TWI846146B - 能夠生產包含所有種類的必需胺基酸之菌絲體的米麴黴菌（aspergillus oryzae） - Google Patents
能夠生產包含所有種類的必需胺基酸之菌絲體的米麴黴菌（aspergillus oryzae） Download PDFInfo
- Publication number
- TWI846146B TWI846146B TW111143782A TW111143782A TWI846146B TW I846146 B TWI846146 B TW I846146B TW 111143782 A TW111143782 A TW 111143782A TW 111143782 A TW111143782 A TW 111143782A TW I846146 B TWI846146 B TW I846146B
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- mycelium
- strain
- aspergillus oryzae
- cji1100
- amino acid
- Prior art date
Links
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 title claims description 63
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 title claims description 63
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 title abstract description 15
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 title abstract description 15
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims abstract description 44
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 41
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 31
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 40
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 38
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 31
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 30
- 229930195730 Aflatoxin Natural products 0.000 claims description 20
- XWIYFDMXXLINPU-UHFFFAOYSA-N Aflatoxin G Chemical compound O=C1OCCC2=C1C(=O)OC1=C2C(OC)=CC2=C1C1C=COC1O2 XWIYFDMXXLINPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000005409 aflatoxin Substances 0.000 claims description 20
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 16
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 claims description 16
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 14
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 11
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 10
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 10
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims description 9
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 8
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 8
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 8
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 8
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 8
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229940116540 protein supplement Drugs 0.000 claims description 8
- 235000005974 protein supplement Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims description 8
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 7
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 7
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 claims description 7
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 6
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 6
