TWI580445B - 使用指示劑定量uv消毒劑量之方法 - Google Patents

使用指示劑定量uv消毒劑量之方法 Download PDF

Info

Publication number
TWI580445B
TWI580445B TW102123113A TW102123113A TWI580445B TW I580445 B TWI580445 B TW I580445B TW 102123113 A TW102123113 A TW 102123113A TW 102123113 A TW102123113 A TW 102123113A TW I580445 B TWI580445 B TW I580445B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
dose
absorbance
indicators
dye
sterilization
Prior art date
Application number
TW102123113A
Other languages
English (en)
Other versions
TW201406412A (zh
Inventor
藍道 普伏
艾德華 柯尼克
卡爾森 普特
泰瑞 歐布萊恩
Original Assignee
壯生和壯生視覺關懷公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 壯生和壯生視覺關懷公司 filed Critical 壯生和壯生視覺關懷公司
Publication of TW201406412A publication Critical patent/TW201406412A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI580445B publication Critical patent/TWI580445B/zh

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/17Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/25Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
    • G01N21/31Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
    • G01N21/33Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using ultraviolet light
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L12/00Methods or apparatus for disinfecting or sterilising contact lenses; Accessories therefor
    • A61L12/02Methods or apparatus for disinfecting or sterilising contact lenses; Accessories therefor using physical phenomena, e.g. electricity, ultrasonics or ultrafiltration
    • A61L12/06Radiation, e.g. ultraviolet or microwaves
    • A61L12/063Ultraviolet radiation
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/02Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using physical phenomena
    • A61L2/08Radiation
    • A61L2/10Ultraviolet radiation
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/26Accessories or devices or components used for biocidal treatment
    • A61L2/28Devices for testing the effectiveness or completeness of sterilisation, e.g. indicators which change colour
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01JMEASUREMENT OF INTENSITY, VELOCITY, SPECTRAL CONTENT, POLARISATION, PHASE OR PULSE CHARACTERISTICS OF INFRARED, VISIBLE OR ULTRAVIOLET LIGHT; COLORIMETRY; RADIATION PYROMETRY
    • G01J1/00Photometry, e.g. photographic exposure meter
    • G01J1/48Photometry, e.g. photographic exposure meter using chemical effects
    • G01J1/50Photometry, e.g. photographic exposure meter using chemical effects using change in colour of an indicator, e.g. actinometer
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N31/00Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods
    • G01N31/22Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators
    • G01N31/226Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators for investigating the degree of sterilisation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Apparatus For Disinfection Or Sterilisation (AREA)
  • Eyeglasses (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Photometry And Measurement Of Optical Pulse Characteristics (AREA)

