UA117675C2 - Спосіб визначення ступеня модифікуючої активності біпатичного лікарського засобу - Google Patents
Спосіб визначення ступеня модифікуючої активності біпатичного лікарського засобу Download PDFInfo
- Publication number
- UA117675C2 UA117675C2 UAA201510146A UAA201510146A UA117675C2 UA 117675 C2 UA117675 C2 UA 117675C2 UA A201510146 A UAA201510146 A UA A201510146A UA A201510146 A UAA201510146 A UA A201510146A UA 117675 C2 UA117675 C2 UA 117675C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- specified
- substance
- activated potentiated
- gamma
- potentiated form
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 111
- 230000000051 modifying effect Effects 0.000 title abstract description 41
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 title description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 188
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 43
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 33
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims abstract description 15
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 27
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 claims description 12
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 10
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 10
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 claims description 6
- 239000000902 placebo Substances 0.000 claims description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims description 6
- 230000001632 homeopathic effect Effects 0.000 abstract description 60
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 18
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 9
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 68
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 68
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 53
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 47
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 41
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 38
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 23
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 22
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 20
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 20
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 16
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- 229960001259 diclofenac Drugs 0.000 description 15
- DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N diclofenac Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 11
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 8
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 7
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 6
- 102100033772 Complement C4-A Human genes 0.000 description 6
- 101000599940 Homo sapiens Interferon gamma Proteins 0.000 description 6
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 6
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 6
- 229960001193 diclofenac sodium Drugs 0.000 description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 6
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- JGMJQSFLQWGYMQ-UHFFFAOYSA-M sodium;2,6-dichloro-n-phenylaniline;acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O.ClC1=CC=CC(Cl)=C1NC1=CC=CC=C1 JGMJQSFLQWGYMQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 102000043557 human IFNG Human genes 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 5
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 5
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101100314454 Caenorhabditis elegans tra-1 gene Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 4
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 4
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Natural products OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 4
- 238000001030 gas--liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 239000012907 medicinal substance Substances 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N methyl cyanide Natural products CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N (3-aminopropyl)triethoxysilane Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)CCCN WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SERLAGPUMNYUCK-DCUALPFSSA-N 1-O-alpha-D-glucopyranosyl-D-mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SERLAGPUMNYUCK-DCUALPFSSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- -1 for example Substances 0.000 description 3
- CNKHSLKYRMDDNQ-UHFFFAOYSA-N halofenozide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)N(C(C)(C)C)NC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CNKHSLKYRMDDNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 239000000905 isomalt Substances 0.000 description 3
- 235000010439 isomalt Nutrition 0.000 description 3
- HPIGCVXMBGOWTF-UHFFFAOYSA-N isomaltol Natural products CC(=O)C=1OC=CC=1O HPIGCVXMBGOWTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 3
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 3
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 2
- 238000012443 analytical study Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000002242 deionisation method Methods 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 2
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 2
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 2
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000011045 prefiltration Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LPXQRXLUHJKZIE-UHFFFAOYSA-N 8-azaguanine Chemical compound NC1=NC(O)=C2NN=NC2=N1 LPXQRXLUHJKZIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- UDIPTWFVPPPURJ-UHFFFAOYSA-M Cyclamate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)NC1CCCCC1 UDIPTWFVPPPURJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 1
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 description 1
- 102100036992 Ecto-ADP-ribosyltransferase 5 Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001024570 Homo sapiens Ecto-ADP-ribosyltransferase 5 Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- AYRXSINWFIIFAE-SCLMCMATSA-N Isomaltose Natural products OC[C@H]1O[C@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O AYRXSINWFIIFAE-SCLMCMATSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- WINXNKPZLFISPD-UHFFFAOYSA-M Saccharin sodium Chemical compound [Na+].C1=CC=C2C(=O)[N-]S(=O)(=O)C2=C1 WINXNKPZLFISPD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 229960004543 anhydrous citric acid Drugs 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000010256 biochemical assay Methods 0.000 description 1
- 230000036782 biological activation Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000004850 capillary HPLC Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000012501 chromatography medium Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004106 citric acid Drugs 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001427 coherent effect Effects 0.000 description 1
- 229940000425 combination drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 229960000913 crospovidone Drugs 0.000 description 1
- 239000000625 cyclamic acid and its Na and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000005489 elastic deformation Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000001730 gamma-ray spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 108010055790 immunoglobulin B Proteins 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-RTPHMHGBSA-N isomaltose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-RTPHMHGBSA-N 0.000 description 1
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229940057948 magnesium stearate Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001225 nuclear magnetic resonance method Methods 0.000 description 1
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 235000010603 pastilles Nutrition 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 235000013809 polyvinylpolypyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000523 polyvinylpolypyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229960001462 sodium cyclamate Drugs 0.000 description 1
- 239000007892 solid unit dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 125000004079 stearyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940098465 tincture Drugs 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6854—Immunoglobulins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N24/00—Investigating or analyzing materials by the use of nuclear magnetic resonance, electron paramagnetic resonance or other spin effects
- G01N24/08—Investigating or analyzing materials by the use of nuclear magnetic resonance, electron paramagnetic resonance or other spin effects by using nuclear magnetic resonance
- G01N24/088—Assessment or manipulation of a chemical or biochemical reaction, e.g. verification whether a chemical reaction occurred or whether a ligand binds to a receptor in drug screening or assessing reaction kinetics
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/15—Medicinal preparations ; Physical properties thereof, e.g. dissolubility
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16C—COMPUTATIONAL CHEMISTRY; CHEMOINFORMATICS; COMPUTATIONAL MATERIALS SCIENCE
- G16C20/00—Chemoinformatics, i.e. ICT specially adapted for the handling of physicochemical or structural data of chemical particles, elements, compounds or mixtures
- G16C20/10—Analysis or design of chemical reactions, syntheses or processes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- High Energy & Nuclear Physics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Theoretical Computer Science (AREA)
- Computing Systems (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Винахід стосується способу визначення активності активованої потенційованої форми речовини, зазначений спосіб включає: одержання активованої потенційованої форми речовини; пересвідчення у відсутності молекулярної форми речовини в зазначеній активованій потенційованій формі; одержання молекулярної форми вказаної речовини; вимірювання принаймні одного фізичного, хімічного або біологічного параметра (А) зазначеної молекулярної форми вказаної речовини за допомогою придатного аналітичного методу, вибраного з групи, що включає високоефективну рідинну хроматографію, імуноферментний аналіз та ядерний магнітний резонанс; оброблення зазначеної молекулярної форми зазначеної речовини, вказаною активованою потенційованою формою зазначеної речовини, та вимірювання того ж зазначеного принаймні одного фізичного, хімічного або біологічного параметра (AM) зазначеної обробленої молекулярної форми зазначеної речовини за допомогою вказаного аналітичного методу, де зазначена активність зазначеної активованої потенційованої форми зазначеної речовини є величиною різниці між A та AM, причому вказану активність вказаної активованої потенційованої форми вказаної речовини виражають у відносних одиницях (Х) відповідно до формули X=C│A-AM│/А, де С - безрозмірний коефіцієнт пропорційності, А - значення характерного параметра вихідної речовини до її взаємодії з вказаною активованою потенційованою формою, Ам - значення того ж характерного параметра вихідної речовини після її взаємодії з вказаною активованою потенційованою формою.
Description
обробленої молекулярної форми зазначеної речовини за допомогою вказаного аналітичного методу, де зазначена активність зазначеної активованої потенційованої форми зазначеної речовини є величиною різниці між А та Ам, причому вказану активність вказаної активованої потенційованої форми вказаної речовини виражають у відносних одиницях (Х) відповідно до формули Х-С | А-Ам| /А, де
С - безрозмірний коефіцієнт пропорційності,
А - значення характерного параметра вихідної речовини до її взаємодії з вказаною активованою потенційованою формою,
Ам - значення того ж характерного параметра вихідної речовини після її взаємодії з вказаною активованою потенційованою формою.
(00011 Дана заявка посилається на пріоритет російської заявки на видачу патента Мо 2013111961, поданої 18 березня 2013, яка включена в даний опис у повному обсязі за допомогою посилання.
ГАЛУЗЬ ДО ЯКОЇ НАЛЕЖИТЬ ВИНАХІД
(00021 Винахід належить до галузі медицини, зокрема до лікарських засобів. Винахід використовується для визначення модифікуючої активності препаратів, особливо біпатичних препаратів, принаймні один з компонентів яких, отримують надійним та відтворюваним чином згідно з гомеопатичними методами.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ
АКТИВОВАНА ПОТЕНЦІЙОВАНА ФОРМА
ІО0ОЗІ Лікарські препарати отримані за допомогою гомеопатичних методів, включають отримані гомеопатичним потенціюванням, яке також згадується як активація, шляхом багаторазового послідовного розведення у носієві (воді або водно-спиртовому розчиннику) - тим самим зменшуючи концентрацію - у поєднанні зі струшуванням кожного послідовного розведення. Дивись, наприклад КО 2191601 С1; КО 2192888 С1; КО 2332236 С1 (англійську версію представлено в ЕР 2 123 300); та КО 2438707 С2 (0.5. 2011/0008452).
Результатом приготування за допомогою гомеопатичного потенціювання є лікарський засіб, який містить низькі або наднизькі дози вихідного лікарського засобу; причому розбавлення може наближатися до приблизно або перевищувати 1 моль носія на молекулу вихідного лікарського засобу у молекулярній формі, маючи на увазі, що загальна кількість молекул на моль задається числом Авогадро (6,022 х 1023 моль"). Нижче додатково визначено термін молекулярна форма.
Стосовно твердої речовини, розбавленням є розтирання. За допомогою гомеопатичних методів носій може набути модифікуючої здатності, що проявляється в його здатності змінювати фізичні, хімічні та/або біологічні властивості вихідної субстанції при лікуванні вказаною активованою потенційовваною формою (КИ 2161955 С1). (0004) Термін "молекулярна форма" використовується для позначення однієї або декількох молекул певної окремої хімічної речовини. Так, молекулярна форма аспірину може бути однією молекулою ацетилсаліцилової кислоти; 1 молем аспірину, що в молекулярній формі складається з 6,022 х 1023 молекул ацетилсаліцилової кислоти і важить 180,157 грамів.
Зо (00051 Термін "активована потенційована форма" використовується для позначення продукту гомеопатичного потенціювання вихідного розчину, що містить молекулярну форму речовини. Іншими словами, розчин, що містить молекулярну форму речовини, наприклад специфічне антитіло або органічну молекулу, піддають повторюваному послідовному розведенню і багаторазовому вертикальному струшуванню кожного отриманого розчину відповідно до гомеопатичних методів. Переважним розчинником, який часто називають носієм, є вода або суміш води та етилового спирту. Переважна концентрація молекулярної форми у вихідному носії становить від приблизно 0,5 до приблизно 5,0 мг/мл. Активована потенційована форма, може бути отримана з вихідного розчину гомеопатичним потенціюванням, переважно з використанням методу пропорційного зменшення концентрації послідовним розведенням 1 частини кожного попереднього розчину. Так, 1 частину вихідного розчину змішують з 99 частинами (для сотенного розведення) носія і піддають зовнішньому впливу. Переважно, зовнішній вплив включає багаторазове вертикальне струшування (динамізацію) кожного розведення. Це призводить до створення 1-го сотенного розведення, що позначається як С1.
Друге сотенне розведення (С2) отримують шляхом змішування 1 частини першого сотенного розведення С1 з 99 частинами носія. Ця процедура повторюється додатково 10 разів для приготування 12-го сотенного гозведення С12. Для кожного наступного розведення до необхідного коефіцієнту розведення, як правило, використовуються окремі контейнери.
Аналогічні процедури з відповідними коефіцієнтами розведення виконуються для отримання, наприклад, розведення С30О С50 та С 200. Цей метод є загальноприйнятим у гомеопатичній галузі. Дивись, наприклад М. Зспугабе "Нотеораїййіс теаісіпе5", М., 1967, р. 14-29, включений у даний опис шляхом посилання для зазначених цілей. С12, С30 та С200 представляють розведення первинного матричного розчину (материнської тинктури) антитіл 10072, 10090 ї 100200 разів, відповідно. (0006) Переважно активовані потенційовані форми часто є сумішшю декількох сотенних розведень однієї і тієї ж самої молекулярної форми. Наприклад, суміш С12, СЗ30, ії С50 розведень або С12, С30 ї С200 розведень. При використанні суміші різних гомеопатичних розведень кожен компонент композиції, наприклад, С12, 30, С50, С200 готують окремо згідно з описаною вище процедурою поки не отримають передостаннє розведення, тобто до С11, С29 і
С199 відповідно, після чого одну частину кожного компонента додають у один контейнер,
відповідно до складу композиції і змішують з необхідною кількістю носія, тобто з 97 частинами на сотенне розведення. (00071 Приклади гомеопатичного потенціювання описано в патентах 05 7572441 та 05 7582294, які включені у даний опис у повному обсязі шляхом посилання та для зазначених цілей. Вважається, що термін "активована потенційована форма" та термін "надмалі дози" є повністю взаємозамінними і головним чином синонімами один з одним.
ГОМЕОПАТИЧНА БІПАТІЯ
(00081 В патенті 05 8178498 описано концепцію біпатичних лікарських форм.