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 6
- 108020004463 18S ribosomal RNA Proteins 0.000 claims description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 5
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims description 5
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims description 4
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 claims description 3
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 claims description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 3
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 claims description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 2
- 108010058643 Fungal Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 claims 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 claims 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 abstract description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 34
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 29
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 17
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 16
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 description 13
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 10
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 9
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 6
- LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]ethanone Chemical compound C1CN(CC2=NNN=C21)CC(=O)N3CCN(CC3)C4=CN=C(N=C4)NCC5=CC(=CC=C5)OC(F)(F)F LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000019542 Cured Meats Nutrition 0.000 description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000512259 Ascophyllum nodosum Species 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 4
- 240000006927 Foeniculum vulgare Species 0.000 description 4
- 235000004204 Foeniculum vulgare Nutrition 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 4
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 235000020991 processed meat Nutrition 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101150118680 aflR gene Proteins 0.000 description 3
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000004362 fungal culture Methods 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 2
- 241000228197 Aspergillus flavus Species 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 239000004278 EU approved seasoning Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 244000203593 Piper nigrum Species 0.000 description 2
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 2
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N daidzein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000002636 mycotoxin Substances 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- DBTMGCOVALSLOR-DEVYUCJPSA-N (2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](CO)O[C@H](O)[C@@H]2O)O)O[C@H](CO)[C@H]1O DBTMGCOVALSLOR-DEVYUCJPSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 241000131386 Aspergillus sojae Species 0.000 description 1
