TWI378808B - Cosmetic compositions containing nigrospora sphaerica extracts - Google Patents

Description

1378808 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於可局部施用至人的皮膚之組合物，該等組 合物包含球黑孢黴萃取物；及關於使用該等. τ !兮物以治療 及調理皮膚（特別為用於皮膚之美白）之方法。 【先前技術】 許多人很關心其皮膚之色素沉著程度。例如，具有老年 斑或雀斑的人可能希望此等色素斑較不顯著。 开匕人0j月& 希望減少藉由曝露於陽光下所導致的皮膚暗沉或希望美白 其天然膚色。A 了滿足此需求’業經多許嚐試以研發可減 少該黑細胞之色素產生之產物。然而，至今該等物質已確 認傾向於具有低功效或非所欲副作用，例如，毒性或皮膚 刺激性。因此，對於具有改良之總有效性之皮膚美白劑、 及在製備時有助於容易加工之藥劑有持續需求。

本發明至少部份根據以下發現：該球黑孢黴菌之萃取物 具有至少與已知皮膚美白劑同等及/或明顯更佳之皮膚美 白活性。至今尚未知球黑孢黴在化妝應用上之用途。 【發明内容】 本發明可減輕先前技藝之缺點，且部份包括含醫藥上或 化妝上可接文載劑及球黑孢黴萃取物之新穎組合物。本發 明組合物含有約0.000001至約5〇%之球黑孢黴萃取物較佳 為其有機溶劑萃取物。I了於最低成本下得到最佳皮膚美 白活性，該萃取物之含量較佳為約0.00001。/。至約10¼，更 佳為約G.GG1%至約7% ’且又更佳為約G G1%至約5%。 '〇>441.d〇, 1378808 本發明之基礎至少一部分在於發現球黑孢黴萃取物具有 至少等同且/或較優於已知皮膚美白劑的皮膚美白活性。 在本發明輓佳具體實施例中，該等組合物及本發明方法可 包含其它皮膚改善劑，例如，α_經基酸、β_經基酸、多經基 酸、氫醒、第三丁基氫醌；維生素Β及/或C衍生物（例如，菸 鹼醯胺）；二酸、類視色素、間苯二酚衍生物、樺酸、香草 酸、氫乳糖及其混合物。亦可包含有機及無機（例如，微米 尺寸化之金屬氧化物）防曬劑。有機防曬劑可包括二苯基酮 -3、二笨基酮_4、二苯基酮_8、桂皮酸甲氧酯、乙基二羥丙 基PAB A、甘油基ραβA、胡莫柳醋（Homosalate)、鄰-胺基苯 甲酸甲酷、氰雙苯丙烯酸辛酯（〇ct〇crylene)、辛基二甲基 PABA、甲氧基桂皮酸辛酯（PARSOL MCX)、柳酸辛酯、 PABA、2-苯基笨并咪唑·5·磺酸、TEA柳酸酯、3_(4-甲基亞 苄基）-樟腦、二笨基酮_丨、二笨基酮_2、二苯基酮-6、二苯基 酮-12、4-異丙基二苯甲醯基甲烷、丁基甲氧基二苯甲醯基甲 燒（PARSOL⑽）、依托克能（Et〇erylene)及其混合物。 本發明Φ包括藉由局部施用含球黑抱徽萃取物之本發明 組合物以調理皮膚之方法。本發明亦較佳包括藉由施用本 發明組合物以美白皮膚之方法 '组合物可用以預防或修 護，例如，起皺紋、鬆?也及光損害之皮膚狀況。 ’ 本發明組合物及方法具有有效美白性質，可較容易傳遞 至皮膚，且具成本有效性及可得自天然資源。 【實施方式】 本發明係關於可局部_至人的皮膚之組合物，該等組 IOM41.doc 1378808 合物包含球黑孢黴萃取物；及關於使用該等組合物以治療 及調理皮膚（特別為用於皮膚之美白）之方法。 黑孢黴為廣泛分佈在土壤、腐爛的植物及種子内之絲狀 黑線黴菌（dematiaceous fungus)。黑孢黴菌落可快速生長， 呈密集毛茸狀，首先為白色，接著變成具有黑色區域及黑 色反向色之灰白。球黑孢黴產生分生孢子柄，其可強制性 地排放分生孢子。分子孢子為黑色、孤立的單細胞、其稍 微呈水平性地平坦狀，且具有一薄赤道芽裂縫。球黑孢黴 (最出名的黑孢黴屬）可以在夏威夷島及太平洋周圍、其它地 方找到。適用於本發明組合物之球黑孢黴萃取物為有機溶 劑萃取物，例如，醇系萃取物（甲醇）或醋酸乙酯萃取物。 根據本發明，球黑孢黴萃取物之存在量必需為該組合物之 約0.00_1重量％至約5〇重量％β為了以最低成本得到最佳 皮膚美白活性，該萃取物之含量較佳為約0 00001%至約 1 〇%，更佳為約0.001%至約7%，且χ更佳為約〇 〇1%至約5%。 如文中使用，該名該”化妝組合物"有意猫述可局部施用 至人的皮膚之組合物。 如文中使用’該名詞"包含"意指包括、由......、组成及/或 基本上由......組成β 如文中使用，該名詞，，皮膚”包括臉、頸、胸、背、手臂、 腋下、手、腿及頭皮上之皮膚。 除了實例中所述外或另有明示，本說明文中之所有數字 表示被瞭解為可藉由該字，，大約"修飾之物質之數量或反應 之條件、物質之物理性質及/或用途。除非另有指定，所有 101441 .doc 1378808 數量係以該組合物之重量比表示。 值得注意的是在詳述的任何濃度範圍内，任何特別之上 -* 限濃度可以與任何特別之下限濃度有關。 球黑抱徽 根據本發明之該等萃取物係得自真菌界之物質；子囊菌 門（Phylum of Ascomycota);黑孢黴屬 〇f

