TWI767387B - 紅葡萄發酵汁液用於製備改善皮膚狀態及縮小皮膚毛孔的組合物的用途 - Google Patents

紅葡萄發酵汁液用於製備改善皮膚狀態及縮小皮膚毛孔的組合物的用途 Download PDF

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Abstract

一種紅葡萄發酵汁液用於製備改善皮膚狀態的組合物的用途。紅葡萄發酵汁液由葡萄浸提液經酵母菌及乳酸桿菌發酵而製得。如此，紅葡萄發酵汁液可以提升人體內抗氧化能力、提升細胞對於光傷害的抵抗力，並且縮小皮膚毛孔。

Description

紅葡萄發酵汁液用於製備改善皮膚狀態及縮小皮膚毛孔 的組合物的用途
本發明關於一種發酵液飲品，尤其是指一種紅葡萄發酵汁液用於製備改善皮膚狀態的組合物的用途。
由微生物發酵的食品具有更易於消化、香味增加、儲藏時間提升等優勢。例如：泡菜、納豆、水果醋等等都是廣受歡迎的發酵類食品。
在飲品界中，發酵飲品也愈來愈受到消費者的喜愛。發酵飲品常以乳品、蔬菜、水果、豆類等為原料基底，再經由微生物作用而製得。
有鑑於此，本發明提供一種紅葡萄發酵汁液的用途，其能進一步提升紅葡萄本身的機能。於此，紅葡萄為基底，精選高效能的菌種，並且經由發酵過程以製得紅葡萄發酵汁液。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液的用途，其是用於製備改善皮膚狀態的組合物，其中紅葡萄發酵汁液由紅葡萄(Vits vinifera)的葡萄浸提液經酵母菌及乳酸桿菌發酵而製得。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液用以提升皮膚纖維細胞抵抗光傷害所造成的氧化。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液具有提升DNA修復相關基因的表現量的能力。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液具有提升MPG基因及XPA基因的表現量的能力。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液具有提升清除自由基相關基因的表現量的能力。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液具有提升SOD2基因的表現量的能力。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液用以提升人體內穀胱甘肽轉硫酶及超氧化物歧化酶含量。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液用以縮小皮膚毛孔。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液的總多酚含量為350ppm。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液的超氧化物歧化酶活性相對於該葡萄浸提液提升3.2倍。
綜上，根據任一實施例的紅葡萄發酵汁液，其具有下列至少一種能力：提升人體內抗氧化能力、提升細胞對於光傷害的抵抗力、縮小人體肌膚上的毛孔，進而改善皮膚狀態。
[圖1]是總多酚含量測試結果數據圖。
[圖2]是超氧化物歧化酶相對表現率結果圖。
[圖3]是相對ROS含量數據圖。
[圖4]是基因的相對表現率數據圖。
[圖5]是人體實驗毛孔比例結果圖。
[圖6]是人體實驗中穀胱甘肽轉硫酶含量相對比例圖。
[圖7]是人體實驗中超氧化物歧化酶含量相對比例圖。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液由桑嬌維塞種(Sangiovese)的紅葡萄的葡萄浸提液經酵母菌(Yeast)及乳酸桿菌(Lactobacillus)發酵而製得。
