕЗНВІ ЗНУТМІ -5БОДАСАМУТІ В
СтутАНІ 399 АМ..КБ.......Е....М.М....0.........5.ЕН.25555.511.
СтутАа! 400 ...........снннннннетьнини втТ-000Зрго 449 АРТЕБУМУОНАЗАЕЄРММИРОБОЇТОІРТКЗ ТМ азОТЗУУКкаРаИаЕТИааоі
СтутАНІ 449 ..М...1.........-А.О5.....АМ.СМЕ.ЕМ.-..15........1
СтутАа! 449... втТ-00ОЗрго 499 | АВВТ5РООІЗТІ ВУМІТАРІ ---- 50О08М ВУВІВМАЗТТМІ ОРНТОрИаВ
СтутАНІТ 498 М.І М.5.ММІОМ.СМ.ЕМ.ІНЕРБТ.Т.....М....М.РІН МУМУУСММО
СтутАа! 499 ..........ситттттннннннн
ВтТ-000Зрго 544 РІМОСМЕЗАТМ5ЗОЗМ' ОБаЗЕВТМавТтТРЕМЕЗМаЗЗМЕТІ БАНМЕМЗа
СтутАНТ 548 5.Е5МТМР..АТ.І 0....50.2МЕЕБЗАМА. 5. С.МІ.-СмуАвМ.ИаТ
СтутАа! 544... вт-000Зрго 594 МЕММІОВІЕЕМРАЕМТЕРЕАЕМОЇ ЕВАОКАММЕЇ ЕТЗЗМОІСІ КТОУТОМН
СтутАНІТ 595 АС.І...Б..МТА..ООСОМ..О....00АООООТОО1ОООМ..ООО
СтутАа! 594...
ВтТ-000Зрго 644 ІОМ5МІ МЕСІ 5ОЕРСІ СЕКОБЇ ЗЕКУКНАКВІ БОЕАМО О0РМЕВИЇМА
СтутАНІ 645........1...........8........::::.::....3..КО...
СтутАа! 644...
Таблиця 48. Продовження вирівнювання ВТ-0003 з СтуТтАНЙІ1 і СгуТАа!1 вт-000Зрго 694 ОЇ ОНСМУВаЗТО ПОСИВОМЕКЕММУТ СТЕРЕО ЕСУРТМІ МОКІРЕЗКІ К
СтутАНІ 695.РЕ...05...05.....М........220х.нннн.
СтутАа! 694 ........нннннинниничи вт-000Зрго 744 АУТАМОЇ ВОМІЕОБООІ ЕІМ'ТАУМАКНЕТУМУРОТИаБІ МУ РІ БАОЗРІСК
СтутАНІ 745.Р................М..........1..........АМК.... В
СтутАа! 744... втТ-000Зрго 794 ССЕРМАСАРНІ ЕУУМРОЇ ОСЗСАрСЕКСАННЗННЕЗ5І СТОМОаСсСТтрІ МЕ С
СтутТАНІ 795 ......----ннннтнттттиииии
СтутАа! 794... втТ-000Зрго 844 МУМІЕКІКТОРСИНАВІ СМІ ЕРГЕЕКРІ МСЕАГАВУКІАЕККМ ВОКАЕКІ Е
СтутАНтІ 825 ..............КІ.........130....... ЖК...
СтутАа! 844 ........ннннниио В
ВТ-000Зрго 894 М'ЕТМІМУКЕАКЕЗМОАЇ ЕММБОМОВОЇ ОАОТМІАМІНААДОКАМН5БІВЕАМІ.
СтутАНІ 875 ...................0...МА..Т...............В......
СтутАа! 894 .........ннннннннннин втТ-000Зрго 944 РЕЇ ЗМІРОУМААІРЕЕЇ ЕСВІЕТАЕ5ЗІ МОАВММІКМАВСЕММИаї БСМУМУКа
СтутТАНІ 925.................0.Ї М М.
Сту1тАа! 944... вт-000Зрго 994 НМИОМЕЕОММОВОЗМІ ММРЕМЕАЕМЗОЕУАУСРОаВаИмі! ВУТАУКЕеЕаУаЕ,С
СтутТАНІ 975 .........Н.....Ї.......хснни
СтутАа! 994 .............20Ї Мн втТ-000Зрго 1044 МТІНЕІЕММТОЕЇ КЕЗМСМЕЕЄ МЗММ ТУТ СМОМТУМОЕЕУСССАМТЗАМА
СтутАНІ 1025 .......0..............М.Р..........АТ....Е.Т......
СтуїАа! 1044 .................2.002Ронна вт-000Зрго 1094 СУМЕА---РУМРАЮМАЗУМЕЕКЗУТрИавВвЕМРСЕРМАСаУАОМХТРІ РУС У
СтутАНт 1075..00.МЕБЗМ5.....02020А.ОСС0СА.ООО0 005000... А..
СтутАаї! 1094. ....----.нннннннннннннинне втТ-000Зрго 1140 МТІКЕГЕМЕРЕТОКУУМЕІСЕТЕСТРІМОЗУМЕЦ І МЕЕ
СтутТАНІ 1125...
СтуїАа! 1140...
Приклад 6. Введення генів у вектор для експресії в рослині
І00274| Перед експресією в рослинах синтетичні полінуклеотиди, що містять нуклеотидну послідовність, яка кодує мутантні білки Сгу, твВТ-0001 ії твтТ-0003 (5ЕБО І МО:41 і 42 відповідно), синтезували з використанням платформи для автоматизованого синтезу генів (Сепзогірі, Іпс., Піскатавей, Нью-Джерсі). У цьому прикладі одержували першу касету експресії, що містила убіквітиновий промотор маїсу (рії), функціонально пов'язаний із послідовністю, яка кодує білок Сту, що була функціонально пов'язана з термінатором Мо5, а також одержували другу касету експресії, яка містила промотор ШБії, функціонально пов'язаний із послідовністю, що кодує фосфоманозоізомеразу (РМІ), яка була функціонально пов'язана з термінатором Мо5.
Експресія РМІ дає змогу здійснювати позитивну селекцію трансгенних рослин на манозі. Обидві касети експресії клонували в придатний вектор для трансформації маїсу, опосередкованої
Адгобасієетійт.
Приклад 7. Експресія та активність білків Сгу у рослинах маїсу (00275) Трансформацію незрілих зародків маїсу виконували, головним чином, як описано в
Медгоно єї аї., 2000, Ріапі Се Верогіз 19: 798 803. Коротко кажучи, штам Адгобасієгійт
І ВА4404 (рев), що містить вектор експресії, описаний у прикладі 5, вирощували на твердому середовищі МЕР, що містить дріжджовий екстракт (5 г/л), пептон (10 г/л), Масі (5 г/л), 15 г/л агару, рН 6,8, протягом 2-4 днів за 28"С. Приблизно 0,8 х 109 клітин Адгобасіегпит суспендували в середовищі І 5-іпї, доповненому 100 мкМ Аз. Бактерії попередньо індукували в даному середовищі протягом приблизно 30-60 хвилин.
І00276| Незрілих зародків інбредної лінії маїсу вирізали з початків віком 8-12 днів із перенесенням у рідке середовище І 5-іпї ї- 100 мкМ Ав. Зародків однократно ополіскували свіжим середовищем для інфікування. Потім додавали розчин Адгобасієгішт і зародків перемішували на вихровій мішалці протягом 30 секунд і забезпечували осідання з бактеріями протягом 5 хвилин. Потім зародків переносили боком зі щитком зародка догори на середовище
БА5 та культивували в темряві протягом двох-трьох днів. Згодом приблизно 20-25 зародків на чашку Петрі переносили на середовище І 5Ос, доповнене цефотаксимом (250 мг/л) і нітратом срібла (1,6 мг/л), і культивували в темряві за приблизно 28 "С протягом 10 днів.
І00277| Незрілих зародків, що утворюють ембріогенний калюс, переносили в середовище
Ї501МО.55. Селекцію культур на цьому середовищі здійснювали протягом приблизно 6 тижнів, при цьому через приблизно З тижні проводили стадію субкультивування. Калюси, які вижили, переносили на середовище Кед!1, доповнене манозою. Після культивування на світлі "у режимі 16 годин світла/8 годин темряви) зелені тканини потім переносили на середовище Кед2 без регуляторів росту та інкубували протягом приблизно 1-2 тижнів. Паростки переносили в контейнери Мадепіа СА-7 (Мадепіа Согр, Чикаго, Іллінойс), які містили середовище КедЗ, і вирощували на світлі. Через приблизно 2-3 тижні рослини тестували за допомогою ПЛР щодо наявності генів РМІ, а також гена сгу Ві. Рослини, що показали позитивні результати в ПЛР- аналізі, переносили в теплицю для подальшої оцінки. (00278) Трансгенні рослини оцінювали щодо числа копій (визначали за допомогою аналізу
Тадтап), рівня експресії білка (визначали за допомогою ЕГІЗА) та ефективності щодо видів комах, що становлять інтерес, у біологічних аналізах із вирізанням листка. Зокрема, тканину рослини (лист або приймочки) вирізали з однокопійних об'єктів (стадії М3 - М4) і заражали новонародженими личинками цільового шкідника, потім інкубували за кімнатної температури протягом 5 днів. Листові диски з трансгенних рослин, що експресують ВТ-0001, тестували щодо кукурудзяного метелика (О5ігіпіа пибііаій5), американської кукурудзяної совки (Неїїсомегра 7еа) і совки-іпсилон (Адгоїї5 ірзіїоп). Листові диски трансгенних рослин, що експресують ВТ-0003, були
Зо активними щодо щонайменше східного кукурудзяного метелика (Оз5ігіпіа Тигпасаїї5) і совки- іпсилон (Адгоїїз5 ірвійоп). (002791) Результати біологічного аналізу на тканині трансгенної рослини підтверджують, що під час експресії в трансгенних рослинах білки Сту за даним винаходом токсичні для цільових комах. Наприклад, ВТ-0001, що експресується в рослині маїсу, стабільно трансформованій химерним геном за даним винаходом, був активний щодо щонайменше кукурудзяного метелика (Озійпіа пибііаій5), американської кукурудзяної совки (Неїїсомегра 7еа) і совки-іпсилон (Адгоїі5 ірзіоп). ВТ-0003 був активний щодо щонайменше східного кукурудзяного метелика (О5ігіпіа
Типасаї5) і совки-іпсилон (Адгоїїз ірзвіїоп).
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
-110» Зупдепіа Рапісірайопе АС
Вгатієїї, Майнем Віспага зЗедиіп, КаїНегіпе
Возе, Мак 5сой «120» Інсектицидні білки -130» 80829-05-І-ОВа-МАТ-1 -1605 50 170» РаїепіНп версія 3.5 -2105 1 «2115» 3546 «2125 ДНК -213» Васійи5 Іигіпдіепвів (510) «4005 1 аддаїааса аїссдаасаї сааїддааїйдс айссцага айудщшаад їіаасссдаа (10) діадаадіаі Іадчддада аадааіадаа асідднаса ссссааїсда ташссід 120
Ісдстіаасдс аашесцші дадідааці опсссда сіддашоі онаддасіа 180 однодаїагаа заюдадаа! Іщодіссс ісісааїдду асосашсі діасааай 240 даасаднаа Наассааад ааіадаадаа нсдсіадда ассаадссаї Нсіадайа /-з00 "7 дааоддасіаа дсааїсща Ісааашас дсадааїсії Надададчід ддаадсадаї 360 ссіасіааїс садсацаад адаададацд содїансааї Ісааїдасаї! даасадідсс 420 сНасаасся сіайссісі Іодсади саааацаїс ааднссісі Шаїсадіа /- 480 таіїсаад сідсаааш асашаїса чнндадад ашюшсаді дшодасаа 540 аддюддавдаї Пдаїдссодс дасіаїсааї адісонаїа аїдашаасіадоснай 600 7 ддсаасіаїа саданаїс їдідсосідо їасааїасдд дзапададсо ідіайїдода / 6бо ссддансіа дзаданодаї ааддіаїааї саашадаа дададсіаас асцасідта 720
Надаїаїсод пдсісіаїй! сісааайцаї даїадісдаа ддіаїссаа ісдаасаді 780
Ісссаанаа саададаааї Пагасдаас ссадіацад ааааннда доатадін 840 сдюддааща сісададааї адаасадааї ападдсаас сасаїсНаї ддатаїссн 900 7 аагадіаїаа ссашаїтас дайшіосаї ададасша апанодісадоддсаїсаа 960 аїаасадсії сіссідїада дішйсадда ссадаайсо сайсссш ашдоадааї 1020 дсддадааг садсіссасс соїаснодіс ісайаасід дошодода ішадааса 1080
Наїснсас сШаїагад аадаанаїа сндайнсад дсссаааїаа ісаддаасід 1140 шаїссно аїддаасода дішесц дсосісссіаа сдассаасі дссПосасі 1200 7 адаіатадас аааддддіас адісдайса сіадаїціаа іассдссаса ддаїаайаді 1260 діассассіс дідсдддай їадссаїсда Подадісаїд Масаадсі дадссаадса 1320 дсіюддадсад Шасассії дададсісса асдішсії ддсадсаїсод садідсідаа 1380
Шааїаага іаайдсаїс ддаїадіаїї асісаааїсс сідсадідаа дддааасш 1440 сишаа однсещіааї йсаддасса ддашасід дідадаасцй аднадаца 1500 7 аагадіадіяд даааїаасаї Ісадааіада ддоїатацо ааднссааісасиссоса 1560
Ісдасаїсіа ссадаїасо аднсадідіа сдоїатшсії сідіаасссос дайсассіс 1620 аасоцнаан дадаїаанс аїссаїнії Іссааіасад їассадсіас адсіасдіса 1680
Надаїааїс їасааісаад щдщаїшоаї їайндааа дідссааідс ішасаїсі 1740 їсанаддіа агаїадіадд ЮНадаааї Шадіддда сідсаддасді даїааїадас 1800 60 адашоааї Ппайссаді Іасідсааса сісдаддсід ааіаіааісі ддааададсуд 1860 садааддсдо дааюсодсі дшасцдісі асадассаас іаддосіааа аасааацдіа 1920 асддайцагс азгандаїса адщіссааї Паднасої дШаїсодда даашної 1980 сідда(дааа адсдадааїй діссдадааа дісааасаїд сдаадсдасі садідаїдаа 2040 сдсаашас іссааданс аавашсааа дасанааїа ддсаассада асдіддаюда 2100
"7 додсддаадіа садддайнас саїссаадда дддададасо їашааада ааацасдіє 2160 асасіаїсад дїассшда щдадосіаї ссаасаїаїй! діаїсаааа ааіїсдадаа 2220 їсаааацаа аадссШас ссонНаїсаа Наададодої асаїсдаада їадісаадаї 2280 падаадш ашодаїссо Пасааюса ааасасдааа сопааасої дссаддіасд 2340 донссНаї ддссасідс аднааааді ссаайддаа додсодіда ассдааїсда 2400
7 Ідідсассас ддандадію дааассідаї діадацой ссідсададасоддадааааа. 2460 тдідсосаїс айсссаїса Шсіссноу дасайдаїд гаддаїціас адаснцаааї 2520 дадаашазд оасаїаїдоодї дагайнсаад айаадасас аададодсса дсдаааайїа 2580 ддаааїсіад аашсісда ададаасдсії Пайаддад аадсацадс асдідщдаад 2640 ааадсддада аааааддаяд адасааасдс дааааацод ааїдддааас аааїапун 2700
7 їаїааададд саааадаас щіададсі Нансдіад айсісааіааайадаца 2760 сааасоддаїа сдаасацос даїщдайнсаї дсддсадаїа аасосоайса їсдааїссда 2820 дааадсодіай дссададії аїсіддаїй ссодащіса адсодсіаї Шсдаадаа 2880 нпадааддіс Ннайнсас сосайсісс сіаїаїда сдадааацісанааааас 2940 ддадайса анаюдії аєсадсюа ааюдааад досащіададіадаадаа з000
7 саааасаасс ассайссаї сспднаїс ссадааюда аадсадааді дісссаадаа 3060 ансдідісї діссаддісу юдсіаас сісдідна садсдіасаа ададддайаї 3120 ддададддсі дсадїаасодаї ссаїдадаїс даадасаайа садасдаасі дааайсадс 3180 аасдюіад аададдааді аіаіссааас аасасдаїаа сдідіаашца Наїасідсд 3240 асісаадаад ааіащдадода їасаїасасі ісісдіааїс даддаїашца содадссіаї 3300 й дааадсаай спсщіасс адсідайаї дсаїсадссі аїдаадаааа адсдіаїаса 3360 даддасдаа дадасааїсс Поідааїсі аасададда! аїадддаца сасассасіа 3420 ссадсіддсі аїдідасааа адаанадад іасійсссад ааассдаїаа ддатаддай 3480 дадаїсддад ааасоддаада аасаїйсаї!ї діддаїадсо ддаанасі сспаддад 3540 дааїад 3546
60
-2105 2 «2115 3531 «2125 ДНК «213» Васійш5 ІпПигіпдіепвів «4005 2 аддадаїад Юдааїааїса дааїсаащдс оідсснаїа айощоаа іааїсссдаа (610) аїсдааазаі їадаадодсоду аадаагагса діддіаага ссссаандаашсісй 120 їсдснНасіс аашеші даддаай дісссадат сододшоганаддайца 180 айщдашаа їаїддддай (їадаоіссі ісссаадад асдсашсі дсісаація 240 й даасадінаа Наассааад ааіадсадаа дсідіаадаа аїасадсаай ісаддаайца 300 дададаада сасдадщша гадаассіаї дсіасідсії Носідадід ддааааадсі 360 ссідаюдасс сададсіаад адаадсасіа сдіасасааї Цасадсаас дадасцаї /-420 агаадддаа дааїаїссодї Шааааай сааасішо аадіасаосі дНаїсадід 480 шосссаад сідсаааці асашаїсі Напаадад асондізнй Шодосаа 540 7 ададсоади Шсаасдас аассдіаааї аацасіаса адашаасадаачддан 600 адіассіаїа садацйаїдс асдсідо їасааіас9ду дайадаасо щіаїдоддда 660
Зо ссддансіа дзаданодаї ааддіаїааї саашадаа дададсіаас асцасідта 720
Ннадаїаїсод пдсісіаї! сісааайцаї даїадіадаа даїаіссаайісдаасадн 780
Ісссаанаа саададаааї Пагасдаас ссадіацад аааайнда ддіадні 840 7 сдюддааща сісададааї адаасадааї ападдсаас сасаїсНаї ддатаїссн 900 аагадіаїаа ссашаїтас дайшіосаї ададасша апанодісадоддсаїсаа 960 аїаасадсії сіссідтада дійсадда ссадаайсду санйсссш ашдоадааї 1020 дсддадааг садсіссасс соїаснодіс ісайаасід дошодода ішадааса 1080
Наїснсас сШаїагад аадаанаїа сндайнсад дсссаааїаа ісаддаасід 1140 7 шаїссно аїддаасода дішсц дсосісссіаа сдассаасі дссНосасі 1200 адаіатадас аааддддіас адісдайса сіадаїціаа іассдссаса ддаїаайаді 1260 діассассіс дідсдддай їадссаїсда Подадісаїд Масаадсі дадссаадса 1320 дсіддадсад Шасассії дададсссса асдішсії ддсадсаїсо садідсідаа 1380
Шааїаага іІаанссіс аїсасаааїй! асасаааїас сшаасааа аїсіасіааї 1440 7 спддсісю дааснсіді сунпааадда ссаддаша саддаддадатансисда 1500 адааснсас сіддссадаї йсаассца ададіааата Насідсасс айаїсасаа 1560 бо адаїафсодда їіаадаансд стасдснсї асіасааай їасаайсса їасаїсаай 1620 дасддаадас сіанааїса ддоаїаацші Ісадсаасіа щадіадідд дадіааша 1680 садіссддаа двсшаддас їдіаддни асіасіссої Паасннс аааддаюа 1740 і адшіаша сойаадідс ісащісне аайсаддса аїдааяша їаїадаїсда 1800 айдаашо Нссддсада адіаассй даддсадааї агїдашада аададсасаа 1860 ааддсддаюа ашдадсідії їасиснсес ааїсааасод доанааааас адащдідасд 1920 данаїсаїа ндаїсааді аїссааша дідадоі іаїсадада акноша 1980 дадааааас аадаайціс сдадааацдісє ааасаюсода адсдасцад щаїдадсдд 2040 й аащшаснс аадаїссааа сісададодя агсааіадас аасіадассуд ддсіюдада 2100 ддаадіасдо аїапйассаї ссааддадас дашдасвдіаї Пааададаа Цасоцасд 2160 сіанпдддіа ссшдаща дідсіаїсса асдіашаї аїсаааааа! адаїдацдієд 2220 ааацаааад ссіаїассся Паїсаана ададодіаа ісдаадаїадісаадасца 2280 даааїсіай їаайсосіа сааідсаааа саїдааасад іаааідідсс аддіасдаді 2340 7 їссчцаюас сасшсадс ссааадісса аїсддаааді діддададсс дааїсдадс 2400 дсдсосасасс нНдаададаа іссідасна данонсої аїадддаща адаааадіцї 2460
Зо дсссаїсаїй сосаїсаїйї сіссйадас андащдіад дащдіасада спааадад 2520 дассіадодід їаддаїдаї сшаадаїї аадасодсааяд адддсасодс аадасіаддд 2580 ааїсіададі Нсісдаада дааассана діаддадаад сдсіадсісу дідааааїа 2640 7 дсддадаааа ааддадада сааасоаюдаа ааайддааї дадааасааа їайсдшаї 2700 ааададдсаа аадааєсці ададсша шодіааасі сісааіаїдаіїсаанасаа 2760 дсоддаїасда агацйоссаї дайсаїдсд дсоддаїааас діднсаїад сайсдадаа 2820 дснаїс14с сюадсідіс дідайсса одідісааю сдасіайн даадааца 2880 даадддсодїа Шісасіодс айсісссіа їіаїдадсода дааацісаг їааааадді 2940 7 дашаагїа адодсйнаїс сідсіддаас дюдаааддодс ашдіададіадаадаасаа 3000 аасаассаас днсдаїссі юйцаойссо дааддаад садаадідіє асаадаації 3060 сащісідіс садаїсоща сіазаїссії соідісасад сдіасаадда додаїаюдда 3120 дааддйносо іІаассайса Ідадаїсдад аасааіасад асдаасдаа дШшадсаас 3180 дсдіадаад аддаааїсіа нсаааїаас асддіаасої аіаадацна їасідіааа: 3240 7 саадаадаа! асддаддідс діасаснсі сдіааісдад даїаіаасдаадсісснос 3300 діассадсю апнадсцдіс адісіадаа дааааа!сої аїасададд асдаададад 3360 бо ааїссцод аашаасад аддаіайадод дайасасдс сасіассаді їдднацід 3420 асаааадааї їІадааіасії сссадааасс даїаадаіаї ддандада ддадааася 3480 дааддаасаї Наїсаїдда садсоюдаа йаснсна дададдааа а 3531 «2105» З «2115 3531 «2125 ДНК «213» Васійш5 ІпПигіпдіепвів «4005 З аддадаїад Юдааїааїса дааїсаащдс оідсснаїа айощоаа іааїсссдаа (610) аїсдааазаі їадаадодсоду аадаагагса діддіаага ссссаандаашсісй 120 їсдснНасіс аашеші даддаай дісссадат сододшоїайадданца 180 айщдашаа їаїддддай їадаоіссі ісссааідду асдсацісі дсісаадія 240 7 даасадінаа Наассааад ааіадсадаа дсідіаадаа аїасадсаай ісаддаайца 300 дададаада сасдадщша гадаассіаї дсіасідсії Носідадід ддааааадсі 360 ссідаюдасс сададсіаад адаадсасіа сдіасасааї Цасадсаас дадаснаї 420 агаадддаа дааїаїссодї Шааааай сааасішо аадіасаосі дНаїсадід 480 шосссаад сідсаааці асашаїсі Напаадад асондізнй Шодосаа 540 7 ададдоади Шсаасдас аассдіаааї аацасіаса аїдашаасадаадддай 600 адіассіаїа садацйаїдс асодсідо їасааіас9ду дайадаасо іадодуда 660
З5 ссддансіа дзаданодаї ааддіаїааї саашадаа дададсіаас асцасідта 720
Надаїаїсод пдсісіаї! сісааайцаї даїадіадаа даїаіссаайісдаасаді 780
Ісссаанаа саададаааї Пагасдаас ссадіанад ааааннда ддіаднн 840 7 сдюддааща сісададааї адаасадааї ападдсаас сасаїсНаї ддатаїссн 900 аагадіаїаа ссашаїтас дайшіосаї ададасша апанодісадоддсаїсаа 960 аїаасадсії сіссідїада дпшсадда ссадаансду санйсссш ашодддааї 1020 дсддадааг садсіссасс соїаснодіс ісайаасід дошодода ішадааса 1080
Наїснсас сШаїагад аадаанаїа сндайнсад дсссаааїаа ісаддаасід 1140 7 шаїссно аїддаасода дішсц дсосісссіаа сдассаасії дссПсосасі 1200 адаіаїадас аааддддіас адісдайса сіадащціаа іассдссаса ддаїаайаді 1260 діассассіс дідсдддай їадссаїсда Подадісаїд Масаадсі дадссаадса 1320 дсіддадсад Шасассії дададсссса асдішсії ддсаодсаїсо садідсідаа 1380
Шааїаага іІаанссіс аїсасаааїй! асасаааїас сшаасааа аїсіасіааї 1440 60 спддсісю дааснсіді сунпааадда ссаддаша саддаддадатансисда 1500 адааснсас сіддссадаї йсаассца ададіааата Насідсасс айаїсасаа 1560 адаїаФсодда їаадаансд сіасоснсі асіасааай їасаайсса їасаїсаан 1620 дасддаадас сіанааїса ддоаїаацші Ісадсаасіа щадіадідд дадіааша 1680 садіссддаа двсшаддас їдіаддни асіасіссої Паасннс аааддаюа 1740 "7 адшіаша сойаадідс ісащісне аайсаддса аїдаадша іаїадаїсда 1800 айдаашо Нссддсада адіаассії даддсадаа! аїдашада аададсасаа 1860 ааддсддаюа ашдадсідії їасиснсес ааїсааасод доанааааас адащдідасд 1920 данаїсаїа ндаїсааді аїссааша дідадоі іаїсадада акноша 1980 дадааааас аадаайціс сдадааацдісє ааасаюсода адсдаснад даюдадсояд 2040 7 аащшаснс аадаїссааа сісададодя агсааіадас аасіадассуд ддсіюдада 2100 ддаадіасдо аїапйассаї ссааддадас дашдасвдіаї Пааададаа Цасоцасд 2160 сіанпдддіа ссшдаща адідсіаїсса асдіашаї аїсааааааї ададацдієд 2220 ааацаааад ссіаїассся Паїсаана ададодіаа ісдаадаїадісаадасца 2280 даааїсіай їаайсосіа сааідсаааа саїдааасад іаааідідсс аддіасдаді 2340 7 їссчцаюас сасшсадс ссааадісса аїсддаааді діддададсс дааїсдаїс 2400 дсдсосасасс нНдаададаа іссідасна дайойсодї діадддаод адаааадіці 2460
З5 дсссаїсаїй сосаїсаїйї сіссйадас андащдіад дащдіасада спааадад 2520 дассіадодід їаддаїдаї сшаадаїї аадасодсааяд адддсасодс аадасіаддд 2580 ааїісіададі псісдаада дааассана діаддадаад сдсіадсісо щідаааага 2640 7 дсддадаааа ааддадада сааасоаюдаа ааайддааї дадааасааа їайсдшаї 2700 ааададдсаа аадааєсці ададсша шодіааасі сісааіаїдаіїсаанасаа 2760 дсоддаїасда агацйодссаї дайсаїдсу дсоддаїааас діднсаїад сайсдадаа 2820 оденаїсідс сідадсідіс ддайссод оддідісааю сдасіайн даадааца 2880 даадддсодїа Шісасіодс айсісссіа їіаїдадсода дааацісаг їааааадді 2940 й дашаагїа адодсйнаїс сідсіддаас ддаааддодс ашдіададіадаадаасаа 3000 аасаассаас днсдаїссі юйцойссо даадааад садаацдіціє асаадааді 3060 55 сащісідіс садаїсоща сіазаїссії соідісасад сдіасаадда додаїаюдда 3120 дааддйносо іІаассайса Ідадаїсдад аасааіасад асдаасдаа дШшадсаас 3180 дсдіадаад аддаааїсіа Ннсаааїаас асддіаасої аіаадацна їасідіаааії 3240 саадаадаа! асддаддідс діасаснсі сдіааісдад даїаіаасдаадсісснос 3300 діассадсю апнадсцдіс адісіадаа дааааа!сої аїасададд асдаададад 3360 ааїссцоід аашаасад аддаіайадод дайасасдс сасіассадіщданацід 3420 асаааадааї іІадааіасії сссадааасс даїааддіа! ядайдада ддадааасу 3480 дааддаасаї Наїсаїдда садсоюдаа йаснсна дададдааа а 3531 «-210» 4 «2115 2148 «2125 ДНК «213» Васійш5 ІпПигіпдіепвів «400» 4 адаааїйсіа адааісаааа іадсаїсаа адсіщісіа асааїдсдас аднодаїааа (610) аасшасад діїсасіада аааіаасаса ааіасддааї їіасаааасі! ідаїсаїдаа 120 даїаіададс сотовнад щіагсааса ансааасод діанддіаї дсюдаїааа 180 аїсснддіа асстадасаї їссшдсі дддсаадіад сіадссісіатадішаїє 240 7 сіадаїдадс Шдоасссаа адддаааадс сааідддааа ісШадда асаїдіадаа 300 дадснайца аїсаааадаї аїсдаснаї дсаадаааса аадсасндсадашаааа 360
Зо ддайаддад аюсшодс щдісіассаї дааїсдсідд ааасіодаїїаааааійсдс 420 ааіаасасаа даасіадаад іщісаад адссааїаса Чассіпдда асцаднс 480 дасааїсаї їасснсцй юрсадідісєї ддададдаад їіассасіай ассаайашаі 540 7 дсісааЯсід сааашаса снайосіа Наададай садісїіаші даааадаа 600 тададайаї садасісада аашсдаса йсіаїааїс дісаадідда аадаасаїса 660 данайссяа аїсайдсас дааацдй дагасддосі дааадайааадоддсіса 720 аадсідааа ісідддіааа діаїааїсаа Нссдіадад асаїдасш ааддіасіа 780 дашадіодд сасіайсса аадсіаїдаї асасаїаі асссаацаа аасіасадсс 840 7 сааснасіа дадаацдіайа іасааасдса айдддасад їасаїссдса сссааайй 900 асаадіасда снодіаїаа іааїааїдвса сспсойнсі сідссаїада ддсідссон 0/ 960 аїссдаадсс сдсассіасі сдашісіа даасаадна саашасад спанааді 1020 сдаюдадіа асасісадіа їагдаайац ддддадодас айааасіада айссдааса 1080 агзаддаддаа соцаааїас сісаасасаа додаїсіасіа агасіїсіаї іаассідіа 1140 7 асайцассді гІсасдісісу адасаїсіаї аддасідааї сапдосадо осідааїста 1200 пШаасіс аассіднаа Юдадіассї аддандай нсанддаа айсдісаса 1260 бо саїссдаїса саїсідаїаа Шсіанаї ссаддодіаю сіддаацод дасдсааца 1320 саддайсад аааашцдааї! ассассідаа асаасаддас адссаааца їдааїснаї 1380 адісаїадаї іаїсісаїдаї аддасісай Ісадсаїсас адідааадс апйддіайаї 1440 і Існддасос аїсдіадюс адаїсдїасд аагасаайс айсадаїад'аїаасасаа 1500 аїассасідд їаааадсаса іасссіїсад їсаддіасіа сідндуіааа адддссадад 1560
Шшасададід дадаїаїссї ссдасдаасі адіддаддас сашосшй іадіааїй 1620 аашадасі ддаасійщіс асааадаїйаї сдідсіадаа іасдсіаїдс йсіасіасі 1680 ааісіаадаа щіасдіаас дайосадод даасдааці посіддіса ашааіааа 1740 й асаашдааїйа сіюдідаїсс анаасанс сааїсіша днасосаасіандайаса 1800 дсашасаї Ісссаасдаа адсдадсадс Ндасюіад діосідаїасіШадсіса 1860 ддіаадаад Шаїдіада їадайоаа Ноаїсссад Насідсаас асйдаддса 1920 діаасідай їІадааададс дсадааддсд дисадаас щдшасаїс їасдаайссу 1980 ддадданаа ааасддаці адссааадаї сайасасаа аїассацадіаааадрдсуан 2040 7 саа!сідісії їісаддідссо сідїіадаюдад аддассадда Шасадаю оддодаїаїссі 2100
Ісдаадааад аазасіддіа сашододода їагасдадіа ааіїацаа 2148
Зо «2105» 5 «2115 3285 «2125 ДНК -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів
З5 «4005» 5 адтцено аасааанода асаасіаайїї дассададаа іададасаді сдазаддааї (610) аддодсаанс ааасайцаа! даднагїса ааіасойнаго ашіааа і цдааодсойа 120 7 ааадаадвадо ааааїааїсс Ідаїаанса дсисасаад ааададіаса іааїсдсй 180 сддасаасід асдацсій даїаасіддс айссісш іадссайсс даашідаа 240 агадсіасі їаїсддщіа днсаасдсі дссааїсіас ашаїссн айаадоддаї 300 дсадшщйці ісддадааад аддоддайа асасаааїаа ашіадаїда сідіасада 360 адацаасда аїааїаїсад ааасіайса даїсанодід сасдаїддіаїаадаадда 420 7 Надаїаата Шсіддій аїсісдаїсі айаасісс ааададааді аасааїсісї 480 діснадаїа пПуносасі Шессдаас іаїдасаїсс даасаїаюссаашсааса 540 асаадссааї Ідасааддда даїайсаса ісіссааця Пдісссіаа данйнаді 600 діадссіасуд аддддаїаад дададсодсса сассіашо ааншада дааасноій 660 ащшагтассд дідаїсдаад юдадайсодс санпдддсда дасаїдаааїаасисіада 720 60 сдіасдаї! саїассасдо їаїаайнсаї іасссісій аїддаасадс адсаааса 780 дааадіссаї агасісндс сснсаассі ісідааадіа Шаїадаас днаїсадаа 840 ссіатації сасааасіду юдяасіцдісї ссісаїадаа ддададіадіададддачіа 900 дацдіїсісіа Ндіаааїаа іаасдіаааї ссіїсдісаї Ноїайаадаадааадддаї 960
Ісунадаїї сішасіда ойПассассі даадаюааа дідіассасс Найїайддс 1020 "7 Тасадісаїс аападсса шпддай даїсдїасаа ащіааїсії даассааді 1080 аашсодсіа дадіссавді ансіссідуд асасаїсдіа дідсаасссс їасааайаса 1140 айдаїссад аїадаацнас ссаааїассі ісадідааду сдаднсісі Ісдіаайсі 1200 асюйцона чіддассадд ашасідда ддддагано нсдааодо адсадідсас 1260 саааїага саасддаїййї аадіаюдааї днсдассіа аідйНосай дадсадайаї 1320 7 сНагаадас Псдсіадс нНаїадд999 адіїсаааса їіаднайаса соддісссі 1380 ацйадащшо їаїсдсіссс аадіасаа!д адіааюдаю аассШаас аїаісааїса 1440
Шадаїасд саадіаїсас аасіссааї!ї асссдіссаа іаіаїааса дшааша 1500
Істазаїсса даашсада ідіссааааї пушаїад аїсдааіада ансайсоса 1560 діададсаа асіисдаадс адаасдада!ї чадададад сдсадааддс ддаюаацдсі 1620 7 сідшасії ссасааасса аададдасіа ааааїада щдасідасіа ісаїандаї 1680 саадіаїсса ашаднода Посцаїсу даїдаанції дісюдацда ааадсдадаа 1740 пдіссдааа ааїссаааса Ідсдаадсда сісадщаїйд аасдсааш асіссаадаї 1800
Наааціса аадасайаа іаддсаасса даасоддії ддадсоддаад іасадддай 1860 ассаїссаад даддадаїда сдїіансааа дадаацнасд Пасасіасс аддіассші 1920 7 дададіодсі аїссаасаїа Шоіаїсаа ааааїсда!д ааісаааай аааадссіаї 1980 асссодсіаїс аайаадада аїасаїсдаа даїадісаад аспадаааї сіашаай 2040 сдсіасааюд саааасащда дасадіаааї аіссіддсі сіддсіссн ардссасі 2100 ісадісдааа дсісаднод аааасода дадссаааїйс даїдіосаїс асддаддаа 2160 тдаааїсссяЯ ассіадацно сісдідіадо дчадюдоддада адшідссса їсайсссаї 2220 7 сашсісн ддасайда щдіаддаці асадаснаа аїдаддацш адаїіаюад 2280 дюаїайса адайаадас асаадаюдс саїдсдаааа іаддаааісі адаашсіс 2340 ааададаадс юйанадо адаадсана одсасаїдіда адааадсодда даааааа(?дд 2400 ададасааас дсдасаааїй ддаадддаа асааано Шаїааада дасаааадаа 2460
Іїсгадаю сшансої адайсісаа їаіадіада! їасаадсода їасдаасаїс 2520 60 дсааюаїйс агдсддсада їіааасодсоїї саїсдаайс дадаадсдіа ісісссадаа 2580 сіаасююа пссаддщі сааїдсаїсії ашісдаад аапададодд асоїаїіс 2640 асадсдіай сссіатаща ідсаадаааї дісаїааааа аїддсдаш саайаадді 2700 наснодсі ддаасдаюдаа адддсащіа даддіасаас адайсаїса ісднсдай 2760 спонайсе сааднддаа аасадааціа ісасаадада щідсдісю іссаддасді 2820 "7 доусіаїаїсс йсдіднас адсаїасааа дааддаїа дадааддсаа сдіаассаїс 2880 сададаїсод адаасааїас адашдаасід аадшадаа асідідаада ададдааціє 2940
Іаїссаааса асасадіаас дщдіаашдаї їаїасщіаа аїсаадаада аіаіїаадддаї 3000 асдюсасії сісдіаасяо аддаїацдас дааїссіаїд ааадсадсіс Пссдааїса 3060 дснанагд сісадісіа Юаадааааа дддіаїасад аїодасдаад ададаасн о 3120 7 тдщдааша агаддддаіа юдоддайнас асдісасіас саасідсна щідасаааа 3180 даанададі асисссада аассдаїаад діаюдано адайддада аасадаадда 3240 дсансаїсс їддасадсої ддаайцасіс спаддада ааїаа 3285 «210» 6 «2115 3510 «2125 ДНК -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005» 6 аддадайа аїааїсадаа ссааїдвціс ссНаїаайї дшоааїаа Іссдааадс (610) 7 дадаїгацнаа асондсааї (Шадіадс даасаддіад садааайса снааадаєс 120 асодсдсНаа Шададаа ШШасса доїдадавдчії Посансдо спайдаї 180 наагатдод даайцнаа даадаїсаа юдадсосаї пспсоддса даїадаадаа 240
Наайцааїс аааддаїаас ддаайсоса ададдоасаад саайсадад асіадіадда 300 шоадаадда онадамюа аїагацтща дсасіаааад аадддаааа сдаїссідаї 360 7 аасссадсії саааддааад адідсдсасі сдашсодда саасідаїдадссдсіа 420 ассоддіонс сісцаюддс аайссадді Шоаацад сіасшаїсіощшШацсі 480 сааїсадсса аїсіасац адсссіаца ададаюсід їанннодо ддададчаща 540 ддайдасас ааасаааїйаї ааадаша іагадіада! їІаааааасіс сансдідаї 600
Таїасаааф андіднса йЩШаїаа! аїаддшад ддаашааадназада 660 7 ссададіаїї ассушсса аададаацна асааїаїсід Ііспадаїсіїдіадсісй (720 шесаааї! асдаїассо аасаїаїсса агассаасіа ааадісаанаасаададаа (780 60 ашагасад аїссдайцаї псассідді дсасаддсад онаїасісіїсаадан 840 пдададаас сасасснаї ддасіщша аассдасна йпашагасідоїдадіаї 900 сдсддаайс дісасідддс аддасащдаа діадааїсіа діадаасадд'аюацдасі 960 і аагагаадаї ЧЦссідіа ддаасадсс дсаасадсад аассаасасд ашагаасі 1020 ссіадіасії Посіддісі їіаашай іаїадаасаї іІаїсадсіссіайшада 1080 дадаассдао дасдсіаайаї їіананада їіаїадаасда дчшодіюдда аддадіадда 1140
Шшайсаас саааіаасдд Юаасадсії їІасададіда дзаддаасай адацнсісн 1200 даїсаацас сасідадад дадацдіавді сіаасідааї агадісаїсд анаїдссаї 1260 й однадашо сдсааїсай даддааюса даассшад апйадсаазд дданссдад 1320
Ішнснода сасаїсдіад їдсаассссі асааагасаа Нодаїссада ідісаїсасс 1380 саааїассаї іадіаааддс Шсааїсії санйсадад ссасдацйді їаааддасса 1440 дашщшасад додаодаїаї ссісдаада асдаашюняа аїадсшод адайацдсдї 1500 діааасайа сідсассасі аїсасааада їаіїсодсдїаа ддансона їдсісіасд 1560 7 асадащшас аайсіаїас дааіанааї ддаасіасіа Паайацод аацісїсд 1620 адсасіадад асадддодда щшашасад їасддаадаї ісаддонос аддішасі 1680
Зо асіссаша ссійсада юсаащдадс асансасаа їаддаідсш адсисісї 1740 їсааасаасуд аадшаїаї адаїсдаай даашцісєс сддсадаадіаасашдад 1800 дсадааїац ашададаа адсісадааа дсддідааг судсідшас Пспссааї 1860 7 саааісодадї їааааасада дщдасодас їаїсаїтано аїіааадіас сааїсіадй 1920 даддшщшаї садаюааїй насіадаї даааадсдад аандіссда дааадісааа 1980 садсдаасдс дасісідіда Ідадсодааї Насисаад аїссааасі сададдсаїс 2040 ааїадасаас садассаїд9 Подададода адіасодайїа Нассаїсса аддаддадаї 2100 дасдіайса аададааца сопнасодсіа ссдодіассі Пдащдадід сіаїссаасд 2160 7 ташаїаїс аааааагада дацдісдааа Наааадссі аїасссдсіа Шаацаада 2220 доаіаїагса аддаїадіса адаснадаа аїсташаа Псодсіасаа дсаааасаї 2280 дааасадіаа аішідссадо їасддунсос Наїддссдс Шсадссса аадіссааїс 2340 ддааадідїд дадаассдаа ісдацідсод асасассцу аагдаасс даснадаї 2400 днсашіа дддаюдада ааадідідсс саїсайсодс аїсашсіс снадасай 2460 7 даюіаддаї діїасадассі ааададдас сіаддщіаї ддоїдаїсніаадацаад 2520 асдсаадац дісадсдад асіаддаааї сіадааціс Іісдаададаа ассацадіа 2580 60 ддадаадсодс їадсісдіді даадададсо дадааааааї ддададасаа асдсдааааа 2640 пддаайцод ааасаааїа! Ющшаїааа дадосааааа аасідіадаїдсшаш 2700 дюаасісіс ааіадаїад апйасаадсяа даїасдаайа ісосодаїаайісаюсоадса 2760 і даїааасодсод Нсаїадсаї Ісдадаадса іаїсіїссад аопоісіді аайссддді 2820 діааадсад сіаіда адаанадад ддасаїайц ісасадссіа сісісіаїаї 2880 даюдсдадаа аїдісайаа ааадсодаї нсааїаац одснагсаю сіддаасою 2940 ааадддса!їд їадашдіада адаасадаас аассаїсаїй соддісспді діссадаа 3000 щадаадсад аадідісаса ададайсої дісідіссад дісдідосіа їаїсснсдЯї 3060 й днасадсої асагададодяд агаддадад досідідїаа сдайсаїда даїсдаадас 3120 ааіасадасод аасідааай садсаасідї діадаададо аааїаіаїсс ааасаасасуд 3180 діаасдідіа адайагїас іІдсдасісаа даадаатац аддодіасдіа сасисісді 3240 ааїсдаддаї адасддадс сіаїдааадс аанснсід їассадсіда Надсаїса 3300 дссіадаад ааааадсдіа іасадаюда адаададаса аїасндіда аїсіаасада 3360 7 ддаадодао апйасасасс асіассадсі ддсіадща саааадаацй ададіаснс 3420 ссадааасся аїааддчіац дайдадаїї ддадааасодд ааддаасан іаісдіддас 3480