Біпатичні лікарські препарати поєднують терапевтичні дії лікарської речовини в терапевтичній дозі і активованого потенційованого препарату хімічно однорідного з лікарською речовиною, але відмінного за механізмом дії на організм. Іншими словами, описаний біпатичний лікарський препарат поєднує молекулярну форму лікарської речовини в приблизно стандартній концентрації та активовану потенційовану форму, отриману з такої ж молекулярної форми, але таку, що містить свою молекулярну форму, якщо взагалі містить, в ультра-низькій концентрації.
Показано, що стандартна доза та активована потенційована форма, у поєднанні або введені приблизно одночасно, сприяють біологічній активації і індукують позитивні морфологічні та функціональні зміни у вигляді "системної адаптації", відповідальні за підвищену терапевтичну ефективність активної лікарської речовини зі зменшеним ризиком окремих реакцій пацієнтів і зменшеними небажаними несприятливими побічними ефектами або відстроченими наслідками. (0009) Крім того, "біпатичне" одночасне введення лікарської речовини в терапевтичній дозі і активованої потенційованої форми, згідно з 05 8,178,498: (1) дозволяє знизити звичайні дози речовини, (2) запобігає звиканню через ферментну "індукцію" та (3) запобігає передозуванню внаслідок нейтралізації негативних енергій і стимуляції певних органів та в цілому . Патент 5 8178498 включений повністю у даний опис шляхом посилання для зазначених цілей.
ЯКІСНА/ЖІЛЬКІСНА ОЦІНКА ЛІКАРСЬКИХ ЗАСОБІВ (00101 Відомий, наприклад з рівня техніки КО 2181890 С1, являє собою спосіб, для визначення біологічної активності речовини. Активність представлена відношенням між швидкістю ферментативної реакції на тестовому зразку до і після додавання речовини.
Зо "Оптимальна концентрація речовини у зразку" визначається іп міго Цей метод не підходить, однак, для визначення потенції лікарських засобів, приготованих за гомеопатичною технологією. (00111 Відомий з рівня техніки метод визначення ефективності гомеопатичного лікарського засобу з застосуванням лінійно поляризованого когерентного оптичного випромінювання до активованого лікарського засобу, що знаходиться у постійному магнітному полі. Розсіяне пропущене випромінювання реєструється за допомогою часового накопичення значень інтенсивності його поляризованої компоненти в режимі оптичного зсуву з різних точок тестового середовища. Аналіз здійснюють шляхом обчислення частотного спектру надповільних коливань інтенсивності пропущеного випромінювання та порівняння його з еталонним зразком. Дивись, наприклад КИ 2112976 С1. (00121 Також відомий спосіб якісного визначення гомеопатичного лікарського препарату або активованої потенційованої форми. Спосіб включає в себе обробку тестового середовища зі стандартним зразком і реєстрацію змін фізичних та хімічних параметрів.
Використовується набір відомих речовин, чия структура та/(або склад приблизно однакові або схожі до одного з гомеопатичних лікарських препаратів, що визначається, або до однієї з потенційованих форм речовини, так само, як і структура та/або склад антитіл до цих відомих речовин. Ідентифікація гомеопатичного лікарського засобу або потенційованої форми речовини повинна базуватися на відомій речовині, чия реакція з відповідним антитілом, коли гомеопатичний лікарський засіб або потенційована форма речовини вводяться у реакційне середовище, супроводжується змінами, що реєструються з використанням |імунохімічних методів аналізу на основі реакції антиген-антитіло (КО 2195648 С2). (00131 Однак відомі з рівня техніки способи не забезпечують надійного та відтворюваного якісного та кількісного визначення ідентичності та ефективності лікарських засобів, пов'язаних з активованою потенційованою формою. Їх включають активовані лікарські засоби, приготовані згідно з гомеопатичною технологією як описано вище.
СУТЬ ВИНАХОДУ
(00141 Спосіб визначення активності активованої потенційованої форми речовини, де вказаний спосіб включає: забезпечення активованої потенційованої форми речовини, забезпечення відсутності молекулярної форми речовини у вказаній активованій потенційованій бо формі, забезпечення молекулярної форми речовини, вимірювання щонайменше одного фізичного, хімічного або біологічного параметра (А) вказаної молекулярної форми вказаної речовини з використанням відповідного аналітичного методу, оброблення вказаної молекулярної форми вказаної речовини вказаною активованою потенційованою формою вказаної речовини, та визначення, щонайменше одного фізичного, хімічного або біологічного параметра (Ат) вказаної обробленої молекулярної форми зазначеної речовини з використанням зазначеного аналітичного методу, де вказана активність вказаної активованої потенційованої форми зазначеної речовини є ступенем відмінності між А і Ат. (00151 Описаний вище спосіб також додатково включає вираження вказаної активності вказаної активованої потенційованої форми зазначеної речовини у відносних одиницях (Х) відповідно до формули Х-С(А-АМ)/А. (0016) Описаний вище спосіб також включає і) оброблення молекулярної форми іншої речовини зазначеною активованою потенційованою формою першої речовини, (Її) вимірювання зазначеного щонайменше одного фізичного, хімічного або біологічного параметра (В) вказаної молекулярної форми вказаної іншої речовини вказаним аналітичним методом, ії) вимірювання зазначеного щонайменше одного фізичного, хімічного або біологічного параметра (Вм) вказаної обробленої молекулярної форми вказаної іншої речовини з використанням зазначеного аналітичного методу для визначення специфічності зазначеного методу, де вказаний метод вважається специфічним, коли, щонайменше, один фізичний, хімічний або біологічний параметр зміниться статистично значущим чином для А-Ам і не зміниться статистично значущим чином для В-Вм. (00171 Спосіб, описаний вище, в якому зазначений аналітичний метод є високоефективною рідинною хроматографією. (00181 Описаний вище спосіб, в якому зазначений аналітичний метод є методом імуноферментного аналізу. (00191 Описаний вище спосіб, в якому зазначений аналітичний метод є методом ядерного магнітного резонансу. (00201 Описаний вище спосіб, в якому зазначена стадія забезпечення відсутності молекулярної форми речовини включає видалення молекулярної форми зазначеної речовини. (00211 Описаний вище спосіб, в якому вказана речовина являє собою антитіло.
Зо (00221 Описаний вище спосіб, в якому вказане антитіло являє собою поліклональне антитіло. (00231 Описаний вище спосіб, в якому вказана речовина являє собою малу органічну молекулу. (00241 Описаний вище спосіб, в якому вказана активована потенційована форма являє собою рідину. (00251 Описаний вище спосіб, де вказана активована потенційована форма імпрегнована у твердий носій.
КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР
(0026) На фігурі 1 показано перекриття спектрів ЯМР антитіла до ІЕМ-гамма «т АС та антитіла до ІЕМ-гамма хт вода очищена.
ДОКЛАДНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
(00271 Далі докладно описано винахід у контексті доданої формули. Основні визначення, які стосуються формули було наведено вище, а також далі наведено додаткові визначення. (00281 Термін"антитіло" як його використано у даній заявці означає імуноглобулін, який специфічно зв'язується 3, і таким чином, визначається як комплементарний до певної просторової та полярної організації іншої молекули. Антитіло як його зазначено у формулі винаходу, може включати цілий імуноглобулін або його фрагмент, може бути природним, поліклональним або моноклональним антитілом, та може включати різні класи та ізотипи, такі як
ІЗ9А, 190, І9ЗЕ, Іде, Ідсга, Ідсгь та ІдсЗ3, д9М тощо. Його фрагменти можуть включати Еаб, Ем і
Каб)», Раб" та подібні. Форма однини "антитіло" включає форму множини "антитіла". (00291 Термін "активована потенційована форма" або "потенційована форма" використовується для позначення продукту гомеопатичного потенціювання будь-якого вихідного розчину, що містить молекулярну форму речовини, наприклад, антитіло. Приклади гомеопатичного потенціювання антитіл описано в патентах 05 7572441 та 5 7582294, які включені у даний опис у повному обсязі шляхом посилання та для зазначених цілей. Антитіло знаходиться у "активованій потенційованій" або "потенційованій" формі за умови присутності наступних трьох факторів. По-перше, "активована потенційована" форма антитіла є продуктом загальноприйнятого у гомеопатичній галузі способу приготування. По-друге, "активована бо потенційована" форма антитіла повинна мати біологічну активність, визначену загальноприйнятими в сучасній фармакології методами. По-третє, біологічна активність, яку проявляє "активована потенційована" форма антитіла не може бути пояснена присутністю молекулярної форми антитіла в кінцевому продукті гомеопатичного процесу.
І0ОЗОЇ Існувала велика кількість суперечок щодо гомеопатичного лікування людини.
Хоча представлений винахід базується на загальноприйнятих гомеопатичних способах отримання "активованої потенційованої" форми речовини, тобто молекулярної форми, він не повністю покладається на гомеопатію людей для доказу активності. Зокрема, для молекулярних форм, що складаються з антитіл, заявником цього винаходу було несподівано виявлено і наочно продемонстровано на прийнятних фармакологічних моделях, що отриманий в кінцевому результаті розчинник, в результаті послідовного багаторазового розведення вихідної молекулярної форми антитіла має визначену активність, не пов'язану з наявністю залишків молекулярної форми антитіла в цільовому розведенні. Також, заявлена "активована потенційована" форма антитіла включає тільки ті розчини або тверді форми препаратів, біологічна активність яких не може бути пояснена присутністю молекулярної форми антитіла, що залишилася від початкового, вихідного розчину. Іншими словами, в той час як передбачається, що "активована потенційована" форма антитіла може містити залишки початкової молекулярної форми антитіла, фахівець у даній галузі не міг з будь-якою ступінню вірогідності пов'язувати біологічну активність, що ним спостерігалася на прийнятих фармакологічних моделях з залишковою молекулярною формою антитіла, так як після послідовного розведення залишаються надзвичайно низькі концентрації молекулярної форми антитіла. Хоча даний винахід не обмежується будь-якою конкретною теорією, біологічна активність "активованої потенційованої" форми антитіл даного винаходу не пов'язана з початковою молекулярною формою антитіл. Переважною є "активована потенційована" форма антитіла у рідкому або твердому носієві, в якому концентрація молекулярної форми антитіла знаходиться нижче, ніж межа виявлення прийнятними аналітичними методами, такими як капілярний електрофорез та високоефективна рідинна хроматографія. Особливо бажаною є "активована потенційована" форма антитіла в рідкій або твердій формі, в якій концентрація молекулярної форми антитіла є нижчою, ніж число Авогадро, тобто 1 молекула молекулярної форми в 6,022 х 1023 молекул носія.
Зо (00311 Фармацевтична композиція згідно з даним винаходом розширює арсенал препаратів, доступних для лікування профілактики інфекційних захворювань, у тому числі бактеріальних інфекцій та гострих і хронічних вірусних інфекцій. (00321 Комбінована фармацевтична композиція згідно з цим аспектом винаходу, може бути в рідкій формі або у твердій формі. Переважний спосіб отримання активованого потенційованого компонента комбінованого препарату згідно з цим винаходом полягає у використанні суміші трьох водно-спиртових розведень первинного матричного розчину антитіл розбавлених 10012, 10099 ї 10059 разів, відповідно, що є еквівалентним сотенним гомеопатичним розведенням С12, С30, та С50 або розбавлених 10072, 10030 ї 100200 разів, відповідно, що є еквівалентним сотенним гомеопатичним розведенням С12, С30 ії Сб200. Для приготування твердої лікарської форми, твердий носій оброблюють бажаним розведенням, отриманим за допомогою гомеопатичного процесу. Щоб отримати тверду одиничну дозовану форму комбінації згідно з винаходом, масу носія просякують кожним з розведень. Обидва порядки імпрегнації придатні для приготування потрібної комбінованої лікарської форми.
ІООЗЗІ У тому випадку, коли активована потенційована форма, яка включена у фармацевтичну композицію, отримана з вихідної молекулярної форми антитіла, вона виготовлена способом, прийнятним у гомеопатичній галузі. Вихідні антитіла можуть бути моноклональними або поліклональними антитілами, приготованими згідно з відомими способами, наприклад, як описано в Іттипоїесппідцев5, 5. Егітеї, М., "Медіїзупа", 1987, р. 9-33; "Нит. Апііїродіеєз.Мопосіопа! апа гесотбріпапі апіїродієз, 30 увєагз апйег" Бу Гау Е., зодоуеєг В.- 2005 - МоІ.14.-- М 1-2.Р.33-55, обидва включені через посилання. (0034) Моноклональні антитіла можуть бути отримані, наприклад, за допомогою гібридомної технології. Початкова стадія процесу включає імунізацію на основі підходів, вже розроблених у процесі приготування поліклональних антисироваток. Подальші етапи роботи включають виробництво гібридних клітин, що генерують клони антитіл з однаковою специфічністю. Їх роздільне виділення здійснюється за допомогою тих самих методів, що і у випадку приготування поліклональних антисироваток.
