TWI821209B - 治療IgE介導的過敏性疾病 - Google Patents

Abstract

以能夠結合於膜結合IgE的Cemx結構域的抗體治療個體中與免疫球蛋白E (IgE)相關的病症之方法。該個體可以施用至少二劑該抗體，該二劑相隔至少三個月。

Description

治療IgE介導的過敏性疾病

本發明係關於治療IgE介導的過敏性疾病的技術。

相關申請案：本申請案基於35 U.S.C.第119條主張於2017年10月31日提出申請的美國專利臨時申請案序號62/579,416之權益，該臨時申請案的全部內容透過引用合併於本文。

IgE在介導第I型過敏反應中具有重要作用，第I型過敏反應導致過敏性疾病，包括過敏性氣喘、過敏性鼻炎、異位性皮膚炎等。過敏反應是免疫系統對無害環境物質的反應，如塵蟎、樹木及草的花粉、某些食物及藥物，以及蜜蜂與火蟻叮咬。在這樣的反應中，過敏原與嗜鹼性球及肥胖細胞表面上的IgE的結合導致IgE的交聯以及IgE.Fc、第I型IgE.Fc受體，或FcεRI的潛在受體的聚集。這種受體聚集隨後活化訊息傳導途徑，導致顆粒的胞吐作用以及藥理學介質的釋放，例如組織胺、白三烯、中性蛋白酶、細胞激素和化學激活素。從肥胖細胞及嗜鹼性球釋放這些介質會引起過敏的各種病理表現。

有兩種類型的IgE分子，游離(或可溶) IgE以及膜結合IgE (membrane-bound IgE，mIgE)。游離IgE分子在血液及組織間隙液中循環。膜結合IgE (mIgE)在B淋巴母細胞以及記憶B細胞的表面上表現。標靶膜結合IgE (mIgE)被認為可有效抑制抗原特異性IgE的產生，從而抑制IgE治療的免疫反應。

本發明基於不可預期的發現，即單一劑量的FB825，其為一種靶向人類B淋巴細胞上膜結合IgE (mIgE)的CemX結構域的抗體，成功地降低了人類個體中總IgE的含量達至少三個月。

據此，本發明之一方面提供了一種治療與IgE相關的病症之方法，該方法包含對有需要的個體施用第一劑量的抗體，該抗體係與膜結合IgE的Cemx結構域結合；以及對該個體施用第二劑量的該抗體。該第一劑量施用至少8週(例如，至少10週、12週或3個月)後施用該第二劑量。

於本文所述之任何方法中，該第一劑量、該第二劑量，或該二者的範圍可在0.5 mg/kg至15 mg/kg (例如，1 mg/kg至15 mg/kg)。例如，該第一劑量、該第二劑量，或該二者的範圍為1 mg/kg至8 mg/kg (例如，1.5 mg/kg至10 mg/kg)。該第一劑量、該第二劑量，或該二者可以透過靜脈內注射給藥。

透過本文描述之方法治療的個體可以是患有或懷疑患有與IgE相關病症的人類患者，例如過敏性氣喘、過敏性鼻炎、高IgE症候群，或異位性皮膚炎。於一些具體實施例中，該病症為冷誘導的蕁麻疹、慢性蕁麻疹、膽鹼型蕁麻疹、慢性鼻竇炎、系統性肥胖細胞增多症、皮膚肥胖細胞增多症、過敏性支氣管肺麴菌病、復發性自發性血管性水腫，以及間質性膀胱炎、嗜酸性白血球相關的胃腸道疾病、食物過敏，或藥物過敏。

於另一方面，本發明提供一種治療異位性皮膚炎之方法，該方法包含對有需要的個體施用第一劑量的一抗體，該抗體係與膜結合IgE的CemX結構域結合；其中該第一劑量為約1 mg/kg至10 mg/kg (例如，3 mg/kg至8 mg/kg，例如，5 mg/kg)。該方法可以進一步包含在該第一劑量後約3個月對該個體施用第二劑量的抗體，如果在施用該第二劑量時，該個體的總IgE含量從施用該第一劑量前的總IgE含量變化小於50%的話。於一些情況下，該第二劑量可以與該第一劑量相同，例如5 mg/kg。該第一劑量抗體、該第二劑量抗體，或二者可以透過靜脈內輸注給藥。

於上述任何方法中，在該第一次劑量施用之前，將保濕劑每天至少施用二次於該個體至少連續七天。或者或另外，該方法可進一步包含向該個體施用局部皮質類固醇。於某些情況下，該局部皮質類固醇每天施用於活動性病變(active lesion)。這種局部皮質類固醇可為0.05%丙酸氟替卡松乳膏、0.1%糠酸莫美他松乳膏、0.06%戊酸貝皮質醇，或1%氫皮質酮軟膏。於其他情況下，該局部皮質類固醇可為0.05%氟喹諾酮乳膏、0.25%去氫氧迪皮質醇軟膏，或0.05%丙酸倍氯松軟膏。

於一些具體實施例中，該個體不含局部他克莫司治療、局部吡美莫司治療、全身皮質類固醇治療、白三烯抑制劑治療、過敏原免疫療法，涉及免疫抑制劑或免疫調節劑的治療、疫苗治療、涉及中藥的治療、外科手術、紫外線處理，或曬黑。

於本文所述之任何治療方法中，本文所述之抗-CemX抗體可結合該膜結合IgE (mIgE)片段GLAGGSAQSQRAPDRVL (SEQ ID NO: 1)或該膜結合IgE (mIgE)片段GLAGGSAQSQRA (SEQ ID NO: 7)。於一些情況下，該抗體及抗體4B12 (FB825)結合相同的抗原決定位，或與抗體FB825競爭結合膜結合IgE的Cemx結構域。於一些實施例中，該抗體包含與抗體FB825相同的重鏈互補決定區及/或與抗體FB825相同的輕鏈互補決定區。這種抗體可為4B12的人源化抗體，例如，FB825。該抗體可包含具有如SEQ ID NO: 2所示的胺基酸序列的重鏈可變區，及/或具有如SEQ ID NO: 3所示的胺基酸序列的輕鏈可變區。本文所述之任何方法中使用的任何抗體可為全長抗體或其抗原結合片段。該抗體可為人類抗體、人源化抗體、嵌合抗體，或單鏈抗體。

於本文所述之任何方法中，該抗CemX抗體可以配製於醫藥組合物中，該醫藥組合物包含該抗體、緩衝液(例如，含有胺基酸，如組胺酸，的緩衝液)、鹽類(例如，氯化鈉)，以及非離子界面活性劑(例如，聚山梨醇酯80)。於一些具體實施例中，該醫藥組合物為pH值為5至8的水溶液。於一些實施例中，該醫藥組合物中的該抗體為約10 mg/ml至30 mg/ml (例如，約20 mg/ml)，該組胺酸緩衝液的濃度約為10-30 mM(例如，約20 mM)，該氯化鈉的濃度為約120-160 mM(例如，約140 mM)，以及該聚山梨醇酯80的濃度為約0.01-0.03% (例如，約0.02%)。本文所述之任何醫藥組合物也在本發明之範圍內。

於另一方面，本文提供一水性製劑，其包含濃度為約10 mg/ml至30 mg/ml的本文所述之任何抗-CemX抗體(例如，FB825或其功能變體)，一包含濃度為約10-30 mM的一胺基酸(例如，組胺酸)的緩衝液，一濃度約為120-160 mM的鹽類(例如，氯化鈉)，以及一濃度約為0.01-0.03%的非離子界面活性劑(如，聚山梨醇酯80)，其中該水性製劑的pH值為約5-8。於一實施例中，該水性製劑包含濃度為約20 mg/ml的該抗體，濃度約為20 mM的組胺酸緩衝液，濃度約為140 mM的氯化鈉，以及濃度約為0.02%的聚山梨醇酯80，其中該水性製劑的pH值為約6.5。

同樣在本發明之範圍內的是 (i) 一種用於治療如本文所述之IgE相關病症的醫藥組合物，其中該醫藥組合物包含一抗-CemX抗體以及一醫藥上可接受的載體，以及其中將該醫藥組合物給予一需要該治療的個體至少二個劑量，該二劑量相隔至少8週(例如，相隔至少10週、12週，或3個月，或間隔12周至6個月)；以及 (ii) 該抗CemX抗體在製備一用於治療該IgE相關病症的藥物中之用途，其中該藥物可以給予一需要該治療的個體至少二個劑量，該二個劑量相隔至少三個月。

於下面的描述中闡述了本發明的一或多個具體實施例之細節。從以下附圖與若干具體實施例之詳細描述中，本發明的其他特徵或優點將變得顯而易見，並且形成所附申請專利範圍。

在罹患過敏症風險增加的特應性個體中，循環系統中的IgE濃度可能達到正常含量的10倍以上。過敏原特異性IgE抗體的濃度與臨床症狀密切相關，而且在過敏性疾病患者中可能比健康個體高出1000倍。免疫球蛋白E透過佔據表現它們的高親和力IgE受體FcεRI而使效應細胞如嗜鹼性球、肥胖細胞，以及活化的嗜酸性白血球敏感。在第I型過敏反應中，過敏原交聯由FcεRI結合的IgE分子，隨後引發效應細胞的去顆粒反應，釋放促發炎介質，例如組織胺及白三烯。IgE介導的過敏途徑產生介質相關的過敏症狀，在局部或全身引發免疫活動。嗜鹼性球及肥胖細胞也釋放出廣泛的發炎性細胞激素與化學激活素，不僅直接引起臨床症狀，而且還激活並募集各種細胞類型以擴大發炎狀態。因此，抗IgE療法可以減弱IgE介導的途徑及發炎狀況。

本文描述了抗CemX抗體，其用於降低總IgE含量並因此治療Ig-E藥物治療障礙。這類抗體可以透過至少二個劑量給予需要治療的個體，該劑量可以相隔至少8週(例如，10週、12週或3個月)。

能夠與膜結合 IgE 的 C e mX 結構域結合的抗體

CemX為位於人類膜結合ε鏈(membrane-bound ε chain，mε)的CH4結構域以及C端膜錨定區段之間的52個胺基酸區段。以下提供人類膜結合IgE (mIgE)的示例性CemX片段的胺基酸序列(SEQ ID NO: 6)： GLAGGSAQSQ RAPDRV_L CHS GQQQGLPRAA GGSVPHPRCH CGAGRADWPG PP

本文所述之抗體可以結合一種膜結合IgE (mIgE)的該Cemx結構域，例如，在B細胞表面上表現的膜結合IgE (mIgE)。此類抗體可以透過例如抗體依賴性細胞的細胞毒性及/或細胞凋亡誘導表現膜結合IgE (mIgE)的B細胞的細胞死亡，進而消除該B細胞，這將導致游離IgE的產生減少。因此，本文所述之抗-CemX抗體可降低以該抗體治療的個體(例如，一人類患者)中的總IgE含量。

抗體(可互換地以複數形式使用)為一種免疫球蛋白分子，其能透過位於該免疫球蛋白分子的可變區中的至少一個抗原識別位點特異性結合一標靶，例如碳水化合物、多核苷酸、脂質、多胜肽等。如本文所用，「抗體」乙詞不僅包括完整的(即，全長)多株或單株抗體，還包括其抗原結合片段(例如Fab、Fab'、F(ab')₂ 、Fv)、單鏈(scFv)、其突變體、包含一抗體部分的融合蛋白、人源化抗體、嵌合抗體、雙功能抗體、線性抗體、單鏈抗體、多特異性抗體(例如，雙特異性抗體)以及該免疫球蛋白分子的任何其他修飾構型，其包含具有所需特異性的抗原識別位點，包括抗體的糖基化變體、抗體的胺基酸序列變體，以及共價修飾的抗體。抗體包括任何類別的抗體，例如IgD、IgE、IgG、IgA，或IgM (或其亞類)，且該抗體不需要是任何特定類別。取決於其重鏈恆定結構域的抗體胺基酸序列，可以將免疫球蛋白分配到不同的類別。免疫球蛋白有五大類：IgA、IgD、IgE、IgG，以及IgM，其中一些可以進一步分為亞類(同種型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1以及IgA2。對應於不同類免疫球蛋白的重鏈恆定結構域分別稱為α、δ、ε、γ，以及μ。不同類免疫球蛋白的次單位結構及立體構型為已知的。

用於本文所述方法之抗體可為小鼠、大鼠、人類或任何其他來源(包括嵌合或人源化抗體)。

本文所述之任何抗體可為單株抗體或多株抗體。「單株抗體」係指同源抗體群，而「多株抗體」係指異源抗體群。這二個術語並不限制抗體的來源或其製備方式。

於一實施例中，本文描述之方法中使用的抗體為人源化抗體。人源化抗體係指非人類(例如，鼠)抗體的形式，其為特異性嵌合免疫球蛋白、免疫球蛋白鏈，或其抗原結合片段，其含有源自非人類免疫球蛋白的最小序列。在大多數情況下，人源化抗體為人類免疫球蛋白(受體抗體)，其中來自受體的互補決定區(CDR)的殘基被來自非人類物種，例如，小鼠、大鼠，或兔子，的互補決定區(CDR)的殘基(供體抗體)取代，其具有所需特異性、親和力，及能力。於一些情況下，該人類免疫球蛋白的Fv框架區(FR)殘基被相應的非人類殘基取代。此外，該人源化抗體可以包含既不在該受體抗體中也不在導入的互補決定區(CDR)或框架序列中發現的殘基，但這樣的殘基被包括在內，以進一步改良並最佳化抗體性能。通常，人源化抗體將包含基本上全部至少一個，通常二個，可變結構域，其中所有或基本上所有的互補決定區(CDR)對應於非人類免疫球蛋白的那些互補決定區(CDR)，且所有或基本上所有的Fv框架區(FR)為人類免疫球蛋白共有序列的那些Fv框架區(FR)。人源化抗體最佳地還將包含一免疫球蛋白恆定區或結構域(Fc)的至少一部分，通常是人類免疫球蛋白的恆定區或結構域。抗體可以具有如PCT專利申請公開號WO 99/58572中所述修飾的恆定區或結構域(Fc)。其他形式的人源化抗體具有一個或多個互補決定區(CDR) (一個、二個、三個、四個、五個、六個)，其相對於原始抗體被改變，其也被稱為「衍生自」來自該原始抗體的一個或多個互補決定區(CDR)的一個或多個互補決定區(CDR)。人源化抗體也可能涉及親和力成熟作用。

於另一實施例中，本文所述之抗體為嵌合抗體，其可以包括來自人類抗體的重鏈恆定區和輕鏈恆定區。嵌合抗體係指具有來自一第一物種的可變區或部分可變區以及來自一第二物種的恆定區的抗體。通常，在這些嵌合抗體中，輕鏈及重鏈的可變區模擬來自一種哺乳動物(例如，非人類哺乳動物，例如小鼠、兔，以及大鼠)的抗體的可變區，而恆定部分與來自另一種哺乳動物如人類的抗體中的序列同源。於一些具體實施例中，可以在可變區及/或恆定區中進行胺基酸修飾。

於一些實施例中，本文公開的抗體特異性結合膜結合IgE的Cemx結構域，該IgE可以在B細胞的表面上表現。「特異性結合」(在本文中可互換使用)於一標靶或抗原決定位的抗體為本領域熟知之術語，並且確定這種特異性結合的方法也是本領域熟知的。如果一分子與其他標靶的反應或締合相比，更頻繁、更快速地且更長的持續時間及/或具有更大的親和力地與一特定標靶抗原反應或締合，則稱其表現出「特異性結合」。如果一抗體與其他物質的結合相比，以更大的親和力、結合性、更容易，及/或更長的持續時間結合一標靶抗原，則該抗體「特異性結合」該標靶抗原。例如，一特異性(或優先)結合一CemX結構域抗原決定位的抗體是一種以較大親和力、結合性、更容易，及/或更長的持續時間結合該CemX結構域抗原決定位的抗體，相較於該抗體與其他CemX結構域抗原決定位或非CemX結構域抗原決定位的結合。透過閱讀該定義還可以理解，例如，一特異性結合一第一標靶抗原的抗體可以或可以非特異性或優先結合一第二標靶抗原。因此，「特異性結合」或「優先結合」不一定需要(儘管它可以包括)排他性結合。通常但非必需地，提及結合表示優先結合。

本文所述之抗-CemX抗體的結合親和力可小於約100 nM，例如，小於約50 nM、約10 nM、約1 nM、約500 pM、約100 pM，或約50 pM至任何約2 pM。結合親和力可以表示為K_D 或解離常數，而且一增加的結合親和力對應於一降低的K_D 。確定抗體與CemX的結合親和力的一種方法為透過測量該抗體的單功能Fab片段的結合親和力。為了獲得單功能Fab片段，可使用木瓜蛋白酶切割抗體(例如，IgG)或重組表現。一抗體的抗-CemX Fab片段的親和力可以透過表面等離振子共振(BIAcore3000TM表面等離子共振(surface plasmon resonance，SPR)系統，BIAcore公司，Piscaway，紐澤西州)來確定。獲得動力學關聯率(k_on )以及解離率(k_off )(通常在25ºC下測量)；平衡解離常數(K_D )值計算為koff/kon。

於一些具體實施例中，該抗體結合人類IgE的CemX結構域，且不顯著地結合來自另一種哺乳動物物種的IgE。於一些具體實施例中，該抗體結合人類IgE以及來自另一種哺乳動物物種的一種或多種IgE。由該抗體結合的抗原決定位可以是連續的或不連續的。

