TWI614500B - 細胞檢測晶片的影像定位與拼接方法及影像檢測系統 - Google Patents
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Abstract
一種細胞檢測晶片的影像定位與拼接方法及影像檢測系統。此方法依據影像擷取裝置的攝像區域的大小及細胞檢測晶片的檢測區域的大小，規劃影像擷取裝置拍攝細胞檢測晶片的影像的移動路徑，其中所述檢測區域中包括配置用以定位影像的多個記號。然後，控制影像擷取裝置依照所規劃的移動路徑於細胞檢測晶片上方移動以拍攝細胞檢測晶片的多張影像。最後，依據影像中出現的記號的位置，對影像進行定位並拼接為完整的晶片影像。
Description
本案是有關於一種細胞檢測方法及裝置，且特別是有關於一種細胞檢測晶片的影像定位與拼接方法及影像檢測系統。
隨著生技產業的發達，檢測癌細胞的方法也逐漸被開發。其中一種檢測方法為循環腫瘤細胞（Circulating Tumor Cell，CTC）檢測，也就是檢測循環系統中的癌細胞。雖然目前CTC的分析尚在研究階段，但利用CTC數量的分析依然有其臨床的價值。例如，透過病患血液中CTC的數量，醫師得以進行腫瘤轉移的預測及治療方式的評估。CTC數量的多寡通常關係到腫瘤轉移的可能性，因此其數量越多表示轉移的機率越高，也代表源發腫瘤的成長程度。
當取得血液的檢體時，由於檢體內的細胞數量相當的多，尤其是紅血球等等，因此必須先經過純化的步驟。在CTC分離的技術上，主要分為四種，分別是利用細胞密度梯度離心、細胞尺寸分選（類似於過濾器過濾的概念）、免疫抗體被覆微結構捕捉及免疫磁珠分離等方式。透過不同的方法分離出CTC後，才會進行DNA或螢光訊號等分析。在CTC的分離上，由於血液樣本的數量龐大，需要高通量的生物晶片來同時檢測大量的細胞，例如採二維陣列排列的晶片，並且使晶片邊緣產生5 um的狹縫來限制細胞的排列範圍，避免細胞遺失。由於二微陣列能夠排列到單層的結構，就可以利用細胞螢光的對比來達到高敏感度的檢測。
然而，即使簡化了晶片的結構進而縮短的晶片的操作時間，在檢測時依然會耗費相當長的時程。
本案提供一種細胞檢測晶片的影像定位與拼接方法及影像檢測系統，可提供所拍攝晶片影像的定位及拼接功能。
本案的細胞檢測晶片的影像定位及拼接方法適於由具有處理器的電子裝置控制影像擷取裝置拍攝細胞檢測晶片的影像並對所拍攝的影像進行定位及拼接。此方法依據影像擷取裝置的攝像區域的大小及細胞檢測晶片的檢測區域的大小，規劃影像擷取裝置拍攝細胞檢測晶片的影像的移動路徑，其中所述檢測區域中包括配置用以定位影像的多個記號。接著，控制影像擷取裝置依照所規劃的移動路徑於細胞檢測晶片上方移動以拍攝細胞檢測晶片的多張影像。然後，依據影像中出現的記號的位置，對影像進行定位並拼接為完整的晶片影像。
在本案的一實施例中，所述依據影像中出現的記號的位置，對影像進行定位並拼接為完整的晶片影像的步驟更包括 依據各張影像在移動路徑中的拍攝順序或拍攝位置，找出相鄰影像，而依據相鄰影像中出現的記號的位置拼接相鄰影像以獲得完整的晶片影像。
在本案的一實施例中，所述的細胞檢測晶片中的記號的數量及位置包括依據影像擷取裝置的攝像區域的大小及細胞檢測晶片的檢測區域的大小來決定，使得影像擷取裝置所拍攝的各張影像中包括至少一個所述的記號。
在本案的一實施例中，所述的方法更包括於細胞檢測晶片上使用光阻製作記號，所述的光阻包括SU-8或AZ9260。