Description

使用指示劑定量UV消毒劑量之方法
本發明係關於滅菌的領域,而且更具體而言係關於使用一或多種程式化UV消毒劑量消毒眼用鏡片。
目前,眼用鏡片的消毒包括了各種的液體化學品,在某些情況下,該等液體化學品可以與顆粒堆積和微生物生物體反應而實現滅菌。然而,在許多情況下,使用這些化學溶液可能無法實現滅菌,而且還會額外殘留在該眼用鏡片上而與使用者的眼睛相互作用。該相互作用可能會產生一些不良的影響,例如造成不適或燃燒感,影響淚膜的化學平衡等。
因此,需要開發出可以克服副作用和限制的新改良滅菌方法和設備,以滿足眼用鏡片領域中長久以來的滅菌需求。
本發明係關於獲得紫外(UV)照射劑量之定量測量的方法。更具體而言,其中該劑量可以在實施UV滅菌中所使用的容器或器皿內測量。
在本發明的一些態樣中描述基於各種發色團/螢光團降解的測量方法之發展,該等發色團/螢光團可用於闡明液體內的UV劑量之定量方法或作為UV滅菌的定性視覺顏色變化化學指示劑。
附圖(被併入本說明書並構成本說明書的一部分)圖示本發明之實施例,並與說明書一起用於解釋本發明之目的、優點及原理。
圖1為進行的獨立實驗之例示性曲線,其繪示A.)以已知劑量的254nm紫外光照射後各種濃度的螢光素之螢光損失(ex./em.490/520nm)。B.)當將原始螢光轉換成起始螢光值之百分比時,全部的螢光素降解曲線皆疊置於同一曲線。
圖2為發色團和螢光團之例示性化學結構。
圖3為呈現獨立實驗的例示性曲線,其繪示A.)經以已知劑量的254nm紫外光照射後,來自10mg/mL發色團和3.5mg/mL螢光素的吸光度或螢光強度損失,為起始值之百分比。括號中顯示每個染料之吸收或激發和發射波長。每個曲線代表三個獨立的實驗。B.)每個染料之UV劑量定量範圍。
圖4為具有各種不均勻包裹的塑料來部分阻隔紫外光之例示性容器組。A.)每個容器組的材料之UV透射%。B、C、D.)對於大腸桿菌(B.)、金黃色葡萄球菌(C.)以及白色念珠菌(D.)之UV透射之抑制和對應的滅菌損失。以紫外光燈泡的功率輸出來測量,每一組的總輻射照度(n=6),細菌(B,C.)為100mW*s/cm2,而白色念珠菌(D.)為250mW*s/cm2。容器內的UV劑量係藉由藻紅B(白條)的降解來計算,並且測定照射之後剩餘存活生物體的數量(黑條)。所有的誤差條表示標準誤差。
圖5(A)為曝露於254nm紫外光之後藻紅B和靛紅之例示性視覺變化以及各種UV生物指示劑和人類病原體之12筆全滅(overkill)滅菌劑量紀錄(括號中的數字)。
圖5(B)為圖5(A)之示意性表示。
圖6A-6K為繪示測試的UV輻射之例示性劑量的影響及其個別影響的圖。
圖6(A)圖示螢光素螢光標準曲線(ex/em 490nm/520nm)。
圖6(B)圖示誘惑紅(Allura Red)紫外光/可見光吸收光譜。
圖6(C)圖示誘惑紅吸光度標準曲線。
圖6(D)圖示靛紅(Indigo Carmine)紫外光/可見光吸收光譜。
圖6(E)圖示靛紅吸光度標準曲線。
圖6(F)圖示藻紅B(Erythrosin B)紫外光/可見光吸收光譜。
圖6(G)圖示藻紅B吸光度標準曲線。
圖6(H)圖示酒石黃(Tartrazine)紫外光/可見光吸收光譜。
圖6(I)圖示酒石黃吸光度標準曲線。
圖6(J)圖示快速綠(Fast Green)紫外光/可見光吸收光譜。
圖6(K)圖示快速綠吸光度標準曲線。
本發明提供定量UV消毒之不同劑量的方法。在以下部分中提供發明實施例之詳細說明。較佳實施例和替代實施例兩者之描述雖然詳細,但僅為例示性的實施例,本技術領域中具有通常知識者應瞭解的是,變化、修改以及替換可以是顯而易見的。對此,應瞭解該等例示性實施例不會限制如本發明各方面如申請專利範圍所定義之各方面的廣泛性。本討論中將方法之步驟以邏輯上的順序列示;然而,除非具體指明,否則此序列當然不會限制可實施該等之順序。
定義
本文中使用的「眼用鏡片」而且有時稱為「鏡片」意指任何駐留在眼睛中或上的眼科設備。這些裝置可提供光學校正或可為美容品。例如:鏡片一詞可指隱形眼鏡、人工水晶體、覆蓋鏡片、眼嵌入物、光學嵌入物或其他類似裝置,透過上述裝置來矯正或修正視力,或者在不妨礙視力的情況下,透過上述裝置使眼睛生理在美容方面有所提升(例如,虹膜顏色)。在一些實施例中,本發明之較佳鏡片為軟性隱形眼鏡並 且係由聚矽氧彈性體或水凝膠所製成,其包括但不限於聚矽氧水凝膠及氟水凝膠。
摘要
精確地測量紫外(UV)照射(尤其是在容器或器皿內)是在面對UV滅菌的廣泛實施時的挑戰之一。生物指示劑可以提供測定施加的UV劑量是否具有實現滅菌的所需效用的方法。為了克服使用生物指示劑的一些挑戰,於是發展出基於食物、藥物及化妝品(FD&C)的降解之化學指示劑。在這個工作中,闡明UV劑量和染料降解之間的關係並用於產生標準曲線。有了這個已知的關係,可以使用各種染料的降解作為定量測量系統。使用染料的降解來測量UV劑量在無法直接測量容器內的UV照射濃度時尤其有用。另外,由於FD&C染料的高度著色本質,可以使用染料照射後呈現的視覺改變作為UV劑量之定性視覺指示劑。
1.介紹
殺菌的紫外(UV)燈泡已經受到醫療產業的認可,並作為醫療器械的消毒和滅菌工具超過60年(1)。自那時以來,紫外光已用於一些不同的固體、液體和氣態材料作為消毒劑和滅菌劑(2,3,4)。特別是,在過去的二十年中,這個技術已廣泛使用於飲用水的處理(2,9,10)。
雖然殺菌燈泡有著廣泛的用途,使用紫外光來對液體消毒或滅菌的主要挑戰之一是準確地測定液體內的UV劑量。首次提出殺菌燈泡作為滅菌方法時,測量可重複和可重製的UV劑量是一個問題(5)。雖然賦予液體容器的每單位面積能量可輕易地從UV源的功率和曝光時間計算,但計算溶液內的能量不是那麼簡單的。不幸的是,即使在今天,UV劑量測量標準化仍然難以捉摸,並且有許多新的測量方法被發表(6,7,8)。
液體內紫外光的平均劑量(Davg)可以從曝光時間(t)乘以平均強度(Iavg)來計算:Davg=Iavg * t。平均強度係使用 以下方程式計算:Iavg=Io * (1-e-A*L)/(A*L),其中A為該液體每公分之吸光度,L為被照射溶液之路徑長度(12)。然而,這種計算只適用於均勻的溶液。溶液本身內的材料或含有該溶液的包材之UV吸光度在被照射時會產生非常不平均的劑量。形成的UV陰影會提供微型生物體無法被有效殺死的地方。近來,已創建出電腦模型/模擬,以試圖更好地預測溶液中的UV劑量和功效,但結果比期望的更少(11,21,22)。由於獲得準確劑量和預測液體內的劑量之抗微生物功效有所困難,故明確需要有額外的定量測量方法。
除了定量測量之外,通常在滅菌製程中還會使用定性視覺指示劑。雖然UV消毒和滅菌的生物指示劑已被開發出(14,15),並且被普遍視為最具權威性的滅菌試驗,彼等仍遭受化學指示劑的一些缺點,即在獲得結果的延遲、成本和潛在的污染(13,20)。這些缺點在某些情況下會限制生物指示劑的效用。雖然其他形式的滅菌,例如蒸汽和化學品具有有效的化學指示劑,但並沒有市購可得的UV化學指示劑。曾有報導將標記螢光的微球(17,19)和二氧化矽(18)用於測定UV反應器內的劑量,並提出將游離氯的降解作為定量溶液中的UV劑量的方法(16)。然而,所有這些化學降解技術皆有能力定量溶液中的UV劑量,但對於其他化學指示劑來說缺乏普遍可以用肉眼觀察之定性變化。
本文中,我們描述了基於各種發色團/螢光團降解的測量方法之發展,該等發色團/螢光團可用於闡明液體內的UV劑量之定量方法或作為UV滅菌的定性視覺顏色變化化學指示劑。
