TW548279B - Synthetic polysaccharides, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them - Google Patents

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548279 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（1 ) 本發明係關於新穎的合成多醣，其具有肝素之抗凝血及 抗血栓形成的醫藥學活性。 肝素屬於葡糖胺基多醣（GAGS)族，係爲異質的天然硫酸 化多醣類。 肝素製劑係爲内含一系列單醣單位（範圍介於1 〇至100或 以上）鏈的混合物。除了此種分子大小異質性外，另外並具 有由單醣之組成種類及其上之取代基所造成的構造異質性 (L. Roden in : ’丨The Biochemistry of Glycoproteins and Glycosaminoglycans", edited by Lennarz W.J., Plenum Press, New York and London，267-371，1980)。 各天然GAGs族通常具有某些程度之醫藥學活性。可將 所有由天然產物形成的G A G族組合在製劑中。因此（例如） 肝素及乙醯肝素硫酸鹽可對多種凝血因子具有同步的抗血 栓形成活性作用。 肝素之催化作用尤其是經抗凝血酶III (AT III)者會抑制 兩種涉及血液凝血率聯反應之酵素，即因子Xa及因子Ila ( 或凝血酶）。與凝血酶相較之下，含有由4至3 0個單醣鏈形 成的低分子量肝素（LMWHs)製劑的性質對因子Xa作用更具 有選擇性。 某些合成寡醣（尤其是EP 84999中所描述者）之性質能透過 抗凝血酶III選擇性地抑制因子X a，而對凝血酶並無任.何活 性。 目前已知在抑制因子X a時，肝素須透過抗凝血酶結合結 構區（ABD)與AT III結合，而在抑制因子Ila (凝血酶）時，肝 -4- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填· .«

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素須处過ABD與AT III結合，（透過其較不明確的結合結構 區（TBD)與凝血酶結合。 已知口成寡醣相當於肝素的ABD，並且在靜脈血栓形成 中.、有抗血技开^成的活性。此類化合物曾於Ep 及π 621，282以及於專利〔八2,040,905中描述。 ， 然而由於此類寡醣並無法抑制凝血酶，所以在預防動脈 血栓形成方面效果不彰。 ，能經at m活化而抑制凝血酶之肝素型葡糖胺基多醣的合 成已於專利申請案pCT/FR 97/〇1344中描述。 μ專利申明案係描述具有生物活性的新穎多醣衍生物。 特別是其具有抗凝血及抗血拴形成活性。此外，由於此類 多醣係爲合成物，因此可選擇性的改變其構造，特別是將 硫酸根取代基移除，因其會與某些鹼性蛋白質（例如：活化 血小板時釋放之血小板因子4 (pF4))交互作用而將凝血區 域内的肝素中和。如此一來，則可得到一種作爲強效的抗 血栓形成劑及抗凝血劑之多醣，尤有甚之，可避開活體中 某些具有中和肝素功效（尤其是對凝血酶）作用的蛋白質（例 如：P F 4 )。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 據顯示，此類經硫酸化及烷化的多醣尤其可成爲強效的 抗血栓形成劑及抗凝血劑，視其烷基及硫酸根在碳水化合 物骨架上的排列而定。 σ 根據一般發現，安排多醣之序列可精確的改變gAG_型之 活性以便形成具有肝素性質、非常活化的產物。 然而，某些在專利申請案PCT/FR 97/01344中描述的用於 -5- 本紙張尺度適用中國國家標率（CNS ) A4規格（210X297公釐） 548279 A7 五、發明説明（3 ) ~療人類t產物則難以改變，尤其是 。因此在#用卜故# & 月長的此類產物 UJ此在使用上述產物以預防或治療血检形 … 時重建或維持血液的流動性以避免引發出血。4 ::冋 方面之考量時，與此功能相關的騎在於以採料期各 之化合物爲較佳，因其較易於改變。 ，月短 此點係基於一般皆知病人在治療過程中會因任何突發狀 況而引發出血。同時亦有必要A )二 IJ叮T百必要在杬血栓形成的處理下對病 人進行外科手術。基於諸多因素，因而以使用 化合物較佳。 本發明之合成多醣在對老鼠進行測試時，意外地觀察到 其半生期會受到分子構造的影響，尤其是八3]0、1[]51)(凝血 酶結合結構區）及其間距（spacer)。 Q此，本“明係關於新穎的合成多酷，其構造與專利申 請案PCT/FR 97/01344中之化合物類似，但具有特定的性質 。此係基於以此類化合物對老鼠靜脈注射並評估其抗_Xa 之活性後，意外地發現其移除半生期少於一個半小時。 此類化合物爲六醣類，内含三種不同序列··硫酸化五醣 類序列DEFGH、非硫酸化七醣類序列z(MN)3及硫酸化四醣 類序列VWXY。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 依據本發明之化合物係爲酸性形式的合成多醣及其帶有 醫藥學上可接受之陽離子的醫藥學上可接受之鹽類，其陰 離子形式相當於下式（I)、（II)、（III)、（IV)及（V)其中之 本發明之活性結構 -6_ 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 at B7 五、發明説明（4 )

本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填頁) 訂 548279 A7 B7 五、發明説明（5 )

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〇Me 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210、乂297公釐） A7 548279 B7 五、發明説明（6 ) 本發明包含酸性形式或任何其醫藥學上可接受之鹽類形 式的多醣。於酸性形式中，-COCT及-so3_官能基分別是以 -COOH及-S03H的形式存在。 ”本發明多醣類之醫藥學上可接受的鹽類”係指多醣上有 一個或多個<〇〇_及/或-so3_官能基以離子键緊密地與醫藥 學上可接受的金屬陽離子键結。在依據本發明的較佳鹽類 中，其陽離子係選自鹼金屬陽離子，更佳之陽離子則是Na+ 或K+。 本發明亦關於製備本發明多醣之製作方法。 原則上，本製作方法係使用依據前述文獻報告所製備成 之雙-或寡醣合成纖維。尤其是參考文獻EP 300,099、EP 529,715、EP 621，282 及EP 649,854、以及 C· van Boeckel，M. Petitou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl·，1993，32，1671-1690。其後 再將此類合成纖維耦合在一起而形成依據本發明經完全保 護著的六醣類前驅物，再選擇性地予以去保護及硫酸化而 得到本發明之六酷類。 在上述偶合反應中之雙-或寡醣"供體π (具有變旋異構的 活化碳原子）係與雙-或寡醣”受體"反應，其係含有自由羥 基。 本發明之六醣類可依據以下之操作步驟合成，其係代表 如上述式（I)中表示的醣類單位。 首先製備在位置4 ’上帶有醇官能基之經保護的G Η、pGH 前驅物、經保護的E F、pEF前驅物（其變旋異構碳原子已活 化）。中間物pGH及pEF在反應後產生EFGH。再將非還原端 -9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 請 先 閲 讀 背 δ 5 意 Ψ 項 再 填

訂 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 __ί 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 548279 A7 B7 五、發明説明（7 ) 單位上的位置4去保護而產生前驅物pEFGH。 同時，依據相同的策略製備帶有YZ(MN) 3 D (其變旋異構 碳原子已活化）、pYZ(MN)3D部份之前驅物。 然後將四醣類pEFGH與pYZ(MN)3D反應而產生 YZ(MN)3DEFGH。將非還原端單位去保護以產生前驅物 pYZ(MN)3DEFGH。 同時製備前驅物VWX、pVWX。 將pVWX與pYZ(MN)3DEFGH反應後產生六醣類之直接前 驅物，在去保護及硫酸化後即產生預期的六醣類。 熟悉此技藝之專業人士可輕易地視受體及供體的取決而 採用多種可能的合成策略。例如，製備出供體 VWXYZ(MN)3 D並與EFGH搞合以產生想要的六酷類前驅物 。參考文獻參見，例如上述的參考文獻以及 Monosaccharides, Their chemistry and their roles in natural products，P.M. Collins and R.J. Ferrier，J· Wiley & Sons，1995 以 及G.J. Boons，Tetrahedron，1996，52，1095-1 121。 依據本發明之化合物經過生化及醫藥學研究後的結果顯 示其與描述於專利申請案PCT/FR 97/01344之產物相較之下 性質更佳。 本發明之化合物可選擇性地與AT III結合，且其親和力等 於或大於肝素，較之肝素則具有更佳的抗凝血及抗血栓形 成性質。 式（I)至（V)產物其總抗血栓形成活性係以在靜脈内或皮 下注射到老鼠靜脈瘀血及以凝血激素引發的模式評估（依據 -10- 本纸張尺度適用中國國家標率（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填頁) >

、1T 548279 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 Μ ----—— 67 1 心 " - -五、發明説明（8) 描逑於 J· Reyers et al· in Thrombosis Research，1980, 18, 669-674 <万法），及以在頸動脈及頸靜脈間植入分流器之老鼠動脈 才王禾成的模式（描述於Umetsu et Thromb· Haemost.，1978, J9, 74-83 )砰估。在此二實驗模式中，本發明化合物之ed% 二少與其他已知的合成肝素類相當或更小（ED%介於1及5 〇 奈莫耳/公斤）。因此本發明化合物具有特別有利的作用專 一性及特別有利的抗凝血活性。 基万；其生化及醫藥活性上之優點，本發明化合物可作爲 非^優秀的内服藥。其毒性與此用途完全相容。彼等亦非 常穩定且特別適於作爲組成醫藥產品之有效成份。 此外，本發明化合物不會被血栓形成過程中因血小板活 化而釋出之高劑量血小板蛋白質陽離子（例如：pF句所中和 。本發明心化合物特別適用於治療及預防動脈或靜脈血栓 的形成。 彼可在對源起於心血管及腦血管系統之病狀施行各種凝 血系統平衡矯正程序之後使用，此類病症例如：與動脈硬 化及與糖尿病相關的血栓性栓塞病症（例如：不穩定的心绞 痛、中風、血管造形術後再狹窄、動脈内膜切除術）或於安 裝血管内人工補缺物時使用；或與血栓溶解之後的血栓再 形成、與梗塞、與起因於局部缺血癡呆症、與末梢動脈疾 病、與血液透析、與心耳纖維性顫動或與使用主動脈-冠狀 動脈橋聯之血管人工補缺物相關的血栓性栓塞病症。本產 品更可用於治療或預防起因於靜脈血栓性栓塞病症，例如 :肺栓塞。彼可用來預防或治療發生在手術中或其他相關 --1 -I —^11 i I— i . (請先閱讀背面之注意事項再填pllf ) -Μ 丹填 訂 辦 -11 - 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 經濟部中央榡準局員工消費合作社印製 548279 五、發明説明（9) 二T用：症及細菌或病毒感染)所引起的血栓形成併 補缺物安裝時，本發明化合物可覆蓋人 補：物= 相容。尤其是彼可與血管内之人工 補缺物（移植膜）結合。在此 原二山力、班店、山L 了送擇性地在彼心未還 原-或逆原和上引入適當的支臂 649,854所描述。 子叹夂如七尸 本發明之化合物亦可作爲# .、用夕孔乳球進行動脈内膜切除 秦時足佐藥。 本發明之化合物非常穩定，因 藥之有效成份。 口此特別通於作爲組成内服 因此，依據本發明之化合物可製備成内服藥以治療 疾病。 依據彼其他的特性，本發明之主題是—種以含有上述合 成多醣作爲有效成份之醫藥組合物。 、本發明係較相關於一種醫藥組合物，其有效成份中含有 依據本發明的酸性形式化合物或其醫藥學上可接受之任何 鹽類一中之一，並選擇性地附加上一種或多種惰性且適當的 賦形刎。一般而言，本發明之多醣可用於治療與凝血官 障礙相關的病症。 匕 各劑量單位中，其有效成份的含量以適用於每日的劑量 馬王。一般而言，各劑量單位係視其劑量及投藥方式（例如 :藥片、明膠膠囊等、藥袋、藥水瓶、糖漿等、點滴、= 皮的或經黏膜的貼片）作適當調整，以便此劑量單位本有 0.1主100毫克之有效成份，較佳者爲〇5至50毫克。 -12 參紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填ml頁)

、1T ^1. 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 548279 五、發明説明（ —依據本發明之化合物亦可與一種或多種對所進行之治療 现用的其他有效成份組合，例如：抗血栓形成劑、抗凝血 剑、彳几血小板凝集劑（.例如：二匹達莫（dipyddam〇le)、阿斯 匹靈、提孔定（ticl〇pidine)、孔比道瑞（cl〇pid〇grd))或醣蛋 白lib/ Ilia複合體拮抗劑。 、此醫藥組合物可調配成供哺乳類（包括人類）使用之投藥 方式，以便能治療上述疾病。 因此所產生心醫藥组合物其優點爲具有多種形式，例如 :，注射用或飲用溶液、糖衣藥片、一般藥片或明膠膠囊 。藥學上以注射用溶液爲較佳形式。本發明之醫藥组合物 尤其適用於預防或治療血管管壁病症，例如：動脈硬化， T如在癌症手術或解除凝血管制後檢查發現到由細菌、病 母或酵素活化因子引發的高凝結狀態。其劑量範圍可視病 人=年齡、體重及健康狀況、併發症之特性及嚴重性、及 投藥路徑而異。此劑量包括每日投用約〇1毫克至約⑽毫 克的單劑或多劑，較佳者每日約0 5至約5〇毫克，其係以 肌肉或皮下、連續式或定期區間的方式投藥。 本發明之主題亦是醫藥組合物，其有效成份包括μ他 及選擇性地组合的上述化合物之―。此類組：物 係製造成可經消化道或非經腸路徑投藥。 t作爲口服、舌下、皮下、肌肉、靜脈、經皮、經黏膜 、局邵或直腸投藥用之本發明醫藥組合物中，並有嗖成广 可藉著與標準醫藥學載劑混合的投藥單位形式對動物及: 類進行投藥。適當的投藥單位形式包括口服形式，例如： 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) /V4規格（210:<297公楚 (請先閎讀背面之注意事項再填頁} :填π 訂 548279 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（1i) 藥片、明膠膠囊、粉末、顆粒及口服懸浮液或溶液、舌下 的及口類的投藥形式、皮下的、肌肉的、靜脈的、鼻腔的 或眼内的投藥形式及直腸的投藥形式。 在製備藥片形式之固體組合物時，其主要有效成份係鱼 醫藥學賦形藥混合，例如：明膠、澱粉、乳糖、硬脂_ 、/“私：阿拉伯膠等。藥片上可塗覆著蔗糖或其他合適 心材料’或可另經處理而使彼等具有長效或延效活性以 能連續地釋出預計量之有效成份。 ，製備明膠膠囊時，係將有效成份與稀釋劑混合，並將此 混合物倒入款的或硬的明膠膠囊中。 水^劑或其顆粒中所含的有效成份可與分散劑或濕潤劑 或few于刎（例如：聚乙烯基吡咯烷酮）、及增甜劑或 增強劑混合3 作直腸用投藥時，係與可在直腸内的溫度下融解之結人 劑（例如可可油或聚乙二醇）製備成栓劑。 ϋ ΰ 作非經腸的、鼻腔的或眼内投藥時，係採用水溶性懸浮 液、等張之生理食鹽水溶液或滅菌之注射溶液，其可含有 藥學相容的分散劑及/或濕潤劑，例如：丙二醇或丁二醇。 作爲經黏膜投藥時，其有效成份可在增強劑存在下調配 ，此增強劑包括，例如：膽鹽、親水性聚合物，例如：声 丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、乙基^ 維素、羧甲基纖維素、聚葡萄糖、聚乙烯基吡咯烷酮、^ 膠、澱粉、明膠、酪蛋白、丙烯酸、丙烯酸酯及其共聚物 、乙晞基聚合物或共聚物、乙晞基醇、烷氧基聚合物、聚 (請先閲讀背面之注意事項再填頁j 、1Τ _ —·