於一些具體實施例中，本文所述之抗-CemX抗體結合該CemX結構域的N端部分，例如GLAGGSAQSQRAPDRVL (SEQ ID NO: 1)或GLAGGSAQSQRA (SEQ ID NO: 7)。這種抗體可以具有與圖4所述之抗體4B12/FB825相同的重鏈及/或輕鏈互補決定區(CDR)。亦可參見美國專利號8,460,664，其中相關公開內容透過引用結合到本文中。該抗-CemX抗體可為4B12的人源化抗體(例如，FB825)。於一些實施例中，用於本文所述方法的該抗-CemX抗體為FB825，其為4B12的人源化抗體(圖4)，或其功能變體。亦可參見美國專利號8,460,664，其中相關公開內容透過引用結合到本文中。

FB825的功能變體(等同物)具有與FB825基本相同的抗原決定位結合特異性，並且表現出與FB825基本相似的生物活性，包括消除表現膜結合IgE (mIgE)的B細胞的活性以及降低一個體中總IgE的含量。於一些具體實施例中，FB825的功能變體含有與FB825相同的負責抗原結合的區域/殘基，例如在該互補決定區(CDRs)或整個互補決定區(CDRs)中相同的特異性決定殘基。於其他具體實施例中，FB825的功能變體包含V_H 鏈，其包括V_H CDR1、V_H CDR2，以及V_H CDR3，其與FB825的相應V_H CDRs至少75% (例如，80%、85%、90%、95%或98%)相同，並且包括V_L 鏈，其包括V_L CDR1、V_L CDR2，以及V_L CDR3，其與FB825的相應V_L CDRs至少75% (例如，80%、85%、90%、95%或98%)相同。例如，FB825的功能變體可以包含V_H 鏈，與單株抗體mAb7E的V_H CDRs相比，該V_H 鏈在該V_H CDR區(V_H CDR1、CDR2，及/或CDR3總和)中包括最多5個(例如，1、2、3、4，或5個)胺基酸殘基變體，及/或包含V_L 鏈，與單株抗體mAb7E的V_L CDRs相比，該V_L 鏈在該V_L CDR區(V_L CDR1、CDR2，及/或CDR3總和)中包括最多5個(例如，1、2、3、4，或5個)胺基酸殘基變體。

或者，FB825的功能變體包含V_H 鏈，其與FB825的V_H 鏈至少75% (例如，80%、85%、90%、95%或98%)相同，以及V_L 鏈，其與FB825的V_L 鏈至少75% (例如，80%、85%、90%、95%或98%)相同。該胺基酸序列變異可以僅在V_H 及/或V_L 框架區中的一個或多個中發生。

使用Karlin及Altschul於Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-68, 1990年發表的演算法確定二個胺基酸序列的「百分比同一性」，該演算法修改如Karlin及Altschul於Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-77, 1993年所發表者。這種演算法被併入Altschul等人於J. Mol. Biol. 215:403-10, 1990年發表的的NBLAST及XBLAST程式(版本2.0)中。可使用XBLAST程式進行BLAST蛋白質搜索，得分= 50，字長= 3，以獲得與目標蛋白質分子同源的胺基酸序列。當二個序列之間存在間隙時，可使用如Altschul等人於Nucleic Acids Res. 25(17):3389-3402, 1997年所述的Gapped BLAST。當使用BLAST及Gapped BLAST程式時，可使用各個程式(例如，XBLAST及NBLAST)的預設參數。

抗體製備

能夠結合如本文所述之膜結合IgE的CemX結構域的抗體可以透過本領域已知的任何方法製備。參見，例如，Harlow及Lane，(1988年) Antibodies: A Laboratory Manual，冷泉港實驗室，紐約。

於一些具體實施例中，可以透過常規雜交瘤技術製備對標靶抗原特異的抗體(例如，膜結合IgE (mIgE)，例如一人類膜結合IgE，的CemX結構域)。任選與載體蛋白如KLH偶聯的全長標靶抗原或其片段可用於免疫宿主動物以產生與該抗原結合的抗體。如本文進一步描述的，宿主動物免疫的途徑及時間表通常與用於抗體刺激及生產的既定且常規技術一致。用於產生小鼠、人源化，以及人類抗體的一般技術為本領域已知的且在本文中描述。預期可以操縱包括人類或其產生抗體之細胞的任何哺乳動物個體以作為哺乳動物，包括人類雜交瘤細胞株，的產生基礎。通常，宿主動物以腹膜內、肌肉內、口腔內、皮下、足底內，及/或皮內接種含有一定量的免疫原，包括如本文所述。

使用Kohler, B.及Milstein, C. (1975年)於Nature 256:495-497發表的一般體細胞雜交技術或由Buck, D. W.等人，發表於In Vitro, 18:377-381 (1982年)所修飾的技術，可以從淋巴細胞與永生化骨髓瘤細胞製備雜交瘤。可獲得的骨髓瘤細胞株，包括但不限於X63-Ag8.653以及來自Salk研究所，Cell Distribution Center，聖地牙哥，加州，美國的那些細胞株可用於雜交。通常，該技術涉及使用融合劑如聚乙二醇或透過本領域技術人員熟知的電學方法融合骨髓瘤細胞及類淋巴細胞。融合後，將細胞與融合培養基分離，並在選擇性生長培養基如次黃嘌呤-氨基蝶呤-胸苷(hypoxanthine-aminopterin-thymidine，HAT)培養基中生長，以消除未雜交的親本細胞。本文所述之任何補充有或不含血清的培養基可用於培養分泌單株抗體的雜交瘤。作為細胞融合技術的另一種替代方案，EBV永生化B細胞可用於產生本發明的抗CemX單株抗體。如果需要，將雜交瘤擴增並進行次選殖，並透過常規免疫測定方法(例如，放射免疫測定、酶免疫測定，或螢光免疫測定)測定上清液的抗免疫原活性。

可用作抗體來源的雜交瘤包括所有衍生物、親本雜交瘤的後代細胞，其產生能夠結合該CemX結構域的單株抗體。產生這種抗體的雜交瘤可以使用已知方法在體外或體內生長。如果需要，可以透過常規的免疫球蛋白純化方法，例如硫酸銨沉澱、凝膠電泳、透析、色層分析，以及超過濾，從培養基或體液中分離單株抗體。如果存在不想要的活性，可以除去該活性，例如，透過將製劑在由附著於固相的免疫原製成的吸附劑上運行，並從該免疫原中流洗或釋放所需的抗體。使用標靶抗原或含有與待免疫物種中具有免疫原性的蛋白質綴合的標靶胺基酸序列的片段來免疫一宿主動物，例如，匙孔血藍蛋白、血清白蛋白、牛甲狀腺球蛋白，或使用雙功能或衍生劑的大豆胰蛋白酶抑制劑，例如，馬來醯亞胺基苯甲醯基磺基琥珀醯亞胺酯(透過半胱胺酸殘基綴合)、N-羥基琥珀醯亞胺(透過離胺酸殘基)、戊二醛、琥珀酸酐、SOCl，或R1N=C=NR，其中R及R1為不同的烷基，可以產生抗體群(例如，單株抗體)。

如果需要，可以對目標抗體(單株或多株)(例如，由雜交瘤產生)進行定序，然後可以將多核苷酸序列選殖到載體中用於表現或繁殖。編碼目標抗體的序列可以保持在宿主細胞的載體中，然後可以擴增並冷凍宿主細胞以備將來使用。或者，多核苷酸序列可用於遺傳操作以「人源化」該抗體或改善其親和力(親和力成熟)，或該抗體的其他特徵。例如，若該抗體用於人類的臨床試驗及治療，則其恆定區可以被設計為更類似於人類的恆定區以避免免疫反應。可能需要遺傳操作抗體序列以獲得對標靶抗原的更大親和力以及更高的降低總IgE之功效。對於本領域技術人員顯而易見的是，可以對抗體進行一種或多種多核苷酸改變，並仍然保持其對標靶抗原的結合特異性。

於其他具體實施例中，可以透過使用已經工程改造以表現特異性人類免疫球蛋白的蛋白質之市售小鼠來獲得完全人類抗體。設計用於產生更理想的(例如，完全人類抗體)或更強的免疫反應的轉基因動物也可用於產生人源化抗體或人類抗體。這種技術的實例為來自Amgen公司 (Fremont，加州)的XenomouseRTM以及來自Medarex公司 (Princeton，紐澤西州)的HuMAb-MouseRTM及TC MouseTM。於另一替代方案中，可以透過噬菌體展示技術重組製備抗體。參見，例如，美國專利號5,565,332；5,580,717；5,733,743；以及6,265,150；以及Winter等人，(1994年) Annu. Rev. Immunol. 12:433-455的發表。或者，噬菌體展示技術(McCafferty等人，(1990年) Nature 348:552-553)可用於來自未免疫的供體的免疫球蛋白可變(V)結構域基因庫中體外產生人類抗體及抗體片段。

可透過常規方法製備一完整抗體(全長抗體)的抗原結合片段。例如，F(ab')2片段可以透過胃蛋白酶消化抗體分子產生，Fab片段可以透過還原F(ab')2片段的雙硫鍵產生。

遺傳工程化抗體，例如人源化抗體、嵌合抗體、單鏈抗體，以及雙特異性抗體，可以透過例如常規重組技術產生。於一實施例中，可以使用常規方法容易地分離編碼對標靶抗原特異的單株抗體的DNA並定序(例如，透過使用能夠與編碼該單株抗體的重鏈及輕鏈的基因特異性結合的寡核苷酸探針)。雜交瘤細胞用以作為這種DNA的較佳來源。一旦分離，可將DNA置於一個或多個表現載體中，然後將其轉染到宿主細胞中，例如大腸桿菌細胞、猿猴COS細胞、中國倉鼠卵巢(CHO)細胞，或不產生免疫球蛋白的骨髓瘤細胞，以獲得該重組宿主細胞中單株抗體的合成。參見，例如，PCT專利申請公開號WO 87/04462。然後可以修飾DNA，例如，透過使用編碼人類重鏈及輕鏈恆定結構域的序列以取代同源鼠序列，如Morrison等人，(1984年) Proc. Nat. Acad. Sci. 81:6851所述，或透過共價連接該免疫球蛋白編碼序列全部或部分非免疫球蛋白多胜肽的編碼序列。以這種方式，基因工程抗體，例如「嵌合」或「雜合」抗體；可以製備具有標靶抗原結合特異性的胜肽。

開發用於產生「嵌合抗體」的技術為本領域熟知的。參見，例如，Morrison等人(1984年) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81, 6851; Neuberger等人(1984年) Nature 312, 604；以及Takeda等人(1984年) Nature 314:452所發表者。

構建人源化抗體的方法也是本領域熟知的。 參見，例如，Queen等人，於Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86:10029-10033 (1989年)所發表。於一實施例中，按照本領域已知的方法對一親本非人類抗體的V_H 及V_L 的可變區進行立體分子模擬分析。接下來，使用相同的分子建模分析鑑定預測對於形成正確CDR結構重要的框架胺基酸殘基。平行地，使用親本V_H 及V_L 序列作為搜索查詢，從任何抗體基因資料庫鑑定具有與親本非人類抗體的胺基酸序列同源的胺基酸序列的人類V_H 及V_L 鏈。然後選擇人類V_H 及V_L 受體基因。

所選人類受體基因內的互補決定區(CDR)可用來替換自親本非人類抗體或其功能變體的互補決定區(CDR)。必要時，預測在與該互補決定區(CDR)相互作用中重要的親本鏈的框架區內的殘基(參見上文描述)可用於取代該人類受體基因中的相應殘基。

透過連接編碼重鏈可變區的核苷酸序列以及編碼輕鏈可變區的核苷酸序列，可以透過重組技術製備單鏈抗體。較佳地，在二個可變區之間引入柔性連接子。或者，可以調整用於產生單鏈抗體的技術(美國專利號4,946,778以及4,704,692)以產生噬菌體scFv文庫，並且可以按照常規方法從該文庫中鑑定對IgE特異的scFv選殖株。

可以使用本領域熟知的方法來表示根據本領域已知的及本文所述之方法獲得的抗體的特徵。例如，一種方法是鑑定抗原結合的抗原決定位或「抗原決定位作圖」。本領域已知許多方法用於繪製並表示在蛋白質上抗原決定位的位置之特徵，包括解決一抗體-抗原錯合物的晶體結構、競爭測定、基因片段表現測定，以及基於合成胜肽的測定，例如，Harlow及Lane於1999年所著作的Using Antibodies, a Laboratory Manual第11章所述，冷泉港實驗室出版社，冷泉港，紐約。於另外的實例中，抗原決定位作圖可用於確定抗體結合的序列。抗原決定位可為一線性抗原決定位，即包含在一單個胺基酸區段中，或由胺基酸的立體相互作用形成的構象抗原決定位，其可以不必包含在單個區段中(一級結構線性序列)。可以分離或合成(例如，重組)不同長度的胜肽(例如，至少4-6個胺基酸長度)並用於與抗體的結合測定。於另一實施例中，抗體結合的抗原決定位可透過使用源自該標靶抗原序列的重疊胜肽並透過抗體確定結合以在系統篩選中確定。根據基因片段表現測定，編碼標靶抗原的開放閱讀框隨機地或透過特定的遺傳構築進行片段化，並確定抗原的表現片段與待測抗體的反應性。例如，基因片段可以透過PCR產生，然後在放射性胺基酸存在下在體外轉錄並轉譯成蛋白質。然後透過免疫沉澱及凝膠電泳確定抗體與放射性標記的抗原片段的結合。還可透過使用展示在噬菌體顆粒(噬菌體文庫)表面上的大型隨機胜肽序列文庫來鑑定某些抗原決定位。或者，可以在簡單結合測定中測試限定的重疊胜肽片段文庫與測試抗體的結合。在另一實施例中，可以進行抗原結合結構域的誘變、結構域交換實驗與丙胺酸掃描誘變，以鑑定抗原決定位結合所需的、足夠的，及/或必需的殘基。例如，可以使用標靶抗原的突變體進行結構域交換實驗，其中IgE多胜肽的各種片段已經被來自密切相關但抗原性不同的蛋白質(例如免疫球蛋白家族的另一成員)的序列替換(交換)。透過評估抗體與突變免疫球蛋白的結合，可以評估特定抗原片段對抗體結合的重要性。

或者，可以使用已知結合相同抗原的其他抗體進行競爭測定，以確定抗體是否與其他抗體結合相同的抗原決定位。競爭測定法為本領域技術人員熟知的。

醫藥組合物

可以將一種或多種上述抗-CemX抗體與醫藥上可接受的載體(賦形劑)，包括緩衝液，混合，以形成用於治療與IgE相關的病症之醫藥組合物。「可接受的」係指載體必須與該組合物的活性成分相容(且較佳地，能夠穩定活性成分)並且對待治療的個體無害。包括緩衝液的醫藥上可接受的賦形劑(載體)為本領域熟知的。參見，例如，Remington: The Science and Practice of Pharmacy 第 20版(2000年) Lippincott Williams及Wilkins, Ed. K. E. Hoover。於一實施例中，一醫藥組合物含有一種以上的抗-CemX抗體，其識別該標靶抗原的不同抗原決定位。

用於本發明方法的醫藥組合物可包含凍乾製劑或水溶液形式的醫藥上可接受的載體、賦形劑或穩定劑。Remington: The Science and Practice of Pharmacy 第 20版(2000年) Lippincott Williams及Wilkins, Ed. K. E. Hoover。可接受的載體、賦形劑或穩定劑在使用的劑量及濃度下對接受者無毒，並且可包含緩衝液，例如磷酸鹽、檸檬酸鹽，及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(如十八烷基二甲基芐基氯化銨；六甲基氯化銨；苯扎氯銨、芐索氯銨；苯酚，丁基或芐醇；對羥基苯甲酸烷基酯如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；鄰苯二酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；以及間甲酚)；低分子量(少於約10個殘基)的多胜肽；蛋白質，如血清白蛋白、明膠，或免疫球蛋白；親水性聚合物，如聚乙烯吡咯烷酮；胺基酸，如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺酸、組胺酸、精胺酸，或離胺酸；單醣，雙糖，以及其他碳水化合物包括葡萄糖、甘露糖，或葡聚醣；螯合劑如EDTA；醣類，如蔗糖、甘露醇、海藻糖，或山梨糖醇；鹽類形成的抗衡離子如鈉；金屬錯合物(例如，鋅-蛋白質錯合物)及/或非離子界面活性劑，例如TWEEN™、PLURONICS™，或聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)。本文進一步描述了醫藥上可接受的賦形劑。

於一些實施例中，本文所述之醫藥組合物包含含有抗-CemX抗體的脂質體，其可透過本領域已知的方法製備，例如在Epstein等人，於Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82:3688 (1985年)發表者；Hwang等人，於Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4030 (1980年)發表者；以及美國專利號4,485,045及4,544,545。具有增強的循環時間的脂質體公開於美國專利號5,013,556中。特別有用的脂質體可以透過反相蒸發法以一脂質組合物產生，該脂質組合物包含磷脂醯膽鹼、膽固醇以及PEG衍生的磷脂醯乙醇胺(PEG-derivatized phosphatidylethanolamine，PEG-PE)。透過具有確定孔徑的過濾器擠出脂質體，以產生具有所需直徑的脂質體。