Зо адсоаддаа! їасісснаї ддаддаагад 3510 -2105 7 «2115 3414 «2125 ДНК -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005 7 аддаацдіаа аїсаїсаааа ідаащдіцдіа сссіаїаай дШааадаа іІсссаадай (610) 7 дадашцйад агаісдадду аагаадіаді адаадіадад аасаадіадс ддааацадс 120 нпададсіса сдсдсшсї шодадіса сідсісссід дідсаааш ддашоді 180 нпашодаїа їісашододд аднанодаї ссідаїсааї ддадссіацйісцЦасасаа /--240 андаасааї іаайдаїса асддагадад дсасащіаа даааісааодс дацадіада /-З00 нпадаадддс нддадаїад Наїдаавдіо їазайдаді соснадада агрдададосо 360 7 Ісіссіааіа аддааїссії дсадсададаї дідсдіааїс дашадіааассдайааї 420 дсснНдана ссдсдаїасс їаїссідада даасадддсі Ндааайсс ісішаасяа 480 ашаїдіс аддсюссаа Шодсаша Ісснайаа додадссдгайайшодда 540 садададсвозяо дасидаїас адсіасадіа аасааїсай аіааїсдай аанааїсй 600 ацаасасії айссдаїса Ндідсісаа дднсаайа даддісідда їаайноді 660 60 дндїаасад саадаїайй адашссаа адададдіаа сааїасідіснНадаїайс 720 оносіснй Ісссдаана даїайсодо асаїаїссаа іссааасасіаацдісаайа 780 асаададааа Шаїасаїс Іссадносі даассідоід саадшааа додана 840 сддааїада!ї дададаасс ісассіааід дзаннйаа сісдссної ташагасад 900 ддадідсадад ддаїацша їсандоадса ддасаюада їаїсисіад дасіасадді 960 "7 аащшаїсда дсаасаїсса айсссасіа іаїддаасаї ссдсааацдвс адайаддсеса 1020
Шаашад ссайсасіа Нсідаааса ашаїадаа сацаїсадс состашаї 1080 їсдашсід діддіацс іссіааіада асдададсад юддааддодіаадайсца 1140 ассдсаадад аїааїаасії ааайссно ссаншаї аїадаааада аддйсша 1200 дансіша ссдаднасс ассідаадаї дадааїдаас сассНаїаг дадіаїаді 1260 7 саїсдовнаї дссаїдсіад ашодсіадад ісаїссодїад йсідадсс аадіаайй 1320 дсдадааїйс садіащшіс а(ддасасаї сдіадсосід дсссіасіаа даадіааді 1380 ісаїсіадаа іаасасаааї сссаддодіа ааадсасаїа сссіїдайс аддадсаш 1440 онНагааадод чіссюдаїй їіасаддадчод9 даїтайсна сіаддсосіаа ШОдЯаїасс 1500 паддадсії їіаададідас ссПасадда саацассас ааасаїаїаа іаїаадааійс 1560 7 сдаїафдсії сдаїадсааа їададдідаї асасідаці Шсасадсс ассисаїаї 1620 доссісасаї ссааааас ааддаїйаїа даїдадсссі їІаасаїсісд ПсушасСІ 1680
З5 сдіасаасіс Шісасасс ааїаасці асасаадсас аддссдаай аааїсіааса 1740 азасаасадо чідщШаїаї адаїадаайц даайсаїсс саднааюс аассцшдад 1800 дсадааїад ашадааад адсасаааад дсддаюааю сісідшас нснсосааї 1860 7 саасіаддаї їІааааасада Шдасодаї іаїсатано аїсаадшс саашаадаід 1920 данощшаї ссдаюдааїй! сідіаїада!ї даааадсодад аайдіссда дааадісааа 1980 садсдаадс дасісадіда Ідаасддааї Пасіссаад айсааасн ададосаїс 2040 ааїадасаас садассаїдо сіддачадда адіасддайа Нассаїсса аддаддаааї 2100 дасдіайса аадааааца сдісасасіа ссддаїассі Ісдадаатю Наїссаасд 2160 7 ташоїаїс ааааааїада дацдісаааа Наааадссі аїасссуЦа їсадйаада 2220 дддіаїагсод аадаїадіса адаснадаа аїсташаа йсдсіасаа дсаааасас 2280 дааасадіаа ашідссадо їасддунсос Наїддссдс Шсадісда аадіссааїс 2340 ддааадідсд дадаассдаа ісдащіої ссасадсно аагдаайс іааісіадаї 2400 днесідса дадасддада аааащідса саїсайссс аїсашсіс ссіадасай 2460 60 чаюдчнодаї діасадасії асадатюас Паддщіаї ддощаїайнй сааданцаад 2520 асдсаада оссаїдсаад асіадддааї Нададнціс Ісдаададаа ассацадіа 2580 ддадаадсодс їадсісдді даааададсо дадааааааї ддададасаа асдсдаааса 2640 посаай9ао ааасдааїаї сдушасааа даддсаааад ааіїсідюдаїдсшаш 2700 дсааасісіс ааіаїаагад айасаадсяа даїасдааса ісосааюдай садсоддса 2760 "7 даїааасодсод Нсаїсдааї ссдададодсі їаїсносда аанаїссді їаїсссадді 2820 діааадсодо ддайшоа адаанадаа дагсдіайі ісасідсай сісшааі 2880 даюдсаадаа аїдісайаа ааасадідаї нсааїаацд дснагїсад сіддаасоїд 2940 ааадддса!д іадагаїада адаасадаас аассассаїйї содіссіді дНссідаа 3000 адаадсад аацдіаїсаса аааадіїсаї дшноіссад дісдіданНа асснсЯї 3060 7 дісасадсої асааддадчояд агаїддадаа дданосаїаа ссайсаїда аайдаадаї 3120 саїасадаїд аасіааацдії ї(адааасюї даадаадасо аадісіаїсс ааасаасасд 3180 адаасущіа адснаїсс Ідсадаїсаа дааддаїа адддаасаю сасіїсісді 3240 ааїсдюдчдаї аїдасдааді стаїддааас ассссійссс їассадсіда Маїддсдсса 3300 ашащдацда адааюдсаїа сасададда сдаададсдіа аїсснаїда аіїсіадсада 3360 7 ддвіащдодао айасасісс асіассадсі дднадааа саааддааї! адад 3414 «210» 8 «2115 2160 «2125 ДНК -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «-4005» 8 адааасіаа адааіссада іІаадсаїсаа адснодісіа дсааїдсдаа адіадаїааа бо аїсдсіасдуд айсасіааа ааашдаааса даїаїадааї дааааааї дааіаадаа 120 данацоа дааїцісіда дсащдадасді андаїссодї ПоНадюс аїсаасаай 180 7 сааасоддаїа ндааайос ддааодаїй сподіасіс їадаїдйсс І шосюда 240 саааїадсіа дссісіаїад Шаїсца ддсдаодсій ддосіааадоа даааацісаа 300 щадаааїйсі наїддааса шіадаадад апайааїс аааааайапйааснаса 360 адааагіааад сасцсада сідададда НПаддодаї сшадссді сіассаїдаа 420
Ісдсндааа дпдадіаа аааїсдіааї аасасісдад сдаддадідіадісаадаас 480 7 сааїаїагсд сацадаасі дча(дщшой сааааасіас спсішос адіаїсідді 540 дадааадіас сацайнасс даїагаюсс саадсідсса ашасаш унпонаца 600 бо ададаюдсаї сіаційду аааадаагд9д ддайнаїсад сисадаааі йсаасаші 660
Таїаассдіє аадісдаасу аасаададаї їайссдасс анпдшіааа адіайааї 720 асаддссіаа аїаасндад дддіасаааї дссаааацчії ддонсоунаїааійсааш 780 і сдіааадага дасайааї даанадаї Насдносос їайсссаад сіаїдайаса 840 сИпдіаїаїс сіанаааас саснсасаа спасаадад аадіатаїасадасдсаан 900 дддассдідс аїссіїсадду дссонодса адіасдасії ддіаїааїаа аадсассі 960
Ісунсісіа сдаїададдс юсіднаїї сдааасссдс аїсіасісда Шісіадаа 1020 сааднасаа Шасадсії айаадісда Юддадіааса сісадіаїаї даааююоа 1080 й ддаддасаїа аасіадаай ссдаасааїа ддаддаасої іаааїассіс аасасаадда 1140 істасіаайа сіїсіанаа Іссщіааса пассоднса сдісісдада сдісіаїадд 1200 асюдаагсаї ддсаддаодсі ааасіайі Паасісаас сіднНаа!дао адіассіадд 1260 дидашіс апддаааїй сдісасасаї ссдаїсосаї сідаїааш сіацаїсса 1320 ддаіаїсід даандддас дсаацасад дансадааа аїдаанасс ассідаааса 1380 7 асаддасадс сааайнайда аїснаїаді саїадасіаї сісаїаіадод асісашса 1440 дсаїсссаю щдааадсдії ддіагансії юдасодсаїс діадідсада ісдіасааай 1500
Зо ассайнаай садаїадсаї іасасаааїа ссанадіаа адосайсааісНссосіса 1560 д9аюснсід понпададо ассаддайц асадаї9ао99 аїаїссійсо аадаасаааї 1620 асюдіасаї надддаїаї асдадіааа! айааїссас сашосаса асдудіаїсдс 1680 7 Нпаадаанс онаїдсіс їасіасаааї Надаансс аїасдісдайаасддаааа у 1740 дсіанааїс ааддіаай! Нсадсаасі аїдааіадад дададдасі адасіаїааа 1800 дссшадаа сідтадаси їасіасісса Шадснії саааїдсаса аадіасайс 1860 асаагаддаю снодаасії сісшадаї аасдааційї аїагадайао аапдааш 1920 днссодіад аадіаасаїа Ідаддсадад саданно ааааадсодса ададдадай 1980 7 асюсасівдї Часаїсіас дааїссадодї ддоанааааа сааащціаас ддадіаїсаї 2040 айдассадао іаїсааайй адіададісі Наїсааай аайсіаїсі сдаїдаааад 2100 ададаанаї ісдадаїацді їІаааїасдсу ааосаасійс аїапддоса їаасаїдіад 2160 «2105» 9 «2115 3495 «2125 ДНК -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005» 9 аддададаа аїааісадда ісааїдсаї! ссПнаїаайї дшоааїаа Іссюадаїй (610) 60 дддагацад агайдаааа Шсааїсіс даасноїаї сдсаадісад соіддаасіс 120 асасдщіс Шодаасдс аїсіаїсссії дддасадуй Носано9да ісїайсдас 180 асашода дідсісіаду сдісдаїсаа ддадснас ісснососа аайдадсаа 240
Наайнаа ааадааїаас аасадіадаа аддаагіадад сдайсаадсанаадідда 300 сіаїсдадіа днаюааді агазайдад дсапаадад аагддодадаа даїсідцдаї збо "7 ааїссадсії сасдадаїад адіддноса сдіШсоід саасадаїаа псісіааїа 420 асадаїаїас сістандда аайссаддаі Шодадаїад сіасшШаїс адістаїасі 480 саадсддсда аїсіасай адсшойна адададссоа Шасіндо адааачаща 540 дданаасас ааасаааїаї даадаїсід сасасаадас ісасдадайаіансаадаа 600
Тасісадасс айдсдсаад адіагаа!ї сааддшоа агаайацод адодаїаааі 660 7 асаадатайн ддасіїсса аададааца асаашсоод іспадага ідісдсісй (720 нпсоссаааї асдасаїссд аасаїаїсса айссдасас ааадссаайаасаадддаа (780 аагагасаї сісссдісді їдсассідаї діааанода ІШаацдіаїаїсдаатюіа 840 пдададссс сісаїсідаї дданшії даїсдааїаа Пашайасіодіасаді 900 адаадіасас сасайддда аддасайаа дісаїаїсіа даадаасадуд дсааддаааї 960 7 дадаїасдсі сдссшШаїа юдадіддсі дсааасосад аассассаді їасіаїаада 1020 ссіасаддаї Насідаюа осааадасаа дідіатадад їасіаїсасуд юнНосНсі 1080
Шадааай саддаассаа сшацдієсід аіадацсад саїсайссі аасіаїаш 1140 адсасіадсі сааїсіаїад аааддації дддашааї сідаїасіаї даюдааай 1200 ссаандадо ддасюаїйсс азагацода іаїадссаїс дацйадсса дйодаш 45 лт260 7 асюсдісаї сіссащшаї сісссадіаї дсааддоасос ссоїаїніс Подасдсаї 1320 сдіадціосда сішасааа їіасаайдаї ссадададда Насосаааі ассааддіа 1380 ааадсаїаса аїснсаюдс аддідссасі данойадад часссоддайн їасаддіддаі 1440 даїсіснцас даадаасдаа їасіддіаса Шодсадаїа їіаададіааа їайасіддд 1500 ссапца!сіс ааадаїа!со шіаадаай сосіаїдсії стасдасада Шасааш 1560 7 нпсасдадаа іІсааддаас йсідіаааї сааоддіаай іІссааадаас іаїдааїада 1620 дддааїаай їадааїсідд ааасшадао асідсаддаї Падіасдсс шасі 1680 їсавааїсодс ааадіасаїйї сасанодої асісадосії Шсаааїса ддаадшаї 1740 агадаїсдаа НКдаашої сссддсадаа діаасансо аддсадааїсідашадаа 1800 ададсдсааа аддсддаюаа ідсссідні асіїсіасаа дссаасіадо дсіаааааса 1860 60 аашіаасда ойассаїаї юдаїсаадід Іссаашад Посоїдш аїсодадаа 1920
Ішцісі99 агдаааадад адааццісєс дадааадна аасадсдаа дсдасісаді 1980 даїаадсдда ашасіїса адаїссааас Нсададодда Ісааїаддса ассадассаї 2040 ддсюдадад даадіасодда їанасіаїс сааддаддад адасодїай сааададааї 2100 тасонасдс іассдддатас Нндаюад дсіаїссаа соїашаїйаїсааааааа 2160 "7 дададісда аайаааадс сіаїасссді Іаїсаайаа даддаіаїаі сдаадайаді 2220 саадасіад ааасіай аайсонас аайсаааас асдааайадіааашцдіасса 2280 ддіасадодда а«Шаїддсс ісшШсідіа дааааісааа Подассно ддадаасся 2340 ааїсдадвсод сдссасассі дааїддааї ссташас асіднссід сададасдду 2400 дааааацціо ідсаїсаїйс іІсаїсаше Ісшодаса Поаїщцісда адіасадаї 2460 7 пааашдадао ассіаддідї агдданодаїйа Нсаадайца адасосаада ддссасдса 2520 адасіаддда аїсіададі ісісдаадад даассонаї їІаддсдаадс ойпадсасаї 2580 дюаададад сддадаадаа дчіддададас ааасдсдада аасідсадії ддааасаааї 2640 ацдісіаїа аададдсааа адааїсідіа дасщшаї Ноїааасіс Ісаайаїдаї 2700 адацасаад соддаїасдаа саїсосдаїд айсаюсод садаїааасо сдуНсайїада 2760 7 аїссдддааяд сдіаїсідсс ададнацсі діданссад дідісааіс доассаййс 2820 даадаанад адддасдіаї ІШасадсо їансснаї аїдадсодад аааїнац 2880 ааааашддса айцісааїаа даоснайца дсіддаасо Ідааадоадса ідіадайіа 2940 даададсааа асаассассу Нсдаїссії дНаїсссад ааїдддаадс адаадідіса 3000 сааааацдіїс дідісщісс адаїсащдаі їагасснс діднасадс діасааадад 3060 7 ддаатддад аадоцосої аасдаїссаї дадаїсдаад асааіасада сдаацааад 3120 шШадсаасі ддіадаада аддаїаїсса аасаасасодо іаасдідіаа дадіаїасі 3180 адааїсаад ддаїаддада дідіасддаї одсаїдіааг Іссдіааїсоа юдагадад 3240 даюсаїаїд дасасааїсс Нсаасдссі днсанаса саасдссоїасдаадаадаа 3300 асдіаїасад аїдаасдаад ададааїссі Ідідаадсіа асаааддаіа цідаайас 3360 7 асдссасіас садндона дідасаааа даанадааї асісссада аассдасаса 3420 діаїбдано ааайддада аасддаадда асайсайо ддасадсаї ддаанасіс 3480 спаюдада ааїад 3495 «2105 10 «2115 3501 60 «2125 ДНК
-213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005» 10 адаадаїаа аіааїсадаа ссааюдсаїйа ссаїаїаайн дснаадіаа іссідаддаа (610) і діасннда аододдадад даганцассі даїаїсдаїс сасісдааді Нсіащісд 120 сішодсааї Нейсіааа їІаасшойї ссаддада9д9 ддоНацшіс адданаай 180 ааїаааазаї дддддасій дадассаїсі даадддаа ташсносасаданйдаа 240 садндайця аїсдаадааї адаадсадса діаададсаа аадсааісусідаайадаа 300 дуашаддода дааднагса асіаїа(да дадасаша аададідддаааааасісса 360 й даїаасасад сддсісддіс їададіаасі дададацс діаїаайда сісааан /- 420 даадсааагїа Ісссісдйї Ісддашес ддашодаад ідссасісіаісдушаї 480 асссаадсад сіаашоса ісісосісіа Наададай сідпунніддададада 540 даддайцоа сдасіасааа щісааюаї аїсіаїааіа дасааднаа дадаандаї 600 дааїаїадсод аїсанціаї адагасдіаї аааасадааї їадаасдістададшадс 660 7 Іїстатадсдс ааддадааї аїаїааїсад Шадаадод аайдасасіаасддіаца 720 даїгайцоїсод сісішссс даасіаюаї додгадасідї аїссдайсуд аасаацієї 780
Зо саандасаа дадаїаша їасаїсссса діаадсдааї Шана ісссашаї 840 аацаїааа їаднддісд сснасюаа садсадсіаа ддсдассаса ісцПаддас 900 псешаасі ссадагїсаї діаїасадіса даїааїадас дадаасана Подісадда 960 7 спдааада адаосіасіда їасісадда аассаадіді сайсссш адсідддасі 1020 ададддааї! садсіссасс адіаасідії адаааїаац дідадддасдчі Наадаайа 1080
Наїсададс саїшанс аїсассції сіаддсасса дідіосіадо аадісаїд99 1140 даачваашо сішосаїс іааїасіасі асаадісідс саїсіасааї аїаїадаааї 1200 сдюддаасад їадайсаї!ї адісадсаїа ссдссасаад ацйайадсдіассассдсас 1260 7 аддаддіава дісашай аадісасаїї асдадсаса аїаднсісс іатанйссас 1320 ддасосаїс діадідсаас сссіадаааї асаандаїс садаїадіаї сасісаааїс 1380 ссадіаона аддснсдса ссісісідаї ддансаодна іІаааадддсс ддасайїаса 1440 ддаддадаїй іааїаадссі ассідіаааї аасшасіс ашссдааї сссашсад 1500 дсааасасіс сасаааддіа іІсдіанада анйсонаїд сддсадасіс адаїдддасі 1560 7 поддаїгадід дадішсії аадіосадса дсаддддаю дішааас аасісцаї 1620 адддссасаа щдадсссща адонсснца асаїсісоїд ашісаай Шадаша 1680 бо аасасаїсді Нассіссда Щщіадсаїсі ааснаді їасайнаг асойцаїаів 1740 сдассадада апшіаїаї адаїададсу даашаїсс садіодаїдс аасснсдад 1800 дсадонаїа ашадааад ддсдсаааад дсдаюдааюю сссідШас Псіасааас 1860 і саааааддаї! Іасааасада дююдасодаї їаїсаїтацо аїсаадіаїс сааїсіади 1920 чанощшаї сідададії пдаснадаї даааадсдад аандіссда дааадісааа 1980 саддсдаадс дасісадіда щадсддааї Пасіссаду айсааайі сададдсаїс 2040 ааїадддаас аадассощда аддададда адіасосаїа Насіаїсса аддаддааай 2100 дашіайса аадаааайцй юнасасіа ссаддідссі пдагдсою Паїссаасд 2160 й ташоїаїс ааааааїада дааїсіааа Наааадссі аїасасуца Шаацаада 2220 ддаїаїагад аадаїадіса адашодаї ашасцнда іссонНасааасдааасаї 2280 дааасайцаа ашдіссадао їасіаацдісі ссаїдісдс Шоїасдда дадсссасії 2340 ддааадідід дддаассааа ісдасоса ісасааатад ааддаа!сс Юаїсіадас 2400 тдсісндса дадасддада аааащідсо саїсансос аїсашсіс сйддасанй 2460 7 чаюднодаї діасадай дааюдадаас сіададіаваї дддщаїйай сааданаад 2520 асасадда дісадсаад асіаддаааї стадааціє Іісдаададаа ассоцаца 2580
Зо ддадаадсді їІадсссдці даадададсо дадааааааї ддададасаа асдідааааа 2640 подсааїсад ааасааа!аї (дШаїааа даадсаааад аадсідіада дошайс 2700 діадайссс ааіададад апйасаасдсі даїасдаайа ісоссаїдай ісадсддса 2760 7 даїааасасод нсаїсаааї ссдададдн ташсссад адсшсіді дайссадді 2820 дісааїдсад сдайнсда адаапцадаа ддссоїац ісасадсаїа йсссіаїаї 2880 даюдсдадаа аїдісайаа ааасоддідаї нсааїаац дснагсад сіддаасоїд 2940 ааадддса!їд їадашіада адіасаааас аассассдії садіссіадііаїсдсддаа 3000 щадаадсад аадцісаса адааднссі дісідіссад дісдідосіа їаїссцсЯї 3060 7 дісасадсої асааадаадяо агаддадаа дданосаїаа ссайсаїда дайдаадаї 3120 саїасадаїд аасідаацдії ї(адааасюї даадаададо аацдіаїаїісс ааасаасаса 3180 діаасдщдіа адопйагїас Ідсдасісаа даадааїаса аддаїдсаїа сасисісді 3240 ааїсдаддаї аїдасдаадс сіаїддаааї аасссіссо їассадсада Надсдіса 3300 дстадаад ааааадсдіа їасадада сдаададада аїссндіда ааїддааада 3360 7 дунНасасас сшассаді доднаїага асаааадаа! тадааїаш сссодааасу 3420 даїасадіаї ддандадаї юдадааасод дааддаасої Чаїсаїада адсодюдаа 3480 бо Насіссіса юдаддааїа а 3501
«2105 11 «2115 3546 «2125 ДНК 213» Штучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного Сту "7 «4005 11 аддасааїйа аїссдаасаї сааїюдацдідс аїсссНаса асідссідіс Іаасссідад (610) дідаадаюдс даддаодсода дсосаїсдад асадодсіаса сіссааіїсда сашсосід 120 й Ісісїісасдс адіссіссі дісддаднсе дідссідосо сіддонсдг осідадссіс 180 дісдаїаса Шоддадаї сісддсссс Ісссадіддуд асусшссі ддіссадаїс 240 дадсадсіса Паассадсд саїсдаддад нсодсіадда аїсаддссаї псосоадсія /-з00 дададссісі сіаассідіа ссадаїсіас дсддадіссі їіссдсдадід ддадосідаї 360 ссдассаасс ссдсссідад ддаддадаїд сддайсаді Ісаасдасаї даанйсддсу 420 7 сідассасда сіаїсссосі сіисоссдіс садаасіасс адднНссссі ссідісідід 480 їасдіссадуд ссдсдааїсі дсассісіса дідсюсодсу асушесої днсадасад 540
Зо сасіддадсі ісдасдсідс їасіанаас іІсссосіаса аїдаїсісасіаддсідаїс 600 ддсаасіаса ссдасіасдс сдідсдсіду їасааїассу досісдадад дашодддоас 0 660 ссддасадса ддданоддаї саддіасаас садійссдса дддадсідас ссісасдай (720 7 сіддасаїсо іддсссісії сісдаасіас дайсісодс дсіасссаайіаддассоаїд 780 адссадсіда сдсдддадаї сіасасаааї ссідіссіс9у адаасінсда сдддісайс 840 адддадсаща сісадсосаї дадсадааї аїссдссадс содсассідаї ддаїайссіс 900 аайсдаїса ссашасас ддасдідсас адддаднса асіасіддіс ддссаїсад 960 аїсассасії сіссадісдуд днсісаддс ссддаднсду сшсссасі дпсЯдддаас. 1020 7 дсдасааїд сідсіссасс садіссісдії Іісдсідасода одссісдддаї сипссудсаса 1080 сідіссадсс сасістасад дсоддагсай сісддсісід ддссіаасаа ісаддадсід 1140 псоюсісод асддсасдда дісісше дсадїсасіда саасіаассі сссаїссасі 1200 ашасаддс ададдддсас содюддасадс сісдаїдіса Ісссассіса ддасаасісд 1260 дісссдсосаа ддосіддсії сісасассдс сідісссаїд ісассаїдсі садссаддсі 1320 7 дсщдасасю Шасасісії дадддсіссс ассійсіссі ддсадсассуд дадсдссдад 1380 нсаасааїа ісацодсдіс адайссаїс асдсаданс сддсдаїдаа ддддаасс 1440 60 сіснсааю дсіссдісаї іаддсддсссс дддансасад дсддддассі ддаідсодссіс 1500 аасісдісід ддаасааїаї ссадааіадд досіасану аддісссааї ссаснсосі 1560 адсасаїсда сісдсіассуд суащадяодіс сосіасдсіа дсдщасісс дайсаїсід 1620 і аасадісаайн дадосаайс аїссаїсне Ісдаасасся ідсссосіас сосіасдісї 1680 сіддасаасс Іссадіссіс сдашсододс їаснсдавії сідсіааідс сисасдісї 1740 їсасісддда агаїсуандо сддсоддаас Несісаддда садссоддсоі їаїсайдас 1800 содснедаді ісаїсссддї дасадссасі сюдадосодо адіасаассі сдадсдсудсі 1860 садааддсса щдааїдсосі дісассісс асдаассадс (ддодссісаа дасааадісє 1920 й асюдасіасс асаїсдаїса адісадсаас сіддйнассі дсосісісдда сдадіїсідс 1980 сідда(дада ададддадсі дадсдадаад дідаадсаїд ссаададасі сісадасдад 2040 сддаассісс Ідсаддасіс саашсааяд даїаїсааса дасадссада заддададідд 2100 досдддісаа ссддсаїсас дайсадддс ддддасдаїйо існсаадда даасіасай 2160 асасідадсд дсасшсода Ідадідсіас сссасцасс Ісіассадаа даїсдасдад 2220 7 їсааадсіда аддсдуйнсас ссосіассад сіссдадосі асандадда сісссаддаї 2280 сіддаддіді ассісаїссд сіасаасодсс аадсасдада сосідаащді сссаддсаса 2340
Зо двісісідії ддссасісдс дунНаадіса ссаапддас дсідсдоасда дссааасадд 2400 тдсосіссіа ддаїсдадід даадссідас діддайосі ссідсаддда сдасдадаад 2460 тдсдсісасс аїадссасса Шсісдсіс дасаїсдаїд ісддоїдсас ддассідаас 2520 7 дададаїсісд дсдісіддаї їІаїсісаад айаадасас аддасоддоаса юсдаадаїє 2580 ддсаассіду аднссісда ддадааодсіс сідсісддаса адасісіддс іаддаідаад 2640 ааддссдада адаадіддсд сдасаададу дадааодсісд адідддадас саасаїсдіє 2700
Тасааддадо ссааддадіс соайдасосу сіднсаї9д9 агадссадіа саасаддсіс 2760 садасадаїа сіааїаїсос саїдайсас дсідссдаса адсоддаїдса ісдсаїссдс 2820 7 дадасдіасс Ідссададсі дадсдщюдай ссіддсдіса асдсддсіаї списдаддад 2880 сіддаддодсс їсайнсас дасщшсісс сідїасдасд сссдсаасої даїсаадааї 2940 ддадайса асіасддссі садсідсідд аасдісаада одссасаїдзда сдісдаддад 3000 садаасааїс аїаддіссді Іісюдідаїс ссддадіддо аддсідаадісадссаддаа 3060 дсадддій дсссаддсад дадодіасаїс сіссддунНа ссдссіасаа ддаддасіас 3120 7 ддчаадддсі дсаїдасодаї ссасдадаїйї даддасааса садаїдадсі даадисадс 3180 аацйдсунау аддаддадаої діасссодаас ааіассдіда сдідсаасда сіасасадсс 3240 бо асісаддаду адіасдаддо сассіасасу Іісдаддаасс дддадіасда дасосцас 3300 дацдісіааї!ї ссадсдіссс адссдасіас дссісадсодї асдаддадаа ддсдіасасд 3360 дасддссоса дддаїааїсс Ндсдадісс аассдддадсі ассдсдаца сасіссасід 3420 і ссідссддсі асдісассаа ддадсюдад їашсссдо адасадасаа ддашодаїс 3480 дадайдодсод адасададодд дасснсай діддансда Пдадсідсі дсідаюдад 3540 адіад 3546 «2105 12 «2115 3531 «212». ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного Стгу 7 «-4005 12 аддадаїсд Юдаасааїса дааїсадідс дідссНаса асідссісаа іааіїсссдад (610) аїсдадаїсс дадодо9до9 дсдсашсо дідддсааса содссіаїсда сашсссіс 120 7 адссюасас адиіссіссі дісідаднсе днссаддсуд сюдансої дсісддсесід 180 аїсдассіса Шоаддадії сдідддсссо їІсссадіюдад аїсшссісдсссаддіє 240
Зо дадсасдсіда Ісаассадад чайосодад асіднсдда агассосдаї ссаддадсід 300 дададсаїдао сісдсудшіа саддасаїас дссасідсді їісасщадід ддадаадудсі 360 ссадасдаїс сададсідад ддадосісід аддасасаді Іісасддсдас ададасцас 420 7 аїсіссддсс дсайадсоді ссісаадаїс садассіїсуд адансадсіссщдадсою 480 нсдсісада сідсіаассі ссассідісд сіссідадда асоіддісн спсддосад 540 сосідадсі ісісдассас дасадюдаас аацасіаса асдассісас щаддосаїс 600 істассіаса саданасдс сдіссдсідо їасааїассоу досіддадчад датшіддодс 0 6б6о сссдасадса даданоодді ссддіасаас садіссдса ддададсідас асічасічуд 720 7 сісдасаїсу іІсдсдсідії сісдаасіас дайсісддс дсіассссаї ссддасадід 780
Ісдсадсіса сісдсдадаї Насассаас ссадіссідуд адаашсда сдддіссс 840 аддддсаща сісадсодаї сдадсадаас апйаддсадс сссассіса одасаїссід 900 аайссаїса ссашасас ддаїдідсас сосодонса асіасіддад сддссаїсад 960 аїсассаосії сіссадісдуд днсісаддс ссддадносд сшсссссі спсдддаас 1020 7 дсдасааїд сідсіссасс садїдсісдіс Ісссідасід дссісдоадаї спсаддасс 1080 сісіссадсс сасідіасад дсоддаїсаїй сідддсадсду ддссіаасаа ісаддадсід 1140 бо псоюсісод асддсасодда дисісанс дсдісссіса сіассаассі дсссіссася 1200 аїсіасаддс адсдадасас адісдасісі сісдацйна йссассіса ддасаасіса 1260 дісссдсосаа ддосіддсії сісасасада сісісссаїд НМассаїдсі дадссаддсі 1320 і дсдасасід діасасдсі дсддасіссо асайсіссї ддсадсассу садсдсддад 1380 нсаасааїа ісанссдіс дісісадаїс асдсадайс сссісасааа діссасіаас 1440 сідддсадсд ддасаїсодді шідааддас ссдаданса сіддсддоада саїссісадд 1500 аддассісдс саддссадаї сісіасісіс сдсонНааа Пассдсісс асідадссад 1560 сдсіасадод іІссдсаїсся сіасдссіса асдасааасс дсаднсса сасдіссаїс 1620 й дасдддаддс станаасса дддсаацшс ісюссасіа ідісаїсс9д9у дісааассіс 1680 садісдадсі сшсосдсас сдідддайнс асіассссді Іісаасісіс сааїддсадс 1740
Ісддідіїса сссідісадс дсаїщісне аасіссдоса аїдадуша саїсдассдд 1800 айдаднсд Нссоддссда адідасшс даддсоддаді асодаїсісда дсдсдсдсад 1860 ааддсдюа асдадсідії сасдіснса ааїсадаїсод дссідаадас сдасдісасу 1920 7 данассаса Пдассаддії сіссаассіс дідадідсс дадсдасда дісідссіс 1980 дададаадс аддадсідіс сдадаадої аадсаїдсса адсоссісад сдасдадачя 2040
Зо аассіссідс аддасссдаа сиссдсдас аїсааіаддс адсіддасад дддаїддада 2100 ддсадсасад аїагсасіаї їісадддос9949 дчасдаїйдісі Іісааддадаа сіасоцасс 2160 сіссідддаса сдійсдасда дідсіассса асдїассіді ассадаадаї сдададіса 2220 7 аадсісааду сдіасасася сіассадсід сдсддсіаса НКдаддасад ссаддаїсіс 2280 даздаїсіасс ЩЗайнаддіа саасдссаад сасдадасод Паашіодссддсасаддсе 2340
Ісссісіддс сасісісідс Ісадісассс аїсдддааді дясдасдадсс ааасаддідс 2400 дсіссісаїс Ісдадддаа іссддассю дайдсадсі дсадддасодо сдадаадідс 2460 дсісассаїа дссассаїйї сісдсісдас аїсдайцідо дсідсасудда ссісааюдад 2520 7 зчасіда9доЗд Ісддайаї сісаадай аадасасадду асддоасасдсіадодсідддс 02580 аассісдаді Ісстддадда даадссасіс дюддосдадао сісіддсіад ддісаадаїс 2640 дссдадаада адіддадода саадсодддад аадсюдасді дддадасодаа саїсдідіас 2700 ааддадасіа аддадісдді ддаїдсссіс Псдісаасі сісадіасда ссадсідсад 2760 дсідаїасса аїаїсдссаї дайсасосс дсддасаадс дадіссайс даїссдсдад 2820 7 дссіассісс сададсідіс ідідаїсссі ддсдісаасд сідссаці сдаддадсід 2880 дададсадда існсассдс дісадссід їіасдасодсіс ддаасдідаі їаадааюду 2940 60 дашсааса аїддссісіс дідсіюддаас дісааддоасс асдіддасоді сдаддадсад 3000 аасаагсадс дсісідіссі даїсойссії дадідддадо ссдаддашс асаддаади 3060 аддашосс саддсад9до діасаїссіс сдсдідасся сдіасаадда ддосіасддуд 3120 і дададсідсо ісасдаїсса щшаданодад аасааїасад асдадсідаа дісадсаас 3180 тдсоадаадо аддадаїсіа сісдаасааї ассоцасої дсаасдаца сасідідааї 3240 саддаддаді асддсдадос Пасассіса аддаасадодао дсіасааїда досіссаїсс 3300 дісссідсід асіасосіад сдашасдаяд дадаацісої асасддацдада саддадодад 3360 аасссаїдсу аднсааїсо содсіасадо дасіасасіс сасісссіді сдодсіасой 3420 й ассааддадс ддадіаці сссададасс даїаадчцісі ддаїсдада додсдадасі 3480 даддддасаї ісайоюда їадсудаддад сідсідсюа їддаддадиа а 3531 «2105 13 «2115 3714 «212» ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного Стгу «4005 13
Зо адаагадса асаддаадаа Юадаасдад аїсандасд снсойнсаї сссадссодіс (610)
Ісдаасдаді сіднасіаї Нсіааддад їасдсдсада ссааїсадсі ссадаасааї 120 їсаандаду асдддсщіа саїсдсідад ддсдадіаса Ндаїсстіїї сощісадса 180 7 їссассдісс адасддоадаї сіссайосі ддссдсаїсс юдоадоіссіддасайсса 240 псосідасс адсісоссіс аїйсіасісс йсаїсодідао чоададсідід дссіаадддс /-З00 адддассаді дддадаїсії саїддадсас діїдадсадс іІсдідсосса дсаданасі 360 дсіааїдсса ддаасасддс ссіддсіс99 сіссадддсс ддоадаасіс сіссосЯсс 420
Тассадсада дссісдадда сідасюдад аагаддаасо асссддас дсодсадсоїд 480 7 сістасасас адіасаїсдс дсіддасдсід дасійссіса асдсдацюрсс асіднсусі 540 айсоасдадс адааддйсс ісіссідаїд дідіасосіс аддсддссаа ссідсассіс 600 сідсіссідс дсдаїдссіс асісїасддд аддааднсо дссідасійсісаддадаїє 660 садсодсіасі асдададдса ддісдададу асссдоддасі асісадаїса Пдсуаюсая 720 даїасааса сддддсісаа сааісідадд ддсасааасд сддададсід ддіссудсіас 780 7 ааїсаднсс дсадддассі дасссідддс діссіддаїс ісойоусссісНсссдуїса 840 їасдасасса ддасдіассс саїсаасаса іІссдсдсадс Юасісоддда ддісіасасс 900 бо дадссацо дддсдасіда сойаасад аснсдаїда апйддіасаа сааїаасдсс 960 ссаадснсії сддсдаїсда дассдсюию анаддісіс сісассіссі ддасцссіс 1020 дадсасдсіда адаїснсіс ддссіссадс аддіддісіа асасссоддса саїдасдіас 1080 і ддадоддосс агасдаїсса дадсаддссс айсдсдодсо сссісаїсас аадсасісас 1140 ддсааїасса асасдісдаї саасссадіс асонссаді ісссіїсісд ддасуашас 1200 сдсасададі саїасдссдо даїосіссід дддосаїсі ассісдадсс ааіссасддс 1260 дюссдасод Іісадднсаа Шссоддаас ссссадааа сунсдадсо сддсасадсу 1320 аасіасісіс адссдіасда дісасссддс сідсадсіса аддасіссда дасодадсід 1380 й ссдссддада ссассдадад дссааасіас дадіснасі сасассддсі дісссаїаіїс 1440 досаїсайс іссадасіад дсюааїйціо ссідістіасі ссіддассса ссдсадсусі 1500 дасаддасаа асасіаїсда сссаааїс9дд аїсасдсада Носідссді дааддддаас 1560 сіссіднса аддсадсої саїсісддас ссдадонса саддсодада ссісдіссдс 1620 сідааіааса дсдддааїаа саїссадаас ададодсіасс ісдадодідсс сайсадіїс 1680 7 ассіссасда дсасасдсіа сададіїсду дідсдсіасу сіссдідас сссосаїссас 1740 сідісадіса асіддддсаа йссаасаї! псісдісіа садідсссдс дасідсідсс 1800
Зо адссісдаса аїсідсадіє дсдадаше досіаснсо адісіассаа сдссіїсаса 1860 їсаонасід ддаадютщаї сддсоїдсодс аасійсіссо адааїдсосо суНаїсай 1920 дасадойсо аднсаїссс адідасідсс ассісдадо сддадіасда сіддачада 1980 7 дсісаддадо ссдісаасдс дсіснсасяо ааіасааасс сдаддадосі дааадасдадс 2040 дюассдасі ассасаїсда дааддідісд аассісдісу ссідссідісідасдаднс 2100 тдссісдац адаадсосда одсідсіддад ааддіюдааді асдсдаадсо дсідадсдас 2160 дадсодсаасс іІссідсадда сссдаасне асдіссаїса аїаадсадсс сдасисай 2220 адсасдаасу адсадісдаа Шсасаїсі аїссасдадс адісададса дддідоаюа 2280 7 дусіссдада асаїсассаї Ісаддадддс аасодаїційї Іісааддадаа НПасдідасс 2340 сісссаддса сдіасаасда дідсіасссі асдіассіді ассадаадаї содсдадієд 2400 дадсщдаадад ссіасасасд сіассадсід сосодсіаса ісдаддасіс ісаддаїсіс 2460 даздаїсіасс щданаддіа саасдсдаад сасдадасіс іддасдідсс сддсассдад 2520
Ісддісіддс сосідісіді дадіссссо аїссдсадаї дасддсдадсс саасаддідс 2580 7 дсіссссай Ісдадіддаа Іссддассіс дайдсіссї дсадддасда сдадаадідс 2640 дсссассаїй! сасассайі сісссіддас апйдаїщцісао догїдсаїсда їсіссасдад 2700 60 аассідддсо щідадної днсаадаїс аадасдсада адддосагдсадодсіддас 2760 аассіддаді Іісайдадда даадссссіс сідддсдадао сісісіссад ддісаадсдс 2820 дсддадаада адчіддадодда сааоасоддад аадсідсадс іІсдадасіаа дсодсодідіас 2880 і ассдаддсіа аддададассаї ддадсаосіс Псдісдаса дссадіасда іаддсідсад 2940 дссдасасда асаїсддсаї дайсасосу дсідаїаадс даїосаїсо саїссдсдад 3000 дсоіассісії ссдадсідад сонаїсссу дасащдаасо сідадацшії сдаддадсід 3060 дададосодда ісацйассодс даїсісссід їіасдасодсіс дсаасдісаї іаадаадоа 3120 дашсааїа асддссісдс сідсіддаас дісаадддсс асдісдасдуі їсадсададс 3180 й сассаїсдсі сддідсіддї саїссссдад щшададосід аддідадсса ддсдонадя 3240 дюїосссда дсаддддаіа саїссіссос дісассодсої асааддадод стасддадад 3300 дусюсаїда сіаїссасда дайдадааї аасассдасод адсідаації саадаасідс 3360 дадааддацда аддісіассс аасідасасс дадасодідса аданасас ддсссаїсад 3420 ддсасадссд саїдсаасіс саддааїдсі дддїасдадо асдссіасда ддісдаїаса 3480 7 асюсдадсд Наасіасаа дсссассіас даддаддада саїасасіда саїдсосада 3540 даїаассасі дсдадіасда ссдсддсіас дісаацасс сассісіссс ддссддудсіас 3600
Зо дюасдаадао адсіддадіа спіссссдад асадасаадо іІстддаїсда чзанпяддадад 3660 асададдаса сінсаїсаої ддаїадсайї дадсідсідс Ісаїддадда діаа 3714 «2105» 14 «2115 2148 -212» ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного Стгу «4005» 14 адаацдісіа адааісадаа саюдсаїсад адссісадса асаасдсіас щіддаїаад (610) 7 аашсасодд дсадссдда дааіаасаса ааїасдадс дсадаай саассасдад 120 дасаїсдадс сайсдісіс адшіссаса айсадасід дсаїсдддаї содддсаад 180 аїссіддодса ассісддсадї дссуйнсдсі ддссадоно сНсссісіа садссаїс 240 сіддадсдадс (діддсссаа ддадаададс садідддада Шісаюда дсаїдісдая /-з00 дадсідаїса аїсадаадаї Псдассіас дсссддааса адосісіддс ідассісаад 360 7 додссщдадоод ашдсісісдс дщіассас дадісдсідо адіснодаї саадаассдс 420 аасаатасса ддасоасодіс діддісааяд іІсасадіаса НПасссісда дсідаїднс 480 60 діссадісас дссдіссії сдссдашШеос ддсдаддадо дссосіссі дссааїсіас 540 дсісадасід сдааїсісса ісіссідсіс сідсдсдасу ссісдаїсі сддсааддад 600 дададсіда дсдайсода дашсеїасі Нсіасаасс ддсаддісєда дсдсассадс 660 і дасіасісд9у аїсасідсас ааадіддіс дасасіддсс Ісааїадодсі даадоаддаієс 720 аасоасддада ісідаддідаа діасаассад йссдсаддао асаїдасісі саїддіссіс 780 чафсідано сссіднсса дадсіасодаї асасасайщі ассссаїсаа дассасдудсі 840 садсісасса дддаддша сасдаасдсс айддсасад дсасссаса ісснсшс 900 ассісаасаа спддіасаа сааїаасодсі ссдісшсії садссаїсда досідссдіє 960 й айсодадсс сссаїсіссї ддаснссід дадсадона сіаїсіасіс ссіссідадс 1020 аддіддісда аіасссадіа садаасаїд (дддосддас асаадсісда унссддаса 1080 айддсддда сісідаасас аїссасісад ддсадсасса аїасадісдаї саасссадіє 1140 асссісссії Ісасдісаад додасаїсіас сддасддаді сссіддссдо ссісааїсід 1200 нссісасас адссадійаа сдддаюссс адддісдасі Іссасіддаа дісодасу 1260 7 саїссааїса сдіссдаїаа сісіасіас ссіддсіаса сюдсанод сасссадсіс 1320 саддасадсод адааюдавдсі дссассадад ассасдддсс адссааасіа сдадієстас 1380