Nigrospora);及球菌種（SpeciesofSphaerica)。如根據本發 明使用之球黑抱黴係在夏威夷島及太平洋周圍採集。採集 ♦ 後’在第-培養基内使該等有機體生長，自其分離並移除 欲在第二培養基中生長之該特異菌株，接著進行萃取。根 據本發明使用之培養及萃取技術為熟悉微生物學技藝者所 知或所進一步研發。生長該微生物之特殊培養方法及使用 以製備該等經篩檢過之萃取物之萃取方法在下文有陳述。 在下文中進一步將該等培養及萃取方法轉換為供培養基製 劑及萃取方法使用之秘铁。 先導的收集詳述 m 下表包含關於收集的地理位置、用以分離該微生物之培養 基及在壇脂分離平板上生長之微生物之形態特微之資訊。 位置/ 說明 收集 地點 菌型 說明 鹽度 ppt 回復 培養基 回復 溫度 分離 抱子 形成 真菌 構造 夏威夷 島：珊 瑚礁， 碎石及 熔岩管 亞湖 紅色 36 pda(馬鈴 薯澱粉、右 旋糖） 2 5〇C YPG(酵 母、葡萄 糖、東）及 SPC(大 豆、馬鈐 薯、醣類） 失誤 稠密 的毛 蔟 101441.doc 0 • y · 1378808

