TW450952B - Ophthalmic pharmaceutical compositions comprising a nitrone compound - Google Patents

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450952 at _ B7 經濟部中央樣準局身工消費合作社印裂 五、發明説明（1 ) 發明背景 發明範園 本發明係有關治療眼部發炎，如眼色素膜炎。更特定地 説’本發明係關於一種稍嗣化合物的醫·藥組合物及使用此 醫藥組合物治療眼部發炎的方法。 此技藝現狀 眼色素膜炎即眼色素膜，眼白後面中間層組織，的發炎 。此疾病威脅到視力，在美國，有百分之十的盲由此引起 。眼色素膜炎的並因現尚不走全明瞭，但有許多全身性疾 病與此有關。至少一種眼色素膜炎顯示其部分病因由游離 態基團所致。 一般用類固醇，如地塞米松（dexamethasone)，治療眼色 素膜炎。但長時間使用類固醇治療此種發炎會引起眼高壓 及/或音光眼。因之需要有一種新穎醫藥組合物能有效地安 全地治療眼部發炎，如眼色素膜炎。 現已發現，特定的硝嗣化合物可用於治療眼部發炎，特 別是眼外部及中部的發炎，如眼色素膜炎。可用於此目的 的硝酮化合物包括，例如，α -(苯基）-Ν-第三丁基硝酮（ΡΒΝ) ’ 5,5-二甲基吡咯啉氧化物（DMPO)及or -(4-呲啶基1- 氧化物）-N-第三丁基硝酮（POBN)及其衍生物。 過去即有報告謂硝酮化合凇是-有用的治療劑。見，例如 —9 - · ·« ，美國專利 5,025,032 ； 5,036,097 i 5,527,828 ; 5,532,277 ;及5,445,277號；及已公告的PCT專.利申請案 -4 ~ 本紙張尺度適用中®國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐i ' (請先聞讀背面之注意事項填寫本1') -\J. r 裝- 釘 450952 A7 B7 五、發明説明（2 ) WO 91/05 552 及 WO 92/22290 號》硝酮化合物，如 pbN， 也曾用作分析試劑用電子旋共振（electron spin resonance)(ESR)以測定高反應的游離態根。見，例如，Bull. Chem. Soc. Jpn., 1994,67,165 ； Appl. Magn. Reson., 1992, 3, 1021 ;及 Aldrichimica Acta. 1979,12,23。 K 以下各參考文獻與眼色素膜炎及其治療有關： 本發明概述 現已發現特定的硝酮化合物可用以治療眼睛發炎，特別 是眼續1外及中部的發炎，如眼色素膜炎。本發明所用的幾 種硝酮化合物有新穎的化構造。 因之，一方面本發明係導向於眼用醫藥组合物，含有醫 藥上可接受的載劑及治療眼睛發炎量的式I之5,5-二甲基 此略'林-N-氧化物： 請 先 閲 面 之 注 填、I寫疲 本衣 頁· 訂

經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 其中 每一 R1係獨立選自包括烷基，低烷氧基，胺醯基，醢氧 基，羥基及-C02Y，其中Y是氩_，或綮.藥上可接受的鹽； R2係選自包括氫，烷基及芳基； R3係選自包括烷基，埽基，炔基，芳基，烷芳.基，烷環 -5- 本紙張尺度逋用中國圏家標举（CNS ) A4規格（210X297公釐） •45 0952 Α7 Β7 經濟部中央標準局貝工消費合作社印策 五、發明説明（3 ) 烷基，環烷基及環烯基； X是CH或N— 0;及 η是0至3的整數》 較佳是R1是獨立選自包括繂基，低烷氧基及羥基。 R2較佳是氫或烷基。R2更佳是氫。 R3較佳是選自包括烷基，烷芳基，芳基及環烷基β R3 更佳是烷基或環拔基。R3尤佳是烷基。特佳的烷基是第三 丁基》 於上述式I中，X較佳是CH，即芳基環是苯基或經取代 的笨基環。較佳的經取代的苯基環包括，但不限於，3,5_ 二甲氧基-4-羥基苯基，3,5-二-第三丁基_4_羥基苯基及2- 羥基苯基。 於本發明眼用醫藥組合物中，眼用載劑較佳是滅菌的水 性載劑或是油膏或膏載劑。於較佳具體實施例中，使用減 菌水性載劑的眼用脊藥组合物還含有一或多種選自包括氣 芊烷銨及硫柳汞的添加物。 在组合物的另一方面，本發明係導向於眼用醫藥組合物 ，其含有醫藥上可接受的眼用載劑及眼睛發炎治療量的選 自下列的化合物： α -(苯基）-Ν-第三丁基硝酮 α-(3,5-二甲氧基-4-羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮 or -(3,5-二-第三丁基_4·羥基苯-基)-N-第三丁基硝酮 α-(2·羥基苯基）-N-第三丁基硝酮 or-(2,4,6-三趣基苯基）_Ν-第三丁基硝嗣 -6- 本紙張尺度適用中留國家橾準（CNS U4规格（210Χ297公釐） V45 095 2 A7 _ B7 經濟部中央梯準局負工消費合作社印製 五、發明説明（4 ) α -(4-吡啶基1-氧化物）_N_第三丁基硝酮 α -(4-毗啶基1-氧化物）_N_正-丙基硝酮，及 5,5-二甲基此洛ο林—N-氧化物。 還有，本發明提供選自包括如下的新穎化合物： or -(3,5-二甲氧基-4·羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮 α-(2,4,6-三羥基苯基）-N-第三丁基硝酮，及 α-(4-吡啶基1-氧化物）·Ν_ε-丙基硝酮。 