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000567178 Fusarium venenatum Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108010073032 Grain Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000007696 Kjeldahl method Methods 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229920001543 Laminarin Polymers 0.000 description 1
- 239000005717 Laminarin Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000678 Mycotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 241001199936 Sphaerocystis Species 0.000 description 1
- 241001561391 Sphaerospora Species 0.000 description 1
- 241000579741 Sphaerotheca <fungi> Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 235000015191 beet juice Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 235000013614 black pepper Nutrition 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 235000019519 canola oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000828 canola oil Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 235000007240 daidzein Nutrition 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 229940029982 garlic powder Drugs 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000007602 hot air drying Methods 0.000 description 1
- 239000010903 husk Substances 0.000 description 1
- 159000000014 iron salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000004213 low-fat Nutrition 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 150000002696 manganese Chemical class 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000009304 pastoral farming Methods 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000004886 process control Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000000779 smoke Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 description 1
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 230000009967 tasteless effect Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000006150 trypticase soy agar Substances 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Abstract
本申請案係關於一種新穎米麴黴菌（
Aspergillus oryzae）CJI1100菌株及由其生產之菌絲體。藉由使用本申請案之新穎米麴黴菌CJI1100菌株，可大量生產含有所有種類的必需胺基酸之菌絲體。本申請案之菌絲體係完整蛋白質且具有且具有用作包括肉類替代品在內之多種食品的優點。
Description
本申請案係關於一種新穎米麴黴菌菌株及由其生產之菌絲體。另外，其係關於一種由米麴黴菌菌株大量生產菌絲體之方法及使用由該方法生產之菌絲體的食品。
相關申請案之交叉參考
本申請案依據35 U.S.C.§119主張2021年11月16日於韓國智慧財產局申請之韓國專利申請案第10-2021-0157491號的優先權，該案之揭露內容以全文引用之方式併入本文中。
在環境問題及人口增長引起食品安全意識不斷提高的情況下，考慮到可持續性，對替代食品之關注不斷增加。此外，隨著近來人們對健康之關注度增加，對高蛋白質、低熱量或低脂肪食品的需求亦增加，且因此，肉類替代品及替代蛋白質的市場規模有望進一步擴大。在此情況下，植物蛋白被用作替代自畜牧業獲得之肉類的蛋白質材料。其中，使用富含蛋白質之大豆的植物肉得到大量使用，但大豆植物肉即使經由擠出模製程序而具有肉類的外觀，其在再現肉類
之獨特紋理方面仍具有侷限性。正在審查使用具有纖維結構之蘑菇菌絲體作為除大豆以外的植物蛋白材料，但有一個缺點，即，與大豆蛋白相比，蘑菇菌絲體之蛋白質含量相對較低。因此，需要開發具有高蛋白質含量之其他蛋白質材料作為肉類替代品。