在一實施例中，葡萄浸提液可以是透過搾取紅葡萄(Vits vinifera)果實而得到的紅葡萄果汁、或透過濃縮紅葡萄果汁而得到的濃縮葡萄果汁、或透過稀釋紅葡萄果汁或濃縮葡萄果汁而得到的葡萄果汁稀釋液、或以溶劑浸提紅葡萄果實而得到的葡萄汁液。舉例而言，將紅葡萄果實直接攪碎過濾而成葡萄浸提液。在一實施例中，紅葡萄果實包含果皮、果肉及種子。在一實施例中，葡萄浸提液可以是採用市售的濃縮葡萄果汁以水調合而成。在一實施例中，葡萄浸提液可以是採用濃縮葡萄果汁、水以及葡萄糖調合而成。在一實施例中，葡萄浸提液可以是採用濃縮葡萄果汁、水以及葡萄糖加熱至95℃以上持續30分鐘所製成。其中，濃縮葡萄果汁與水的體積比可為1：8。並且，葡萄糖的濃度可為3%(W/V)，或是添加使葡萄浸提液的白利糖度(Brix°)大於或等於8的葡萄糖的量。意即，在添加葡萄糖的過程中同步量測溶液的白利糖度，並且於葡萄浸提 液的糖度達到8或超過8時，則停止添加葡萄糖。在一實施例中，紅葡萄可以是採用桑嬌維塞種(Sangiovese)、藍布魯斯科種(Lambrusco)的紅葡萄或其混合。
在一些實施例中，紅葡萄發酵汁液可以是葡萄浸提液經0.1%(W/V)的酵母菌及0.05%(W/V)的乳酸桿菌(Lactobacillus)發酵而製得。在一實施例中，紅葡萄發酵汁液可以是透過葡萄浸提液植入0.1%(W/V)的酵母菌及0.05%(W/V)的乳酸桿菌後靜置培養72小時而製得。在一實施例中，紅葡萄發酵汁液可以是透過葡萄浸提液、酵母菌及乳酸桿菌培養72小時後進行減壓濃縮而製得。在一實施例中，紅葡萄發酵汁液可以是透過葡萄浸提液、酵母菌及乳酸桿菌培養72小時後進行減壓濃縮及過濾而製得。其中，減壓濃縮時的溫度為55~65℃。
在一實施例中，酵母菌可以是啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。舉例而言，啤酒酵母可為寄存於食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心(BCRC)且寄存編號BCRC20271菌株的啤酒酵母(其亦寄存於DSMZ且國際寄存編號ATCC26602)，或是其他的市售啤酒酵母。在一實施例中，乳酸桿菌可以是為嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)、瑞士乳酸菌(Lactobacillus helveticus)、或植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)。舉例而言，乳酸桿菌可為寄存於BCRC且寄存編號BCRC910636的嗜熱鏈球菌TCI633(其亦寄存於DSMZ且國際寄存編號DSM28121)、寄存於BCRC且寄存編號BCRC910846的瑞士乳酸菌TCI357(其亦寄存於DSMZ且國際寄存編號DSM33107)、寄存編號BCRC910805的嗜熱鏈球菌TCI028(其亦寄存於DSMZ且國際寄存編 號DSM33108)、寄存編號BCRC910760的嗜熱鏈球菌TCI378(其亦寄存於DSMZ且國際寄存編號DSM32451)、其他市售嗜熱鏈球菌、其他市售瑞士乳酸菌、或其他市售植物乳桿菌。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液用以提升皮膚纖維細胞抵抗光傷害所造成的氧化。在一實施例中，光傷害是指紫外線(Ultraviolet)所造成的細胞氧化狀態。在一實施例中，紫外線是指波長介於320~400奈米(nm)的光線。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液具有提升DNA修復相關基因的表現量的能力。在一實施例中，紅葡萄發酵汁液具有提升MPG(N-methylpurine DNA glycosylase)基因(基因ID：4350)及XPA(DNA damage recognition and repair factor)基因(基因ID：7507)的表現量的能力。於此，MPG基因是關於DNA單股斷裂的修護能力，可以維持DNA的穩定性。XPA基因是關於DNA結構異常的修護能力，其編碼的XPA蛋白能與DNA的受損部位結合，穩定DNA的核苷酸切除修復(Nucleotide excision repair)過程。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液具有提升清除自由基相關基因的表現量的能力。在一實施例中，紅葡萄發酵汁液具有提升SOD2(superoxide dismutase 2)基因(ID：6648)的表現量的能力。於此，提升SOD2基因的表現量可以促進粒腺體內錳超氧化物歧化酶的含量，進而提升粒腺體內自由基的清除。錳超氧化物歧化酶能催化超氧基團的歧化反應，以將粒線體內產生的超氧離子清除，以降低粒線體DNA的過氧化損傷。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液用以提升人體內穀胱甘肽轉硫酶(GST)及超氧化物歧化酶(SOD)含量。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液於人體實驗中有效的縮小皮膚毛孔。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液的總多酚含量大於200μg/mL。在一示範例中，紅葡萄發酵汁液的總多酚含量可為350ppm。
在一實施例中，紅葡萄發酵汁液的超氧化物歧化酶活性相對於該葡萄浸提液提升3.2倍。
在一些實施例中，前述之組合物可包括食品產品，前述食品產品包含特定含量的紅葡萄發酵汁液。
在一些實施例中，食品產品可為一般食品、保健食品或膳食補充品。換言之，此一般食品、保健食品(health foods)或膳食補充品包含有效劑量的紅葡萄發酵汁液。
在一些實施例中，前述之食品產品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成適合於口服的劑型。在一些實施例中，前述之一般食品可為食品產品本身。在一些實施例中，一般食品可為但不限於：飲料(beverages)、發酵食品(fermented foods)、烘培產品(bakery products)或調味料。
在一些實施例中，所得的紅葡萄發酵汁液可進一步作為食品添加物(food additive)，以製得含有紅葡萄發酵汁液的食品組合物。於此，能藉由習知方法於原料製備時添加任一實施例的紅葡萄發酵汁液，或是於食品的製作過程中添加任一實施例的紅葡萄發酵汁液，而與任一種可 食性材料配製成供人類與非人類動物攝食的食品產品(即食品組合物)。
在一些實施例中，前述之組合物可包括美妝產品，前述美妝產品包含特定含量的紅葡萄發酵汁液。
在一些實施例中，前述之美妝產品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成適合於外用的產品。在一些實施例中，前述之美妝產品可為產品本身或為另一產品的添加物。在一些實施例中，美妝產品可為但不限於：化妝水、凝膠、凍膜、泥膜、乳液、乳霜、唇膏、粉底、粉餅、蜜粉、卸妝油、卸妝乳、洗面乳、沐浴乳、洗髮精、護髮乳、防曬乳、護手霜、指甲油、香水、精華液及面膜。在一些實施例中，前述之化妝品或保養品可視需要更包含外用品可接受成分。在一些實施例中，外用品可接受成分可例如為乳化劑、滲透促進劑、軟化劑、溶劑、賦型劑、抗氧化劑、或其組合。
例一：紅葡萄發酵汁液的製備方式一
首先將產地為義大利的桑嬌維塞種的紅葡萄果實製成的濃縮果汁加入水調合成葡萄汁溶液。其中，濃縮果汁與水的比例為1：8。於此，濃縮果汁採購自供應商diana food、產品編號CC01460001。
接著，在葡萄汁溶液中添加3%(W/V)的葡萄糖，以得到葡萄基液。
將葡萄基液加熱至約95℃(槽內溫度)持續30分鐘後，再降溫至40℃以下，以得到葡萄浸提液。
在葡萄浸提液內添加0.1%(W/V)的酵母菌及0.05%(W/V)的乳酸菌，然後於30℃下靜置培養72小時，以得到葡萄發酵初液。於此， 酵母菌採用寄存編號BCRC20271的啤酒酵母，乳酸菌採用寄存編號BCRC910636的嗜熱鏈球菌TCI633。於此，葡萄發酵初液的白利糖度為4.0±0.5(20℃)以及其pH值為3.0±0.5。
將葡萄發酵初液於60℃之間進行減壓濃縮，並將減壓濃縮後的葡萄發酵初液以孔徑400mesh進行過濾，以製得紅葡萄發酵汁液。
例二：紅葡萄發酵汁液的製備方式二
首先將產地為義大利的桑嬌維塞種的紅葡萄果實製成的濃縮果汁加入水調合成葡萄汁溶液。其中，濃縮果汁與水的比例為1：8。於此，濃縮果汁採購自供應商diana food、產品編號CC01460001。
接著，在葡萄汁溶液中添加3%(W/V)的葡萄糖，以得到葡萄基液。
將葡萄基液加熱至約95℃(槽內溫度)持續30分鐘後，再降溫至40℃以下，以得到葡萄浸提液。
在葡萄浸提液內添加0.1%(W/V)的酵母菌及0.05%(W/V)的乳酸菌，然後於30℃下靜置培養72小時，以得到葡萄發酵初液。於此，酵母菌採用寄存編號BCRC20271的啤酒酵母，乳酸菌採用寄存編號BCRC910636的嗜熱鏈球菌TCI633。於此，葡萄發酵初液的白利糖度為4.0±0.5(20℃)以及其pH值為3.0±0.5。
將葡萄發酵初液於60℃之間進行減壓濃縮，並將減壓濃縮後的葡萄發酵初液以孔徑400mesh進行過濾，以製得紅葡萄發酵過濾液。
另，將上述製得的紅葡萄發酵過濾液加入紅葡萄風味醋(購自VARVELLO GIOVANNI & C.L'ACETO REALE S.R.L.，產品名稱 Aceto Balsamico di Modena I.G.P)以及異麥芽寡糖混合後，以100℃滅菌70分鐘，以製成白利糖度40±2以並且pH值3.3±0.5的紅葡萄發酵汁液B。於此，紅葡萄發酵過濾汁液、紅葡萄風味醋及異麥芽寡糖的體積比為100：35：80。其中，紅葡萄風味醋為用於調整風味。
例三：總多酚含量測試
分別以前述例二所得的葡萄浸提液及紅葡萄發酵汁液為樣本。將各樣本以水稀釋後取100μL到離心管中。接著，加入500μL之Folin-Ciocalteu酚試劑(Folin-Ciocalteu's phenol reagent,Merck)至離心管中與稀釋後的樣本混合並靜置3分鐘，然後再加入400μL之7.5%(W/V)碳酸鈉(Sigma 31432)混勻靜置30分鐘，以得到待測反應溶液。於確認待測反應溶液中無氣泡存在後，取200μL之待測反應溶液至96孔盤中，並測量待測反應溶液於750nm下之吸光度。以上各樣品進行三次重複試驗並取其四捨五入後的平均值。
並且，以沒食子酸(Gallic acid)作為標準品製作標準曲線。於此，以沒食子酸(粉末，Sigma G7384)與純水配置0μL/mL、20μL/mL、40μL/mL、60μL/mL、80μL/mL、及100μL/mL之沒食子酸的標準溶液，並分別取100μL之各濃度的標準溶液至10mL離心管中。加入500μL之Folin-Ciocalteu酚試劑至離心管內與標準溶液混合並靜置3分鐘，然後再加入400μL之7.5%碳酸鈉混合並靜置30分鐘，以得到標準反應溶液。取200μL之標準反應溶液至96孔盤中，並測量其在750nm下之吸光度。然後，以沒食子酸的濃度與其對應的吸光值繪製標準曲線。
接著，利用標準曲線將待測反應溶液的吸光值以內差法換算 成濃度後，在回乘稀釋倍率，以得到各樣品的總多酚含量。
於此，可得到葡萄浸提液的總多酚含量為120ppm及紅葡萄發酵汁液B的總多酚含量為350ppm，如圖1所示。
由實驗結果可知，紅葡萄發酵汁液的總多酚含量較葡萄浸提液的總多酚含量提升2.9倍。基此，可知藉由酵母菌及乳酸菌的發酵能更有利於有效成份的提取。
例四：細胞抗氧化實驗
於此，採用人類皮膚纖維細胞CCD-966sk(保存編號BCRC 60153)，以下簡稱CCD-966sk細胞。使用之培養基為透過額外添加使其含有0.1M的非必需胺基酸(Gibco；Cat.11140050)、1.5g/L的碳酸氫鈉(Sigma；Cat.S5761-500G)、1mM的丙酮酸鈉(Gibco；Cat.11360-070)、10%(V/V)胎牛血清(Gibco；Cat.10437-028)以及1%(V/V)的青黴素-鏈黴素(Gibco；Cat.15140122)之Earle’s平衡鹽類型的MEM(Minimum essential medium)培養液。
將螢光染料DCFH-DA(購自Sigma/SI-D6883-50MG)以二甲基亞碸(Dimethyl sulfoxide,DMSO)為溶劑配置成濃度為5mg/mL的活性氧化物質染劑。
首先，以每孔1.5×105個細胞的細胞數，將CCD-966sk細胞接種於含有2mL培養基的6孔培養盤的各孔中，並置於37℃下培養24小時。
於此，實驗分為四組進行。於24小時培養後，各組更換培養基，接著在37℃下再培養1小時。其中，第一組僅添加培養基，未作施加 任何樣本(即空白組)。第二組僅添加培養基，未作施加任何樣本(即對照組)。第三組添加的培養基中含例一所製得的葡萄浸提液(即第一實驗組)於此，所添加的葡萄浸提液濃度是相對於培養基體積的0.03125%(V/V)。第四組添加的培養基中含例二所製得的紅葡萄發酵汁液(即第二實驗組)於此，所添加的紅葡萄發酵汁液濃度是相對於培養基體積的0.03125%(V/V)。
於培養1小時後，添加5μg/mL的活性氧化物質染劑並在37℃下反應15分鐘，以進行染色。接下來，除第一組外，各組的各孔加入10μL的100mM的H2O2水溶液並在37℃下處理1小時。
處理後將各孔內的液體移除後，再以1mL的1X DPBS(Dulbecco’s phosphate-buffered saline)潤洗細胞二次。再於避光情況下，將各孔內液體移除後，加入200μL的1×胰蛋白酶作用5分鐘。然後，將各孔的細胞以培養基個別收集至1.5mL的微量離心管內，並以400xg離心10分鐘。去除管內的上清液，然後以1X DPBS重新懸浮沉澱物，再次以400xg離心10分鐘。重新去除管內上清液後，再以1mL的1X DPBS懸浮細胞，以得到待測細胞液。
接下來，以流式細胞儀(品牌Beckman)檢測各孔待測細胞液的DCFH-DA螢光訊號(儀器設定激發光：450-490nm；散射光：510-550nm)，以得到各組的相對活性氧(reactive oxygen species,ROS)表現量，並以空白組的相對活性氧表現量為1換算出各組的相對活性氧表現量，如圖2所示。
於圖3中，以單尾學生t檢驗(Student t-test)分析二組別之 間是否具有統計上的顯著差異，即P值。「###」代表對照組相對於空白組其P值小於0.001，「**」代表第一實驗組相對於對照組其P值小於0.01，「***」代表第二實驗組相對於對照組其P值小於0.001。
由圖3可見，在以空白組的相對活性氧表現量為1的情況下，對照組的相對活性氧表現量為5.21，第一實驗組的相對活性氧表現量為4.37，第二實驗組的相對活性氧表現量為2.69。
若氧化傷害壓力愈大的的情況下，則活性氧表現量愈高，反之，若能適當抑制H2O2所造成的氧化壓力傷害，則其相對活性氧表現量愈低。因此，比較空白組與對照組可見，在H2O2處理後的CCD-966sk細胞的相對活性氧表現量明顯地增加，意即H2O2會造成的氧化壓力傷害。比較對照組與實驗組可見，葡萄浸提液處理後的CCD-966sk細胞的抗氧化傷害能力與紅葡萄發酵汁液處理後的CCD-966sk細胞的抗氧化傷害能力明顯優於未有任何處理的CCD-966sk細胞的抗氧化傷害能力。其中，紅葡萄發酵汁液處理後的CCD-966sk細胞的抗氧化傷害能力更優於葡萄浸提液處理後的CCD-966sk細胞的抗氧化傷害能力。基此，可知藉由酵母菌及乳酸菌的發酵能更有利於提升抗氧化傷害能力。
例五：相關基因表現實驗
於此，採用人類皮膚纖維細胞CCD-966sk(ATCC,CRL-1881)，以下簡稱CCD-966sk細胞。使用之培養基為透過額外添加使其含有0.1M非必需胺基酸、1.5g/L碳酸氫鈉、1mM丙酮酸鈉、10%(V/V)胎牛血清(Gibco)之0.1mM的Earle’s平衡鹽類型的MEM(Minimum essential medium)培養液。
以每孔1.5×105個細胞的細胞數，將CCD-966sk細胞接種於含有2mL培養基的6孔培養盤的各孔中，並置於37℃下培養24小時。
於此，實驗分為四組(即空白組、對照組、第一實驗組及第二實驗組)進行。於24小時培養後，各組更換培養基，接著在37℃下再培養1小時。其中，空白組及對照組僅添加培養基，未施加任何樣本。第一實驗組添加含有上述例一所製得的葡萄浸提液的培養基，於此，所添加的葡萄浸提液濃度是相對於培養基體積的0.03125%(V/V)。第二實驗組添加含有上述例二所製得的紅葡萄發酵汁液的培養基，於此，所添加的紅葡萄發酵汁液濃度是相對於培養基體積的0.03125%(V/V)。
再將上述各組在37℃下培養6小時之後，對照組、第一實驗組及第二實驗組照射能量單位達5J/cm2的UVA，以進行UVA處理。其中，空白組不經UVA處理。
接著，使用RNA萃取套組(RNA extraction kit，購自Geneaid公司，台灣，Lot No.FC24015-G)對各組的CCD-966sk細胞進行RNA萃取。接著，每組取2000奈克(ng)所萃取出的RNA為模板，藉由SuperScript® III反轉錄酶(購自Invitrogene公司，美國，編號18080-051)進行反轉錄作用，以產生相應之cDNA。後續，利用ABI StepOnePlusTM Real-Time PCR system(Thermo Fisher Scientific公司，美國)，利用KAPA SYBR FAST qPCR套組(購自Sigma公司，美國，編號38220000000)及目標基引對應的組合引子(Primer)(如下表一)對相應之cDNA進行定量即時反轉錄聚合酶連鎖反應(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction)，以檢測各組的 CCD-966sk細胞的目標基因的表現量。於此，利用2-△△Ct法進行基因表現量的測定。
並且，以空白組的檢測結果視為1(即相對表現率為1)，將各組的檢測結果換算為相對表現率。其中，各組的MPG基因、SOD2基因及XPA的基因的表現率如圖4所示。
Figure 109138001-A0305-02-0015-1
*R為REVERSE(反向引子)，F為FORWARD(順向引子)。
於圖4中，以單尾學生t檢驗(Student t-test)分析二組別之間是否具有統計上的顯著差異，即P值。圖式中「*」代表p值小於0.05，「**」代表P值小於0.01。
由圖4可見，在空白組的CCD-966sk細胞的MPG基因的相對表現率為1的情況下，對照組的MPG基因的相對表現率為0.96，意即在UVA的照射下會使得CCD-966sk細胞的MPG基因的表現量下降。在空白組的CCD-966sk細胞的MPG基因的相對表現率為1的情況下，第一實驗組的CCD-966sk細胞的MPG基因的相對表現率為1.11，第二實驗組的CCD-966sk細胞的MPG基因的相對表現率為1.29，意即細胞在經由葡萄浸提液或紅葡萄發酵汁液處理後，即使經過相同劑量的UVA照射，其MPG基因的相對表現率仍然都高過於1(即高於空白組)。也就是說，葡萄浸提液及紅葡萄發酵汁液均能提升CCD-966sk細胞的DNA修護能力。其中，經紅葡萄發酵汁液處理後的細胞的MPG基因的相對表現率還優於經葡萄浸提液處理後的細胞的MPG基因的相對表現率。也就是說，在提升DNA修護能力上，紅葡萄發酵汁液的效果優於葡萄浸提液。
由圖4亦可見，分在空白組的CCD-966sk細胞的SOD2基因的相對表現率為1的情況下，對照組的CCD-966sk細胞的SOD2基因的相對表現率為0.92，意即在UVA的照射下會使得CCD-966sk細胞的SOD2基因的表現量下降。而在空白組的CCD-966sk細胞的SOD2基因的相對表現率為1的情況下，第一實驗組的CCD-966sk細胞的SOD2基因的相對表現率為1.17，第二實驗組的CCD-966sk細胞的SOD2基因的相對表現率為1.22，意即細胞在經由葡萄浸提液或紅葡萄發酵汁液的處理後，即使經過相同劑量的UVA照射，其SOD2基因的相對表現率仍然都高過於1(即高於空白組)。其中，不論葡萄浸提液紅葡萄發酵汁液，其均能提升CCD-966sk細胞的SOD2基因的表現量。尤其是，紅葡萄發酵汁液對於提 升SOD2基因的表現量的效果更佳。
由圖4亦可見，在空白組的CCD-966sk細胞的XPA基因的相對表現率為1的情況下，對照組的CCD-966sk細胞的XPA基因的相對表現率為0.92，第一實驗組細胞的XPA基因的相對表現率為1.83，意即在UVA的照射下會使得CCD-966sk細胞的XPA基因的表現量下降，並且在經葡萄浸提液處理後，CCD-966sk細胞的XPA基因的表現量更是顯著地下降。反觀，第二實驗組的CCD-966sk細胞的MPG基因的相對表現率為1.13，意即細胞在經由紅葡萄發酵汁液的處理後，即使經過相同劑量的UVA照射，其XPA基因的相對表現率仍然有顯著地提升。也就是說，紅葡萄發酵汁液能提升CCD-966sk細胞的修護DNA結構的能力。
例六：皮膚狀態改變人體實驗
本次實驗共有8位受試者，令受試者每日服用一瓶5ml的例二所製得的紅葡萄發酵汁液，並連續飲用4週。並且，於第一次服用前(即控制組)及服用4週後(即實驗組)蒐集各受試者的血液以檢測其穀胱甘肽轉硫酶及超氧化物歧化酶含量(委託立人醫事檢驗所檢測)，以及採用數位膚質檢測儀對受試者的面部皮膚進行檢測。
首先，採用美國Canfield所販售之VISIA高階數位膚質檢測儀，其係透過高解析度之相機鏡頭對受試者的面部肌膚進行各組毛孔表現量的量測。藉由標準白光照射，造成面部毛孔凹陷處產生陰影，毛孔會比周圍的膚色更黑，故可以藉此偵測毛孔數量及其面積。再利用軟體根據毛孔數目、面積分析得到數值化的毛孔表現量，數值越高則顯示其毛孔數較多量、面積較大。於量測後，將控制組的毛孔表現量作為基準(即控制組 的之皮膚上毛孔的相對表現率為100%)，計算實驗組的皮膚上毛孔的相對表現率(%)。
由圖5可見，在控制組的毛孔相對表現率為100的情況下，實驗組的毛孔相對表現率為92.6，意即當受試者連續飲用紅葡萄發酵汁液四週後，受試者的面部皮膚上的毛孔較使用前減少。意即，紅葡萄發酵汁液能縮小皮膚上的毛孔，以改善皮膚粗糙狀態，進而使皮膚更細緻光澤。
於此，將蒐集到的血液委託立人醫事檢驗所進行血液中的穀胱甘肽轉硫酶及超氧化物歧化酶的含量檢測。於檢測後，將控制組的含量作為基準(即控制組的之相對含量為100%)，計算實驗組的相對含量(%)。
參照圖6，在控制組的穀胱甘肽轉硫酶的相對含量為100的情況下，實驗組的穀胱甘肽轉硫酶的相對含量為106.62。可知，相較飲用前，受試者在連續飲用紅葡萄發酵汁液四週後，其血液中的穀胱甘肽轉硫酶的含量明顯提升6.62%。也就是說，紅葡萄發酵汁液能提升人體內穀胱甘肽轉硫酶的含量。
參照圖7，在控制組的超氧化物歧化酶的相對含量為100的情況下，實驗組的超氧化物歧化酶的相對含量為104.65。可知，相較飲用前，受試者在連續飲用紅葡萄發酵汁液四週後，其血液中的超氧化物歧化酶的含量明顯提升4.65%。也就是說，紅葡萄發酵汁液能提升人體內超氧化物歧化酶的含量。
於圖6及圖7中，以單尾學生t檢驗(Student t-test)分析二組別之間是否具有統計上的顯著差異，即P值。圖式中「*」代表p值小於 0.05，「**」代表P值小於0.01。
基此，紅葡萄發酵汁液能提升人體內穀胱甘肽轉硫酶與超氧化物歧化酶的含量，以致增加人體清除自由基的能力，進而使人體能更加抵禦氧化壓力的傷害。
雖然本發明的技術內容已經以較佳實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神所作些許之更動與潤飾，皆應涵蓋於本發明的範疇內，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
<110> 大江生醫股份有限公司
<120> 紅葡萄發酵汁液用於製備改善皮膚狀態及縮小皮膚毛孔的組合物的用途
<130> NA
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<160> 6
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<210> 1
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> MPG-F
<400> 1
Figure 109138001-A0305-02-0021-2
<210> 2
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> MPG-R
<400> 2
Figure 109138001-A0305-02-0021-3
<210> 3
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SOD2-F
<400> 3
Figure 109138001-A0305-02-0022-4
<210> 4
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SOD2-R
<400> 4
Figure 109138001-A0305-02-0022-5
<210> 5
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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Figure 109138001-A0305-02-0023-6
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<211> 26
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> XPA-R
<400> 6
Figure 109138001-A0305-02-0023-7

Claims (9)

  1. 一種紅葡萄發酵汁液的用途，其是用於製備改善皮膚狀態及縮小皮膚毛孔的組合物，其中該紅葡萄發酵汁液由一葡萄浸提液經一酵母菌及一乳酸桿菌發酵而製得，且該葡萄浸提液的葡萄果實原料為桑嬌維塞種(Sangiovese)。
  2. 如請求項1所述的用途，其中該紅葡萄發酵汁液用以提升皮膚纖維細胞抵抗光傷害所造成的氧化。
  3. 如請求項2所述的用途，其中該紅葡萄發酵汁液具有提升DNA修復相關基因的表現量的能力。
  4. 如請求項3所述的用途，其中該紅葡萄發酵汁液具有提升MPG基因及XPA基因的表現量的能力。
  5. 如請求項3所述的用途，其中該紅葡萄發酵汁液具有提升清除自由基相關基因的表現量的能力。
  6. 如請求項5所述的用途，其中該紅葡萄發酵汁液具有提升SOD2基因的表現量的能力。
  7. 如請求項1所述的用途，其中該紅葡萄發酵汁液用以提升人體內穀胱甘肽轉硫酶及超氧化物歧化酶含量。
  8. 如請求項1到7任一項所述的用途，其中該紅葡萄發酵汁液的總多酚含量為350ppm。
  9. 如請求項1到7任一項所述的用途，其中該紅葡萄發酵汁液的超氧化物歧化酶活性相對於該葡萄浸提液提升3.2倍。
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116548609A (zh) * 2022-01-27 2023-08-08 大江生医股份有限公司 益生质组合物及其用途
EP4368192A1 (en) 2022-11-09 2024-05-15 Cépages Combination of a lactobacillus strain and a grape extract for use as an anti-ageing agent

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101204470A (zh) * 2006-12-22 2008-06-25 刘杰龙 用葡萄发酵的产品在皮肤杀菌及保健药品领域的应用

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006008566A (ja) * 2004-06-24 2006-01-12 Ichimaru Pharcos Co Ltd 果汁の乳酸菌醗酵物を有効成分とする美容剤とその応用
KR20060101095A (ko) * 2005-03-19 2006-09-22 정세영 피부 주름 개선 효능이 있는 적포도 추출물
CN105188661A (zh) * 2013-03-08 2015-12-23 深圳华大基因科技有限公司 组合物以及包含其的食品、该食品的制备方法
JP6133834B2 (ja) * 2014-12-12 2017-05-24 日本・バイオ株式会社 美白剤及び美白用化粧料
CN105995979A (zh) * 2016-05-20 2016-10-12 福建师范大学 一种美藤果油组合物、微胶囊粉末及其制备方法
CN107960649A (zh) * 2016-10-20 2018-04-27 沈阳工学院 一种复合菌种发酵红树莓和葡萄酵素的方法
CN106726949B (zh) * 2016-12-22 2020-10-27 北京工商大学 一种葡萄籽发酵原浆化妆品及其制备方法与应用
CN109082342A (zh) * 2017-06-14 2018-12-25 广西启福微生物农业有限公司 一种星油藤籽油
CN107550764B (zh) * 2017-10-20 2020-04-21 上海应用技术大学 一种高稳定性的美藤果油水润q弹珠的制备方法
CN108096081A (zh) * 2017-12-13 2018-06-01 上海拉丽丝商贸有限公司 一种酵母发酵提取物的组合物及其在化妆品中的应用
CN108685767B (zh) * 2018-05-28 2020-10-09 上海应用技术大学 一种水包油型美藤果油微乳液的制备方法
CN109276483B (zh) * 2018-12-11 2021-03-19 无限极（中国）有限公司 一种美藤果油微乳及其制备方法
CN111467385B (zh) * 2019-01-24 2022-05-17 深圳市华大农业应用研究院 组合物在预防或治疗神经退行性疾病中的用途

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101204470A (zh) * 2006-12-22 2008-06-25 刘杰龙 用葡萄发酵的产品在皮肤杀菌及保健药品领域的应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
網路文獻 愛秀美 紅酒可以洗臉嗎?用紅酒洗臉這個效果太驚人了 壹讀， 2017/04/27， https://read01.com/nB23Dd.html#.YXkJpp5ByUk *
網路文獻 愛秀美 紅酒可以洗臉嗎?用紅酒洗臉這個效果太驚人了 壹讀， 2017/04/27， https://read01.com/nB23Dd.html#.YXkJpp5ByUk。

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