2.材料和方法 2.1.材料
誘惑紅(Allura Red)AC和日落黃(Sunset Yellow)FCF均購自東京化學工業(日本東京)。罌紅 (Erioglaucine)係購自Spectrum(Gardena,CA)。藻紅B、酒石黃和快速綠FCF均購自Alfa Aesar(Ward Hill,MA)。靛藍胭脂紅係購自Amresco(Solon,OH)。螢光素鈉鹽係購自Sigma(St.Louis,MO)。NIST認證的UV殺菌檢測器PMA2122和數據記錄器PMA2100均購自Solar(Glenside,PA)。UV燈泡係購自LCD Lighting(Orange,CT)。TableCurve2D係購自Systat Software(San Jose,CA)。胰蛋白酶大豆湯汁、胰蛋白酶大豆瓊脂、SAB-DEX湯汁和SA-DEX瓊脂均購自Northeast Laboratories(Waterville,ME)。康寧清晰的96孔盤#3585、石英半微量光析管、佩垂皿及所有其他材料均購自VWR(Atlanta,GA)。
2.2.光譜和標準曲線產生
將1mL在去離子水中的10μg/mL染料溶液加入石英光析管中。從200到800nm每2nm讀取Molecular Devices M5(Sunnyvale,CA)中的紫外光/可見光吸光度光譜。測定每種染料在可見光區的最大峰值吸光度。
將一式三份100μL在去離子水中各種濃度的染料溶液加入96孔盤的各孔中。在Molecular Devices M5上在適當的波長讀取96孔盤的吸光度。
2.3.螢光素螢光降解
將1毫升在去離子水中各種濃度的螢光素加入石英螢光光析管中。使用激發為490nm、發射為520nm及515nm的截止濾波器的Molecular Devices M5測量每個光析管之螢光強度。以客制殺菌UV燈泡照射光析管各種的時間量。在每個照射循環之前和之後記錄燈泡功率(測量單位為μW/cm2)。再次完全如上所述測量螢光強度。將燈泡功率乘以時間來計算劑量。以TableCurve2D使用具有以下形式的8119 DecayN方程式來適配衰變曲線:y=(b1-d+cdx-cx)1/(1-d)+a。
2.4.發色團降解
各種濃度的每個染料溶於去離子水,並取1mL加入石英光析管中。以Molecular Devices M5測量每個光析 管之吸光度得到每個染料之最大峰值波長。以各種不同的時間量用客制殺菌UV燈泡照射光析管。在每個照射循環之前和之後記錄燈泡功率,測量單位為μW/cm2。再次完全如上所述測量吸光度。以時間乘以燈泡功率來計算劑量。完全如上所述適配曲線。
2.5.生物體製備
在35℃讓草坪生物體在佩垂皿上生長過夜,佩垂皿含有胰蛋白酶大豆瓊脂供給細菌或SAB-DEX瓊脂供給白色念珠菌從佩垂皿刮下細胞並轉移至5mL的Dulbecco磷酸鹽緩衝鹽水(DPBS),Dulbecco磷酸鹽緩衝鹽水含有0.05%的Tween 80(體積/體積)(TDPBS)。讀取生物體之吸光度並與標準曲線比較。然後視每一個具體實驗的需要將細胞稀釋至適合的濃度。
2.6.滅菌和染料劑量測定實驗
在TDPBS中調整每個生物體的接種物至約106CFU/mL。將1.5mL的接種物加入半微量石英光析管。以各種類型和厚度的塑料不均勻地包裹光析管,以形成具有不同UV吸光量的容器。測量UV燈泡功率並調整時間使得每個光析管容器被照射總共250mW*s/cm2的劑量。如下所述計數存活的生物體數量。將10μg/mL的藻紅B溶液加入確切相同的光析管容器中,並完全如上所述進行照射。照射後,在525nm測量染料之吸光度,並使用以上產生的適配曲線計算對應的劑量。
2.7.生物體計數
將100μL的生物體加至96-孔盤列A6個孔的每個孔中。將90μL的SAB-DEX或TSB加至該盤的列B-H中。藉由從列A轉移10μL到列B之後混合產生1:10的連續稀釋。往盤下方重複此模式。然後將100μL的SAB-DEX或TSB加至所有的孔中。在35℃培養該盤48小時。使用Molecular Devices SpectraMax 384Plus讀取每個孔的吸光度。將該等孔視為正成長 或負成長,並使用最可行的數值方法計算生物體的原始濃度(23,24)。
28.UV照射後之視覺染料變化
將1mL的10或100μg/mL藻紅B溶液或100μg/mL靛紅染料在去離子水中的溶液加至石英光析管。測量UV燈泡功率並調整時間,使得每個光析管被照射指定的劑量。在照射前後拍攝光析管。
3.結果與討論 3.1.UV照射後之染料降解
由於普遍缺乏UV滅菌的化學指示劑,故尋求經UV照射後會出現容易看出之顏色變化及/或螢光變化的化學品品。這些化學染料需要是水溶性的,因為大多數的UV滅菌不是在乾燥表面上進行,就是在水性介質中進行(31);表現出高消光係數,使得染料為肉眼輕易可見的;並且較佳是無毒的。高度著色的FD&C染料顯現出符合所有的要求,並具有非常低的毒性水平和高水溶性。
為了特徵化這些染料如何在UV照射後降解,首先選擇代表性的螢光素(D&C黃色8號)。在石英光析管中以254nmUV殺菌燈泡照射各種濃度的螢光素。在整個實驗過程中測量螢光強度、吸光度及UV劑量。使用TableCurve2D適配曲線並且發現最佳適配於衰變類型的曲線。如圖1a中所圖示,每個濃度的螢光素表現出與此衰變曲線有良好的適配。
正如任何的衰變,當各曲線的螢光強度被轉換成其起始值的百分比時,所有的曲線皆疊置於保留曲線(圖1b)。該疊置的吸光度和螢光強度曲線類似。利用單一適配的直線方程式大大地簡化了實驗的執行和分析,因為染料的確切濃度並不需要是已知的,只要初步測量其吸光度或強度。然而,起始值和結束值必須要在檢測器的線性範圍內。
為了確認當曝露於254nm紫外光時表現出類似的簡單衰變曲線並具有不同敏感度而能夠定量不同劑量範圍的其他染料,選擇藻紅B(FD&C紅色3號)、誘惑紅(FD&C紅色40號)、亮藍FCF(FD&C藍色1號)、靛紅(FD&C藍色2號)、酒石黃(FD&C黃色5號)、日落黃FCF(FD&C黃色6號)及快速綠FCF(FD&C綠色3號)。首先測定每個發色團之吸光度光譜、峰值吸收波長及偵測線性區(參見支持資訊)。
對於UV降解的研究,選擇濃度10μg/mL,以確保每個染料確實在偵測的線性範圍內。與螢光素的研究類似,讓每個染料接受已知量的紫外光,並在整個實驗過程中測量吸光度。除了吸收之外,藻紅B也具有可用的顯著螢光發射。將吸光度值轉換成原始吸光度值的百分比,並使用與螢光素相同的衰變曲線適配得到的曲線。
發現日落黃和罌紅並沒有表現出簡單的衰變曲線,因此不使用於任何進一步的實驗。剩餘的染料確實表現出簡單的衰變曲線,在圖3中可以看出。如圖3a所圖示,確實表現出簡單衰變曲線的各種染料之衰變率橫跨廣範圍的UV劑量。測出每種染料的定量範圍在產生介於100%和約20%間之百分比值的原始吸光度值的劑量之間(圖3b)。有了產生的標準曲線和確定的定量範圍,然後可以將這些染料用於定量照射對象內實際實現的UV劑量。
3.2.測定容器的內部UV劑量和滅菌性
當施加於低UV吸光度介質(例如空氣)時UV滅菌是最有效的。然而,大多數滅菌的應用,尤其是液體滅菌的過程需要紫外光通過除了介質本身之外的某種容器。由於厚度或材料類型的變化造成吸光度不一致的封裝會產生UV劑量遠較低的區域。同樣地,異質的溶液也會造成本身內有不同水平的UV劑量。
雖然照射容器外部的UV劑量經由燈泡功率來測量是相當直接的,但在容器內測量平均累積劑量的能力並不 是那麼容易完成。然而,有了可以放置在容器內的可溶染料,則可測定UV照射後該容器內獲得的近似平均劑量。