長期以來，真菌一直被用作生產多種食品及飲料之食品成分，包括醱酵食品及酒精飲料。當在液體培養基中培養真菌時，只能獲得由真菌生產之菌絲體而不形成孢子。經由此培養方法獲得的真菌菌絲體具有高蛋白質含量及纖維結構，此有利於產生肉類之紋理。此外，由於由真菌生產之菌絲體具有高麩胺酸含量，其具有鮮美的味道且為無味的，故其可以用作多種產品添加至食品中。另外，由真菌生產之菌絲體富含膳食纖維且已知其可有效降低血膽固醇。
韓國專利第10-1760184號提出一種增加大豆之大豆素I含量的方法，該方法係藉由在以作為可食用真菌菌株之醬油麴黴菌(Aspergillus sojae)的菌絲體接種大豆之後培養來進行。韓國專利第10-1929346號提出一種使用米麴黴菌菌株生產米麴之方法，但該案並未揭露藉由培養真菌菌株獲得具有優良胺基酸組成之菌絲體的方法。因此，本申請案之發明人證實，由醱酵之大豆團塊得到的新穎麴黴屬菌株生產由所有種類的必需胺基酸構成之菌絲體且完成本申請案。
[先前技術文件]
[專利文件]
(專利文件1)韓國專利第10-1760184號
(專利文件2)韓國專利第10-1929346號
本申請案之一個目標係提供一種新穎米麴黴菌菌株，其生產包含
甲硫胺酸之菌絲體。
另外，本申請案之目標係提供由該菌株生產之菌絲體。
另外，本申請案之目標係提供一種由該菌株生產菌絲體之方法。
另外，本申請案之目標係提供一種含有由該菌株生產之菌絲體的食品。
本申請案之一個態樣提供米麴黴菌CJI1100菌株(寄存號碼：KCCM13053P)，其生產具有包含甲硫胺酸之胺基酸組成的菌絲體。
本申請案之另一態樣提供由米麴黴菌CJI1100菌株生產之菌絲體。
本申請案之另一態樣提供一種用於生產菌絲體之方法，其包含以下步驟：藉由在培養基中培養米麴黴菌CJI1100菌株來生產菌絲體；並回收該菌絲體。
本申請案之另一態樣提供一種含有由米麴黴菌CJI1100菌株生產之菌絲體的食品。
在下文中，將詳細地描述本申請案。
本申請案之一個態樣提供米麴黴菌CJI1100菌株(寄存號碼：KCCM13053P)，其生產具有包含甲硫胺酸之胺基酸組成的菌絲體。
本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株係自傳統醱酵之大豆團塊分離之新穎菌株，且具有生產含有包括甲硫胺酸在內的所有種類之必需胺基酸之菌絲體的特徵。
本申請案之菌株係在2021年10月5日寄存於韓國微生物保藏中心(Korean Culture Center of Microorganisms，KCCM)且得到寄存號碼KCCM13053P。
在一個具體實例中，由本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株生產的
菌絲體之胺基酸組成包含甲硫胺酸。
在一個具體實例中，由本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株生產的菌絲體之胺基酸組成可進一步包含至少一種選自由以下者組成之群的胺基酸：離胺酸、蘇胺酸、纈胺酸、異白胺酸、白胺酸、苯丙胺酸、色胺酸及組胺酸。
在一個具體實例中，本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株含有編碼SEQ ID NO：1之18S rRNA序列的DNA序列。
在一個具體實例中，本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株不生產黃麴毒素。
本申請案之另一態樣提供由米麴黴菌CJI1100菌株生產之菌絲體。
在本申請案中，「菌絲體」共同地指真菌之菌絲以緻密纏結之狀態生長的狀態。菌絲體係真菌之營養器官，且由真菌生產之菌絲體具有高蛋白質含量。
在一個具體實例中，該菌絲體具有包含甲硫胺酸之胺基酸組成。
在一個具體實例中，該菌絲體含有甲硫胺酸，且具有進一步包含至少一種選自由以下者組成之群的胺基酸的胺基酸組成：離胺酸、蘇胺酸、纈胺酸、異白胺酸、白胺酸、苯丙胺酸、色胺酸及組胺酸。
在一個具體實例中，該菌絲體具有胺基酸組成，該胺基酸組成包含甲硫胺酸且進一步包含兩個或多於兩個、三個或多於三個、四個或多於四個、五個或多於五個、六個或多於六個、七個或多於七個或者八個或多於八個選自由以下者組成之群的胺基酸：離胺酸、蘇胺酸、纈胺酸、異白胺酸、白胺酸、苯丙胺酸、色胺酸及組胺酸。
在一個具體實例中，該菌絲體具有包含甲硫胺酸、離胺酸、蘇胺酸、纈胺酸、異白胺酸、白胺酸、苯丙胺酸、色胺酸及組胺酸之胺基酸組成。
在一個具體實例中，基於100g乾蛋白質計，該菌絲體菌絲體具有0.4g或更高、0.5g或更高、0.6g或更高、0.7g或更高、0.8g或更高、0.9g或更高、1g或更高、1.1g或更高、或1.2g或更高的甲硫胺酸(Met)含量。
在一個具體實例中，基於100g乾蛋白質計，該菌絲體具有3.5g或更高、3.6g或更高、3.7g或更高、或3.8g或更高之異白胺酸(Ile)含量。
在一個具體實例中，基於100g乾蛋白質計，該菌絲體具有4g或更高、4.1g或更高、4.2g或更高、或4.3g或更高之甘胺酸(Gly)含量。
在一個具體實例中，基於100g乾蛋白質計，該菌絲體具有至少一種選自由以下者組成之群的胺基酸含量：5g或更高、或者6g或更高的纈胺酸含量；0.5g或更高、或者1g或更高之甲硫胺酸含量；2.5g或更高、或者3.5g或更高之異白胺酸含量；5g或更高、或者6g或更高之白胺酸含量；3g或更高、或者4g或更高之苯丙胺酸含量；1.6g或更高、或者1.8g或更高之組胺酸含量；2g或更高、或者2.3g或更高之色胺酸含量；及3.5g或更高、或者4g或更高之蘇胺酸含量。
在一個具體實例中，基於100g乾蛋白質計，該菌絲體具有10g或更高、11g或更高、12g或更高、13g或更高、13.1g或更高、或者13.2g或更高之麩胺酸(Glu)含量。
在一個具體實例中，基於總乾產物重量計，乾燥菌絲體產物中之乾蛋白質含量可為30wt%至70wt%，特定言之，35wt%至70wt%、40wt%至60wt%。
在一個具體實例中，該菌絲體不含黃麴毒素(一種真菌毒素)。
本申請案之另一態樣提供一種用於生產菌絲體之方法，其包含以下步驟：藉由在培養基中培養米麴黴菌CJI1100菌株來生產菌絲體；並回收該菌絲體。
培養米麴黴菌CJI1100菌株以生產菌絲體之步驟可包含接種物製備步驟，即分離米麴黴菌CIJ1100菌株或培養孢子以獲得種子原液，且接著將種子原液接種於適當培養基中，培養並使其繁殖；以及主培養步驟，用以在液體培養基中由該接種物大量生長所希望之菌絲體。
該種子原液可為CJI1100菌株之子實體組織或孢子的培養物。
該種子原液可在適當培養基中培養及繁殖以獲得接種物。
