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經濟部中央標準局員工消費合作社吖裂 五、發明説明 ( 1 ) 1 1 1 [技術領域] 1 1 1 本 發 明 係 關 於 由 有 病 毒 摻 雜 之 可 能 性 之 含 有胞 漿 素 原 1 (P 1 a s m i η 〇 g e η 即 厂 血 纖 維 蛋 白 溶 酶 原 J )之組成物製造 請 先 1 閱 I 在 實 質 上 使 病 毒 不 活 性 化 之 含 高 活 性 胞 漿 素 原組 成 物 之 方 讀 背 1 面 I 法 0 之 注 1 | 意 I [背景技術] 事 項 1 | 胞 漿 素 原 藉 尿 激 酶 等 之 胞 漿 素 原 活 化 因 子 活化 時 變 為 胞 4 填 寫 1 漿 素 (P 1 a s m in 即 厂 血 纖 維 蛋 白 溶 酶 J ) 此物可溶解 本 頁 ν__<· 1 血 纖 維 蛋 白 而 造 成 血 栓 溶 解 現 象 〇 因 此 胞 漿素 原 被 認 定 I 1 其 在 臨 床 上 有 作 為 血 拴 之 溶 解 劑 (血拴溶解劑）之 可 能 性 〇 1 1 尤 其 是 離 胺 豳 型 胞 漿 素 原 其 Ν端為離胺随基（ 離 胺 酸 殘 1 訂 1 | 基 )者 被期待其有用性 > 此 離 胺 豳 型 胞 漿 素 原 係 麩 胺 醚 型 胞 漿 素 原 (其Ν 端 為 麩 胺 1 1 豳 基 之 胞 漿 素 原 )之N 端 起 第 76個 之 離 胺 豳 基 與第 77個 之 廉 1 胺 醯 基 之 間 被 切 斷 所 生 成 〇 胞 漿 素 原 之 來 源 為 人 之 血 漿 因 此 例 如 肝炎 病 毒 ! I A IDS 病 毒 等 之 病 毒 可 能 會 侵 入 含 有 胞 漿 原 之 組成 物 〇 從 而 1 1 有 防 止 此 等 病 毒 繁 殖 之 下 述 習 知 方 法 • 將 含 血漿 蛋 白 質 組 1 成 物 在 溶 液 狀 態 下 予 Μ 加 熱 之 方 法 (曰本專利特開昭 1 55 -14561 5、 5 6 ~ 139422 Ν 56 -106595等） 在 乾煉 狀 態 下 加 1 I 熱 之 方 法 (特表昭55- 500548等 ) 藉磷酸三 Ξ烷酯接觸 處 1 1 理 之 方 法 (特開昭60- 51 116 等） 〇 然 而 在 加 熱處 理 時 有 可 1 1 能 留 存 耐 熱 之 病 毒 另 在 磷 酸 三 烷 酷 處 理 時 有可 能 留 存 非 1 1 被 膜 病 毒 〇 又 有 蛋 白 質 之 活 性 在 磷 酸 三 院 酷處 理 中 降 低 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 3 修正頁 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A6 B6 五、發明説明（2 ) 之問題。 為解決此等問題，在磷磷酸三烷酯接觭·處理後在乾燥 狀態下加熱處理之方法（EP公開378208),在溶掖狀態下同 時進行藉磷酸三烷酯之接觭•處理及加熱處理之方法（待 開平2- 1 80833)等被倡議。 本案發明人等在考慮上述情事下，為了可應用於含胞漿 素原組成物之製造而進行研究。本發明乃提供一種可在胞 漿素原之活性損失減至最低之下以良好之效率使摻雜之病 毒不活性化而製造其為醫蕖品更安全之含胞漿素原組成物 之方法。 [發明之掲示] 本發明為，使有病毒摻雜之可能性之含胞漿素原組成物 (1)在溶液狀態下與磷酸三烷酯接觸並予以處理，然後（2) 進行磷酸三烷酯之去除處理，如此構成之病薄不活性化之含 s-----^ 胞漿素原組成物之製造方法。 應用本發明之方法之胞漿素原乃非特別限定之物而偽利 用血漿來源（自血漿單離）、組嫌來源（自組嫌單離）、基因 重組或組鏃培餐即可得到者。 