TWI239248B - Preparation for determining pyrimidine metabolizing activity - Google Patents

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1239248 A7 -------_ B7 _ 五、發明説明。^一^ [技術領域] 本毛月係有關於一種可有效地使用於測定並評定關於 各個待測者有無喊咬代謝異常、其程度等、或射代謝能 製诏更詳而§之’本發明係有關於利用呼氣等簡便地 測=關於各個待測者對以5·敦尿料為首之各種氣尿㈣ 系藥物之代謝月b之製劑。又，本發明係有關於該製劑之各 種用途。 [習知背景] 氟尿喷疋（以下，本說明書中亦簡稱「5_FU」）及 -各種何生物（m (tegafur)、卡摩富爾（⑽则加） 及杜克西氟瑞定（d〇Xyfluridine)等）是現在最廣泛地用 來作為抗癌劑之氟尿嘧啶系藥物。 、5-FU主要係藉於肝臟之嘧啶代謝過程之一連串嘧啶 代謝系酵素之作用而被分解且不活性化。具體來說如p 圖所示，投藥於體内之5_FU首先藉喷咬代謝過程中之第丄 酵素二氫料錢酶（DihydfG Pyfimidine Dehydn)g_e:以 下本說明書亦簡稱「_」）之作用成為5_敦二氮尿射 (5-mu〇ro Dihydrouracil:以下本說明書中亦簡稱「fdhu」）， 接著這個藉嘧啶代謝過程中之第2酵素二氫嘧啶酶 (Dihydropyrimidenase:以下，本說明書亦簡稱「DHpase」） 之作用成為氟+服基丙酸（Fluoro_万_urdd〇pr〇pi〇nic add : 以下本說明書亦簡稱「F+UPA」），這個更藉嘴。定代謝 過程:之第3酵素^脲基丙酸酶（，销id〇propionase :以 下本說明書亦簡稱「点-UPase」）之作用代謝為氣_点_丙 ^紙張^^適财81國家標準（CNS) A4規格⑵GX297公釐) -- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、可| -4- 1239248 A7 _B7___ 五、發明説明（2 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 胺酸（Fluoro-冷-alanine :以下，本說明書中亦簡稱「F--丙胺酸」）及二氧化碳（最終代謝產物），而各自從尿 中及呼氣中排泄出。 已有報告指出，投藥於體内之5_FU約八成在上述嘧啶 代謝過程中被分解（Cancel^ Phila)，68, 499-501，1991 )， 又該代謝過程中之速度限制酵素係第1酵素之DPD( Cancer Res” 47 : 2203-2206, 1987)。因此，若對 DPD缺乏或 DPD 活性低下之受測者投予5-FU等氟尿嘧啶系之藥物，則有可 能因為無法正常代謝，其血中濃度會變成異常之高值而可 能引起嚴重的副作用（骨髓抑制或消化器官病狀等）

(Cancer.Inves. 11 ( 2 ) : 239-240,1993 ) 〇 又，已知 DPD 活性之個人差異很大，依男女等之性別亦會有所差異（J. Clin. Oncol., 12 ： 2248-2253 » 1994 ； Adv. Exp. Med. Biol., 431 ： 811-816 ， 1998)。 因此，在歐美，為了防止5-FU等之氟尿嘧啶系藥物所 產生之副作用，提出了診斷關於各個待測者，特別是DPD 缺乏或DPD活性低下所引起之嘧啶代謝異常之有無或其程 度之必要性。 關於DPD缺乏症，現在，雖已確立了測定周邊血液單 核細胞之DPD活性之診斷法（Cancer Res·，53 : 5433-5438， 1993 ; Phermacogenetics.4: 301-306.1994; J.Inherited.metab.Dis.，16 : 574-576,1993 )，然而由於該測定需使用放射性物質或需繁 雜之事前處理，因此對氟尿嘧啶系藥物之投藥對象者之癌 症患者而言並非適宜之診斷方法。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） -5- 1239248 A7 -_____B7___ 五、發明説明（3 ) 又，藉著近年之遺傳基因解析技術之進步，DpD遺傳 基因可很容易地判定，更有多數報告報導了成為DPD活性 低下之原因的DPD遺傳基因之多型。然而，該卿遺傳基 因多型與DPD活性之相關關係至今尚未能清楚了解，藉基 因表現位準來評價DPD活性之有無、特別是其活性高Z I 私度還很困難。 鼠尿嘧啶系藥物作為抗癌療法之有效性已被確認，且 在現今藉由併用阻礙這些藥物之代謝酵素DPD酵素活性之 種種藥物之氟尿嘧啶系藥物增強療法正在進步之治療狀況 下，為了預知並防止因氟尿嘧啶系藥物療法產生之副作 '因此必須開發可事先簡便地判定關於待測者㈣代謝 異常之有無或其程度等嘧啶代謝能之診斷方法。 [發明之揭示] 基於該狀況’本發明第la的在提供可簡便地測定並評 $各個待測者之嘧啶代謝能之製劑。具體來說，本發明之 目的在提供—種對於利用呼氣簡便地料評定關於各個待 冑者有無射代謝異常或其程度之所謂㈣代謝能上有用 之製劑。 i X ’本發明之第2目的在提供利用該製劑簡單地測定且 汗疋關於各個待測者活體内之嘧啶代謝異常之有無或其程 度之所謂嘧啶代謝能之方法。 〃又，本發明之第3目的在提供上述製㈣選適於投 Z亂尿嘧啶系藥物；亦即氟尿嘧啶系藥物投藥適應者之方 本紙張尺度_巾關家標準（CNS) Μ規格（210X297公釐了 t • Φ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) #1 -6- 1239248 五、發明説明（4 本發明人發現，藉由將以 ^ β、，a 素軚識之嘴啶化合物投 梁於待測者，並測定對呼氣 (包含排泄量及歷時之變化），〜=〇二之排泄舉動 嘧啶代謝異常之有盔或1 /疋忒待測者之 私度之所謂嘧啶代謝能。 =亡依_知識’事先針對各個待測者使 :::=物並測定㈣謝能，由其結果藉由排除 人=過南而無法期待氣尿㈣系藥物之治療效果的 之㈣用疋=能過低而會令人擔心投予氣尿喷咬系藥物後 :乍用的人，確信了可從待測者中筛選出適於投藥則 系藥物的人，及，可針對各個待測者個別之喊 =谢氣尿㈣系藥物之更有效之投藥方法（投藥 :者。技糸夏、投樂次數等）。本發明係依據該知識而完 發月係下述第1項〜第8項所揭示之嘧啶代謝能 測定製劑： ι 一種;^代謝能測定製劑，係含有以同位素標識碳原 子、乳原子或氮原子之至少一種之嘧啶化合物作為有效 成分者。 第員之嘧啶代謝能測定製劑，其中該嘧啶化合物係 °密°定代謝系酵素之受質，或其先驅體。 第員之密σ疋代謝能測定製劑，其中該嘴σ定代謝系酵 素係由—氫嘧唆脫氫酶、二氫嘧唆酶及yS-脲基丙酸酶 構成之群中所選出之至少一種酵素。 •如第1項或第2項之㈣代謝能測定製劑，其中該嘴咬化 (210X297公釐） 請 先 閲 讀 背， 之 注 意 事 項 再 填 窝 本 頁 訂 本紙張尺度適用中國 -7- 7. 氟 中 種 素 至