在接種物製備步驟中，可使用營養培養基，諸如馬鈴薯右旋糖瓊脂培養基及酵母麥芽葡萄糖培養基作為培養本申請案之菌株的培養基。
藉由製備接種物並對其進行主培養，可使用純培養細菌在微生物穩定條件下製備大量菌絲。
主培養步驟係在培養基中由接種物大量生長菌絲體的步驟。
主培養可使用固體培養基或液體培養基進行。
在液體培養基中培養真菌具有以下優點：低成本、各種細菌之繁殖相對較安全、易於程序控制以及易於回收細胞外酶、菌絲體及孢子。
作為可用於本申請案中之液體培養基，可無限制地使用可用於培養用於食品之菌絲體的任何培養基，且例如，可使用PDB培養基或其等效組分。
作為液體培養基之碳源，可使用一般用於菌絲體培養之任一者，而無特別限制。舉例而言，可使用單醣、雙醣、高於三醣之多醣、澱粉及混合醣，諸如在蔗糖生產期間作為副產物產生的廢棄糖蜜。較佳地，可使用葡萄糖、麥芽糖、海帶二糖、馬鈴薯澱粉及玉米澱粉。
作為液體培養基之氮源，可使用一般在真菌之液體培養期間添加的組分，且例如，可為硫酸銨、磷酸銨、碳酸銨、乙酸銨、蛋白腖、酵母萃取物、玉米漿、酪蛋白水解產物、小麥麩、肉類萃取物及類似物。此外，可向液體培養基中添加無機鹽，諸如鉀鹽、鎂鹽、鈉鹽、磷酸鹽、錳鹽、鐵鹽及鋅鹽，且可進
一步向其中添加維生素或胺基酸。
可在主培養程序期間執行振盪培養或液體培養基攪拌。攪拌可藉由在培養容器中旋轉攪拌器執行，且該攪拌器之旋轉速度可在適當範圍內調節，例如在1rpm至300rpm範圍內調節。
此外，可將過濾空氣或壓縮空氣吹入含有液體培養基之培養容器中，由此使液體培養基與真菌菌絲體之間之接觸均勻，並增加氧氣濃度，而在固定液態下氧氣濃度可能為不足的。
培育溫度可為一般選擇用於培養真菌之溫度且不受特別限制，但其可在例如5℃至45℃、10℃至40℃、20℃至40℃、25℃至35℃之溫度範圍內適當選擇。
培養基之pH值可選自真菌培養基之一般pH值範圍，且可調至適當pH值範圍，例如在3至8之pH值範圍內。
培養時間可調至可獲得最大量菌絲體之時間，且該培養可執行例如1天至30天、1天至25天、1天至20天、1天至15天、1天至10天及1天至5天。
在回收菌絲體之步驟中，自培養基回收真菌之方法不受特別限制，且可適當地使用已知之分離方法，諸如離心、過濾分離、壓縮分離、載片培養物分離及類似分離方法。
所回收之菌絲體可本身或在乾燥之後用作肉類替代品。舉例而言，在將所回收之菌絲體的水分含量調到30%至90%、40%至80%、50%至70%及65%至70%之後，可藉由添加並混合少量調味料(seasoning)、礦物質、蛋白質補充劑或黏合材料將菌絲體直接製備為肉類替代品，或者所回收之菌絲體亦可在乾燥之後使用。乾燥方法不受特別限制且可使用已知方法，諸如自然乾燥、熱空氣乾燥、冷空氣乾燥、真空乾燥或冷凍乾燥。
所回收之菌絲體可在使用之前經歷加工。菌絲體之加工方法不受
特別限制，但例如，可使用擠出模製方法。
在擠出模製菌絲體之情況下，製造方法可進一步包含擠出模製菌絲體之步驟。在擠出模製期間，可調節原材料之組成比、原材料之輸入量、水分含量、螺桿旋轉速度及筒體加熱溫度。在擠出模製期間，可將原材料之水分含量調至適當範圍，且例如，可藉由將水分含量增加到約30%至40%來進行擠出模製。此外，可在擠出模製期間選擇適當溫度範圍及壓力範圍，且例如，可在100psi至1000psi之壓力及100℃至170℃之溫度條件下進行擠出模製。可使用冷卻模具或圓形模具將菌絲體組織成蛋白質。
本申請案之另一態樣提供一種含有菌絲體之食品。
該食品可為例如肉類、作為素肉之肉類替代品、藉由加工肉類或肉類替代品獲得的經加工之肉類產品、真菌蛋白質(黴菌蛋白質)、調味劑或蛋白質補充劑，但不限於此。
肉類替代品可藉由將礦物質、蛋白質補充劑或黏合材料添加並混合至由以上製造方法製備之菌絲體中來製備。礦物質較佳為鈣、鎂、磷酸鹽及類似物。作為蛋白質補充劑，可以使用習知肉類替代品之材料，諸如水解植物蛋白質(HVP)，例如大豆蛋白及穀物蛋白質，且亦可使用肉類，諸如牛肉或雞肉；魚類；蔬菜；堅果等。作為黏合材料，可使用卵白蛋白或類似物。除蛋白質補充劑及黏合材料外，亦可混合鈣、葡聚糖、核苷酸、含硫胺基酸、麩胺酸、澱粉、脂肪、膳食纖維及類似物，且此外，亦可混合已知之微量成分，諸如調味劑及著色劑。
該肉類可利用已知的用於生產肉類之方法，藉由使用由以上製造方法製備之菌絲體製備。
經加工之肉類產品可為火腿、香腸、醃肉、乾燥儲存之肉類、經調味之肉類、經加工之肉類萃取物、含肉加工產品及用肉類或肉類替代品加工的
經包裝之肉類。
調味劑可利用已知的用於生產調味劑之方法，藉由使用由以上製造方法製備之菌絲體製備。
蛋白質補充劑可利用已知的用於生產蛋白質補充劑之方法，藉由使用由以上製造方法製備之菌絲體製備。
本申請案之另一態樣提供一種接種物組成物，其包含米麴黴菌CJI1100菌株或其培養物。
如本文所使用，術語「接種物組成物」係指人工施加至培養對象中以開始主培養的製劑或組成物，且可包括待培養之微生物及能夠提供微生物生長必需之組分的組分。接種物組成物中所包括之微生物可為主要在培養對象中生長之微生物。
在本申請案之接種物組成物中，可包括呈該菌株的切碎之細胞壁、活細胞、孢子、乾燥之細菌或冷凍乾燥之細菌形式的米麴黴菌CJI1100菌株。
在一個具體實例中，接種物組成物可以含有1×102個孢子/毫升或更高之濃度，特定言之，1×102至1×1015個孢子/毫升之濃度、1×102至1×1013個孢子/毫升之濃度、1×102至1×1012個孢子/毫升之濃度、1×103至1010個孢子/毫升之濃度或1×103至109個孢子/毫升之濃度的米麴黴菌CJI1100菌株之孢子，但不限於此。該等孢子之濃度可取決於組成物之用途及調配物而變化。
菌株之培養物係指在培養基中接種並培養本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株的結果。特定言之，本申請案之培養物可包括藉由在培養基中培養本申請案之菌株獲得的培養物本身、藉由對該培養物過濾或離心以移除菌株而獲得的濾液、或其濃縮物。此外，本申請案之培養物可為液體或粉末，且該粉末可包括在乾燥或凍乾培養物之後得到的粉末狀產物。培養物本身可包括本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株本身、其孢子、其代謝物、其菌絲體或其培養基。
作為培養基，可無限制地使用已知之真菌培養基，諸如馬鈴薯右旋糖瓊脂培養基或胰蛋白酶大豆瓊脂培養基，且該培養基可進一步含有輔助成分，諸如維生素。由於培養基與在說明由米麴黴菌CJI1100菌株生產菌絲體之方法的培養步驟時所描述之培養基的含量相同，故調用以上含量且不再重複描述。