V -14- 本紙張尺度適用中國國家標準（Cns ) Α4規格（210Χ 297公釐） 548279 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（12) 氧化乙晞聚合物、聚醚或其混合物。 有效成份亦可選擇性的與一種或多種載劑或添加物調配 成微膠囊之形式。 有效成份亦可與環糊精，例如：α、/?或r環糊精、2 -羥基丙基-/?-環糊精或甲基-/?-環糊精調配成複合物之形 式。 有效成份亦可從含彼之氣球中釋出或由血管内延長器引 入血管。因此並不致於影響有效成份之醫藥學效能。 皮下投藥是較佳的路徑。 以下之方法、製備及圖表係在展示各種適用於產生依據 本發明多酿之中間物的合成。 本文使用之簡寫説明如下： TBDMS :第三-丁基二甲基矽烷基；Lev :塊莖糖醯基； Β η :芊基：B z :芊醯基：TLC :薄層色層分析法；〇lm : 三氯乙醯亞胺醯基；LSIMS :液態二級離子質譜分析法； ESIMS :電子噴灑游離質譜分析法；TMS :三甲基矽烷基； TSP :三甲基石夕燒基四氘丙酸納：T f :三氟績酸鹽；M S : 分子篩；ΡΜΒ : ρ -甲氧基芊基：ΜΡ : ρ -甲氧基苯基；TS :甲苯橫醯基；ΕΤ:乙基；Ph:苯基；Me:甲基：Ac: 乙si：基。 Do'vex®，Sephadex®，Chelex® and Toyopearl® 爲註册商標。 於下述之方法、製備及實施例中，一些關於醯亞胺酯類 (imidates)之催化耦合反應、塊莖糖酸酯分解反應、硫基醣 苷之催化耦合反應、p -甲氧基芊基之皂化反應、甲基化及 -15- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210乂 297公釐） 請 先 閱 讀 背 冬 i 事 項

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f 548279 A7 B7 五、發明説明（13) %擇性去保護反應、暴醣及多st藉著爷基g旨或醚氫解作用 之去保護及硫酸化反應、醋類之包化反應或硫酸化反應可 運用下列一般方法使用適當的中間物進一 成實施例旨在詳細説明本發明之化合物。仃。本文以下之合 (請先閱讀背面之注意事項存 一丨丨 丹頁) 訂 r 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -16· ______ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（14: 圖1 合成五醣9

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548279 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 ______B7__五、發明説明（15) 製備1 乙基 〇-(2，：> - 一 - 0- :^:8&基-4,6-〇-亞宇基-<^-〇-1?比喃葡萄 糖基）-(l — 4)-2,3,6 -二-0-爷酿基-l-石灵基-/? -D-p比喃葡 萄醣苷（2) 、 將+酿基氣（24.5¾升，211毫莫耳）在20分鐘内逐滴加至 化合物1(16.7克，35.2毫莫耳）之冰冷（〇。〇的吡啶（202毫升)溶液中（J. Westman and M. Nilsson，J. Carbohydr. Chem.，1995, 14 (7)，949-960)。反應混合物在室溫下攪摔20小時；由丁Lc 顯示約5 0 %發生轉換。混合物用水及二氯甲烷稀釋。經萃 取後’有機相用1 0 %碳酸氫鋼溶液及水清洗，以硫酸鎂乾 燥及濃縮。殘餘物依上述步驟再以芊醯基氯處理。粗產物 用二氧化矽凝膠管柱色層分析法予以純化而產生2 2克之化 合物2。 TLC : Rf = 0.80 ’二氧化石夕凝膠，9 / 1 v / v甲苯/乙醇。 製備2 〇-(2,3-二苄醯基-4,6-〇_亞爷基-α - D_吡喃葡萄糖基 )-(l—4)-〇-(2,3,6-三-〇-苄醯基吡喃葡萄糖基卜 (1->4)-1，6-脱水-2,3-二-〇_甲基J _D-吡喃葡萄糖（4) 將硫基醣苷2( 1.05克，1·〇5毫莫耳）、化合物3 (2〇〇毫克，1.05毫莫耳）（Jeanloz et al.，J· Org. Chem. 1961，26, 3939-3944) 及粉末狀的4人分子篩克）之甲苯（1 8毫升）混合物在氮 氣下揽掉1 5分鐘。然後將混合物冷卻至_ 2 〇 ，並加上由 N-碘基琥珀酸二醯亞胺（1·：Π毫莫耳）及三氟曱磺酸（〇125 -18 - 本紙張尺$用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐)~ (請先閲讀背面之注意事項再填頁} :填 訂

548279 A7 B7 五、發明説明（16 毫莫耳）與以1 / 1 v/v二氯甲烷/二呤烷（6毫升）新製備成之 溶液。1 0分鐘後，過濾紅色之反應混合物，用二氯甲燒稀 釋、萃取，依序用1 0 %硫代硫酸鈉溶液、1 〇 %碳酸氨納溶 液及水清洗，以硫酸鎂乾燥，然後真空濃縮。殘餘物用二 氧化碎凝膠管柱色層分析法純化而產生L25克之化合物4。 TLC : Rf = 〇·55，二氧化矽凝膠，4/6(ν/ν)庚烷/乙酸乙酯。 製備3 〇-(4，6-〇 -亞苄基-α - D- 吡喃葡萄糖基）(石_ 1)-吼喃葡萄糖基）-(1 — 4)-1，6-脫水-2,3-二-〇-甲基_点-13 一吡喃葡萄糖（5) <將第三丁氧化鉀（約50毫克）加至化合物4 (1.24克，L11 鼋莫耳）之l/l(v/v)甲醇/二呤烷（7毫升）溶液中。攪掉混合 tI小時並再加上5 〇毫克第三丁氧化鉀；然後再將混合物 杈拌6 〇分鐘。反應混合物用Dowex® 50WX8 H+樹脂中和， %過濾及以真空濃縮。以二氧化矽凝膠管柱色層分析後即 分離出665毫克之油狀化合物5。 TLC * p f — - 0.50，一氧化石夕凝膠，85/15(v/v)二氯甲垸/曱 醇。 製備4 〇/4,6-0-亞苄基_2,3-二甲基_ a -D-吡喃葡萄糖基）_ —4)-0-(2,3,6-三-〇_甲基-广一〜吡喃葡萄糖基卜— )，6脫水-2，j -二_〇_甲基_冷· D _吡喃葡萄糖（6 ) (請先閱讀背面之注意事項再 衣— 頁

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〔尺度適用 -19- (210X 297公釐） 548279 A7 五、發明説明（17) 〜一" 在氮氣下將氫化納（387毫克，9.65毫莫耳）加至化合物5 (660毫克，u毫莫耳）之冷卻的（代）無水四氯咬喃（^毫升 )溶」夜中。將甲基碘(〇51毫升，8 22毫莫耳)逐滴加入，並 在室溫下授拌混合物2 0小時。過剩的氫化鈉用甲醇予以破 壞，古將混合物倒至50毫升之冰水中。用乙酸乙酉旨萃取⑴欠 2 〇笔升）後，有機相用氯化鈉溶液清洗、以硫酸鎂乾燥及濃 縮而產生690¾克之化合物6。 TLC : RfU5，二氧化矽凝膠，95/5(v/v)二氯甲烷/甲醇。 製備5 二甲基1 -D -吡喃葡萄糖基）_(1 — 4卜〇- (2,0,6 -二甲基比喃葡萄糖基）-(1 — 4)·1，6-脱 水-2，3 -二_〇-甲基-卢_吡喃葡萄糖（7 ) 將化合物6(690毫克，1·〇3毫莫耳）溶於80%乙酸（7 3毫升） 中，並在4 0 C下攪拌2 〇小時。混合物在眞空下濃縮並與甲 苯共同杂> 發。用一氧化石夕凝膠管柱進行色層分析，以8 / 1 /1 二氯甲燒/乙酸乙酯/甲醇溶析產生569毫克之化合物7。 TLC · Rf - 〇·40 ’二氧化石夕凝膠，9 / J ( ν/ν)二氯甲烷/甲醇。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 製備6 〇 - ( 6 - 0 -苄醯基-2，3 _二_〇一甲基_ a _ D _吡喃葡萄糖基）·（ 1 *~>4)-〇-(2,3,6-三甲基-a _D_吡喃葡萄糖基卜（1^4卜 1，6-脱水-2,3-二-曱基^ - D_吡喃葡萄糖（8) 將1-芊氧基-1H-苯幷三氮唑（227毫克，丨〇5毫莫耳）及三 _______-20- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 〇X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（18) 靖 先 閱 乙基胺（1·15毫莫耳）加至化合物7(560毫克，0·96毫莫耳）之 二氯甲烷溶液中，混合物在室溫下攪拌2 0小時。反應混合 物用二氯甲烷稀釋，並用1 〇 〇/。後酸氫鈉溶液及水清洗。有 機相用硫酸鎂乾燥、過濾並蒸乾。產物用二氧化矽凝膠管 柱色層分析法純化產生6〇〇毫克之化合物8。 TLC : Rf=0.50，二氧化矽凝膠，9/1 (ν/ν)二氯甲烷/甲醇。 項

頁 製備7 〇-(2,3-二-〇-爷醯基_4,6-〇-亞爷基吡喃葡萄糖基 )(1 4 ) 〇 (2，J，6 -二-〇-芊醯基-/? - D - Ρ比喃葡萄糖基） ^ ^ r\ ψ η ^ I卷2,3_ 一甲基吡喃葡萄 糖基）-(1—4)-〇-(2,3 6-二 〇 甲芙 /? n . 訂 ，一 .Ο-甲基—冷.D-吡喃葡萄糖基 )-(l—4)-1，6 -脱水〇 3 — ，一〇-甲基U-吡喃葡萄梦（9) 依據描述於製備化合物4 ( } 9。搞合反應係在5。。下::二步継合物8轉換成化合物 TLC : Rf=0.50 ，二氧仆仏， 夕俠膠，2/8(v/v)庚烷/乙酸乙酯：

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本紙^尺度適用中國國家標準（CNS -21 - X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（19) 圖2-合成七醣1 4 yr

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1T m 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 OBz

-22 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210 X 297公釐） 548279 Α7 Β7 五、發明説明（20 ) 製備8 〇-(4,6-0-亞苄基-“_1：)_吡喃葡萄糖基）_(1 — 4)_〇_(点_ D-吡喃葡萄糖基）-(1 —4)_〇_(2,3_二_〇_曱基_a_D_吡喃 葡萄糖基）-(1 —4)-〇_(2,3,6_三_〇_甲基_D“比喃葡萄 糖基）-(l —4)-1,6-脱水_2,3_二_〇_甲基u"比喃葡萄 糖（10) 依據描述於製備化合物5之相同步驟將化合物9轉換成化 合物1 0。 TLC : Rf=0.3)，二氧化矽凝膠，9/1(v/v)二氯甲烷/甲醇。 製備9 0-(4,6-〇-亞芊基-2,3-二-甲基_ “ _!^吡喃葡萄糖基卜 (1 — 4)-〇-2,3,6-三-〇.甲基-/?—]〇_吡喃葡萄糖基卜（1 — 4)-0-(2,3,6-三-〇-甲基-“-]^吡喃葡萄糖基）_(1 — 4)_ Ο - ( 2，j，6 -二-〇-甲基_卢_ D -吡喃葡萄糖基）_ j，6 _脱水_ 2，3 _二-〇 _曱基_ /? _ D _ p比喃葡萄糖（1 1 ) 依據描述於製備化合物6之相同步驟將化合物1 〇轉換成 化合物11。 TLC : Rf^O. 50 ’二氧化石夕凝膠，9 / 1 ( v/ v)二氯甲燒/甲醇： 製備1 〇 〇-(2，3 -二-〇-甲基-a -D-P比喃葡萄糖基）_(][ — 4)-〇-(2,3,6-三-〇-甲基-/?-0-?比喃葡萄糖基）_(1 — 4)-〇-(2,3,6-三-〇-甲基-泛-0-叶匕喃葡萄糖基）_(1__>4)-〇- -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210X297公羡） (請先閲讀背面之注意事項再本頁) 、1Τ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 548279 A7 B7 五、發明説明（21 (2,3,6-三-0 -甲基-D_吡喃葡萄糖基）_(1—4广16•脱 水-2，3 -二-0 _甲基-/? - D -吡喃葡萄糖（j 2 ) 依據描述於製備化合物7之相同步驟將化合物丨丨轉換成 化合物1 2。 TLC : Rf=0.35，二氧化矽凝膠，9/l(v/v)二氯甲垸/甲醇。 製備1 1 〇-(6-〇-字酿基_2,3-二·〇-甲基-以-D-吡喃葡萄糖基 —4)-〇-(2,3,6-三-〇 -甲基_0_吡喃葡萄糖基）_(l —4)_ 〇-(2,3,6-三-〇_甲基_“_1)-吡喃葡萄糖基卜（1 — 4)_〇_ (2，j，6 一- 〇_甲基_yg 比喃葡萄糖基卜（1—4)-i，6_脱 水-2，3 *二-〇-曱基-々-D ·吡喃葡萄糖（1 3 ) 依據描述於製備化合物8之相同步驟將化合物12轉換成 化合物1 3。 甲苯/ TLC : Rf=〇.4〇，二氧化矽凝膠，7.0/1.5/1.5 v/v/v 乙酸乙S旨/乙醇 製備1 2 绶濟部智慈財屋总員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再iPIF本頁) 〇一（2,3-二芊醯基、4，卜〇-亞爷基吡喃葡萄糖基 )-（1 —4)-〇-(2,3,6-三—〇_宇醯基_ 0 吡喃葡萄糖基卜 (1 4 ) 〇 ( 6 -〇-下基* 2，3 _二_〇_甲基1 _ n南葡萄 搪基）-(1-4)-0-(2，3,6_三_〇·甲基1 吡喃葡萄糖基 )-(1 —4)^(2,3,6_三-〇-甲基_ a_D-吡喃葡萄糖基）_(1 ^4)-〇-(2,3,6-三-0、甲基一/^1^吡喃葡萄糖基）_(1—4)· -24 - 適用中國國家標準（ 548279

發明説明（22 1，6-脱水-2,3-二-〇_甲基·久·D_吡喃葡萄糖（i4) /依據描述於製備化合物9之步驟將化合物丨3與雙糖類2進 行_合反應而產生化合物14。 TLC : Rf==0·40，二氧化矽凝膠，7.0/1.5/1.5 Wv/v 甲苯/ 乙酸乙酯/乙醇。 (請先閱讀背面之注意事項再本頁)

、1T 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -25- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（23) 圖3-合成九醣19 14

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m. 11 -—習** —I l^i I...... ------ 1"*— : (請先閲讀背面之注意事項再本頁)