І0ООЗ5І Поліклональні антитіла можуть бути отримані за допомогою активної імунізації тварин Для цього, наприклад, підходящі тварини (наприклад кролі) отримують серію ін'єкцій відповідним антигеном (цитокін та рецептор). Імунна система тварин генерує відповідні антитіла, які збираються у тварин відомим способом. Ця процедура дозволяє приготувати сироватку, збагачену моноспецифічними антитілами. (00361 При бажанні, сироватка, що містить антитіла, може бути очищена, наприклад, за допомогою афінної хроматографії, фракціонування сольовим осадженням або іонообмінної хроматографії. Отримана в результаті очищення, збагачена антитілами сироватка, може бути використана як вихідний матеріал для приготування активованої потенційованої форми антитіл.
Переважна концентрація отриманого вихідного розчину антитіл у розчиннику, переважно воді або водно-етанольній суміші, становить від приблизно 0,5 до приблизно 5,0 мг/мл. (00371 Приклад процесу приготування молекулярної форми, що складається з поліклональних антитіл до СО4 рецептора може бути описаний наступним чином. За 7-9 днів до відбору проб крові, для підвищення рівня поліклональних антитіл в потоці крові, кроликам роблять 1-3 внутрішньовенні ін'єкції бажаним антигеном. Після імунізації відбирають проби крові для перевірки рівня антитіл. Як правило, максимальний рівень імунної реакції розчинного антигену досягається в межах 40 до 60 днів після першої ін'єкції антигена. Після завершення першого циклу імунізації кролики мають 3З0-денний реабілітаційний період, після чого знову виконується імунізація ще 1-3 внутрішньовенними ін'єкціями. Щоб отримати антисироватку, яка містить бажані антитіла, кров імунізованих кроликів збирають і поміщують в 50 мл центрифужну пробірку. Згустки продукту, утвореного з боків трубки видаляються дерев'яним шпателем і в згусток в центрі пробірки поміщається стрижень. Далі кров поміщували у холодильник на одну ніч при температурі близько 40"С. На наступний день, згусток на шпателі видаляють і рідину, що залишилася центрифугують протягом 10 хв. при 13 000 обертів на хвилину. Цільовою сироваткою є надосадова рідина. Отримана антисироватка, як правило, жовтого кольору. До антисироватки додавали 2095 МамМ»з (вагова концентрація) до кінцевої концентрації 0,02905 і зберігали у замороженому стані при температурі від -207"С або без МаМмз при температурі -707С до використання. Для відділення цільових антитіл до гамма-інтерферону з антисироватки є придатною наступна послідовність твердофазної абсороції: - 10 мл антисироватки кроликів розводили в два рази в 0,15 М Масі, після чого додавали 6.26г Маг2505, перемішували та інкубували протягом 12-16 годин при 4"С. Осад видаляють центрифугуванням, розводять в 10 мл фосфатного буфера і здійснюють діаліз проти такого ж
Зо буфера протягом ночі при кімнатній температурі. Після видалення осаду розчин наносили на колонку ДЕАЕ-целюлози, врівноважену фосфатним буфером. Фракцію антитіл визначали шляхом вимірювання оптичної густини елюату при 280 нм. - Виділені неочищені антитіла очищали за допомогою методу афінної хроматографії шляхом приєднання отриманих антитіл до антигену СО4, розташованого на нерозчинній матриці хроматографічгого середовища, з подальшим елююванням концентрованими водно- сольовими розчинами. - Отриманий буферний розчин використовується як вихідний розчин для процесу гомеопатичного розведення, який використовується для одержання активованої потенційованої форми антитіл. Переважна концентрація вихідного матричного розчину антиген-очищених поликлональних кролячих антитіл до рецептора СО4 становить від 0,5 до 5,0 мг/мл, переважно, від 2,0 до 3,0 мг/мл. (00381 Переважно, фармацевтичну композицію у твердій дозованій лікарській формі отримують з гранул фармацевтично прийнятного носія, який був попередньо просякнутий водними або водно-спиртовими розведеннями активованої потенційованої форми антитіл рецептора СО4. Тверда лікарська форма може бути у будь-якій формі, відомій у фармацевтичній галузі, у тому числі у вигляді таблеток, капсул, пастилок та ін. Як неактивні фармацевтичні інгредієнти можна використовувати глюкозу, сахарозу, мальтозу, крохмаль, ізомальтозу, ізомальт та інші моно-, оліго- та полісахариди, що придатні для використання у виробництві фармацевтичних препаратів, а також технологічні суміші згаданих вище неактивних фармацевтичних інгредієнтів з іншими фармацевтично прийнятними наповнювачами, наприклад, ізомальтом, кросповідоном, цикламатом натрію, сахарином натрію, лимонною кислотою безводною і т.п.), включаючи змащуючі речовини, дезінтегранти, звязуючі речовини та барвники. Переважними носіями є лактоза та ізомальт. Фармацевтична лікарська форма може додатково включати стандартні фармацевтичні наповнювачі, наприклад, мікрокристалічну целюлозу, стеарат магнію та лимонну кислоту. (00391 Для приготування твердої оральної форми, 100-300 мкм гранули лактози імпрегнують водними або водно-спиртовими розчинами активованої потенційованої форми антитіл до рецептора СО4 у співвідношенні 1 кг розчину антитіл до 5 або 10 кг лактози (1:5 до 1:10). Щоб здійснити просочення, гранули лактози піддають насичувальному зрошенню в бо псевдозрідженому шарі в установці киплячого шару (наприклад "Нишіп Ріоцарб" виробництва компанії Ніишіп СЗІтрнН) з наступним сушінням за допомогою нагрітого потоку повітря при температурі нижче 40 "С Приблизна кількість висушених гранул (від 10 до 34 вагових частин), насичених активованою потенційованою формою антитіл поміщають в змішувач і змішують з 25-45 ваговими частинами "ненасиченої" чистої лактози (використовується в цілях скорочення витрат, спрощення і прискорення технологічного процесу без зниження ефективності лікування), разом з від 0,1 до 1 вагових частин стеарату магнію, і від З до 10 вагових частин мікрокристалічної целюлози. Отриману масу для виготовлення пігулки рівномірно змішують і надають форму пігулок сухим пресуванням (наприклад, в пресі Ког5сп - Хі 400) для формування круглих пігулок масою 150-500 мг, переважно 300 мг. Після таблетування отримвують пігулки 300 мг, які насичені водно-спиртовим розчином (3,0-6,0 мг/пігулку) активованої потенційованої форми антитіл до рецептора СО4 у вигляді суміші сотенних гомеопатичних розведень С12, С30 ї С50, або у вигляді суміші сотенних гомеопатичних розведень С12, СЗО0 ї С200. (0040) З метою лікування переважним є вживання від одного до чотирьох разів на день комбінації згідно з винаходом, переважно двічі на день, кожне вживання включає одне або два одиничних дозування лікарської форми комбінації. (00411 Технічний результат, що досягається згідно з заявленим винаходом, полягає у підвищенні надійності і відтворюваності способів визначення лікарських засобів, виготовлених згідно з гомеопатичними методами, тобто лікарських засобів, які не містять молекулярної форми практично в будь-якій концентрації, що піддається визначенню. Крім того, заявлений винахід направлено на підвищення надійності та відтворюваності способів визначення фармакологічної модифікуючої активності, пов'язаної з лікарським засобом, тобто активованої потенційованої форми. Ці способи виконуються іп міїго, тобто поза організмом. (00421 Способи досягнення технічного результату даного винаходу, в кінцевому рахунку спрямовані на визначення ступеня модифікуючої активності, пов'язаної з активованою потенційованою формою, яка була одержана у процесі активації. Обробка вихідної речовини, що містить молекулярну форму, для забезпечення лікарського засобу, приготованого гомеопатичними методами, тобто активованої потенційованої форми, включає кілька послідовних розведень носієм, таким чином зменшуючи концентрацію вихідної речовини.
Зо (0043) В контексті біфатичних медичних засобів, активність активованої потенційованої форми проявляється в її здатності змінювати або впливати на фізичні, хімічні та/або біологічні властивості терапевтичної дози іншої речовини. Отже, заявлений винахід включає визначення змін фізичних параметрів терапевтичної дози з використанням аналітичних методів після додавання до неї активованої потенційованої форми. Такі аналітичні методи здатні визначати наявність або відсутність активованої потенційованої форми у терапевтичній дозі. Аналітичні методи вимірюють один або більше фізичних параметри терапевтичної дози до та після змішування з активованою потенційованою формою. Також за допомогою аналітичних методів може бути визначена ступінь активності терапевтичної дози до та після змішування з активованою потенційованою формою. Зміни характерного параметру може бути представлено у відносних одиницях. (0044) Вимірювання характерного параметра може залежати від наявності молекулярної форми в активованій потенційованій формі у кількостях, що піддаються визначенню. Якщо молекули молекулярної форми в активованій потенційованій формі присутні на рівнях, що піддаються виявленню, в такому випадку ці молекули повинні бути видалені з активованої потенційованої форми до виготовлення суміші активованої потенційованої форми і терапевтичної дози. Відсутність молекулярної форми у зразку, у контексті представленого об'єкту винаходу, є синонімом неможливості виявлення зазначеної молекулярної форми. Одним із способів видалення/рендерингу молекулярної форми, присутньої на рівні, що піддається виявленню, з активованої потенційованої форми, є подальше розведення, наприклад, гомеопатичне сотенне розведення. Іншим засобом є використання молекулярного сита.
Молекулярне сито є матеріалом з дуже маленькими отворами точного і однакового розміру. Ці отвори досить малі, щоб блокувати великі молекули, дозволяючи при цьому малим молекулам проходити крізь них. Приклади молекулярних сит включають активоване вугілля та силікагель.
Подібно до молекулярного сита, будь-які процеси та/або пристрої, що мають властивість зупиняти або навіть уповільнювати молекулярну форму, дозволяючи проходження носія, можуть бути використані для видалення молекулярної форми або приведення її до стану неможливості виявлення. Таким чином, може бути використано такий спосіб як рідинна хроматографія високого тиску (РХВТ"), в якій нерухома фаза РХВТ апарату зупиняє або уповільнює хід молекулярної форми, а рухома фаза, що містить активовану потенційовану бо форму, проходить через апарат відносно безперешкодно. Залежно від параметрів, таких як (с;
афінність молекулярної форми до твердої фази, молекулярна форма буде повністю відсутня на виході РХВТ пристрою протягом, щонайменше деякого відомого періоду часу. (0045) Крім того, якщо молекули вихідної речовини присутні в модифікованому носієві, вони можуть бути видалені з використанням загальновідомих прийнятних способів.
Зокрема, молекули білка, взятого як вихідна речовина, може бути видалено, наприклад, шляхом нагрівання модифікованого носія до досягнення денатурації білка з наступним фільтруванням.
Як альтернатива, може бути використано спосіб знесолювання де білок осаджують високими концентраціями нейтральних солей лужних і лужноземельних металів з наступною фільтрацією.
Інші можливі методи включають в себе електродіаліз, деіонізацію з використанням іонообмінних смол; зворотний осмос; та ультрафільтрування (молекулярна фільтрація) з або без попередньої фільтрації через великі пори. Як інші знайдені в літературі приклади, можна навести В.М.
Зіеумага, Те ргодисіп ої підп-ринйу улаїег іп Ше сіїпіса! Іарогайогу, І абогаюгу Медадісіпе, мої.
З1(11), рр. 605- 611 (2000); У. Стітт, О. Веззагаром, В. Запаегзоп, Немієм/ ої єІесіго-азвзівієй теїнод ог маїег ригітісайоп, Оезаїїпайоп, мої. 115 (3), рр. 285- 294 (1998); І.А. Когпаспеем, вї аї.,
ММаїег ригіїсайоп ої огдапіс іптивіоп5 іп а гемегзе Пом/ їШгайоп сотривійоп геасіог, Іпіегпайопаї|! доитаї ої Неаї апа Ма:з5 Тгапзвіег, Мої. 54, рр. 932-937 (1998); І арсопсо Согрогаїййоп, А Спціде
ІГарогаїогу УМагег Ринітісайоп, Ап Іпаивігу зЗегмісе Рибіїсайоп. пер //біотгезеагспопіїпе.сот/дос.тус/А-Сіціде-ю-І арогаїюгу-У/агегРитгіїісайоп. (0046) Заявлений спосіб може бути реалізований з використанням різних способів якісного та кількісного визначення, таким чином, забезпечуючи високу чутливість і відтворюваність тестування на наявність та активність активованої потенційованої форми.