本申請案之接種物組成物可呈液體或粉末形式。當以粉末形式分佈時，其具有易於供應、維持品質及使用之優點。當將接種物組成物調配為粉劑、顆粒劑、錠劑或膠囊形式時，其可進一步包括常用於食品生產的適合載劑、低溫保護劑、賦形劑及稀釋劑。
根據本申請案之一個具體實例，本申請案之接種物組成物可進一步包括低溫保護劑，且更特定言之，可進一步包括至少一種選自由以下者組成之群的低溫保護劑：甘油、海藻糖、麥芽糊精、脫脂奶粉及澱粉。基於本申請案之接種物的總重量計，可含有0.01wt%至20wt%、0.01wt%至10wt%之量的本申請案之低溫保護劑。特定言之，在接種物組成物中可含有5wt%至20wt%之量的甘油，可含有2wt%至10wt%之量的海藻糖，可含有2wt%至10wt%之量的麥芽糊精，可含有0.5wt%至2wt%之量的脫脂奶粉，且可含有0.1wt%至1wt%之量的澱粉。
本申請案之接種物可進一步包括賦形劑。特定言之，該賦形劑可為選自由以下者組成之群的至少一者：葡萄糖、糊精及脫脂牛奶。更特定言之，基於本申請案之接種物的總重量計，可含有75wt%至95wt%或者85wt%至95wt%之量的賦形劑。
本申請案之另一態樣可提供一種使用該接種物組成物製備之食品。該食品可以含有該接種物組成物中所包括之米麴黴菌CJI1100菌株或由該菌株生產之菌絲體。由於該食品與在說明含有由米麴黴菌CJI1100菌株生產之菌絲體的食品時所描述之培養基的含量相同，故調用以上含量且不再重複描述。
本申請案之新穎米麴黴菌CJI1100菌株可生產含有9個種類之必需胺基酸的菌絲體。因此，含有所有必需胺基酸之菌絲體可藉由培養該菌株大量生產。此外，藉由培養該菌株獲得的菌絲體可以用作多種食品材料，包括肉類替代品或替代性蛋白質材料。
另外，由於由本申請案之菌株生產的菌絲體富含麩胺酸，產生鮮美的味道，故其有效減少在製造肉類替代品時使用之習知植物蛋白質或化學調味料的量。
然而，本申請案之作用不限於上文所提及之作用，且熟習此項技術者根據以下描述將清楚地理解其他未提及之作用。
[圖1]顯示本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株之18s rRNA序列分析的結果。在圖1中，NS1之核苷酸序列係以SEQ ID NO：2顯示，且NS8之核苷酸序列係以SEQ ID NO：3顯示，分別作為定序引子及PCR引子。
[圖2]顯示本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株之黃麴毒素生物合成基因群組的NorBCypA基因之序列分析的結果。在圖2中，片段重疊組(Contig)序列係由SEQ ID NO：4表示。
[圖3]顯示本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株之黃麴毒素生物合成基因群組的aflR基因之序列分析的結果。在圖3中，片段重疊組序列係由SEQ ID NO：5表示。
在下文中，將藉由實施例詳細描述本申請案。
然而，以下實施例僅具體說明本申請案，且本申請案之內容不受
以下實施例限制。
本申請案之真菌菌株係自傳統醱酵之大豆團塊分離。使用補充有20μg/ml氯黴素之馬鈴薯右旋糖瓊脂(PDA，Difco)作為真菌分離之培養基來分離真菌菌株。
藉由18S rRNA分析及NorBCypA基因與aflR基因(皆為產黃麴毒素之基因)之間的序列同源性來分析經分離之真菌菌株的分子生物鑑別。
如圖1中所示，由18S rRNA分析之結果證實，經分離之菌株與米麴黴菌99%一致。
另外，如圖2及圖3中所示，由經分離菌株之黃麴毒素生物合成基因群組中NorBCypA基因及aflR基因的序列分析之結果證實，該菌株與米麴黴菌一致，與已知生產黃麴毒素之黃麴黴菌(Aspergillus flavus)不一致。此外，NorBCypA基因之長度在作為生產黃麴毒素之菌株的黃麴黴菌中為800bp，但該長度在米麴黴菌中為300bp至400bp。經證實，本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株的NorBCypA係319bp長。因此，經證實，本申請案之真菌菌株中的黃麴毒素生物合成基因群組不具有能夠生產黃麴毒素之完整結構。
作為該鑑別之結果，本申請案之真菌菌株命名為麴黴屬之米麴黴菌CJI1100菌株。該菌株於2021年10月5日寄存於韓國微生物保藏中心(KCCM)，且給予寄存號碼KCCM13053P。
根據以上分子生物鑑別結果證實，本申請案之真菌菌株係具有不能生產黃麴毒素之黃麴毒素生物合成基因群組的米麴黴菌。然而，為了保證安全
性，再經由黃麴毒素之實際生產情況對其進行驗證。將在-80℃下保存於甘油原液中的米麴黴菌CJI1100菌株之孢子鋪展於PDA培養基上並在30℃下培育5天。接著，藉由用含有0.05% Tween 80之鹽水溶液洗滌來回收孢子。藉由在121℃滅菌15分鐘來準備大豆，接種孢子且接著在30℃下培育5天。將以此方式獲得的大豆培養物在45℃下乾燥48小時，且接著粉碎，製備出分析樣本。在自分析樣本中萃取並純化出黃麴毒素之後，經由液相層析法量測總黃麴毒素含量。
作為量測總黃麴毒素以檢查菌株之安全性的結果，由於未偵測到黃麴毒素，故可以證實本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株不生產黴菌毒素。
將在-80℃下保存於甘油原液中的米麴黴菌CJI1100菌株及我們公司擁有之菌株(CJI1130、CJI1140、CJI1333、CJT1105、CJI1126、CJT1050)的孢子分別鋪展於PDA培養基上，並在30℃下培育5天。接著，用含有0.05% Tween 80之鹽水溶液回收孢子。此外，使用生產真菌菌絲體的鑲片鐮孢黴菌(Fusarium Venenatum)ATCC20334菌株作為比較菌株。對回收之孢子溶液適當稀釋並經由顯微鏡對孢子計數。
使用500ml錐形瓶進行真菌之液體培養。對於真菌之液體培養，將200ml馬鈴薯右旋糖培養基(PDB，Difco)放入500ml錐形瓶中，且接著在121℃滅菌15分鐘。將實施例[3-1]中計數之各菌株的真菌孢子接種於PDB培養基
中，達到1×104至105個孢子/毫升之濃度，並在30℃及120rpm下培養5天。用過濾器組合件(Nasco)過濾真菌培養溶液之後，回收所生產之菌絲體並將其用鹽水溶液洗滌三次以獲得真菌菌絲體，自該真菌菌絲體移除培養基來源之組分。
量測總氮含量以測定蛋白質含量。使用凱氏定氮法(Kjeldahl Method)量測總氮含量。當藉由將硫酸添加至實施例3-2中獲得的真菌菌絲體中並藉由加熱濃縮，將有機氮分解成銨鹽時，向其中添加鹼溶液並將自由NH3收集於酸性溶液中。藉由滴定酸性溶液中吸收之NH3來量測總氮含量。用所量測之總氮值乘以6.25之氮因數來計算粗蛋白質含量。