Зо адссасаддс ісісссаїаї сдассідаї! Ісддсдісіс асдадаасдос ісісдїісіас 1440 існддассс аїісосісадс ддасаддаса аасасіаїсс асісадайнс саїсасдасад 1500 айссісісд Ісааддссса сасасідсад адсддсасаа сідйоїдаа дддсссадод 1560 7 псасдддсод доддасаїссі даддсдсаса іссддсддас сшсосай садсаан 1620 аассісдай ддааїсюдад ссадсдсіас сдсдсссдса іссдсіасдс дісдассасуд 1680 аассіссдда юташідас даїсдсддас дадсодсайці ісдсіддоса аййсааїаад 1740 ассаюдааса сдддсдассс асідассійс сададснсї сдїасодсіас ааісдаїасі 1800 дсснсассі Ісссіасдаа ддссіссадс сісасідідд асасідасас сіїсісдісї 1860 7 ддааасдада ісіасоідда ісдснсдад сідаїсссад Ідассосіас дсісдадасі 1920 дісасддасс Іддадададс іІсадааддсс дідсаюадс іднсассіс сасіааїсса 1980 до9сддосіда адассдасаої сдсіааддаї сасіасасса асасдаїсісіаадісаді 2040 садісдащі їісадаюсса аіосісідад сдсасдадда ісіассдсід даддсіасссу 2100 я Істаадааду адіасюдіа сашддодс їасассісаа адіасда 2148 «2105 15 «2115 3285 «212» ДНК 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Кодувальна послідовність синтетичного Стгу «4005 15 ашдіссісд адсадайда дсадсідаїс дассадсдса Ндадассої сдададдааї (10) сдддсдаїсс адасодсісаї ддассідісуд аасіснасо адідіасаї сдаддсдсіс 120 ааддадіддд адаасааїсс ддасаайса дспсссадо адсосдісад даассодісє 180 сдсассасду асдаїдсодсі саїсасаддс айссдсісс дасіайсс саайсдад 240 аїсдссасіс щісадіста сансаддсод дссаассісс ассідісссіссщадодас 300 й сід їісддсдадсу стададсід асссадаїса адіддасда їсісіассдс 360 аддсідасда асааїаїссд даасіасісс даїсайодсо сдсосіддіа сааїдадддс 0420 сісдасааса Падсдоддсі дадссодісо аїсаашсс адсосдадді сасаашся 480 онсісдаїа іІсдіддсссії дпсссдаас їасдасайс дсаснассс саїсадсаса 540 аснсдсадс ісассаддда дашісасод Ісдссдаїсо ідаїссссаа сдаснсісс 600 7 оноссіаса адддсдідсу дсодсосіссс сассіднса аднссісда даадсісаїд 660 аїсіасасду дсдаїсдсад сдодаїсадд сасідддссу дссаюадаї їасдістада (720
Зо сддасадасі саїассасдод саїсаїссдс їасссдсісі асдддасадсідссаасудсос 780 дацдіссссаї асасісісдс дсідсадссі ісідадісаа ісіассдсас ссісіссдад 840 ссіайнса дссадас999 сддзосіцісї ссдсасадда ддадданої доаадодсдіє 900 7 дацдіїсісаа ісдісаасаа іІаасодцаас ссдіссадсі Ісдідіассо саддаадддс 960
Ісісісдай! сайсасада дсідссдссс даддасдаді сідісссасс Цасаїсддс 1020
Тасісасасс адсісідсса (діддоснс дададдасоа ащісаїсії сдадссдісд 1080 аасісдсса дддідсссді снсісдща асасассоді сідсдасасс аасіааїасс 1140 аїсдасссід аісддаїсас іІсадайссі Іссдідаада содісдісісї дсдсаасісд 1200 7 асадісдій сіддссс9д9 діїсасіддс ддддаїаїсао іІссдсаїддо сосіднсас 1260 садаїсіасуд ссассдассі садсаддаас дідаддссодї садісдсісі дісссдсіас 1320 сісаїсаддс юсоддіасдс сідсадоадас ісаїссааїа ісунайса їддодссаїсс 1380 аїссодднсо щісссіссс їіадсассаїд Ісдаасдасу адссудсщас діассадіса 1440 пссдсіасу ссіссаїсас сасодссааїйї ассаддссіа іІсіасааїйаі дисаассіс 1500 7 Іссаїсадсс ддайадсодо сдіссадааї сіднсаїсу ассосайда дисаїсссс 1560 дюдадсода асіисдаддс дадададас сюдадсосо сісадааддс ідісааїдсу 1620 бо сісйсасді ссасааасса дадддассід аадандасяа іІдасддана ссасаїсчдаї 1680 садунадса ассісдідда сідссідісд дададнсії дссісдасда даадсудсдад 1740 сідісщдада адісааадса Ідссаададо сісадсдасду адсоддаассі ссідсаддас 1800 і сідаацйіса аддаїаїісаа ссдссадссоу дададдадаої даїссдосіс їасідддаїс 1860 ассансадд дсддадасода (дшсаад дадаасіаса ідасісіссс сддсассс 1920 дададідсі асссаассіа ссюїассад аадаїсдасоу адіссаадсі саадосцас 1980 асдсдсіасс адсідаддда сіасаїсдад дасадссада аїсісдадаї сіассісаїє 2040 аддіасаа!д ссаадсасда дассонаас дідссаддсі садоасісссі сіддосісїд 2100 й Іссдісдаді ссіссунодд саадідс9дду дадссаааа ддідсдссад ссосаюддад 2160 ддаасссад ассісдацо сіссідсада дчасддсдада адідсодсіса ссаїадссас 2220 сашсісдс юдасаїсода ідісдасідс ассдассіса асдаддаїсі ддодаїсюа 2280 днашіса адаїсаадас дсаддасддс сасдссаада ісдддаассі сдаднсосід 2340 ааддадаадс їдсідсіддуд сдадасісід дссадддаюа адааддсдда даадаачідд 2400 7 адддасаадс дадаїаадсі ддадідддад ассаасаїдао іІстасаадда ддасдааддад 2460 адсоаддаса сісісноді сдайсссад їасадссдсс їдсаддссда асдаасай 2520
Зо дсдаюаїсс асдсддсіда саададодід саїсосаїса дддаддсна ссісссддад 2580 сідассдіда Псссоддсої саасдссісд аїсйсдадо адсіддадад саддаїсно 2640 асдассіасі сісідїасдд сдссаддааї дісаїсаада асддсдасії сааїаасода 2700 7 сісіссідсі ддаасдїідаа ддассасодід даддіссадс адаїссасса їаддісідіє 2760 сіддноїдс ссісаддаа дасадададйн Ісссаддада Шосдідю сссадасада 2820 дддіасаїсс іІсадддщас їдссіасаад даддасіасуд дддаддоасаа їдісасаан 2880 сасдадаїсд адааіаасас щасдадсід аадіссдса айдсдадда ддаддадаїс 2940 їТасссдаайїа асасіднас сідсааїюдас іасассдіса ассаддадда діасааддудс 3000 7 асдюсасаї сссддаассу сдддіасдас дададсіасд адіснсаїс садсдададс 3060 дснасіаса ссісдащіа сдаддадаад додсіасасда аїдддсдаса сдадаасіс 3120 тдсдадіїса асаддддадіа сддсдасіас ассадссісс сіасадссіа сдідасіаад 3180 дадсюдаді асісссдда дасадаїааа діоїддаїсу адайдосда дасюадода 3240 я дсснсаїсс ддасіссаї ддадсідсіс стаюддада адіаа 3285 «2105 16 «2115 3510 «212» ДНК 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Кодувальна послідовність синтетичного Стгу «4005 16 аддадаїса асааїсадаа ссадідсдіс ссдіасаай дссісаасаа Ісссдадісс (610) дадаїссіда асдіддссаї Шсіссадс дадсаддісу саодадайнса ссісаадаїє 120 асссодссіда йсісдадаа сіссідссу ддсодддісі Ісдсшсод ссідйсдас 180 сісашода додаїснсаа Іадодаїсад одісадсоді Іссісаддса даїддаддад 0240 сідаїсаасс ададданас ддаднсдсі аддддссадао сіаїссадад дсіддіддодс 300 й псдддадаої ссіасдасда діасайсід дсісісаадоа адідддадаа сдасссоддаї 360 ааїісссдсса дсааддадад донсддаса сосісадда ссасддасда їдсссіосід 420 асщдсодідс сасісадас їаїсссіддоу псдадсіда сіасссісіс ддісіасудсі 480 садісдоасса ассідсассі содсссіссід адддасосі їайсисда ддададаюа 540 доссісассс адасодаасаї саащдассіс їасісдсддс даадаасіс їайсдсдаї 600 7 Тасассааїс айдсонад дісіасаас аісддссіду ддаассісаа дідайсда 660 ссададіасі ассддноса дсдсдадсід асдаїсадсо нсіддассі сдіддсосід (720
Зо псссіаасі асдайагссод даснасссд айсссасса адісссадсісасоасасдад 780 аїсіасасад асссааїсаї Нсосс9дадао дсссаддссоу дсіасасасіссаддасдіє 840 сідадддадс сдсассідаї ддашссію аассддсіса ісаїсіасас ддоддадіас 900 7 сдддасаїсс ддсасідддс ддссаюдад діддацвдісоії сісосасіду саїдаїдасс 960 аасаїссдсі іІсссссіста сддасасддсу дссасадссу адссаасаса сісацасі 1020 ссдісдассі Іссссддссі дааїсіснс їассодасіс іІдісддсссс саїснсосдс 1080 дасдадссдо дсодсіаасаї сацнаїссос іассдсассі сссіддідда ддосонода 1140 нсаїссадс сдаасааїдд сдадсадсід їасадддіюс дддосасссі сдасісссід 1200 7 даїсадсідс сссісдаддо сдадісаїсс сісасодаді асісасасад асідідссаї 1260 діссддіса сісадісссї ссддаасодсу дадссасіда асіасдсссд ддаідссіаїд 1320 песісаюдда сасассдсіс сдссасасса асіааїасса Ісдасссіда дНанасі 1380 садаїсссас Ісдщдаадодс дисаассід сайсддосо сіасіаісді сааддудсссі 1440 дддіїсассд дсддддасаї ісїдсодсадао асдаацйно даїсшсда сдайацдсус 1500 7 дюаасаїса сддсдссссі садссадсодс їіасададідс додайсосіа сдспсдаса 1560 асщдассідс аднсіасас саасаїсааї дддассасда НПаасаїсдуд саашсадс 1620 бо Ісдасдадад анйссдддда содаїсіссад їасддсадоді Іссддадс ддодисаса 1680 асіссунНса суднсадсда сосіащісд асоднсасаа іІсдосодссії садсісісї 1740 їсааасааїд аддю!асаї дассдсаїс дадйсдісс ссдсідадді їасспйсдад 1800 і дссдавіасо аіїсіддадаа додсісадаад оссадісаад содсіснсас діссадсаас 1860 садаїсодсс Фаадасдда сддасадаї їассасацо асааддідад саассісдіє 1920 адшщссідаї сддасдадії сюссісдаї дзадаададоад адсідіссда дааддісаад 1980 садсдаадс дссісідсда сдададдаас сіссіссадд асссдааси ссдсдоасаїс 2040 ааїсддсадс сідассдсда аіддаддодс іссасідаїа Нассаїсса дддсддоддас.. 2100 й чащідіїса аддадаасіа сдісасдсіс ссдддсасаї Ісдасдадід сіассссаса 2160 їассідіасс адаадаїсода іІдадісааад сісааддссі асасісддіа сдадсідсас 02220 дусіасаїсуд аддасіссса ддаїсісдад аїсіассіса Іссдсіасаа дсдаадсас 2280 дадасідна асдідссада сассдадісо сідідасссс ісісддсоса діссссааїс 2340 ддааадідсд дсдадссааа ісдсідсдсу асссаїсісд адіддаассс їдассіддаї 2400 7 тдсадсдса дддасддсда даадідсосі сассайнсіс ассашсіс асіддасаїс 2460 чадіддосі дсассдассі саасдаддаї сідддсдісї ддойанн саадаїсаад 2520
Зо асссаддасд ддсасдсіад асюддсаас сісдаднсос Ісдаддадаа дссосідаїд 2580 додсдаддсіс Іддстададі їіаададаосо дадаадааді ддададасаа дсдддадаад 2640 сіддадсіду адасааасаї сдісіасаад даддсдаада адісідісда дсісісне 2700 7 онНаайсас адіасдасад дсідсаддсс даїасдааса ісдсданаї ссасдсідсс 2760 дасаадсддо дсайнссаї Ісдсдадосс їассісссад адсщадсаї аісссіддс 2820 дюаасдсдо сіашісда ддадсіддад ддссосаїсі Ісассдссіа садссідіас 2880 дасдсдадда асонцайнаа даагдддадаї Нсаасааїа дссісісдюд сіддаасую 2940 аадддссасд ддасдісда ддадсадаас ааїсаїсодсі сідіссісоі даїсссядад 3000 7 щададосід адацсаса ддаданадяо дідідссс9о дсаддоддадіа саїссіссдс 3060 дісасдасої асааддадчад сіасддддаад досідсона саайсасда даїсдаддас 3120 ааїасіда адсідаацдії сіссаасідс діддаддадау адаїсіассс ааасаатасі 3180 дісассіюдса асдасіасас ддссасасад даддадіасу аддосасца сассадссдс 3240 ааїаддадаї асдасддсдс сіасдадіса аасісдісід дссідсдда НПасодсодісї 3300 7 дснасдадо адааддсна сассдасддс аддсодсдаїа асасадсда дадсааїадд 3360 ддвіасдодсод асіасасссс асісссідсо ддсіасудщюда сдааддадсі одадіаснс 3420 бо ссддадассод асааддієід дайдадаїс ддддадасоду аддасасаїй саїсоіддаї 3480
Іссдісдадс юдсідсісаї ддаддадіаа 3510 -2105 17 «2115 3510 «2125» ДНК 213» Штучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного Сту «4005 17 аддаддіса ассассадаа дадюдсоі ссаїасаасі дссідаадаа іссіаадаїс (610) й дадаїдсісд асаїсдадда сашсодісс аддісдадодо адсадаїдос сдадаїсісс 120 сюддссіса саадднссі ссіддацісі сіссідсс99 дсоасісай сддснсдад 180 сіднсдаїа іїісашоддаа саїдаїсоддс ссддассаді ддісосідн ссісасссад 240 айдадсадс ісаїсдасса дсдсайдад асосасодїда ддаассаддсіашсдаду 300 сіддаддоасс (ддододдасіс сіасдадцдіс їіасаїсдада оссідаддда чідоддадосі 360 7 Іссссдааса аїдадісісї ссадсаддаї дідаддаасс дайсадсаа сассдасааї 420 одсісідаца сддссаїссс дайнсіссдс дадсаддосі ісдадаїссс дсіссідасс 480
Зо дістасащс аддсідссаа ссідсассіс адссіссідс дддаїдсоді сїаснсдду 540 сададаоїддо дссісдасас ддссасддіс аасааїсасі асаассддсі даїсаассіс 600 анаагїассі асіссдаїса Носдсісад дднсаасс дсдадсідда саашсодс 660 7 дюдісасід сссосіассії сдашссад аддааддщюа ссаїсісаді ссіддатан 720 онососісі Ісссааасіа сдасаїсада асаїасссіа Нсадасісі дісссадсіс 780 асссдддада Ісіасасадіс іІссадісдсу дадссіддсо сісасісаа сойдассід 840 аддааїаїсс Іссдддадсс асассщда!їд чашссіда сасодссісді даїстасасі 900 досдіссадд дсдддаїста ссасюдаосі дддсаюада ісісдісіад дассасдддс 960 7 аассідісаї ссааїаїсса дисссасід їасддсасодї ссдссаасдс дассудсосі 1020 нсааїсща сдаїссана сіссдадасс аїсіассдса сдсісадсоус Іссааїстас 1080
Іссдісадся асдддашсе дссдаасадду ассадддссд Ндаддосдї ососНсосіс 1140 асадсіадду асаасааїсі даасісдсіс ссойнссіді ассддаадда ддосісасід 1200 дайнссіса ссдадсідсс дссддаддас дадаасдадс сасснасаї сдосіасісс 1260 7 сасадасідї дссаїдссад дисасісдс адсісаддно сісдадсс дісіаасіс 1320 дсісдсаїсс сддідісіс аїддасссас сдсіссдссу дсссдасааа дадодісісї 1380 бо Ісаїссадда ісасісадаї! Іссндодії ааддсісаїа сссіддайад сддсусснс 1440 дюайаадод дсссдоадаїї сассд9дс999 дасаїссіса ссаддссааа ссісдддаса 1500 сіддасасас іІсадддісас асідасщдас садсісссдс адаснасаа саїссддай 1560 і сдсіасдссі ссайдсдаа ісдсддсддс асссісаїсі Ісісісадсс дссаїсайас 1620 доссісасаї Ісссдаадас іаддасаїс даїдадсссс іщдасдісдсоу сісшсдсс 1680 аддасаасіс Існсасасс аацассійс асдсаддссс аддсададсі даассісасі 1740 аїссадсадад дсоюіасаї сдаїаддайї дадисаїсс сідісаадс сасайсдад 1800 дсоддавдіасд ассіддадса ддсісадаад ассадїдаасод содсіснсас садсісдааї 1860 й садсідадсс Ісаадасада ссідасідаї їассасацо аїсадаідіс даассідаіє 1920 дасюссісі сдаюдадії сідсаїсдас дадаадсодсу адсідадсда дааддісаад 1980 садссаадс досісісада сдадсодсаас сіссідсадо айссааси сададосаїс 2040 ааїаддсадс сддасададо дчюдадододос іІссассдаїа іІсасдайса дддсдддаас. 2100 дасушіса аддадаайцна сдідасссід ссаддсасадї Ісдасдадід сіасссіасд 2160 7 їассістасс адаадаїсда щдадіссаад сідаадасої асасасдсіа ссадсіссдд 2220 досіасаїсд аддасадсса ддаїсіддад аїсіассіса іІсаддіасаа сдссаадсас 2280
Зо дадасідвна ашідсс9дад сассдддадс сідіддссас ісадсоїдда дісдссіаїс 2340 ддааадідсд дсдадсссаа ссосідсдіс ссасадсідд адіддаасад сааїсісдас 2400 тдсіссідса дддадосода даадідсдсс сассайссс ассашсаяд ссісдасаїс 2460 7 чаюдіддодді дсасоддассі дсасдасодаї сісдасаїсі ддоананин саадаїсаад 2520 асдсаддасд дасаїдсіад дсідддсаас сісдаднсс Ісдаддадаа дссосідаїд 2580 додсдаддсіс Іддсіададі саададдасо дадаадааді ддсдддасаа дсдсдадаса 2640 сідсадсісод адасіаасаї сдушасаад дадассаадао адісодідда сосісідне 2700 дссаасісіс адіасааїсд ссіссаддсі даїасдааса поссаїдаї ссасдсідсс 2760 7 дасаададду юсаїсосаї ссдсдаддсі їассіссссд адсідісіді аїссссдда 2820 дюаасдсдд дсашісда ддадсіддад ддссддаш ісассдссії садссістас 2880 дадсодсодса асдісаїсаа даайсадас Нсаасааїйа досідіссід сіддаасоаїє 2940 аадддссасд Ндасаїсда ддадсадаас ааїсаїадда одсойсісаї сдпссддад 3000 щададосода адащісдса даадаїдсас дісідсссду дсадададіа саїссідсдуд 3060 7 дісассдссі асааддад9да сіасддддад досідсовна сіайсасда даїсдаддас 3120 саїассдаю адсіюдаації ссдсаасідс дзаддадда аддідіассс даасаайаса 3180 бо аддасноса агсадїассс ддсідассад дзададатасо аддоасоссід сасісісдс 3240 аасаддддаї асдасдадодї сіасддсааї ассссдісас іссссодссда Пасдсдсса 3300 аїсіїіасдаду адаасдссіа сасддасдда аддадддаса аїссцосда діснсасдс 3360 і ддаіасдодсод асіасасдсс асідссідсс дасіасдада саааддадсі ддадіасінс 3420 ссддадассяо аїасдацію одаїсаадай даддадасад аддодсасій саїсдісдас 3480 їссандадс ідсідсісаї ддаддадіаа 3510 «2105» 18 «2115 2160 «2125 ДНК 213» Штучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного Сту 7 «4005» 18 адаадсіса адааїссада саадсассад адссідісса дсаасдсіаа ддддасаад (610) аїсдссасад ансдсісаа дааюдадасі дасайдадс Юаадаасаї даасаадад 120 7 данассісс дсаїдісдда дсаюдадісі аїсдасссії Ісдшсодс сісіасіай 180 садассоддса Іісддданодс сддсаадаїйс сісддсассс Ісдудсдідсс дНпсосіддс 0240
Зо садаїсасії сісісіасіс айсайсід дасдадсіді ддссіааддд даададссад /-З00 щададаїсі їІсаддадса соддаддад аїсайцааїс адаадайсі дассіасдсу 360 аддаасаада сісідісдда ссісаддадс сюдододдаїй сссісдусіді сіассадад 420 7 Ісссіддада дсіддднаа дааісдсаас ааїасдс99ао сісдсіссді ддісаадаас 480 садіасаїсд сссісдадсі дайнсаїс садаадсідс саїсунсос сдідіссддс 0540 дададааддісс сдсіссідсс ааіїсіасдсс саддсідсса ассіссассі ссідсіссід 600 сдсдасаосії сіаїснсо9д сааддадвідо дадсщісад сдїссдада іадсасайс 660
Тасаасаддс адднаадад дасісдддас їасісддаїс айдсудюаа діддіасаас 720 7 ассдоссіса асааїсідад даоадасодааї дссаададсі дддіссддіа саассадіс 780 сдсааддаса дасасісаї даїсісдаї сіддісосос існсссаїс аїасдасасі 840 сіддісіасс сіаїсаадас сасдісссад сідасіаддд аддшШасас сдаїдссанй 900 ддсасодіїс ассссісада ддсддідасс Іссасаасії ддіасаасааїаасдсдссу 960 адсійсісда ссаїсдадас ссаноїд сддаассссс ассіссідда спсосісдад 1020 7 саддщдасса Іісіасісдсі ссідісїаду юдісаааца сосадіасаї даасашідд 1080 досддосаїа адсісдацдії ссддасіаїс ддсдоасассс іІсаасасаад сасісаддас 1140 бо Ісдассааїа сдісіанаа сссадщасо сісссШса саїсіаддда сдісїассдд 1200 асададісас юассодссі сааїсідне сісасдсадс ссудідаасдд сдіссссада 1260 дидасісс асіддаацдії сдісасссаї ссааїсосаї ссдаїаасії стасіассосі 1320 і додстасасю дсандддас дсадсіссад дасіссдада аїдадсідсс дсссдадасс 1380 ассддссадс ссаасіасда діснНасіса сасаддсісї сссаїаісдд ссідашсс 1440 дссадссасд НМааддсодсі сдщіасадс (ддасасаїс дсісддссда саддасаааї 1500 асіаїсаасі суддайнсіаї сасадсадай ссдсісдіда аддссисаа ссідссдісд 1560 дососсісда ісайс9999 ссссддайе ассдоас9999 асаїссідсуд саддассаас 1620 й асдоадсасаї ісддоадаїаї ссдсдісааї айаасссас сШсдссса дсодсіасадд 1680 сіссдсаїсс дсіасдсдіс сасаасіааї сіддадійсс асассадсаї саасддсаад 1740 дсіанааїс аддддаасії сісддсіасс агдаассодсод дсдаддассі сдайасаад 1800 дсснсадда сдоаддоси сассасоссс Неїсацсі ссаасососа дісдасшіс 1860 ассаїсадсд спддааїйй сісісіддду аасдадчдісі асаїсдасад данйдаднс 1920 7 дюссдаїсод адднассіа сдаддсддад сасдашсяо адааддсдса ддаддадаю 1980 асдасісісі ісасдадсас аааїссаддс ддссідаада сдаасдісас ададіассаї 2040
Зо аїсдассада ісісдааїйсі соіїдададс сідісдаасо аднсіассі сдаїдадаад 2100 сдддадсіді Ісдадаїсодї даадіасдсс аадсадсідс асайдодссд саасаїдіаа 2160 «2105» 19 «2115 3495 «212» ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного Стгу «4005» 19 аддадсдса асааїсадда ссадіосаїс ссдіасаасі дссісаасаа ісссдаддй (610) 7 досайсідо агаісдадаа сіїсааісід дадсідаії сссаддідіс адісддссіс 120 ассадойсс іссіддадас сіссаїссса дасассдаді Ісодсісідду ссіснсдас 180 асашо9дао дсодсссісдд сдаюдагсад юдісссіді іссісдсіса данйдадсая 240 сідаїсааід адсдсанас сассуюдад аддаассоса сіаїссаддс ссідісддодс 300 сісіссадсі сдіасдадодї сіасандаяд дсісісаддд адідоададаа сдассіюддаї збо 7 ааіссддсії стадддасаад дащдаюасі аддноес9додд сіассдасаа сісасісай 420 асддаїаїсс сдсіссідда даїссссдас Нсдадано ссасасідіс сдідіасасд 480 60 саддсдаосса ассідсассі сдсссіссід адддасосіод ісіасісдуд ддадсасюа 540 ддссідасас адасіаасаї сдаддассіс сасасасодс ідасісдсіа сайсаддад 600
Тасіссдаїс айдсодсодсо сіддіасаас саддодссіса асааїацнод сдоддаїсааї 660 і асссодсіасс Ісдасійсса дсдддадсід асдаїсадсо іссісдасай ідносссід (720 псссдаасі асдаїаіссд дассіассса анссіасдс ададссадсі сасасдсдад 780 аїсіасасії сдссдоної дасссссдас дюдаанода йсідісдаї сісїаасціє 840 сісадддсдс сасассідаї ддаснейне даїсддаїса Наїсіасас дддсасдадаїд 900 сдсісаассс сісасіддда ддддсащдад дісаїсісса ддаддасодо ссаддддаас 960 й дадайадда одсссдсісіа сддсдіддсі дсіаадсса адссоссаді їасдаїюсадчу 1020 ссаасддасі Іісасаддасда дсадсдасад дістассдсу Нсідіссад ддісдссадс 1080 пссддаасі сдддсасааа Шсісасіс дідасодсоду спссссі дасіайсцс 1140 адсасадісії сааістассд саасоддсис ддонсаад сідасассаї сдададай 1200 ссааїсдаду ддасддассс Насацодс їасісссасс одссісідсса діддасис 01260 7 ассдссісса дсссунсаї садссадіас дсдаддосіс ссдіснсіс сіддасасас 1320 сддадсодсіа сайсасіаа сассаїсдас ссададсдса Насосадаї сссіаїдоїд 1380
Зо ааддссіаса ассідсаїдс дадсодссаса дісанадоад дсссоадоади сасіддсд99 1440 дассіссідс ддсоасасодаа сасададсасі Псдсддаїа ісаддаїсааанассддс 1500 ссссісіссс адсдсіассд содідсдсаїс сдсіасосії сіасаасіда ссідсадіс 1560 7 нсассадда ісаасдддас дадсдідаас саддоасааїй! іссадсоддас даїдаассдс 1620 дддадасааїс іІсдадісідо саасіссду асадссдоді ісісаасісс айсісайс 1680 іссаадсіс адіссассії сасдсідддс асссаддссі Ісадсаасса ддададістас 1740 айдасадда ісдадіїсої дссідсщаяд дісасонсод адассдадіс сдаїсісдад 1800 сдддсісада аддссоідаа сдсосідіїс асаадсасії сдасадсід99 ссісаадаса 1860 7 аасадїсасід дсіассасаї сдассадаїй ісдааїсісо юдсоідссі дісідасдад 1920 псдссісу ададаадсо сдаадсідісд дадаадаюда адсасдссаа дсодсісісї 1980 дасаадсдса ассіссідса ддасссдаас йПсаддодоса Ісааїаддса дссідассас 2040 ддсюдадода дсісдассда їайасдаїс саддасоа9д99 асдадші сааддадаас 2100 тасдідассс Ісссаддсас дісдасдад дсіасссіа саїйассідіа ссадаадаїс 2160 7 даюдадісса адсісааддс дїасасісдс їІассадсіда ддоадсіасаі сдаддасіса 2220 саддаїсісд адаїсіассі саїссдсіас аайссаадс асдадаісді їаасдідссс 2280 бо ддсассоддаї сосідіддсс асісісцщід дадааїсада іІсдддссаю сододсдадссі 2340 аассдащдсао ссссдсассі сдадіддааї ссадассідс айосіссід ссдададдс 2400 дадаадідсо Іссассайс Ісассаціс Ісасісдаса ісдайнодд сідсассдас 2460 і сісаасдадао аіїсідддааї діддсісай Нсаадаїса адасссадда сддасасдсс 2520 аддсіддоса ассісдацдії ссісдаддад дадссссісс дадсдадодс ісіддсіадя 2580 дюаададод ссдадаадаа діддсосдас аададддада адсідсадсі сдадассаас 2640 аїсдісіаса аддаддсдаа ддадісадід даїдсісісі Ісдісаасіс ссадіасдас 2700 сдссідсадд ссдаїасдаа їайдсодаїд аїссасдссу сддасаадад доїдсаїсяс 2760 й аїссдсдадад ссіассіссс ададсіціса дісаїсссід дсопаасодсідссаййс 2820 дадаадсідао аддодссосаї сісассосс Іасісісіщді асдасдсдад даасдуїдай 2880 аадаасддда ашсаасаа юдссіссід дсддаасо ісаадддасса сдісдайц 2940 даддадсада асааїсаїсуд садсодідсіс дісаїссссод адідддаддс сдадаїсісд 3000 садаадона дааїідссс дддасадоа9дода їасаїссідс дсоїдассодс Насааддад 3060 7 ддстасаддад адаодсіосої сассайсас дадаїсдадо асааіасдда дадсюдаад 3120 неіссаасі дсаїйдадда одасіасссо аасаатассо Щасдідсаа сдадіасасс 3180
Зо адаассадд чадідддсда дідсасідас дспдсаасо Нсосааїад ддодсіасдад 3240 даюдсдіасд ддсасаассс аадсассссі дідсайаса ссасдссаїа сдаддаддад 3300 асаїасасід асдададосд ддадаасссі юсдаддсса агааддасіа сдідаасіас 3360 7 асассодсісс ссдіддосіа сдщдасіаад дадсіддасді асіссссда дассдасасд 3420 дісіддацо адаїсддода дасададддс асшсаїсо Ноагадсої ддадсідсід 3480 сісадададао адіаа 3495 «2105» 20 «2115 3501 «212». ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного Стгу й «4005» 20 адаадаїса асааїсадаа ссаддсаїй ссдіасаасі дссідадсаа Ііссддаддад (610) дідсіссщ4о асдасдадсо сайсідссу дасаїсдаїс сссісдадаої садсаїцісд 120 7 сіссідсаді Іссіссідаа саацісодід ссддас9999 осоісаїсіс ддассідаїс 180 аасаадацй одддодсосссі ссдассдісс дадідддадс ідпсосісдс ссадандая 240 бо садсідаїсд асаддаддаї (дадосдаса дісаддодсіа адодссаїсоас дадсіддад 300 ддасддаосс доїснасса дсістасддс дчаддсойса аддадіддда даадасассс 360 даїаасассуд сддсодсодсіс садддідасс дадсодсіиса ддаїсайда сдсдсадаїс 420 і дадасіааса Нссаїсні ссдсушса додснсдада гссісіссі дісідісїас 480 асссаддс9дао сіаассідса Ісісдсссіс сідсдддай садіддіяай сддсдадада 540 адаосіда ссассасааа сдідааідас аїсіасаасс дссаддісаа даддайдас 600 дадіасадсод аїсасідсодї сдасассіас аадасддадс їддадсоссі сдаднсісс 660 адсаїсдсдс адюддаддаї сіасаассад йссоддадод адсідасссі сассдіюсіс 720 й даїасайцо9 сссідноссе даайасдас доассдссіді ассссаїсад дассашсс 780 садсісасдс дддасаїсіа сасаїсісса дшсададі іІсіасітасду сосіаїсіас 840 аасіасааіа ПФдІЮДОдДад дсісасдад садсадсіда додсодссаса ісісаїддаї 900 пснсаасі ссаїдаїсаї діасассадс дасааїсдса дддадсасіа сіддіссяддс 960 сіддадада адодссасада сасіадсдда аассададіді сунсссссі ддсіддсасу 1020 7 адддаддааїй ссдссссдсс адісасадії аддаасаа доададдосоді сіассдсаїс 1080 сісісідадс сайсіасіс дісіссшс сідддсассі ссоїдсідда сісссдсддс 1140
Зо дадааднсд ссісдсдад саасасіасс асдісссідс сдадсасіаї сіасаддаа: 1200 сдсддсассду юдайсосі сдісісіай ссассісадо асіасісддісссодссссас 1260 аддддсіасі сссассіссі дісісащії асдадсаса асісаїсссс даїсцссас 1320 7 ддасасаїс дсіссдссас сссасдсааї асдандасс сідаїадсаї сасдсадай 1380 сссоцдща адодссісаса ісідіссдда ддсадсона іІсаадддодсс ддодссасаса 1440 ддчадсдасс щдашсссі ссссдісаас аашсасіс асіссдсаї сссойссад 1500 дссаасассс сдсадсодсіа ссосаїссдс аїссосіасо сідссдасіс ддаддсасс 1560 сіддайсдо додіднесі сісадсідсо дссддддасу дсісаасас аасисдіас 1620 7 адддсіасса іщдісісс9дад содсісссіс асаїсіаддд ашссадії ссіддассіс 1680 аасасаїсаї їІісаснсосда сдісосаїсс ааїісідіддс іссашсаї саддіасай 1740 сддссадодса ассщдіасаї сдаїадддсс дадисанс сюіодасодс сассійсдад 1800 дсддосіаса аїсісдадсу ддсасадаад дсююаася сссідіїсас сіссасдааї 1860 садааддодсс іІссадассда сдісасддаї іІассасаїсу аїсаддціс ааассісдід 1920 7 данаоссіді ссдасдадії сідсстіддас дадаадсодсу адсдадсда дааодісаад 1980 саддсдаада ддсщісща дадсддаас сіссідсадо асісааасі ссдддоасаїс 2040 60 ааїадддадс аддагадда99 сіддад99о99 ісдасасаїа іІсасіайса дддсддсаас. 2100 дасдісійса аддадаайі соцасісід ссддудсоусді ісдаїсно сіассссасс 2160 їассістасс адаадаїсда сдадіссаад сідааддссі асасссдсіа сдадсідсдда 2220 і дусіасаїсд аддасадсса ддассісодаї аїсіассіда Нсосіасаа сасааадсас 2280 дадасісіса аідссддд сасіаадісс сссіддіссс Ідідсасдда діссссасіс 2340 ддсаадідсд дддадссіаа саддідсосс Ісссадаїсо адіддааісс ддассюдаї 2400 тдсіссідса дддасддсда даадідсдсі сассайсас ассашсіс ссісдасаїс 2460 чаюдіддодсі дсасддассі саасдадаа! сюдадаїйсі дддісанії саадаїсаад 2520 й асдсаддасу дссасдссад асщоаддаас сісдаднсс Ісдаддадаа дссосіосід 2580 додсдаддсіс Іддсіададі саадсдсдсс дадаадааді ддадддасаа дсдддадаад 2640 сіссададсд адасдаасаї сдідіасаад дадассаадо аддсоддйдадодссіднс 2700 дюдасісдс адіасдадся ссіссаддсоу даїассааса Посіаїдаї ссасдсідсс 2760 дасаадсасод ідсаїсадаї садддадцдіс їасісссад адсідіссоді саїсссіддс 2820 7 онНаасодсдо сіайнсда ддадсіюддаяд оддссодаїсі ісасддссіа сісасістас 2880 дадсодсодса асдісанаа дааіддсдас Нсаасаад досідіссід сіддаасуай 2940
Зо аадддссаїд юддасодісда дднсадаас ааїсассдсі садіодсісді саїсдсідад 3000 дададосдо аддіщіссса ддадунссо дідїдссс99 ддададасіа саїссідадда 3060 днассодссі асааддадда діасддсдад дадідсоїда сдайсаїда даїсдаддас 3120 7 сасасадаїд адсідаації саддаасідс даддаддадо аддшШассс даасаайаса 3180 дюасідса аддсіасас сдсдасоасад даддадіаса аддадсна сассісдадда 3240 аасаддддсі асдасдаддс сіасдддаас ааіссаадсо ісссідсіда Масдссісд 3300 дшасдаду адааддсцна сасддасддс аддадддада асссаїдсда даїдддадада 3360 дусіасасіс сасідссідї ддддіасаїс ассааддадс юдадіасі сссідадаса 3420 7 даїасідісї ддаісдадаї (ддсдадасс дчаддоддасоі ісаїсайда садсдіддад 3480 сідсідсіса ддаддадіаа 3501 «2105 21 «2115 3546 «212» ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного мутантного ВТ-0001 «4005 21 бо аддасааїйа аїссдаасаї саасдадідс аїсссіаса асідссідіс їідасссюдад (610)
дідаадаюс даддаодсда дсосаїсдад асадодсіаса сіссааїсда сашсдсід 120
Ісісїсасдс адйссіссі дісддаднс дідссідосо сіддонсог осідадссіс 180 і дісдаїаса Шоддадаї сісддсссс Ісссадіддуд асусшссі ддіссадаїс 240 дадсадсіса Паассадсд саїсдаддад нсодсіадда аїсаддссаї псосоадсія /-з00 дададссісі сіаассідіа ссадаїсіас дсодадіссі Ііссдсдадія ддадосідаї 360 ссдассаасс ссдсссідад ддаддадаїд сддайсаді Ісаасдасаї даанйсддсу 420 сідассасда сіаїсссосі сіисоссдіс садаасіасс адднНссссі ссідісідід 480 й їасдіссадуд ссдсдааїсі дсассісіса дідсюсо9со асаошсессої днсддасад 540 сасіддадсі ісдасдсідс їасіанаас іІсссосіаса аїдаїсісасіаддсідаїс 600 ддсаасіаса ссдасіасдс сдідсдсіду їасааїассу досісдадад дашодддоас 0 660 ссддасадса ддданоддаї саддіасаас садійссдса дддадсідас ссісасдай (720 сіддасаїсо іддсссісії сісдаасіас дайсісодс дсіасссааііаддассоаїд 780 7 адссадсіда сдсдддадаї сіасасаааї ссідіссіс9у адаасінсда сдддісайс 840 адддадсаща сісадсосаї дадсадааї аїссдссадс содсассідаї ддаїайссіс 900
Зо аайсдаїса ссашасас ддасаїдсас адддадіїса асіасіддіс ддссаїсад 960 аїсассасії сіссадісдуд днсісаддс ссддаднсду сшсссасі дпсЯдддаас. 1020 дсдасааїд сідсіссасс саїссіаді Ісосідасод дссісдодаї спссдсаса 1080 7 сідіссадсс сасістасад дсоддагсай сісддсісід ддссіаасаа ісаддадсід 1140 псоюсісод асддсасдда дісісше дсадїсасіда саасіаассі сссаїссасі 1200 ашасаддс ададдддсас содюддасадс сісдащдіаа Ісссассіса ддасаасісд 1260 дісссдсосаа ддосіддсії сісасассдс сідісссаїд іаассаїдсі садссаддсі 1320 дсщдасасю Шасасісії дадддсіссс асснсіссі ддасадсассод дадсдссдад 1380 7 нсаасааїа ісацодсдіс адайссаїс асдсаданс сддсдаїдаа ддддаасс 1440 сіснсааю дсіссдіаа! їадсдасссс дуддійсасад дсддддассі ддідсудссіс 1500 аасісдієід ддаасааїаї ссадааіадд оддаїасаїсу аддісссааї ссасісссії 1560 адсасаїсда сісдсіассуд суащадяодіс сосіасдсіа дсдщасісс дайсаїсід 1620 аасадісаайн дадосаайс аїссаїсне Ісдаасасся ідсссосіас сосіасдісї 1680 7 сіддасаасс Іссадіссіс сдашсододс їаснсдавії сідсіааідс сисасодїсї 1740 їсастаддда агаіїсунод соїдсддаас Нсісадодда садссддсді їаїсайдас 1800 бо содснедаді ісаїсссддї дасадссасі сюдадосодо адіасаассі сдадсдсудсі 1860 садааддссод даасодсодсі дісассісс асдаассадс Іддодссісаа дасааашціа 1920 асюдасіасс асаїсдаїса адісадсаас сідонассі дссісісдда сдаднсідс 1980 і сідда(дада ададддадсі дадсдадаад дідаадсасд ссаададасі сісадасдад 2040 сддаассісс Ідсаддасіс саашсааяд даїаїсааса дасадссада заддададідд 2100 досдддісаа ссддсаїсас дайсадддс ддоадасоаїу ісіїсаадда даасіасдіа 2160 асасідадсуд дсасшсда сдадідсіас сссасцасс Ісіассадаа даїсдасдад 2220 їсааадсіда аддсунсас ссдсіассад сіссддодаї асаїсдадда сісссаддаї 2280 й сіддаддіді ассісаїссд сіасаасодсс аадсасдада сосідаасді сссаддсаса 2340 довісісідії ддссасісдс дунНаадіса ссаапддас дсідсдоасда дссааасадда 2400 тдсосіссіа ддаїсдадід даадссідас діддайосі ссідсаддда сдасдадаад 2460 тдсдсісасс аїадссасса Шсісдсіс дасаїсдаїд ісддоїдсас ддассідаас 2520 дададаїсісд дсдісіддаї їІаїсісаад айаадасас аддасодддса дсдаадайа 2580 7 ддсаассіду аднссісда ддадааодсіс сідсісддаса адасісіддс іаддаідаад 2640 ааддссдада адаадіддсд сдасаададу дадааодсісд адідддадас саасаїсдіє 2700
Зо Тасааддадо ссааддадіс соайдасосу сіднсаї9д9 агадссааїа саасаддсіс 2760 садасадаїа сіааїаїсос саїдайсас дсідссдаса адсоддаїдса ісдсаїссдс 2820 дадасдіасс Ідссададсі дадсдщюдай ссіддсдіса асдсддсіаї списдаддад 2880 7 сіддаддодсс їсайнсас дасщшсісс сідїасдасд сссдсаасої даїсаадааї 2940 ддадайса асіасддссі аадсідсідд аасдісаадд дссасодідда саісдаддад 3000 садаасааїс аїаддіссді Іісюдідаїс ссддадіддо аддсідаадісадссаддаа 3060 дсадддій дсссаддсад додаїасаїс сіссддунНа ссдссіасаа ддаддасіас 3120 ддчаадддсі дсаїдасдаї ссасдадай даддасааса садаїдадсі даадісадс 3180 7 аацйдсунау аддаддадаої діасссодаас ааіассдіда сдідсаасда сіасасадсс 3240 асісаддаду адіасдаддо сассіасасд Ісдаддаасс ддддааїасда сддсодсцас 3300 дацдісіааї!ї ссадсдіссс адссдасіас дссісадсодї асдаддадаа дасаїасасяд 3360 дасддссоса дддаїааїсс Ндсдадісс аассдддадсі ассдсдаца сасіссасід 3420 ссідссддсі асдісассаа ддадсюдад їашсссдо адасадасаа ддашодаїс 3480 7 дадснодсо адасддад9одд дассіссії діддайсодо пдаосіодсі дсідаюдчдад 3540 дадіад 3546 60
«2105 22 «2115 3531 «212» ДНК -213» Штвтучна послідовність і «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного мутантного ВТ-0003 «4005 22 аддадаїсд Юдаасааїса дааїсадідс дідссНаса асідссісаа іааіїсссдад бо аїсдадаїсс дадодо9до9 дсдсашсо дідддсааса содссіаїсда сацісссіс 120 адссюасас адиіссіссі дісідаднсе днссаддсуд сюдансої дсісддсесід 180 й аїсдассіса ШоаддадіЇ сдідддсссо Ісссадіюдад аїсшссісодсссаддіа 240 дадсасдсіда Ісаассадад чайосодад асіднсдда агассосдаї ссаддадсід 300 дададсаїда сісдсудщіа саддасаїас дссасідсодї ісдсідачід ддадаадасі 360 ссадасдаїс сададсідад ддадосісід аддасасаді Іісасддсдас ададасцас 420 аїсіссддсс дсайадсоді ссісаадаїс садассіїсуд адансадсіссщдадсою 480 7 нсдсісада сідсіаассі ссассідісд сіссідадд9д асаїгддісн спсддосад 540 сосідадсі ісісдассас дасадюдаас аацасіаса асдассісас щаддосаїс 600
