CN111493292B - 一种以海洋生物和/或海产品加工废弃物为原料制备精膏的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种以海洋生物和/或海产品加工废弃物为原料制备精膏的方法,本发明以海洋生物和/或海产品加工废弃物为原料,特别是鱿鱼下脚料为原料,依次经自溶酶水解、优选外源酶水解和发酵处理,有效的将鱿鱼下脚料中的营养成分转化为有利于人体吸收的成分,并将蛋白水解液的苦腥味脱除。本发明所制备的鱿鱼精膏具有独特的发酵香以及鱿鱼原始的鲜香气息,香气诱人、口感鲜美、留香持久;可作为食品的调味剂,赋予食品浓郁的鱿鱼风味。
Description
技术领域
本发明涉及海产品加工技术领域,具体涉及一种以海洋生物和/或海产品加工废弃物为原料制备精膏的方法。
背景技术
近年来,随着国内外深海捕捞技术的发展,鱿鱼已成为我国主要的海洋捕捞和水产加工品种。在鱿鱼的加工过程中,一般对其胴体进行加工,鱿鱼内脏、鱿鱼眼及表皮等下脚料产出量约有35%。而鱿鱼加工方法仍是粗放型的,除部分下脚料加工成鱼粉外,其他的一般都采用掩埋处理。因此,许多生产企业和学者们试图开发和利用鱿鱼加工后的下脚料。除可变废为宝、减少浪费和环境污染外,还可极大的提升鱿鱼加工产品的经济价值,从而形成海洋生物技术加工的新型产业链。
在鱿鱼加工处理所产生的下脚料中,鱿鱼内脏占其中很大的比例,虽然是鱿鱼加工过程中产生的废物,但是其所含营养却是相当丰富的,鱿鱼内脏中所含的蛋白质达百分二十左右,脂肪含量和蛋白质相当;除此之外,还富含人体所需的氨基酸、牛磺酸以及一些微量元素。这表明鱿鱼下脚料有很大的开发潜力。但在实际开发应用过程中却存在诸多的问题,第一,鱼蛋白在水解后功能和营养价值大幅提高,但其在水解过程中会不可避免的产生不同程度的苦味,且水产品本身也有腥味,这严重限制了其在食品工业中的推广应用;第二,目前将鱿鱼下脚料加工制成饲料的较多,因为其含有丰富的氨基酸,另外,也有将鱿鱼内脏制成酱油和天然调味品的,但在我国,让消费者接受鱿鱼内脏产品仍然是一个不小的挑战,这要求鱿鱼内脏产品只有具有更优的口感和更高的营养价值才会被广大消费者所接受,因此对产品品质的要求更高。
发明内容
针对上述现有技术,本发明的目的是提供一种以海洋生物和/或海产品加工废弃物为原料制备精膏的方法,特别是用鱿鱼下脚料为原料制备鱿鱼精膏的方法。本发明以鱿鱼下脚料为原料,依次经自溶酶水解、优选外源酶水解和发酵处理,有效的将鱿鱼下脚料中的营养成分转化为有利于人体吸收的成分,并将蛋白水解液的苦腥味脱除。本发明所制备的鱿鱼精膏具有独特的发酵香以及鱿鱼原始的鲜香气息,香气诱人、口感鲜美、留香持久;可作为食品的调味剂,赋予食品浓郁的鱿鱼风味。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种以海洋生物和/或海产品加工废弃物为原料制备精膏的方法,包括以下步骤:
(1)将鱿鱼下脚料洗涤、沥水,加入鱿鱼下脚料重量4-6%的食用盐,搅拌均匀,研磨成浆液;向浆液中加入羟脯氨酸和蒸馏水,混合均匀,调节混合液的pH为5.5-6.5,在40-45℃、超声处理条件下自溶酶水解4-8h,自溶酶水解结束后加热灭酶,得到自溶浆液;将自溶浆液离心,分离上清液和沉淀,收集上清液,作为鱿鱼下脚料自溶酶水解液;
(2)向步骤(1)离心分离后的沉淀中加入蒸馏水,分散均匀,调节分散液的pH为6.5-7.5;向分散液中加入胰蛋白酶和酵母蛋白酶,在35-40℃条件下酶解1-2h,酶解结束后加热灭酶,作为鱿鱼下脚料外源酶水解液;
(3)将鱿鱼下脚料自溶酶水解液和鱿鱼下脚料外源酶水解液混合,调节混合后的水解液的pH为6.0-6.5,接入植物乳杆菌和产朊假丝酵母进行发酵处理,发酵结束后,将发酵液浓缩,制备得到鱿鱼精膏。