抗CemX抗體也可以包埋在製備的微膠囊中，例如，透過凝聚技術或透過界面聚合作用，例如，分別以羥甲基纖維素或明膠-微膠囊以及聚-(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊，在膠體藥物輸送系統中(例如，脂質體、白蛋白微球、微乳液，奈米粒子及奈米膠囊)或在粗滴乳液中。這些技術為本領域已知的，參見例如Remington所著The Science and Practice of Pharmacy 第 20版，Mack出版社(2000年)。

於其他實例中，本文所述之醫藥組合物可以持續釋放形式配製。持續釋放製劑的合適實例包括含有該抗體的固體疏水聚合物的半透性基質，該基質為成型製品的形式，例如薄膜或微膠囊。緩釋基質的實例包括聚酯、水凝膠(例如，聚(2-羥乙基 - 甲基丙烯酸酯)，或聚(乙烯醇)、聚乳酸(美國專利號3,773,919)、L-麩胺酸以及7乙基-L-麩胺酸的共聚物，不可降解的乙烯-醋酸乙烯酯，可降解的乳酸-乙醇酸共聚物，例如LUPRON DEPOT™ (由乳酸-乙醇酸共聚物與醋酸亮丙瑞林組成的可注射微球)、蔗糖乙酸異丁酸酯，以及聚-D-(-)-3-羥基丁酸。

於一些具體實施例中，包含本文所述之抗-CemX抗體，例如FB825或其功能變體，如本文所述，的該醫藥組合物可為一水性製劑，其可進一步包含一緩衝液(其可包含一胺基酸，例如組胺酸或精胺酸)、一鹽類(例如，氯化鈉)，及/或一界面活性劑，如非離子界面活性劑。例如，該水性製劑可包含一濃度約為10-30 mg/ml的該抗體，包含一濃度為約10-30 mM的胺基酸(例如組胺酸或精胺酸)的一緩衝液，一濃度為約0.01-0.03%的界面活性劑如聚山梨醇酯80，及/或濃度約為120-160 mM的氯化鈉。這種水性製劑可具有約5-8的pH值。於一特定實施例中，該水性製劑可包含濃度約為20 mg/ml的抗體FB825，濃度約為20 mM的L-組胺酸，濃度約為140 mM的氯化鈉，濃度約為0.02%的聚山梨醇酯80，以及pH值約為6.5。

「約」或「近似」等詞意指在本領域普通技術人員確定的特定值的可接受誤差範圍內，這將部分取決於如何測量或確定該數值，亦即，測量系統的局限性。例如，根據本領域的實踐，「約」可以表示在可接受的標準偏差內。或者，「約」可表示給定數值的至多±20%，較佳至多±10%，更佳至多±5%，更佳至多±1%的範圍。或者，特別是對於生物系統或過程，該術語可以表示在一個數量級內，較佳在數值的2倍內。在本申請案及申請專利範圍中描述了特定值的情況下，除非另有說明，否則「約」乙詞為隱含的並且在該上下文中意味著在特定值的可接受誤差範圍內。

用於體內施用的醫藥組合物必須為無菌的。這可以透過例如透過無菌過濾膜過濾而容易地實現。通常將治療性抗體組合物置於具有無菌進入口的容器中，例如，具有可由皮下注射針刺穿的塞子的靜脈內溶液袋或小瓶。

本文所述之醫藥組合物可以為單位劑型，例如片劑、丸劑、膠囊、粉末、顆粒、溶液或懸浮液，或栓劑，用於口服、腸胃外或直腸給藥，或透過吸入或吹入給藥。

為了製備固體組合物如片劑，可以將主要活性成分與醫藥載體混合，例如，常規的壓片成分，例如玉米澱粉、乳糖、蔗糖、山梨糖醇、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸鎂、磷酸二鈣或樹膠，以及其他醫藥稀釋劑，例如，水，以形成含有本發明化合物的均勻混合物的固體預配製組合物，或其無毒的醫藥上可接受的鹽類。當將這些預配製組合物稱為均勻時，意指活性成分均勻地分散在整個組合物中，使得組合物可以容易地細分成等效的單位劑型，例如片劑、丸劑以及膠囊。然後將該固體預配製組合物再分成上述類型的單位劑型，其含有0.1至約500 mg的本發明之活性成分。可以將新組合物的片劑或丸劑包覆或以其它方式混合，以提供具有延長作用優點的劑型。例如，片劑或丸劑可包含內部劑量及外部劑量組成分，後者在前者上形成包膜。這兩種組成分可以透過腸溶層分開，該腸溶層用於抵抗在胃中的崩解並使得該內部組成分完整地進入十二指腸或延遲釋放。多種材料可用於此類腸溶層或塗層，這些材料包括許多聚合酸及聚合酸與例如蟲膠、鯨蠟醇以及乙酸纖維素等材料的混合物。

合適的表面活性劑，尤其包括非離子試劑，例如聚氧乙烯山梨糖醇(例如，Tween™ 20、40、60、80或85)以及其他山梨糖醇(例如，Span™ 20、40、60、80或85)。具有表面活性劑的組合物將方便地包含0.05至5%的表面活性劑，並且可以在0.1及2.5%之間。應當理解的是，可以添加其他成分，例如，如果需要，可以使用甘露醇或其他醫藥上可接受的載體。

合適的乳液可使用市售脂肪乳液來製備，例如Intralipid™、Liposyn™、Infonutrol™、Lipofundin™以及Lipiphysan™。該活性成分可以溶解在一預混乳液組合物中，或者可以溶解在油中(例如，大豆油、紅花油、棉籽油、芝麻油、玉米油或杏仁油)以及與磷脂混合後形成的乳液(例如，卵磷脂、大豆磷脂或大豆卵磷脂)及水。應當理解的是，例如，可以添加其他成分，例如甘油或葡萄糖，以調整該乳液的張力。合適的乳液通常含有高達20%的油，例如5-20%之間。

該乳液組合物可為透過將抗CemX抗體與Intralipid™或其組成分(大豆油、卵磷脂、甘油及水)混合而製備的那些。

用於吸入或吹入的醫藥組合物包括醫藥上可接受的溶液及懸浮液、水溶液或有機溶劑，或其混合物，以及粉末。液體或固體組合物可含有如上所述的合適的醫藥上可接受的賦形劑。於一些具體實施例中，該組合物透過口服或鼻呼吸途徑施用以產生局部或全身作用。

較佳無菌的醫藥上可接受的溶劑中之組合物可以透過使用氣體進行霧化。霧化溶液可以直接從霧化裝置吸入，或者霧化裝置可以連接到面罩，帳篷或間歇正壓呼吸機。溶液、懸浮液或粉末組合物可從以適當方式遞送該製劑的裝置給藥給藥，較佳為口服或經鼻給藥。

抗 C e mX 抗體用於治療與 IgE 相關的疾病的用途

為了實施本文公開之方法，可以透過合適的途徑將一有效量的上述醫藥組合物給予一需要治療的個體(例如一人類)，如靜脈給藥，例如，作為推注或在一段時間內連續輸注，透過肌肉、腹腔內、腦脊髓內、皮下、關節內、滑膜內、鞘內、口服、吸入或局部途徑給藥。用於液體配方的市售霧化器，包括噴射霧化器及超音波霧化器可用於給藥。液體製劑可以直接霧化，凍乾粉末可以在重構後霧化。或者，可以使用碳氟化合物製劑以及定量吸入器霧化抗CemX抗體，或者作為凍乾及研磨的粉末吸入。

透過本文所述之方法治療的個體可為一哺乳動物，更佳為ㄧ人類。哺乳動物包括，但不限於，農場動物、運動動物、寵物、靈長類動物、馬、狗、貓、小鼠以及大鼠。需要治療的人類個體可為具有、有風險或懷疑患有與IgE相關的病症的人類患者(例如，過敏性氣喘，以及本領域已知及/或本文公開的其他疾病)。患有一IgE相關病症如過敏性氣喘的個體可透過常規醫學檢查，例如實驗室檢查來鑑定。懷疑患有該IgE相關疾病的個體可能表現出一種或多種疾病症狀，例如，升高的IgE含量及/或對過敏原及/或抗原的高反應性。具有該病症風險的個體可為具有該病症的一種或多種風險因子的個體。

示例性IgE相關病症包括，但不限於，氣喘、過敏性鼻炎、高IgE症候群、異位性皮膚炎、感冒蕁麻疹、慢性蕁麻疹、膽鹼型蕁麻疹、慢性鼻竇炎、系統性肥胖細胞增多症、皮膚肥胖細胞增多症、過敏性支氣管肺麴菌病、復發性自發性血管性水腫，以及間質性膀胱炎、嗜酸性白血球相關的胃腸道疾病、食物過敏，或藥物過敏。

如本文所用的「有效量」係指單獨或與一種或多種其他活性劑組合賦予該個體治療效果所需的每種活性劑的量。如本領域技術人員所認識到的，有效量的變化，取決於所治療的具體病症、病症的嚴重程度、個體患者參數，包括年齡、健康狀況，體型大小、性別以及體重、治療的持續時間、併發治療的性質(如果有的話)、給藥的具體途徑，以及健康從業者的知識及專業中的相似因素。這些因素為本領域普通技術人員所熟知的，並且可以僅透過常規實驗來解決。通常較佳使用最大劑量的各個組成分或其組合，即根據合理的醫學判斷的最高安全劑量。本領域普通技術人員將理解，然而，由於醫學原因、心理原因或幾乎任何其他原因，患者可能堅持較低劑量或可耐受劑量。

經驗考量，例如半衰期，通常將有助於確定劑量。例如，與人類免疫系統相容的抗體，例如人源化抗體或完全人類抗體，可用於延長抗體的半衰期並防止該抗體被宿主的免疫系統攻擊。施用頻率可以在治療過程中確定並調整，而且通常但並非必需地基於與IgE相關的病症之治療及/或抑制及/或改善及/或延遲。或者，抗CemX抗體的持續連續釋放製劑可能是合適的。用於實現持續釋放的各種製劑及裝置為本領域已知的。

於一實施例中，如本文所述之抗-CemX抗體的劑量可以在已經給予一次或多次施用抗-CemX抗體的個體中憑經驗確定。給予個體遞增劑量的抗CemX抗體。為了評估抗CemX抗體的功效，可以遵循與IgE相關的病症的指標(例如IgE含量)。

為了本發明之目的，抗CemX抗體的合適劑量將取決於所用的特異性抗-CemX抗體(或其組合物)、與IgE相關的病症的類型及嚴重性、 抗體是否用於預防或治療目的、既往的治療、患者的臨床病史以及對抗體的反應，以及主治醫師的判斷。通常，臨床醫生將施用抗CemX抗體，例如FB825，直至達到達成所需結果的劑量。抗CemX抗體的施用可為連續的或間歇的，這取決於例如受體的生理狀況，施用的目的為治療性的還是預防性的，以及技術人員已知的其他因素。

於一些具體實施例中，將本文所述之抗-CemX抗體(例如，FB825)施用於一有需要該治療的個體，以足以將其總IgE含量降低至少20% (例如，30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更高)的量以進行治療。

如本文所用，「治療」乙詞係指對個體應用或施用包括一種或多種活性劑的一組合物，該個體患有一與IgE相關的疾病、一與IgE相關疾病之症狀，或具有對該疾病的易感性，其目的為治療、治癒、緩解、舒緩、改變、補救、改善、改進，或影響該疾病、該疾病之症狀，或對該疾病之易感性。

減輕與IgE相關的疾病包括延遲該疾病之發展或進展，或降低該疾病的嚴重程度。減輕疾病並不一定需要治療效果。如本文所使用的，「延遲」疾病(例如與IgE相關的疾病)的發展意味著推遲、阻礙、減緩、延緩、穩定，及/或延後該疾病之進展。這種延遲可以具有不同的時間長度，這取決於該疾病的歷史及/或被治療的個體。一種「延遲」或減輕一疾病發展，或延遲該疾病發作的方法是一種，當相較於不使用該方法時，降低在給定時間範圍內發生一種或多種疾病症狀的可能性及/或在給定的時間範圍內減少該症狀程度之方法。這種比較通常基於臨床研究，使用足以給出統計學顯著結果的個體數目。

疾病的「發展」或「進展」意指該疾病的初始表現及/或隨後的進展。可以使用本領域熟知的標準臨床技術檢測及評估一疾病的發展。然而，發展也指可能無法察覺的進展。出於本發明之目的，發展或進展係指一症狀的生物學過程。「發展」包括發生、復發，以及發作。如本文所用，與IgE相關的疾病的「發作」或「發生」包括初始發作及/或復發。

為了進行如本文所述之方法，任何抗CemX抗體如FB825可以透過一單劑量或透過合適途徑的多劑量給予一需要治療的個體(例如，一人類患者)，例如，靜脈輸注或皮下注射。每次給藥的抗CemX抗體的劑量可以為約0.5 mg/kg至約25 mg/kg (例如，約1 mg/kg至約20 mg/kg，約5 mg/kg至約15 mg/kg，或約10 mg/kg至約20 mg/kg)，取決於各種因素，包括本文所述的那些因素。對於數天或更長時間的重複給藥，取決於病症，持續治療直至出現所需的症狀抑制或直至達到足夠的治療含量以減輕與IgE或其症狀相關的病症。

抗CemX抗體(例如，FB825)的施用可以在預選的一段時間內基本連續，或者可為一系列間隔劑量，例如，在發展與IgE相關的病症之前、期間或之後。示例性給藥方案包含對需要治療的個體施用第一劑量的抗Cemx抗體(例如，3 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg、15 mg/kg、20 mg/kg，或25 mg/kg)，然後在第一次給藥後至少3個月(例如，4個月、5個月，或6個月)施用第二劑量的該抗體。該第二次給藥的劑量可以高於、等於或低於該第一次給藥。取決於從業人員希望實現的藥物動力學衰變之模式，其他劑量方案可能是有用的。

於一些具體實施例中，可以合適的數量給予一需要治療的個體一第一劑量的該抗體(例如，3 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg、15 mg/kg、20 mg/kg，或25 mg/kg)。然後定期監測該個體的IgE相關病症的症狀指標，例如過敏反應及/或總IgE含量升高。當觀察到這種症狀時，可以對該個體施用一第二劑量的該抗體。

同樣在本發明內容的範圍內的是以任何抗CemX抗體預防性治療IgE相關病症以降低這種病症發生的風險。適合於這種預防性治療的個體可以是具有患有IgE相關病症病史及/或IgE相關病症家族史的人類患者。

醫學領域普通技術人員已知的常規方法可用於將該醫藥組合物給予該個體，這取決於待治療的疾病類型或疾病部位。該組合物還可透過其他常規途徑給藥，例如口服、腸胃外、透過吸入噴霧、局部、直腸、鼻腔、口腔、陰道或透過植入的儲庫給藥。本文所用之「腸胃外」乙詞包括皮下、皮內、靜脈、肌內、關節內、動脈內、滑膜內、胸骨內、鞘內、病灶內，以及顱內注射或輸注技術。另外，亦可透過可注射的貯庫給藥途徑給予該個體，例如使用1個月、3個月，或6個月的可注射或可生物降解的材料及方法。

可注射組合物可含有各種載體，例如植物油、二甲基乳醯胺、二甲基甲醯胺、乳酸乙酯、碳酸乙酯、肉荳蔻酸異丙酯、乙醇，以及多元醇(甘油、丙二醇、液體聚乙二醇及其類似物)。對於靜脈內注射，可以透過滴注方法施用水溶性抗體，由此輸注含有抗體與生理學上可接受的賦形劑的醫藥製劑。生理學上可接受的賦形劑可包括例如5%葡萄糖、0.9%鹽水、林格氏溶液或其他合適的賦形劑。肌肉內製劑，例如抗體的合適可溶性鹽形式的無菌製劑，可以溶解並在醫藥賦形劑中給藥，例如注射用水、0.9%鹽水或5%葡萄糖溶液。

於一具體實施例中，經由位點特異性或標靶局部遞送技術施用抗CemX抗體。位點特異性或標靶局部遞送技術的實例包括抗CemX抗體的各種可植入的儲庫來源或局部遞送導管，例如輸注導管、留置導尿管，或針導管、合成移植物、外膜包裹、分流器及支架或其他可植入設備，特定位點的載體，直接注射，或直接應用。參見，例如，PCT專利申請公開號WO 00/53211以及美國專利號5,981,568。也可以使用含有反義多核苷酸、表現載體，或亞基因組多核苷酸的治療組合物的標靶遞送。受體介導的DNA遞送技術描述於，例如，Findeis等人，Trends Biotechnol. (1993年) 11:202；Chiou等人，Gene Therapeutics: Methods And Applications Of Direct Gene Transfer (J. A. Wolff編輯) (1994年)；Wu等人，J. Biol. Chem. (1988年) 263:621；Wu等人，J. Biol. Chem. (1994年) 269:542；Zenke 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1990年) 87:3655；Wu等人，J. Biol. Chem. (1991年) 266:338。含有多核苷酸的治療組合物以約100 ng至約200 mg的DNA給藥，用於基因治療方案中的局部給藥。 於一些具體實施例中，濃度範圍為約500 ng至約50 mg，約1 μg至約2 mg，約5 μg至約500 μg，以及約20 μg至約100 μg或更多DNA也可在基因治療方案中使用。

可使用基因遞送載體來遞送本文所述之治療性多核苷酸及多胜肽。基因遞送載體可為病毒或非病毒來源(一般參見Jolly，Cancer Gene Therapy (1994年) 1:51；Kimura，Human Gene Therapy (1994年) 5：845；Connelly，Human Gene Therapy (1995年) 1：185；以及Kaplitt，Nature Genetics (1994年) 6：148)。可以使用內源哺乳動物或異源啟動子及/或增強子誘導此類編碼序列之表現。編碼序列之表現可為組成型的或受調節的。

