UA124001C2

UA124001C2 - Інгібітори протеїнкіназ, спосіб їх отримання і медичне застосування

Info

Publication number: UA124001C2
Application number: UAA201806447A
Authority: UA
Inventors: Лей Інь; Лей Инь; Веньцзянь Лю; Хен Лі; Хен Ли; Дяньсі Чжу; Дяньси Чжу
Original assignee: ГАНендЛІ ФАРМАСЬЮТІКАЛС; ГАНэндЛИ ФАРМАСЬЮТИКАЛС
Priority date: 2015-11-30
Filing date: 2016-11-28
Publication date: 2021-07-07
Also published as: RU2018122864A3; EP3385262A4; PT3385262T; US20210371418A1; ES2928169T3; US20200165239A1; ZA201803531B; MA42341B2; CN113956238B; CO2018005854A2; MA42341A1; KR20180083421A; RU2749437C2; IL259711B; WO2017092635A1; CN108290864A; CN108290864B; US11787801B2; EP3385262B1; BR112018010879A2

Description

демонструють гарне всмоктування і подолання гематоенцефалічного бар'єру при пероральному введенні. Таким чином, сполуки за цим винаходом є перспективними для розробки нових лікарських засобів для лікування захворювань, пов'язаних з проліферацією клітин, зокрема пухлин головного мозку, забезпечуючи нові можливості для лікарів і пацієнтів. и Кк щу не м кл ши пе ке | Вк

Її Е 1 2 т шк я М Ме ша х т ().

Перехресне посилання на споріднені заявки

Дана заявка заявляє пріоритет за патентною заявкою она винахід Китаю Мо

СМ201510856641.1, яка подана 30 листопада 2015 р., яка включена у цей документ у повному обсязі за допомогою посилання.

Галузь техніки

Даний винахід відноситься до галузі медицини та зокрема відноситься до ряду заміщених 2- (піридин-2-іл)амінопіримідинів, які володіють активністю інгібування протеїнкіназ, і до способу їх отримання та їх фармацевтичного застосування.

Рівень техніки

Клітинний цикл є важливою частиною життєдіяльності клітини. При нормальному зростанні клітин здійснення розвитку клітинного циклу залежить від точної та добре організованої регуляції клітинного циклу за допомогою регуляторних факторів різних рівнів. Ключовим 3 цих регуляторних факторів є циклін-залежна кіназа (СОК) і її позитивні і негативні регулятори, тобто циклін та інгібітори циклін-залежної кінази (СОЇ). Комплекс СОК-циклін, утворений циклін- залежною протеїнкіназою і цикліном, залучений в ріст, проліферацію, спокій або апоптоз клітин.

У процесі розвитку клітинного циклу циклін періодично і постійно експресується, і розкладається, і зв'язується 3 СОК, які відповідно тимчасово ним активуються.

Фосфорилювання різних субстратів каталізується активністю СОК для здійснення просування і переходу на різні фази клітинного циклу.

На даний момент встановлено 13 членів сімейства СОК, і вони являють собою СОКІ1-

СОКІ13, відповідно, серед яких СОКІ, СОК2, СОКЗ, СОК4 і СОКб залучені в регуляцію проліферації клітин, а СОК7, СОК8, СОКУ, СОКІ11, СОК12 ії СОКІ13 залучені в регуляцію транскрипції.

Циклін поділяють на АГ, ї різні СОК зв'язуються з різними підтипами цикліну. Серед них сімейство цикліну О (циклін 01, 02, 03) починає експресуватися у фазі С1, зв'язується і активує сОоКка4 ї СОКб з утворенням комплексу СОК4/6-циклін Ю для того, щоб фосфорилювати ряд субстратів, в тому числі білок ретинобластоми (КБ). Після фосфорилювання Кб звільняє білки, які з ним зв'язуються та інгібуються ним, включаючи головним чином транскрипційний фактор

Е2Е, який активує і транскрибує деякі гени, необхідні для входу в фазу 5 (МА Ке, Айдмапсе іп

Апіі-штог Ебесі ої СОК4/6 Іппірпйогв, ММопа Моїе5 оп Апіїбіоїйс5, 2013, 34 (5): 197-202). Якщо рівновага порушена внаслідок різних чинників: чи сигнал стимуляції проліферації клітин збільшено, або сигнал інгібування проліферації клітин зменшений в деякій мірі, проліферація клітин вийде з-під контролю, а потім виникне пухлина. У дослідженні встановлено, що аномалія шляху циклін 0-СОКА/6-ІМКА-Кр зустрічаються у приблизно 80 95 випадків раку людини (1.

Маїнтбгез М, Вагбасіа М., То сусів ог пої о сусіє: а спйфсаї! десівіоп іп сапсег (|). Мате Немівму5

Сапсег, 2001, 1 (3): 222; 2. ЗПпарігюо СІ., Сусіїп-дерепаепі Кіпазе рашулауз аз їагоаєї5 ог сапсег їгеайтепі ІЧ). У Сііпіса! ОпсоіІоду, 2006, 24 (11):1770). Зміна цього шляху прискорює розвиток фази С1, так що прискорюється проліферація клітин пухлини, і вони отримують перевагу у виживанні. Тому втручання в цей шлях стає терапевтичною стратегією, а таким чином СОК4/6 стає однією з потенційних протипухлинних мішеней.

Переваги СОКа4/6 в якості протипухлинної мішені полягають у тому, що: (1) більшість клітин, що проліферуються, залежать від проліферації СОК2 або СОКАУ/6, але інгібітори СОК4/6 не виявляють цитотоксичність, як "неселективні інгібітори СОК", таку як мієлосупресія та кишкова реакція; і (2) доклінічні експерименти демонструють, що якщо рівень цикліну Ю в клітинах підвищений, або рібіМКа4а неактивован, чутливість клітин до лікарського засобу може бути збільшена. Оскільки клітини пухлини демонструють вищевказане явище на відміну від нормальних клітин, спрямована дія лікарських засобів в деякій мірі збільшується.

На додаток до пригнічення росту пухлини інгібітори СОК також використовуються при лікуванні інших розладів, наприклад серцево-судинних розладів, в тому числі атеросклерозу, рестенозу після імплантації судинного стенту та інших серцево-судинних розладів, викликаних аномальною клітинною проліферацією; наприклад, при лікуванні захворювань, викликаних грибами, найпростішими паразитами (такими як Ріазтодішт ТаіІсірагит) та вірусними інфекціями, що містять ДНК- і РНК, включаючи малярію, СНІД, тощо. Крім того, в дослідженнях додатково встановлено, що інгібітори СОК також можуть використовуватися для лікування аутоїмунних захворювань (таких як псоріаз, ревматоїдний артрит, гломерулонефрит і червоний вовчак, тощо) і пригнічення проліферації запальних клітин.

З тих пір як в УУМО9811095 був описаний ряд сполук 2-піримідинаміну, що володіють цитокіновою інгібуючої активністю, в цій галузі техніки поступово з'являлася велика кількість сполук на основі такої структури ядра, що володіють інгібуючої активністю відносно СОКАУ/, і 60 деякі стали перспективними лікарськими речовинами-кандидатами і навіть надійшли на клінічні дослідження І фази. Наприклад, сполука РООЗ332991, також відома як палбоцикліб, яка описана в М/О2003062236, представлена структурною формулою 1 та розроблена компанією

Ріїгег. РООЗ332991 має ІСво, що становлять 11 нмоль/л і 15 нмоль/л для пригнічення СОКА і

СОКб, відповідно; а його ІСзо для інгібування СОК2, СОКІ ї СОК5 вище ніж 10 мкмоль/л (Егу

МУ, Нагуєу РУ, Кеїег РЕ, еї аї. 5ресіїіс іппірйіоп ої сусіїп-дерепаепі Кіпазе 4/6 Бу РО 0332991 апа аззосіаїєд апійштог асіїмйу іп питап Штог хепоагайв5 |Л. МоїІесшаг Сапсег ТНегарешіісв, 2004, 3 (11):1427). Сполука ГЕЕО11, яка розробляється Момагіів (описана в УМО2011101409), представлена структурною формулою 2. Сполука І 2835219 (описана в ММО2010075074), також відома як бемацикліб, представлена структурною формулою 3; повідомлялося, що її ІС5о для інгібування СОКА і СОКб становлять 2 нмоль/л і 9,9 нмоль/л, відповідно (І амтепсе МО, 5ЕСаї,

Х. Пп еї аї. Ргесіїпіса! спагасієгігайоп ої Ше СОкКа/6 іппірйог І 2835219: іп-мімо сеї! сусів- дерепаєпі/паерепаєпі апіі-їмтог асіїміе5 аїопе/п сотбіпайоп м/йй детсіїгабіпе |У). Іпме5і Мем

Огидв, (2014), 32: 825). На даний момент І У2835219 вивчається в клінічному дослідженні І фази, проведеному Еїї Шу Сотрапу. . з х пев не ШЕ ще НА ля ну і ше ш я я бом як цит Ще т ї і са В ц і Й і . набон

І М вия пає з й З з

Внаслідок появи цих сполук СОК4/6б стала очевидною протипухлинної мішенню. Заявник також подавав заявку на патент (Мо 201510708487.3, яка подана 27 жовтня 2015 р.) для ряду нових заміщених 2-(піридин-2-іл) амінопіримідинів, які демонструють активність селективного інгібування СОКА/6.

Злоякісні пухлини досі є серйозною загрозою здоров'ю людини. Отже, необхідно і актуально розробити інгібітори СОК4/6 з більш високою активністю, селективністю і біодоступністю для того, щоб забезпечити більше клінічних варіантів лікування захворювань, пов'язаних з аномальною проліферацією клітин, таких як рак.

Суть винаходу

Беручи до уваги вищевказані проблеми, метою даного винаходу є отримати нову заміщену сполуку 2-(піридин-2-іляуамінопіримідин. Сполука, що запропонована у винаході, може селективно інгібувати циклін-залежну кіназу СОК4/6б і зупиняти клітинний цикл у фазі С1, а таким чином може бути використана для лікування розладів клітинної проліферації.

Для того щоб досягти вищевказаного технічного ефекту, у даному винаході запропоновані

Зо наступні технічні рішення.

В одному аспекті у даному винаході запропонована сполука структурної формули І або таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, проліки або їх суміш; або фармацевтично прийнятні солі або сольвати сполуки структурної формули І або його таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, проліки або їх суміші, но те

ХЖ хх ни ІК!

І сх

А то пе і Ва В

І

, де кожен з Кі, Но і Кз незалежно вибраний з атому гідрогену, незаміщеної С1-Св вуглеводневої групи або С1-Сє вуглеводневої групи, заміщеної одним або більшою кількістю замісників, вибраних з Сі-Сє вуглеводневої групи, Сз-Свє циклоалкану, С1і-Свє галогеналкілу, С1і-Св з З їз в «-Бнвеве шо ев. або у вв алкокси, гідроксилу, галогену, ціано,-МАвАВе; б» Нв ТО тАЮКе або будь-які два з Кі, Во і Кз разом з атомами С, до яких вони відповідно приєднані, утворюють насичене або ненасичене 3-7-членне кільце; кожен з Ка. і К5 незалежно вибраний з групи, що складається з гідрогену і галогену, і щонайменше один з Ка і К5 являє собою галоген;

Вб вибраний з групи, що складається з атому гідрогену, Сі-Св алкілу, Сі-Св алкокси, гідроксилу або галогену; й

КУ щі

В? являє собою Ві: , де 7 являє собою карбоніл, 0, 5, іміно, сульфоніл або й 7», п дорівнює цілому числу від 0 до 4; кожен з М/ і У незалежно являє собою С, М, О або 5, але обидва УМ і М не можуть одночасно являти собою С, і коли 7 являє собою О або 5, М являє собою С; кожен з Ко, Віт, Ві» і Кіз незалежно вибраний з атому гідрогену, С1і-Св алкілу,

С3з-Свє циклоалкену, С:і-Свє гідроксиалкілу, Сі-Сє галогеналкілу, Сі-Свє алкокси, гідроксилу, в 2 ге 8 . ще «Ве -4в ще або ав. галогену, ціано, -МАВвВе, ЯеНа» тома есте ОК ої якщо У-М, Б11о не може являти ї Е З її Й р Гу й її Й собою МН», -МНВА», -МАВвВ», Т-во, отв, ОеСна або седана або

Ав та К; разом з атомами С, до яких вони приєднані, утворюють 5-7-ч-ленний гетероцикл, що містить один або більшу кількість атомів, вибраних з М, О або 5, і 5-7--ленний гетероцикл заміщений одним або більшою кількістю замісників, вибраних з С1-Свє алкілу, Сз-Сє циклоалкену,

Сі-Свє галогеналкілу, Сі-Сє алкокси, С1-Сє гідроксиалкілу, гідроксилу, галогену, ціано, -МН», - а їз ЕН ; «Кене --Еру соя або ня М

МА, МАЮ, ше де кожен з Кв і Ко незалежно вибраний з групи, що складається з атома гідрогену, С1-Св алкілу і Сі-Свгідроксиалкілу.

Кожен з Кі, В» і Ез переважно незалежно вибраний з атома гідрогену, незаміщеної С1-Св вуглеводневої групи або С1-Сє вуглеводневої групи, заміщеної одним або більшою кількістю замісників, вибраних з Сі-Сє вуглеводневої групи, Сз-Свє циклоалкену, С1-Свє галогеналкілу, С1-Св алкокси, гідроксилу або галогену.

Більш переважно кожний з Кі, В» і Ез незалежно вибраний з атома гідрогену, незаміщеної

Сі-Св вуглеводневої групи або Сі-С6є вуглеводневої групи, заміщеної одним або більшою кількістю замісників, вибраних з Сі-Сє вуглеводневої групи, гідроксилу або галогену.

Більш переважно кожний з К., Р» і Ез незалежно вибраний з атома гідрогену, незаміщених лінійного або розгалуженого Сі-Сє алкілу, незаміщених лінійного або розгалуженого С2-С4 алкенілу.

Найбільш переважно, кожен з Кі, В» і Кз незалежно вибраний з атома гідрогену, незаміщеного лінійного або розгалуженого С1-Са алкілу.

У якості іншого переважного варіанту реалізації винаходу КЕ» і Кз разом з атомами С, до

Зо яких вони обидва приєднані, утворюють насичене або ненасичене 3-7-членне кільце.

Більш переважно БЕ» і Кз разом з атомами С, до яких вони обидва приєднані, утворюють насичене 3-7-членне кільце.

Кожен з Ка. і К5 незалежно переважно вибраний з гідрогену, флуору або хлору, і щонайменше один з Ка і К5 являє собою флуор або хлор.

Більш переважно кожний з К. і Ко незалежно являє собою гідроген або флуор, і щонайменше один з Ка і КЕ5 являє собою флуор.

Найбільш переважно Ка. являє собою гідроген або флуор, і КЕ5 являє собою флуор.

Ве переважно вибраний з атома гідрогену або С.і-Св алкілу. «(енд 2 переважно являє собою карбонільну групу, О або. п, п дорівнює цілому числу від 0 до 4. ! -Яснодр- ! ! ! !

Більш переважно 7 являє собою . в, п дорівнює цілому числу від 0 до 2, більш переважно п-0 або 1.

Кожен з М/ і М переважно незалежно вибраний з С або М, але УМ і М не можуть обидва одночасно являти собою С.

Кожен з Біо, Вії, Ві2 і Віз незалежно вибраний з атома гідрогену, Сі-Свє алкілу, Сз-Св циклоалкену, С:1-Свє гідроксиалкілу, Сі-Св галогеналкілу, Сі-Св алкокси, гідроксилу або -МАвН», і якщо У-М, Кліо не може являти собою -МАвН», де кожен з Кз і Ко незалежно вибраний з атома гідрогену та С1-Сх алкілу.

Більш переважно кожний з Ко, Віт, Ві» і Кіз незалежно вибраний з атома гідрогену, С1-Св алкілу, С:1-Св гідроксиалкілу, Сі-Сє галогеналкілу, Сі-Св алкокси або -МАвНА», де Ка і К» незалежно вибрані з атома гідрогену та С1і-Сх алкілу.

Більш переважно К»; вибраний із замісників, які мають такі структури: "т Ко Т год і Вів Вк о Ав Ав у лч» Кг ту щі 15 5; ЖЕ бу З в С чна МА. МА. М йти С яви МА а,

Ктйе і

А де кожен з Ки і Кі5 незалежно вибраний з атома гідрогену, С1-Св алкілу, Сзе-Св циклоалкену,

Сі-Свє галогеналкілу, Сі-Свє гідроксиалкілу, Сі-Сє алкокси або гідроксилу; Кіє вибраний з атома гідрогену, Сз-Сє циклоалкену, Сі-Сєвє галогеналкілу, Сі-Сє гідроксиалкілу, С:і-Св алкокси, гідроксилу або -МАвВ», де Кз і Ко незалежно вибрані з атома гідрогену та С1і-Са алкілу.

Більш переважно кожний з Ка і Кі5 незалежно вибраний з групи, що складається з атома гідрогену, Сі-Св алкілу, Сз-Свє циклоалкену та С:1-Сє гідроксиалкілу; Кіє вибраний з атома гідрогену, Сі-Св алкілу, Сз-Сє циклоалкену, С:1-Сє гідроксиалкілу або -МАвН», де Кв і Ко незалежно вибрані з атома гідрогену та С1і-Сх алкілу.

В якості кращого варіанту реалізації винаходу Кеє і К7 разом з атомами С, до яких вони приєднані, утворюють б-ч-ленний гетероцикл, що містить один або більшу кількість атомів, вибраних з М, О або 5.

Більш переважно Ке і К7 разом з атомами С, до яких вони приєднані, утворюють б--ленний гетероцикл, що містить М.

Більш переважно Ке і К7 разом з атомами С, до яких вони приєднані, утворюють наступну хімічну структуру: задля ві о обл, де Кі7 вибраний з гідроксилу або С1-Сз алкокси; додатково, К1і7 переважно являє собою гідроксил.

В якості кращого варіанта реалізації в даному винаході додатково запропоновані сполуки структурних формул Ії, Ії, ІМ або М, або їх відповідні таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, проліки або їх суміш; або фармацевтично прийнятні солі або сольвати сполук формул ЇЇ, ПІ, ІМ або У, або їх відповідні таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, проліки або їх суміші,

Ве

У х не

АХ в в нм и и - Вк

НМ бЗдют й

Ше: М ей М в я ван ; и 8 Во В Зк Кз 2 В. В. ть га ик І ви йо Віт ла

НІ ,; ІН , мете

В

- н тв нею й я й

Ж до ЩХ мм Я нм" М й ьо, є х 1 т що ше о Я у

Мо м

Ні Но

Ви- во

ЇУ , У ! де 2, ММ, У, Кі, ЕВ», В», Ва, В5, Нв, Но, Вії і Кі? визначені, як зазначено вище, кільце А являє собою насичене 3-7-членне кільце.

Кільце А переважно являє собою насичене 3-6-членне кільце.

Більш переважно в даному винаході запропонована сполука структурної формули МІ! або таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, проліки або їх суміш; або фармацевтично прийнятні солі або сольвати сполуки структурної формули МІ або його таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, проліки або їх суміші, ми ра - Ваз не НУ 7-0

Мб М і й р - Нгг де Вам Но (Сн ату

М ще тВог

УШ де кожен з Кого, В2і, Н22 незалежно вибраний з С1і-С4 алкілу, або Кого являє собою С1-С4 алкіл, а К2ї ії Ко» разом з атомом С, до якого вони приєднані, утворюють насичене 5-6-членні кільце; Кгз вибраний з гідрогену та флуору; п-:0 або 1; Е2« вибраний з групи, що складається з гідрогену, С1-Са алкілу або С1-Са гідроксиалкілу, С) являє собою С або М.

В якості кращого варіанту реалізації в даному винаході запропоновані сполуки наступних структур або їх таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, проліки або їх суміш; або фармацевтично прийнятні солі або сольвати сполук зазначених структур або їх відповідні таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, проліки або їх суміші,

ще х є й я

М А й же - Ж як йокя ук, й ву Х і «х зу о) є сь «

Х 5 | о дим ШК й ІН Га ке с

Бк ак ра Кк ММ ет Ж Кі вчи

НІ же Хе М: осв ій й А

Кк. - Зх ї х ся под ї е с сво же У й ки ЦІ в ше ку зд і си веечу НЕ : я Я Н -х ов рай ий ПАЗИ ом, Хе

Гї ; м я ак ШИН ОК вза

У ци : о х й ее Зх КУ чо х КО а ЧИНИ ВІ Б й ех я . і мо Бе й : м 7 ци І Н хх зонеК, Н кВ чи 7 АВМ є Е 1 Оз

КУА тки жи : у. Ч Ї і

Му й : я :

ШИК ій НК х де НН песни я ц мих шко І

К Ж атм оди Я Я я ме чий

Мету ке не ГНН НЕ щи их ке шк Ко З те і 5 Ух КУЗИК я : ІН т МЕ З ІЗ

АВ; ен В хх а ЇХ ж я не ох

Я МАХ ой ЯК зом Хе ши:

М. в У «їх щи шк Я У НЯ Б

В: яв. і с --Я о ш МИ с од

У о Н Ех тні фу ІЗ : К-

Кн ї Н Н чле т Ту БИК дн й ЕК ее й ! ГОД З Я х в" СНУ я - , 7 Кк НЯ БК: жк

А ГУ ще шо ай к ІЗ ч Ж й Щі т з я Й її

Х З щи в й 7 дже цем І: нач ух ХО д'чх ек ї т ори ЕН м ш 3 ! ! Ес ен содоету од БА сили хе са ше ЕД вжи Хо оту

Н УНН: НКУ о, 4 |! : них, око ве в ня дея й їшной ЩЕ вяту ан ка ІЗ ї вах соя

С: жи Гете І гомо Шан я Ї Н

Я і і с хол ве Б тво ву ще г і я, їжу Ї КТХ ук дня НК й

У й я б : п чи ден бр бр ї : М. вк І У ї КхЗ ї ІЗ ит» т х реж

В Я ЕД Оз уч би з ра к це Н Н см ої т Ж М жа

Гей е к М

КЗ ц ре Кк ше т М .