真菌培養物及培養方法之發酵培養基 表2 培養基组份 數量 檸檬酸鈉 8克 棉籽細粉 5克 甘露醇 5克 東 4克 L-精胺酸 1.5克 添加培養基組份至1升海水（其已經調整至PH=4.0±0.2)。 在靜止液體中發酵16天@25°C。 萃取方法 添加約等量之HP-20樹脂粒（DIAION品牌，Mitsubishi， Japan)至整個肉湯培養物内。 搖動2小時。 過濾，經等量Ηβ洗滌兩次保持真空，費時45分鐘以乾燥。 使用等量MeOH(甲醇）萃取殘留物。其它合適之有機溶劑包 括（但不限於）乙醇、丙酮、醋酸乙酯、氣仿等過濾，移除 馨溶劑。 微生物之鑑定 使用以下程序確認該等微生物之特徵為球黑孢黴。藉由 Microbial ID Inc.，（Newark，Delaware)進行試驗結果（其包 括脂肪酸分佈）及資料庫之比對。 視需要選用之皮膚改善劑 適於施用至人的 生之化合物外， 較佳化妝組合物為根據本發明之方法， 皮膚之組合物，除了本發明之經薰草素衍 l0144J.doc -10. !378808 本組合物可視需要，而且較佳’包含皮膚改善劑。 合適之附加皮膚改善劑包括抗老化、減少敏紋、皮膚美 白、抗座瘡、及皮脂減少劑。這些實例包括㈣基酸、β_ .經基酸、多經基酸'氫醒、第三丁基氫酿、維生素⑽衍 2物、二酸'類視色素；樺酸；香草酸；尿囊素，一種胎 盤萃取物；氫乳糖，·及間苯二酚衍生物。 化妝上可接受之載劑 =上:接受媒劑可作為該組合物内之皮膚改善成份 之稀釋劑、分散劑或載劑，以當施用該組合物至皮膚時可 加速其分佈。 汉價时j s亥媒劑可以是水性、益尤忐爱丨、产 ^ ，"、水或礼液。該組合物較佳為水性 或礼液’特別為油包水或水包油乳液，更佳為 當存在時，水之含量範圍可; y 3 、” 至7〇番旦。/ η 目5至99重量％，較佳為自20 至70重$/。，最佳介於4〇至7〇重量％之間。 内外’具發性之溶劑亦可作為本發明組合物 =载劑。最佳為單醇。這些包括乙醇、甲醇 ^丙醇。單經基院醇之含量範圍可以自重量％，較 佳自W重量。/。’最佳介於15與4〇重量％之間。 以料亦可作為化版上可接受之載劑。這些材料可 以約自0舌S 【式。亥專軟化劑之含量範圍可 . 重里〇/〇，較佳介於】與20重量％之間。 ::氧油可被分成揮發性及非揮發性種類 用s亥名詞"揮發柯"扣狄Α 入τ便 此等物質。捏心 溫度下具有可測定蒸氣塵之 聚碎氧油較佳選自含有自3至9(較佳自 101441 .doc 4至5)個矽原子之環狀或直鏈聚二甲基矽氧烷。於25力下， 直鏈揮發性聚矽氧物質之黏度通常小於約5厘史，而環狀物 質之黏度典型上小於約1〇厘史。作為軟化劑材料之非揮發 ϋ聚矽氧油包括聚烷基矽氧烷'聚烷基芳基矽氧烷及聚醚 矽氧烷共聚物。文中使用之本質上具非揮發性之聚烷基矽 氧烷包括，例如，於25它下黏度為自約5至約25百萬厘史之 聚二甲基矽氧烷。用於本發明組合物之該等較佳之非揮發 性軟化劑之一為於25〇C下黏度為自約1〇至約4〇〇厘史之聚 一甲基石夕氧院。 該等酯軟化合物為： (1) 具有10至20個碳原子之脂肪酸烯基酯或烷基酯。其實 例包括新戊酸異花生酯、合成蠶絲油（is〇n〇nyl isonanonoate)、肉豆蔻酸油酯、硬脂酸油酯及油酸油 酯。 (2) 趟-g旨，例如’乙氧化脂肪醇之脂肪酸酷。 (3) 多元醇酯。乙二醇單及二-脂肪酸酯、二乙二醇單_及 二-脂肪酸酯 '聚乙二醇（200至6000)單·及二_脂肪酸 酯、丙二醇單-及二-脂肪酸酯、聚丙二醇2〇〇〇單油酸 酯、聚丙二醇2000單硬脂酸酯、乙氧化丙二醇單硬脂 酸酯、甘油基單-及二-脂肪酸酯、聚甘油聚脂肪酯、 單硬脂酸乙氧化甘油酯、1，3，- 丁二醇單硬脂酸酯、丨，3_ 丁二醇二硬脂酸酯、聚氧乙烯多元醇脂肪酸酯、山梨 糖醇if脂肪Ssl Ss及聚氧乙烯山梨糖醇針脂肪酸酯為令 人滿意之多元醇酯。 101441.doc 12 1378808 (4) 蠟酯，例如，蜂蠟、鯨蠟、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、硬脂 •硬月曰知及山答酸花生醋。 (5) 固醇酯，其實例為膽固醇酯肪酸酯。 本發明組合物亦可包含具有自10至30個碳原子之脂肪酸 以作為化妝上可接受之載劑。該等種類之實例為壬酸、月 桂酸、肉且冠冑、棕櫚酸、硬脂酸、異硬脂酸、經基硬脂 酉夂/由酸、亞油酸、環麻油酸、花生酸、山簽酸及芬子酸。 亦可使用夕元醇型之保濕劑以作為本發明組合物之化妝 上可接受載劑。該保濕劑有助於增加軟化劑之功效、減少 鱗屑形成、刺激積聚鱗屑之移除及改善皮膚觸感…般多