此外’本發明提供醫藥组合物，其含有醫藥上可接受的 惰性載劑及治療發炎量的選自包括如下的化合物： 'α-(3,5-二甲.氧基-4-羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮 α-(2,4,6-三羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮，及 α-(4-吡啶基1_氧化物）-Ν-正-丙基硝酮。 在方法的一方面，本發明係導向於治療患有眼發炎的哺 y 乳動物的方法，此法包括给予該哺乳動物含有脣藥上可接 受的惰性載劑及治療眼發炎量的5,5-二甲基吡咯啉-N-氧 化物的或式I彳[:合物的醫藥組合物·· (RJ)r^^-C=N(0)-R3 I ' X R2_ 其中 每一 R1係獨立選自包括烷基，低烷氧基，胺醯，基，醯氧 "I—111---裝------訂· (請先聞讀背面之注^項^:寫本艮) α 本紙張尺度適用中國國家揉攀（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局員工消费合作社印裝 45 0952 Α7 Β7 五、發明説明（5 ) 基，羥基及-COzY，其中Y是氫，或醫藥上可接受的鹽； R2係選自包括氩，烷基及芳基； R係選自包括坑基，缔基，決基，芳基，炫;芳基，燒環 烷基，環烷基及環烯基； X是CH或N—0 ;及 η是0至3的整數》 在方法的另一方面，本發明係導向於治療患有炎的哺乳 動物的方法，此法包括給予該啫乳動物含有醫藥上可接受 的惰性載劑及治療發炎量的選自如下化合物的醫藥组合物： λ -(3,5-二甲氧基-4-羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮 從-(2,4,6-三羥基苯基）-1^-第三丁基硝酮，及 毗啶基1-氧化物）-Ν-正-丙基硝酮。 圖解簡述 圓1爲使用Ν-第三丁基-λ-苯基硝酮（ΡΒΝ)或生理鹽水（ 對照）治療以内毒素引起的眼色層炎（EIU)的鼠的眼房水蛋 白質含量的比較。同時也顯示以ΡΒΝ或生理鹽水治療的對 照鼠的眼房水蛋白質含量。 圈解詳述 如前所述，本發明眼用醫藥H：物含一或多.種硝酮化合 物作爲活性成分。在進一步説明本發明前，先説明以下各 詞的定義。 · -8- 本紙張適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（2丨0X297公釐）

45 0952 A7 B7 —_ ---- " """ --— 五、發明説明（β ) 定義 "烷基"指單價烷基，有1至12個碳原子，較佳是1至8 個碳原子，更佳是1至5個破原子。此詞的例有，如，甲 基’乙基’正-丙基，異丙基’正-丁基，異丁基，第三丁 基，正-己基，正·辛基，第三辛基，等。•，低烷基"一詞指有 I至5個碳原子的烷基。 "伸烷基"指二償的伸烷基，較佳是有1至1 〇個碳原予， 更佳是有1至6個碳原子，可以是直鏈或支鍵的》此詞的 例有如亞曱基（-CH2-)，伸乙基（-CH2CH2-)，伸丙基異構物（ 例如-CH2CH2 CH2-及-CH (CH3) (CH2)-等。 "伸稀基"一詞指二價的伸虎基，較佳是有2至10個碳原 子，更佳是有2至6個碳原予，可以是直鏈或支鏈的，且 有至少一個，較佳是1-2個烯基不飽和位。此詞的例有， 如，亞乙缔基（-CH=CH-)，亞丙埽基異構物（例如，_ CH=CHCH2-及-C(CH3)=CH-及-CH=C (CH3)-)等。 "烷芳基"指-伸烷基芳基，較佳是於伸烷基部分有1至10 個碳原子，芳基部分有6至14個碳原子《此烷芳基的例有 ，如’苄基，苯乙基等。 "娱;環燒基"一詞指-伸燒基·環燒基，較佳是於伸垸基部 分有1至10個碳原子，環烷基部分有3至8個碳原子。此 類烷環烷基的例有，如，-CH2-環丙基，-CH2-環戊基-CH2 CH2 •環己基，等β . "烷氧基"指"鍵基^較佳的烷氧基包括，例如，甲氧 基，乙氧基，正-丙氧基，異丙氧基，正-丁氧基.，第三丁 "9 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > Α4規格（210X297公釐) ~ ί請先閲讀背面之注意事項:寫本I-) 裝· 訂 α 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 •45 095 2 A7 B7 趄濟部中央標準局貝工消费合作社印製 五、發明説明（7 ) 氧基’第二丁氧基，正-戊氧基等。"低貌氧基M ~詞指拔^基 有1至5個碳原子β "烯基"一詞指有2至10個碳原子的埽基’較佳是有2至 6個碳原子，且有至少1個，較佳是1-2個烯基不飽和位。 較佳的烯基包括乙烯基（-CH=CH2)，正-丙晞基（_ CH2CH=CH2)，異丙烯基（-C(CH3) = CH2)等。 "炔基"指有2至10個碳原子的炔基，較佳是有2至6個 碳原子，JL有至少1個，較佳是1-2個炔基不飽和位。較佳 的炔基包括乙炔基（-CH = CH2)，丙炔基（-CH2CH s CH2) 等。 "胺醯基"指-NRC(0)R基團，其中每一 R獨立是氫或烷基。 "芳基”指有6至14個碳原子的單環（例如苯基）或多缩合 環的（例如荅基或蒽基）的不飽和的碳環基團。較佳的芳基 包括苯基，莕基等。除非受個別取代基的定義所限，此類 芳基可視需要由1至3個取代基所取代，此等取代基選自 包括烷基，烷氧基，胺醯基，醯氧基，羥基等。 "環烷基"指3至10個碳原子的有單環形環多縮合環的環 形烷基，可視需要由I至3個烷基所取代。