НЕК сш Що гЗ Ж у дела З

ГУ Н Хол их У ч . МН ск я

Кох ЕН щх пон ен ие я А й Мч я я весь М М В Ще но МО ий пе ай ІЗ ї ї І АЖ ФІ ж Б ща ї їх Н й З Н дю а с ж - з хі Бо у с, Ей й», ще Е Н Мк сл ся Ган ЩЕ: і: З ветв а ме М я ц ки 3 5 Ж дня щ т. й ї їх У У х ї й 5 й ке ШЕ ши ж нш Ш ех,

ЕД кі зад і ї х ! ох Бе (Ще і му -В ; З х щи нн хо Х І ї а х ре х т те арх ЕД Н В ко ! ї; УДО о гу Ма Н Н ІЗ і М бл

Н Й Її р ух В х Я Я еще де ЖЕ що І 7 - Ми реак жили з Н

А ІН 3 яю у т ою ет. КОМ й Моз вести Б ие Х З ке м " ЩІ вт хи ж ет х с сш с чи, ем ха ГОД ди

НЕ: см Ї і з. НН их нет Х і

Зо вх Се Е ц КЗ Кк "в Б ее т в в З нм кет : ШУ ї КО Е КУ ка оак ї ІН Н я и м с А в Же -- ща Кі с з всакя ма Ку я їі: К І Н чн -К и хм дим : не соди ї ЕХ, ой він

М Же Ко Н кох й її

В У І 1 ше ж и ЗДУ

У У й РО ей ск ву У нн Н ' ї ту 5 зх ї чих Н Е : ! М У Ї : ; х зи суми? й ! пе цу тий й : ; ие ех ж песня з соя Кк ГКУ - е МКУ

ЗИ вес пре ге ті вл

КИНЕ п св ше х сти ЕК пиши че: ж си й я ще чи.

ЕЯ І 1 й кт Хв й» ї ї чи А й І ї

Зо я М й ї хх С ай Со вай зт Ко, 1 й ян й я о СІЙ їх Ї ж

З Фо у У й ях ват ше М усій й 7 й ЧИНИ ! сови МИ З : й ска ї ес и М х х хх Н ОДА ї ї сЗ х ка ж яеоклї «А, них

Мох ЕД ж їх Я шт щ х Ка Ї Н З їх і 1 . к й о - Моя - М щі НН Не х Н - ї : Я х зи ; й Я і Н и ок ;

ма щі сяйни че Й нк тя ще ще оку вк з, ле ; яв ше сш ша зе рей їй кі з щі що й п за ш іч, й ек Кк вх с я Я ді я -е й че | з | м й че ; г ай

Я Кожей КУ ій

Зк й і ще Щи: вузи еєчьий пеню : я ще тих як хо йо сх з ож, ї ще ее ень ж кН: ОН ШИ о ЩО о: у ОД В щих м живи Де и тр оту п Х в 7 кВ. в: ВЕ А х І: я в ж що Й ще х | 5 І і ау в Й І в в хх що к шених о ЖЕ в я З ше й КУ: вострг че Кк: з щ- я ток ие

Кок кс ХА, С: Ах о Кв о щи те з х сту й я с че ще ве з Мих, х йм з КЕ к

З ек сит в

КЕ Хей в Є пре щі Кн т ЩЗ «іх ие, А а ей о: в ок її

Сполуки відповідно до цього винаходу також включають всі вищезгадані сполуки, які є ізотопно-міченими.

В іншому аспекті в даному винаході додатково запропонована сполука структурної 5 формули МІ або таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, пролікарська сполука або їх суміш; або фармацевтично прийнятні солі або сольвати сполуки структурної формули Мі або її таутомера, мезомера, рацемата, енантіомера, діастереомера, дейтерованої сполуки, проліків або їх суміші я Ка

М Ше є я хи пф см ї й

У де Ки, В», Вз, Ва їі К5 визначені, як зазначено вище, Х являє собою відхідну групу або аміногрупу.

Х переважно являє собою галоген або аміно, більш переважно флуор, бром, хлор або аміно.

В іншому аспекті в даному винаході запропонований спосіб отримання сполуки структурної формули І що включає проведення реакції сполучення, що каталізується паладієм, між сполукою формули МІ і сполукою формули МІ! в розчиннику, що дає сполуку формули Ї, ве М зе по

Н зе ж 4 пику й В. не ех я с я ше в о І

З в. Не

В. 7 З Ко В

Во В п

Уї У І де Кі, ВН», Нз, Ва», В5, Кб і К7 визначені, як зазначено вище; кожен з Х і М незалежно являють собою відхідну групу або аміногрупу, тільки один з Х і М являє собою аміногрупу, і один з двох повинен являти собою аміногрупу; відхідна група переважно являє собою галоген; більш переважно відхідна група являє собою флуор, бром або хлор.

При цьому вищевказаний спосіб отримання може додатково включати видалення захисної групи.

При цьому вищевказаний спосіб отримання може додатково включати розділення і/або очищення продуктів, і розділення і/або очищення можна здійснювати за допомогою методу, який зазвичай використовується в органічному синтезі, наприклад, придатної комбінації методів фільтрування, екстракції, промивання, концентрування, хроматографії та тому подібне.

В іншому аспекті в даному винаході запропоновано застосування сполук структурних формул ІМ і МІШ або їх відповідних таутомера, мезомера, рацемата, енантіомера, діастереомера, дейтерованої сполуки, проліків або їх суміші; або фармацевтично прийнятних солей або сольватів сполук формул ІМ і МІ або їх відповідних таутомера, мезомера, рацемату, енантіомера, діастереомеру, дейтерованої сполуки, проліків або їх суміші при виробництві фармацевтичної композиції для лікування розладу проліферації клітин.

Фармацевтична композиція переважно містить фармацевтично прийнятну допоміжну речовину.

Розлад проліферації клітин переважно відноситься до раку ссавця або людини, більш переважно відноситься до раку людини, у тому числі злоякісним солідним пухлинам і злоякісним несолідним пухлинам, зокрема включаючи, але не обмежуючись ними, рак молочної залози, рак легенів, рак передміхурової залози, лейкоз, рак головного мозку, рак шлунка та гліому.

Розлад проліферації клітин переважно може також являти собою СНІД, атеросклероз і рестеноз після імплантації судинного стента.

Зазначене застосування переважно відноситься до застосування сполук структурних формул ІМ і МІШ або їх відповідних таутомера, мезомера, рацемата, енантіомера, діастереомера, дейтерованої сполуки, проліків або їх суміші; або фармацевтично прийнятних

Зо солей або сольватів сполук формул ІМ і МІ! або їх відповідних таутомера, мезомера, рацемата, енантіомера, діастереомера, дейтерованої сполуки, проліків або їх суміші, в якості єдиного активного інгредієнта або в комбінації з іншими біологічно активними речовинами при виробництві фармацевтичної композиції для лікування розладу проліферації клітин.

Інші біологічно активні речовини включають, але не обмежуючись ними, протиракові агенти, імунодепресивні агенти і противірусні агенти; причому протираковий агент вибраний з алкілюючого агенту (такого як циклофосфамід, фосфамід, тіотепа, семустін, мехлоретаміна гідрохлорид, бусульфан, хлорамбуцил, мелфалан, нітрокафан, формілмелфалан, кармустин, ломустин, альтретамін, дибромоманніт, темозоломід тощо), антіметаболітних протипухлинних лікарських засобів (таких як цитарабін, фторурацил, метотрексат, гідроксимочевина, тегафур, меїізоіїндіго, меркаптопурин тощо), агент, що являє собою комплекс з платиною (такий як цисплатин, карбоплатин, оксаліплатин тощо), антибіотичних протипухлинних лікарських засобів (актиноміцина 0, митоміцина, доксорубіцина, пінгіангміціна, епірубіцина, пірарубіціна, даунорубіцина, блеоміцина і тому подібне), протипухлинних лікарських засобів природного походження (гомогаррінгтоніна та його похідних, вінкристину та його похідних, гідроксикамптотеціна та його похідних, етопозиду та його похідних, віндезіна та його похідних, вінбластина та його похідних, вінорелбіна гідротартрата, таксолу та його похідні, колхіцину та його похідних, елемена та його похідних і тому подібне), гормональних протипухлинних лікарських засобів (таких як аміноглутетимід, тамоксифен, дексаметазон, дутастерид, флутамід, гонадорелін, лейпролід ацетат, летрозол тощо), інгібіторів МЕСЕК або ЕСЕЕ (таких як сунітиніб,

БО сорафеніб, іматиніб, гефітиніб, ерлотиніб, вандетаніб, пазопаніб, лапатиніб, канертиніб, афатиніб, мубритиніб, дазатиніб, нератиніб тощо), протипухлинних лікарських засобів, що являють собою антитіла (таких як трастузумаб, пертузумаб, ритуксимаб, панітумумаб, бевацизумаб, іпілімумаб, офатумумаб, рамуцірумаб тощо), інгібіторів ттТОм (таких як еверолімус, сиролімус, зотаролімус тощо) і лікарських засобів для лікування пухлини головного мозку, таких як темозоломід тощо.

В іншому аспекті в даному винаході запропонований комбінований продукт для лікування розладу проліферації клітин, причому комбінований продукт містить одну або декілька сполук, обраних із сполук структурних формул ІМ і МІ або їх відповідних таутомера, мезомера, рацемата, енантіомера, діастереомера, дейтерованої сполуки, проліків або їх суміші; або бо фармацевтично прийнятних солей або сольватів сполук формул ІМ ї МІ! або їх відповідних таутомера, мезомера, рацемата, енантіомера, діастереомера, дейтерованої сполуки, проліків або їх суміші.

Комбінований продукт переважно додатково містить фармацевтично прийнятні допоміжні речовини, і/або комбінований продукт являє собою набір.

В іншому аспекті в даному винаході додатково запропонований спосіб лікування розладу проліферації клітин, що включає введення пацієнту, який цього потребує, перорально або неперорально ефективної кількості сполук за даним винаходом або вищезгаданого комбінованого продукту.

Вищевказаний спосіб лікування розладу проліферації клітин переважно включає введення пацієнту перорально або неперорально ефективної кількості сполук за даним винаходом і зазначених інших біологічно активних речовин. Зазначені інші біологічно активні речовини включають, але не обмежуючись ними, протиракові агенти, імунодепресивні агенти і противірусні агенти; причому протираковий агент вибраний з алкілюючого агенту (такого як циклофосфамід, іфосфамід, тіотепа, семустін, мехлоретамін гідрохлорид, бусульфан, хлорамбуцил, мелфалан, нітрокафан, формілмелфалан, кармустин, ломустин, альтретамін, дибромоманніт, темозоломід тощо), антиметаболітних протипухлинних лікарських засобів (таких як цитарабін, фторурацил, метотрексат, гідроксимочевина, тегафур, меїзоіндіго, меркаптопурин тощо), агент, що являє собою комплекс з платиною (такий як цисплатин, карбоплатин і оксаліплатин), антибіотичних протипухлинних лікарських засобів (актиноміцину О, митоміцина, доксорубіцину, пінгіангміціну, епірубіцину, пірарубіцина, даунорубіцину, блеоміцина і тому подібне), протипухлинних лікарських засобів природного походження (гомогаррінгтоніна та його похідних, вінкристину та його похідних, гідроксикамптотеціна та його похідних, етопозиду та його похідних, віндезіна та його похідних, вінбластину і його похідних, вінорелбіна гідротартрата, таксолу і його похідних, колхіцину і його похідних, елема і його похідних і тому подібне), гормональних протипухлинних лікарських засобів (таких як аміноглутетимід, тамоксифен, дексаметазон, дутастерид, флутамід, гонадорелін, лейпролід ацетат, летрозол тощо), інгібіторів МЕСЕК або ЕСЕМК (таких як сунітиніб, сорафеніб, іматиніб, гефітиніб, ерлотиніб, вандетаніб, пазопаніб, лапатиніб, канертиніб, афатиніб, мубрітиніб, дазатиніб, нератиніб тощо), протипухлинних лікарських засобів, що являють собою антитіла (такі як трастузумаб, пертуз умаб, ритуксимаб, панітумумаб, бевацизумаб, іпілімумаб, офатумумаб, рамуцірумаб тощо), інгібіторів тТОК (таких як еверолімус, сиролімус, зотаролімус тощо) і лікарських засобів для лікування пухлини головного мозку, таких як темозоломід тощо.

Пероральний або непероральний шлях може являти собою доставку пацієнту перорально або за допомогою ін'єкції, пластиру, спрею і одного або більшої кількості інших відомих шляхів.

Ефективна кількість може включати кількість, яка ефективна для лікування, зменшення, пом'якшення, ослаблення, усунення одного або більшої кількості симптомів патологічного стану, яке намагаються вилікувати або в альтернативному варіанті намагаються попередити, або кількість, яка ефективна для додаткового отримання корисних змін, що клінічно виявляються, в патологічному стані або його наслідків.

В іншому аспекті в даному винаході запропоновано сполуку для лікування розладу проліферації клітин або його відповідний таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, проліки або їх суміш; або фармацевтично прийнятні солі або сольвати сполук формул ІМ і МІ або їх відповідних таутомера, мезомера, рацемату, енантіомера, діастереомера, дейтерованої сполуки, проліки або їх суміші, причому структурна формула сполуки являє собою одну або більшу кількість структурних формул, вибраних з групи, що складається із структурних формул ІМ і МИ; розлад проліферації клітин переважно відноситься до раку ссавця або людини, більш переважно відноситься до раку людини, в тому числі злоякісним солідним пухлинам і злоякісним несолідним пухлинам, зокрема включаючи, але не обмежуючись ними, рак молочної залози, рак легенів, рак передміхурової залози, лейкоз, рак головного мозку, гліому і рак шлунку; і/або розлад проліферації клітин являє собою одно або декілька захворювань, вибраних з групи, що складається з СНІДУ, атеросклерозу і рестенозу після імплантації судинного стента.

При описі даного винаходу, якщо не вказано інше, "С1-Свє алкіл" відноситься до лінійного або розгалуженого Сі-Св алкілу; "С1-С4 алкіл" відноситься до лінійного або розгалуженого С1-С4 алкілу, переважно метилу, етилу, пропілу або ізопропілу. "Сі-Св алкокси" відноситься до С1-Св лінійного або розгалуженого алкокси, переважно С1-С4 лінійного або розгалуженого алкокси, більш переважно метокси, етокси, пропокси або 2-метилетокси. "Сз-Сє циклоалкіл" відноситься до незаміщеного Сз-Сє циклоалкілу або Сз-Свє циклоалкілу, заміщеного С1-Са алкілу і/або С1-С4 60 алкокси, переважно незаміщеного Сз-Сє циклоалкілу або Сз-С6 циклоалкілу, заміщеного С1-С4 алкілу або Сі-С4 алкокси, більш переважно циклопропілу, циклобутилу, метилциклопропілу, циклопентилу або циклогексілу. "Галоген" відноситься до брому, хлору або флуору. "С1-Св галогеналкіл" відноситься до лінійного або розгалуженого С1і-Сє алкілу, заміщеному бромом, хлором або флуором, переважно лінійному або розгалуженому С:і-С4 алкілу, заміщеному хлором або флуором, переважніше монофлуорометилу, дифлоурометилу, трифлоурометилу, монохлорометилу, дихлорометилу, трихлорометилу, 1-флуороетилену, 1-хлоропропілу, 1- хлороетилу та 1-хлоропропілу.

Наявні дослідження свідчать, що токсичність інгібіторів СОК головним чином пов'язана з пригніченням СОК'І та інших протеїнкіназ, таких як Ріт-1, треонін-/серинкіназа, які кодуються протоонкогеномом з такою ж назвою. Отже, очікується, що як сполуки, які інгібують СОК, вони характеризуються більш значущою відмінністю між впливом на СОК4/СОКб і на СОКІ1 та інші кінази, тобто селективним інгібуванням СОК4/СОКб. Сполуки, запропоновані в даному винаході, краще або співставні за активністю з І! 2835219, кандидатом, який на даний момент вивчається в клінічному дослідженні ІП фази, а деякі сполуки демонструють кращу селективність до кінази.

Крім того, переважна сполука (отримана у Прикладі 17) добре абсорбується при пероральному введенні і характеризується добрим розподілом між кров'ю і головним мозком. Вищенаведені результати вказують на те, що сполуки з даного винаходу є перспективними для розробки нових лікарських засобів для лікування захворювань, пов'язаних з проліферацією клітин, особливо злоякісних пухлин, особливо раку головного мозку.

Детальний опис суті винаходу

Даний винахід описано нижче на підставі конкретних прикладів. Фахівцю в даній галузі техніки повинне бути зрозуміло, що ці приклади є тільки ілюстрацією винаходу і не призначені для обмеження обсягу винаходу будь-яким способом.

Сполуки формули МІ з даного винаходу є основними проміжними речовинами для синтезу сполук формули І, ії їх піддають реакції сполучення, що каталізується паладієм, зі сполуками формули МІЇ в розчиннику, що дає сполуки формули І. в з 16 ий М З

А ве нят що х М МОХ (А й Ї я пня М М

М в | і и я--й 5 в о з В; 8 В

В. В, В, Яа Я

Сполуки формули МІ можна синтезувати за допомогою такої схеми реакцій: мав отой ог ур Ку мн. т В: й ; те Во пенні Ва й сего і них но у;

Ве А: А

Й ее я На В з

Ко) де ЕК, В», В», Ва», В5, Нб і К7 визначені, як зазначено вище, Х являє собою відхідну групу або аміногрупу.

Кожен з Кі, В» і Ез переважно незалежно вибраний з атома гідрогену, незаміщеної С1-Св вуглеводневої групи або С1-Сє вуглеводневої групи, заміщеної одним або більшою кількістю замісників, вибраних з Сі-Сє вуглеводневої групи, гідроксилу або галогену.

В якості альтернативного варіанту, в якості іншого кращого варіанту, Кі: визначено, як зазначено вище, а Е» і Ез разом з атомом С, до якого вони приєднані, утворюють насичене або ненасичене 3-7-членне кільце; більш переважно Ко і Кз разом з атомом С, до якого вони приєднані, утворює насичене 3-7-членне кільце.

Кожен з Ка і К5 переважно незалежно являє собою гідроген або флуор, і щонайменше один

З Кі К5 являє собою флуор.

Ве переважно являє собою атом водню або С1-Сх алкіл.

В; переважно являє собою замісник наступної структури: дин В ! КЕ Ж. ко ий а 7 шаф сива, че ТА, С дян або «МА, де кожен з Ка і Кі5х незалежно вибраний з групи, що складається з атома гідрогену, С1-С4 алкілу та С1-Са гідроксиалкілу.

Як альтернативний варіант, в якості іншого кращого варіанту реалізації винаходу Кб і К7 разом з атомом С, до якого вони приєднані, утворюють наступну хімічну структуру: вічі

С о облто, де Кі? вибраний з гідроксилу або С1-Сз алкокси; більш переважно гідроксилу.

Якщо не вказано інше, всі експериментальні методики в наступних прикладах являють собою загальноприйнятні методики. Якщо не вказано інше, вихідні хімічні речовини, реагенти тощо, які використовуються в наступних прикладах, являють собою комерційно доступні продукти.

Скорочення і їх значення, що зустрічаються в прикладах даного винаходу, наведені нижче:

ПЕ: петролейний ефір

ЕА: етилацетат

ДХМ: дихлорометан

Меон: метанол

Ра (аррдСі»: П1,1-бісідифенілфосфіно)фероцен|паладію дихлорид

РД(РРз)«: тетракис(трифенілфосфін)паладій

Разх(ава)з: трис(дибензиліденацетон)дипаладій

Манв(Одс)з: триацетоксиборгідрид натрію

ІГНМО5: гексаметилдисилазид літію

ДАФІ: флуоресцентний барвник ДАФІ

Приклад 1 5-Флуоро-4-(7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН-індол-5-іл)-М-(5-(піперазин-1-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно к- | КЕ пк ск Оз й 2 о. чай "м а

С

Кк г

Стадія 1: трет-бутиловий естер 4-(6б-нітропіридин-З3-іл)піперазин-1-карбонової кислоти чо; (З

Ек, ШЕ

С

"м

Е

Вас

Зо У реакційну колбу вносили 5-бромо-2-нітропіридин (5,0 г, 24,63 ммоль), трет-бутиловий естер піперазин-і-карбонової кислоти (5,04 г, 27,09 моль), ацетонітрил (30 мл) та діізопропілетиламін (4,77 г, 36,94 ммоль). Суміші давали реагувати при нагріванні зі зворотним холодильником протягом 2 год. Продукт реакції піддавали випаровуванню на роторі для видалення розчинника і відділялли за допомогою колонкової хроматографії (ПЕ/ЕА - 1:1 до дхХмМ/Меон-г0:1) для отримання цільової сполуки (3,8 г, жовта тверда речовина).

МС (ЕРІ): розр. маса для С1і4НгоМаОх4 308,1, знайдене іп/7 309,1 (МаНІ».

Стадія 2: трет-бутиловий естер 4-(6-амінопіридин-3-іл)/піперазин-1-карбонової кислоти

МН

Що; ше х

Тос

У реакційну колбу вносили трет-бутиловий естер 4-(6б-нітропіридин-З-іл)піперазин-1- карбонової кислоти (0,92 г, 3,0 ммоль), отриманий на Стадії 1, етилацетат/метанол (10 мл/10 мл) та Ра/С (0,1 г) та продували газоподібним воднем. Реакцію виконували при кімнатній температурі протягом 2 год. Продукт реакції відфільтровували та концентрували, щоб отримати цільову сполуку (792 мг, жовтувата тверда речовина).

МС (ЕРІ): розр. маса для Сі4Нг2МаО» 278,2, знайдене іп/2 279,2 (Ма-НІХ.

Стадія 3: отримання 5-бромо-7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН-індола

Ве в Ж / і став, й

У реакційну колбу вносили (4-бромо-2-флуорофеніл)гідразин гідрохлорид (1,0 г, 4,14 ммоль), оцтову кислоту (10 мл) та З-метил-2-бутанон (0,32 г, 4,14 ммоль). Суміші давали реагувати при нагріванні зі зворотним холодильником протягом 5 год. Продукт реакції піддавали випаровуванню на роторі для видалення розчинника, додавали 20 мл води та тричі екстрагували етилацетатом (по 20 мл кожного разу). Об'єднану органічну фазу одноразово промивали 25 мл насиченого водного розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, піддавали випаровуванню на роторі та розділяли за допомогою колонкової хроматографії (ДХМ:Меона.50:1 до 25:71), щоб отримати цільову сполуку (420 мг, жовта тверда речовина). "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ»з) б 7,23-7,21 (м, 2Н), 2,30 (с, ЗН), 1,32 (с, 6Н).