、1T 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 OBz

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.ml— I ,v i ....... - -- I—I -1 In --- -- HI - : .: I i --— 本纸張尺度適用十國國家標準（匚^3)六4規格（210父297公釐） 548279 A7 B7 五、 發明説明（24 ) --------- 製備1 3〇-(4,6-0_亞苄基-q _D-吡喃葡萄糖基）_(1—4)_〇_(冷〇峨喃葡萄糖基）-(1 — 4 )-〇-(2,3-二-0 -甲基一D % α U «•吡喃匍-萄糖基）-(^4)-0.(2,3,6三_〇_甲基n比喃葡萄糖 基）-(1 — 4)-0-(2,3,6-三-〇·甲基-a -D-吨喃葡萄糖基）_(1 —4)_0_(2,3,6.三_〇_甲基H峨喃葡萄糖基卜（卜 4)-1，6-脱水-2,3-二-0-甲基_/?-]0_吡喃葡萄糖（15) 依據描述於製備化合物5之相同步驟將化合物丨4轉換成 化合物1 5。TLC:Rf=0.60,二氧化矽凝膠，9/1(v/v)二氯甲烷/甲 (請先閱讀背面之注意事項再IBP本頁) r裝· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 製備14 〇-(4，6 -〇-亞下基-2，3 -二-〇_甲基- α _ D吡喃葡萄糖基） (1~>4)-〇-(2,3,6-三_〇_甲基_〇_吡喃葡萄糖基卜（1 — 4)-[〇-(2,3,6-二-〇_甲基_ π _d_p比喃葡萄糖基卜4) 〇-(2，3，6 -三_ 0 -甲基_冷_ D _吡喃葡萄糖基）_ ( ! — 4 )] 1，6 -脱水-2，3 -二_ 〇 _甲基_卢_ D _吡喃葡萄糖（】6 ) 依據描述於製備化合物6之相同步驟將化合物1 5轉換成 化合物1 6。 TLC : Rf=0.70，二氧化矽凝膠，9/1 (v/v)二氯甲烷/甲醇。 製備1 5 〇 ( 2,3 - 一 -〇-甲基-乂 - D-p比喃葡萄糖基）-(1—>4)-〇·» (2，3,6 -三-〇-甲基-冷-d -吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 )-[〇- 2 - 訂 27 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明説明（25 ) (2,356-三-0甲基-“-〇-吡喃葡萄糖基）-(1 — 4)-〇-(2,3,6 -三-0-甲基-/? -吡喃葡萄糖基）-(244)32-1,6- 脱水- 2,3 -二-0-曱基-冷- D-p比喃葡萄糖（17) 將化合物16 (5.05克，2.0毫莫耳）之80 %乙酸（50毫升） 么液在4 0 C下攪;拌2 0小時。將混合物以眞空濃縮並與甲苯 共同蒸發。將殘餘物溶於乙酸乙酯中並用水萃取。水相用 二氯甲烷萃取，此有機相用硫酸鎂乾燥、過濾及蒸乾產生 2.68克化合物17。 TLC : Rf=0.50，二氧化矽凝膠，9/l(v/v)二氯甲烷/甲醇。 製備1 6 0-(6-0-芊醯基-2,3_二_〇_甲基_ “ _ϋ_吡喃葡萄糖基 —4)-〇-(2，：>，6-二-〇-甲基->/5-〇-?比喃葡萄糖基）-(1~~> 4)[0-(2,3,6_ 三-0-甲基-“ - D-p比喃葡萄糖基）-(1->4) -〇-(2，3,6 -三-0 -甲基-θ -吡喃葡萄糖基）-(! — 4幻2 _〗，6 一 脱水-2，3 -二-0 -甲基-冷-D _吡喃葡萄糖（i 8 ) 依據描述於製備化合物8之相同步驟將化合物1 7轉換成 化合物1 8。 TLC : Rf=〇.80，二氧化矽凝膠，7.0/1 . 5/1 . 5 v/v/v 甲苯 / 乙 酸乙醋/乙醇。製備17 一 ~ 0 S &基-4，6 - 0 -亞卞基-a - D - ρ比喃葡萄糖基 )-(1 — 4 ) - 〇 - ( 2，3，6 -三-〇 -芊醯基-y5 - D -吡喃葡萄糖基）- -28- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再本頁)

裝- 、11 548279 Α7 Β7 五、發明説明（26) (1~>4)-〇-(6-0 -苄醯基-2,3 -二-0-甲基-汉-吡喃葡萄 糖基）-(1~>4)-〇-(2,3,6 -三-〇-甲基比喃葡萄糖基 )-(l — 4)-[0-(2,3,6 -三-〇-甲基-π - £)-卩比喃葡萄糖基）-(1 —4)-〇-(2,3,6-三-0-甲基-/5-〇-口比喃葡萄糖基）-(1~~> 4)]r 1，6-脱水-2,3-二-〇-甲基-/? - D-吡喃葡萄糖（19) 將硫基醣苷2 (1.97克，2.0毫莫耳，3.5 eq)、七醣類1 8 (〇·86克，0.57毫莫耳）及粉末狀4人分子篩之甲苯（22毫升） 混合物在氮氣下攪拌1 5分鐘。然後在室溫下遂滴加上内含 Ν -破基號珀酸二驢亞胺（496毫克，2.2毫莫等）及三氟甲續 酸（0.808毫莫耳）之1 / 1 ν/ν二氯甲烷/二呤烷（1 2毫升）新鮮 落液。1 0分鐘後過滤反應混合物，用二氯甲垸稀釋、萃取 ，用10%硫代硫酸鈉溶液及10%碳酸氫鈉溶液清洗，以硫 酸鎂乾燥及眞空濃縮。粗產物用二氧化矽凝膠管柱色層分 析法純化產生1.09克之化合物1 9。 TLC : Rf=0.80，二氧化石夕凝膠，6/2/2 ν/ν/ν甲苯/乙酸乙 酯/乙醇。 (請先閱讀背面之注意事項再本頁)

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -29- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（27 ) 圖4-合成九醣25 19

(請先閱讀背面之注意事項再本頁)

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經濟部智慧財產¾¾工消f合作社印製

• OAc -30- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 0 -甲基-y3 _ D -吡喃葡萄糖基）]2 〇 -甲基-吡喃葡萄糖（2 〇 ) A7 B7 五、發明説明（28 ) 製備1 8 0-(4，6-0 -亞苄基-“ _D^ 比喃葡萄糖基）_(1 — 4)-〇-(； y5 -D-吡喃葡萄糖基）-(l —4)-〇_(2,3-二-〇 -甲基-a - D-吡喃 葡萄糖基Μ1 — 4)-〇-(2,3,6-二-甲基-A 吡喃葡萄 糖基）-[(ι —4)-〇-(2,3,6-三_〇_甲基_ “ _D_吡喃葡萄糖基 )_ ( ! — 4 ) - 〇 - (2，3，6 -三-0 -甲其-β - n - W ”土 试 & --、， (1 一 4)-1，6 -脱水-2,3- 依據描述於製備化合物5之相同步驟將化合物1 9轉換成 化合物20。 TLC : Rf=〇.25，二氧化矽凝膠，5·0/2·5/2·5ν/ν/ν 甲苯/ 乙 酸乙酯/乙醇。 (請先閱讀背面之注意事項再本頁)

裝· 部 哲 財 t 合 作 社 印 製 製備1 9 0-(4,6-0-亞苄基-2,3·二-0甲基-a - D-吡喃葡萄糖基）-(1^4)-0-(2，j，6-二-〇 -曱基-A - D-p比喃葡萄糖基）-(1~> 4)-[〇-(2，j，6-二 _〇·甲基_ “ - D-p比喃葡萄糖基）_(ι — 4)-〇“2,3,6-三-0_甲基· 0 _D_吡喃葡萄糖基）_(1 6一脱水_2,3-二-〇 -甲基1 - D-吡喃葡萄糖（21) 依據彳田述於製備化合物6之相同步驟將化合物2 0轉換成 化合物21。 TLC : Rf=0.50 ’二氧化矽凝膠，6/2/2 v/v/v甲苯/乙酸乙 酯/乙醇。 -31 - f關家鮮（CNS ) A4規格（2IGX297公董 、-口 泉 548279 Α7 Β7 五、發明説明（29) α - (2,3-二-Q-甲基-π -D-p比喃葡萄糖基）-(1~>4)-0-( 2，3，6 -三，〇-甲基-- D -吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 ) - [ 0 -( 2，3，6 -三-〇-甲基-a - D -吡喃葡萄糖基）-(1 -> 4 ) - 0 -(2,3,6-三-〇-甲基-/?-0-吡喃葡萄糖基）-(1->4)]3-1，6-脱水-2,3-二-0-甲基-/5-0-吡喃葡萄糖（2 2) 依據描述於製備化合物7之相同步驟將化合物2 1轉換成 化合物22。 TLC : Rf=0.20，二氧化矽凝膠，6/2/2 ν/ν/ν甲苯/乙酸乙 酯/乙醇。 製備2 1 〇_( 6 - 〇 -芊醯基-2，3 -二-0 -甲基-π - D -吡喃葡萄糖基）-(1 —4 )-〇-(2,3，6 -三-〇-甲基-/9 - D -吡喃葡萄糖基）-(1->4)-[〇-(2，3，6 -三-0 -甲基-a - D -吡喃葡萄糖基）_(1 — 4)-〇-(2，3，6 -三-〇-甲基-/?-吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 ) ] 3 - 1 , 6 -脱水 -2，3 -二-〇-曱基_ /5 D -吡喃葡萄糖（2 3 ) 依據描述於製備化合物8之相同步驟將化合物2 2轉換成 化合物2 3。 TLC : Rf=0.20，二氧化矽凝膠，6/2/2 Wv/v甲苯-乙酸乙 經濟部智慧財產局貨工';/3費合作社印製 酯/乙醇。 製備2 2 〇-(6 - 0 -卞起基-4 - 0 -塊^至糖驗基-2，3 -二-〇-甲基-a - D _ 吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 )-〇-(2,3，6 -三-〇-甲基-/? - D -吡喃 -32- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） ^48279 A7 ^~^ ______ B7 五、發明説明（3〇) 葡萄糖基Ml—4)-[〇-(2,356-三_〇_甲基_ “ _D-吡喃葡萄 梃基）-(1~>4)-〇-(2,3,卜三·〇_甲基一卢_D_吡喃葡萄糖基 ，6 -脱水- 2,3 -二-〇-甲基-D -吡喃葡萄糖 (24) 將1-(3-二甲基胺基丙基）-3 -乙基氰胺氣化氫（4 8毫克， 〇·25笔莫耳）、塊莖糖酸（29毫克，0.25毫莫耳）及二甲基胺 基吡哫（4耄克，〇〇33毫莫耳）加至化合物23 p2〇亳克， ^67¾莫耳）之二嘮烷（丨毫升）溶液中。反應混合物在室溫 、氮氣下攪拌3小時。然後加入二氯甲烷及水，萃取後有機 相用水清洗，以硫酸鎂乾燥、過濾及濃縮。粗產物用二氧 化矽凝膠管柱色層分析法純化產生312毫克之化合物24。 TLC : Rf=〇.5〇，二氧化矽凝膠，6/2/2 v/Wv甲苯/乙酸乙 酯/乙醇。 製備2 3 〇-(6 - 0 -苄醯基_ 4 _〇_塊莖糖醯基_ 2，3 _二_〇一甲基_ “ d 吡喃葡萄糖基）-(1 — 4)-〇-(2,3,6-三-〇_甲基_/?_〇-吡喃 葡萄糖基）-(l—4)-[〇-(2,3,6-三-〇_甲基_ “ _D_吡喃葡萄 糖基）-(1 一> 4 )-〇-(2，3，6 -三-0 _甲基_ _ D -吡喃葡萄糖基 6 -二-〇-乙醯基-2,3 -二-〇-甲基-a，A 吡喃葡萄糖（2 5 ) 在室溫下將化合物24 (3 12毫克，0·155毫莫耳）於乙酸酶 (2.25毫升）、乙酸（5 〇毫升）及三氟乙酸（〇. 14毫升）之混合溶 液中攪拌4小時。加入甲苯（1 〇毫升）後，混合物經濃縮並 -33- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 訂

Jm 經濟部智慧財產局Μ工消費合作社印製 548279 Α7 Β7 五、發明説明（31 ) 與曱苯共蒸發（10毫升，3次）。以二氧化矽凝膠管柱色層 分析後分離出324毫克之化合物25。 TLC ·· Rf=0.65，二氧化矽凝膠，6/2/2 v/v/v甲苯/乙酸乙 酯/乙醇。 圖5 -合成九醣27 25 (請先閱讀背面之注意事項再ml本頁) ψ

製備24 ψ

0-(6-0-卞酿基-4-0 -塊至糖酿基-2,3 -二-〇-甲基-a - D- 經濟部智慧財產局Μ工消費合作社印製 吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 ) - 0 - ( 2，3，6 -三-0 -甲基-- D -吡喃 葡萄糖基）-(1 — 4 ) - [ 0 - ( 2,3，6 -三-0 -甲基-卢-D -吡喃葡萄 糖基）-(1 — 4 )-〇-(2，3 , 6 -三-〇-甲基-- D -吡喃葡萄糖基 ) ( 1 —^ 4)]3-6-〇-乙酿基- 2,3 -二-〇-甲基-α，/5 - D - 口比喃葡 萄糖（2 6 ) -34- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（32 將化合物2 5 (324毫克，〇·153毫莫耳）及嗎福琳（223 0.256毫莫耳）之甲苯（2毫升）溶液在3 5。(：下攪拌4小時。接 著再加上嗎福4 ( 22.3 // 1 )，反應混合物在3 5。〇下攪；掉2 〇 j 時。混合物用水快速冷卻。用二氯甲烷萃取後，有機相依 序用0 · 1 N鹽酸及水清洗、乾燥並蒸乾。以二氧化碎凝膠管 柱色層分析分離出280毫克之化合物26。 TLC ·· Rf=0.45，二氧化矽凝膠，6/2/2 Wv/v甲苯/乙酸乙 @旨/乙醇。

U 經濟部智惡財產苟員工消費合作社印製 製備25 二氯乙酿亞胺酸〇 - ( 6 - 〇 -苄醯基—4 - 〇 -塊莖糖醯基-2，3 · 二-〇-甲基_ a - 吡喃葡萄糖基）_(1 — 4广〇-(2,3,6 -三一 〇-甲基-/? -D-吡喃葡萄糖基）_(1 —4)-[〇-(2,3,6_三_〇一 甲基-α-D w比喃葡萄糖基）_(1 —4)-〇-(2,3,6_三甲基-/5-D-吡喃葡萄糖基）_(1 —4)]3-6-〇_乙醯基_2,3_二_〇 一甲 基-π，y5 - D -吡喃葡萄糖酯（2 7 ) 將三氯乙呋（39微升，〇·39毫莫耳）及碳酸铯（47毫克）加 至化合物2 6 ( 138毫克，0.066毫莫耳）之二氣甲烷（1.5毫升） 溶液。攪拌2小時，將混合物過濾、濃縮，殘餘物經二氧化 矽凝膠管柱色層分柄,立丄，〇 > 士、 刀仰而產生1 52¾克之醯亞胺酯2 7。 TLC : Rf=0.35，二急 h 孔化矽凝膠，8/1/1 v/v/v甲苯/乙酸乙 酯/乙醇。 (210X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再ιρι本頁} :裝·

-、1T 35- 548279 A7 B7 五、發明説明（33 ) 圖6 -合成雙醣33

(請先閱讀背面之注意事項再ιριι本頁) :裝·

ΟΜβ OBn 31

訂 經濟部智慧財產^7〃貝工消費合作社印製 HCXDC—; OMe MeOv Κ ΒηΟ 〇Μ· HO r ΟΜβ 32 ! 、0 ΟΒπ I ϊ ▼ BnOOC — ΟΜβ MeO、 X ΒηΟ OMe HO r ΟΜβ \ ο ΟΒπ 33 -36 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（34 ) 製備26 甲基- 0- (4,6-0 -異亞丙基- 3- 0-甲基- a- L-吡喃艾杜糖基 -(1 —4)-2,6 -二-〇 -爷基-3-0 -甲基-a-D_吡喃葡萄醣苷 (29) 將化合物 28 (2.5克 ’ 3.53 毫莫耳）（M· Petitou et al.，J. Med.