—醇匕括甘油、聚伸烷基二醇，且更佳為伸烷基多元醇及 其衍生物，其包括丙二醇、二丙二醇、聚丙二醇、聚乙二 醇及其衍生物、山梨糖醇、羥丙基山梨糖酐、己二醇、H 丁 一醇、1，2’6-己二醇、乙氧化甘油、丙氧化甘油及其混合 就最佳果而a，s亥保濕劑較佳為丙二醇或透明質酸 =°該保濕劑之含量範圍可以約為該組合物之自^謂重 量％，較佳介於1與15重量％之間。 亦可使用增稠劑作為根據本發明之組合物之化妝上可接 受載劑的-部份。一般增稠劑包括交聯丙烯酸酷(例如， bopol 982)、經疏水性修飾之丙烯酸酯(例如’㈣ 1382)、牛項酸酷聚合⑯、纖維質衍生物及天然樹膠。有用 之纖維質衍生物為羧曱基纖維素鈉、羥丙基曱基纖維素、 經丙基纖維素、經乙基纖維素、乙基纖維素及經甲基纖維 素。適於本發明之天然樹膠包括瓜耳樹膠、黃酸樹膠、麥 I0144l.doc 13 1378808 角樹膠'角叉菜膠'果膠及這些樹膠之組合。該增稠劑之 含量範圍可以自0.0001至5重量％，通常自〇 〇〇1至1重量％ , 最佳自0.01至0.5重量％。 集體上而言，構成該化妝上可接受載劑之水、溶劑、聚 矽氧、酯、脂肪、保濕劑及/或增稠劑之含量，自！至99 9 重量％ ’較佳自80至99重量％。 主要根據所使用乳化劑之平均親水_親脂平衡值（HLB)， 可含有油或油性物質，其可以併用乳化劑以得到油包水乳 液或水包油乳液。 本發明之化妝組合物亦可包含表面活化劑。該表面活化 劑之總濃度範圍為該組合物之自〇·丨至4〇重量％，較佳自】 至20重罝％，最佳自】至5重量％。該表面活化劑可選自由陰 離子活化劑、非離子活化劑、陽離子活化劑及兩性活化劑 斤、、成之群組。更特佳之非離子表面活化劑為此等具有以 下組份之表面活化劑：每莫耳疏水物經2至1〇〇莫耳環氧乙 烷縮合C,G至Cm脂肪醇或酸疏水物；具有經自2至2〇莫耳環 氧烷烴縮合之C2至Ci。烷基酚；乙二醇之單-及二-CJC2。脂 肪敲，嵌段共聚物（環氧乙烷/環氧丙烷及聚氧乙烯山梨 糖醇酐及其組合。烷基多糖苷及醣脂肪醯胺(例如，甲基葡 萄糖酿胺）亦為合適之非離子表面活化劑。 較# t ^離子表面S化劑包括肥皂、烧基驗硫酸酷及烷 K Sa硫酸烷酯及續酸院酯、烧基苯續酸酯、績基 ，珀酸烷酯及磺基琥珀酸二烷酯、羥基乙磺酸q至。。醯 δθ麩胺酸醯酯、C8至C2〇烷基醚磷酸酯及其組合。 10144l.doc •14· 1378808 視需要選用之組份 可視需要添加增塑劑、黑極鋅（calamine)、抗氧化劑、螯 合劑及防曬劑至本發明該等化妝組合物内。 亦可將其它添加劑次要組份併入該等化妝組合物内。這 些成份可包括著色劑、顏料、不透明劑、及香料。這些其 它添加劑次要組份之含量範圍可以為該組合物之約自 0.001重量％至高至20重量％。 防曬劑 可單獨使用金屬氧化物作為防曬劑或混合及/或 合併有機防曬劑。有機防曬劑之實例包括（但不限於）下表 所陳述之防曬劑。 該化妝組合物内之該等有機防曬劑之含量較佳在約〇· 1 重量％至約10重量％之範圍内，更佳為約1重量％至5重量 %。較佳有機防曬劑為PARSOL MCX及Parsol 1789，因為其 很有效，且市面上有售。 _表3_ CTFA_^_供應商