應用本發明方法之起始原料，即含有胞漿素 之組成物 (溶液狀態）偽非特別受到限制之物，例如可舉出血淸，血 漿，腹水，胎盤萃取液，胎盤紐鎇萃取液，由血漿所得之 Cohn氏低溫乙酵劃分法之第Π + Β份或第I份，其他方面 由血漿或組嫌萃取掖藉各種_分法處理所得之（劃分）份所 構成之溶液，藉基因重組宿主或組鏃培餐所得之培餐液. (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 -訂 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）4 Α7 Β7 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 五 發明説明 ( 3 ) 1 1 市 售 之 胞 漿 素 原 製 劑 (溶液） 等 〇 1 1 I 再 者 9 本 發 明 對 含 胞 漿 素 原 組 成 物 之 與 磷 酸 三 烷 接 m 1 1 時 之 鈍 化 程 度 並 未 特 別 限 定 » 而 可 應 用 於 任 意 純 化 程 度 之 先 1 Μ | 該 組 成 物 f 從 而 含 胞 漿 素 組 成 物 與 磷 酸 三 賄 之 接 觸 係 可 讀 背 | 面 I 應 用 於 胞 漿 素 原 之 分 離 或 純 化 之 任 . 階 段 0 之 注 1 1 本 發 明 使 用 之 磷 酸 三 烷 酯 並 未 予 特 別 限 制 而 可 舉 出 » 意 事 項 1 | m 酸 三 正 丁 酯 m 酸 三 第 三 丁 酯 磷 酸 三 正 己 酯 磷 酸 三 再 填 — 寫 本 (2 -乙基己酯） » Λ 磷 酸 三 癸 酷 等 為 較 佳 〇 尤 其 更 佳 之 m 酸 三 頁 1 烷 酯 為 瞵 酸 三 正 丁 酯 (以下稱為T N B P ) 〇 又 按 亦 可 使 用 二 種 1 1 以 上 互 相 不 同 之 m 酸 三 烷 酯 之 混 合 物 0 1 1 本 發 明 中 磷 酸 三 烧 酿 之 使 用 量 為 在 0 . 01 10X ( w/ V) 之 1 訂 1 I 範 圍 内 Μ 約 0 . 1 - -3¾ ( W / V ) m 圍 内 較 佳 〇 隣 酸 三 烷 醏 可 在 界 面 活 性 劑 伴 随 或 不 伴 随 之 下 使 用 之 0 1 1 I 最 好 能 將 磷 酸 三 烷 酿 與 界 面 活 性 劑 組 合 使 用 之 〇 此 界 面 活 1 1 性 劑 可 於 磷 酸 三 烷 酯 與 含 胞 漿 素 原 組 成 物 接 觸 Μ 刖 或 接 觸 時 (同時） 或 接 觸 Μ 後 之 任 一 階 段 添 加 之 0 界 面 活 性 劑 之 作 1 1 用 在 於 強 化 含 胞 漿 素 原 組 成 物 中 之 病 毒 與 磷 酸 三 烷 酯 之 接 1 I 觸 〇 « 1 1 為 界 面 活 性 劑 可 舉 出 脂 肪 酸 之 聚 氧 伸 乙 衍 生 物 葡 萄 糖 1 醇 無 水 物 之 部 分 酯 例 如 Tw e e η 80 > Tw e e η 20及 聚 山 梨 酸 酯 1 1 80等 ， 及 非 離 子 性 油 溶 水 清 m m 例 如 Tr ί t on XI 00 ( 氧 乙 化 1 1 烷 基 苯 酚 等 〇 又 可 舉 出 9 以 去 氧 m 酸 納 及 统 内 鹽 1 I (S u 1 P h 〇 b e t a i ne)聞名之合成兩性離子清潔劑 1 1 Ι (K w 1 11 e r g e n t s ) 例 如 N- 十 —· 基 -N ,N 二甲基- 2- 銨 -1 -乙磺 1 1 5 - 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) Λ4規格（210Χ297公婕） 修正霣 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A6 B6 五、發明説明（4 ) 酸鹽等及其同族黼，或非離子性淸潔_例如辛基-冷， D-蕕萄《喃耱苷等。 在使用界面活性劑之場合，其使用置並無睡界性，例如 可在約0.001X〜約10X(以約0.01〜3X較佳）之範圍内使用 之。 