此類環烷基包 括，例如，單環構造的如環丙基，環丁基，環戊基，環辛 基，1-甲基環丙基，2-甲基環戊基，2-甲基環辛基’等， 或多環構造如金剛烷基等。 "環締基"指4至10個碳原子的-有單環形環及至少一内不 飽和點的環形烯基，可視需要由1至3個挽基所取代。此 類環烯基包括，例如，環戊烯基，環己-2-烯基，環辛_ -10- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐) " Ί.------裝I (請先聞讀背面之注意事項4填寫本頁 )- 4 經濟部中央標準局貝工消费合作社印裝 45 095 2 A7 __B7_五、發明説明（8 ) 3-烯基等。 "醫藥上可接受的鹽"指衍生自此技藝週知的各種有機或 無機相對離子的臀藥上可接受的鹽，包括，例如，鈉，卸 ，鈣，鎂，銨，四烷基銨等；當分子含有鹼性官能度時， 與有機或無機酸所成的鹽，如鹽酸，氫溴酸，酒石酸，甲 基磺酸，醋酸，馬來酸，草酸等所成的鹽醫藥上可接受 的陽離子"指酸性官能基團的醫藥上可接受的陽性相對離 子。此類陽離子的例有鈉，钟，妈，巍，銨，四燒基按， 等。 硝酮化合物 本發明醫藥組合物使用的較佳硝酮包括α -(苯基）-N-第 三丁基硝酮（PBN)，5,5-二甲基毗咯啉-]^-氧化物（01^1>0) 及or -(4-呲啶基卜氧化物）-N-第三丁基硝酮（POBN)及其衍 生物β此等化合物特佳的衍生物包括經基衍生物，如α -(2-羥基苯基）-Ν-第三丁基硝輞，α-(3-羥基苯基）-Ν-第三丁基 硝酮及α -(4-羥基苯基）-N-第三丁基硝酮；二羥基及三寇基 衍生物，如or-(2，4,6 -三裡基苯基）-Ν-第三丁基確嗣；酿衍 生物，特別是釋出2-，3-或4-羥基衍生物的酯，如α -(2-乙醯氧基苯基）-Ν-第三丁基硝酮，π-(3·乙醯氧基苯基）-Ν-第三丁基硝酮，α-(4-乙醯氧基苯基）-Ν-第三丁基硝酮·，羧 基衍生物，如α -(-2-羧基笨基）-Ν·第三丁基硝酮，α -(3-羧基苯基）第三丁基硝酮及a -(4-羧基苯基）-Ν·第三丁 基硝輞；及乙醯胺基衍生物，如α -(2-乙醯胺基苯基）-Ν- 本紙張尺度適用中國國家搮準（CNS ) A4ilL格（210Χ297公釐） 經濟部中央捸準局貝工消費合作社印« 4 5 095 2 A7 B7 五、發明説明（9 ) 第三丁基硝酮，α -(3 -乙醯胺基苯基）-N-第三丁基硝酮，及 α -(4-乙醯胺基苯基）_N-第三丁基硝酮。其他較佳的化合物 包括二苯基硝酮（PPN)及類二苯基硝酮衍生物；α-(3,5-二 甲氧基-4-羥基苯基第三丁基硝酮；or -(2,4,6-三羥基苯 基）-N-第三丁基確酮；及〇；-(4-此症基1-氧化物）-N-正-丙基 硝酮。 用於本發明的特佳的一組硝酮化合物是式I化合物：

其中 每一 R1係獨立選自包括烷基，低烷氧基，胺醯基，醯氧 基，，羥基及-C〇2Y，其中Y是氫或螯藥上可接受的鹽； R2係選自包括氫，烷基及芳基； R3係選自包括烷基，烯基，炔基，芳基，烷芳基，烷環 烷基，環烷基及環晞基； · X是CH或N4〇;及 π是0至3的整數。 應了解到，有些上述化合物可以鹽存在，即羧基街生物 ’。於此情形，此化合物可離子_£^，奉生酱藥上可誕受的陰 離子及陽離子。最普通的是，陽離子是一價‘質，如鈉， 钾或按，但也可是與醫藥上可接受的一價陰離子結合的多 -12- 表紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） -----------裝-- - * ί请先Mtf背面之注意事項寫本頁)

，1T 45 095 2 a? B7 經濟部中央揉準局貝工消费合作社印製 五、發明説明（1〇 ) 價陽離子，如转與氯、溴、蛾、趟基、靖酸、確酸、醋酸 、酒石酸'草酸、丁二酸、棕櫊酸等陰離子結合；鎂於此 等離子的結合；锌與此等離子的結合等^ 如困需要*本發明螯藥組合物及方法可使用二或更多種 硝酮化合物。 >般合成工序 本發明所用梢嗣化合物可由市場購得，也可用易於購得 ，的起始物質依下述一般方法及工序製備。應了解到，除非 另有説明ί 一般是使用較常用的反應條件（即：反應溫度， 時間’反應物莫耳比，溶劑，壓力等），也可用其他反應條 件。適宜的反應條件會因所用特定反應物或溶劑而改變， 但此等反應條件可由精於此技藝者以常規缚宜工序決定。 此外，精於此技藝者會了解到，可能需要習用的保護基 以防止特定的官能基困作不需要的反應。特定官能基圈的 適宜保護基的選擇以及各種官能基图的保護及去保護的適 宜條件都是此技藝週知的》例如，於T.w. Greene a‘nd G. Μ. Wut-s 所著 Protecting Groups in Organic Synthesis, Second Edition，Wiley，New York, 1991及其内所列參考資料即説 明多種保護基及其引入與去除。 於較佳合成方法中，本發明所用硝銅化合物係藉在習用 .反應條件下·偶合式II之羰基化金^ ·

-13- 本紙張尺度適用中國國家榡率（CNS ) A4規格（210X29*7公釐） 1* 1.^1 m ^^^1 m 1·1. c {請先M讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 α. 450952 A7 B7 五、發明説明（11 ) 其中R1，R2，X及η之定義如上述， 與式III之羥基胺製備：