优选的,步骤(1)中,所述浆液与蒸馏水加入的体积比为1:2;所述羟脯氨酸的加入量为浆液重量的0.5-1%。
优选的,步骤(1)中,所述超声处理的功率为200-240W。
鱿鱼下脚料特别是鱿鱼内脏自溶是一个多因素共同作用的复杂过程,温度、pH值、料液比、水解时间、超声处理等都会对自溶过程产生影响。本发明研究发现,在鱿鱼下脚料研磨打浆时加入一定量的食用盐,一方面有利于研磨的均匀,另一方面,也有利于后续的自溶酶水解过程;另外,在200-240W超声功率条件下,超声处理对自溶和水解均有促进作用,但当超声功率超过240W时,功率增加会对自溶产生抑制作用;羟脯氨酸的加入则会对自溶产生明显的促进作用,推测羟脯氨酸可以作为鱿鱼内源酶的激活剂,通过适量羟脯氨酸的加入,可以影响鱿鱼内源酶的活性,促进鱿鱼内脏的自溶过程,有利于蛋白质的深度水解。
优选的,步骤(2)中,所述沉淀与蒸馏水加入量的比为1g:(4-8)ml。
优选的,步骤(2)中,所述胰蛋白酶的加入量为分散液重量的0.1-1%;所述酵母蛋白酶的加入量为分散液重量的0.5-1%。
在外源酶水解过程中,本发明优选胰蛋白酶和酵母蛋白酶进行酶解反应,其可以对蛋白质进行定位水解产生特定要求的肽,作用条件温和,对蛋白质营养价值无破坏作用,反应中无有毒、有害物质产生,且水解速度和水解程度可灵活控制。
优选的,步骤(3)中,所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母是以活化后的混合种子液的形式接入,混合种子液中,植物乳杆菌的活菌数为3×108CFU/ml,产朊假丝酵母的活菌数为1×108CFU/ml。
进一步的,所述混合种子液的接种量为1-2%(体积分数)。
优选的,步骤(3)中,所述发酵处理的条件为:在35-40℃条件下先震荡培养12-24h,然后再静置培养24-48h。
无论是自溶酶水解还是外源酶水解,在水解蛋白质过程中都会产生苦味肽而引起苦味。本发明选择添加微生物,通过发酵作用对苦味肽加以利用、降解,以达到脱苦的目的。本发明所选择的植物乳杆菌和产朊假丝酵母,这两种菌株之间具有协同增效作用,其在共同发酵的过程中能够利用各种腥苦物质进行新陈代谢,以及将腥苦物质进行转化,有效去除了鱿鱼下脚料的苦腥味。
本发明的第二方面,提供上述方法制备的鱿鱼精膏。
本发明的第三方面,提供上述鱿鱼精膏在制备食品调味剂中的用途。
本发明的第四方面,提供一种食品调味剂,包含:上述鱿鱼精膏和鱿鱼香基;所述鱿鱼香基由以下重量份的原料制成:
十六酸2份、反式-9-十八烯酸1.6份、10-羟基-2-葵烯酸0.1份、十六酸乙酯0.1份、9-葵烯酸0.1份、十二烷0.3份、辛酸0.1份、杜松醇0.1份、乙酸丁酯2份、大豆油70份。
本发明精选食品用香料原料,经过反复多次试验,调配出具有鱿鱼风味的鱿鱼香基;将上述鱿鱼精膏和鱿鱼香基搅拌混合后进行灭菌处理,即可制备得到食品调味剂。本发明制备的食品调味剂能够赋予食品浓郁、逼真的鱿鱼风味,并能耐一定高温。
本发明的有益效果:
(1)本发明以鱿鱼下脚料为原料,结合原料自身特点,本发明采用自溶酶水解和外源酶水解相结合的方式来获取鱿鱼下脚料中的有价值成分,并对水解条件进行了优化处理,从而有效的将鱿鱼下脚料中的营养成分转化为有利于人体吸收的成分;针对水解液中所含有的苦味物质以及鱿鱼下脚料本身的腥味,本发明采用发酵的方式将腥苦味去除,有效改善了产品的口感。
(2)采用本发明方法所制备的鱿鱼精膏,其蛋白质含量高、氨基酸成分齐全,具有独特的发酵香及鱿鱼原始的鲜香气息,香气诱人、口感鲜美、留香持久;可作为食品的调味剂,赋予食品浓郁的鱿鱼风味;并且具有体外抗氧化活性,是有利于人体健康的营养食品。
具体实施方式