對本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株及我們公司擁有之六種米麴黴菌比較菌株(CJI1130、CJI1140、CJI1333、CJT1105、CJI1126、CJT1050)以及比較菌株鑲片鐮孢黴菌ATCC20334生產的菌絲體之蛋白質含量進行評價。結果顯示於表2中。
由量測結果證實，由真菌菌株生產之菌絲體的乾產物含有約40wt%至60wt%的蛋白質。
在酸水解所回收之真菌菌絲體之後，使用胺基酸分析儀量測菌絲體之胺基酸組成。將量測之胺基酸值轉化成100g乾蛋白質之公克數並比較含量。
對由與本申請案之米麴黴菌CJI1100菌株同源及同質的6個種類之米麴黴菌比較菌株(CJI1130、CJI1140、CJI1333、CJT1105、CJI1126、CJT1050)以及比較菌株鑲片鐮孢黴菌ATCC20334菌株生產的菌絲體之胺基酸組成進行評價。
如表3中所示，經證實，由本申請案之CJI1100菌株生產的菌絲體具有含所有必需胺基酸之胺基酸組成。當與該六種米麴黴菌比較菌株相比較時，經證實，僅米麴黴菌CJI1100菌株之菌絲體含有必需胺基酸甲硫胺酸。當與鑲片鐮孢黴菌ATCC20334相比較時，亦證實由米麴黴菌CJI1100菌株生產之菌絲體中必需胺基酸纈胺酸、甲硫胺酸、異白胺酸、白胺酸、苯丙胺酸、組胺酸、色胺酸及蘇胺酸之含量較高。
此外，為評價蛋白質品質，藉由用每公克真菌菌絲體蛋白質中各
必需胺基酸之含量(mg)除以每公克參考蛋白質中相同必需胺基酸之含量(mg)來計算胺基酸評分(AAS)值。胺基酸評分係藉由下式計算：AAS=(1g蛋白質中AA之毫克數)/(需求模式中AA之毫克數)。參考蛋白質中每公克蛋白質的各必需胺基酸之含量(mg)稱為胺基酸需求模式，且參考蛋白質可為卵蛋白，且每公克參考蛋白質中必需胺基酸之含量可使用WHO提出之值。WHO 2007標準稱為胺基酸需求模式。胺基酸評分值係基於1.0，且小於1.0之胺基酸定義為限制性胺基酸。
計算由米麴黴菌CJI1100及鑲片鐮孢黴菌ATCC20334生產之菌絲體之胺基酸評分的結果顯示於下表4中。
已發現，在由米麴黴菌CJI1100菌株生產之菌絲體的胺基酸組成中，由於甲硫胺酸及胞嘧啶(Met+Cys)之胺基酸評分值小於1.0，故Met+Cys為限制性胺基酸，但除此等胺基酸外的所有必需胺基酸之胺基酸評分皆超過1.0，因此其滿足該標準。由於米麴黴菌CJI1100菌株生產之菌絲體含有所有種類之必需胺基酸，故其可經由培養基及培養條件之最佳化而改良為完整蛋白質形式。
在調節水分含量以使得實施例3-2中獲得的本申請案之菌株之菌
絲體的水分含量係40%之後，使用冷卻模具，在100psi至1000psi之壓力及100℃至170℃之溫度條件下執行擠出模製，由此製備出可用於食品之菌絲體。
藉由將少量鹽、糖、胡椒、米粉及類似物添加至本申請案之菌絲體中來製備肉類替代品。
特定言之，在調節水分含量以使得實施例3-2中獲得的本申請案之菌株之菌絲體的水分含量係65%至70%之後，向其中添加0.81%鹽、0.1%黑胡椒、0.51%大蒜粉、1.52%白糖、0.81%芥花油、0.3%肉味香精及5.87%米粉，製備出肉類替代品。
使用以上實施例5中製備之肉類替代品來製備醃肉。特定言之，將所製備之肉類替代品模製成2吋厚度之寬盤形狀。接著，將其薄薄地切成易於加工醃肉的大小。將切片的菌絲體片在具有1%至5%鹽度之鹽溶液中酸洗，接著用鹽、糖、椰子油及甜菜汁著色，並添加煙熏液以製備煙熏味的鮮美醃肉。
其係根據常用植物蛋白質製造方法(韓國食品研究所(Korea Food Research Institute)，使用高級真菌及應用研究開發新穎功能性食品材料(Development of new functional food materials using higher fungi and application research)，最終研究報告(Final research report)，農業與林業部(Ministry of Agriculture and Forestry)，2002年11月18日)進行。在以40%、30%及30%之比率混合以上實施例3-2中製備之菌絲體、玉米殼及卵白之後，使用冷卻模具，以與
以上實施例4中相同的方式進行擠出模製以獲得黴菌蛋白質。
此外，根據習知肉類替代品(人造肉)製造方法製造肉類替代品，在該方法中，將澱粉、水、樹膠、乳化劑及類似物添加至本申請案之黴菌蛋白質的蛋白質材料中，並在高溫及高壓下進行擠出模製以獲得纖維組織。特定言之，藉由添加50wt%實施例5中製備的本申請案之黴菌蛋白質並添加少量調味料、香辛料、著色劑及類似物來製備肉類替代品。
將實施例3-2中製備之菌絲體乾燥並製成粉末，且製備移除腸之鳳尾魚、經洗滌且切好之海帶及海藻。將20wt%的鳳尾魚、20wt%的海帶及20wt%的海藻添加至100wt%水中，並在100℃下加熱，直至水量減少至1/2，由此獲得熱水萃取物。將鳳尾魚、海帶及海藻浸入熱水萃取物中12小時之後，對其進行乾燥並製成粉末。將65wt%的粉末狀菌絲體、10wt%的鳳尾魚粉末、10wt%的海帶粉末及5wt%的海藻粉末混合，製備出天然肉味調味劑。
在上文中，已示例性描述本申請案之代表性實施例，但本申請案之範圍不限於如上文所描述之特定實施例，且熟習此項技術者將能夠在本申請案之申請專利範圍中所描述之範圍內作出適當改變。
國外寄存機構：韓國微生物保藏中心
寄存號碼：KCCM13053P
寄存日期：20211005
TWI846146B_111143782_SEQL.xml
Claims (17)
- 一種米麴黴菌(Aspergillus oryzae)CJI1100菌株(寄存號碼：KCCM13053P)，其生產菌絲體，該菌絲體具有包含甲硫胺酸之胺基酸組成。
- 如請求項1之米麴黴菌CJI1100菌株(寄存號碼：KCCM13053P)，其中該米麴黴菌CJI1100菌株含有編碼SEQ ID NO：1之18S rRNA序列的DNA序列。
- 如請求項1之米麴黴菌CJI1100菌株(寄存號碼：KCCM13053P)，其中該胺基酸組成進一步包含至少一種選自由以下者組成之群的胺基酸：離胺酸、蘇胺酸、纈胺酸、異白胺酸、白胺酸、苯丙胺酸、色胺酸及組胺酸。
- 如請求項1之米麴黴菌CJI1100菌株(寄存號碼：KCCM13053P)，其中該米麴黴菌CJI1100菌株不生產黃麴毒素。
- 一種菌絲體，其由如請求項1至請求項4中任一項之米麴黴菌CJI1100菌株(寄存號碼：KCCM13053P)所生產。