為了研究不均勻的材料吸光度對滅菌的影響,以各種塑膠片不均勻地包裹石英光析管。這種包裹含有摺縫、小褶皺和間隙而在紫外光的吸光度中造成差異。應用10種不同的包裹並安排成平均UV透射減少的組(圖4a)。
在包裹的光析管中,加入1.5mL約1×106CFU/mL的生物體溶液或10μg/mL的藻紅B染料溶液。將生物體和染料皆懸浮於含有0.05% Tween-80的Dulbeco改質磷酸鹽緩衝鹽水(TDPBS)。使用TDPBS來避免生物體形成大的團塊,並賦予該溶液本身明顯的UV吸光度。然後以燈泡功率測量的恆定外部劑量照射填充、包裹的光析管,並判定藉由減少的染料吸光度測量的存活生物體數量或內部劑量。
選擇革蘭氏陰性菌、大腸桿菌、革蘭氏陽性菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌酵母用於此滅菌實驗。得到或從發表的數據計算提供12筆全滅(overkill)滅菌紀錄的UV劑量。由於方法的差異和測量UV劑量的固有挑戰,文獻中的全滅(overkill)滅菌劑量存在大的變化,大腸桿菌的劑量範圍在2.5至98mW*s/cm2之間(25,26,27,28,31),金黃色葡萄球菌在2.7至174mW*s/cm2之間(25,26,27,29,30,31),以及白色念珠菌在26至537mW*s/cm2之間(25,26,31)。至於各種發表的值和我們自己未發表的數據,選擇100mW*s/cm2的劑量用於細菌,並選擇250mW*s/cm2的劑量用於白色念珠菌。
如圖4b-d中看到的,計算出的內部劑量小於所施加的劑量,並且當塑料包裹的透射下降時(較高的容器組號碼具有較低的UV透射,如圖4a中所圖示),內部劑量顯示類似的下降。即使是在未包裹的光析管(容器第1組),較低的內部劑量最有可能是由於TDPBS溶液本身的吸光度增加,每公分幾乎減少20%的透射。增加與燈泡的距離來考慮其他光析管組的包裹和光析管本身的輕微吸光度都造成內部劑量降低。
表現高透射和相應較高內部劑量的容器組顯示全部三個生物體(容器組1-4)皆完全滅菌。然而,隨著塑料包裹的吸光度增加,內部劑量最終下降到一些生物體可以存活的水平(容器組5-7)。一旦達到這個過渡點,存活生物體的數量隨著內部劑量進一步下降而增加(容器組8-11)。由於塑料的不均勻包裹,存活的生物體並非均勻地分佈於各樣品的複製之間,導致有高的可變性。
3.3.染料降解作為視覺UV化學指示劑
除了被用作定量測量的工具之外,也可以更多定性的方式使用染料的降解來作為UV劑量的視覺化學指示劑。由於選擇高度著色的FD&C染料,可以使用染料降解時的顏色轉變作為視覺指示劑。為了顯示視覺的變化,以已知劑量的紫外光照射幾種濃度的各種染料,並在整個照射過程中拍攝每個染料的影像。選擇10和100μg/mL的藻紅B溶液和100μg/mL的靛紅溶液作為代表性候選物,因為彼等在測試的劑量範圍中顯示出良好的視覺顏色變化。
如圖5(A)和(B)中所圖示,10μg/mL的藻紅B溶液在較低的UV劑量下表現出最直觀的變化,在0和500mW*s/cm2之間形成明顯的顏色差異,並在1000mW*s/cm2之前完全喪失顏色。100μg/mL的靛紅溶液稍微較不敏感,在500mW*s/cm2顯示出輕微的顏色變化,在1000mW*s/cm2之前形成明顯的顏色變化,並且在2500mW*s/cm2之前完全喪失顏色。最後,更濃的100微克/毫升藻紅B溶液允許具有較高紫外光劑量的視覺變化,直到5000mW*s/cm2的劑量才觀察到顏色完全喪失。假使需要較高的UV劑量,則可以使用UV較不敏感的染料作為視覺指示劑。
3.4.微量生物體12筆全滅(overkill)UV滅菌劑量紀錄
作為參考,獲得或從發表的數據(31)計算對於各種細菌、真菌、病毒及原生動物的12筆全滅(overkill)滅菌劑量值。選擇這些生物體是因為彼等作為UV滅菌之生物指示 劑的用途,或因為彼等是已知的人類病原體。一般而言,大多數的細菌、病毒和原生動物是以低於500mW*s/cm2的UV滅菌,且有幾個生物體存在增加的抗力。真菌,尤其是在其孢子的形式比其他的生物體組更耐UV滅菌,且大部分的生物體在500和2500mW*s/cm2之間被滅菌。由於絕大多數的生物體在0至5000mW*s/cm2範圍內被滅菌,故可以使用藻紅B及/或靛紅作為有效的視覺定性化學指示劑,以判斷該UV劑量是否足以滅菌。
4.結論
測試7種FD&C染料和D&C染料螢光素,以確定是否其吸光度及/或螢光降解在以254nm的紫外光照射後可以用來作為UV劑量的定量測量。8種染料中有6種染料在UV照射後顯示簡單的衰變曲線。產生這6種染料的標準UV降解曲線,並且可以使用所有這些染料來測定賦予溶液的平均UV劑量。由於染料的靈敏度不同,故可以定量不同範圍的UV劑量。
為了表現直接測量容器內的UV劑量的潛能,以相當於12筆全滅(overkill)滅菌劑量紀錄的恆定劑量UV能量照射不均勻地以各種UV吸光度塑料包裹的光析管。由於光析管容器的構造,能夠進入內部空間的UV能量之量是未知的,而且難以絕對地計算。對於這些容器,加入染料藻紅B或微生物大腸桿菌、金黃色葡萄球菌或白色念珠菌。使用染料來定量內部的UV劑量,或測定存活生物體的數量。內部劑量的損失顯示與存活生物體的數量增加有關,即使傳遞到容器外部的總UV能量並未改變。
最後,對UV照射後染料的視覺變化進行了研究。兩種最敏感的染料,藻紅B和靛紅在0至5000mW*s/cm2的劑量範圍中表現出良好的視覺顏色變化,取決於彼等之濃度。假使需要更大的劑量,可以使用其他的染料。然而,因為 最相關的微生物之12筆全滅(overkill)滅菌劑量紀錄係低於5000mW*s/cm2,所以這兩種染料應適用於絕大多數的微生物。
總而言之,在測量絕對UV劑量中的挑戰和目前用於UV滅菌的市售化學指示劑的缺乏存在著對於新定量和定性方法的需求。利用FD&C染料降解作為定量測量工具和定性的視覺指示劑的能力使得這些染料成為UV化學指示劑的良好選擇。
結論
已經描述了本發明的數個實施例。雖然本說明書包含了許多具體的實施細節,但不應被解讀為對任何發明或可能主張者之範圍的限制,而是作為本發明之特定實施例特有的特徵描述。
在本說明書個別實施例的上下文中描述的某些特徵也可以在單個實施例中被組合實施。相反地,在單個實施例的上下文中描述的各種特徵也可以在多個個別的實施例中或在任何適當的次組合中組合實施。此外,雖然以上可以將特徵描述為在某些組合中作用,甚至最初亦如此主張,但在某些情況下可以將來自主張的組合中的一或多個特徵從該組合去除,而且所主張的組合可以針對次組合或次組合的變化。
同樣地,儘管在圖示中以特定的順序描繪操作,但這不應被理解為要求在所顯示的特定順序或按順序執行這樣的操作,或是所有圖示的操作皆應被執行,以實現理想的結果。在某些情況下,多工和並行可能是有利的。此外,在上述的實施例中,各種系統組件的分離不應被理解為在所有實施例中都要求這樣的分離,而且應當理解的是,所描述的程式組件和系統一般可以被一起整合在單一的軟體產品或包裝成多個軟體產品。
因此,主題的特定實施例已被描述出。其他的實施例係在以下的申請專利範圍要求之內。在一些情況下,可 以不同的順序執行申請專利範圍中所述的動作,而且仍可實現理想的結果。此外,在附圖中描繪的處理並不一定需要特定的順序顯示或依序的順序,以實現理想的結果。在某些實施方式中,多工和並行的處理可以是有利的。儘管如此,將理解的是,在不偏離所主張發明的精神和範圍下,可以做出各種的修改。