Зо істассіаса саданасдс сдіссдсідо їасааїассоу досіддадчад датшіддодс 0 6б6о сссдасадса даданоодді ссддіасаас садіссдса ддададсідас асічасічуд 720 сісдасаїся іІсдсдсідії сісдаасіас дайсісддс дсіассссаї ссддасадід 780 7 Ісдсадсіса сісдсдадаї Насассаас ссадіссідуд адаашсда сдддіссс 840 аддддсаща сісадсодаї сдадсадаас апйаддсадс сссассіса одасаїссід 900 аайссаїса ссашасас ддасдідсас сдсудддйнса асіасіюддад сддссаїсад 960 аїсассаосії сіссадісдуд днсісаддс ссддадносд сшсссссі спсдддаас 1020 дсдасааїд сідсіссасс саїдсіадіс Ісссідасід дссісдодаї спсаддасс 1080 7 сісіссадсс сасідіасад дсоддаїсаїй сідддсадсду додссіаасаа ісаддадсід 1140 псоюсісод асддсасодда дисісанс дсдісссіса сіассаассі дсссіссася 1200 аіїсіасаддс адсдадасас адісдасісі сісдащдіаа Псосассіса ддасаасіса 1260 дісссдсосаа ддосіддсії сісасасада сісісссаїд НМассаїдсі дадссаддсі 1320 дсщдасасід діасасосі дсддасіссо асаїйсіссї ддсадсассд садсдсддад 1380 7 нсаасааїа ісанссдіс дісісадаїс асдсадайс сссісасааа діссасіаас 1440 сідддсадсд ддасаїсодді шідааддас ссдаданса сіддсддоада саїссісадд 1500 60 аддассісдс саддссадаї сісіасісіс сдсоНаайа Нассдсісс асідадссад 1560 сдсіасадод іІссдсаїсся сіасдссіса асдасааасс дсаднсса сасдіссаїс 1620 дасдддаддс станаасса дддсаацшс ісюссасіа ідісаїсс9д9у дісааассіс 1680 і садісдадсії сшсосдсас сдідддойнс асіассссді Іісаасцсіс саасддсадс 1740 ісддідіїса сссідісадс дсасдіснсе аасіссдоаса аїдаддша саїадассдд 1800 айдаднсд Нссоддссда адідасшс даддсоддаді асодаїсісда дсдсдсдсад 1860 ааддсдюа асдадсідії сасдіснса ааїсадаїсод дссідаадас сдасдісасу 1920 данассаса Ндассадді сіссаассіс дідадідсс дадсдасда дісідссіс 1980 й дасдадаадс аддадсідіс сдадаадодїд аадсаїдсса адсдссщдад сдасдадада 2040 аассіссщс аддасссдаа сіиссдсдда аїсаасаддс адсіддасад дддаїдада 2100 ддсадсасад аїагсасіаї ісаддос999 дасдасодісі Ісааддадаа сіасуайцасс 2160 сіссіддаса сдійсдасда додсіассса асдіассіді ассадаадаї сдасдадіса 2220 аадсісаадд сдіасасасяа сіассадсід сдсддаїаса Ісдаддасад ссаддаїсіс 2280 7 дадаїсіасс ЩдФанаддіа саасдссаад сасдадасод Паасдідссіддсасадас 2340
Ісссісіддс сасісісідс Ісадісассс аїсдддааді дясддсдадсс ааасаддідс 2400
Зо дсіссісаїс Ісдадддаа іссддассю дайдсадсі дсадддасодо сдадаадідс 2460 дсісассаїа дссассаїйї сісдсісдас аїсдайціад дсідсасудда ссісааюдад 2520 зчасіадо999 Ісддовнаї сісаадай аадасасаду асадоасасосіаддсіддас 02580 7 аассісдаді Ісстддадда даадссасіс дюддосдадао сісіддсіад ддісаадаїс 2640 дссдадаада адіддадода саадсодддад аадсюдасді дддадасодаа саїсдідіас 2700 ааддадасіа аддадісдді ддаїдсссіс Псдіааасі сісадіасда ссадсідсад 2760 дсідаїасса аїаїсдссаї дайсасосс дсддасаадс дадіссайс даїссдсдад 2820 дссіассісс сададсідіс ідідаїсссі ддсдісаасд сідссаці сдаддадсід 2880 7 дададсадда існсассдс дісадссід їасдасодсіс ддаасаїдаі їаадаасддда 2940 дашсааса агддссісіс дідсюдаас діаааддасс асдіддасді сдаддадсад 3000 аасаагсадс дсісідіссі даїсойссії дадідддадо ссдаддашс асаддаади 3060 аддашосс саддсад9о9дао аїасаїссіс сдсдідасся сдіасаадда ддосіасддуд 3120 дададсідсо ісасдаїсса дадаїадад аасааїіасад асдадсідаа дисадсаас 3180 7 тдсоадаадо аддадаїсіа сісдаасааї ассоцасої дсаасдаца сасідідааї 3240 саддаддаді асдасддадодс Пасассіса аддаасадодд дсіасаасда ддсіссаїсс 3300 60 дісссідеід асіасосіад сошасдаяд дадаацдісоаї асасддасоад саддададад 3360 аасссаїдід аднсааїсд соддсіасаду дасіасасіс сасісссідї сддсіасоай 3420 ассааддадс ддадіаці сссададасс даїаадцоісі дасісдада ддсдадасі 3480 і даддддасаї ісайоаюда їадссіддад сідсідсіда юдаддадчю а 3531 «2105 23 «2115 3714 «212» ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного мутантного ВТ-0020 «4005» 23 адаагадса асаддаадаа Юадаасдад аїсандасд снсойнсаї сссадссодіс (610)
Іїсдаасдаді сіднасіаї Нсіааддад їасдсдсада ссааїсадсі ссадаасааї (120 їсаандаду асдддсщіа саїсдсідад ддсдадіаса Ндаїсстіїї сощісадса 180 їссассдісс адасддоадаї сіссайосі ддссдсаїсс юдоадоіссіддасайсса 240 7 псосідасс адсісоссіс аїйсіасісс йсаїсодідао чоададсідід дссіаадддс /-З00 адддассаді дддаадаїсії саїддадсас діїдадсадс ісдідсдсса дсаданасі 360
Зо дсіааїдсса ддаасасддс ссіддсіс99 сіссадддсс ддоадаасіс сіссосЯсс 420
Тассадсада дссісдадда сідасюдад аагаддаасо асссддас дсодсадсоїд 480 сістасасас адіасаїсдс дсіддасдсід дасійссіса асосдаїдссасіднсусі 540 7 айсоасдадс адааддйсс ісіссідаїд дідіасосіс аддсддссаа ссідсассіс 600 сідсіссідс дсдаїдссіс асісїасддд аддааднсо дссідасійсісаддадаїє 660 садсдсіасі асдададдса ддісдададу асссодддасі асісадаїса пПдсддсад 720 даїасааса сддддсісаа сааїстад9у дааассаасд сддадчаодсід ддіссдсіас 780 ааїсаднсс дсадддассі дасссідддс діссіддаїс ісойоусссісНсссдуїса 840 7 їасдасасса ддасдіассс ааїсаасаса іссдсосадс дасісддда ддісіасасс 900 дадссацо дддсдасідд сонаасаїд дсисдаїда апйддіасаа сааїаасдсс 960 ссаадснсії сддсдаїсда дассдсюию анаддісіс сісассіссі ддасцссіс 1020 дадсасдсіда адаїснсіс ддссіссадс аддіддісіа асасссоддса саїдасдіас 1080 юддадоддосс агасдаїсса дадсаддссс айсдсдодсо сссісаїсас аадсасісас 1140 7 ддсааїасса асасдісдаї саасссадіс асонссаді ісссіїсісд ддасуашас 1200 сдсасададі саїасдссдо даїосіссід дддосаїсі ассісдадсс ааіссасддс 1260 бо дюссдасод Іісадднсаа Шссоддаас ссссадааа сунсдадсо сддсасадсу 1320 аасіасісіс адссдіасда дісасссдас сідсадсіса аддасіссда дасддадсід 1380 ссдссддада ссассдадад дссааасіас дадіснасі сасассддсі дісссаїаіїс 1440 і досаїсайс іссадасіад дсюааїйціо ссідістіасі ссіддассса ссдсадсусі 1500 дасаддасаа асасіаїсда сссаааїсда аісасдсада Носідссді дааддддаас 1560 сіссіднса аддсадсої саїсісддас ссдадонса саддсодада ссісдіссдс 1620 сідааіааса дсдддааїаа саїссадаас ададодсіасс ісдадодідсс сайсадіїс 1680 ассіссасда дсасасдсіа сададіїсду дідсдсіасу сіссдідас ссссаїссас 1740 й сідісадіса асіддддсаа йссаасаї! псісдісіа садідсссдс дасідсідсс 1800 адссісдаса аїсідсадіє дсдадаше досіаснсо адісіассаа сдссіїсаса 1860 їсаонасід ддаадютщаї сддсоїдсодс аасійсіссо адааїдсосо суНаїсай 1920 дасададйсод аднсаїссс адщдасідсс ассіїсдада сддадіасда сіддадада 1980 дсісаддадо ссдісаасдс дсіснсасяо ааіасааасс сдаддадосі дааадасдадс 2040 7 дюассдасі ассасаїсда дааддідісд аассісдісу ссідссідісідасдаднс 2100 тдссісдац адаадсосда одсідсіддад ааддідааді асдсдаадсод дсідадсдас о 2160
Зо дадсодсаасс іІссідсадда сссдаасне асдіссаїса аїаадсадсс сдасисай 2220 адсасдаасу адсадісдаа Шсасаїсі аїссасдадс адісададса дддідоаюа 2280 доусіссдада асаїсассаї Ісаддадддс аасодаїцдійї Іісааддадаа Пасдідасс 2340 7 сісссаддса сдіасаасда дідсіасссі асдіассіді ассадаадаї содсдадієд 2400 дадсщдаадао ссіасасасд сіассадсід соасодаїаса іІсдаддасіс ісаддаїсіс 2460 даздаїсіасс щданаддіа саасдсдаад сасдадасіс іддасдідсс сддсассдад 2520
Ісддісіддс сосідісіді дадіссссо аїссдсадаї дсддсдадсс саасаддідс 2580 дсіссссай Ісдадіддаа Іссддассіс дайдсіссї дсадддасда сдадаадідс 2640 7 дсссассаїй! сасассайі сісссіддас апйдаїщцісао догїдсаїсда їсіссасдад 2700 аассідддсо щідадної днсаадаїс аадасдсада ададасаїдсіаддсюдас 2760 аассіддаді Іісайдадда даадссссіс сідддсдадао сісісіссад ддісаадсдс 2820 дсддадаада адчіддадодда сааоасоддад аадсідсадс іІсдадасіаа дсодсодідіас 2880 ассдадодсіа аддададассаї ддадсосіс Псдісдаса дссадіасдатадасюсад 2940 7 дссдасасда асаїсддсаї дайсасоса одсідагаадс аїдсаїсод саїссдсдад 3000 дсоіассісії ссдадсідад сонаїсссу дасащдаасо сідадацшії сдаддадсід 3060 бо дададосодда ісацйассодс даїсісссід їіасдасодсіс дсаасдісаї їаадаадо 3120 дашсааїа асддссісдс сідсіддаас дісаадддсс асадісдасді ісадсададс 3180 сассаїсдсі сддідсіддї саїссссдад щшададосід аддідадсса ддсдонадя 3240 і дюїосссда дсаддддаїйа саїссіссос дісассодсої асааддадод стасддадад 3300 дусюсаїда сіаїссасда дзайдадааї аасассдасо адсідааді саадаасідс 3360 дадааддацда аддісіассс аасідасасс дадасодідса аданасас ддсссаїсад 3420 ддсасадссд саїдсаасіс саддааїдсі дддїасдадо асдссіасда ддісдаїаса 3480 асюсдадсд Наасіасаа дсссассіас даддаддада саїасасіда сдідсдсада 3540 й даїаассасі дсдадіасда ссдсдасіас дісаацнасс сассісіссс ддссддудсіас 3600 дюасдаадао адсіддадіа сіссссдад асадасаадо іІстддаїсда дспддадад 3660 асададдаса сшссісої ддаїадсай дадсідсідс їісаюдадода діаа 3714 «2105» 24 «2115 2148
«212». ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного мутантного ВТ-0022
7 «4005» 24 адаацдісіа адааісадаа саюдсаїсад адссісадса асаасдсіас щіддаїаад (610) аашсасодд дсадссдда дааїаасаса ааіасідадс ідсадааці саассасдад 120
7 дасаїсдадс сайсдісіс адшссаса айсадасід дсаїсдддаї содддсаад 180 аїссіддодса ассісддсадї дссуйнсдсі ддссадоно сНсссісіа садссаїс 240 сюдодсдадс діддсссаа дддааададс саддддада ННсаюда одсаїдісдад оо дадсідаїса аїсадаадаї Нсдассіас дсссддааса адодсісіддс дассісаад 360 додссщдадоод ашдсісісдс дщіассас дадісдсідо адіснодаї саадаассдс 420
7 аасаатасса ддасоасодіс діддісааод іІсасааіаса НПасссісда дсідаїднс 480 діссадісас дссдіссії сдассуашес ддсдаддадо ідссосіссі дссааїстас 540 дсісадасід сдааїсісса ісіссідсіс сідсдсдасу ссісдаїсі сддсааддад 600 дададсіда дсдайсода дашсеїасі Нсіасаасс ддсаддісєда дсдсассадс 660 дасіасісд9у аїсасідсас ааадіддіс дасасіддсс Ісааіаддсі дааддадієс 720
7 аасосддада ісіддідаа агасаассад Пссдсаддао асаїдасісі саїддіссіс 780 чафсідано сссіднсса дадсіасодаї асасасайщі асссааїсаа дассасддсі 840 бо садсісасса дддаддша сасдаасдсс айддсасад дсасссаса ісснсшс 900 ассісаасаа спддіасаа сааїаасодсі ссдіснсі садссаїсда досідссдіє 960 айсодадсс сссаїсіссї ддаснссід дадсадона сіаїсіасіс ссіссідадс 1020 і аддіддісда аіасссааїа садаасаїд (дддосддас асаадсісда унссддаса 1080 айддсддда сісідаасас аїссасісад ддсадсасса аїасадісдаї саасссадісє 1140 асссісссії Ісасдісаад додасаїсіас сддасддаді сссіддссдо ссісааїсід 1200 нссісасас адссадійаа сдддаюссс адддісдасі Іссасіддаа дісодасу 1260 саїссааїсЯ сдіссдаїаа сістасіас ссіддсіасд сіддсайод сасссадсіс 1320 й саддасадсод адаашдавдсі дссассадад ассасдддсс адссааасіа сдадісстасє 1380 адссасаддс ісісссаїаї сдассідаї! Ісддсдісіс асдадаасдос ісісдїісіас 1440 існддассс аїісосісадс ддасаддаса аасасіаїсс асісадайнс саїсасдасад 1500 ацссісісу Ісааддссса сасасідсад адсддсасаа сідндуїідаа дддсссадудд 1560 псасдддсод доддасаїссі даддсдсаса іссддсддас сшсосай садсаан 1620 7 аассісдай ддааїсюдад ссадсдсіас сдсдсссдса іссдсіасдс дісдассасуд 1680 аассіссдда юташідас даїсдсддас дадсосай іІсдсідддса дісаайаад 1740
Зо ассаюдааса сдддсдассс асідассійс сададснсї сдїасодсіас ааісдаїасі 1800 дсснсассі Ісссіасдаа ддссіссадс сісасідідд асасідасас сіїсісдісї 1860 ддааасдада ісіасоідда ісдснсдад сідаїсссад Ідассосіас дсісдадасі 1920 7 дісасддасс Іддадададс ісадааддсс дідсаїдадс днсассіс сасіааїсса 1980 досддосіда адассдасаї сдсіааддаї сасіасасса асасдсісісіаадісаай 2040 садісдаі ісадаюсса аіосісідад сдсасдадаос ісіассосід ддосіасссд 2100
Істаадаадд адіасідаїа сашддодс їасассісаа адіасда 2148 «2105» 25 «2115 3285 «212» ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного мутантного ВТ-0027 «4005» 25 ашдіссісд адсадайда дсадсідаїс дассадсдса Ндадассої сдададдааї (10) 7 сдддсдаїсс адасдсісаї ддссідісуд аасіснасо ашідіасаї сдаддсусіс 120 ааддадіддд адаасааїсс ддасаайса дспсссадо адсосдісад даассодісє 180 60 сдсассасду асдаїдсодсі саїсасаддс айссдсісс дасіайсс саайсдад 240 аїсдссасіс щісадіста сднсаддсод дссаассісс ассідісссіссідадддас 300 сід їісддсдадсу стададсід асссадаїса адіддасда їсісіассдс 360 і аддсідасда асааїаїссд даасіасісс даїсайодсо сдсосіддіа сааїдадддс 0420 сісдасааса Падсдоддсі дадссодісу аїсаашсс адсудсдаддісасаашісд 480 онсісдаїа іІсдіддсссії днсссдаас їасдасайс дсаснассс саїсадсаса 540 аснсдсадс ісассаддда дашісасод Ісдссдаїсо ідаїссссаа сдаснсісс 600 оНоссіасуд адддсдідсу дсдсусіссс сассіднсу аднссісда даадсісодід 6бо й аїсіасасду дсдаїсдсад сдодаїсадд сасідадссао дссаїдадаї їасдісїадда 720 сддасадасі саїассасдод саїсаїссдс їасссдсісі асдддасадсідссаасудсос 780 дацдіссссаї асасісісдс дсідсадссі ісідадісаа ісіассдсас ссісіссдад 840 ссіайнса дссадас999 сддосідісї ссдсасадда ддадданої ддадоддсдіє 900 дацдіїсісаа ісдісаасаа іІаасодцаас ссдіссадсі Ісдідіассо саддаадддс 960 7 Ісісісдаїй! сайсасада дсідссдссс даддасдаді сідісссасс аїасаїсдас 1020
Тасісасасс адсісідсса (діддоснс дададдасода аїщдісаїсі сдадссдісд, 1080
Зо аасісдсса дддідсссді снсісдща асасассодді сідсдасасс аасіааїасс 1140 аїсдасссід аісддаїсас іІсадайссі Іссдідаада содісдісісї дсдсаасісд 1200 асадісдій сіддссс9д9 діїсасіддс ддддаїаїсао іІссдсаїддо сосіднсас 1260 7 садаїсіасуд ссассдассі садсаддаас дідаддссодї садісосісі дісссудсіас 1320 сісаїсаддс юсоддіасдс сідсадоадас ісаїссааїа ісунайса їддодссаїсс 1380 аїссодднсо щісссіссс їіадсассаїд Ісдаасдасу адссудсщас діассадіса 1440 пссдсіасу ссіссаїсас сасдссааїй ассаддссіа Ісіасааіаг дісаассіс 1500
Іссаїсадсс ддайадсодо сдіссадааї сіднсаїсу ассосайда дисаїсссс 1560 7 дюдадсода асіисдаддс дадададас сюдадсосо сісадааддс ідісааїдсу 1620 сісйсасді ссасааасса дадддоассід аадандаса ідасодайца ссасаїсдаї 1680 садунадса ассісдідда сідссідіса дадасднсі дссісдасда даадсосдад 1740 сідісщдада адісааадса Ідссаададо сісадсдасду адсоддаассі ссідсаддас 1800 сідаацйіса аддаїаїісаа ссдссадссоу дададдадаої даїссдосіс їасідддаїс 1860 7 ассайнсадд дсддадасода (дшсаад дадаасіаса ідасісіссс сдодсассцс 1920 дададідсі асссаассіа ссюїассад аадаїсдасоу адіссаадсі саадосцас 1980 бо асдсдсіасс адсідадоада аїасаїсдад дасадссада аїсісдадаї сіассісаїс 2040 аддіасаа ссаадсасда дассойцаас дідссаддсі саддсісссі сіддссісїд.ї 2100
Іссдісдаді ссіссунодд саадідсо999 дадссааага ддідсдссад ссосаддад 2160 і ддаасссад ассісдацо сіссідсада дчасддсдада адідсодсіса ссаїадссас 2220 сашсісдс юдасаїсода щдісдасідс ассдассіса асдаддаїсі дддадісюда 2280 днашіса адаїсаадас дсаддасддс сасодссаада ісдддаассі сдадійссід 2340 ааддадаадс їдсідсіддуд сдадасісід дссадддаюа адааддсдда даадаачідд 2400 адддасаадс дадаїаадсі ддадідддад ассаасаїдао іІстасаадда ддасдааддад 2460 й адсаддаса сісісноді сдайсссад їасадссдсс їдсаддссда асдаасанц 2520 дсдаюаїсс асдсддсіда саададодід саїсосаїса дддаддсна ссісссддад 2580 сідассдіда Псссоддсої саасдссісд аїсйсдадо адсіддадад саддаїсно 2640 асдассіасі сісідїасуду сдссаддааї дісаїсаада асддсдасії сааїаасддда 2700 сісіссідсі ддаасдідаа ддассасодід даддіссадс адаїссасса їаддісідіє 2760 7 сіддноїдс ссісаддаа дасадададйн Ісссаддада Шосдідю сссадасада 2820 ддаїасаїсс ісадддщас їдссіасаад даддасіасуд дддаддоасаа ідісасаай 2880
Зо сасдадаїсуд адааіаасас щасдадсід аадіссдса апйдсдадда ддаддаддаіє 2940 їТасссдаайїа асасіднас сідсааїюдас іасассдіса ассаддадда діасааддудс 3000 асдюсасаї сссддаассу сдддіасдас дададсіасд адіснсаїс садсдададс 3060 7 дсаїасіасд ссісдаїціа сдаддадаад ддсіасасодд аїдддсдаса сдадаасіс 3120 тдсдадіїса асадддддіа сддсдасіас ассадсаїсс сіасадссіа сдідасіаад 3180 дадсюдаді асісссдда дасадаїааа діоіддаїсо адсподсда дасічаддада 3240 дсснсаїсс ддасіссаї ддадсідсіс стаддада адіаа 3285 «2105» 26 «2115 3509 «212» ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного мутантного ВТ-0029 «4005» 26 аддадаїса асааїсадаа ссадідсдіс ссдіасаай дссісаасаа Ісссдадісс (610) 7 дадаїссіда асдіддссаї Шсіссадс дадсаддісду саодаданса ссісаадаїс 120 асссодссіда йсісдадаа сіссідссу ддсодддісі Ісдсшсод ссідйсдас 180 60 сісашода додаїснсаа Іадодаїсад одісадсоді Іссісаддса даїддаддад 0240 сідаїсаасс ададданас ддаднсдсі аддддссада сіаїссадазд осідаїдоддс 300 псдддадаої ссіасдасда діасаїйсід дсісісаадо адідддадаа сдасссоддаї 360 і ааїісссдсса дсааддадад донсддаса сосісадда ссасддасда їдсссіосід 420 асщдсодідс сасісадас їаїсссідду псдадсідо сіасссісіс ддістасудсі 480 садісддсса ассідсассі сдсоссіссіюд адддасосід юЮнснсода ддачадаад 540 доссісассс адасодаасаї саащдассіс їасісдсддс даадаасіс їайсдсдаї 600
Тасассааїс айдсонад дісіасаас аісддссіду ддаассісаа дідайсда 660 й ссададіасі ассдансса дсдсдасдсід асдаїсадсду нсіюддассі сдіддсосід (720 псссіаасі асдайаїссод даснасссд айсссасса адісссадсісасасоасдад 780 аїсіасасад асссааїсаї Нсосс9дадао дсссаддссоу дсіасасасіссаддасдіє 840 сідадддадс сдсассідаї ддашссію аассддсіса ісаїсіасасддодадіас 900 сдддасаїсс ддсасідддс ддссадад діюддацвдісої сісдсасідд саїдаїдасс 960 7 аасаїссдсі іІсссссіста сддасасддсу дссасадссу адссаасаса сісацасі 1020 ссдісдассі Іссссддссі дааїсіснс їассодасіс ідісддсссс саїснсосдс 1080
Зо дасдадссдо дсодсіаасаї сацнаїссос іассдсассі сссіддідда ддосонода 1140 нсаїссадс сдаасааїдд сдадсадсід їасадддіюс дддосасссі сдасісссід 1200 даїсадсідс сссісдаддо сдадісаїсс сісасодаді асісасасад асідідссаї 1260 7 діссддіса сісадісссі ссддаасдсу дадссасда асіасдсссоу доюссіад 1320 псісаюдда сасассдсіс сдссасасса асіааїасса Ісдасссюда днанасі 1380 садаїсссас Ісдщдаадодс дисаассід сайсддосо сіасіаісді сааддудсссі 1440 дддіїсассд дсддддасаї ісїдсдсадао асдаацйно ддісшсоо сдаїа(соус 1500 дюаасаїса сддсдссссі садссадсодс іасададідс ддансосіа сосисдаса 1560 7 асщдассідс аднсіасас саасаїсааї дддассасда НПаасаїсдуд саашсадс 1620
Ісдасдадад анйссдддда содаїсіссад їасддсадоді Іссддадс ддодисаса 1680 асіссунНса судйнсадсда сосіащісд асоднсасаа іІсдосодссії садсісісї 1740 їсааасааїд аддю!асаї дассдсаїс дадйсдісс ссдсідадді їасспйсдад 1800 дссдавіасо аіїсіддадаа додсісадаад оссадісаад содсіснсас діссадсаас 1860 7 садаїсодсс Фаадасдда сддасадаї іассасанод асааддюаяд саассісдіє 1920 чадшщссіаї сддасдації сідссісдаї дадаададод адсідісєссда дааддісаад 1980 60 садсдаадс дссісідсда сдададдаас сіссіссадд асссдаасіи ссдсддааїс 2040 аассдасадс сідассдсдао аіддадддаос іссасідаїа Нассаїсса дддсддоадас о 2100 чащідіїса аддадаасіа сдісасдсіс ссдддсасаї Ісдасдадід сіассссаса 2160 і їассідіасс адаадаїсода іІдадісааад сісааддссі асасісддіа сдадсідсас 02220 ддаїасаїсд аддасіссса доаїсісдад аїсіассіса Іссдсіасаа дсдаадсас 2280 дадасідйна асдідссада сассдадісо сідідасссс Ісісддсоса діссссааїс 2340 ддааадідсд дсдадссааа ісдсідсдсу асссаїсісд адіддаассс їдассіддаї 2400 тдсадсдса дддасддсда даадідсосі сассайнсіс ассашсіс асіддасаїс 2460 й чадідддсі дсассдассі саасдаддаї сідддсдісі ддаоНацші сааааїсаад 2520 асссаддасд ддсасдсіад асюдодсаас сісдадійсс Іісдаддадаа дссосідоід 2580 додсдаддсіс Іддстададі їіаададаосо дадаадааді ддададасаа дсдддадаад 2640 сіддадсіду адасааасаї сдісіасаад даддсдаада адісідісда дсісіснс 2700 онНаайсас адіасдасад дсідсаддсс даїасдааса ісдсданаї ссасдсідсс 2760 7 дасаадсддо дсайнссаї Ісдсдадосс їассісссад адсщадсаї аісссіддс 2820 дюаасдсдо сіашісда ддадсіддад ддссосаїсі Ісассдссіа садссідіас 2880
Зо дасдсдадда асоцайнаа дааддодаї Нсаасаа!д дссісісодїо сіддаасую 2940 аадддссасд ддасдісда ддадсадаас ааїсаїсодсі сідіссісді ддісссядад 3000 щададосід адацсаса ддаданадяо дідідссс99 дсаддодайа саїссіссдс 3060 7 дісасдасої асааддадчоад сіасддддаад досідсонНа саансасда даїсдаддас 3120 аагасіда адсідаацдії сіссаасідс діддаддадао адаїсіассс ааасаайасі 3180 дісассіюдса асдасіасас ддссасасад даддадіасу аддосасца сассадссдс 3240 ааїаддадаї асдасддсдс сіасдадіса аасісдісід дссідсдда НПасодсдісї 3300 дснасдадд адааддсна сассдасддс аддсдсдаїа асасадсда дадсааїадд 3360 7 ддвіасдодсод асіасасссс асісссідсо ддсіасудщюда сдааддадсі одадіаснс 3420 ссддадассд асааддієід асіидадаїс ддддадасодо аддосасаїй саїсоіддаї 3480
Іссдісдадс юсідаїсаї ддаддадіа 3509 «2105» 27 «2115 3510 «2125 ДНК 213» Штучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного мутантного ВТ-0030 60
«4005 27 аддаддіса ассассадаа дадодсоі ссаїасаасі дссідаадаа іссіаадаїс (610) дадаїдсісд асаїсдадда сашсодісс аддісдадодо адсадаїдос сдадаїсісс 120 і сюддссіса саадднссі ссіддацісі сіссідсс99 дсоасісай сддснсдад 180 сіднсдаїа іїісашоддаа саїдаїсоддс ссддассаді ддісосідн ссісасссад 240 айдадсадс ісаїсдасса дсдсайдад дсосасодїда ддаассаддсіайісдаду 300 сіддаддоасс Іддодддасіс сіасдадсдіс їасаїсдада дссідаддда чідддадасі 360
Іссссдааса аїдадісісї ссадсаддаї дідаддаасс дайсадсаа сассдасааї 420 й одсісідаца сддссаїссс дайсіссдс дадсадддсі Іісдадаїссс осіссідасс 480 дістасддс аддсідссаа ссідсассіс адссіссідс дддаюсоої сїаснсдад 540 сададаоїддо дссісдасас ддссасддіс аасааїсасі асаассддсі даїсаассіс 600 анааїассі асіссдаїса Носдсісад дднсаасс дсдоадсідда саашсодс 660 дюдісасід сссосіассії сдашссад аддааддщюа ссаїсісаді ссіддатан 720 7 онососісі Ісссааасіа сдасаїсада асаїасссіа Нсадасісі дісссадсіс 780 асссдддада Ісіасасадіс іІссадісдсу дадссіддсо сісасісаа сойдассід 840
Зо аддааїаїсс Іссдддадсс асассідаїд дашссіда сасодссісді даїстасасі 900 досдіссадд дсдддаїста ссасюдаосі дддсаюада ісісдісіад дассасдддс 960 аассідісаї ссааїаїсса дисссасід їасддсасодї ссдссаасдс дассудсосі 1020 7 нсааїсща сдаїссайца сіссдадасс аїсіассдса содсісадсоус іссааїсіас 1080
Іссдісадса асдддашсе дссдаасадд ассадддссд Ндаддосді ососНосіс 1140 асадсіадду асаасааїсі даасісдсіс ссойнссіді ассддаадда ддосісасід 1200 дайнссіса ссдадсідсс дссддаддас дадаасдадс сасснасаї сдосіасісс 1260 сасадасідї дссаїдссад дисасісдс адсісаддно сісдадсс дісіаасіс 1320 7 дсісдсаїсс сддідісіс аїддасссас сдсіссдссд дсссдасааа дададісісї 1380
Ісаїссадда ісасісадаї! Іссндодії ааддсісаїа сссіддайад сддсусснс 1440 дюайаадод дсссдоддаїї сассддс9дао дасаїссіса ссаддссааа ссісдддаса 1500 сіддасоасас іІсадддісас асідасщас садсісссдс адаснасаа саїссддай 1560 сдсіасдссі ссайдсдаа ісдсддсддс асссісаїсі Ісісісадсс дссаїсайас 1620 7 доссісасаї Ісссдаадас іаддасаїс даїдадсссс іщдасдісдсоу сісшсдсс 1680 аддасаасіс Існсасасс аацассійс асдсаддссс аддсададсі даассісасі 1740 бо аїссадсадад дсоюіасаї сдаїаддайї дадисаїсс сідісаадс сасайсдад 1800 дсоддавдіасд ассіддадса ддсісадаад ассадїдаасод содсіснсас садсісдааї 1860 садсіддадсс Ісаадасада ссюдасідаї Іассасацо аїсадаідіс даассідаіє 1920 і дасюссісі сідаюдадії сідсаїсдас дадаадсдсу адасщдадсда дааодісаад 1980 садссаадс досісісада сдадсодсаас сіссідсадо айссааси сададосаїс 2040 ааїаддсадс сддасададо дчюдадодододс Іссассодаїа ісасдайса дддсдоддаас. 2100 дасушіса аддадаайца содідасссід ссаддсасодї Ісдасдадід сіасссіасд 2160 їассістасс адаадаїсда щдадіссаад сідаадасої асасасдсіа ссадсіссдд 2220 й ддаїасаїсд аддасадсса оддаїсіддаая аїсіассіса ісаддіасаа сдассаадсас 2280 дадасідвна ашідсс9дад сассдддадс сідіддссас ісадсоїдда дісдссіаїс 2340 ддааадідсд дсдадсссаа ссосідсдіс ссасадсідд адіддаасад сааїсісдас 2400 тдсіссідса дддадосода даадідсдсс сассайссс ассашсаяд ссісдасаїс 2460 чаюдіддодді дсасддассі дсасдасодаї сісддсаісї ддойани саадаїсаад 2520 7 асодсаддасу дасаїдсіад дсідддсаас сісдадійсс ісдаддадаа дссосідаоїд 2580 додсдаддсіс Іддсіададі саададдасо дадаадааді ддсдддасаа дсдсдадаса 2640
Зо сідсадсісод адасіаасаї сдушасаад дадассаадо адісддідда сосісідйс 2700 дссаасісіс адіасааїсд ссіссаддсі даїасдааса поссаїдаї ссасдсідсс 2760 дасаададду юсаїсосаї ссдсдаддсі їассіссссд адсідісіді аїссссдда 2820 7 дюаасдсдд дсашісда ддадсіддад ддссддаш ісассдссії садссістас 2880 дадсодсодса асдісаїсаа даайсадас Нсаасааїйа досідіссід сіддаасоаїє 2940 аадддссасд Ндасаїсда ддадсадаас ааїсаїадда одсойсісді сунссдддад 3000 щададосода адащісдса даадаїдсас дісідсссду дсадададаїйа саїссідсдуд 3060 дісассдссі асааддад9дао сіасддддад досідсона сіайсасда даїсдаддас 3120 7 саїассдаю адсідаації ссдсаасідс дзаддаддаїд аддідіассс даасааїаса 3180 аддасноса агсадїассс ддсідассад дзададатасо аддоасоссід сасісісдс 3240 аасаддддаї асдасдадодї сіасддсааї ассссдісас іссссодссда Насдсдсса 3300 аїсіїіасдаду адаасдссіа сасддасдда аддадддаса аїісспосда діснсасдс 3360 ддаіасдодсод асіасасдсс асідссідсс дасіасдада саааддадсі ддадіасінс 3420 7 ссддадассяо агасдацію даїсаадсії ддададасад аддоасасій саїсдісдас 3480 їссандадс ідсідасаї ддаддадіаа 3510 60
«2105» 28 «2115 2160 «212» ДНК -213» Штвтучна послідовність і «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного мутантного ВТ-0031 «4005» 28 адаадсіса адааїссада саадсассад адссідісса дсаасосіаа ддіддасаад бо аїсдссасад ансдсісаа дааюдадасі дасайдадс Юаадаасаї даасаадад 120 данассісс дсаїдісдда дсаюадісі аїсдасссії Ісдашсодс сісіасіай 180 й садассоддса Іісддданос сддсаадаїйс сісддсассс Ісдудсдідсс дНйсосіддс 0240 садаїсасії сісісіасіс айсайсід дасдадсіді ддссіааддд даададссад /-З00 щададаїсі їІсаюддадса соддаддад аїсанаас адаадайсі дассіасаса 360 аддаасаада сісідісдда ссісаддадс сюдододдаїй сссісдусіді сіассадад 420
Ісссіддада дсіддднаа дааісдсаас аагасосодао сісдсіссаї ддісаадаас 480 7 садіасаїсд сссісдадсі дайнсаїс садаадсідс саїсунсос сдідіссЯдс 0540 дададааддісс сдсіссідсс ааіїсіасдсс саддсідсса ассіссассі ссідсіссід 600
Зо сдсдасаосії сіаїснсодд сааддадвідо дадсщісад сдїссдадайіадсасанс 660
Тасаасаддс адднаадад дасісдддас їасісддаїс айдсудюаа діддіасаас 720 ассдоссіса асааісідад дддаассаас дссаадасдсі дддіссддіа саассадіїс 780 7 сдсааддаса дасасісаї даїсісдаї сіддісосос існсссаїс аїасдасасі 840 сіддісіасс сааїсаадас сасдісссад сідасіаддд аддШасас сдаїдссай 900 ддсасоадіїс ассссісада ддсддідасс Іссасаасії ддіасаасааіаасдсдсся 960 адсійсісда ссаїсдадас ссаноїд сддаассссс ассіссідда спсосісдад 1020 саддщдасса Іісіасісдсі ссідісїадд ддісааайа сосадіасаї даасаїдідд 1080 7 додсддосаїа адсісдацдії ссддасіаїс ддсдоасассс іІсаасасаад сасісаддас 1140
Ісдассааїа сдісіанаа сссадщасо сісссШса саїсіаддда сдісїассдд 1200 асададісас юассоддссі сааїсідне сісасдсадс ссудідаасду сдіссссадда 1260 дидасісс асіддаацдії сдісасссаї ссааїсосаї ссдаїаасії стасіассосі 1320 додстасасю дсандддас дсадсіссад дасіссдада аїдадсідсс дсссдадасс 1380 7 ассддссадс ссаасіасда діснНасіса сасаддсісї сссаїаісдд ссідашсс 1440 дссадссасод Нааддсодсі сдіщіасадс ддасасаїс дсісддссда саддасаааї 1500 60 асіаїсаасі суддайнсіаї сасадсадай ссдсісдіда аддссіїсаа ссідссдісд 1560 дососсісда ісайс9999 ссссддайе ассдоас9999 асаїссідсуд саддассаас 1620 асдоадсасаї ісддоадаїаї ссдсдісааї апйаасссас сшсоссса дсодсіасадда 1680 і сіссдсаїсс дсіасдсдіс сасаасіааї сіддадійсс асассадсаї саасддсаад 1740 дсіанааїс аддддаасії сісддсіасс агдаассодсод дсдаддассі сдайасаад 1800 дсснсадда сдаддосії сассасоссс Неїсацсі ссаасососа дісдасніс 1860 ассаїсадсд спддааїйй сісісіддду аасдадчдісі асаїсдасад данйдаднс 1920 дюссдаїсод адднассіа сдаддсддад сасдацшісо адаадасоса ддаддадат 1980 й асдасісісі ісасдадсас аааїссаддс ддссідаада сдаасдісас ададіассаї 2040 аїсдассада ісісдааїсі сдїдададс сідісдаасо адисіассі сдашадаад 2100 сдодададсіді Ісдадсісдї даадіасдсс аадсадсідс асспддссо саасаціаа 2160 «2105» 29 «2115 3495 «212». ДНК -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного мутантного ВТ-0201 7 «4005» 29 аддадсдса асааїсадда ссадіосаїс ссдіасаасі дссісаасаа ісссдаддй (610) досайсідо агаісдадаа сіїсааісід дадсіддіді сссаддіцдіє адісддссіс 120 7 ассадойсс іссіддадас сіссаїссса дасассдаді Ісодсісідду ссіснсдас 180 асашо9дао дсодсссісдд сдаддаїсад юдісссіді іссісдсіса дандадсая 240 сідаїсааід адсдсанас сассуюдад аддаассоса сіаїссаддс ссідісдддс 300 сісіссадсі сдіасдадодї сіасандаяд дсісісаддд адідоададаа сдассіюддаї збо ааіссддсії стадддасаад дадашщасі адданес9од9 сіассдасаа сісасісай 420 7 асддаїаїсс сдсіссідда даїссссдас Нсдадано ссасасідіс сдідіасасд 480 саддсдасса ассідсассі сдсссіссід адддасасід ісіасісдуд ддадсасюа 540 дассідасас адасіаасаї сдаддассіс сасасасддс Юасісдсіа сансаддад (610)0)
Тасіссдаїс айдсодсодсо сіддіасаас саддодссіса асааїацнодд суддааісаас 660 асссодсіасс Ісдасісса дсдддадсід асдаїсадсо іІссісдасайідйодсссід (720 7 псссдаасі асдаїаіссд дассіассса анссіасдс ададссадсі сасасдсдад 780 аїсіасасії сдссдоної дасссссддс ддаанода сідісдаї сісїаасціє 840 бо сісаддасас сасассідаї ддаснсне даїсддаїса Наїсіасас ддосасодід 900 сдсісаассс сісасіддда ддддсащдад дісаїсісса ддаддасодо ссаддддаас 960 дадайадда одсссдсісіа сддсдіддсі дсіаадссо адссдссаді їасдаїсадд 1020 і ссаасддасі Іісасаддасда дсадсдасад дістассдсу Нсідіссад ддісдссадс 1080 пссддаасі сдддсасааа Шсісасіс дідасодсоду спсосНосі дасіаїсйс 1140 адсасадісії сааістассд саасоддсис ддонсаад сідасассаї сдаїдадай 1200 ссааїсдадду ддасддассс аїасаїсодс їасісссасс дссісідсса діддасис 01260 ассдссісса дсссунсаї садссадіас дсдаддосіс ссдіснсіс сюддасасас 1320 й сддадсодсіа сайсасіаа сассаїсдас ссададсдса Насосадаї сссіаїдоїд 1380 ааддссіаса ассідсаїдс дадсодссаса дісанадда асссоадоди сасюдсддаЯа 1440 дассіссідс ддсоасасодаа сасададсасі Псдсддаїа ісаддаїсааанассддс 1500 ссссісіссс адсдсіассд содідсдсаїс сдсіасосії сіасаасіда ссідсадіс 1560 нсассадда ісаасдддас дадсдідаас саддосааїй іссадсддас даїдаассяс 1620 7 дддадасааїс іІсдадісідо саасіссду асадссдоді ісісаасісс айсісайс 1680 іссаадсіс адіссассії сасдсідддс асссаддссі Ісадсаасса ддаддісіас 1740
Зо айдасадда ісдадіїсої дссідсщаяд дісасонсод адассдадіс сдаїсісдад 1800 сдддсісада аддссоідаа сдсосідіїс асаадсасії сдасадсід99 ссісаадаса 1860 аасадїсасід дсіассасаї сдассадаїй ісдааїсісо9 юдсоідссі дісідасдад 1920 7 псдссісу ададаадсо сдаадсідісд дадаадаюда адсасдссаа дсодсісісї 1980 дасаадсдса ассіссюдса ддасссдаас Нсадоаддаа ісаасадоса дссідассас 2040 ддсюдадода дсісдассда їайасдаїс саддасоа9д99 асдадші сааддадаас 2100 тасдідассс іІсссаддсас дісдасдад юсіасссіа саїассідіа ссадаадаїс 2160 даюдадісса адсісааддс дїасасісдс їІассадсіда ддодаїасаї сдаддасіса 2220 7 саддаїсісд адаїсіассі саїссдсіас аайссаадс асдадаісді їаасдідссс 2280 ддсассоддаї сосідіддсс асісісцід дадаасада ісодддссаїд сддсдадссі 2340 аассдащдсао ссссдсассі сдадіддааї ссадассідс айосіссід ссдададдс 2400 дадаадідсод Іссассайс Ісассашес іІсасісдаса ісдаюнода сідсассдас 2460 сісаасдада аіїсідддааї аіддсісай Нсаадаїса адасссадда сддасасдсс 2520 7 аддсіддоса ассісдацдії ссісдаддад дадссссісс дадсдадодс ісіддсіадя 2580 дюаададод ссдадаадаа діддсосдас аададддада адсідсадсі сдадассаас 2640 60 аїсдісіаса аддаддсдаа ддадісадід даїдсісісі Ісдісаасіс ссадіасдас 2700 сдссідсадд ссдаїасдаа їайосодаїд аїссасдссду сддасаадад даїосаїсяс 2760 аїссдсдадад ссіассіссс ададсіціса дісаїсссід дсопаасодсідссацшис 2820 і дадаадсідао аддодссосаї сісассосс Іасісісіщді асдасдсдад даасдуїдай 2880 аадаасддда ашйсаасаа юдссіссід дсддаасо іІсаадддсса саїсдаюн 2940 даддадсада асааїсаїсуд садсодідсіс дісаїссссод адідддаддс сдадаїсісд 3000 садаадона дааїідссс дддсадддда їасаїссідс дсоїдассос Насааддад 3060 ддстасадоад ададосіосої сассайсас дадаїсдадо асаагасдда дадсюдаад 3120 й неіссаасі дсаїйдадда одасіасссо аасаатассо Щасдідсаа сдадіасасс 3180 адаассадд чадідддсда дідсасідас дспдсаасо псодсааїаа ддосіасдад 3240 даюдсдіасд ддсасаассс аадсассссі дідсайаса ссасдссаїа сдаддаддад 3300 асаїасасід асдададосд ддадаасссі ї(дсдаддсса агааддосіа сдідаасіас 3360 асассодсісс ссдіддосіа сдщдасіаад дадсіддасді асіссссда дассдасасд 3420 7 дісіддацо адаїсддода дасададддс асшссісд Ндагаосаї ддаосідсід 3480 аїсаддазда адіаа 3495
Зо «2105» 30 «2115 3501 «212» ДНК -213» Штвтучна послідовність