- 如請求項5之菌絲體，其中該菌絲體具有包含甲硫胺酸之胺基酸組成。
- 如請求項6之菌絲體，其中該胺基酸組成進一步包含至少一種選自由以下者組成之群的胺基酸：離胺酸、蘇胺酸、纈胺酸、異白胺酸、白胺酸、苯丙胺酸、色胺酸及組胺酸。
- 如請求項5之菌絲體，其中該菌絲體不含黃麴毒素。
- 如請求項5之菌絲體，其中基於總乾產物重量計，乾燥之菌絲體產物中的蛋白質含量以重量計為30wt%至70wt%。
- 一種用於生產菌絲體之方法，其包含以下步驟：藉由在培養基中培養米麴黴菌CJI1100菌株(寄存號碼：KCCM13053P)來生產菌絲體；並回收所生產之菌絲體。
- 如請求項10之用於生產菌絲體之方法，其中該回收菌絲體之步驟包含過濾該菌株之培養溶液的步驟。
- 如請求項10之用於生產菌絲體之方法，其進一步包含擠出並模製所回收之菌絲體的步驟。
- 一種食品，其含有由如請求項1至請求項4中任一項之米麴黴菌CJI1100菌株生產的菌絲體。
- 如請求項13之食品，其中該食品係肉類替代品、從該肉類替代品加工之肉類產品、真菌蛋白質(黴菌蛋白質)、調味劑或蛋白質補充劑。
- 一種接種物組成物，其包含米麴黴菌CJI1100菌株(寄存號碼：KCCM13053P)或其培養物。
- 如請求項15之接種物組成物，其中該接種物組成物包含102個孢子/毫升或更高濃度的該米麴黴菌CJI1100菌株(寄存號碼：KCCM13053P)之孢子。
- 如請求項15之接種物組成物，其中該接種物組成物進一步包含至少一種選自由以下者組成之群的低溫保護劑：甘油、海藻糖、麥芽糊精、脫脂奶粉及澱粉。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR10-2021-0157491 | 2021-11-16 | ||
| KR1020210157491A KR20230071371A (ko) | 2021-11-16 | 2021-11-16 | 모든 종류의 필수 아미노산을 포함하는 균사체를 생성하는 아스퍼질러스 오리제 균주 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW202325834A TW202325834A (zh) | 2023-07-01 |
| TWI846146B true TWI846146B (zh) | 2024-06-21 |
Family
ID=
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 期刊 Elena M. Serba et al. Bioconversion of soy under the influence of Aspergillus oryzae strains producing hydrolytic enzymes Foods and Raw Materials 2021 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4628482B2 (ja) | キノコ菌糸体を用いた肉類似物の製造方法、これにより製造された肉類似物、肉類似物を含む低カロリーの代用肉、肉香味料、および肉香味増強物 | |
| US4265915A (en) | Protein-containing food material | |
| CN113412932A (zh) | 一种食用菌丝蛋白加工方法及应用 | |
| EP2368444A1 (en) | Yeast extract with high glutamic acid content and producing method thereof | |
| CN109401983B (zh) | 一种米曲霉za151及其应用 | |
| CN111493292B (zh) | 一种以海洋生物和/或海产品加工废弃物为原料制备精膏的方法 | |
| CN114591850A (zh) | 酿酒酵母cmrc 5s及其应用 | |
| IL309261A (en) | Methods for the production of micellar biomass from date extract | |
| CN1219052C (zh) | 一种产细菌素的米酒乳杆菌菌株及其用法 | |
| TWI846146B (zh) | 能夠生產包含所有種類的必需胺基酸之菌絲體的米麴黴菌（aspergillus oryzae） | |
| JP7433800B2 (ja) | 麹菌の液体組織培養物の製造および利用方法 | |
| Anbuselvi et al. | A comparative study on biochemical constituents of sweet potatoes from Orissa and Tamilnadu and its curd formation | |
| KR101976503B1 (ko) | 마의 잎을 포함하는 알코올 발효 촉진용 배지 조성물 및 이를 이용한 마잎 발효주 | |
| JP7503537B2 (ja) | キノコ菌糸体を用いた食品素材 | |
| KR0137063B1 (ko) | 순수배양 버섯균을 이용한 발효식품의 제조방법 | |
| CN113163823B (zh) | 含丹贝酱料的制造方法及通过该方法制造的酱料 | |
| TW202325834A (zh) | 能夠生產包含所有種類的必需胺基酸之菌絲體的米麴黴菌（aspergillus oryzae） | |
| CN104041804B (zh) | 一种酱制品风味增强发酵液的制备方法 | |
| CN111067079A (zh) | 一种虾头壳废弃物制作调味品方法 | |
| CN116162554B (zh) | 一株间型脉胞菌菌株及其在替代蛋白中的应用 | |
| CN116622526B (zh) | 一株米根霉菌株及其在生产菌丝体蛋白中的应用 | |
| JPS6214759A (ja) | 食品素材の製造方法 | |
| CN114606138B (zh) | 菌株和酶在制备保健酱油中的应用及制备方法 | |
| Saguibo et al. | Low-cost Media from Agro-industrial Wastes for the Cultivation and Metabolite Production of Lactic Acid Bacteria. | |
| Sadler | Fungal protein |