Chem. 1997, 40, 1600 )用合成化合物5的方法處理，以二氧化 矽凝膠管柱色層分析後（2 / 1環己烷/乙酸乙酷）產生化合物 29 (2.1克，98%)。 TLC . Rf = 〇· ：> 2 ’ 一氧化石夕合疋膠，2/l(v/v)環己燒/乙酸乙 m ° 製備2 7 甲基-〇-(4,6-〇-異亞丙基-2,3-二-〇-甲基-“-^峨喃艾 杜糖基-(1 —4)-2,6-二-〇-爷基·3-〇_甲基1 -〇_吡喃葡 萄醣苷（3 0) 將化合物29 (2.0克，3.3毫莫耳）用合成化合物6的方法處 理，二氧化矽凝膠管柱色層分析後（5/1環己烷/乙酸乙醋） 產生化合物30 (1.83克，89%)。 TLC . Rf = 0.j8，一氧化砂凝膠，5/2( v/v)環己燒/乙酸乙 m ° 製備2 8 甲基-〇-(2，j - 一 -〇-甲基-q - p比喃艾杜糖基_ ( j — 4 ) _ 2，6 -二-〇-芊基-3 - CK曱基_ “ D 4比喃葡萄醣苷（3】） -37- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2ι〇χ 297公慶） (請先閱讀背面之注意事項再？^本頁)

、τ 經濟部智慈財產局8工消費合作社印製 548279 A7 B7 五、發明説明（35 將70%三氟乙酸水溶液（3·14毫升）加至化合物3〇 (1 %克 ，2.84毫莫耳）之二氯甲烷（16毫升）溶液中。5〇分鐘後反應 溶液用二氯甲烷稀釋，並用水清洗至中性爲止。有機相經 乾燥（硫酸鈉）、過濾然後濃縮。殘餘物用二氧化矽純化產 生化合物31(1.45克，88%)。

叫2(V :+i〇(c=i.〇，二氯甲烷） 經濟部智¾財產局g(工消費合作社印製 製備2 9 甲基-0-(2,3-二-甲基_ “ _卜吡喃艾杜糖基糖醛酸 ^4)-2,6-一-〇-爷基-3-〇-甲基-“-〇-吡喃葡萄醣答（32) 私2，2,6,6 -四甲基-1-六氫吡啶氧基（3.3毫克）、碳酸氫 鈉溶液（4毫升）、溴化鉀（2 2毫克）及四丁基氯化銨（2 9毫 )加至化合物3 1 ( 1 · 16克）之二氯甲烷（6毫升）溶液中。將 合物冷卻至0 °C，在1 5分鐘内加上飽和氣化鈉溶液（4 4 升）、飽和碳酸氫鈉溶液（2.2毫升）及次氣酸鈉（丨· 3莫耳， 笔升）之混合物。攪拌1小時後，混合物用水稀釋並用二私 甲：fe萃取（3次）。有機相用氯化鈉水溶液清洗，以硫酸鎂乾 燥、過濾並蒸乾，產生3 4克之粗化合物3 2。 Rf=0.22，二氧化矽凝膠，10/1(v/v)二氯甲烷/甲醇。 製備3 0 甲基〇-(卞基-2,3 -二-〇-曱基-乂 - L - p比喃艾杜糖基糖酸酸 酷Μ 1 — 4 ) - 2，6 -二-〇-节基-3 - 〇 -甲基-a - D -吡喃葡萄醣 ^(33) 克 混 毫 氯 (請先閱讀背面之注意事項再本頁)

-5口 -38 本’.氏張尺度適用中國國家標準（^^5)八4規格（21〇乂297公釐 548279 A7 B7 五、發明説明（36 ) 將化合物32在氮氣下溶於N，N-二甲基-曱醯胺（11毫升） 。加入碳酸氫鉀（0.67克）及苄基溴（1.07毫升），將混合物攪; 拌90分鐘。加入乙酸乙酯及水，萃取後濃縮有機相。用二 氧化矽凝膠管柱色層分析法純化所產生之0.99克化合物33。 TLC ·· Rf=0.58，二氧化矽凝膠，1/4 v/v甲苯/乙醚。 圖7 -合成四醋36 (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 衣· 太 V OAc

OBn OMe 35 、11 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 r

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本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（37) 製備3 1 甲基- 0- (芊基- 4- 0-塊莖糖酿基- 2,3 -二-0-甲基比 喃葡萄糖基糖醛酸酯-(1 —4)-0-(3,6_二-乙驢基_2-〇 +基-α-D-p比喃葡萄糖基）-(1-~>4)-〇-(爷基2,3 - - ·〇_甲 基-a - L -吡喃艾杜糖基糖醛酸酯）-(1 _> 4 ) - 2,6 -二_ 〇 _爷基 -3-0 -甲基-a - D-p比喃葡萄酷答（35) 將化合物3 4(274毫克，0.31毫莫耳）（M. Peth〇u，et吐， J.Med· Chem·，1997, 40，1600)及化合物 3 3 (200 毫克，〇 29 毫 莫耳）之甲苯（10毫升）溶液在-20°C、分子篩存在下（22〇毫 克）以三氟甲磺酸第三-· 丁基二甲基矽烷酯（i莫耳濃度之甲 豕洛液0.15宅升）處理。攪拌1 0分鐘後，反應混合物經中和 (NaHC〇3)、過濾及濃縮。用二氧化矽凝膠管柱色層分析產 生化合物35(334毫克，80%)。 [Q]2〇d = + 31(c = 0.76，二氣甲燒）。 製備3 2 甲基-0-(芊基2,3_二-〇-甲基- /5-D-p比喃葡萄糖基-糖酸酸 酯）-(1 — 4 )-〇-(3，6 -二-〇-乙醯基-2 -〇-苄基-“ -D -吡喃 葡萄糖基Ml —4)-0-(苄基-2,3-二-〇 -甲基-“ -[_吡喃艾 杜糖基糖醛酸酯）-(1 — 4 ) - 2,6 -二-〇 -苄基· 3 _ 〇 -甲基—“-D -吡喃葡萄醣茹（3 6 ) 將化合物3 5 (308毫克，0.22毫莫耳）溶於甲苯/乙醇混合物 (1/2，43毫升）中，然後加入乙酸胼（1〇1毫克，5 eq)。攪 拌4 5分鐘後，濃縮混合物，然後用二氧化矽管柱純化產生 -40- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐) (請先閲讀背面之注意事項再ιρι本頁) 、τ 經濟部智慈財產局員工消费合作社印製 548279 A7 B7 五、發明説明（38 ) 化合物3 6( 162毫克，89%)。 [π ]20D = + 2 9(c = 1.05，二氯甲烷）。 經濟部智慈財產苟Μ工消費合作社印製 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（39 圖8-合成多_38

3CO 經濟部智慧財產局工消費合作社印製

4 37

-42- (請先閲讀背面之注意事項再本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（40 ) 製備33 甲基0-(6-0 -爷酿基-4-0 -塊莖糖隨基- 2,3 -二-0-甲基-以 一 D-p比喃葡萄糖基）-(1 — 4)-〇-(2,3,6 -三-0 -甲基-/? -D-口比喃葡萄糖基）-(1—>4)-[〇-(2,3,6-三-〇-甲基-泛-〇-?比喃 葡萄糖基）-(1 ~>4)-0-(2,3，6-二-0-甲基->/3-〇-^7比喃葡萄 糖基）-(1->4)-]3-0-(6-0 -乙醯基-2,3 -二-0-甲基-π - D-吡喃葡萄糖基）-(1 -> 4 ) - 0 -(芊基2，3 -二-〇 -甲基-/? - D -吡 南葡萄糖基糖路酸g旨）-(1 — 4)-0-(3,6 -二-0 -乙醒基-2· 0 -苄基-a - D -吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 ) - 0 -(芊基-2，3 -二-0 *甲基-a - L -吡喃艾杜糖基糖醛酸酯-(1 — 4 ) - 2，6 -二-0· 卡基-3 - 〇 _甲基_ “ _ D _吡喃葡萄醣答（3 7 ) (請先閱讀背面之注意事項再頁)

M濟部智祛財產苟員工消f合作社印製 υ - 丁恭-α υ ρ闲甫』刮啊甘、j / j 將醯亞胺酯27( 177毫克，76.6微莫耳）及受體3 6(201毫 ’ 〇. 1 5毫莫耳）之2 / 1乙醚/二氯甲烷混合物（2 8毫升）以 氣甲❺S父第二-丁基二甲基石夕燒g旨處理（1莫耳濃度之二氯甲 &落液11.5微升）合成化合物35。化合物依序用Sephade>^ LH - 2 0色層分析管柱（丨/丨二氣甲烷/乙醇）、二氧化矽管 (.$ / 1之甲苯/丙自同/乙醇）、最後以二氧化石夕管柱（3 / 2 丙缒7乙醇）純化產生衍生物37(116毫克，44%)。 T L C 、 • Rf—〇.31 ’ 二氧化矽凝膠，3/0.5/0.4 v/v/v 異丙 丙酮/乙醇。 克 甲 柱 驗/ 製備34 F基〇-(6 -〇-卞gS基、2，3 -二_ 〇 _甲基1 _ D _外匕喃葡萄 (1 — 4 ) ·〇-(2，3，6 -三、〇_甲基_ θ _ D _吡喃葡萄糖基） 糖 d -43. (210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（41 ) — 4)_[〇-(2,3,6 -三-〇-甲基-α-D -吡喃葡萄糖基— 4)-〇-(2，3，6-三-0 -甲基-y?-D-吡喃葡萄糖基 ]3 - CU ( 6 - 0 _乙醯基-2,3 _二_ 0 _甲基-a - E)-吡喃葡萄糖基 )-(1-Μ)-〇-(芊基2,3-二-0 -甲基吡喃葡萄糖基-糖 遂酸 §旨）-(1 — 4)-0-(3,6 -二-0-乙酿基-2-0 一爷基 “ - D-p 比 喃葡萄糖基）-(1->4)-0-(芊基-2,3-二-0 -甲基-Q七_吡喃 艾杜糖基糖趁酸酯- (1 — 4)-2，6 -二-0-苄基-3-0 -甲基_ α -D -吡喃葡萄醣菩（3 8 )。 依據描述於製備化合物3 6之步驟將化合物3 7 ( 11 〇毫克， 0.032毫莫耳）轉換成化合物3 8(95毫克，89%)。 TLC : Rf = 〇·32，二氧化矽凝膠，1 / 1 ( ν/ν)甲苯/丙酮。 (請先閱讀背面之注意事項本頁) ，tr 經濟部智慧財產局肖工消費合作社印製 -44- ^^^^中國國家標準（0奶）八4規格（210、乂 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（42) 圖9 -合成三酷43 OH OH OH H0

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OAc OAc AcO 40

本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（43 製備35 0-(2,3,4,6-四-〇-乙醯基-“-〇-吡喃葡萄糖基）_(1 — 4)_ 0-(2,3,6-三-〇-乙醯基-“-〇-吡喃葡萄糖基）-(1 — 4)_ 1，2,3,6 -四-0-乙醯基-y5 - D-p比喃葡萄糖（4〇) 將市售之麥芽三糖（7克，Π.9毫莫耳）在155。(：下分批加至 乙酸鈉（7克，85毫莫耳）之乙酸酐（70毫升）懸浮液中。15 分鐘後，將溶液冷卻並倒入冰水（700毫升）中。用乙酸乙醋 萃取後，有機相用水清洗，以硫酸鎂乾燥、經過濾、及濃縮 而產生13.1克之化合物40。 TLC : Rf=0.53，二氧化矽凝膠，7/3(v/v)二氯甲烷/乙酸乙 m ° 製備3 6 乙基〇-(2，3，4，6 -四-〇 _乙醯基-π - D -吡喃葡萄糖基X i — 4)-〇-(2,3,6-三-〇 -乙醯基· “ -D_吡喃葡萄糖基卜（1—4卜 2，：>，6-二_〇·乙醯基-1-硫基_d_p比喃葡萄醋苷（41) 將化合物40(1 3克，13.5毫莫耳）溶於甲苯（80毫升）。在 氮氣下加入乙硫醇（1.97毫升，26.9毫莫耳）及三氟化硼二乙 基醚（13.7毫升，1莫耳之甲苯溶液）。攪拌6〇小時後，用水 及一氯甲fe稀釋混合物。萃取後，有機相用1 〇 0/。碳酸氫鈉 落液及水清洗，經乾燥過濾及濃縮。粗產物用二氧化矽凝 膠管柱色層分析法純化產生8.6克之化合物4 1。 TLC : Rf=0·60，二氧化矽凝膠，7/3 (v/v)二氯甲烷/乙酸乙 醋0 -46- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再頁) 訂 548279 A7 五、發明説明（44 ) 製備37 乙基0如-D”比喃葡萄糖基）-(l —4)-0-( 喃葡萄 糖基）-(l —4)-1-硫基_D_吡喃葡萄醣苷（42) 依據描述於製備化合物5之步驟將化合物41轉換成化合 物4 2。 TLC:Rf=0.80,二氧化矽凝膠，13/7/1 6/4 乙酸 乙酯/吡啶/乙酸/水。 製備38 乙基〇-(2,3,4,6-四_0_节酿基^"比喃葡萄糖基）_(1 — 4)-0-(2,3,6·三吼喃葡萄糖基(卜& 依據描述於製備化合物2之步驟將化合物42轉換成化人 物 4 3。 口 經濟部中央標準局員工消f合作社印製 -47- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（45) 圖10 -合成多醣46 46 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 L 3

43 + 38 (請先閱讀背面之注意事項 — -- 項再本頁) 訂丨 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐) 548279 A7 B7 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 TLC : Rf=0.43，二 五、發明説明（46 ) 製備39 曱基0-(2,3,4,6-四-〇-苄醯基吡喃葡萄糖基— 4)-〇-(2,3,6-二-〇_苄醯基_“_1)_吡喃葡萄糖基）_(1 — 4)_ 〇-(2，j，6 -二-0-卞醯基_d·吡喃葡萄糖基— 4)_〇_ (6-0-苄醯基-2,3-二_〇_甲基_ σ 吡喃葡萄糖基）_(ι — 4)-〇-(2，j，6 -二-〇·甲基-冷_〇-吡喃葡萄糖基— 4)· [〇-(2,3,6-三-〇-甲基—“-1)_吡喃葡萄糖基）_(1 — 4)_〇_ (2,3,6-三-0-甲基-/5_1)_吡喃葡萄糖基）_(1-4)]”〇_(6_ 〇 -乙醱基_2,3_二甲基_ q - ^吡喃葡萄糖基卜4)_ 〇-(苄基2,3-二-〇 一甲基-卢^-吡喃葡萄糖基糖醛酸酯卜 4) 〇 (〇,6 一乙醞基-2·〇_芊基吡喃葡萄糖 基-(1 —4)冬（宇基2,3^〇-甲基比喃艾杜糖基糖 輸旨)-0-4)-2,6-二_0，_3心甲基1各 萄醣茹（4 4 ) 1 依據描述於製備化合物4之步驟將硫基醣苷43〇7〇毫克， 狐7微莫耳）及受體38(9〇毫克，27微莫耳）進行搞合。色 物先用Sephadex® LH 2 〇色層分析法（1 / 1二氣甲以乙醇以 化，接者用二氧化矽凝膠管柱色層分析法（12/1〇 να環已 烷/丙酮）純化以產生89 5毫克（68%)之化合物44。 氧化矽凝膠，（12/1〇 v/ν環己烷/丙酮） 製備4 0 曱基〇-(\3,4,6-四-0-芊醯基-«-D-吡喃葡萄糖基）_(1〜 4)-〇-(2,3,6-三-〇-苄醯基-«_〇-吡喃葡萄糖基）_(1—4)_ 49 - 本纸張尺度適财關家標準（CNS ) M規格（·χ 297公瘦） ^--J ；---― (請先閎讀背面之注意事項再頁) 訂— 548279 Α7 Β7 五、發明説明（47) (6-0-字醯基·2,3 -二-0 -甲基-a-D-吡喃葡萄糖基-(1 — 4)_〇-(2,3,6-三_0-甲基-/5-〇-吡喃葡萄糖基）_(1_>4)-[〇-(2,3,6-三-〇-甲基_ a - D-吡喃葡萄糖基_(；[ — 4)_〇_ (二一^-三…-甲基-^^-吡喃葡萄糖基^㈠—彳）；^…-…-〇_乙醯基-2,3_二-0_甲基_ α _D-吡喃葡萄糖基_(} — 4)_ 〇-(2,3-二-〇-甲基1-1：)”比喃葡萄糖基糖酸酸）-(1 — 4)-〇气3，6 -二-〇-乙醯基-a - D -吡喃葡萄糖基-㈠—斗）·^-(2，3 -二-〇_甲基泛-L -吡喃艾杜糖基糖醛酸）_ ( } _> 4 ) _ 3 _ 〇 -甲基-π-D-吡喃葡萄醣:y：(45) 將化合物44(8 0毫克，0.0163毫莫耳）之乙酸（3毫升）溶液 在氫氣壓力下（10 bar)、10% Pd/C( 160毫克）下反應。經 過濾後，將溶液濃縮而產生化合物4 5，不必純化即直接供 以下步驟使用。 製備4 1 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 甲基〇-(a - D -吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 ) - 〇 - ( π - D -吡喃葡萄 糖基）-(1 -> 4 ) - 〇 - ( /5 - D -吡喃葡萄糖基）_ ( 1 — 4 ) - Ο - ( 2，3 -二~〇-甲基-泛-D -吡喃葡萄糖基）-(1 4 ) - Ο - ( 2,3，6 -三- 〇-甲基-/? - D -吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 ) - [ 0 - ( 2,3，6 -三-0 -甲基- α- D-吡喃葡萄糖基）-(ι—4)-0-(2,3,6-三-〇-甲基-/3-D-吡喃葡萄糖基）-(1—4)]3o_(2,3_二-0-甲基-α-D -吡喃葡萄糖基）-(1 -> 4 ) - 〇 - ( 2,3 -二-〇 -甲基-y3 - D -吡喃 葡萄糖基糖醛酸）-(1，4)-〇-(以-D-吡喃葡萄糖基）-(1 — -50- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 548279 A7 ________B7 五、發明説明（48 ) 4)_0-(2,3-二-〇_曱基_ a 吡喃艾杜糖基糖醛酸）_(1 — 4)-3-0 -甲基-“ _D-p比喃葡萄醣菩（46) 將曱醇（2.8毫升）及5Ν氫氧化鈉溶液（〇69毫升）之混合物 加至化合物45(72毫克，0.016毫莫耳）中。將5]^氫氧化鈉 水落液（其數量足以使氫氧化鈉加入後之最終濃度爲〇 . 5 Μ) 加至酯類之甲醇（150毫升/毫莫耳）溶液中。在2乃小時後加 入水’將混合物通過Sephadex® G-25凝膠（1 6χ1ΐ5公分）管 柱並用k ;谷析。；谷析液經濃縮、通過D〇wex® 5紐+管柱（2 笔升）亚經冷凍乾燥。此時用質子NMR確認所有保護基均已 私除產物可視須要進行氳化作用及/或包化作用。產生化 口物4 ( 3 4笔克，在兩段步驟爲6 8 % )。 (請先閲讀背面之注意事項再^^^本頁)