HO-NH-R3 III 其中R3之定義如上述。 偶合反應一般是藉將羰基化合物II與至少一當量較佳是 約1.1至約2當量的輕基胺III在惰性極性溶劑，如水，甲 酵，乙酵，1,4-二哼烷，四氫呋喃，二曱基亞颯，二甲基 甲雄胺等，内接觸進行。此反應較佳是約0 °C至約1〇〇 進行约1至48小時。此反應視需要可加催化量的酸，如醋 酸，對-甲苯磺酸等。在反應完了時，式I之硝酮化合物係 用習用方法收取，如沉澱，色譜分析，過濾，蒸餾等。 偶合反應中所用式II羰基化合物是已知的或可以習用工 序製備的。較佳的羰基化合物包括，但不限於，苯甲醛， 2-羥基苯甲醛，3-羥基苯甲醛，4-羥基苯甲醛，2,4,6-三 羥基苯甲醛，3,5-二-第三丁基-4-羥基苯甲醛，3,5-二甲 氧基-4-羥基苯甲醛，4-甲醯基毗啶-1-氧化物等。 式III輕基胺化合物是已知的或可以已知化合物用習用 工序製備的。此式III羥基胺化合物一般是用適宜的催化劑 ，如活化鋅/醋酸催化劑或鋁/汞齊催化劑使對應的硝基化 合物（即R3-N02，其中R3之定義如上述）還於製備《此反 應一般是在水性反應介質，如酵_/7jC澈合物（在用鋅催化劑 時）或醚/水混合物（在用鋁/汞齊催化劑時）内於約15 ΐ至約 100 °C進行约0_5至12小時，較佳是約2至約6小時。脂肪 -14 - 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4規格（2丨0X297公釐） t-------νΜΊ^—t c (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) -訂 d. 經濟部中夬標準局貞工消費合作社印東 5 O^i5 2 A7 ---___ B7 五、發明説明（12 ) 族硝基化合物（其里的形式）也可用硼在四氫呋喃内還原成 幾基胺。因爲有些羥基胺不太安定，此類化合物一般是在 與式Π之羰基化合物反應前臨時製備β 本發明所用較佳羥基胺包括，但不限於，Ν_甲基羥基胺 ’ Ν-乙基羥基胺，n-正-丙基羥基胺，Ν-異丙基羥基胺， Ν-正· 丁基羥基胺，Ν-異丁基羥基胺，Ν-笫二丁基羥基胺 Ν•第三丁基羥基胺，’ Ν-正-戊基羥基胺，Ν-環戊基羥基 胺’ Ν-正-己基羥基胺，Ν-環己基羥基胺，〜正_辛基羥 基胺，Ν-第三辛基羥基胺，Ν-苯基羥基胺等。特佳的是Ν-第三丁基羥基胺。 •藥組合物 本發明所用硝酮化合物（包括其鹽）較佳是調配成適於局 部給予的眼用醫藥组合物。 經濟部中央橾準局貝工消費合作社印装 (請先《讀背面之注意事項寫本页) ο 局部調配物可包括局部眼用液，含有一或多種溶於或懸 浮於滅菌的、等張的一般使用的水性臀藥上可接受的眼可 用載劑内的硝酮化合物。局部調配物也可製成油膏或膏的 形式。此類油膏或膏一般含一或多種溶於或懸浮於減菌的 、酱藥上可接受的油膏或膏基（如礦物油-白礦脂基）内的硝 嗣化合物。 局部調配物可包括約0.01 〇/〇重量比至約10 〇/〇重量比的 活性硝基酮化合物’其餘爲盎劍-及其他此技藝已知的局部 醫藥成分。此類添加的成分包括缓衝劑，界面活性劑，助 溶劑，防腐劑，乳化劑，等張劑，安定劑，pH調節劑等。 -15- 本纸張尺度適用中圉固家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央樣準局貝工消費合作社印裝 4 5 095 2 a? ____B7 五、發明説明（13 ) 用於減菌的等張的溶液中的較佳的添加物包括，但不限 於，氯苄垸銨，乙基汞硫代水楊酸鈉，氣丁醇，氣化納， 硼酸及其混合物。於較佳具體實施例中，氣苄烷銨是作爲 抗微生物防腐劑加入，加入的量約0.001至約002重量百 分比，較佳是0.01重量百分比。於另一較佳具體實施例中 ’乙基汞硫代水楊酸鈉是作爲抗微生物防腐劑加入，加入 的量約爲0.005至約0.02重量百分比》於油膏或胥组合物 中，調配物内也可包括無水羊毛脂。此類膏組合物内也可 加乙基汞硫代水揚酸鈉或氯丁醇作爲抗微生物劑。 另外，硝酮化合物之全身用調配物也可用於治療眼發炎 。此類全身用調配物可以各種途徑給予，包括經口、經皮 、皮下、靜脈内、肌肉内、及鼻内給予。視投送途徑而異 ’本發明化合物較佳是調配成注射或經口給予的組合物。 經口給予的組合物可以是批量的液體溶液或懸浮液形式 ，或是批量的散劑形式。但最常用的是此組合物爲單位劑 形以便利給予正確劑量。"單位劑形"一詞意爲物理上分散 的單位’適於以單位劑量給予人或其他哺乳動物，每一單 位含可產生治療效果的預定量的活性成分，以及適宜的醫 藥賦形劑。典型的單位劑形包括液體組合物的預裝的、預 測定的安瓿或注射筒，或如係固體組合物，則是丸、鍵、 膠囊等。於此類组合物中，硝酮化合物一般是小量成分（ 約〇 1至約50 %重量比，或.較隹是约1至約40 %重量比） ’其餘爲載體或載劑及有助於製成所需劑形加工助劑。 適於供經口給予的液體形式可包括適宜的水性或非水性 -16- ( CNS ) A4^ ( 210X297^ ) ' ------- ^^1 屬 1 > ί - — - -- I I I C請先聞讀背面之注意事項^;寫本頁) 打 a 缠濟部中央標準局負工消费合作社印製 4 5 095 2 A7 ______B7 五、發明説明（14) 的有緩衝劑的載體，懸浮及分散劑，增色劑，矯味劑等。 固體形式可包括下述任合成分，或類似性質的化合物：結 合劑如微及結晶纖維素，黃蓍膠或明膠；賦形劑如乳糖； 崩溃劑如藥酸’ Primogel，或玉米澱粉；滑潤劑如硬脂酸 緩；滑移劑如膝樣二氧化矽；甘味劑如蔗糖或糖精；或矯 味劑如薄荷，水楊酸甲酯，或橘味香料。 可注射的組合物一般以可注射的滅菌生理鹽水或磷酸鹽 緩衝的生理鹽水或其他此技藝已知的可注射的載劑爲基。 如前所述，此類组合物中的硝豳化合物是典型的少量成分 ，一般是約0.05至10 〇/。重量百分比，其餘爲可注射的載劑 等。 上述供經口给予的或注射的组合物的成分只是代表性的 。其他物料以及加工技術見Remington's Pharmaceutical