应该指出,以下详细说明都是例示性的,旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明,本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
正如背景技术部分所介绍的,开发和利用鱿鱼加工后的下脚料,可变废为宝、减少浪费和环境污染外,还可极大的提升鱿鱼加工产品的经济价值。但在实际开发应用过程中存在苦腥味难以去除、由于开发的产品不易被消费者接受而导致对产品品质要求高等问题。
基于此,本发明开发了一种新的用鱿鱼下脚料为原料制备鱿鱼精膏的方法。本发明以鱿鱼下脚料为原料,结合原料自身特点,采用自溶酶水解和外源酶水解相结合的方式来获取鱿鱼下脚料中的有价值成分。其中:本发明首先利用鱿鱼内脏中自身的蛋白酶对鱿鱼下脚料进行水解,从而可以提取得到抗氧化肽等有效成分;再将自溶酶水解后的物料通过优选的外源酶进行水解处理,可以通过控制作用条件对蛋白质进行定位水解产生特定要求的肽及氨基酸。本发明首次通过自溶酶水解和外源酶水解相配合,最大限度的将鱿鱼下脚料中有价值的营养成分提取出来。
进一步的,为脱除鱿鱼下脚料本身的腥味,以及在蛋白水解过程中所产生的苦味物质,本发明选择采用生物脱除法,但不同种类的微生物的性能是存在差异的,本发明通过对多种菌株的考察,结果发现:将植物乳杆菌和产朊假丝酵母这两种菌株进行复合发酵,菌株之间不仅不存在拮抗作用,反而能够协同增效,通过发酵的过程有效的将腥苦物质脱除,改善了产品的口感。
对于植物乳杆菌和产朊假丝酵母的混合发酵过程,本发明采用先震荡培养、后静置培养的方式,前期震荡培养能够实现快速増菌,后期静置培养可以降低能耗,并且有利于代谢产物的生成。在共同发酵的过程中,植物乳杆菌和产朊假丝酵母所产生的一些代谢活性物质能够互为对方所需的营养物质,从而共同促进植物乳杆菌和产朊假丝酵母的生长。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本申请的技术方案,以下将结合具体的实施例详细说明本申请的技术方案。
本发明实施例和对比例中所用的试验材料均为本领域常规的试验材料,均可通过商业渠道购买得到。其中:
鱿鱼下脚料包括:鱿鱼内脏、鱿鱼眼和鱿鱼皮,鱿鱼内脏占鱿鱼下脚料重量的60%-70%。
植物乳杆菌和产朊假丝酵母均来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC),植物乳杆菌的编号为CICC21794,产朊假丝酵母的编号为CICC31494。
胰蛋白酶的酶活不低于2500U/mg;酵母蛋白酶的酶活不低于1500U/mg,均为市售产品。
实施例1:用鱿鱼下脚料为原料制备鱿鱼精膏
(1)将鱿鱼下脚料用清水洗涤、沥水,加入鱿鱼下脚料重量5%的食用盐,搅拌均匀,研磨成浆液;向浆液中加入L-羟脯氨酸和蒸馏水,所述浆液与蒸馏水加入的体积比为1:2;所述L-羟脯氨酸的加入量为浆液重量的0.8%,混合均匀,调节混合液的pH为6.0,在42℃、超声功率200W的条件下自溶酶水解6h,自溶酶水解结束后加热至100℃灭酶,得到自溶浆液;将自溶浆液离心,分离上清液和沉淀,收集上清液,作为鱿鱼下脚料自溶酶水解液。
(2)向步骤(1)离心分离后的沉淀中加入蒸馏水,所述沉淀与蒸馏水加入量的比为1g:6ml,分散均匀,调节分散液的pH为7.0;向分散液中加入胰蛋白酶和酵母蛋白酶,胰蛋白酶的加入量为分散液重量的0.5%;所述酵母蛋白酶的加入量为分散液重量的1%,在37℃条件下酶解1.5h,酶解结束后加热灭酶,作为鱿鱼下脚料外源酶水解液。