З5 «220» «223» Кодувальна послідовність синтетичного мутантного ВТ-0202 «4005 30 адаадаїса асааїсадаа ссаддсаїй ссдіасаасі дссідадсаа Ііссддаддад бо дідсіссщ4о асдасдадсо сайсідссу дасаїсдаїс сссісдадаої садсаїцісд 120 сіссідсаді Іссіссідаа саашсодід ссдддс9доаа дсаісаїсіс дддссідаїс 180 7 аасаадацй одддодсосссі ссдассдісс дадідддадс ідпсосісдс ссадандая 240 садсідаїсд асаддаддаї (дадосдаса дісаддодсіа адодссаїсоас дадсіддад 300 ддасддаосс доїснасса дсістасдас даддсонса аддадіддда даадасассс 360 даїаасассуд сддсодсдсіс садддідасс дадсодсіса додаїсайда сдсдсадаїс 420 дадасіааса Нссаїсні ссдсушса додснсдада гссісіссі дісідісїас 480 7 асссадоас9до сіаассідса ісісдсссіс сідсдддаай садідздіий сддсдадада 540 дададсіда ссассасааа сдідааідас аїсіасаасс дссаддісаа даддандас 600 бо дадіасадсод аїсасідсодї сдасассіас аадасддадс їддадсоссі сдаднсісс 660 адсаїсдсдс адюддаддаї сіасаассад йссоддадод адсідасссі сассдіюсіс 720 даїаїсойца сссідноссе даайасдас ддссдссідії ассссаїсад дассашсс 780 і садсісасдс дддасаїсіа сасаїсісса дшсададі іІсіасітасду сосіаїсіас 840 аасіасааіа ПФдІЮДОдДад дсісасдад садсадсіда додсодссаса ісісаїддаї 900 пснсаасі ссаїдаїсаї діасассадс дасааїсоса дддадсасіа сіддіссддс 960 сіддадада адодссасада сасіадсдду аассадаці сунсссссі ддсіддсасу 1020 адддаддааїй ссдссссдсс адісасадії аддаасаа доададдосоді сіассдсаїс 1080 й сісісідадс сайсіасіс дісіссшс сідддсассі ссоїдсідда сісссдсдас 1140 дадааднсд ссісдсдад саасасіасс асдісссідс сдадсасіаї стасаддааї 1200 сдсддсассду юдайсосі сдісісіай ссассісадо асіасісддісссодссссас 1260 аддддсіасі сссассіссі дісісащії асдадсаса асісаїсссс даїсцссас 1320 ддасасаїс дсіссдссас сссасодсааї асдандасс сідаїадсаї сасдсадай 1380 7 сссоцдща адодссісаса ісідіссдда ддсадсона іІсаадддодсс ддодссасаса 1440 ддчадсдасс щдашсссі ссссдісаас аашсасіс асіссдсаї сссойссад 1500
Зо дссаасассс сдсадсодсіа ссосаїссдс аїссосіасу сідссдасіс ддаїдоасасс 1560 сіддайсдо додіднесі сісадсідсу дссадодасу дсісаасас аасійсдіас 1620 адддсіасса іщдісісс9дад содсісссіс асаїсіаддд ашссадії ссіддассіс 1680 7 аасасаїсаї їісаснсосда сдісосаїсс ааїісідіддс їіссашсаї саддіасай 1740 сддссадодса ассщдіасаї сдаїадддсс дадисанс сюіодасос сасснсдад 1800 дсддосіаса аїсісдадсу ддсасадаад дсююаася сссідіїсас сіссасдааї 1860 садааддодсс іІссадассда сдісасддаї іІассасаїсу аїсаддціс ааассісдід 1920 данаоссіді ссдасдадії сідссіддас дадаадсоса адсідадсда дааддісаад 1980 7 саддсдаада ддсщісща ідадсоддаас сіссідсаду асісааасі ссддддааїс 2040 аасадддадс аддагадд9д9 сіддадддоя ісдасасаїа іІсасіанса дддсддсаас. о 2100 дасдісійса аддадаайі соцасісід ссддудсоусді ісдаїдсно сіассссасс 2160 їассістасс адаадаїсда сдадіссаад сідааддссі асасссдсіа сдадсідсяад 2220 ддаїасаїсд аддасадсса оддассісдаї аїстассіда Нсосіасаа сасааадсас 2280 7 дадасісіса аідссддд сасіаадісс сссіддіссс Ідідсасдда діссссасіс 2340 додсаадідсд дддадссіаа саддідсосс Ісссадаїсо адіддааїсс ддассюдаї 2400 бо тдсіссідса дддасддсда даадідсдсі сассайсас ассашсіс ссісдасаїс 2460 чаюдіддодсі дсасддассі саасдадаа! сюдадаїйсі дддісанії саадаїсаад 2520 асдсаддасу дссасдссад асщоаддаас сісдадісс ісдаддадаа дссдсіссід 2580 додсдаддсіс Іддсіаддді саадсдсдсс дадаадааді ддададасаа дсддададаад 2640 сіссададсд адасдаасаї сдідіасаад дадассаадо аддсоддйдадодссіднс 2700 дюдасісдс адіасдадся ссіссаддсоу даїассааса НПосіаїдаї ссасдсідсс 2760 дасаадсасод ідсаїсадаї садддаддіс їасісссад адсідіссді саїсссіддс 2820 онНаасодсдо сіайнсда ддадсіюддаяд оддссодаїсі ісасддссіа сісасістас 2880 дадсодсодса асдісанаа дааіддсдас Нсаасаад досідіссід сіддаасуай 2940 аадддссаїд ддасдісда дднсадаас ааїсассдсі садіодсісаї саїсдсідад 3000 щададосдо адащіссса ддадунссо дідїдссс99 ддададааїа саїссідачоа 3060 днассодссі асааддадда діасддсдад дадідсоїда сдайсаїда даїсдаддас 3120 сасасадаїд адсідаації саддаасідс даддаддадчу аддшассс даасаайаса 3180 дюасідса аддсіасас сдсдасдсад даддадіаса аддасна сассісдадя 3240 аасаддддсі асдасдаддс сіасдддаас ааіссаадсо ісссідсіда Масдссісд 3300
Зо дшасдаду адааддсцна сасддасддс аддадддада асссаїдсда даїдддадада 3360 дусіасасіс сасідссіді дддаїасаїс ассааддадс юдадіаси сссідадаса 3420 даїасідісї ддаісдадсі тосдадасс даддодасоі Іссісанда садсдіддад 3480 сідсідсіса ддаддадіаа 3501 «2105 31 «2115 1181 «212» Білок -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005 31
Меї Авр Авп Авзп Рго Авп Пе Авп Сім Суз Пе Рго Туг Авп Сувз І єи 1 5 10 15 зЗег Авп Рго Спи Маї Спи Ма! Геи Спту Спіу СП Аго Пе Спи Тиг Спу 20 25 зо
Туг Тиг Рго Іе Авр Іе 5ег І єи 5ег Гей Тпг Сіп Рне І єи Гей Зег 35 40 45
Сім Ре Маї Рго Сіу Аа Стпу Рне Маї І еи Сту І ви Маї Авр Іе Пе 50 55 бо (516)
Тр Сту Пе Рне Сіу Рго 5ег СіІп Тер Авр Аїа Ре ГГ еи Маї Сп Пе 65 70 75 80 сій іп Гей Пе Авп Сіп Ага Пе Спи Спи РНе Аа Агу Авп Сп Аа 85 90 95
Пе Бег Аго І еи Сім СПІу Гей Зег Авп Геи Туг Сіп Пе Туг Аіа Си 100 105 110 зЗег Ре Агу Сім Тгтр Сіи Айа Авр Рго Тнг Авп Рго Аа І єи Ага Си 115 120 125
Сім Меї Ага Іе Сіп Рне Азп Ар Меї Авп 5ег Ага Г еи Тниг Тнг Аа 130 135 140
Пе Рго І еи РНе Аїа Маї Сіп Авп Туг Сіп Маї Рго Геи І єи 5ег Маї 145 150 155 160
Туг Маї Сіп Аа Аа Авп І єи Ніз І єи Зег Ма! І ей Агу Азр Маї 5ег 165 170 175
Коо) маї Рне Сіу Сп Аго Тр Сіу Рпе Азр Аїа Аа Тнг Іе Авп Зег Ага 180 185 190
Туг Авп Азр І єи Тнг Ага Г єи Пе Спу Авп Туг Тиг Азр Туг Аїа Маї 195 200 205
Аг Тгр Туг Авп ТНг Су І еи Сім Агу Маї Тгтр Спу Рго Авр 5ег Аг9 210 215 220
Азр Тр Маї Агу Туг Авп Сп РНе Аг Ага Си І єи ТАг ГГ еи Тнг Маї 225 230 235 240
Ї еи Ар Іе Маї Аїа І єи Рне 5ег Авп Туг Азр Зег Агу Аг Туг Рго 245 250 255
Пе Агоу Тнг Маї Зег Сп Гей Тнг Ага Сти Пе Туг ТАг Авп Рго Маї 260 265 270
Їеи Спи Авп Ріє Авр Сіпу Зег Рне Аго Стпу Меї Аїа Сп Аго Пе Си 275 280 285
Сіп Авп Пе Аго Сп Рго Нів Геи Меї Авр Пе Геи Авп Зег Пе ТНг 290 295 100) 60
Пе Туг Тиг Авр Маї Ні Агу сту Рнеє Авп Туг Тр Зег Спу Ні Сп 305 з10 315 з20
Пе Тниг Аа 5ег Рго Маї Спу Рпе Зег Су Рго См Ре Аа Рне Рго 325 330 335
Ї еи Рне Сіу Авп Аа Сіу Авп Аа Аїа Рго Рго Маї І єи Ма! 5ег І еи 340 345 350
Тиг ау Геи Спу Пе Ре Аг Тнг ГГ еи 5ег Зег Рго Геи Туг Аг Ага 355 360 365
Пе Пе Геи Спу Зег Сіу Рго Авзп Авп ап Сім Гей РНе Маї Гей Авр 370 375 380
Спіу Тиг Сім Рне 5ег Рнеє Аїа 5ег І єи Тиг ТНг Авп І єи Рго 5ег ТНг 385 390 395 400
Пе Туг Ага Сп Ага СПУ Тиг Маї Авр 5ег І еи Авр Маї! Іе Рго Рго 405 до 415
Коо) Сіп Авр Авп 5ег Маї Рго Рго Ага Аа Сіу РНе 5ег Нів Аго І еи 5ег 420 425 430
Ні Ма! Тиг Меї І єи Зег Сп Аа Аа Сту Аа Маї Туг ТНиг І и Агд 435 440 445
Аа Рго Тниг РНе 5ег Тр Сп Ні Агу Зег Аіа Спи Ріє Авп Авп Їе 450 455 460
Пе Аа бег Авр 5ег Пе Тнг Сп Пе Рго Аа Маї Гуз Спу Азп Риє 465 470 475 480
Ї єи Рпєе Азп Сту 5ег Ма! Пе бег Спу Рго Спіу Рпе Тнг Спу Спу А5р 485 490 495
Ї еи Маї Аг Гей Авп 5ег Зег Сіу Авп Авп Іе Сп Авп Ага спіу Туг 500 505 510
Пе Спи Маї Рго Іе Ні РнНе Рго 5ег Тнг Зег ТНг Ага Туг Агу Маї 515 520 525
Аг Маї Ага Туг Аа 5ег Маї Тнг Рго Пе Ніз І еи Авп Маї Авп Тр 530 535 540 60
Спу Авп 5ег 5ег Пе РНе 5ег Азп ТНг Маї Рго Аа Тнг Аа Тнг 5ег 545 550 555 560
І еи Авр Авп ГГ еи СіІп 5ег Зег Авр Рпе Сіу Туг Рпе Спи Бег Аа Ап 565 570 575
Аа РНе Тнг Зег 5ег ГГ еи Спу Азп Те Маї Спіу Маї Агу Азп Ре 5ег 580 585 590
Сіу ТНг Аа Сту Маї! Пе Пе Ар Ага РНе Сім РНе Іе Рго Маї ТНг 595 600 605
Аа ТНиг І еи Сім Аа Спи Туг Авп ГГ еи Си Агу Аа Сп Гуз Аїа Маї 610 615 620
Авзп Аа І єи Ріє Тнг Зег ТНг Авп Сп І ви Стпу Геи Гуз ТНг Авзп Маї 625 630 635 640
Тпиг Авр Туг Ніз Пе Ар ап Маї Зег Авп ГІ єи Ма! Тиг Суз Гей Зег 645 650 655
Авр Сім Рнеє Суз І єи Авзр Си І уз Ага Спи І ей бег Спи І уз Ма! І уз 660 665 670
Ні Аїа Гуз Аго І еи Зег Авр Си Агу Авп І ви ГГ еи Сп Авр 5ег Авп 675 680 685
Рпє Гуз Азр Іе Авп Ага ап Рго Спи Агоу Стпу Ттр СПу Спу зег ТНг 690 695 700
СУ Пе Ти Пе Сп Спу СЧу Азр Азвр Маї РНе Гуз Сім Авп Туг Маї 705 710 715 720
Тиг Геи Зег Спу ТАиг Ріє Ар Сім Суз Туг Рго Тиг Туг Геи Туг Сп 725 730 735
Гуз Пе Авр Сім 5ег Гуз І еи Гуз Аіа Рпє Тнг Аго Туг Сіп Гей Аг9 740 745 750 сСіу Тут Пе Сім Ар 5ег Сп Авр І єи Сім Маї Туг І єи Пе Ага Туг 755 760 765
Авзп Аа Гуз Ні Си ТНг ГГ еи Авп Маї Рго Стпу Тнг Спу 5ег Гей Ттр 770 775 780 60
Рго І єм Аа Маї Гуз 5ег Рго Пе Спу Агд Сув Сіу Спи Рго Авп Ага 785 790 795 800
Сув Аа Рго Ага Іе Сім Тр Гуз Рго Авр Маї Авр Су 5ег Суз Аг9 805 810 815
Ар Сіу Спи Гуз Суз Аа Ні Ні Зег Ні Ні Рне 5ег І еи Авр Пе 820 825 830
Ар Маї Спу Суз Тиг Авр І єи Авп Сім Азр І єи Сіу Маї Тгтр Ма! Пе 835 840 845
Рпє Гуз Пе Гуз Тиг Сп Авр Су Нів Ага Гуз Пе Спу Авп І ви Спи 850 855 860
Рпє І еи Спи См Гуз Ге ГГ еи Геи Спіу Спи Аа Гей Аа Агу Маї Гуз 865 870 875 880
Гуз Аа Си Гуз Гуз Тр Агу Авр Гуз Аг Сім Гуз Гей Спи Ттр Си 885 890 895
Коо) Тпиг Авп ЇІе Маї Туг Гуз Спи Аа Гуз Сім Зег Маї А5р Аа І єи Рпе 900 905 910
Ммаї Авр 5ег Сп Туг Авп Ага Геи Сп ТАг Азр Тиг Авп Їе Аа Меї 915 920 925
Пе Ні Айа Аїа Ар Гуз Агу Маї Ніз Ага Іе Ага Сім Аа Туг І ей 930 935 940
Рго Си І ви Зег Ма! Пе Рго Спу Маї Авп Аїа Аа Пе РНе Сім Спи 945 950 955 960
Ї ви Спи С1у І еи Пе Рне ТиНг Аїа РНе 5ег І єи Туг Азр Аа Ага Авп 965 970 975 ма! Ме Гуз Авп Сіу Авр РНе Авзп Туг Су І еи бег Суз Тр Авп Маї 980 985 990
Гуз Сту Нів Ма! Азр Маї Спи Сі СІп Авп Авп Ні Агу 5ег Маї І еи 995 1000 1005 ма! Ме Рго Сім Тр Сіи Аіа Си Маї Зег Сіп Сіи Маї Агу Маї 1010 1015 1020 60
Сув Рго ау Агу Сіу Туг Ше Ге Аго Маї Тнг Аа Туг Гуз Сім 1025 1030 1035 сСіу Туг Спу Спи Спіу Суз Ма! ТА Пе Нів Спи Пе Си Авр Авп 1040 1045 1050
ТАг Авр Сі єи Гуз Рпе бЗег Азп Сувз Маї Спи Сім Си Маї Тут 1055 1060 1065
Рго Азп Авзп ТНг Ма! ТАиг Сув Авп Авр Туг ТНг Аа. Тнг Сп Спи 1070 1075 1080
Сі Туг Спи су Те Тук ТАг 5ег Ага Авп Ага Спіу Туг Азр Спу 1085 1090 1095
Аа Туг Спи бег Азп 5ег 5ег Маї Рго Аа Авр Туг Аа бег Аа 1100 1105 1110
Туга спи Гуз АІа Туг Тиг Авр Сту Аго Агу Азр. Авп Рго Сув 1115 1120 1125
Коо) Сі Зег Авп Ага Сіу Туг Агу Авр Туг ТНг Рго Геи Рго Аа Спу 1130 1135 1140
Туг Ма! ТАиг Гуз Спи Гей Спи Тук Рпе Рго Сім Тиг Азвр Гуз Маї 1145 1150 1155
Тер Пе Спи Пе Спу Спи Тиго Спи СПу Тк Ре Пе Маї Авр 5Бег 1160 1165 1170 ма! Сім І еи Ї еи Ї ви Меї Спи Сім 1175 1180 «2105 32 «2115 1176 «212» Білок -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005 32
Меї Сі Пе Маї Азп Авп Сп Авп Сп Суз Маї Рго Туг Азп Суз І еи 1 5 10 15
Авп Азп Рго Сім Пе См Пе Її еи СТ СТу Спу Агу Пе бег Ма! Су 20 25 0) 60
Азп Тпг Рго Іе Авр Іе 5ег І ви 5ег І еи ТАг Сп Рне І єи ГГ еи 5ег 35 40 45
Сім Ре Маї Рго Сіу Аа Спу Рне Маї І еи Спу І еи Пе Авр ГГ еи Пе 50 55 60
Тр Спу РНе Маї сіу Рго Зег Сп Ттр Авр Аа РнНе Г еи Аа Сіп Маї 65 70 75 80 сій Сп Гей Пе Авп Сіп Ага Іе Аїа Сім Аа Маї Ага Авп ТАг Аа 85 90 95
Пе Сп Схи Геи СПи СТу Меї Аа Ага Маї Туг Агу Тнг Туг Аіа ТНг 100 105 110
Аа Рне Аа Сі Тгр Си І уз Аа Рго Азр Авр Рго Си І ей Ага Спи 115 120 125
Аа Гей Агу Тпг Сп Ріє Тнг Аа Тиг Сіи Тег Тук Пе Зег Спу Аг9 130 135 140
Пе Бег Маї Геи Гуз Пе Сіп Тиг Рне Сім Маї Сіп Гей ГГ єи 5ег Маї
Ко) 145 150 155 160
РНе Аїа сСіІп Аа Аа Авп І єи Ніз І єи 5ег І єи І еи Агу Азвр Маї Маї 165 170 175
З5
Рпе Ріє Сту Сип Агу Тгр Спу Рпе Зег Тиг ТАиг Тнг Маї Авп Авп Туг 180 185 190
Туг Авп Авр І єи ТНг Сім СпПу Пе Зег ТНг Туг Тиг Авр Туг Аа Маї 195 200 205
Аг Тгр Туг Авп ТНг Су І еи Сім Агу Маї Тгтр Спу Рго Авр 5ег Аг9 210 215 220
Азр Тр Маї Агу Туг Авп Сп Рнеє Ага Ага Си І еи ТАг І еи Тнг Маї 225 230 235 240
Ї еи Ар Іе Маї Аїа І єи Рне 5ег Авп Туг Азр Зег Агу Аг Туг Рго 245 250 255
Пе Агоу Тнг Маї Зег Сп Гей Тнг Ага Сти Пе Туг ТАг Авзп Рго Маї 260 265 270 60
Ї еи Спи Авп Ріє Авр Сіу Зег Рне Аго Стпу Меї Аїа Сп Аго Пе Спи 275 280 285
Сіп Авп Пе Аго Сп Рго Нів Геи Меї Ар Іе ГІ еи Авп Зег Пе ТНг 290 295 00
Пе Туг Тиг Авр Маї Ні Агу Сіпу Рне Авп Туг Тр Зег Сіу Нів Сип 305 з10 315 320
Пе Тниг Аа 5ег Рго Маї Спу Рпе Зег Су Рго См Ре Аа Рне Рго 325 330 335
Ї еи Рне Су Авп Аїа ау Авзп Аа Аїа Рго Рго Маї І єи Маї Зег І еи 340 345 350
Тиг ау Геи Спу Пе Ре Аг Тнг ГГ еи 5ег Зег Рго Геи Туг Аг Ага 355 360 365
Пе Пе Геи Спу Зег Сіу Рго Азп Авп ап Сім Геи РНе Маї І єи А5р 370 375 380
Сіу Тиг Спи Рне Зег Рнеє Аїа 5ег Геи ТАиг Тниг Авп Гей Рго 5ег ТНг 0) 385 390 395 400
Пе Туг Ага Сп Ага СПУ Тиг Маї Авр 5ег ГГ еи Авр Ма! Іе Рго Рго 405 до 415
З5
Сіп Авр Авп 5ег Маї Рго Рго Ага Аа Сіу РНе 5ег Нів Аго І еи 5ег 420 425 430
Ніз Ма! Тнг Меї І єи 5ег Сіп Аа Аа Сіу Аа Маї Туг ТНг І єи Ат 435 440 445
Аа Рго Тниг РНе 5ег Тр Сп Ні Агу Зег Аіа Спи Ріє Авп Авп Їе 450 455 460
Пе Рго Зег Зег СіІп Пе Тиг Сп Пе Рго Геи ТАг Гуз Зег ТАг Авп 465 470 475 480
Ї ви Спу Зег Спу Тнг Зег Маї Ма! Гуз Спу Рго Спу Рпе Тиг Спу Спу 485 490 495
Азр Іе Гей Аг Аг Тпг Зег Рго Сіу Сіп Пе Зег ТНг ГГ еи Агу Маї 500 505 510 60
Азп Пе Тнг Айа Рго І єи 5ег Сіп Аго Туг Агу Маї Аго Пе Аг Туг 515 520 525
Аа 5ег Тиг Тиг Авп І єи Сп Ре Ні ТНг Зег Пе Азр Спу Агоу Рго 530 535 540
Пе Авп Сп СПу Авп Рне 5ег Аа Тиг Меї Зег 5ег СПу 5ег Авп І ви 545 550 555 560
Сіп Зег Сіу Зег Ре Агу ТНг Маї Спу Рпе Тнг ТАг Рго Ре Авзп Ре 565 570 575 зЗег А5п Сіу бег Зег Ма! Рне Тнг І єи 5ег Аа Ніз Ма! Рне Авп 5ег 580 585 590
Сіу Азп Ст Маї Туг Пе Азр Ага Іе Сім Рпє Маї Рго Аа Сіи Маї 595 600 605
Тиг РНе Сім Аа Сти Туг Авр Г еи Сім Агу Аїа Сп ГІ уз Аа Маї Авп 610 615 620 сій Гей Ре Тнг Зег Зег Авп Сп Пе СПУ Геи Гуз ТАг Авр Маї ТнНг 625 630 635 640
Азр Туг Ні Пе Ар Сіп Маї Зег Авп І єи Ма! Спи Суз І ви Зег А5р 645 650 655
З5
Сім Рне Суз І єи Авр Спи Гуз Сп Сі Ї еи бег Спи І уз Ма! Гуз Нів 660 665 670
Аа Гуз Ага Геи 5ег Авр Си Агу Авп І ви Гей Сп Авр Рго Авзп Рпе 675 680 685
Аго Сту Пе Авп Ага ап ГІ еи Авр Аго Су Тгр Аго Спу 5ег Тиг Авр 690 695 700
Пе Тиг Пе Сіп СПу Спу Авр Азр Маї РНе Гуз Спи Авп Туг Маї ТНг 705 710 715 720
Ї еи Гєи Спу Тиг Ре Авр Сіи Суз Туг Рго ТАг ТугІ еи Туг Сп Гув 725 730 735
Пе Ар Сім 5ег Гуз І еи Гуз Аїа Туг ТНиг Агу Туг Сіп І еи Агу Спіу 740 745 750 60
Туг Пе Сіи Авр 5ег Сп Авр І єи Ст Пе Туг І еи Пе Аго Туг Авп 755 760 765
Ага Гуз Ніз Сім ТАг Маї Авп Маї Рго Спу Тк Спу зег ГГ еи Тгр Рго 770 775 780
Ї еи Бег АІа Сп 5ег Рго Пе Спу Гуз Сув Спіу Сіши Рго Азп Агу Суз 785 790 795 800
Аа Рго Ніз І еи Спи Тгр Авп Рго Авр І ей Авр Суз бег Суз Ага Авр 805 810 815 сіу Спи Гуз Суз Аїа Ні Ні Зег Нів Ні РНе 5ег І еи Ар Пе Авр 820 825 830 маї Спу Суз Тиг Азр Геи Авп Си Азр І еи Су Маї Тгр Ма! Пе Рпе 835 840 845
Гуз Пе Гуз Тнг Сп Ар ау Нів Аа Ага ГІ еи Спу Авп ГГ еи Си Ре 850 855 860
Їеи Спи Сім Гуз Рго І еи Маї Спу Ст Аа І єм Аа Агу Маї Гуз Пе 865 870 875 880
Аа Спи Гуз Гуз Тр Ага Авр Гуз Аго Сім Гуз Геи Сім Ттр Сі ТАг 885 890 895
З5
Азп ЇІе Маї Тут Гуз Сім Аа Гуз Спи 5ег Маї Авр Аа Геи Ре Маї 900 905 910
Азп Зег Сп Туг Авр Сп І ви Сіп Аа Азр Тпг Авзп Їе Аа Меї Пе 915 920 925
Ні Аа Аа Азр І уз Агу Маї Нів 5ег Пе Ага Сіи Аа Туг Геи Рго 930 935 940
СІши Г еи Бег Маї Пе Рго Сіу Маї Авп Аїйа Аа Пе Рне Си Сім Гей 945 950 955 960
Сім Спу Аг Пе Рпе ТНг Аа Рне 5ег ГГ еи Туг Азр Аа Агу Авзп Маї 965 970 975
Пе Гуз Азп Спу Авр Рпє Азп Авп ау І єи Зег Суз Тр Азп Маї І уз 980 985 990 60
Сту Ні Маї Азр Маї Спи Спи Сіп Авп Авзп Сп Ага бег Маї І и Маї 995 1000 1005 ма! Рго Сім Тгр Сіи Аа Сіи Маї Зег СіІп Спи Ма! Ага Ма! Суз 1010 1015 1020
Рго Спу Аго Сіу Туг Пе Гей Агу Маї Тниг Аа Туг Гуз Сіи СПУ 1025 1030 1035
Тугачту ами Спу Суз Ма! Тиг Пе Ні Спи Пе Сі Авп Авп Тйг 1040 1045 1050
Авр Си Гей Гуз Рне 5ег Азп Суз Ма!Ї Спи СМи Сіи Пе Ту 5ег 1055 1060 1065
Азп АзпоТНг Маї Тит Сувз Азп Авр Туг Тпг Маї Азп. Сп Сім Спи 1070 1075 1080
Тугачу ау Аа Туг Тиг бег Агу Авп Агу Спу Туг. Авп Си Аа 1085 1090 1095
Рго 5ег Маї Рго Аа Авр Туг Аа 5ег Ма! Тут Сім Спи Гув Зег 1100 1105 1110
Туг Тиг. Авр ау Агу Агу Сім Авп Рго Суз Спи Рпе Авп Агу Сіу 1115 1120 1125
З5
Туг Агу Азр Туг ТНг Рго Геи Рго Маї Спу Туг Ма! Тнг Гув Спи 1130 1135 1140
Ї ви Спи. Туг Ріє Рго Сіи Тиг Азр Гуз Маї Тр Пе Сім Пе Спу 1145 1150 1155
Сі Тиг Спи с1іу ТАг Ріє Пе Маї Ар 5ег Маї Спи Гец ЇЇ еи Гей 1160 1165 1170
Ме Сім Спи 1175 «2105» ЗЗ3 «2115 1176 «212» Білок -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005» ЗЗ3 (510) Меї Сім Пе Маї Авп Авп Сп Авп Сп Суз Маї Рго Туг Азп Суз І еи
1 5 10 15
Авп Азп Рго Сім Пе См Пе Її еи СТ СТу Спу Агу Пе бег Ма! Су 20 25 0)
Азп Тпг Рго Іе Авр Іе 5ег І ви 5ег І еи ТАг Сп Рне І єи ГГ еи 5ег 35 40 45
Сім Ре Маї Рго Сіу Аа Спу Рне Маї І еи Спу І еи Пе Авр ГГ еи Пе 50 55 60
Тр Спу РНе Маї сіу Рго Зег Сп Ттр Авр Аа РнНе Г еи Аа Сіп Маї 65 70 75 80 сій Сп Гей Пе Авп Сіп Ага Іе Аїа Сім Аа Маї Ага Авп ТАг Аа 85 90 95
Пе Сп Сти Геи СПи СТу Меї Аа Ага Маї Туг Агу Тниг Туг Аіа ТНг 100 105 110
Аа Рне Аа Сі Тгр Си ГГ уз Аа Рго Азр Авр Рго Сім І ей Агу Сім 115 120 125
Зо
Аа Гей Агу Тпг Сп Ріє Тнг Аа Тиг Сіи Тег Тук Пе Зег СПу Ага 130 135 140
З5
Пе Бег Маї Геи Гуз Пе Сп Тиг РНе Сім Маї Сіп І еи Геи 5ег Маї 145 150 155 160
Рпє Аїа Сіп Аїа Айа Авп ГГ еи Нів Геи з5ег І еи І еи Агу Авр Маї Маї 165 170 175
Рпе Ріє Сту Сип Агу Тгр Спу Рпе Зег ТНг Тк Тнг Маї Авп Авп Туг 180 185 190
Туг Авп Авр І єи ТНг Сім СпПу Пе Зег ТНг Туг Тнг Авр Туг Аа Маї 195 200 205
Ага Тгр Туг Авп ТНг Су І еи Сім Ага Маї Тгр Сіпу Рго Авр 5ег Ага 210 215 220
Азр Тр Маї Агу Туг Авп Сп РНе Аг Ага Си І єи ТАг ГГ еи Тнг Маї 225 230 235 240 (510) Ї еи Азр Іе Маї Аа І єи РНе 5ег Авп Туг Авр 5ег Аг Ага Туг Рго
245 250 255
Пе Агоу Тнг Маї Зег Сп Гей Тнг Ага Сти Пе Туг ТАг Авп Рго Маї 260 265 270
Ї ви Спи Авп Ріє Авр ау бег Рне Аго Спу Меї Ага ап Аго Пе Спи 275 280 285
Сіп Авп Пе Аго Сп Рго Нів Геи Меї Авр Пе Геи Авп Зег Пе ТНг 290 295 00
Пе Туг ТНг Азр Маї Ні Агу Сіпу Ріє Авзп Туг Тгтр Зег Сіу Нів Сип 305 з10 315 320
Пе Тниг Аа 5ег Рго Маї Спу Рпе Зег Су Рго См Ре Аа Рне Рго 325 330 335
Ї еи Рне Су Авп Аїа ау Авзп Аа Аїа Рго Рго Маї І єи Маї Зег І еи 340 345 350
Тиг ау Геи Спу Пе Ре Аг Тнг ГГ еи 5ег Зег Рго Геи Туг Аг Ага 355 360 365
Зо
Пе Пе Геи Спу Зег Сіу Рго Азп Авп ап Сім Геи РНе Маї І єи А5р 370 375 380
З5
Спіу Тиг Сім Рне 5ег Рнеє Аїа 5ег І єи Тиг ТНг Авп І єи Рго 5ег ТНг 385 390 395 400
Пе Туг Ага Сп Ага СПУ Тиг Маї Авр 5ег ГГ еи Авр Ма! Іе Рго Рго 405 до 415
Сіп Авр Авп 5ег Маї Рго Рго Ага Аа Сіу РНе 5ег Нів Аго І еи 5ег 420 425 430
Ні Ма! Тнг Меї І єи Зег ап Аа Аа Сту Аа Маї Тут Тиг Гей Агд 435 440 445
Аа Рго Тниг РНе 5ег Тр Сп Ні Агу Зег Аіа Спи Ріє Авп Авп Їе 450 455 460
Пе Рго Зег Зег СіІп Пе Тиг Сп Пе Рго Геи ТАг Гуз Зег ТАг Авп 465 470 475 480 бо Ї ви Спу Зег Спу Тнг Зег Маї Ма! Гуз Спу Рго Спу Рпе Тиг Спу Спу
485 490 495
Азр Іе Гей Аг Аг Тпг Зег Рго Сіу Сіп Пе Зег ТНг ГГ еи Агу Маї 500 505 510
Азп Пе Тнг Айа Рго І єи 5ег Сіп Аго Туг Агу Маї Аго Пе Аг Туг 515 520 525
Аа 5ег Тит ТНиг Авп І єи Сп РНе Нів Тнг 5ег Пе Авр Сіу Агу Рго 530 535 540
Пе Авп Сп СПу Авп Рне 5ег Аа Тиг Меї Зег 5ег СПу 5ег Авп І ви 545 550 555 560
Сіп Зег Сіу Зег Ре Агу ТНг Маї Спу Рпе Тнг ТАг Рго Ре Авзп Ре 565 570 575 зЗег А5п Сіу бег Зег Ма! Рне Тнг І єи 5ег Аа Ніз Ма! Рне Авп 5ег 580 585 590
Сіу Азп Ст Маї Туг Пе Азр Ага Іе Сім Рпє Маї Рго Аа Сіи Маї 595 600 605
Зо
Тиг Рне Сім Аа Спи Туг Авр Г еи Сім Агу Аїа Сп ГГ уз АЇа Маї Авп 610 615 620
З5 сій Гей Ре Тнг Зег Зег Авп Сп Пе СПУ Геи Гуз ТАг Авр Маї Тиг 625 630 635 640
Азр Туг Ні Пе Ар Сіп Маї Зег Авп І єи Ма! Спи Суз І еи Зег Авр 645 650 655
Сім Рне Суз І єи Авр Спи Гуз Сп Сі Ї еи бег Си І ув Маї Гуз Нів 660 665 670
Аа Гуз Ага Геи 5ег Авр Си Агу Авп І ви Ге Сп Авр Рго Авп Рпе 675 680 685
Аго сту Пе Авп Ага ап ГІ еи Авр Аго Сіу Тгтр Агу Спу бег Тит Ар 690 695 700
Пе Тиг Пе Сіп СПу Спу Авр Авр Маї Рне Гуз Сіи Авп Туг Маї ТНг 705 710 715 720 (510) Ї еи Гєи Спу Тиг Ре Авр Сіи Суз Туг Рго ТНг Туг І єи Туг Сп Гув
725 730 735
Пе Ар Сім 5ег Гуз І еи Гуз Аїа Туг ТНг Аго Туг Сип Гей Агу Сіу 740 745 750
Туг Пе Сім Авр 5ег Сп Авр І еи Сім Пе Туг І еи Пе Агу Туг Авп 755 760 765
Ага Гуз Ніз Сім ТАг Маї Авп Маї Рго Спу Тиг Спу зег І еи Тр Рго 770 775 780
Ї еи Бег АІа Сп 5ег Рго Пе Спу Гуз Сувз Сіу Сім Рго Азп Агу Суз 785 790 795 800
Аа Рго Нів І єи Спи Тгр Авп Рго Азвр І єи Авр Суз бег Суз Ага Авр 805 810 815 сіу Спи Гуз Суз Аїа Ні Ні Зег Нів Ні РНе 5ег І еи Авр Пе Ав5р 820 825 830
Маї спу Суз Тиг Азр Геи Авп Си Авр І єи Су Маї Тгр Ма! Пе Рпе 835 840 845
Зо
Гуз Пе Гуз Тнг Сп Ар ау Нів Аа Ага ГІ еи Спу Авп ГГ еи Си Ре 850 855 860
З5
Їеи Спи Сім Гуз Рго І еи Маї Спу Ст Аа І єм Аа Агу Маї Гуз Пе 865 870 875 880
Аа Спи Гуз Гуз Тр Ага Авр Гуз Аго Сім Гуз Геи Сім Ттр Сі ТАг 885 890 895
Азп ЇІе Маї Тут Гуз Сім Аа Гуз Спи 5ег Маї Авр Аа Геи Ре Маї 900 905 910
Азп Зег Сп Туг Авр Сп І ви Сіп Аа Азр Тпг Авзп Їе Аа Меї Пе 915 920 925
Ні Аа Аа Азр І уз Агу Маї Нів 5ег Пе Ага Сіи Аа Туг Геи Рго 930 935 940
СІши Г еи Бег Маї Пе Рго Сіу Маї Авп Аїйа Аа Пе Рне Си Сім Гей 945 950 955 960 (510) Сім Спу Аг Пе Рпе ТНг Аа Рне 5ег ГГ еи Туг Азр Аа Агу Авзп Маї
965 970 975
Пе Гуз Азп Спу Авр Рпє Азп Авп ау І єи Зег Суз Тр Азп Маї І уз 980 985 990
Сту Ні Маї Азр Маї Спи Спи Сіп Авп Авзп Сп Ага бег Маї І и Маї 995 1000 1005 ма! Рго Сім Тгр Сіи Аа Сіи Маї Зег СіІп Спи Ма! Ага Ма! Суз 1010 1015 1020
Рго Спу Аго Сіу Туг Пе Гей Агу Маї Тниг Аа Туг Гуз Сіи СПУ 1025 1030 1035
Тугапу Спи Спіу Суз Ма! Тиг Пе Ні Спи Пе Сім Авп Авп ТНг 1040 1045 1050
Авр Си Гей Гуз Рне 5ег Азп Суз Ма!Ї Спи СМи Сіи Пе Ту 5ег 1055 1060 1065
Азп АзпоТНг Маї Тит Сувз Азп Авр Туг Тпг Маї Азп. Сп Сім Спи 1070 1075 1080
Зо
Тугачу ау Аа Туг Тиг бег Агу Авп Агу Спу Туг. Авп Си Аа 1085 1090 1095
Рго 5ег Маї Рго Аа Авр Туг Аа 5ег Ма! Тут Сім Спи Гув Зег 1100 1105 1110
Туг Тиг. Авр ау Агу Агу Сім Авп Рго Суз Спи Рпе Авп Агу Сіу 1115 1120 1125
Туг Агу Азр Туг ТНг Рго Геи Рго Маї Спу Туг Ма! Тнг Гув Спи 1130 1135 1140
Ї ви Спи. Туг Ріє Рго Сіи Тиг Азр Гуз Маї Тр Пе Сім Пе Спу 1145 1150 1155
Сі Тиг Спи с1іу ТАг Ріє Пе Маї Ар 5ег Маї Спи Гец ЇЇ еи Гей 1160 1165 1170
Ме Сім Спи 1175 бо «2105» 34
«2115 715 «212» Білок -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005» 34
Меї Гуз бег І ув Азп Сп Азп Меї Нів Сіп 5ег І єи бЗег Азп Азп Аїа 1 5 10 15
ТНг Маї Азр Гуз Азп РНе Тнг Сіпу бег І єи Спи Авп Азп ТНг Авзп ТАг 20 25 0) сій Гей Сп Авп Ріє Авп Ні Спи Спу Пе Спи Рго Рне Маї 5ег Маї 35 40 45 зег ТП Пе Сіп Ти Спу Пе Су Пе Аїа Стпу Гуз Пе Геи Сіу Авп 50 55 60
Ї ви Спу Маї Рго РНе Аїа Сіу Сіп Маї Аа 5ег І еи Туг Зег РНе Пе 65 70 75 80
Ї еєи Сіу Сім І єи Тер Рго Гуз Стпу Гуз Зег СіІп Ттр Спи Пе Рне Меї 85 90 95
Зо
Сім Ніз Маї Спи См Ге Пе Авп ап Гуз Пе Зег ТНг Туг Аіа Агд 100 105 110
Авзп Гуз Аа І еи Аа Азр І єи Гуз Сіу І еи Спіу Авр Аа Гей Аїйа Маї 115 120 125
Туг Ніз Спи Зег І еи Спи Бег Тгр Пе Гуз Авп Ага Авп Авзп ТНг Ага 130 135 140
Тпиг Агу 5ег Маї Ма! Гуз Зег Сп Тут Пе ТНг Гей Спи ГГ еи Меї Рпе 145 150 155 160 маї Сп 5ег Гей Рго 5ег РНе Аїа Маї 5ег Спу Спи Спи Маї Рго І еи 165 170 175
Ї еи Рго Іе Туг Аа Сіп Айа Аїа Авп Г єи Ніз І еи І єи ГГ еи І єи Ага 180 185 190
Азр Аа 5ег Пе Рпе Сіу Гуз Спи Тгтр Спу Геи Зег Авр Зег Спи Пе 195 200 205 зЗег ТНг Рпеє Туг Авп Ага ап Маї Спи Агу Тиг Зег Авр Туг Зег А5р бо 210 215 220
Ні Суз Тпг Гуз Тгтр Рпе Ар ТАг Сту І еи Авп Аг ГГ еи Гуз Спіу Зег 225 230 235 240
Азп Аїа Сім Пе Тгтр Ма! Гуз Туг Авп Сп РНе Агу Ага Ар Меї ТНг 245 250 255
Ї еи Меї Маї! І еи Авр ГГ еи Маї Аа І єи Рне Сп 5ег Туг Авр ТНиг Нів 260 265 270
Меї Туг Рго Пе Гуз Тнг Тниг Аїа Сп І єи Тиг Ага Сім Маї Туг ТНг 275 280 285
Азп Аїа Пе Спу Тнг Маї Ні Рго Нів Рго Зег Рпе ТНиг Зег ТНг ТНг 290 295 00
Тер Туг Авп Авп Авп Аа Рго 5ег РНе 5ег Аїа Іе Спи Аа Аїа Маї 305 з10 315 320
Пе Ага 5ег Рго Ніз І еи І єи А5р Ре Геи Спи Сіп Ма! ТНиг Пе Туг 325 330 335
Зо зегі ви Геи Зег Агу Тр Зег Азп Тпг Сп Туг Меї Азп Меї Тгтр Спу 340 345 350
Сіу Ні Гуз Г еи Спи Ре Ага ТАг Пе Спу Сіу Ти ГГ еи Авп ТНг Зег 355 360 365
Тиг ап Спу Зег ТНг Авп ТНг 5ег Пе Авп Рго Маї Тнг Геи Рго Рпе 370 375 380
Тпиг Зег Агу Авр Пе Туг Агу Тиг Спи Зег І єи Аа Сту І ви Авп Гей 385 390 395 400
Рпє ГГ еи Тиг Сп Рго Маї Авп Сіу Маї Рго Ага Маї Ар Рне Ні Ттр 405 до 415
Гуз РНе Маї Тнг Ні Рго Іе Аа Зег Авр Авзп Ре Туг Туг Рго Силу 420 425 430
Туг АІа Стпу Пе Спу Тк Сп Ї єи Сп Авр 5ег Сіи Авп Спи Гей Рго 435 440 445
Рго Спи Тик Тнг Слпу Сп Рго Авп Туг Спи Зег Туг 5ег Ніз Агу ГІ єи бо 450 455 460 зег Нів Пе Спу Геи Пе 5ег Аа 5ег Ніз Ма! Гуз Аа І єи Ма! Туг 465 470 475 480 зЗег Пр ТНг Ні Ага 5ег Аа Азр Аго Тиг Авп Тпг Пе Нів Зег Азр 485 490 495 зег Пе ТАг Сп Пе Рго ГІ єм Маї Гуз Айа Нів ТАг ГГ еи Сіп Зег Спу 500 505 510
Тпиг Тиг Маї Ма! Гуз Спу Рго Спіу Рпе Тиг Спу Спу Азр Пе Ге Ага 515 520 525
Агу Тиг Зег Спу Спу Рго Рне Аїа РНе 5ег Авп Маї Авп І єи Авр Тр 530 535 540
Ап Гей Зег Сп Аго Туг Агу Аа Ага Іе Ага Туг Аіа Зег Тит ТНг 545 550 555 560
Азп Гей Аг Меї Туг Ма! Тнг Пе Аа Спіу Сім Агу Пе РНе Аїа Су 565 570 575
Зо
Сіп Ре Авп Гуз Тиг Меї Азп Тиг Спу Авр Рго І єи Тиг РНе Сп Зег 580 585 590
Рпеє 5ег Туг Ага ТАг Пе Ар ТиАг Аа РНне Тиг Рне Рго Тнг Гуз Аа 595 (100) 605 зЗег ЗегІ еи Тниг Ма! Сіу Аа Ар ТНг Ре 5ег 5ег СПу Авп Сіи Маї 610 615 620
Туг Маї Азр Агу РНе Си І єи Пе Рго Маї ТАг Аа Тнг І ви Си Аа 625 630 635 640 маї Тиг Азвр І еи Сім Аго Аїа Сп Гуз Аа Маї Ні Спи Г еи Рпе ТНг 645 650 655 зЗег ТНг Азп Рго Спу Спу І еи Гуз Тиг Авр Маї Аа Гуз Ар Ні Туг 660 665 670
Тпиг Авп ТАг Пе Зег Гуз 5ег Ма! Сіп Зег Ма! Ре Агу Суз Ага Сувз 675 680 685 зег Си Ага Тнг Ага Іе Туг Агу Тгр Стпу Туг Рго Зег Гуз Гуз Си бо 690 695 700
Туг Ттр ТупПе Ттр Стпу Туг Тк Зег Гуз Туг 705 710 715 «2105» 35 «2115» 1094 «212» Білок «213» Васійш5 ІпПигіпдіепвів «4005» 35
Меї Рне І ви Спи Сип Пе СПи Сп Гей Пе Авр Сп Аго Пе Спи Тйг 1 5 10 15 маї Сім Ага Авп Аг Аїа Іе Сп Тиг І еи Пе Сіу Геи 5ег Авп 5ег 0) 20
Туг Авр Маї Тут Пе Сі Аїа І єи Гуз Спи Тр Сім Авп Авп Рго Авр 25
Азп Зег Аа бег Сп Сім Аго Маї Агу Авп Агу Ре Аг ТНг Тит Ар 60
Коо) Азр Аа І єи Пе Тниг Спу Пе Рго Г еи І єи Аа Пе Рго Азп Рпе Си 65 70 75 80
Пе Аа ТНг І єи Зег Ма! Туг Маї Сіп Аа Аа Авп Гей Нів Г еи Зег 35 85 90 95
Ї ей Г єи Агу Авр Аїйа Маї Рне РНе Сіу Сім Ага Тгтр Су І ви Тнг Сп 100 105 110 40
Ме Азп Маї Ар Ар І єи Туг Агу Ага І ви Тпг Азп Авп Пе Агу Авп 115 120 125 45
Туг Зег Ар Ні Суз Аа Ага Тр Туг Азп Спи Спу Геи Авр Авп Іе 130 135 140 50 Зег Спу І єи Зег Агу 5ег Пе Азп РНе Сп Агу Сім Маї ТНг Пе 5ег 145 150 155 160
Ма! І еи Ар Пе Маї Аа І ви Ре Рго Авп Туг Азр Іе Ага Тиг Туг 55 165 170 175
Рго Пе Зег Тк Тиг 5ег Сп Геи ТАг Агу Спи Пе Рпе Тнг Зег Рго 180 185 190 60
Пе Маї Маї Рго Авзп Ар Ре зег Маї Аа Туг Спи Спу Ма! Агу Аго 195 200 205
Аа Рго Нів І єи Ре Спи Ре Г єи Сім Гуз І еи Ма! Пе Туг ТАг Спу 210 215 220
Азр Агу 5ег Сіу Пе Ага Ні Тгр Аа Стпу Ні Спи Пе ТНг Зег Аг9 225 230 235 240
Аг Тиг Авр Зег Туг Ніз Спу Пе Пе Аго Туг Рго Геи Туг Спу ТНг 245 250 255
Аа Аа Авп Аа Сім Зег Рго Туг ТНг І єи Аа І єи Сип Рго Зег Си 260 265 270 зег Пе Туг Агу Тиг ГГ еи Зег Сім Рго Пе Рпе 5ег Сп Тиг Спіу Спу 275 280 285
І еи Зег Рго Ні Агоу Аг Ага Маї Ма! Сіи Спу Ма! Спи Ре 5ег Пе 290 295 00
Коо) маї Авп Авп Авп Маї Авп Рго 5ег Зег РНе Маї Туг Агу Ага Гуз СпПу 305 з10 315 320 зег І ви Азр 5ег Рпе Тпг Сім Гей Рго Рго Сіи Авр Сіи Зег Ма! Рго 325 330 335
Рго Туг Пе Спу Туг Зег Ні Сіп Геи Суз Ні Ма! Спу Рне Су Ага 340 345 350
Тпиг Авп Ма! Пе Рпє Спи Рго Зег Авп РНеє Аїа Аго Маї Рго Ма! Рпе 355 360 365 зЗег Пр ТНг Ні Ага 5ег Аа ТНг Рго Тнг Авп ТНг Іе Авр Рго Азр 370 375 380
Ага Пе Тниг ап Пе Рго 5ег Маї Гуз Аа 5ег Зег І еи Агу Авп 5ег 385 390 395 400
Тнг Маї Маї Зег Спу Рго Спу Рпе ТАиг Спіу Спу Азр Пе Маї Агу Меї 405 до 415
Су Аїа Маї Ніз Сип Пе Туг Аа ТНг Авр Геи Зег Меї Авп Маї Ага 420 425 430 60
Рго 5ег Маї Аа І єи 5ег Ага Туг І еи Пе Ага І єи Ага Туг Аа Су 435 440 445
Агоу Счпу Зег Зег Азп Іе Маї Пе Нів Спу Рго Зег Пе Агу РНе Маї 450 455 460 зег І ви Рго Зег Тиг Меї Зег Азп Авр Си Рго ГІ єи Тиг Туг Сп Зег 465 470 475 480
Рпє Аго Туг Аа 5ег Пе Тиг Тнг Рго Пе Тнг Ага Рго Іе Туг Авп 485 490 495
Меї Рне Авт І єи Зег Пе 5ег Ага Пе 5ег СПу Ма! Сіп Авп І єи Рпе 500 505 510
Пе Ар Ага Іе Спи Ре Іе Рго Маї Азр Аа Ап РНе Сім Айїа Спи 515 520 525
Аг9 Азвр І єи Сім Аг Айа Сп ГІ уз Аїа Маї Авп Аа І еи РНе ТАг Зег 530 535 540
Коо) Тпиг Авп Сп Агу Су Гей Гуз Пе Ар Маї Тиг Авр Туг Нів Пе Азр 545 550 555 560
Сп Маї Зег Авп І еи Маї Азр Суз І єи бег Азр Сім Рне Суз І єи Азр 565 570 575
Сім Гуз Ага Сім Гей Зег Спи І уз Зег ГГ уз Нів Аа Гуз Аго І еи 5ег 580 585 590
Азр Сі Агу Авп Гей І ви Сп Авр Гей Авп Ре Гуз Авр Пе Авп Ага 595 600 605
Сіп Рго Спи Ага СПУ Ттр Зег Сіу Зег ТАг Спу Пе ТНг Пе Сп Спу 610 615 620
Сіу Азр Ар Маї Ре Гуз Сім Авп Туг Ма! Тнг І ви Рго Спу Ти Рпе 625 630 635 640
Азр Спи Суз Туг Рго ТАг Туг ГГ еи Туг Сп Гуз Пе Авр Сім Зег Гуз 645 650 655
Ї еи Гуз Аа Туг ТАг Аго Туг Сп І и Ага СПУ Туг Пе Спи Авр Зег 660 665 670 60
Сіп Авр І єи Спи Пе Туг І єи Пе Агу Туг Авп Аїа Гуз Ні Спи ТНг 675 680 685 маї Авп Маї Рго Спу Зег Спу Зег І єи Тр Рго ГІ єи Зег Ма! Сім Бег 690 695 700 зЗег Ма! Спу Гуз Суз Спіу Си Рго Авп Агу Суз Аа 5ег Агу Меї СіІи 705 710 715 720
Тер Авп Рго Азр І єи Азр Суз 5ег Суз Агу Азр Сіу Спи Гуз Суз Аа 725 730 735
Нів Ні 5ег Ні Ні Рне 5ег І єи Авр ІПе Азр Ма! Спу Суз ТНг Ар 740 745 750
Ї ей Авп Си Азвр І єи Сіпу Маї Тр Маї Пе РНе Гуз Пе Гув Тк Сітп 755 760 765
Азр Су Нів Айа Гуз Пе Спу Авп І ви Сім РНе І єи Гуз Спи Гув Гей 770 775 780
Ко) Ї еи Г єи Сіпу Сім Айа І єи Аїа Аг Маї Гуз Гуз Аа Спи Гуз Гуз Ттр 785 790 795 800
Агу Авр Гуз Агу Авр Гуз І еи Спи Ттр Си ТАг Азп Маї Маї Туг Гув 805 810 815
Сім Айа Гуз Спи Зег Маї Авр Аа І єи РНе Маї Авр 5ег Сп Туг Зег 820 825 830
Ага І еи Сп Аа Авр Тиг Авп ЇІе Аа Ме! Пе Ніз Аа Аїйа Азвр ГГ ув 835 840 845
Аг Маї Ніз Ага Іе Ага Сі Аа Туг Геи Рго Си І єи Тиг Маї Пе 850 855 860
Рго Стпу Маї Авп Аа 5ег Пе Рпе Сім Спи Гей Спіи Спіу Агу Пе Рпе 865 870 875 880
Тиг Ада Туг Зег І єи Туг Сіу Аа Ага Авп Маї Пе Гуз Авп Спу Авр 885 890 895
Рпе Авп Авп ау І єи бег Суз Тр Авп Маї Гуз Сіу Ні Маї Спи Маї 900 905 910 60
Сіп Сп Пе Нів Ніз Агу Зег Маї І єи Маї Маї Рго Зег Тр Гу ТНг 915 920 925
Спи Маї Зег Сіп Сіши Маї Суз Ма! Суз Рго Сіу Ага Спіу Тут Пе І ей 930 935 940
Аго Ма! Тниг Ага Туг Гуз Спи Сту Туг Сіу Сіи Спу Авп Маї Тиг Пе 945 950 955 960
Ніз Спи Пе Спи Авзп Авп ТНг Авр Си Гей Гуз Рне Ага Азп Суз Сім 965 970 975 сій си си Маї Тук Рго Авп Авп ТНг Маї Тниг Суз Авп Азвр Туг ТНг 980 985 990 маї Авп Сп Си СПИ Тугі ув Счу Тег Сув Тнг Зег Агу Авп Ага спу 995 1000 1005
Туг Азр Си Зег Туг Сі Зег 5Бег бег Зег Сіи Зег Аа Туг Туг 1010 1015 1020
Коо) Аа бЗег Ма! Туг Сім Сіи Гуз СТу Туг Ти Азр Спу Агу Агу Си 1025 1030 1035
Ав5піІеи Суз Сіи Рпе Авп Агу Сіу Туг СІу Азр Туг ТНг Зег І ей 1040 1045 1050
Рго Тнг Аїа Туг Ма! Тиг Гуз Спи Геи СПи Туг Рне Рго Сім ТНг 1055 1060 1065
Азр Гуз Маї Тр Пе Сім Пе Спу СПи Тиг Си Спу Аїа РНе Іе 1070 1075 1080
Ї еи Азр Зег Ма! Спи Геи Гей Гей Меї Спи Спи 1085 1090 «2105» 36 «2115 1169 «212» Білок -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005 36
Меї Спи Пе Авп Авп ап Авп Сп Суз Маї Рго Туг Авп Суз І єи Авп 1 5 10 15 60
Азп Рго Спи Зег Сім Пе Геи Авп Маї Аа Пе РНе 5ег Зег Сіи Сп 20 25 Зо маї Аїіа Сіш Пе Нів І еи Гуз Пе ТНг Аго ГІ єеи Пе Геи Сім Авп Рпе 35 40 45
Ї еи Рго Сіу Спіу бег РНне Аа Рнє Су Гей Рне Азр І єи Пе Ттр Спу 50 55 бо
Пе Рпе Авп Сти Авр Сп Тр 5ег Аа Ре І єи Аг Сіп Ма! Сіи Спи 65 70 75 80
Ї ем Пе Авп ап Ага Пе Тниг Спи Ре Аїа Аго Сіу Сіп Аа Пе Сп 85 90 95