Кількісні та якісні методи включають мас-спектрометрію, таку як хромато-мас-спектрометрія, газорідинну хроматографію (ГРХ") та високоефективну рідинну хроматографію ("ВЕРХ"); ЯМР- спектроскопію, імуноферментний аналіз ("ІФА"). (00471 Хроматографія базується на розділенні компонентів суміші, обумовленому відмінністю їх рівномірного розподілення між двома фазами, що не змішуються. Одна з фаз в хроматографії є нерухомою (сорбент), у той час як інша - мобільна (елюент). Відмінними рисами
ВЕРХ є високий тиск (до 400 бар) і суспензія розчинника (як правило, 3-5 мкм; в даний час вона становить 1,8 мкм) . Якісне визначення за допомогою ВЕРХ-аналізу базується на визначенні
Зо часу утримування піку хроматографії. Кількісне визначення грунтується на оцінці площі піка. (0048) Спектроскопія ядерного магнітного резонансу ("ЯМР-спектроскопія") є методом дослідження, що використовує магнітні властивості деяких атомних ядер. ЯМР визначає фізичні та хімічні властивості атомів або молекул, в яких вони містяться. Цей метод базується на явищі ядерного магнітного резонансу і може надати докладну інформацію про структуру, динаміку, стан реакції і хімічного середовища молекул. Внутрішньомолекулярне магнітне поле навколо атома в молекулі змінює резонансну частоту, тим самим даючи доступ до деталей електронної структури молекули. Програмне забезпечення дозволяє аналізувати інтенсивності сигналу піків, які в умовах оптимальної релаксації, корелюють з кількістю протонів цього типу. Аналіз інтенсивності сигналу здійснюється інтегруванням - математичним процесом, обчислення площі під кривою, розмір залежить від його площі. (0049) Імуноферментний аналіз ("ІФА") є біохімічним аналізом, який вимірює наявність або концентрацію макромолекули у розчині з використанням антитіла або імуноглобуліну. Макромолекулу, яку виявляють імунологічним способом часто називають "аналітом". В ідеальних умовах, антитіло буде зв'язуватися з аналітом і лище з аналітом. Після зв'язування з аналітом, антитіло видає сигнал, який вказує на присутність однієї молекули аналіту. Такий сигнал може бути безпосереднім спонтанним вивільненням фотона світла при зв'язуванні або вивільненням фотона світла антитілом, зв'язаним з аналітом при настанні якогось "вибіркового" сигналу. Так само, зв'язані з аналітом антитіла можуть реагувати інакше, ніж незв'язані антитіла на більш пізньому етапі, що дозволяє МЕА, наприклад, для видалення незв'язаних антитіл і оцінки кількості зв'язаних антитіл, що залишилися. Крім того, антитіла можуть бути зв'язані з п'єзоелектричним кристалом, який піддається пружній деформації при застосуванні до нього електричного струму. Змінний електричний струм (3С) виробляє у кристалі стоячу хвилю характерної частоти. Частота надзвичайно сильно залежить від пружних властивостей кристала, чиї властивості залежать від того, що приєднано до кристалу.
Зв'язування цільового аналіту з антитілом змінюватиме резонансну частоту, що дає сигнал зв'язування. Для реалізації заявленого способу придатними для застосування є біологічні та інші методи. Дивись, наприклад, Золотов Ю. А. (ред.) Основьі аналитической химии (в 2-х книгах), Учебник для вузов. - 3-е изд., (2004); Васильев В.П., Аналитическая химия, (1989); Отто
М., Современньєе методь аналитической химии, (2003).
(00501 Застосування комбінації аналітичних методів для виявлення молекул вихідної речовини у вказаному активованому потенційованому носієві та вимірювання аналітичними методами щонайменше одного з характерних параметрів вихідної субстанції до або після її взаємодії з вказаним активованим потенційованим носієм, ми демонструємо (обгрунтовуємо) наступне: по-перше, асоційована з носієм модифікуюча активність не пояснюється присутністю молекул вихідної речовини, та фізичні, хімічні та/або біологічні властивості зазначеного носія відрізняються від фізичних, хімічних та/або біологічних властивостей вихідної субстанції; по- друге, активований потенційований носій, отриманий за допомогою вихідної речовини, де активована потенційована форма забезпечується самим процесом, що використовується під час технологічної обробки вихідної речовини та представлений багаторазовим послідовним зниженням концентрації останньої з використанням вказаного носія. Нарешті, на основі отриманих іп міго даних, продемонстровано справжність та ідентичність лікарського продукту, який отримують з використанням зазначеного активованого потенційованого носія. Тобто, починаючи з молекулярної форми у концентрації, яку готують активовану потенційовану форму шляхом здійснення множини послідовних знижень концентрації молекулярної форми за допомогою носія. Крім того, заявлені аналітичні дослідження щонайменше одного характерного параметра терапевтичної форми до її взаємодії з активованою потенційованою формою і знову після такої взаємодії, служать для визначення ступеня модифікуючої активності, пов'язаної з активованою потенційованою формою у відносних безрозмірних одиницях активності (активність вивільнення). (00511 Ступінь модифікуючої активності, повязаної з активованою потенційованою формою, визначається на основі кількісних змін характерного параметра, вираженого у відносних одиницях активності (активність вивільнення), за формулою (1):
ХАС|А-Ам|/А (1)
Х являє собою число одиниць активності (ОА);
С - безрозмірний коефіцієнт пропорційності, який залежить від аналітичних методів, що використовуються для вимірювання характерного параметра, який відображає початкову фізичну, хімічну та/або біологічну властивості вихідної речовини та від значення характерного параметра. Зокрема, наприклад, С-10К, де К є цілим числом послідовності 1, 2, З і т.д.;
Зо А - це значення характерного параметра вихідної речовини до її взаємодії з вказаною активованою потенційованою формою (технологічно оброблений носій);
Ам є значенням того ж характерного параметра вихідної речовини після її взаємодії з вказаною активованою потенційованою формою (технологічно оброблений носій). (00521 Заявлений спосіб може бути реалізований з використанням різних методів якісного та кількісного визначення, таким чином, забезпечуючи високу чутливість і відтворюваність тестування наднизьких концентрацій речовин, таких, як спектрометрія, зокрема мас-спектрометрія, хромато-мас-спектрометрія (газорідинна хроматографія (ГРХ)), (і високоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ) на основі розділення компонентів суміші, спричиненого різницею їх рівномірного розподілу між двома фазами, що не мішуються. Одна з фаз в хроматографії є нерухомою (сорбент), у той час як інша - мобільна (елюент). Відмінними рисами ВЕРХ є високий тиск (до 400 бар) і суспензія сорбенту (як правило, 3-5 мкм; в даний час вона становить 1,8 мкм). Якісне визначення за допомогою ВЕРХ-аналізу базується на визначенні часу утримування піку хроматографії. Кількісне визначення грунтується на оцінці площі піка.
І0ОО53ЗІ Наступним методом, що використовується в заявленому способі є спектроскопія ядерного магнітного резонансу (ЯМР-спектроскопія"), що використовує магнітні властивості деяких атомних ядер. ЯМР визначає фізичні та хімічні властивості атомів або молекул, в яких вони містяться. Він базується на явищі резонансного поглинання і випромінювання електромагнітної енергії речовинами з нульовим спіном ядер при поміщенні в зовнішнє магнітне поле з частотою м (так звана частота ЯМР), яке індукується переорієнтацією магнітних ядерних моментів, де так званий хімічний зсув є характерним параметром. Крім того, зазначені методи включають в себе імуноферментний аналіз (ІФА), використання п'єзоелектричного імуносенсора, аналітичний сигнал якого, представлений різницею в резонансній частоті п'єзоелектричного резонатора (А ї) в результаті збільшення або зменшення ваги шару, покритого рецепторами, що викликається утворенням та руйнуванням імунних комплексів на його поверхні. Для реалізації заявленого способу придатними для застосування є біологічні та інші методи. (наприклад, див. Золотов Ю. А. (ред.), Основьї аналитической химий (в 2-х книгах), Учебник для вузов, 3-е изд., исправленное и дополненное: изд. Вьісшая школа (2004); Васильев В.П., Аналитическая химия, (1989); Отто М., Современнье методь! бо аналитической химии, (2003).
(00541 Крім того, якщо молекули вихідної речовини присутні в модифікованому носієві, вони можуть бути видалені з використанням загальновідомих прийнятних способів.
Зокрема, молекули білка, взятого як вихідна речовина, може бути видалено, наприклад, шляхом нагрівання модифікованого носія до досягнення денатурації білка з наступним фільтруванням.
Як альтернатива, може бути використано спосіб знесолювання де білок осаджують високими концентраціями нейтральних солей лужних і лужноземельних металів з наступною фільтрацією.
Інші можливі методи включають в себе електродіаліз, деіонізацію з використанням іонообмінних смол; зворотний осмос; та ультрафільтрування (молекулярна фільтрація) з або без попередньої фільтрації через великі пори. Як інші знайдені в літературі приклади, можна навести В.М.
Зіемага, Те ргодисійп ої підн-рипйу маїег іп їйе сіїпіса! Іабогаюгу /Л арогаюгу Меадісіпе. - 2000. -
М. 31(11) - Р. 605- 611; 9. Стітт, 0. Веззагаром, В. Запдегтзоп. Немієм ої еІесіго-азвівїєд теїйодв
Тог маїег ригітісайоп //Оеєзаїіпаййоп. - 1998. - М. 115 (3) - Р. 285-294; І.А. Когпаснеєм, еї аї., УМаїег ригіїїсайоп ої огдапіс іпсіивіоп5 іп а гемегзе Пом/ Пгайоп сотривійоп геасіог /Лпіегтайопа! Чуоитаї ої Неаї апа Мав5 Тгапвіег - 1998. 54 - Р. 932-937; І арсопсо Согрогаїйоп, А диїде ю Іабогаюгу маїег ригіїсайоп, Ап Іпдивігу 5егуісе Рибіїсайоп. пНр:/біогезеагспопііпе.сот/дос.тус/А-Сіціде-їо-
Габогаїгу-У/аїегРигійсацноп (вставить правильную ссьлку).
І0О55)І Застосування комбінації аналітичних методів для виявлення молекул вихідної речовини у вказаному активованому потенційованому носієві та вимірювання аналітичними методами щонайменше одного з характерних параметрів лікарської субстанції до або після її взаємодії з вказаним активованим потенційованим носієм, ми демонструємо (обгрунтовуємо) наступне: по-перше, асоційована з носієм модифікуюча активність не пояснюється присутністю молекул вихідної речовини, та фізико-хімічних та/або біологічні властивості зазначеного носія відрізняються від фізико-хімічних та/або біологічних властивостей вихідної субстанції; по-друге, активований потенційований носій, отриманий за допомогою вихідної речовини, де активована потенційована форма досягається самим процесом, що використовується під час технологічної обробки вихідної речовини, тобто, багаторазовим послідовним зниженням концентрації останньої з використанням вказаного носія. Нарешті, на основі отриманих іп міго даних, продемонстровано справжність та ідентичність лікарського продукту, який отримують з використанням зазначеного активованого потенційованого носія.
Зо (0О56)1 Крім того, заявлені аналітичні дослідження щонайменше одного характерного параметра вихідної речовини до та після її взаємодії з активованим потенційованим носієм, служать для визначення ступеня модифікуючої активності, пов'язаної з носієм у відносних безрозмірних одиницях активності (активність вивільнення). (00571 Для визначення рівня модифікуючої активності пов'язаної з носієм були виконані наступні послідовні процедури: а. підготовка носія з модифікуючою активністю потенціювання в ході технологічної обробки (очищення) вихідної речовини у декілька етапів послідовного зниження концентрації з використанням зазначеного носія, де останній не містить молекулярної форми зазначеної вихідної речовини. б. специфічний аналіз на визначення присутні речовини в розчині зі стадії а), який включає й оброблення молекулярної форми вихідної субстанції носієм, зазначеним на стадії а). ії. переважно, оброблення молекулярної форми іншої речовини та/або розчинника носієм, зазначеним в стадії а.) ії. аналітичне визначення принаймні одного фізико-хімічного та/або біологічного характеристичного параметра зазначеної молекулярної форми вихідної субстанції (А) та комбінації зазначеної в абзаці б) ї) (Ам), де зазначений носій, що специфічно модифікує ефект- ємність для модифікування фізико-хімічних та/або біологічних властивостей вихідної субстанції вважається специфічним до субстанції якщо зміна зазначеного характеристичного параметру при здійсненні зазначеного в абзаці б) ї) є статистично значущим (та не є статистично значущим при здійсненні зазначеного в абзаці б) ії)) с. визначення модифікуючої активності пов'язаної з носієм у відносних одиницях активності за рівнянням (1):
ХАС|А-Ам|/А (1)
Х, С, А та Ам - як визначено раніше, де С переважно від 100 до 1000.
ПРИКЛАДИ
(0058) Даний винахід буде проілюстровано наступними прикладами, які будь-яким чином не обмежують обсяг винаходу. (00591 Скорочення, використовувані в Прикладах: (00601 Ар, Ат - антитіла 60 (00611 ІФА - ферментний імуносорбентний аналіз
(00621 Ор, ОГ - оптична густина (00631 ІЕМ-гамма - інтерферон-гамма (0064) НРГІС, ВЕРХ - високоефективна рідинна хроматографія. (00651 АС, АН - активована потенційована форма (0066) РВ5, ФБР - Фосфатно-буферний розчин (00671 АРВ5З, АФБР - Фосфатно-буферний розчин активований за гомеопатичним методом (0068) ІДС; - імуноглобулін б, включаючи антитіла до інтерферону гамма ("ЕМ- гамма") (00691 А-вода - вода активована за гомеопатичним методом (00701 ОМЛ/5, УФ/Вид - спектроскопія в ультрафіолетовій та видимій області
Приклад 1 (00711 Мета Прикладу 1 - визначення ступеня модифікуючої активності активованої потенційованої форми кролячих антитіл ("АБ") до ІФН-гамма людини. Починаючи з матричного розчину кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, активована потенційована форма кролячих антитіл до ІРМ-гамма людини була приготована багатьма послідовними розведеннями понижуючи концентрацію вихідної речовини, що супроводжувалося багатьма послідовними струшуваннями. Розчинник, тобто, носій є водно-спиртовим розчином. Молекулярна форма була розведена у 10012, 10030 та 10050 частинах носія, тобто, сотенних гомеопатичних розведеннях С12, С30, С50. Для визначення змін фізичних, хімічних та/або біологічних властивостей вихідної речовини, а саме, кролячих антитіл до ІРМ-гамма людини, використовувалися ВЕРХ тоді як об'єм речовини використовувався в якості характерного параметру. (00721 Кількісне визначення речовини грунтується на оцінці площі піка при використанні ВЕРХ. Суміш Ідс «ж АН було взято в якості тестового зразка. В якості контрольних зразків були взяті наступні розчини: Ідс я А вода, дос «ж вода та Ід ж АФБР. (00731 Досліджувані зразки були приготовані змішуванням Ідс (50 тао/ті) та АН (або
А вода або АФБР або вода) у співвідношенні 1:2 (о0об./06.). Отримані розчини були профільтровані за допомогою ацетатних мембранних фільтрів, розмір пори - 0,45 нт.