Sciences (17th edition,1985,. MacJk Publishing Company， Easton，Pennsylvania)第8部分所述，今一併附上供參考。 本發明所用硝酮化合物也可以持續釋出形式，或由持續 釋出藥物投送全身給予。有關代表性的持續釋出物料也可 見所附 Remington’s Pharmaceutical Scieprpg 〇 下述調配物實例説明適於全身投送本發明硝酮化合物的 的醫藥組合物。但本發明並不限於以下舉例的醫藥組合物。 調配物1-眼用滴劑 ：- 將硝酮化合物，如PBN(0,5克），硼酸（1.8克），氣芊烷銨 (0,005克）混合並溶於垂化的滅菌水内。用1當量.的氫氧化 -17- 本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS)八4規格（2〗〇Χ297公釐） ---1111---裝 I 『 m (請先W讀背面之注項寫本頁 訂 a. 經濟部中央梂率局貝工消费合作社印裝 45 095 2 A7 B7 五、發明説明（15 ) 鈉將溶液pH調整至約7.3。然後加純化滅菌水至總容積爲 100毫升，將此溶液以過濾滅菌。 調配物2-眼用油膏 將硝酮化合物，如PBN，與礦物油及白礦脂混合，形成 含活性硝酮化合物爲0.05重量百分比的油膏。 調配物3-口服錠劑 將硝酮化合物，如PBN，以Γ : 10重量比與乾明膠結合 劑混合成乾粉。加少量硬脂酸鎂作爲滑潤劑。將此混合物 於打片機上製成240-270毫克的錠（每錠含20-30毫克活性 硝酮化合物）。 調配物4- 口服膠倉 將硝酮化合物，如PBN，以1 : 4重量比與澱粉稀釋劑 混合成乾粉。將此混合物裝入250毫克的膠囊内（每膠囊含 50毫克活性硝酮化合物）。 調配物5-浚艏溶液 將硝酮化合物，如DMPO(50毫克），蔗糖（1.75克）及黃蓍 膠（4毫克）混合，用美國10號網眼篩過，再於預製好的微 結晶織維素及羧酸甲基鈉（11:89,50毫克）於水内之溶液混 - . · ·_ 合。將苯甲綾鈉（10毫克），矯味劑及增色劑以水稀釋，在 攪拌下加於前一混合物内。然後加足量的水使總容積爲5 -18- 本紙張尺度適用中國囷家標準（CNS } A4規格（2I0X297公釐）

Tu i— n nl· i— n - —i n * <請先閲讀背面之注f項'^寫本頁 訂 α 經濟部中央梂準局黃工消費合作社印裂 45 095 2 A7 _____B7 _五、發明説明（16 ) 毫升。 調配物6~注射洁 將硝酮化合物’如PBN，溶於緩衝的滅菌的可注射的生 理鹽水内’使濃度約爲5毫克/毫升。 應了解到’此處所述的任何硝酮化合物，考慮及其溶解 度、分散性等性質後，都可使用於此等代表性調配物中， 且任一此等調配物都可以前述任一方式給予以治療眼發炎。 治療的疾病及治痊方式 以本發明眼用醫藥組合物治療的疾病一般包括眼發炎及 屬於眼發炎定義内的各種症狀。此等疾病包括，例如，色 素層炎。給予本發明提供的含硝醐的調配物可使眼睛的發 炎減輕。要達此效果，是將局部製劑藉滴注適宜的溶液或 油膏直接給予眼睛以減輕眼睛的發炎。一般適宜的劑量是 約0.001毫克/公斤至約10毫克/公斤。這樣的劑量可以是 單一劑量，單一般是在患病期間每天給予2至5個劑量。 此臀藥组合物的全身給予可爲約0.001至約100毫克/公斤/ 劑，每天给予1至約5劑，使總劑量爲約0.001毫克/公斤/ 小時至約10毫克/公斤/小時，此總劑量使用1至約120小 時，特別是1至96小時。 於任何治療方式中，應由健像人員評估病人的疾病以決 定病人是否能由使用硝酮治療取得利益。有時需常規的調 整劑量以達適宜投藥量及方式。 -19- 本紙張尺度逋用中國S家標準（CNS ) A4規格（21〇X297公釐） ^^1- ^^1 — it ^^1 ^^1 is-I n - r · ^)/ {請先聞讀背面之注意事項^寫本頁) 訂 a A7 450952 ______B7 五、發明説明（17 ) 本發明化合物可作爲唯一活性劑給予，也可與其他劑， 包括其他活性硝嗣化合物，合併給予。 應了解到，本發明所提供的新穎硝酮化合物，包括α _ (3,5-二甲氧基-4·羥基苯基）-Ν·第三丁基硝酮，π_(2,4,6-三 經基苯基）-Ν-第三丁基硝網，及α -(4-此症基1 -氧化物）_Ν-正-丙基硝明，因具有抗炎性質，在全身給予時也有其他醫 藥用途’全身给予時較佳是經口或經腸給予，劑量爲約 0.001至約100毫克/公斤/劑，每天给予1至約5劑，使總 劑量爲約0.001毫克/公斤/小時至約10毫克/公斤/小時，此 總劑量使用1至約120小時，特別是1至96小時。 實例 下述合成及生物學實例用以説明本發明，不能從任何方 面理解爲對本發明的限制。 實例1 α _(3,5·二甲氧基-4·羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮的合成 經濟部中夫橾準局貝工消费合作社印製 將注射器醛（5,47克，0,030莫耳）溶於回流中的苯（1〇〇 毫升）内，滴加Ν-第三丁基羥基胺（2.67克，0.030莫耳）於 50毫升苯内之溶液。任此反應物於室溫靜置過夜，然後過 濾，汽提去溶劑，殘餘物用醋酸乙酯洗，製得灰綠色粉（1.54 克，產出率20.3 % )。