Ага ГІ еи Ма! Спу Ріє Сту Аго Зег Туг Авр Сім Туг Пе Г еи Аа Гей 100 105 110
Гуз Спи Тр Сім Авп Авр Рго Авр Авп Рго Аїа 5ег Гуз Спи Ага Маї 115 120 125
Аг Тиг Агу Ріє Аго Тпг Тнг Авр Авр Аа Ге І єи Тнг Стпу Маї Рго 0) 130 135 140
Ї еи Меї Аа Пе Рго Сіу Рпє Си І єи Аа ТиАг І єи 5ег Маї Туг Аа 145 150 155 160
З5
Сіп бег Аа Авп І еи Ніз І еи Аа І ей Гей Ага Азр Аїйа Ма! Рне Ре 165 170 175 сСіу Спи Агу Тгтр Су І еи ТАг Сп ТАг Авп Пе Азп Авр Гей Туг Зег 180 185 190
Ага ГГ еи Гуз Авп з5ег Пе Аго Авр Туг Тиг Авп Ні Суз Маї Агу Рпе 195 200 205
Туг Авп Пе Сіу І еи СПу Авп ГГ еи Авп Маї Пе Агу Рго Сім Туг Туг 210 215 220
Агу РНе Сп Аг Сім І еи Тнг Пе 5ег Ма! І єи Авр І еи Маї Аа І ви 225 230 235 240
Рпеє Рго Авзп Туг Азвр Іе Аго Тниг Туг Рго Пе Рго ТНг Гуз 5ег Сп 245 250 255 60
Геи ТНиг Аго Си Пе Туг Тиг Авр Рго Пе Пе Зег Рго Сіу Аа Сп 260 265 270
Аа Спу Туг Тиг Геи Сп Авр Маї І еи Агу Сім Рго Ніз І єи Меї Азр 275 280 285
Рпє ГІ еи Авп Ага Г єи Пе Пе Туг ТАиг Спу Спи Ту Агу Спу Пе Ага 290 295 00
Ні Тгр Аа Сту Ніз Спи Маї Спи Зег 5ег Агу Тиг Спу Меї Меї ТнНг 305 з10 315 320
Азп Пе Ага РНе Рго ГГ еи Туг Спу ТНг Аа Аа Тнг Аа Спи Рго ТНг 325 330 335
Агу РНе Іе Тнг Рго Зег Тит Рне Рго Сту Геи Авп І єи РНе Туг Аг9 340 345 350
Тиг Геи Зег Аїа Рго Пе Рпє Агу Авр Сі Рго Сіу Аа Авп Пе ІПе 355 360 365
Пе Аго Туг Ага Тнг 5ег І еи Ма! Спи Спу Ма! Спу РНе Пе Сіп Рго 370 375 380
Авп Авп Стпу Сім Стп Гей Туг Агу Маї Аг Стпу ТАг Ї еи Авр 5егі ей 385 390 395 400
З5
Ар Сп Гей Рго І ви Спи Сіу Спи бег Зег І єи ТНиг Сім Туг Зег Нів 405 а410 415
Аго І єи Суз Ні Маї Ага РНе Аїа Сп 5ег ГІ еи Агу Авп Аа Спи Рго 420 425 430
Ї еи Азр Туг Аа Аго Маї Рго Меї Рне 5ег Тр ТНиг Нів Агу 5ег Аа 435 440 445
Тиг Рго Тнг Авп ТАг Пе Авр Рго Авр Маї Пе Тиг Сп Пе Рго ГІ єи 450 455 460 маї Гуз Аа РНе Авт І єи Ні 5ег Сіу Аа Тнг Пе Ма! Гуз Спу Рго 465 470 475 480
Сіу Рне Тиг Спу Спу Авр Іе ГГ еи Аго Аго Тпг Авзп Маї Сіу Зег Рне 485 490 495 60
Сіу Азр Меї Ага Маї Авзп Іе Тнг Айа Рго І єи Зег Сп Аго Туг Ага 500 505 510
Маї Аг Іе Ага Туг Аа 5ег Тиг ТНг Авр І єи Сп Рпє Туг ТАг Авп 515 520 525
Пе Авп сту ТАг ТАг Пе Авп Пе СПу Авп РНе 5ег Зег ТАИг Меї А5р 530 535 540 зЗег Сіу Авр Авр І єи СіІп Туг Спу Агу РНе Аго Маї Аїіа Спу Ре Тиг 545 550 555 560
Тиг Рго Рпе Тит РНе 5ег Авр Аа Меї Зег Тиг Рпе Тнг Пе Спу Аа 565 570 575
Рпе 5ег РНе Зег Зег Авп Азп Спи Маї Туг Пе Азр Аго Пе Спи Ріе 580 585 590 маї Рго Аа Сіи Маї Тнк Рне Сім Айїа Спи Туг Азр І єи Сім І уз Аа 595 600 605
Сіп Гуз АЇа Маї Авп Аа І єи Ре Тнг 5ег Зег Авп Сп Пе Су І еи 610 615 620
Гуз Тнг Авр Маї Тнг Авр Туг Ніз Пе Авр Гуз Ма! Зег Авп І ви Маї 625 630 635 640
З5
Сім Суз І єи Зег Авр Сім РНе Суз І еи Азр Спи І уз Агу Сім І єи бег 645 650 655
Сі Гуз Маї Гуз Нів Айа І уз Ага І єи Суз Авр Сім Ага Авп І ви Ї еи 660 665 670
Сіп Авр Рго Азп РНе Аго Су Пе Авп Ага Сп Рго Авр Аго Сапу Ттр 675 680 685
Агоу Стпу Зег Тиг Ар Пе ТАг Пе Сип Спіу Спу А5р Авр Маї Ре Гуз 690 695 700
Сі Авп Туг Маї ТАг І еи Рго Спу ТАг Рпе Авр Сіи Суз Туг Рго ТНг 705 710 715 720
ТугГеи Туг ап Гуз Пе Авр Си 5ег Гуз І еи Гуз Аа Туг ТАиг Аг9 725 730 735 60
Туг ам Геи Аг Стпу Туг Пе Спи Авр 5ег Сп Авр І єи Спи Пе Туг 740 745 750
Ї еи Пе Аго Туг Авп Аїа Гуз Ні Сім ТНг Маї Азп Маї Рго Спіу ТНг 755 760 765
Сіу Зег І єи Тгр Рго Геи Зег Аа Сп Зег Рго Пе СПу Гуз Сув Спу 770 775 780
Сім Рго Авп Агу Суз Аа Тнг Ні І ви Сім Тр Авп Рго Авр І єи А5р 785 790 795 800
Сув бег Суз Агу Ар Стпу Спи І ув Суз Аїйа Ні Ні 5ег Нів Ні5 Рпє 805 810 815 зЗег І ей Авр Пе Авр Маї Спу Сув ТНг Авр І єи Азп Спи Авр І еи Су 820 825 830 маї Тр Ма! Пе Ріє Гуз Пе Гуз Тнг ап Ар Су Нів Ага Ага І еи 835 840 845
Спу Авп І еи Сім РНе Гей Си Спи ГГ ув Рго І єи Ма! Спу Сім Аа І єи 850 855 860
Аа Агу Маї Гуз Агу Аа Си Гуз Гуз Ттр Аг Авр Гуз Ага Сі Гув 865 870 875 880
З5
Ї еи Спи І ви Спи ТНг Авп Пе Маї Туг Гуз Сім Аїйа Гуз Гуз Зег Маї 885 890 895
Азр Аа І єи Ріє Маї Авп 5ег Сіп Туг Азр Ага ГГ єи Сп Аа Азр ТНг 900 905 910
Азп Іе Аїа Іе Пе Ні Аа Аїа Азр Гуз Аго Маї Нів Зег Пе Агд 915 920 925
Сім Айа Туг Геи Рго Си І еи Зег Ма! Пе Рго Сіу Маї Авп Айа Аа 930 935 940
Пе Рпе Спи Спи ГГ еи Спи СПу Аго Пе РНе ТАг Аїа Туг Зег І еи Туг 945 950 955 960
Азр Аа Агу Авп Маї Пе Гуз Авп Стпу Авр РНе Авп Авп Су Геи Зег 965 970 975 60
Суз Тр Азп Маї І уз СіІу Ніз Ма! Азр Маї Спи Спи Сп Авп Авп Нів 980 985 990
Агу Зег Маї Геи Маї Маї Рго Сім Тр Сім Аа Сіи Ма! Зег СіІп Спи 995 1000 1005 маї Агу Маї Суз Рго Сіу Агу сСпу Тут Пе Г еи Агу Маї Тнг Аа 1010 1015 1020
ТугГув Спи Спу Туг Сіу Сіи СПу Суз Ма! Тиг Пе Нів Спи Пе 1025 1030 1035 сій Авр Авп ТНг Авр Си Геи Гув Рпе 5ег Азп Сувз Маї Спи Спи 1040 1045 1050
Сіш Ме Туг Рго Авп Азп Тнг Маї Тиг Суз Авп Ар Туг ТАг Аа 1055 1060 1065
Тиг ап спи Сі Туг Стій Сбу ТНг Туг ТАг Зег Агу Авп Агу Спіу 1070 1075 1080
Туг Азр ау Аа Туг Сім 5ег Авп Бег Зег Маї Рго Аїа Авр Туг 1085 1090 1095
Аа бег Аа Туг СІ Сі ув Аа Туг Тиг Азр Сіу Ага Агу Азр 1100 1105 1110
З5
Азп Тиг Суз СПм Зег Ап Ага Спу Туг Сіу Авр Туг Тнг Рго І єи 1115 1120 1125
Рго Аіа Сту Туг Ма! Тит Гуз Спи Геи СП Туг Рне Рго Сім ТНг 1130 1135 1140
Азр Гуз Маї Ттр Пе Спи Пе Спіу Спи Тиг Спи Сіу Тнг РНе Пе 1145 1150 1155 маї Азр з5ег Ма! Сіи ей еи Геи Меї Спи Спи 1160 1165 «2105» 37 «2115 1138 «212» Білок -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005» 37 бо Меї Спи Маї Авп Ні Сіп Авп Сім Суз Маї Рго Туг Авзп Суз ГГ еи ГГ ув
1 5 10 15
Авп Рго І уз Пе Сіи Меї І еи Авр Пе Спи Спу Пе бег Зег Агу Зег 20 25 0)
Ага Сіш Сп Маї Аіа Спи Пе 5ег І єи Спу І єи ТАг Ага Рне І ей Ї ви 35 40 45
Сіи Зег І еи І єи Рго Сіу Аа Зег Рпе Сіу Рпе Спу Геи Рне Авр Іе 50 55 60
Пе Тур Спу Ма! Пе Спу Рго Авр Сіп Тр 5ег Геи Рне ГГ еи Тиг Сп 65 70 75 80
Пе Сім Стій Г еи Пе Авр Сп Ага Пе Сім Аїа Ніз Ма! Агу Авп Сп 85 90 95
Аа Пе 5ег Агу І еи Спи Спу Ї еи Спу Авр 5ег Туг Сіи Маї Тук Пе 100 105 110
Спи Бег І єи Аг Сім Тгр Сі Аа 5бег Рго Авп Авп Сім 5ег І єи Сп 115 120 125
Зо
Сіп Авр Маї Агу Авп Ага РНе 5ег Азп ТНг Авр Авзп Аа ГГ еи Пе ТНг 130 135 140
З5
Аа Іе Рго Пе Гей Агу Спи Сп Сіу Ре Сім Пе Рго Геи Гей ТНг 145 150 155 160 маї Туг Ма! ап Аа Аа Авп Гей Нів І єи 5ег ГГ еи ГГ еи Агу Авр Аа 165 170 175 маї Туг Рпе Сту Сіп Агу Тр Су Геи Авр ТАг Айва Тнг Ма! Авп Авп 180 185 190
Ні Туг Азп Аг І еи Пе Авп І єи Пе Азп ТНг Туг бег Авр Ні Сув 195 200 205
Аа Сіп Тр Рне Авп Аг ау І єи Азр Авп РНе Су Маї Маї Тиг Аа 210 215 220
Аг9 ТугГеи Авр РНе Сп Аг Сім Маї Тнг Пе Зег Ма! І еи Ар Пе 225 230 235 240 бо маї Айа І єи РНе Рго Авп Туг Авр Іе Аго Тиг Туг Рго Пе Сіп ТНг
245 250 255
Ї еи Зег Сп Геи Тнг Ага Сім Пе Туг ТНг Зег Рго Маї Аа Спи Рго 260 265 270
Сіу Аїа 5ег І еи Авп Маї Авр І ви Агу Авп Пе І єи Ага Си Рго Ніб 275 280 285
Ї еи Меї А5р Ре Геи ТНг Ага ГІ єи Ма! Пе Тук Тиг Спцу Ма! Сп Спу 290 295 00
Су Пе Туг Ні Тгр Аа Сту Ні Спи Пе Зег Зег Агу Тиг ТАг Спу 305 з10 315 320
Авп Гей Зег Зег Авп Іе Сіп Ре Рго І ви Туг Су ТАг Зег Аа Ап 325 330 335
Аа Авр Агу Рго РнНе Ав І! єи Аїа Іе Ні Туг Зег Спи ТАг Пе Туг 340 345 350
Аг Тиг ГГ еи Зег Аа Рго Пе Туг бег Ма! Зег Сіу Сіу Пе Зег Рго 355 360 365
Зо
Азп Агу ТНг Ага Аа Маї Спи Спу Ма! Ага РнНе І єи Тнг АЇа Агу Авр 370 375 380
З5
Авп Азп І єи Авп 5ег І єи Рго РнНє І єи Туг Агу Гуз Спи Спіу Зег І ей 385 390 395 400
Азр Зег Рпе Тиг Сім Геи Рго Рго Спи Авр Сім Авп Спи Рго Рго Туг 405 до 415
Пе Сну Туг Зег Ні Аго І єи Суз Нів Аа Ага РнНе Аїа Агу 5ег Зег 420 425 430 маї Ма! І еи Спи Рго Зег Авп Рне Аїа Ага Іе Рго Маї Рне 5ег Ттр 435 440 445
Тиг Ні Агу 5ег Аа Спу Рго Тнг Авп Сім Маї Зег бег Зег Ага Пе 450 455 460
Тпиг сп Пе Рго Тер Маї Гуз Аа Ні ТАг І єи Ар 5ег Спу Аіа Рпе 465 470 475 480 60 ма! Ме Гуз Спу Рго Сіу Рне Тнг Спу Сіу Авр Іе І ви Тнг Ага Ро
485 490 495
Азп Гей Спу ТАг І єи Спу Аа Г еи Ага Маї Тиг Геи ТАиг Спу Сп І є 500 505 510
Рго Сп Тнг Туг Азп Пе Аг Іе Аго Туг Аа 5ег Пе Аа Авп Ага 515 520 525 сСіу Спу Ти ГГ еи Пе РНе 5ег Сп Рго Рго 5ег Туг Спу І еи Тиг Рпе 530 535 540
Рго Гуз Тит Меї Азвр Іе Авр Си Рго І єи Тниг 5ег Ага 5ег РНе Аа 545 550 555 560
Ага Тит Тиг І єи РНе Тнг Рго Іе Тнг Рне Тнг Сіп Аа Сіп Аа Спи 565 570 575
Ї еи Авп Г єи Тпг Пе Сіп Сп сту Ма! Туг Пе Азр Ага Пе Спи Рпе 580 585 590
Пе Рго Маї Авп Аа Тниг Рне Сти Аїа Сіи Туг Авр Геи Спи Агу Аа 595 600 605
Зо
Сіп Гуз Аїа Маї Авп Аа І єи Ре Тнг 5ег Зег Авп Сп І ви Спу Гей 610 615 620
З5
Гуз Тнг Авр Г еи Тнг Ар Туг Нів Пе Ар Сп Маї Зег Авп ГГ еи Маї 625 630 635 640
Ар Суз І єи бег Азр Спи Рпє Суз Пе Авр Спи І уз Агу Сім І єи бег 645 650 655
Сім Гуз Маї Гуз Нів Айа І уз Ага І еи Зег Авр Сім Агу Авп Ге Ї ви 660 665 670
Сіп Авр бег Азп РНе Аго Су Пе Авзп Ага Сп Рго Авр Аго Сапу Ттр 675 680 685
Агоу Стпу Зег Тиг Ар Пе ТАг Пе Сіп Сіу Спу Азп Авр Маї Ре Гуз 690 695 700
Сі Авп Туг Маї ТАг І еи Рго Спу ТАг Рпе Авр Сіи Суз Туг Рго ТНг 705 710 715 720 (510) ТугГеи Туг ап Гуз Пе Авр Си 5ег Гуз Гей Гуз Аа Туг ТАиг Аг9
725 730 735
Туг ап Ге Агу сту Туг Пе Спи Авр 5ег Сп Авр І єи Спи Пе Туг 740 745 750
Ї ем Пе Агу Туг Авп Аїа Гуз Ні Спи ТНг Маї Авзп Маї Рго Спіу ТНг 755 760 765
Сіу Зег І єи Тгр Рго Геи Зег Маї Спи Зег Рго Пе СПу Гуз Сув Спу 770 775 780
Сім Рго Авп Агу Суз Маї Рго Сп І еи Спи Тур Авп 5ег Авп І єи Ав5р 785 790 795 800
Сувз бег Суз Агу Авр Стпу Спи І ув Суз Аїйа Ні Ні 5ег Нів Ніз Рне 805 810 815 зег І ви Азр Іе Ар Маї Сіу Суз ТНАг Авр І єи Ні Авр Авр ГГ еи Спу 820 825 830 маї Тр Ма! Пе Ріє Гуз Пе Гуз Тнг ап Ар Су Нів Аа Агу І єи 835 840 845
Зо
Спу Авп І еи Сім РНе Гей Си Спи ГГ ув Рго І єи Ма! Спу Сім Аа І єи 850 855 860
З5
Аа Агу Маї Гуз Агу Аа Си Гуз Гуз Ттр Агу Авр Гуз Агу Спи ТНг 865 870 875 880
Ї еи Сп І єи Спи ТНг Авп Пе Маї Туг Гуз См Аа Гуз Спи Зег Маї 885 890 895
Азр Аа І єи Ріє Аа Авп 5ег Сіп Туг Авп Ага Геи Сп Аа Авр ТНг 900 905 910
Авп Іе Аа Меї Іе Ні Аа Аа Азр Гуз Агу Маї Ні Ага Іе Аг9 915 920 925
Сім Айа Туг Геи Рго Спи І еи Зег Ма! Пе Рго Стпу Ма! Авп Аа Спу 930 935 940
Пе Рпе Спи Спи Гей Сти СПу Аго Пе РНе ТАг Аа РНе з5ег ГГ еи Туг 945 950 955 960 (510) Азр Аа Агу Авп Маї Пе Гуз Авп 5ег Авр Рпе Авп Авп ау Геи 5ег
965 970 975
Сув Тгтр Азп Маї Гуз Сіпу Ніз Маї Авр Пе Спи Спи Сп Авп Авп Нів 980 985 990
Ага 5ег Ма! І єи Маї Ма! Рго Сім Тгр Си Аа Сіи Ма! Зег СіІп І ув 995 1000 1005 маї Ні Маї Сув Рго Спіу Ага аСпу Туг Пе І єи Агу Маї Тнг Аа 1010 1015 1020
ТугГув Спи Спу Туг Сіу Сіи СПу Суз Ма! Ти Пе Ні Спи Пе 1025 1030 1035
Сім А5р Нів ТНг Авр Сі І єи Гуз Рпе Агу Азп Суз. Спи Спи Ар 1040 1045 1050
Сім Ма! Тук Рго Авп Авп Тниг Агу Тпг Суз Авп Аа Туг Рго Аа 1055 1060 1065
Авзр Сип Спи Сіу Туг Пи сту Аа Суз ТНг Зег Агу Авп Агу Сіу 1070 1075 1080
Зо
Туг Азр Си Маї Туг Спу Абп. ТНг Рго 5ег ГГ еи Рго Аїа Азвр Туг 1085 1090 1095
З5
Аа Рго Іе Туг Спи Спи Авзп Аа Туг Тиг Азр Спу Агу Аг Сіу 1100 1105 1110
Авп Рго Суз Сіи Зег бег Агу Спіу Туг Спу А5р Туг. ТНг Рго ГІ єи 1115 1120 1125
Рго Аіа Спу Туг Си ТАиг Гуз Спи Гей Си 1130 1135 «2105» З8 «2115 719 «212» Білок -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005» З8
Меї Гуз І єи Гуз Авп Рго Авр Гуз Ні Сіп Зег І ви Зег Бег Азп Аа 1 5 10 15
Гуз Маї Азвр Гуз Іе Аа Тниг Авр 5ег І єи Гу Авп Сім ТНиг Авр Пе бо 20 25 0)
сій Гей Гу5 Авзп Меї Авп Авзп Си Авр Туг Геи Агу Меї Зег Сім Нів 35 40 45 сін Зег Пе Авр Рго РНе Маї 5ег Аа 5ег ТАг Пе Сп Ти Спу Пе 50 55 бо
СУ Пе Аїа Сту Гуз Пе Геи Спіу ТНиг Геи Спу Маї Рго Рне Аа Сіу 65 70 75 80
Сп Пе Аїа 5ег І еи Туг Зег РНе Іе Геи Спіу Спи Гей Тр Рго Гув 85 90 95
Спу Гуз Зег Сп Тгр Си Пе Рне Меї Сіи Ні Маї Спи Спи Пе Пе 100 105 110
Азп ап Гуз Пе Геи Тиг Туг Аа Агу Авп І уз Аа І єи 5ег Азвр І єи 115 120 125
Агу Сту Геи Сіпу Авр Аа Геи Аїа Маї Туг Ніз СПми Зег І еи Спи Бег 130 135 140
Зо
Тр Ма! Гуз Авп Агу Авп Авп ТНг Ага Аїа Ага 5ег Маї Ма! Гув Авп 145 150 155 160
Сіп Туг Пе Аа Г еи Спи І еи Меї РНе Маї ап Гуз ГІ еи Рго Зег Рпе 165 170 175
Аа Ма! Зег Сіу Спи Спи Маї Рго Г єи І єи Рго Іе Туг Аа Сіп Аа 180 185 190
Аа Авп І єм Нів І єи І єи І си І еи Агу Авр Аа 5ег Пе РНе Су І ув 195 200 205
Сіи Тер Су Г еи 5ег Аа Зег Спи Пе 5ег Тит РНе Туг Авп Агу Сп 210 215 220 маї Сім Ага Тнг Аго Авр Туг Зег Авр Ні Суз Маї Гуз Тр Туг Авп 225 230 235 240
Тиг ау Геи Авп Авп ГГ еи Агу Сі1у ТАг Авп Аа Гуз 5ег Тгр Маї Ага 245 250 255
Туг Авп СіІп Ре Ага Гуз Авр Меї ТнНг І єи Меї Маї Гей Азр ГГ еи Маї бо 260 265 270
Аа Гей Ре Рго 5ег Туг Авр ТА І єи Маї Туг Рго Пе Гуз Тк ТнНг 275 280 285 зег Сп Гей Тниг Агу Си Маї Туг ТНг Авр Аа Пе Сіу Тиг Ма! Нів 290 295 100)
Рго Бег Сіу Аа Маї Аа 5ег Тиг ТАг Тгр Туг Авп Авп Авп Аїа Рго 305 з10 315 320 зЗег Ре 5ег Тпг Пе Спи Аа Аа Маї Маї Агу Авп Рго Нів Г еи І єи 325 330 335
Азр Ре ГГ еи Сім Сп Ма! Тк Пе Туг Зег І еи Геи 5ег Ага Тр 5ег 340 345 350
Азп Тпиг Сп Туг Меї Азп Меї Тгр Стпу Су Ні Гуз Геи СП Ре Агд 355 360 365
Тиг Пе Спу Спу Тпг Г еи Авп ТНг Зег Тиг Сп Спу Зег ТНг Авп ТНг 370 375 380
Зо зЗег Пе Азп Рго Маї Тнг Геи Рго РНе ТАг Зег Агу Азр Маї Туг Аг 385 390 395 400
ТАг Сім Бег І еи Аа Сіу Гей Авп І еи Ре І єи Тнг Сп Рго Маї Азп 405 до 415
Сіу Маї Рго Агу Маї Авр РНе Ні Тр Гуз Рне Маї Тнг Нів Рго Пе 420 425 430
Аа 5ег А5р Авп РНе Туг Туг Рго Стпу Туг Аа Спу Пе Спу Тк Сп 435 440 445
Ї еи Сп Авр бег Спи Авп Си І єи Рго Рго Спи Тиг ТАг Спу Сп Рго 450 455 460
Азп Туг ами Зег Туг Зег Ніз Ага І єи 5ег Нів Пе Спу Геи Пе Зег 465 470 475 480
Аа 5ег Ні Маї Гуз Аа ГІ еи Маї Туг Зег Тр Тнг Ні Ага 5ег Аа 485 490 495
Азр Агу Тпг Авп ТНг Пе Авп бег Авр 5ег Пе ТНиг Сп Пе Рго Гей бо 500 505 510 маї Гуз Аа Рне Авт І єи Рго 5ег Сіпу АІа 5ег Маї Маї Агд Сіу Рго 515 520 525
Сіу Рне Тиг Спу Спу Авр Іе ГГ еи Аго Аго Тпг Авзп Тиг Спу ТАг Ре 530 535 540
Сіу Азр Іе Аг Маї Авп Пе Авп Рго Рго Рнє Аїа Сп Аго Туг Ага 545 550 555 560
І ей Ага Іе Аго Туг АІа Зег Тит Тниг Авп Геи Сім РНе Нів ТНиг Зег 565 570 575
Пе Авп Су Гуз Аа Пе Авзп Сп Спу Авп Ре 5ег Аа Тит Меї Авп 580 585 590
Аг Спу Сім Авр Геи Азвр Туг Гуз Аа РНе Ага ТНг Маї Спу Рпе Тнг 595 600 605
ТАг Рго Рне 5ег Рне 5ег Авп Аа Сіп 5ег ТНиг Рне Тнг Пе Спіу Аа 610 615 620
Зо
Тер Азп Рне 5ег І єи Сіу Авп Сім Маї Туг Пе Азр Аго Пе Сіи Рпе 625 630 635 640 маї Рго Маї Сім Маї Тнг Туг Сіи Ага Си Нів Авр РПє Си ГГ ув Аа 645 650 655
Сп Сіи Спи Маї Тнг Ага І еи РНне Тнг Зег Тиг Азп Рго Су СІУу І єи 660 665 670
Гуз Тнг Авп Маї Тниг Сти Туг Ні Пе Ар Сп Маї Зег Авп ГГ еи Маї 675 680 685
Сіи ЗегІ еи Зег Азп Си Ріє Туг Геи Авр Си Гуз Агу Си Гей Ріе 690 695 700
Сіш Пе мМаї Гуз Туг Ага Гуз Сіп І еи Ні Пе Спіу Агу Азп Меї 705 710 715 «2105» 39 «2115 1164 «212» Білок -213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів (510) «4005» 39
Меї Спи Агу Авп Авп Сп Авр Сп Суз Пе Рго Туг Азп Суз Гей Авп 1 5 10 15
Азп Рго Спи Маї Спу Пе І еи Ар Пе Спи Авп Рне Авт І єи Спи І ей 20 25 Зо маї Зег ап Маї 5ег Ма! Спу Геи Тиг Агу РнНе І єи ГГ еи Сім Аа Зег 35 40 45
Пе Рго Сту Аа Сіу РНе Аа Геи Су І еи Ре Авр Іе Пе Ттр Спу 50 55 бо
Аа І єи Стпу Маї Авр Сіп Тгр 5ег І єи РНе І єи Аа Сіп Пе Спи Стіл 65 70 75 80
Ї ем Пе Авп Си Ага Пе Тиг Тиг Маї Спи Агу Авп Аг Аа Пе Сіп 85 90 95
Аа І єи бЗег Спу І еи 5ег бег Зег Туг Си Маї Тук Пе Спи Аїпа І єи 100 105 110
Коо) Аг Си Тгр Си Авп Авр ГГ єи Авр Авп Рго Аа 5ег Агу Авр Аго Маї 115 120 125 маї Аа Агу РНе Аг Аа Тнг Авр Авп 5ег І ви Пе ТНг Авр Пе Рго 130 135 140
Ї еи Гєи Сім Пе Рго Спу Рпе Сім Пе Айа ТАг І еи 5ег Маї Туг ТНг 145 150 155 160
Сп Айа Аа Авп І! єи Ніз І ви Аа Геи І єи Агу Ар Аа Ма! Туг Ре 165 170 175 сСіу Спи Агу Тгтр Су Геи ТАг Сп ТАг Авп Пе Сім Авр Геи Нів ТНг 180 185 190
Ага ГІ еи Тиг Ага Туг Пе Сип Спи Туг 5ег Авр Ні Суз Аа Аг9 Тр 195 200 205
Туг Авп Сп слу І ви Авп Авп Іе Спіу Стпу Пе Авп ТАг Аго Туг І еи 210 215 220
Авр РНе СіІп Агу Сі І ви Те Пе 5ег Маї І єи Азр Іе Маї Ага І єи 225 230 235 240 60
Рпеє Рго Авп Туг Азвр Іе Аго Тиг Туг Рго Пе Рго Тиг Сп 5ег Сп 245 250 255
Ї еи Тиг Аго Си Пе Туг ТАг Зег Рго Маї Маї Аїіа Рго Спу Маї Абп 260 265 270
Тер Пе Геи Зег Пе Зег Азп Маї Гей Агу Аа Рго Ніз І еи Меї Азр 275 280 285
Рпе Ріє Азр Ага Іе Іе Пе Туг Тиг Спу Тниг Маї Агу 5ег ТАг Рго 290 295 00
Ні5 Ттр Спи Спу Нів Спи Ма! Пе Зег Агу Агу Тит Спу Сп Спу Авп 305 з10 315 320
Сіш Пе Агу 5ег Рго ГІ єи Туг Стпу Маї Аа Аа Авп Аа Сім Рго Рго 325 330 335 маї Тиг Пе Агу Рго ТАиг Спу Рпе Тниг Авр Сім Сітп Ага Сп Маї Туг 340 345 350
Коо) Агоу Ма! Геи Зег Агу Маї Аа бег РНе Ага Авп 5ег Спу ТНг Ап Ре 355 360 365 зег І еи Ма! Авр Аїа Аа 5ег РНеє ГІ еи ТНг Пе РНе Зег Аа 5ег 5ег 370 375 380
Пе Туг Ага Ап Сіу РНе Сіу Рне Авзп Аа Авр ТНг Пе Ар Сіи Пе 385 390 395 400
Рго Пе Спи Спу Тнг Авр Рго Туг Пе Спіу Туг Зег Ніз Агу І єи Суб 405 до 415
Ніз Маї Спу Ре Тнг Аа 5ег Зег Рго РНе Іе Зег Сп Туг Аа Ага 420 425 430
Аа Рго Маї Рне 5ег Тр ТНиг Ніз Агу 5ег Аа ТАг Ре Тнг Авп ТНг 435 440 445
Пе Ар Рго Сім Аго Пе ТАг Сп Пе Рго Меї Маї Гуз Аа Туг Авп 450 455 460
І еи Ніз Аа Сіу Аа Тнг Маї Маї Ага Сіу Рго Сіу Рпе Тиг Сіу СПУ 465 470 475 480 60
Азр Геиц І ви Агу Агу ТНг Авп ТАг Спу ТНг Рпє Аа Ар Іе Агу Маї 485 490 495
Азп Пе Тниг Сіпу Рго ГГ єеи бег Сп Аго Туг Агу Маї Ага Іе Аго Туг 500 505 510
Аа 5ег Тпг ТНг Авр І єи Сп Рпе РНе Тнг Ага Іе Авп Сіу ТАг Зег 515 520 525 маї Авп Сп Спіу Авп Рпє Сіп Агу ТАг Меї Авп Ага Стпу Авр Авп І єи 530 535 540 сій Зег Сіу Авп РНе Ага ТНг Аа Спу Рпе 5ег ТАг Рго РНе 5ег Рпе 545 550 555 560 зЗег Авп Аа Сіп 5ег Тит Рпе Тпг ГГ еи Спіу Тниг ап Аа РНе 5ег Авп 565 570 575
Сіп Си Маї Туг Пе Авр Ага Іе Спи РНе Маї Рго Аїа Спи Маї! ТНг 580 585 590
Ко) Рпе Сти Аїа Спи 5ег Авр ГІ єи Спи Агу Аїа Сіп Гуз Аа Маї Авп Аа 595 600 605
Ї еи Ре Тит Зег ТНг Зег Сп І еи СпПу Г еи Гу ТНг Авп Маї Тит Спу 610 615 620
Туг Ніз Пе Азр Сп Маї 5ег Авп І ви Маї Аа Суз І єи 5ег Авр Си 625 630 635 640
Ре Суз І еи Авр Сім ГГ уз Ага Си І єи Зег Си І уз Ма! Гуз Нів Аа 645 650 655
Гуз Аг9 І еи 5ег Азр І уз Ага Авп І еи Ї еи Сп Авр Рго Азп РНе Аг9 660 665 670
Су Пе Авп Аг Сп Рго Авр Ніз Слпу Тгтр Агу Спу Зег Тиг Ар Пе 675 680 685
Тпиг Пе Стп Спу Спу Авр Авр Маї РНе Гуз Спи Авп Туг Маї ТНг І ви 690 695 700
Рго Спу Тиг Рне Ар Сім Суз Туг Рго Тниг Туг Гей Туг Сп Гуз Пе 705 710 715 720 60
Азр Ст Бе" Гуз І єи Гуз Аа Туг Тнг Аг Туг Сп Г еи Агоу Спу Туг 725 730 735
Пе См Авр 5ег Сп Авр ГГ еи Сі Пе Туг Геи Пе Агу Туг Авп 5ег 740 745 750
Гуз Ніз Спи Пе Маї Авп Маї Рго Стпу Тнг Спу з5ег Геи Тгр Рго І єи 755 760 765 зЗег Ма! Сім Авп Сп Пе СПу Рго Суз Спіу Спи Рго Авп Агу Суз Аа 770 775 780
Рго Нів Геи Спи Ттр Авп Рго Авр ГГ єи Нів Суз 5ег Суз Агу Авр Спу 785 790 795 800 сін Гуз Суз Маї Нів Ні 5ег Нів Ні РНе 5ег І еи Ар Іе Азвр Маї 805 810 815 сСіу Суз Тиг Авр Гей Азп Ст Авр ГГ еи Спу Маї Тр І еи Пе Ре Гуз 820 825 830
Зо Пе Гуз Тнг Сп Авр Су Нів Аїа Ага І єи Спу Авп І еи Спи РнНе І еи 835 840 845 сій Си Си Рго Ге І еи Спу Спи Аїйа І єи Аа Агу Маї Гуз Агу Аїа 850 855 860
Сім Гуз Гуз Ттр Агу Авр І уз Агу Си І ув І єи Сп ей Си Те Авп 865 870 875 880
Пе маї Туг Гуз Спи Аа Гуз Спи Зег Маї Авр Аа І єи РНе Маї Авп 885 890 895 зег Сп Туг Авр Ага І єи Сп Аа Авр Тиг Авп Іе Аа Ме! Пе Нів 900 905 910
Аа Аа Азр Гуз Аго Маї Ні Ага Іе Аго Си Аа Туг Гей Рго Спи 915 920 925
Ї еи Зег Ма! Ме Рго Сіу Маї Азп Аїа Айа Пе Рпе Сіи Спи І еи Спи 930 935 940
Сіу Ага Іе РНе Тнг Аа Туг Зег І єи Туг Азр Ага Агу Авп Маї Іе 945 950 955 960 60
Гуз Азп Сіу Азп РНе Азп Авп ау І єи І єи Суз Тр Авп Маї І уз Су 965 970 975
Ніз Маї Азр Маї Спи Спи Сп Авп Авп Ні Агу 5ег Маї І єи Маї Пе 980 985 990
Рго Сіи Тгр Сім Аїа Сім Ма! Зег Сп Гуз Маї Агу Ма! Сув Рго Су 995 1000 1005
Агу Счу Тут Пе Геи Агу Ма! Тнг Аа Туг Гуз Спи СТу Туг Спу 1010 1015 1020
Сіи сіу Суз Маї Тнг Пе Ніб Спи Пе Сім Азр Азп.ТНг Авр Си 1025 1030 1035
Їеи Гуз РНе бег Азп Суз Ма! Спи Сіи Спу Туг Рго Авп Авп ТНиг 1040 1045 1050 ма! Тиг Суз Авп Сім Туг ТАиг Меї Авп Сп Сіу Ма! Сіу СПЧи Суб 1055 1060 1065
Коо) Тиг Азр Аа Суз Азп Маї Ага Авп Аго Спу Туг Сім Авр Аа Туг 1070 1075 1080
Сіу Нів Авп Рго 5ег Тнг Рго Маї Ніз Тут ТНиг ТАиг Рго Туг Си 1085 1090 1095
Сі си ТНг Туг Тег Ар Спи Аг Агу Спи Авп Рго Суз Спи Аа 1100 1105 1110
Азп Гуз Спу Туг Ма! Азп Туг Тнг Рго Геи Рго Ма! Стпу Туг Маї 1115 1120 1125
ТигГув Спи ГГ еи Спи Туг Рнпе Рго Сім Тиг Авр ТАг Маї Тгр Пе 1130 1135 1140
Сі Ше Спу Сіи ТАг Спи пу ТА РНе Пе Маї Азр. Зег Ма! Спи 1145 1150 1155
Гей ГГ еи ГІ еи Меї Сім Спи 1160 «210» 40 «2115 1166 бо «212» Білок
-213» Васійив5 ІпПигіпдіепвів «4005» 40
Меї Гуз Пе Авп Авп Сп Авп аїп Суз Пе Рго Туг Азп Суз ГГ еи Зег 1 5 10 15
Авп Рго Сім Спи Ма! І ей ЇЇ еи Азр Стпу Спи Аго Пе І єи Рго Авр Пе 20 25 0)
Ар Ро І еи Си Маї бег Меї 5егі єи І ви Сп Рне І еи Ї еи Авп Авп 35 40 45
Рпє Маї Рго Спу Спу Спу Ма! Пе Зег СПУ Геи Пе Авп Гуз Пе Тр 50 55 60
Сіу Аа Геи Агу Рго 5ег Спи Ттр Сім Гей Рпє І єи Айїа Сіп Пе Спи 65 70 75 80
Сп Ї еи Пе Ар Ага Ага Іе Сім Аїа Аїа Маї Аг Аїа Гуз Аа Пе 85 90 95
Аа Спи Геи Спи СПу Ї еи Стпу Аг Зег Туг Сп ГГ еи Туг пу Сім Аа 100 105 110
Рпе Гуз Спи Ттр Спи Гуз ТНг Рго Авр Авп Тпг Аїа Аа Ага 5ег Ага 115 120 125
З5
Маї Тиг си Агу Рне Ага Пе Іе Авр Аїа Сп Пе Сім Аа Авп Пе 130 135 140
Рго 5ег Рне Агу Маї бЗег Сіу Рне Сіи Маї Ро Гей Гей 5ег Маї Туг 145 150 155 160
Тпиг ап Аа Айа Авп ГГ еи Ніз ГІ еи Айа Г еи І еи Агу Авр Зег Маї Маї 165 170 175
Рпе Стпу Сім Аг Тгр Стпу Геи ТАг Ти Тнг Авп Маї Авп Ар Іе Туг 180 185 190
Азп Аго ап Маї Гуз Ага Пе Авр Сім Туг Зег Авр Ніз Суз Маї А5р 195 200 205
Тиг Туг Гуз Тиг Си ГГ еи Сім Аго Гей Сім Ре Зег Зег Пе Аа Сп 210 215 220 60
Тр Ага Іе Туг Авп Сп РНеє Агу Аго Сі ГГ еи ТНг ГГ еи Тнг Маї Гей 225 230 235 240
Азр Іе Маї Ага І еи Рне Рго Авп Туг Ар Су Ага Геи Туг Рго Пе 245 250 255
Аг Тит Пе 5Бег Сіп І еи ТАг Агу Азвр Їе Туг Тнг 5ег Рго Маї Зег 260 265 270
Сім Рпе Туг Туг ау Рго Пе Туг Авп Туг Азп Пе Маї Спу Ага Гей 275 280 285
Тиг ами Сіп Стій Гей Ага Ага Рго Ніз І єи Меї Азвр РНе РНе Авп 5ег 290 295 100)
Ме! Пе Меї Туг Тиг Зег Азр Авп Ага Ага Си Нів Туг Тгтр Зег Спу 305 з10 315 320
Ї ви Спи Меї Гуз Аа ТАиг Авр Тнг Зег Спу Авп Сп Маї Зег РНе Рго 325 330 335
Ї еи Аа Сту Тниг Агу Сіу Авп 5ег Аїа Рго Рго Маї Тниг Маї Агу Авп 340 345 350
Азп Спу Сім Спу Маї Туг Ага Пе Геи Зег Си Рго РНе Туг Зег Зег 355 360 365
З5
Рго Рне І єи Спу Тнг 5ег Ма! Ї єи Спу бЗег Агу Сіу Спи Си Рне Аа 370 375 380
РНе Аа 5ег Азп ТНг Тнг Тнг Зег Гей Рго 5ег ТНиг Пе Туг Ага Авзп 385 390 395 400
Агоу Стпу Тнг Маї Авр 5ег І єи Маї Зег Пе Рго Рго Сп Авр Туг Зег 405 а410 415 маї Ріо Рго Ні Агу Сіу Туг 5ег Нів І єи Геи Зег Ні Ма! Тиг Меї 420 425 430
Нів Авп 5ег Зег Рго Пе Рпє Ні Тр ТНг Нів Агу Зег Аа ТНиг Рго 435 440 445
Агу Авзп ТНг Пе Авр Рго Авр 5ег Пе Тниг Сп Пе Рго Маї Ма! Гуз 450 455 460 60
Аа 5ег Нів І єи 5ег Спу Спу Зег Ма! Пе Гуз Спу Рго Спу Ні ТНг 465 470 475 480
Спу Сіу Авр І єи Пе 5ег І єи Рго Маї! Азп Азп РнНе Тнг Ні Рне Аг9 485 490 495
Пе Рго Ріє Сп Аа Авп ТиНг Рго Сп Ага Туг Аго Пе Ага Пе Аг9 500 505 510
Туг Аа Аа Ар 5ег Авр Су ТАг І єи Авр 5ег Спу Маї Рне Геи Зег 515 520 525
Аа Аа Аа Стпу Ар Сіу РНе Авп Тиг ТНг Зег Туг Агу Аіа Тиг Меї 530 535 540 зЗег Рго Сіу Сіу Зег І єи ТНг 5ег Агу Авр РНе Сп РнНе Гей Авр І еи 545 550 555 560
Азп Тпг 5ег Рпе Тнг Зег Авр Маї Аа 5ег Авп І єи Тгр І єи Ні Рпе 565 570 575
Пе Аго Туг Пе Агу Рго Сіу Авп І єи Туг Пе Авр Аго Аа Спи Ріе 580 585 590
Пе Рго Маї Авр Аїа Тниг Ре Сти Аїа Сіу Туг Авп І ви Спи Аго Аа 595 600 605
З5
Сп Гуз Аа Маї Авп Аа І еи Ріе Тнг 5ег Тнг Азп Сп І уз СПУ І еи 610 615 620
Сіп ТАиг Авр Маї Тниг Авр Туг Ніз Іе Азвр Сп Маї 5ег Авп І єи Маї 625 630 635 640
Ар Суз І єи бег Азр Спи Ре Суз І єи Авр Спи Гуз Агу Сім Гей 5ег 645 650 655
Сіши Гуз Ма! Гуз Сіп Ага Гуз Ага Геи Зег Авр Си Агу Авп І еи Ї ви 660 665 670
Сіп Авр бег Азп РНе Аго Су Пе Авзп Аго Спи Сп Авр Аго сапу Ттр 675 680 685
Агоу Стпу Зег Тиг Ні Пе Ти Пе Сп СПу СпЧу Авп Азвр Маї Ре ГГ ув 690 695 700 60 сій Авп РНе Маї Тнг ГГ еи Рго Сіу Аа Рне Азр Аїйа Суз Туг Рго ТНг 705 710 715 720
ТугГеи Туг Сип Гуз Пе Авр Си 5ег Гуз І еи Гуз Аа Туг ТАиг Аг9 725 730 735
Туг ам Геи Аг Стпу Тут Пе Спи Авр 5ег Сп Авр І єи Ар Пе Туг 740 745 750
Ї ем Пе Агу Туг Авп ТНАг Гуз Нів Спи ТНг Гей Авп Маї Рго Спу ТНг 755 760 765
Гуз 5ег Рго Тгтр 5ег Геи Суз Тиг Спи Зег Рго І ви Спу Гуз Суз СПУ 770 775 780
Сім Рго Авп Агу Суз Аа 5ег Сп Пе Спи Тр Авп Рго Авр І еи А5р 785 790 795 800
Сув бег Суз Агу Ар Стпу Спи І ув Суз Аїйа Ні Ні 5ег Нів Ні5 Рпє 805 810 815 зЗег І ей Авр Пе Авр Маї Спу Сув ТНг Авр І єи Авп Спи Авп І ви Су 820 825 830
Пе Тр Ма! Пе Рпє Гуз Пе Гуз ТАг Сп Авр Сту Нів Аа Ага Гей 835 840 845
З5
Спу Авп І еи Сім РНе Гей Си Спи ГГ ув Рго І єи І ви Спу Сім Аа І єи 850 855 860
Аа Агу Маї Гуз Агу Аа Си Гуз Гуз Ттр Аг Авр Гуз Ага Сі Гув 865 870 875 880
Ї еи Сп Зег Си ТАг Авп Те Маї Туг Гуз Сім Аа Гуз Спи Аа Маї 885 890 895
Азр Сту Геи Рне Маї Ар 5ег Сп Туг Сіи Агу І ви Сп Аа Авр Тиг 900 905 910
Азп ЇІе Аїа Меї Іе Ні Аїа Аа Авр Гуз Ні Маї Ні Сип Пе Аг9 915 920 925
Сіи Маї Тук Рне Рго Сім Геи Зег Ма! Пе Рго Стпу Маї Азп Аа Аа 930 935 940 60
Пе Рпе Спи Спи ГГ еи Спи СПу Аго Пе РНе ТАг Аїа Туг Зег І еи Туг 945 950 955 960
Азр Аа Агу Авп Маї Пе Гуз Авп Стпу Авр РНе Авп Авп Су Геи Зег 965 970 975
Суз Тр Азп Маї І уз СіІу Ніз Ма! Азр Маї Спи Маї Сип Авп Авп Нів 980 985 990
Агу Зег Маї Геи Маї Пе Аа Сіи Тр Сіи Аіа Спи Ма! Зег Сп Спи 995 1000 1005 маї Рго Маї Суз Рго Сіу Агу Спу Тут Пе Г еи Агу Маї Тнг Аа 1010 1015 1020
ТугГув Спи Спу Туг Сіу Сіи СПу Суз Ма! Тиг Пе Нів Спи Пе 1025 1030 1035
Сім А5р Ні ТНг Авр Сім І єи Гуз Рпе Агу Азп Суз. Спи Спи Спи 1040 1045 1050
Сім Ма! Тук Рго Авп Азп Тниг Маї Тиг Суз Азп Спу Туг ТНг Аа 1055 1060 1065
Тиг ап спи Сі Туг Гуз А5р Аа Туг ТНг Зег Агу Авп Аг Сіу 1070 1075 1080
З5
Туг Азр Си Аа Туг Спу Абп Авп Рго Зег Маї Рго Аїа Ар Туг 1085 1090 1095
Аа Зег Маї Туг Си Сі ув Аа Туг Тиг Азр Сіу Ага Агу Спи 1100 1105 1110
Авп Рго Суз Сіи Меї Спи Ага Спу Туг Тит Рго Геми Рго Ма! Спу 1115 1120 1125
ТугМПе Тиг Гуз Спи Гей Сім Тут Рпе Рго Спи ТАиг Авр Тнг Маї 1130 1135 1140
Тер Пе Спи Пе Спу Спи ТАго Спи сту Тиг Ре Пе Пе Авр 5ег 1145 1150 1155 ма! Сім І еи Ї еи Ї ви Меї Спи Сім 1160 1165 60
«-2105 А1 «2115 1181 «212» Білок -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Мутантний білок ВТ-0001. «4005 А1
Меї Авр Авп Авзп Рго Авп Пе Авп Сім Суз Пе Рго Туг Авп Суз І єи 1 5 10 15 зЗег Авп Рго Спи Маї Спи Ма! Геи Спту Спіу СП Аго Пе Спи Тиг Спу 0)
Туг Тиг Рго Іе Авр Іе 5ег І єи 5ег Гей Тпг Сіп Рне І єи Гей Зег 20 35 40 45
Сім Ре Маї Рго Сіу Аа Стпу Рне Маї І еи Сту І ви Маї Авр Іе Пе 50 55 60 25
Тр Сту Пе Рне Сіу Рго 5ег СіІп Тер Авр Аїа Ре ГГ еи Маї Сп Пе 65 70 75 80
Зо сій іп Гей Пе Авп Сіп Ага Пе Спи Спи РНе Аа Агу Авп Сп Аа 85 90 95
Пе Бег Аго І еи Сім СПІу Гей Зег Авп Геи Туг Сіп Пе Туг Аіа Си 100 105 110 зЗег Ре Агу Сім Тгтр Сіи Айа Авр Рго Тнг Авп Рго Аа І єи Ага Си 115 120 125
Сім Меї Ага Іе Сіп Рне Азп Ар Меї Авп 5ег Ага Г еи Тниг Тнг Аа 130 135 140
Пе Рго І еи РНе Аїа Маї Сіп Авп Туг Сіп Маї Рго Геи І єи 5ег Маї 145 150 155 160
Туг Маї Сіп Аа Аа Авп І єи Ніз І єи Зег Ма! І ей Агу Азр Маї 5ег 165 170 175 маї Рне Сіу Сп Аго Тр Сіу Рпе Азр Аїа Аа Тнг Іе Авп Зег Ага 180 185 190
Туг Авп Азр І єи Тнг Ага Г єи Пе Спу Авп Туг Тиг Азр Туг Аїа Маї бо 195 200 205
Аг Тгр Туг Авп ТНг Су Г еи Сім Агу Маї Тгтр Спу Рго Авр Зег Ага 210 215 220
Азр Тр Маї Агу Туг Авп Сп РНе Аг Ага Си І єи ТАг ГГ еи Тнг Маї 225 230 235 240
Ї еи Ар Іе Маї Аїа І єи Рне 5ег Авп Туг Азр Зег Аг Ага Туг Рго 245 250 255
Пе Агоу Тнг Маї Зег Сп Гей Тнг Ага Сти Пе Туг ТАг Авп Рго Маї 260 265 270
Ї ви Спи Авп Ріє Авр Стпу Зег Рне Аго Стпу Меї Аа Сіп Ага Пе Спи 275 280 285
Сіп Авп Пе Аго Сп Рго Нів Геи Меї Авр Пе Геи Авп Зег Пе ТНг 290 295 00
Пе Туг Тиг Авр Маї Ні Агу Сіпу Рне Авзп Тут Тгр Зег Сіу Нів Сип 305 з10 315 з20
Зо
Пе Тниг Аа 5ег Рго Маї Спу Рпе Зег Су Рго См Ре Аа Рне Рго 325 330 335
Ї єи Рне Сіу Авп Аа Сіу Авп Аа Аа Рго Рго Маї І єи Маї 5ег І єи 340 345 350
Тиг ау Геи Спу Пе Ре Аг Тнг ГГ еи 5ег Зег Рго Геи Туг Аг Ага 355 360 365
Пе Пе Геи Спу Зег Сіу Рго Авп Авп Сп Сім Гей РНе Маї Гей Авр 370 375 380
Спіу Тиг Сім Рне 5ег Рнеє Аїа 5ег І єи Тиг ТНг Авп І єи Рго 5ег ТНг 385 390 395 400
Пе Туг Ага Сп Ага Стпу Тиг Маї Ар 5ег І еи Авр Ма! Іе Рго Рго 405 до 415
Сіп Авр Авп 5ег Маї Рго Рго Ага Аа Сіу РНе 5ег Нів Аго І еи 5ег 420 425 430
Ні Ма! Тниг Меї І єи Зег ап Аа Аа Сту Аа Маї Тут ТНг Гей Агд бо 435 440 445
Аа Рго Тниг РНе 5ег Тр Сп Ні Агу Зег Аіа Спи Ріє Авп Авп Їе 450 455 460
Пе Аа бег Авр 5ег Пе Тнг Сп Пе Рго Аа Маї Гуз Спу Азп Ріє 465 470 475 480
Ї єи Рпєе Азп Сту 5ег Ма! Пе бег Спу Рго Спіу Рпе Тнг Спу Спу А5р 485 490 495
Ї еи Маї Агу ГІ еи Авп 5ег Зег Сіу Авп Авп Іе Сп Авп Ага сіу Туг 500 505 510
Пе Спи Маї Рго Іе Ні РнНе Рго 5ег Тнг Зег ТНг Ага Туг Агу Маї 515 520 525
Аг Маї Ага Туг Аа 5ег Маї Тнг Рго Пе Ніз І еи Авп Маї Авп Тр 530 535 540
Спу Авп 5ег 5ег Пе РНе 5ег Азп ТНг Маї Рго Аа Тнг Аа Тнг 5ег 545 550 555 560
Зо
І еи Авр Авп ГГ еи СіІп 5ег Зег Авр Рпе Сіу Туг Рпе Спи Бег Аа Ап 565 570 575
Аа РНе Тнг Зег 5ег ГГ еи Спу Азп Те Маї Спіу Маї Агу Азп Ре 5ег 580 585 590
Сіу ТНг Аа Сту Маї! Пе Пе Ар Ага РНе Сім РНе Іе Рго Маї ТНг 595 (5100) 605
Аа ТНиг І єи Сім Аа Сім Туг Авп І еи Си Агу Аа Сп І уз Аа Маї 610 615 620
Авп Аа І єи РНе Тнг Зег ТНг Азп Сп І єи Су І єи ГГ ув ТНг Авп Маї 625 630 635 640
Тпиг Авр Туг Ніз Пе Ар ап Маї Зег Авп ГІ єи Ма! Тиг Суз Гей Зег 645 650 655
Авр Сім Рнеє Суз І єи Авзр Си І уз Ага Спи І ей бег Спи І уз Ма! І уз 660 665 670
Ні Аїа Гуз Аго І еи Зег Авр Си Агу Авп І ви ГГ еи Сп Авр 5ег Авп бо 675 680 685
Рпє Гуз Азр Іе Авп Ага ап Рго Спи Агоу Стпу Ттр СПу Спу зег ТНг 690 695 700
СУ Пе Ти Пе Сп Спу СЧу Азр Азвр Маї РНе Гуз Сім Авп Туг Маї 705 710 715 720
Тиг Геи Зег Спу ТАиг Ріє Ар Сім Суз Туг Рго Тиг Туг Геи Туг Сп 725 730 735
Гуз Пе Авр Сім 5ег Гуз І еи Гуз Аіа Ріє Тнг Аго Туг Сіп Гей Ага 740 745 750 сСіу Тут Пе Сім Ар 5ег Сп Авр І єи Сім Маї Туг І єи Пе Ага Туг 755 760 765
Авзп Аа Гуз Ні Сіи Тиг ГГ еи Авп Маї Рго Стпу Тнг Спу Зег І єи Тр 770 775 780
Рго І єм Аа Маї Гуз 5ег Рго Пе Спу Агд Сув Сіу Спи Рго Авп Ага 785 790 795 800
Зо
Сув Аа Рго Ага Іе Сім Тр Гуз Рго Авр Маї Авр Суз 5ег Суз Ага 805 810 815
Ар Сіу Спи Гуз Суз Аа Ні Ні Зег Ні Ні Рне 5ег І еи Авр Пе 820 825 830
Ар Маї Спу Суз Тиг Авр І єи Авп Сі Авр І єи Спу Маї Ттр Ма! Пе 835 840 845
Рпє Гуз Пе Гуз Тиг Сп Авр Су Нів Ага Гуз Пе Спу Авп І ви Спи 850 855 860
Рпє І еи Спи См Гуз Геи ГГ еи Гей Сіу Спи Аа Геи Аа Аго Маї Гуз 865 870 875 880
Гуз Аа Си Гуз Гуз Тр Агу Авр Гуз Аг Сім Гуз Гей Спи Ттр Си 885 890 895