(3)将上述步骤(1)制备的鱿鱼下脚料自溶酶水解液和步骤(2)制备的鱿鱼下脚料外源酶水解液混合,调节混合后的水解液的pH为6.0,按体积比为1.5%接入植物乳杆菌和产朊假丝酵母活化后的混合种子液的进行发酵处理,混合种子液中,植物乳杆菌的活菌数为3×108CFU/ml,产朊假丝酵母的活菌数为1×108CFU/ml;所述发酵处理的条件为:在35℃条件下先震荡培养12h,然后再静置培养24h,发酵结束后,离心,分离上清作为发酵液,将发酵液浓缩至相对密度为1.20(50℃测),制备得到鱿鱼精膏。
上述方法中,pH调节为本领域的常规调节方式,用于调节pH的酸为HCl,碱为NaOH,至于调节过程,在此不再赘述说明。
实施例2:用鱿鱼下脚料为原料制备鱿鱼精膏
(1)将鱿鱼下脚料用清水洗涤、沥水,加入鱿鱼下脚料重量4%的食用盐,搅拌均匀,研磨成浆液;向浆液中加入L-羟脯氨酸和蒸馏水,所述浆液与蒸馏水加入的体积比为1:2;所述羟脯氨酸的加入量为浆液重量的0.5%,混合均匀,调节混合液的pH为5.5,在40℃、超声功率200W的条件下自溶酶水解8h,自溶酶水解结束后加热至100℃灭酶,得到自溶浆液;将自溶浆液离心,分离上清液和沉淀,收集上清液,作为鱿鱼下脚料自溶酶水解液。
(2)向步骤(1)离心分离后的沉淀中加入蒸馏水,所述沉淀与蒸馏水加入量的比为1g:4ml,分散均匀,调节分散液的pH为6.5;向分散液中加入胰蛋白酶和酵母蛋白酶,胰蛋白酶的加入量为分散液重量的0.1%;所述酵母蛋白酶的加入量为分散液重量的1%,在35℃条件下酶解2h,酶解结束后加热灭酶,作为鱿鱼下脚料外源酶水解液。
(3)将上述步骤(1)制备的鱿鱼下脚料自溶酶水解液和步骤(2)制备的鱿鱼下脚料外源酶水解液混合,调节混合后的水解液的pH为6.5,按体积比为1.0%接入植物乳杆菌和产朊假丝酵母活化后的混合种子液的进行发酵处理,混合种子液中,植物乳杆菌的活菌数为3×108CFU/ml,产朊假丝酵母的活菌数为1×108CFU/ml;所述发酵处理的条件为:在40℃条件下先震荡培养12h,然后再静置培养48h,发酵结束后,离心,分离上清作为发酵液,将发酵液浓缩至相对密度为1.20(50℃测),制备得到鱿鱼精膏。
实施例3:用鱿鱼下脚料为原料制备鱿鱼精膏
(1)将鱿鱼下脚料用清水洗涤、沥水,加入鱿鱼下脚料重量6%的食用盐,搅拌均匀,研磨成浆液;向浆液中加入L-羟脯氨酸和蒸馏水,所述浆液与蒸馏水加入的体积比为1:2;所述羟脯氨酸的加入量为浆液重量的1.0%,混合均匀,调节混合液的pH为6.5,在45℃、超声功率240W的条件下自溶酶水解4h,自溶酶水解结束后加热至100℃灭酶,得到自溶浆液;将自溶浆液离心,分离上清液和沉淀,收集上清液,作为鱿鱼下脚料自溶酶水解液。
(2)向步骤(1)离心分离后的沉淀中加入蒸馏水,所述沉淀与蒸馏水加入量的比为1g:8ml,分散均匀,调节分散液的pH为7.5;向分散液中加入胰蛋白酶和酵母蛋白酶,胰蛋白酶的加入量为分散液重量的1.0%;所述酵母蛋白酶的加入量为分散液重量的0.5%,在40℃条件下酶解1.0h,酶解结束后加热灭酶,作为鱿鱼下脚料外源酶水解液。
(3)将上述步骤(1)制备的鱿鱼下脚料自溶酶水解液和步骤(2)制备的鱿鱼下脚料外源酶水解液混合,调节混合后的水解液的pH为6.0,按体积比为2.0%接入植物乳杆菌和产朊假丝酵母活化后的混合种子液的进行发酵处理,混合种子液中,植物乳杆菌的活菌数为3×108CFU/ml,产朊假丝酵母的活菌数为1×108CFU/ml;所述发酵处理的条件为:在40℃条件下先震荡培养24h,然后再静置培养24h,发酵结束后,离心,分离上清作为发酵液,将发酵液浓缩至相对密度为1.20(50℃测),制备得到鱿鱼精膏。
对比例1:
(1)将鱿鱼下脚料用清水洗涤、沥水,加入鱿鱼下脚料重量5%的食用盐,搅拌均匀,研磨成浆液;向浆液中加入蒸馏水,所述浆液与蒸馏水加入的体积比为1:2,混合均匀,调节混合液的pH为6.0,在42℃、超声功率200W的条件下自溶酶水解6h,自溶酶水解结束后加热至100℃灭酶,得到自溶浆液;将自溶浆液离心,分离上清液和沉淀,收集上清液,作为鱿鱼下脚料自溶酶水解液。
(2)调节上述步骤(1)制备的鱿鱼下脚料自溶酶水解液的pH为6.0,按体积比为1.5%接入植物乳杆菌和产朊假丝酵母活化后的混合种子液的进行发酵处理,混合种子液中,植物乳杆菌的活菌数为3×108CFU/ml,产朊假丝酵母的活菌数为1×108CFU/ml;所述发酵处理的条件为:在35℃条件下先震荡培养12h,然后再静置培养24h,发酵结束后,离心,分离上清作为发酵液,将发酵液浓缩至相对密度为1.20(50℃测),制备得到鱿鱼精膏。
对比例2:
(1)将鱿鱼下脚料用清水洗涤、沥水,加入鱿鱼下脚料重量5%的食用盐,搅拌均匀,研磨成浆液;向浆液中加入蒸馏水,所述浆液与蒸馏水加入的体积比为1:2,混合均匀,调节混合液的pH为6.0,加入胰蛋白酶和酵母蛋白酶,胰蛋白酶的加入量为分散液重量的0.1%;所述酵母蛋白酶的加入量为分散液重量的1%,在35℃条件下酶解2h,酶解结束后加热灭酶,作为鱿鱼下脚料外源酶水解液。
(2)调节上述步骤(1)制备的鱿鱼下脚料外源酶水解液的pH为7.0,按体积比为1.5%接入植物乳杆菌和产朊假丝酵母活化后的混合种子液的进行发酵处理,混合种子液中,植物乳杆菌的活菌数为3×108CFU/ml,产朊假丝酵母的活菌数为1×108CFU/ml;所述发酵处理的条件为:在35℃条件下先震荡培养12h,然后再静置培养24h,发酵结束后,离心,分离上清作为发酵液,将发酵液浓缩至相对密度为1.20(50℃测),制备得到鱿鱼精膏。
试验例1:鱿鱼精膏的氨基酸组成分析
取部分实施例1-实施例3、对比例1-对比例2制备的鱿鱼精膏分别进行冷冻干燥,得到冷冻干燥粉。分别称取10mg上述实施例1-实施例3、对比例1-对比例2制备的鱿鱼精膏的冷冻干燥粉,用15ml的6mol/L的HCl溶解,然后在氮气保护下110℃水解22h,冷却,转移至25mL的容量瓶中,定容。取出1mL在55℃下氮气吹干,加入1mL蒸馏水复溶,再吹干,反复3次。最后用1mL去离子水(含0.02mol/L HCl)溶解,混匀,0.45μm滤膜过滤,取滤液20μL上氨基酸自动分析仪进行分析。
不同方法制备的鱿鱼精膏的氨基酸组成分析结果见表1。
表1:氨基酸组成分析结果
注:Trp在酸性条件下被破坏,未检测。
由表1可以看出,本发明实施例所制备的鱿鱼精膏中,除色氨酸外,含有人体所需的必需氨基酸,且必需氨基酸所占的比例较高;其次,还含有丰富的呈味氨基酸(谷氨酸和甘氨酸),能够赋予鱿鱼精膏特别的风味;再次,与对比例1和对比例2相比,本发明实施例制备的鱿鱼精膏中所含的Val、Leu和Phe的比例较高,这些氨基酸本身具有一定的抗氧化作用,因此,由这些氨基酸组成的肽类具有更强的抗氧化活性。
试验例2:鱿鱼精膏的体外抗氧化性测定
羟自由基清除能力测定:
分别取实施例1-实施例3、对比例1-对比例2制备的鱿鱼精膏用去离子水制成浓度为1.0mg/ml的样品溶液。
将1.0mL 0.75mM邻二氮菲溶液、2.0mL pH=7.4的磷酸盐缓冲液和1.0mL 0.75mMFeSO4溶液混合,然后加入1.0mL上述制备的样品溶液,剧烈混匀,加入1.0mL 0.12%(V/V)H2O2,37℃下水浴60min,用蒸馏水调零,测定样品在536nm处的吸光值(As),根据下面公式计算羟自由基清除率:
式中,Ap表示用等体积去离子水代替样品溶液按如上操作后测得的吸光值;Ab表示用等体积去离子水代替样品溶液和0.12%(V/V)H2O2按如上操作后测得的吸光值。
鱿鱼精膏的体外抗氧化性测定结果见表2。