裝. 訂 經濟部智慧財產局员工消費合作社印製 I 公 548279 A7 B7 五、發明説明（49) 圖1 1-製備雙醣54

54 製備4 2 (請先閱讀背面之注意事項再ml本頁)

經濟部智慈財產局員工消費合作社印製 甲基0 - 4，6 - 0 -亞芊基-2 - 0 -芊基-π - D -吡喃葡萄醣甞（4 8 ) 將市售化合物4 7 ( 6 0克）與苄基溴（50.5毫升）溶於Ν，Ν -二 甲基甲醯胺（858毫升）中。將溶液冷卻至+ 1 0 °C後，將2 0 % 氫氧化鈉溶液逐滴加上並攪拌混合物。1小時後將反應溫度 -52- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 548279 A7 ^__ B7___ 五、發明説明（SO ) 提高至2 0 °C，混合物繼續授捽2 0小時。再將溶液倒至水、 冰及甲苯之混合物中並萃取。濃縮有機相，其粗產物用結 晶法純化產生30.0克之化合物4 8，參見描述於J.M. Kuster et al· in Justus Liebigs Ann. Chem. 1975, 2179_2189 0 TLC : Rf=〇. 60，二氧化石夕凝膠，7/3(v/v)甲苯/乙酸乙醋。 製備43 甲基0-4,6·0 -亞爷基- 2- 0-爷基- 3- 0-甲基-a - D-p比喃葡 萄醣苷（49) 將化合物48 (26.4克）溶於ν，Ν-二甲基甲醯胺（211毫升）中 並冷卻至+ 5 °C。在氮氣下加上氫化鈉（3·2克）。接著逐滴加 入碘甲烷（11.3克），混合物在室溫下攪拌^小時。混合物用 乙鉍乙酯稀釋，以水清洗兩次及濃縮而產生2 8克之粗化合 物 49，參見 M. Petitou et ai. ln j Med Chem 1997, 4〇, 16〇〇_ 1607。 TLC :Rf=0.70,二氧化矽凝膠（7/3(v/v)甲苯/乙酸乙酯卜 製備4 4 甲基〇 2 〇 Ί、基甲基喃葡萄膽楚（50) 將化合物49(2 8克)落於甲醇⑽毫升)中。加入P-甲 酸（1.3 5克）’混合物在7 〇 丫' τ1 a 〜〇 ϋ下攪掉小時。混合物用 稀釋及濃縮。用二氧化矽龄 ^ 入一 匕矽#疋膠官柱色層分析法純化產 克之化合物5 0。 TLC : Rf-〇.〇7，一 氧化令 心（6/4(v/v)甲苯/乙酸乙酯） 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) (請先閲讀背面之注意事項再^一^本頁}

、=口 經 濟 部 智 & 財 產 王 消 費 合 作 社 印 製 苯續 甲笨 生2 1 -53 548279 A7 B7 五、發明説明（51 製備45 甲基0-2-0-苄基_3,6-二-〇 -甲基-“一〜吡喃葡萄醣苷 (51) 在氮氣下將化合物50 (11·8克）溶於二氯甲烷（16〇毫升）。 在室溫下將四氟硼酸三甲基_(7〇克）及2,6-二第三-丁基 -4 -甲基吡哫（10.6克）加入。2小時後將混合物倒至水及冰 的混合物中，用二氯甲烷萃取。有機相用碳酸氫鈉清洗及 濃°粗產物用二氧化矽凝膠色層分析法純化產生1〇丨克之 化合物5 1。 TLC : Rf=0.25，二氧化矽凝膠（7/3(v/v)甲苯/乙酸乙酯）： 製備46 乙基2，4，6 -二-〇 -乙醯基_ 3 _ 〇 _甲基_ 1 _硫基-卢_ L _吡喃艾 杜糖（5 2 ) 將1，2,4,6 -四-〇-乙醯基-甲基-“ 吡喃艾杜糖（ 依照其過卞酿基類似物之製備方式以乙酸酐取代芊醯基氯 而製成，參見Jaurand et al· Bio· Med. Chem. Lett, I"2, 2, 897- 經濟部智慧財產局Μ工消費合作社印製 900) (48.4克）落於甲苯（175毫升）。在氮氣下加入乙硫醇（2 〇 毫升）及三氟化硼乙醚酯（1 Μ之甲苯溶液，134毫升）。攪拌 1小時後’加入竣酸氫鈉（4〇〇毫升）水溶液，將混合物攪掉1 小時。將混合物倒至乙酸乙酯。有機相用水清洗兩次後:農 縮。用二氧化石夕凝膠管柱色層分析法純化產生2 9 . 6克之化 合物5 2。 TLC : Rf二〇·45 ’二氧化矽凝膠（6/4(v/v)甲苯/乙酸乙酯）' -54 - 本纸 浪尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21Qx297公釐） --—-— 548279 A7 - -~—----____ 五、發明説明 製備47 甲基0-(2,4,6-三-〇·乙醯基-甲基吡喃艾杜糖 基）-(l —4)-2-0-苄基-3,6_二甲基_“_D_吡喃葡萄醣 苷（53) 將化合物51 (1〇·1克）及化合物52 (16〇克）在氮氣下溶於甲 苯（304毫升）。加入粉末的分子篩（4Α)後，將反應溶液冷卻 i-20 C。在氮氣下將Ν-碘基琥珀酸二醯亞胺（1〇1克）及三 氟甲磺酸（0.80毫升）在1/丨（v/v)二崎烷/二氯甲烷混合物中 製備成之新鮮0 · 1 Μ溶液逐滴加入。丨〇分鐘後過濾反應混 合物，並依序用硫代硫酸鈉水溶液及碳酸氫鈉水溶液清洗 。濃縮有機相，殘餘物用二氧化矽凝膠色層分析法純化產 生21.1克之化合物53。 TLC · Rf-O.jO，一氧化石夕凝膠（6/4(v/v)甲苯/乙酸乙醋）。 製備4 8 甲基Ο - ( 3 - Ο _甲基_泛_ L -吡喃艾杜糖基）_ ( j — 4卜2 _ 〇 一芊 基- 3，6 -二-0 -甲基-α - D -吡喃葡萄醣：y： ( 5 4 ) 經濟部智慧財產P-7員工消費合作社印製 化合物5 j ( 21.1克）落於2 9 5毫升之甲醇/二崎燒混合物 (1/1 v/v)中並加上第三丁氧化鉀。3〇分鐘後混合物用^ 形式之Dowex 50WX8樹脂中和並經眞空濃縮。用二氧化石夕 凝膠色層分析法純化產生12.7克之化合物5 4。 TLC : Rf=0.08，二氧化矽凝膠（3/7(v/v)甲苯/乙酸乙酯） -55- 度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210父297公[「 548279 A7 B7 五、發明説明（53 圖12-製備四醣62

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r 61 : R = Lev : R = H -56· 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（54 製備49 甲基〇-(4,6-〇·異亞丙基-3-0 -曱基-π-L -吡喃艾杜糖基 )-(1 — 4)-2-〇 -苄基- 3,6 -二-〇-甲基- α- D-吡喃葡萄醣:y： (55) 在氮氣下將化合物5 4 (12.7克）溶於四氫吱喃（6 7毫升）。將 2，2 -二甲氧基丙烷（19毫升）及p -甲苯磺酸加入，在室溫下 攪拌混合物1 6小時。然後用破酸氫鈉水溶液稀釋反應溶液 並用乙酸乙酯萃取，蒸發溶劑後，粗殘餘物用二氧化矽凝 膠色層分析法純化產生10 4克之化合物5 5。 TLC : Rf = 0.35，二氧化矽凝膠（1 / 1 ( v/v)甲苯/乙酸乙酯）。 製備5 0 甲基0-(4,6-0 -異亞丙基-2,3-二-甲基-“-^吡喃艾杜 糖基）-(1—4)-2-〇· +基- 3,6 -二甲基- D-p比喃葡萄 醣苷（56) 將化合物5 5 ( 10.4克）溶於四氫呋喃（14〇毫升）中並冷卻至 1 〇 C。在氮氣下加入氫化纳（1.3 8克；6 0 %分散於油中）及 碘甲烷（1.84毫升）。4小時後過量之氫化鈉用甲醇破壞，混 經濟部智慈財產局其工消費合作社印製 合物用一氯甲反卒取及濃縮。殘餘物用二氧化石夕凝膠色層 分折法純化產生1 1 . 1克之化合物5 6。 TLC : Rf=0.55，二氧化矽凝膠（95/5(v/v)甲苯/乙酸乙酯）。 製備51 甲基〇-(2,3-二-甲基-α - L-吡喃艾杜糖基）·〇 —4)·2_ 57 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） 548279 Α7 Β7 五、發明説明（55) 〇 -苄基-3,6_二_〇_甲基_“_D_吡喃葡萄醣苷（57) 將化合物5 6 (11.1克）溶於7/3 (v/v)乙酸/水混合物中並攪 掉過夜。混合物在甲苯存在下蒸發兩次並用二氧化矽凝膠 色層分析法純化產生9 · 2克之化合物5 7。 TLC : Rf=〇.〇9，二氧化矽凝膠（m (v/v)甲苯/乙酸乙酯）。 製備52 曱基〇"*(2,3 - 一 - 0-甲基· a - L-p比喃艾杜糖基糖酸酸）_ ( 1 4)-2-0-苄基·3,6_二_0_甲基_a_D_ 口比喃葡萄酷菩（58) 私2,2,6,6 -四甲基-1-六氫p比淀氧基（13毫克）、飽和的後 §义氫鈉落液（1 6毫升）、溪化钾（8 8毫克）及四丁基氯化按 (U7毫克）加至化合物57 (4.7克）之二氣甲烷（28毫升）溶液 中。將混合物冷卻至〇。(：並在1 5分鐘内加上氯化鈉飽和溶 液（1入8毫升）、碳酸氫鈉飽和溶液（8 8毫升）及次氯酸鈉 (1 · 3莫耳；2 0毫升）之混合物。攪拌1小時後溶液用乙酸乙 酉曰稀釋’以氯化鋼飽和水溶液清洗，以硫酸鎂乾燥，經過 濾及蒸乾產生3 . 5克之粗化合物5 8。 TLC : Rf=〇.i4，二氧化矽凝膠，9/1 (v/v)二氯甲烷/甲醇。 製備5 3 甲基0 -(芊基-2，3 -二-〇 -甲基-a - L -吡喃艾杜糖基-糖醛酸 酯）-(1〜4 ) - 2 - 0 -苄基-3，6 -二-0 -甲基-a - D -吡喃葡萄酸 铝（59) 在氮氣下將化合物58 (3.5克）溶於Ν，Ν -二甲基甲醯胺9 -58- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再^||本頁) 、11 經濟部智慧財產局a(工消費合作社印製 548279 A7 ------------- 五、發明説明（56 ) 愛升）中。加入碳酸氫钟（1.76克）及爷基溴（2.85毫升），將混 合物攪捽4小時。加入乙酸乙酯及水，萃取後濃縮有機相。 用二氧化矽凝膠色層分析法純化產生3.4克之化合物59。 TLC : Rf = 0.43，二氧化矽凝膠，4/6(ν/λ〇甲苯/乙酸乙酯 製備54 甲基〇-(苄基4-0-塊莖糖醯基-2,3 -二-0-曱基- /5-D-吡喃 葡萄糖基糖醛酸酯）-(l — 4)-0-(3-0 -乙醯基-2-0 -芊基-6-0 -甲基 a - D-口比喃葡萄糖基）-(1~^4)·〇-(芊基2,3-二-〇-甲基-a - -吡喃艾杜糖基糖醛酸酯）-(1 — 4 ) - 2 - 0 -芊基 -〇,6 -二甲基_ “ _D-峨喃葡萄醋苷（61) 將化合物5 9 (0.53克）及化合物60(1.0克）之混合物在甲苯 存在下蒸發，並在氮氣下溶於二氯甲烷（16 2毫升）中。加入 粉末狀分子篩（4 A )，將混合物冷卻至_ 2 0 °C。攪拌1 5分鐘 後加入三氟甲磺酸三甲基矽烷酯（相當於化合物6 〇之〗5莫 耳％ )。1 5分鐘後，混合物用碳酸氫鈉水溶液處理。將分子 筛過遽後，滤液用二氯甲烷稀釋，以水清洗，經濃縮及用 一氧化矽凝膠色層分析法純化產生〇 75克之化合物6 1。 TLC : Rf=〇.45，二氧化矽凝膠（3/7(v/v)甲苯/乙酸乙酯）。 經濟部智您財產局資工消費合作社印製 製備5 5 甲基〇-(芊基2,3-二-甲基_冷-D"比喃葡萄糖基趁酸酯） -0-(3-0 -乙酶基-节基冬〇甲基-以D “比 喃葡萄糖基）-(1—4)-〇-(苄基-2〜3-二_〇-甲基-^1^吡 — _ -59- 548279 A7 B7 五、發明説明（57 ) 喃艾杜糖基糖醛酸酯）-(1~>4)-2-0 -苄基·3 6 — 〇_甲基_ a -D-吡喃葡萄醣:y：(62) 將化合物61(0.74克）溶於吡啶（3.0毫升）中，並在室溫下 加上乙酸（4. 1毫升）及肼水合物（〇47毫升）之吡啶（3〇毫升） 混合物。攪拌9小時後再加上二氯甲烷及水。將有機相分離 並依序用鹽酸溶液（1.0N)、碳酸氫鈉水溶液及水清洗。濃 縮有機相，並用二氧化矽凝膠色層分析法純化產生〇 66克之 化合物62。 TEC:Rf=0.25，二氧化矽凝膠（9 8/2(V/V)二氯甲烷/甲醇）。 以下之四醣6 8是用雙醣5 5依據與以下反應圖1 3類似的方 法開始製備。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（58 圖1 3-製備四醣68