МС (ЕРІ): т/2 258,0 |МаАНІ».

Стадія 4: отримання 7-флуоро-2,3,3-триметил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2- іл)-ЗН-індола

Код опи ! р и | х

У реакційну колбу вносили 5-бромо-7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН-індол (400,0 мг, 1,56 ммоль), отриманий на Стадії 3, 4,4,44,5,5,5,5'-октаметил-2,2'-біс(1,3,2-діоксаборолан) (436,5 мг, 1,71 ммоль), ацетат калію (306,3 мг, 3,12 ммоль), діоксан (10 мл) та Ра(аррОсСі» (228,7 мг, 0,32 ммоль). Суміш нагрівали до 90 "С під захистом газоподібного азоту та давали реагувати

Зо протягом ночі. Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, додавали 10 мл води та тричі екстрагували етилацетатом (по 20 мл кожного разу). Об'єднували органічні фази етилацетату, одноразово промивали 25 мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ДХМ: Меон-50:1-30:1), щоб отримати цільову сполуку (306,5 мг, жовте масло).

МС (ЕРІ): т/2 304,1 |МАНІ».

Стадія 5: отримання 5-(2-хлоро-5-флуоропіримідин-4-іл)-7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН- індола шк пл зи ще р

У реакційну колбу для мікрохвильової обробки вносили 7-флуоро-2,3,3-триметил-5-(4,4,5,5- тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-ЗН-індол (300 мг, 0,99 ммоль), отриманий на Стадії 4, 2,4- дихлоро-5-флуоропіримідин (181,8 мг, 1,08 ммоль), фосфат калію (419,8 мг, 1,98 ммоль), суміш діоксан/вода (4 мл/1 мл) та РА(РРз)4 (114,5 мг, 0,09 ммоль). Реакцію під дією мікрохвильового випромінювання проводили під захистом газоподібного азоту при 130 С протягом 1 год.

Реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, додавали 10 мл води та екстрагували тричі дихлорометаном (по 15 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 20 мл насиченого водного розчину хлориду натрію, потім сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, піддавали випаровуванню на роторі та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ДХМ:МеОН-100:1-50:1), щоб отримати цільову сполуку (301,2 мг, жовта тверда речовина).

МС (ЕРІ): розр. маса для Сі5НІ2СІР2М3з 307,1, знайдене т/7 308,1 (МАНІ.

Стадія 6: отримання трет-бутилового ефіру 4-(6-(5-флуоро-4-(7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН- індол-5-іл)піримідин-2-іл)аміно)піридин-3-іл)піперазин-1-карбонової кислоти м і Е нк7ж ше й й --Ук КУ

НІ - 64 а Я г ч

Вос

У реакційну колбу вносили 5-(2-хлоро-5-флуоропіримідин-4-іл)-7-флуоро-2,3,3-триметил-

ЗН-індол (150,0 мг, 0,48 ммоль), отриманий на Стадії 5, трет-бутиловий естер 4-(6б-амінопіридин-

З-іл)/піперазин-1-карбонової кислоти (135,8 мг, 0,48 ммоль), отриманий на Стадії 2, карбонат цезію (371,6 мг, 0,96 ммоль), діоксан (3 мл), Раз(ара)з (44,7 мг, 0,05 ммоль) та 4,5- бісідифенілфосфіно)-9,9-диметилксантен (30,4 мг, 0,05 ммоль). Суміш нагрівали до 150 "С під захистом газоподібного азоту, щоб здійснити реакцію під дією мікрохвильового випромінювання протягом 1 год. Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, додавали 10 мл води та тричі екстрагували дихлорометаном (по 10 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 30 мл насиченого водного розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ДХМ/МеоН.50:1), щоб отримати цільову сполуку (53,4 мг, жовта тверда речовина).

МС (ЕРІ): розр. маса для СгоНззб2М7О» 549,3, знайдене т/2 550,3 (МАНІ.

Зо Стадія 7: отримання 5-флуоро-4-(7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН-індол-5-іл)-М- (5-(піперазин-1-іл)піридин-2-іл)піримідин-2-амінотрифлуорацетата

С ня зи вч 1 Ж

М ї М вка е к

У реакційну колбу вносили трет-бутиловий естер 4-(6-(5-флуоро-4-(7-флуоро-2,3,3- триметил-ЗН-індол-5-іл)піримідин-2-ілламіно)піридин-3-іл)упіперазин-1-карбонової кислоти (30,0 мг, 0,054 ммоль), отриманий на Стадії 6, дихлорометан (4 мл) та трифтороцтову кислоту (1 мл), та суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 2 год. Продукт реакції піддавали випаровуванню на роторі для видалення розчинника, встановлювали рН 8 за допомогою насиченого водного розчину гідрокарбонату натрію та тричі екстрагували дихлорометаном (по 5 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 10 мл насиченого водного розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, піддавали випаровуванню на роторі та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ДХМ/МеОН-20:1), щоб отримати цільову сполуку (10,5 мг, жовта тверда речовина). "Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ав) 6 9,75 (ш. с., 1Н), 8,65 (д, 1Н, 9У-3,2 Гц), 8,02-7,94 (м, ЗН), 7,82 (д, 1ТН, 9У-10,8 Гц), 7,43 (д, 1Н, У-8,8 Гц), 3,09-3,02 (м, 4Н), 2,84-2,83 (м, 4Н), 2,31 (с, ЗН), 1,34 (с, бН).

МС (ЕРІ): розр. маса для СгаНо5Р2М;7 449,50, знайдене тп/2 450,2 (МАНІ.

Приклад 2

М-(5-(4-Етилпіперазин-1-іл)метил)піридин-2-іл)-5-флуоро-4-(7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН- індол-5-іл)піримідин-2-аміно о ян зе КЗ

Меса

Стадія 1: 1-((6-бромопіридин-3-іл)метил)-4-етилпіперазин

Ще

З

Ук 2-бромо-5-формілпіридин (1,5 г, 8,15 ммоль), 1-етилпіперазин (0,93 г, 8,15 ммоль) та дихлорометан (15 мл) вносили у реакційну колбу, а потім порціями додавали Манв(ОАдс)з (2,58 г, 12,23 ммоль). Реакцію проводили при кімнатній температурі протягом ночі. Продукт реакції відфільтровували, концентрували і відділялли за допомогою колонкової хроматографії (ДХМ/Меон-100:1 до 10:1), щоб отримати цільовий продукт (1,64 г, жовте масло).

МС (ЕРІ): розр. маса для С12НівВІіМз 285,1, знайдене іп/7 286,1 ІМ-АНІ".

Стадія 2: 5-((4-етилпіперазин-1-іл)метил)піридин-2-аміно пт

Ж -

Ве

А

У реакційну колбу вносили 1-((6-бромопіридин-3-ілуметил)-4-етилпіперазин (2,84 г, 10 ммоль), отриманий на Стадії 1, 2-(дициклогексілфосфіно)біфеніл (700 мг, 2 ммоль), Раг(ава)з (915 мг, 1 ммоль) та толуол (30 мл), додавали І НМОЗ5 (1 н.) (20 мл, 20 ммоль) під захистом газоподібного азоту. Суміш нагрівали до 80 "С та давали реагувати протягом ночі, потім охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, концентрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії (ДХМ/МеоН-100:1-10:1), що давало 1,52 г цільового продукту (коричнева тверда речовина).

Зо МС (ЕРІ): розр. маса для СізНаїМз 220,2, знайдене т/2 221,2 |МАНІ..

Вей

ЖК У

У реакційну колбу вносили (4-бромо-2-флуоробензен)гідразин (900,0 мг, 3,73 ммоль), оцтову кислоту (5 мл) та З-метилбутан-2-он (353,3 мг, 4,09 ммоль). Суміші давали реагувати при нагріванні зі зворотним холодильником протягом 5 год. Продукт реакції піддавали випаровуванню на роторі для видалення розчинника, додавали 10 мл води та тричі екстрагували етилацетатом (по 20 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 25 мл насиченого водного розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували та піддавали випаровуванню на роторі. Залишок розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (етилацетат:петролейний ефір - 1: 50-1: 25), що давало 910 мг цільової сполуки (жовта тверда речовина).

МС (ЕРІ): т/2 258,0 (МАНІ.

Стадія 4: отримання 7-флуоро-2,3,3-триметил-5-(4,4,5,5-тетраметил- 1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-ЗН-індола

Ми те ше р

У реакційну колбу вносили 5-бромо-7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН-індол (1,0 г, 3,91 ммоль), отриманий на Стадії 3, 4,4,44,5,5,5',5'-октаметил-2,2'-біс(1,3,2-діоксаборолан) (1,09 г, 4,29 ммоль), ацетат калію (770 мг, 7,82 ммоль), діоксан (10 мл), Ра(арросі» (570 мг, 0,78 ммоль) та нагрівали до 90 "С під захистом газоподібного азоту для проведення реакції протягом ночі.

Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, розбавляли 10 мл води та тричі екстрагували етилацетатом (по 20 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 25 мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою сульфату натрію, фільтрували, піддавали випаровуванню на роторі та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ЕА:ПЕ - 1:100-1:20), що давало 1,02 г цільової сполуки (жовте масло).

МС (ЕРІ): т/2 304,2 |МАНІ".

Стадія 5: отримання 5-(2-хлоро-5-флуоропіримідин-4-іл)-7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН -індола ав ств ше шк

У реакційну колбу для мікрохвильової обробки вносили 7-флуоро-2,3,3-триметил-5-(4,4,5,5- тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-ЗН-індол (1,0 г, 3,30 ммоль), отриманий на Стадії 4, 2,4- дихлоро-5-флуоропіримідин (610 мг, 3,63 ммоль), фосфат калію (1,39 г, 6,60 ммоль), суміш діоксан/вода (8 мл/2 мл) та РЯД(РРПЗ)4 (380 мг, 0,33 ммоль). Реакцію під дією мікрохвильового випромінювання проводили під захистом газоподібного азоту при 130 С протягом 1 год.

Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, додавали 10 мл води та тричі екстрагували дихлорометаном (по 15 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 20 мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ЕА:ПЕ - 1:50 до 1:10), що давало цільову сполуку (290,0 мг, жовта тверда речовина).

МС (ЕРІ): т/2 308,1 |МАНІ".

Зо Стадія 6: отримання М-(5-(4-етилпіперазин-1-іл)метил)піридин-2-іл)-5--флуоро-4- (7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН-індол-5-іл)піримідин-2-аміно п нет в: не ше

М евии

ЗН-індол (290,0 мг, 0,94 ммоль), отриманий на Стадії 5, 5-((4-етилпіперазин-1-іл)уметил)піридин- 35 2-амін (228,6 мг, 1,04 ммоль), отриманий на Стадії 2, фосфат калію (400,5 мг, 1,88 ммоль), 10 мл діоксана, Раз(ара)з (86,4 мг, 0,09 ммоль) та 4,5-біс(ідифенілфосфіно)-9,9-диметилксантен (109,2 мг, 0,19 ммоль). Реакцію під дією мікрохвильового випромінювання проводили під захистом газоподібного азоту при 150 "С протягом 1 год. Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, додавали 10 мл води та тричі екстрагували 40 дихлорометаном (по 10 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, піддавали випаровуванню на роторі для видалення розчинника та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (дихлорометан:метанол - 30:1), що давало цільову сполуку (140,3 мг, жовта тверда речовина).

"Н-ЯМР (400 МГц, СОС») 6 8,72 (с, 1Н), 8,49 (д, 1Н, 9У-3,2 Гц), 8,38 (д, 1Н, 9У-8,4 Гц), 8,31 (с, 1Н), 7,92 (с, 1Н), 7,89 (с, 1Н), 7,73 (д, 1Н, 9У-8,4 Гц), 3,52 (с, 2Н), 2,54-2,41 (м, 10ОН), 2,38 (с, ЗН), 1,40 (с, 6Н), 1,10 (т, ЗН, У-7,2 Гу).

МС (ЕРІ): т/: 492,2 |МАНІ".

Приклад З

М-(5-(4-Етилпіперазин-1-іл)уметилпіридин-2-іл)-5-флуоро-4-(7-флуоро-2'- метилспіро|циклопентан-1,3'-індол/|-5'-іл)піримідин-2-аміно

Як Як ве ши ма Не дн Мк, по Ак, ни Ех оди й щи ще

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 2. "Н-ЯМР (400 МГц, СОС») б 9,75 (с, 1Н), 8,54 (д, 1Н, 9У-3,2 Гц), 8,38-8,37 (м, 2Н), 7,94 (с, 1Н), 7,87 (д, 1Н, 9У-10,8 Гу), 7,68 (д, 1Н, 9У-8,4 Гу), 3,49 (с, 2Н), 2,99-2,39 (м, 1ОН), 2,37 (с, ЗН), 2,14- 2,08 (м, 6Н), 1,87-1,84 (м, 2Н), 1,06 (т, ЗН, У-6,4 Гц).

МС (ЕРІ): т/2 518,3 МАНІ».

Приклад 4

М-(5-(4-Етилпіперазин-1-іл)уметил)піридин-2-іл)-5-флуоро-4-(7-флуоро-2'- метилспіро|циклобутан-1,3'-індол|-5'-ілламінопіримідин-2-аміно можн пк сх «Кия й і; о ІЧ р уж С х

Мч

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 2. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІз) б 8,36-8,32 (м, 2Н), 8,23 (с, 1Н), 8,04 (с, 1Н), 7,78-7,75 (м, 2Н), 7,71 (д, 1Н, 9У-8,4 Гу), 5,84-5,83 (м, 1Н), 5,63-5,62 (м, 1Н), 4,39-4,38 (м, 1Н), 3,66-3,64 (м, 1Н), 3,51 (с, 2Н), 3,06-3,00 (м, 1Н), 2,71-2,38 (м, 11Н), 1,55 (с, ЗН), 1,11 (т, ЗН, 9У-7,2 Гц).

МС (ЕРІ): т/2 504,3 |МаАНІ».

Приклад 5 4-(3-Етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-М-(5-(4-етилпіперазин-1-іл)метил)піридин- 2-іл)-5-флуоропіримідин-2-аміно ве як сем ше Е нету - : І х ет ї ще

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 2. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 8,71 (с, 1Н), 8,49 (д, 1Н, У-3,6 Гц), 8,38 (д, 1Н, У-8,4 Гц), 8,31 (с, 1Н), 7,94 (д, 1Н, 9У-11,2 Гу), 7,86 (с, 1Н), 7,72 (дд, 1Н, 9У-8,0, 1,2 Гц), 3,52 (с, 2Н), 2,53-2,А41 (м,

Зо 1ОН), 2,34 (с, ЗН), 2,06-1,93 (м, 1Н), 1,91-1,84 (м, 1Н), 1,39 (с, ЗН), 1,09 (т, ЗН, 9У-7,2 Гу), 0,50 (т,

ЗН,9У-7,2 Гу).

МС (ЕРІ): т/2 506,3 МАНІ".

Приклад 6 5-Флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол|-5'-іл)-М-(5-(піперазин-1- іл)піридин-2-іл)піримідин-2-аміно на рак Е вит, Кв г х з

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 1. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 8,67 (ш. с., 1Н), 8,44 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,29 (д, 1Н, 9У-9,2 Гц), 8,11 (д, 1Н, У-2,4 Гу), 7,95 (с, 1Н), 7,89 (д, 1Н, 9У-10,8 Гу), 7,36 (дд, 1Н, 9-9,2, 2,8 Гу), 3,12-3,06 (м, 8Н), 2,39 (с, ЗН), 2,16-2,10 (м, 6Н), 1,89-1,86 (м, 2Н).

МС (ЕР): т/2 476,2 |МААНІ".

Приклад 7 4-(3-Етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(піперазин-1-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно н ше ий ня сш і-й ра

Н КО й

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 1. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 9,33 (ш. с., 1Н), 8,46 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,28 (д, 1Н, 9У-8,8 Гц), 8,16 (д, 1Н, У-2,4 Гу), 7,90 (д, 1Н, У-10,8 Гу), 7,82 (с, 1Н), 7,35 (дд, 1Н, У-8,8 Гц, 2,8 Гц), 3,10-3,03 (м, 8Н), 2,31 (с, ЗН), 2,03-1,80 (м, ЗН), 1,36 (с, ЗН), 0,47 (т, 6Н, 9У-7,6 Гц).

МС (ЕРІ): т/: 464,2 |МАНІ".

Приклад 8

М-(5-(4-Етилпіперазин-1-іл)уметил)піридин-2-іл)-4-(7-флуоро-2'-метилспіро|циклопентан-1,3'- індол|-5'-іл)піримідин-2-аміно ще бе я т

ЩЕ

Ї дає

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 2. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») 6 8,83 (с, 1Н), 8,61 (д, 1Н, 9У-5,2 Гц), 8,49 (д, 1Н, У-8,8 Гц), 8,32 (д, 1ТН,ШЧ-1,2 Гу), 7,91 (д, 1Н, 9У-1,2 Гу), 7,78 (д, 1Н, 9У-10,8 Гу), 7,78 (дд, 1Н, 9У-8,4, 1,6 Гу), 7,21 (д, 1ТН, 2-52 Гу), 3,52 (с, 2Н), 2,54-2,41 (м, 10ОН), 2,38 (с, ЗН), 2,19-2,08 (м, 6Н), 1,90-1,87 (м, 2Н), 1,10 (т, ЗН, У-6,8 Гу).

МС (ЕРІ): т/2 500,3 (МАНІ.

Приклад 9

М-(5-((4-Єтилпіперазин-1-іл)метил)піридин-2-іл)-5-флуоро-4-(2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'- індол/|-5-іл)піримідин-2-аміно ма? вам, ій жк и І г

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 2.

Коо) "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 8,73 (ш. с., 1Н), 8,47 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,43 (д, 1Н, 9У-8,4 Гу), 8,30 (с, 1Н), 8,15-8,13 (м, 2Н), 7,70-7,64 (м, 2Н), 3,52 (с, 2Н), 2,53-2,37 (м, ТОН), 2,31 (с, ЗН), 2,21-2,06 (м, 6Н), 1,89-1,86 (м, 2Н), 1,10 (т, ЗН, 9У-7,2 Гц).

МС (ЕРІ): т/2 500,3 (МАНІ.

Приклад 10 4-(3,3-Діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН-індол-5-іл)-М-(5-(4-етилпіперидин-1-ілуметил)піридин-2- іл)у-5--флуоропіримідин-2-аміно о ве втси я й че

"Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») 6 9,19 (ш. с., 1Н), 8,53 (с, 1Н), 8,39-8,34 (м, 2Н), 7,95 (д, 1Н, 9У-11,2

Гц), 7,83 (с, 1Н), 7,72 (д, 1Н, 9У-8,0 Гу), 3,51 (с, 2Н), 2,52-2,41 (м, 1ОН), 2,31 (с, ЗН), 2,06-2,01 (м, 2Н), 1,90-1,85 (м, 2Н), 1,08 (т, ЗН, 9У-6,8 Гц), 0,46 (т, 6Н, 9У-6,8 Гц).

МС (ЕРІ): т/2 520,3 МАНІ".

Приклад 11 4-(3-Етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(піперидин-1-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно чт щ.

Ки

Стадія 1: трет-бутиловий естер в-нітро-3',6'-дигідро-(3,4-біпіридині|-1'(2'Н)- карбонової кислоти що, шо їхе

У реакційну колбу вносили 5-бромо-2-нітропіридин (20,3 г, 0,1 моль), трет-бутиловий естер 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)- 5,б-дигідропіридин-1(2Н)-карбонової кислоти (31 г, 0,1 моль), суміш діоксан/вода (250 мл/30 мл), карбонат цезію (66 г, 0,2 моль) та Ра(арросі?» (7,33 г, 0,01 моль) та продували газоподібним азотом. Суміш нагрівали до 85 "С протягом 12 год. Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, концентрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії (ПЕ/ЕА - 171 до ДХМ/МеОН-20:1) для отримання цільового продукту (11 г, жовта тверда речовина).

МС (ЕРІ): розр. маса для С15Ні»МзОх4 305,1, знайдене іп/7 306,1 (МаНІ».

Стадія 2: трет-бутиловий естер 4-(6-амінопіридин-3-іл)/упіперидин-1-карбонової кислоти мі ш

Цих

У реакційну колбу вносили трет-бутиловий естер б-нітро-3',6'-дигідро-ІЗ,4-біпіридині-1(2'Н)- карбонової кислоти (0,9 г, 3,0 ммоль), отриманий на Стадії 1, етилацетат/метанол (10 мл/10 мл) та Ра/С (0,1 г). Подавали водень та реакцію виконували при кімнатній температурі протягом 2 год. Продукт реакції відфільтровували та концентрували, щоб отримати цільовий продукт (790 мг, жовтувата тверда речовина).

МС (ЕРІ): розр. маса для Сі5НгзіМзО» 277,2, знайдене ітп/2 278,2 (МАНІ. 4-(3-Етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(піперидин-1-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно ка Бо щи "а ві рю 5 ро й : йо Ки ще

Зо н

Інші стадії здійснювали відповідно до стадій, що подібні Стадіям 3-7 Прикладу 1, щоб отримати цільову сполуку цього прикладу. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 8,61 (ш. с., 1Н), 8,46 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,34 (д, 1Н, 9У-8,8 Гц), 8,26 (д, 1Н, 9-1,6 Гу), 7,93 (д, 1Н, 9У-11,2 Гц), 7,64(д, 1Н, 9У-8,0 Гц), 7,86 (с, 1Н), 7,61 (дд, 1Н, У-8,4 Гу,

2,0 Гу), 3,24-3,21 (м, 2Н), 2,77 (т, 1ТН, У-10,8 Гу), 2,64-2,61 (м, 1Н), 2,34 (с, ЗН), 2,06-1,91 (м, 4Н), 1,89-1,84 (м, ЗН), 1,72-1,63 (м, 2Н), 1,39 (с, ЗН), 0,50 (т, 1Н, 9У-7,2 Гу).

МС (ЕРІ): знайдене ітп/2 463,3 МАНІ".

Приклад 12

М-(5-(1-Етилпіперидин-4-іл)піридин-2-іл)-5-флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан- 1,3-індол|-5-іл)упіримідин-2-аміно г ня гей че

Се

А

5-Флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол|-5'-іл)-М-(5-(піперидин-4- іл)упіридин-2-іл)піримідин-2-аміно т м ня як, Мр я ей

М -- вся х і-й рн шк:

Я

Цю проміжну сполуку отримували відповідно до стадії, що подібна стадії з Прикладу 11.