二笨基酮-3 / UV1NULM-40 二苯基酮-4 UVINULMS-40 二笨基酮-8 SPECRA-SORB UV-24 桂皮酸曱氧酯 BERNEL HYDRO 乙基二羥丙基-PABA AMERSCREEN P 甘油基PABA MPA GM.P.A. 胡莫柳 SI(Homosalate) KEMESTERHMS 鄰-胺基苯曱酸曱酯 SUNAROME UVA 101441.doc -15- BASF Chemical Co. BASF Chemical Co. American Cyanamide Bemel Chemical Amerchol Corp.

Nipa Labs.

Hunko Chemical Felton Worldwide 1378808 氛雙苯丙稀酸辛Sl(Octocrylene) UVINULN-539 BASF Chemical Co. 辛基二甲基PABA AMERSCOL Amerchol Corp. 甲氧基桂皮酸辛酯 PARSOLMCX Bemel Chemical 柳酸辛酯 SUNAROMEWMO Felton Worldwide PABA PABA National Starch 2-笨基苯并咪唑-5磺酸 EUSOLEX 232 EM Industries TEA柳酸酯 SUNAROMEW Felton Worldwide 3-(4-甲基亞苄基)-掉腦 EUSOLEX 6300 EM Industries 二笨基酮-1 UVINUL400 BASF Chemical Co. 二笨基酮-2 UVINULD-50 BASF Chemical Co. 二苯基酮-6 UVINULD-49 BASF Chemical Co. 二笨基酮-12 UVINUL408 BASF Chemical Co. 4-異丙基二苯甲醯基甲烷 EUSOLEX 8020 EM Industries 丁基甲氧基二苯甲醖基曱烷 PARSOL1789 Givaudan Corp. 依托克能(Etocry lene) UVINULN-35 BASF Chemical Co.

組合物之用途

根據本發明之該等真菌萃取物、組合物及方法主要作為 可局部施用至人的皮膚之個人護理產物，及用以美白皮 膚，減少皮膚色素沉著之程度或平衡皮膚色調。 被使用時，自合適容器或塗佈器施用少量（例如，自1至5 毫升）該組合物至皮膚之無掩蔽區域，且若必要，使用手或 手指或合適裝置將其遍佈及/或塗抹使其滲入皮膚内。 產物型式及包裝 可以將本發明該化妝組合物調配成黏度為自4,000至 101441.doc - 16- iO’OOO毫帕（mpas)之洗劑、點度為自1〇 〇〇〇至2〇，_毫帕之 々,《·體札劑或黏度為自2〇 〇〇〇至1〇〇 〇〇〇毫帕或更高之乳劑。 可以將该組合物包裝在合適容器内以配合其黏度及消費者 之計劃用途，例如，可以將洗劑或流體乳齊！包裝在瓶子或 滾子與滾珠塗佈器或推進劑驅動之氣溶膠裝置或配備適於 手私操作之泵之容器内。當該組合物為乳劑時，可簡單地 將其貯存於非可變敎瓶子㈣擠容器（例如管或有蓋的 瓿）内。當該組合物為固體或半固體棒狀物時，可以將其包 裝在適於以手動或機械方法推出或擠出該組合物之容器 内。 本發明因此亦提供含如文中定義之化妝上可接受組合物 之閉合容器。 以下實例為說明進行本發明之最佳模式之實例，而非限 制本發明原理。 實例1 本實例說明使用本發明之球黑孢黴萃取物以減少新黑色 素合成之方法。 以下實例從頭至尾所使用之該等球黑孢黴萃取物係根據 上文陳述之程序製成。 器官培養法 、刮件自8個月大之著色豬之廢皮以移除豬毛，並徹底洗滌 、私除碎屑及減少微生物含量。然後將已洗淨之豬皮切成 約1毫米厚X75厘米2 ’並改置在含杜伯科氏改良之伊格爾氏 。養基（Dulbecco，s Modified Eagle，s Medium)(DMEM Cat# 10l441.doc 1378808 1 1 88507)之組織培養燒瓶内，該培養基含有青黴素（1 〇〇單位 /毫升）、鏈黴素（100微克/毫升）、康黴素（200微克/毫升）、 麵酿胺酸（2-毫莫耳濃度）及芳幾腙（fungiz〇ne)(〇 5微克/毫 升）。於5%二氧化碳存在.下，於37»c下培育所有燒瓶，費時 一夜。在添加黑色素抑制劑之前，前述培育步驟可以使該 豬皮平衡1 8小時。棄置有到痕、細斑或不均勻色素沉著之 該渚豬區域。 隔天早上，將s亥豬皮打孔成4毫米直徑之活體檢視體，並 ® 移至96井之組織培養皿内。添加180微升含青黴素（1〇〇單位 /毫升）、鏈黴素（100微克/毫升）、麩醯胺酸（2毫莫耳濃度）、 氫化可體松（hydrocortisone)(100微克/毫升）及0.4微居里/毫 升 C·硫尿嘧啶（Moravek Biochemicals)之新 DMEM、及 20 微升之天然萃取物（萃取物先溶於DMSO(亦即二曱基亞 砜）’然後經磷酸鹽緩衝食鹽水稀釋）至含活體檢視體之各井 内。使所有平皿返回該怪溫箱内，費時3天。 經3天培育後，於室溫下使用自動化平皿洗滌器以^ M ® 碳酸鹽緩衝劑（PH10)洗滌該等活體檢視體，費時分別為3〇 分鐘及2小時，以移除過量未合併之放射性標記物。然後漂 白活體檢視體，並藉由添加1〇〇微升之i N 使其溶解，繼而於60°C下培育一夜。 一旦乾燥時，添加50微升之2 Ν_Ηα至各井内以再溶解/ 中和該等試樣，繼而添加220微升之閃爍混合（packard

MiCr〇SCint-40)。使試樣經混合數次以確保均勻分散，經密 封，並使用Packard TopCount閃爍計數器評估其放射性標記 101441.doc 1378808 物之合併程度。放射性標記物之合併度減少可被解釋成新 黑色素合成之減少。 表4 台療劑 濃度 放射性標記物減少〇/〇* 球黑孢黴萃取物 80微克/毫升 45 8微克/毫升 4 麴酸 1.4毫克/毫升（1〇毫莫 耳濃度） 56 使用史丟登氏（studentS)t-試驗之P-值小於0.05具有統計學上重要性 # 實例2

MelanoDerm組織模式方法 使用得自黑皮膚個體之含黑細胞之Melan〇Derm組成同 專物模式（知自 Mat Tek，Ashland, Massachusetts)，以確認在 該猪器g培養物中所得到之結果。M〇ian〇Dernis依供應商指 示培養。 在Μ天期間内，每兩天替換培養基，並以每毫升5〇及1〇〇 個微克之最終濃度，添加治療劑（其包括該等天然萃取物） _至該培養基相内。包括正對照物，亦即，输酸，其係為已 知皮膚美白劑。於各培養基改變期間，分析部份該廢料之 乳酸脫氫酶含量以作為細胞毒性及壓力之指示。該乳酸脫 氫酶之含量絕不超過該等媒劑對照物溶劑（水或乙醇）。 使用藉由製造商提供之分析法進行各Melan〇Dernl内黑 色素含量之測定。在含2〇微升蛋白酶κ(5毫克/毫升）之45〇 微升緩衝劑（1%SDS、〇.〇5毫莫耳濃度EDTA、1〇毫莫耳濃度 1>丨8 1101，？則.8)内使各1^1311〇〇61^111均質化，並於45。(3下 101441.doc -19- 1378808 培育一仪《隔天，添加50微升之碳酸鈉（5〇〇毫莫耳濃声）及 10微升之過氧化氫（30%溶液）至各試樣，並於8〇{>(：辰二及 卜培育3〇 分鐘，然後冷卻。以100微升之氯仿：甲醇（2:1)萃取該試樣， 並離心（10,000g)處理10分鐘後，測定（4〇5奈米）該上相 密度。然後計算與該未經處理或媒劑對照物（水或乙2光 ^ J有關

麴酸 14微克/毫升(1〇〇微莫耳濃度） -'~~------ 9.5 '~~--- 球黑孢黴萃取物 50微克/毫升 60.9* 100微克/毫升 I ----— 48.9* ----—.___ 使用史圖登氏（StUdents)t-檢定，P-值小於〇 〇5具統計上顯著性