用於遞送所需多核苷酸並在所需細胞中表現的基於病毒的載體為本領域熟知的。示例性的基於病毒的載體包括，但不限於，重組反轉錄病毒(參見，例如，PCT專利申請公開號WO 90/07936；WO 94/03622；WO 93/25698；WO 93/25234；WO 93/11230；WO 93/10218；WO 91/02805；美國專利號5,219,740 以及4,777,127；英國專利號2,200,651；以及歐洲專利號0 345 242)，基於甲病毒的載體(例如，辛德畢斯病毒載體、塞姆利基森林病毒(ATCC VR-67；ATCC VR-1247)、羅斯河病毒(ATCC VR-373；ATCC VR-1246)，以及委內瑞拉馬腦炎病毒(ATCC VR-923；ATCC VR-1250；ATCC VR 1249；ATCC VR-532))，以及腺相關病毒(adeno-associated virus，AAV)載體(參見，例如，PCT專利申請公開號WO 94/12649、WO 93/03769；WO 93/19191；WO 94/28938；WO 95/11984以及WO 95/00655)。如Curiel, Hum. Gene Ther. (1992) 3:147中所述的施用與不活化腺病毒連接的DNA也可以使用。

也可以使用非病毒遞送載體及方法，包括，但不限於，與單獨的不活化腺病毒連接或不連接的聚陽離子濃縮DNA (參見，例如，Curiel, Hum. Gene Ther. (1992年) 3:147)；配體連接的DNA(參見，例如，Wu, J. Biol. Chem. (1989年) 264:16985)；真核細胞遞送載體細胞(參見，例如，美國專利號5,814,482；PCT專利申請公開號WO 95/07994；WO 96/17072；WO 95/30763；以及WO 97/42338)以及核電荷中和或與細胞膜融合。也可以使用裸DNA。示例性的裸DNA導入方法描述於PCT專利申請公開號WO 90/11092以及美國專利號5,580,859中。可作為基因遞送載體的脂質體描述於美國專利號5,422,120；PCT專利申請公開號WO 95/13796；WO 94/23697；WO 91/14445；以及歐洲專利號0524968。其他方法描述於Philip, Mol. Cell. Biol.(1994年)14:2411，及Woffendin, Proc. Natl. Acad. Sci. (1994年) 91:1581。

還顯而易見的是，表現載體可用於引導本文所述之任何基於蛋白質的抗-CemX抗體(例如，FB825)之表現。例如，能夠結合CemX及/或IgE生物活性的其他抗-CemX抗體片段為本領域已知的。

在本文所述之方法中使用的具體劑量方案，亦即劑量、時間及重複，將取決於特定個體及該個體的病史。本文所述之任何抗Cmex抗體可以與其他藥劑(例如，用於治療IgE相關病症的其他藥劑)聯合使用，其用於增強及/或補充該藥劑的有效性。

於一些具體實施例中，如下文所述的抗-CemX抗體，例如FB825，用於治療異位性皮膚炎。異位性皮膚炎，也稱為濕疹，是一種以發紅及/或發癢為特徵的慢性皮膚病。其好發於兒童中，但可以在任何年齡發生。一需要治療的患者可以透過常規醫療實踐確定患有異位性皮膚炎的一種或多種症狀，包括皮膚乾燥、瘙癢、紅色到棕灰色斑塊、小、凸起的腫塊，當劃傷、增厚、破裂、鱗片狀皮膚，及/或皮膚刮傷引起的粗糙、敏感、腫脹時可能會洩漏液體及結成外殼。於一些情況下，可以透過常規實踐檢查候選個體的總IgE含量及過敏原特異性IgE含量。如果候選個體的IgE含量(例如，總IgE，過敏原特異性IgE，或二者)高於正常含量(代表相同物種的個體的平均IgE含量，例如人類，沒有異位性皮膚炎或與IgE相關的其他過敏性疾病)。

需要治療的人類患者可以經由本文所述之常規途徑給予第一劑量的該抗體，其範圍可為3 mg/kg至8 mg/kg。於某些情況下，該第一劑量為5 mg/kg。在該第一次劑量後，可以監測該患者的總IgE含量。如果該第一次給藥後3-4週IgE含量的降低小於50%，則可在該第一次給藥後3-4週給予該患者第二劑量的該抗體。該第二劑量可以與該第一劑量相同，或者低於該第一劑量。於一些情況下，該第一劑量及該第二劑量皆為5 mg/kg，且在1-2小時內透過靜脈內(IV)輸注施用。在治療過程中還可以監測指示功效及/或安全性的其他生物標示物。此類生物標示物包括，但不限於，胸腺及活化調節化學激活素(thymus and activation regulated chemokine，TARC)、嗜酸性白血球化學激活素-3、胸腺基質淋巴細胞生成素(thymic stromal lymphopoietin，TSLP)、骨膜素、IL-1a、IL-4、IL-5、IL-13、IL- 16、IL-31、M-CSF，或其組合。

經常規醫學實踐診斷，經過上述治療的人類患者可患有慢性異位性皮膚炎至少3年，例如，由Hannifin及Rajka的Eishenfield修訂標准定義並且由陽性過敏原特異性IgE支持。患者可能具有以下一項或多項特徵：(i) 濕疹面積及嚴重程度指數(eczema area and severity index，EASI)評分大於14，(ii) 調查員的綜合評估(Investigator’s Global Assessment，IGA)得分大於3 (5分制)，(iii) 體表面積(body surface area，BSA)大於10%，(iv) 在治療前至少一個月或至少三個月對局部皮質類固醇或鈣調神經磷酸酶抑制劑的穩定方案反應不足的歷史。此外，在治療前至少7天，可以對該人類患者每天二次給予一穩定劑量的潤膚劑。

於一些情況下，如本文所述之抗CemX抗體(例如，FB825)可與保濕劑(例如，以穩定劑量，例如每天至少二次)及/或局部皮質類固醇(topical corticosteroid，TCS)共同使用。中等效力的局部皮質類固醇(TCS)可以施用於具有活動性病變的區域，並且可以在病變得到控制後轉換為一低效局部皮質類固醇(TCS)。如果病變再次發生，以中等效力局部皮質類固醇(TCS)以下階梯式方式治療可以恢復。如果在使用中等效力局部皮質類固醇(TCS)進行每日治療後病變持續或惡化，則可以使用高效或超高效局部皮質類固醇(TCS)，除非認為其不安全。低效局部皮質類固醇(TCS)可用於薄皮膚區域(例如，面部、頸部、間隙、生殖器區域或皮膚萎縮區域)或持續使用中等效力局部皮質類固醇(TCS)被認為不安全的區域。

具有低、中，及高或超高效力的局部皮質類固醇(TCS)在本領域中為眾所周知的。示例性的中效局部皮質類固醇(TCS)包括0.05%丙酸氟替卡松乳膏、0.1%糠酸莫美他松乳膏，或0.06%戊酸貝皮質醇乳膏。示例性的低效局部皮質類固醇(TCS)包括1%氫皮質酮軟膏。示例性的高效局部皮質類固醇(TCS)可為0.05%的氟喹諾酮乳膏或0.25%的去氫氧迪皮質醇軟膏。示例性的超高效局部皮質類固醇(TCS)可為0.05%丙酸倍氯松軟膏。

於一些情況下，以本文所述治療的患者不含以下一種或多種療法：(i) 局部他克莫司及吡美莫司，(ii) 全身皮質類固醇治療，(iii) 白三烯抑制劑(iv) 過敏原免疫療法，(v) 免疫抑制劑或免疫調節劑的系統治療(例如，環孢菌素、黴酚酸酯-黴菌素、IFN-γ、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤，或生物製劑)，(vi) 活的(例如，減毒的)疫苗，及/或(vii) 中藥治療。該患者也可能沒有經過任何外科手術及/或紫外線處理。

本文所述之任何方法可以進一步包含在該第一劑量後評估該個體中降低的血紅蛋白、上呼吸道感染、尿路感染，或其組合的發生。如果觀察到一次或多次出現，則可以減少該第二劑量的抗CemX抗體(例如，FB825)的量。或者，可以停止治療。

用於治療 IgE 相關疾病的套組

本發明還提供了用於治療IgE相關病症之套組。此類套組可包括一個或多個容器，其包含如本文所述之抗CemX抗體(例如FB825)。

於一些具體實施例中，該套組可包含根據本文所述任何方法使用的說明書。所包括的說明書可包含根據本文所述之任何方法施用抗CemX抗體以治療、延遲發作或減輕IgE相關病症的描述。該套組可以進一步包含基於鑑定該個體是否具有、懷疑患有該疾病，或是否具有該疾病的風險來選擇適合於治療的個體之描述。在其他具體實施例中，該說明書包含對一需要治療的個體施用抗CemX抗體以降低發生IgE相關病症的風險之描述。

與使用抗CemX抗體有關的說明書通常包括關於預期治療的劑量、給藥方案，以及給藥途徑的資訊。容器可為單位劑量、散裝包裝(例如，多劑量包裝)或次單位劑量。 本發明之套組中提供的說明書通常是在標籤或包裝說明書(例如，包括在套組中的紙張)上的書面說明，但機器可讀指令(例如，磁性或光學存儲盤上攜帶的說明書)也是可以接受的。

標籤或包裝說明書指示該組合物用於治療、延遲發作及/或減輕IgE相關病症。可以提供用於實踐本文所述之任何方法的指令。

本發明的套組處於合適的包裝中。合適的包裝包括，但不限於，小瓶、瓶子、廣口瓶、軟包裝(例如，密封的聚酯薄膜或塑料袋)及其類似物。還考慮了與特定裝置結合使用的包裝，例如吸入器、鼻腔給藥裝置(例如，霧化器)或輸液裝置，例如微型幫浦。該套組可具有無菌進入口(例如，容器可為靜脈內溶液袋或具有可由皮下注射針刺穿的塞子的小瓶)。該容器還可具有無菌進入端口(例如，該容器可為靜脈內溶液袋或具有可由皮下注射針刺穿的塞子的小瓶)。該組合物中的至少一種活性劑為抗Cemx抗體，例如FB825。

該套組可選地提供額外的組成物，例如緩衝液與解釋資訊。通常，該套組包含一容器以及在該容器上或與該容器相關聯的標籤或包裝插件。於一些具體實施例中，本發明提供了包含上述套組的內容物之製品。

一般技術

除非另有說明，否則本發明的實踐將採用分子生物學(包括重組技術)、微生物學、細胞生物學、生物化學，以及免疫學的常規技術，這些技術在本領域的技術範圍內。這些技術在文獻中有完整的解釋，例如，Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition (Sambrook等人，1989年) 冷泉港實驗室出版社；Oligonucleotide Synthesis (M. J. Gait編輯，1984年)；Methods in Molecular Biology, Humana出版社；Cell Biology: A Laboratory Notebook (J. E. Cellis編輯，1998年) Academic出版社；Animal Cell Culture (R. I. Freshney編輯，1987年)；Introduction to Cell and Tissue Culture (J. P. Mather及P. E. Roberts, 1998年) Plenum出版社；Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J. B. Griffiths及D. G. Newell編輯，1993-8年) J. Wiley and Sons；Methods in Enzymology (Academic出版社)；Handbook of Experimental Immunology (D. M. Weir及C. C. Blackwell編輯)；Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J. M. Miller及M. P. Calos編輯，1987年)；Current Protocols in Molecular Biology (F. M. Ausubel等人，eds., 1987年)；PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis等人，eds., 1994年)；Current Protocols in Immunology (J. E. Coligan等人編輯，1991年)；Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999年)；Immunobiology (C. A. Janeway及P. Travers, 1997年)；Antibodies (P. Finch, 1997年)；Antibodies: a practical approach (D. Catty.編輯，IRL出版社，1988-1989年)；Monoclonal antibodies: a practical approach (P. Shepherd及C. Dean編輯，牛津大學出版社，2000年)；Using antibodies: a laboratory manual (E. Harlow及D. Lane (冷泉港實驗室出版社，1999年)；The Antibodies (M. Zanetti及J. D. Capra編輯，Harwood學術出版社，1995年)。

無需進一步詳細說明，相信本領域技術人員基於以上描述可以最大程度地利用本發明。因此，以下特定具體實施例應被解釋為僅為說明性的，並且不以任何方式限制本發明的其餘部分。出於本文引用之目的或主題，本文引用的所有出版物均以引用的方式併入。

實施例 1 ： FB825 在食蟹猴中的毒性研究

材料與方法

實驗室檢測

在常規臨床實驗室測試後收集血液及尿液樣本用於血液學、凝血、血清化學(包括肝功能測試)、甲狀腺功能測試及尿液分析。

基於每個實驗室參數的參考範圍，將異常臨床實驗室值標記為高或低(或正常或異常)。臨床意義被定義為具有醫學相關性之結果的任何變化，並可能導致醫療護理的改變(例如，主動觀察、診斷措施，或治療措施)。如果注意到篩選的臨床顯著變化，則記錄臨床顯著性值以及臨床意義的原因。繼續監測正在治療的食蟹猴，進行額外的評估，直至數值達到參考範圍或篩選時的數值或直到醫學上不在需要隨後的追蹤。

藥效學評估

使用由Vince and Associates 臨床研究公司提供的3.5-mL血液收集管(BD Vacutainer® SST™血清分離管)收集用於測定總IgE及抗藥物抗體(antidrug antibodies，ADA)的血液樣品。收集一個樣品以達到每個血液收集管尺寸的最小血液量。在每個時間點收集至少1.0 mL血清。在獲得血液樣品後，將收集管倒置5次，並使血液在環境溫度(19˚C-24˚C)下凝結30分鐘。將樣品在旋翼式轉子離心機中於室溫下以約2200 rpm離心10分鐘。使用標準實驗室技術將大約等體積的重複血清等分試樣(每等分試樣至少500 μL)轉移到由Vince and Associates 臨床研究公司提供的2個適當標記的儲存管(2-mL聚丙烯冷凍管)中。

使用經驗證的ELISA分析用於測量抗藥物抗體(ADA)的免疫原性樣品。

血清內天門冬胺酸胺基轉移酶與丙胺酸胺基轉移酶

透過測量天門冬胺酸胺基轉移酶(aspartate aminotransferase，AST)以及丙胺酸胺基轉移酶(alanine amino transferase,，ALT)的含量來監測以FB825治療的食蟹猴的肝功能。這兩種酶的活性表示為每公升單位(U/L)。

結果

FB825 在食蟹猴中的單劑量研究

在食蟹猴中進行的非GLP單劑量毒性研究中評估了FB825的單劑量的毒性。在第一項研究中，在食蟹猴中測定治療相關效應，給予單次10分鐘靜脈輸注FB825。在第二項研究中，在單獨皮下注射FB825的食蟹猴中測定了治療相關效應。

在靜脈內(IV)注射劑量範圍發現研究中，雄性與雌性食蟹猴對於以30、100，以及300 mg/kg FB825的單次10分鐘靜脈內(IV)輸注展現出良好的耐受性。在臨床參數、食物攝取、體重或死亡率上並無治療相關的影響。FB825相關效應僅限於在第57天恢復的ALT及AST的最小量增加，以及給予至少100 mg/kg FB825的動物在給藥後6小時及/或1小時後介白素-6與介白素-10的最小量增加。基於這些結果，未觀察到不良反應的含量(no observed adverse effect level，NOAEL)被認為是300 mg/kg。

於另一單劑量毒理學研究中，透過單次皮下注射給予300 mg/kg FB825的食蟹猴中具有良好的耐受性。未觀察到與FB825相關的臨床徵狀或對體重或臨床病理學參數(血液學、凝血，以及臨床化學)的影響。FB825 在食蟹猴中的重複劑量研究

在食蟹猴中評估FB825的重複劑量毒性。在食蟹猴中測定治療相關效果，每週一次10分鐘靜脈內輸注FB825，總共4個劑量。

以10分鐘靜脈內(IV)輸注每週一次施用30、100，以及300 mg/kg FB825總共4次劑量在食蟹猴中耐受性良好。本研究評估了以下參數以及終點：臨床症狀、體重、食物攝取、眼科、心電圖檢查、臨床病理參數(血液學、凝血和臨床化學)、生物分析及毒物動力學評估、抗腫瘤抗體分析、流式細胞儀、IgE分析、甲狀腺激素含量、大體剖檢結果、器官重量，以及組織病理學檢查。

在高達300 mg/kg的劑量下，在任一性別中均未觀察到與體重、食物攝取、眼科及心電圖檢查、凝血參數，以及甲狀腺激素含量相關的FB825相關臨床徵狀或影響。此外，在劑量高達並包括300 mg/kg時，沒有與FB825相關的顯著總體發現。

FB825相關效應局限於FB825劑量高於或等於100 mg/kg時ALT的可逆顯著增加，以及AST可逆性輕度增加，白蛋白含量與相對應白蛋白：球蛋白比例的部分可逆性最小降低，以及在FB825劑量為300 mg/kg時單核細胞計數可逆性最小增加。ALT及AST含量在300 mg/kg時的增加幅度被認為是不利的。在≥30 mg/kg的含量觀察到標靶器官效應，且由甲狀腺的非逆向濾泡膠體消耗以及較低的甲狀腺重量所組成。然而，較低的甲狀腺重量在歷史對照組猴子中觀察到的範圍內。據報導，在食蟹猴中，膠體染色模式的變化、甲狀腺濾泡大小的變化，以及空泡變性都是自發的發現(Ishida 2000年；Hatakeyama 2011年)，因為對甲狀腺素及促甲狀腺激素含量沒有測試物相關的影響，在本研究的條件下，甲狀腺的發現被認為並非不利的。