f! (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂丨 Ϊ239248 五、發明說明（5 物係由尿氟尿♦ σ定及胸腺料構成之群 選出之至少一種。 5· 項或第2項之射代謝能測定製劑，其中該㈣化 二物係由二氫讀、5_就二氫尿•定、二氫胸腺哺 疋/5-脲基丙酸、氟脲基丙酸及脲基異丁酸 成之群中所選出之至少一種。 、 6·=第1項她項之㈣代謝能敎跡其中該㈣化 “勿係由杜克西氟瑞定（doxyfluddine)、替加 (tegafW)及卡摩f爾（eam咖）構成之群中所選 之至少-種之㈣代謝系酵素之受質先驅體。 如第1項至第6項中任一項之^定代謝能測定製劑，其 忒製劑係以藉同位素標識碳原？丨氧原？之至少一 之口密口定化合物作為有效成分者，且在投藥於待测ς後 可在體内產生同位素標識c〇2。 8_如第1項至第7項之㈣代謝能敎㈣ 係由13C、14c、丨8〇月15χΓ搂氺 _丄 “立 構成之群中任一者所選出 少一種。 又，本發明係如下述第9項至第叫項 謝能之測定方法： <在疋代 9. 一種料代謝能之測定方法，包含有：將以項至第8 射任-項之射代謝能測定製劑投藥於待測者並測 疋排泄出體外之同位素標識代謝產物之排出舉動之步 驟0 Μ如第9項之_代謝能敎方法，其中同位素標識代謝 本紙張尺度適用中關家標準（咖）Μ規格(^297公 -8- 1239248 、發明說明（6 ^物^由同位素標識c〇2、同位素標識^丙胺酸、同 ^ 气氟石丙胺酸及同位素標識/5 -胺基異丁酸構 成之群中所選出之至少一種。 1〇\一種㈣代謝能之測定方法，包含有：將第！項至第8 二 員之密啶代謝能測定製劑投藥於待測者，並測 疋呼乳中排出之同位素標識C02之舉動之步驟。 10-1如第H)項之対代謝能測定方法，其係使用第4項之 製劑作為嘧啶代謝能測定製劑。 本^月係下述第n項〜第12_2項所揭示哺咬代謝能 之評定方法： 11· 一種，測者之哺口定代謝能之評定方法，包含有··將糾 =至弟8項之㈣代謝能測定製劑投藥於待測者，並測 定排出體外之同位素標識代謝產物之排出舉動，且評定 该所得到之待測者之排出舉動之步驟。 Η]如上述第U項之嘧啶代謝能之評定方法，其中該同位 素標識代謝產物係由同位素標識C〇2、同位素標識r 丙胺酸、同位素標識氟|丙胺酸及同位素標識^胺 基異丁酸構成之群中所選出之至少一種。 12· -種待測者之^定代謝能之評定方法，包含有··將幻 項至第8項中任一項之嘴咬代謝能測定製劑投藥於待測 者，並測定呼氣中排出之同位素標識叫之排出舉動， 且評定該所得到之待測者之c〇2之排出舉動之步驟。 ⑴如第12項之㈣代謝能之評定方法，其係使用第4項 之製劑作為嘧啶代謝能測定製劑。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公爱）

.訂— (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -9- 1239248 五 、發明説明（7 Μ如上述第11項、第U]項、第12項或第12]項中任一 Z = °定代謝能之評定方法，其係藉由將制者之排出 具有正f之対代謝能之健康受㈣之對應之 排出舉動進行對比。 待測者有^發月係下述第13項〜第14 _1項所揭示之測定有關 者有無_代謝異常或其程度之方法： 13_:種^定關於待測者有無料代謝異常或其程度之方 ‘將第1項至第8項中任—項之0^°定代謝能測 二背投藥於待測者’並測定同位素標識代謝產物之 心二將該所得到之待測者之排出舉動與具… ^代謝叙健康受測者之上述對應之排出舉動 對比之步驟。 13-i二苐13項之測定關於待測者有無_代謝異常或其 /X之方法’其中該同位素標識代謝產物係由同位素 戠C〇2 @位素標識f丙胺酸、同位素標識氣·石-丙 =同位素標識石-胺基異丁酸構成之群中所選出之 標 胺 ,1、 仏 ，· ％ ΟΪ < 至 少一種。 種測定關於制者有無料代謝異常或其程卢之方 =含有:將第1項至第8項之蝴謝 ： 樂於待測者，並測定呼氣中 職 Μ㈣之_素標識C02之排 :’且將該得到之待測者之co2排出舉 行對比之步驟。 者之上这對應之排出舉動進 ⑷如第U項之測定詩待測者有無錢代謝異常或其 14 二?尺度適财國國家規格⑵0X“J7 排 常

--------------------------- % i (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) #· 、τ -10- 1239248 五 、發明説明（8 =方法，其係使用第4項之製劑作一代謝能測 又，本發明係下述第15項〜第17項揭 選氟尿嘴° 定系藥物投藥適應者之方法：G測者中師 15. -種氧尿•系藥物投藥適應者之篩選方法，. 項至第8項中任一項之㈣代謝能測定製3劑投 藥於待測者之步驟； 測定同位素標識代謝產物之排出舉動之步驟·及 依據該所得到之待測者之排出舉動挑選適於投予氟 尿嘧啶系藥物者之步驟。 15-!如第15項之氟尿嘧啶系藥物投藥適應者之篩選方 法’其中該同位素標識代謝產物係由同位素標識c〇2、 同位素標識万-丙胺酸、同位素標識氟I丙胺酸及同 位素標識万-胺基異丁酸構成之群中所選出之至少一 種。 16·—種氟尿嘧啶系藥物投藥適應者之篩選方法，包含有： 將第1項至第8項之嘧啶代謝能測定製劑投藥於待測 者之步驟； 測定呼氣中排出之同位素標識〇〇2之排出舉動之步 驟，及 依據该所得到之待測者之C〇2排出舉動挑選適於投 予氟尿嘧啶系藥物者之步驟。 16-1如上述第16項之氟尿嘧啶系藥物投藥適應者之篩選 方法，其係使用第4項之製劑作為嘧啶代謝能測定製劑。 本紙張尺度適用中國國家標準（哪）A4規格（21〇><297公爱） -11- 1239248 A7 五、發明説明（9 ) 16-2如上述第15項〜第16]項中任一項之氟尿嘧啶系藥物 投藥適應者之筛選方法’其係藉由將該待測者之排出舉 動與具有正常之喷咬代謝能之健康受測者之上述對: 之排出舉動進行對比。 “ 17·如弟15項〜第16_2項中任一項之氟尿料系藥物投藥適 應者之筛選方法，其中該氟尿^定系、藥物係由5-氣尿。密 啶、替加氟（tegafur)、卡摩富爾（carm〇fur)及杜克 西氟瑞定（d〇xyfluridine )構成之群中所選出之抗癌劑。 又’本發明亦包含下述態樣： 23. 使用於製造以同位素標識碳原子、氧原子或氮原子之 至少一種之嘧啶化合物之嘧啶代謝能測定製劑。 24. 使用於含有以同位素標識碳原子、氧原子或氛原子之 至少一種之嘧啶化合物作為有效成分之組成物之測定 待測者之活體之嘧啶代謝能。 在本說明書中，所謂「㈣代謝過程」係指有關於分 解以嘧啶為首之具有嘧啶骨架之一連串之化合物直到變為 最終產物之活體内之異化過程。又，該嘧啶代謝過程中， 與各分解反應有關之酵素稱為「嘧啶代謝系酵素」。又， 在此「嘧啶代謝系酵素」包含有指從事上述嘧啶代謝過程 之各为解反應之各個酵素’以及總稱與上述喊。定代謝過程 有關之一連串之酵素這兩個意思。如第丨圖所示，在嘧啶代 谢過程中’尿σ密咬、5 -氟尿哺咬或胸腺嘴σ定等具有喷α定骨 架之化合物（以下在本說明書中亦簡稱「嘴π定化合物」。） 經三階段之酵素反應而變成最終代謝產物。又，本說明書 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) Α4規格（210X297公釐） ·Λ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .訂· .参- -12- 例 或 泄 體 氟 以 經