磷酸三烷酯處理像對被膜病毒，例如B型肝炎病毒、非 A非B型肝炎病毒、人免疫不全病毒（HIV)、水泡性口炎病 毒、Si ndb is病毒等之不活性化待別有用。再者，進一步 在乾燥狀態下以充分之時間加熱處理時，亦可使較不晒熱 之病毒不活性化。 本發明藉磷酸三烷酯所行之含胞漿素原組成物之處理像 在0〜60¾ (以20〜40Ϊ：較佳）之溫度下實行30分鐘以上為 宜，該項時間以1〜30小時較佳，而以3〜10小時更佳。再 者，本項處理最好能在弱酸性條件下實行之，具體可例示 PH4〜6 ,以4.5〜5 . 5較佳。 在血漿、血清中有N端為麩胺酸殘基之麩胺醯型胞漿素 原之存在，而在Cohn氏低溫乙酵劃分法之第I + B份或第 I份中有麩胺酵型及離胺醯型之兩胞漿素原之存在。為播 得離胺醯型胞漿素原，必需使麩胺蘩型胞漿素原變換為離 胺醯型，此際在上述弱酸性pH條件下實行磷酸三烷酯處理 卽可將麩胺睡型有效變換為離胺釅型。在此場合，於蛋白 痗阻害劑不存在之下，或在指定濃度之蛋白病阻害薄之存 在下實行本處理時，可在未損及胞漿素原之活性下得到離 胺隹型胞漿素原。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝 .、ΤΓ -線- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐）6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A6 B6 五、發明説明（5 ) 另一方面，在中性及弱鑛pH條件下實行本處理時，可在 阻止向離胺醯型之變換下得到麩胺醛型胞漿素原。在此場 合最好能在蛋白瘺阻害劑之存在下施行之。 為蛋白痗阻害劑，主要能實質將蛋白痗活性阻害之物質 即可，並未特別限定。例如可舉出e-胺己酸（EACA)、離 按酸、精胺酸等之鹼性胺基酸，DFP、DMSF等之化學物質 ,抑狀病（aprotinin)等之蛋白質等。 通常在磷酸三烷酯處理後，除去磷酸三烷酯。在使用界 面活性劑或安定化劑之場合，此等劑物亦一*起被除去。其 去除方法可採用任一方法，例如可舉出，藉親合層析術或 離子交換層析術來趿附胞漿素原之方法，將胞漿素原籍沉 激回收之方法，藉凝綴過濾使胞漿素原與該等劑物分離之 方法等。此等方法2種以上組合亦可，或1種方法反覆複數 次亦可。再者，加熱處理亦可以在磷酸三烷酯之去除處理 時施行之。 磷酸三烷酯之去除處理最好能在最後藉親合層析術或凝 謬遇濾或離子交換層析術處理該含胞漿素原組成物。籍親 合層析術或凝睡遇濾或離子交換層析術來處理時可除去磷 酸三烷酯、界面活性劑、安定化劑。再者，即使在留存有 如非被膜病毒等特別耐熱之病毒之情況.亦有可能藉本項 親合層析術或凝醪遇濾或離子交換層析術來除去其全部或 大部份。親合層析術在胞漿素原之場合可》利用固定化離 胺酸之層析法來處理。 在實行乾燥之含胞漿素原組成物之加熱處理之場合，從 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝 .訂 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A6 _B6_ 五、發明説明（6 ) 被處理物除去磷酸三烷酯等之後，回收胞漿素原，而予以 純化至指定純度後，用習知方法凍結乾燥邸可得到乾燥組 成物。 加熱處理通常在30t：〜100¾ (以55〜85t：較佳）溫度下 實施3〜200小時（以10〜100小時較佳）。再者，亦可以在 安定化劑之存在下實施以保護蛋白質不受熱之影譬。為安 定化劑例如可舉出人血淸白蛋白、糖醇、糖酵、胺基酸等。 [實施發明之最佳形態] 實施例1 使藉Cohn氏冷乙酵劃分法所得（劃分）份II + 1漿讎萃取 殘渣（100g)懸浮於含有10單位/ bJL抑肽_及0.111氯化銷之 TrU鼸酸鑀衡液（PH8.3)中，暫時攪拌後，對此添加並攪 拌5S：硫酸銨溶液，而藉離心分離法分離上清液。然後對此 上清掖添加攪拌30X硫酸銨而藉離心分離法，分離沉毈物 lg。使此沉澱物懸浮於含有0.9¾{氰化納之0.9X甘胺酸（pH 7.2)中。對此一含胞漿素原溶掖以1〇?