Зо (00741 Дослідження проводили розділенням за допомогою ВЕРХ у градієнтному режимі. Аніон-обмінну колонку наносили як нерухому фазу; суміш 2 фаз (фаза 1 - ацетонітрил, фаза 2 - розчин гідрофосфату калію і розчин хлориду калію) використовували як рухому фазу.
Для цілей виявлення був застосований ОМ-Мів-детектор; довжина хвилі - 280 нм. (00751 Калібрування і встановлення нуля вихідної відмітки ШМ-Мів-детектора проводилися перед кожним аналізом і після нього. (00761 Підготовлені суміші переносили у ємності і вводили в хроматографічну систему за допомогою автоматичної піпетки. Дослідження кожного зразка тривало близько 23 хвилин. (00771 Після завершення аналізу урівноваження хроматографічної колони проводили при постійній швидкості потоку в умовах рухомої фази градієнта, подібно як на початку аналізу. (00781 Сигнал, що випромінюється тестовими зразками реєструється у вигляді піків хроматограми, які, як передбачається, відповідають легким і важким ланцюгам дос. Було обчислено площу першого максимуму спектрофотометричного піку (Мах -1 відповідає імуноглобуліновим важким ланцюгам) та другого максимуму (Мах -2 відповідає імуноглобуліновим легким ланцюгам). Результати цього аналізу представлені в таблиці 1.
(00791 Таблиця 1. Площа максимуму хроматографічного піку
Дослідний зразок Площа максимуму Модифікуюча хроматографічного піку активність речовини в
ОА при С-100
ВИМИ ПОН НБН НИНІ НИ
(00801 Рівень модифікуючої активності розраховується за рівнянням (1): (Х-С |А-Ам|/А) де С-100. Рівняння (1) яке застосовується до зразку до ж АН та до зразку до «ж вода, дає в результаті: (Мах-1) А-30270,2; Ам-:17207,9; Х-:43,2 ОДА; (Мах-2) А-5577 4; Ам-45860,6; Х-722,3 ОА (00811 Експерименти показують, що АН до ІЕМ-гамма зменшує площу піку (до першого максимуму (Мах-1 відповідає важким ланцюгам імуноглобуліну) і збільшує площу піку дб другого максимуму (Мах-2 відповідає легсим ланцюгам імуноглобуліну) у порівнянні з контрольною групою. (00821 Результати Прикладу 1 підтверджують наступні висновки: (00831 1. Завдяки методу, застосованому при отриманні гомеопатичних розведень
С12, С30, С50, активована потенційована форма, яка включає суміш цих трьох гомеопатичних розведень а ргогі не містить молекул вихідної речовини; (00841 2. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини кролячих антитіл до ІРМ-гамма людини, оброблених активованою потенційованою формою, являє незаперечний доказ того, що зазначена активована потенційована форма отримана на основі вихідної речовини ІЕМ-гамма; (00851 З. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихіної речровини, кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, оброблених активованою потенційованою формою, значущо підтверджує рівень модифікуючої активності пов'язаної з активованою потенційованої формою і дає можливість виразити зазначену модифікуючу активність визначену за допомогою методу
ВЕРХ у безрозмірних одиницях відповідно до рівняння (1) (Таблиця 1).
Приклад 2 (00861 Задачею Прикладу 2 є визначення ступеня модифікуючої активності
Зо активованої потенційованої форми кролячих антитіл ("АБ") до гамма-інтерферону людини ("ІФН- гамма"). Починаючи з матричного розчину кролячих антитіл до І(ЕМ-гамма людини, активована потенційована форма кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини була приготована багатьма послідовними розведеннями понижуючи концентрацію вихідної речовини, що супроводжувалося багатьма послідовними струшуваннями. Розчинник, тобто, носій є водно-спиртовим розчином.
Молекулярна форма була розведена у 1007127, 10030 та 10050 частинах носія, тобто, сотенних гомеопатичних розведеннях С12, С30, С50. Для визначення змін фізичних, хімічних та/або біологічних властивостей вихідної речовини, а саме, кролячих антитіл до І(ЕМ-гамма людини, використовувалися ВЕРХ тоді як об'єм речовини використовувався в якості характерного параметру. (00871 Кількісне визначення речовини грунтується на оцінці площі піка при використанні ВЕРХ. Суміш антитіл до ІЕМ-гамма т АН було взято в якості тестового зразка. Як контрольні зразки були взяті наступні розчини: антитіла до ІЕМ-гамма « А вода, антитіла до ІЕМ- гамма «з вода та антитіла до ІЕМ-гамма ї- АФБР. (00881 Досліджувані зразки були приготовані змішуванням антитіла до ІЕМ-гамма та
АН (або А вода або АФБР або вода) у співвідношенні 1:1 (0б./06.). Отримані суміші струшували протягом 15 секунд, інкубували при кімнатній температурі протягом 18 годин і потім додавали
АН, А воду, АФБР або воду. (00891 Дослідження проводили розділенням за допомогою ВЕРХ у градієнтному режимі. Обернено-фазну октадецілсіланову колонку було застосовано як нерухому фазу; суміш 2 фаз (фаза 1 - ацетонітрил з додаванням оцтової кислоти і трифтороцтової кислота, фаза 2 - деіонізована вода з метиловою кислотою і трифтороцтовою кислотою) було використано як рухому фазу. Для цілей виявлення був застосований ШУ-Мів-детектор; довжина хвилі - 280 нм. (00901 Калібрування і встановлення нуля вихідної відмітки ШМ-Мів-детектора проводилися перед кожним аналізом і після нього. (00911 Підготовлені суміші переносили у ємності і вводили в хроматографічну систему за допомогою автоматичної піпетки. Дослідження кожного зразка тривало близько 15 хвилин. (00921 Після завершення аналізу урівноваження хроматографічної колони проводили при постійній швидкості потоку в умовах рухомої фази градієнта, подібно як на початку аналізу.
ІО093І Сигнал, що випускається зразками було зареєстровано у вигляді піків хроматограми відповідного білка. Було розраховано площу спектрофотометричного піку.
Результати цього аналізу представлені в таблиці 2. (00941 Таблиця 2. Площа максимуму хроматографічного піку
Дослідний зразок Площа Модифікуюча активність хроматогорафічного піку речовини в ОА при С-100 антитіла до ІЕРМ-гамманАС від 113.153.6 антитіл до ІЕМ-гамма (00951 Було показано, що активована потенційована форма АТ до ІЕМ-гамма знижує площу піку АТ до ІЕМ-гамма у порівнянні з контрольною групою. (0096) Результати Прикладу 1 підтверджують наступні висновки: (00971 1. Завдяки методу, застосованому при отриманні гомеопатичних розведень
С12, С30, С50, активована потенційована форма, яка включає суміш цих трьох гомеопатичних
Зо розведень а ргіогі не містить молекул вихідної речовини; (00981 2. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, оброблених активованою потенційованою формою, значущо підтверджує, що зазначена активована потенційована форма отримана на основі вихідної речовини антитіла до інтерферону гамма (анти-ІЕМ-гамма); (0099) З. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, оброблених активованою потенційованою формою, значущо підтверджує рівень модифікуючої активності пов'язаної з активованою потенційованої формою і дає можливість виразити зазначену модифікуючу активність визначену за допомогою методу
ВЕРХ у безрозмірних одиницях відповідно до рівняння (1) (Таблиця 2).
Приклад З (01001 Задачею Прикладу З є визначення ступеня модифікуючої активності активованої потенційованої форми диклофенак натрію. Починаючи з матричного розчину диклофенаку натрію, активована потенційована форма диклофенаку натрію була приготована багатьма послідовними розведеннями понижуючи концентрацію вихідної речовини, що супроводжувалося багатьма послідовними струшуваннями. Розчинник, тобто, носій є водно- спиртовим розчином. Молекулярна форма була розведена у 10072, 10030 та 100200 частинах носія, тобто, сотенних гомеопатичних розведеннях С12, С30, С200. Для визначення змін фізичних, хімічних та/або біологічних властивостей вихідної речовини, а саме, диклофенаку натрію, використовувалися ВЕРХ тоді як об'єм речовини використовувався в якості характерного параметру. (01011 Кількісне визначення речовини грунтується на оцінці площі піка при використанні ВЕРХ. Суміш диклофенак ї- лактоза, насичена за допомогою АН було взято в якості тестового зразка. В якості контрольних зразків були взяті наступні розчини: диклофенак лактоза, насичена за допомогою АФБР та диклофенак «х лактоза, ненасичена. (01021 Тестові зразки були представлені у вигляді порошку диклофенаку натрію, непросякнутої лактози і лактози, просякнутої АН (АФБР). Порошки було розчинено в дистильованій воді, співвідношення наважки диклофенаку і наважки лактози складало 1:3; об'єм води, що використовувався для розчинення був ідентичним. Отримані розчини змішували з розчином натрію диклофенаку у співвідношенні 1:3 (06./06.). Розчини змішували вручну вертикальним струшуванням ємностей протягом 15 секунд. Для розведення суміші розчинів для досягнення кінцевої концентрації 0,3 мкг/мл був використаний бідистилят. Розчини піддавали механічному перемішуванню протягом 15 секунд за допомогою вертикального струшуванням ємностей. Отримані суміші інкубували у темноті при кімнатній температурі протягом 18 годин. (О103)І Дослідження проводили розділенням за допомогою ВЕРХ у градієнтному режимі. Колонку, заповнену силікагелем, і модифіковану октадецилом було застосовано як нерухому фазу; суміш 2 фаз (фаза 1 - дистильована вода з мурашиною кислотою і трифтороцтовою кислотою, фаза 2 - ацетонітрил з мурашиною кислотою і трифтороцтовою кислотою) були використані як рухома фаза. Для цілей виявлення був застосований ШМ-Мів- детектор; довжина хвилі - 276 нм. (0104) Калібрування і встановлення нуля вихідної відмітки ШМ-Міз-детектора проводилися перед кожним аналізом. (01051 Підготовлені суміші переносили у ємності і вводили в хроматографічну систему за допомогою автоматичної піпетки. Дослідження кожного зразка тривало близько 15 хвилин. (0106) Після завершення аналізу урівноваження хроматографічної колони проводили при постійній швидкості потоку в умовах рухомої фази градієнта, подібно як на початку аналізу.
Зо (01071 Сигнал, що видається зразками, було зареєстровано у вигляді піків хроматограми, що відповідає диклофенаку. Було розраховано площу спектрофотометричного піку. Результати цього аналізу представлені в табліці З (детектування проводили при 276 нм). (01081 Таблиця 3. Площа максимуму хроматографічного піку
Дослідний зразок Площа хроматографічного піку Модифікуюча активність речовини в ОА при С-100
Диклофенак В лактоза, 66039,32549 1 насичена за допомогою АН
Диклофенак В лактоза, 42652,0-484 2 54,8 насичена за допомогою АФБР
Диклофенак - ненасичена 32004,3:2-111 3,7 106,3 лактоза (01091 Було показано, що площа піку диклофенаку, змішаного з АН перевищує площу піку диклофенаку, змішаного з контролями, тобто непросякнутою лактозою і лактозою, насиченою АФБР. (01101 Результати Прикладу З підтверджує наступні висновки: (01111 1. Завдяки методу застосованому при отриманні гомеопатичних розведень
С12, С30, С50, активована потенційована форма яка включає суміш цих трьох гомеопатичних розведень а ргогі не містить молекул вихідної речовини;
(01121 2. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, диклофенаку, оброблених активованою потенційованою формою диклофенаку, значущо підтверджує, що зазначена активована потенційована форма отримана на основі вихідної речовини - диклофенак;
І(О113)1 З. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, диклофенаку, оброблених активованою потенційованою формою диклофенаку, значущо підтверджує рівень модифікуючої активності пов'язаної з активованою потенційованої формою і дає можливість виразити зазначену модифікуючу активність визначену за допомогою методу
ВЕРХ у безрозмірних одиницях відповідно до рівняння (1) (Таблиця 3).