此產物之熔點爲163-164 °C於二氧化 矽膠薄層色譜分析（TLC)(100 %醋酸乙酯）比移値（Rf)爲 0.27(注射器醛 Rf=0.75)。 -20- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 B7 45 095 2 五、發明説明（18 ) 色譜分析數據如下： JH NMR(CDC13) : =7.703 ppm(s，2H，芳基 2,6-ITs)， 7.454 ppm(s，lH，硝酮基-H)，5.290 ppm(s，lH，苯氧基-Η) ’ 3,933 ppm(s，6H，CH30_)，1.611 ppm(s，9H，第三 丁基-CH3)。 13CNMR(CDCl3):(y=l46.80ppm(芳基 3,5-C)，137.16 ?卩111(芳基4-(：)，129_93?1>«1(硝明基-0：)，122.83??111(芳 基1-(：)，106.95 卩卩111(芳基2,6-€)，70.42 ??111(€：(£^3)3) ，56,50(CH30-)，28.41 ppm(C(i!H3)3)。 實例2 β -(2,4,6-三羥基苯基）-N-第三丁基硝酮之合忐 將2,4,6-三羥基苯甲醛（17.69克，0.115莫耳）加於N-第 三丁基趣基胺（14.32克，0,161莫耳）於苯（250毫升）内之溶 液中。加對-甲苯磺酸（15毫克），反應器上裝Dean Stark醉 。此反應物於氮氣下於回流加熱88小時，然後用500毫升 醋殖乙酯稀釋。此溶液用水、鹽水洗，於疏酸納上乾燥。 用乙醇/水重結晶產物，然後於35。(：眞空乾燥2小時，製得 16.95克（產出率65.5 % )榡題化合物。此產物之熔點爲 189.9-190.3 *C ’於二氧化矽膠薄層色譜分析（TLC)(50 %己 烷，45 %醋酸乙酯，5 %甲醇）比移値（Rf)爲031(2,4,6_三 羥基苯甲醛Rf=0.47)。 ., 色譜分析數據如下·· NMR(DMSO-d6) : =11_88 ppm(s，0.2H9苯氧基-H)， -21 各纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先sili背面之注^.項再填寫本頁) 裝. 訂 經濟部中央標準局员工消费合作社印掣 450952 A7 B7 經濟部中央梂準局負工消资合作社印製 五、發明说明（19 ) 9.801ppm(s，0.8H，膀氧基-H)，7.948 ppm(s,lH，硝酮基-H) ，5,746 卩卩111(3,211，芳基3,5，11’3)，1.497 卩1)111(3,911，第三.丁 基-CH3)。 13CNMR(DMSO-d6): β =164.48 ppm(芳基 4-C)，161.93 ppm(芳基 2，6-C)，133.91 ppm(硝網基-C)，99.15 ppm ( #*l-C)，95.46 ppm($*3,5-C)，68,61ppm(£_(CH3)3) ，27.82 ppm(C(aH3)3)。 FTIR(KBr Pellet): 3465(:111^(0-11 伸縮），aMScm'C-H 脂肪族伸縮），1626 cm·1 (ON伸縮），1173cm」（N-0伸縮 )0 實例3 e -(4-此喊基1-氧化物）-N-正-丙基硝嗣之合成 將於40毫升甲醇内之N-正-丙基羥基胺（1.62克，0.021 莫耳）加於甲醇（40毫升）内之呲啶-4-羧醛1-N-氧化（2.21 克，0.018莫耳）内《加濃HC1，此混合物於回流加熱16 小時，汽提去溶劑，殘餘物用己烷洗，製得3.20克標題化 合物（產出率98 %)。此產物之熔點爲113.1-115.5。(：， 色譜分析數據如下： 1HNMR(CDCl3):d=8.142ppm(s，4H，#*-H)，7.384 Ppm(s，lH，硝酮基-Η)，3.915?卩111(1，1=7.0112,211，丙基1^) ，2.017 ppm (q，J=7.3Hz，2Η，丙-基 H's)，1.005 ppm '—-- (t，J=7.3Hz，3H，丙基 H，s)。 ^^^1- - - S - n^i n —^ϋ (請先閎讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 d -22 - 本紙張尺度壌用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標隼局負工消费合作社印裝 ^^45 095 2 A7 B7 五、發明説明（20 ) 實例4 内真素引起的眼色素膜炎的治痊 給予實驗動物次於死劑量的脂多糖（LPS)，使其眼睛前部 產生有特點的發炎。此一稱作内毒素引起的眼色素膜炎 (EIU)的暫時的但強烈的反應用作眼色素膜炎發炎模型。此 發炎反應係藉測定動物眼房水内的蛋白質測出。於此實例 中，顯示π-(苯基）-N-第三丁基霄酮（PBN)有效地治療由内 毒素引起的眼色素膜炎的能力。PBN —般可從Aldrich, Milwaukee, Wisconsin, USA,講得0 將雌性Lewis鼠，8-10週大，重170-200克，關於12小 時亮/暗循環的環境内，任其自由飲食。所有動物實驗都遵 ^ NIH Guiding Principles in the Care and Use of Animals 。以皮下注射生理食鹽水内的750克/公斤LPS(由大腸菌 (Escherichia coli)製得的内毒素，血清型 055 : B5，Lot 34H4113, Sigma Chemical Co)使 Lewis 鼠發展成内毒素引 起的眼色素膜炎（EIU)，然後立即腹腔内注射（PBN)或生理 鹽水安慰劑。