М-(5-(1-Етилпіперидин-4-іл)піридин-2-іл)-5-флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіро|Їциклопентан- 1,3-індол|-5-іл)піримідин-2-аміно не наб ск» п мя ТУ и ї ях г зе . ви

У реакційну колбу вносили 5-флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіро|циклопентан-ї "3'-індол|-5'- іл)-М-(5-(піперидин-4-іл)піридин-2-іл)іпіримідин-2-аміно, 50 мг (0,1 ммоль), отриманий на вищевказаній стадії, ацетальдегід, 26 мг (0,6 ммоль) та дихлорометан, 5 мл, та реакцію виконували при кімнатній температурі протягом 0,5 год. Потім додавали триєтилборгідрид натрію, 60 мг (0,28 ммоль), та реакцію виконували при кімнатній температурі протягом 2 год. У реакційний розчин додавали 20 мл насиченого водного розчину карбонату натрію, а потім тричі екстрагували дихлорометаном (по 10 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали насиченим розчином хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували при зниженому тиску та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ПЕ/ЕА - 5:1), що давало цільову сполуку (11 мг, вихід 22 Уб). "Н-ЯМР (400 МГц, СОС») 6 8,45 (д, 1Н, 9У-3,6 Гу), 8,38 (с, 1Н), 8,33 (д, 1Н, У-8,8 Гц), 8,25 (с, 1Н), 7,97 (с, 1Н), 7,90 (д, 1Н, 9-11,2 Гц), 7,62 (дд, 1Н, 9У-8,8, 2,0 Гц), 3,14-3,11 (м, 2Н), 2,55-2,46 (м, ЗН), 2,40 (с, ЗН), 2,18-2,03 (м, 8Н), 1,90-1,82 (м, 6Н), 1,15 (т, ЗН, 9У-7,2 Гц).

МС (ЕРІ): т/2 503,3 МАНІ".

Приклад 13 5-Флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол|-5'-іл)-М-(5-(піперидин-4- іл)упіридин-2-іл)піримідин-2-аміно ви че я З чув - Е м же не м я -

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 11.

"Н-ЯМР (400 МГц, СОС») б 9,14 (ш. с., 1Н), 8,48 (д, 1Н, 9У-3,2 Гц), 8,34-8,30 (м, 2Н), 7,96 (с, 1Н), 7,89 (д, 1Н, У-10,8 Гу), 7,58 (д, 1Н, 9У-8,4 Гц), 3,22-3,19 (м, 2Н), 2,76 (т, 2Н, 9У-11,6 Гц), 2,66- 2,60 (м, 1Н), 2,38 (с, ЗН), 2,16-2,02 (м, 6Н), 1,88-1,83 (м, 4Н), 1,69-1,61 (м, 2Н).

МС (ЕР): т/2 475,3 |МААНІ".

Приклад 14 5-Флуоро-4-(2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол|-5'-іл)-М-(5-(піперазин-1-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно мя ше ї- ія чу І

З ТА

Н х А ж па х

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 11. "Н-ЯМР (400 МГц, СОС») 6 9,28 (ш. с., 1Н), 8,43 (д, 1Н, 9-3,6 Гц), 8,33 (д, 1Н, У-9,2 Гц), 8,16- 8,09 (м, ЗН), 7,63 (д, 1Н, 9У-8,0 Гц), 7,32 (дд, 1Н, 9У-9,2 Гу, 2,68 Гу), 3,08-3,06 (м, 4Н), 3,03-3,02 (м,

АН), 2,34 (с, ЗН), 2,29-2,04 (м, 7Н), 1,86-1,83 (м, 2Н).

МС (ЕРІ): т/2 458,3 МАНІ».

Приклад 15 5-Флуоро-4-(2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол|-5'-іл)-М-(5-(піперидин-4-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно мічних нет що и п ет м че їж

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 11. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 8,99 (ш. с., 1Н), 8,46 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,39 (д, 1Н, 9У-8,4 Гц), 8,29 (д, 1Н, 9У-1,6 Гу), 8,15-8,11 (м, 2Н), 7,65 (д, 1Н, У-8,0 Гу), 7,58 (дд, 1Н, У-8,8 Гц, 2,0 Гу), 3,22-3,19 (м, 2Н), 2,76 (т, 2Н, 9У-10,4 Гу), 2,65-2,59 (м, 1Н), 2,36 (с, ЗН), 2,18-2,05 (м, 7Н), 1,88-1,83 (м, 4Н), 1,70-1,60 (м, 2Н).

МС (ЕР): т/2 457,3 |МААНІ".

Приклад 16 4-(3,3-Діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(4-метилпіперазин-1- іл)упіридин-2-іл)піримідин-2-аміно сш Й нен ет ше - й ; в ей. ї й ще

Б

Стадія 1: отримання 5-бромо-3,3-діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН-індола

Мен тем ЕВ

Кв ще г є У

Зо У реакційну колбу вносили 10 мл оцтової кислоти, 5,0 г (20,75 ммоль) (4-бромо-2- флуорофеніл)гідразин гідрохлориду та 2,35 г (20,75 ммоль) З-етилпентан-2-она, та суміші давали реагувати при нагріванні зі зворотним холодильником протягом 5 год. Продукт реакції піддавали випаровуванню на роторі для видалення розчинника, додавали 50 мл води та тричі екстрагували етилацетатом (по 50 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 50 мл розчину хлориду натрію, сушили за допомогою сульфату натрію, фільтрували, піддавали випаровуванню на роторі та розділяли за допомогою колонкової хроматографії (ЕА:ПЕ - 1:100-1:10), щоб отримати цільову сполуку (2,5 г, жовте масло), вихід 87,1 95.

МС (ЕРІ): т/2 286,1 МАНІ".

Стадія 2: отримання 3,3-діетил-7-флуоро-2-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,9,2- діоксаборолан-2-іл)-ЗН-індола ха а 7 с я

У реакційну колбу вносили 2,0 г (7,07 моль) 5-бромо-3,3-діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН- індола, що отриманий на Стадії 1, 1,97 г (7,77 ммоль) 4,4,44,5,5,5',5'-октаметил-2,2'-біс(1,3,2- діоксаборолана), 1,38 г (1,41 ммоль) ацетата калію, 10 мл 1,4-діоксана та 1,03 г (1,41 ммоль)

Ра(аррі)Сі» та суміш нагрівали до 90 "С під захистом газоподібного азоту для здійснення реакції протягом ночі. Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, розбавляли 10 мл води та тричі екстрагували етилацетатом (по 10 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 15 мл розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ЕА: ПЕ - 1:50 до 1:10), що давало цільову сполуку (2,0 г, жовте масло), вихід 86,96 95.

МС (ЕРІ): т/2 332,3 |МаНІ".

Стадія 3: 5-(2-хлоро-5-флуоропіримідин-4-іл)-3,3-діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН-індол сен ве т

У реакційну колбу вносили 2,0 г (6,05 ммоль) 3,3-діетил-7-флуоро-2-метил-5-(4,4,5,5- тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-ЗН-індола, що отриманий на Стадії 2, 1,10 г (6,65 ммоль) 2,А4-дихлоро-5-флуоропіримідина, 2,56 г (12,1 ммоль) фосфата калію, 20 мл/5 мл діоксана/води, 0,69 г (0,61 ммоль) Ра (РРз)4, та суміш нагрівали до 120 "С під захистом газоподібного азоту, та давали реагувати протягом 2 год. Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, розбавляли 10 мл води та тричі екстрагували 50 мл дихлорометана. Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 20 мл розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували при зниженому тиску та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ЕА: ПЕ - 1:100-1:10), що давало цільову сполуку (1,2 г, жовта тверда речовина), вихід 59,4 95.

МС (ЕРІ): т/2 336,1 МАНІ».

Стадія 4: отримання трет-бутилового ефіру 4-(6-((4-(3,3-діетил-7-рфлуоро-2-метил-ЗН-індол-

Зо Б-іл)-о-флуоропіримідин-2-іл)аміно)піридин-3-іл)/піперазин-1-карбонової кислоти ман вх су бот ї сни нев, у в

Зак

У реакційну колбу вносили 400,0 мг (1,19 ммоль) 5-(2-хлоро-5-флуоропіримідин-4-іл)-3,3- діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН-індола, що отриманий на Стадії З, 331,9 мг (1,19 ммоль) трет- бутил-4-(6-амінопіридин-3-іл)піперазин-1-карбоксилата, що отриманий відповідно до стадій 1-2

Прикладу 1, 776,2 мг (2,38 ммоль) карбоната цезію, 10 мл 1,4-діоксана, 109,5 мг (0,12 ммоль)

Раг(ава)з та 69,0 мг (0,12 ммоль) 4,5-бісідифенілфосфіно)-9,9-диметилксантена та продували азотом. Суміші давали реагувати під дією мікрохвильового випромінювання при 130" протягом 1 год. Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, розбавляли 10 мл води, тричі екстрагували 10 мл дихлорометана. Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 30 мл розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували та розділяли за допомогою ТШХ, щоб отримати цільову сполуку (253,1 мг, жовта тверда речовина), вихід 36,74 95.

МС (ЕРІ): т/2 578,3 |МаАНІ".

Стадія 5:

4-(3,3-діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(піперазин-1-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно дну ша б кн й ну, мч

Й

У реакційну колбу вносили трет-бутиловий естер 4-(6-(4-(3,3-діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН- індол-5-іл)-о--флуоропіримідин-2-іл)аміно)піридин-3-іл)піперазин-1-карбонової кислоти, 250,0 мг (0,43 ммоль), отриманий на Стадії 4, дихлорометан, 4 мл та ТФО, 1 мл. Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 2 г, а потім видаляли розчинник. Залишок доводили до рН 8 за допомогою 5 мл насиченого розчину гідрокарбонату натрію та тричі екстрагували дихлорометаном (по 5 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 10 мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували при зниженому тиску та розділяли за допомогою ТШХ, що давало цільову сполуку (201,2 мг, жовта тверда речовина), вихід 97,6 95.

МС (ЕР): т/2 478,3 МАНІ.

Стадія 6: 4-(3,3-діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(4-метилпіперазин-1- іл)упіридин-2-іл)піримідин-2-аміно ай не ск ре зр ге вт ох з и нь ї

В

У реакційну колбу вносили 50,0 мг (0,10 ммоль) 4-(3,3-діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН-індол-5- іл)-5--флуоро-М-(5-(піперазин-1-іл)піридин-2-іл)піримідин-2-аміно, 30,8 мг (1,0 ммоль) формальдегіду, 2 мл 1-етил-(З-диметиламінопропіл)карбодіїміда, 65,3 мг (0,3 ммоль) триетилборгідрида натрію, та суміші давали реагувати протягом ночі. Для гасіння реакції додавали 2 мл метанолу та продукт реакції тричі екстрагували дихлорометаном (по 5 мл кожного разу). Органічну фазу одноразово промивали 10 мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували та розділяли за допомогою ТШХ, щоб отримати цільову сполуку (20,3 мг, жовта тверда речовина), вихід 39,4 9. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІз) 6 9,57 (ш. с., 1Н), 8,47 (д, 1Н, 9-3,2 Гц), 8,28 (д, 1Н, У-8,8 Гц), 8,18 (д, 1Н, 9У-2,0 Гу), 7,91 (д, 1Н, 9У-11,2 Гу), 7,78 (с, 1Н), 7,33 (д, 1Н, 9У-8,8 Гц), 3,16-3,15 (м, 4Н), 2,58-2,57 (м, 4Н), 2,33 (с, ЗН), 2,26 (с, ЗН), 2,04-1,95 (м, 2Н), 1,85-1,78 (м, 7Н), 0,43 (т, 6Н, 9У-7,2

Зо Гц).

МС (ЕРІ): т/: 492,3 |МаАНІ".

Приклад 17 5-Флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол|-5'-іл)-М-(5-(1-метилпіперидин- 4-іл)/піридин-2-іл)/піримідин-2-аміно вия ну ке що ше чну,

ШЕ щ

Проміжну сполуку 5-(2-хлоро-5-флуоропіримідин-4-іл)-7-флуоро-2'- метилспіроЇциклопентан-1,3-індол| отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям

Прикладу 1.

нний си

Боят я и

Стадія 1: 1-метил-б-нітро-1",2,3',6'-тетрагідро-3,4-біпіридин ях рев я -

У реакційну колбу вносили 5-бромо-2-нітропіридин (20,3 г, 0,1 моль), 1-метил-4-(4,4,5,5- тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-1,2,3,6-тетрагідропіридин (22,3 г, 0,1 моль), суміш діоксан/вода (250 мл/30 мл), карбонат цезію (66 г, 0,2 моль) та Ра(аррОсСі» (7,33 г, 0,01 моль).

Суміш перемішували для проведення реакції при 85 С під захистом газоподібного азоту протягом 12 год. Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, концентрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії (ПЕ/ЕА - 1:11 до ДХМ/МеоН-20:1), що давало цільовий продукт (5,7 г, біла тверда речовина).

МС (ЕРІ): розр. маса для С11НізіМзО» 219,1, знайдене іп/2 220,1 (МаНІ"».

Стадія 2: 5-(1-метилпіперидин-4-іл)піридин-2-аміно

МЕ; шк ой ре у

У реакційну колбу вносили 1-метил-бв-нітро-1",2',3',6'-тетрагідро-3,4"-біпіридин (657 мг, 3,0 ммоль), отриманий на Стадії 1, етилацетат/метанол (10 мл/10 мл) та Ра/С (0,1 г). У суміш подавали газоподібний водень та суміш перемішували для проведення реакції протягом 2 г, фільтрували та концентрували, що давало цільовий продукт (550 мг, біла тверда речовина).

МС (ЕРІ): розр. маса для С1Ні7Мз 191,1, знайдене т/2 192,2 |МАНІ..

Стадія 3:

Б-флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол/|-5'-іл)-М-(5-(1-метилпіперидин- 4-іл)/піридин-2-іл)/піримідин-2-аміно ви на кА бр бе г чи

У реакційну колбу вносили проміжну сполуку 5'-(2-хлоро-5-флуоропіримідин-4-іл)-7"- флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол| (150,0 мг, 0,45 ммоль), 5-(1-метилпіперидин-4- іл)піридин-2-аміно (86,6 мг, 0,45 ммоль), отриманий на Стадії 2, карбонат цезію (293,2 мг, 0,9 ммоль), діоксан (3 мл), Раз(ара)з (44,7 мг, 0,05 ммоль), 4,5-бісідифенілфосфіно)-9,9- диметилксантен (30,4 мг, 0,05 ммоль). Суміш нагрівали до 150 "С під захистом газоподібного азоту для проведення реакції під дією мікрохвильового випромінювання протягом 1 год.

Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, фільтрували, додавали 10 мл води та

Зо тричі екстрагували дихлорометаном (по 10 мл кожного разу). Об'єднану органічну фазу одноразово промивали 30 мл насиченого водного розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (дихлорометан/метанол - 50:1), що давало цільову сполуку (51,1 мг, жовта тверда речовина). "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 9,38 (ш. с., 1Н), 8,49 (д, 1Н, 9-3,2 Гц), 8,34-8,33 (м, 2Н), 7,96 (с, 1Н), 7,88 (д, 1Н, 9У-11,2 Гц), 7,58 (дд, 1Н, 9У-8,8 Гц, 1,6 Гу), 3,01-2,98 (м, 2Н), 2,52-2,44 (м, 1Н), 2,38 (с, ЗН), 2,34 (с, ЗН), 2,25-2,04 (м, 8Н), 1,87-1,76 (м, 6Н).

МС (ЕРІ): т/: 489,3 (МАНІ.

Приклад 18 4-(3-Етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(4-метилпіперазин-1- іл)упіридин-2-іл)піримідин-2-аміно ци ли шк не се "м іш р еВ 5

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 16. "Н-ЯМР (400 МГц, СОС») б 9,48 (ш. с., 1Н), 8,47 (д, 1Н, 9У-3,2 Гц), 8,28 (д, 1Н, 9У-9,2 Гц), 8,17 (с, 1Н), 7,90 (д, 1Н, 9У-10,8 Гу), 7,82 (с, 1Н), 7,34 (д, 1Н, У-8,4 Гц), 3,17-3,16 (м, 4Н), 2,59-2,58 (м,

АН), 2,35 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН), 2,01-1,96 (м, 1Н), 1,87-1,82 (м, 1Н), 1,35 (с, ЗН), 0,47 (т, ЗН, 9У-7,2

Гу).

МС (ЕР): т/2 478,3 |МААНІ".

Приклад 19 4-(3-Етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-М-(5-(4-етилпіперазин-1-іл)піридин-2-іл)-5- флуоропіримідин-2-аміно ва ню мете ше еВ х

М с

Стадія 1: отримання 1-етил-4-(6б-нітропіридин-3-іл)піперазина

Мох

Се:

Те щ -

У реакційну колбу вносили 4,00 г (19,7 ммоль) 5-бромо-2-нітропіридина, 3,40 г (2,98 ммоль) 1-етилпіперазина, 4,10 г (29,6 ммоль) карбоната калію, 0,4 г (1,22 ммоль) йодида тетрабутиламонію та 40 мл ДМСО та проводили реакцію при 80 "С протягом 16 год. Потім реакційний розчин виливали у льодяну воду та тричі екстрагували дихлорометаном (по 20 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, кконцентрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії (ДХМ/Меон-100:1-10:1), що давало 3,59 г жовтої твердої речовини, вихід 56,1 95.

МС (ЕР): т/2 237,2 |МАНІ".

Стадія 2: отримання 5-(4-етилпіперазин-1-іл)піридин-2-аміно ше ще я шо 650 мг (2,13 ммоль) 1-етил-4-(б-нітропіридин-3-іл)упіперазина, що отриманий на Стадії 1, розчиняли в 45 мл метанола, додавали 10 95-ий паладій на вугіллі (250 мг, каталізатор), газоподібне середовище тричі замінювали газоподібним воднем та реакцію виконували при

Зо кімнатній температурі протягом 12 г в в атмосфері газоподібного водню під тиском З атм. Після завершення реакції продукт реакції відфільтровували за допомогою невеликої кількості діатоміту та осадок на фільтрі одноразово промивали 20 мл суміші розчинників дихлорометану та метанолу (0б6./06. - 10:1). Потім фільтрат збирали та концентрували при зниженому тиску, що давало 559 мг неочищеного продукту, що являє собою цільову сполуку (прозора і в'язка речовина), яке використовували для наступної реакції безпосередньо без додаткового очищення.

МС (ЕР): т/2 2071 МАНІ».

Стадія 3: отримання 5-(2-хлоро-5-флуоропіримідин-4-іл)-3-етил-7-флуоро-2,3-диметил -ЗІН- індола ей г ше пз Е п, й

Цю проміжну сполуку отримували за допомогою тієї ж методики, що і в Стадіях 1-3

Прикладу 16.

Стадія 4: отримання 4-(3З-етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-М-(5-(4-етилпіперазин-1-іл)піридин-2-іл)-5- флуоропіримідин-2-аміно ми чо пт - й К щи ра об, У і.

М щ

У реакційну колбу вносили 321 мг (1 ммоль) 5-(2-хлоро-5-флуоропіримідин-4-іл)-3-етил-7- флуоро-2,3-диметил-ЗН-індола, що отриманий на Стадії 3, 206 мг (1 ммоль) 5-(4-етилпіперазин- 1-ілупіридин-2-аміно, що отриманий на Стадії 2, 2 мл 1,4-діоксана, 650 мг (2 ммоль) С52СОз, 91 мг (0,1 ммоль) Рагз(ава)з та 58 мг (0,1 ммоль) дифенілфосфіна. Суміш нагрівали до 120 "С для проведення реакції під дією мікрохвильового випромінювання протягом 1 год. Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, додавали 10 мл води, а потім тричі екстрагували етилацетатом (по 40 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 40 мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою сульфату натрію, фільтрували, концентрували при зниженому тиску та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ДХМ/МеОН-10:1), що давало цільову сполуку (49 мг, жовта тверда речовина), вихід 10 Ор. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 9,25 (ш. с., 1Н), 8,46 (д, 1Н, 9У-3,2 Гц), 8,28 (д, 1Н, У-9,2 Гу), 8,17 (д, 1Н, У-2,0 Гу), 7,90 (д, 1Н, 9У-11,2 Гц), 7,82 (с, 1Н), 7,35 (дд, 1Н, У-9,2 Гц, 2,68 Гу), 3,20-3,18 (м,

АН), 2,64-2,61 (м, 4Н), 2,51 (к, 2Н, 9У-6,68 Гц), 2,31 (с, ЗН), 2,03-1,94 (м, 1Н), 1,89-1,82 (м, 1Н), 1,36 (с, ЗН), 1,13 (т, ЗН, У-7,2 Гц), 0,48 (т, ЗН, 9У-7,2 Гц).

МС (ЕРІ): т/: 492,3 |МААНІ".

Приклад 20 5-Флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол|-5'-іл)-М-(5-(4-метилпіперазин- 1-іл)/піридин-2-іл)/піримідин-2-аміно м'яз я

С к-. к Б я

Зо Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 16. "Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО- ав) 6 9,77 (ш. с., 1Н), 8,63 (д, 1Н, 9У-4,0 Гц), 8,02-7,98 (м, ЗН), 7,82 (д, 1Н, 9У-11,2 Гу), 7,41 (дд, 1Н, 9У-8,8 Гц, 2,68 Гу), 3,13-3,11 (м, 4Н), 2,49-2,46 (м, 4Н), 2,33 (с, ЗН), 2,26 (с, ЗН), 2,23-2,07 (м, 6Н), 1,76-1,74 (м, 2Н).

МС (ЕРІ): т/2 490,3 |МААНІ".

Приклад 21

М-(5-(1-Етилпіперидин-4-іл)піридин-2-іл)-5-флуоро-4-(2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол|/- 5-іл)/піримідин-2-аміно с ша чле в: Щі

АЙ сну ве и щі

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 12. "Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО- ав) 6 9,91 (ш. с., 1Н), 8,65 (д, 1Н, 9У-4,0 Гц), 8,28-8,14 (м, ЗН), 8,04 (д, 1Н, 9-84 Гц), 7,43 (дд, 1Н, У-8,4 Гц, 2,0 Гц), 7,60 (д, 1Н, 9У-8,0 Гц), 3,00-2,97 (м, 4Н), 2,38-2,33 (м, 2Н), 2,30 (с, ЗН), 2,08-2,07 (м, 6Н), 1,99-1,94 (м, 2Н), 1,77-1,64 (м, 6Н), 1,02 (т, ЗН, У-7,2 Гу).