f請先閱讀背面之注意事項再填窝本頁) •、η— 1239248 、發明説明（ 中’所謂「最終代謝產物」《「代謝產物」 謝過財料之料反應生成之最終生成物 於此糟途巾之酵素反應生成之生成物稱為「巾間代。 [發明之實施形態] 」° (1 ) 嘧啶代謝能測定製劑 本發明之嘧啶代謝能測定製劑，係含有以同位素栌嗲 碳原子、氧原子或氮原子之至少一種增化合物作：： 效成分者。 典口本發明中所使用之口密咬化合物，可廣泛例舉具有哺口定 骨架之化合物’而以㈣代謝系酵素；特収活體之嘧^ 代谢過程中之第1酵素之二氫《脫氳_ (DPD)之受質為 $。具體可舉尿^定、胸腺t定及該等之衍生物作為該喷 T化合物。這裡所謂衍生物係DpD之受質，只要是經過嘧 定代謝過私生成之最終代謝產物會從呼氣、尿或汗等排 物中排泄出來的即可，在此範圍内並無特別之限制。具 可舉5-氟尿嘧啶或弘溴尿嘧啶等尿嘧啶之鹵化物，或5·軋 胸腺嘧啶或5-溴胸腺嘧啶等胸腺嘧啶之由化物。更佳者可 舉尿’唆、胸腺嘧啶及5-氟尿嘧啶。 又，嘧啶化合物除了 DPD的直接受質之上述化合物 外亦包括間接地成為其受質者，亦即投藥於活體後，經 由在體内代謝或分解成為上述DPD之受f (例如上述尿嘧 咬、胸腺嘴㈣5·氟尿射等）之先驅體或藥物前體。 如，該先驅體可舉：尿嘧啶之先驅體之胞嘧啶、脲苷、 其磷酸鹽（例如脲核苔酸）；胸腺嘧啶之先驅體之5_甲基 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） -13- 1239248 ΚΙ -------- Β7 五、發明說明（„ ) "" --- 7嘧啶、胸腺4"、其磷酸鹽（例如胸腺核苔酸）；以及 卡：尿嘯唆之先驅體（藥物前體）之替加氟（—〇、 摩昌ϋ u_Gfu〇、及杜克西氟瑞定（dQxyfiuridine) 4 〇 ^ 本么明之嘧啶代謝能測定製劑亦可使用含有相當 於嘧啶化合物之中間代謝物之化合物（以下在本說明書中 =「•定代謝化合物」。）作為有效成分者來代替上述 ^ a物名嘧啶代謝化合物可舉例如：嘧啶代謝過程 〃酵素之DHPase之文質之二氫尿^定、二氫胸腺哺咬 及這些的衍生物（例如5·氟二氫尿嘧咬等之二氫尿似或 二氫胸腺料之i化物）（以下，在本說明#中亦稱這些 為第1代謝化合物」。）；㈣代謝過程之第3酵素之y3 pase之文質之冷_脲基丙酸、冷-脲基異丁酸及這些的衍 生物（例如氣-/3 -脲基丙酸等之卢_脲基丙酸或^ _脲基異丁 酸之1S化物）（以下，在本說明書中亦稱這些為「第2代謝 化合物」。） 用來作為嘧啶代謝能測定製劑之有效成分的這些嘧啶 化合物或嘧啶代謝化合物，其特徵在於以同位素標識其分 子内之碳原子、氧原子或氮原子之至少一種。該同位素具 體可舉3C、14c、18〇或15N。該同位素不論放射性及非放 射性之別，而就安全性之觀點來看，以非放射性同位素 13c、18〇或 15N為佳。 ^ 又本發明中所使用之°密σ定化合物或嘴σ定代謝化合 物，可以是其分子内具有一個上述同位素者，《是具有兩 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) Α4規格（210X297公釐） t! -_ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、一吓 — -14-

A7 B7 彡、發明説明（12 ) 一 個以上之同一種或異種之同位素者皆可。並無特別限制， 不過如同以同位素標識嘧啶化合物或嘧啶代謝化合物經過 嘧啶代謝過程生成之C〇2之至少一部（c或〇)，以碳原子 或氧原子經同位素標識者為佳。這種嘧啶化合物可舉例如 以同位素標識嘧啶骨架之2位之碳原子之化合物，具體可舉 2-13C標識尿嘧啶、2J3C標識弘氟尿嘧啶。 嘧啶化合物或嘧啶代謝化合物藉這些同位素標識之方 法，並無特別之限制，可廣泛地採用通常所使用之方法。 (佐佐木、「5.1安定同位素對臨床診斷之應用」；化學領 域107女疋同位素對醫•藥學、生物學之應用」ρρ (1975 )南江堂：梶原、RADI〇IS〇T〇pES，41，45 48 ( 1992) 等）。又，這些藉同位素標識之各種嘧啶化合物或嘧啶代 謝化合物之一部分係可商業性地得到，亦可簡便地使用相 關之市售品。 本發明之喊咬代謝能測定製劑，只要是合乎本發明之 目的，該製劑型態並無特別之限制，可任意地採用注射劑、 靜脈注射劑、栓塞劑、點眼劑及點鼻劑等非經口投藥型態； 液劑（包含糖漿劑）、懸浮劑、乳狀劑、錠劑（包含裸劑、 被覆劑）、膠囊劑、丸劑、粉劑（粉末劑）、細粒劑、顆 粒劑等經口投藥型態。 本發明之啦啶代謝能測定製劑，在實質上可以僅由有 效成分之上述同位素標識嘧啶化合物或嘧啶代謝化合物構 成，不過只要不損及本發明之作用及效果，亦可以是依據 各製劑型態（投藥型態）混合通常業界中所使用之所有載 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) Α4規格（210X297公釐〉 tr------ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -15- 1239248 A7 ....... B7 五、發明説明~ ~；— 體及添加物作為其他成分之組成物之型態（+定代謝能測 定用組成物）。 若為該組成物，作為有效成分混合之同位素標識t定 化合物或嘴咬代謝化合物之量並無特別之限制，可舉組成 物100重量份左右1〜95重量份，可在該範圍内適宜地調整。 上述嘧啶代謝能測定用組成物例如以 之際，載體可使用例如：乳糖、白糖、氯化納、㈣^ 尿素^殿粉、碳_、高嶺土、晶體纖維素、石夕酸等賦形 劑，早糖激、葡萄糖液、殿粉液、明膠溶液、叛甲基纖維 素、蟲膠、甲基纖維素、磷酸奸、聚乙稀基〇比洛烧嗣等黏 合劑，乾燥澱粉、褐薄酸鈉、洋菜粉末、尾布多糖粉末、 破酸氫納、碳酸約、聚經基乙缚山梨糖醇肝脂肪酸醋類、 月桂基硫酸鈉、硬脂酸甘油一酸酯、澱粉、乳糖等散解劑； 白糖硬月曰、可可月曰、氫化油等散解抑制劑；第4級錢鹽、 月桂基硫酸納等吸收促進劑；丙三醇、殿粉等保漁劑；殿 粉、乳糖、高嶺土、膨潤土、膠狀矽酸等吸收劑；精緻滑 石、硬脂酸鹽、硼酸粉末、聚乙浠乙二醇等滑潤劑等。又， 鍵劑可依需要作成-般施予包衣之鍵劑，例如糖衣鍵 '明 膠被衣旋、薄膜衣片劑、二層錠、多層錠等。 上述嘧啶代謝能測定用組成物以丸劑之型態成型之 際，載體可使用例如葡萄糖、乳糖、澱粉、可可脂、硬化 植物油、高嶺土、滑石等賦形劑；金合歡膠粉末、黃耆膠 粉末、明膠等黏合劑；昆布多糖、洋菜等散解劑等。 膠囊劑係遵循常法，通常將本發明之有效成分與上述 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（21〇χ297公爱） .....訂 -* (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -16- 1239248 A7 _____ B7 五、發明説明（14 ) 舉例之各種載體混合充填於明膠膠囊、軟質膠囊等調製而 變… (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 以栓塞劑之型態成型之際，載體可使用例如聚乙烯乙 二醇、可可脂、高級乙醇、高級乙醇之酯類、明膠、半合 成甘油劑等。 、? 調製為注射劑時，液劑、懸浮劑需經殺菌，且以與血 液等滲壓者為佳，以這些型態成型時，可使用例如水、乙 基乙醇、聚乙二醇、丙烯乙二醇、乙氧基化異硬脂基乙醇、 聚羥基化異硬脂基、聚羥基乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯類等 作為稀釋劑。又，這時亦可使製劑中含有調製等滲壓性之 /谷液時充为之量之食鹽、葡萄糖或丙三醇，或亦可添加一 般之助溶劑、緩衝劑、無痛化劑等。 更進一步，上述各製劑中可依需要混合著色劑、保存 劑、香料、風味劑、去臭劑、去味劑、甘味料、安定化劑 等藥學上容許之添加劑。又，上述各種載體或添加劑可任 意組合1種或2種以上來使用。 混合本發明之嘧啶代謝能測定製劑之單位投藥型態中 之同位素標識嘧啶化合物或嘧啶代謝化合物（有效成分） 之置，由於根據測定試劑及混合之有效成分之種類等有所 差異，因此無法一概而定，而可依據情況適宜地調節設定。 例如，使用2-13C標識尿嘧啶等之同位素標識尿嘧啶作為同 位素標識嘧啶化合物作為有效成分時，每一單位投藥之製 劑組成物中以含有1〜1000mg/b〇dy2同位素標識尿嘧啶， 又以H)〜1〇(hng/body之範圍為佳，以其他之同位素標識嘧 本紙張尺度適财關家標準（CNS) Α4規格（210X297公釐) -17- 15 1239248 五、發明説明（ 定化θ物或嘧啶代謝化合、 準則來適宜地調整。又，使用:有：成“寺，也可以此為 使用同位素標識5-貌尿嘧啶或其 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 同位素標識氣尿哺糊物作為同位素標識喷 :圍：广以該藥物之藥理效果不會給予待測者影響之 該量在上述中並無特別限制，不過通常可舉每 單位投藥丨〜義—之範圍。 ^母 、:本發明之喷σ定代謝能測定製劑，投藥於一連串之嘧 处代謝酵素（DPD、Μρ㈣、0 ·υρ㈣）在活體内正常機 ’即具備正常之嘧啶代謝能者（以下在本說明書中亦 簡稱健康叉測者」）時，該製劑中作為有效成分所混合 之嘧啶化合物會如第1圖所示地代謝分解。 、例如，作為嘧啶化合物之尿嘧啶、5-氟尿嘧啶（5-FU ) 或胸腺嘧啶，在體内會藉嘧啶代謝過程之第1酵素之DPD 之作用各自成為二氫尿嘧啶、5-氟二氫尿嘧啶（fdHU)或 一氫胸腺嘧啶，接著這些藉嘧啶代謝過程之第2酵素之 DHPase之作用各自變成冷_脲基丙酸、氟-石-脲基丙酸（f_ /3 UPA )或石-脲基異丁酸，而這些更藉嘧啶代謝過程之 第3酵素之沒_Upase之作用各自分解成石丙胺酸、氟-丙胺酸（F-冷-丙胺酸）或胺基異丁酸與c〇2。 又’若嘴啶代謝能測定製劑係含有成為DHPase之受質 之一氫尿鳴咬、FDHU或二氫胸腺嘧啶等之嘧啶代謝化合 物作為有效成分者，則這些在健康受測者之體内會藉由 DHPase之作用各自成為冷脲基丙酸、F-/3 -UPA或/3 -脲基 異丁酸’而這些更藉第3酵素冷-UPase之作用各自分解為冷 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) M規格（21〇><297公釐） -18- 1239248 A7 I^ ^^----~ 五、發明説明（16 ) 一~ ~— •丙胺酸、W·丙胺酸或^胺基異丁酸及⑶2。 X ’若°密°定代謝能測定製劑係含有/9-脲基丙酸、F_ β·υΡΑ或r脲基異丁酸作為有效成分者，這些在健康受 測者之體内會藉由Θ .uPase之作用各自分解為丙胺 酸、F-石-丙胺酸或石·胺基異丁酸及e〇2。 如此，代謝生成之最終代謝產物co2從呼氣中，而f @胺I、F· /5 _丙胺酸或f胺基異丁酸主要從尿中排泄 $。這時最終代謝產物按照作為有效成分來使用之㈣化 “勿或嘧啶代謝化合物之同位素標識部位，藉同位素標識 c〇2或是石-丙胺酸、丙胺酸或点-胺基異丁酸之至少 一種。因此，以該同位素標識作為指標，標識C02時是呼 I 氣、而標識丙胺酸、F-3-丙胺酸或々-胺基異丁酸時則 疋尿等排泄物作為被驗試劑，可測定這些最終代謝產物之 排泄舉動（排泄量或排泄速度之歷時之舉動）。 只要藉由本發明之嘧啶代謝能測定製劑，即可測定並 評定各個待測者之活體内之嘧啶代謝能。 具體來說，將本發明之嘧啶代謝能測定製劑以經口或 非經口之態樣投藥於待測者，並測定排泄出體外之同位素 標識代謝產物，從藉此得到之同位素代謝產物之排泄舉動 (排泄量或排泄速度之歷時舉動），可測定該待測者之哺 啶代謝能（嘧啶代謝異常[低下/亢進]之有無或其程度）。 在此，排泄出體外之代謝產物，依據嘧啶代謝能測定 製劑中所使用之有效成分之種類而異。例如含有同位素標 識尿嘧咬或其先驅體作為有效成分之嘧啶代謝能測定製劑 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐）