6小時後注射第二等量的PBN或安慰劑《製 成LPS溶液，給鼠注射，每公斤1毫升（於此750微克/公斤 實驗中，LPS溶液内含750微克/毫升）》以PBN的生理鹽 水溶液（20毫克/毫升）給予PBN，100毫克/公斤體重。注 射LPS24小時後使吸入C02將動物殺死》殺死後立即以吸 量管抽取眼房水並分析其蛋白質-含量。 以 Smith 法[PK Smith 等，Anal Biochem.，150,76(1975)] 使用 BCA-1 Protein Determination Kit(Sigma Chemical Co) -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X29?公釐） (請先閱讀背面之注$項再填寫本頁) 裝· 訂 45 0952 A7 B7 五、發明説明（21 作眼房水取樣的蛋白質鑑定。各眼房水樣品都编號以排除 分析偏見。由每一眼房水樣品容器内抽取5微升，與試管 内的95微生水混合。然後每一管内加2毫升蛋白質測定拭 劑。將每一管產生渦動，然後於37 X水浴内培養30分鐘 。將管冷至室溫。使用Cary分光光度劑（用水使儀器歸零） 於5<52毫微米測定吸光率。以相伴測定的標準曲線的線性 回歸方程式計算眼房水樣品的蛋白質含量。 此實驗結果見下表1及圖1。用Student's t- Test分析所 得數據’顯示LPS +生理鹽水明顯地不同於空白組（生理鹽 水+生理鹽水），負對照组（生理鹽水+PBN)，及樣品組 (LPS+PBN)，p<0.05(見下表 1)。 表1 眼房水蛋白質含量 治療 蛋白質含量 P(T<=t)二拖尾 (毫克/毫升）與LPS +生理鹽水之比較 {請先聞讀背面之注f項再填寫本頁) .裝' 訂 ο- 經濟部中央橾準局男工消費合作社印製 生理鹽水+生理鹽水 2.08 <0.05 生理鹽水+PBN 2.23 <0.05 LPS+PBN 2.31 <0.05 LPS +生理鹽水 · 4.44_ 無 表1數據顯示，由眼房水蛋白質含量測定可知LPS產生 明顯的發炎，PBN能有效地治療由内毒素引起的.眼色素膜 24- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇X297公釐） 45 095 2 a? B7 經濟部中央樣準局貝工消费合作社印製 五、發明説明（22 ) 炎。 實例5 内真音引起的眼色素膜炎的治療 此實例顯示各種硝酮化合物治療内毒素引起的眼色素膜 炎的能力。此實例所用硝酮可由市場購得或可用此技藝承 認的方法製得β 此實例使用習用的Lewis雄鼠（Harlan Spragus Dawley， Inc” Indianapolis，IN, USA),體重 200 至 250 克，因爲此 種鼠及此性別易產生内毒素引起的眼色素膜炎（EIU)。研究 期間把鼠關在籠内，每籠1-3隻。動物接受Purina實驗室 食物（Purina Rodent Diet 50-02，PMI Feeds，Inc.，St. Louis， MO, USA)及去離子水（18.2兆歐姆，使用Milli Q水純化全 身，Millipore Corporation, Bedford, MA，USA,純化），任其 自由飲食。 要引起EIU時，於0時間給鼠作足底注射以生理鹽水稀 釋至250微克/毫升脂多糖（由血清型〇55 : B5大腸菌（E. coli)製得的 LPS，L-2880，Sigma Chemical Co.，St. Louis， MO, USA)。足底注射LPS後，立即給鼠腹腔内注射或經口 給予确明化合物或對照載體。6小時後再給予確明化合物 或載體（下示者例外）。硝酮给予的標準濃度爲1〇〇毫克/公 斤，劑量容積爲1毫升/公斤。也分別腹腔内給予1毫克/ 公斤或經口給予75毫克/公斤消炎痛（dexamethasone)及環 孢素（cyclosporin)作爲比較。 -25 - 本ίΛ張尺度適用中圉國^^準（CNS ) A4規格（2丨0X29^公| ) (诗先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 15 0S52 A7 B7 五、發明説明（23 24小時後使吸入c〇2將動物殺死，用26號針（Hamilton， Co· Reno, NV)由每一眼抽取1〇微升眼房水》將由單一動物 取得的二份眼房水樣品於與50微升生理鹽水在微離心管 内合併，冰凍保存。使用小整數份的稀釋樣品立即用血球 計數器（Hausser Scientific, Horsahm，PA, USA)及 Nikon Diaphot 300光顯微鏡作細胞計數《只計數活細胞。 剩餘的眼房水樣品以3500轉/分鐘作微離心（Fisher Scientific，Pittsburgh, PA，USA)10 分鐘。用 Bicillch〇ninic Acid Protein kit (Sigma Chemical Co.，St. Louis, MO, USA) 在樣品收取後6小時内測定上清液之蛋白質含量e 以Student’s t· test比較治療的和未治療的動物的蛋白質 濃度及細胞計數。以試驗化合物與未治療的對照组比較所 得的保護百分比見下表2 » 表2 试驗化合物所得保謹百分此 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ο -裝. 