Приклад 4 (01141 Задачею Прикладу 4 є визначення ступеня модифікуючої активності активованої потенційованої форми кролячих антитіл ("АБ") до гамма-інтерферону людини ("ІФН- гамма"). Починаючи з матричного розчину кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, активована потенційована форма кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини була приготована багатьма послідовними розведеннями понижуючи концентрацію вихідної речовини, що супроводжувалося багатьма послідовними струшуваннями. Розчинник, тобто, носій є водно-спиртовим розчином.
Молекулярна форма була розведена у 10072, 10039 та 10059 частинах носія, тобто, сотенних гомеопатичних розведеннях С12, С30, С50. Для визначення змін фізичних, хімічних та/або біологічних властивостей вихідної речовини, а саме, кролячих антитіл до І(ЕМ-гамма людини, використовувалися ІФА тоді як зміна кількості комплексів антиген-антитіло використовувалася в якості характерного параметру. (01151 Перед проведенням аналізу, АТ до ІРМ-гамма та АН (або АФБР, використовуваний як плацебо) попередньо інкубували протягом 24 годин при 4 "С; під час інкубування АТ до ІЕМ-гамма зв'язувалося з ІЕМ-гамма, що містився у розчині. Після інкубування кожен зразок піддавали дії пластини ЕГІЗА, що має твердофазну антигенну поверхню. АТ до
ІЕМ-гамма, попередньо звязані з ІЕМ-гамма, адсорбувалися на твердій фазі пластини ЕГІЗА. АТ до ІЕМ-гамма, що після інкубування залишалися незвязаними з ІЕМ-гамма, залишалися у розчині. (0116) Отримані зразки було протестовано згідно з порядком виконання процедури
Зо ЕГІЗА. Кількість утворених комплексів антиген-антитіло, адсорбованих на твердій фазі визначали шляхом вимірювання оптичної густини розчинів у лунках планшета з урахуванням реакції екстинції розчину хромогену, який змінює колір на тлі індукованого ферментом розкладання підкладки. Щоб визначити екстинцію розчину, застосовували спектрофотометричні методи при довжині хвилі 490 нм в однохвильовому режимі. Чим більше комплексів антиген- антитіло було утворено на пластині, тим менше АТ до ІЕМ-гамма, зв'язаних з ІЕМ-гамма в розчині. (01171 Середня ОГ зразків для 2 аналогічних експериментів, інкубованих з АН складала 0,603 ж 0,075 (коли АН або плацебо були негайно змішані з антигеном і з АТ до ІЕМ- гамма і інкубовані протягом 24 годин) або 0,251 ж 0,027 (коли АН або плацебо були змішані з АТ до ІЕМ-гамма, а антиген додавали на 40-хвилині інкубації і проводили інкубацію 24 години), а для ІЕМ-гамма, інкубованого з АФБР значення оптичної щільності складало 0,812 ж 0,084 0,391 т і 0,023 відповідно. (0118) Експерименти показали, що водні розчини АН зменшували кількість комплексів антиген-антитіл у розчині у порівнянні з контролем, який підтверджував ідентичність препарату, що містить кролячі антитіла до інтерферону - гамма людини (АТ до ІЕМ-гамма). (01191 Результати Прикладу 4 підтверджують наступні висновки: (01201 1. Завдяки методу, застосованому при отриманні гомеопатичних розведень
С12, С30, С50, активована потенційована форма, яка включає суміш цих трьох гомеопатичних розведень а ргогі не містить молекул вихідної речовини; (01211 2. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, оброблених активованою потенційованою формою, значущо підтверджує, що зазначена активована потенційована форма отримана на основі вихідної речовини - антитіла до інтерферону гамма (анти-ІЕМ-гамма); (01221 З. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, оброблених активованою потенційованою формою, значущо підтверджує рівень модифікуючої активності пов'язаної з активованою потенційованої формою і дає можливість виразити зазначену модифікуючу активність визначену за допомогою методу
ВЕРХ у безрозмірних одиницях відповідно до рівняння (1) (Таблиця 2). Ступінь модифікуючої активності, розрахована за формулою (1) (у порівнянні з плацебо) складала 25,7- 35,8 ОА. 60 Приклад 5
(01231 Задачею Прикладу 5 є визначення ступеня модифікуючої активності активованої потенційованої форми кролячих антитіл ("АБ") до гамма-інтерферону людини ("ІФН- гамма"). Починаючи з матричного розчину кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, активована потенційована форма кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини була приготована багатьма послідовними розведеннями понижуючи концентрацію вихідної речовини, що супроводжувалося багатьма послідовними струшуваннями. Розчинник, тобто, носій є водно-спиртовим розчином.
Молекулярна форма була розведена у 10072, 10039 та 10059 частинах носія, тобто, сотенних гомеопатичних розведеннях С12, С30, С50. Для визначення змін фізичних, хімічних та/або біологічних властивостей вихідної речовини, а саме, кролячих антитіл до І(ЕМ-гамма людини, вимірювалася здатність абсорбованих на поверхні п'єзоелектричного імуносенсору антитіл звязуватися з антигеном обробленим активованою потенційованою формою. (01241 Скорочення, специфічні для Прикладу 5: (01251 ді - зміни частоти коливань п'єзоелектричного імуносенсора (01261 АРТ5, АПТЕС - у-амінопропілтриетоксисилан (01271 З - стандартне відхилення (01281 Аналітичний сигнал п'єзоелектричного імуносенсора включає зміну частоти коливань (ДЮ кварцового резонатора залежно від збільшення або зменшення маси біорецептора. Така зміна маси може виникати як наслідок утворення або руйнування імунного комплексу на поверхні датчика. У ході даного дослідження було оцінено вплив складу аналізованих проб на аналітичний сигнал датчика. Суміш ІЕМ-гамма та активованого потенційованого носія ("АН") ІЕМ-гамма було взято в якості тестового зразка. Суміш ІЕМ-гамма та АФБР було взято в якості контрольного зразка. Зразки були досліджені у вигляді водних розчинів. (01291 Для створення імуносенсора на п'єзоелектричному елементі був сформований біо-розпізнавальний рецепторний шар основі АПТЕС. Використовувана поверхня мікрошприца золотого сенсорного електрода (діаметр 8 мм), таким чином була покрита 8 мкл
АПТЕС (його сушили в ексикаторі протягом 20 хв. при 80 "С), 5 мкл глутаральдегіду (2,590 розчин в дистильованій воді), а потім 5 мкл розчину антитіл до ІЕМ-гамма (9,6 нг/мл). Для кожного вимірювання формували новий рецепторний шар біо-розпізнавання.
Зо (01301 Попередня підготовка зразка включала змішування 50 мкл ІЄМ-гамма (30 мг/мл) з 50 мкл випробовуваного зразка. Зразок далі нагрівали протягом 45 хвилин при температурі 37 "С і перемішували протягом 10 хвилин центрифугуванням (1000 об./хв.).
Сенсорну поверхню з іммобілізованим АТ до ІЕМ-гамма покривали 2,5 мкл отриманого розчину, витримували протягом 30 хв., промивали дистильованою водою, сушили до досягнення постійної ваги і проводили вимірювання статичного сигналу сенсора. Зміни звязування антиген- антитіло були оцінені через зміни маси молекули інтерферону. (01311 П'єзоелектричні резонатори, зроблені з АТ-зрізаного кварцового кристала з 8 мм золотим електродом (ЗАТ Етна, Москва) були використані як датчики. Для реєстрації аналітичного сигналу були застосовані персональний комп'ютер і цифровий модуль ДиСкоп (НПП Бафика, Москва). (01321 Результати цього аналізу представлені в таблиці 4. (О1331 Таблиця 4. Вплив складу аналізованих проб на аналітичний сигнал датчика.
Композиція зразка А Модифікуюча активність (М50) речовини в ОА при С-100 т (01341 Експерименти показали, що додавання активованої потенційованої форми до терапевтичної форми ІЕМ-гамма впливає на частоту п'єзоелектричного резонатора індукуючи його редукцію порівняно з контрольною групою.
ІО1351 Результати Прикладу 5 підтверджує наступні висновки: (01361 1. Завдяки методу, застосованому при отриманні гомеопатичних розведень
С12, С30, С50, активована потенційована форма, яка включає суміш цих трьох гомеопатичних розведень а ргіогі не містить молекул вихідної речовини;
(01371 2. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, ІЕМ-гамма людини, оброблених активованою потенційованою формою, значущо підтверджує, що зазначена активована потенційована форма отримана на основі вихідної речовини - антитіл до інтерферону гамма (анти-ІЕМ-гамма); (01381 З. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, оброблених активованою потенційованою формою, значущо підтверджує рівень модифікуючої активності пов'язаної з активованою потенційованої формою і дає можливість виразити зазначену модифікуючу активність визначену за допомогою пьєзоелектичного сенсору у безрозмірних одиницях відповідно до рівняння (1) (Таблиця 4).
Ступінь модифікуючої активності розрахована за формулою (1) (у порівнянні з плацебо) складала 2764,2 ОА.
Приклад 6 (01391 Аналіз змін нейтралізуючої активності антитіл до ІЕМ-гамма, оброблених реліз-активними антитілами до ІЄМ-гамма; застосований метод є вимірюванням нейтралізуючої активності. (01401 Задачею Прикладу б є визначення ступеня модифікуючої активності активованої потенційованої форми кролячих антитіл ("АТ") до гамма-інтерферону людини ("ЕМ- гамма"). Починаючи з матричного розчину кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, активована потенційована форма кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини була приготована багатьма послідовними розведеннями понижуючи концентрацію вихідної речовини, що супроводжувалося багатьма послідовними струшуваннями. Розчинник, тобто, носій є водно-спиртовим розчином.
Молекулярна форма була розведена у 1007127, 10030 та 10050 частинах носія, тобто, сотенних гомеопатичних розведеннях С12, С30, С50. Для визначення змін фізичних, хімічних та/або біологічних властивостей вихідної речовини, а саме, кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, використовувалися ІФА тоді як зміна кількості комплексів антиген-антитіло використовувалася в якості характерного параметру. (01411 Скорочення, специфічні для Прикладу 6: (01421 А (Х) - АРМ1-1640, культуральне середовище, яке містить Хо - фетальної телячої сироватки.
Зо (01431 МА, НА - нейтралізуюча активність (0144) СРЕ, ЦПЕ - цитопатичний ефект (01451 Нейтралізуюча активність, виміряна як НА/мл, препаратів, що містять антитіла, базується на інгібуванні звязування ІЄМ-гамма зі своїм рецептором, що експресується на клітинній мембрані. (0146) Нейтралізуюча активність зразків поліклональних кролячих АТ до ІЄМ-гамма у культуральному середовищі ГК (1)| у присутності активованої потенційованої форми ("АН") або з контрольним зразком (дистильована вода). (01471 Культивовані НЕр-2 клітини фібробластів легень людських ембріонів обробляли трипсином, суспендували у 10 мл К (10) і були нанесені на пластини при концентрації 2,3 х 105 клітин / лунку (100 мкл/лунку). Клітини інкубували 24 години при 37 "С у зволоженому інкубаторі з 795 СО». ІЕМ-гамма піддавали крок за кроком розведенню в К(1), від 500 нг/мл до 3,9 нг/мл і вводили у лунки. Кролячі поліклональні антитіла до ІЄМ-гамма (2 послідовних розведення в (1), починаючи з тисячного розведення) і змішують з ІЕМ-гамма у фіксованій концентрації (250 нг/мл) і АН (1095 (об./06.) в Е (1)) або в дистильованій воді (1095 (об./об. в ЕК (1)). Планшети інкубували протягом 1 години при 37 "С. (0148) Після інкубування лунки були звільнені і в них додавали вірус везикулярного стоматиту у К(1) у кількості 100 мкл/лунку. Після цього клітини інкубували протягом 20-24 годин при 37 "С до тих пір, поки ЦПЕ в лунках контрольних ліній не перевищував 9095. (0149) Після видалення культурального середовища, клітини, що залишились промивали РВЗ (200 мкл/лунку) і обробляли кристалічним фіолетовим у формаліні (50 мкл/лунку) протягом 15 хвилин при кімнатній температурі. Одношарове 10095 фарбування спостерігалося, у тому випадку, коли всі клітини були живі; якщо клітини були мертві (ЦПЕ), моношарове фарбування не спостерігалося. (01501 Планшет промивали водою. Лунки з розведеннями, що демонстрували близько 5095 ЦПЕ, були визначені візуально, а потім були протестовані з використанням спектрофотометрії. (01511 Оцінка ефекту базувалася на кількості тих клітин, що вижили (співвідношення клітин, що вижили, до загальної кількості клітин). Зниження нейтралізуючої активності АТ ІЕМ- гамма вважалося критерієм оцінки впливу активованої потенційованої форми. Для розрахунку бо нейтралізуючої активності лікарських препаратів було застосовано наступне рівняння: Е х А х
10/С, де Р-зворотна величина розведення антитіл, А-ЕШ/мл стандартного препарату при 5090
ЦПЕ, ї С-концентрації антитіл (мг / мл). (01521 Експеримент показав, що: (01531 - при інкубуванні ІЕМ-гамма людини (500 нг/1 мл культурального середовища) з ембріональними фібробластами людини, клітинами клітинної лінії НЕр-2, отриманої з легень (2,3 х 105 клітин/лунку), інфікованими вірусом везикулярного стоматиту (1,6 х 105 БУО / мл), було помічено повне інгібування цитопатичного ефекту вірусу (10095 інфікованих клітин вижили); (01541 - при інкубуванні ІЕМ-гамма людини (500 нг/1 мл культурального середовища) та кролячих поліклональних АТ до ІЕМ-гамма (0,525 мкг/1 мл культурального середовища) з ембріональними фібробластами людини, клітинами клітинної лінії НЕр-2, отриманої з легень (2,3 х 105 клітин/лунку), інфікованими вірусом везикулярного стоматиту (1,6 х 105 БУО / мл), було помічено 5095 інгібування цитопатичного ефекту вірусу (50 95 інфікованих клітин вижили); (01551 - при інкубуванні ІЕМ-гамма людини (500 нг/1 мл культурального середовища) та кролячих поліклональних АТ до ІРМ-гамма (0, 525 мкг/1 мл культурального середовища) а також активованої потенційованої форми (1095 (о0б./06.) культурального середовища) з ембріональними фібробластами людини, клітинами клітинної лінії НЕр-2, отриманої з легень (2,3 х 105 клітин/лунку), інфікованими вірусом везикулярного стоматиту (1,6 х 105 БУО / мл), було помічено 7595 інгібування цитопатичного ефекту вірусу (75 95 інфікованих клітин вижили); (01561 При цьому було виявлено, що активована потенційована форма викликала модулюючий вплив на модулюючу активність поліклональних антитіл. (01571 Результати Прикладу 6 підтверджують наступні висновки: (01581 1. Завдяки методу, застосованому при отриманні гомеопатичних розведень
С12, С30, С50, активована потенційована форма, яка включає суміш цих трьох гомеопатичних розведень а ргіогі не містить молекул вихідної речовини; (01591 2. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, оброблених активованою потенційованою формою, значущо підтверджують, що зазначена активована потенційована форма отримана на основі вихідної речовини кролячих антитіл до інтерферону гамма (анти-ІЕМ-гамма);
Зо (01601 З. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, обробленої згаданою вище активованою потенційованою формою, значущо підтверджує рівень модифікуючої активності пов'язаної з носієм і дає можливість виразити зазначену модифікуючу активність у безрозмірних одиницях відповідно до рівняння (1), яка що відповідає нейтралізуючій активності 50 ОА.