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66 (請先閱讀背面之注意事項再一Pf本頁)

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OMe C 67 : R 3 Lev W 68 : R = H -61 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（59) 圖14製備四醣7 〇 z OMe HO ΟΒπ 43 -> Ph^ PMBO^ 〇Bn 69

AcO AcO AcO

SEt OMe 52 HO^/VoMe PMBO^ 〇Bn 71 HO^^OMe PMBO〆 〇Bn 70 (請先閱讀背面之注意事項再

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\ OMe -62- 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 Α7 --___ Β7 五、發明説明（6〇 ) 製備5 6 甲基2-0-苄基-4,6-二-CU亞；基-3-〇1_甲氧基苄基-卢 -D-吡喃葡萄醣甞（69) 將化合物48 (26.4克）溶於Ν，Ν_二甲基甲醯胺（211毫升）中 並冷卻至5°C。在氮氣下加入氫化鈉（2·5克）。接著逐滴加 上4_甲氧基苄基氯（13.3克），此混合物在室溫下攪拌2小時 。混合物用乙酸乙酯稀釋，以水清洗兩次並濃縮而產生4〇. 7 克之化合物6 9。 TLC:Rf==0.80,二氧化矽凝膠，7/3(ν/ν)甲苯/乙酸乙酯 製備5 7 甲基2〇-苄基j-0-ρ -甲氧基苄基-卢比喃葡萄酷芬 (70) 將化合物6 9 ( 34·9克）溶於6 Ο %乙酸水溶液中，並在6 〇 ,c 下攪拌4小時。混合物用甲苯稀釋及濃縮。用二氧化矽凝膠 官柱色層分析法純化產生26.4克之化合物7 〇。 TLC : Rf = 0 07，二氧化矽凝膠，7/3(v/v)甲苯/乙酸乙酯 製備5 8 甲基2-0-芊基-3-〇-y5 -甲氧基；基-6-CK甲基-n说，南 葡萄®I菩（7 1 ) 在氮氣下將化合物70 (26.4克）溶於二氣甲烷（263亳升）中 。在至溫下加入四氟硼酸三甲基鮮（η. 6克）及2，6 -二-第二 -丁基-/9 - 4-甲基吡啶（17.4克）。4小時後，將混合物倒入咏 -63· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再5^本頁}

玎 經濟部智慧財產苟Μ工消費合作钍印製 548279 五、發明説明（61 ) A7 B7 經濟部智¾財產局S(工消費合作社印製 水中並用二氯甲烷萃取。 ,^ , 有機相用碳酸氫鈉清洗及濃縮。 祖屋物用二氧化矽凝膠營 人u &枉色層分析法純化產生18.5克之化 合物7 1。 TLC : Rf = 〇·25，二夤仆功如脾 乳化夕奴膠，7/3(v/v)甲苯/乙酸乙酯 製備59 土、 （，，6 一 〇乙驗基** 3 - 〇 _甲基_ “ _ l - ρ比喃艾杜糖 基）-(1^4)-2-0 -芊基-甲氧基芊基_6_〇_甲基 D -吡喃葡萄醣苷（7 2 ) =化合物71(17.5克）及化合物5 2(28 2克）在氮氣下溶於 甲苯（525毫升）中。加入4人分子篩後，將反應混合物冷卻至 -〇 C在連續〜氮氣下逐滴加上Μ -破基琥珀酸二醯亞胺 (17.4克）及二氟甲磺酸（138毫升）製備成之〇ιμ ν/ν 一 π烷/二氯甲烷新鮮溶液。丨Q分鐘後過濾紅色反應混 合物，並依序用硫代硫酸鈉水溶液及碳酸氫鈉水溶液清洗 。以眞空濃縮有機相並分離出3〇.〇克之化合物72。 TLC : Rf =0.45，二氧化矽凝膠，8/2(v/v)二氣甲烷/乙酸乙 Sg 製備60 甲基-0-(3-0 -甲基-a - L- p比喃艾杜糖基）-(i—4)-2-0 -爷 基- 3- O- p-甲氧基爷基-6-0 -甲基-a - D- p比喃葡萄醣:y： (73) 將化合物72 (30.0克）溶於460毫升之1/1 (v/v)甲醇/二$ 烷中，並加上第三丁氧化鉀。1 5分鐘後，用Dowex® -64- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再本頁)

、-口 548279 A7 經濟部智慈財產局肖工消費合作社印製 五、發明説明（62 50WX8H+樹脂將混合物中和並以眞空濃縮。用二氧化矽凝 膠管柱色層分析法純化產生1 7.4克之化合物7 3。 TLC :Rf=0.25，二氧化矽凝膠95/5(v/v)二氯甲烷/甲醇 製備61 甲基〇（4,6〇-兴亞丙基。甲基吡喃艾杜糖基 )-(l —4)-2-0-苄基-3-Q-P·甲氧基苄基甲基_ “ _d_ 吡喃葡萄醣苷（7 4 ) 在氮氣下將化合物73(17.4克）溶於N，N二甲基甲酿胺（77 毫升）中。加上2,2-二甲氧基丙烷（26毫升）及p-甲苯磺酸 ，將混合物攪拌3 0分鐘。混合物用碳酸氫鈉水溶液稀釋並 用乙酸乙酯萃取，蒸發溶劑後產生19·7克之化合物74。 TLC : Rf = 0.4)，二氧化矽凝膠，95/5(ν/ν)二氯甲烷/甲醇 製備6 2 甲基0-(4,6-0-異亞丙基-2,3_二_〇-甲基-“-[_吡喃艾杜 糖基）_(1 — 4)-2-〇-字基_6_〇-甲基_ “ - D — 吡喃葡萄醣苷 (75) 將化合物74( 18.5克）溶於Ν，Ν_二甲基甲醯胺（24.4亳升） 中並冷卻至〇 °C。在氮氣下加入氫化鈉（丨47克；6 〇 %分散 於油中）及碘甲烷（2.36亳升）。1小時後過量之氫化鈉用甲醇 破壞，混合物用二氯甲烷萃取及濃縮產生2〇 〇克之化合物 75 〇 TLC : Rf=〇.85 , 一氧化石夕凝膠，95 / 5 ( v/v )二氣甲'j：完/甲醇。 請 先 閱 讀 背 面 項 裝 頁 訂 -65- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（63 ) 圖1 5合成雙醣60 75

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O曰η OMe 〇Bn OMe 78 COOBn θη0\ Γ^〇：^〇Μβ OMe 80

OMe BnO 81 經濟部智慈財產局肖工消費合作社印製

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C〇〇Bn 〇 Ac〇0 60 -66· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 Α7 Β7 五、發明説明（64 ) 製備63 甲基0-(4,6-0 -異亞丙基- 2,3 -二-0-甲基-π-L-p比喃艾杜 糖基）-(1->4)-2-0 -字基- 6- 0-甲基-α - D-外1：喃葡萄醣:y： (76) 將化合物75( 18.4克）溶於二氯甲烷（ 838毫升）及水（168毫升 )中。加入2，J 一氣-5,6 - 一篆基-1，4 -苯幷g昆（7.1克），混合 物在4 °C下攪掉1 8小時。將混合物倒至竣酸氫納水溶液中 並用二氯甲烷萃取。濃縮有機相產生12.7克之化合物76。 TLC : Rf=0.40，二氧化矽凝膠，9 5/5(\^/\〇二氯甲烷/甲醇。 製備6 4 甲基0-(4,6-0 -異亞丙基- 2,3 -二-0·甲基-“ - L-p比喃艾杜 糖基）-(1—4)-2,3 -二-〇-爷基- 6- 0-甲基-“ - D-p比喃葡萄 醣苷（77) 將化合物7 6 ( 10.5克）溶於無水Ν，Ν -二甲基甲醯胺（178毫 升）中並在氮氣下冷卻至0°C。加入氫化鈉（1.91克；60 %分 散於油中），接著逐滴加入芊基溴（3 . 3毫升）。3 0分鐘後反 應完成，過量之氫化納用甲醇破壞。加入水，混合物用乙 酸乙S旨萃取兩次。蒸發溶劑後產生13.6克之化合物7 7。 TLC : Rf二0.50，二氧化矽凝膠，l/l(v/v)甲苯/乙酸乙酯· 製備65 曱基Ο - ( 2，3 -二-0 -甲基-a - L -吡喃艾杜糖基）-(1 — 4 ) - 2，3 -二-Ο -芊基-6 - 0 -甲基-“ -D -吡喃葡萄醣苷（7 8 ) -67- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再本頁} ϋϋ · I - · 衣 开本 經濟部智毯財產局肖工消費合作社印製 548279 五、發明説明（65 人^合物77落於77/3 3 (v/v)乙酸/水中並檀拌過夜。混 、：舁甲苯共蒸發兩次，並用二氧化矽凝膠管柱色層分析 法純化產生11.5克之化合物78。 TL—C:Rf=G.G9,二氧化碎凝膠，ι/ι(ν~)甲苯/乙酸乙g旨。 Rf=0.68,二氧化碎凝膠，9/1(v/v)二氯甲規/甲醇。 製備6 6 甲基0 (2,〇 —甲基喃艾杜糖基糖酸酸）_(ι — )一’3 一 〇-爷基- 6- 0-甲基比喃葡萄醣苷（79) 將2,2,6,6 -四甲基-1-六氫吡啶氧基（33毫克）、碳酸氫鈉 溶液（40毫升）、溴化鉀（218毫克）及四丁基氯化銨（289毫克 )加至化合物78(η·6克）之二氯甲烷（60毫升）溶液中。將混 合物冷部至0 C並於1 5分鐘内加上氯化鈉飽和溶液（4 4毫升 )、碳酸氫鈉飽和溶液（21.8毫升）及次氯酸鈉（1 · 3莫耳，5 0 愛升）之/昆合物。揽掉1小時後，混合物用水稀釋，以二氯 甲燒萃取（3次）。有機相用氣化鈉水溶液清洗，以硫酸鎂乾 燥，經過濾及蒸乾產生13.4克之粗化合物79。 TLC : Rf=0.14，二氧化矽凝膠，9 /1 (ν/ν)二氣甲烷/甲醇。 經濟部智慈財產局’1貝工消費合作社印製 製備6 7 甲基〇-(爷基2，3 -二-0 -甲基-π - D - ρ比喃艾杜糖基糖酸酸§旨 )-(1 — 4)-2,3 -二-〇-卞基- 6- 0-甲基-a - D-p比喃葡萄醋替 (80) 在氮氣下將化合物79溶於Ν,Ν二甲基甲醯胺（110毫升）中 -68 - 本紙張尺度適用中國國家標举（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 548279 經濟部智慈財產局Μ工消費合作社印製 A7 _ _______________—_____—------ " * 五、發明説明（66 ) 。加入碳酸氫鉀（6.7克）及芊基溴（1〇·7毫升），混合物攪拌 9 0分鐘。加入乙酸乙酯及水並萃取後，濃縮有機相。用二 氧化矽凝膠管柱色層分析法純化產生9 · 9克之化合物8 〇 ° TLC : Rf=0.43，二氧化矽凝膠，4/6(v/\〇甲苯/乙酸乙酯。 製備68 甲基0 -(芊基2，3 -二-0 -甲基-/5 - D -吡喃葡萄糖基糖醛酸酯 )-(l—>4)-2,3 -二-0-爷基- 6- 0-甲基-π - D-p比喃葡萄醋替 (81) 將化合物8 0 ( 9.9克）溶於300毫升之甲醇中並在氮氣下回流 。逐滴加入1莫耳曱氧化鈉之甲醇（65.2毫升）溶液，混合物 攪拌回流3小時。混合物冷卻至室溫，加入1 ν氫氧化納 (22.2愛升）’反應混合物再銳摔90分鐘。用Dowex^ 50WX8 H+樹脂中和及過濾後，濃縮混合物。將純產物溶於^^^^ 二甲基甲醯胺（192毫升）中並在氮氣下加上分子篩。加入竣 酸氫鉀（3.2克）及字基溴（4.8毫升），將混合物攪拌$小時。 加入乙酸乙酯及水，經萃取及分離兩相後，將有機相濃縮 。粗產物用二氧化矽凝膠管柱色層分析法純化產生6 Η克化 合物8 1及1.88克起始化合物80。 TLC:Rf二0.55,二氧化矽凝膠，4/6(v/v)甲苯/乙酸乙酯。 製備69 甲基〇-㈠r基-4-0-塊至糖醯基一2,3 -二曱基-々〇比产 葡萄糖基糖醛酸醋）-(1—4)-2,3-二爷某$ 一 ^ ~ τ - a _ _69_ I紙張尺度適用中家標¥7cns ) (2ι〇χ 297：公釐^ -------- (請先閱讀背面之注意事項再本頁)

、1T 548279 A7 B7 五、發明説明（67) -D -吡喃葡萄醣：y： ( 8 2 ) (請先閲讀背面之注意事項再本頁) 將化合物8 1(6.2克）溶於40毫升之二，燒中。加入塊莖糖 酸（2.1克）、二環己基氰胺（3.75克）及4_二甲基胺基吡啶 (〇·2克），將混合物在氮氣下攪摔2小時。加入乙醚（95毫 升）並濾除沉澱。濾液用硫酸氫鉀水溶液清洗，以硫酸鎂乾 燥，經過濾及濃縮。自乙醚/庚烷中結晶產生6.2克之化合 物8 2。 TLC : Rf=0.26，二氧化矽凝膠，9 5/5(v/v)二氯甲烷/丙酮。 製備7 0 〇-（苄基-4 - Ο -塊莖糖醯基-2，3 -二-〇-甲基-/5 - D -吡喃葡 萄糖基糖醛酸酯）-(1~~>4)-1，3 -二-〇-乙醯基- 2- 0-芊基- 6-〇 -甲基-π，- D -吡喃葡萄糖（8 3 ) 經濟部智慧財產局工消費合作社印製 在氮氣下將化合物8 2 ( 6 · 1克）溶於乙酸酐（256毫升）中並 冷卻至-2 0 °C。在3 0分鐘内逐滴加入硫酸（4 9毫升）/乙酸 奸（4 9毫升）混合物。6 〇分鐘後，加入乙酸鈉直到混合物 P Η達到中性爲止。加上乙酸乙酯及水，濃縮有機相。用二 氧化碎凝膠官枉色層分析法純化產生4.2克之化合物8 3。 TLC : Rf=0.24 ’二氧化矽凝膠，8/2(ν/ν)二氯甲烷/乙酸乙 酯〇 製備7 1 〇-(苄基4-0-塊莖糖g龜基-2,3_二甲基_ 0 _D_吡喃葡萄 fe基糖醛酸酯）-(1〜4 ) · 3 _〇-乙醯基_ 2 _〇—苄基_ 6 〇-甲基 70, A4規格（210X 297公釐） 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) 548279 A7 _____ B7 五、發明説明（68 ) ，Ά -D-吡喃葡萄糖（84) 將化合物83(4.2克）溶於四氫呋喃（42毫升）中並加入六 氫吡啶（4· 1毫升）。混合物在室溫下攪拌過夜。加入乙酸乙 醋，混合物用0 · 5 N鹽酸清洗。濃縮有機相，殘餘物用二氧 化矽凝膠管柱色層分析法純化產生3.2克之化合物8 4。 TLC : Rf=〇.33，二氧化矽凝膠，l/l(v/v)二氯甲烷/乙酸乙 m 〇 製備72 〇-(芊基4 -〇-塊莖糖醯基-2，3 -二-0 -甲基-a - D -吡喃葡萄 糖基糖酸酸g旨）-(1—>4)-3-〇-乙酿基- 2- 0-爷基- 6- 0-甲1 -α，〇 - D -吡喃葡萄糖三氯乙醯亞胺酯（6 0 ) 在氮氣下將化合物8 4 (1 ·59克）溶於無水二氯甲燒中。加入 三氣乙腈（1 · 1毫升）及碳酸铯（7 2毫克），混合物攪拌！小時 ΰ濾除碳酸铯，濃縮濾液。用二氧化矽凝膠管柱色層分析 法純化產生1.57克之化合物60。 TLC : Rf=0.60，二氧化矽凝膠，3/7(Wv)甲苯/乙酸乙酯。 經濟部智慧財產^員工消費合作社印製 -準 標 家 國 國 |中 用一% 度 -尺