在本案的一實施例中，所述於細胞檢測晶片上使用光阻製作記號的步驟包括於玻片表面塗佈第一光阻並進行軟烤、曝光及顯影，以製作流道的微結構，以及於玻片表面上各個記號的位置塗佈第二光阻並進行軟烤、曝光及顯影，以製作記號的微結構。
本案的細胞檢測晶片的影像檢測系統包括影像擷取裝置及電子裝置。其中，影像擷取裝置係配置於細胞檢測晶片上方，用以移動拍攝細胞檢測晶片的多張影像。電子裝置包括連接裝置、儲存裝置及處理器。連接裝置係用以連接影像擷取裝置。儲存裝置係用以儲存多個模組。處理器係耦接連接裝置及儲存裝置，用以執行儲存裝置中儲存的模組。所述模組包括移動路徑規劃模組、控制模組及影像拼接模組。移動路徑規劃模組係依據影像擷取裝置的攝像區域的大小及細胞檢測晶片的檢測區域的大小，規劃影像擷取裝置拍攝細胞檢測晶片的影像的移動路徑，其中所述的檢測區域中包括配置用以定位影像的多個記號。控制模組係用以控制影像擷取裝置依照移動路徑規劃模組所規劃的移動路徑於細胞檢測晶片上方移動以拍攝影像。影像拼接模組係用以依據影像中出現的記號的位置，對所述影像進行定位並拼接為完整的晶片影像。
在本案的一實施例中，所述的影像拼接模組包括依據各張影像在移動路徑中的拍攝順序或拍攝位置，找出相鄰影像，並依據相鄰影像中出現的記號的位置拼接相鄰影像以獲得完整的晶片影像。
在本案的一實施例中，所述的移動路徑規劃模組更依據影像擷取裝置的攝像區域的大小及細胞檢測晶片的檢測區域的大小，決定細胞檢測晶片中的記號的數量及位置，使得影像擷取裝置所拍攝的各張影像中包括至少一個記號。
在本案的一實施例中，所述的記號包括數字、字母、符號、圖案其中之一或其組合。
基於上述，本案的細胞檢測晶片的影像定位與拼接方法及影像檢測系統藉由在細胞檢測晶片的檢測區域中配置可用以定位的記號，並利用相機以錄影及定時擷圖的方式，拍攝檢測區域中各個區域的影像。之後，藉由影像拼接演算法，找出各張影像中的記號以及具有相同記號的影像，再根據記號在影像中的位置對各張影像進行對位及拼接，使得拼接後影像中的記號重疊。藉由上述記號的輔助，電子裝置得以快速辨認出重疊的部分，並將這些晶片影像拼接成完整的晶片影像。
為讓本案的上述特徵和優點能更明顯易懂，下文特舉實施例，並配合所附圖式作詳細說明如下。
本發明一實施例使用密度離心法（例如Ficoll）直接從血液中分離出循環腫瘤細胞（Circulating Tumor Cell，CTC）及淋巴細胞等，並對分離出的樣本進行螢光標定，之後滴入本發明一實施例的細胞自組裝陣列（Self-Assembled Cell Array，SACA）晶片中。此晶片利用流體的特性，使得滴入的樣本在經過一段時間後可呈現細胞單層排列。
詳言之，本發明一實施例係使用微流道井式檢測平台來實施細胞分選，利用流體作用使得細胞落點能夠分散，避免同一位置落下的細胞數量過多而造成檢測效果降低。圖1A及圖1B分別是依照本發明一實施例所繪示的細胞檢測平台與細胞檢測晶片的示意圖。請參照圖1A，細胞檢測平台1上可配置多個細胞檢測晶片（例如晶片10），其例如選用透明材質的材料（例如玻片）作為平台主體，並在玻片表面以黃光微影製成厚度約5微米（μm）的流道，以作為帶動細胞流動的動力源。詳言之，晶片10中間的圓孔係作為細胞懸浮液的注入孔，晶片10周圍的孔洞則作為蒸發孔，使得流道內的液體可由此處蒸發。液體蒸發時的向外拉力，不僅可給予細胞穩定的流動拉力，將中心的細胞向外圍擴散，更能避免水分蒸發速度過快造成細胞死亡。