濃度可達0.35!且「 Tween 80J _度可達0.1X之方式添加TNBP(磷酸三正丁酸 )及「Tween 80」而配成一溶液後使用該溶液1»文按PH5, 3 0t：處理6小時。 將胞漿素原溶液注人一比照Deutsch, DG等[Science.^ 1095, (1970)]之方法藉含大0.9X氯化納之0.9X甘胺酸溶 液（PH7.2)平衡化之離胺酸-Sepharose管柱（100·31),以 吸附胞漿素原，其次用一含有0.9 X氯化銷之0.9%甘胺酸溶 液（ΡΗ7.2)予以洗淨，繼之用一含有1H氛化銷之0.9S!甘胺 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝 -訂 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐）8 299232 A6 B6 五、發明説明（7 ) 酸溶液（pH7.2)500hJI洗淨後，利用一含有Θ.25Ν_胺酸之 0.9%甘胺酸溶液（pH7.2)使所吸附之胞漿素原溶出。 藉此項處理除去THBP、Tween 80。使所得到之胞漿素原 純化至指定純度後，予以溶解成指定濃度而分裝於小瓶内 ，凍結乾燥之。就凍結乾燥後之胞漿素原製劑進行60〜 80它、72小時以上之乾燥加熱處理而製成已將病毒除去或 不活性化之含離胺醸型胞漿素原組成物。 奮施例2 施行與實施例1相同之TNBP/Tween 80處理後，使用 Sephacryl S-30及作為展開液之含有0.9S! w/v氛化鈉之 0.9%甘胺酸溶液（pH7.2)以進行凝睡過濂，而輿資施例1同 樣實施藉固定化離胺酸所行之親合層析（法）處理。與實施 例1同樣製得一具有高活性並使病毒不活性化之含離胺醏 型胞漿素原組成物。 實施例3 與實施例1同樣實施如同實施例1之TNBP/Tween 80處理 時pH條件及由麩胺酵型胞漿素原變換至雔胺酵型胞漿素原 時之變換程度而予以確證。其結果示於表1中。 裝......................訂...................線 {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 表1 PH TNBP/Tween80 處理前 TNBP/Tween80 處理後 麩胺醢型 離胺醢型 麩胺醮型 钂胺釀型 4. 5 6 5% 3 5% 0% 10 0% 5. 0 6 5% 3 5% 0% 10 0% 5. 5 6 5% 3 5% 0% 10 0% 6. 0 6 5% 3 5% 5 8% • 4 2% 7. 2 6 5% 3 5% 6 5% 3 5 % 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐）9 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A6 B6 五、發明説明（S ) 實施例4 使Cohn氏冷乙酵剷分法所得之（劃分）份I + 1漿黼萃取 殘渣（1.1kg)懸浮於含有10單位/ mil之抑肽_及0.1»4氯化 納之Tris鹽酸级衢液（PH8.3)中，暫時攪拌後，藉離心分 離、遇雄手段分離上清液。 將此上清液注入離胺酸-SepharoseU义）以使吸附胞漿 素原，其次用一含有0 . 9SI氯化納之0 . 9!«甘胺酸溶液（pH 7.2)予以洗滌，繼之用一含有1M氛化納之0.9¾甘胺酸溶液 (PH7.2)洗淨後，利用一含有0.25M離胺酸之0.9%甘胺酸溶 液（PH7.2)使所吸附之胞漿素原溶出。 實行此溶出液之濃縮而得到250bJI之濃縮液。 以此一含胞漿素原濃縮液每b义計，添加0.3XTNBP及 liHween 80以配製成一溶液，而將該溶液按PH5.0在30T： 溫度下處理6小時。將處理後之胞漿素原溶液施加於已藉 含有0.9X氯化銷之0.9¾{甘胺酸溶液（PH7.2)平衡化之 -Sephacryl S 300 "管柱（10JI)而進行凝醪遇濾。由是與 責施例1同樣製得一具有高活性且已將病毒不活性化之含 離胺醯型胞漿素原組成物。 