表2:体外抗氧化性测定结果
组别 | 羟自由基清除率(%) |
实施例1 | 92 |
实施例2 | 81 |
实施例3 | 85 |
对比例1 | 70 |
对比例2 | 58 |
羟自由基是最为活跃的一种自由基,易与体内细胞和组织内物质发生反应,甚至能直接引起DNA损伤,对人体健康产生危害。因此,羟自由基清除能力是评价抗氧化剂发挥抗氧化性能的一个重要指标。
羟自由基清除能力和水解液中肽分子量大小和氨基酸组成有着密切的关系。由表2可以看出,通过自溶酶水解和外源酶水解相结合的方式所获得的水解液,其羟自由基清除能力要显著优于采用单一方式所获得的水解液,自溶酶水解和外源酶水解在提高羟自由基清除能力方面具有协同增效作用。
试验例3:感官评定
对实施例1-实施例3、对比例1-对比例2制备的鱿鱼精膏的风味进行感官评定,评分人员包括男、女各5名评分员,对他们进行一定的味觉和嗅觉培训,对苦味、腥味、鲜味和腐臭味进行评分,采用记分制,最高为5分,0分表示不能感觉到该风味,5分表示该风味非常强烈。
感官评定结果见表3。
表3:感官评定结果
由表3可以看出,采用本发明实施例的方法制备的鱿鱼精膏,特别是实施例1制备的鱿鱼精膏,其已基本脱除了苦味和腥味,在产品风味上有了极大的改善,从而更容易被消费者所接受。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已,并不用于限制本申请,对于本领域的技术人员来说,本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (1)
1.一种以海洋生物和/或海产品加工废弃物为原料制备精膏的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将鱿鱼下脚料用清水洗涤、沥水,加入鱿鱼下脚料重量5%的食用盐,搅拌均匀,研磨成浆液;向浆液中加入L-羟脯氨酸和蒸馏水,所述浆液与蒸馏水加入的体积比为1:2;所述L-羟脯氨酸的加入量为浆液重量的0.8%,混合均匀,调节混合液的pH为6.0,在42℃、超声功率200W的条件下自溶酶水解6h,自溶酶水解结束后加热至100℃灭酶,得到自溶浆液;将自溶浆液离心,分离上清液和沉淀,收集上清液,作为鱿鱼下脚料自溶酶水解液;
(2)向步骤(1)离心分离后的沉淀中加入蒸馏水,所述沉淀与蒸馏水加入量的比为1g:6ml,分散均匀,调节分散液的pH为7.0;向分散液中加入胰蛋白酶和酵母蛋白酶,胰蛋白酶的加入量为分散液重量的0.5%;所述酵母蛋白酶的加入量为分散液重量的1%,在37℃条件下酶解1.5h,酶解结束后加热灭酶,作为鱿鱼下脚料外源酶水解液;
(3)将上述步骤(1)制备的鱿鱼下脚料自溶酶水解液和步骤(2)制备的鱿鱼下脚料外源酶水解液混合,调节混合后的水解液的pH为6.0,按体积比为1.5%接入植物乳杆菌和产朊假丝酵母活化后的混合种子液的进行发酵处理,混合种子液中,植物乳杆菌的活菌数为3×108CFU/ml,产朊假丝酵母的活菌数为1×108CFU/ml;所述发酵处理的条件为:在35℃条件下先震荡培养12h,然后再静置培养24h,发酵结束后,离心,分离上清作为发酵液,将发酵液浓缩至相对密度为1.20(50℃测),制备得到鱿鱼精膏;
所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母均来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC),植物乳杆菌的编号为CICC21794,产朊假丝酵母的编号为CICC31494。
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