Приклад 7 (01611 Задачею Прикладу 7 є визначення ступеня модифікуючої активності активованої потенційованої форми кролячих антитіл ("АБ") до гамма-інтерферону людини ("ІФН- гамма"). Починаючи з матричного розчину кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, активована потенційована форма кролячих антитіл до ІРМ-гамма людини була приготована багатьма послідовними розведеннями понижуючи концентрацію вихідної речовини, що супроводжувалося багатьма послідовними струшуваннями. Розчинник, тобто, носій є водно-спиртовим розчином.
Молекулярна форма була розведена у 10072, 10039 та 10059 частинах носія, тобто, сотенних гомеопатичних розведеннях С12, С30, С50. Для визначення змін фізичних, хімічних та/або біологічних властивостей вихідної речовини, а саме, кролячих антитіл до І(ЕМ-гамма людини, використовувалися ВЕРХ тоді як об'єм речовини використовувався в якості характерного параметру. (01621 Для визначення конформаційних змін в ІЄМ-гамма, речовина, що містила молекули зі структурою подібною до кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, оброблену активованим потенційованим носієм (місцями скорочено "АН") було додано до ІЕМ-гамма та проведено ЯМР-спектроскопію. Гомеопатичні розведення очищеної води були використані як контроль. (01631 Для приготування тестових зразків АН або очищену воду змішували з розчином АТ до ІЕМ-гамма у співвідношенні 2:11. Кінцева концентрація АТ до ІЕМ-гамма в кожному зразку складала 0,8 мг/мл. (0164) ЯМР спектрометр ВгисКег Амапсе 700 (робоча частота 700 МГц) був використаний для проведення експерименту. Зразки для випробувань були введені в магнітне поле пристрою. Спостерігалося збудження магнітного ізотопу водню 1Н. Сигнал зразків був зареєстрований у формі спектрів ЯМР (накопичення сигналу протягом 12 годин), який характеризує структуру та конформаційний стан АТ до ІЄМ-гамма.
(01651 Оцінка конформаційного стану АТ до ІЕМ-гамма була проведена в рамках порівняльного аналізу спектрів, отриманих зі зразка, що містить АТ до ІЕМ-гамма ї АН або АТ до ІБМ-гамма ї- очищена вода. Порівняння проводилося за допомогою спектрального накладення з відповідним масштабуванням. (01661 Результати дослідження показали, що додавання активованої потенційованої форми АТ до ІЕМ-гамма викликало зміни спектра АТ до ІЕМ-гамма в діапазоні 8-8,5 ррт, 7,6-7,8 ррт, 6-6,6 ррт у порівнянні зі спектром АТ до ІЕМ-гамма ж очищена вода. На фігурі 1 показано перекриття спектрів АТ до ІЕМ-гамма «з АН і АТ до ІЕМ-гамма хт очищена вода. (01671 Експеримент показав, що активована потенційована форма впливає на конформацію АТ до ІЕМ-гамма в розчині. (0168) Результати Прикладу 7 підтверджує наступні висновки: (01691 1. Завдяки методу, застосованому при отриманні гомеопатичних розведень
С12, С30, С50, активована потенційована форма, яка включає суміш цих трьох гомеопатичних розведень а ргогі не містить молекул вихідної речовини; (01701 2. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, кролячих антитіл до ІЕМ-гамма людини, оброблених активованою потенційованою формою, значущо підтверджують, що зазначена активована потенційована форма отримана на основі вихідної речовини кролячих антитіл до інтерферону гамма (анти-ІЕМ-гамма); (01711 З. Зміни фізичних та хімічних властивостей вихідної речовини, людини, оброблених активованою потенційованою формою, значущо підтверджує, рівень модифікуючої активності пов'язаної з активованою потенційована форма. (01721 Опис, приклади і рисунки, що містяться в даному описі представляють кращий варіант здійснення винаходу і, як такі, прикладами предмета винаходу, який широко описується в цьому винаході. Обсяг цього винаходу включає в себе повністю інші варіанти, які можуть стати очевидними для фахівців в даній області техніки, і обсяг цього винаходу відповідно нічим не обмежений, крім прикладеної формули винаходу.
Claims (1)
- ФОРМУЛА ВИНАХОДУ Зо 1. Спосіб визначення активності активованої потенційованої форми речовини, де зазначений спосіб включає: а) одержання активованої потенційованої форми речовини, Б) пересвідчення у відсутності молекулярної форми речовини в зазначеній активованій потенційованій формі, с) одержання молекулярної форми вказаної речовини, 4) вимірювання принаймні одного фізичного, хімічного або біологічного параметра (А) зазначеної молекулярної форми вказаної речовини за допомогою придатного аналітичного методу, вибраного з групи, що включає високоефективну рідинну хроматографію, імуноферментний аналіз та ядерний магнітний резонанс, е) оброблення зазначеної молекулярної форми зазначеної речовини, вказаною активованою потенційованою формою зазначеної речовини, та ї) вимірювання зазначеного принаймні одного фізичного, хімічного або біологічного параметра (Ам) зазначеної обробленої молекулярної форми зазначеної речовини за допомогою вказаного аналітичного методу, де зазначена активність зазначеної активованої потенційованої форми зазначеної речовини є величиною різниці між А та Ам, причому вказану активність вказаної активованої потенційованої форми вказаної речовини виражають у відносних одиницях (Х) відповідно до формули хес|А- Ам | /А, де С - безрозмірний коефіцієнт пропорційності, А - значення характерного параметра вихідної речовини до її взаємодії з вказаною активованою потенційованою формою, Ам - значення того ж характерного параметра вихідної речовини після її взаємодії з вказаною активованою потенційованою формою.2. Спосіб згідно з пунктом формули 1, який додатково включає ї) оброблення молекулярної форми іншої речовини зазначеною активованою потенційованою формою першої речовини, ії) вимірювання зазначеного щонайменше одного фізичного, хімічного або біологічного параметра (В) вказаної молекулярної форми вказаної іншої речовини вказаного аналітичного методу, іїї) вимірювання зазначеного щонайменше одного фізичного, хімічного або біологічного параметра(Вм) вказаної обробленої молекулярної форми вказаної іншої речовини з використанням зазначеного аналітичного методу для визначення специфічності зазначеного методу, де вказаний метод вважається специфічним, коли щонайменше один вказаний фізичний, хімічний або біологічний параметр зміниться статистично значущим чином для А-Ам і не зміниться статистично значущим чином для В-Вм.З. Спосіб згідно з пунктом формули 1, в якому зазначена стадія забезпечення відсутності молекулярної форми речовини включає видалення молекулярної форми зазначеної речовини.4. Спосіб згідно з пунктом формули 1, в якому вказана речовина являє собою антитіло.5. Спосіб згідно з пунктом формули 4, в якому вказане антитіло являє собою поліклональне антитіло.6. Спосіб згідно з пунктом формули 1, в якому вказана речовина являє собою малу органічну молекулу.7. Спосіб згідно з пунктом формули 1, в якому вказана активована потенційована форма є рідкою.8. Спосіб згідно з пунктом формули 1, де вказана активована потенційована форма імпрегнована у твердий носій. Таблиця. Перекриття спектрів АВ до ІЕМ гамма змінного струму і АВ гамма я плацебо нн в в п р дл а ВИ пня ї с Б ! їх; . ві її Е ВІ ще Н у ши. Е й: я ї ї : ; з Я ШЕ і ї їх : ге ує ще. Н кА ЕХ, ї с Ми і ЖАХ ВЕУ зе та й ме зі, ие " У Ж я ен І ва ее; ай зби, фігура ї
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013111961/15A RU2013111961A (ru) | 2013-03-18 | 2013-03-18 | Способ определения выраженности модифицирующей активности, ассоциированной с носителем |
| PCT/IB2014/001267 WO2014147487A2 (en) | 2013-03-18 | 2014-03-18 | Method for determining degree of modified potency of bipathic medicament |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA117675C2 true UA117675C2 (uk) | 2018-09-10 |
Family
ID=51178964
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201510146A UA117675C2 (uk) | 2013-03-18 | 2014-03-18 | Спосіб визначення ступеня модифікуючої активності біпатичного лікарського засобу |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9945868B2 (uk) |
| EP (1) | EP2976636A2 (uk) |
| JP (1) | JP6527853B2 (uk) |
| KR (1) | KR20150133786A (uk) |
| CN (1) | CN105209906A (uk) |
| AR (1) | AR096018A1 (uk) |
| AU (1) | AU2014233938A1 (uk) |
| BR (1) | BR112015023917A2 (uk) |
| CA (1) | CA2907524A1 (uk) |
| CL (1) | CL2015002779A1 (uk) |
| DE (1) | DE112014001501T5 (uk) |
| EA (1) | EA030610B1 (uk) |
| ES (1) | ES2560897R1 (uk) |
| GB (1) | GB2531169B (uk) |
| MX (1) | MX2015013379A (uk) |
| PE (1) | PE20151556A1 (uk) |
| RU (1) | RU2013111961A (uk) |
| UA (1) | UA117675C2 (uk) |
| WO (1) | WO2014147487A2 (uk) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2013111961A (ru) * | 2013-03-18 | 2014-09-27 | Олег Ильич Эпштейн | Способ определения выраженности модифицирующей активности, ассоциированной с носителем |
| RU2013111962A (ru) * | 2013-03-18 | 2014-09-27 | Олег Ильич Эпштейн | Способ определения выраженности модифицирующей активности, ассоциированной с носителем |
| WO2017147616A1 (en) * | 2016-02-28 | 2017-08-31 | Standard Homeopathic Company | Methods and compositions for using solvatochromic dyes to detect the presence of homeopathic potencies |
| RU2018118695A (ru) * | 2018-05-22 | 2019-11-22 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственная Фирма "Материа Медика Холдинг" | Лекарственное средство для лечения нарушений функций органа или ткани, а также заболеваний, сопровождающихся данными нарушениями, и способ его получения |
| RU2679885C1 (ru) * | 2018-05-31 | 2019-02-14 | Александр Мордухаевич Клейман | Способ приготовления гомеопатических препаратов на основе органических соединений |
Family Cites Families (38)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IL125743A (en) | 1996-02-12 | 2003-09-17 | Epshtein Oleg Iliich | Medicinal preparation containing an active medical substance with homeopathic potentiation |
| RU2112976C1 (ru) | 1997-04-07 | 1998-06-10 | Акционерное общество закрытого типа "Международный концерн "ЭДАС" | Способ определения качества гомеопатических лекарственных средств и устройство для его реализации |
| RU2161955C1 (ru) | 1999-07-16 | 2001-01-20 | Эпштейн Олег Ильич | Способ изменения физико-химических или физико-химических и биологических свойств вещества |
| RU2181297C2 (ru) | 2000-06-20 | 2002-04-20 | Эпштейн Олег Ильич | Способ лечения патологического синдрома и лекарственное средство |
| RU2195648C2 (ru) * | 2000-11-03 | 2002-12-27 | Эпштейн Олег Ильич | Способ качественного определения гомеопатического лекарственного препарата или потенцированной формы вещества |
| RU2192888C1 (ru) | 2001-02-15 | 2002-11-20 | Эпштейн Олег Ильич | Лекарственное средство и способ лечения патологического синдрома |
| RU2191601C1 (ru) | 2001-04-18 | 2002-10-27 | Эпштейн Олег Ильич | Лекарственное средство и способ лечения эректильных дисфункций |