МС (ЕРІ): т/2 485,3 |МаАНІ".

Приклад 22

М-(5-(4-Етилпіперазин-1-іл)піридин-2-іл)-5-флуоро-4-(2'-метилопіро|Іциклопентан-1,3'-індолі|- 5-іл)/піримідин-2-аміно нюють

Б гли ам --

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 19. "Н-ЯМР (400 МГц, СОС») 6 8,87 (ш. с., 1Н), 8,42 (д, 1Н, 9-3,6 Гц), 8,33 (д, 1Н, У-9,2 Гц), 8,13- 8,10 (м, ЗН), 7,65 (д, 1Н, 9У-8,0 Гц), 7,35 (дд, 1Н, 9У-8,8 Гц, 2,4 Гц), 3,19-3,18 (м, 4Н), 2,64-2,63 (м,

АН), 2,53 (к, 2Н, У-6,8 Гц), 2,35 (с, ЗН), 2,27-2,06 (м, 6Н), 1,88-1,85 (м, 2Н), 1,14 (т, ЗН, У-6,8 Гу).

МС (ЕРІ): т/: 486,4 МАНІ».

Приклад 23

М-(5-(4-Метилпіперидин-1-іл)піридин-2-іл)-5-флуоро-4-(2'-метилспіро|циклопентан-1,3'- індол|-5'-іл)піримідин-2-аміно ве п ве чен й но , я--ї

В:

М

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 17. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІз) 6 9,24 (ш. с., 1Н), 8,47 (д, 1Н, 9-3,2 Гц), 8,38 (д, 1Н, У-8,8 Гц), 8,31 (с, 1Н), 8,14-8,09 (м, 2Н), 7,64 (д, 1Н, 9У-8,4 Гц), 7,57 (дд, 1Н, 9У-8,4 Гц, 2,4 Гц), 3,00-2,98 (м, 2Н), 2,49-2,46 (м, 1Н), 2,35 (с, ЗН), 2,33 (с, ЗН), 2,16-1,99 (м, 8Н), 1,85-1,76 (м, 6Н).

МС (ЕРІ): т/2 471,3 |(МаАНІ».

Приклад 24 4-(3-Етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(1-метилпіперидин-4- іл)упіридин-2-іл)піримідин-2-аміно ; 4 що ши КЕ т

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 17.

Коо) "Н-ЯМР (400 МГц, СОС») б 9,74 (ш. с., 1Н), 8,50 (д, 1Н, 9-3,6 Гц), 8,35-8,32 (м, 2Н), 7,88-7,82 (м, 2Н), 7,57 (д, 1Н, 9У-8,8 Гу), 2,97-2,95 (м, 2Н), 2,49-2,42 (м, 1Н), 2,30 (с, 6Н), 2,24-1,93 (м, ЗН), 1,88-1,74 (м, 5Н), 1,35 (с, ЗН), 0,47 (т, ЗН, 9У-7,2 Гу).

МС (ЕРІ): т/2 477,3 |МаНІ".

Приклад 25

5-Флуоро-М-(5-(4-метилпіперазин-1-іл)піридин-2-іл)-4-(2'-метилспіро|Їциклопентан-1,3'- індол|-5'-іл)піримідин-2-аміно мий ев а чи

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 16. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІз) 6 9,28 (ш. с., 1Н), 8,44 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,33 (д, 1Н, 9-9,2 Гц), 8,18 (д, 1Н, У-2,0 Гу), 8,12-8,09 (м, 2Н), 7,64 (д, 1Н, 9У-8,0 Гц), 7,33(дд, 1Н, У-9,2 Гц, 2,4 Гу), 3,16-3,14 (м, 4Н), 2,59-2,58 (м, 4Н), 2,35 (с, ЗН), 2,34 (с, ЗН), 2,15-2,06 (м, 6Н), 1,87-1,83 (м, 2Н).

МС (ЕР): т/2 472,3 |МАНІ".

Приклад 26 4-(3-Етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-М-(5-(1-етилпіперидин-4-іл)піридин-2-іл)-5- флуоропіримідин-2-аміно че я «Коли ак й

Си я

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 12. "Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ав) б 9,99 (ш. с., 1Н), 8,70 (д, 1Н, 9-3,2 Гц), 8,19 (с, 1Н), 8,14 (д, 1Н, 98,6 Гц), 7,92 (с, 1Н), 7,85 (д, 1Н, 9У-11,2 Гц), 7,69 (д, 1Н, У-8,4 Гу), 3,04-3,02 (м, 2Н), 2,42-2,А41 (м, 2Н), 2,28 (с, ЗН), 2,04-1,99 (м, ЗН), 1,89-1,84 (м, 1Н), 1,78-1,63 (м, 4Н), 1,33 (с, ЗН), 1,04 (т, ЗН, 9-6,68 Гц), 0,36 (т, ЗН, У-7,2 Гу).

МС (ЕРІ): т/ 491,3 МАНІ».

Приклад 27

М-(5-(4-Етилпіперазин-1-іл)піридин-2-іл)-5-флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан- 1,3-індол|-5-іл)упіримідин-2-аміно вет ще я й з в т і їх

З І й

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 19. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 8,92 (ш. с., 1Н), 8,44 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,29 (д, 1Н, 9У-9,2 Гц), 8,15 (д, 1Н, У-2,8 Гу), 7,94 (с, 1Н), 7,89 (д, 1Н, 9У-11,2 Гц), 7,36 (дд, 1Н, 9У-9,2 Гц, 2,68 Гц), 3,21-3,19 (м,

АН), 2,65-2,63 (м, 4Н), 2,51 (к, 2Н, 9У-7,2 Гц), 2,38 (с, ЗН), 2,22-2,07 (м, 6Н), 1,89-1,86 (м, 2Н), 1,15 (т, ЗН, Уу-7,2 Гц).

МС (ЕРІ): т/2 504,3 |МААНІ".

Приклад 28

Зо 2-(4-(6-(5-Флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол/|-5'-іл)піримідин-2- іл)яаміно)піридин-3-іл)піперазин-1-іл)уетанол ак де ве о шуке, ошИ

У реакційну колбу вносили 5-флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3"-індол/|-5'- іл)-М-(5-(піперазин-1-іл)піридин-2-іл)/піримідин-2-аміно, 20 мг (0,04 ммоль, отриманий за тією ж методикою, що і в Прикладі б), 16 мг (0,12 ммоль) 2-брометанола, 2 мл ДМФА та 17 мг (0,12 ммоль) карбоната цезію. Суміш нагрівали до 80 "С та проводили реакцію протягом 1 г, а потім продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, додавали 10 мл води та тричі екстрагували етилацетатом (по 40 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 40 мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували при зниженому тиску та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ДХМ/МеОН-10:1), що давало цільову сполуку (10 мг, жовта тверда речовина), вихід 55 95. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 8,52 (ш. с., 1Н), 8,43 (д, 1Н, 9У-2,8 Гц), 8,29 (д, 1Н, 9У-9,2 Гц), 8,09 (с, 1Н), 7,94 (с, 1Н), 7,89 (д, 1Н, 9У-10,8 Гц), 7,36 (д, 1Н, 9У-8,8 Гц), 3,70-3,68 (м, 2Н), 3,19-3,18 (м,

АН), 2,71-2,63 (м, 7Н), 2,39 (с, ЗН), 2,25-2,00 (м, 6Н), 1,90-1,87 (м, 2Н).

МС (ЕР): т/2 520,3 МАНІ.

Приклад 29 4-(3,3-Діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(піперазин-4-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно й ч - «Коли

СЯ

М

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 1. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІз) б 8,66 (ш. с., 1Н), 8,45 (д, 1Н, 9-3,6 Гу), 8,29 (д, 1Н, 9У-9,2 Гц), 8,11 (д, 1Н, У-2,8 Гу), 7,94 (д, 1Н, 9У-11,2 Гц), 7,81 (с, 1Н), 7,37 (дд, 1Н, У-8,8 Гц, 2,4 Гу), 3,13-3,12 (м,

АН), 3,08-3,07 (м, 4Н), 2,30 (с, ЗН), 2,08-1,99 (м, 2Н), 1,91-1,82 (м, ЗН), 0,46 (т, 6Н, 9У-7,6 Гу).

МС (ЕРІ): т/2 478,3 |МаАНІ".

Приклад 30 2-(4-(6-(5-Флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол/|-5'-іл)піримідин-2- іл)аміно)піридин-3-іл)піперидин-1-іл)етанол в'я пів тнуя мет ше і-й І во;

ОА

- жк

У реакційну колбу вносили 20 мг (0,04 ммоль) 5-флуоро-4-(7-флуоро-2'- метилспіро|циклопентан-1,3'-індол/|-5'-іл)-М-(5-(піперидин-4-іл)піридин-2-іл)піримідин-2-аміно, що отриманий за допомогою тих самих методик, що і в Прикладі 13, 16 мг (0,12 ммоль) 2- брометанола, 2 мл ДМФА та 17 мг (0,12 ммоль) карбоната цезію, та суміш нагрівали до 80 "С, та реакцію проводили протягом 1 год. Потім продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, додавали 10 мл води та тричі екстрагували етилацетатом (по 40 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 40 мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, та концентрували при зниженому тиску, та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (ДХМ/МеОн-10:1), що давало цільову сполуку (10 мг, жовта тверда речовина), вихід 55 95. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 8,63 (ш. с., 1Н), 8,46 (д, 1Н, 9У-3,2 Гц), 8,34 (д, 1Н, 9У-8,4 Гц), 8,26 (с, 1Н), 7,96 (с, 1Н), 7,90 (д, 1Н, 9У-10,8 Гц), 7,60 (д, 1Н, 9У-8,0 Гц), 3,67-3,66 (м, 2Н), 3,08-3,06 (м, 2Н), 2,60-2,52 (м, 4Н), 2,39 (с, ЗН), 2,25-2,11 (м, 8Н), 1,89-1,83 (м, 4Н), 1,80-1,77 (м, 2Н).

МС (ЕРІ): т/2 519,3 |МаАНІ».

Приклад 31 5-Флуоро-4-(7-флуоро-2,3,3-триметил-ЗН-індол-5-іл)-М-(5-(1-метилпіперидин-4-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно ню ча й и ра

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 17. "Н-ЯМР (400 МГц, метанол-да) б 8,57 (ш. с., 1Н), 8,37 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,18 (с, 1Н), 8,13 (д, 1ТН, 2-88 Гу), 7,84 (с, 1Н), 7,70 (д, 1Н, 9У-11,2 Гц), 7,51 (д, 1Н, 9У-7,2 Гц), 3,21-3,18 (м, 2Н), 2,60- 2,54 (м, 4Н), 2,50-2,44 (м, 2Н), 2,37 (с, ЗН), 1,90-1,79 (м, 4Н), 1,38 (с, 6Н).

МС (ЕРІ): т/: 463,3 (МАНІ.

Приклад 32 4-(3-Етил-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(піперазин-1-іл)піридин-2-іл)піримідин- 2-аміно щи втечу мим, СА, як й нй

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 6. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІз) б 9,68 (ш. с., 1Н), 8,44 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,32 (д, 1Н, У-8,8 Гц), 8,18 (д, 1ТН, 9У-2,4 Гу), 8,11 (д, 1Н, У-8,0 Гу), 7,98 (с, 1Н), 7,64 (д, 1Н, У-8,0 Гц), 7,30 (д, 1Н, 9У-2,8 Гу), 3,05-3,04 (м, 4Н), 3,00-2,98 (м, 4Н), 2,26 (с, ЗН), 2,00-1,90 (м, 2Н), 1,83-1,74 (м, 1Н), 1,32 (с, ЗН), 0,45 (т, 1Н, У-7,2 Гу).

МС (ЕРІ): т/: 446,3 |МаАНІ".

Приклад 33 4-(3-Етил-2,3-диметил-ЗН-їіндол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(піперидин-4-іл)піридин-2-іл)піримідин- 2-аміно меч нене

ЕК вою Шк в: -и не т

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 13. "Н-ЯМР (400 МГц, метанол-а) б 8,33 (д, 1Н, 9У-2,8 Гц), 8,16-8,13 (м, 2Н), 7,95-7,93 (м, 2Н), 7,48-7,41 (м, 2Н), 3,18-3,15 (м, 2Н), 2,73 (т, 1Н, 9У-11,6 Гц), 2,59-2,53 (м, 1Н), 2,30 (с, ЗН), 2,01- 1,96 (м, 1Н), 1,89-1,83 (м, 1Н), 1,79-1,76 (м, 2Н), 1,66-1,58 (м, 2Н), 1,32 (с, ЗН), 0,42 (т, 1Н, У-6,8

Гц).

МС (ЕРІ): т/2 445,3 |МаАНІ".

Приклад 34 4-(3-Етил-2,3-диметил-ЗН-їіндол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(4-метилпіперазин-1-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно й ін ЖК их низ ме чех

У

Зо ке

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 16. "Н-ЯМР (400 МГц, метанол-а) б 8,42 (д, 1Н, 9У-3,2 Гц), 8,18 (д, 1Н, 9У-8,8 Гу), 8,09-8,01 (м,

ЗН), 7,57 (д, 1Н, 9У-8,0 Гц), 7,42-7,37 (м, 1Н), 3,22-3,15 (м, 4Н), 2,61-2,60 (м, 4Н), 2,35 (с, ЗН), 2,32 (с, ЗН), 2,07-2,02 (м, 1Н), 1,94-1,89 (м, 1Н), 1,38 (с, ЗН), 0,43 (т, 1Н, 9-7,2 Гц).

МС (ЕРІ): т/: 460,3 |МА-НІ".

Приклад 35 4-(3-Етил-2,3-диметил-ЗН-їіндол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(1-метилпіперидин-4-іл)піридин-2- іл)упіримідин-2-аміно ми ям ет дей Е. оц що шен вк й

Кк

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 17. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІз) 6 8,97 (ш. с., 1Н), 8,47 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,39 (д, 1Н, 9У-8,4 Гц), 8,30 (д, 1Н, 9У-2,0 Гу), 8,15 (д, 1Н, У-8,4 Гц), 8,04 (с, 1Н), 7,68 (д, 1Н, У-8,0 Гц), 7,59 (дд, 1Н, 9У-8,8 Гц, 2,4 Гц), 3,01-2,98 (м, 4Н), 2,51-2,45 (м, 1Н), 2,34 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН), 2,10-1,97 (м, ЗН), 1,85-1,81 (м, 5Н), 1,37 (с, ЗН), 0,49 (т, 1Н, 9У-7,2 Гц).

МС (ЕРІ): т/2 459,3 |МаАНІ».

Приклад 36 4-(3-Етил-2,3-диметил-ЗН-їіндол-5-іл)-М-(5-(4-етилпіперазин-1-іл)піридин-2-іл)-5- флуоропіримідин-2-аміно а а Є вини рт мех де

В чи «М, тт

І

Я

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 19. "Н-ЯМР (400 МГц, СОС») б 8,93 (ш. с., 1Н), 8,44 (д, 1Н, У-3,6 Гц), 8,33 (д, 1Н, 9У-9,2 Гц), 8,15- 8,13 (м, 2Н), 8,02 (с, 1Н), 7,67 (д, 1Н, У-8,0 Гц), 7,35 (д, 1Н, 9У-8,0 Гц), 3,19-3,18 (м, 4Н), 2,63-2,62 (м, 4Н), 2,52-2,47 (м, 2Н), 2,30 (с, ЗН), 2,02-1,97 (м, 1Н), 1,86-1,80 (м, 1Н), 1,36 (с, ЗН), 1,14 (т, ЗН, 9У-7,2 Гц), 0,57 (т, 1Н, 9-72 Гу).

МС (ЕРІ): т/2 474,3 |МаАНІ".

Приклад 37 5-Флуоро-М-(5-(1-метилпіперидин-4-іл)піридин-2-іл)-4-(2,3,3-триметил-ЗН-індол-5- іл)упіримідин-2-аміно нят ви в я ся і х

МН р. ке

Си ї

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 17. "Н-ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 9,03 (ш. с., 1Н), 8,46 (д, 1Н, 9У-3,2 Гц), 8,38 (д, 1Н, У-8,4 Гу), 8,29 (с, 1Н), 7,67 (д, 1Н, 9У-8,0 Гц), 7,60 (дд, 1Н, У-8,8 Гц, 1,6 Гу), 3,00-2,97 (м, 2Н), 2,49-2,44 (м, 1Н), 2,34 (с, ЗН), 2,33 (с, ЗН), 2,10-2,03 (м, 2Н), 1,84-1,79 (м, 4Н), 1,37 (с, 6Н).

Зо МС (ЕРІ): т/2 445,3 |МаАНІ».

Приклад 38 4-(3,3-Діетил-7-флуоро-2-метил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(1-метилпіперидин-4- іл)упіридин-2-іл)піримідин-2-аміно век туи тк ша: ск їх ще щ і

Зо

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 17. "Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ав) б 9,95 (с, 1Н), 8,69 (с, 1Н), 8,19-8,11 (м, 2Н), 7,89-7,84 (м, 2Н), 7,67 (д, 1Н, 9У-7,6 Гу), 2,87-2,85 (м, 2Н), 2,25 (с, ЗН), 2,19 (с, ЗН), 2,02-1,92 (м, 6Н), 1,90-1,65 (м,

АН), 0,34 (м, 6Н).

МС (ЕРІ): т/ 491,3 |МААНІ".

Приклад 39 1-(2-(4-(3-Етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоропіримідин-2-іл)аміно)-7,8- дигідро-1,6-нафтирідин-6(5Н)-іл)-2-гідроксиацетамід сей пен че й в ев

Й

Стадія 1: 2-(2-хлоро-7,8-дигідро-1,6-нафтирідин-6(5Н)-іл)-2-ацетоксиацетамід іх мете вч кота баг

У реакційну колбу вносили 1,0 г (5,95 ммоль) 2-хлоро-5,6,7 ,8-тетрагідро-1,6-нафтирідина, 1,21 г (11,90 ммоль) триетиламіна та 5 мл дихлорометана, а потім повільно по краплях додавали 2-хлоро-2-ацетоксиацетилхлорид (1,22 г, 8,93 ммоль). Суміші давали реагувати протягом 1 г при кімнатній температурі, та реакцію гасили 5 мл води. Розчинник видаляли та залишок тричі екстрагували дихлорометаном (по 15 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 10 мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували та концентрували при зниженому тиску, що давало неочищений продукт, який являє собою цільову сполуку (1,09 г, жовтуватий), вихід 68,21 9.

МС (ЕРІ): т/2 269,1 |МАНІ".

Стадія 2: 1-(2-(4-(З-етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-5--флуоропіримідин-2-іл)аміно)-7,8- дигідро-1,6-нафтирідин-6(5Н)-іл)-2-гідроксиацетамід дитя ню чия шк а

Ак Ї Й М ву у я

У реакційну колбу вносили 101 мг (0,34 ммоль) 4-(3-етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5- іл)-5-флуоропіримідин-2-аміно, що отриманий за допомогою методиці, що подобна Стадіям 1-3

Прикладу 1, 85,2 мг (0,532 ммоль) 2-(2-хлоро-7,8-дигідро-1,6-нафтирідин-6(5Н)-іл)-2- ацетоксиацетаміда, 10 мл діоксана, 65,3 мг (0,68 ммоль) трет-бутоксида натрію, 31,2 мг (0,034

Зо ммоль) Раз(ава)з, 19,7 мг (0,034 ммоль) 4,5-бісідифенілфосфіно)-9,9-диметилксантена. Суміш нагрівали до 120 "С та давали реагувати під дією мікрохвильового випромінювання протягом 1 г, а потім продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, додавали 50 мл води та тричі екстрагували етилацетатом (по 50 мл кожного разу). Органічні фази об'єднували, одноразово промивали 50 мл насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували, концентрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (дихлорометан/метанол - 10:1), що давало цільову сполуку (20 мг, жовта тверда речовина), вихід 12 Об. "Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО- ав) 5 9,98 (с, 1Н), 8,70 (д, 1Н, 9У-3,6 Гу), 8,07 (д, 1Н, У-8,4 Гц), 7,94 (с, 1Н), 7,87 (д, 1Н, 9У-11,2 Гу), 7,64-7,57 (м, 1Н), 4,68-4,55 (м, ЗН), 4,22-4,21 (м, 2Н), 4,21-4,19 (м, 2Н), 2,89-2,81 (м, 2Н), 2,28 (с, ЗН), 2,04-1,84 (м, 2Н), 1,33 (с, ЗН), 0,37 (т, ЗН, 9У-7,2 Гц).

МС (ЕРІ): т/2 493,2 |МаАНІ".

Приклад 40

1-(2-(5-Флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3 -індол/|-5-іл)піримідин-2- іл)аміно)-7,8-дигідро-1,6-нафтирідин-6(5Н)-іл)-2-гідроксиацетамід ця -Х І «уч ет Ем пи Я т ще ном

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 39. "Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-дв) 6 10,07 (ш. с., 1Н), 8,69 (д, 1Н, 9У-3,6 Гц), 8,53 (с, 1Н), 8,09-8,02 (м, 1Н), 7,98 (с, 1Н), 7,88 (д, 1Н, 9У-12,4 Гу), 7,62-7,54 (м, 1Н), 4,73 (ш. с., 1Н), 4,62-4,61 (м, 2Н), 4,21-4,19 (м, 2Н), 2,89-2,81 (м, 2Н), 2,50 (с, 2Н), 2,34-2,11 (м, 5Н), 1,75-1,72 (м, 2Н).

МС (ЕРІ): т/2 505,2 |МАНІ".