Claims (3)

  1. 一種使用一或多種添加指示劑測定足以對眼用鏡片滅菌的UV消毒劑量之方法,包含:添加一或多個水溶性且無毒之指示劑至含眼用鏡片之水溶液;在控制時間中及強度下施加紫外輻射劑量至含眼用鏡片之水溶液;以及收集來自該一或多個水溶性且無毒之指示劑中發色團和螢光團之至少一者之降解的反饋以測定賦予水溶液及眼用鏡片組合之紫外輻射實際劑量,該反饋是定量本質中至少一者;其中發色團和螢光團係選自由藻紅(Erythrosin)B、靛紅(Indigo Carmine)、螢光素、快速綠(Fast Green)、誘惑紅(Allura Red)與酒石黃(Tartrazine)組成之群組。
  2. 如申請專利範圍第1項之方法,另外包含一或多個能夠對該一或多個指示劑之降解起反應的活性染料。
  3. 如申請專利範圍第2項之方法,其中該一或多個活性染料為FD&C染料。
TW102123113A 2012-06-29 2013-06-28 使用指示劑定量uv消毒劑量之方法 TWI580445B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261665960P 2012-06-29 2012-06-29
US13/924,693 US9244013B2 (en) 2012-06-29 2013-06-24 Method of quantifying UV disinfecting doses applied to an ophthalmic lens using indicators