實施例5 使Cohn氏冷乙酵K分法所得之（劃分）份I + 漿體萃取 殘渣（1.5kg)懸浮於含有10Θ單位/ b文之抑肽酶及0.1M氯化 納之Tris鹽酸緩衝液（PH8.3),暫時攪拌後，藉離心分離 、過濾手段分離上清液。 將此上清液注入離胺酸-SepharoseUJI )以使吸附胞漿 .............................................. 裝......................訂.....................線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210X297公釐） A7 gpM丨月外二二: _η::二_ B7 五、發明説明（9 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 素原*其次用一含有0.9¾氛化納之0.9S：甘胺酸溶液 (pH 7.2)予Μ成淨，堪之用一含有1M氛化納之0.9X甘胺酸 溶液（ΡΗ7.2)洗淨後，利用一含有0.25Μ離胺酸之0.9S；甘胺 酸溶液（ρΗ7.2)使所吸附之胞漿素原溶出。 對此溶出液添加100單位/ ml (最後澹度）之抑肽梅後予 以澹締而得到220mll之濃縮液。 Μ此一含胞漿素原濃縮液每m丨計*添加0.3SKTNBP及U Tween 80及100單位/ ml (最後澹度）之抑肽酶Μ配製成一 溶液，而將該溶液按ΡΗ7. 2在3〇υ溫度下處理6小時。 將處理後之胞漿素溶液施加於已藉含有0.9!«氮化納之 0.9*甘胺酸溶浚（ΡΗ7.2)之"Sephacryl S 300 ”管柱（101 ) 而進行凝膠過滤。由是製得一具有高活性且已將病毒不活 性化之含有胞漿素原（其中65¾屬麩胺醢型）之組成物。 實驗例 (1)胞漿素原活性之保持 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 在胞漿素原溶液中添加O.WTNBP及ISiTWeen 80*然後按 照上述實施例處理。測定MTNBP/Tween處理前後及乾煉加 熱處理前後所殘留之胞漿素原活性。活性之測定係依據 J . B 1 〇 c h e m . , 8 8 , P . 1 8 8 ( 1 9 8 0 )所記載之方法。其結果 如表1所示。 本紙張尺度適用中國國家標苹（CNS ) Λ4規格（210X297公f ) 11 ♦正霣 A7 B7 五、發明説明（9M) 表 1 處理前 處理後 殘存率 TNBP/Tween處理（3010,6小時）310cu/ml 300cu/ml 98% 乾煉加熱處理（6010,72小時） 61cu/ml 46cu/m 1 76¾ (2)滤過性病毒之不活性化 用表2所示之供試驗病毒·其宿主细胞及感染價的測定 法進行下列評估。 表 2 供試驗的病毒 宿主细胞 感染價的測定法 ：---：------『衣—— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 水疱性口炎 (印第安那株） S i n d b i s Echo (6型）

Fh CEF HeLa 測定形成的斑（P 1 aque 測定形成的斑 觀察细變性效果 訂 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 各细胞係Μ添加10¾去活化牛胎兒血清之伊格氏ΕΜΕ培養 基來培養。感染病毒後•用減少2»；血清添加量之維持培養 基培養。在上述胞漿素原溶液中添加3ΧΤΝΒΡ及UTween80, 並與一定量之病毒溶液混合*然後按照上述實施例所述予 Μ處理。測定TNBP/Tween 80處理前後及乾煉加熱處理前 後所殘留之病毒感染價。其結果如表3所示。 1 ^ 條正頁 2D9232 at B7 五、發明説明（9邛） 表 3 供試驗 病毒之 感染價 之病毒 處理前 處理 後 TNBP/Tween處理 VSV ί 二 10 PFU/ml — (30 1C ,6小時） S ί n d b i s 107" PFU/ml — 7 Λ 久7 Echo 1 0 丁 10 TCIDsa/ml 6 Λ 乾煉加熱處理 VSV 10 PFU/ml — (60¾ ,72小時） S i n d b i s 10 PFU/ml Echo 107 TCIDso/ml — r -」 表示在檢出 界限M下 。