Приклад 41

М-(5-(4-"Циклопропілметил)піперазин-1-іл)піридин-2-іл)-5--флуоро-4-(7-флуоро-2"- метилспіро|циклопентан-1,3'-індол|-5-іл)піримідин-2-аміно й я

Ід в па ца

Проміжну сполуку 5-флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіро|циклопентан-1,3-індолі-5-іл)-М- (5- (піперазин-1-іл)піридин-2-іл/упіримідин-2-аміно отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 6. го

З

У реакційну колбу вносили вищезазначену проміжну сполуку 5-флуоро-4-(7-флуоро-2'- метилспіро|циклопентан-1,3'-індол/|-5'-іл)-М-(5-(піперазин-1-іл)піридин-2-іл)піримідин-2-аміно (150 мг, 0,32 ммоль), бромометилциклопропан, ацетонітрил (5 мл) та карбонат калію (130,0 мг, 0,96 ммоль), та нагрівали до 80 С, та проводили реакцію протягом 4 год. Продукт реакції охолоджували до кімнатної температури, додавали 50 мл води, тричі екстрагували 10 мл дихлорометана (по 10 мл кожного разу). Органічні шари об'єднували, одноразово промивали 15 мг насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії (дихлорометан/метанол - 10:1), щоб отримати цільовий продукт цього прикладу (42,1 мг, біла тверда речовина). "Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ав) б 9,89 (с, 1Н), 8,68 (м, 1Н), 8,64-8,01 (м, ЗН), 7,87 (д, 1Н, 9У-14,4

Гу), 7,42-7,40 (м, 1Н), 3,14-3,13 (м, 5Н), 2,60-2,51 (м, 5Н), 2,33 (с, ЗН), 2,24-2,23 (м, 2Н), 2,09-2,02 (м, 6Н), 1,99-1,97 (м, 2Н), 1,75-1,74 (м, 2Н), 0,85-0,83 (м, 2Н), 0,48-0,47 (м, 2Н).

МС (ЕРІ): т/2 530,3 (МАНІ.

Приклад 42 4-(3-Етил-7-флуоро-2,3-диметил-ЗН-індол-5-іл)-5-флуоро-М-(5-(4-метилпіперазин-1- іл)уметил)піридин-2-іл)піримідин-2-аміно паї щен | вчи деку,

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 2. "Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-ав) б 10,06 (ш. с., 1Н), 8,72 (д, 1Н, У-3,2 Гц), 8,18-8,15 (м, 2Н), 7,93 (с, 1Н), 7,86 (д, 1Н, 9У-11,6 Гу), 7,67 (д, 1Н, 9У-5,2 Гу), 3,42 (с, 2Н), 2,35-2,28 (м, 8Н), 2,14 (с, ЗН), 2,04-1,98 (м, 1Н), 1,89-1,84 (м, 1Н), 1,34 (с, ЗН), 0,36 (т, ЗН, 9У-7,2 Гу).

МС (ЕРІ): т/: 492,3 |МаАНІ".

Приклад 43 5-Флуоро-4-(7-флуоро-2'-метилспіроЇциклопентан-1,3'-індол/|-5'-іл)-М-(5-(4-метилпіперазин- 1-ілуметил)піридин-2-іл)піримідин-2-аміно ви вити тт г ше ин.

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 2. "Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-дв) б 10,09 (с, 1Н), 8,71 (д, 1Н, У-3,2 Гц), 8,18-8,15 (м, 2Н), 8,02 (с, 1Н), 7,85 (д, 1Н, 9У-11,2 Гу), 7,67 (д, 1Н, 9У-8,4 Гу), 3,43 (с, 2Н), 2,50-2,34 (м, 8Н), 2,14 (с, ЗН), 2,14-2,08 (м, 6Н), 1,75-1,74 (м, 2Н), 1,75-1,72 (м, 2Н).

МС (ЕРІ): т/2 504,2 |МАНІ".

Приклад 44

М-(5-(1-Метилпіперидин-4-іл)-(б-метилпіридин)-2-іл)-5-флуоро-4-(7-флуоро-2'- метилспіро|циклопентан-1,3'-індол/|-5'-іл)піримідин-2-аміно г не я че ен ше . ее ! 4

Цільову сполуку отримували відповідно до стадій, що подібні стадіям Прикладу 12.

І"НЯМР (400 МГц, ДМСО-бв), б 9,84 (с, 1Н), 8,70 (с, 1Н), 8,11 (с, 1Н), 7,98-8,01 (д, 2Н), 7,81- 7,85 (д, 1Н), 2,87-2,90 (д, 2Н), 2,50-2,51 (м, 1Н), 2,20-2,34 (м, 6Н), 1,78-1,98 (м, 8Н), 1,69-1,75 (м, бН).

МС (ЕРІ): т/2 503,3 (МАНІ.

Приклад 45

М-(5-(1-Метилпіперидин-4-іл)окси)-піридин-2-іл)-5--флуоро-4-(7-флуоро-2- метилспіро|циклопентан-1,3'-індол|-5-іл)піримідин-2-аміно ши на ши о КЕ рОщох

От

М

Прикладу 1.

аби же ще: чи -й - у;

Стадія 1: 1-метилпіперидин-4-іл-4--метилбензенсульфонат її З ще ши

У реакційну колбу вносили 4-гідрокси-1-метилпіперидин (1000 мг, 8,69 ммоль), п- толуолсульфонілхлорид (3310 мг, 17,38 ммоль), дихлорометан (50 мл) та триєтиламін (1 мл) та давали реагувати при кімнатній температурі протягом 2 год. Потім до продукту реакції додавали 50 мл води та тричі екстрагували 30 мл дихлорометану (по 30 мл кожного разу). Органічні шари об'єднували, одноразово промивали 50 мг насиченого розчину хлориду натрію, сушили за допомогою безводного сульфату натрію, фільтрували та розділяли за допомогою колонкової хроматографії (дихлорометан/метанол - 50:1), що давало 1,87 г проміжної сполуки, вихід 80,0 95 (блідо-жовта тверда речовина).

Стадія 2: 2-бром-5 -(1-метилпіперидин-4-іл)окси)піридин соди В

С

У реакційну колбу поміщали проміжну сполуку 1-метилпіперидин-4-іл-4- метилбензолсульфонат (1000 мг, 3,70 ммоль), 2-бромо-5-гідроксипіридин (637 мг, 3,70 ммоль) і

ДМФА (50 мл), і суміш нагрівали до 90" С, і давали реагувати протягом 2 год. До продукту реакції додавали 50 мл води і тричі екстрагували дихлорометаном (по 30 мл кожного разу).

Органічні шари об'єднували, одноразово промивали 50 мл насиченого розчину натрій хлориду, сушили за допомогою безводного натрій сульфату, фільтрували і розділяли за допомогою колонкової хроматографії (дихлорометан / метанол - 40: 1), що приводило до 0,49 г проміжної сполуки (блідо-жовта тверда речовина), вихід 50,1 95.

Стадія 3: 5-(1-метилпіперидин-4-іл)окси)-піридин-2-амін б КЕ й щ7 ев що

У реакційну колбу поміщали проміжну сполуку 2-бром-5 - ((1-метилпіперидин-4- іл)уокси)піридин (1000 мг, 3,70 ммоль), натрій біс (триметилсиліл)амід (618 мг, 3,70 ммоль), тетрагідрофуран (50 мл), 2-(дициклогексилфосфіно)біфеніл (120 мг, 0,37 ммоль) і трис(дибензіліденацетон)дипалладій (338 мг, 0,37 ммоль), і суміш нагрівали до 65" С, і проводили реакцію протягом 12 год. До продукту реакції додавали 50 мл води, тричі екстрагували дихлорометаном (по 30 мл кожного разу). Органічні шари об'єднували, промивали

Зо 50 мл насиченого розчину натрій хлориду, сушили за допомогою безводного натрій сульфату, фільтрували і розділяли за допомогою колонкової хроматографії (дихлорометан/метанол - 10: 1), що приводило до проміжної сполуки (0,37 г, жовта тверда речовина), вихід 49,3 Об.

Стадія 4:

М- (5-(1-метилпіперідін-4-іл) окси)-піридин-2-іл) -Б-флуоро-4- (7-флуоро-2- метилспіроІциклопентан-1,3'-індолі -5'-іл) піримідин-2-амін отримували за методикою, подібною

Стадії 6 Прикладу 1. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6), б 9,69 (с, 1Н), 8,63 (с, 1Н), 7,93-7,99 (д, 1Н), 7,80-7,83 (д, 1Н), 7,81-7,85 (д, 1Н), 7,12-7,14 (д, 1Н), 5,76-5,82 (м, 1Н), 5,02-5, 13 (м, 2Н), 3,79 (с, 2Н), 2,56-2,59 (м, 13Н), 2,28-2,33 (м, 6Н), 1,74-1,99 (м, 2Н).

МС (ЕС): т/2 505,2 |МННІ жк.

Контроль, який використовується в наступних прикладах експериментів, з номером

Гу2835219 отримували відповідно до методики отримання, представленої в ММО2010075074, і його структурна формула така ж, як показано у структурній формулі З в розділі "Рівень техніки".

Приклад експерименту 1

Вимірювання активності пригнічення кінази СОК для сполук за даним винаходом.

Іп міго інгібуючу дію сполук за даним винаходом на кіназну активність СОК (СОК1, СОКА і

СОКб) досліджували за допомогою наступної методики. 111 Інформація про прилади і набори

АОР-СІо "М для аналізу кіназ'-кіназна ферментна

АОР-СІО"М для аналізу кіназякіназна ферментна

АОР-СІо "М для аналізу кіназ'-кіназна ферментна 1.2 Приготування розчинів для експерименту 1.2.1 Приготування реакційного буферного розчину І для кіназ: 5хреакційний буферний розчин А (Рготеда; М307А-С), що отримується в наборі, змішували з і розбавляли НгО МіїЇ СО і 0,1 М ДТТ (дитіотреїтол), що давало 4хбуферний розчин для кіназ, а потім додатково додавали

НгО Мій о, щоб в результаті приготувати 1хбуферний розчин для кіназ.

Приготування реакційного буферного розчину ІЇ для кіназ: до 1хреакційного буферного розчину для кіназ додавали 0,5 96 ДМСО (диметилсульфоксид) та добре перемішували. 1.2.2 Приготування розчину кінази: розчини кінази з концентраціями, необхідними для кожної реакційної системи, готували з вихідного розчину кінази з концентрацією 100 нг/мкл і 1 х реакційного буферного розчину для кіназ. 1.2.3 Приготування розчину досліджуваної сполуки і контрольного розчину І У2835219: (1) Приготування контрольного розчину І 2835219 а. Відбирали 1 мкл вихідного розчину стандартної речовини з концентрацією 10 мМ, і додавали 9 мкл реакційного буферного розчину І для кіназ, і добре перемішували; потім додавали 90 мкл реакційного буферного розчину | для кіназ і добре перемішували; потім додавали 100 мкл реакційного буферного розчину І для кіназ і добре перемішували. Кінцева концентрація становила 50 мкМ. р. 40 мкл реакційного буферного розчину ІІ для кіназ додавали в лунки В2-В10 96-лункового планшета, і 50 мкл вищевказаного розчину додавали в В1;

Зо с. З лунки В1 відбирали 10 мкл розчину, додавали в В2 і добре перемішували; потім відбирали 10 мкл отриманого розчину і додавали в ВЗ, і розведення виконували послідовно до

ВУ, щоб отримати контрольні розчини, які розбавлені послідовно в 5 разів. (2) Приготування розчину досліджуваної сполуки: а. Брали розчини досліджуваної сполуки з певною концентрацією, відповідно розбавляли реакційним буферним розчином | для кіназ, щоб отримати розчин сполуки з кінцевою концентрацією 50 мкМ; р. 40 мкл реакційного буферного розчину ІІ для кіназ додавали в лунки Н2-НІ10О 96-лункового планшета, і 50 мкл вищевказаного розчину додавали в НІ1; с. З лунки НІ відбирали 10 мкл розчину, додавали в Н2 і добре перемішували; потім відбирали 10 мкл отриманого розчину і додавали в НЗ, і розведення виконували послідовно до

Не, щоб отримати контрольні розчини, які розбавлені послідовно в 5 разів. 1.2.4 Приготування змішаного розчину реакційного субстрату Її АТФ а. Приготування розчину АТФ:

200 мкл розчину АТФ з концентрацією 0,1 мМ: 2 мкл 10 мМ АТФ додавали до 198 мкл реакційного буферного розчину І для кіназ; 300 мкл розчину АТФ з концентрацією 50 мкМ: 150 мкл реакційного буферного розчину для кіназ додавали до 150 мкл вищевказаного розчину АТФ з концентрацією 0,1 мМ;

Б. Приготування 300 мкл розчину реакційного субстрату: 150 мкл вихідного розчину реакційного субстрату з концентрацією 1 мкг/мкл додавали до 150 мкл реакційного буферного розчину І для кіназ і добре перемішували; с. Вищевказані розчини а/о змішували, щоб отримати змішані розчини, відповідно. 1.3 Процедура експерименту: 1.3.1: Відбирали 2 мкл розчинів сполук з різними концентраціями, додавали в 384-лункові планшети і центрифугували протягом З хв; 1.3.2: У кожну лунку додавали 4 мл розчину кінази, центрифугировали при 5000 об/хв і 18 "С протягом 10 хв і струшували на струшувачі для планшетів протягом 10 хв; 1.3.3: У кожну лунку додавали 4 мкл змішаного розчину субстрату і АТФ, центрифугировали при 5000 об/хв і 187 С протягом 10 хв і струшували на струшувачі для планшетів при 377 С протягом 90 хв; 1.3.4: 384-лунковий планшет виймали і давали нагрітися до кімнатної температури; 1.3.5: У кожну лунку додавали 10 мкл реагенту АЮОР-СІо, центрифугировали при 5000 об/хв і 18 "С протягом 18 хв і струшували на струшувачі для планшетів при 25 "С протягом 40 хв, а потім реакцію зупиняли; 1.3.6: У кожну лунку додавали 20 мкл реагенту для визначення кінази, центрифугировали при 5000 об/хв і 18 "С протягом 10 хв і струшували на струшувачі для планшетів при 25 "С протягом 30 хв; і 1.3.7: Використовували рідер для мікропланшетів МІОООрго для зчитування значень флуоресценції. 1.4 Обробка даних:

Ступінь інгібування для кожної сполуки при даній концентрації розраховували за наступною формулою, а апроксимацію кривої здійснювали за допомогою програмного забезпечення

СгарпРавд Ргіхт 5, щоб отримати величину ІСбо. велицина Ффлуореєценнії о величина Ффлуоресценнії

Ступінь інгібування при при нульовій коннентрації при давній концентрації Шк даній концентрації Обінг) величина флузпесценції шо при нульавій концентрації 1.5 Результати дослідження:

Інгібуючу дію ІМ2835219, описаної в УМО2010075074, і сполук Прикладів 1-43 на

СОКІ/циклін А2 і СОКб/циклін ОЗ виражено у вигляді ІСво, і конкретні результати показані в

Таблиці 1.

Таблиця 1

Результати визначення інгібуючої активності досліджуваних сполук для СОКІ/циклін А2 і СОКб/циклін ОЗ (ІСво: НМ) нити схлини нини ни ПП Я ПО хг НЯ ПО 77777860 ,1777771522 6452358 вит 77778171 268281 20421 3и3 С

Таблиця 1

Результати визначення інгібуючої активності досліджуваних сполук для СОКІ/циклін А2 і СОКб/циклін ОЗ (ІСво: НМ) 7ле111011717771лв4ва001011700000 65490000 |010089 01000000001588401111131 нин с ПО ПО Ся: ПНЯ ПО 77772377 ва ,....10801. 298ив нн я ту ИН ПОЛ пише ИН ПИ я ПО ХП ПОЛ

Інгібуючу дію деяких ілюстративних сполук за даним винаходом на СОКОУ/циклін 03, Рітч-1 і

СОКао/циклін ЕТ ії СОКА / циклін ЕТ показано в Таблиці 2, Таблиці З і Таблиці 4, відповідно.

Таблиця 2

Результати визначення інгібуючої активності деяких досліджуваних сполук для СОКОУ/циклін ОЗ (ІСво: НМ) 76717522 1. вм5 | 042. | зва | 006 778 | обвав 1 года | 1443. | 33 10 в | завмит 10624106 |в | 05

Таблиця З

Результати визначення інгібуючої активності деяких досліджуваних сполук для Ріт-1 (ІСво: НМ) 76 1 1522 | 645 | 042 | 1509. 2359 | 006 | 233 779 | вва | годе | 443 17389) 1373 | ол | 85 774 123364 | 407 | - | ве | 5740 | - 1 703

Таблиця 4

Інгібуюча дія частини досліджуваних сполук на СОКА і СОК2 (ІСво: нМ)

Пика | укл о циклі т (цілі и цк ов циклнов Р | сок | сок | сркв.

Приклади й й й й й Ріт-1 циклін А2 |циклін ЕТ |циклін ЕТ |(циклін ОЗ|циклін ОЗ СОоКб | СОоКб | СОКб 776 | 1522 | - | 809 | 645 | ода |1509| 2359| 006 233 1.6 Висновок отриманий з експерименту: 1) Сполуки даного винаходу мають значну інгібуючу дію на СОКб і СОКА. 2у СОК1/СОоКб6, СОоКе/СКОб і Ріт-1/20Кб6 можуть відображати селективність сполуки по відношенню до протеїнкіназ. Чим більше значення, тим краще селективність сполуки по відношенню до СОКб, що вказує на те, що токсичність сполуки при неселективному інгібуванні кіназ може бути менше. Контрольна сполука (І2835219) демонструє СОК1/СОКб-83,83,

СсорКе/СОКб-1,33 їі Ріт-1/С0ОК6-1,03; деякі з сполук за даним винаходом демонструють кращу селективність, ніж І 2835219, зокрема, сполука, отримані у Прикладі 17, показує більш високу ферментативну активність по відношенню до СОКб і кращу селективність у порівнянні з СОК'І,

СОКУ і Ріт!'.

Приклад експерименту 2

Вимірювання інгібуючої дії ілюстративних сполук за даним винаходом на проліферацію клітин раку молочної залози лодини МОВ-МА-231 2.1 Матеріали для експерименту: клітини раку молочної залози людини МОА-МВ-231, придбані в СеїЇ Кезоцгсе Сепіег, Пекінський об'єднаний медичний коледж, ДАФІ (5 мг / мл,

Веуоїїйте, С1002), 4 95 -ий параформальдегід (СІМОСШО ВІОТЕСНМОЇ ОС СО. І ТО, АК-0211), 9б-лунковий планшет з чорним прозорим дном (РЕ, 6005182), система мультипараметричного клітинного аналізу Іп СеїІ Апаїугег 2200 (СЕ Неайсаге). 2.2 Приготування розчинів для експерименту: 2.2.1 Приготування середовища для клітин раку молочної залози людини МОА-МВ-231:

ВАРІМ1640--10 96 ФБС 1 95 пеніциліну/стрептоміцину. 2.2.2 Приготування розчинів досліджуваних сполук і розчинів стандарту І 2835219: (1) Приготування розчинів стандарту І У2835219 а. Відбирали 3,6 мкл вихідного розчину стандарту з концентрацією 10 мМ, додавали до 6,4 мкл середовища і добре перемішували; потім додавали 90 мкл середовища і добре перемішували; потім додавали 200 мкл середовища і добре перемішували, що давало вихідну концентрацію 20 мМ;

Зо р. 200 мкл середовища, що містить 0,2 90 ДМСО (диметилсульфоксид), додавали в лунки

В2-810 96-лункового планшета; 300 мкл вищевказаного розчину додавали в В1; і с. відбирали 100 мл розчину з лунки ВІ, додавали в В2 і добре перемішували; потім відбирали 100 мкл отриманого розчину і додавали в ВЗ, і розведення виконували послідовно до

Ве, щоб отримати стандартні розчини, послідовно розбавлені в З рази. (2) Приготування розчинів досліджуваних сполук а. Брали розчин досліджуваної сполуки з певною концентрацією і розбавляли середовищем, що давало розчин сполук з кінцевою концентрацією 20 мкМ; р. 200 мкл середовища, що містить 0,2 96 ДМСО (диметилсульфоксид), додавали в лунки

Н2г-НІ0 96-лункового планшета; і 300 мкл вищевказаного розчину додавали в НІ; і с. з лунки НІ відбирали 100 мл розчину, додавали в Н2 і добре перемішували; потім відбирали 100 мкл отриманого розчину і додавали в НЗ, і розведення виконували послідовно до

ВеО, щоб отримати розчини досліджуваної сполуки, послідовно розбавлені в З рази. 2.3 Процедура експерименту: 2.3.1: Клітини МОА-МВ-231 інокулювали в 96-лункові клітинні планшети з чорним прозорим дном в кількості 4000 клітин/100 мкл/лунку і вирощували протягом ночі при 37 "С; 2.3.2: У культуральний планшет з внесеними клітинами додавали вищевказані зразки в кількості 100 мкл/лунку, злегка поплескували, щоб добре перемішати, і інкубували при 37 С протягом 72 год.;

2.3.3: Фіксація: клітинний планшет виймали, середу видаляли і додавали 50 мкл 4 95 -ого параформальдегіду на лунку для фіксації протягом 10 хв; 2.3.4: Додавали 50 мкл 0,1 М гліцину для нейтралізації протягом 10 хв; 2.3.5: Використовували їхФСБ (фосфатний буферний розчин, рН 7,2) для дворазового промивання; 2.3.6: Пермеабілізація: додавали 50 мкл 0,295 -ого тритону Х-100 (тритон) на лунку, і пермеабілізацію здійснювали при кімнатній температурі протягом 10 хв; 2.3.1: Використовували їхФСБ (фосфатний буферний розчин, рН 7,2) для дворазового промивання; 2.3.8: Вихідний розчин ДАФІ з концентрацією 5 мг/мл розбавляли в співвідношенні 1: 5000 (кінцева концентрація 1 мкг/мл), і виконували фарбування при кімнатній температурі протягом 20 хв; 2.3.9: Використовували їхФСБ (фосфатний буферний розчин, рН 7,2) для триразового промивання; і 2.3.10: Виконували зчитування і аналіз за допомогою Іп сеї! апаїугег. 2.4 Обробка даних:

СгарпРавд Ргіхт 5, щоб отримати величину ІСбо. кількість клітин при Шо кількість клітин при

Ступінь інгібування при Й нульовій концентрації двній канцентрації ня данійконцентраці бін); о 0 ііькянири 000000 ше нульовій концентрації 2.5 Результати визначення:

Результати визначення цитологічної активності І У2835219, описаної в ММО2010075074, і сполук Прикладів 12 і 17 виражені у вигляді ІСво, а конкретні результати показані в Таблиці 5.