基於在300 mg/kg濃度時ALT及AST含量的增加，未觀察到的不良反應含量(NOAEL)被認為是100 mg/kg (雄性的C_max 為5330 μg/mL，AUC_(0-168h) 為520 mg•hr/mL，且雌性的C_max 為5220 μg/mL，AUC_(0-168h) 為487 mg•hr/mL)。實施例 2 ：人體臨床研究

本研究的主要目的為評估單次遞增靜脈內(IV)劑量的FB825在正常健康個體中的安全性及耐受性。本研究的次要目標包括確定FB825單次遞增靜脈注射劑量的藥物動力學(PK)曲線，探討單次遞增靜脈內(IV)劑量FB825後對總IgE的影響，並探討FB825的單次遞增靜脈注射(IV)劑量後抗FB825抗體的發生情況。

研究設計

這是第一階段，首次於人體內執行(first-in-human，FIH)、隨機、雙盲，安慰劑對照組研究，以評估FB825的單次遞增靜脈內(IV)劑量的安全性、耐受性，藥物動力學，以及免疫原性。表1中描述了在FB825人體臨床研究期間執行的事件之時間表的概述。符合研究入組標準的個體被分配到當前劑量組並隨機分配接受FB825或安慰劑(載劑)。所有劑量的FB825以1小時靜脈內(IV)輸注給藥。

在進展至下一個最高劑量組群之前，審查每個劑量組的安全性數據。只有在確認安全性後，才允許給予下一劑量最高劑量組。必要時可以調整或重複劑量含量。盲法藥物動力學(PK)數據與盲法安全性數據同時進行審查。

該研究包括6個隊列與總共約54個正常、健康的個體(在組群A及B中各7個個體[4個活性：3個安慰劑]，並在群組C、D、E，及F中各10個個體[7個活性：3個安慰劑])。起始FB825劑量為0.003 mg/kg 靜脈內(IV)給藥，隨後組群計劃增加至0.03、0.3、1.5、5，以及10 mg/kg 靜脈內(IV)給藥。該研究包括篩選時期(第-28天至第-2天)、登記 (第-1天)、治療/後續追蹤期(第1天至第140天)，以及研究結束訪問(第140天)。

個體在第-1天檢查進入臨床研究，並進行登記手續。當程序重疊並計劃在同一時間點發生時，程序的順位是生命特徵測量、心電圖，然後是藥物動力學血液採集。

個體在第1天接受活性或安慰劑研究藥物。來自2個最低劑量群組(群組A及B)的前2個個體接受安慰劑或FB825 (即，安慰劑與活性研究藥物二者皆被要求要有代表)。在前2名個體給藥後48小時對這些組中的剩餘個體進行給藥。4個最高劑量組中的所有個體同時給藥。在決定繼續給予下一個隊列之前，在隊列中最後一個個體的給藥之間至少有14天。在進展至下一個最高劑量組群之前，以盲法評估每個劑量組的安全性數據。只有在確認安全後，才允許在次高劑量組中給藥。盲法藥物動力學(PK)數據與盲法安全性數據同時進行審查。

在第1天，收集用於藥物動力學(PK)評估的血液樣品在輸注開始前30分鐘(±5分鐘)；在輸注開始後30分鐘(±2分鐘)；在輸注開始後1小時、1.25小時，以及2小時(±2分鐘)；在輸注開始後4小時及8小時(±5分鐘)；在輸注開始後24小時及48小時(±10分鐘)。此外，在輸注後第5、14、29、85，以及140天收集單個血液樣品。在第1天(輸注開始前30分鐘[±5分鐘])以及第5、14、29、85，以及140天收集用於免疫原性評估的血液樣品。

個體從第-1天限制在診所內，直到第3天出院(給藥後48小時)，並在第5、14、29、85，以及140天返回診所進行門診就診。

研究的持續時間，排除篩選，約為140天。患者族群

健康的男性及女性個體，年齡在18至55歲之間，體重超過或等於50公斤，身體質量指數為18.0至30.0 kg/m² (含)，並提供書面知情同意書。共招募了54名個體，41名個體(75.9%)完成了本研究，並且停止13名個體(24.1%)進行研究。7名個體(13.0%)因為個體選擇而中斷，並且在0.3、1.5、5，以及10 mg/kg FB825治療組中包括1名個體，在安慰劑治療組中包括3名個體。6名個體(11.1%)失去隨後追蹤，並且在0.003、0.3，以及1.5 mg/kg FB825與安慰劑治療組中包括1名個體，在10 mg/kg FB825治療組中包括2名個體。

表 1. 事件時間表。 縮寫：ADA，抗藥物抗體；ECG，心電圖；EOS，研究結束；FSH，卵泡刺激素；Ig，免疫球蛋白。

FB825 施用

在第1天，個體在約1小時內接受單次靜脈內(IV)輸注FB825 (0.003、0.03、0.3、1.5、5，或10 mg/kg)或安慰劑。

所有劑量在預定給藥日(第1天)的早晨作為一個單次，約1小時靜脈內(IV)的輸注在禁食約2小時後給藥。在給藥前2小時或更長時間允許清淡的早餐。除了給藥前1小時及給藥後1小時，任何時間都允許飲水。在施用前稀釋FB825溶液。

在第1天0小時以靜脈內輸注施用單次約1小時的FB825或安慰劑。下一劑量含量的進展取決於安全審核小組的批准。來自2個最低劑量組群(組群A及組群B)的前2個個體接受安慰劑或FB825 (即，安慰劑與活性研究藥物二者皆被要求要有代表)。在給予前2名個體48小時後，對這些組中的剩餘個體進行給藥。4個最高劑量組中的所有個體同時給藥。

藥物動力學 (PK) 評估

在以下時間點從所有個體收集用於FB825的藥物動力學(PK)分析的血液樣品：在第1天，在開始輸注之前30分鐘(±5分鐘)；在輸注開始後30分鐘(±2分鐘)；在輸注開始後1小時、1.25小時，以及2小時(給藥後30分鐘至2小時±2分鐘)；在輸注開始後4小時及8小時(給藥後4至8小時±5分鐘)；在輸注開始後24小時及48小時(給藥後24至48小時±10分鐘)。 另外，在輸注後第5天、第14天(±1天)、第29天(±2天)、第85天(±3天)，以及第140天(±5天)收集單個血液樣品。

使用非隔室方法從每個個體的血清濃度數據計算FB825的以下單劑量藥物動力學(PK)參數：

藥物動力學血液樣本

使用由Vince and Associates 臨床研究公司提供的3.5 mL血液收集管(BD Vacutainer^® SST™血清分離管)收集用於分析FB825的血液樣品。收集一個樣品以達到每個血液收集管尺寸的最小血液量。在每個時間點收集至少1.0 mL血清。在獲得血液樣品後，將收集管倒置5次，並使血液在環境溫度(19˚C-24˚C)下凝結30分鐘。將樣品在旋翼式轉子離心機中於室溫下以約2200 rpm離心10分鐘。使用標準實驗室技術將大約等體積的重複血清等分試樣(每等分試樣至少500 μL)轉移到由Vince and Associates 臨床研究公司提供的2個適當標記的儲存管(2-mL聚丙烯冷凍管)中。標籤固定在每個儲存管上，並包含以下資訊： 樣品類型：人類血清 分析類型：藥物動力學(PK) 實驗程序：FB825CLCT01 主題編號：隨機數 時間點：參考實驗程序 血清等分試樣：1或2

在收集後90分鐘內，將兩份等分試樣直立儲存在-70°C±10°C。使用經驗證的ELISA進行FB825的藥物動力學測定。

藥效學評價

在第1天，在輸注開始前30分鐘(±5分鐘)以及輸注後第5天、第14天(±1天)、第29天(±2天)、第85天(±3天)，以及第140(±5天)收集用於測定總IgE以及抗藥物抗體(ADA)的血液樣品，或提前終止。

使用由Vince and Associates 臨床研究公司提供的3.5 mL血液收集管(BD Vacutainer^® SST™血清分離管)收集用於分析ADA含量的血液樣品。收集一個樣品以達到每個血液收集管尺寸的最小血液量。在每個時間點收集至少1.0 mL血清。在獲得血液樣品後，將收集管倒置5次，並使血液在環境溫度(19˚C-24˚C)下凝結30分鐘。將樣品在旋翼式轉子離心機中於室溫下以約2200 rpm離心10分鐘。使用標準實驗室技術將大約等體積的重複血清等分試樣(每等分試樣至少500 μL)轉移到2個適當標記的儲存管(2-mL聚丙烯冷凍管)中。使用經驗證的ELISA分析用於測量抗藥物抗體(ADA)的免疫原性樣品。

安全評估

安全性及耐受性透過監測及記錄不良事件(AEs)、臨床實驗室檢測結果(血液學、凝血、血清化學，包括肝功能檢查、甲狀腺功能檢查，以及尿液分析)、生命徵狀測量、12導聯心電圖結果、心臟遙測數據，以及體檢結果進行測定。

臨床實驗室檢查

用於血液學、凝血、血清化學(包括肝功能測試)、甲狀腺功能測試、尿液分析，以及藥物篩選測試的血液及尿液樣本在禁食條件下(禁食約2小時或更長時間)在事件時間表(表1)中指示的時間點收集。在篩選時進行臨床實驗室測試(血液學、凝血、血清化學[包括肝功能測試]，以及尿液分析)；報到；在輸注開始前第1天及輸注開始後第1小時(輸注結束)、第8小時及第24小時(±15分鐘)；並且在第3天 (給藥後長達48小時±15分鐘)，第5天、第14天、第29天、第85天，以及第140天的單個時間點。

樣本用於臨床實驗室檢查，包括血液學、凝血、血清化學、甲狀腺功能，以及尿液分析。

在篩選、報到，第3天(給藥後48小時)以及研究結束時(第140天)對所有女性個體進行血清妊娠試驗(β-人類絨毛膜促性腺激素)。 停經後的女性個體在篩選時進行血清FSH測試。

在篩選時評估B型肝炎表面抗原，C型肝炎病毒抗體，以及人類免疫缺陷病毒(第1型或2型)抗體。

在篩選時進行尿液篩選，在第-1天進行酒精、安非他命、巴比妥類藥物、苯二氮卓、可卡因代謝物、可鐵寧、亞甲二氧基甲基苯丙胺、鴉片類藥物、苯環己哌啶、丙氧芬，以及四氫大麻酚篩檢。

基於每個實驗室參數的參考範圍，將異常臨床實驗室值標記為高或低(或正常或異常)。臨床意義被定義為具有醫學相關性的結果的任何變化，並且可能導致醫療護理的改變(例如，主動觀察、診斷措施，或治療措施)。如果注意到篩選的臨床顯著變化，則在eCRF的不良事件(AE)頁面上記錄臨床顯著性值與臨床意義的原因。透過額外評估連續監測該個體，直至數值達到參考範圍或篩選時的數值或直到醫學上不在需要隨後的追蹤。

生命徵狀測量

生命徵狀測量包括收縮壓及舒張壓、心率、呼吸頻率，以及口腔體溫。 除了直立性評估之外，在進行所有測量之前，個體坐下至少5分鐘。在直立性評估的時間點，在對個體進行所有測量之後，個體在測量他們的血壓及心率之前仰臥5分鐘；然後個體靜待1分鐘後再次採集血壓與心率。

在事件時間表(表1)中指示的時間點測量生命徵狀。

在篩選時獲得生命徵狀測量值(收縮壓及舒張壓、心率、呼吸頻率，以及口腔體溫)；報到；在輸注開始前的第1天及輸注開始後的第1小時(輸注結束)、第2小時及第4小時(±15分鐘)，以及第8小時及第24小時(±30分鐘)；在第3天(給藥後長達48小時±15分鐘)、第5天、第14天、第29天、第85天，以及第140天。在輸注期間，每15分鐘(±5分鐘)獲得生命徵狀測量值。在辦理報到手續時進行了直立評估；在輸注開始前的第1天及輸注開始後的第2、4、8以及24小時(±15分鐘)；以及在第5天。

臨床意義被定義為具有醫學相關性的結果的任何變化，並且可能導致醫療護理的改變(例如，主動觀察、診斷措施，或治療措施)。如果注意到篩選的臨床顯著變化，則在個體eCRF的不良事件(AE)頁面上記錄臨床顯著性值與臨床意義的原因。可以持續監測個體並進行額外的評估，直至數值達到參考範圍或篩選時的數值或直到醫學上不在需要隨後的追蹤。

十二導聯心電圖

個體在事件時間表(表1)中指示的時間點處於仰臥位置至少5分鐘後獲得單個12導聯心電圖。篩選時獲得12導聯心電圖；報到；在第1天輸注開始前2小時內以及輸注開始後1小時(輸注結束)、8小時以及24小時(±15分鐘)；並在第3天(給藥後長達48小時±15分鐘)、第5天、第14天，以及第140天。

心電圖評估包括評論描記為正常還是異常，以及節律、心律失常或傳導缺陷的存在、形態學、心肌梗塞的證據，以及ST段、T波，以及U波異常。此外，測量並報告了以下間隔的測量值：RR間期、PR間期、QRS寬度、QT間期，以及QTcF。

臨床意義被定義為具有醫學相關性的結果的任何變化，並且可能導致醫療護理的改變(例如，主動觀察、診斷措施，或治療措施)。如果注意到篩選的臨床顯著變化，則在個體eCRF的不良事件(AE)頁面上記錄臨床顯著性值與臨床意義的原因。透過額外評估連續監測該個體，直至數值達到參考範圍或篩選時的數值或直到醫學上不在需要隨後的追蹤。

心臟遙測

在事件時間表(表1)中指示的時間點進行心臟遙測。心臟遙測監測在第1天開始(在輸注開始前約30分鐘開始)並在輸注結束後持續4小時。

臨床意義被定義為具有醫學相關性的結果的任何變化，並且可能導致醫療護理的改變(例如，主動觀察、診斷措施，或治療措施)。如果注意到第1天(輸注開始前約30分鐘)的初始遙測結果的臨床顯著變化，臨床顯著性值與臨床意義的原因記錄在個體的eCRF的不良事件(AE)頁面上。透過額外評估連續監測該個體，直到醫學上不在需要隨後的追蹤。

體檢

在事件計劃表(表1)中指出的時間點進行完整的身體檢查及簡短的身體檢查。在篩選時以及第3天、第14天和第140天進行完整的身體檢查(包括皮膚紅斑的評估)。在報到時(第-1天)以及第5天、第29天，以及第85天進行簡短的身體檢查(包括皮膚紅斑評估)。身體檢查包括篩選時的身高及體重，僅在其他日子進行體重檢查。

完整的身體檢查包括皮膚評估(包括任何皮膚紅斑跡象)、頭部、耳朵、眼睛、鼻子、喉嚨、頸部、甲狀腺、肺臟、心臟、心血管系統、腹部、淋巴結，以及肌肉骨骼系統/四肢。進行臨時體檢以評估不良事件(AEs)或臨床實驗室異常。

簡短的身體檢查包括評估皮膚(包括皮膚紅斑的任何跡象)、肺臟、心血管系統，以及腹部(肝臟、脾臟)。

測量身高及體重，僅在篩選時計算身體質量指數。在事件時間表中指示的所有其他身體檢查時間點測量體重。

人體研究的劑量選擇

在該階段1，FIH研究中的起始劑量為0.003 mg/kg，其使用來自非人類靈長類動物的4週重複劑量毒理學研究的未觀察到不良反應的含量(NOAEL)測定，該研究是與人類最接近且最相關的模型，並且應用適當的安全性因子，以及基於體外及體內藥理學數據和毒物動力學數據，計算FB825的最小預期生物效應含量(minimum anticipated biological effect level，MABEL)。

在食蟹猴的4週重複劑量毒理學研究中，FB825的未觀察到不良反應的含量(NOAEL)被認為是100 mg/kg。等效人體劑量係根據美國食品暨藥物管理局(Food and Drug Administration，FDA)產業指南：估計成人健康志願者治療藥物在初始臨床試驗中的最大安全起始劑量(2005年7月)計算，其為38.8 mg/kg；在對其應用適當的安全因子(即100倍)後，人類個體的最大推薦起始劑量約為0.39 mg/kg。

FB825的最小預期生物效應含量(MABEL)預計為0.1 μg/mL。據估算，人類個體單次靜脈注射0.003 mg/kg可導致FB825暴露於全身，範圍為0.06 μg/mL至0.09 μg/mL；因此，研究期間不應超過最小預期生物效應含量(MABEL)。採用該範圍的較高數值，以該起始劑量的FB825的預期最大循環濃度將比食蟹猴未觀察到不良反應的含量(NOAEL)(100 mg/kg/天)劑量含量的FB825的C_max 小約4.4×10⁴ 倍，給予單次靜脈內(IV)劑量的FB825(研究20031008)。這提供了以毫克/公斤為基礎的3.7×10⁴ 倍的安全係數，超過了未觀察到不良反應的含量(NOAEL)(300 mg/kg)的人類當量劑量111.6 mg/kg。