Тпиг Авп ЇІе Маї Туг Гуз Спи Аа Гуз Спи Зег Ма! Авр Аа І еи Ріе 900 905 910
Ммаї Авр 5ег Сп Туг Авп Ага Геи Сп ТАг Азр Тиг Авп Їе Аа Меї бо 915 920 925
Пе Ні Айа Аїа Ар І уз Ага Маї Ніз Ага Іе Ага Сім Аа Туг І еи 930 935 940
Рго Си І ви Зег Ма! Пе Рго Спу Маї Авп Аїа Аа Пе РНе Сім Спи 945 950 955 960
Ї ви Спи С1у І еи Пе Рне ТНг Аїа РНе 5ег І єи Туг Азр Аа Ага Авп 965 970 975 ма! Ме Гуз Авп Сіу Авр РНе Авзп Туг Су І еи бег Суз Тр Авп Маї 980 985 990
Гуз Сіпу Ні Маї Азр Маї Сіи Спи Сп Авп Авп Нів Ага 5ег Маї Гей 995 1000 1005 ма! Ме Рго Сім Тр Сіи Аіа Си Маї Зег Сіп Сіи Маї Агу Маї 1010 1015 1020
Сув Рго ау Агу Сіу Туг Ше Ге Аго Маї Тнг Аа Туг Гуз Сім 1025 1030 1035
Зо
Спіу Туг Спіу Спи Сіу Суз Ма! Тит Пе Нів Спи Пе Спи Авр Авп 1040 1045 1050
Тиг Авр ам Геи Гуз Рпе бег Авп Суз Ма! Спи Сім Спи Ма! Туг 1055 1060 1065
Рго Азп Авзп ТНг Ма! ТАиг Сув Авп Авр Туг ТНг Аа. Тнг Сп Спи 1070 1075 1080
Сім Туг Спи Спу ТНг Тук Тк Бег Агу Авп Агу Спіу Туг Азр Спу 1085 1090 1095
Аа Туг Спи бег Азп 5ег 5ег Маї Рго Аа Авр Туг Аа бег Аа 1100 1105 1110
Туга спи Гуз АІа Туг Тиг Авр Сту Аго Агу Азр. Авп Рго Сув 1115 1120 1125
Сі Зег Авп Ага Сіу Туг Агу Авр Туг ТНг Рго Геи Рго Аа Спу 1130 1135 1140
Туг Ма! ТАиг Гуз Спи Гей Спи Тук Рпе Рго Сім Тиг Азвр Гуз Маї бо 1145 1150 1155
Тер Пе Сі Гей Спу Спи ТАг Си Сту ТАг Рне І еи Маї Ар 5ег 1160 1165 1170 ма! Сім Гей Гей Геи Меї Сім Сім 1175 1180 «2105» 42 «2115 1176 «212» Білок -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Мутантний білок ВТ-0003. «4005» 42
Меї Сі Пе Ма! Азп Авп Сп Авп Сп Сув Маї Рго Туг Азп Суз І еи 1 5 10 15
Авп Азп Рго Сім Пе См Пе Її еи СТ СТу Спу Агу Пе бег Ма! Су 20 25 0)
Азп Тпг Рго Іе Авр Іе 5ег І еи 5ег І еи ТАг Сіп РНе І єи Геи Зег
Сім Ре Маї Рго Сіу Аа Спу Рне Маї І еи Спу І еи Пе Авр ГГ еи Пе 60
З5
Тр Спу РНе Маї сіу Рго 5ег СіІп Тгр Азр Аа РнНе Г еи Аїа Сп Маї 65 70 75 80 40 сій Сп Гей Пе Авп Сіп Ага Іе Аїа Сім Аа Маї Ага Авп ТАг Аа 85 90 95 45 Пе Сп Схи Гей См СТу Меї Аа Ага Маї Туг Агу Тнг Туг Аіа ТНг 100 105 110
Аа Рне Аа Сі Тгр Си І уз Аа Рго Азр Авр Рго Си І ей Ага Спи 50 115 120 125
Аа Геи Аг Тпг Сп Рпе Тнг Аіа Тиг Сіи Тег Тук Пе Зег СПу Ага 130 135 140 55
Пе Бег Маї Геи Гуз Пе Сіп Тиг Рне Сім Маї Сіп Гей ГГ єи 5ег Маї 145 150 155 160 60
РНе Аїа сСіІп Аа Аа Авп І єи Ніз І єи 5ег І єи І єи Ага Авр Маї Маї 165 170 175
Рпе Ріє Сту Сип Агу Тгр Спу Рпе Зег Тиг ТАиг Тнг Маї Авп Авп Туг 180 185 190
Туг Авп Авр І єи ТНг Сім СпПу Пе Зег ТНг Туг Тнг Авр Туг Аа Маї 195 200 205
Аг Тгр Туг Авп ТНг Су І еи Сім Агу Маї Тгтр Спу Рго Авр 5ег Аг9 210 215 220
Азр Тр Маї Агу Туг Авп Сп РНе Аг Ага Си І єи ТАг ГГ еи Тнг Маї 225 230 235 240
Ї еи Ар Іе Маї Аїа І єи Рне 5ег Авп Туг Азр Зег Агу Аг Туг Рго 245 250 255
Пе Агоу Тнг Маї Зег Сп Гей Тнг Ага Сти Пе Туг ТАг Авп Рго Маї 260 265 270
Ї еи Спи Авп Ріє Авр Сіу Зег Рне Аго Стпу Меї Аїа Сп Аго Пе Спи
Ко) 275 280 285
Сіп Авп Пе Аго Сп Рго Нів Геи Меї Авр Пе Геи Авп Зег Пе ТНг 290 295 00
З5
Пе Туг Тиг Авр Маї Ні Агу Сіпу Рне Авп Туг Тр Зег Сіу Нів Сип 305 310 315 320
Пе Тниг Аа 5ег Рго Маї Спу Рпе Зег Су Рго См Ре Аа Рне Рго 325 330 335
Ї єи Рне Сіу Авп Аа Сіу Авп Аа Аїа Рго Рго Маї І ем Ма! 5ег І еи 340 345 350
Тиг ау Геи Спу Пе Ре Аг Тнг ГГ еи 5ег Зег Рго Геи Туг Аг Ага 355 360 365
Пе Пе Геи Спу Зег Сіу Рго Азп Авп ап Сім Геи РНе Маї І єи А5р 370 375 380
Спіу Тиг Сім Рне 5ег Рнеє Аїа 5ег І єи Тиг ТНг Авп І єи Рго 5ег ТНг 385 390 395 400 60
Пе Туг Ага Сп Ага СПУ Тиг Маї Авр 5ег ГГ еи Авр Ма! Іе Рго Рго 405 до 415
Сіп Авр Авп 5ег Маї Рго Рго Ага Аа Сіу РНе 5ег Нів Аго І еи 5ег 420 425 430
Ні Ма! Тиг Меї І єи Зег ап Аа Аїа Сту Аа Маї Туг ТНиг І еи Ага 435 440 445
Аа Рго Тниг РНе 5ег Тр Сп Ні Агу Зег Аіа Спи Ріє Авп Авп Їе 450 455 460
Пе Рго Зег Зег Сп Пе Тниг Сп Пе Рго Геи ТА Гуз Зег Тит Авп 465 470 475 480
Ї ви Спу Зег Спу Тнг Зег Маї Ма! Гуз Спу Рго Спу Рпе Тиг Спу Спу 485 490 495
Азр ІПе Гей Аг Аг Тпг Зег Рго Сіу Сіп Пе 5ег ТНг Геи Агу Маї 500 505 510
Азп Пе Тнг Айа Рго І єи 5ег Сіп Аго Туг Агу Маї Аго Пе Аг Туг 515 520 525
Аа 5ег Тиг Тиг Авп І єи Сіп РНе Ні ТНг Зег Пе Авр Спу Ага Рго 530 535 540
З5
Пе Авп Сп СПу Авп Рне 5ег Аа Тиг Меї Зег 5ег СПу 5ег Авп І ви 545 550 555 560
Сіп Зег Сіу Зег Рпе Агу Тиг Маї Спіу Рне Тниг ТАг Рго Ре Авзп Ре 565 570 575 зЗег А5п Сіу бег Зег Ма! Рне Тнг І єи 5ег Аа Ніз Ма! Рне Авп 5ег 580 585 590
Сіу Азп Си Маї Туг Пе Азр Ага Іе Сім Ре Маї Рго Аа Си Маї 595 600 605
Тиг РНе Сім Аа Сти Туг Авр Г еи Сім Агу Аїа Сп ГІ уз Аа Маї Авп 610 615 620 сій Гей Рпе Тнг Зег Бег Авп Сп Пе СПУ Геи Гуз ТАг Авр Маї Тиг 625 630 635 640 60
Азр Туг Ні Пе Ар Сіп Маї Зег Авп І єи Ма! Спи Суз І ви Зег А5р 645 650 655
Сім Рне Суз І єи Авр Спи Гуз Сп Сі Ї еи бег Си І ув Маї Гуз Нів 660 665 670
Аа Гуз Ага Геи 5ег Авр Си Агу Авп І ви Гей Сп Авр Рго Авзп Рпе 675 680 685
Аго сту Пе Авп Ага ап ГІ еи Авр Аго Сіу Тгтр Агу Спу бег Тит Ар 690 695 700
Пе Тиг Пе Сіп СПу Спу Авр Азр Маї РНе Гуз Спи Авп Туг Маї ТНг 705 710 715 720
Ї еи Гєи Спу Тиг Ре Авр Сіи Суз Туг Рго ТНг Туг І єи Туг Сп Гув 725 730 735
Пе Ар Сім 5ег Гуз І еи Гуз Аїа Туг ТНиг Агу Туг Сіп І еи Агу Спіу 740 745 750
Туг Пе Сім Авр 5ег Сп Авр І еи Сім Пе Туг І еи Пе Агу Туг Авп 755 760 765
Ага Гуз Ніз Сім ТАг Маї Авп Маї Рго Спу Тк Спу зег ГГ еи Тгр Рго 770 775 780
З5
Ї еи Бег АІа Сп 5ег Рго Пе Спу Гуз Сувз Сіу Сім Рго Азп Агу Суз 785 790 795 800
Аа Рго Ніз І еи Спи Тгр Авп Рго Авр І ей Авр Суз бег Суз Ага Авр 805 810 815
Спу Спи Гуз Суз Аа Ні Ні Зег Нів Ні Рне 5ег І єи Авр Пе Ар 820 825 830 маї Спу Суз Тиг Азр Геи Авп Си Азр І еи Су Маї Тгр Ма! Пе Рпе 835 840 845
Гуз Пе Гуз Тнг Сп Ар ау Нів Аа Ага ГІ еи Спу Авп ГГ еи Си Ре 850 855 860
Їеи Спи Сім Гуз Рго І еи Маї Спу Ст Аа І єм Аа Агу Маї Гуз Пе 865 870 875 880 60
Аа Спи Гуз Гуз Тр Ага Авр Гуз Аго Сім Гуз Геи Сім Ттр Сі ТАг 885 890 895
Азп ЇІе Маї Тут Гуз Сім Аа Гуз Спи 5ег Маї Авр Аа Геи Ре Маї 900 905 910
Азп Зег Сп Туг Авр Сп І ви Сіп Аа Азр Тпг Авзп Їе Аа Меї Пе 915 920 925
Ні Аа Аа Азр І уз Агу Маї Нів 5ег Пе Ага Сім Аа Туг Гей Рго 930 935 940
СпІМ Гей 5ег Ма! Пе Рго Сіу Ма! Азп Аїа Аа Пе Рне Сім Сі І єи 945 950 955 960
Сім Спу Аг Пе Рне ТНг Аа Рне 5ег ГГ еи Туг Азр Аа Агу Азп Маї 965 970 975
Пе Гу Авп ау Авр РНе Авп Авп ау ГГ еи Зег Суз Тр Азп Маї Г ув 980 985 990
Сту Ні Маї Азр Маї Спи Сі Сіп Авп Авзп Сп Агу 5ег Маї І єи Маї 995 1000 1005 ма! Рго Сім Тгр Сіи Аа Сіи Маї Зег СіІп Спи Ма! Ага Ма! Суз 1010 1015 1020
З5
Рго Спу Аго Спу Туг Пе Гей Агу Маї Тиг Аіа Туг Гуз Спи Спу 1025 1030 1035
Тугачту ами Спу Суз Ма! Тиг Пе Ні Спи Пе Сі Авп Авп Тйг 1040 1045 1050
Авр Си Гей Гуз Рне 5ег Азп Суз Маї СІи Сі Сім Пе Туг Зег 1055 1060 1065
Азп АзпоТНг Маї Тит Сувз Азп Авр Туг Тпг Маї Азп. Сп Сім Спи 1070 1075 1080
Тугачу ау Ага Туг Тиг Зег Агу Авп Агу СПУ Туг Авп Си Аа 1085 1090 1095
Рго 5ег Маї Рго Аа Авр Туг Аа 5ег Ма! Тут Сім Спи Гув Зег 1100 1105 1110 60
Туг Тиг. Авр ау Агу Агу Сім Авп Рго Суз Сіи Рпе Авзп Агу Сіу 1115 1120 1125
Туг Агу Азр Туг ТНг Рго Геи Рго Маї Спу Туг Ма! Тнг Гув Спи 1130 1135 1140
Ї еи Си Тук РНне Рго Сіи Тниг Азр Гуз Маї Ттрієи Спи Пе Спіу 1145 1150 1155
Сі Тиг спи с1іу ТАг Рпе Пе Маї Авр 5егІ еи Сім Гей ЇЇ еи Гей 1160 1165 1170
Меї Спи Спи 1175 «2105 43 «2115 1237 «212» Білок 213» Штучна послідовність «220» «223» Мутантний білок ВТ-0020. «-4005 43
Зо
Меї Авп 5ег Азп Ага І уз Авп Сім Авп Спи Пе Пе Авр Аа бег Рне 1 5 10 15
Пе Рго Аа Маї Зег Азп Си Зег Маї Тиг Пе 5ег Гуз Спи Туг Аіа 20 25 Зо
Сп Тнг Авп Сп І ви Сп Авп Авп 5ег Пе Сіи Авр Су І єи Суз Пе 35 40 45
Аа Спи Сіу Спи Тук Пе Авр Рго Рнеє Маї 5ег Аа 5ег Тиг Ма! Стій 50 55 60
Тиг сапу Пе 5ег Пе Аїа Спу Ага Іе ГГ еи Спу Ма! Геи Спу Маї Рго 65 70 75 80
РНе Аїа Сіу Сп І єи Аа бег Рне Туг бег РНе Іе Маї Спу Спи Ї еи 85 90 95
Тер Ро Гуз Сіу Агу Авр СіІп Ттр Спи Пе РНне Меї Сім Нів Ма! СПи 100 105 110
Сіп Ї еи Маї Ага Сп Сіп Пе ТАг Ага Авп Аїа Агу Авзп ТНг Аа І єи бо 115 120 125
Аа Агу Геи Сп Спу Геи СтПу Авп Зег РНе Ага Айа Туг Сип Сп Бег 130 135 140
Ї еи Спи Авр Тгр Г еи Си Авп Агу Авп Азр Аїа Ага ТАг Агу 5ег Маї 145 150 155 160
Ї еи Туг Тниг Сп Туг Пе Ага Геи Си І еи Ар РНе Геи Авзп Аа Меї 165 170 175
Рго І єи РНе Аїа Іе Агу Сіи Сп Спи Маї Рго І єи Геи Меї Ма! Туг 180 185 190
Аа Сіп Аа Аа Авп І єи Ніз! еп І еи І єи І и Агу Авр Аа 5ег І еи 195 200 205
Туг ау Ага Сім Ре Су Г єи Тиг 5ег Сип Сім Пе Сп Ага Туг Туг 210 215 220
Сім Ага Сп Маї Сім Агу ТНг Агу Авр Туг Зег Авр Ні Суз Маї Сп 225 230 235 240
Зо
Тер Туг Авп Тиг Спу І еи Авп Авп І єи Агу Су ТАг Авп Аа Сім Зег 245 250 255
Тр Маї Ага Туг Азп Сп Рне Аго Агу Азр ГІ еи ТиАг І єи Стпу Ма! Гей 260 265 270
Азр Геи Маї Ага Геи РНе Рго 5ег Туг Азр Тнг Ага Тнг Туг Рго Іе 275 280 285
Азп Тнг 5ег Аа Сіп І еи Тнг Ага Сім Маї Туг Тиг Авр Аа Пе Стпу 290 295 00
Аа Тнг Спу Ма! Азп Меї Аа бег Меї Авп Тр Туг Авп Авп Авп Аїа 305 з10 315 з20
Рго бег Рне 5ег Аа Пе Спи ТНг Аа Маї! Пе Ага 5ег Рго Нів І еи 325 330 335
Ї еи Авр РнНе І єи Сім Сп Гей Гуз Пе РНе 5ег Аїа 5ег Зег Ага Тр 340 345 350 зЗег Авп ТНг Аг Нів Меї ТНг Туг Тгр Агу Су Нів Тнг Пе Стій Бег бо 355 360 365
Аг Рго Іе Аго Сіу Аа І еи Пе Тниг Зег Тниг Ні Спу Авзп ТНиг Авп 370 375 380
Тпиг Зег Пе Авп Рго Маї ТАг Рне Сп Рпє Рго 5ег Агу Азвр Маї Туг 385 390 395 400
Агу Тиг Си Зег Туг Аа Сіу Маї І еи І єи Тр Сіу Пе Туг Гей Спи 405 до 415
Рго ЇІе Нів Слу Маї Рго Тнг Маї Агу Рне Авп Рнє Агу Авп Рго Сп 420 425 430
Азп Тпиг РНе Сім Агу Спу ТНиг Айва Авзп Туг Зег Сп Рго Туг Сіи Зег 435 440 445
Рго СіІу І еи Сп Ї єи Гуз Авр бег Спи ТНг Спи І ви Рго Рго Сім ТАг 450 455 460
Тиг ам Агу Рго Азп Туг Спи Зег Туг Зег Нів Аго І єи 5ег Ніз Пе 465 470 475 480
Зо
СУ Пе Пе Геи Стп ТАг Аг ГІ єи Авп Маї Рго Маї Туг Зег Ттр ТНг 485 490 495
Ні Агу 5ег Айа Азр Агу ТНг Авп ТА Пе Спіу Рго Азп Ага Пе ТНг 500 505 510
Сіп Пе Рго Айа Маї Гуз Спу Авп І еи Геи Рпе Авп Спу 5ег Маї! Пе 515 520 525 зЗег Сіу Рго Сіу Рпе ТАг Спу Спу Авр ГГ еи Маї Ага Геи Авп Авп 5ег 530 535 540
Сіу Азп Авп ЇІе Сп Авп Аг Су Туг І еи Спи Маї Рго Пе Сіп Рпе 545 550 555 560
Тпиг Зег Тиг Зег ТНг Ага Туг Агу Маї Аг Маї Ага Туг Аа 5ег Маї 565 570 575
Тиг Рго Іе Нів І єи 5ег Маї Авп Ттр Спу Авп 5ег Авп Пе Рпе 5ег 580 585 590 зЗег ТНг Маї Рго Аа Тнг Аа Аа 5ег І ви Авр Авп Геи Сп Зег Аг9 бо 595 600 605
Азр Ре Саму Туг Рне Спи Зег ТНг Авп Аа Ре Тнг 5ег Ма! Тиг Спу 610 615 620
Азп Маї Маї Стпу Маї Агу Авп РНе 5ег Сім Авп Аїа Ага Ма! Пе Пе 625 630 635 640
Авр Агу Ріє Спи Ре Пе Рго Маї Тнг Аа Тнг Рне Сі Аа Спи Туг 645 650 655
Азр І єи Сім Ага Аа Сп См Аа Маї Авп Аїа І єи Рпе Тнг Авп ТНг 660 665 670
Азп Рго Аго Ага І єи Гуз Тнг Спу Ма! Тниг Ар Туг Ніз Пе Авр Сі 675 680 685 ма! Зег Авп І еи Маї Аа Суз І єи Зег Азр Си Рне Суз І єи Азр Си 690 695 700
Гуз Агу Сі І еи Ї ви Спи Гуз Маї Гуз Туг Аа Гуз Ага І єи Зег А5р 705 710 715 720
Зо
Сім Ага Авп ГГ еи ГГ еи Сп Авр Рго Авзп РНе ТНг Зег Пе Авп Гуз Сп 725 730 735
Рго Авр Ре Пе 5ег ТНг Авп Сім С1п б5ег Азп Рпе ТНг 5ег Пе Ніб 740 745 750 сій іп бег Спи Ні Спу Тгтр Тр Спу Зег Спи Авп Пе ТАг Пе Сп 755 760 765 сій сіу Авп Авр Маї РНеє Гуз Сім Авп Туг Маї ТАг Гей Рго СІу ТНг 770 775 780
Туг Авзп Си Суз Туг Рго ТНиг ТугІ єи Туг Сп Гув Пе СПу Спи Зег 785 790 795 800
Сі Г еи Гуз Аа Туг Тиг Аго Туг Сп Гей Агу Сіу Туг Пе СіПм Ар 805 810 815 зег Сп Авр І ви Сім Пе Туг І еи Пе Аго Туг Авп Аа Гуз Ні Си 820 825 830
Тиг Геи Авр Маї Рго Спу Тиг Спи Зег Маї Тгр Рго І єи 5ег Ма! Спи бо 835 840 845 зЗег Рго Іе Агу Ага Суз Сіу Си Рго Авп Аг Суз Аа Рго Ні Рпе 850 855 860
Сім Тер Авзп Рго Авр І єи Авр Суз 5ег Сувз Агу Авр Сіу Спи Гуз Суз 865 870 875 880
Аа Нів Нів 5ег Нів Ні РНне 5ег І ей Авр Пе Авр Маї Спіу Сув Пе 885 890 895
Азр Геи Нів Сім Авп І еи Су Маї Тгр Маї Маї Ре Гуз Пе Гув ТНг 900 905 910
Сіп Спи Су Ні Аа Ага І єи Спу Авп ГГ еи Си РНе Пе Спи Спи Гув 915 920 925
Рго І єи І єи Спу Сім Айа І єи бег Ага Маї Гуз Агу Аа Сі ГГ уз І ув 930 935 940
Тр Агу Авр Гуз Аг Сім Гуз Гей Сп Гей Сім Те Гуз Аг Маї Туг 945 950 955 960
Зо
Тниг сім Аа Гуз Сім Аа Маї Ар Аїа І єи РНе Маї Авр 5ег СіІп Туг 965 970 975
Азр Ага ГГ еи Сп Аа Азр Тнг Авп Пе Спу Меї Пе Ні Аїа Аа Азр 980 985 990
Гуз Геи Маї Ніз Аг Іе Ага Сім Аа Туг І єи бег Спи ГІ еи 5ег Маї 995 1000 1005
Пе Рго Сіпу Маї Авп Аа Сіи Пе Рпе Спи Сіи Гей Спи СПу Аго 1010 1015 1020
Пе Пе ТнНг Аа Іе Зегі єи Туг Авр Аїа Агу Азп Маї Маї Гуз 1025 1030 1035
Ап Сіу Авр РНе Азп Авп ау І єм Аа Суз Ттр Азп Маї Гуз Спу 1040 1045 1050
Ніз Ма! Азр Маї Сіп Сп 5ег Нів Ні Агу 5ег Маї ГІ еи Ма! Пе 1055 1060 1065
Рго Си Тгр Сіш Аа Спи Ма! 5ег Сіп АІа Ма! Ак Маї Суз Рго бо 1070 1075 1080
Сіу Агд сту Туг Пе Геи Агу Маї Тнг Аа Туг Гуз Спи СПУ Туг 1085 1090 1095
Спіу Сіши Спу Суз Ма! Тиг Ше Ні Спи Пе Сіи Авп. Авп ТНг Авр 1100 1105 1110 сій ей Гуз Ріє Гуз Авп Суз. Спи СІ Спи СТІ Ма! Туг Рго ТНг 1115 1120 1125
Азр Тиг сапу Тиг Суз Авп Азр Туг ТНг Аа Ні Сіп. Спу ТНг Аа 1130 1135 1140
Аа Сув Авп 5ег Ага Ав5п Аа Стіу Туг СПи Ав5р Аа Туг Спи Маї 1145 1150 1155
Азр Тиг ТНг Айва бег Ма! Азп Туг Гуз Рго ТНг Туг Спи спи СТИ 1160 1165 1170
Тиг Туг. Тнг Авр Маї Агу Агу Авр Авп Ні Су Спи Туг Ар Ага 1175 1180 1185
Зо
Сіу Туг Маї Авп Туг Рго Рго І єи Рго Аа Спу Туг Маї ТАиг Гув 1190 1195 1200 сій Сей Спи Туг Рпе Рго Спи Тпг Азр Гуз Маї Ттр Пе Сім Гей 1205 1210 1215
Сіу Сіи ТАг Спи СПу ТАг Ре І єи Маї Авр бег Пе Спи ей Ї єи 1220 1225 1230
Ї еи Меї. Сім Спи 1235 «2105» 4А «2115 715 «212» Білок 213» Штучна послідовність «220» «223» Мутантний білок ВТ-0022. «4005» 44
Меї Гуз бег І ув Азп Сп Азп Меї Нів Сіп 5ег І єи бЗег Азп Азп Аїа 1 5 10 15 60
ТНг Маї Азр Гуз Азп РНе Тнг Сіпу бег І єи Спи Авп Азп ТНг Авзп ТАг 20 25 0) сій Гей Сп Авп Ріє Авп Ні Спи Спу Пе Спи Рго Рне Маї 5ег Маї 35 40 45 зег ТП Пе Сіп Ти Спу Пе Су Пе Аїа Стпу Гуз Пе Геи Сіу Авп 50 55 60
Ї ви Спу Маї Рго РНе Аїа Сіу Сіп Маї Аа 5ег І еи Туг Зег РНе Пе 65 70 75 80
Ї еєи Сіу См І єи Тер Рго Гуз Стпу Гуз Зег СіІп Ттр Спи Пе Рне Меї 85 90 95
Сім Ні Маї Спи См Ге Пе Авп ап Гуз Пе Зег ТНг Туг Аіа Аг9 100 105 110
Авзп Гуз Аа І єи Аа Азр І єи Гуз Стпу Геи Спу Авр Аа І єи Аа Маї 115 120 125
Туг Ніз Спи Зег І еи Спи Бег Тгр Пе Гуз Авп Ага Авп Авп ТАг Ага 130 135 140
Тпиг Агу 5ег Маї Ма! Гуз Зег Сп Туг Пе ТНг І еи Спи Геи Меї Ріе 145 150 155 160
З5 маї Сп 5ег Гей Рго 5ег Рне Аїа Маї 5ег Спу СП Сім Маї Рго І єи 165 170 175
Ї еи Рго Іе Туг Аа Сіп Айа Аїа Авт І єи Ніз І еи І єи І єи І еи Ага 180 185 190
Ар Аа 5ег Пе РНеє Су І уз Спи Тр Сіу І еи 5ег Азр 5ег Сім Пе 195 200 205 зЗег ТНг Рпеє Туг Авп Ага аСіп Маї Спи Агу ТАг Зег Азр Туг Зег А5р 210 215 220
Ні Суз Тпг Гуз Тгтр Рпе Ар ТАг Су І єи Авп Аго Гей Гуз Спу Зег 225 230 235 240
Азп Аїа Сі Пе Тгтр Ма! Гуз Туг Авп Сп РНе Агу Ага Азвр Меї ТНг 245 250 255 60
Ї еи Меї Маї! І еи Авр ГГ еи Маї Аа ГІ єи Ре Сип 5ег Туг Авр ТиАг Нів 260 265 270
Меї Туг Рго Пе Гуз Тнг Тниг Аїа Сіп І єи Тиг Ага Сім Маї Туг ТНг 275 280 285
Азп Аа Пе Спіу Тнг Маї Нів Рго Ні Рго 5ег РНе Тнг Зег ТНг ТНг 290 295 00
Тер Туг Авп Авп Авп Аа Рго 5ег РНе 5ег Аїа Іе Спи Аа Аїа Маї 305 з10 315 320
Пе Аго Зег Рго Нізв І еи І єи А5р Ре Геи Спи Сіп Ма! ТНиг Пе Туг 325 330 335 зегі ви Геи Зег Агу Тр Зег Азп Тпг Сп Туг Меї Азп Меї Тгтр Спу 340 345 350
Сіу Ні Гуз Г еи Спи Ре Ага ТАг Пе Спу Сіу Ти ГГ еи Авп ТНг Зег 355 360 365
Тиг ап Спу Зег ТНг Авп ТНг 5ег Пе Авп Рго Маї Тнг Геи Рго Рпе 370 375 380
Тпиг Зег Агу Авр Пе Туг Агу Тиг Спи Зег І єи Аа Сту І ви Авп Гей 385 390 395 400
З5
Рпє ГГ еи Тиг Сп Рго Маї Авп Сіу Маї Рго Ага Маї Ар Рне Ні Ттр 405 до 415
Гуз РНе Маї Тнг Ні Рго Іе Аа Зег Авр Авзп Ре Туг Туг Рго Силу 420 425 430
Туг АІа Стпу Пе Спу Тк Сп Ї єи Сп Авр 5ег Сіи Авп Спи Гей Рго 435 440 445
Рго Спи Тик Тнг Слпу Сп Рго Авп Туг Спи Зег Туг 5ег Ніз Агу ГІ єи 450 455 460 зег Нів Пе Спу Геи Пе 5ег Аа 5ег Ніз Ма! Гуз Аа І єи Ма! Туг 465 470 475 480 зЗег Пр ТНг Ні Ага 5ег Аа Азр Аго Тиг Авп Тпг Пе Нів Зег Азр 485 490 495 60 зег Пе ТАг Сп Пе Рго ГІ єм Маї Гуз Айа Нів ТАг ГГ еи Сіп Зег Спу 500 505 510
Тпиг Тиг Маї Ма! Гуз Спу Рго Спіу Рпе Тиг Спу Спу Азр Пе Ге Ага 515 520 525
Агу Тиг Зег Спу Спу Рго Рне Аїа РНе 5ег Авп Маї Авп І єи Авр Тр 530 535 540
Ап Гей Зег Сп Аго Туг Агу Аа Ага Іе Ага Туг Аіа Зег Тит ТНг 545 550 555 560
Азп Гей Аг Меї Туг Ма! Тнг Пе Аа Спіу Сім Агу Пе РНе Аїа Су 565 570 575
Сіп Ре Авп Гуз Тиг Меї Авп Тиг Спу Авр Рго І єи Тиг РНе Сіп Зег 580 585 590
Рпеє 5ег Туг Ага ТАг Пе Ар ТиАг Аа РНне Тиг Рне Рго Тнг Гуз Аа 595 (100) 605 зЗег ЗегІ еи Тниг Ма! Сіу Аа Ар ТНг Ре 5ег 5ег Спу Азп Сі Маї 610 615 620
Туг Маї Азр Агу РНе Си І єи Пе Рго Маї ТАг Аа Тнг І ви Спи Аа 625 630 635 640
З5 маї Тиг Азвр І еи Сім Аго Аїа Сп Гуз Аа Маї Ні5 Сти І еи Рпе ТНг 645 650 655 зЗег ТНг Азп Рго Спу Спу І еи Гуз Тиг Авр Маї Аїа Гуз Авр Нів Туг 660 665 670
Тпиг Авп ТАг ГГ еи Зег Гуз 5ег Маї Сип 5ег Ма! Рпє Агу Суз Агу Сув 675 680 685 зЗег Си Ага ТНг Ага Г єи Туг Ага Ттр Сіу Туг Рго Зег Гуз Гув Си 690 695 700
Туг Ттр Тупе Ттр Стпу Туг Тиг Зег Гуз Туг 705 710 715 «2105» 45 «2115» 1094 «212» Білок 60 -213» Штвтучна послідовність
«223» Мутантний білок ВТ-0027. «400» 45
Меї Рне І ви Спи Сип Пе СПи Сп Гей Пе Авр Сп Аго Пе Спи Тйг 1 5 10 15 маї Сім Ага Авп Аг Аїа Іе Сп Тиг І еи Пе Сіу Геи 5ег Авп 5ег 20 25 0)
Туг Авр Маї Тут Пе Сі Аїа І єи Гуз Спи Тр Сім Авп Авп Рго Авр 35 40 45
Азп Зег Аа бег Сп Сім Аго Маї Агу Авп Агу Ре Аг ТНг Тит Ар 50 55 бо
Азр Аа І єи Пе Тниг Спу Пе Рго Г еи І єи Аа Пе Рго Азп РНе Си 65 70 75 80
Пе Аа ТНг І єи Зег Ма! Туг Маї Сіп Аа Аа Авп Гей Нів Г еи Зег 85 90 95
Зо
Ї еи Г єи Агу Авр Аїйа Маї Рне РНе Сіу Сім Ага Тгтр Су Г еи Тиг Сп 100 105 110
Ме Азп Маї Ар Ар І єи Туг Агу Ага І ви Тпг Азп Авп Пе Агу Авп 115 120 125
Туг Зег Ар Ні Суз Аа Ага Тр Туг Азп Сім СПу Гей Авр Авп Пе 130 135 140
Зег Спу І єи Зег Агу 5ег Пе Азп РНе Сп Агу Сім Маї ТНг Пе 5ег 145 150 155 160
Ма! І еи Ар Пе Маї Аа І ви Ре Рго Азп Туг Азр Пе Аг Тиг Туг 165 170 175
Рго Пе Зег Тк Тиг 5ег Сп Геи ТАг Агу Спи Пе Рпе Тнг Зег Рго 180 185 190
Пе Маї Маї Рго Авзп Ар Ре 5ег Маї Аа Туг Сіи Спу Маї Ага Ага 195 200 205
Аа Рго Нів І єи Ре Спи Ре Г єи Сім Гуз І еи Ма! Пе Туг ТАг Спу бо 210 215 220
Азр Агу 5ег Сіу Пе Аг Ні Тгр Аа Стпу Ні Спи Пе ТНг Зег Аг9 225 230 235 240
Аг Тиг Авр Зег Туг Ніз Спу Пе Пе Аго Туг Рго Геи Туг Спу ТНг 245 250 255
Аа Аа Авп Аа Сім Зег Рго Туг ТНг І єи Аа І єи Сип Рго Зег Си 260 265 270 зег Пе Туг Агу Тиг ГГ еи Зег Си Рго Пе Рпе 5ег Сп Тиг Спу Спу 275 280 285
Ї еи бег Рго Ні Ага Агу Ага Маї Ма! Сіш Спу Ма! Спи Рне 5ег Пе 290 295 00 маї Авп Азп Авп Маї Авп Рго 5ег Зег Рпє Маї Туг Агу Ага Гуз Спу 305 з10 315 з20 зег І ви Азр 5ег Рпе Тпг Сім Гей Рго Рго Сіи Авр Сіи Зег Ма! Рго 325 330 335
Зо
Рго Туг Пе Спу Туг Зег Ні Сіп Геи Суз Нів Ма! Сіу Рне Сіпу Агд 340 345 350
Тпиг Авп Ма! Пе Рпє Спи Рго Зег Авп РНеє Аїа Аго Маї Рго Ма! Рпе 355 360 365 зЗег Пр ТНг Ні Ага 5ег Аа ТНг Рго Тнг Авп ТиНг Пе Авр Рго Азр 370 375 380
Ага Пе Тниг ап Пе Рго 5ег Маї Гуз Аа 5ег Зег І еи Агу Авп 5ег 385 390 395 400
ТНг Маї Маї Зег Спу Рго Сіу Рне Тиг Спіу Спу Авр Пе Маї Агу Меї 405 а410 415
Су Аїа Маї Ніз Сип Пе Туг Аа ТНг Авр Геи Зег Меї Авп Маї Ага 420 425 430
Рго 5ег Маї Аа І єи 5ег Ага Туг І еи Пе Ага І еи Ага Туг Аіа Су 435 440 445
Агоу Счпу Зег Зег Азп Іе Маї Пе Нів Спу Рго Зег Пе Агу РНе Маї бо 450 455 460 зег І ви Рго Зег Тит Меї Зег Азп Авр Си Рго ГІ еи Тиг Туг Сп Зег 465 470 475 480
Рпє Аго Туг Аа 5ег Пе Тиг Тнг Рго Пе Тнг Ага Рго Іе Туг Авп 485 490 495
Меї Рне Авт І єи Зег Пе 5ег Ага Пе 5ег СПу Ма! Сіп Авп І єи Рпе 500 505 510
Пе Азр Ага Пе Сіши РНе Іе Рго Маї Авр Аа Азп РНе Сім Аа Спи 515 520 525
Аг9 Азвр І єи Сім Аг Айа Сп ГІ уз Аїа Маї Авп Аа І еи РНе ТАг Зег 530 535 540
Тпиг Авп Сп Агу Су Гей Гуз Пе Ар Маї Тиг Авр Туг Нів Пе Азр 545 550 555 560
Сп Маї Зег Авп І еи Маї Азр Суз І єи бег Азр Сім Рне Суз І єи Ар 565 570 575
Зо
Сім Гуз Ага Сім Гей Зег Спи І уз Зег ГГ уз Нів Аа Гуз Аго І еи 5ег 580 585 590
Азр Сли Агу Авп Гей І ви Сп Авр Гей Авп Ре Гуз Авр Пе Авп Аг9 595 600 605
Сіп Рго Спи Ага СПУ Ттр Зег Сіу Зег ТАг Спу Пе ТНг Пе Сп Спу 610 615 620
Сіу Азр Ар Маї Рне Гуз Сім Авп Туг Ма! Тниг І єи Рго Спіу Тиг Рпе 625 630 635 640
Азр Спи Суз Туг Рго ТАг Туг ГГ еи Туг Сп Гуз Пе Авр Сім Зег Гуз 645 650 655
Ї еи Гуз Аа Туг ТАг Аг Туг Сп І еи Агу Спу Тук Пе СтПи Авр Бег 660 665 670
Сіп Авр І єи Спи Пе Туг І єи Пе Агу Туг Авп Аїа Гуз Ні Спи ТНг 675 680 685 маї Авп Маї Рго Спу Зег Спу Зег Геи Тгр Рго І єи Зег Ма! Спи 5ег бо 690 695 700 зЗег Ма! Спу Гуз Сув Спу Спи Рго Авп Агу Суз Аа бег Агу Меї Спи 705 710 715 720
Тер Авп Рго Азр І єи Азр Суз 5ег Сувз Агу Авр Спу Сі І уз Суз Аа 725 730 735
Нів Ні 5ег Ні Ні Рне 5ег І єи Авр ІПе Азр Ма! Спу Суз ТНг Ар 740 745 750
Ї еи Авзп Си Авр Геи Су Маї Тр Ма! Пе РНе Гуз Пе Гуз ТНг Сп 755 760 765
Азр Су Нів Айа Гуз Пе Спу Авп І ви Сім РНе І єи Гуз Спи Гуз І еи 770 775 780
Ї еи Г еи Сіпу Сім Айа І єи Аїа Аг Маї Гуз Гуз Аа Спи Гуз Гуз Ттр 785 790 795 800
Агу Авр Гуз Агу Авр Гуз І еи Спи Тр Си ТАг Азп Маї Маї Туг Гуз 805 810 815
Зо
Сім Айа Гуз Спи Зег Маї Авр Аа І єи РНе Маї Авр 5ег Сп Туг Зег 820 825 830
Ага І еи Сп Аа Авр Тиг Авп ЇІе Аа Ме! Пе Ні Аа Аїа Азвр Гуз 835 840 845
Аг Маї Ніз Ага Іе Ага Сі Аа Туг Геи Рго Си І єи Тиг Маї Пе 850 855 860
Рго Сіу Маї Азп Аа 5ег Пе Рне Спи Спи Гей СТІши Спу Агу Пе Рпє 865 870 875 880
Тиг Ада Туг Зег І єи Туг Сіу Аа Ага Авп Маї Пе Гуз Авп Спу Авр 885 890 895
Рпе Авп Авп ау І єи бег Суз Тгр Авп Маї Гуз Спу Ні Ма! Сіи Маї 900 905 910
Сіп Сп Пе Нів Ніз Агу Зег Маї І єи Маї Маї Рго Зег Тр Гу ТНг 915 920 925
Спи Маї Зег СіІп Сіш Ма! Суз Ма! Суз Рго Сіу Агу Спу Туг Пе І ей бо 930 935 940
Аго Ма! Тниг Ага Туг Гуз Спи Сту Туг Сіу Сіи Спу Авп Маї Тиг Пе 945 950 955 960
Ніз Спи Пе Сіи Авзп Авп ТНг Авр Си Гей Гув РНне Ага Азп Суз Сім 965 970 975 сій си си Маї Тук Рго Авп Авп ТНг Маї Тниг Суз Авп Азвр Туг ТНг 980 985 990 маї Авп Сп Си Си Тугі ув Счу Тег Су Тнг Зег Агу Авп Ага спу 995 1000 1005
Туг Азр Си Зег Туг Сі Зег 5Бег бег Зег Сіи Зег Аа Туг Туг 1010 1015 1020
Аа бЗег Ма! Туг Сім Сіи Гуз СТу Туг Ти Азр Спу Агу Агу Си 1025 1030 1035
А5піІеи Суз Сіи Рне Авп Агу Сіу Туг Сіу Азр Тут ТНг Зег Пе 1040 1045 1050
Зо
Рго Тнг Аїа Туг Ма! Тиг Гуз Спи Геи СПи Туг Рне Рго Сім ТНг 1055 1060 1065
Авр Гуз Маї Ттр Пе Сі Її еи Спіу Спи Тк Спи Спіу Аа Ре Пе 1070 1075 1080
Ї еи Азр Зег Ма! Спи Геи Гей Гей Меї Спи Спи 1085 1090 «2105» 46 «2115» 1169 «212» Білок -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Мутантний білок ВТ-0029. «4005» 46
Меї Спи Пе Авп Авп ап Авп Сп Суз Маї Рго Туг Авп Суз І єи Авп 1 5 10 15
Азп Рго Спи Зег Сім Пе Геи Авп Маї Аа Пе РНе 5ег Зег Сіи Сп 20 25 0) (516)
маї Аа Сіш Пе Нів І еи Гуз Пе ТНг Аго ГІ еи Пе Геи Сім Авп Ріе 35 40 45
Ї еи Рго Сіу Спу бЗег Ріє Аа Рне Сту ГГ еи Рпє Азвр ГГ еи Пе Тгтр Спу 50 55 бо
Пе Рпе Авп Сти Авр ап Тр 5ег Аа Ре І єи Аг Сіп Маї Сум Спи 65 70 75 80
Ї ем Пе Авп ап Ага Пе Тниг Спи Ре Аїа Аго Сіу Сіп Аа Пе Сп 85 90 95
Ага ГГ еи Ма! Спу Ріє Сту Аго Зег Туг Авр Сім Тут Пе ГГ еи Аа І єи 100 105 110
Гуз Спи Ттр Сім Авп Авр Рго Авр Авп Рго Аа 5ег І уз Сіши Агу Маї 115 120 125
Аг Тиг Агу Ріє Аго Тпг Тнг Авр Авр Аа І єи Гей Тнг Стпу Маї Рго 130 135 140
Ї еи Меї Аа Пе Рго Сіу Рпє Си І єи Аа ТиАг І єи 5ег Маї Туг Аа 145 150 155 160
Сп бег Аа Авп І еи Ніз І еи Ада І ей І еи Ага Авр Аа Маї Рне Рнеє 165 170 175
З5 сСіу Спи Агу Тгтр Су І еи ТАг Сп ТАг Авп Пе Азп Авр Гей Туг Зег 180 185 190
Ага ГГ еи Гуз Авп з5ег Іе Агу Авр Туг ТНг Авп Ні Су Маї Ага Рпе 195 200 205
Туг Авп Пе Сіу І еи СПу Авп ГГ еи Авп Маї Пе Агу Рго Сім Туг Туг 210 215 220
Агу РНе Сп Агу Сім ГГ еи Тнг Пе 5ег Ма! І еи Авр І еи Маї Аа І єи 225 230 235 240
Рпеє Рго Авзп Туг Азвр Іе Аго Тниг Туг Рго Пе Рго ТНг Гуз 5ег Сп 245 250 255
Геи Тиг Аго Си Пе Туг Тиг Авр Рго Пе Пе Зег Рго Стпу Аа Сп 260 265 270 60
Аа Спу Туг Тиг Геи Сп Авр Маї І еи Агу Сім Рго Ніз І єи Меї Азр 275 280 285
Рпє ГІ еи Авп Ага Г єи Пе Пе Туг Тиг Спу Спи Туг Агу Спу Пе Аг9 290 295 00
Ні Тгр Аа Сту Ніз Спи Маї Спи Зег 5ег Агу Тиг Спу Меї Меї ТнНг 305 з10 315 320
Азп Іе Ага Ре Рго ГГ еи Туг Спу ТАг Аїа Аа Тнг Аа Ст Рго ТНг 325 330 335
Агу РНе Іе Тнг Рго Зег Тит Рне Рго Сту Геи Авп І єи РНе Туг Аг9 340 345 350
Тиг Геи Зег Аїа Рго Пе РНе Агу Авр Сім Рго Спу Аа Авп Пе Пе 355 360 365
Пе Агу Туг Агу ТНг Бе" І єи Маї Спи Спіу Ма! Спу Рне Пе Сп Рго 370 375 380
Авп Авп Стпу Спи Сп Гей Туг Ага Маї Агу Сіу ТАг Г еи Авр 5ег ей 0) 385 390 395 400
Ар Сп Гей Рго І ви Спи Сіу Спи бег Зег І єи ТНиг Сім Туг Зег Нів 405 до 415
З5
Аго І єи Суз Ні Маї Ага РНе Аїа Сп 5ег І еи Агу Авп Аа Спи Рго 420 425 430
Ї еи Азр Туг Аа Аго Маї Рго Меї Рне 5ег Тр ТНиг Нів Агу 5ег Аа 435 440 445
Тиг Рго Тнг Авп ТАг Пе Авр Рго Авр Маї Пе Тиг Сп Пе Рго ГІ єи 450 455 460 маї Гуз Аа РНе Авт І єи Ні 5ег Сіу Аа Тнг Пе Ма! Гуз Спу Рго 465 470 475 480
Сіу Рне Тиг Спу Спу Авр Іе ГГ еи Аго Аго Тпг Авзп Маї Сіу Зег Рне 485 490 495
Сіу Азр Меї Ага Маї Авзп Іе Тнг Айа Рго І єи Зег Сп Аго Туг Ага 500 505 510 60
Маї Аг Іе Ага Туг Аа 5ег Тиг ТНг Авр І єи Сп Рпє Туг ТАг Авп 515 520 525
Пе Авп сту ТАг ТАг Пе Авп Пе СПу Авп РНе 5ег Зег ТАИг Меї А5р 530 535 540 зЗег Сіу Авр Авр І єи СіІп Туг Спу Агу РНе Аго Маї Аїіа Спу Ре Тиг 545 550 555 560
Тиг Рго Рпе Тит РНе 5ег Авр Аа Меї Зег ТНг Рпе Тнг Пе Спу Аіа 565 570 575
Рпе 5ег РНе Зег Зег Авп Азп Спи Маї Туг Пе Азр Аго Пе Спи Ріе 580 585 590 маї Рго Аа Сі Маї Тнк Рне Сім Айїа Спи Туг Азвр І єи Си І уз Аа 595 600 605
Сіп Гуз АЇа Маї Авп Аа І єи Ре Тнг 5ег Зег Авп Сп Пе Су І еи 610 615 620
Гуз Тнг Авр Маї Тнг Авр Туг Ніз Іе Авр Гуз Маї Зег Авп І еи Маї 625 630 635 640
Сім Суз І єи Зег Авр Сім РНе Суз І еи Азр Спи І уз Агу Сім І єи бег 645 650 655
З5
Сі Гуз Маї Гуз Нів Айа І уз Ага І еи Сувз Авр Сім Ага Авп Гени Ї єи 660 665 670
Сіп Авр Рго Азп РНе Аго Су Пе Авп Ага Сп Рго Авр Аго Сапу Ттр 675 680 685
Агоу Стпу Зег Тиг Ар Пе ТАг Пе Сіп Сіу Спу Азр Авр Маї Ре Гуз 690 695 700
Сі Авп Туг Маї ТАг І еи Рго Спу ТАг Рпе Авр Сіи Суз Туг Рго ТНг 705 710 715 720
ТугГеи Туг ап Гуз Пе Авр Си 5ег Гуз Гей Гуз Аа Туг ТНг Агд 725 730 735
Туг ам Геи Аг Стпу Туг Пе Спи Авр 5ег Сп Авр І єи Спи Пе Туг 740 745 750 60
Ї ем Пе Агу Туг Авп Аїа Гуз Ні Спи ТНг Маї Азп Маї Рго СІу ТНг 755 760 765
Сіу Зег І єи Тгр Рго Геи Зег Аа Сп Зег Рго Пе СПу Гуз Сув Спу 770 775 780
Сім Рго Авп Агу Суз Аа Тнг Ніз І єи Сім Тр Авп Рго Авр І єи Ар 785 790 795 800
Сув бег Суз Агу Ар Стпу Спи І ув Суз Аїйа Ні Ні 5ег Нів Ні5 Рпє 805 810 815 зЗег І ей Авр Пе Авр Маї Спу Сув ТНг Азр І еи Авп Сім Авр І ей Спу 820 825 830 маї Тр Ма! Пе Ріє Гуз Пе Гуз Тнг ап Ар Су Нів Ага Ага І еи 835 840 845
Спу Авп І еи Сім РНе Гей Спи Спи Гуз Рго Гей Маї Спу Спиши Аа І ей 850 855 860
Аа Агу Маї Гуз Агу Аа Си Гуз Гуз Ттр Аг Авр Гуз Ага Сі Гув 865 870 875 880
Ї еи Спи І ви Спи ТНг Авп Пе Маї Туг Гуз Спи Аїйа Гуз Гуз Зег Маї 885 890 895
З5
Азр Аа І єи Ріє Маї Авп 5ег Сіп Туг Азр Ага ГГ єи Сп Аа Азр ТНг 900 905 910
Азп Іе Аїа Іе Пе Ні Аа Аїа Авр Гуз Аго Маї Нів Зег Пе Аго 915 920 925
Сім Айа Туг Геи Рго Си І еи Зег Ма! Пе Рго Сіу Маї Авп Айа Аа 930 935 940
Пе Рпе Спи Спи ГГ еи Спи СПу Аго Пе РНе ТАг Аїа Туг Зег І еи Туг 945 950 955 960
Азр Аа Агу Авп Маї Пе Гуз Авп Стпу Авр РНе Авп Авп Су Геи Зег 965 970 975
Суз Тр Азп Маї І уз СіІу Ніз Ма! Азр Маї Спи Спи Сп Авп Авп Нів 980 985 990 60
Агу Зег Маї Геи Маї Маї Рго Сім Тр Сім Аа Сіи Ма! Зег СіІп Спи 995 1000 1005 маї Агу Маї Суз Рго Сіу Агу сСпу Тут Пе Г еи Агу Маї Тнг Аа 1010 1015 1020
ТугГув Спи Спу Туг Сіу Сіи СПу Суз Ма! Тиг Пе Нів Спи Пе 1025 1030 1035 сій Авр Авп ТНг Авр Си Геи Гув Рпе 5ег Азп Сувз Маї Спи Спи 1040 1045 1050
Сіш Ме Туг Рго Авп Азп Тнг Маї Тиг Суз Авп Ар Туг ТАг Аа 1055 1060 1065
Тиг ап спи Сі Туг Стій Сбу ТНг Туг ТАг Зег Агу Авп Агу Спіу 1070 1075 1080
Туг Азр ау Аа Туг Си бег Авзп 5ег Зег Ма! Рго Аїа Азвр Туг 1085 1090 1095
Аа бег Аа Туг СІ Сі ув Аа Туг Тиг Азр Сіу Ага Агу Азр
Ко) 1100 1105 1110
Азп Тиг Суз СИПм Бег Абвп Ага Спу Туг Сіу Авр Туг ТНг Рго Гей 1115 1120 1125
З5
Рго Аіа Сту Туг Ма! Тит Гуз Спи Геи СП Туг Рне Рго Сім ТНг 1130 1135 1140
А5р Гуз Маї Тірієи Спи Пе Спіу Сіи Тк Спи Сіу ТАг РНе Іе 1145 1150 1155 маї Азр з5ег Ма! СіІи Гей Геи Пе Меї Сім Си 1160 1165 «2105» 47 «2115» 1169 «212» Білок -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Мутантний білок ВТ-0020. «4005» 47
Меї Сіи Маї Авп Нів Сіп Азп Спи Суз Маї Рго Туг Азп Суз І єи І ув бо 1 5 10 15
Авп Рго І уз Пе Сіи Меї І еи Авр Пе Спи Спу Пе бег Зег Агу Зег 20 25 Зо
Ага Сіш Сп Маї Аіа Спи Пе 5ег І єи Спу І єи ТАг Ага Рне І ей Ї ви 35 40 45
Сіи Зег І еи І єи Рго Сіу Аа Зег Рпе Сіу Рпе Спу Геи Рне Авр Іе 50 55 60
Пе Тгтр Спіу Ма! Пе Сіу Рго Азр Сп Тгр 5ег І єи РНе Геи ТНиг Сп 65 70 75 80
Пе Сім Стій Г еи Пе Авр Сп Ага Пе Сім Аїа Ніз Ма! Агу Авп Сп 85 90 95
Аа Пе 5ег Агу І еи Спи Спу Ї еи Спу Авр 5ег Туг Сіи Маї Тук Пе 100 105 110
Спи Бег І єи Аг Сім Тгр Сі Аа 5бег Рго Авп Авп Сім 5ег І єи Сп 115 120 125
Зо
Сіп Авр Маї Агу Авп Ага РНе 5ег Азп ТНг Авр Авзп Аа ГГ еи Пе ТНг 130 135 140
Аа Іе Рго Пе Гей Агу Спи Сп Сіу Ре Сім Пе Рго Геи Гей ТНг 145 150 155 160 ма! Туг Ма! Сіп Аа Аа Авп І єи Ніз І єи 5егіІ ей І еи Ага Авр Аа 165 170 175 маї Туг Рпе Сту Сіп Агу Тр Су Геи Авр ТАг Айва Тнг Ма! Авп Авп 180 185 190
Ні Туг Азп Аг І еи Пе Авп І єи Пе Азп ТНг Туг бег Авр Ні Сув 195 200 205
Аа Сіп Тр Рне Авп Аг ау І єи Азр Авп РНе Су Маї Маї Тиг Аа 210 215 220
Ага Туг Гей Авр Рнє СіІп Агу Сім Маї Тнг Пе 5ег Маї І єи Авр Пе 225 230 235 240 маї Айа І єи РНе Рго Авп Туг Авр Іе Аго Тиг Туг Рго Пе Сіп ТНг бо 245 250 255
Ї еи Зег Сп Геи Тнг Ага Сім Пе Туг ТНг Зег Рго Маї Аа Спи Рго 260 265 270
Сіу Аїа 5ег І еи Авп Маї Авр І ви Агу Авп Пе І єи Ага Си Рго Ніб 275 280 285
Ї еи Меї А5р Ре Геи ТНг Ага ГІ єи Ма! Пе Тук Тиг Спцу Ма! Сп Спу 290 295 00
Су Пе Туг Ні Тгр Аа Сту Ні Спи Пе Зег Зег Агу Тиг Тиг Спу 305 з10 315 320
Авп Гей Зег Зег Авп Іе Сіп Ре Рго І ви Туг Су ТАг Зег Аа Ап 325 330 335
Аа Авр Агу Рго РнНе Ав І! єи Аїа Іе Ні Туг Зег Спи ТАг Пе Туг 340 345 350
Аг Тиг ГГ еи Зег Аа Рго Пе Туг бег Ма! Зег Сіу Сіу Пе Зег Рго 355 360 365
Зо
Азп Агу ТНг Ага Аа Маї Спи Спу Ма! Ага РнНе І єи Тнг АЇа Агу Авр 370 375 380
Авп Авп Гей Авп 5ег І єи Рго РНе Геи Туг Агу Гуз Спи СПу Зег І еи 385 390 395 400
Азр Зег Рпе Тиг Сім Геи Рго Рго Сіи Авр Спи Авп Сім Рго Рго Туг 405 до 415