-19- 泄 1239248 五、發明説明（1? 之情況，最終代謝產物係同位素標識3 _丙胺酸或同位素伊 = C02;而含有同位素標識5_氟尿癌啶或其先軀體（藥： 前體）作為有效成分之喷咬代謝能測定製劑之情況，最終 代物係同位體標識氟_丙胺酸或同位素標識含有 胸腺嘴咬或其先驅體作為有效成分之料代謝能測定製劑 之情況，最終代謝產物係同位素標識石-胺基異丁酸或 素標識C 0 2。 杈適宜的係以使用代謝之結果、啤氣中會排出同位 標識叫之《化合物或其先驅體作為有效成分者作為 咬代謝能測定製劑為佳。藉由該製劑，以經Π或非經σ 態樣投藥於待測者，並測定呼氣中排出之同位素標識 C〇2,由自此求得之同位素標識c〇2排泄舉動（排泄量 泄速度之歷時舉動），可測定出待測者之鳴咬代謝能（ 啶代謝異常[低下/亢進]之有無或其程度）。 又田使用生成CO2以外之同位素標識化合物（点 胺酸、氣+丙胺酸胺基異丁酸）作為同位素標識 謝產物之痛咬化合物作為有效成分之鳴咬代謝能測定製劑 Z。，可使用尿或汗等排泄物代替上料氣作為測定被驗試 —待測者之料代謝能之評定，例如可藉由將藉上述測 疋件到之同位素標識代謝產物之排泄舉動（排泄量世 速度之歷時舉動），與針對料代謝能正常之健康受測者 進仃同㈣定得収❹素㈣⑽聽之排轉 對比來實施。又，亦可藉代替同位素標識代謝產物之排τ 本紙張尺度適财_家鮮（⑽从規格（2K)X297H} 位 素 嘧 之 識 -丙 代 劑

f : I * (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .#1 參 -20- 1239248 五、發明説明（1S ) 舉動或與之合併，從待測者之排泄舉動（排泄量之過渡曲 線）得到之曲線下面積（AUC)、排池速度（特別是排泄 初速度）、或排液濃度之最高值（Cmax)等之參數；尤以 藥物動態學/藥物速度論中之參數為佳，將之與健康受測者 之各對應參數進行對比來進行。 又，㈣代謝過程之第！酵素DPD之有無缺乏沒有必 要藉與健康受測者之排泄舉動對比，而可藉以同位素標識 代謝產物之有無排泄來判斷。又，藉由進行待測者之= 舉動或由此所求得之各種參數與健康受測者之對應之舉動 及參數之對比，可評定待測者之鳴咬代謝能之低下或充進 (咳咬代謝異常）之有無、及其程度（異常之程度）。 又，使用尿或汗等排泄物作為測定被驗試劑時，藉由 併用液相層析分析或氣相層析分析等各種分離技術;一 起分離及分析被驗試劑中所含得到之同位素標識嘲咬化人 物（或同位素標識喷咬代謝化合物）、同位素標識代謝中 間物、及同位素標識代謝產物，而可藉這些選擇性地測定 同位素標識代謝產物之排泄舉動。 另，鳴咬代謝過程係如前所述，藉—連串之射代謝 系酵素（DPD、DHPase、/Q ΤΤΌ ^ se 0_UPase)之三階段酵素反應所 構成。待測者之㈣代謝能可由使用以該錢代謝經路中 =第1酵素（DPD)之受質或其先驅體（任_者皆為同位素 -識物）作為有效成分之嘧啶代謝能測定製劑，投予該製 相传到之最終代謝產物之排泄舉動來評^，這種情況 下’藉由考量以該待測者之Μ代謝過程中之第2酵素 本臟度 Α4 規格 .................参…： * · (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -訂— -21- 本紙張尺峨格⑵ 1239248