意味著在VSV中 未滿 50PFU/ml ，在S i ndbis中未滿 500PFU/ ml,而在Echo中未 / 滿10 TC IDso /ml。 [產業上之可利用 性] 依照本發明之製造方法， 在胞漿素原之活 性不致 有損失 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 之下可有效製成其使病毒不活性化之含胞漿原組成物。 又按，磷酸三烷酯處理對未具被膜之病毒之不活性化效 果較低。然而，依照本發明由於包括乾燥狀含胞漿素原組 成物之加熱處理步驟*此種病毒亦可藉該步驟予Μ顯著不 活性化。 再者，若欲得到其中被期待Μ作為血栓溶解劑之有用性 之離胺醢型胞漿素原，則在弱酸性條件下進行磷酸三烷酯 處理步驟Μ使麩胺豳型胞漿素原有效變換為離胺豳型即可 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） 232五、發明説明（ίο ) A7 B7 鐮 全毒 或 安病 性 更在 中 品其 按 槩尤 下 翳 ， 。 在。為法用 存原 作方有 之素種之別 劑漿一佳特 害胞供極上 阻型提法造 酶醢係製製 白胺 法業之 蛋麩方工劑 在到造之製 驟得製物原 步可 之成素 本時明組娘 。 ， 施 發原胞 的面實本素之 目方件，漿化 其一 條而胞性 成另PH從含活 達性 之不 •-VI% 訂 (請先閲讀背而之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家梯準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 12 - 修正買

Claims (1)

1. 85.11. 29 修正冬 經濟部中央梯準局員工消費合作社印装 申請專利範圍 1. 一種病毒被不活性化之含離胺醚型胞漿素原之組成物 之製法*其包含將有病毒摻雜可能性之含有麩胺醢型胞漿 素原之組成物， (1) 在弱酸性溶液條件下，與磷酸三烷賄在溫度為0至60¾ 下接觸並予Μ處理30分鐘， (2) 去除磷酸三烷_ * (3 )凍結乾煉，然後 (4)將含有胞漿原之組成物在溫度為30-10013及乾煉狀態 下加熱處理3至200小時*藉此得到其中病毒被不活性 化之含離胺醢型胞漿素原之組成物。 2. 如申請專利範圍第1項所述之含有胞漿素原之組成物 之製法，其中該加熱處理係實行至可使非被膜病毒不活性 r 化之程度者。 3. 如申請專利範圍第1項所述之含有胞漿素原之組成物 之製法，其中該弱酸性係pH4〜6者。 4. 如申請專利範圍第1項所述之含有胞漿素原之組成物 之製法，其中藉磷酸三烷酯之處理係在界面活性劑共存之 下茛行者。 5. 如申請專利範圃第4項所述之含有胞漿素原之組成物 之製法，其中該界面活性劑為，脂肪酸之聚氧伸乙基衍生 物，葡萄糖酵無水物之部份酿，非離子性油溶水清潔劑· 去氧膽酸納，合成兩性離子濟潔劑及其同族體，或非離子 性清潔劑者。 6. 如申請專利範圃第1項所述之含有胞漿素原之組成物 本紙張尺度適用巾阀國家標率（ms)以規焓（2丨〇χ 297公釐） 1 --^----J--一裝------訂------ί Μ (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) ABCD 299232 々、申請專利範圍 之製法，其中該磷酸三烷酯為磷酸三正丁酷、磷酸三 第三丁賄、磷酸三正己賄、磷酸三（2-乙基己酯）或磷酸三 正癸酯者。” ----------^裝------訂------^ ; (請先閱讀背面之注$項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 2 本紙張尺度適用中國國家標率（CNS ) Λ4坭格（2丨0X297公梦）