Ns 格 規 i釐 公 7 9 2 548279 Δ7 Α7 Β7 五、發明説明（69) 圖16-合成四醣86 60 + 80

86 (請先閲讀背面之注意事項再本頁)

訂 製備7 3 經濟部智惡財產局員工消費合作社印製 甲基〇-(芊基- 4- 0-塊莖糖醯基-2,3 -二-0-甲基-冷_D_吋匕 喃葡萄糖基糖醛酸酯）-(1 — 4 ) - Ο - ( 3 - 0 -乙醯基-2 -〇-芊基 -6 -〇-甲基-a - D -吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 ) - Ο -(芊基2，3 -二-〇-甲基-π - L -吡喃艾杜糖基糖醛酸酯）-(1 -> 4 ) - 2，3 -二-〇-苄基-6 -〇-甲基-a - D -吡喃葡萄醣茹（8 5 ) 將化合物8 0 (300毫克）及化合物6 0 (455.6毫克）之混合物與 -72- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） 548279 A7 __________B7五、發明説明（7Ό ) 甲苯共蒸發並在氮氣下溶於二氯甲烷（6毫升）中。加入4又 分子篩後，將混合物冷卻至〇Χ：。攪掉2〇分鐘後，加入 二氟曱磺酸三甲基矽烷酯（相當於化合物⑼之丨5莫耳％)。 10分鐘後，混合物用碳酸氫鈉水溶液中 ，遽液用二氯爾釋，以嫩，、咖^二= 凝膠管柱色層分析法純化後產生560毫克之化合物85。 TLC:Rf=0.50,二氧化矽凝膠，3/7(v/v)甲苯/乙酸乙酯。 經濟部智惡財產局ΰ(工消費合作社印製 製備7 4 甲基〇 -(卞基2，3 -二-〇-甲基-冷_ D -吡喃葡萄糖基醛酸酯卜 (一1:4)-0^-0-乙醯基_2冬芊基-6-0-曱基比喃 葡萄糖基）-(l —4)-〇-(苄基2,3·二甲基_ “_L_吡喃艾 杜糖基糖醛酸酯）-(144)-2,3_二-〇-;基_6_〇_甲基一 α _ D -吡喃葡萄醣苷（8 6 ) 將化合物8 5 ( 532.6毫克）溶於吡啶（19亳升）中，並在室溫 下加上乙酸（2.4毫升）及肼水合物（0.3亳升）之吡啶（1 9亳 升）混合物。攪拌9分鐘後，加上二氯甲烷及水。分開有機 ‘目並依序用〇 . 1 Ν鹽水溶液、碳酸氫納水溶液及水清洗。 奴細有機相，並用二氧化矽凝膠管柱色層分析法純化，產 生451毫克之化合物86。 TLC:Rf=〇.45,二氧化矽凝膠，3/7(v/v)甲苯/乙酸乙酯。 -73 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 、11 548279 A7 B7 五、發明説明（71 ) 圖17-合成單醣93 OTs 87

〇

〇 (請先閱讀背面之注意事項 -- 再本頁) ▼

MPO ^-OH 91 ▼ 、11

HO

〇Βη 93 Ο-

Ο^Ο ΜΡΟ ν-〇Βη 92 經濟部智慧財產局員工涓費合作社印製 製備7 5 ' 1，6 -脱水- 4- 0- ρ-甲氧ι基冬基-2 -〇-甲私㉘· 8¾基-- D - 口比 喃葡萄糖（8 8 ) -74- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 ______B7 五、發明説明（72 ) 在氬氧下將環氧化物87(20克，67毫莫耳）（見M. Cemy et al.，Collect· Czech· Chem· Commun，1961，26, 2542)及 p-甲氧基 驗（33.3克，268毫莫耳）之混合物加熱至9〇 。當混合物液 化時’分批加上AlCh( 0.3克，2.35毫莫耳），攪拌3〇分鐘 後再度冷卻至室溫’反應溶液用二氯曱燒（毫升）稀釋， 以三乙基胺（0 · 5毫升）中和，依序用i μ氫氧化鈉水溶液 (120毫升）、氯化鈉飽和水溶液（3 X 60毫升）、1〇%硫酸氫 鉀水溶液（5 0毫升）及氯化鈉飽和水溶液清洗。然後乾燥有 機相（硫酸鈉），經過濾及濃縮。殘餘物自乙醚中沉澱、純 化，並用二氧化矽凝膠管柱色層分析法純化產生化合物8 8 (19.4克，69%) 〇 TLC : Rf=0.37，二氧化石夕凝膠，6 / 1 ( ν/ν)二氯甲規/乙酸。 製備7 6 1，6 -脱水- 4- 0- Ρ-甲氧基苯基- 3- 0-甲基- 2- 0-甲苯磺醯基 -/? - D - ρ比喃葡萄糖（8 9 ) 經濟部智总財產局Μ工消費合作社印製 將甲基碘（54毫升，954毫莫耳）及氧化銀（18.4克，79.5毫 莫耳）加至化合物8 8 ( 3.36克，7.95毫莫耳）之無水ν，Ν-二甲 基甲酿胺（8毫升）溶液中。攪拌1 6小時後，過遽（Celite)混 合物，用乙酸乙酯（300毫升）稀釋，以水清洗（3 X 100毫升） ，經乾燥（硫酸鈉）、過濾、濃縮，並用二氧化矽色層分析 法純化產生衍生物8 9 ( 3 · 23克，8 0 % )。 TLC : Rf二0.36，二氧化矽凝膠，2/3 (v/v)環己燒/乙醚。 -75- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格（2丨〇><297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（73 製備77 1，6-脱水-4-〇-P -甲氧基苯基-3-0 -甲基-2-0-苄醯基f D -吡喃甘露糖（9 〇 ；) 、將化合物8 9(27.4克，62.7毫莫耳）溶於N，N-二甲基甲醯 胺（）15¾升）中。加入苯甲酸四丁基銨（341克，94〇毫莫耳） ，將落液在150°C下維持3 h。冷卻至室溫後，溶液用乙酸 乙酯（300耄升）稀釋，以水清洗至中性爲止，經乾燥及濃縮 。殘餘物（即化合物9 〇 )可直接於以下之步骤中使用。 TLC : Rf=〇.53，二氧化矽凝膠，1〇/1(v/v)二氯曱烷/乙醚。 (請先閱讀背面之注意事項再本頁)

經濟部智慈財產局員工消費合作社印製 製備7 8 1，6-脱水- 4-0-P -甲氧基苯基_3-〇 -甲基- 〇_吡喃甘露 糖（9 1 ) 將甲氧化鈉（13.5克，250毫莫耳）加至上述粗殘餘物9〇之 二氯甲烷/甲醇（5 4 0毫升，1 / 1 )溶液中。攪拌1小時後，反 應落液用二氯甲fe ( 500毫升）稀釋，以3 %鹽酸水溶液及水 清洗。經乾燥、過濾及濃縮後，殘餘物用二氧化矽純化產 生化合物91(10.5兄’兩步骤之產率爲59%)。 TLC ·· Rf = 0.29，二氧化石夕凝膠，ι/ι(ν/ν)甲苯/乙·。 製備7 9 1，6 -脱水- 2- 0-芊基- 4- 0- P-甲氧基苯基- 3- 0-甲基- D- p比喃甘露糖（9 2 ) 將苄基溴（6.2毫升，51.9毫莫耳）加至化合物91(9.8克， -76· 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 訂 548279 經濟部智慧財產局Μ工消費合作社印製 A7 一———·' —_________ B7 五、發明説明（74 ) 34·6毫莫耳）之N，N-二甲基甲醯胺（180毫升）溶液，接著在〇 C下加入95%氫化鈉16克，48_4毫莫耳）。攪拌16小時後 在0 C下加入甲醇（3毫升），反應混合物用乙酸乙酯（2〇〇毫 升）稀釋’水清洗，乾燥，經過濾、及濃縮。殘餘物即化合物 9 2不必純化可直接用於以下之步驟。但是經二氧化石夕色層 分析法後可產生分析級的溶析 化合物。 [a]2〇D = -49(c = 〇.73，二氯甲烷）。 製備8 0 1，6-脱水-2-〇_爷基-3-0·甲基·々吡喃甘露糖（93) 將上述粗合物92溶於THF/水混合物（311毫升，17/1)中， 然伎在0°C下加入硝酸鈽化銨（76克，Π8亳莫耳）。攪拌 分鐘後，反應混合物用二氯甲烷（1升）稀釋，以2 %碳酸氫 鈉水落敗及水清洗。經乾燥、過濾、濃縮後，殘餘物用二 氧化矽=屯化產生化合物93 (6.63克，兩步驟之產率爲α%)。 [^^'-^((^.(^，二氯甲烷）。 、以下九醣94是用單醣93依據與從單醣3製備九醣以之類 似反應步驟加以製備。 548279 A7 B7 五、發明説明（75) 圖18合成九醣96

▼

請 閲 讀 背 面 冬 意 事 項 頁 經濟部智惡財產局員工消費合作社印製 製備81 〇-(6 - 0 -苄醯基-4 -〇-塊莖糖醯基-2，3 -二-0 -甲基-π - D -吡喃葡萄糖基）-(1 -> 4 ) - 0 - ( 2，3，6 -三-〇-甲基-yS - D -吡喃 葡萄糖基）-(1 4 )-[〇-(2，3，6 -三-〇-甲基-π - D -吡喃葡萄 糖基）-(1 - 4 )-〇-(2，3，6 -三-〇-甲基-/5 - D -吡喃葡萄糖基）-(1—>4)]3-1,6-脱水- 3- 0-甲基- D- p比喃甘露糖（95) 78- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 Μ --___ ___ Β7 五、發明説明（76 ) 知5/〇 pd/C(l〇9亳克）加至化合物94(759耄克，0.36毫莫 耳）之二氯甲烷/t-丁醇混合物（3·3毫升，1/2)溶液中。在 1() bar、55°C下攪拌16小時後，混合物經過濾及濃縮。化 合物9 5不須純化或定性即可於以下之步驟中使用。 製備82 0-(6-0 -爷醯基-4-0-塊莖糖醯基-2,3-二-〇 -甲基-a-D-P比喃葡萄糖基）-(1 — 4 ) - 〇 - ( 2，3，6 -三-〇 -甲基-々-D -吡喃 葡萄糖基）-(1~>4)-[〇-(2,3,6-三-〇-甲基-“-1)-吡喃葡萄 糖基Μ1 — 4)-〇-(2,3,6 -三-0-甲基- /S-D -吡喃葡萄糖基 )-(1 ) ] 3 - 1，6 -脱水-2 - 〇 -爷醯基-3 - 0 甲基-0 - D -吡喃 甘露糖（9 6 ) 將节醯基氯（6 2微升，〇· 54毫莫耳）及二甲基胺基吡啶（9 愛克，0.073毫莫耳）加至化合物9 5 (726毫克，0.36毫莫耳） 之典水吡啶（5.4毫升）溶液中。在6 〇 °C下攪掉2小時後加入 等量之苄醯基氣，3 5分鐘後濃縮溶液，將殘餘物溶於二氯 甲烷，依序用1 〇 %硫酸氫鉀水溶液、2 %碳酸氫鈉水溶液及 水清洗。有機相用硫酸鈉乾燥，經過濾及濃縮。殘餘物用 經濟部智慈財產局員工消費合作社印製 二氧化矽純化產生化合物96 (684毫克，兩步骤之產率爲 9 0%) 〇 TLC : Rf = 〇·5，二氧化矽凝膠，1 /! (v/v)甲苯/丙酮 -79- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 548279 Α7 Β7 五、發明説明（77 ) 圖1 9合成九醣99

