TWI263499B - Pharmaceutical compositions and uses for androst-5-ene-3beta,17beta-diol - Google Patents

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1263499 玖、發明說明： 【發明所屬之^支彳軒領滅】 本毛明彳;T、關於治療或預防性類固醇濃度減低或不平衡及 對雄激素及/或雌激素活性增高可產生有利反應之病情之藥學 5 組成物、套件組及方法。本發明利用雄-5-烯-3/5，】7/?-二醇（後 文稱作5-DI0L)或於活體内可轉成5_DI〇L之化合物。 C 才支冬奸】 5-DIOL為一種經由還原性17石-羥類固醇去氫酶（17万 -HSD)作用而由DHEA生合成之化合物，屬於一種微弱雌激素。 10該化合物用於大鼠腦下垂體前葉胞溶體之雌激素受體，親和力 比17/3-雌二醇(E2)低85倍（Slmar(^Labrie5 j•類固醇生物化學 期刊，26. 539-:546，1987) ’進一步證實於人子宮癌及乳癌組織對 相同參數所付資料（1<^丨1；1113111：1及如>^1*(15]\類固醇生物化學期刊 11: 1589-1595，1979: Adams 等人，癌症研究，41: 4720-4926, 15 1981; Poulin及Labrie，癌症研究，46: 4933_4937, 1986)。 於成年女性血漿濃度範圍之濃度，5-DIOL可促進缺乏3 /5 _ 羥類固醇去氫酶D5-D4異構酶活性之人類乳腺腫瘤ZR_75]細 胞之細胞增生及孕酮受體含量（Poulin及Labne，癌症研究；46: 4933-4937，1986)及增加52 kDa糖蛋白於MCF-7細胞之雌激素 20 依賴型合成（Adams等人，癌症研究，4]: 4720-4926, 1981)。 一般已知DHEA及DHEA-S之血清濃度隨著年齡而下降，因 此於周邊目標組織雄激素及雌激素的形成大減，以及由性類固 醇誘生的生物化學及細胞功能劇降。結果DHEA及DHEA-S曾經 用於治療多種關聯性類固醇濃度降低及/或不平衡的病情。晚近 1263499 發明人發現3-DI0L血清濃度隨年齡劇降。 骨質疏鬆症為一種影響男性及女性疾病，與雄激素及雌激 素的減少有關。雌激素顯示可降低骨質分解速率，而雄激素可 營構骨質。 5 更年期症候群與雌激素的喪失有關，常使用低劑量雌激素 治療停經附近及更年期婦女來缓解血管運動神經症狀、生殖泌 尿道萎縮、刺激、睡眠障礙、精力不佳、骨質疏鬆症、及其它 停經相關症狀。

此外乳癌、心血管病、及胰島素抗性亦與DHEA及DHEA-S ]〇 之血清濃度減低有關，曾經提議使用DHEA及DHEA-S二者來預 防或治療此等病情。也曾經提示DHEA用於治療及/或預防下列 病在具有有利效果：肥胖，糖尿病，動脈粥瘤硬化，化學品誘 發乳癌、皮膚癌及結腸癌，自體免疫病，阿茲海默氏病，記憶 力衰退，老化以及增強精力、肌肉質塊及長壽。使用DHEA以 ]5 及雄激素及雌激素治療效果討論於國際專利公告案W〇 94/16709。

曾經提議DHEA及DHEA-S用於治療此等病情比標準雄激 素及雌激素治療更佳，原因在於DHEA及DHEA-S之作用目標係 鎖定於可將DHEA及/或DHEA-S轉成特定性類固醇的組織。但 20 需高劑量DHEA來獲得所需雌激素及雄激素效果。最要緊地 DHEA之雄激素效果為主控，因此對於需要較高比例雌激素以 及雄激素副作用成問題的病情，特別於女性，本發明允許較佳 比例之雌激素效果相對於雄激素效果。 【令务明内容】 1263499 發明概要 本發明之目的係提供包括㈣〇L或於活體内可轉成 5-m〇L之前驅藥之藥學組成物及套件组。若干具體例中，藥學 組成物主要係由5-DI0L組成。 卞卞 /發明也有—目的储供於需要此種治療或預防之病人 升高5-DIQL濃度而治療及預防性_醇激素（雄激素及/或雄激 素）/辰度不平衡或減少之方法。 10 本發明之又-目的係提供治療或減少發作對雌激素活性 可產生有利反應之病情之方法，該等病情包括陰道萎縮，性功 能低下’性慾減低，皮膚萎縮，尿失禁，脂質及脂蛋白不平衡 ’動脈粥癌硬化’心血管病及停經症候群（熱潮红，睡眠障礙， 阿輯默氏病，巴金森氏病’精神障礙，憂營症，記憶力減退 )’該方法係經由投予5-m〇L。本發明之又—目的係提供預防 或治療對雄激素活性產生有利反應之病情之方法，該等病情包 括乳癌，即巢癌，子宮内膜癌，性您減退，皮膚萎縮，皮膚乾 h ’骨質疏鬆症及停經症候群’該方法係經由投予5_di〇l。多 種受到性議㈣㈣疾錄丨如„疏鬆症）對㈣素及雕激 素二者皆可產生有利的反應。 需要治療或減少發作特定疾病風險之病人為已經被診斷 20患有該病病人或對患有該病易感病人。 除非另行註明或由前後文顯然易知，此處劑量表示未受藥 车賦形劑、稀釋劑、載劑或其它成分影響的活性化合物重量， 仁專乂乜包括此等額外成分，如文中實例所述。任何醫藥業界常 用劑型（膠囊劑、錠劑、注射劑等）皆適用於此，以及「賦形劑 1263499 / j希u」$編」等詞包括業界典型連同活性成分含括 等d土之黑活性成分。例如包括典型膠囊、丸粒、腸衣、 固體或液體稀釋劑或賦形劑、矯味劑、保藏劑等。 〃本發明也包括使用活性劑用於製造治療此處列舉疾病用 5 此等疾病對該藥劑具有感受性或組成中之-種成分用於製 i玄病…療用樂，此處治療進—步包括所請合併治療之另一種 成分。 本％明之頭外目的係提供包括投予5_di〇l之新穎'避孕方 法。 5-DI0L為去氫表雄固酮⑽EA)之代謝產物。今日發現 5-DI0L之雄激素及雌激素效果方面具有出乎意外的變化（相對 方、DHEA)。特別⑽肌之滩激素活性比細^高五倍，而雄激 不活ϋ僅比DHEA^-或二倍，如此獲得5_DIqL&dhea之雕 激素對雄激素比約為3.〇。它方面，於較高劑量時，5_m〇L產生 15的最大效果之雄激素活性低於麵A。如此投予5①肌之相對 雖激素對雄激素效果比較投予對應劑量之dhea較為朝向雄激 素效果。如此5-DIOL特別可用於治療及預防涉及性類固醇濃度 過低之病情，特別為雌激素濃度下降（亦即超過雄激素濃度的下 降)之病情。料本發明可餘希望雌激素效果比㈣素效果更 2〇高的情況。容後詳述，⑽脱可單獨或合併其它治療劑例如抗 雌激素劑、雄激素劑、孕激素劑、雌激素劑、DtiEA、DHEA-硫酸鹽、LHRH同效劑或拮抗劑、17/3名類固醇脫氫酶抑制劑 、芳香酶抑制劑、生殖腺性類固醇分泌抑制劑作為合併治療之 1263499 本發明之内文中，任何孓DI〇l前驅藥皆可用於替代 5-D10L包括5-D10L脂肪酸類，原因為其亦可提高5七1〇]1之血 清濃度。 其δ本發明之特點及優點由後文本發明之說明參照附圖 5 將顯然易明。 圖式之間單說明 第1圖為線圖顯示經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DI0L， 每曰兩—入經歷7日對卵巢切除大鼠之子宮重量此乃一種雌激素 敏感性參數的影響。完好動物用作額外對照。化合物係溶解於 10 50/〇乙g子-50%丙二醇及以〇1毫升投予背部皮膚區厘米X 2厘 米）。 第2圖為線圖顯示經皮投予遞增劑量之dhea或， 每曰兩次經歷7日對印巢切除大鼠之血清促黃體激素（lh)濃度 此乃谁/放$及/或雌激素效果測量值的影響。完好動物用作額外 化a物係’谷解於50%乙醇-50%丙二醇及以〇,1毫升投予背 部皮膚區（2厘米X 2厘米）。 弟3圖為線圖顯示經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL· , 每曰兩—人經歷7日對卵巢切除大鼠之血清DHEA濃度之影響。完 子力物用作名頁外對照、。化合物係溶解於乙醇一 丙二醇及 2〇以0.1笔升投予背部皮膚區(2厘米X 2厘米)。 第4圖為線圖顯示經皮投予遞增劑量之⑽从或⑽沉， 每日兩-人I歷7日對_巢切除大i之血清5_m〇L濃度之影響。 兀好動相作頭外對照。化合物係溶解於观乙醇、胃。丙二醇 及以〇.]毫升投予背部皮膚區（2厘米χ 2厘米）。 1263499 卜‘ Β U圖喊不經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL， 母曰兩次經歷7曰對即巢切除大鼠之血清雄烯二_)濃 度此乃雄激素及/或雄激素效果測#值之影響。完好動物用作額 外對照。化合她容解於5Q%乙醇猶丙二醇及飢】毫升投予 背部皮膚區（2厘米x 2厘米）。 10 15 第6圖為線圖顯示經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DI〇L， :曰兩次經歷7曰對卵巢切除大鼠之血清畢晴度之影響。 兀子動物用作領外對照。化合物係溶解於·乙醇巧〇%丙二醇 及以0:1毫升投予背部皮膚區(2厘米X 2厘米)。 —第目為、泉圖转員不經皮投予遞增劑量之DHEA或5_di〇l， 母日兩人、..工歷7日對印巢切除大鼠之血清二氯筆固嗣①町)濃 度的影響。完好動物用作額外對照。化合物係溶解於50%乙醇 5〇%—丙二醇及以0·1毫升投予背部皮膚區（2厘米X2厘米）。 —第8圖為線圖顯示經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DI0L, 母日H歷7日對睪丸切除大鼠之腹腔攝護腺重量此乃雄激 素測里值之影響。完好動物用作額外對照。 弟9圖為線圖顯示飯由 、、、二皮彳又予遞增劑量之DHEA或5-DIOL， 每日兩次經歷7日對睪丸切除大氣之貯精囊重量此乃雄激素效 果測$值之影響。完好動物用作額外對照。 第1〇圖為線圖顯示經皮投予遞增劑量之1DHEA或5-DI0L ’每日兩次經歷7日«心除大鼠之腹賴護腺之編碼攝護 ，結合蛋白質C1成分(PBp_ClkmRNA濃度此乃雄激素效果測 量值之影響。完好動物用作額外對照。 第]】圖為線圖顯开 不經皮指予遞增劑量之DHEA或5 -D]OL， 20 1263499 每日兩次經歷7日對睪丸切除大鼠之腹腔攝護腺之編码攝護腺 結合蛋㈣3成分(PBP.C3)之mRNA濃度_麵效果測量 值之影響。完好動物用作額外對照。

第12圖為線圖顯示經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DI0L ，每θ日兩次經歷7日對«切除大鼠之子宮重量此乃雄激素效 果測置值之影響。完好動物用作額外對照。 10 15 —^圖為、泉圖择員不經皮投予遞增劑量之洲^八或㈤胤 兩人、、工[7日對卵果切除大鼠之血清⑶濃度此乃雄激素 及/或《素效果測量值以彡響。紐祕㈣額外對照。 —第11為、，泉圖_不經皮投予遞增劑量之或^di〇l 母日兩人、、.工歷7日對睪丸切除大鼠之攝護腺重量此乃雄激素 效果測I值之影響。完好動物用作額外對照。

―第15圖為線圖顯示經皮投予遞增劑量之r)HEA或5-DI0L ^ “人、工[7日對畢丸切除大鼠之貯精囊重量此乃雄激素 效果測里值之影響。完好動物用作額外對照。 第圖為、.泉圖頒不經皮投予遞增劑量之或5·助^ ，每日兩次經歷7日解丸切除大鼠之血清LH濃度此乃雄激素 及/或雌激素效果測量值之影響。完好動物用作額外對照。 第17圖顯示雄大鼠單次口服吸收雄傅”，二醇 (150微莫耳/蝴前1鳴咖A4_毫微克/毫升娜） 呈時間剛之函數。框内報告由此等化合物誘生之醜A之 AUC 24小時。 EM-760 EM-900 去氫表雄固酮 雄-5-烯-3yS j7yS—二醇 20 1263499 EM-1 j05-CS雄烯-3石，πρ -二醇二乙酸酯 EM-1397 雄-5H3万，I7 二醇乙酸酯17-苯甲 酸酯 EM-I400 雄-5|3万，】7/9二醇二苯甲酸酯 EM- ] 410 雄-5-烯-3 /9，17々-二醇二丙酸酯 EM1474①雄·5·烯部，17心二醇二半丁二酸酯 第18圖頰不雄大鼠單次口服吸收雄_5_烯_3石，170 _二醇 (150微莫耳/大鼠）前驅藥後雄―5_稀·3/?，】7万·二醇血衆濃度（毫 微克/毫升）(Υ轴）呈時間（X軸）之函數。框内報告由此影化合物誘 生之雄-5-烯-3 /3，17 /5-二醇之AUC 24小時。

EM-760 EM-900 EM-1304 EM-1305-CS EM-1397 EM-1400 EM-1410 EM1474-D 去氣表雄固0¾ 雄 烯-3yg，17yS-二醇 雄-5-歸-3 /5 517点-二醇3-乙酸酯 雄-5、婦_3 /5，17 /9 -二醇二乙酸酯 = •5、烯_3万，Π万-二醇乙酸酯17_苯曱酸 S曰 雄-5、烯_3 /3，17々-二醇二苯曱酸酯 雄-5~烤·3 yg/3 -二醇二丙酸酯 雄5、稀-3/5,17/9-二醇二半丁二酸酯 活體試驗檢定分析雄 用率 1)原理 5-烯-3 /3，17 0 -二醇前驅藥之生物利 雄- 5-^-3 ，17 石 於雄史伯格拉力大鼠 血漿濃度進行。 -二醇前驅藥之生物利用率之檢定分析係 錯測量單次口服投予化合物後之化合物 2)動物及處理 10 1263499 重275_350克之雄史伯袼拉力大鼠[CrL‘CD(SB)Br]係得自 加拿大查理士河公司且於職期間以每籠兩頭圈養而研究期 間係個別圈養。動物接受12小時光照；12小時黑暗（光照始於 _〇)之計晝。動物使用核准的鼠食（實驗室膳食#5〇〇2，粒狀) 5及自由給予龍頭水。給藥前夜開始大鼠空腹（僅可進水）。 各試驗化合物經口灌食以〗50微莫耳/大鼠劑量呈於04% 甲基纖維素之懸浮液投予三頭大鼠。約0·7毫升血樣係於灌食後 2 〇 4及7小犄收集自使用異氟烷(Is〇f]誘生麻醉大鼠 之頸靜脈。血樣即刻移轉至含聰入之冰;東〇 75毫升微容器且維 10持於冰水浴直到於3000 rPm離心10分鐘。收集血樣後迅速（少於 50分鐘）進行血漿分離。一份〇25毫升血漿移至硼矽酸鹽管（3χ 1〇〇)且於乾冰快速冰冷。血漿樣本維持於約8(rc至藉〇〇%3測 量性類固醇或性類固醇前驅物濃度。 發明之詳細說明 15 相信根據本發明，5_DI〇L可用於治療任一種已知可對使用 DHEA治療產生有利反應的疾病，由於5—DI〇L2雌激素對雄激 素活性比更為有利以及比較DHEA其最高雄激素活性較低。故 更可額外獲益。根據本發明直接投予5_DI〇L比較投予〇]9；£八有 多種優點，如此處所述。 -〇 申#人杳現5-〇1〇[可產生與DHEA顯著不同的雄激素及 雌激素效果。特別，5七1〇1^比較1)]^£八對特定雌激素效果之產 生可產生較少可能的雄激素或男性化影響。因此用於治 療需要雌激素而減少雄激素之病情特別有效。事實上，停經後 婦义缺雄激素及雌激素二者，但雌激素/雄激素比比停經前低。 1263499 如此婦女需要較高雌激素-雄激素比俾便補償卵巢之雌二醇分 泌減少。DHEA無法補償此種卵巢雌激素活性缺陷，而僅替代 由腎上腺分泌DHEA-S及DHEA的減低。 此外投予遞增劑量範圍之DHEA產生活性雄激素DHT及其 5 前驅藥4-dione比投予5-D10L高30至125%。它方面投予DHEA比 5-DIOL之睪固酮產量高53%。4-dione是一種類固醇其本身為微 弱雄激素，但於細胞内可特別有效轉變成為較為強力的雄激素 睪固酮及DHT。資料顯示投予5_DI〇L後所達血清DHT最高濃度 比DHEA所達最高濃度之半更低，於相對低劑量，5-DIOL之雄 10 激素效果達到最高活性平臺遠比DHEA達到的平臺更低。 第10及11圖驗證DHEA之雄激素活性比5-DIOL相對較高。 資料顯示依劑量而定，DHEA刺激攝護腺結合蛋白質-C1 (PBP-C1)及攝護腺結合蛋白質-C3 (PBP-C3) mRNA濃度比 5-DIOL強二至五倍。PBP-C1及PBP-C3 niRNA濃度為雄激素活 15 性之特別敏感參數，編碼此等蛋白質之mRNA濃度受雄激素調 節。PBP-C1及PBP-C3 mRNA濃度測量值可指示雄激素活性， 原因為作用於轉錄層面的雄激素可提高編碼PBP亞單位成分之 mRNA之穩態濃度 因經皮投予DHEA及5-DIOL二者於指定劑量時對雌激素 20 參數幾乎具有相同效果，DHEA可產生比5-DIOL高二至三倍之 雄激素活性，此處提供相等雌激素效果。 也發現DHEA與5-DIOL間之主要差異為轉換5-DIOL成為 DHEA之氧化Π /S -HSD於系統性投予5-D]OL後具有極低度活

性（參考第3及4圖）。它方面，投予DHEA及5-D]〇:L後血清VD]OL 1263499 濃度類似，指示還原性]7/5八HSD具有相對高度活性。此外因並 無顯著量之DHEA可用於由3yS-HSD直接轉成4-dione，故投予 5-DI0L後，雄烯二酮須衍生自睪固酮的氧化作用。此點符合血 清4-dione(—種高度有效之雄激素前驅物）濃度於5-DI0L處理後 5 比較DHEA處理後遠更低。 不欲受任何理論所限，相信DHEA產生與5-DIOL(相等劑量 )之不同雄激素反應的原因之一為DHEA及5-DI0L係以不同方 式代謝。5-DI0L的代謝（比DHEA之代謝更高）結果導致較少生 成某些類固醇（例如睪固酮及D Η T)及/或於類固醇可發揮雄激素 10 活性之前較為鈍化。如此5-DI0L比較等劑量DHEA導致較少暴 露於強力雄激素，此處氧化類固醇主控作為形成活性雄激素之 儲存處。 進一步如第14及15圖所示，當兩種化合物藉皮下途徑投藥 用於評估最大生物利用率時，5-DI0L刺激雄激素敏感性參數於 15 比DHEA更低值達到平臺。如此顯然經皮投予兩種化合物後（第 8，9，]0及1]圖）觀察得DHEA與5-DI0L之最大雄激素活性差異 並非來自於經皮吸收速率不同。 一般而言，於最高生物利用率條件下yDI〇L之雌激素活性 顯示比等劑量之DHEA活性更高。事實上經皮投藥後，5七I〇L 2〇刺激子宮生長比DHEA強約5倍。因此如前述，於雌激素效果相 等之劑量時，5-D10L產生的雄激素效果顯然比DHEA產生的效 果更低。此外5-DI0L之雄激素效果達到最高效果平臺顯著比 DHEA達成的最高刺激更低。 -合詳述，可彳文予：)-D] 〇L治療或預防性類固醇亦即雄激幸 1263499 及/或雌激素濃度不足或濃度不平衡的病人。特別相信5-DIOL 可用於治療及減低對雌激素活性可產生有利反應之後天病情 ，及其中需要比DHEA提供較低雄激素活性之病情。由於5-DI0L 如同DHEA被定量代謝成為相同的性類固醇，故5-DI0L可用於 5 任何對DHEA產生有利反應的用途，與使用DHEA不同的雄激素 相對於雌激素活性效益。當預定雌激素/雄激素比係於使用 DHEA相對於5-DI0L可達成之範圍時，則可使用DHEA與 5-DI0L之混合物來提供所需比。 可由5-DI0L治療獲益之個體包括全部患有可使用DHEA 10 治療病情的個體，包括5-DIOL、雌激素或雄激素濃度異常低的 個體。降低患有此等病情風險亦屬可能，推薦5-DIOL劑量及目 標血清濃度同此處5-DIOL之治療用途。可由本發明獲益之個體 可藉由測量5-DIOL、DHEA、性類固醇及其代謝產物（特別雄固 酮葡萄醛糖苷及雄烷-3 a J7 /3 -二醇葡萄醛糖苷為雄激素代謝 15 產物及雌酮硫酸鹽及雌二醇硫酸鹽為雌激素代謝產物）之血槳 濃度識別，述於Belanger等人，周邊、正常及腫瘤組織之類固 醇生成、分解及活性（H· Bradlow，L. Castagnetta, S· d’Aquino, L. Gog]iotti編輯）Ann. N.Y· Acad. Sci. 586: 93-100，1990。血清 IGF-1 濃度可如所述測量（Furlanetto 等人，J· C]in. Invest· 60: 648, 20 1977)。

根據本發明之一方面，一旦測值不平衡，5-DIOL較佳係以 足夠升高與維持血清5_DIOL濃度高達年輕成人正常血清濃度 範圍之3倍的劑量投藥。女性5-DIOL血清濃度為4.0 nM至10 nM 及男性〗0至20 nM為佳，例如女性7.0及男性]5 nM。當然臨 1263499 床"可基於病人反應之顯著變化而增減㈣。間歇或連續投 予+破素（例如美卓氧孕固酮（medroxypr〇geste】.⑽幻乙酸鹽，口 服5-ι〇笔克/日）可改善停經婦女接受5_di〇l治療對子宮内膜可 能造成的副作用。 右干較佳具體例中，血清濃度對女性及及男性分別為4〇 7·〇 nlV[或7.0至15 nM。但用於避孕或預防即巢癌《子宮癌目 的’對女性高達15 nM(例如1〇至13 nM)之濃度為佳。用於避孕 可加入雌激素（例如雌二醇獲得血清雌二醇濃度為耻毫微 克/升），添加孕激素特別適合。此處討論之較佳劑量可適當提 10 *俾便達成所需血清濃度，例如由臨床醫師監視個別病人反應 改變劑量。 當VDIOL係藉經皮或穿黏膜技術投藥時輸藥劑量可以已 知方式增減，亦即經由改變洗劑、軟膏劑、乳膏劑、膠漿劑或 貼布之施藥位置，經由改變施藥表面積大小，經由改變活性成 15分濃度，或經由改變媒劑或載劑而增減劑量。例如增加表面積 方、活性成分濃度保持恆定時通常可增加活性成分輸藥劑量。以 相同方式，劑量的輸送隨著輸送基劑之活性成分濃度的增加而 增高，隨著濃度的下降而減低。輸送至血流的劑量也相對於經 皮苓透系統施用於皮膚之身體區域以已知方式改變。改變媒劑 20 或載劑也可以已知方式改變輸送劑量。 較佳血清5-01〇1^濃度係於開始治療前測量，劑量選擇可迅 連提高血清5-DIOL濃度至較佳目標範圍，女性為4〇至]〇】]Μ及 男丨生為]〇至20 nM。I1 返俊監視病人的症狀以及循環的^d】〇l或 比0 g子代έ射產物濃度而證賞已經獲得預定血清;農度及症候 1263499 缓解。然後維持循環之5-DI0L於恆定濃度。用於典型停經後病 人例如此種劑量相當於施用400毫克5-DI0L作為]0%組成物於 50%乙醇-50%丙二醇之一部分至200平方厘米腹部或大腿面積 ，每曰兩次用於50公斤體重。若選擇經口投藥，則對50公斤體 5 重每日可投予兩次每次500毫克。

如本發明使用，5-DIOL可含或未含額外載劑或稀釋劑經口 服途徑投藥，但經皮或穿黏膜途徑投藥時則需要額外載劑或稀 釋劑。口服投藥用藥學組成物中，5-DIOL之濃度較佳相對於組 成物總重為5至99%重量比，更佳50至99%，特佳80至99%。 10 當準備經皮投藥時，5-DIOL之存在濃度較佳相對於組成物 總重為2至20%重量比，更佳5至15%及特佳5至10%。 5-DIOL活性成分可得自斯提伐洛得（Steraloids)公司（美國 新罕普夏州03086威頓郵政信箱310)。較佳5-DI0L前驅藥為下 式兩種化合物，市面上得自斯提伐洛得公司。

]8 1263499 5 -DI0L可單獨投藥或合併其它活性化合物投藥”例如抗雌激素 劑，孕激素劑，雄激素劑，雌激素劑，DHEA或DHEA-S，17 万-經類固醇脫氫酶抑制劑，芳香酶抑制劑，LH RH同效劑或拮 抗劑，及其它生殖腺類固醇分泌抑制劑。DHEA及5-DI0L皆被 5 代謝成為雄激素及雌激素但比例不等。此外5-DI0L具有微弱特 有雌激素活性。結合DHEA或5-DI0L對雄激素或雌激素受體之 不同作用，相信由5-DI0L相對於DHEA可賦予不同的雄激素相 對於雌激素活性比。無須僅利用DHEA的雄激素/雌激素比或僅 利用5-DI0L的雄激素/雌激素比。DHEA及5-DI0L可共同用於提 10 供最佳有效雄激素/雌激素反應比，該比係介於DHEA之比與 5-DIOL之比間。DHEA相對於5-DIOL之相對量可隨預定雄激素 /雌激素反應比係較為接近DHEA之比或較為接近5-DIOL之比 改變。 用於治療乳癌、子宮内膜癌、卵巢癌、子宮内膜炎或其它 15 雌激素敏感性疾病，需要遮斷雌激素的生成及/或活性，至少一 種下列藥劑可與5-DIOL併用：亦即抗雌激素劑，芳香酶抑制劑 ，雄激素化合物，孕激素劑，LHRH同效劑或拮抗劑，或其它 生殖腺性類固醇分泌抑制劑，Π /S -羥類固醇去氫酶活性抑制劑 。單獨5-DIOL或合併DHEA可提供刺激雄激素敏感性功能所需 20 雄激素成分，特別骨質形成及雄激素敏感癌症生長抑制（例如乳 癌及子宮内膜癌）。然後5-DIOL可單獨使用或合併前述可用於 組合之任一種化合物使用。某些病歷中，無5-DI0L存在下， DHEA可併用前述任一種化合物。 另一具體例中，5-D]〇L併用抗雌激素劑' 較佳為EM-800 1263499 ((+»特戊醯氧-3-(4^特戊醯氧苯基曱基(4，，，_2(2_六氫 吼咬基乙氧）苯基）-2H-苯并吡喃），们m，78〇 (7a-[9-4(4,4,5,5,5·五氟-戊基亞磺醯基）壬基]雌·],3·5(ι〇)_三烯 _3,17石-一醇）或任何其它抗雌激素劑用於治療乳癌，子宮内膜 癌，卵巢癌，心血管病’動脈粥瘤硬化及其它雌激素敏感性疾 病。非類固醇抗雌激素劑如E Μ—8 〇 〇傾向於為選擇性雌激素受體 調節劑’其用於乳房組織作為雌激素受體拮抗劑，而對膽固醇 ，脂質及動脈粥瘤硬化仍然提供仿雌激素的有利效果。 10 15 5-0脱劑#可改變。5.DI〇L及其它性_醇及其代謝之 血中濃度指示適當劑量須考慮個體吸收、代謝及反應敏感度變 化。較佳臨床醫師特別於治療開始時監視個別病人整體反應及 血清⑶肌濃度（比較前述較佳血清濃度），及監視病人對治療 的整體反應’若該特定病人之代謝或對治療的反應並非典型反 應則視需要調整劑量。用於合併治療，—_法係單獨心 5-DI〇L以及若有所紐添加其它化合物。用於治純癌、子宮 内膜癌、印巢癌及子宮内膜炎，使用抗雄激素劑+⑼肌或 抗雌激素劑+ 5-DIOL + DHEA^4工收4 士 〃 或“«劑+ DHEA之治療 係同時開始。若加上DHEA、ϋ、、#本十| 雄/放素劑、孕激素劑或雌激素劑 ，則於治療早期及醫生於 、； 炎勾疋/舌性成分以及雄激素或雌激 素代謝產物二者具有有用的整體血清濃度為佳。 根據本發明之治療適合益 …、呢期連績使用。預期5-DIOL治療 單純維持天然類固醇濃度對女性 、 及乃性分別於4至]0】]M及]〇 至20 nM血清濃度範圍。由於持 打i5-D]〇L治療造成之非 作兩預期可減至最低或不存在。 了以糸界已知方式防止持續姓 20 1263499 使用雌激素造成的非期望副作厂 _ 例如以母曰口服劑量2至]〇 *克間歇（某些具體例為 -逆 '，貝）杈卞孕激素類（例如美卓氧孕固 酮乙酸鹽）。任何雄激素副 ~用（、減至最低，原因為5-DIOL之 雄激素效果相當低，大本 —大+接叉本發明方法之病人已 5 DHEA(第 18 圖）。 為了輔助本發明之合併治療方面，用於此處討論之任何指 不，本發明_包含藥學組成物其包括⑽OL或第二或隨後活 f生化口物方、早一組成物供同時投藥。組成物適合以任一種傳統 方式投藥，包括但非限於細 10 、、，二口技樂、經皮投藥或穿黏膜投荜。 策 15 其它具體例則提供套件組，其中套件組包括测二及第二種化 口物方、刀開。也可含括此處討論之其它活性化合物。除了 其它投藥模式之外，根據本發明也可經皮投予第二種化合物及 ^合後，羊述。如此套件組包括經皮投藥之適當材料，例 士库人月^ '洗劑、㈣劑、乳膏劑、持續釋放貼片等。相同 略也可應用於孕激素劑、抗雌激素劑、雄激素劑、雌激素劑、 DHEA、DHEA-S、17万—經類固醇去氫酶抑制劑、芳香酉每抑制 劑或生殖腺性類固醇抑制劑其可經口投藥（或l麵同效劑或拮 抗劑藉注射投藥）。 雖然預期某些情況下5_di〇l可藉注射投藥^旦此種方法不 20佳。原因為使用5伽L之治療經常為長期且無限期，重複注射 投藥不變。 相信治療性投予5-DI0L之較佳途徑為經《、穿黏膜或緩〇 ，須避免注射投予5-D]〇L·的不適及不便。 業界已知多種經皮滲透系統之任—者皆可用於輪详 1263499 5-m〇L。例如㈤肌可製備成軟膏劑、洗劑、膠榮劑或乳膏劑 用於塗抹於病人皮膚或黏膜。活性成分較佳存在量相對於藥學 組成物總重為約5%至20%重量比及更佳約5至12%重量比。另夕子卜 活性成分可置於具有業界已知構造的經皮貼片内，例如£上專 5 利案第0279982號所述構造。 10 15 當配方成軟膏劑、洗劑、膠裝劑、乳膏劑等時，活性化合 物混合可與人類皮膚或黏膜相容的適當載劑，及其可促進化合 物經由皮膚或黏膜之經皮或經黏膜穿透。適當載劑為業界已知 包括但非限於庫索（Klucel)册及格拉紹（G]axai)基劑其係得自° 加拿大格拉紹公司。其它適當媒劑可參考K〇ner&Buri, s^p

Ph議a3(2),115_124，觸。載劑較佳為可於周圍溫度於使用之 活性成分濃度溶解的活性成分。載綱具有足_度維持前祀 物於組成物施用之局限皮膚或黏膜區域，而未流動或蒸發經歷 足夠使前驅物大致穿透皮膚或黏膜局部區域而進人血流獲： 血清5 - DIΟ L濃度可量測且就的增高的時間。載劑典型為若干 成分例如藥學上可接受性溶劑及增稠劑之混合物。有機與無機 溶劑混合物可輔助親水及親脂性質例如水及醇如乙醇。 較佳載劑為若配方成10% 5_DI0L及9〇%載劑（重量比）藉每 曰以可提供100毫克別0L之量施用於腹部每曰兩二欠，將^ 典型病人之5-DI0L血清濃度達高於治療前血清濃度至少^ nM/50千克體重，隨後維持相對恆定5_Di〇l血清漯产。 載劑包括多種化粧品及醫藥業界眾所周知之常用於軟膏 劑、洗劑、膠裝劑及乳膏劑之添加劑。例如可含有香料、^ 化劑、香丨、膠凝劑、增稠劑如叛曱基纖維素、界二性= 20 1263499 安又劑、軟化劑、著色劑及其它類似化學劑。用於治療系統性 疾病時’於皮膚施用位置較佳定期改變以防過度刺激局部類固 醇濃度而可能經由5-DI0L之雄激素代謝產物過度刺激皮膚及 皮脂腺。 5-DI0L或衍生物也可經口服途徑投藥，可與習知藥學賦形 劑例如噴乾乳糖及硬脂酸鎂調配成錠劑或膠囊劑或以可提供 每曰每50千克體重0.050至2.5克之劑量範圍之濃度口服投藥。 活('生物貝可加工成為錠劑或糖衣錠中心，係經由混合固體 粉狀載劑物質如檸檬酸納，碳酸與或鱗酸二妈，及黏結劑如聚 】〇乙縣口比略口定西同，明膠或纖維素衍生物，可能也添加潤滑劑如 硬脂酸鎮，硫酸月桂醋納，「巴西栋搁虫默」或聚丙二醇。當然 口服投藥劑型可添加改善ϋ味物質。活性物質可於適當載= 固體分散體狀態投藥。此等載劑可為選自分子量顧至20000 之聚丙二醇及聚乙歸基吨略咬_ [ f維隆(p。',】d_)，購自加拿 15 大蒙特羅美國化學公司]。 j便用例如硬明膠製成的桎塞型膠囊以 及封閉型軟明膠膠囊包含軟化劑或塑性劑例如甘油。柱塞刑於 囊含有活性物質較佳呈顆粒形，例如混合填充劑如乳糖^糖 、甘露糖醇、^«如馬鈴薯搬粉或戊糖果膠、纖維素衍生物或 高度分散性㈣。於自行膠凝„中，活性物質較佳溶解或^ 浮於適當液體，如植物油或液體聚丙二醇類。 〜 軟膏劑、乳膏劑、膠裝劑或洗劑之活性成分濃度典 2至2則如卿及更佳5至陶相對於洗劑、乳膏劑1 浆劑或軟膏劑總重以重量計）。於料範圍，較⑼度可達^ 20 1263499 當劑量，施用洗劑、仏主 人以、膠紫劑或乳膏劑至比較低劑量所 可此之較小皮膚表面楕， 部分的較大自由戶、、、仔選擇軟膏劑或洗劑施用皮膚 由&。例如業界眾所周知可經 於身體的某些點可反4化。物通吊 … 〃 b點更有效滲透。例如於前臂極為有效 苓透而於手掌顯著無效。 旦洗月"人局劑、膠漿劑或乳膏劑徹底摩擦於皮膚而未見過 7，皮膚至施ϋ後已經出現大半經皮參透較佳至州分鐘及更 佳至少30分鐘不洗該區。 10 經皮貼片可根據已知技術用於輸送5.DI〇L。典型可長期施 關如〇_5至4日，但典型活性成分接觸較小表面積，可獲得較 ^且穩定之活性成分輸送。 已經開發多種經皮輸藥系統且已被使㈣合輸送本發明 之活性成分。釋放速率典_由母質擴散控制，或由活性成分 通過控制膜控制。 15 經皮裝置之機械結構方面«界已知且討論於例如美國 專利第+^()3^^922 ^^^666^^624^ ' 3,742,951 - 3,797,444，4,568,343 > 4,064,654 > 5,071,644 > 5,071，657號’其揭示併述於此以供參考。其它背景則由歐州專 利案0279982及英國專利申請案2】85]87提供。 裝置可為業界已知之任—種—般類型包括黏著劑母質及 貯器型經皮輸送裝置。裝置包括含藥母f合併纖維其吸收活性 成分及/或載劑。貯器型裝置之貯器係.由不可透過載劑及活性成 为之各、合物膜界限。 經皮裝置中，裝置本身含有活性成分接觸預定局部皮膚表 1263499 面。此種裝置中活性成分之載劑黏度比較乳膏劑或膠漿劑較為 ^纟k皮k置之〉谷劑糸統包括例如油酸、線性醇乳酸酷及一 丙一醇或業界已知之其它溶劑系統。活性成分可溶解或懸浮於 載劑。 5 , 马了附著於皮膚，經皮貼片可安裝於手術用黏膠帶其中間 鑽—孔。黏著劑較佳由離型襯覆蓋而於使用前保護黏著劑。適 合離型之典型材料包括聚乙醯及聚乙烯塗層紙較佳塗有聚矽 虱方便撕離。施用於裝置時離型襯單純撕離並將黏著劑附著於 病人皮膚。美國專利第45l35,480號其揭示内容併述於此以供參 1〇考，n等人敘述具有非黏著性裝置用於牢固固定裝置於皮 膚之替代裝置。 15 20 除了 w述較高劑量適應症（例如避孕）以外，5_di〇l之目桿 血清濃度可減美，而無論5_DIQL料為更年期治療之合併治 療之-部分或用於(其本身或合併抗雌激素劑、雄激素劑、孕激 素劑、《素纟如^名翻醇去氫_侧、芳香酶抑制劑 、生殖腺性_醇生成抑制劑、LH_效劑或枯抗劑、刪八 及/或DHEA-S)治療心血管病、骨質疏鬆症、皮膚劣化、停經、 陰這委縮、展失禁、子宮癌、卵巢癌、骨質疏鬆症、子宮内膜 癌、性腺魏低T纽料退料縣發明之料，或用於仏 療於性類固醇特別5伽L及其代謝產物之濃度減低或不^ 相關病情皆如此。 5-] -〇肌特別可用於治療需要最低雄激素效果的病情，原因 為對相等雌激素效果而言5-職之雄激素緣咖A更低， 之最大效

使用5』! ◦ L達成之最切«效果係低於D Η E A達成 1263499 果。5-D10L特❹於治療對雌激素治峨使用雌激素前驅物 如臟八治療）有反應的婦女病情，原因為5伽L之雄激素活性 比麵A低，因而可降低可能之雄激素或男性化影響，同時仍 ^供預定雌激素活性。此㈣f於停經婦女需要比d職所 月& ^供之更咼雌激素/雄激素比。 10 15 20 因5-DI0L為雄激素劑及雕激素劑之天然來源，此種化合啦 之分泌隨著老化顯著減低（第17圖），其補充須具有最低非期以 的副作用。其特㈣激素活性須可補償停經後卵潮分泌雌激, 的損失，此乃卿八所無法達成的效果。本發明可用於其中㈣ 激素受體活化具有有利效果之多種疾病，特別«疏鬆症及待 經症狀包括陰道萎縮、失眠、焦躁不安、心血管病、尿失苹及 喪失性慾。此外本發明可用於治療及預防對雄激素受體的活化 有反應的病症，例如„流失、肥胖、乳癌、子宮_癌、印 巢癌、尿失禁、生殖腺功能低下、喪失性您、喪失肌肉質塊、 無精打彩姨島素抗性及其它老化過程。又51)肌可用於治療 或預防任何軸環性類固醇亦即#激素類及雄激素類之整體 平衡之改良可產生有利反應之任何情況。 預/月對此處所述治療有反應的病情可以習知方式診斷。例 如乳癌的出現通常輸我檢_得知，臨床上由醫生檢查 房攝影得知。它方面，子宮内膜癌通繼子宮内膜生 _癌症皆可藉#界人士i所周知之標準理學方法診 ΓΓ估’例如骨掃描，胸部x光，骨路研究，肝臟超音波攝 '?爾臟物料竭·⑽"，咖錢學檢查。 知經的開始通常首先係發現熱湖红。進一步特徵可根據已

26 1263499 知技術決定。例如參考停經（Herbert J. Buchsbaurm，編輯）， Springer Verlag，紐約（1983年），222頁。陰道萎縮經常由性交 困難及陰道感染表現。陰道萎縮、生殖腺功能低下、性慾減退 、失眠、焦躁不安、憂鬱症及尿失禁全部皆以眾所周知的方式 5 特徵化。至於前述疾病例如參考Korenman，Stanley G，「性功 能障礙」威廉氏内分泌學教科書，（Jean D. Wilson及Daniel W. Foster，編輯），WB Saunders公司，費城，1033-1048 頁，1992 年。 它方面，骨密度可藉業界人士眾所周知之標準方式測量例 10 如QDR(定量數位放射性攝影）、雙重質子吸收光譜術及電腦斷 層攝影。血漿及尿液鈣及磷酸鹽濃度、血漿鹼性磷酸酶，骨鈣 素（osteocalcin)，抑妈素（calcitonin)及帕拉戶斤蒙（parathormone) 濃度以及尿液羥脯胺酸、去氧吡咯啶及鈣/肌胺酸酐比皆為骨質 形成與吸收的可靠參數。 15 皮膚之膠原或結締組織喪失經常伴隨以老化，特別50歲以 上。可由皮膚皺紋及/或彈性低顯示。皮膚狀態可藉目測檢視， 觸診及較為精密地使用衝頭生檢及標準組織學檢查評估。 體重之正常範圍為業界人士眾所周知，膽固醇及脂蛋白可 藉標準技術例行檢查(Nestler等人，J. C]in. Endocrino]. Metab· 20 66: 57-61，1988以供參考）。 此外5-DIOL可作為女性避孕劑。先前技術女性避孕通常係 投予雌激素，雌激素於循環濃度增高時可降低下視丘分泌 LHRH，而其又減少腦下垂體之LH分泌。結果LH分泌檢定使卵 巢功能下降特別排卵功能下降。加上孕激素控制子宮内膜的生 1263499 長以及將陰道及子宮頸的分泌轉變成不利於精蟲能力及受孕 力的環境。 本發明中，5-DI0L提供雌激素用於避孕，同時且滿意地提 供極少提高雄激素濃度，雄激素也有助於避孕，因雄激素也可 5 抑制LHRH及LH的分泌。雄激素特別於更年期周圍婦女（以及停 經後婦女不再需要避孕時）提供較為需要的骨質形成及對抗骨 質流失。除了本身為微弱的雌激素外，投予5-DI0L產生雌激素 也促成減少骨質流失。如同此處其它用途，使用5-DI0L替代性 類固醇（此處為雌激素）可防止外部投予高劑量雌激素，如此避 10 免雌激素過度接近各種組織，許多組織無需雌激素。以5-DIOL 取代，雌激素及/或雄激素於相同組織係由天然過程產生，此處 需要雌激素及/或雄激素且通常將5 - DI〇L轉成雌激素及/或雄激 素。雌激素及雄激素之相對比例比任何特定組織也維持於大致 天然濃度。 15 由於此處所述避孕激素降低卵巢功能，故卵巢的雌激素及 孕酮產量減低。如此可投予孕激素（例如美卓孕酮乙酸鹽，美潔 卓（megestro])乙酸鹽，諾辛翠（norethynodrel)，L-諾潔翠 (L-norgestrel))可投予作為避孕方法之一部分以防需要高劑量 5-DI0L使子宮内膜過度增生。孕激素可於包括5-DI0L之藥學組 20 成物投藥或分開投藥。某些具體例中，孕激素可每個月間歇投 予12-14日，或每隔數個月（例如每2-5月）投予12-]4日或連續投 藥，隨5-DIOL之使用劑量而定，孕激素於生理劑量對子宮内膜 無刺激性。孕激素劑量可為先前技術使用範圍，但較佳較低， 其理由如後述。 1263499 因5-D10L於許多組織轉成雌激素，故避孕療法不再需要添 加雌激素來補償卵巢雌激素產量的減低。但若有所需可給予最 低劑量。用於避孕方法時添加雌激素之較佳劑量為可獲得每升 50-300毫微克雌二醇之量或相當量。較佳添加雌二醇對5-DI〇L( 5 重量/重量）之比係於100:1至]0,000:1，較佳200:1至5,00(hl及特 佳300:1至3000:1之範圍。如同添加孕激素，添加雌激素也可作 為含括5-DIOL(若使用時5-DIOL前驅藥）之藥學組成物之一部 分投藥或分開投藥。 若干具體例中，5-DIOL、孕激素及雌激素全部皆共同或分 10 開作為組合治療之一部分投藥。組合治療可同時提高活性劑血 中濃度。如此單純要求活性劑係於投藥時間充分接近而可使此 等藥劑之血中濃度同時升高。 合併使用含雌激素及孕激素之避孕藥未曾顯示可降低乳 癌風險(Romiev等人，1990，癌症66·· 2253-2263)。此等資料符 15 合已知之雌激素及孕酮對乳房細胞表皮增生之有絲分裂的影 響，如此可說明於黃體期中期乳房細胞增生高峰（Masters等人： J. Natl. Cancer Inst. 1977, 58: 1263-1265; Anderson等人，1982, 英國癌症期刊46 376-382)。事實上，停經前婦女使用避孕藥之 總乳房細胞增生率與未治療之婦女無差異（Potter等人，1988; 20 英國癌症研究58: 163-170; Going等人，1988; Am· J. Pathol· 130: 193-204)。5-DIOL之雄激素成分可降低雌激素及孕激素之此種 可能有害的影響。 成骨細胞（骨質生成細胞）含有酵素可將5-D10L轉成雌激 素及雄激素。因此5-D]〇L可用於替代(或添加）雄激素、雌激素 1263499 、或DHEA用於治療或預防骨質疏鬆症。骨質產生足量雄激素（ 、 由於投予5七]0L的轉化）刺激骨質形成及減少骨質流失。此外 ，5-DI0L之低雌激素活性及投予5_m〇L產生雌激素可促成減少 骨質λίίΐ失。 5 由方'月岔度可於特定低劑量雄激素受刺激，5-DI0L·具有比 _ DHEA更低的雄激素/雌激素活性比，應可以極少造成雄性素分 泌過多症風險劑量下對骨質具有最高有利效果。 此外，因5-DI0L(若有所需或其前驅藥）藉天然機轉絕對僅 表正吊根據其局部需求進行轉化的組織職雄激素及雌激素 _ 0故其田作用比較先前技術外部投予活性性類固醇（其可能接近 彳何、且4其既未產生也不需要特定雄激素或雌激素）可使副作 用大減或肩除。該等組織之性類固醇之生理平衡不受本發明干 擾，此乃與先前技術之全部賀爾蒙補充療法相反。由5_di〇l產 生雄激素及雌激素之相對比例也大致為正常比例，並非由體外 ‘ 15投予活性性類固醇造成某一型性類固醇比例異常升高，如此造 成全部組織包括不需要此種治療的組織皆暴露於藥物。 較佳更年期症狀之治療中，本發明尋求同時維持5_di〇l φ 、雄激素、及雌激素血中濃度於正常停經前期之參數範圍内。 不欲受理論所限，相信維持適當前驅物濃度可使天然酶如W 20姻員固醇去氫酶，3/5姻固醇氫化酶，芳香酶及5『還絲 · _ 更能調節雄激素及雌激素的產生且維持於更類似停經期前之 、 絕對及相對;農度。如此本發明預期不僅雌激素同時雄激素也彳 、、隹持於較佳平衡。事實上目標組織具有酶學機轉可根據局部需 求合成及鐵化雄激素及/或哗激素（Labne屬κ Μ· End〇c】·丨· 30 1263499 C] ] j_c] 18，199】）。 本產r'j述5①I〇L可合併雌激素投藥。但因比較DHEA，雌激 相對較高，以及5挪l本身輸娜激素， 之、添加雄激素以及未產生伴隨高濃度DHEA-種較為強力 U素化合物非期望的雄激素副作用而達到財雌激素濃 X同理’因5伽L為微弱雌激素，故無需孕激素治療。 10 15

但若測定需要額外雄激素，則雌激素與5_m〇L可同時或分 開投藥。此外僅須5挪L及雕激素叹夠使個別血清濃度達到 财程度的方式投藥。根據本發明之合併治療，5_臟濃度可 維持於預定參數範圍内，同時雌激素濃度維持於預定參數範圍 内。當使用雌二醇時，血清雌二醇濃度典型須維持於％至· 毫微克/升，較佳100至175毫微克/升及最佳125至175毫微克/升 之範圍。使用另—種雌激素時，血清濃度可以已知方式改變而 思相對方、雌—g?之雌激素活性差異，俾便達到正常停經前雌 激素濃度。例如若使用美翠農（Mestran〇])則需較低濃度。適當 血清雌激素濃度也可由更年期症狀的消失評估。5损沉血清濃 度典型維持於婦女4至1〇 nM及男性10至2〇 nM，或於某些 例女性4.0至7.0 ηΜ或男性7.0至15 nM。 若雌激素合併5-DIOL，較佳為雌二醇，但可為雌酮硫酸鹽 2〇或另一種可直接作為或於適當轉換後作為雌激素受體同效劑 的化合物。當分開投藥時可使用市售雌激素補充劑例如普馬林 (PREMARIN)得自Ayerst(加拿大魁北克聖勞倫特）。典型病人達 成預定血清雌激素濃度之適當雌激素劑量為口服投藥時每5〇 千克體重每日0.3至2·5毫克普馬林。本發明之某些具體例，雌 31 1263499 激素可為17 yS-雌二醇於貼布經皮投藥，貼布可以商品名伊塔登 (ESTRADERM)得自 '汽巴公司，其中每日劑量為〇 〇5至〇 2毫克/ 曰/50千克體重。用於典型病人，性類固醇前駆物5_di〇l達度預 定前驅物血清濃度之適當劑量於口服投藥時為〇.]〇至2.5克/日 5 /5〇千克體重。其它前驅藥可以其劑量投藥，劑量取決於其於活 體内轉換成5-DIOL之轉換率。容後詳述，5_DI〇L也可經皮或經 黏膜投藥而於以逐量達到目標血清濃度。 另一具體例中，停經如前述使用5_DI〇L治療，合併定期投 予孕激素如美卓氧孕酮乙酸鹽（例如普維拉（pr〇veia))其較佳為 10間歇投藥，例如每日2_10毫克連續12日，該12日期間可間隔2〇 日至5個月。也可使用5_DI〇L、雌激素及孕激素的合併治療， 較佳係於前文對各成分討論之劑量。 等劑I5-DIOL可用於各種適應症，但避孕及預防卵巢癌及 子宮内膜癌時以高達約15 llM 5-DIOL血清濃度為佳。 15 對於所有其它適應症當需要雄激素類及/或雌激素類二者 時可使用前述尋常劑量。同理當合併抗雌激素用於治療或預防 乳癌、子呂内膜癌作為其它雌激素敏感疾病時可使用等劑量 5-DIOL。若干病例使用芳香酶抑制劑、丨7石-羥類固醇去氫酶 抑制劑、雄激素、孕激素、生殖腺類固醇生成抑制劑、 20同效劑或拮抗劑時推薦使用等劑量5-DIOL。 L實施方式】 下列實例驗證5-DIOL之雄激素及雌激素效果且提供 5-DIOL與DH.EA之相對活性比較。如前述顯示5—D1〇L《較佳雌 激素活性相對於雄激素活性且與DH e A比較。 1263499 材料及方法 動物 雄及雌史伯袼拉力大鼠[Cli:CD(SD)Br]體重22孓25〇克及 175-200克係得自查爾士河加拿大公司（魁北克聖康斯坦）且接 5受每日照光14小時（照光始於们:15)之計晝且每蘢圈養兩頭。動 物接受普麗那（Purina)大鼠食及自由給水。動物研究係遵照「實 驗動物養護及使用指南」進行。 處理 動物隨機分成指定組別（皮下投藥及局部投藥組分別每組8 1〇及1 〇頭大鼠）。適當組別動物於乙醚麻醉之下接受雙側卵巢切除 (〇VX)或睪丸切除（0RCH)，其它大鼠則用作完好對照組。DHEA 及5-DIOL得自斯提伐洛得（美國新罕普夏州威爾頓）溶解於5〇% 乙醇―50%丙二醇，每曰施用兩次（〇.5毫升）於背部皮膚面積（2厘 米X 2厘米）連續7曰始於〇^/乂或〇11(：]9[當天。至於皮下投藥， 15 DHEA及5‘DIOL答解於〇.5毫升；! 〇%乙_ _〗％明膠_〇·9%氯化納 且每曰注射兩次連續7曰也始於OVX或ORCH當天。 開始治療後7日或末次投予類固醇後約12小時動物藉斬首 木又死。7刀別收集血樣，血清至檢定分析前皆冷凍於·2〇它。即刻 取出子S、卵巢、腹腔攝護腺、背部攝護線及貯精囊，去除結 2〇 、帝、、且、·哉及知肪組織並稱重，於液態氮冷凍及儲存於-80°C至檢定 分析。三頭得自處理組之大鼠灌流三聚曱醛用於原位雜交。 類固醇分析 J固s子卒取。乙醇毫升）加至】毫升血清及於g離心 ]5分鐘。所得丸粒進一步使用2毫升乙醇萃取，於別㈧X g第二 1263499 次離心15分鐘後合併兩份上清液。懸浮液如前述再度離心，上 清液經傾析且合併先前所得乙醇萃取物。然後有機溶劑於氮氣 蒸發，殘餘物溶解於1毫升水：甲醇(95:5, v/v)。C-18管柱（邦伊 魯（Bond-Elm)，英國巴克阿莫山公司）之調理方式係接續通過j 〇 5毫升曱醇，10毫升水及〗〇毫升曱醇/水（5:95, v/v)。萃取物溶解 於水.曱醇(95:5，v/v)然後沉積於C-18管柱。以2毫升水曱醇· 曱醇(95:5, v/v)及5毫升曱醇：水（50:50; v/v)洗滌管柱後，5亳升 甲醇：水（85:15, v/v)加至管柱溶離未接合的類固醇。 於LH-20管柱層析及放射性免疫檢定分析。於西法雷斯 10 (Sephadex) LH-20管柱（法瑪西亞公司，瑞典烏普莎拉）層析係如 前述進行（Belanger等人，1988)。簡言之類固醇溶解於丨毫升異 辛烷/曱苯/曱醇（90:5:5, v:v:v)並沉積於LH-20管柱。收集溶離分 ，蒸發去除有機溶劑後，各種類固醇濃度係如前述藉放射性免 疫檢定分析測定（Belanger等人，1980 ; Belanger等人，1988 ; 15 Belanger等人，1990)。 cDNA探針之製備 含有與PBP-C1編碼mRNA互補DNA片段之質體係由 Malcolm G. Parker博士（英國倫敦帝國癌症研究基金會）善意提 供。PBP-Cl cDNA之434氮驗基對Pst—鴻剪片段於5%(重量比/ 容積)聚丙稀酿胺凝膠電泳後藉電溶離純化(拜爾拉得(B — 電溶離機’型號422 ’加州李奇蒙拜爾拉得公司）。純化後片段 以[a-35S]dCTPaS(加拿大奥蘭多奥克維爾阿莫山公司）藉隨機 引子方法（Geinberg及V0ge]ste】n，] 983)加放射性標記至高比活 性（]09 dpm/微克）c 20 1263499 藉原位雜交測量PBP-C ] mRNA濃度 攝護腺切片與PBI"C]探針作原位雜交係如前述進行 (PelleUer等人，1988)。簡言之大鼠灌流4%三聚甲醛及〇1 “磷 酸鹽緩衝液(PH 7.4)組成的固定緩衝液。腹腔攝護腺脫去脂肪及 5結締組織，後固定於固定緩衝液於4°C2小時及隨後浸泡於0.05 M PBS含15%(重量比/容積）隸。隨後腹腔攝護腺於液態氮急 冷的異完迅速冰;東。由腹腔攝護腺所得多片（6至S片）1〇微米 組織切片置於明膠塗層玻璃片上。前雜交緩衝液含有5〇%甲臨 胺，5x SSPE (lx SSPE=0.18 Μ氯化鈉，1〇⑴乂磷酸二氫鈉，及 10 1 mM EDTA，pH 7.4)，（U%硫酸十二醋鈉，〇1% BSA，〇1〇/❽ 費可（Ficoll)，〇·1%聚乙烯基吡咯啶酮，〇2亳克/亳升酵母tRNA ，〇·2毫克/毫升變性鮭睪iDNA&2微克/亳升p〇〗y(A)。玻璃片 於刖雜父緩衝液於37°C雜交48小時，緩衝液額外含有4%葡萄聚 糖硫酸酯及飽和濃度（l.(M.5x 1〇7 cpm/毫升）pBp_cl cDNa探 15針。然後切片於2x SSC (lx SSC = 0.15 Μ氯化鈉及〇.〇15 M檸檬 酸鈉，pH 7.0)洗兩次歷30分鐘，脫水及暴露於自動放射性攝影 。為了測定非特異性背景雜交量，各處理組之攝護腺切片使用 胰核糖核酸酶-A (20微克/毫升）於室溫處理丨小時，隨後得自大 鼠腦、腦下垂體、腎及肝之切片與PBP_C1探針雜交。觀察得非 2〇 特異性雜交（未顯示資料）。 LH放射性免疫檢定分析 血清LH係藉雙重抗體放射性免疫檢定分析使用大鼠激素 (LH.-_i-6用於碘化；LH-RP-2作為標準）及由美國巴爾的摩國家攝 護腺計畫慷慨供給的兔抗血清a n丨】_卜LH _ S - 8測量。 1263499 統計學分析 、&免疫w分析貧料係、使用基於RQdb㈤及乙⑽^ (Rodb喊1974)模式„程式分析。血榮類固醇濃度顯示為各樣本 之重複測定之平均土標準差。原位雜交資料獲得如下：對各攝 5護腺組織切片，20個面積〇.25平方厘米之隨意選擇區(腺胞腔除 ::)使用影像研究分析系統(伊利諾州阿靈頓高地阿莫山公司) /。刀片的平均光②、度值。資料顯示得自腹腔3攝護 腺之U個攝護腺切片之2〇個讀值之平均土標準差。根據

Dunc^n-ICrsrner (Krarner ^ -r_ >- 〈 Γ，1956)之多重範圍試驗測量統計學意 10 義。 士第1圖所7F ’ DHEA及5.DIOL對子宮重量—種雌激素活 性才曰產生類似刺激效果。特別投予1〇毫克及外毫克劑量 DHEA及5 DI0L&卵巢切除大鼠產生可相媲美的子宮重量刺激 效果而1及3¾克劑置並無顯著效果。但於使用的最高劑量1〇〇 15毛克5 D〗〇L產生較兩刺激效果，對卵巢切除抑制作用產生最 南52%i£轉效果，比較DHEA之最高逆轉效果。 5-DI0L及DHEA對血清影響顯示於第2圖。已知血清 LH為雄激素及雌激素活性之敏感指標，基於|現雄性及雌性動 物經過切除生殖腺之後性類固醇主要抑制性反饋作用去除時 20 ，血清 LH 迅速升高（Ferland 等人，於：Labne，F.，Meites，J.;及

Pel]et]er，G.(編輯），下視丘及内分泌功能，]9]_2〇9頁，紐約： Plenum出版社，]976年）。於1〇毫克劑量，孓m〇L產生較高效果 且完全逆轉卵巢切除的強力刺激作用至0 86± 〇17毫微克/毫升 ，而對應劑量之DHEA僅引起6 ] % (p<〇.()])抑制效果。但於更高 1263499 劑量，DHEA及5-DI0L皆有類似效果，分別使用30毫克及]00 毫克劑量，可抑制血清LH濃度比完好對照動物數值低約35%及 70%。 對投予5-DIOL及DHEA產生的主要類固醇及前驅物循環 5 濃度的影響顯示於第3至7圖。特別如第3圖所示，使用DHEA治 療引起血清DHEA由對照卵巢切除動物之無法偵測濃度於投予 3，10，30及100毫克劑量後分別升高至1·74± 0.30 nM (p<0.01) ，3.67± 0.59 nM (p<0.01)，12.9± 3.69 nM (p<0.01)及39.2± 6.5 nM(p<0.01)。它方面，使用相等5-DIOL劑量產生相對穩定但低 10 濃度血清DHEA。 第4圖顯示投予5-DIOL及DHEA後產生5-DIOL血清濃度。 雖然於低劑量1及3毫克，5-DIOL可產生較高濃度5-DIOL，但於 較高劑量5-DIOL及DHEA產生的5_DIOL濃度並無顯著差異。 投予DHEA及5-DIOL後產生的4-dion、睪固酮及二氫睪固 15 酮（DHT)血漿濃度示於第5至7圖。血清4-dione(—種由DHEA產 生的雄激素指標）濃度隨劑量而定比5-DIOL產生者高30%至 125%。 血清DHT及睪固酮二者皆為雄激素活性指標獲得一致結 果。特別DHEA產生比5-DIOL高30%至125%之血清DHT，於最 20 高劑量時，DHEA產生比等劑量5-DIOL高53%之對睪固酮的刺 激效果。此外，5-D10L產生之血清DHT濃度於各劑量範圍大致 維持恒定且相當低。 第8至11圖針對DHEA及5-DIOL對睪丸切除大鼠之多種眾 所周知的雄激素敏感性參數的影響。第8圖顯示對腹腔攝護腺 1263499 重量影響，其中於10毫克劑量DHEA可逆轉睪丸切除之抑制效 果約75%，而更高]50%劑量（15毫克）5-DIOL僅能產生50%逆轉 效杲。此外，DHEA提高貯精囊重量強1倍，如第9圖所示。 此外如第10及11圖所示，DHEA可產生5-DIOL對編碼攝護 5 腺結合蛋白質（PBP)之C1及C3成分之mRNA濃度影響為2至5倍 。如前述此種濃度為雄激素活性的精密指標。此外，使用最高 劑量5-DIOL達成C1及C3 PBP mRNA最高濃度分別僅為DHEA 達成濃度之17%至37%。 第12至16圖顯示皮下投予DHEA及5_DI〇L對前述選定參 10 數的影響。因兩種類固醇經皮下注射，結果可更直接測量DHEA 及5-DIOL於最佳生物利用率條件下之相對雌激素及雄激素活 性。特別如第12圖所示，5-DIOL於最低使用劑量亦即0.3毫克僅 能逆轉90%—週卵巢切除對子宮重量（一種雌激素敏感性參數） 的影響；但DHEA於相等劑量並無顯著效果。但於較高劑量時 15 ，兩種類固醇所能達成的最高刺激效果類似，具有2.8至2.9倍 刺激。此外由子宮重量半最高刺激劑量（DHEA為約2.5毫克及 5-DIOL為0.5毫克）求出皮下注射後5-DIOL對子宮的親和力比 DHEA高約5倍。此外如第13圖所示，5-DIOL抑制閹割造成血清 LH濃度升高比DHEA強5-7倍。 20 如第14圖所示，使用5-DIOL所得對攝護腺及貯精囊重量（ 雄激素敏感性之參數）之最大刺激效果為DHEA達成值之約70% 。但由可獲得睪丸切除之半最高逆轉影響劑量（ED50)計算， DHEA及5-D10L約略強度相等（亦即ED50值為1毫克）。它方面， 最高DHEA及5-D]〇L效果之ED50值分別計算為2.5毫克及].2毫 1263499 克，估計5-DI0L比DHEA強兩倍。同理，如第15圖對貯精囊重 量顯示，5-DI0L之最高刺激效果約為DHEA之70%，對睪丸切 除影響之最大半逆轉估計對DHEA及5-D10L分別為2.5毫克及 1.2毫克，5-DIOL之強度估計高兩倍。於C1及C3 PBP mRNA之 5 攝護腺濃度，5-DIOL比DHEA強兩倍。第16圖顯示對血清LH濃 度的影響，5-DIOL比DHEA強約10倍。 如前述可知於每種濃度，DHEA提供的雌激素對雄激素效 果比皆顯示比5-DIOL偏重於雄激素效果。 雖然已經就特定具體例說明本發明，但業界人士顯然易知 10 可作多種變化及修改及其它用途。 【圖式簡單說明】 第1圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 次經歷7天，對卵巢切除大鼠之子宮重量的影響。完好動物 作為額外對照，化合物係溶解於50%乙醇-50%丙二醇，以 15 0.1毫升投予背部皮膚區（2厘米X 2厘米）。 第2圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 次經歷7天，對卵巢切除大鼠之血清LH濃度的影響。完好 動物作為額外對照，化合物係溶解於50%乙醇-50%丙二 醇，以0.1毫升投予背部皮膚區（2厘米X 2厘米）。 20 第3圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 次經歷7天，對卵巢切除大鼠之血清DHEA濃度的影響。完 好動物作為額外對照，化合物係溶解於50%乙醇-50%丙二 醇，以0.1毫升投予背部皮膚區（2厘米X 2厘米）。 第4圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 1263499 次經歷7天，對卵巢切除大鼠之血清5-DI0L濃度的影響。完 好動物作為額外對照，化合物係溶解於50%乙醇-50%丙二 醇，以0.1毫升投予背部皮膚區（2厘米X 2厘米）。 第5圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 5 次經歷7天，對卵巢切除大鼠之血清4-dione濃度的影響。完 好動物作為額外對照，化合物係溶解於50%乙醇-50%丙二 醇，以0.1毫升投予背部皮膚區（2厘米X 2厘米）。 第6圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 次經歷7天，對卵巢切除大鼠之血清睪固酮濃度的影響。完 10 好動物作為額外對照，化合物係溶解於50%乙醇-50%丙二 醇，以0.1毫升投予背部皮膚區（2厘米X 2厘米）。 第7圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 次經歷7天，對卵巢切除大鼠之血清二氫睪固酮濃度的影 響。完好動物作為額外對照，化合物係溶解於50%乙醇-50 15 %丙二醇，以0.1毫升投予背部皮膚區（2厘米X 2厘米）。 第8圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 次經歷7天，對睪丸切除大鼠之腹腔攝護線重量的影響。完 好動物作為額外對照。 第9圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 20 次經歷7天，對睪丸切除大鼠之儲精囊重量的影響。完好動 物作為額外對照。 第10圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 次經歷7天，對睪丸切除大鼠之PBP-C1 mRNA濃度的影響。 完好動物作為額外對照。 40 1263499 第11圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DI0L，每曰兩 次經歷7天，對睪丸切除大鼠之PBP-C3 mRNA濃度的影響。 完好動物作為額外對照。 第12圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DI0L，每曰兩 5 次經歷7天，對卵巢切除大鼠之子宮重量的影響。完好動物 作為額外對照。 第13圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DI0L，每曰兩 次經歷7天，對卵巢切除大鼠之血清LH濃度的影響。完好動 物作為額外對照。 10 第14圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 次經歷7天，對卵巢切除大鼠之攝護線重量的影響。完好動 物作為額外對照。 第15圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 次經歷7天，對睪丸切除大鼠之儲精囊重量的影響。完好動 15 物作為額外對照。 第15圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 次經歷7天，對睪丸切除大鼠之儲精囊重量的影響。完好動 物作為額外對照。 第16圖係經皮投予遞增劑量之DHEA或5-DIOL，每曰兩 20 次經歷7天，對睪丸切除大鼠之血清LH濃度的影響。完好動 物作為額外對照。 第17圖係URMA-r-53-97( 5-DIOL衍生物之口服吸收，150 微莫耳，灌流後6小時餵食5CX雄大鼠）。 第]8圖係URMA-r-53-97( 5-DIOL衍生物之口服吸收，150 1263499 微莫耳，灌流後6小時餵食5CX雄大鼠）。【圖式之主要元件代表符號表】

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Claims (1)

1263499 ,^ re j \ 」— i 监！ ιΛν -./:....:、」 j 二，\ 、…’ ? ' 1 —.… — 第88 1 09823號專利再審查案申請專利範圍修正本 修正曰期·· 2006年6月 1 · 一種治療有效量之抗雌激素劑與雄-5-烯-3 /3，17 $ -二 醇或抗雌激素劑與雄-5-烯-3 /3，1 7 /3 -二醇之下列前驅 藥之一者的用途，該用途係製造一用於治療或預防與 生殖系統無關之更年期症狀的藥品：

C〇〇H Ο OH 1263499 2 . —種治療有效置之抗雖激素劑與雄-5 -稀-3 /5，1 7 0 -二 醇或抗雌激素劑與雄-5-烯-3 /3，17 /3 -二醇之下列前驅 藥之一者的用途，該用途係製造一用於治療或預防與 雄激素或雌激素之降低相關的骨質疏鬆症症狀的藥 口 · 口 σ · 0

、C〇OH 1263499 3. —種治療有效量之抗雌激素劑與雄-5-烯-3 /3，17 /5 -二 醇或抗雌激素劑與雄-5-烯-3 /3，1 7 /3 -二醇之下列前驅 藥之一者的用途，該用途係製造一用於治療或預防乳 癌、子宮癌、卵巢癌或子宮内膜炎的藥品：

0 Π COOH

1263499 Η . 素劑與 酵或抗雌激素劑與雄丄物，17/?_二醇之；万： 藥之-者的用途，該用途係製 歹“’j ^ L 用％ /σ療或預防途 狀動脈硬化’胰島素抗性、記憶力喪失以及阿茲海默 氏症的藥品： 雄激素或雌激素之降低相關的肥胖、心血管疾病、粥

-4- 1263499 柒、指定代表圖： (一） 本案指定代表圖為：第（1)圖。 (二） 本代表圖之元件代表符號簡單說明： 捌、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：