結果

該研究在健康成年人個體的隨機、安慰劑對照組、雙盲研究中透過靜脈內(IV)注射評估單次遞增劑量的FB825的安全性、耐受性、藥物動力學，以及免疫原性。計劃的首次人體(FIH)臨床第1階段研究的研究群體之設計及選擇是基於所獲得的FB825的初始安全性、耐受性、藥物動力學(PK)，以及免疫學結果以用於未來臨床研究的需要。根據表1中列出的事件時間表獲得數據。

FB825 被安全地給予人類個體

單劑量、1小時、靜脈注射FB825，劑量為0.003、0.03、0.3、1.5、5，以及10 mg/kg，在該臨床試驗中，健康個體是安全且耐受性良好的。沒有死亡且沒有因為治療緊急不良事件(treatment emergent adverse event，TEAE)而有任何個體中斷。除血紅蛋白減少、上呼吸道感染、尿路感染，以及槍傷外，所有治療緊急不良事件(TEAE)均在研究結束時得到解決。

臨床實驗室檢查結果、生命徵狀測量、12導聯心電圖檢查結果或體檢結果均未出現明顯的治療或劑量相關趨勢。

透過施用 FB825 減少總 IgE

在1.5以及10 mg/kg FB825治療組的所有給藥後時間點，總IgE降低。在其他劑量(0.003、0.03、0.3，以及5 mg/kg FB825)以及安慰劑治療組中，總IgE於一些給藥後時間點減少，但沒有總體趨勢(圖1及圖2)。

僅有4名個體(0.03、0.3，以及5 mg/kg FB825與安慰劑治療組各1名)具有可檢測的抗藥物抗體(ADA)，其中0.03 mg/kg FB825治療組中僅1名個體具有反應性抗藥物抗體(ADA)(圖3)。

實施例 3 ：評估 FB825 在患有異位性皮膚炎的成人中的安全性及有效性的開放標記探索性研究

本研究目的在於評估靜脈注射FB825後患有異位性皮膚炎的患者的總IgE以及過敏原特異性IgE從基線的變化，並評估這些患者的臨床療效。本研究的目的還有在評估以FB825治療的患者中的安全性，監測靜脈內(IV)給予FB825後臨床血液學的變化，以及探索在靜脈內(IV)給予FB825後的生物標記物變化，包括胸腺與激活調節化學激活素(thymus and activation regulated chemokine，TARC)、嗜酸性球趨化性因子-3 (Eotaxin-3)、胸腺基質淋巴細胞生成素(thymic stromal lymphopoietin，TSLP)、骨膜素、IL-1a、IL-4、IL-5、IL-13、IL-16、IL-31，以及M-CSF。

FB825為人源化單株免疫球蛋白G1 (IgG1)，其將表現膜結合IgE (mIgE)的人類B淋巴細胞上的CemX結構域作為標靶。FB825可以阻斷IgE合成的生物學途徑，從而有利於IgE介導的過敏性疾病之治療。FB825在水溶液中配製，並透過1小時靜脈內(IV)輸注以5 mg/kg給予患者。

研究程序

這是一項開放標記的探索性研究，目的在於評估FB825在異位性皮膚炎(AD)成人中的安全性及有效性。大約12名患有異位性皮膚炎(AD)的人類患者符合研究入組標準，並參加該研究。所有符合條件的患者在第1天及第85天透過1小時靜脈內(IV)輸注接受5 mg/kg的FB825 (表2)。個體在第1天及第85天接受FB825後住院，第二天出院進行安全觀察(至少12小時)。為了安全性及有效性以及生物標記物評估，患者在第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天返回研究地點(表2)。

在某些情況下，可能要求患者在第78天進行實地訪視以進行血液採樣。血液採樣之目的為測量總IgE，以確定該個體是否需要第二劑量的FB825。在第78天，總IgE的基線變化小於50%的個體可以接受第二劑量的FB825 (5 mg/kg)。在第78天具有總IgE從基線50%變化的個體可以在第85天進行研究結束訪問，然後完成研究。針對接受第二劑量FB825的患者，可以分析並總結第二劑量之數據，與第一劑量收集的相同。於一些情況下，患者在第85天透過1小時靜脈內(IV)輸注接受5 mg/kg第二劑量的FB825。這些患者在第85天接受FB825之前住院，並於第二天出院進行安全觀察(至少12小時)。為了安全性及有效性評估，患者在第92、99、113、141，以及169天返回研究地點。

在預定的就診時間測量血清總IgE以及抗原特異性IgE，並評估靜脈注射5 mg/kg FB825後從基線的變化。

在預定的就診時間檢查患者的臨床療效評估活動，包括瘙癢視覺模擬量表(Pruritus Visual Analogue Scale，VAS)、濕疹及嚴重程度指數(EASI)、異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)，針對異位性皮膚炎(AD)症狀的異位性皮膚炎(AD)及體表區域(BSA)的研究者綜合評估(IGA)。

計畫主持人(PI)審查了安全性數據，包括不良事件(AEs)以及實驗室測試。個體參與研究的持續時間約為24週。

研究群體的選擇

患有異位性皮膚炎的男性或女性個體被納入單個研究地點。共招募約15名個體以達到至少12名可評估個體。

選擇標準

(i) 主要入選標準 l 20至65歲(包括20及65歲)的男性或女性個體。 l 根據3年的症狀史，個體患有醫生確認診斷的慢性異位性皮膚炎，這是基於由Eichenfield修訂的Hannifin及Rajka的標準定義，且在篩選就診時由陽性過敏原特異性IgE所支持。 l 在篩選與基線訪視時濕疹面積及嚴重程度指數(EASI)評分≥14。 l 在篩選與基線訪視時研究者的全面評估(IGA)評分≥3 (5分制)。 l 篩選與基線訪視時，異位性皮膚炎(AD)包含的體表面積(BSA) ≥10%。 l 在篩選訪視前3個月內對一種局部皮質類固醇或鈣調神經磷酸酶抑制劑穩定(1個月)方案作為異位性皮膚炎(AD)治療的反應不足的歷史。(局部皮質類固醇的治療方案意味著中等至高效，應用至少28天或產品處方資訊推薦的最長持續時間。) l 患者必須在基線訪視前至少7天每天使用二次穩定劑量的提供給異位性皮膚炎的潤膚劑。 l 有生育潛力的女性個體必須至少使用二種形式的避孕措施。一個必須是屏障保護(即保險套或女用保險套)，另一個為整個研究中可接受的節育方法之一(即隔膜、宮內節育器、激素避孕藥或禁慾)。手術無菌(即子宮切除術，雙側輸卵管結紮術或雙側卵巢切除術)或停經後(定義為連續12個月的閉經且記錄的血清促卵泡激素含量＞ 40 mU/mL)的個體將被視為無生育潛力。所有女性個體在給藥前必須進行陰性血清妊娠試驗。個體必須在研究期間以及在FB825最後一次給藥後的16週或5個半衰期中使用上述避孕方法。 l 個體在篩選時體重≥40kg，身體質量指數為18.0至30.0 kg/m² (含)。 l 根據研究者的確定，個體具有正常心臟傳導參數的12導聯心電圖(ECG)： - 心率在45到100 bpm之間； - Fridericia校正的QT間期(QTcF) ≤ 450毫秒(男性)或 ≤ 470毫秒(女性)；以及 - QRS間隔低於120毫秒。 l 根據篩選時進行的臨床實驗室檢測結果，研究者確定個體是健康的，除了特應性疾病之外。如果結果超出正常參考範圍，則僅當研究者判斷異常或與正常偏差不具有臨床意義時才可包括該個體。該確定必須記錄在該個體的來源文件中，並由研究者起草。這不適用於排除標準中列出的實驗室異常(使用微生物學及傳染病分部標準)。 l 個體能夠提供書面知情同意書。 l 個體同意遵守所有實驗程序要求。

(ii) 主要排除標準 l 懷孕或哺乳期的女性個體。 l 個體進行飲食控制或攝食不足。 l 個體有心律失常病史(任何臨床相關性)。 l 個體在篩選時對B型肝炎表面抗原、C型肝炎病毒抗體，或人類免疫缺陷病毒抗體具有陽性檢測結果。 l 研究者認為，個體有酒精或藥物濫用史，會損害患者或充分參與研究的風險。 l 該個體受司法監督或監管。 l 個體具有臨床相關性，目前活躍或潛在的胃腸道心血管、神經系統、精神病、新陳代謝、腎、肝、呼吸道(除了無併發症的過敏性鼻炎)、發炎、免疫學、內分泌、糖尿病或傳染病，並且沒有資格參加由研究者評判的研究。 l 個體有任何先前過敏反應的病史。 l 個體有任何條件，在研究者看來，會損害研究或個體的福祉或阻止個體達到或進行研究要求。 l 個體在給藥前3個月內接受過任何免疫球蛋白產品或血液製品。 l 個體已接受一生物製品： - 個體在給藥前6個月內或淋巴細胞計數恢復正常之前，以較長者為準，已接受任何細胞耗竭劑，不僅限於利妥昔單抗。 - 個體在給藥前5個半衰期(如果已知)或16週內，以較長者為準，接受其他生物製劑。 l 根據2007年微生物學及傳染病成人毒性表的定義，個體在篩選時具有一個或多個以下實驗室異常[實驗室值可轉換為等效標準單位。 重新測試可能導致排除的異常實驗室值將被允許一次(未經贊助商批准)。重新測試將在篩選階段(基線前)的計劃外訪問期間進行]： - 天門冬胺酸氨基轉移酶或丙胺酸氨基轉移酶(＞2x正常[ULN]上限)或更高； - 總膽紅素≥ 1.5x ULN - 血清肌酐≥ 1.6x ULN - 除上述IgE含量、嗜酸性白血球計數、嗜酸性白血球陽離子蛋白(eosinophil cationic protein, ECP)以及實驗室數值外，任何其他實驗室異常高於或等於2級。

實驗室數值可以轉換為等效的標準單位。 可以允許重新測試可能導致排除的異常實驗室值一次(未經贊助商批准)。重新測試可以在篩選階段的非計劃訪問期間(基線之前)進行。 l 個體在過去3個月內接受過任何批准或未批准(即研究性)的免疫治療。 l 個體使用以下任何一類藥物(處方藥或非處方藥)： - 在給藥前30天內鼻內皮質類固醇(例如，丙酸氟替卡松)。 - 在給藥前30天內全身性皮質類固醇(例如，prednisone)。 - 在給藥前30天內的白三烯調節劑(例如，montelukast)。 - 在給藥前30天內的免疫抑制劑(例如，金鹽、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、環孢菌素)。 - 在給藥前30天內免疫調節藥物(例如，IFN-γ)。 - 在給藥前過去1年內的抗IgE (例如，奧馬珠單抗)。 - 在給藥前1年內過敏原免疫療法。 - 在給藥前30天內口服吸入皮質類固醇(例如，budesonide)。 l 個體在給藥前4週內接受了光療。 l 個體在給藥前12週內接種了活疫苗。 l 個體已知或懷疑有免疫抑制史，包括每位研究者判斷的機會性感染史(如，肺結核TB)。 l 個體在篩選期之前的5年內有惡性病史。 l 寄生蟲感染的高風險。寄生蟲病的風險因素(生活在流行地區，慢性胃腸道症狀，過去6個月內到地熱病流行地區及/或慢性免疫抑制的地區旅行)以及寄生蟲定植或感染糞便評估卵子和寄生蟲的證據。糞便卵及寄生蟲評估僅在患有危險因素且嗜酸性白血球計數超過正常個體上限二倍的患者中進行。

研究治療

(i) 研究治療 的劑量與靜脈內(IV)給藥

給患有異位性皮膚炎的個體施用二劑5 mg/kg的FB825。個體在第1天及第85天早晨透過1小時靜脈內(IV)輸注接受FB825。在某些情況下，需要禁食至少2小時。在給藥前1小時及給藥後1小時不允許飲用水。可以基於個體的體重調節FB825的施用量，以250 mL 0.9%氯化鈉溶液稀釋適當量的藥物產品。在可編程的容量輸注裝置的幫助下，透過靜脈內(IV)途徑在1小時內施用FB825。重構後，含有0.9%氯化鈉的最終稀釋產品必須盡快使用，並且必須在8小時內使用。重構後的FB825可在使用前在2°C至25°C下保存最多8小時。

(ii) 先前、伴隨以及禁用的藥物 l 先前的藥物及療法 在個體的CRF中記錄個體在其提供知情同意之前30天內服用的先前藥物的資訊。 l 預處理/伴隨藥物及程序 從簽署ICF到研究訪視結束時進行的任何治療(包括營養補充劑)或程序都被認為是伴隨的，並記錄在CRF中。這包括在同意時正在進行的許可藥物。 研究期間的異位性皮膚炎(AD)基礎治療如下： - 所有患者需要在給藥前至少連續7天每天至少使用二次保濕劑，並在整個研究期間繼續治療。允許使用所有類型的保濕劑，但患者可能不會在篩選期間或研究期間使用處方保濕劑或含有添加劑的保濕劑進行治療。 - 如果在篩選就診前開始，患者可繼續使用穩定劑量的處方保濕劑或含有添加劑的保濕劑。從第1天/基線開始，所有患者都需要根據以下指南使用標準化方案開始局部皮質類固醇(TCS)治療： - 每天將中等效力的局部皮質類固醇(TCS)應用於有活動性病變的區域。低效局部皮質類固醇(TCS)應該用於皮膚薄的部位(臉部、頸部、間隙，以及生殖器區域、皮膚萎縮區域等)，或者用於以持續中等效力局部皮質類固醇(TCS) 治療被認為是不安全的區域。 - 在病變得到控制(清除或幾乎清除)後，從中等效力轉為低效局部皮質類固醇(TCS)，每天治療，共7天，然後停止。 - 如果病變復發，以中等效力局部皮質類固醇(TCS)重新進行治療，採用上述下階梯式方法進行病變消退。 - 對於在中等效力局部皮質類固醇(TCS)的日常治療下持續或惡化的病變，可以使用高效或超高效局部皮質類固醇(TCS)治療(拯救)患者，除非更高效力的局部皮質類固醇(TCS)被認為是不安全的。 - 監測患者是否存在局部或全身性局部皮質類固醇(TCS)毒性跡象，並根據需要減少或停止治療。 - 記錄研究期間使用的局部產品的類型及數量。使用的局部皮質類固醇(TCS)量透過在每次就診時稱重管來確定(詳見研究參考手冊)。 - 建議患者使用0.05%丙酸氟替卡松乳膏、0.1%糠酸莫美他松乳膏、0.06%戊酸貝皮質醇乳膏作為中等效力局部皮質類固醇(TCS)，以及1%氫皮質酮軟膏作為低效局部皮質類固醇(TCS)。 - 如果需要使用局部皮質類固醇(TCS)進行搶救，建議患者使用0.05%氟喹諾酮乳膏、0.25%去氫氧迪皮質醇軟膏作為高效局部皮質類固醇(TCS)，使用0.05%丙酸倍氯松軟膏作為超高效局部皮質類固醇(TCS)。 - 白天不要在同一區域同時使用保濕劑及局部皮質類固醇(TCS)。在未經局部皮質類固醇(TCS)治療的區域，保濕霜每天使用二次 - 早晚各一次。 治療前藥物/程序：服用藥物或給藥前進行的程序。 伴隨藥物/程序：透過EOS訪問靜脈注射研究藥物後服用的藥物或程序。 l 禁止同時使用的藥物： - 局部他克莫司和吡美莫司 - 全身性皮質類固醇，除非個體正在服用救援藥物。 - 白三烯抑制劑 - 過敏原免疫療法 - 以免疫抑制/免疫調節物質對異位性皮膚炎(AD)進行全身治療(包括，但不僅限於，環孢素、黴酚酸酯、IFN-γ、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤，或生物製劑) - 以活(減毒)疫苗治療 - 中藥 l 禁止的伴隨程序： - 外科手術 - 伴隨紫外線(UV)程序(光療[NBUVB、UVB、UVA1，或PUVA]) - 研究期間不允許在床/亭內曬黑 - 在參與研究期間，患者每週不得超過2次漂白浴

(iii) 輸注相關或過敏反應的處理

研究藥物的靜脈注射必須在經過培訓的醫務人員的監督下進行，並且可以使用處理過敏反應的設施。如果個體經歷輸注相關反應，則必須對患者進行對症治療，包括支持治療，進一步監測及適當的藥物治療，如果需要，可以包括抗組織胺藥及/或皮質類固醇。可以停止研究輸注並且追蹤該個體直至研究結束。記錄輸入的量。 如果個體出現過敏反應的典型症狀(例如，呼吸短促、過敏反應、蕁麻疹、血管性水腫)，則應立即並永久地停止研究藥物靜脈內(IV)給藥。

疑似過敏反應應根據國家過敏及傳染病研究所概述的臨床診斷標準進行評估，該標準見附錄12-2。

對於這些及其他情況，個體可以依研究者決定接受適當的治療。

如果出現過敏反應，可以使用禁止的藥物或手術治療患者，以治療無法忍受的異位性皮膚炎(AD)症狀。 - 如果在醫學上有必要(即，控制無法忍受的異位性皮膚炎(AD)症狀)，可以在第2週後為研究患者提供全身性皮質類固醇激素以治療異位性皮膚炎(AD)，以低於1 mg/kg/天劑量的培尼皮質醇(prednisolone)，且施用不超過3天。 - 在施用任何挽救治療之前，患者立即接受功效及安全性評估(例如，疾病嚴重程度評分，安全性實驗室)。