五、發明説明（l9 (DHPase)及第3酵素（/3-UPase)為根據之嘧啶代謝能， 可評定該待測者之第1酵素（DPD)之有無缺乏或其活性之 低下/宄進（異常）之程度。以該第2酵素（DHpas㈠及第 3酵素M_UPase)為根據之㈣代謝㉟，可藉由例如對該 待測者投予以第2酵素（DHPase)之受質（同位素標識物^ 作為有效成刀之嘧啶代謝能測定製劑，並測定排泄出體外 之最終代謝產物，接著評定得到之排泄舉動（排泄量或排 泄速度等歷時之舉動）等求得。 又，以待測者之第2酵素（DHpase)為根據之㈣代 謝能，可由使用以第2酵素（DHpase)之受質（同位素標 識物）作為有效成分之喷咬代謝能測定製劑，投予該製劑 而得到之最終代謝產物之排泄舉動（排泄量或排泄速度等 之舉動）來評定’而這時候，則需考量到以該待測者 /唆代謝過程之第3酵素（㈣^為根據之Μ代謝 2以邊第3酵素（万⑽咖）為根據之喷咬代謝能，可 由例如對該待測者投予以第3酵素（㈣^)之 θ =標識物）作為有效成分之㈣代謝能測定製劑，並測 H出料之最終代謝產物’接著評定得到之排泄舉動 (排泄置或排泄速度等歷時之舉動）求得。 各個=1之料代謝能測定製劑，適於使用在為檢驗出 =則者之活體内之嘯咬代謝能有無異常（低下/充 之：：測定且評定其異常之程度。特别是以成為卿 之同：:胸腺㈣及這些的街生物(5_氣尿㈣等） 素標識物作為有效成分之喷唆代謝能測定製劑，適

!……--------------變！ *·_ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂| •參， -22- 1239248 五、發明說明 =用在為了測定且評定各個受測者之基於Dp· 或增加所造成…代謝異常(低下/充進)之有 古：私？。因& ’本發明 <嘧啶代謝能測定製劑亦可換 i嘧：：：'代謝異常檢驗製劑、嘧啶代謝異常測定製劑 次疋代谢異常診斷製劑等。 ()密σ疋代謝能之測定及評定方法 代謝ί發明亦是測定待測者之錢代謝能之方法。該㈣ 2之料可藉❹前述•代謝能敎製劑簡單地實 具體來說’待測者之嘧啶代謝能可藉由 =定製劑投藥於動物(特別是哺乳類)或人類等喷: tr之測定對象物（待測者），之後採取呼氣、尿、 ㈣產2排泄物，❹該採取試劑中所排泄之同位素標 來實施。之排泄舉動（排泄量或排泄速度之歷時之舉動 v才木取4劑中所含之同位素標識代謝產物之測定 1斤係因所使用之同位素為放射性或非放射性 據這些種類之不同，可使用液體閃燦計數器法、質譜儀； 紅外線光譜分析法、發射光譜分析法、磁共振譜法Γ 所使用之分析方法來進行。 體内_代謝係藉-連串之料代謝系酵素來進 1 力體内之喷咬化合物或射代謝化合物主要！i ㈣代謝系酵素之作用’代謝為c〇2或其他最終代謝產曰 (y5 -丙胺酿、齑、/〇 τ 一, ： 般 該 (卢丙㈣n丙胺酸、3_胺基異丁酸等）而排出體 本紙張尺度適用中國國家標準(⑽ 依

------變—— *·· (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、可丨 -23- 1239248 A7 I--------- B7_ 五、發明説明（21 ) 一 "一' --— 夕卜上述最終代謝產物中，⑺2主要從呼氣中；又其他最 、终代謝產物主要從尿或汗中排泄出。因此，作為上述測定 對象之同位素標識代謝產物，宜舉同位素標識C〇2、同位 素標識/3-丙胺酸、同位素標識敦I丙胺酸、或同位素標 識β -胺基異丁酸。 X ’本發明之測定方法中之測定試劑（採取試劑）用 W 可藉由依投藥之t定化合物或射代謝化合物之 同位素標識部位生成之同位素標識代謝產物之種類來選 擇/亦即，同位素標識代謝產物為C02時宜採用呼氣，而 同位素標識代謝產物為Μ胺酸、氟+丙胺酸L基 異丁酸等時，宜使用尿。適宜之測定試劑，從試劑之採取 簡便這點來看為呼氣，從可以一起分析藉代謝生成之最終 代謝物及中間代謝物這點來看則是尿。 、適宜之㈣代謝能之測定方法，可舉將前述㈣代謝 月b測疋製劑投藥於待測者，以同位素標識呼氣中排出之同 位素標識c〇2之排泄舉動（排泄量或排泄速度之歷時之舉 動）作為指標來測定之方法。 k時，可使用設計成產生同位素標識CO2作為最終代 謝產物之同位素標識哺咬化合物或射代謝化合物作為有 效成分之製劑來作為哺咬代謝能測定製劑。該同位素標識 密定化α物，具體可舉以同位素標識嘧啶骨架之2位之c之 化合物，適宜的有2,標識尿㈣或2_13c標識5遣尿嘧 啶。以2-uC標識尿嘧啶為佳。 使用13C作為同位元素時，呼氣中排泄之！^^之量可 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公楚）--------- -24- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、^τ— 五、發明説明（22 ) ，照慣用之％呼氣檢查法（分析化學，VG131，PP 450 453 0982) , HELICOBACTER,Vol.3,No.l,pp.49.53 ( 1998 ) 專）測定。 各待測者之錢代謝能可依據藉前述方法測定之同位 素標識代謝產物之排液舉動（排泄量或排泄速度之歷時之 舉動）來評定。具體來說，各待測者之⑭代謝能之評定， 可f由將本發明之㈣代謝能測定製劑投藥於待測者，並 測定尿或呼氣等之排泄物中所排泄之同位素標識代謝產物 =排泄舉動（排泄量或排泄速度之歷時之舉動），且將該 得到之待測者之排泄舉動與針對健康受測者相對應之排泄 舉動進行對比來進行。 較適宜的是採取藉由將以同位素標識喷咬骨架之2位 之C之化合物；適宜的有以2_13(：標識尿料或2_13仁標識％ ，尿㈣為有效成分之同位素標識料代謝能測定製劑投 樂於待測者’並測定該待測者之啤氣中排出之同位素標識 C02之排,世舉動，且將之與針對健康受測者相對應之同位 素標識co2之排泄舉動進行對比來進行之方法。具體來 說，呼氣中之同位素標識C02(例如13c02)之排泄舉動（排 座里^排慶速度之歷時舉動）可藉由將癌咬代謝能測定製 劑投藥於待測者後’歷時地測定呼氣中排泄之i 2 C 〇邊體之 比例（co’c%濃度比：5l3c值），由該Pc值與製 劑投藥前之該待測者之5"c值之差算出二氧化碳氣體△ (0/⑻）值，標緣該△ (%0)值相對於呼氣採取時間（本 發明之製劑投藥後之經過時間）且圖表化來視覺性地顯 1239248 •、發明説明（ 7、寺則者與健康受測者之同位素標識C〇2排出舉動之對 比，可藉由例如將上述作成之圖表與針對健康受測者之上 述同樣做法作成之圖表相對比來進行。 亦了代替同位素標識代謝產物之排泄舉動、或與 σ併而將從待測者之排泄舉動（排泄量之過渡曲線） 得到之曲線下面積（AUC)、排泄速度（特別是排泄初速 度）、或排泄濃度之最高值（Cmax)等參數；宜為藥物動 態學/藥物速度論中之參數與健康受測者之各對應參數相 對比來進饤。藉此，可評定待測者有無較代謝能之低下 或尤進（μ代謝異常）及其程度（異常之程度）/ 又，嘧啶代謝過程之第〗酵素DPD之有無缺乏，沒有 要與健康受測者之排泄舉動相對比，而可以同位素標識 謝產物之有無排泄來判斷。 又’使用尿或汗等排泄物作為測定被驗試劑時，藉 併用液相層析分析或氣相層析分析等各種分離技術可一 起分離及分析被驗試劑中所含得到之同位素標識•化人 物（或同位素標識料代謝化合物）、同位素標識代謝口 間物、及同位素標識代謝產物，藉此可選擇地測定同位 標識代謝物之排泄舉動。 如此’藉由本發明’可針對各個待測者檢驗 唆代謝能之異常（低下或充進），或測定其異常之程二 因此’本發明之料代謝能之測定方法切定方又 為針對各個待測者檢驗出有無嘧啶代謝能異常（低 進）之方法、針對各個待測者測定㈣代謝能異常 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公發) 中 素 必 代 由