實例3 製備屬於本發明範圍之化妝組合物。

藉由將相A成份攪拌加熱至70到85。〇以製備下表中所_ 之基礎調配物。在個別容器内，將相B成份攪拌加熱至川 到85°C。然後添加相A入相B内，並保持這兩相於7〇至85艺 下。於70至85 C下攪拌該混合物，費時至少15分鐘，然後 冷卻。 IOI441.doc -20· 1378808

表6 成份 a b 重量％ 重量％ 相 棕櫊酸異硬脂酯 6.00 6.00 A 辛酸C12至CI5烷酯 3.00 3.00 A PEG-100硬脂酸酯 2.00 2.00 A 羥基硬脂酸甘油酯 1.50 1.50 A 硬脂醇 1.50 1.50 A 硬脂酸 3.00 4.00 A TEA > 99% 1.20 1.20 B 二甲基聚矽酮 1.00 1.00 A 單硬脂酸山梨糖醇酐酯 1.00 1.00 A 矽酸鎂鋁 0.60 0.60 B 維生素E醋酸酯 0.10 0.10 A 膽固醇 0.50 0.50 A 塞曱基聚石夕酿l(Simethicone) 0.01 0.01 B 黃酸樹膠 0.20 0.20 B 羥乙基纖維素 0.50 0.50 B 對羥基笨甲酸丙酯 0.10 0.10 B EDTA 二納 0.05 0.05 B 丁基化羥基曱苯 0.05 0.05 B 球黑孢黴萃取物 0.05 2.00 B 菸鹼醯胺 1.00 1.00 B 金屬氧化物 2.50 5.00 B 對羥基苯曱酸曱酯 0.15 0.15 B 水 BAL* BAL* B 總共 100.00 100.00 B BAL表示差額。 .實例4 屬於本發明範圍之一附加化妝組合物之製法如下：

1. 將相A加熱至80°C

2. 在個別容器内將相B加熱至75°C 3. 添加B至A，並在停熱下混合30分鐘 4. 於50°C下添加相C，並混合10分鐘 101441.doc -21 - 1378808 表7

组份 重量％ 相 水，DI 差額 A EDTA 二鈉 0.05 A 矽酸鎂鋁 0.6 A 對羥基苯甲酸甲酯 0.15 A 塞甲基聚妙酮(Simethicone) 0.01 A 丁二醇 1，3 3.0 A 羥乙基纖維素 0.5 A 甘油，USP 2.0 A 黃酸樹膠 0.2 A 三乙醇胺 1.2 B 硬脂酸 3.0 B 對羥基苯甲酸丙SINF 0.1 B 羥基硬脂酸甘油酯 1.5 B 硬脂醇 1.5 B 棕櫊酸異硬脂酯 6.0 B 辛酸C12至CI5醇酯 3.0 B 二曱基聚矽酮 1.0 B 膽固醇NF 0.5 B 硬脂酸山梨糖醇酐酯 1.0 B 微米尺寸二氧化鈦 5.0 c 醋酸生育酯 0.1 B PEG-100硬脂酸酯 2.0 B 硬脂醖乳醯酸鈉 0.5 B 羥基辛酸 0.1 c 球黑孢黴 10.0 C PARSOL MCX 2.4 C α -沒藥醇（a -bisabolol) 0.2 c 101441.doc -22·

1378808 實例5至1 2 根據實例3之方法製備屬於本發明範圍之一組附加組合 物，且其列示在下表中。 表8 成份 相 實例(重量％) 5酸肥 皂鹼 6 7 8 9 10 11 12 硬脂酸 A 17.9 17.9 17.9 17.9 17.9 17.9 17.9 17.9 鯨蠟硬脂基 硫酸鈉A(乳化劑） A 2.2 1 1.5 2 3 2 Myrj 59★(乳化劑） A 2 2 2 2 2 1 Span 6〇★(乳化劑） A 2 2 2 2 2 1 球黑孢黴萃取物 B 0.05 0.05 2.0 2.0 3.5 3.5 5.0 10.0 微米尺寸化之氧化鋅 B 2.50 5.00 5.00 2.50 2.50 5.00 2.50 5.00 KOH，22%(於現場在具 有硬脂酸之肥皂中形 成） 2.20 曱氧基桂皮酸辛酯 2.50 2.50 2.50 2.50 水 B BAL BAL BAL BAL BAL BAL BAL BAL 甘油 B 1 1 1 1 1 1 1 1