Таблиця 5

Інгібуюча активність ілюстративних сполук за даним винаходом щодо проліферації клітин раку молочної залози лодини МОВ-МА-231 (ІСво: нМ) 2.6 Висновок отриманий з експерименту:

Сполуки Прикладів 12 і 17 мають значну інгібуючої активністю щодо проліферації клітинної лінії МОА-МВ-231, і ілюстративні сполуки за даним винаходом мають більш сильну інгібуючу дію на проліферацію у порівнянні з контрольною сполукою І 2835219.

Зо Приклад експерименту З

Визначення фармакокінетики ілюстративних сполук за даним винаходом у щурів 3.1 Короткий опис експерименту

Щурів лінії БО використовували як піддослідних тварин, і визначали концентрації лікарських засобів в плазмі щурів в різні моменти часу після внутрішньовенного введення і внутрішньошлункового введення ілюстративних сполук за допомогою РХ/МС/МС для того, щоб вивчити фармакокінетичну поведінку сполук за даним винаходом у щурів і оцінити їх фармакокінетичні характеристики. 3.2 Порядок проведення експерименту 3.2.1 Досліджувані лікарські речовини:

Сполука, отримана в Прикладі 17 за даним винаходом.

Контрольна лікарська речовина І 2835219, отримана нами. 3.2.2 Піддослідні тварини: 12 здорових дорослих щурів лінії 50, самців, у віці 6-8 тижнів, масою 200-250 г, придбаних у

Зи2пои 2паомап Мем Огид Везеагсй Сепієг Со., Ца., ліцензія на розведення тварин Мо: ЗСХК (Би) 2013-0003 3.2.3 Підготовка досліджуваних лікарських речовин

Внутрішньошлункове введення: зважували необхідну кількість зразка і додавали 0,1 95 гідроксиетилцелюлози/0,5 95 твін 80 так, щоб отримати в кінці розчин з концентрацією 1 мг/мл.

Внутрішньовенне введення: зважували необхідну кількість зразка і додавали 10 95 М-метил- 2-пірролідону і 90 95 1895 -ого сульфобутил-В-циклодекстрину так, щоб в отримати в кінці розчин з концентрацією 0,4 мг/мл для внутрішньовенного введення. 3.2.4 Введення досліджуваних лікарських речовин

Внутрішньовенне введення: кожну досліджувану сполуку вводили внутрішньовенно З самцям щурів лінії 50, яких не годували протягом ночі, в дозі 2 мг/кг і обємі введення 1 мл/кг.

Внутрішньошлункове введення: кожну досліджувану сполуку вводили внутрішньошлунково

З самцям щурів лінії ЗО, яких не годували протягом ночі, в дозі 5 мг/кг і обємі введення 5 мл/кг. 3.3 Проведення експерименту

До введення і через 0,0833, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 12 і 24 години після введення відбирали кров через канюлю в сонній артерії. Згортуванню крові запобігали за допомогою ЕДТА-К2 і центрифугували, супернатант видаляли, а залишок заморожували при -20" С до аналізу зразків.

Зразки плазми аналізували за допомогою РХ-МС/МС, попередню обробку зразків виконували з використанням методу осадження білків, лінійний діапазон при аналізі зразків становив 1-2000 нг/мл, і нижня межа кількісного визначення становила 1 нг/мл. 3.4 Отримані фармакокінетичні дані

Фармакокінетичні параметри сполук за даним винаходом показані в Таблиці 6 і Таблиці 7.

Таблиця 6

ФК параметри сполуки 17 за даним винаходом у щурів після одноразового внутрішньовенного введення (середнє х СВ)

Уявний об'єм розподілу М7

Таблиця 7

ФК параметри сполуки 17 за даним винаходом у щурів після одноразового внутрішньошлункового введення (середнє х СВ) 3,5 Висновок отриманий з експерименту: ілюстративна сполука за даним винаходом (отримана у Прикладі 17) володіє більш високою біодоступністю у щурів у порівнянні зі сполукою І 2835219 і добре всмоктується при пероральному введенні.

Приклад експерименту 4

Визначення фармакокінетики ілюстративних сполук за даним винаходом у мишей 4.1 Короткий опис експерименту

Мишей лінії ІСК використовували як піддослідних тварин, і визначали концентрації

Зо лікарських речовин в плазмі мишей в різні моменти часу після внутрішньошлункового введення і внутрішньовенного введення ілюстративної сполуки за даним винаходом за допомогою

ЖХ/МС/МС для того, щоб вивчити фармакокінетичну поведінку сполук за даним винаходом у мишей і оцінити їх фармакокінетичні характеристики. 4.2 Порядок проведення експерименту 4.2.1 Досліджувані лікарські речовини:

Контрольна лікарська речовина І 2835219, отримана нами. 4.2.2 Піддослідні тварини: 12 здорових дорослих мишей лінії ІСЕ, самців, у віці 6-8 тижнів, масою 20-25 г, придбаних у зи2пои 2паохмап Мем Огид Кезеагсп Сепіег Со., Ца., ліцензія на розведення тварин Мо БСХК (Би) 2013-0003. 4.2.3 Підготовка досліджуваних лікарських речовин

Зважували необхідну кількість зразка і додавали 0,1 95 гідроксиетилцелюлозу/0,5 95 твін 80 так, щоб отримати в кінці розчин з концентрацією 0,5 мг/мл для внутрішньошлункового введення.

Внутрішньовенне введення: зважували необхідну кількість зразка і додавали 10 95 М-метил- 2-пірролідону і 90 95 1895 -ого сульфобутил-В-циклодекстрину так, щоб в отримати в кінці розчин з концентрацією 0,2 мг/мл для внутрішньовенного введення. 4.2.4 Введення досліджуваних лікарських речовин

Кожну досліджувану сполуку вводили внутрішньошлунково З самцям мишей лінії ІСК, яких не годували протягом ночі, в дозі 5 мг/кг і в обємі введення 10 мл/кг.

Кожну досліджувану сполуку вводили внутрішньовенно З самцям мишей лінії ІСК, яких не годували протягом ночі, в дозі 2 мг/кг і в обємі введення 10 мл/кг. 4.3 Проведення експерименту

До введення і через 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 12 і 24 години після введення відбирали кров у групи, в якій введення проводили внутрішньошлунково, через канюлю в сонній артерії.

Згортуванню крові запобігали за допомогою ЕДТА-К2 і центрифугували, супернатант видаляли, а залишок заморожували при -20" С до аналізу зразків. До введення і через 0,083, 0,25,0,5,1,2, 4, 8, 12 і 24 години після введення відбирали кров у групи, в якій введення проводили внутрішньовенно, через канюлю в сонній артерії. Зразки плазми обробляли аналогічно, зразкам

Зо плазми групи, в якій проводили внутрішньошлункове введення. Зразки плазми аналізували за допомогою РХ-МС/МС, попередню обробку зразків виконували з використанням методу осадження білків, лінійний діапазон при аналізі зразків становив 1-2000 нг/мл, і нижня межа кількісного визначення становила 1 нг/мл. 4.4 Отримані фармакокінетичні дані: див. Таблицю 8 і Таблицю 9.

Таблиця 8

ФК параметри сполуки 17 за даним винаходом у мишей після одноразового внутрішньовенного введення (середнє х СВ)

Уявний об'єм розподілу М7

Таблиця 9

ФК параметри сполуки 17 за даним винаходом у мишей після одноразового внутрішньошлункового введення (середнє х СВ) 4,5 Висновок отриманий з експерименту: ілюстративна сполука 17 за даним винаходом володіє більш високою біодоступністю і більш довгим періодом напіввиведення мишей у порівнянні зі сполукою І 2835219 і добре всмоктується при пероральному введенні.

Приклад експерименту 5

Визначення рівнів в плазмі і рівнів впливу на головний мозок ілюстративної сполуки 17 за даним винаходом 5.1 Короткий опис експерименту

Мишей лінії СО-1 використовували як піддослідних тварин, і визначали концентрації лікарських речовин в плазмі і тканині головного мозку мишей в різні моменти часу після одноразового внутрішньошлункового введення ілюстративних сполук за даним винаходом за допомогою ЖХ/МС/МС для того, щоб вивчити рівень в плазмі і рівень впливу на головний мозок сполук за даним винаходом у мишей. 5.2 Порядок проведення експерименту 5.2.1 Досліджувані лікарські речовини:

Контрольна лікарська речовина І 2835219, отримана нами. 5.2.2 Піддослідні тварини: 24 здорові дорослі миші лінії СО-1, самці, у віці 6-8 тижнів з масою тіла 20-25 г, придбані у зпапопаї зіррг ВК Гарогайогу Апітаї Со., Ц., ліцензія на розведення тварин Мо БСХК (Зпапопаї) 2013-0016. 5.2.3 Підготовка досліджуваних лікарських речовин

Зважували необхідну кількість зразка і додавали 0,1 95 гідроксиетилцелюлозу/0,5 95 твін 80 так, щоб отримати в кінці розчин з концентрацією 1,0 мг/мл. 5.2.4 Введення досліджуваних лікарських речовин

Кожну досліджувану сполуку вводили внутрішньошлунково 12 самцям мишей лінії СО-1, яких не годували протягом ночі, в дозі 10 мг/кг і в обємі введення 10 мл/кг. 5.3 Проведення експерименту

І 2835219: до введення і через 0,25, 1,5 і 6 годин після введення відбирали кров через канюлю в сонній артерії, і три миші вбивали в той же час. Ізолювали весь головний мозок, розминали і заморожували в рідкому азоті. Через 10 годин після введення вбивали тварин, що залишилися, збирали цільну кров за допомогою пункції серця, і ізолювали весь головний мозок, розминали і заморожували в рідкому азоті.

Приклад 17: до введення і через 2, 4 і 24 години після введення відбирали кров через канюлю в сонної артерії, і три миші вбивали в той же час. ІзЗолювали весь головний мозок, розминали і заморожували в рідкому азоті. Через 48 годин після введення вбивали тварин, що залишилися, збирали цільну кров за допомогою пункції серця, і ізолювали весь головний мозок, розминали і заморожували в рідкому азоті.

Обробка зразків цільної крові: згортуванню зібраної цільної крові запобігали за допомогою

ЕДТА-К2 і центрифугували, видаляли супернатант і залишок заморожували і зберігали при -20"

С до аналізу зразків за допомогою РХ-МС/МС.

Пробопідготовка гомогенату головного мозку: гомогенат головного мозку диспергували в розчині ФСБ (рН-7,4): МеоН (о06.: об., 2: 1) в обємі, який в п'ять разів перевищує обєм гомогенату головного мозку. Відбирали 100 мкл розчину і в ньому осаджували білок за допомогою 600 мкл І5. Суміш центрифугували при 13000 об/хв і 20-25" С протягом 15 хвилин.

50 мкл супернатанту змішували з 150 мкл води, що містить 0,3 95 ЕРА, і центрифугували при 4" С. мкл зразка аналізували за допомогою РХ-МС/МС.

Лінійний діапазон при аналізі зразків становив 1-2000 нг/мл, а нижня межа кількісного визначення становила 1 нг/мл. 5 5.4 Результати вимірювань впливу на кров і головний мозок показані в Таблиці 10.

Таблиця 10

Середній ступінь впливу досліджуваної сполуки на плазму і головний мозок у мишей лінії бор-1

Концентрація в крові

Плазма

Час, необхідний для досягнення максимально! й Головний мозок 4,00 концентрації в крові

Ттах (год.)

Площа під кривою мозок/Плазма 5.5 Висновок отриманий з експерименту: ілюстративна сполука за даним винаходом (отримана в Прикладі 17) має кращий розподіл між кров'ю і головним мозком, більш високе співвідношення АйМсСо-остл. (головний мозок/плазма) і більш високе співвідношенням Стах (головний мозок/плазма) в порівнянні зі сполукою І М2835219, і Ттах в головному мозку відповідає Ттах в плазмі, що вказує на те, що лікарська речовина володіє подібним ФК поведінкою в головному мозку і в плазмі. Передбачається, що сполуки за даним винаходом можуть проходити через гематоенцефалічний бар'єр, щоб пригнічувати ріст пухлин головного мозку (рак головного мозку) і лікувати рак головного мозку.

Приклад експерименту 6

Визначення інгібуючої дії ілюстративної сполуки 17 за данним винаходом на проліферацію клітинної лінії 087 МО. 6.1 Матеріали для експерименту: клітинна лінія глоюоми людини 087 МО придбана в клітинному фонді Китайської академії наук (СеїІ ВапкК ої Спіпезе Асадету ої зсіепсез), Шанхай,

ДАФІ (5 мг/мл, Веуоїйте, С1002), 4 96 параформальдегід (ІМОСЦО ВІОТЕСНМОГ ОБУ СО. 1 ТО,

АНВ-0211), 9б-лунковий планшет з чорним прозорим дном (РЕ, 6005182), система мультипараметричного клітинного аналізу Іп СеїІ АпаїІу7ег 2200 (СЕ Неайсаге). 6.2 Приготування розчинів для експерименту: б.2.1 Приготування середовища для И87 Мо: КРІМІ640-1095 ФБС - 195 пеніциліну/стрептоміцину. 6.2.2 Приготування розчинів досліджуваних сполук і розчинів стандарту І 2835219: (1) Приготування розчинів стандарту І 2835219 відбирали 3,6 мкл вихідного розчину стандарту з концентрацією 10 мМ, додавали до 6,4

Зо мкл середовища і добре перемішували; потім додавали 90 мкл середовища і добре перемішували; потім додавали 200 мкл середовища і добре перемішували, що давало вихідну концентрацію 20 мМ; р. 200 мкл середовища, що містить 0,2 96 ДМСО (диметилсульфоксид), додавали в лунки

Ве, щоб отримати стандартні розчини, послідовно розбавлені в З рази. (2) Приготування розчину досліджуваної сполуки:

брали розчин досліджуваної сполуки з певною концентрацією і розбавляли середовищем, що давало розчин сполук з кінцевою концентрацією 20 мкМ; р. 200 мкл середовища, що містить 0,2 96 ДМСО (диметилсульфоксид), додавали в лунки

Не, щоб отримати розчини досліджуваної сполуки, послідовно розбавлені в З рази. 6.3 Процедура експерименту: 6.3.1: Клітини 87 МО інокулювали в 96-лункові клітинні планшети з чорним прозорим дном в кількості 4000 клітин/100 мкл/лунку і вирощували протягом ночі при 37 "С; 6.3.2: У культуральний планшет з внесеними клітинами додавали вищевказані зразки в кількості 100 мкл/лунку, злегка поплескували, щоб добре перемішати, і інкубували при 37 С протягом 72 год.; 6.3.3: Фіксація: клітинний планшет виймали, середу видаляли і додавали 50 мкл 4 95 -ого параформальдегіду на лунку для фіксації протягом 10 хв; 6.3.4: Додавали 50 мкл 0,1 М гліцину для нейтралізації протягом 10 хв; 6.3.5: Використовували 1 х ФСБ (фосфатний буферний розчин, рН 7,2) для дворазового промивання; 6.3.6: Пермеабілізація: додавали 50 мкл 0,295 -ого тритону Х-100 (тритон) на лунку, і пермеабілізацію здійснювали при кімнатній температурі протягом 10 хв; 6.3.7: Використовували 1 х ФСБ (фосфатний буферний розчин, рН 7,2) для дворазового промивання; 6.3.8: Вихідний розчин ДАФІ з концентрацією 5 мг/мл розбавляли в співвідношенні 1: 5000 (кінцева концентрація 1 мкг/мл), і виконували фарбування при кімнатній температурі протягом 20 хв; 6.3.9: Використовували 1 х ФОБ (фосфатний буферний розчин, рН 7,2) для триразового промивання; і 6.3.10: Виконували зчитування і аналіз за допомогою Іп сеї апаїу7ег. 6.4 Обробка даних:

Зо Ступінь інгібування для кожної сполуки при даній концентрації розраховували за наступною формулою, а апроксимацію кривої здійснювали за допомогою програмного забезпечення

СгарпРавд Ргіхт 5, щоб отримати величину ІСбо. кількість клітин при ШИ нільність клітин при

Ступінь інгібування при Й нульовій концентрації даній концентрації двнійконцентрацйббінт 00070000 хМКих кДдвКІСТтьЬ КЛИН при нульовій концентрації 6.5 Результати визначення:

Результати визначення цитологічної активності І У2835219, описаної в ММО2010075074, і сполуки Прикладу 17 виражені у вигляді ІСво, а конкретні результати показані в Таблиці 11.

Таблиця 11

Інгібуюча активність ілюстративної сполуки за даним винаходом щодо проліферації клітинної лінії О87МО (ІСво: нМ) 6.6 Висновок отриманий з експерименту:

Сполука Прикладу 17 має значну інгібуючу активністю щодо проліферації клітинної лінії

О87МО, і ілюстративна сполука за даним винаходом мають більш сильну інгібуючу дію на проліферацію у порівнянні з контрольною сполукою І 72835219.

Приклад експерименту 7

Фармакодинамічне дослідження сполуки 17 за данним винаходу і комбінації сполуки 17 за данним винаходом і темозоломіду в моделі ортотопічної ксенотрансплантації клітин Ш87-Ійс в головний мозок 7.1 Короткий опис експерименту

У якості піддослідних тварин використовували дорослих самок голих мишей лінії ВАГ В/с.

Для вивчення впливу ілюстративної сполуки 17 за данним винаходом на медіанне виживання самок голих мишей лінії ВАГ В/с після внутрішньошлункового введення використовували модель ортотопічної ксенотрансплантації клітин Ш87-Ійс в головний мозок. 1.2 Порядок проведення експерименту 7.2.1 Досліджувані лікарські речовини:

Контрольна лікарська речовина І 2835219, отримана нами.

Темозоломід був придбаний в зейПеск. 7.2.2 Піддослідні тварини:

Здорові дорослі самки голих мишей лінії ВАГ В/с, 8 мишей/ группу, у віці 6-8 тижнів, масою 18-22 г, придбані в Зпапопаї 5іррг ВК І абогаїгу Апітаї! Со., Ч., ліцензія на розведення тварин

Мо 2008001658261; 2008001658263. 7.2.3 Підготовка досліджуваних сполук

Зважували необхідну кількість сполуки 17 і додавали 0,1 95 гідроксиетилцелюлози/0,5 95 твін 80 в якості наповнювача до 0,3125 мг/мл;

Зважували необхідну кількість зразка темозоломіду і додавали 0,1 95 КМЦ-Ма-0,25 95 твін 80 в якості наповнювача до 0,3 мг/мл. 7.3 Модель ортотопічної ксенотрансплантації в головний мозок

Дорослим самкам голих мишей лінії ВАГВ/сС давали анестезію за допомогою внутрішньочеревної ін'єкції пентобарбіталу натрію в дозі 80 мг/кг. Для полегшення болю тваринам підшкірно вводили бупренорфін в моменти часу 30 хвилин до операції і Є годин після операції в дозі 0,1 мг/кг. За тваринами спостерігали після анестезії, поки всі тварини не прокинулись.

Непритомних тварин належним чином фіксували, стерилізували шкіру голови тварин 70 95 - им етанолом і виконували розріз завдовжки приблизно 10 мм праворуч від серединної лінії від чола до лінії вух. Вводили З х 105 клітин Ш87-Іис (З мкл, суміш ФСБ і Маїгіде! в співвідношенні 4: 1) в праву лобову частку, яка знаходиться на відстані 2 мм від правої частини брегми і на відстані 1 мм від передньої частини вінцевої шва у кожної тварини. Розріз зашивали хірургічної

Зо ниткою Мо б і стерилізували полівінілліролідоном. Підтримували температуру тварин до відновлення життєдіяльності. Через б днів після трансплантації клітин пухлини тварин з пухлинами групували з використанням стратифікованої рандомізації на підставі величин інтенсивності сигналу флуоресценції, і середнє значення біолюмінесценції досягало 2,812Е07 фотонів/с, коли введення виконували по групах. Різним группам тварин вводили різні дози протягом загалом 35 днів. 7.4 Медіанне виживання (дні) для сполуки 17 за даним винаходом і комбінації сполуки 17 за данним винаходом і темозоломіду в моделі ортотопічної ксенотрансплантації клітин О87-Іис в головний мозок

Таблиця 12

Медіанне виживання, обумовлене сполукою 17 і комбінацією сполуки 17 з темозоломідом. . . Величина

Наповнювач 33331... 30бе37 01010101 шу 000звеювю 00 бою добу ду | яванаоюи добу ду Й жвомя | ом добу

МЕ ПОД сх ти ЕСЕ НН добу ву 1пявмя яю добу

Темозоломід, З мг/кг ІР, в дні 0,

Кен зано НИ ТИНИ ПЕС НОЯ

Сполука 17, 6,25 мг/кг, раз на добуктемозоломід, З мг/кг ІР в 57 (42-» 114) -0,0001 0,0454 дні 0, 7,14,21128 а. Період часу виживання. р. Величини р, коли кожну групу порівнювали з групою "Наповнювач". с. Величини р, коли кожну групу порівнювали з групою, що одержувала разову дозу темозоломіду. 7.5 Висновок отриманий з експерименту: ілюстративна сполука 17 за даним винаходом може значно збільшувати медіанну виживаність тварин в моделі ортотопічної ксенотрансплантації клітин Ш87-Іс в головний мозок залежним від дозування способом. У дослідженні комбінованого лікарського препарату з темозоломідом комбінований лікарський препарат додатково збільшує медіанну виживаність тварин в порівнянні з темозоломідом, використовуваним окремо.

Таким чином, в даному винаході запропонований ряд нових сполук, які мають селективну інгібуючу активністю по відношенню до кінази СОКа4/6, яка вище ніж або порівнянна з активністю

І у2835219, лікарської речовини-кандидата, яка вивчається в даний момент в клінічному дослідженні І фази, при цьому деякі сполуки демонструють кращу селективність. Крім того, переважна сполука добре всмоктується при пероральному введенні, і демонструє хороший розподіл між кров'ю і головним мозком, і має значну фармакологічну дію в моделі ортотопічної ксенотрансплантації клітин О87-Ійс в головний мозок, що свідчить про те, що сполуки за данним винаходом перспективні для розробки нових лікарських засобів для лікування захворювань, пов'язаних з проліферацією клітин, зокрема злоякісних пухлин, особливо різних типів раку головного мозку, і дають нові можливості лікарям і пацієнтам.

Набори

В даному винаході також запропоновано набір, що містить сполуки структурних формул 1-М і МІ або їх відповідний таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, пролікарський засіб або їх суміш; або фармацевтично прийнятні солі або сольвати сполук структурних формул І-М і МІ або їх відповідний таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, пролікарський засіб або їх суміші.

Крім того, набір може додатково містити інструкцію по застосуванню.