Пе Сну Туг Зег Ні Аго І єи Суз Нів Аа Ага РнНе Аїа Агу 5ег Зег 420 425 430 маї Ма! І еи Спи Рго Зег Ап Рне Аїа Ага Іе Рго Маї Рне з5ег Ттр 435 440 445
Тиг Ні Агу 5ег Аа Спу Рго Тнг Авп Сім Маї Зег бег Зег Ага Пе 450 455 460
Тпиг Сп Пе Рго Тгр Маї Гуз Ага Ні ТАг І єи Авр 5ег Сіу Аіа Рпе 465 470 475 480 ма! Ме Гуз Спу Рго Спіу Рпе Тиг Спіу Спу Ар Пе Гей Тнг Агу Рго бо 485 490 495
Азп Гей Спу Тиг ГГ єи слу Аа Г еи Ага Маї Тиг Геи ТАиг Спу Сп І є 500 505 510
Рго Сп Тнг Туг Азп Пе Аг Іе Аго Туг Аа 5ег Пе Аа Авп Ага 515 520 525 сСіу Спу Тит ГГ еи Пе РНе 5ег Сп Рго Рго 5ег Туг Спіу Геи Тиг Рпе 530 535 540
Рго Гуз Тит Меї Азвр Іе Авр Си Рго І єи Тниг 5ег Ага 5ег РНе Аа 545 550 555 560
Агу Тиг Тиг Гей Ре ТАг Рго Пе Ти Ре Тнг Сіп Аа Сп Аіа Спи 565 570 575
Ї еи Авп Г єи Тпг Пе Сіп Сп сту Ма! Туг Пе Азр Ага Пе Спи Рпе 580 585 590
Пе Рго Маї Авп Аа Тниг Рне Сти Аїа Сіи Туг Авр Геи Спи Агу Аа 595 600 605
Зо
Сіп Гуз Аїа Маї Авп Аа І єи Ре Тнг 5ег Зег Авп Сп І ви Спу Гей 610 615 620
Гуз Тнг Авр Г еи Тнг Ар Туг Нів Пе Ар Сп Маї Зег Авп ГГ еи Маї 625 630 635 640
Ар Суз І єи бег Азр Спи Рпє Суз Пе Авр Спи І уз Агу Сім І єи бег 645 650 655
Сім Гуз Маї Гуз Нів Айа І уз Ага І еи Зег Авр Сім Агу Авп Ге Ї ви 660 665 670
Сіп Авр бег Азп РНе Аго Су Пе Авзп Ага Сп Рго Авр Аго Сапу Ттр 675 680 685
Агоу Стпу Зег Тиг Ар Пе ТАг Пе Сіп Сіу Спу Азп Авр Маї Ре Гуз 690 695 700
Сі Авп Туг Маї ТАг І еи Рго Спу ТАг Рпе Авр Сіи Суз Туг Рго ТНг 705 710 715 720
ТУПІ єи Туг Сп Гуз Пе Авр Сім 5ег І уз І еи І уз АІа Тут ТНг Агу бо 725 730 735
Туг ап Ге Агу сту Туг Пе Спи Авр 5ег Сп Авр І єи Спи Пе Туг 740 745 750
Ї ем Пе Агу Туг Авп Аїа Гуз Ні Спи ТНг Маї Авзп Маї Рго Спіу ТНг 755 760 765
Сіу Зег І єи Тгр Рго Геи Зег Маї Спи Зег Рго Пе СПу Гуз Сув Спу 770 775 780
Сім Рго Авп Агу Суз Маї Рго Сп І еи Спи Тур Авп 5ег Авп І єи Ав5р 785 790 795 800
Сув бег Суз Агу Ар Стпу Спи І ув Суз Аїйа Ні Ні 5ег Нів Ні5 Рпє 805 810 815 зег І ви Азр Іе Ар Маї Сіу Суз ТНАг Авр І єи Ні Авр Авр ГГ еи Спу 820 825 830 маї Тр Ма! Пе Ріє Гуз Пе Гуз Тнг ап Ар Су Нів Ага Агу І єи 835 840 845
Зо
Спу Авп І еи Сім РНе Гей Си Спи ГГ ув Рго І єи Ма! Спу Сім Аа І єи 850 855 860
Аа Агу Маї Гуз Агу Аа Си Гуз Гуз Ттр Агу Авр Гуз Ага Сім ТНг 865 870 875 880
Ї еи Сп І єи Спи ТНг Авп Пе Маї Туг Гуз См Аа Гуз Спи Зег Маї 885 890 895
Азр Аа І єи Ріє Аа Авп 5ег Сіп Туг Азп Ага Геи Сп Аа Авр ТНг 900 905 910
Авп Іе Аа Меї Іе Ні Аа Аа Азр Гуз Агу Маї Ні Ага Іе Аг9 915 920 925
Сім Айа Туг Геи Рго Си І еи Зег Ма! Пе Рго Стпу Ма! Авп Аа Спу 930 935 940
Пе Рпе Спи Спи Гей Сти СПу Аго Пе РНе ТАг Аа РНе з5ег ГГ еи Туг 945 950 955 960
Азр Аа Агу Авп Маї Пе Гуз Авп 5ег Авр Рпе Авп Авп ау Геи 5ег бо 965 970 975
Суз Тр Азп Маї І уз СіІу Ніз Маї Азр Пе Сіи Спи Стій Авп Авп Нів 980 985 990
Ага 5ег Ма! І єи Маї Ма! Рго Сіи Тгр Си Аа Сіи Ма! Зег СіІп І ув 995 1000 1005 маї Ні Маї Сув Рго Спіу Ага аСпу Туг Пе І єи Агу Маї Тнг Аа 1010 1015 1020
ТугГув Сі Спіу Тут Су Сім СтІу Сувз Маї Тит Ше Нів Спи Пе 1025 1030 1035 сій Авр Ні ТНг Ар См Гей Гув РНе Ага Ап Суз. Спи Сім Ар 1040 1045 1050
Сім Ма! Тук Рго Авп Авп Тниг Аг ТНг Суз Авп Аа Туг Рго Аа 1055 1060 1065
Авзр Сип Спи Сіу Туг Пи сту Аа Суз ТНг Зег Агу Авп Агу Сіу 1070 1075 1080
Зо
Туг Азр Си Маї Туг Спу Абп. ТНг Рго 5ег ГГ еи Рго Аїа Азвр Туг 1085 1090 1095
Аа Рго Іе Туг Спи Спи Авзп Аа Туг Тиг Азр Спу Агу Аг Сіу 1100 1105 1110
Авп Ріо Суз Си бег Зег Агу Спіу Туг СІу Азр Тут ТНг Рго І єи 1115 1120 1125
Рго Аіа Сну Туг Сіи Тиг Гуз Спи Гей Си Туг Рпе Рго Сіи ТНг 1130 1135 1140
Азр Тиг Маї Ттр Пе Гуз Геи Спу Спи Тиг Спи СПу Тиг Ре Пе 1145 1150 1155 маї Азр з5ег Ма! СіІи Гей Геи Пе Меї Сім Си 1160 1165 «2105» 48 «2115 719 «212» Білок -213» Штвтучна послідовність бо «220»
«223» Мутантний білок ВТ-0031. «4005» 48
Меї Гуз І єи Гуз Авп Рго Азр І уз Нів Сіп бег І єи бег Зег Авп Аа 1 5 10 15
Гуз Маї Азвр Гуз Іе Аа Тниг Авр 5ег І єи Гуз Авп Спи ТНиг Авр Іе 20 25 0) сій Гей Гу5 Авзп Меї Авп Авзп Си Авр Туг Геи Агу Меї Зег Сім Нів 35 40 45 сін Зег Пе Авр Рго РНе Маї 5ег Аа Зег ТАг Пе Сип Тк Спу Пе 50 55 бо
СУ Пе Аїа Сту Гуз Пе Геи Спіу ТНиг Геи Спу Маї Рго Рне Аа Сіу 65 70 75 80
Сп Пе Аїа 5ег Геи Туг Зег РНе Іе Геи Спіу Спи Гей Тгр Рго Гув 85 90 95
Спу Гуз Зег Сп Тгр Си Пе Рне Меї Сіи Ні Маї Спи Спи Пе Пе 100 105 110
Азп ап Гуз Пе Геи Тиг Туг Аа Агу Ав І уз Аа І єи 5ег Авр І єи 115 120 125
З5
Агу Сту Геи Сіпу Авр Аа Геи Аїа Маї Туг Ніз СПми Зег І еи Спи Бег 130 135 140
Тр Ма! Гуз Авп Агу Авп Авп ТНг Ага Аїа Ага 5ег Маї Ма! Гув Авп 145 150 155 160
Сіп Туг Пе Аа Г еи Спи І еи Меї РНе Маї ап Гуз ГІ еи Рго Зег Рпе 165 170 175
Аа Ма! Зег Сіу Спи Спи Маї Рго І еи І еи Рго Іе Туг Аа Сп Аа 180 185 190
Аа Авп І єм Нів І єи І єи І си І еи Агу Авр Аа 5ег Пе РНе Су І ув 195 200 205
Сім Тер Су Г еи 5ег Аа Зег Сти Пе Зег ТАг РНе Туг Авп Агу Сіп 210 215 220 60 маї Сім Ага Тнг Аго Авр Туг Зег Авр Ні Суз Маї Гуз Тр Туг Авп 225 230 235 240
Тиг ану Геи Авп Авп ГГ еи Агу Су ТАг Авп Аа Гуз 5ег Тгр Маї Ага 245 250 255
Туг Авп СіІп Ре Ага Гуз Авр Меї ТнНг І єи Меї Маї Гей Азр ГГ еи Маї 260 265 270
Аа Гей Ре Рго 5ег Туг Авр ТАг І єи Маї Туг Рго Пе Гуз Тк ТнНг 275 280 285 зег Сп Гей Тниг Агу Си Маї Туг ТНг Авр Аа Пе Сіу Тиг Ма! Нів 290 295 100)
Рго Зег Сіу Аа Маї Аа 5ег Тиг ТАг Тгр Туг Авп Авп Авп Аа Рго 305 з10 315 320 зЗег Ре 5ег Тпг Пе Спи Аа Аа Маї Маї Агу Авп Рго Нів Г еи І єи 325 330 335
Азр Ре ГГ еи Сім Сп Ма! Тк Пе Туг Зег І еи Геи 5ег Ага Тр 5ег 340 345 350
Азп Тпиг Сп Туг Меї Азп Меї Тгр Стпу Су Ні Гуз Геи СП Ре Агд 355 360 365
З5
Тиг Пе Спу Спу Тпг Г еи Авп ТНг Зег Тиг Сп Спу Зег ТНг Авп ТНг 370 375 380 зЗег Пе Азп Рго Маї Тнг Геи Рго РНе ТАг Зег Агу Азр Маї Туг Аг 385 390 395 400
ТАг Сім Бег І еи Аа Сіу Гей Авп І еи Ре І єи Тнг Сп Рго Маї Азп 405 до 415
Сіу Маї Рго Агу Маї Авр РНеє Ні Тр Гуз РНе Маї Тнг Нів Рго Пе 420 425 430
Аа 5ег А5р Авп РНе Туг Туг Рго Стпу Туг Аа Спу Пе Спу Тк Сп 435 440 445
Ї еи Сп Авр бег Спи Авп Си І єи Рго Рго Сім Тиг ТАг Спу Сіп Рго 450 455 460 60
Азп Туг ами Зег Туг Зег Ніз Ага І єи 5ег Нів Пе Спу Геи Пе Зег 465 470 475 480
Аа 5ег Ні Маї Гуз Аа ГІ еи Маї Туг Зег Ттр Тниг Ні Агу 5ег Аіа 485 490 495
Азр Агу Тпг Авп ТНг Пе Авп бег Авр 5ег Пе ТНиг Сп Пе Рго Гей 500 505 510 маї Гуз Аа Рнеє Азп І єи Рго 5ег Су Аа 5ег Маї Ма! Агу Сіпу Рго 515 520 525
Сіу Рне Тиг Спу Спу Авр Іе ГГ еи Аго Аго Тпг Авзп Тиг Спу ТАг Ре 530 535 540
Сіу Азр Іе Аг Маї Авп Пе Авп Рго Рго РПє Аїа Сп Ага Туг Ага 545 550 555 560
І ей Ага Іе Аго Туг АІа Зег Тит Тниг Авп Геи Сім РНе Нів ТНиг Зег 565 570 575
Пе Авп Су Гуз Аа Пе Авп Сп Спу Авп Рне 5ег Аа Тиг Меї Авп 580 585 590
Аг Спу Сім Авр Геи Азвр Туг Гуз Аа РНе Ага ТНг Маї Спу Рпе Тнг 595 600 605
З5
ТАг Рго Рне 5ег Рне 5ег Авп Аа Сіп 5ег Тиг Рне Тнг Пе Спу Аїа 610 615 620
Тер Азп Рне 5ег І єи Сіу Авп Сім Маї Туг Пе Азр Аго Пе Сіи Рпе 625 630 635 640 маї Рго Маї Сім Ма! Тнг Туг Сіи Аа Си Нів Авр Ре Си Гуз Аа 645 650 655
Сп Сіи Спи Маї Тнг Ага І еи РНне Тнг Зег Тиг Азп Рго Су СІУу І єи 660 665 670
Гуз Тнг Авп Маї Тнг Сти Туг Ніз Пе Ар Сп Маї 5ег Авп І єи Маї 675 680 685
Сіи ЗегІ еи Зег Азп Си Ріє Туг Геи Авр Си Гуз Агу Си Гей Ріе 690 695 700 60
СІш Ї еи Маї Гуз Туг Аа Гуз Сіп ГГ еи Ні Г еи Спіу Агу Азп Меї 705 710 715 «210» 49 «2115 1164 «212» Білок -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Мутантний білок ВТ-0201. «4005» 49
Меї Спи Агу Авп Авп Сп Авр Сп Суз Пе Рго Туг Азп Суз Гей Авп 1 5 10 15
Азп Рго Спи Маї Спу Пе І еи Ар Пе Спи Авп Рне Авт І єи Спи І ей 20 25 0) маї Зег ап Маї 5ег Ма! Спу Геи Тиг Агу РнНе І єи ГГ еи Сім Аа Зег 35 40 45
Пе Рго Сту Аа Сіу РНе Аа Геи Су І еи Ре Авр Іе Пе Ттр Спу 50 55 60
Зо
Аа І єи Стпу Маї Авр Сіп Тгр 5ег І єи РНе І єи Аа Сіп Пе Спи Стіл 65 70 75 80
Ї ем Пе Авп Си Ага Пе Тиг Тиг Маї Спи Агу Авп Аг Аа Пе Сіп 85 90 95
Аа І єи бЗег Спу І еи 5ег бег Зег Туг Си Маї Тук Пе Спи Аїпа І єи 100 105 110
Аг Си Тгр Си Авп Авр ГГ єи Авр Авп Рго Аа 5ег Агу Авр Аго Маї 115 120 125 маї Аа Агу РНе Аг Аа Тнг Авр Авп 5ег І ви Пе ТНг Авр Іе Рго 130 135 140
Ї еи Гєи Сім Пе Рго Спу Рпе Сім Пе Айа ТАг І еи 5ег Маї Туг ТНг 145 150 155 160
Сп Айа Аа Авт І! єи Ніз І ви Аа Геи І єи Агу Авр Аа Маї Туг Рне 165 170 175
Спіу Спи Ак9 Ттр Су Ї ви Те Сп Те Авп Пе Спи Авр І єи Нів ТНг бо 180 185 190
Ага ГІ еи Тиг Ага Туг Пе Сип Спи Туг 5ег Авр Ні Суз Аа Ага Тр 195 200 205
Туг Авп Сп слу І ви Авп Авп Іе Спіу Стпу Пе Авп ТАг Аго Туг І еи 210 215 220
Авр РНе СіІп Агу Сі І ви Те Пе 5ег Ма! І ей Авр Іе Маї Аїйа І єи 225 230 235 240
Рпеє Рго Авп Туг Азвр Іе Аго Тиг Туг Рго Пе Рго Тиг Сп 5ег Сп 245 250 255
Ї еи Тиг Аго Си Пе Туг Тиг Зег Рго Маї Маї Аа Рго Стпу Маї Абп 260 265 270
Тер Пе Гей 5ег Пе 5ег Азп Маї І еи Агу Аа Рго Нівз І ви Меї Азр 275 280 285
Рпе Ріє Азр Ага ЇІе Іе Пе Туг Тиг Спу Тниг Маї Агу 5ег ТАг Рго 290 295 00
Зо
Ні5 Ттр Спи Спу Нів Спи Ма! Пе Зег Агу Агу Тит Спу Сп Спу Авп 305 з10 315 320
Сіш Пе Агу 5ег Рго Гей Туг Спу Маї Аа Аа Авп Аа Сім Рго Рго 325 330 335 маї Тиг Пе Агу Рго ТАиг Спу Рпе Тниг Авр Сім Сіп Аго Сіп Маї Туг 340 345 350
Агоу Ма! Геи Зег Агу Маї Аа бег РНе Ага Авп 5ег Спу ТНг Ап Ре 355 360 365 зег І еи Ма! Авр Аїа Аа 5ег РНеє ГІ еи ТНг Пе РНе 5ег Аа 5ег Зег 370 375 380
Пе Туг Ага Ап Сіу РНе Сіу Рне Авзп Аа Авр ТНг Пе Ар Сіи Пе 385 390 395 400
Рго Пе Спи Спу Тиг Авр Рго Туг Пе СПУ Туг Зег Ніз Аг9 Геи Сувз 405 до 415
Ніз Маї Спу Ре Тнг Аа 5ег Зег Рго РНе Іе Зег Сп Туг Аа Ага бо 420 425 430
Аа Ріо Маї Рне 5ег Тр Тнг Ніз Агу 5ег Аа Тит Ре Тнг Авп ТНг 435 440 445
Пе Ар Рго Сім Аго Пе ТАг Сп Пе Рго Меї Маї Гуз Аа Туг Авп 450 455 460
Ї еи Ніз Аа Сіу Аа ТНг Маї Маї Ага Стпу Рго Спіу Рпе Тиг Сіу Спу 465 470 475 480
Азр Геиц І ви Агу Агу ТНг Авп ТАг Спу ТНг Рпє Аа Ар Іе Агу Маї 485 490 495
Азп Пе Тниг Сіпу Рго ГГ єеи бег Сп Аг Туг Агу Маї Ага Іе Аго Туг 500 505 510
Аа 5ег Тпг ТНг Авр І єи Сп Рпе РНе Тнг Ага Іе Авп Сіу ТАг Зег 515 520 525 маї Авп Сп Спіу Авп Рпє Сіп Агу ТАг Меї Авп Ага Стпу Авр Авп І єи 530 535 540
Зо сій Зег Сіу Авп РНе Ага ТНг Аа Спу Рпе 5ег ТАг Рго РНе 5ег Рпе 545 550 555 560 зЗег Авп Аа Сіп 5ег Тит Рпе Тпг ГГ еи Спіу Тниг ап Аа РНе 5ег Авп 565 570 575
Сіп Си Маї Туг Пе Авр Ага Іе Спи РНе Маї Рго Аїа Спи Маї! ТНг 580 585 590
Рпе Сти Аїа Спи 5ег Авр ГІ єи Спи Агу Аїа Сіп Гуз Аа Маї Авп Аа 595 600 605
Ї еи Ре Тит Зег ТНг Зег Сп І еи СпПу Г еи Гу ТНг Авп Маї Тит Спу 610 615 620
Туг Ніз Пе Азвр Сп Маї 5ег Авп І ви Маї Аа Суз І єи 5ег Авр Сі 625 630 635 640
Ре Суз І еи Авр Сім ГГ уз Ага Си І єи Зег Си І уз Ма! Гуз Нів Аа 645 650 655
Гуз Аг9 І еи 5ег Азр І уз Ага Авп І еи ей Сп Авр Рго Азп Рнє Ага бо 660 665 670
Су Пе Авп Аг Сп Рго Авр Ніз Слпу Тгтр Агу Спу Зег Тиг Ар Пе 675 680 685
Тпиг Пе Стп Спу Спу Авр Авр Маї РНе Гуз Спи Авзп Туг Ма! Тиг Гей 690 695 700
Рго Спу Тиг Рне Ар Сім Суз Туг Рго Тниг Туг Гей Туг Сп Гуз Пе 705 710 715 720
Азр Ст Бе" Гуз І єи Гуз Аа Туг Тнг Аго Туг Сп Гей Агоу Сіу Туг 725 730 735
Пе Спи Авр Зег Сп Авр І єи Сіи Пе Тут ей Пе Агу Туг Авп 5ег 740 745 750
Гуз Ніз Спи Пе Маї Авп Маї Рго Спіу ТНг Спу Бег Геи Тр Рго І єи 755 760 765 зЗег Ма! Сім Авп Сп Пе СПу Рго Суз Спіу Спи Рго Авп Агу Суз Аа 770 775 780
Зо
Рго Нів І єи Спи Тгр Авп Рго Азр І єи Ні Су бег Сувз Агу Авр Сіу 785 790 795 800 сін Гуз Суз Маї Нів Ні 5ег Нів Ні РНе 5ег І еи Ар Іе Азвр Маї 805 810 815 сСіу Суз Тиг Авр Геи Азп Ст Азвр І еи Сіпу Маї Тр Геи Пе Рпеє Гуз 820 825 830
Пе Гуз Тнг ап Авр Су Нів Аїа Аго ГІ еи Спу Авп І єи Сім Рне ГІ єи 835 840 845 сій Си Си Рго Ге І еи Спу Спи Аїйа І єи Аа Агу Маї Гуз Агу Аїа 850 855 860
Сім Гуз Гуз Ттр Агу Авр І уз Агу Си І ув І єи Сп Ї ви Сі ТНг Авп 865 870 875 880
Пе маї Туг Гуз Спи Аа Гуз Спи Зег Маї Авр Аа І єи РНе Маї Авп 885 890 895 зЗег Сп Туг Авр Аг І єи Сп Аіа Азр ТНг Азп ЇІе Аа Меї Їе Ніб бо 900 905 910
Аа Аа Азр Гуз Аго Маї Ні Ага Іе Аго Си Аа Туг Гей Рго Спи 915 920 925
Ї еи Зег Ма! Ме Рго Сіу Маї Азп Аїа Аїйа Пе Рпє Спи Спи І еи Спи 930 935 940
Сіу Ага Іе РНе Тнг Аа Туг Зег І єи Туг Азр Ага Агу Авп Маї Іе 945 950 955 960
Гуз Ап Стпу Авп РНе Авзп Авп ау І еи І єи Суз Ттр Авп Маї Гув Спу 965 970 975
Ніз Маї Азр Маї Спи Спи Сп Авп Авп Ні Агу 5ег Маї І єи Маї Пе 980 985 990
Рго Ст Тгр Сл Аа Сім Ма! Зег Сп Гуз Маї Агу Ма! Сув Рго Спу 995 1000 1005
Агу Счу Тут Пе Геи Агу Ма! Тнг Аа Туг Гуз Спи СТу Туг Спу 1010 1015 1020
Зо
Сіи сіу Суз Маї Тнг Пе Ніб Спи Пе Сім Авр Азп.ТНг Авр Си 1025 1030 1035
Їеи Гуз РНе бег Азп Суз Ма! Спи Сіи Спу Туг Рго Авп Авп ТНиг 1040 1045 1050 ма! Тиг Суз Авп Сім Туг ТАиг Меї Авп Сп Сіу Ма! Сіу СПЧи Суб 1055 1060 1065
Тиг Азр Аа Суз Азп Маї Ага Авп Аго Спу Туг Сім Авр Аа Туг 1070 1075 1080
Сіу Нів Авп Рго 5ег Тнг Рго Маї Ніз Тут ТНиг ТАиг Рго Туг Си 1085 1090 1095
Сі си ТНг Туг Тег Ар Спи Аг Агу Спи Авп Рго Суз Спи Аа 1100 1105 1110
Азп Гуз Спу Туг Ма! Азп Туг Тнг Рго Геи Рго Ма! Стпу Туг Маї 1115 1120 1125
ТигГув Спи ГГ еи Спи Туг Рнпе Рго Сім Тиг Авр ТАг Маї Тгр Пе бо 1130 1135 1140
Сі Ше СПу Спи ТАг Спи Спу ТАг Рне І єи Маї Авр 5ег Ма! Спи 1145 1150 1155
Їеи Гєи Пе Меї Спи Сім 1160 «2105» 50 «2115» 1166 «212» Білок -213» Штвтучна послідовність «220» «223» Мутантний білок ВТ-0202. «4005» 50
Меї Гуз Пе Авп Авп Сп Авп аїп Суз Пе Рго Туг Азп Суз ГГ еи Зег 1 5 10 15
Авп Рго Сім Спи Ма! І ей ЇЇ еи Азр Стпу Спи Аго Пе І єи Рго Авр Пе 20 25 0)
Ар Ро І еи Си Маї бег Меї 5егі єи І ви Сп Рне І еи Ї еи Авзп Авп
Рпє Маї Рго Спу Сіу Спу Ма! Пе Зег СПУ Геи Пе Авп Гуз Пе Ттр 60
З5
Сіу Аа Геи Агу Рго 5ег Сім Ттр Си Гей Рпє І єи Аа Сіп Пе Си 65 70 75 80 40
Сіп Ї еи Пе Ар Ага Ага Іе Сім Аїа Аа Маї Агу Аїа Гуз Аїа Іе 85 90 95 45 Аа Спи Геи Спи СПу Ї еи Стпу Аг Зег Туг Сп Геи Туг Сіу Спи Аа 100 105 110
Рпе Гуз Спи Ттр Спи Гуз ТНг Рго Авр Авп ТНг Аїа Аа Агу 5ег Ага 50 115 120 125
Маї Тиг си Агу Рне Ага Іе Іе Авр Аа Сіп Пе Спи Аа Авп Іе 130 135 140 55
Рго бег Рне Агу Маї Зег Сіу Рне Сі Маї Рго І еєи І єи бег Ма! Туг 145 150 155 160 60
ТАг сій Айа Аа Авп І єи Ніз І єи Ага І еи І еи Агу Авр 5ег Маї Ма! 165 170 175
Рпе Стпу Спи Аг Тгр Стпу Геи Тнг Тиг ТАг Авп Маї Азп Ар Іе Туг 180 185 190
Азп Аго ап Маї Гуз Ага Пе Авр Сім Туг Зег Авр Ніз Суз Ма! А5р 195 200 205
Тиг Туг Гуз Тиг Си Гей Сім Аго Гей Сім РНе 5ег Зег Пе Аа Сп 210 215 220
Тр Ага Іе Туг Авп Сп РНеє Агу Ага Сім Геи ТНг І єи Тнг Маї Гей 225 230 235 240
Азр Іе Маї Ага Геи Рне Рго Авп Туг Ар ау Ага Геи Туг Рго Пе 245 250 255
Аг Тит Пе 5Бег Сіп І еи ТАг Агу Азвр Їе Туг Тнг 5ег Рго Маї Зег 260 265 270
Сім Рне Туг Туг ау Рго Пе Туг Авп Туг Авп Пе Маї Спу Ага Гей 275 280 285
Тиг ами Сіп Стій Гей Ага Ага Рго Ніз І єи Меї Азвр РНе РНе Авп 5ег 290 295 100)
З5
Ме! Пе Меї Туг Тиг Зег Азр Авп Ага Ага Си Нів Туг Тгтр Зег Спу 305 з10 315 з20
Ї єи Спи Меї Гуз Аа Тиг Авр Тнг бег Спіу Авп Сп Маї бег Рне Рго 325 330 335
Ї еи Аа Сту Тниг Агу Сіу Авп 5ег Аїа Рго Рго Маї Тниг Маї Агу Авп 340 345 350
Азп Спу Сім Спу Маї Туг Ага Пе Геи Зег Си Рго РНе Туг Зег Зег 355 360 365
Рго Рне І єи Спу Тнг 5ег Ма! Ї єи Спу бЗег Агу Сіу Спи Си Рне Аа 370 375 380
РНе Аа 5ег Азп ТНг Тнг Тнг Зег Гей Рго 5ег ТНиг Пе Туг Ага Авзп 385 390 395 400 60
Агоу Стпу Тнг Маї Авр 5ег І єи Маї Зег Пе Рго Рго Сп Авр Туг Зег 405 до 415
Маї Рго Рго Ніз Агу Сіу Туг Зег Нів І ей Г еи 5ег Ні Ма! Тиг Меї 420 425 430
Нів Авп 5ег Зег Рго Пе Рпє Ні Тр ТНг Нів Агу Зег Аа ТНиг Рго 435 440 445
Агу Авзп ТНг Пе Авр Рго Авр 5ег Пе Тниг Сп Пе Рго Маї Ма! Гуз 450 455 460
Аа 5ег Нів І єи 5ег Спу Спу Зег Ма! Пе Гуз Спу Рго Спу Ні ТНг 465 470 475 480
Спу Сіу Авр І єи Пе 5ег І єи Рго Маї! Азп Азп РнНе Тнг Ні Рне Аг9 485 490 495
Пе Рго Ріє Сп Аа Авп ТиНг Рго Сп Ага Туг Аго Пе Ага Пе Аг9 500 505 510
Туг Аа Аа Ар 5ег Авр Су ТАг І єи Авр 5ег Спу Маї Рне Геи Зег 515 520 525
Аа Аа Аа Стпу Ар Сіу РНе Авп Тиг ТНг Зег Туг Агу Аа Тиг Меї 530 535 540
З5 зЗег Рго Сіу Сіу Зег І єи ТНг 5ег Агу Авр РНе Сп РнНе Гей Авр І еи 545 550 555 560
Азп Тпиг 5ег Рпе Тнг Зег Азвр Маї Аа 5ег Авп І єи Тгр Геи Нів Рпе 565 570 575
Пе Аго Туг Пе Агу Рго Сіу Авп І єи Туг Пе Авр Аг Аа Спи Рпе 580 585 590
Пе Рго Маї Авр Аа Тниг Ре Сти Аїа Сіу Туг Авп Гей Спи Агу Аа 595 600 605
Сп Гуз Аа Маї Авп Аа І еи Ріе Тнг 5ег ТНг Азп Сп Гуз СпПу Ї ей 610 615 620
Сіп ТАиг Авр Маї Тниг Авр Туг Ніз Іе Авр Сіп Ма! 5ег Авп І ви Маї 625 630 635 640 60
Ар Суз І єи бег Азр Спи Ре Суз І єи Авр Си І уз Агу Сім Ї ей 5ег 645 650 655
Сім Гуз Ма! Гуз Сіп Ага Гуз Аго ГІ еи 5ег Авр Сім Агу Ав І єи Гей 660 665 670
Сіп Авр бег Азп РНе Аго Су Пе Авп Аго Спи Сп Авр Ага ау Ттр 675 680 685
Агоу Стпу Зег Тиг Нів Пе ТА Пе СПп Спіу Спу Авп Авр Маї Ре Гуз 690 695 700 сій Авп РНе Маї Тнг Геи Рго Спу Аа Рне Авр Аїа Суз Туг Рго Тиг 705 710 715 720
ТугГеи Туг ап Гуз Пе Авр Си 5ег Гуз Гей Гуз Аа Туг ТАиг Аг9 725 730 735
Туг ам Геи Агу сту Тут Пе Спи Авр Зег Сп Авр І єи Ар Пе Туг 740 745 750
Ї ем Пе Агу Туг Авп ТНАг Гуз Нів Спи ТНг Гей Авп Маї Рго Спу ТНг 755 760 765
Гуз Зег Рго Тгтр 5ег І єи Сув ТНг Спи Зег Рго І єи Спу Гуз Сув СИу 770 775 780
З5
Спм Рго Авп Агу Суз Аа 5ег Сп Пе Спи Тер Азп Рго Авр І єи Ав5р 785 790 795 800
Сув бег Суз Агу Ар Стпу Спи І ув Суз Аїйа Ні Ні 5ег Нів Ні5 Рпє 805 810 815 зег І ви Азр Іе Авр Маї Спіу Суз ТНг Азвр І єи Авп Сім Авп ГІ ви Спу 820 825 830
Пе Тр Ма! Пе Рпє Гуз Пе Гуз ТАг Сп Авр Сту Нів Аа Ага Гей 835 840 845
Спу Авп І еи Сім РНе Гей Си Спи ГГ ув Рго І єи І ви Спу Сім Аа І єи 850 855 860
Аа Агу Маї Гуз Агу Аа Си Гуз Гуз Ттр Аг Авр Гуз Ага Сі Гув 865 870 875 880 60
Ї еи Сп Зег Си ТАг Авп Те Маї Туг Гуз Сім Аа Гуз Спи Аа Маї 885 890 895
Азр Сту Геи Рне Маї Ар 5ег Сп Туг Сіи Агу І ви Сп Аа Авр Тиг 900 905 910
Азп ЇІе Аїа Меї Іе Ні Аїа Аа Авр Гуз Ні Маї Ні Сип Пе Аг9 915 920 925
Сіи Маї Тук Рне Рго Сім Геи Зег Ма! Пе Рго Стпу Маї Азп Аа Аа 930 935 940
Пе Рпе Спи Спи ГГ еи Спи СПу Аго Пе РНе ТАг Аїа Туг Зег І еи Туг 945 950 955 960
Азр Аа Агу Авп Маї Пе Гуз Авп Стпу Авр РНе Авп Авп Су Геи Зег 965 970 975
Суз Тр Азп Маї І уз СіІу Ніз Ма! Азр Маї Спи Маї Сип Авп Авп Нів 980 985 990
Агу Зег Маї Геи Маї Пе Аа Сіи Тр Сіи Аіа Спи Ма! Зег Сп Спи 995 1000 1005 маї Рго Маї Суз Рго Сіу Агу Спу Тут Пе Г еи Агу Маї Тнг Аа 1010 1015 1020
З5
ТугГув Спи Спу Туг Сіу Сіи СПу Суз Ма! Тиг Пе Нів Спи Пе 1025 1030 1035
Сім А5р Ні ТНг Авр Сім І єи Гуз Рпе Агу Азп Суз. Спи Спи Спи 1040 1045 1050
Сім Ма! Туг Рго Авп Азп Тниг Маї Тиг Суз Азп Спу Туг Тнг Аа 1055 1060 1065
Тиг ап спи Сі Туг Гуз А5р Аа Туг ТНг Зег Агу Авп Аг Сіу 1070 1075 1080
Туг Азр Си Аа Туг Спу Абп Авп Рго Зег Маї Рго Аїа Авр Туг 1085 1090 1095
Аа бЗег Маї Туг Си Сі ув Аа Туг Тиг Азр Сіу Ага Агу Си 1100 1105 1110 60
Авп Рго Суз Сім Меї Сіи Аг Спу Тук ТНг Рго Гей Рго Маї Спу 1115 1120 1125
ТугПе Тниг Гуз Спи Гей Сім Туг Рне Рго Сіи Тиг Авр ТНг Маї 1130 1135 1140
Тер Пе Сі Геи Спу Спи ТАг Спи СПУ ТАг РНе І еи Пе Авр 5ег 1145 1150 1155 ма! Сі Гей Гей Гей Меї Спи Спи

Claims (17)

1160 1165 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Молекула нуклеїнової кислоти, яка містить нуклеотидну послідовність, що кодує білок Стгу, який є токсичним для європейського кукурудзяного метелика (О5/піа пибіїа/в5), кукурудзяного метелика (Не//сомегра 7еа) або чорної совки (Адгої/їз р5йОп), де нуклеотидна послідовність містить ЗЕО ІЮ МО:21 або 5ЕО ІЮО МО:22; або кодує білок Стгу, що містить амінокислотну послідовність ФЕО ІЮ МО:41 або 5ЕО І МО:42.
2. Химерний ген для експресії білка Сгу, який містить гетерологічний промотор, функціонально зв'язаний із молекулою нуклеїнової кислоти за п. 1.
3. Химерний ген за п. 2, де гетерологічний промотор являє собою промотор, що забезпечує експресію в рослині.
4. Химерний ген за п. 3, де промотор, що забезпечує експресію в рослині, вибраний із групи промоторів, що складається з промотору убіквітину, вірусу жовтої кучерявості листя цеструму, Зо ТтрА кукурудзи, О5МАЮБЗ5 б, огістону НЗ маїсу, сахарозосинтетази 1 кукурудзи, алкогольдегідрогенази 1 кукурудзи, світлозбирального комплексу кукурудзи, білка теплового шоку кукурудзи, тії маїсу, малої субодиниці КиВР карбоксилази гороху, актину рису, циклофіліну рису, манопінсинтази Ті-плазміди, нопалінсинтази Ті-плазміди, халкон-ізомерази петунії, багатого на гліцин білка 1 бобів, пататину картоплі, лектину, 355 СаммМм і малої субодиниці 5-Е9 КиВР карбоксилази.
5. Рекомбінантний білок Стгу, який є токсичним для європейського кукурудзяного метелика (О5іппіа пибіїа!їз), кукурудзяного метелика (Не//сомегра 7еа) або чорної совки (Адгоїї5 ІрвзПйоп), де білок Сгу містить амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:41 або 5ЕО ІЮО МО:42.
6. Рекомбінантний вектор для експресії білка Сту за п. 5, що містить молекулу нуклеїнової кислоти за п. 1.
7. Трансгенна рослинна клітина для експресії білка Сту за п. 5, що містить рекомбінантний вектор за п. 6.
8. Трансгенна рослинна клітина за п. 7, де рослинна клітина являє собою клітину маїсу.
9. Трансгенна рослина маїсу для боротьби з європейським кукурудзяним метеликом (О5/йпіа пибіїа!в), кукурудзяним метеликом (Не//сомегра леа) або чорною совкою (Адгої/5 /рейоп), яка містить трансгенну рослинну клітину за п. 8.
10. Трансгенна насінина для вирощування трансгенної рослини, стійкої до європейського кукурудзяного метелика (Оз5іг/ліа пибіїа!ї5), кукурудзяного метелика (Не//соуегра 7єа) або чорної совки (Адгоїїз Ірзіїоп), де трансгенна насінина містить молекулу нуклеїнової кислоти за п. 1.
11. Спосіб одержання білка Сту, який є токсичним для лускокрилого шкідника, що передбачає культивування трансгенної клітини за п. 7 в умовах, за яких трансгенна клітина продукує білок
Сту.
12. Спосіб одержання стійкої до комах трансгенної рослини, який передбачає введення в рослину химерного гена за п. 3, де білок Сту експресується в рослині, з одержанням таким чином стійкої до комах трансгенної рослини.
13. Спосіб боротьби з європейським кукурудзяним метеликом (Оз5і7іпіа пибіїа!і5), кукурудзяним метеликом (Не//сомегра 7єа) або чорною совкою (Адгоїїз /рвйоп), який передбачає згодовування європейському кукурудзяному метелику (О5ігіпіа пибіїа/їіз), кукурудзяному метелику (Не/соуегра 2еа) або чорній совці (Адгої5 /р5йоп) композиції, що містить ефективну кількість білка Сгу за п. 5.
14. Спосіб боротьби зі стійкою до СгутАр лускокрилою комахою, що передбачає згодовування комасі ефективної кількості інсектицидного білка, що містить ЗЕО ІЮ МО:31 або 5ЕО ІО МО:32, ЗЕО ІЮ МО:41 або 5ЕО ІО МО:42.
15. Спосіб за п. 14, де стійка до СтутАр комаха являє собою вогнівку цукрової тростини (Оіаїгаєа зассНагаїї|5).
16. Спосіб запобігання розвитку стійкості у популяції цільової лускокрилої комахи-шкідника до білка СтгутАБр, що експресується в трансгенній рослині, який передбачає пакетування в трансгенній рослині додатково до білка СтгутАб другого інсектицидного білка, що містить ЗЕО ІЮ МО:31 або 5ЕО ІЮ МО:32, 5БЕО ІО МО:41 або 5ЕО ІЮ МО:42.
17. Спосіб за п. 16, де цільова лускокрила комаха-шкідник являє собою вогнівку цукрової тростини (Піаїгаєа зассНагаїїв).
UAA201800782A 2015-07-01 2016-06-23 Інсектицидний білок, який є токсичним для лускокрилого шкідника, та спосіб контролю шкідників рослин UA125683C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562187468P 2015-07-01 2015-07-01
PCT/US2016/038947 WO2017003811A1 (en) 2015-07-01 2016-06-23 Compositions and methods for controlling plant pests

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA125683C2 true UA125683C2 (uk) 2022-05-18

Family

ID=57609370

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201800782A UA125683C2 (uk) 2015-07-01 2016-06-23 Інсектицидний білок, який є токсичним для лускокрилого шкідника, та спосіб контролю шкідників рослин

Country Status (12)

Country Link
US (3) US10696982B2 (uk)
EP (1) EP3316690A4 (uk)
CN (2) CN107920536A (uk)
AR (1) AR104833A1 (uk)
BR (1) BR112017028589B1 (uk)
CA (1) CA2987131A1 (uk)
MX (2) MX2017016486A (uk)
PH (2) PH12017502387A1 (uk)
RU (1) RU2745306C2 (uk)
UA (1) UA125683C2 (uk)
WO (1) WO2017003811A1 (uk)
ZA (2) ZA201707904B (uk)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3044408A1 (en) * 2016-12-12 2018-06-21 Syngenta Participations Ag Engineered pesticidal proteins and methods of controlling plant pests
UA128156C2 (uk) * 2017-01-12 2024-04-24 Монсанто Текнолоджі Ллс Пестицидний білок токсину, активний проти лускокрилих комах
CN108752443B (zh) * 2018-06-07 2021-09-07 华中农业大学 水稻cyc u2；1基因在控制水稻中胚轴发育中的应用
CA3114466A1 (en) * 2018-10-30 2020-05-07 Clarence Michael REYNOLDS Insecticidal proteins
CN109456976B (zh) * 2018-12-26 2021-09-28 菏泽学院 舞毒蛾JHAMT基因、其编码蛋白及其dsRNA在害虫防治中的应用
AU2020226376A1 (en) * 2019-02-20 2021-08-05 Syngenta Crop Protection Ag Engineered pesticidal proteins and methods of controlling plant pests
CN109776659B (zh) * 2019-03-14 2021-01-29 中国农业科学院生物技术研究所 cry2Ah-vp基因在抗黏虫中的应用
CA3161051A1 (en) * 2019-12-20 2021-06-24 Clarence Michael REYNOLDS Insecticidal proteins
CN112279902A (zh) * 2020-01-15 2021-01-29 四川农业大学 一种Bt蛋白Cry1A-like及其编码基因和应用
WO2022155884A1 (en) * 2021-01-22 2022-07-28 Syngenta Biotechnology China Co., Ltd. Control of noctuid, crambid, and pyralid pests
CN116829163A (zh) * 2021-01-22 2023-09-29 先正达生物科技（中国）有限公司 夜蛾科、草螟科和螟蛾科有害生物的控制
WO2023181068A1 (en) * 2022-03-20 2023-09-28 Fertis India Pvt. Ltd. Genetic modification of nitrogen fixing microbes for production of nitrogen containing compounds
CN117024536B (zh) * 2023-10-08 2024-07-23 莱肯生物科技(海南)有限公司 控制亚洲玉米螟害虫的方法
CN117143831B (zh) * 2023-10-31 2024-01-26 中国农业科学院生物技术研究所 一种抗虫蛋白杂交瘤细胞株及其产生的抗体和应用
CN117169516B (zh) * 2023-11-01 2024-02-23 中国农业科学院生物技术研究所 抗虫蛋白Cry 1Ah胶体金免疫层析速测试纸条及其检测方法
CN117143832B (zh) * 2023-11-01 2024-02-13 中国农业科学院生物技术研究所 一种抗虫蛋白Cry 1Ah杂交瘤细胞株及其产生的抗体和应用

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5254799A (en) * 1985-01-18 1993-10-19 Plant Genetic Systems N.V. Transformation vectors allowing expression of Bacillus thuringiensis endotoxins in plants
US5338544A (en) * 1987-04-16 1994-08-16 Ecogen Inc. CryIIB protein, insecticidal compositions and methods of use thereof
WO1994012642A1 (en) * 1992-11-24 1994-06-09 Novo Nordisk Entotech, Inc. Bacillus thuringiensis isolates active against lepidopteran pests
CN1111600C (zh) * 1999-08-26 2003-06-18 中国科学院遗传研究所 杀虫蛋白基因及其应用
GB0227346D0 (en) * 2002-11-22 2002-12-31 Chiron Spa 741
US20080226753A1 (en) * 2004-03-29 2008-09-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Method of Reducing Insect Resistant Pests in Transgenic Crops
US20090181025A1 (en) * 2005-09-29 2009-07-16 Hideaki Ogasawara T Cell Adhesion Molecule and Antibody Thereto
EP2198030B1 (en) * 2007-10-10 2016-09-14 Athenix Corporation Synthetic genes encoding cry1ac
US8283524B2 (en) * 2008-05-15 2012-10-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc Bacillus thuringiensis gene with lepidopteran activity
BRPI0917159A2 (pt) * 2008-08-25 2015-07-28 Down Agrosciences Llc Proteínas cry14 modificadas do bacillus trhuringiensis para o controle de nematódeos
US20100077507A1 (en) * 2008-09-22 2010-03-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Novel Bacillus Thuringiensis Gene with Lepidopteran Activity
CN101768558B (zh) * 2008-12-29 2013-08-07 行政院农业委员会农业药物毒物试验所 抗害虫的新颖苏云金芽孢杆菌菌株
CN101926365B (zh) * 2009-11-26 2013-01-02 中国农业科学院植物保护研究所 苏云金芽孢杆菌cry1Ai在抗虫中的用途、改造的mcry1Ai基因及应用
CN107177627A (zh) * 2009-12-16 2017-09-19 陶氏益农公司 用于控制欧洲玉米螟的包含CRY1Ab和CYR2Aa的杀虫蛋白组合
US8878007B2 (en) * 2011-03-10 2014-11-04 Pioneer Hi Bred International Inc Bacillus thuringiensis gene with lepidopteran activity
WO2013134734A2 (en) 2012-03-09 2013-09-12 Vestaron Corporation Toxic peptide production, peptide expression in plants and combinations of cysteine rich peptides
CN103688974B (zh) * 2013-11-11 2015-07-15 北京大北农科技集团股份有限公司 控制害虫的方法
CN105348374B (zh) * 2015-12-01 2018-08-17 中国农业科学院植物保护研究所 获得高活性Cry1Ai蛋白突变体的方法及其突变体

Also Published As

Publication number Publication date
EP3316690A4 (en) 2019-03-27
RU2018103768A (ru) 2019-08-01
US20230250140A1 (en) 2023-08-10
PH12017502387A1 (en) 2018-06-25
US20200283793A1 (en) 2020-09-10
CN113293171A (zh) 2021-08-24
MX2020011559A (es) 2020-11-24
WO2017003811A1 (en) 2017-01-05
ZA201707904B (en) 2022-08-31
BR112017028589A2 (pt) 2018-08-28
BR112017028589B1 (pt) 2022-11-29
MX2017016486A (es) 2018-03-12
RU2745306C2 (ru) 2021-03-23
RU2018103768A3 (uk) 2020-05-19
US11578105B2 (en) 2023-02-14
CN107920536A (zh) 2018-04-17
CN113293171B (zh) 2024-03-15
US10696982B2 (en) 2020-06-30
US20190177377A1 (en) 2019-06-13
ZA201901080B (en) 2020-10-28
CA2987131A1 (en) 2017-01-05
PH12021550899A1 (en) 2022-02-21
EP3316690A1 (en) 2018-05-09
AR104833A1 (es) 2017-08-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA125683C2 (uk) Інсектицидний білок, який є токсичним для лускокрилого шкідника, та спосіб контролю шкідників рослин
AU2010221183B2 (en) Methods and compositions for controlling plant pests
RU2745322C2 (ru) Композиции и способы контроля вредителей растений
UA125684C2 (uk) Молекула нуклеїнової кислоти для експресії інсектицидного білка cry, композиція та спосіб контролю шкідників рослин
EA035563B1 (ru) Молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид с пестицидной активностью против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей, ее получение и применение
EP2957638A1 (en) Pesticidal proteins and methods for their use
MX2011006694A (es) Gen de delta-endotoxina axmi-150 y metodos de uso del mismo.
WO2017146899A1 (en) Compositions and methods for controlling plant pests
US20220089658A1 (en) Compositions and methods for controlling insect pests
CA2842530A1 (en) Axmi205 variant proteins and methods for their use
KR20160094985A (ko) 바실루스 투린기엔시스 유래의 ａｘｍｉ４７７, ａｘｍｉ４８２, ａｘｍｉ４８６ 및 ａｘｍｉ５２５ 독소 유전자 및 그의 사용 방법
RU2741833C2 (ru) Композиции и способы контроля вредителей растений
CN113179823A (zh) 小地老虎的控制
US11359209B2 (en) Compositions and methods for control of insect pests
WO2020050905A1 (en) Compositions and methods for controlling plant pests
BR112021016275A2 (pt) Proteínas pesticidas manipuladas e métodos de controle de pragas de plantas
RU2817591C2 (ru) Сконструированные пестицидные белки и способы контроля вредителей растений
RU2816526C2 (ru) Сконструированные пестицидные белки и способы контроля вредителей растений
RU2772947C2 (ru) Сконструированные пестицидные белки и способы контроля вредителей растений
EA047187B1 (ru) Сконструированные пестицидные белки и способы контроля вредителей растений
EP4373944A2 (en) Compositions and methods for controlling insects
CN114680127A (zh) 夜蛾、草螟和螟蛾有害生物的防治
CN114747590A (zh) 夜蛾、草螟和螟蛾有害生物的防治