請參照圖1B，晶片10例如是由上下兩片玻片12、14疊合而成，兩片玻片12、14中間夾著一層以黃光微影製成的5微米厚度的光阻16。玻片12中間的開孔係作為細胞懸浮液的注入孔，而光阻16的厚度則作為井壁，使得井底部有向外流通的狹窄通道，井中的液體通過此流道而經由周圍的孔洞向外蒸發。此蒸發所導致的力量有二：一為側向拉力，其可使得井中心的細胞向外移動，產生「攤平」的現象；另一則向下拉力，其可加速細胞的沈降及排列。藉由小幅的加速排列，可以減少細胞推積的可能性。
需說明的是，為了避免細胞隨著井內液體的蒸發而跟著流失，前述光阻36的厚度定為至少5微米，此可使得直徑大於此厚度的細胞被侷限在井中。由圖1B右側的放大圖可知，光阻36的作用如同一個濾孔，其可以使液體通過，但細胞卻會因為被上下兩玻片12、14卡住而留在井內。
以下搭配圖1B簡述將細胞注入晶片10的流程，首先在晶片10內填充PBS溶液，再由細胞懸浮液注入口滴入細胞懸浮液18。此時細胞18a會受向下的重力和側向的拉力，較靠近井緣的細胞會受到側向拉力影響快速往底部側向流道流動，最後細胞會受到狹窄濾孔的阻隔而侷限在井中。藉此，可避免細胞過度分散。另一方面，接近中心的細胞雖然所受到的側向拉力較小，仍會因為重力的影響向下沉降，最終沉降在同一位置的細胞會被攤平（如細胞18b），而不致於因細胞堆疊而無法形成單層排列。
為求能夠在短時間內完成晶片10內細胞的檢測，本發明一實施例為此晶片10設計了一套自動檢測影像系統，其係在晶片10的檢測區域中預留記號，並利用電控平台控制相機在晶片10上移動以錄製晶片影像，再利用所拍攝影像中的記號對所拍攝影像進行定位及拼接，最終獲得完整的晶片影像。藉此，除了能夠大幅縮短手動操作所耗費的時間外，也可讓研究員無需致力於後續的影像分析上。
舉例來說，圖2是依照本發明一實施例所繪示的細胞檢測晶片的影像檢測系統的方塊圖。請參照圖2，本實施例的影像檢測系統2包括電子裝置20及影像擷取裝置30，其中電子裝置20例如是具備運算能力的個人電腦、伺服器、工作站或等計算機裝置，其中包括連接裝置22、儲存裝置24及處理器26，其功能分述如下：
連接裝置22例如是通用序列匯流排（USB）、RS232介面、通用非同步收發傳輸器（UART）、積體電路匯流排（I2C）、串行外設介面（SPI）、顯示埠（Display port）、雷電（Thunderbolt）介面或區域網路（LAN）介面，其可提供電子裝置20透過有線的方式連接影像擷取裝置30，以控制影像擷取裝置30移動並拍攝影像。
需說明的是，影像擷取裝置30例如包括鏡頭、影像感測器及致動器等元件。鏡頭例如是由一或多個凹凸透鏡組合而成，藉由改變透鏡的位置而改變焦距，而聚焦在所拍攝的物體上。影像感測器中例如配置有電荷耦合元件（Charge Coupled Device，CCD）、互補性氧化金屬半導體（Complementary Metal-Oxide Semiconductor，CMOS）元件或其他種類的感光元件，其可感測進入鏡頭的光線強度以產生影像。致動器例如是步進馬達，其可根據由電子裝置20發出的控制訊號，推動影像擷取裝置30的鏡頭在細胞檢測晶片上方移動以拍攝細胞檢測晶片的影像。