研究程序及評估方法

以下部分描述了要收集的研究程序及數據。盡可能由相同的研究者或現場人員評估個體。表2提供了時間表及評估。表3中提供了基線特徵。

(i) 終點： l 主要終點： - 在第85天及第169天/研究結束(EOS)總IgE從基線的變化。 l 第85天及第169天/EOS的過敏原特異性IgE從基線的變化。 l 生物標記物的終點： - 在第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天總IgE從基線的變化。 - 在第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天過敏原特異性IgE從基線的變化。在靜脈內(IV)給予FB825後第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天時生物標記物從基線的變化，包括胸腺及活化調節化學激活素(TARC)、嗜酸性白血球化學激活素-3、胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)、骨膜素、IL-1a、IL-4、IL-5、IL-13、IL-16、IL-31，以及M-CSF。 l 功效終點： - 在第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天時瘙癢視覺模擬量表(VAS)從基線的變化。 - 在第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天時濕疹面積及嚴重程度指數(EASI)從基線的變化。 - 在第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天時異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)從基線的變化。 - 在第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天時異位性皮膚炎的研究者綜合評估(IGA)從基線的變化。 - 在第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天時與異位性皮膚炎相關的體表面積(BSA)從基線的變化。 - 在靜脈內(IV)給予FB825後第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天時生物標記物從基線的變化，包括胸腺及活化調節化學激活素(TARC)、嗜酸性白血球化學激活素-3、胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)、骨膜素、IL-1a、IL-4、IL-5、IL-13、IL-16、IL-31，以及M-CSF。 - 透過監測及記錄不良事件(AE)及嚴重不良事件(SAE)評估安全性；體檢結果及生命徵狀測量(收縮壓與舒張壓、心率、呼吸頻率及體溫)、臨床實驗室檢查結果(血液學、凝血、血清化學[包括肝功能檢查、血糖含量]以及尿液分析)；12導聯心電圖結果。

(ii) 生物標記物評估

根據另外的報告中描述的方法分析，測定血液樣本中總過敏原特異性IgE、胸腺及激活調節化學激活素(TARC)、嗜酸性白血球化學激活素-3、胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)、骨膜素、IL-1a、IL-4、IL-5、IL-13、IL-16、IL-31，以及M-CSF。

採集血液樣品。實際的樣品採集時間及採樣問題(如果有的話)記錄在CRF上。在以下時間點抽取每個樣品大約5 mL的靜脈血樣品： l 總免疫球蛋白/過敏原特異性IgE： - 篩選期：隨時 - 第1天及第85天：(在輸液開始前2小時內) - 在靜脈內(IV)給予FB825後第8、15、29、57、92、99、113、141，以及169天當天的任何時間。 l 胸腺及激活調節化學激活素(TARC)、嗜酸性白血球化學激活素-3、胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)、骨膜素、IL-1a、IL-4、IL-5、IL-13、IL-16、IL-31，以及M-CSF： - 在第1天和第85天輸注開始前2小時內，以及第8、15、29、57、92、99、113、141，以及169天當天的任何時間。

(iii) 臨床療效評估 l 瘙癢視覺模擬評分(VAS) 異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)的瘙癢視覺模擬評分(VAS)用於測量瘙癢。要求患者分配表示其症狀強度的數字分數，範圍從0到10，其中0表示沒有症狀，10表示最嚴重的症狀。要求個體在篩選時，給藥前第1天及第85天，出院前第2天及第86天以及第8、15、29、57、92、99、113、141，以及169天的任何時間進行測量。 l 異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD) 異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD) (指數)是異位性皮膚炎(AD)中經過驗證的評分系統。為了測量異位性皮膚炎(AD)的程度，將九的規則應用於患者的炎性病變的前/後圖。範圍可以從0到100評分。異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)的強度部分由6個項目組成：紅斑、水腫/丘疹、脫毛、苔蘚化、滲出/結痂，以及乾燥。每個項目可以按0 (不存在)到3(嚴重)的等級進行評分。主觀項目包括每日瘙癢及失眠。異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)指數公式為：A/5 + 7B/2 + C。在此公式中，A定義為範圍(0 -100)，B定義為強度(0-18)，C定義為主觀症狀(0-20)。異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)指數的最高得分為103。要求個體在篩選時、給藥前第1天及第85天，出院前第2天及第86天以及第8、15、29、57、92、99、113、141，以及169天的任何時間進行測量。 l 濕疹面積及嚴重程度指數(EASI) 濕疹面積及嚴重程度指數(EASI)評分系統使用定義的過程來評估濕疹徵狀的嚴重程度及受影響的程度。在四個身體區域評估濕疹徵狀的程度及嚴重程度，總得分是以乘數調整的四個區域得分之總和。濕疹面積及嚴重程度指數(EASI)得分範圍為0-72。要求個體在篩選時，給藥前第1天及第85天，出院前第2天及第86天以及第8、15、29、57、92、99、113、141，以及169天的任何時間進行測量。 l 針對異位性皮膚炎(AD)的研究者綜合評估(IGA) 研究者綜合評估(IGA)允許研究人員在一個給定時間點評估整體疾病嚴重程度，它包括從清晰到非常嚴重疾病的5點嚴重程度評分(0 =清除、1 =幾乎清除、2 =輕度疾病、3 =中度疾病、4 =嚴重的疾病)。要求個體在篩選時，給藥前第1天及第85天，出院前第2天及第86天以及第8、15、29、57、92、99、113、141，以及169天的任何時間進行測量。 l 體表面積(BSA)參與異位性皮膚炎(AD)症狀 它是作為異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)的A部分(範圍)測量。要求個體在篩選時，給藥前第1天及第85天，出院前第2天及第86天以及第8、15、29、57、92、99、113、141，以及169天的任何時間進行測量。

(iv) 安全評估

透過監測並記錄不良事件(AEs)、嚴重不良事件(SAE)、體檢結果，以及生命徵狀測量(收縮壓與舒張壓、心率、呼吸頻率，以及口腔體溫)評估安全性，臨床實驗室檢查結果(血液學、凝血、血清化學[包括肝功能檢查]，以及尿液分析)以及12導聯心電圖結果。表4中提供了透過15-168天治療期-SAF的不良事件患者數量的總體總結。 l不良事件 不良事件部分(第7節)描述了在研究期間收集的不良事件(AEs)、嚴重不良事件(SAEs)，以及特殊目標的不良事件。 l體檢 在事件時間表中指示的時間點進行完整的身體檢查。 完整的體檢包括評估皮膚(包括皮膚紅斑的任何跡象)、頭部、耳朵、眼睛、鼻子、喉嚨、頸部、甲狀腺、肺部、心臟、心血管系統、腹部、淋巴結，以及肌肉骨骼系統/四肢。如有必要，由研究者自行決定進行臨時體檢，以評估不良事件(AE)或臨床實驗室異常。測量身高及體重，僅在篩選時計算身體質量指數。還在所有其他體檢時間點測量體重，如研究事件的時間表所示。在穿著室內衣物(沒有外套及鞋子)的情況下以公斤(kg)至小數點第1位記錄體重，並且以估分(cm)為單位測量身高(不穿鞋)，沒有小數位。 l生命徵狀測量 生命徵狀測量包括收縮壓與舒張壓、心率、呼吸頻率，以及體溫。在進行所有測量之前，使個體坐下至少5分鐘。在事件時間表中指示的時間點測量生命徵狀。 當程序重疊並在同一時間點發生時，程序的順序應該是生命徵狀測量，然後是心電圖。 研究者可以確定任何生命徵狀測量是否具有臨床意義。臨床意義被定義為具有醫學相關性的結果的任何變化，並且可能導致醫療護理的改變(例如，主動觀察、診斷措施，或治療措施)。如果注意到篩選值的臨床顯著變化，則在個體的CRF的不良事件(AE)頁面上記錄臨床顯著性值與臨床意義的原因。研究者可以繼續以額外評估連續監測該個體，直至數值達到參考範圍或篩選時的數值或直到醫學上不在需要隨後的追蹤。 l臨床實驗室測試 臨床實驗室測試由當地現場進行。在事件時間表中指示的時間點，在禁食條件下(禁食約2小時或更長時間)收集血液及尿液。 進行了以下血液學、凝血、血清化學(包括肝功能及甲狀腺功能檢查)、尿液分析評估： - 血液學：血球比容(Hematocrit，Hct)、血紅蛋白(hemoglobin，Hb)、平均微粒血紅蛋白(mean corpuscular hemoglobin，MCH)、平均微粒血紅蛋白濃度(mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC)、平均微粒體積(mean corpuscular volume，MCV)、血小板計數、紅血球(RBC)計數，以及白血球(WBC)及差異計數(絕對值及百分比)。 - 凝血：國際標準化比率(International normalized ratio，INR)、部分促凝血酶原激酶時間(artial thromboplastin time，PTT)，以及凝血酶原時間(prothrombin time，PT) - 血清化學：ALT、白蛋白、鹼性磷酸酶、澱粉酶、陰離子間隙、AST、碳酸氫鹽、膽紅素(總和及直接)、血尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、鈣、二氧化碳、氯化物、膽固醇(總膽固醇、高密度脂蛋白，以及估算的低密度脂蛋白)、肌酸磷酸激酶、肌酸酐、γ-谷胺醯轉移酶(gamma-glutamyltransferas，γ-GT)、球蛋白、葡萄糖、乳酸脫氫酶(actate dehydrogenase，LDH)、脂肪酶、鎂、磷、鉀、鈉、總蛋白、甘油三酯、肌鈣蛋白I或T，以及尿酸。 - 甲狀腺功能：游離T4與促甲狀腺激素 - 尿液分析：外觀、膽紅素、顏色、葡萄糖、酮、白細胞酯酶、顯微鏡(如果量油尺為正；包括細菌、石膏、結晶、上皮細胞、紅血球，以及白血球)、亞硝酸鹽、潛血、pH值、蛋白質、比重、濁度，以及尿膽素原 將對所有女性個體進行血清妊娠試驗(b-人絨毛膜促性腺激素)，該女性個體在給藥前具有篩選並確認結果的生育潛力。在第8、15、29、57、85、92、99、113、141，以及169天進行尿妊娠試驗。對於停經後的女性個體，在篩選時進行血清促卵泡激素試驗。 將在篩選時評估B型肝炎表面抗原、C型肝炎病毒抗體，以及人類免疫缺陷病毒抗體。 基於每個實驗室參數的參考範圍，將異常臨床實驗室值標記為高或低(或正常或異常)。研究者可以確定任何生命徵狀測量是否具有臨床意義或臨床意義。臨床意義被定義為具有醫學相關性的結果的任何變化，並且可能導致醫療護理的改變(例如，主動觀察、診斷措施，或治療措施)。如果注意到篩選的臨床顯著變化，則在CRF的不良事件(AE)頁面上記錄臨床顯著性值與臨床意義的原因。研究者可以透過額外評估連續監測該個體，直至數值達到參考範圍或篩選時的數值或直到醫學上不在需要隨後的追蹤。 列出了個體個體的臨床重要實驗室值。提出了在任何時間點具有臨床顯著實驗室值的個體的數量及百分比的總結。 l心電圖 在事件時間表中指示的時間點使個體處於仰臥位置至少5分鐘後獲得單個12導聯心電圖(ECG)。心電圖評估包括評估描記是否為正常還是異常、節律、是否存在心律失常或傳導缺陷、形態學、心肌梗塞的任何證據，或ST段、T波，以及U波異常。此外，將測量並報告以下間隔的測量值：RR間期、PR間期、QRS寬度、QT間期，以及QTcF。

不良事件

表4中提供了透過15-168天治療期-SAF的不良事件患者數量的總體總結。

(i) 定義 l 不良事件(AE) 不良事件(AE)被定義為與在人類中使用藥物相關的任何不良醫學事件，無論是否與藥物相關。如果出現任何症狀，將指導個體在研究期間的任何時間聯繫研究者。 治療緊急不良事件(TEAE)被定義為在暴露於研究藥物之前不存在的任何事件，或是已經存在的任何於暴露後強度或頻率惡化的事件。 不良反應是由藥物引起的任何不良事件(AE)。不良反應是所有疑似不良反應的一個子集，疑似不良反應是針對那些有理由結論出藥物引起該事件的那些。 疑似不良反應是任何那些有研究藥物有可能導致不良事件(AE)的合理可能性的不良事件(AE)。出於研究性新藥安全性報告的之目的，「合理可能性」表示有證據顯示研究藥物與不良事件(AE)之間存在因果關係。懷疑的不良反應暗示因果關係的確定性程度低於不良反應，這表示研究藥物引起的任何不良事件(AE)。 不良事件(AE)或疑似不良反應被認為是「不預期的」，如果它沒有在IB中列出，或者在被測試的研究藥物中觀察到的特異性或嚴重性；或者，如果不要求或不提供IB，則與一般研究計劃或本申請中其他地方描述的風險信息不一致。例如，根據該定義，如果IB僅提及升高的肝酶或肝炎，則肝壞死將是不預期的(由於更嚴重)。類似地，如果IB僅列出腦血管意外，則腦血栓塞及腦血管炎將是不預期的(由於更大的特異性)。如本定義中所使用的「不預期的」，也指在IB中提到的不良事件(AEs)或疑似不良反應，其發生在一類藥物中或從藥物的藥理學性質預期，但沒有特別提及與正在調查的特定藥物。 l 嚴重不良事件(Serious Adverse Event, SAE) 如果研究者或贊助者認為，不良事件(AE)或疑似不良反應被視為嚴重不良事件(SAE)，則會導致以下任何結果： - 死亡 - 威脅生命的不良事件(AE) - 住院治療或延長現有住院時間 - 持續或嚴重喪失能力或嚴重破壞正常生活功能的能力 - 先天性異常或出生缺陷 可能不會導致死亡、危及生命，或需要住院治療的重要醫療事件可能會被認為是嚴重的，當根據適當的醫學判斷，這些事件可能危及該個體，並可能需要醫療或外科手術干預，以防止該定義中列出的結果之一。此類醫療事件的實例包括需要在急診室或家中進行強化治療的過敏性支氣管痙攣，不導致住院治療的血液惡質或抽搐，或藥物依賴性或藥物濫用的發展。 如果研究者或贊助者認為其發生使個體立即死亡，則不良事件(AE)或疑似不良反應被認為是「危及生命」。這不包括那些如果它以更嚴重的形式發生則可能導致死亡的不良事件(AE)或疑似不良反應。 l 特殊目標的不良事件 特殊目標的不良事件包括以下事件： - 任何個體經歷過敏反應的治療緊急不良事件 (TEAE) - 任何個體都有嚴重不良事件(SAE) (第7.1.2節) - 任何個體持續QT延長(＞ 500毫秒，或≥60毫秒從基線的變化)至少30分鐘或重複心電圖缺血性改變，或持續性症狀性心律失常 - 過敏反應，包括過敏反應、甲狀腺異常、皮膚紅斑、血小板減少症、貧血、溶血、嗜中性球減少症、肝毒性，以及腎毒性。 - 任何個別個體都會遇到以下實驗室參數： ü ALT或AST≥5×ULN ü 膽紅素≥2×ULN ü 血小板計數1級≤99.999* 109/L. ü 血紅蛋白≤105g/L. ü 絕對中性粒細胞計數1級≤1.5* 109/L. ü 血尿素氮或肌酐升至＞ 2×ULN

(ii) 引發不良事件

調查員負責確保所有不良事件(AE)與嚴重不良事件(SAE)都記錄在CRF中並報告給泉盛生物科技股份有限公司。從篩選期開始直到所有研究程序完成並從研究中排出來評估不良事件。

在每次研究訪問或評估時，個體被問到一個標準問題，以引起他們健康狀況的任何醫學相關變化。他們還被問到他們是否住院、發生意外、使用任何新藥或改變伴隨的藥物治療方案(處方藥及非處方藥)。

除了個體觀察之外，還從CRF的不良事件(AE)頁面中收集的任何數據(例如，實驗室值、身體檢查結果，以及心電圖(ECG)變化)或與個體安全相關的其他文件來記錄不良事件(AE)。

嚴重程度評估：使用不良事件的常用術語標準(Common Terminology Criteria for Adverse Events, CTCAE)的不良事件(AE)的嚴重性(或強度)用於輸注反應嚴重性的分級。 - 1級輕度：短暫或輕微不適(＜48小時)；無需醫療干預/治療。 - 2級中等：輕度至中度的活動限制 - 可能需要一些幫助；無需或只需要最少的醫療干預/治療。 - 嚴重3級：活動明顯限制，通常需要一些幫助；需要醫療干預/治療，可能住院治療。 - 4級危及生命：活動受到極大限制，需要大量援助；需要重大的醫療干預/治療，住院或臨終照顧可能。

應記錄不良事件(AE)嚴重程度的變化，以便評估每個強度等級的事件持續時間。特徵為間歇性的不良事件(AE)需要記錄每次發作的發作及持續時間。 l 7.3.2 因果關係評估 研究者對不良事件(AE)與研究藥物的關係的評估是文件製作過程的一部分，但不是決定研究報告內容或未報告內容的因素。 研究者評估了所有不良事件(AE)及嚴重不良事件(SAE)的因果關係(即研究藥物是否存在合理的可能性引起事件)。使用以下分類列出這種關係的特徵： - 無關：這種關係表示研究藥物與報導的事件之間沒有關聯。 - 可能：該關係基於證明研究藥物與不良事件(AE)之間存在因果關係的證據，即藥物有可能引起該事件。該事件遵循從藥物靜脈內(IV)施用時間開始的合理時間順序或遵循對研究藥物的已知反應模式，但也可以由其他因素產生。 - 很有可能：這種關係表示存在藥物靜脈內(IV)給藥事件的合理時間序列，並且基於藥物的已知藥理作用，已知或先前報告的對藥物或藥物類別的不良反應，或基於研究者的臨床經驗，該事件與研究藥物的關聯似乎很有可能。 - 確定：這種關係表示藥物靜脈注射給藥與不良事件(AE)之間存在明確的因果關係，其他病症(併發疾病、疾病狀態的進展/表現，或併發藥物反應)似乎不能解釋該事件。