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Claims (1)

1. 十、申請專利範圍：中文申 1乂種皮膚美白之化妝方法，其包括施用一組合物至皮 膚’該組合物包含： 0.000001重量〇/〇至約5〇重量％球黑抱徵萃取物； 及 化妝上可接觉之載劑，其中該萃取物係藉由甲醇萃取 獲得者。 2·如2求項1之方法，其中該組合物尚包含防權劑。 3·如睛求項2之方法，其中該防曬劑為微米尺寸化金屬氧化 物。 請求項1之方法，其中該萃取物佔該組合物之約 0-00001%至約 。 、、項1之方法，其中該萃取物佔該組合物之約 至約7%。 項1之方法，其中該萃取物佔該組合物之約〇. 〇 1 〇/〇 至約5%。 7. 如請求項丨之化妝方法，其中該組合物尚包含一選自由心 經基酸、Ρ-經基酸、多經基酸、氫醒、第三丁基氣親、維 生素Β及/或C衍生物、二酸、類視色素、間苯二紛衍生物、 香草酸、樺酸、氫乳糖及其混合物所組成之群組之皮膚 改善劑。 8. 如哨求項丨之化妝方法，其中該組合物尚包含一選自由二 本基_-3、二苯基_·4、二苯基_·8、桂.皮酸甲氧醋、乙 基二羥丙基-ΡΑΒΑ、甘油基ΡΑΒΑ、胡莫柳醋 101441-1010724.doc 1378808 (Homosalate)、鄰·胺基苯曱酸曱酯、氰雙苯丙烯酸辛酯 (Octocrylene)、辛基二曱基PABA、甲氧基桂皮酸辛酯 (PARSOL MCX)、柳酸辛酯、PABA、2-苯基苯并咪唑-5-磺酸、TEA柳酸酯、3-(4-甲基亞苄基）-樟腦、二苯基酮]、 二苯基酮-2、二苯基酮-6、二苯基酮-12、4-異丙基二笨 甲酿基甲烷、丁基曱氧基二苯曱醯基甲烷（pars〇L 1789)、依托克能（Etocrylene)及其混合物所組成之群組之 有機防曬劑。 9. 一種化妝組合物，其包含： a. 約0.000001至約50%球黑孢黴萃取物， 及 b. 化妝上可接受之載劑’其中該萃取物係藉由甲醇萃取 獲得者；及其中該組合物尚包含一選自由仏羥基酸、 β-羥基酸、多羥基酸、氫醌、第三丁基氫醌、維生素 Β及/或C衍生物、二酸 '類視色素、間苯二酚衍生物、 香草酸、樺酸、氫乳糖及其混合物所組成之群組之皮 膚改善劑。 10·如請求項9之化妝組合物，其中該萃取物佔該組合物之約 0.00001%至約 10%。 11. 如請求項9之化妝組合物，其中該萃取物佔該組合物之約 0.001%至約 7%。 12. 如請求項9之化妝組合物’其中該萃取物㈣組合物之約 0.01%至約 5%。 13. 如請求項9之化妝組合物’其中該組合物尚包含一選自由 10144M010724.doc 1378808 二苯基酮-3、二苯基酮-4、二苯基酮-8、桂皮酸曱氧酯、 乙基二羥丙基-PABA、甘油基PABA、胡莫柳酯 (Homosalate)、鄰-胺基苯曱酸甲酯、氰雙苯丙烯酸辛酯 (Octocrylene)、辛基二曱基PABA、甲氧基桂皮酸辛酯 (PARSOL MCX)、柳酸辛酯、PABA、2-苯基苯并咪唑-5-磺酸、TEA柳酸酯、3-(4-甲基亞苄基）-樟腦、二苯基酮-1、 二苯基酮-2、二苯基酮-6、二苯基酮-12、4-異丙基二苯 甲醯基曱烷、丁基曱氧基二苯甲醯基甲烷（PARSOL 1 789)、依托克能（Etocrylene)及其混合物所組成之群組之 有機防曬劑。

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