儲存裝置24可以是任何型態的固定式或可移動式隨機存取記憶體（random access memory，RAM）、唯讀記憶體（read-only memory，ROM）、快閃記憶體（flash memory）或類似元件或上述元件的組合。在本實施例中，儲存裝置24用以儲存移動路徑規劃模組242、控制模組244及影像拼接模組246，這些模組例如是儲存在儲存裝置24中的程式。
處理器26例如是中央處理單元（Central Processing Unit，CPU），或是其他可程式化之一般用途或特殊用途的微處理器（Microprocessor）、數位訊號處理器（Digital Signal Processor，DSP）、可程式化控制器、特殊應用積體電路（Application Specific Integrated Circuits，ASIC）、可程式化邏輯裝置（Programmable Logic Device，PLD）或其他類似裝置或這些裝置的組合。處理器26耦接連接裝置22及儲存裝置24，其會從儲存裝置24載入移動路徑規劃模組242、控制模組244及影像拼接模組246的程式，據以執行本案的細胞檢測晶片的影像定位及拼接方法。以下即舉實施例說明此方法的詳細步驟。
圖3是依照本案一實施例所繪示之細胞檢測晶片的影像定位及拼接方法的流程圖。請同時參照圖2及圖3，本實施例的方法適用於圖2的影像檢測系統2，以下即搭配影像檢測系統2中的各項元件說明本案之影像定位及拼接方法的詳細步驟。
首先，由電子裝置20處理器26執行移動路徑規劃模組242，以依據影像擷取裝置30的攝像區域的大小以及所欲檢測的細胞檢測晶片的檢測區域的大小，規劃影像擷取裝置30拍攝細胞檢測晶片的影像的移動路徑（步驟S302），其中所述的檢測區域中包括配置用以定位影像的多個記號。
詳言之，在影像檢測系統2進行影像擷取裝置30的控制時，為了減少整個晶片掃描時的影像張數，本發明一實施例使用4倍的物鏡鏡頭進行影像掃描。4倍物鏡所達到的影像解析度約為0.62像素/微米(pixel/μm)，以白血球細胞的平均大小10μm進行計算，一個細胞可被分配到的解析度約為6*6像素，此解析度已足以用於分辨細胞螢光，並進行基本的循環腫瘤細胞的判定。
需說明的是，在上述實施例中，影像檢測系統2係利用電子裝置20控制影像擷取裝置30移動，並以錄影的方式進行影像的記錄。而在另一實施例中，影像檢測系統2可製作成可攜帶式的小型電控平台，其可適用於任何顯微鏡系統上。藉由將其放置於光學顯微鏡本身的平台的上，並移動顯微鏡平台進行最基本的位置校準，將晶片中心移到物鏡中間即可。
另一方面，由於本實施例在細胞檢測晶片中使用高密度的細胞檢測方式，不同區域影像的差異性較不明顯。為了增加差異性，以便於後續拼接影像，本實施例例如是在細胞檢測晶片底部增加數字、字母、符號、圖案等記號，必要時再利用光學暗場效果強化記號邊緣。其中，光學暗場的原理為利用不透光結構遮擋入射光，使得光線無法直接進入物鏡及目鏡。在沒有物體的情況下，視野全黑，而當有物體時，光線會在物體邊緣產生漫射，使其邊緣在暗場中變得明亮可見。藉此，可在不干擾螢光訊號的情況下，對不同區域的影像進行簡易的辨識及定位。
圖4是依據本發明一實施例所繪示之細胞檢測晶片的檢測區域的示意圖。請參照圖4，本實施例繪示圖1中細胞檢測晶片10的檢測區域40中的詳細結構。其中，檢測區域40中包括採用之字形依序排列的數字圖形42，這些數字圖形42例如是採用光阻製作，藉由採用形狀較為複雜的數字圖形42作為檢測區域40中各個區域的記號，可供電子裝置20做為後續拼接影像的參考。此外，透過此方式也能夠藉由數字的大小得知所拍攝影像在細胞檢測晶片上的對應位置。