it! S r (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、町| 参- -26- 1239248 五 、發明說明（ 24 ί::)之程度之方法、或針對待測者評定有無嘧啶代謝 -異吊（低下或宄進）及其程度之方法。 ,(3)氟尿嘧啶系藥物投藥適應者之篩選方法 =發明之方法評定之各制者之料代謝能，可 ==待測t是否適合投予I尿《系藥物。因此，本發 :、關於師選氟尿嘴咬系藥物之投藥適應者之方法。 5 Futrr:謂氟尿㈣藥物投藥適應者，宜指投予 用〜、樂物前體等氟尿·系藥物時，不會有嚴重副作(包C業界之常識通常可預想之治療效果者 (…頰之動物（哺乳類），以人類為佳）， 口：予氟尿•定系藥物時’不會產生嚴重副作用或 ❹藥物之治療效果者（包含人類之動物（哺乳 ::明之氣尿㈣藥物投藥適應者之筛選方 以癌症患者等㈣代謝系藥物投 Γ療對象）之待測者作為對象，實施前述本發2 疋代謝能測定及評定方法來進行。 之 2対系藥物投藥適應者之挑選，可藉由·藉前 夕、疋R位素標識代謝產物之排泄舉動（排泄 逮度之歷時舉動）來評定各待測者之 篁次排 評定，當«師為對象之㈣者依據 或判斷錢謝能缺乏時 低下或顯能與健康受測者之料代謝能相較 尿喷0、’則將相當於該例子之待測者作為 密疋系樂物投藥之不適應者而排除來進行。又，若 口密 顯^ 對秦 T紙張尺度適 隨