| RU2181890C1 (ru) | 2001-06-06 | 2002-04-27 | Научно-исследовательский и учебно-методический центр биомедицинских технологий ВИЛАР | Способ выявления веществ, обладающих адаптогенными свойствами, in vitro |
| RU2201255C1 (ru) | 2001-12-26 | 2003-03-27 | Эпштейн Олег Ильич | Лекарственное средство и способ регуляции сосудистого тонуса |
| UA76639C2 (uk) | 2002-08-02 | 2006-08-15 | Олєг Ільіч Епштєйн | Гомеопатичний лікарський засіб та спосіб лікування еректильних дисфункцій |
| UA76641C2 (uk) | 2002-08-02 | 2006-08-15 | Олєг Ільіч Епштєйн | Гомеопатичний лікарський засіб та спосіб лікування захворювань передміхурової залози |
| UA76638C2 (en) | 2002-08-02 | 2006-08-15 | Oleh Illich Epshtein | Homeopathic medication based on anti-interferon antibodies and method for treating a pathological syndrome associated with interferon |
| UA76640C2 (uk) | 2002-08-02 | 2006-08-15 | Олєг Ільіч Епштєйн | Спосіб корекції патологічних імунних реакцій та гомеопатичний лікарський засіб |
| RU2253478C1 (ru) | 2003-10-01 | 2005-06-10 | Эпштейн Олег Ильич | Средство для потенцирования лечебных эффектов - усиления действия лекарственного вещества |
| RU2309732C1 (ru) | 2006-03-13 | 2007-11-10 | Олег Ильич Эпштейн | Спрессованная твердая оральная форма лекарственного препарата и способ получения твердой оральной формы лекарственного препарата |
| RU2438707C2 (ru) | 2006-06-06 | 2012-01-10 | Олег Ильич Эпштейн | Лекарственное средство для перорального лечения сахарного диабета и других заболеваний, сопровождающихся нарушением толерантности к глюкозе, и способ получения твердой лекарственной формы для пероральной терапии сахарного диабета и других заболеваний, сопровождающихся нарушением толерантности к глюкозе |
| JP5687425B2 (ja) | 2006-06-06 | 2015-03-18 | オレグ イリッチ エプシュテイン | 肥満、真性糖尿病及び耐糖能異常を伴う疾患の治療用薬剤 |
| RU2332236C1 (ru) | 2007-02-02 | 2008-08-27 | Олег Ильич Эпштейн | Лекарственное средство для лечения гриппа у птиц |
| US20130189707A1 (en) | 2010-01-26 | 2013-07-25 | Svetlana Alexandrovna Sergeeva | Method of determination of autoantibody level by means of enzyme immunoassay |
| FR2962655A1 (fr) | 2010-07-15 | 2012-01-20 | Oleg Iliich Epshtein | Composition pharmaceutique d'association et ses utilisations dans les procedes de traitement des troubles du systeme genito-urinaire |
| MX2013000544A (es) | 2010-07-15 | 2013-10-28 | Oleg Iliich Epshtein | Una composicion de combinacion farmaceutica y metodos de tratamiento de enfermedades o condiciones asociadas con el sistema cardiovascular. |
| CN103124742A (zh) * | 2010-07-15 | 2013-05-29 | 奥列格·伊里奇·爱泼斯坦 | 药物组合物和治疗方法 |
| FR2962652A1 (fr) | 2010-07-15 | 2012-01-20 | Oleg Iliich Epshtein | Composition pharmaceutique d'association et son utilisation dans des procedes pour traiter les maladies ou affections associees a des maladies neurodegeneratives |
| CZ2013105A3 (cs) * | 2010-07-15 | 2013-05-22 | Iliich Epshtein@Oleg | Zpusob zvýsení úcinku aktivované potencované formy protilátky |
| GB2496794B (en) | 2010-07-15 | 2017-11-01 | Iliich Epshtein Oleg | Combination pharmaceutical composition and methods of treating functional diseases or conditions of gastrointestinal tract |
| JP2013533269A (ja) | 2010-07-21 | 2013-08-22 | イリイチ・エプシテイン オレグ | 組み合わせ医薬組成物及び呼吸器の疾患又は状態に関連する疾患及び状態を治療する方法 |
| NZ606970A (en) | 2010-07-21 | 2015-08-28 | Oleg Iliich Epshtein | A method of treating attention deficit hyperactivity disorder |
| WO2012014078A2 (en) | 2010-07-21 | 2012-02-02 | Olge Iliich Epshtein | Method of treatment of organic diseases of nervous system, psychoorganic syndrome and encephalopathy |
| JP2013535445A (ja) | 2010-07-21 | 2013-09-12 | イリイチ・エプシテイン オレグ | アルツハイマー病を治療する方法 |
| JP2013536174A (ja) | 2010-07-21 | 2013-09-19 | イリイチ・エプシテイン オレグ | 組み合わせ医薬組成物並びに回転性めまい、動揺病及び自律神経血管ジストニアを治療する方法 |
| WO2012010966A2 (en) | 2010-07-21 | 2012-01-26 | Oleg Iliich Epshtein | A combination pharmaceutical composition and methods of treating diabetes and metabolic disorders |
| RU2535034C2 (ru) | 2010-08-06 | 2014-12-10 | Олег Ильич Эпштейн | Лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида |
| CZ2013159A3 (cs) | 2010-08-06 | 2013-06-12 | Iliich Epshtein@Oleg | Kombinovaná farmaceutická kompozice a zpusoby lécby a prevence infekcních chorob |
| RU2535033C2 (ru) | 2010-08-06 | 2014-12-10 | Олег Ильич Эпштейн | Лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида |
| RU2517084C2 (ru) | 2010-08-06 | 2014-05-27 | Олег Ильич Эпштейн | Способ и средство для ингибирования продукции или усиления элиминации белка р24 |
| US20120263725A1 (en) | 2010-08-06 | 2012-10-18 | Epshtein Oleg Iiiich | Pharmaceutical composition and methods of treating and preventing the diseases caused by HIV or associated with HIV |
| US20130171161A1 (en) | 2010-12-23 | 2013-07-04 | Oleg Iliich Epshtein | Method and composition for the treatment of diseases caused by or associated with hiv |
| RU2013111961A (ru) * | 2013-03-18 | 2014-09-27 | Олег Ильич Эпштейн | Способ определения выраженности модифицирующей активности, ассоциированной с носителем |
-
2013
- 2013-03-18 RU RU2013111961/15A patent/RU2013111961A/ru unknown
-
2014
- 2014-03-18 EP EP14739227.8A patent/EP2976636A2/en not_active Ceased
- 2014-03-18 PE PE2015002041A patent/PE20151556A1/es not_active Application Discontinuation
- 2014-03-18 DE DE112014001501.6T patent/DE112014001501T5/de not_active Withdrawn
- 2014-03-18 ES ES201590109A patent/ES2560897R1/es active Pending
- 2014-03-18 US US14/218,081 patent/US9945868B2/en active Active
- 2014-03-18 EA EA201500924A patent/EA030610B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2014-03-18 AU AU2014233938A patent/AU2014233938A1/en not_active Abandoned
- 2014-03-18 CN CN201480028670.2A patent/CN105209906A/zh active Pending
- 2014-03-18 BR BR112015023917A patent/BR112015023917A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2014-03-18 UA UAA201510146A patent/UA117675C2/uk unknown
- 2014-03-18 JP JP2016503732A patent/JP6527853B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2014-03-18 MX MX2015013379A patent/MX2015013379A/es unknown
- 2014-03-18 KR KR1020157030001A patent/KR20150133786A/ko not_active Application Discontinuation
- 2014-03-18 CA CA2907524A patent/CA2907524A1/en not_active Abandoned
- 2014-03-18 WO PCT/IB2014/001267 patent/WO2014147487A2/en active Application Filing
- 2014-03-18 GB GB1518061.5A patent/GB2531169B/en active Active
- 2014-03-19 AR ARP140101288A patent/AR096018A1/es unknown
-
2015
- 2015-09-16 CL CL2015002779A patent/CL2015002779A1/es unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB2531169B (en) | 2018-04-04 |
| WO2014147487A2 (en) | 2014-09-25 |
| WO2014147487A3 (en) | 2014-12-31 |
| ES2560897A2 (es) | 2016-02-23 |
| JP6527853B2 (ja) | 2019-06-05 |
| EA201500924A1 (ru) | 2016-04-29 |
| EA030610B1 (ru) | 2018-08-31 |
| ES2560897R1 (es) | 2016-03-29 |
| GB2531169A (en) | 2016-04-13 |
| GB201518061D0 (en) | 2015-11-25 |
| US20140287442A1 (en) | 2014-09-25 |
| MX2015013379A (es) | 2016-01-08 |
| RU2013111961A (ru) | 2014-09-27 |
| CN105209906A (zh) | 2015-12-30 |
| JP2016516205A (ja) | 2016-06-02 |
| CL2015002779A1 (es) | 2016-10-07 |
| DE112014001501T5 (de) | 2016-04-14 |
| US9945868B2 (en) | 2018-04-17 |
| CA2907524A1 (en) | 2014-09-25 |
| KR20150133786A (ko) | 2015-11-30 |
| AU2014233938A1 (en) | 2015-10-15 |
| AR096018A1 (es) | 2015-12-02 |
| PE20151556A1 (es) | 2015-11-05 |
| EP2976636A2 (en) | 2016-01-27 |
| BR112015023917A2 (pt) | 2017-07-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Cai et al. | Uric acid induces endothelial dysfunction by activating the HMGB1/RAGE signaling pathway | |
| UA117675C2 (uk) | Спосіб визначення ступеня модифікуючої активності біпатичного лікарського засобу | |
| Wu et al. | Inhibition of peripheral TNF-α and downregulation of microglial activation by alpha-lipoic acid and etanercept protect rat brain against ischemic stroke | |
| Wei et al. | Involvement of ROS/NLRP3 inflammasome signaling pathway in doxorubicin-induced cardiotoxicity | |
| Naicker et al. | A UHPLC–MS/MS method for the simultaneous determination of piperacillin and tazobactam in plasma (total and unbound), urine and renal replacement therapy effluent | |
| Gu et al. | Development of 3-mercaptopropyltrimethoxysilane (MPTS)-modified bone marrow mononuclear cell membrane chromatography for screening anti-osteoporosis components from Scutellariae Radix | |
| Wang et al. | Effects of a novel glucokinase activator, HMS5552, on glucose metabolism in a rat model of type 2 diabetes mellitus | |
| Chen et al. | Total saponins from dioscorea septemloba thunb reduce serum uric acid levels in rats with hyperuricemia through OATP1A1 up-regulation | |
| Lin et al. | Ultrasensitive and simultaneous detection of 6 nonsteroidal anti-inflammatory drugs by colloidal gold strip sensor | |
| Kinders et al. | Isolation of cell-surface glycopeptides from bovine cerebral cortex that inhibit cell growth and protein synthesis in normal but not in transformed cells | |
| Liendo et al. | A new interference in some digoxin assays: Anti‐murine heterophilic antibodies | |
| CN106153954A (zh) | 一种苯妥英钠的快速检测方法 | |
| Silva et al. | Effect of lysine acetylsalicylate on aluminium accumulation and (Na+/K+) ATPase activity in rat brain cortex synaptosomes after aluminium ingestion | |
| US9945798B2 (en) | Method for determining degree of modified potency of a medicament | |
| Zhou et al. | Identification of differentially expressed proteins in rats with spinal cord injury during the transitional phase using an iTRAQ-based quantitative analysis | |
| Mamina et al. | Determination of diphenhydramine by HPLC method in biological liquids | |
| RU2643934C2 (ru) | Способ определения выраженности модифицирующей активности, ассоциированной с носителем | |
| Dasgupta et al. | The Fab fragment of anti-digoxin antibody (digibind) binds digitoxin-like immunoreactive components of Chinese medicine Chan Su: monitoring the effect by measuring free digitoxin | |
| Baybutt et al. | The proliferative effects of retinoic acid on primary cultures of adult rat type II pneumocytes depend upon cell density | |
| Guan et al. | Biosensor-based active ingredient recognition system for screening TNF-α inhibitors from lotus leaves | |
| CN108283635A (zh) | 补骨脂宁用作hsp90ab1抑制剂的医药用途 | |
| Lenzi et al. | Analysis of single, purified inclusions as a novel approach to understand methamphetamine neurotoxicity | |
| Mamina et al. | Identification and quantitative determination of clonidine by HPLC method | |
| CN113009127A (zh) | 一种生物传感器联合蛋白免疫反应在检测五味子甲素治疗少弱精子症信号通路中的应用 | |
| Klys et al. | Determination of deslanoside in antemortem and postmortem specimens. Unusual case report |