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201406412A TW201406412A (zh) 2014-02-16
TWI580445B true TWI580445B (zh) 2017-05-01

Family

ID=48745739

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW102123113A TWI580445B (zh) 2012-06-29 2013-06-28 使用指示劑定量uv消毒劑量之方法

Country Status (13)

Country Link
US (1) US9244013B2 (zh)
EP (2) EP3263139B1 (zh)
JP (1) JP6180821B2 (zh)
KR (1) KR20140002565A (zh)
CN (1) CN103575710B (zh)
AU (1) AU2013206574B2 (zh)
BR (1) BR102013016806A2 (zh)
CA (1) CA2819987A1 (zh)
ES (1) ES2643848T3 (zh)
HK (1) HK1250218A1 (zh)
IL (1) IL227203A (zh)
RU (1) RU2578452C2 (zh)
TW (1) TWI580445B (zh)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104897281B (zh) * 2015-06-08 2017-01-04 哈尔滨工业大学 一种紫外辐射剂量的测定方法
JP6699225B2 (ja) * 2015-08-21 2020-05-27 東洋製罐株式会社 光曝露量の評価方法、及び遮光性能の評価方法
DE102016225596A1 (de) * 2016-12-20 2018-07-05 Ernst-Moritz-Arndt-Universität Greifswald Verfahren und Vorrichtung zur Reinigung eines Medizinprodukts
CN106755287B (zh) 2017-02-07 2020-05-08 盎亿泰地质微生物技术(北京)有限公司 一种微生物相对含量检测计数方法
IT201900009948A1 (it) * 2019-06-24 2020-12-24 Nterilizer S R L Metodo di sterilizzazione, certificazione e tracciabilita' di azoto liquido
US11603551B2 (en) 2020-12-02 2023-03-14 Steritec Products Mfg. Co., Inc. Biological indicators, and systems and methods for determining efficacy of sterilization
WO2022220064A1 (ja) * 2021-04-16 2022-10-20 富士フイルム株式会社 検査装置、検査方法、検査プログラム及び検査システム
CN113252632B (zh) * 2021-06-25 2021-10-19 成都瀚辰光翼生物工程有限公司 样本浓度处理方法、装置、样本处理设备及可读存储介质
CN114158607B (zh) * 2021-12-06 2024-01-16 北京市农林科学院 一种控制青椒冷害的绿色保鲜剂及其使用方法
DE102022004386A1 (de) * 2022-11-21 2024-05-23 Heyfair Gmbh Desinfektionsverfahren, Stoffgemische und Desinfektionssets