95

〇λ=Ί

'C-LV 3 WO 經濟部智慈財產局資工消費合作社印製 96 製備8 3 〇-(6 - Ο -苄醯基-4 -〇-塊莖糖醯基-2，3 -二-〇-甲基-π - D -吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 )-〇_ ( 2，3，6 -三-〇-甲基-y3 - D -吡喃 葡萄糖基）-(1 — 4 ) - [ Ο - ( 2,3，6 -三_〇-甲基-a - D -吡喃葡萄 糖基Μ 1 — 4 ) - Ο - ( 2，3，6 -三-0 -甲基-/5 - D -吡喃葡萄糖基 )-(1 4 ) ] 3 - 1 , 6 -二-〇-乙醯基-2 -〇-芊醯基-3 -〇-甲基-α， /3 - D - ρ比喃甘露糖（9 7 ) 化合物9 6 (657毫克，0.31毫莫耳）係依製備23的方法以乙 80- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（78 酸酐（4.5毫升）、乙酸（100微升）及三氟乙酸（〇19毫升）混合 物處理。用二氧化矽凝膠管柱色層分析法純化後產生化合 物 97(432毫克，92%)。 TLC :Rf=〇.53，二氧化矽凝膠，1/1(v/v)甲苯/丙酮。 製備84 〇-(6-0-爷醯基-4-〇-塊莖糖醯基-2,3-二-〇-甲基-“_]〇_ 口比喃葡萄糖基）-(l—4)-0-(2,3,6 -三-〇 -甲基-冷- 比喃 葡萄糖基）-(1 — 4)-[〇-(2,3,6-三-〇-甲基1-〇_吡喃葡萄 糖基）-(1 — 4 ) - 〇 - ( 2，3，6 -三-〇 _甲基_ - D -吡喃葡萄糖基 )-(1—4)]3-6-〇 -乙酿基- 2- 0-芊醯基-3-0 -甲基—α 0 _ D -吡喃甘露糖（9 8 ；) 將化合物9 7 (382毫克，0.17毫莫耳）及苄基胺（736微升， 6.74靟莫耳）之THF( 6毫升）溶液攪拌5小時。將混合物倒入 冰中，用乙酸萃取後，有機相依序用3 %鹽酸及水清洗，經 乾燥及濃縮。用二氧化石夕凝膠管柱色層分析法純化後產生 化合物9 8 (241毫克）。 TLC ·· Rf = 0.37，二氧化矽凝膠，6/2/2 v/Wv甲苯/乙酸乙 經濟部智&財1¾¾工消費合作社印製 酯/乙醇 製備8 5 〇-(6 - 〇 -苄醯基-4 - 〇 -塊莖糖醯基-2，3 -二-〇 -甲基-a - D - 口比喃葡萄糖基）-(1 — 4 )-〇-(2，3，6 -三-〇 -甲基-冷-D -吡喃 葡萄糖基）-(1 — 4 ) ] CU ( 2，3，6 -三_〇-甲基-“ -D _吡喃葡萄 -81 - 本纸張尺度適用中關家標辛（CNS ) Μ規格（2lQX 297公慶） 548279 A7 B7 蚤明説明（79 ) 糖基）-(l — 4)-0-(2,3,6 -三- Ο-甲基-/? -D-峨喃葡萄糖基 )-(1 ^ 4)]3-6-0 -乙酿基-2 - Ο -卞酿基-3 - Ο -甲基-α_ (請先閲讀背面之注意事項再本頁} D -吡喃甘露糖三氯乙醯亞胺酯（9 9 ) 將三氯乙腈（57微升，0.56毫莫耳）及碳酸铯（58毫克）加 至化合物98(241毫克）之二氯甲燒（2.2毫升）溶液中。攪拌1 小時後，混合物經過濾、濃縮，殘餘物用二氧化矽凝膠管 柱色層分析法純化後產生醯亞胺酯9 9 ( 221毫克，兩步驟之 產率爲5 6 %)。 TLC : Rf = 0.19，二氧化矽凝膠，3/2(ν/ν)環己烷/丙酮 貫施例1 訂 甲基〇-(2，〕，4,6-四-〇-績基_以_〇-1?比喃葡萄糖基）-(1_> 4)-0-(2,3,6-三-CU磺基_泛_D_吡喃葡萄糖基）-(1 —4卜 〇气2，3,6-三-磺基_D-吡喃葡萄糖基）-(1一4)-〇-(2,3-二_〇-甲基_6-〇_磺基_“_;〇-吡喃葡萄糖基卜（1 — 4卜 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (2,3,6_三_〇-甲基_ “ 吡喃葡萄糖基卜（1 一 4)_〇一 (2,3,6-三-0 -甲基_々吡喃葡萄糖基卜（1 — 4)]3_〇一 (2，J _ 一 - 〇 -甲基-6 -〇_續基_ a _ D _ p比喃葡萄糖基）-(1 — 4卜 〇-（2,3-二_0·甲基_々-〇_吡喃葡萄糖基糖醛酸卜（1 — 4)— 〇-(2，j，6 -二-0 -確基1 _ D _吡喃葡萄糖基）_ ( i 一 4 ) _〇_ (2，3-二_〇_甲基吡喃艾杜糖基糖醛酸 〇-曱基_2,6-二-〇-磺基1 南葡萄醣菩，鈉鹽（1) 將六醋46(34毫克，11微莫耳）溶於N，N -二甲基甲醯胺 -82- 本纸張尺度適财關家標準（CNS ) A4規格（21Qx 297公釐 548279 A7 -____ ____ Β7 五、發明説明（80 ) 〜 —' --- (一1亳升）中。加上三氧化硫/三乙基胺錯合物（18〇毫克，〇·89 毫莫耳），混合物在55°C下攪拌2〇小時。將三乙基胺/三氧 化硫錯合物（5莫耳/莫耳之羥基官能基）加至待硫酸化之化 合物/N，N-二甲基甲醯胺（5毫克/毫升）溶液中。在551下 反應1天後，將溶液置於Sephadex⑮G-25管柱（ι·6χιΐ5 cm) 之上端，並用〇·2Μ氯化鈉溶析。濃縮含產物之區份，並用 相同的管柱以水溶析脱鹽。產生化合物j ( 4 7毫克，8 7 % )， 經冷凍乾燥後爲白色粉末。 卜]2〇d = + 65(c=1.0 水）。 實施例2 . 甲基〇-(2，3，4，6 ·四-Ο -磺基-“ -D -吡喃葡萄糖基）_ ( !— 4)-〇-(2,3,6-三-0-橫基-“-〇-吡喃葡萄糖基）_(1 — 4)- 〇 - ( 2，3，6 -三· Ο -磺基-/? - D -吡喃葡萄糖基）-。—々）—… (2，3 -二-〇-甲基-6 -〇-磺基-“ -D - p比喃葡萄糖基）_ ( i — 4 )-〇-(2,3,6-三-0-甲基-/?-〇-说喃葡萄糖基）-(1 — 4)-[〇_ 經濟部智慧財產局a;工消費合作社印製 (2，3，6 -三-〇-甲基-α - D -吡喃葡萄糖基）_(1—4)-〇-(2,3，6 -三-0 -甲基-/3 - D - ?比喃葡萄糖基）-(1 -> 4 ) ] 3 - Ο-ΐ； 2 ， 3 - 二 _ Ο - 甲基 - 6 - Ο - 績基- 泛 - D - ρ比喃葡 萄糖基 ） - ( 1 _> 4 ) -〇 - ( 2，3 -二-〇-甲基-/? - D -吡喃葡萄糖基糖酸酸）-(】—4 )-0-(6-0 -甲基- 2,3-二-0-績基-q - D-p比喃葡萄糖基）-(1-4 )-〇-(2，3 -二-〇-甲基-a - L - ρ比喃艾杜糖基糖酸酸）-(1 — 4 ) - 3，6 -二-〇·甲基-2 - 〇 -績基-“ -d - ρ比喃葡萄醣：y：納鹽 (ΙΟ -83- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 548279 A7 B7 五、發明説明（81 ) 實施例3 (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 甲基0-(2,3,4,6-四-0-磺基-“-〇-吡喃葡萄糖基）-(1 — 4)-0-(2,3,6-三-0-磺基-“-〇-吡喃葡萄糖基）-(1 — 4)-〇-(2,3,6-三-0-磺基-卢-0-吡喃葡萄糖基）-(1->4)-〇-(2,3 -二-0 -甲基-6 - 0 -磺基-a - D -吡喃葡萄糖基）-(1 -> 4 )-〇-(2,3,6-三-〇-甲基-y5 -D-吡喃葡萄糖基）-(1 — 4)-[0-(2,3,6-三-〇-甲基-“-0-吡喃葡萄糖基）-(1 — 4)-0-(2，3，6 -三-0 -甲基-y3 - D -吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 ) ] 3 - 0 - ( 3 -〇-甲基-2，6 -二-〇-磺基-a - D -吡喃甘露糖基）-(1 — 4 )-〇-(2，3-二-0-甲基- 吡喃葡萄糖基糖醛酸）-(1^4)-0- (6-0 -甲基-2,3-二-0-磺基-a - D-吡喃葡萄糖基）-(1 — 4)-〇-(2，3 -二-〇-甲基-π - L -吡喃艾杜糖基糖醛酸）-(1 — 4 ) -6 -〇-甲基-2，3 -二-〇-磺基-π - D -吡喃葡萄醣苷，鈉鹽 (III) 貫施例4 經濟部智慈財產局員工消費合作社印製 甲基0 - ( 2，3，4，6 -四-0 -磺基-π - D -吡喃葡萄糖基）-(1 -> 4 )-〇-(2,3，6 -三-〇-磺基-π - D -吡喃葡萄糖基）-(1 — 4 )-〇-(2,3,6 -二-0-績基-y5 - D - ρ 比喃葡萄糖基）-(1 —> 4)-0-(2，3 -二-〇-甲基-6 - 0 -磺基-π - D 〇比喃葡萄糖基）-(1 -> 4 )-〇 - ( 2 ， 3 ， 6 - 三 - 〇 - 甲基 - /5 - D · 吡喃葡 萄糖基）-(1->4)-[〇-(2,3 , 6 -三-〇-甲基-π - D -吡喃葡萄糖基）-(1 -> 4 ) - 0 -( 2 ， 3 ， 6 - 三 - 〇 - 甲基 - /? - D - 吡喃葡 萄糖基 ） - ( 1 — 4 ) ] 3 - 〇 - ( 3 -〇-甲基-2,6 -二-0 -績基-a - D-p比喃甘露糖基）-(1 一4)-0- -84- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2!0X 297公釐） 548279

'發明説明（82) t ^ ，3、二-〇-甲基-y? 一 D_吡喃葡萄糖基糖醛酸— 4)_〇_ (6 0 -甲基-2,3_ 一 _〇·續基_dP比喃葡萄糖基卜。—#)· ^弋：^-二^-甲基-“-^吡喃艾杜糖基糖醛酸卜㈠^^卜 3 f\ 二_0 -甲基-2-0·磺基_“_D_吡喃葡萄醣苷，鈉鹽 (IV) 實施例5 甲基0-(2,3,4,6-四-〇_磺基- “- ο-吡喃葡萄糖基）-(l — 4)、0-(2,3,6_三_〇_磺基_“_1)_吡喃葡萄糖基卜（1 — 4卜 0'(2,3,6-三-0-磺基-/?-]〇-吡喃葡萄糖基>(1 — 4)-〇-(2,3-二-〇-甲基-6-〇‘磺基_“_〇_吡喃葡萄糖基）_(1—4)_ 〇·(2,3,6-二_0_曱基-々_D_^喃葡萄糖基卜— (2,3,6 -三-〇-甲基—α 喃葡萄糖基）_(1 — 4卜〇_ (2，3，6 _三-0 -甲基_々_ D _吡喃葡萄糖基卜^ —斗）]”… (2，3 -二-〇 -甲基_ 6 - 〇 -磺基_沒· D _吡喃葡萄糖基卜（j — 4 ) _ 〇-(2,3_二-0-甲基-/?-0-吡喃葡萄糖基糖醛酸）-(1~>4卜 〇-(6 - 0 -甲基-2，3 -二-〇_磺基_ “ _ D _吡喃葡萄糖基^ — 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 4 ) - 0 - ( 3 -〇-甲基-2 _ 〇 -磺基4 _ L -吡喃艾杜糖基糖醛酸卜 (1 — 4)-3,6-二-0_甲基_2-〇-磺基_“_1)_吡喃葡萄醣苷， 鈉鹽（V) 實施例2至5之化合物是以相似的方式製備，其係將適當 的四醣與適當的九糖耦合，然後與三醣41或43(描述於製 備3 6或3 8 )耦合，再進行去保護及硫酸化反應。 於實施例2中，其使用的四gf係描述於製備5 5中之（化合 -85- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨〇>< 297公瘦） 548279 五、發明説明（83) 物62)，而其使用的九醣是描述於製 、 於實施例3中，其使用的四醣 5中之（化合物2了）。 物叫，而其使用的九醋是描/於製備^製 =4中之（化合 於實施例4中，其使用的四醣是描述於製：二物")。 62)，而其使用的九醣是描 八化合物 、人— 表備85中化合物99、 於貫施例5中，其使用的四酷是化合物Μ，而）。 九醣是描述於製備2 5之（化合物2 7)。 ，、使用的 表1 lH-NMR(D2〇，4.80 Ppm)H]質子之 β (p_): 單位1 =含還原端之單位 單位1 6 ==含非還原端之單位 經濟部中夬標準局員工消費合作杜印製

-86- 548279 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（84)

表II ”負離子電子噴霧游離化"（ESI)質量法 實施例 分子式 估算値 實際値 2 C129H224O128S15 4304.1 4304.5 3 C127H220O134S17 4436.2 4436.2 4 Cl28H222〇13lSi6 4370.1 4370.4 5 Ci29H222〇13lSi6 4370.1 4370.5 -87- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐）

Claims (1)

1. 8 8 8 8 A BCD 第088p)1l6號專利申請案 中文申請寺利範圍替換本(92年6月) 六、申請專利範圍 1. 一種酸性形式的合成多醣及其醫藥上可接受的鹽類，其 陰離子形式相應於下式（I)至（V)之一： 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)

   548279 六、申請專利範圍 8 8 8 8 A B c D R- =0丄3 R2 = S03_

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   2 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 548279 六、申請專利範圍

   本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 548279 申請專利範圍 2. 6 . 如申請專利範圍第β之多醣，其為鋼鹽或辞職之来式。 如申請專利範圍第丨及2項中任一項之多醣，武 二二t(2,3,6-三-〇-橫基m南葡萄糖基 = ·(2,3_，6_三冬續基υ·«葡萄糖基）_(p 2,3 — 〇-甲基-6_〇•磺基H吡喃葡萄糖基 ;(了、4)-。-(2,3,6·三 _°WD·^ 葡萄糖基)_ —_[〇-(2,3,6-三-〇-甲基m南葡萄糖基)- ()·〇·(2,3,6-三_0_甲基n峨喃葡萄糖基)-(1 ㈣二〇-(2,3-二〇·甲基·6_〇-續基南葡萄 4)-0-(2,3_ —_0_甲基n比喃葡萄糖基 糖醛酸）_(1 — 4)_〇_(2 3 6-二 η Μ、 （，， o_0_n比喃葡萄 梦二:1厂4)-0_(2,3-二-0_甲基-a_L，喃艾杜糖基 —4)小〇_ 甲基-2,6二.OHa-D”比喃 匍萄醣苷，鈉鹽。 -種有用於與凝血官能障礙相關之疾病《醫藥組合物， 其包含如申請專利範圍第丨及2項中任一項之多醣^為有 政成份，其係呈鹽與醫藥上可接受的鹼化合之形式或呈 酸性形式，與醫藥上可接受的惰性、無毒賦形劑組合^ 形成混合物。 如申請專利範圍第4項之醫藥組合物，其係呈劑量單位 形式，其中有效成份係與至少一種醫藥赋形劑混合。 如申請專利範圍第5項之醫藥組合物，其中各劑量單位 含有0.1至100毫克有效成份。 -4- 本紙張尺度適财酬家料(CNS) A钱i(21Gx297公釐） 548279 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 7.如申請專利範圍第6項之醫藥組合物，其中各劑量單位 含有0.5至50毫克有效成份。 8 . 根據申請專利範圍第4項之醫藥組合物，其中該多醣係 選自甲基〇-(2,3,4,6·四-0-磺基-α-D-吡喃葡萄糖基 )· (1 —* 4)-0-(2，3,6 -二-Ο -石黃基-(2 - D - ρ比喃葡每糖基）-(1 — 4)·0-(2，3,6 -三-0-石黃基-/5 - D-p比喃葡萄糖基）-(1 —^ 4)-0-(2，3-二_0 -〒基- 6- 0-續基-a _ D _ ρ比喃葡萄糖 基）-(1—>4)-0-(2,3,6-二-0-甲基-/5 - D-p比喃葡萄糖基 )-(1 ^ 4)-[0-(2,3,6 -二-0-甲基-(2 - D ρ比喃葡萄糖基 )-（1 4)-0-(2，3,6_ 二0甲基-Θ - D- p比喃葡萄糖基）- (1 —> 4)]3·〇-(2，3 -二-0 -甲基-6 - Ο -石黃基-a - D -外匕喃葡 萄糖基）-(1-^4)-0-(2，3 -二-0-甲基-yS - D-外匕喃葡萄糖 基糖酸酸）-(l — 4)-0-(2,3,6 -二-0·續基_ a - D- p比喃葡 萄糖基）-(1^4)-0-(2,3 -二-0-甲基-a - /5 -叶匕喃艾杜 糖基糖酸酸）-(l — 4)-3-0 -甲基- 2,6 -二-0-石黃基-a - D-吡喃葡萄醣甞，鈉鹽（I)。 -5- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 548279 第88100716號專利申^案 中文補充說明書(91年 比較測試 發明人已進行特定測試以說明本發明之優異性，事實上，對於抗血栓劑 而言，半生期越短越好，抗凝血劑傾向於增加血液之流動性，因為會引發 出血症狀，故此乃不欲者。 因此’具較短時效性之抗凝血活性乃目前致力尋求者，此即本發明之化 合物具有優異性之主因。 測試半生期之方法如下： 鼠類肝素赌之«動力丨 ·* 經五巴比妥鋼(30毫克/公斤，i.v·) i.v·注射麻醉之Sprague Dawley藏類 (250-300克，Iffa Credo，法國)係經欲研究之化合物投藥處理，抽取出數次 之血液樣本(2毫升)置於3.8%檸檬酸三鈉溶液(1/9 v/v)中，以其抗血栓形成 與抗Xa因子活性作為指標度量該等化合物之血漿濃度。 活tt内抗Xa因子舆抗Ila活性之測定 將各血液樣本離心’然後將PPP於-20 C下儲存，利用Teien、Lie (Thromb Res·，1977; 10; 399-410)之胺化方法與Coatest肝素之改質來測定抗xa因子 與抗Ila活性，各化合物係以其各自之標準建立一校正曲線。 ft · 自各相關曲線測量個別之半生期。 所得之結果收集於下表中： 半生期（抗Xa活性） 半生期（抗Iia活性） 本發明之實例1化合物 1.5 士 0.2h 2·1 士 0.7h W〇97/01568之實例7化合物 9.3±0.7h 8.6±l.〇h W〇97/01568之實例9化合物 7·3 士 0.5h 9·0 土 0.7h 此表顯示相較於W0 97/01568者，本發明之化合物具有較短之半生期。 P:\MLS\CHINESE\56769 補充.DOC 1