•訂. (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -27- 25 1239248 五、發明説明（ 抽^地以多數待測者作為對象進行本發明之t定代謝能之 測疋及汗定方法，事先求得從同位素標識代謝產物之排泄 舉動得到之藥物動態學或藥物速度論上之各種參數（例如 曲線下面積（AUC)、排泄速度（特別是排泄初速度）、 =㈣濃度之最高值（Cmax)等）之分布圖案及與氣尿喷 :疋糸樂物投藥適應之相關關係，則藉由應用根據關於各待 測者之排泄舉動之各參數，可判斷關於該待測者有無氣尿 嘧啶系藥物投藥適應。 ▲又，由以本發明之方法評定之各待測者之嘧啶代謝 Γ—Γ判斷關於該待測者之氟尿响°定系藥物之清除率，並 设定氟尿嘧啶系藥物之投藥方法[製劑處方（藥物種類、混 合调製等）、投藥量、投藥次數等]。 广具體來說’以氟尿嘧啶系藥物投予對象作為待測者， σ藉由在&予氟尿喷σ定系藥物前’先依照上述評^方法評 2待測者之嘧啶代謝能，再從得到之嘧啶代謝能判斷氟尿 嘧疋系藥物之清除率，並根據該結果設定對該待測者之嘧 系某物之技藥方法（製劑處方（藥物種類、混合調製等）、 技藥！、投藥次數等）。又，氟尿嘧咬系藥物可舉一直以 來：為抗癌劑使用之5-氟尿嘧啶、替加氟（tegafur)、卡 摩富爾Uarmofur)及杜克西氟瑞定等。 /由於藉由本發明之方法，可事先評定活體内對氟尿嘧 啶系藥物之分解能，故可預知在DPD缺乏症或DPD活性低 下症等嘧啶代謝異常症之患者内氟尿嘧啶系藥物、特別是 上述氟尿嘧啶系藥物之副作用，而防止其發生。亦即，本 本紙張尺度適财_家標準（⑽）A4規格（2獻297公酱） 0!! - (請先閱讀背面之注意事^再填寫本頁) •訂丨 -28- a239248 号务日 月之方法’作為因氟尿嘧啶系藥物所產生之副作 防方法是有用的。 义預 [實施例] 以下揭示實施例，使本發明更進一步明暸。 明並不受實施例之限制。 本舍 例1 使用以13C標識2位之碳原子之尿嘧啶（尿嘧啶_2_Uc) 作為同位素標識之嘧啶化合物，調製以該尿嘧啶作 為有效成分之製劑作為靜脈注射投藥型態之嘧啶代謝異常 /則定製劑。然後，研討關於該製劑對測定嘧啶代謝異常之 有用性。 (1)哺啶代謝異常測定製劑之調製 洛解尿唯、口疋 _2· c ( Cambridge Isotope Laboratory 製） 300mg於O.lN-NaOH/saline溶液（ion氫氧化鈉溶液2mi中 加入生理食鹽水調整為2⑻mi ) 24mi中，調製成注射劑（靜 脈注射型態）型態之嘧啶代謝異常測定製劑（注射液4ml 中含有50mg之尿嘧啶_2-13C)。 (2 ) ( E ) -5- ( 2-漠乙烯基）-尿嘧啶製劑之調製 (E) -5- ( 2-演乙烯基尿嘧啶係以二氫嘧啶脫氫酶 (DPD )抑制劑為人所知（Cancer Research 46,1094-1101，March 1986, pp.1094-1101)。混合該（e) -5_ (2_溴乙烯基）-尿嘧 啶250ml與金合歡膠2.25g，接著一面添加少量之水一面攪 和，調製成45ml之懸浮劑（懸浮劑15ml中含有83.3mg之（E) -5- ( 2·溴乙烯基）-尿嘧啶）。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) Α4規格（210X297公爱） tr (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -29- 1239248 五、發明説明（π (3 )實驗 使用業以絕食之英國小獵兔犬作為實驗動物，對第i 組（n=3 )以靜脈注射投予上述調製之嘧啶代謝異常測定 製劑（5〇mg/body)(實驗組），對第2組（n=3)首先以 經口投予（E) _5_ (2-溴乙烯基）_尿嘧啶製劑（DpD抑制 劑）（83.3mg/body)，1小時後與第}組同樣以靜脈注射投 予嘧啶代謝異常測定製劑（50mg/b〇dy )(對照組：尿嘧 咬代謝異常模式動物）。接著，兩組皆在喊σ定代謝異常測 定製劑之投藥前與投藥後（15分，3〇分，45分，6〇分，75 分，90分，105分，120分，135分，15〇分，分，21〇分， 240分）之各時點採取呼氣，且使用gc_ms*析裝置 (ABCA-G，Eur〇pa Scientific社製）測定呼氣中排泄之Uc_ 二氧化碳氣體之濃度。 實驗組之結果（―♦—)與對照組之結果合併 員示於第2圖目中’縱軸係表示痛唆代謝異常測定製劑投 藥前採取之呼氣之5-C值（。/。。)(呼氣中》濃 度比）與製劑投藥後採取之各時點各自之呼氣5 1Sc值 (/Go)之差之Δ1%值（％Q)。又橫軸係表示製劑投藥後， 採取呼氣之時間（hrs)。 自第2圖可清楚得知，實驗組中可觀察出在活體内尿嘧 啶-2々被代謝而在啤氣中排泄出13c〇2,而藉由事先投予 DPD抑制劑人為地作成之^定代謝異常模式動物（對照組） 中，可觀察出"〇：02於呼氣中之排泄顯著低下。纟此可見， 藉由以尿嘴咬-2-13C作為有效成分之本發明之製劑（靜脈 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)公楚） -30- 1239248 A7 _______B7_ 五、發明説明（28 ) 注射投藥型態），可經由調查13C02於呼氣中之排泄舉動來 測定、評定因DPD之活性阻礙或活性低下導致之尿嘧啶代 謝異常之有無。 實施例2 調製以實施例1中使用之尿喊唆-2-13C作為有效成分 之經口投藥型態之嘧啶代謝異常測定製劑，並研討關於該 經口投藥製劑對測定嘧啶代謝異常之有用性。 (1 )嘧啶代謝異常測定製劑之調製 溶解尿哺咬 _2_13C ( Cambridge Isotope Laboratory 製） 300mg於O.lN-NaOH/saline溶液（ION氫氧化鈉溶液2ml中 加入生理食鹽水調整為200ml) 24ml中，加水調製成6〇mi 之作為經口用液劑之嘧啶代謝異常測定製劑（經口用液劑 10ml中含有50mg之尿嘧啶-2-13C)。 (2)實驗 使用業以絕食之英國小獵兔犬作為實驗動物，對第i 組（n=3 )以經口投予上述（1 )中調製之嘧啶代謝異常測 定製劑（50mg/10ml/body)(實驗組），對第2組（n=3) 首先與實施例1 (2)同樣以經口投予（e) -5_ (2_漠乙婦 基）·尿嘧啶製劑（DPD抑制劑）（83.3mg/15ml/body)，；[ 小時後與第1組同樣以經口投予嘧啶代謝異常測定製劑 (50mg/10ml/body )(對照組：尿嘧啶代謝異常模式動 物）。又，實驗組與對照組皆在經口投予嘧啶代謝異常測 定製劑後，為了洗去殘餘之試藥，使用該用來投藥之探針 更強制經口投予水1 〇ml。接著，兩組皆在嘧咬代謝異常、則 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） t 〆 % (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、可丨 -31- 1239248 A7 ______B7 五、發明説明（29 ) 疋製劑之投藥前與投藥後（15分，30分，45分，60分，75 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 刀 ’ 90分 ’ 1〇5分，120分，135分，150分，180分，210分， 240分）之各時點採取呼氣，且與實施例1同樣使用gc_ms 分析裝置（ABCA-G，Europa Scientific社製）測定呼氣中排 泄之13C-二氧化碳氣體之濃度。實驗組之結果（_♦ —)與 對…、組（-_)之結果合併顯示於第3圖。又，第3圖之縱 軸及橫軸與實施例1相同。 自第3圖可清楚得知，與靜脈注射投藥（實施例丨）之 情況相同，在經口投藥之情況下，藉由本發明之嘧啶代謝 異常測定製劑（實驗組），可觀察出尿嘧啶-2」4被代謝 而在呼氣中排泄出13c〇2,而另一方面，藉由事先投予DpD 抑制劑人為地作成之嘧啶代謝異常模式動物（比較組）中， 可觀察出13C〇2於呼氣中之排泄顯著低下。由此可見，藉由 以尿嘧啶-2-13C作為有效成分之本發明之製劑（經口投藥 型態），可經由調查13C〇2於呼氣中之排泄舉動來測定、評 定因DPD之活性阻礙或活性低下導致之尿嘧啶代謝異常之 有無。 以上，由實施例1及2之結果可知，本發明之嘧啶代謝 異常測定製劑，無關於其投藥型態，對利用呼氣簡便且精 度良好地測定在活體内之嘧啶代謝異常之有無是有用的。 實施例3 於0.05N之氫氧化鈉溶液50mlt，以％ 5mg、ιΐ3」 mg、226.2 mg及452.3 mg之比例溶解尿嘧啶· (Cambridge Isotope Laboratory 製），各自調製成 1〇 以 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公酱） -32- 1239248 A7 _—___B7 五、發明説明（3。） mol/ml、20 // m〇l/mi、40 // mol/ml及 80 # mol/ml之各濃度 之溶液。使用犬用經口探針將之對業以絕食之雄性英國小 獵兔犬（n=3 )，將各溶液以1 ml/kg體重之比例強制地經口 投藥後（投藥量：1〇、20、40及80#ml/kg)，更以2ml/kg 體重之比例強制經口投予水。在投藥前與投藥後1 5、30、 45、60、75、90、105、120、135、150、180、210及 240 分之各時點採取呼氣，測定呼氣中i3C_二氧化碳氣體濃 度’從得到之呼氣中13c-二氧化碳氣體濃度之過渡曲線求 得藥動力學參數之曲線下面積（AUC)及最高呼氣中13C-二氧化碳氣體濃度（Cmax)。 第4圖係顯示呼氣中13C -二氧化碳氣體濃度之過渡曲 線，第5圖及第6圖係各自顯示各投藥量與曲線下面積 (AUC)及最高呼氣中13C-二氧化碳氣體濃度（Cmax)之 關係。 從第4圖可清楚得知，呼氣中13C-二氧化碳氣體不論投 藥量，每一個都在投藥後15〜30分鐘達到最高濃度，之後 急速減少。又，如第5圖及第6圖所示，相對於各投藥量之 AUC及Cmax之標繪，幾乎皆成通過原點之直線，可判斷投 藥量、AUC及Cmax之間，各自為直線之相關關係。這意味 著在10〜80//mol/kg體重之投藥量中，尿嘧啶-2-13C之呼氣 排泄動態呈現線型性。 對嘧啶代謝能不明確之個體以40 // mol/kg體重之比例 經口投予含有尿嘧啶-2-13C之本發明之嘧啶代謝能測定用 製劑，從呼氣中13C-二氧化碳氣體濃度測定最高13C-二氧化 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) Α4規格（210X297公爱） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -、tr· -33- 1239248 A7 _ B7_ 五、發明説明（Μ ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 石炭氣體濃度（Cmax )時’假設該待測者之Cmax係50G/〇〇， 從第6圖可判斷該待測者之嘧啶代謝能較正常者約低下二 分之一（第6圖中Cmax=500/00，相當於以20 // m〇l/kg體重 之比例投予尿嘧啶-2-nC時）。 處方例1 混合甘露糖醇1400mg與尿嘧啶-2-13C ( Cambridge

Isotope Laboratory製）l〇〇mg，依照常法調製成顆粒劑之 形態。 處方例2 混合甘露糖醇900mg與尿嘧啶-2-nC ( Cambridge Isotope Laboratory製）l〇〇mg，依照常法調製成細粒劑之 形態。 [圖式之簡單說明] 第1圖係各嘧啶化合物（尿嘧啶、5_氟尿嘧啶（5_FU)、 胸腺嘧啶）藉嘧啶代謝過程中一連串之嘧啶代謝系酵素（二 氫嘧啶脫氫酶（DPD )、二氫嘧啶酶（DHPase )及冷-脲基 丙酸酶（冷-Upase))之分解舉動（代謝舉動）。 第2圖係顯示實施例1中將本發明之嘧啶代謝能測定製 劑經靜脈注射投藥於實驗動物之實驗結果。係顯示歷時地 觀察對健康受測動物以靜脈注射投予尿嘧時（一 ♦-），及對尿嘧啶代謝異常模式動物以靜脈注射投予尿嘧 啶-2-uC時經呼氣排泄之i3c〇2之舉動之結果。橫 軸係表示採取投藥後呼氣之時間（hr)，縱軸係以製劑投 藥前之呼氣之y 3C值（(呼氣中uccvucw濃度比） 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（21〇><297公爱） -34- 32 1239248 五、發明説明（ 之各採取時之呼氣〜、)之差W 亦相二來心呼氣排泄之"c〇2之量(第3圖及第顿 第3圖係顯示實施例2中’將本發明 製劑經口投藥於實驗動物之實驗社果 則疋 斜m 4驗、、-果。係顯不歷時地觀察 對健康文測動物以經口投予尿嘧啶·2_13(：時“♦),及 對尿㈣代謝異常模式動物以經口投予㈣時（ _-)經呼氣排泄之"c〇2之舉動之結果。 第4圖係顯示實施例3之實驗結果之圖。具體而古，係 顯示將含有各種不同比例之尿咳咬_2、之各^域謝能 測定製劑經口投予實驗動物，歷時地觀察歷時之呼氣中排 重（ 泄之△〜值（％。））之舉動之結果之圖。尿料 -2-13C之投藥量如下：10# mol/kg體重（_#_)、心则心 體重、40"m〇l/kg體重（一▲一）、8〇"m〇i/kg體 X - 第5圖係顯示由實施例3所得到之結果（第4圖）求得關 於尿嘴唆-2-13C之各投藥情形之曲線下面積（AUC)，以 尿嘴咬We之投藥量（"m〇1/kg體重）為橫轴、曲線下面 積（AUC :〇/〇〇· hr )為縱軸緣圖之結果之圖。 第6圖係顯示由實施例3所得到之結果（第4圖）求得關 於尿嘴唆-2-13C之各投藥情形之最高呼氣中濃度 (Cmax)，以尿嘧啶-2-13C之投藥量為橫軸、最高呼氣中 UC〇2濃度（Cmax)為縱軸繪圖之結果之圖。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） •35-