訂 .4 —保護百分比 經濟部中央標準局貝工消费合作社印掣 编號 試驗化合物 5A汉-（苯基）·Ν-第三丁基硝酮 29.20 5B α-(4-此淀基1-氧化物）-N- 75.40 第三丁基硝酮 : 5C α -(3,5-二甲氧基-4-羥基苯71.30 基）-Ν-第三丁基硝酮1 質細胞統計 ρ<0.05 ρ<0.05 ρ<0.001 26- f紙張尺度適用中因國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） A7 45 095 2 B7 五、發明説明（24 ) 5D α -(3,5-二-第三丁基-4-羥 基苯基）-Ν-第三丁基硝酮 40.00 72.00 ρ<〇.〇〇1 5E π -(2-羥基苯基）-Ν-第三丁 20.90 -- N.S. 基硝明 5F 從-(4-视淀基1-氧化物）-Ν- 9.70 -- N.S. 正-丙基硝酮 5G or -(2,4,6-三羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮 4.60 -- N.S. 5H 消炎痛 65.90 99.00 ρ<〇.〇ι 51 環孢表 46.60 -- ρ<0.05 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央#準局貝工消费合作社印製 1 :此化合物只於0時間給予一次》 表1中的數據顯示，本發明醫藥组合物中所用的硝酮化 合物有效地防止内毒素引起的眼色素膜炎。 由前述説明中，精於此技藝者會發現可作各種修改及變 化。所有此類修改都屬於後附申請專利的範圍内。 -27- 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

Claims (1)

1. 450952 第86105289號專利申請案 g 中文申請專利範圍修正本（90年5月） 六、申請專利範圍 {請先閩讀背面之注ί項再填寫本頁) 1. 一種眼用醫藥組合物，其含有醫藥上可接受的眼用載 劑及眼睛發炎治療量的選自下列的化合物： α -(表基）-N -第三丁基硝銅 α -(3,5-二甲氧基-4-羥基苯基）-N-第三丁基硝酮 a -(3，5-二-第三丁基-4-羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮 α -(2-羥基苯基）·ν-第三丁基硝酮 〇：-(2,4,6-三羥基苯基）-1^第三丁基硝酮 α-(4-吡啶基1-氧化物）_Ν-第三丁基硝酮 α-(4-吡啶基1-氧化物）_Ν-正·丙基硝酮，及 5,5-二甲基ρ比哈淋-Ν-氧化物。 2，根據申請專利範圍第丨項之眼用醫藥組合物，其中眼 用載劑是滅菌的水性載劑。 3-根據申請專利範，圍第2項之眼用醫藥組合物，其中此 組合物還含有一種或多種選自：氣苄烷銨及乙基汞硫 代水楊，鈉之添加物。 4·根據申請專利範園第1項之眼用醫藥组合物，其中眼 用載劑是油膏或软骨載劑β 經濟部t夹揉窣局負工消费合作社印— 5-根據申請專利範圍第1項之眼用醫藥組合物，其中化 合物是α -(苯基）-Ν-第三丁基硝酮。 6_根據申請專利範園第1項之眼用醫藥組合物，其中化 合物是α -(3,5-二甲氧基羥基苯基）-Ν-第三丁基硝 網〇 7_根據申請專利範困第1項之眼用醫藥組合物，其申化 合物是α -(3,5-二-第三丁基-4-羥基苯基）-N-第三丁基 本纸浪尺度適用_禱國家揉丰 (CNS ) ( 210X297公釐） 45 095 2 Αβ Β8 C8 D8 六、申請專利範圍 ~ 硝酮。1 8. 根據申請專利範圍第1項之眼用醫藥組合物，其中化 合物是α -(2-羥基苯基）-N-第三丁基硝酮。 9. 根據申請專利範圍第1項之眼用酱藥组合物，其中化 合物是〇:-(2,4,6-三羥基苯基）-仏第三丁基硝酮。 10. 根據_請專利範園第1項之眼用醫藥组合物，其中化 合物是α -(4-吡啶基1-氧化物第三丁基硝酮* 11‘根據申請專利範圍第1項之眼用赘藥組合物，其中化 合物是α-(4-吡啶基1-氧化物）-Ν-正-丙基硝酮。 12. 根據申請專利範圍第丨項之眼用贅藥组合物，其中化 合物是5,5-二甲基吡咯啉-N-氧化物β 13. —種化合物，其係選自： α -(3,5-二甲氧基-4-羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮 α-(2,4,6-三羥基苯基第三丁基硝酮，及 α -^4-吡啶基1-氧化物）-Ν-正-丙基硝輞。 Η.根據中請專利範圍第13項之化合物，其為α -(3,5-二 甲氧基-4-羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮。 15. 根據申請專利範困第13項之化合物，其為α -(2,4,6-三羥基苯基）-Ν-第三丁基硝酮。 16. 根據申請專利範圍第13项之化合物，其為α -(4-吡啶 基1-氧化物）-Ν-正-丙基靖明β Π-根據申·請專利範面第1項之酱藥組合物，其中該化合 物係選自下列所组成之群： α -(3,5-二甲氧基_4-羥基苯基）-Ν-第三丁基蛸網 -2 - 本紙張尺度遑用中«國家揉丰（CNS > Α4規格（2丨0Χ297公釐） (請先聞讀背面之注$項再填寫本I) 訂 經濟部中央樣率局貝工消费合作社印装 A8 DQ 45 035 2 g® 六、申請專利範園 α-(2,4,6-三羥基苯基）-N-第三丁基硝酮，及 α -(4-峨咬基1 -氧化物）-N-正-丙基硝朗。 (請先閩讀背面之注$項再填寫本I) 訂 經濟部中央嫖窣局貝工消费合作社印策 本纸張尺度遘用中ββ家樣率（CNS ) A4^ ( 210Χ297公釐）