統計學分析

(i)一般 統計

統計分析計劃中描述了所有統計分析的詳細資訊。收集的所有數據都顯示在資料清單中。來自分析群體的個體的數據列於資料清單中，但未包括在匯總統計的計算中。

對於分類變量，提出了頻率及百分比。使用描述性統計匯總連續變量(個體數量、平均值、中位數、 標準差(SD)、最小值，以及最大值)。

透過劑量及總體對所有個體總結基線人口統計學及背景變量。報告了參加研究的個體數量以及完成研究的個體的數量及百分比。還總結了退出或停止研究的個體的頻率及百分比，以及退出或停止的原因。透過每個時期與群組的描述性統計證明該研究的分析。沒有進行顯著性測試。

編寫統計分析計劃(statistical analysis plan, SAP)以詳細說明統計分析工作。臨床資料庫鎖定可以在最後一個患者完成研究之後協調(即「清除」)所有數據之後發生。

(ii) 樣本量計算

本研究共計約12名可評估個體。本研究的樣本量基於臨床及實際考慮，而非基於正式的統計功效計算。

(iii) 分析集

完整分析集(Full Analysis Set, FAS)定義為接受至少1劑研究藥物的個體。所有功效評估將在完整分析集(FAS)群體中進行。

安全性群體被定義為接受至少1劑研究藥物的個體。所有安全評估將在安全群體中進行。

(iv) 統計分析 l 生物標記物分析 透過訪問總結總體及過敏原特異性IgE以及作為終點列出的生物標記物的濃度與從基線的變化，並以圖形方式呈現。透過基線總IgE濃度(血清IgE ＞ 1500 IU/mL或血清IgE ≤ 1500 IU/mL)以及給予FB825劑量(1劑量或2劑量)總結總體及過敏原特異性IgE從基線的變化。 在接受第二劑量FB825的個體中，對第二劑量收集的數據進行分析並總結為與第一劑量收集的數據相同。 l 臨床療效分析 在每次訪問個體期間，透過計畫主持人(PI)或共同計畫主持人(co-PI) 評估該評估指數。使用描述性統計學(EASI、SCORAD、IGA、VAS，以及體表面積(BSA)的平均值；SD、變異係數(CV)、個體數量)透過訪視時間點以及給予FB825劑量(1劑量或2劑量)分析臨床終點。 平均指數與預定訪問時間概況的變化以圖形方式顯示， 在接受第二劑量FB825的個體中，對第二劑量收集的數據進行分析並總結為與第一劑量收集的數據相同。 l 安全分析 使用最新版本的法規活動醫學詞典，透過較佳術語及系統器官類別對不良事件進行編碼，並透過治療、劑量含量，以及總體進行總結。不良事件還透過嚴重程度、與研究藥物的關係、嚴重不良事件(SAE)，以及導致停止研究藥物的不良事件(AE)進行總結。 臨床實驗室測試結果、生命徵狀測量，以及12導聯心電圖結果的實際值與基線變化透過治療及劑量在每個時間點使用描述性統計進行總結(個體數量、平均值、標準差、中位數、最小值，以及最大值)。為臨床實驗室測試結果產生班次表。資料清單中列出了臨床實驗室數據、生命徵狀測量、12導聯心電圖結果，以及體檢結果。

(v) 遺失數據的處理

對於描述性統計，低於定量限制(below the limit of quantification, BLQ)的濃度被視為零。平均低於定量限制(BLQ)濃度將以低於定量限制(BLQ)表示，且SD和變異係數(CV)被報導為不適用。缺少濃度將被排除在計算之外。

最後一次觀察結轉(Last observation carry forward, LOCF)用於處理遺失的數據。 安全性數據不會有任何估算。

(vi) 數據品質保證

監測本研究的所有方面是否符合適用的政府法規，適用於當前的國際協調會議(International Conference on Harmonisation, ICH)統一的三方指南E6 (R1)：良好的臨床實施及當前的標準操作程序。臨床監測者可能會對數據進行內部品質檢視稽查並進行額外的檢視

表 2. 事件及評估時間表

表 3. 基線的特徵

表 4. 透過 15-168 天治療期間不良事件患者的總數 -SAF

結果

這是一項開放標記的探索性研究，目的在於評估FB825在異位性皮膚炎(AD)成人中的安全性及有效性。將12名符合條件的異位性皮膚炎(AD)患者納入研究，並在第1天及第85天透過1小時靜脈內(IV)輸注接受5 mg/kg FB825。根據表2中列出的事件時間表安排患者返回研究地點進行安全性及有效性評估。

FB825 安全地給予異位性皮膚炎 (AD) 人類患者

在第1天及第85天，透過1小時靜脈內輸注以5 mg/kg的劑量給予患者FB825。由於治療緊急不良事件(TEAE)或治療緊急嚴重不良事件(TE SAE)，沒有死亡且沒有個體停止治療。六名個體發展了治療緊急不良事件(TEAE)，其中三名可能與藥物有關。五名個體出現上呼吸道感染，兩名個體感染皰疹病毒感染。只有一名個體被報告出現以下症狀之一：結膜炎、流鼻涕、氣喘發作、發燒、咳嗽或延長QTC。(表4)

臨床實驗室檢查結果、生命徵狀測量、12導聯心電圖結果，或體檢結果均無明顯治療或劑量相關趨勢。功效

在給藥前第1天及第85天，出院前第2天及第86天，以及第8、15、29、57、92、99、113、141，以及169天當天的任何時間，透過記錄濕疹面積及嚴重程度指數(EASI)、研究者綜合評估(IGA)、異位性皮膚炎指數嚴重程度評分(SCORAD)，以及瘙癢視覺模擬評分(VAS)的基線變化來確定FB825的療效。基線人口統計學及背景變量將透過表3中所有個體的劑量及總體來概括。

(i) FB825與基線相比，濕疹面積及嚴重程度指數(EASI)降低

在給予FB825後第1天至約第55天，個體顯示濕疹面積及嚴重程度指數(EASI)逐漸降低(減少約65%)。濕疹面積及嚴重程度指數(EASI)評分在第55天後開始上升，直到第85天進行FB825第二次給藥，但與基線相比仍然少了約40%。個體在第113天顯示進一步濕疹面積及嚴重程度指數(EASI)的減少至減少約70%並保持該程度直至研究結束(EOS)。(圖5)。

(ii) FB825與基線相比，研究者綜合評估(IGA)降低

在給予FB825後第1天至第55天，個體顯示研究者綜合評估(IGA)逐漸減少(約減少30%)。研究者綜合評估(IGA)評分在第55天後開始上升，直到第85天進行FB825第二次給藥，但與基線相比仍然少了約15%。個體顯示進一步降低研究者綜合評估(IGA)約45%，在第113天降至最低值，並且與基線相比保持35%的降低程度直至研究結束(EOS)。(圖6)。

(iii)FB825與基線相比，異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)降低

在給予FB825後第1天至第55天，個體顯示異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)逐漸減少(減少約45%)。異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)評分在第55天後開始上升，直到第85天進行FB825第二次給藥，但與基線相比仍然少了約30%。個體在第113天顯示進一步減少異位性皮膚炎指數的嚴重程度評分(SCORAD)至約55%，並保持該程度直至研究結束(EOS)。(圖7)。

(iv)FB825與基線相比，瘙癢視覺模擬評分(VAS)降低

在給予FB825後第1天至第15天，個體顯示出逐漸降低的瘙癢視覺模擬評分(VAS)(減少約45%)。瘙癢視覺模擬評分(VAS)在第15天後開始上升，並且與基線相比維持在減少25%，直到第85天進行FB825第二次給藥。個體在第113天顯示進一步減少瘙癢視覺模擬評分(VAS)至約55%，並保持該程度直至研究結束(EOS)。(圖8)。

其他實施方式

本說明書中公開的所有特徵可以任意組合方式組合。本說明書中公開的每個特徵可以由用於相同、等同或類似目的之替代特徵代替。因此，除非另有明確說明，否則所公開的每個特徵僅為一系列等效或類似特徵之示例。

根據以上描述，本領域技術人員可以容易地確定本發明的基本特徵，並且在不脫離其精神及範圍的情況下，可以對本發明進行各種改變及修改以使其適應各種用途及條件。因此，其他實施例也在申請專利範圍內。

無

圖 1 為顯示透過單一劑量FB825治療的人類個體體內總IgE隨時間從基線的平均值(±SD)變化的圖。從血液樣品中測定總IgE。基線定義為研究藥物施用前的最後一次非缺失評估(包括重複及非計劃評估)。

圖 2 為顯示透過單一劑量FB825治療的人類個體體內總IgE隨時間從基線的平均值(±SD)百分比變化的圖。測定從該人類個體獲得的血液樣品中的總IgE含量。基線定義為研究藥物施用前的最後一次非缺失評估(包括重複及非計劃評估)。

圖 3 為顯示透過單一劑量FB825治療的人類個體體內抗藥物抗體(antidrug antibody，ADA)隨時間從基線的平均值(±SD)變化的圖。測定從該個體獲得的血液樣品中的抗藥物抗體(ADA)。基線定義為研究藥物施用前的最後一次非缺失評估(包括重複及非計劃評估)。

圖 4 顯示了單株抗體4B12與單株抗體FB825的V_H 及V_L 的胺基酸序列比對，單株抗體FB825為人源化的4B12抗體。突出顯示該二種抗體之間的差異。V_H 及V_L 互補決定區(CDRs)以粗體及下底線表示。4B12的V_H ：SEQ ID NO: 4。4B12的V_L ：SEQ ID NO: 5。FB825的V_H ：SEQ ID NO: 2。FB825的V_L ：SEQ ID NO: 3。

圖 5 為顯示濕疹面積及嚴重程度指數(Eczema Area and Severity Index，EASI)從基線的百分比變化的圖，在第8天、第15天、第29天、第57天、第85天、第92天、第99天、第113天、第141天，以及第169天，在開放標籤研究中評估FB825在患有異位性皮膚炎的成人中的安全性及有效性。

圖 6 為顯示研究者綜合評估(Investigator’s Global Assessment，IGA)中從基線的百分比變化的圖，在第8天、第15天、第29天、第57天、第85天、第92天、第99天、第113天、第141天，以及第169天，在開放標籤研究中評估FB825在患有異位性皮膚炎的成人中的安全性及有效性。

圖 7 為顯示異位性皮膚炎指數嚴重程度評分(Severity Scoring of Atopic Dermatitis Index，SCORAD)中從基線的百分比變化的圖，在第8天、第15天、第29天、第57天、第85天、第92天、第99天、第113天、第141天，以及第169天，在開放標籤研究中評估FB825在患有異位性皮膚炎的成人中的安全性及有效性。

圖 8 為顯示瘙癢視覺模擬評分(Pruritus Visual Analogue Scale， VAS)中從基線的百分比變化的圖，在第8天、第15天、第29天、第57天、第85天、第92天、第99天、第113天、第141天，以及第169天，在開放標籤研究中評估FB825在患有異位性皮膚炎的成人中的安全性及有效性。

<110> 合一生技股份有限公司

<120> 治療IgE介導的過敏性疾病

<140> TW107138583

<141> 2018-10-31

<150> US 62/579,416

<151> 2017-10-31

<160> 7

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的胜肽

<400>1

<210> 2

<211> 117

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的胜肽

<400> 2

<210> 3

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的胜肽

<400> 3

<210> 4

<211> 117

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的胜肽

<400> 4

<210> 5

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的胜肽

<400> 5

<210> 6

<211> 52

<212> PRT

<213> 智人

<400> 6

<210> 7

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的胜肽

<400> 7

Claims (29)

1. 一種與膜結合IgE的Cεmx結構域結合的抗體在製備用於治療在有需要的個體中與免疫球蛋白E(IgE)相關的病症之藥物的用途，其中該藥物包括第一劑量的該抗體以及第二劑量的該抗體，其中該第二劑量在該第一劑量之後至少8週及至多6個月施用於該個體，其中該第一劑量、該第二劑量，或二者的範圍為1mg/kg至10mg/kg；其中該抗體包含重鏈及輕鏈，其中，該重鏈包括重鏈可變區(VH)，包括重鏈互補決定區(CDR)1、重鏈CDR2及重鏈CDR3，該重鏈CDR1、CDR2及CDR3分別包括SEQ ID NO：2之殘基26-36、51-66及98-106之胺基酸序列；以及其中，該輕鏈包括輕鏈可變區(VH)，包括輕鏈CDR1、輕鏈CDR2及輕鏈CDR3，該輕鏈CDR1、CDR2及CDR3分別包括SEQ ID NO：3之殘基24-39、55-61及94-102之胺基酸序列。
2. 如請求項1之用途，其中該VH與SEQ ID NO：2至少90%相同，及/或該VL與SEQ ID NO：3至少90%相同。
3. 如請求項1之用途，其中該VH與SEQ ID NO：2至少95%相同，及/或該VL與SEQ ID NO：3至少95%相同。
4. 如請求項1之用途，其中該VH與SEQ ID NO：2至少98%相同，及/或該VL與SEQ ID NO：3至少98%相同。
5. 如請求項1至4中任一項之用途，其中該第二劑量在該第一劑量之後至少3個月施用。
6. 如請求項5之用途，其中該第二劑量在該第一劑量之後12週至6個月施用。
7. 如請求項1之用途，其中該第一劑量、該第二劑量，或二者的範圍為1mg/kg至8mg/kg。
8. 如請求項1之用途，其中在施用該第二劑量時，該個體的總IgE含量從施用該第一劑量之前的總IgE含量變化小於50%。
9. 如請求項8之用途，其中該VH與SEQ ID NO：2至少95%相同，及/或該VL與SEQ ID NO：3至少95%相同。
10. 如請求項8之用途，其中該VH與SEQ ID NO：2至少98%相同，及/或該VL與SEQ ID NO：3至少98%相同。
11. 如請求項8至10中任一項之用途，其中該第一劑量的該抗體為5mg/kg。
12. 如請求項8之用途，其中該第二劑量的該抗體在該第一劑量之後3個月施用。
13. 如請求項8之用途，其中該第二劑量為5mg/kg。
14. 如請求項1或8之用途，其中該第一劑量、該第二劑量，或二者透過靜脈內注射施用。
15. 如請求項1或8之用途，其中該抗體為人源化抗體。
16. 如請求項1或8之用途，其中該抗體為全長抗體或其抗原結合片段。
17. 如請求項1或8之用途，其中該抗體包含具有如SEQ ID NO：2所示胺基酸序列的重鏈可變區，以及具有如SEQ ID NO：3所示胺基酸序列的輕鏈可變區。
18. 如請求項1或8之用途，其中該個體為人類患者。
19. 如請求項1之用途，其中該與IgE相關的病症為過敏性氣喘、過敏性鼻炎、異位性皮膚炎，或高IgE症候群。
20. 如請求項19之用途，其中該疾病為冷誘導的蕁麻疹、慢性蕁麻疹、膽鹼型蕁麻疹、慢性鼻竇炎、系統性肥胖細胞增多症、皮膚肥胖細胞增多症、過敏性支氣管肺麴菌病、復發性自發性血管性水腫，以及間質性膀胱炎、嗜酸性白血球相關的胃腸道疾病、食物過敏，或藥物過敏。
21. 如請求項1或8之用途，其中在該第一劑量之前至少連續七天將一保濕劑每天至少施用二次於該個體。
22. 如請求項1或8之用途，其中對該個體進一步施用局部皮質類固醇。
23. 如請求項22之用途，其中該局部皮質類固醇每日施用於活動性病變(active lesion)，且其中該局部皮質類固醇為0.05%丙酸氟替卡松乳膏、0.1%糠酸莫美他松乳膏、0.06%戊酸貝皮質醇，或1%氫皮質酮軟膏。
24. 如請求項22之用途，其中該局部皮質類固醇為0.05%氟喹諾酮乳膏、0.25%去氫氧迪皮質醇軟膏，或0.05%丙酸倍氯松軟膏。
25. 如請求項1或8之用途，其中該個體不使用局部他克莫司治療、局部吡美莫司治療、全身皮質類固醇治療、白三烯抑制劑治療、過敏原免疫療 法，涉及免疫抑制劑或免疫調節劑的治療、疫苗治療、涉及中藥的治療、外科手術、紫外線處理，或曬黑。
26. 如請求項1或8之用途，其中該抗體配製於醫藥組合物中，該醫藥組合物包含該抗體、緩衝液、鹽類，以及非離子界面活性劑。
27. 如請求項26之用途，其中該醫藥組合物為pH值為5-8的水溶液。
28. 如請求項26之用途，其中該緩衝液為組胺酸緩衝液，該鹽類為氯化鈉，及/或該非離子界面活性劑為聚山梨醇酯80。
29. 如請求項28之用途，其中在該醫藥組合物中的該抗體為10mg/ml至30mg/ml，該組胺酸緩衝液的濃度為10-30mM，該氯化鈉的濃度為120-160mM，以及該聚山梨醇酯80的濃度為0.01-0.03%。