Claims (1)

12舰 tot 本 A 8 ^<S C8 08 申請專利範圍 第咖號專利街巾請專利範幌本94〇3〇7 •二種用於測定《代謝能之經σ或靜脈投藥的組成 其特徵在於包含有由5_氟尿，定、胸腺t定、杜 克西氟瑞定（d〇xyfluridine)、替加敦ο—)及卡 摩富爾U随。fur)構成之群中所選出之至少—種対 化合物或由二氫尿料、5_氟二氫尿射、二氫胸腺鳴 口疋、万-脲基丙酸、氟|脲基丙酸及^脈基異丁酸構 成之群中所選出之至少-種嘴咬代謝化合物作為有效 成分」且前述㈣化合物或喷咬代謝化合物係為碳原 子、乳原子或氮原子至少-種以同位素標識者。 2. 如申請專利範圍第i項之用於測定料代謝能之經口 或靜脈投藥的組成物’其中該同位素係由13。、丨4c、i8〇 及15n構成之群中任一者所選出之至少一種。 3. -種㈣外測定哺咬代謝能之測定方法，包含有：測 定-待測者呼氣中排出之同位素標冑c〇2之舉動之步 驟，且該待測者係經過用於測定射代謝能之組成物 投藥者，又，該用於測定嘧啶代謝能之組成物包含有 由尿密咬、5-氟尿哺唆、胸腺㈣、杜克西氟瑞定 (doxyfluridine )、替加氟（tegafur )及卡摩富爾 (cann〇fur)構成之群中所選出之至少一種嘧啶化合物 或由一氫尿嘧啶、5-氟二氫尿嘧啶、二氫胸腺嘧啶、石 -脲基丙酸、氟-/3-脲基丙酸及脲基異丁酸構成之群 中所選出之至少一種嘧啶代謝化合物作為有效成分， 且前述嘧啶化合物或嘧啶代謝化合物係為碳原子、氧 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八4規格（2〖〇 χ 297公爱） 裝 訂 t -36- 丄239248 申請專利範圍 4. 原：或氮原子至少—種以同位素標識者。 圍第3項之方法，其中更包含有:評定 5. : 待測者之C〇2之排出舉動等步驟。 種在體外測定關於待 度之方法，包含有定代謝異常或其程 素標識c〇2之排出舉動< ^者呼氣中排出之同位 排出舉動血且有正ϋ且將該得到之待測者之C02 料座 有吊㈣代謝能之健康受測者之上述 過如申，專利並且該待測者係經 成物苐1項之用於測定㈣代謝能之組 6. 2種在體外篩選氟尿_系藥物投藥適應者 法’包含有·· 敎-待測者呼氣中排出之同位素 出舉動之步驟；及 依據該所得到之待測者之CO2排出舉動挑選適於 投予氟尿嘧啶系藥物者之步驟， 且該待測者係經過如申請專利範圍第i項之用於 測疋吻α疋代謝能之組成物投藥者。 7·如申請專利範圍第6項之在體外筛選說尿料系藥物 投，適應者之筛選方法，其中該氟尿•系藥物係由 說尿密。疋、替加氟（tegafur)、卡摩富爾（㈣则如） 及杜克西氟瑞定（dGXyfluHdine)構成之群中所選出之 抗癌劑。 8·如申請專利範圍第i項之用於測定啦〇定代謝能之經口 -37- 1239248 Λ 8 Β8 C8 D8

六、申請專利範圍 或靜脈投藥的組成物，係含有由二氫尿嘧啶、5_氟二氫 尿嘧唆、二氫胸腺σ密啶、/^脲基丙酸、氣^_脈基丙 酸及/3-脲基異丁酸構成之群中所選出之至少一種嘧啶 代謝化合物作為有效成分者，且前述嘧啶代謝化合物 1 係為碳8原子1、氧原子或氮原子之至少！種分別以由 〇或Ν所選出之非放射性同位素標識者。 9·如申請專利範圍第8項之用於測定射代謝能之經口 或靜脈投藥的組成物，係設計成至少一種之碳原子及 乳原子分別以13c、18〇標識，並可測定經π投藥後呼 氣中排出之非放射性同位素標識C〇2者。 1〇· 一種在體外設定嘧啶系藥物之投藥設定方法，係包含 測定-待測者呼氣中排出之非放射性同位素標識 C〇2，然後評定該待測者之嘧啶代謝活性，其次根據已 評定之哺咬代謝活性來設定投藥方法，且該㈣者係 經：含有C及〇之至少一種分別以非放射性同位素13匸 及18〇標識之务定化合物或其代謝物之組成物投藥者。 11·如:請專利範圍第H)項之方法，其Μ㈣藥物係由 5氟尿％〇疋、替加氟（tegafur)、卡摩富爾（car则如） 及杜克西就瑞定（doxyfluridme)所選出之氟尿哺咬系 藥物。 12.如申請專利範圍第3項之方法，具有下述⑴〜㈣之步 驟： ⑴測定待測者以非放射性同位素標識之c〇2的步 驟’且該待測者係經過碳原子、氧原子或氮原子至少 衣紙張尺度適用中國國家標準 -38-

矛以非放射性同位素標識之尿嘧啶或胸線嘧啶投藥 者； (ii)測疋待测者以非放射性同位素標識之C〇2的步 驟’且該待測者係經過碳原子、氧原子或氮原子至少 種以非放射性同位素標識之二氟尿嘧啶或二氟胸線 嘧啶投藥者； (111)測定待測者以非放射性同位素標識之C02的步 驟，且該待測者係經過碳原子、氧原子或氮原子至少 種以非放射性同位素標識之3 _脲基丙酸或3 _脲基 異丁酸投藥者；及 (iv)由（i)〜(Hi)之測定結果決定待測者嘧淀代謝活性 之步驟。 13·如申請專利範圍第12項之方法，其中測定之嘧啶代謝 活性為二氫嘧啶脫氫酶之活性。 14·如申請專利範圍第3項之方法，包含有下述⑴〜(iii)之 步驟： ⑴測定待測者以非放射性同位素標識之c〇2的步 驟，且該待測者係經過碳原子、氧原子或氮原子至少 -種以非放射性同位素標識之n密钱二氣胸線 嘧啶投藥者； ⑻測定待測相非放射性同位素標識之⑶2的步 驟’且該待測者係經過碳原子、氧原子或氮原子至少 :種以非放射性同位素標識之^脲基丙酸或沒-脲基 -、丁酸投藥者；及 本紙狀度適财規格

-39- 1239248 Λ8 BS C.8 D8 六、申請專利範圍 (iii)由步驟⑴〜(ii)之測定結果決定待測者嘧啶代謝 活性之步驟。 15·如申請專利範圍第14項之方法，其中測定之嘧啶代謝 活性為二氫°密σ定酶或/3 -脲基丙酸酶之活性。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) Α4·規格（2 10Χ297公釐） -40-