需說明的是，在上述光阻的製作方面，本發明一實施例係採用SU-8 3000系統的光阻來製作玻片上的微結構，再以AZ 9620的光阻來製作玻片上的數字圖形，其製作流程搭配圖5A~5E說明如下：
在圖5A中，使用丙酮、異丙醇、DI Water依序清洗玻片52的表面，並放置於加熱板上進行去水烘烤（120℃，5分鐘）。
在圖5B中，將玻片52移至破片用旋轉塗機塗佈光阻54。其中，本實施例使用的光阻為SU-8 3010。塗佈完成後進行軟烤的步驟，藉此去除光阻54中大部分的溶劑，使結構較為穩固。待玻片52的溫度降至室溫後，使用單側（single side）進行曝光，曝光後並進行曝後烤，以加強曝光時產生反應的結構，完成後同樣進行自然降溫。
在圖5C中，使用SU-8的顯影液對玻片52上的光阻54進行顯影以產生結構。為了確認結構是否完成，顯影30秒後可以異丙醇沖洗，吹乾後確認顯影是否完成。顯影完畢後再以DI Water清洗玻片52上的異丙醇，即可完成流道的微結構54a的製作。
需說明的是，由於SU-8對於玻璃的附著性有極限，較小的記號無法黏附於玻璃表面上，因此在製作記號的部分係使用AZ 9260光阻進行製作。在塗佈AZ 9260光阻之前，會先使用異丙醇及DI Water依序清洗玻片52，進行去水烘烤後，使用HMDS蒸鍍5分鐘，以增加AZ 9260光阻在玻片52上的附著性。
在圖5D中，以2000的轉速（rpm）、30秒的參數在已製作微結構54a的玻片52上塗佈AZ 9260光阻56，厚度為10微米，接著將玻片52放置在100℃的加熱板軟烤約2分鐘，軟烤後再進行曝光的動作，曝光的劑量為200毫焦耳/平方公分（mJ/cm
2）。
在圖5E中，使用AZ 400K的顯影液混合DI Water（比例為1：3），顯影時間約90秒，對已塗佈AZ 9260光阻56的玻片52進行顯影，顯影後以DI Water沖洗並放置於加熱板上進行硬烤（120℃，5分鐘）即完成記號的微結構56a的製作。
回到圖3的流程，處理器26接著執行控制模組244以控制影像擷取裝置30依照移動路徑規劃模組242所規劃的移動路徑，於細胞檢測晶片上方移動以拍攝細胞檢測晶片的多張影像（步驟S304）。詳言之，本實施例的影像檢測系統2更提供電子裝置20設計移動速度、移動路線等功能。路線的設計可以使用影像擷取裝置30的攝像區域的面積來作為參考依據。舉例來說，利用已知尺寸的圖形（例如細胞計數盤的網格，一小格為50微米）進行測量，即可獲得影像擷取裝置30在一定倍率下的攝像區域。若影像擷取裝置30的攝像區域約為長2毫米、寬1毫米左右，影像擷取裝置30在Y軸的移動最少需移動7次（基於晶片的孔洞為7毫米）。
最後，處理器26執行影像拼接模組246，以依據影像擷取裝置30所擷取影像中出現的記號的位置，對這些影像進行定位並拼接為完整的晶片影像（步驟S306）。詳言之，在一實施例中，移動路徑規劃模組242例如會依據影像擷取裝置30的攝像區域的大小及細胞檢測晶片的檢測區域的大小，決定細胞檢測晶片中的記號的數量及位置，使得影像擷取裝置30所拍攝的各張影像中包括至少一個記號。藉此，影像拼接模組246即可依據每張影像中的記號，得知其在晶片影像中的對應位置，此時再利用記號的圖形對相鄰影像進行拼接，而獲得完整的晶片影像。在另一實施例中，影像拼接模組246則可直接依據各張影像在移動路徑中的拍攝順序或拍攝位置，找出相鄰影像，並依據相鄰影像中出現的記號的位置對相鄰影像進行拼接，以獲得完整的晶片影像。
舉例來說，圖6A是依據本發明一實施例所繪示之移動影像擷取裝置的示意圖。圖6B及圖6C是依據本發明一實施例所繪示之拼接影像的示意圖。請參照圖6A，本實施例的影像擷取裝置的移動路線例如是簡易的弓字形，透過對攝像區域60進行錄影及定時擷圖的方式，即可取得檢測區域40中各個區域的影像。影像擷取裝置的移動速度的最大值例如是0.35毫米/秒(mm/s)，為了避免錄影時會產生殘影，影像擷取裝置的移動速度可設為0.25毫米/秒。圖6B繪示影像擷取裝置在移動過程中所擷取的影像（例如影像62、64、66），藉由對這些影像進行拼接，即可取得如圖6C所示的完整晶片影像68。
圖7A及圖7B是依據本發明一實施例所繪示之依據影像中記號位置拼接影像的示意圖。請參照圖7A，在本實施例中，由於細胞檢測晶片的檢測區域的各個位置都有對應的數字圖形，且影像擷取裝置在拍攝過程中所拍攝的影像之間會有重疊，因此利用此重疊部分中出現的數字圖形的特徵，即可透過影像處理軟體將各個區或的影像拼接為完整的晶片影像。例如透過影像72及影像74中出現的數字圖形8及數字圖形5的特徵，即可拼接影像72與影像74。藉由上述方式逐一拼接相鄰影像，最終即可拼接為如圖7B所示的完整的晶片影像76。
綜上所述，本案的細胞檢測晶片的影像定位與拼接方法及影像檢測系統係在細胞檢測晶片的檢測區域中配置可用以定位的記號，並利用相機以錄影及定時擷圖的方式，拍攝檢測區域中各個區域的影像。之後，藉由影像拼接演算法，找出各張影像中的記號以及具有相同記號的影像，再根據記號在影像中的位置對各張影像進行對位及拼接，使得拼接後影像中的記號重疊。藉由上述記號的輔助，電子裝置得以快速辨認出重疊的部分，並將這些晶片影像拼接成完整的晶片影像。
雖然本案已以實施例揭露如上，然其並非用以限定本案，任何所屬技術領域中具有通常知識者，在不脫離本案的精神和範圍內，當可作些許的更動與潤飾，故本案的保護範圍當視後附的申請專利範圍所界定者為準。
1‧‧‧細胞檢測平台
10‧‧‧晶片
12、14‧‧‧玻片
16‧‧‧光阻
18‧‧‧細胞懸浮液
18a、18b‧‧‧細胞
2‧‧‧影像檢測系統
20‧‧‧電子裝置
22‧‧‧連接裝置
24‧‧‧儲存裝置
242‧‧‧移動路徑規劃模組
244‧‧‧控制模組
246‧‧‧影像拼接模組
26‧‧‧處理器
30‧‧‧影像擷取裝置
40‧‧‧檢測區域
42‧‧‧數字圖形
52‧‧‧玻片
54、56‧‧‧光阻
54a‧‧‧流道微結構
56a‧‧‧記號微結構
60‧‧‧攝像區域
62、64、66、72、74‧‧‧影像
76‧‧‧完整晶片影像
S302~S306‧‧‧本案一實施例之細胞檢測晶片的影像定位及拼接方法的步驟
圖1A及圖1B分別是依照本發明一實施例所繪示的細胞檢測平台與細胞檢測晶片的示意圖。 圖2是依照本發明一實施例所繪示的細胞檢測晶片的影像檢測系統的方塊圖。 圖3是依照本案一實施例所繪示之細胞檢測晶片的影像定位及拼接方法的流程圖。 圖4是依據本發明一實施例所繪示之細胞檢測晶片的檢測區域的示意圖。 圖5A~5E是依據本發明一實施例所繪示之製作流道及記號微結構的示意圖。 圖6A是依據本發明一實施例所繪示之移動影像擷取裝置的示意圖。 圖6B及圖6C是依據本發明一實施例所繪示之拼接影像的示意圖。 圖7A及圖7B是依據本發明一實施例所繪示之依據影像中記號位置拼接影像的示意圖。
S302~S306‧‧‧步驟