Зо Фармацевтичні композиції

Винахід також відноситься до комбінованого продукту для лікування розладу проліферації клітин, причому комбінований продукт містить фармацевтично прийнятний носій та сполуки структурних формул І-М їі МІ або їх відповідний таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, пролікарський засіб або їх суміш; або фармацевтично прийнятні солі або сольвати сполук структурних формул І-М і МІ або їх відповідний таутомер,

мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, пролікарський засіб або їх суміші. Сполуки або їх відповідний таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, пролікарський засіб або їх суміш; або фармацевтично прийнятні солі або сольвати сполук структурних формул І-М і МІ або їх відповідний таутомер, мезомер, рацемат, енантіомер, діастереомер, дейтерована сполука, пролікарський засіб або їх суміші можуть перебувати у фармацевтичній композиції в ефективній кількості або терапевтично ефективній кількості.

При використанні в даному документі, "ефективна кількість" відноситься до кількості, яка є функціональною і активною по відношенню до людей і/або тварин і прийнятна по відношенню до людей і/або тварин.

При використанні в даному документі, "фармацевтично прийнятні" інгредієнти є придатними для застосування у людей і/або тварин (таких як ссавці або птахи) без небажаних побічних ефектів (таких як токсичність, подразнення і алергія), тобто речовина з прийнятним співвідношенням користь/ризик. "Фармацевтично прийнятний носій" означає носій для введення і може включати в себе різні допоміжні речовини і розчинники тощо. Такі носії можуть включати в себе, але не обмежуватися ними, воду, ізотонічний розчин натрій хлориду, ліпосоми, ліпіди, білки, кон'югати білок-антитіло, пептиди, целюлозу, наногель, буферний розчин, глюкозу, гліцерин, етанол і їх комбінації. Вибір носія в загальному слід здійснювати таким чином, щоб він був сумісний зі способом введення, що добре відомо фахівцю в даній області техніки.

Ефективна кількість за даним винаходом може варіюватися в залежності від способу введення і тяжкості захворювання, що піддається лікуванню. Бажану ефективну кількість може визначити фахівець у даній галузі на підставі різних факторів (наприклад, за допомогою клінічного дослідження). Такі фактори включають в себе, але не обмежуються ними: фармакокінетичні параметри активного інгредієнта, такі як біодоступність, метаболізм, період напіввиведення і т. д.; тяжкість захворювання пацієнта, який піддається лікуванню, масу тіла пацієнта, імунологічний статус пацієнта, шлях введення |і т. д.

Спосіб лікування

Винахід також відноситься способу лікування розладу проліферації клітин, що включає введення пацієнту перорально або не перорально ефективної кількості сполук структурних

Зо формул /!-М і МІШ або їх відповідного таутомера, мезомера, рацемата, енантіомера, діастереомера, дейтерованої сполуки, пролікарського засобу або їх суміш; або фармацевтично прийнятних солей або сольватів сполук структурних формул І-М і МІ або їх відповідного таутомера, мезомера, рацемата, енантіомера, діастереомера, дейтерованої сполуки, пролікарського засобу або їх суміші, або вищевказаної фармацевтичної композиції.

Пероральний або непероральний шляхи можуть являти собою введення в шлунково- кишковий тракт, назальні введення, інтратрахеальне введення, внутрішньолегеневе введення, введення через вени або епідерміс непошкоджених ділянок, внутрішньошкірне введення, підшкірне введення, внутрішньосерцеве введення, внутрішньом'язове введення, внутрішньокісткового введення, внутрішньочеревинне введення, епідуральне введення, трансбуккальне введення, сублінгвальне введення, введення через око, ректальне введення, вагінальне введення, уретральне введення, введення через зовнішній слуховий канал або інші шляхи. Переважні способи введення включають в себе пероральне введення, введення через дихальні шляхи, ін'єкцію, трансдермальне введення, введення через слизові оболонки або введення в порожнину.

При цьому пероральне введення включає проковтування, сублінгвальне введення тощо.

Спосіб введення через дихальні шляхи включає інгаляцію, таку як інгаляцію за допомогою ультразвукового розпилювача, інгаляцію за допомогою кисневого аерозольного розпилювача, інгаляцію за допомогою розпилювача ручного дії тощо. Ін'єкційний спосіб введення включає артеріальну ін'єкцію, внутрішньовенну ін'єкцію, внутрішньом'язову ін'єкцію, внутрішньосерцеву ін'єкцію, внутрішньошкірну ін'єкцію тощо. Способи трансдермального введення включають в себе іонофорез, електропорацію тощо. Спосіб введення через слизові оболонки включає введення через слизову оболонку носа, введення через слизову оболонку ротової порожнини, введення через слизову оболонку ока, введення через слизову оболонку прямої кишки, введення через слизову оболонку матки і введення через слизову оболонку піхви. Спосіб введення в порожнину включає ректальне введення, вагінальне введення, уретральне введення, назальне введення і введення через зовнішній слуховий канал.

Всі згадки, наведені в даному винаході (в тому числі патентні документи або документи, які не є патентами), включені в даний документ за допомогою посилання, як якби кожен був окремо включений за допомогою посилання.

Хоча винахід було певною мірою описано, можна зробити безсумнівно придатні зміни різних умов без відхилення від сутності та обсягу винаходу.

Зрозуміло, що винахід не обмежується описом варіантів реалізації винаходу, а визначається обсягом формули винаходу, яка включає еквіваленти кожного описаного елемента.

Claims

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

1. Сполука структурної формули І: КЕ ме: и Х в нм М ГА р : Її / й Но й ; де кожен з Кі, В» і Ез незалежно вибраний з атома гідрогену та С:і-Свалкілу, або будь-які два з Кі, Р?» і Ез разом з атомами С, до яких вони відповідно приєднані, утворюють насичене або ненасичене 3-6-членне кільце; кожен з К. і К5 незалежно вибраний з групи, що складається з гідрогену і галогену, і щонайменше один з Ка і К5 являє собою галоген; Ве вибраний з атома гідрогену, Сі-Свалкілу; Віз М уио г В М ру го В? являє собою Ніг , де 7 являє собою О або ТО, і п дорівнює цілому числу від 0 до 4; кожен з МУ і М незалежно являє собою С, М, але обидва УМ і М не можуть одночасно являти собою С, і, якщо 7 є О, М/ являє собою С; кожен з Кіо незалежно вибраний з атома гідрогену, Сі-Свалкілу, Сз-Свциклоалкілу або Сі-Свгідроксіалкілу; кожен з ії, Ві2 та Кіз незалежно вибраний з атома гідрогену; або Ав ії А? разом з атомами С, до яких вони приєднані, утворюють б-ч-ленний гетероцикл, що містить один або більшу кількість атомів, вибраних з М, і б-членний гетероцикл заміщений де Рв являє собою С:-Свгідроксіалкіл; або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль.

2. Сполука структурної формули І або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль за п. 1, де К: вибраний з атома гідрогену, незаміщеного лінійного або розгалуженого Сі1- Сзалкілу, та кожен з Е2 і Кз незалежно вибраний з незаміщеного лінійного або розгалуженого Сі-Сзалкілу. Зо

3. Сполука структурної формули І або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль за п. 1 або п. 2, де Е» і Ез разом з атомами С, до яких вони обидва приєднані, утворюють насичене 4-5-членне кільце.

4. Сполука структурної формули І або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-3, де кожен з Ка і К5 незалежно вибраний з гідрогену, флуору або хлору, і щонайменше один з Ка і К5 являє собою флуор або хлор.

5. Сполука структурної формули І або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-4, де кожен з Ка і К5 незалежно являє собою гідроген або флуор, і щонайменше один з Ка і КЕ5 являє собою флуор.

6. Сполука структурної формули І або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль за п. 5, де Ка являє собою гідроген або флуор, а К5 являє собою флуор.

7. Сполука структурної формули І або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-6, де 7 являє собою /п, п дорівнює цілому числу від 0 до 2.

8. Сполука структурної формули І або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль за п. 7, де п-:0 або 1.

9. Сполука структурної формули І або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-6, де ЕК; вибраний із замісників наступних структур: ку чере й : Ав | А Ве й в Ав вже ї не ах 5 ще о що 7 С ліва, М сив, «МВ, С ви, си, В я Ав де Кі4 незалежно вибраний з атома гідрогену, С:-Свалкілу, Сз-Свциклоалкілу або сСі- Свгідроксіалкілу; К:і5 являє собою гідроген; Кіє вибраний з атома гідрогену, Сі-Свгідроксіалкілу.

10. Сполука структурної формули | або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль за будь-яким із пп. 1-6, де Кв і К7 разом з атомами С, до яких вони приєднані, утворюють наступну хімічну структуру: 2 ко обов де Ві являє собою гідроксил.

11. Сполуки структурної формули ІЇ, ПІ, ІМ або У: М" Ре Ве А в І не" ом З й 1, не Ще йо Ме М дк в ю йе ( Ї | и Ж во В:

М. во Те Вл НІ , ни , мб ! Ве не й і. Ме ащи Ж Же В мч м нм" М Фе І й Ве Ж (х) Й М І, В І -4 т у с з я м Е жи в М й тка " вия во ЇУ , У . де ЕК, В» і Ез такі, як визначено в будь-якому з пп. 1-3, Ва» і К5 такі, як визначено в пп. 1, 4, 5 або 6; Ве такий, як визначено в п. 1; Ко і К:1 такі, як визначено в п. 1; Кі; такий, як визначено в п. 10; 7, МІ і Х такі, як визначено в пп. 1, 7 або 8; кільце А являє собою насичене 3-6-членне кільце; або їх дейтерована сполука, або їх фармацевтично прийнятна сіль.

12. Сполука структурної формули МІ:

ки А и о НЖОсм ЩО М ! ке Нох 4 сн Я» о А (Сак ве щи Во У , де кожен з Кого, Рі, Н22 незалежно вибраний з Сі-Слалкілу, або Кго являє собою С:-Сзалкіл, а Ва ії К22 разом з атомом С, до якого вони приєднані, утворюють насичене 5-6-членне кільце; Кгз вибраний з гідрогену або флуору; п-0 або 1; К24« вибраний з гідрогену, Сі-Слалкілу або Сі- Сагідроксіалкілу, і ОО) являє собою С або М; або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль.

13. Сполуки наступних структур:

дужий Я й жениї с у Ж ЕН й а щи г хо ей я шия Козак код кі ЖЖ дн Зери З ой ВН Й М Ж я как ся, В й най З В: кри ри Кок ЗИ ши - я пове нн й М х 7 х Ха 3 -х дя М К Кок, в ї й не соду т Є ше що ой в'яз я з ши ше я Н : 2 С ча фе у НІ ї і зве М з ІЗ ше Медея ше й ен ще зак М Ж й АК У ЕК го н Ї З зв» ся СУ ре Й ї их. Ж Й ї де ком Я ра С сяк я й ще я ши м'я ще й 5 на чн, З сей як и ж че й

В. й ї т цк дж чи м В шко АЙ ше 7 с ШИ Як ан и ЧИ З в

Ї. В |; КУ в Х не МУ й соц Її. ІН хи : С; ЕЕ к дит, -к рес з ї Б я М. Же» КА НЕО Ж оно шана Її вечори Шк Й ря Мой х й ву с Я ШЕ ; вк І й Каши її тк ве СЯЩИе в Й ! Ср я т ов я з Ми і и и дин ій Кк У З ан пий Т хх ще й ї х КЗ х д'я ї се Мои Ко. др СКУ прий Й ди і я це КЗ т що ви Й суб ; ; вк яке с Ж й . і: с ! Аж Ян іешнй АКА щи І ж дні вх і пон шо Й СН вий У ї м ГІ я, ї От нта и ІН і Й я -К КЕ Щи мех кл І я ій Зх нк ей дих х дани - ша днини щи дит АХ р в ус й ! де лі ! Н й кб кри че г -Я ш- їв мя ще ме щі оч и Би ШЕ ї фе Гей й я х й М ой і: у й" я--й в В їй дом й Н 5 ке в ЩІ А Е щі кій ї що Кк ій В М г і дае -- ги Е пе й пд г Й й : гей щ | | і і и КУ ї й | Енас ай х З моя 7 М осн мил мае : НН син ЩІ а, де т КЕ се й по нн ИЙ кн о а й ще З сть, щи х ЩІ т Й Е с Ох ї ій КАТА В що я й в ма Же мб чт я в х т Її я Зм --у ЩО Й Ї І Же о В Н г Я У і м се а щи ї" й б: з ї г В ий ї ТЕ оо ія х й ї Ся ях ї М Бай М г й а х Кай Ган Й Й у й НІ ї І С й в'я у -- й Де х І З ше к х Н о рум, НМ т В н о ОО й МО ле їх: ще У де х Кз пеня й Се М В: с вія КЕ. с вк а п м нет ж Я шо | Я м. ЕЕ и ку ВИ х Гн -е ра ши ше жк, най ой т х сх ІЗ ї ІЗ р: ї В Я ж: 3 Ц й З й а рень й КЯ со Я х СеКУ с мк ма ц в НІ З КО ЩІ ям сне ще Ге ШЕ В! Я КИ ШК ХМ дев М ж ї Н гу їх ЩІ АЙ ! й а "м с і ше я б -- іде ! ШУ Н Ей го ХК. їх і я тк ї ї Н кое як Я і у т : су ша НИ: АВ чел: й х ; у Я щу ! Й М. ЗК ак ! ! шу нин серед Ж Ді З що» я Й , в І З пев ан Й Її ск я СМ ов, Е З и в в - Е З ї ге вч ЗД ї т тт М ї в» яко Хар -в й хк ще НИЄ їі кун ий й ! ни Ши С к ТЇ ле ши с ЕН КО р виг ще я 1 ше ОЗ Й м че: ій ж ше чу ї пкт їв їй М т й ж Б б я я й й ші с, Б Ї зви ї ше ЕЕ Ше В ей веше й ЕН е в Й Н "ми и Ук ні я НА х Й й з й пе й

- й й в дух Е хв Ж цей Мк щу ї. З Ме В ї ГА В ово 0 речойчечк вель в р рт мачо А Ше я сш я ї Е. ї Ж : ЕЕ Я хз ї ЕК дк а сах, ве ще ас е В к, єї і В еко Ей я Ка А - я -к КІ яке сяк ах і: й А ще Її Я КЗ ох у ОК Н і 4 х ні Я х Ка Я Я з Ма Б У а чає За За І х Ж х У х 3 У І 5 в : вия в вч ї н т Хий ке, Хо в У а Я ї й: х У ее во ме Ж Ух хо ж СЯ ж КО я бу рий Я вк ов як і а "г зе З й З З ї ож жк - мита Шк В Зоря щу а в бай т г С соя ден дев, х Хорив х їх Е ЩЕ, до е кос со ВК маш Я и вх Я В я нев що Ме ЕЙ в НО я дн й ше не щ сг ке ей З г ек дн Е Ж ше Її або їх дейтерована сполука, або їх фармацевтично прийнятна сіль.

14. Сполука структурної формули МІ: ще Ме ! Ж М зи Я ри Не ВУ в У де ЕК, В» і Ез такі, як визначено в будь-якому з пп. 1-3; Ва» і К5 такі, як визначено в пп. 1, 4, 5 або 6; Х являє собою галоген або аміно; або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль.

15. Сполука за п. 14, де Х являє собою флуор, бром, хлор або аміно, або її дейтерована сполука, або її фармацевтично прийнятна сіль.

16. Спосіб отримання сполуки структурної формули | або її дейтерованої сполуки, або її фармацевтично прийнятної солі за п. 1, який включає проведення каталізованої паладієм реакції сполучення між сполукою формули МІ і сполукою формули Мі! в розчиннику, що приводить до сполуки формули І:

ї Де т-о еВ Ше: и у й: «о М її Ж я : Й 4 с, я т В аль ї зе Ма ме НВ ві (а сл о нн у й см Бонн й й. до" й Нут 4 за н. Б Е 1. На Й, М йо М У І де Ви, В» і Вз такі, як визначено в будь-якому з пп. 1-3, Ва» і В5 такі, як визначено в пп. 1, 4, 5 або б; Вє такий, як визначено в п. 1 або 10; В; такий, як визначено в пп. 1, 9 або 10; кожен з Х і М незалежно являє собою галоген або аміно, і тільки один з Х і М являє собою аміно.

17. Спосіб за п. 16, де галоген являє собою флуор, бром або хлор.

18. Застосування сполук структурних формул І-М і МІ або їх дейтерованої сполуки, або їх фармацевтично прийнятної солі, як вказано в пп. 1-13, при виробництві фармацевтичного складу для лікування розладу проліферації клітин.

19. Застосування за п. 18, де фармацевтичний склад містить фармацевтично прийнятну допоміжну речовину.

20. Застосування за п. 18 або п. 19, де розлад проліферації клітин являє собою одне або декілька захворювань, вибраних з групи, що складається з раку ссавця або людини, СНІДУ, атеросклерозу і рестенозу після імплантації судинного стента.

21. Застосування за п. 20, де рак людини включає злоякісні солідні пухлини і злоякісні несолідні пухлини.

22. Застосування за п. 21, де рак людини включає, але не обмежується, рак молочної залози, рак легенів, рак передміхурової залози, лейкоз, рак головного мозку, рак шлунка та гліому.

23. Застосування за будь-яким із пп. 18-22, де вказані сполуки або їхні дейтеровані сполуки або фармацевтично прийнятні солі вводять суб'єкту, який цього потребує, як єдиний активний інгредієнт або в комбінації з іншими біологічно активними речовинами.

24. Застосування за п. 23, де інші біологічно активні речовини включають в себе, але не обмежуючись ними, протиракові агенти, імунодепресивні агенти і противірусні агенти; причому протираковий агент являє собою один або більшу кількість агентів, вибраних з циклофосфаміду, іфосфаміду, тіотепів, семустину, мехлоретаміну гідрохлориду, бусульфану, хлорамбуцилу, мелфалану, нітрокафану, формілмелфалану, кармустину, ломустину, альтретаміну, дибромоманіту, цитарабіну, фторурацилу, метотрексату, гідроксисечовини, тегафуру, меїізоіндіго, меркаптопурину, цисплатину, карбоплатину, оксаліплатину, актиноміцину ОР, мітоміцину, доксорубіцину, пінгіангміцину, епірубіцину, пірарубіцину, даунорубіцину, Зо блеоміцину, гомогаринітоніну і його похідних, вінкристину і його похідних, гідроксикамптотецину і його похідних, етопозиду і його похідних, віндезину і його похідних, вінбластину і його похідних, вінорелбіну бітартрату, таксолу і його похідних, колхіцину і його похідних, елемену і його похідних, аміноглутетиміду, тамоксифену, дексаметазону, дутастериду, флутаміду, гонадореліну, лейпроліду ацетату, летрозолу, сунітинібу, сорафенібу, іматинібу, гефітинібу, ерлотинібу, вандетанібу, пазопанібу, лапатинібу, канертинібу, афатинібу, мубритинібу, дазатинібу, нератинібу, темозоломіду, трастузумабу, пертузумабу, ритуксимабу, панітумумабу, бевацизумабу, іпілімумабу, офатумумабу, рамуцирумабу, еверолімусу, сиролімусу і зотаролімусу.

25. Фармацевтична композиція для лікування розладу проліферації клітин, яка містить ефективну кількість однієї або декількох сполук, вибраних із сполук структурних формул І-М і МІ, або їх дейтерованої сполуки, або їх фармацевтично прийнятної солі, як вказано в пп. 1-13, та фармацевтично прийнятні допоміжні речовини.

26. Набір, який містить фармацевтичну композицію за п. 25 та інструкцію по застосуванню.

27. Спосіб лікування розладу проліферації клітин, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, перорально або парентерально ефективної кількості сполук структурних формул І-М і МІ або їх дейтерованої сполуки, або їх фармацевтично прийнятної солі, як вказано в пп. 1-13, або фармацевтичної композиції за п. 25.

28. Спосіб за п. 27, де розлад проліферації клітин належить до одного або більшої кількості захворювань, вибраних з групи, що складається з раку ссавця або людини, СНІДУ, атеросклерозу і рестенозу після імплантації судинного стента.

29. Спосіб за п. 28, де рак людини включає злоякісні солідні пухлини і злоякісні несолідні пухлини.

30. Спосіб за п. 29, де рак людини включає, але не обмежується, рак молочної залози, рак легенів, рак передміхурової залози, лейкоз, рак головного мозку, рак шлунка та гліому.

31. Спосіб за будь-яким із пп. 27-30, де у способі сполуки структурних формул І-М і МІ! або їх дейтеровану сполуку, або їх фармацевтично прийнятну сіль вводять суб'єкту, який цього потребує, як єдиний активний інгредієнт або в комбінації з іншими біологічно активними речовинами.

32. Спосіб за п. 31, де інші біологічно активні речовини включають в себе, але не обмежуючись ними, протиракові агенти, імунодепресивні агенти і противірусні агенти; причому протираковий агент являє собою один або більшу кількість агентів, вибраних з циклофосфаміду, іфосфаміду, тіотепів, семустину, мехлоретаміну гідрохлориду, бусульфану, хлорамбуцилу, мелфалану, нітрокафану, формілмелфалану, кармустину, ломустину, альтретаміну, дибромоманіту, цитарабіну, фторурацилу, метотрексату, гідроксисечовини, тегафуру, меїізоіндіго, меркаптопурину, цисплатину, карбоплатину, оксаліплатину, актиноміцину 0, мітоміцину, доксорубіцину, пінгіангміцину, епірубіцину, пірарубіцину, даунорубіцину, блеоміцину, гомогарингтоніну і його похідних, вінкристину і його похідних, гідроксикамптотецину і його похідних, етопозиду і його похідних, віндезину і його похідних, вінбластину і його похідних, вінорелбіну гідротартрату, таксолу і його похідних, колхіцину і його похідних, елему і його похідних, аміноглутетиміду, тамоксифену, дексаметазону, дутастериду, флутаміду, гонадореліну, лейпроліду ацетату, летрозолу, сунітинібу, сорафенібу, іматинібу, гефітинібу, ерлотинібу, вандетанібу, пазопанібу, лапатинібу, канертинібу, афатинібу, мубритинібу, дазатинібу, нератинібу, темозоломіду, трастузумабу, пертузумабу, ритуксимабу, панітумумабу, бевацизумабу, іпілімумабу, офатумумабу, рамуцирумабу, еверолімусу, сиролімусу і зотаролімусу.