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20010048891A1 (en) * 2000-02-01 2001-12-06 Mcgeorge Gram J. Method and apparatus for verifying ultraviolent sterilization
US20090199878A1 (en) * 2006-08-16 2009-08-13 Jennifer Dawn Lane Temporal photo-bleaching of colored lens care solutions and use thereof
US7956334B2 (en) * 2006-03-13 2011-06-07 School Corporation, Azabu University Medicine Educational Institution Radiation dosimeter for fluid very small substances, and method of measuring radiation dose
US20110284772A1 (en) * 2010-05-19 2011-11-24 Pugh Randall B Light emitting diode disinfection base for ophthalmic lenses

Family Cites Families (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2738429A (en) 1952-08-02 1956-03-13 Samuel A Goldblith Indicator for high energy radiation sterilizing processes
US3852032A (en) * 1971-06-07 1974-12-03 Uroptics Int Inc Process for sterilizing hydrophilic gelatin lenses having ultraviolet stabilizers
US3787687A (en) * 1972-02-23 1974-01-22 T Trumble Ultraviolet radiation dosimeter
CA1010224A (en) * 1973-02-12 1977-05-17 Neville A. Baron Asepticizing of contact lenses
US4308459A (en) * 1980-05-22 1981-12-29 Williams Gwyn P Ultraviolet radiation detection device
JPH0754269B2 (ja) * 1985-11-11 1995-06-07 株式会社資生堂 紫外線線量測定用素子
AU612143B2 (en) * 1987-03-19 1991-07-04 Xytronyx, Inc. Systems for the visualization of exposure to ultraviolet radiation and for the utilization of ultraviolet radiation to effect color changes
US5028792A (en) * 1987-03-19 1991-07-02 Xytronyx, Inc. System for the visualization of exposure to ultraviolet radiation
JPS6425086A (en) * 1987-07-02 1989-01-27 Mead Corp Radiant irradiation dosimeter
US4918317A (en) * 1987-07-02 1990-04-17 The Mead Corporation Radiation dosimeter
US5075557A (en) * 1988-06-06 1991-12-24 Nippon Carbide Kogyo Kabushiki Kaisha Simplified apparatus and method for measuring quantity of ultraviolet radiation received
US5120499A (en) * 1990-01-11 1992-06-09 U. V. Black Box Corporation Method and system for asepticizing contact lenses and storing device
US5144144A (en) * 1991-07-19 1992-09-01 American Vision, Inc. Contact lens cleaning and disinfecting system
DE69219313T2 (de) * 1992-03-23 1997-11-13 Nippon Telegraph & Telephone UV-A und UV-B trennender Sensor
US5581090A (en) * 1995-10-25 1996-12-03 Solartech Enterprises, Llc Photochromic ultraviolet detector
US7038219B2 (en) * 1996-05-22 2006-05-02 Purepulse Technologies, Inc. Sterilization of packages and their contents using light
US6287518B1 (en) * 1997-06-25 2001-09-11 3M Innovative Properties Company Sterilization monitors
US6255659B1 (en) * 1998-07-10 2001-07-03 Sandia Corporation Method and apparatus for passive optical dosimeter comprising caged dye molecules
US6514405B1 (en) * 1999-08-12 2003-02-04 Eric L. Lifschitz Portable water purifier with ultraviolet light source
GB9821342D0 (en) * 1998-10-02 1998-11-25 Common Services Agency Device for treatment of biological fluids
US7879288B2 (en) * 1999-03-01 2011-02-01 Johnson & Johnson Vision Care, Inc. Method and apparatus of sterilization using monochromatic UV radiation source
CA2299691C (en) * 1999-03-01 2011-07-12 Johnson & Johnson Vision Care, Inc. Package for medical device
AU1954600A (en) * 1999-03-01 2000-09-07 Johnson & Johnson Vision Care, Inc. Method of sterilization
US6465799B1 (en) * 1999-03-01 2002-10-15 Johnson & Johnson Vision Care, Inc. UV radiation system having materials for selectively attenuating radiation
WO2001057124A2 (en) * 2000-02-01 2001-08-09 Ciba Specialty Chemicals Holding Inc. Method of content protection with durable uv absorbers
US20020146343A1 (en) * 2000-12-14 2002-10-10 Jenkins Geoffrey H. Method and apparatus for rapidly sterilizing small objects
US6596542B1 (en) * 2001-01-08 2003-07-22 Christopher R. Schulz Flow-through chemical actinometer for ultraviolet disinfection reactors
GB0117571D0 (en) * 2001-07-19 2001-09-12 Common Services Agency UV irradiation control
JP2003093481A (ja) * 2001-09-25 2003-04-02 Menicon Co Ltd コンタクトレンズの殺菌消毒装置
JP3640934B2 (ja) * 2002-04-19 2005-04-20 旭化成アイミー株式会社 成形用型の分離方法
AU2004216476B2 (en) * 2003-02-27 2009-01-08 Takeda Pharmaceutical Company Limited Method for the validatable inactivation of pathogens in a biological fluid by irradiation
US20050028848A1 (en) * 2003-08-04 2005-02-10 Jung-Hua Lai Contact lens cleansing unit
US7993580B2 (en) * 2004-08-24 2011-08-09 Baxter International Inc. Methods for the inactivation of microorganisms in biological fluids, flow through reactors and methods of controlling the light sum dose to effectively inactivate microorganisms in batch reactors
US20060289796A1 (en) 2005-06-22 2006-12-28 Cryovac, Inc. UV-C sensitive composition and dosimeter
JP4880425B2 (ja) * 2006-11-07 2012-02-22 日本電信電話株式会社 オゾン検知素子
DE102007018605A1 (de) * 2007-04-18 2008-10-30 Kronos International, Inc. Zusammensetzung und Verfahren zum Anzeigen einer bestimmten UV-Strahlendosis
US8512633B2 (en) * 2007-08-16 2013-08-20 American Sterilizer Company Indicator for monitoring a sterilization process
WO2009103611A1 (en) * 2008-02-21 2009-08-27 Basf Se Uv-dose indicator films
WO2009104192A2 (en) * 2008-02-22 2009-08-27 Skyrad Ltd Disposable measuring device for uv radiation
GB0910464D0 (en) * 2009-06-17 2009-07-29 Insigniapack Ltd Indicator, application thereof and related products
TWM367032U (en) * 2009-06-25 2009-10-21 zhi-xian Wu Dual shockwave cleaning machine
US8158961B2 (en) * 2009-07-31 2012-04-17 Sciconsult, Inc. Ophthalmic lens case equipped with an ultraviolet light source