Claims (10)
- 一種細胞檢測晶片的影像定位及拼接方法，適於由具有處理器的電子裝置控制影像擷取裝置拍攝細胞檢測晶片的影像並對所拍攝的所述影像進行定位及拼接，該方法包括下列步驟：依據該影像擷取裝置的攝像區域的大小及該細胞檢測晶片的檢測區域的大小，規劃該影像擷取裝置拍攝該細胞檢測晶片的所述影像的移動路徑，其中該檢測區域中包括配置用以定位所述影像的多個記號；控制該影像擷取裝置依照所規劃的該移動路徑於該細胞檢測晶片上方移動以拍攝該細胞檢測晶片的多張影像；以及依據所述影像中出現的所述記號的位置，定位所述影像並拼接所述影像為完整的晶片影像，其中所述記號是在該細胞檢測晶片上使用黃光微影製程的光阻製作而成。
- 如申請專利範圍第1項所述的方法，其中依據所述影像中出現的所述記號的位置，定位所述影像並拼接所述影像為完整的該晶片影像的步驟更包括：依據各所述影像在該移動路徑中的拍攝順序或拍攝位置，找出相鄰影像；以及依據所述相鄰影像中出現的所述記號的位置拼接所述相鄰影像以獲得完整的該晶片影像。
- 如申請專利範圍第1項所述的方法，其中該細胞檢測晶片中的所述記號的數量及位置包括依據該影像擷取裝置的該攝像區域的大小及該細胞檢測晶片的該檢測區域的大小來決定，使得該影像擷取裝置所拍攝的各所述影像中包括至少一所述記號。
- 如申請專利範圍第1項所述的方法，其中所述光阻包括SU-8或AZ9260。
- 如申請專利範圍第4項所述的方法，其中於該細胞檢測晶片上使用光阻製作所述記號的步驟包括：於玻片表面塗佈第一光阻並進行軟烤、曝光及顯影，以製作流道的微結構；以及於該玻片表面上各所述記號的位置塗佈第二光阻並進行軟烤、曝光及顯影，以製作所述記號的微結構。
- 如申請專利範圍第1項所述的方法，其中所述記號包括數字、字母、符號、圖案其中之一或其組合。
- 一種細胞檢測晶片的影像檢測系統，包括：影像擷取裝置，配置於細胞檢測晶片上方，移動拍攝該細胞檢測晶片的多張影像；以及電子裝置，包括：連接裝置，連接該影像擷取裝置；儲存裝置，儲存多個模組；以及處理器，耦接該連接裝置及該儲存裝置，執行該儲存裝置中儲存的所述模組，所述模組包括： 移動路徑規劃模組，依據該影像擷取裝置的攝像區域的大小及該細胞檢測晶片的檢測區域的大小，規劃該影像擷取裝置拍攝該細胞檢測晶片的所述影像的移動路徑，其中該檢測區域中包括配置用以定位所述影像的多個記號；控制模組，控制該影像擷取裝置依照該移動路徑規劃模組所規劃的該移動路徑於該細胞檢測晶片上方移動以拍攝所述影像；以及影像拼接模組，依據所述影像中出現的所述記號的位置，定位所述影像並拼接所述影像為完整的晶片影像，其中所述記號是在該細胞檢測晶片上使用黃光微影製程的光阻製作而成。
- 如申請專利範圍第7項所述的系統，其中該影像拼接模組包括依據各所述影像在該移動路徑中的拍攝順序或拍攝位置，找出相鄰影像，並依據所述相鄰影像中出現的所述記號的位置拼接所述相鄰影像以獲得完整的該晶片影像。
- 如申請專利範圍第7項所述的系統，其中移動路徑規劃模組更依據該影像擷取裝置的該攝像區域的大小及該細胞檢測晶片的該檢測區域的大小，決定該細胞檢測晶片中的所述記號的數量及位置，使得該影像擷取裝置所拍攝的各所述影像中包括至少一所述記號。
- 如申請專利範圍第7項所述的系統，其中所述記號包括數字、字母、符號、圖案其中之一或其組合。
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