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20010048891A1 (en) * 2000-02-01 2001-12-06 Mcgeorge Gram J. Method and apparatus for verifying ultraviolent sterilization
US7956334B2 (en) * 2006-03-13 2011-06-07 School Corporation, Azabu University Medicine Educational Institution Radiation dosimeter for fluid very small substances, and method of measuring radiation dose
US20090199878A1 (en) * 2006-08-16 2009-08-13 Jennifer Dawn Lane Temporal photo-bleaching of colored lens care solutions and use thereof
US20110284772A1 (en) * 2010-05-19 2011-11-24 Pugh Randall B Light emitting diode disinfection base for ophthalmic lenses

Also Published As

Publication number Publication date
JP2014014674A (ja) 2014-01-30
TW201406412A (zh) 2014-02-16
US9244013B2 (en) 2016-01-26
RU2578452C2 (ru) 2016-03-27
AU2013206574B2 (en) 2016-04-28
US20140004609A1 (en) 2014-01-02
KR20140002565A (ko) 2014-01-08
ES2643848T3 (es) 2017-11-24
EP3263139A1 (en) 2018-01-03
CA2819987A1 (en) 2013-12-29
IL227203A (en) 2017-05-29
BR102013016806A2 (pt) 2015-08-25
IL227203A0 (en) 2014-03-31
RU2013129856A (ru) 2015-01-10
JP6180821B2 (ja) 2017-08-16
EP2679248B1 (en) 2017-08-09
CN103575710A (zh) 2014-02-12
CN103575710B (zh) 2018-02-09
HK1250218A1 (zh) 2018-12-07
AU2013206574A1 (en) 2014-01-16
EP2679248A1 (en) 2014-01-01
EP3263139B1 (en) 2019-12-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI580445B (zh) 使用指示劑定量uv消毒劑量之方法
DK2646566T3 (en) Composition for detection of biofilm on viable tissues
Xhevdet et al. The disinfecting efficacy of root canals with laser photodynamic therapy
ES2404519T3 (es) Procedimiento y dispositivo para la detección de células de fitoplancton vivas en agua
Nikinmaa et al. Dual-light photodynamic therapy administered daily provides a sustained antibacterial effect on biofilm and prevents Streptococcus mutans adaptation
JP2015061865A (ja) 皮膚および創傷における使用のための組成物
Asnaashari et al. Comparison of antibacterial effects of photodynamic therapy, modified triple antibiotic paste and calcium hydroxide on root canals infected with Enterococcus faecalis: an in vitro study
US10029926B2 (en) System and method for inactivation of infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) using medium pressure ultraviolet (UV) light
Gomez et al. Photo inactivation of Streptococcus mutans biofilm by violet-blue light
WO2004080494A1 (ja) 閃光パルスによる光殺菌方法及びその装置
Lusche et al. Cavity disinfection with a 445 nm diode laser within the scope of restorative therapy–a pilot study
CN107250374A (zh) 用于快速活微生物列举的光谱强度比(sir)分析
Afrasiabi et al. Antibacterial potential of riboflavin mediated blue diode laser photodynamic inactivation against Enterococcus faecalis: A laboratory investigation
Li et al. Antimicrobial photodynamic effect of cross-kingdom microorganisms with toluidine blue O and potassium iodide
Steier et al. Fluorescence-enhanced theragnosis: a novel approach to visualize, detect, and remove caries
Putt et al. The use of chromophore and fluorophore degradation to quantitate UV dose: FD&C dyes as chemical identicators for UV sterilization
Hoenes et al. Improved contact lens disinfection by exposure to violet radiation
Lawrence et al. Blue Light Inhibits E. coli, but Decisive Parameters Remain Hidden in the Dark: Systematic Review and Meta-Analysis
JP7298830B2 (ja) オゾンインジケーターの調製方法およびオゾンインジケーター
Alkhtani Efficacy of chemical and photoactivated disinfectants against Candida Albicans and assessment of hardness, roughness, and mass loss of acrylic denture base resin
US10761026B2 (en) Methods to quantify an ion in a dental biofilm
Seme et al. Blue light‐emitting diodes for disinfection: Is the process able to improve hygiene in clinics and public buildings?
Alsaif Treatment of Dental Plaque Biofilms using Photodynamic Therapy
Liu Thermoplasmonic Photoinactivation of Vibrio Cholerae
Karam et al. Evaluation of the efficacy and influence of the decontamination and sterilization of FBGs exposed to S. aureus and E. coli

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees