TW202415407A

TW202415407A - 穩定之包含抗cldn18.2抗體的藥物製劑

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Publication number: TW202415407A
Application number: TW112123063A
Authority: TW
Inventors: 凡張; 胡裕迪
Original assignee: 中國大陸商蘇州創勝醫藥集團有限公司; 美商創勝醫藥有限公司; 開曼群島商創勝集團醫藥有限公司
Priority date: 2022-06-30
Filing date: 2023-06-20
Publication date: 2024-04-16
Also published as: WO2024002257A1

Abstract

本申請案揭示一種藥物製劑，其包含抗密連蛋白(Claudin)(CLDN)18.2抗體、緩衝液、穩定劑及界面活性劑。該藥物製劑能夠在長期儲存、高溫下(例如40℃)及/或多次凍融後仍然保持抗CLDN18.2抗體的穩定性。本申請案亦揭示該藥物製劑預防及/或治療CLDN18.2相關疾病、尤其癌症(例如CLDN18.2相關的癌症)的方法以及製備該藥物製劑的方法。

Description

穩定之包含抗CLDN18.2抗體的藥物製劑

本申請案係關於藥物製劑，特定言之，包含抗CLDN18.2抗體之穩定藥物製劑。本申請案亦關於該藥物製劑的製備方法及其用途。

研究表明，CLDN‎18.2屬於密連蛋白(CLDN)家族成員，係CLDN18的亞型之一。CLDN‎18.2係一種高度選擇性的胃譜系標記物‎，並在胃癌、食道癌、胰腺癌和肺癌等多種癌症類型中高度表現。CLDN18.2蛋白結構包括4個跨膜區及2個胞外環，定位於細胞膜表面的跨膜蛋白，CLDN18.2作為細胞膜表面蛋白，暴露的胞外結構允許抗體的結合，係理想的治療性抗體開發靶點。抗CLDN‎18.2抗體能在腫瘤細胞表面特異性地識別並結合CLDN‎18.2分子，從而引發抗體依賴性細胞毒性(ADCC)、補體依賴性細胞毒性(CDC)，凋亡及抑制細胞增殖，清除癌細胞及控制疾病。

由於抗體分子具有複雜的蛋白質多級結構，並且易於物理上黏結在一起，從而可能導致不期望的免疫反應，或者可能在投與期間堵塞注射器或泵而對患者不安全，因此，抗體的液體製劑長期以來面臨的問題之一係凝聚所致的穩定性問題。

因此，需要具有穩定性及質量一致性的抗CLDN‎18.2抗體藥物製劑。

本申請案提供在長期儲存、高溫下(例如40℃)及/或多次凍融後仍然保持均一及穩定的包含抗CLDN18.2抗體之穩定藥物製劑。

在一態樣中，本申請案提供一種藥物製劑，其包含抗CLDN18.2抗體及緩衝液，其中該緩衝液為乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液，且pH值為4.5-6.0。在一些實施例中，該緩衝液在該藥物製劑中的濃度為5~50 mM，或10~30 mM。

在一些實施例中，該藥物製劑亦包含穩定劑。

在一些實施例中，該穩定劑在該藥物製劑中的濃度為1~20%(w/v)，或1~10%(w/v)。

在一些實施例中，該穩定劑選自：蔗糖、海藻糖和山梨糖醇。

在一些實施例中，該穩定劑為蔗糖或海藻糖，且該蔗糖或海藻糖在該藥物製劑中的濃度為5-10%(w/v)。在另一些實施例中，該穩定劑為山梨糖醇，且該山梨糖醇在該藥物製劑中的濃度為2-8%(w/v)。

在一些實施例中，該藥物製劑亦包含界面活性劑。

在一些實施例中，該界面活性劑在該藥物製劑中的濃度為0.005%(w/v)~0.4%(w/v)，或0.01%(w/v)~0.2%(w/v)。

在一些實施例中，該界面活性劑選自：聚山梨酯80和泊洛沙姆188。

在一些實施例中，該界面活性劑為聚山梨酯80，且該聚山梨酯80在該藥物製劑中的濃度為0.01%(w/v)~0.1%(w/v)。在另一些實施例中，該界面活性劑為泊洛沙姆188，且該泊洛沙姆188在該藥物製劑中的濃度為0.05%(w/v)~0.2%(w/v)。

在一些實施例中，該藥物製劑亦包含螯合劑。

在一些實施例中，該螯合劑在該藥物製劑中的濃度為30-350μM，或40-60 μM。

在一些實施例中，其中該螯合劑選自：EDTA、DTPA、IDHA、EDDHA、HBED。

在一些實施例中，該抗CLDN18.2抗體在該藥物製劑中的濃度為1~200 mg/ml。

在一些實施例中，該抗CLDN18.2抗體在該藥物製劑中的濃度為20~40 mg/ml。

在一些實施例中，該抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 1所示的重鏈CDR1(HCDR1)、如SEQ ID NO: 2所示的HCDR2及如SEQ ID NO: 3所示的HCDR3，以及如SEQ ID NO: 4所示的輕鏈CDR1(LCDR1)、如SEQ ID NO: 5所示的LCDR2及如SEQ ID NO: 6所示的LCDR3。

在一些實施例中，該抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 7所示的重鏈可變區的CDR1、CDR2和CDR3，以及如SEQ ID NO: 8所示的輕鏈可變區的CDR1、CDR2和CDR3。

在一些實施例中，該抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 7所示的重鏈可變區及如SEQ ID NO: 8所示的輕鏈可變區。

在一些實施例中，該抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 9所示的重鏈及如SEQ ID NO: 10所示的輕鏈。

在一些實施例中，該藥物製劑包含抗CLDN18.2抗體、緩衝液、穩定劑和界面活性劑，其中該緩衝液為乙酸緩衝液，該穩定劑為蔗糖或海藻糖，該界面活性劑為聚山梨酯80，且pH值為約4.5~6.0。

在一些實施例中，該抗CLDN18.2抗體在該藥物製劑中的濃度為20~40 mg/ml，該乙酸緩衝液在該藥物製劑中的濃度為10~30 mM，該蔗糖或海藻糖在該藥物製劑中的濃度為5~10%(w/v)，且/或該聚山梨酯80在該藥物製劑中的濃度為0.01%(w/v)~0.2%(w/v)。

在一些實施例中，該抗CLDN18.2抗體在該藥物製劑中的濃度為約30 mg/ml，該乙酸緩衝液在該藥物製劑中的濃度為約20 mM，該蔗糖或海藻糖在該藥物製劑中的濃度為約9%(w/v)，該聚山梨酯80在該藥物製劑中的濃度為0.01%(w/v)~0.1%(w/v)，pH值為約5.0~5.5。

在一些實施例中，該藥物製劑亦包含EDTA，該EDTA在該藥物製劑中的濃度為40~60 μM。

在一些實施例中，該藥物製劑包含抗CLDN18.2抗體、緩衝液、穩定劑和界面活性劑，其中該緩衝液為組胺酸緩衝液，該穩定劑為蔗糖或山梨糖醇，該界面活性劑為聚山梨酯80或泊洛沙姆188。

在一些實施例中，該穩定劑為蔗糖，該蔗糖在該藥物製劑中的濃度為6~12%(w/v)。在另一些實施例中，該穩定劑為山梨糖醇，該山梨糖醇在該藥物製劑中的濃度為2~8%(w/v)。

在一些實施例中，該界面活性劑為聚山梨酯80，該聚山梨酯80在該藥物製劑中的濃度為0.01%(w/v)~0.1%(w/v)。在另一些實施例中，該界面活性劑為泊洛沙姆188，該泊洛沙姆188在該藥物製劑中的濃度為0.05%(w/v)~0.2%(w/v)。

在另一方面，本申請案提供一種製備藥物製劑的方法，該方法包括： 1)提供製劑溶媒及抗CLDN18.2抗體原液，其中該製劑溶媒包含緩衝液及穩定劑以及視情況存在的界面活性劑；2)使用該製劑溶媒對該抗CLDN18.2抗體原液進行換液，從而得到如本文所述的藥物製劑。

在一些實施例中，本文所述的方法中該抗CLDN18.2抗體原液含有螯合劑(例如，EDTA)，該製劑溶媒不含螯合劑，該藥物製劑中幾乎不含有螯合劑。在另一些實施例中，該製劑溶媒包含緩衝液及穩定劑且不含有界面活性劑。

在另一些實施例中，本文所述的方法中該製劑溶媒包含緩衝液及穩定劑且含有螯合劑(例如EDTA)。

在另一些實施例中，在使用該製劑溶媒對該抗CLDN18.2抗體原液進行換液後添加界面活性劑，從而得到如本文所述的藥物製劑。

在一些實施例中，本文所述的製劑或方法中該乙酸緩衝液為乙酸-乙酸鈉緩衝液；該組胺酸緩衝液為組胺酸-組胺酸鹽酸鹽緩衝液。

在另一態樣中，本申請案提供如本文所述的藥物製劑在製備供預防及/或治療CLDN18.2相關疾病之藥物中的用途。

在一些實施例中，該CLDN18.2相關疾病選自胃癌、胃食管交界處腺癌、肺癌、支氣管癌、骨癌、肝膽管癌、胰腺癌、乳腺癌、肝癌、卵巢癌、睾丸癌、腎癌、膀胱癌、頭頸癌、脊柱癌、腦癌、宮頸癌、子宮癌、子宮內膜癌、結腸癌、結直腸癌、直腸癌、肛門癌、食道癌、胃腸道癌、皮膚癌、前列腺癌、垂體癌、陰道癌、甲狀腺癌、膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、黑色素瘤、骨髓增生異常症候群、肉瘤、畸胎瘤或腺癌。

本申請案的如下描述僅旨在說明本申請案的各個實施例。所描述的具體實施例不應被理解為對本申請案範圍的限制。在不偏離本申請案精神和實質的情況下，熟習此項技術者可進行各種等同替代、改變或變化，而且應瞭解本文亦包括此等等同實施例。本文引用的所有文獻，包括出版物、專利和專利申請等以全文引用方式併入本文。在本發明中提及之方法包括兩個或更多個限定步驟的情況下，所定義的步驟可以任何順序或同時進行(除非上下文排除該可能性)，並且該方法可以包括一個或多個其他步驟，該等步驟可以在任何定義的步驟之前，在兩個定義的步驟之間或在所有定義的步驟之後執行(除非上下文排除了該可能性)。

本文中對「約」(某一數值或某一數值範圍)的提及包括針對該數值或該數值範圍本身的實施例，例如，「約X」包括「X」。一般而言，術語「約」係指某一變數的數值以及在變數之實驗誤差範圍內(例如，平均值的95%信賴區間內)的所有數值或變數之10%以內的所有數值，以較大者為準。例如，「約X」包括「110% × X」、「109% × X」、「108% × X」、「107% × X」、「106% × X」、「105% × X」、「104% × X」、「103% × X」、「102% × X」、「101% × X」、「99% × X」、「98% × X」、「97% × X」、「96% × X」、「95% × X」、「94% × X」、「93% × X」、「92% × X」、「91% × X」或「90% × X」。

術語「至少」以及後接數字在本文中用於表示一個以該數字為開始之範圍的開端(其可為具有上限或沒有上限的範圍，此取決於所定義的變數)。例如，「至少1」表示1或者大於1。術語「至多」以及後接數字在本文中用於表示一個以該數字為結尾之範圍的結束(其可為以1或0作為下限的範圍，或沒有下限的範圍，此取決於所定義的變數)。例如，「至多4」表示4或者小於4，「至多40%」表示40%或者小於40%。在本發明中，當將範圍設為「(第一個數字)至(第二個數字)」或「(第一個數字)~(第二個數字)」時，此意謂該範圍下限為第一個數字，其上限為第二個數字。例如，5〜50 mg/mL係指下限為5 mg/mL，上限為50 mg/mL的範圍。術語「小於」或「大於」某一數值在本文中包括該數值。

抗體如本文所用，術語「抗體」包括與特異性抗原結合的任何免疫球蛋白、單株抗體、多株抗體、多價抗體、二價抗體、單價抗體、多特異性抗體或雙特異性抗體。完整的抗體包含兩個重鏈及兩個輕鏈。每個重鏈由重鏈可變區(V _H)以及重鏈第一、第二及第三恆定區(C _H1，C _H2，C _H3)組成，而每個輕鏈由輕鏈可變區(V _L)及輕鏈恆定區(C _L)組成。重鏈及輕鏈的V _H及V _L區中亦各有三個互補決定區(CDR)，三個CDR由被稱為框架區(FR)的連續部分間隔開，框架區比CDR更加高度保守並形成一個支架支撐超變環。一條重鏈及一條輕鏈的6個CDR共同構成抗體的抗原結合部位，決定抗體的特異性。本文所述的抗體還包括完整抗體之具有抗原結合功能的片段或衍生物，該片段或衍生物與完整的抗體具有相同的抗原結合特異性，但是該片段或衍生物與其特異性抗原結合的親和力可與完整抗體相同或不同。

在一些實施例中，本文所述的抗體包括抗原結合片段。抗原結合片段指保留與抗原特異性結合之能力的一或多種抗體片段。抗原結合片段的實例包括但不限於(i)Fab片段，其係指由V _L、V _H、C _L及C _H1結構域組成的單價片段；(ii)Fab'片段，其係指包含一部分鉸鏈區的Fab片段；(iii)F(ab') ₂片段，其係指包含由鉸鏈區之二硫鍵連接之2個Fab片段的二價片段；(iv)由V _H及C _H1結構域組成的Fd片段；(v)由抗體單臂的V _L及V _H結構域組成的Fv片段，(vi)dAb片段(Ward等人, Nature 341:544-546 (1989)；PCT公開案WO 90/05144)，其包含單個可變結構域；(vii)分離的CDR；(viii)單鏈Fv片段，其係指V _L與V _H結構域直接相連或藉由一個肽鏈連接而形成的單價片段(Huston JS等人, Proc Natl Acad Sci USA, 85:5879(1988))。

在一些實施例中，本文所述的抗體包括嵌合抗體，其部分重鏈及/或輕鏈與從特定種類中衍生獲得的或屬於特定抗體類或亞類的抗體對應序列相同或同源，而剩餘的鏈與從另一種類中衍生獲得的或屬於另一抗體類或亞類的抗體以及此抗體之片段的對應序列相同或同源，只要其展現出所需的功能活性。

在一些實施例中，本文所述的抗體包括人源化抗體。非人體來源(如鼠源型)抗體的人源化形式為包含從非人源型免疫球蛋白中獲得之最少序列的嵌合免疫球蛋白、免疫球蛋白鏈或其片段(如Fv、Fab、Fab'、F(ab') ₂或抗體的其他與抗原結合之序列)。在一些實例中，人源化抗體可為CDR移植的抗體，其中將人源型CDR的胺基酸序列引入非人源型V _H及V _L的胺基酸序列以替換相應的非人源型CDR胺基酸序列。在另一些實例中，人源化抗體的大部分胺基酸序列可以來自於人源型免疫球蛋白(受體抗體)，其中受體的CDR的胺基酸殘基被具有所需特異性、親合性和能力的非人源型(例如小鼠、大鼠、兔)抗體之CDR胺基酸殘基替代。通常，人源化抗體基本上皆包含至少一個，一般包括兩個可變結構域，其中所有或基本上所有的CDR區對應於非人源型免疫球蛋白的序列，且所有或基本上所有的構架(FR)區為人源型免疫球蛋白的序列。在一些實例中，人源型免疫球蛋白之可變區的構架區殘基被相應的非人源型殘基取代。而且，人源化抗體可包括在原始抗體及引入的CDR或框架區序列中均不存在的殘基。

本文所述的抗CLDN18.2抗體係指能夠特異性結合CLDN18.2蛋白的抗體。

本文所述的CLDN18.2蛋白係指源自哺乳動物的密連蛋白-18剪接變體2，例如靈長類動物(例如人類、猴子)和嚙齒動物(例如小鼠)。在某些實施例中，CLDN18.2為人CLDN18.2。人CLDN18.2的例示性序列包括人CLDN18.2蛋白(NCBI Ref Seq No. NP_001002026.1)。CLDN18.2可以在癌細胞中表現。在一個實施例中，該CLDN18.2在癌細胞表面表現。

在一些實施例中，本文所述的抗CLDN18.2抗體包括重鏈可變區V _H，該重鏈可變區V _H具有如SEQ ID NO: 1所示的CDR1、如SEQ ID NO: 2所示的CDR2，及/或如SEQ ID NO: 3所示的CDR3。

在一些實施例中，本文所述的抗CLDN18.2抗體包括輕鏈可變區V _L，該輕鏈可變區V _L具有如SEQ ID NO: 4所示的CDR1、如SEQ ID NO: 5所示的CDR2，及/或如SEQ ID NO: 6所示的CDR3。

在一些實施例中，本文所述的抗CLDN18.2抗體包括重鏈可變區V _H和輕鏈可變區V _L，該重鏈可變區V _H包含具有如SEQ ID NO: 1所示之胺基酸序列的CDR1、具有如SEQ ID NO: 2所示之胺基酸序列的CDR2，及/或具有如SEQ ID NO: 3所示之胺基酸序列的CDR3，該輕鏈可變區V _L包含具有如SEQ ID NO: 4所示之胺基酸序列的CDR1、具有如SEQ ID NO: 5所示之胺基酸序列的CDR2，及/或具有如SEQ ID NO: 6所示之胺基酸序列的CDR3。在一些實施例中，該抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 1所示的重鏈CDR1(HCDR1)、如SEQ ID NO: 2所示的HCDR2及如SEQ ID NO: 3所示的HCDR3，以及如SEQ ID NO: 4所示的輕鏈CDR1(LCDR1)、如SEQ ID NO: 5所示的LCDR2及如SEQ ID NO: 6所示的LCDR3。在一些實施例中，該抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 7所示之重鏈可變區的CDR1、CDR2和CDR3，以及如SEQ ID NO: 8所示之輕鏈可變區的CDR1、CDR2和CDR3。

在一些實施例中，本文所述的抗CLDN18.2抗體包括具有如SEQ ID NO: 7所示之胺基酸序列的重鏈可變區V _H。在一些實施例中，本文所述的抗CLDN18.2抗體包括具有如SEQ ID NO: 8所示之胺基酸序列的輕鏈可變區V _L。在一些實施例中，本文所述的抗CLDN18.2抗體包括具有如SEQ ID NO: 7所示之胺基酸序列的重鏈可變區V _H及具有如SEQ ID NO: 8所示之胺基酸序列的輕鏈可變區V _L。在一些實施例中，所述抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 7所示的重鏈可變區及如SEQ ID NO: 8所示的輕鏈可變區。

在一些實施例中，本文所述的抗CLDN18.2抗體進一步包括免疫球蛋白恆定區。在一些實施方式中，免疫球蛋白恆定區包括重鏈及/或輕鏈恆定區。該重鏈恆定區包括C _H1、C _H1-C _H2或C _H1-C _H3區，該輕鏈恆定區包括C _L區。

在一些實施例中，本文所述的抗CLDN18.2抗體包括具有如SEQ ID NO: 9所示之胺基酸序列的重鏈和具有如SEQ ID NO: 10所示之胺基酸序列的輕鏈。在一些實施例中，所述抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 9所示的重鏈及如SEQ ID NO: 10所示的輕鏈。

下表A中列出一些實施例中的例示性胺基酸序列：表A 例示性胺基酸序列

SEQ ID NO.	胺基酸序列	名稱
1	GYNMN	HCDR1
2	NIDPYYGGTSYNQKFKG	HCDR2
3	MYHGNAFDY	HCDR3
4	KSSQSLLNSGNLKNYLT	LCDR1
5	WASTRKS	LCDR2
6	QNDYSYPLT	LCDR3
7	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYNMNWVRQAPGQGLEWMGNIDPYYGGTSYNQKFKGRVTMTIDKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARMYHGNAFDYWGQGTTVTVSS	VH
8	DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNLKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRKSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQNDYSYPLTFGGGTKVEIK	VL
9	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYNMNWVRQAPGQGLEWMGNIDPYYGGTSYNQKFKGRVTMTIDKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARMYHGNAFDYWGQGTTVTVSSSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK	HC
10	DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNLKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRKSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQNDYSYPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC	LC

本申請案係關於包含抗CLDN18.2抗體(例如本申請案所述的抗CLDN18.2抗體)的藥物製劑。在一些實施例中，抗CLDN18.2抗體在本申請案之藥物製劑中的濃度可為1~200 mg/ml、1~190 mg/ml、10~190 mg/ml、20~180 mg/ml、20~170 mg/ml、20~160 mg/ml、20~150 mg/ml、20~140 mg/ml、20~130 mg/ml、20~120 mg/ml、20~110 mg/ml、20~100 mg/ml、20~90 mg/ml、20~80 mg/ml、20~70 mg/ml、20~60 mg/ml、20~50 mg/ml、20~40 mg/ml‎、20~30 mg/ml。在一些實施例中，抗CLDN18.2抗體的濃度為上述範圍內的任一濃度值。例如，根據需要，抗CLDN18.2抗體在藥物製劑中的濃度可為至少5 mg/ml、至少10 mg/ml、至少20 mg/ml、至少30 mg/ml、至少40 mg/ml、至少50 mg/ml、至少60 mg/ml、至少70 mg/ml、至少80 mg/ml、至少90 mg/ml、至少100 mg/ml、至少110 mg/ml、至少120 mg/ml、至少130 mg/ml、至少140 mg/ml、至少150 mg/ml、至少160 mg/ml、至少170 mg/ml、至少180 mg/ml、至少190 mg/ml及/或至多200 mg/ml。

緩衝液術語「緩衝液」一般係指藉由其酸鹼共軛組分的作用而耐受pH值變化的緩衝溶液。本文所用的「緩衝液」指已知可安全地應用於藥學製劑中、具有維持或控制該製劑之pH值在所需範圍的化合物溶液。能控制pH值在溫和酸性pH值至溫和鹼性pH值範圍(例如，pH 4.5~8.0)的可接受之緩衝液包括但不限於丁二酸緩衝液、檸檬酸緩衝液、磷酸緩衝液、乙酸緩衝液、精胺酸緩衝液、2-胺基-2-羥甲基-1,3-丙二醇(TRIS)緩衝液、組胺酸緩衝液等中之一種或任意幾種的組合。

可以使用此項技術中已知的任何適當方法製備該製劑溶媒中的緩衝液。在一些實施例中，可以使用特定的酸性與鹼性離子對製備本申請案所述的緩衝液。在一個實例中，可以準確稱取酸性、鹼性離子對的輔料，添加約為目標緩衝液體積之60%的純水，混合均勻後，測定溶液的pH。若pH值偏離目標值，可使用相應的離子對調節pH。接著將溶液用純水稀釋至目標重量或目標體積。最後測定溶液的電導率，滲透壓及pH以進行驗證。

本申請案的穩定藥物製劑可包含使得藥物製劑具有4.5~8.0的pH值，例如具有4.5~6.0、6.0~7.0或7.0~8.0之pH值的緩衝液。在一些實施例中，合適的緩衝液使得本申請案的藥物製劑具有4.5~6.0的pH值。特別地，本申請案之藥物製劑的pH值可為如上列舉之彼等pH值範圍內的任一pH值，例如4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9或8.0。

可將藥物製劑的pH值控制在所需範圍內之緩衝液的實例包括乙酸緩衝液、組胺酸緩衝液、檸檬酸緩衝液及其他有機酸或無機酸緩衝液。此等緩衝液可以單獨使用1種，亦可將2種以上混合使用。較佳地，本申請案的藥物製劑包含乙酸緩衝液、組胺酸緩衝液。更佳地，本申請案的藥物製劑包含乙酸緩衝液。

「乙酸緩衝液」為包含乙酸根離子的緩衝液。乙酸緩衝液可包含乙酸(例如冰醋酸)、乙酸鉀、乙酸鈉(例如三水乙酸鈉)等中的一或多者。在一些實施例中，乙酸緩衝液為乙酸-乙酸鈉緩衝液，特定言之，冰醋酸-三水乙酸鈉緩衝液。在一些實施例中，乙酸緩衝液的pH值可為4.5~6.0範圍內的任一pH值，例如4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9或6.0。

「組胺酸緩衝液」為包含組胺酸根離子的緩衝液。組胺酸緩衝液可包括組胺酸、組胺酸鹽酸鹽(例如一水合組胺酸鹽酸鹽)、組胺酸乙酸鹽、組胺酸磷酸鹽、組胺酸硫酸鹽等中的一或多者。在一些實施例中，組胺酸緩衝液可為組胺酸-組胺酸鹽酸鹽緩衝液。在一些實施例中，組胺酸緩衝液的pH值可為4.5~6.0範圍內的任一pH值，例如4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9或6.0。

「檸檬酸緩衝液」為包含檸檬酸根離子的緩衝液。檸檬酸緩衝液可包含檸檬酸、檸檬酸一鈉、檸檬酸二鈉、檸檬酸三鈉、檸檬酸一鉀、檸檬酸二鉀、檸檬酸三鉀、氯化鈉、氯化鉀中的一或多者等。在一些實施例中，檸檬酸緩衝液為檸檬酸-檸檬酸三鈉緩衝液。在一些實施例中，檸檬酸緩衝液的pH值可為4.5~6.0範圍內的任一pH值，例如4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9或6.0。

在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的緩衝液為乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液，且本申請案之藥物製劑的pH值為4.5~6.0。不希望受到理論束縛，但認為乙酸緩衝液及組胺酸緩衝液更加優於檸檬酸緩衝液。例如，當本申請案之藥物製劑的緩衝液為乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液時，該藥物製劑中的抗CLDN18.2抗體更為穩定(例如，在高溫下更為穩定)，抗體分子之間的作用力為排斥力而非吸引力，且分子間聚集的風險更小。

本文所述之緩衝液的濃度指緩衝液中緩衝離子的濃度。在一些實施例中，適用於本申請案之藥物製劑中之緩衝液的濃度可為5~100 mmol/L、5~90 mmol/L、5~80 mmol/L、5~70 mmol/L、5~60 mmol/L、5~50 mmol/L、10~50 mmol/L、10~40 mmol/L、10~30 mmol/L、10~20 mmol/L。在一些實施例中，緩衝液的濃度為上述範圍內的任一濃度值。例如，根據需要，緩衝液的濃度可為5 mmol/L、至少10 mmol/L、至少15 mmol/L、至少20 mmol/L、至少25 mmol/L、至少30 mmol/L、至少35 mmol/L、至少40 mmol/L、至少45 mmol/L、至少50 mmol/L、至少55 mmol/L、至少60 mmol/L、至少65 mmol/L、至少70 mmol/L、至少75 mmol/L、至少80 mmol/L、至少85 mmol/L、至少90 mmol/L、至少95 mmol/L或者及/或至多100 mmol/L，此視特定緩衝液及藥物製劑所需的穩定性而定。

在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的緩衝液為乙酸緩衝液，包括乙酸-乙酸鈉緩衝液，其濃度可為5~100 mmol/L。在一些實施例中，乙酸緩衝液的濃度可為5~100 mmol/L、5~90 mmol/L、5~80 mmol/L、5~70 mmol/L、5~60 mmol/L、5~50 mmol/L、5~45 mmol/L、5~40 mmol/L、5~35 mmol/L、5~30 mmol/L、5~25 mmol/L、5~20 mmol/L、5~15 mmol/L、5~10 mmol/L。

在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的緩衝液為組胺酸緩衝液，包括組胺酸-鹽酸組胺酸緩衝液，其濃度可為5~100 mmol/L。在一些實施例中，組胺酸緩衝液的濃度可為5~100 mmol/L、5~90 mmol/L、5~80 mmol/L、5~70 mmol/L、5~60 mmol/L、5~50 mmol/L、5~45 mmol/L、5~40 mmol/L、5~35 mmol/L、5~30 mmol/L、5~25 mmol/L、5~20 mmol/L、5~15 mmol/L、5~10 mmol/L。

在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的緩衝液為乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液，且濃度為5~50mM。在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的緩衝液為乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液，且濃度為10~30 mM。在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的緩衝液為乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液，且濃度為約20 mM。在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的緩衝液為乙酸緩衝液，且濃度為約20 mM。

穩定劑如本文所用，術語「穩定劑」係指如下試劑，當其與感興趣的蛋白質結合時，其能阻止或減少蛋白質的化學及/或物理不穩定性。穩定劑的實例包括糖類、醇類、酸類、鹽類、聚合物等。糖類的實例包括葡萄糖、蔗糖、海藻糖、乳糖、葡聚糖等。醇類的實例包括山梨糖醇等。酸類的實例包括檸檬酸、磷酸、酒石酸、胺基酸、乙二胺四乙酸等。鹽類的實例包括硫酸鈉、麩胺酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、乙酸銨等。聚合物的實例包括聚乙二醇、聚維酮等。

在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的穩定劑選自糖類。在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的穩定劑選自醇類。在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的穩定劑選自蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、或其組合。

在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的穩定劑在藥物製劑中的濃度可為‎1~20%(w/v)、1~19%(w/v)、1~18%(w/v)、1~17%(w/v)、1~16%(w/v)、1~15%(w/v)、1~14%(w/v)、1~13%(w/v)、1~12%(w/v)、1~11%(w/v)‎、1~10%(w/v)、2~10%(w/v)、5~10%(w/v)、2~8%(w/v)、2~7%(w/v)、2~6%(w/v)或2~5%(w/v)，此視特定穩定劑及藥物製劑所需的穩定性而定。在一些實施例中，穩定劑的濃度為上述範圍內的任一濃度值。

在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的穩定劑為蔗糖，其在藥物製劑中的濃度可為‎1~20%(w/v)。在一些實施例中，蔗糖在藥物製劑中的濃度可為‎1~10%(w/v)、10~20%(w/v)或5~15%(w/v)。在一些實施例中，蔗糖在藥物製劑中的濃度為5~10%(w/v)。在一些實施例中，蔗糖在藥物製劑中的濃度為約9%(w/v)。

在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的穩定劑為海藻糖，其在藥物製劑中的濃度可為‎1~20%(w/v)。在一些實施例中，海藻糖在藥物製劑中的濃度可為1~10%(w/v)、10~20%(w/v)或5~15%(w/v)。在一些實施例中，海藻糖在藥物製劑中的濃度為5~10%(w/v)。在一些實施例中，海藻糖在藥物製劑中的濃度為約9%(w/v)。

在一些實施例中，用於本申請案之藥物製劑的穩定劑為山梨糖醇，其在藥物製劑中的濃度可為‎1~20%(w/v)。在一些實施例中，山梨糖醇在藥物製劑中的濃度可為1~10%(w/v)、10~20%(w/v)或5~15%(w/v)。在一些實施例中，山梨糖醇在藥物製劑中的濃度為2~8%(w/v)。在一些實施例中，山梨糖醇在藥物製劑中的濃度為約5%(w/v)。

界面活性劑如本文所用，術語「界面活性劑」係指同時具有親水性與疏水性兩性結構的有機物質，即其包含具有相反溶解度趨勢的基團，例如，油溶性烴鏈及水溶性離子基團。取決於表面活性部分的電荷，界面活性劑可分為陰離子、陽離子和非離子界面活性劑。

界面活性劑的實例包括聚山梨酯(例如聚山梨酯80)、泊洛沙姆(例如泊洛沙姆188)、曲通(Triton)、以及聚乙二醇、聚丙二醇以及乙二醇和丙二醇的共聚物(例如普朗尼克(Pluronics)、PF68等)。在一些實施例中，本申請案之藥物製劑的界面活性劑選自聚山梨酯80(亦稱polysorbate 80、PS 80或吐溫80)、泊洛沙姆188或其組合。

在一些實施例中，界面活性劑在本申請案之藥物製劑中的濃度可為0.005%(w/v) ~ 0.4%(w/v)、0.01%(w/v) ~ 0.3%(w/v)、0.01%(w/v) ~ 0.2%(w/v)、0.05%(w/v) ~ 0.2%(w/v)、0.05%(w/v) ~ 0.1%(w/v)或0.01%(w/v) ~ 0.1%(w/v)，此視特定的界面活性劑及藥物製劑所需的穩定性而定。在一些實施例中，界面活性劑的濃度為上述範圍內的任一濃度值。

在一些實施例中，本申請案之藥物製劑的界面活性劑為聚山梨酯80，其在藥物製劑中的濃度可為0.005%(w/v) ~ 0.4%(w/v)。在一些實施例中，聚山梨酯80在藥物製劑中的濃度可為0.005%(w/v) ~ 0.1%(w/v)或0.1%(w/v) ~ 0.4%(w/v)。在一些實施例中，聚山梨酯80在藥物製劑中的濃度可為0.01%(w/v) ~ 0.1%(w/v)。在一些實施例中，聚山梨酯80在藥物製劑中的濃度可為約0.05%(w/v) 。

在一些實施例中，本申請案之藥物製劑的界面活性劑為泊洛沙姆188，其在藥物製劑中的濃度可為0.005%(w/v) ~ 0.4%(w/v)。在一些實施例中，泊洛沙姆188在藥物製劑中的濃度可為0.005%(w/v) ~ 0.1%(w/v)或0.1%(w/v) ~ 0.4%。在一些實施例中，泊洛沙姆188在藥物製劑中的濃度可為0.05%(w/v) ~ 0.2%(w/v)。

螯合劑如本文所用，術語「螯合劑」係指能夠與某些金屬離子(例如錳(II)、銅(II)、鐵(III)及鈷(II))反應形成穩定、水溶性金屬錯合物的化合物。螯合為在配位體與單個中心原子之間形成或存在兩個或多個單獨的結合。螯合劑的實例包括但不限於乙二胺四乙酸(EDTA)、三胺五乙酸(DTPA)、N-(1,2-二羧乙基)-D,L-天門冬胺酸(IDHA)、乙二胺-N,N'-bis (EDDHA)、N,N-二(2-羥基苯基)亞乙基二胺-N,N'-二乙酸(HBED)或其鹽形式，例如EDTA-2Na、EDTA-4Na。在一些實施例中，本申請案之藥物製劑的螯合劑可為EDTA的螯合鹽(例如EDTA的二鈉鹽，即EDTA-2Na；或EDTA的四鈉鹽，即EDTA-4Na)。

在一些實施例中，螯合劑在本申請案之藥物製劑中的濃度可為‎30~350 μmol/L、30~330 μmol/L、30~300 μmol/L、30~270 μmol/L、30~250 μmol/L、30~230 μmol/L、30~200 μmol/L、30~170 μmol/L、30~150 μmol/L、30~130 μmol/L、40~100 μmol/L、40~90 μmol/L、40~80 μmol/L、40~70 μmol/L、40~60 μmol/L或40~50 μmol/L，此視特定的螯合劑及藥物製劑所需的穩定性而定。在一些實施例中，螯合劑的濃度為上述範圍內的任一濃度值。

在一些實施例中，本申請案之藥物製劑的螯合劑為依地酸二鈉(EDTA-Na ₂)，且濃度為30~350 μmol/L或40~60 μmol/L。在一些實施例中，本申請案之藥物製劑的螯合劑為依地酸二鈉(EDTA-Na ₂)，且濃度為約50 μmol/L。

在另一態樣中，本申請案提供螯合劑用於防止界面活性劑(例如聚山梨酯80)在藥物製劑(例如本申請案提供的藥物製劑)中降解的用途。

在另一態樣中，本申請案提供螯合劑用於防止蛋白質(例如抗體)在藥物製劑(例如本申請案提供的藥物製劑)中之穩定性降低的用途。

其他材料本申請案的藥物製劑還可視情況包含其他材料，例如但不限於等張劑、稀釋劑等。

術語「等張劑」係指可賦予藥物適宜的滲透張力以避免水份跨越接觸該藥物之細胞膜淨流動的化合物或組合物。在一些實施例中，本申請案的製劑具有與人血基本相同的滲透壓。合適的等張劑包括但不限於：甘油，胺基酸或蛋白質(如甘胺酸或白蛋白)，鹽類(如氯化鈉)以及糖類(如葡萄糖、甘露醇、蔗糖和乳糖)。

術語「稀釋劑」為藥學上可接受的，並可用於稀釋本申請案之藥物製劑的試劑。典型的稀釋劑包括水、生理鹽水、注射用抑菌劑、pH緩衝液、無菌鹽溶液、林格溶液或葡萄糖液。

製劑在一態樣中，本申請案提供包含抗CLDN18.2抗體(例如本申請案提供的特定抗CLDN18.2抗體)、緩衝液、穩定劑及界面活性劑的穩定藥物製劑。該藥物製劑具有pH 4.5~8.0，在一些實施例中為pH 4.5~6.0，以達到足夠的穩定性。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含： i)抗CLDN18.2抗體(例如本申請案提供的特定抗CLDN18.2抗體)，其濃度為1~200 mg/ml，較佳為20~40 mg/ml，更佳為約30 mg/ml； ii)緩衝液，其較佳為乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液，更佳為乙酸緩衝液，且該緩衝液在該藥物製劑中的濃度為5~100 mmol/L，較佳為5~50 mmol/L或10~30 mmol/L，更佳為約20 mmol/L； iii)穩定劑，其較佳為蔗糖、海藻糖或山梨糖醇， a)較佳為蔗糖或海藻糖，且該穩定劑在該藥物製劑中的濃度為‎1~20%(w/v)，較佳為‎1~10%(w/v)或5~10%(w/v)，更佳為‎約9%(w/v)，或者 b)‎較佳為山梨糖醇，且該穩定劑在該藥物製劑中的濃度為‎1~20%(w/v)，較佳為‎1~10%(w/v)或2~8%(w/v)，更佳為‎約5%(w/v)； iv)界面活性劑，其較佳為聚山梨酯80或泊洛沙姆188， a)更佳為聚山梨酯80，且該界面活性劑在該藥物製劑中的濃度為0.005%(w/v) ~ 0.4%(w/v)，較佳為0.01%(w/v) ~ 0.2%(w/v)，更佳為0.01%(w/v) ~ 0.1%(w/v)，更佳為0.05%(w/v)，或者 b)‎更佳為泊洛沙姆188，且該界面活性劑在該藥物製劑中的濃度為0.005%(w/v) ~ 0.4%(w/v)，較佳為0.01%(w/v) ~ 0.2%(w/v)，更佳為0.05%(w/v) ~ 0.2%(w/v)； v)視情況存在的螯合劑，較佳為EDTA或其鹽(例如EDTA-2Na)，且該螯合劑在該藥物製劑中的濃度為30-350 μM或40-60 μM，且其中該藥物製劑的pH值為約4.5~6.0，較佳為約5.0~5.5。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約1~200 mg/ml的抗CLDN18.2抗體(例如本申請案提供的特定抗CLDN18.2抗體)、濃度為約5~100 mmol/L的乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液，其中該藥物製劑的pH為4.5~6.0。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約10~30 mg/ml的乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約1~200 mg/ml的抗CLDN18.2抗體(例如本申請案提供的特定抗CLDN18.2抗體)、濃度為約5~100 mmol/L的乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液及濃度為約‎1~20%(w/v)的蔗糖、海藻糖或山梨糖醇，其中該藥物製劑的pH為4.5~6.0。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約10~30 mg/ml的乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約5~10%(w/v)的蔗糖或海藻糖。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約2~8%(w/v)的山梨糖醇。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約1~200 mg/ml的抗CLDN18.2抗體(例如本申請案提供的具體的抗CLDN18.2抗體)、濃度為約5~100 mmol/L的乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液、濃度為約‎1~20%(w/v)的蔗糖、海藻糖或山梨糖醇和濃度為約0.005%(w/v) ~ 0.4%(w/v)的聚山梨酯80或泊洛沙姆188，其中該藥物製劑的pH為4.5~6.0。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約10~30 mg/ml的乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約5~10%(w/v)的蔗糖或海藻糖，或濃度為約2~8%(w/v)的山梨糖醇。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約‎0.01%(w/v) ~ 0.1%(w/v)‎的聚山梨酯80，或濃度為約0.05%(w/v) ~ 0.2%(w/v)的泊洛沙姆188。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約1~200 mg/ml的抗CLDN18.2抗體(例如本申請案提供的特定抗CLDN18.2抗體)、濃度為約5~100 mmol/L的乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液、濃度為約‎1~20%(w/v)的蔗糖、海藻糖或山梨糖醇、濃度為約0.005%(w/v) ~ 0.4%(w/v)的聚山梨酯80或泊洛沙姆188及濃度為約‎30~350μmol/L的螯合劑，其中該藥物製劑的pH為4.5~6.0。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約10~30 mg/ml的乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約5~10%(w/v)的蔗糖或海藻糖，或濃度為約2~8%(w/v)的山梨糖醇。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約‎0.01%(w/v) ~ 0.1%(w/v)‎的聚山梨酯80，或濃度為約0.05%(w/v) ~ 0.2%(w/v)的泊洛沙姆188。在一些實施例中，上述藥物製劑中包含濃度為約40~60μmol/L的螯合劑(例如EDTA、EDTA-2Na)。在一些其他實施例中，本申請案的藥物製劑中幾乎不含有螯合劑。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約10~30 mmol/L的乙酸緩衝液、濃度為約5 ~ 10%(w/v)的蔗糖或海藻糖及濃度為約‎0.01%(w/v) ~ 0.2%(w/v)‎的聚山梨酯80，其中該藥物製劑的pH為約4.5-6.0或約5.0~5.5。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約30 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約20 mM的乙酸緩衝液、濃度為約9%(w/v)的蔗糖、濃度為約0.05%(w/v)的聚山梨酯80，且pH值為約5.3。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約10~30 mmol/L的乙酸緩衝液、濃度為約5 ~ 10%(w/v)的蔗糖或海藻糖、濃度為約‎0.01%(w/v) ~ 0.2%(w/v)‎的聚山梨酯80及濃度為約40~60 μmol/L的EDTA或EDTA-2Na，其中該藥物製劑的pH為約4.5-6.0或約5.0~5.5。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約30 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約20 mM的乙酸緩衝液、濃度為約9%(w/v)的蔗糖、濃度為約0.05%(w/v)的聚山梨酯80及濃度為約50 μmol/L的EDTA或EDTA-2Na，且pH值為約5.3。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約10~30 mmol/L的乙酸緩衝液、濃度為約2 ~ 8%(w/v)的山梨糖醇及濃度為約‎0.01%(w/v) ~ 0.1%(w/v)‎的聚山梨酯80，其中該藥物製劑的pH為約4.5-6.0或約5.0~5.5。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約10~30 mmol/L的乙酸緩衝液、濃度為約2 ~ 8%(w/v)的山梨糖醇、濃度為約‎0.01%(w/v) ~ 0.1%(w/v)‎的聚山梨酯80及40~60 μmol/L的EDTA，其中該藥物製劑的pH為約4.5-6.0或約5.0~5.5。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約10~30 mmol/L的組胺酸緩衝液、濃度為約6 ~ 12%(w/v)的蔗糖及濃度為約0.05%(w/v) ~ 0.2%(w/v)的泊洛沙姆188，其中該藥物製劑的pH為約4.5-6.0或約5.0~5.5。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約10~30 mmol/L的組胺酸緩衝液、濃度為約2 ~ 8%(w/v)的山梨糖醇及濃度為約0.05%(w/v) ~ 0.2%(w/v)的泊洛沙姆188，其中該藥物製劑的pH為約4.5-6.0或約5.0~5.5。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約10~30 mmol/L的組胺酸緩衝液、濃度為約6 ~ 12%(w/v)的蔗糖及濃度為約0.01%(w/v) ~ 0.1%(w/v)的聚山梨酯80，其中該藥物製劑的pH為約4.5-6.0或約5.0~5.5。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約10~30 mmol/L的組胺酸緩衝液、濃度為約2 ~ 8%(w/v)的山梨糖醇及濃度為約0.01%(w/v) ~ 0.1%(w/v)的聚山梨酯80，其中該藥物製劑的pH為約4.5-6.0或約5.0~5.5。

在一些實施例中，本申請案的藥物製劑包含濃度為約20~40 mg/ml的抗CLDN18.2抗體、濃度為約10~30 mmol/L的組胺酸緩衝液、濃度為約6 ~ 12%(w/v)的蔗糖或海藻糖、濃度為約0.05%(w/v) ~ 0.2%(w/v)的泊洛沙姆188及40~60 μmol/L的EDTA，其中該藥物製劑的pH為約4.5-6.0或約5.0~5.5。

抗體分子的化學降解、或凝聚形成聚合物，或者抗體分子的脫糖基、糖基化修飾、氧化或可能導致單體蛋白質至少一種功能活性降低的其他結構性修飾等，皆可能引起抗體製劑的不穩定。對於包含抗CLDN18.2抗體的藥物製劑而言，在藥物製劑儲存過程中，抗CLDN18.2抗體可能發生化學降解，從而導致抗體的濃度下降；抗CLDN18.2抗體亦可凝聚而形成有時不可溶的、以含有多個抗體分子之多聚分子形式存在的聚合物，從而導致含單個抗體分子的單體含量減少。因而，聚合物抗體的含量增加，將導致單體抗體的純度下降。而且，由於不溶性聚合物的形成，因此藥物製劑的濁度可能增大。

在一些實施例中，本申請案的包含抗CLDN18.2抗體之藥物製劑可在長期儲存、高溫下及/或多次凍融後仍然保持穩定性，其中抗CLDN18.2抗體的物理及/或化學穩定性及/或功能活性等隨時間變化而保持相對恆定。在一些實施例中，抗體蛋白濃度、蛋白質純度、蛋白質活性、製劑的pH值、製劑的滲透壓、製劑的外觀、製劑中的不溶性微粒等可作為藥物製劑的穩定性的標誌。此項技術中已有測定蛋白質穩定性的多種分析技術，此回顧於 Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301, Vincent Lee編輯，Marcel Dekker Inc.，紐約，紐約出版社(1991)及Jones, A. Adv. Drug Delivery Rev.10: 29-90 (1993)。

在一些實施例中，藥物製劑的穩定性可藉由此項技術中已知的方法在選定的條件和時間內進行量測。示例的方法包括但不限於動態光散射(DLS)、分子排阻層析(SEC)、陽離子交換層析(CEX)、非還原性毛細管電泳(NR CE-SDS)、pH值量測、蛋白質濃度(Protein Conc)量測及目檢(Visual Inspection)。

如本申請案實施例所示，本申請案的包含抗CLDN18.2抗體之藥物製劑在目檢中顯示出高穩定性，例如長期儲存下的高穩定性、高溫下(例如40℃)的高穩定性、凍融後的高穩定性。

在一些實施例中，穩定的藥物製劑係指藥物製劑在DLS測試中，蛋白質粒徑在貯藏過程中沒有明顯變化，KD呈正值，即單抗分子間的作用力為排斥力，單抗分子沒有發生聚集。如本申請案實施例所示，本申請案的包含抗CLDN18.2抗體之藥物製劑在DLS測試中顯示出高穩定性，例如長期儲存下的高穩定性、高溫下(例如40℃)的高穩定性、凍融後的高穩定性。

在一些實施例中，穩定的藥物製劑係指藥物製劑在SEC測試中，藥物製劑在貯藏過程中僅有少量的蛋白質降解，且高聚體、低聚體增加速率緩慢。如本申請案實施例所示，本申請案的包含抗CLDN18.2抗體之藥物製劑在SEC測試中顯示出高穩定性，例如長期儲存下的高穩定性、高溫下(例如40℃)的高穩定性、凍融後的高穩定性。

在一些實施例中，穩定的藥物製劑係指藥物製劑在CEX測試中，藥物製劑的電荷異質性在貯藏過程中沒有發生明顯變化，酸性峰、鹼性峰的分離程度沒有發生明顯變化。如本申請案實施例所示，本申請案的包含抗CLDN18.2抗體之藥物製劑在CEX測試中顯示出高穩定性，例如長期儲存下的高穩定性、高溫下(例如40℃)的高穩定性、凍融後的高穩定性。

在一些實施例中，穩定的藥物製劑係指藥物製劑在NR CE-SDS測試中，藥物製劑在貯藏過程中僅有少量的蛋白質降解，且高聚體、低聚體增加速率緩慢。如本申請案實施例所示，本申請案的包含抗CLDN18.2抗體之藥物製劑在NR CE-SDS測試中顯示出高穩定性，例如長期儲存下的高穩定性、高溫下(例如40℃)的高穩定性、凍融後的高穩定性。

在一些實施例中，穩定的藥物製劑係指當藥物製劑在目檢測試中，藥物製劑的外觀在貯藏過程中沒有觀察到明顯變化，仍呈現無色澄明液體。

在一些實施例中，穩定的藥物製劑係指當藥物製劑在蛋白質濃度測試中，藥物製劑中的蛋白質濃度變化不超過+/-20%、不超過+/-19%、不超過+/-18%、不超過+/-17%、不超過+/-16%、不超過+/-15%、不超過+/-14%、不超過+/-13%、不超過+/-12%、不超過+/-11%、不超過+/-10%、不超過+/-9%、不超過+/-8%、不超過+/-7%、不超過+/-6%、不超過+/-5%、不超過+/-4%、不超過+/-3%、不超過+/-2%、不超過+/-1%、或者不超過+/-0.5%，其中蛋白質濃度可根據《中國藥典》2010年版，三部，通則0401，藉由紫外-可見光分光光度法測定。

製劑製備在另一態樣中，本申請案提供一種製備藥物製劑的方法，其包括： 1)提供製劑溶媒及抗CLDN18.2抗體原液，其中該製劑溶媒包含緩衝液及穩定劑，以及視情況存在的界面活性劑； 2)使用該製劑溶媒對該抗CLDN18.2抗體原液進行換液，從而得到如本文所述的藥物製劑。在一些實施例中，該換液為緩衝液置換，例如藉由透析法進行緩衝液置換。在一些實施例中，該換液為過濾換液。在一些實施例中，該過濾為超濾、滲濾、凝膠過濾及/或熟習此項技術者所知曉的其他過濾方法。

本申請案亦提供一種製備藥物製劑的方法，其包括： 1)提供製劑溶媒及抗CLDN18.2抗體原液，其中該製劑溶媒包含緩衝液及穩定劑，其中該抗CLDN18.2抗體原液含有螯合劑(例如EDTA、EDTA-2Na)‎； 2)使用該製劑溶媒對該抗CLDN18.2抗體原液進行換液，換液後的產物中幾乎不含有螯合劑； 3)向換液後的產物(即含有抗CLDN18.2抗體的製劑溶媒)中添加界面活性劑，從而得到如本文所述的藥物製劑。

在一些實施例中，該界面活性劑含有聚山梨酯80。

在一些實施例中，該製劑溶媒中的該緩衝液為濃度約20 mM的乙酸緩衝液，該穩定劑為濃度約9%(w/v)的蔗糖，界面活性劑為濃度約0.05%(w/v)的聚山梨酯80。

在一些實施例中，該換液為緩衝液置換。在一些實施例中，使用該製劑溶媒對該抗CLDN18.2抗體原液進行透析換液。例如，可以將一定體積的樣品置於透析袋內(例如Snake Skin®透析袋)，密封後，置於≧100倍體積的目標緩衝液中，持續攪拌以促進置換。透析進行適當的次數(例如3次)，持續適當的時間(例如4h、4h及隔夜)，在適當的攪拌速度下完成(例如150 rpm)。

在一些實施例中，該換液為過濾換液。在一些實施例中，該過濾為超濾、滲濾、凝膠過濾，及/或熟習此項技術者所知曉的其他過濾方法。

如本文所用，術語「超濾」係指混合物(例如抗CLDN18.2抗體原液)在例如壓力驅動下移動通過膜(例如超濾膜)，並且其中不同物質(例如溶劑及溶質)因其回應於給定的壓力驅動力而過濾穿過膜之速率的差異從而得到分離的過程。

如本文所用，術語「滲濾」係指利用例如可滲透膜過濾器將混合物(例如抗CLDN18.2抗體原液)根據其中各組分的分子大小進行分離的過程。通常蛋白質原液穿過保留蛋白質並允許緩衝液交換的膜而進行滲濾，由此，隨著時間的推移，含有蛋白質的原液被新的緩衝液所替代。

如本文所用，術語「凝膠過濾」係指利用凝膠藉由將比樹脂孔大的分子(例如蛋白質)排斥，使其比擴散到樹脂孔中並因此被保留且較慢地移動通過固相的較小分子更快地穿過固相，從而將較大分子與較小分子分離的過程。

在另一態樣中，本申請案提供一種製備藥物製劑的方法，其包括：將高濃度的抗CLDN18.2抗體原液與高濃度的製劑輔料(例如緩衝液及穩定劑，以及視情況存在的界面活性劑)混合，接著稀釋到目標濃度。

應用在另一態樣中，本申請案亦提供治療受試者之疾病的方法，其包括將治療有效量的本申請案之藥物製劑投與受試者，其中該受試者患有或可能患有需要用針對CLDN18.2之抗體進行治療的疾病。

如本文所用，術語「治療」指減少或改善病症或其一或多種症狀的嚴重性及/或持續時間，抑制或預防病症進展，引起病症消退，抑制或預防與病症相關的一或多種症狀復發、發展、發作或進展。需要治療的受試者包括已患有疾病的受試者。

術語「治療有效量」指實現可量測的改善或預防特定的病症所需的最小濃度。

本申請案的藥物製劑可用於治療CLDN18.2相關的疾病，包括慢性及急性疾病。CLDN18.2相關的疾病包括癌症等。在一些實施例中，該CLDN18.2相關的疾病為表現CLDN18.2的癌症。表現CLDN18.2的癌症的實例包括但不限於肺癌(例如小細胞肺癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、肺腺癌或肺鱗狀細胞癌)、胃癌(例如胃腸癌)、胰腺癌、食道癌、肝癌(例如肝細胞癌/肝細胞瘤)、鱗狀細胞癌、腹膜癌、腦瘤(例如膠質母細胞瘤/多形性膠質母細胞瘤(GBM)、非膠質母細胞瘤腦瘤或腦膜瘤)、膠質瘤(例如室管膜瘤、星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤、少突膠質瘤或混合膠質瘤，如少突星形細胞瘤)、宮頸癌、卵巢癌、肝癌(例如肝母細胞瘤、肝細胞癌/肝細胞瘤、肝癌)、膀胱癌(例如尿路上皮癌)、乳腺癌、結腸癌、結腸直腸癌、直腸癌、子宮內膜癌或子宮癌、唾液腺癌、腎癌(例如腎橫紋肌瘤)、前列腺癌、外陰癌、陰莖癌、肛門癌(例如肛門鱗狀細胞癌)、甲狀腺癌、頭頸癌(例如鼻咽癌)、皮膚癌(例如黑色素瘤或鱗狀細胞癌)、骨肉瘤、尤文氏肉瘤、軟骨肉瘤、軟組織肉瘤(例如橫紋肌肉瘤、纖維肉瘤、卡波西氏肉瘤)、類癌、眼癌(例如視網膜母細胞瘤)、間皮瘤、淋巴細胞性/淋巴母細胞性白血病(例如T細胞譜系和B細胞前體譜系的急性淋巴細胞性/淋巴母細胞性白血病(ALL)、慢性淋巴母細胞性/淋巴細胞性白血病(CLL)、急性骨髓性/成髓細胞性白血病(AML)，包括肥大細胞白血病、慢性骨髓性/髓細胞性/成髓細胞性白血病(CML)、毛細胞白血病(HCL)、霍奇金氏病、非霍奇金氏淋巴瘤、慢性骨髓單核細胞性白血病(CMML)、濾泡性淋巴瘤(FL)、瀰漫性大B細胞淋巴瘤(DLCL)、套細胞淋巴瘤(MCL)、伯基特氏淋巴瘤(BL)、蕈樣肉芽腫、塞紮里症候群、皮膚T細胞淋巴瘤、肥大細胞瘤、髓母細胞瘤、腎胚細胞瘤、孤立性漿細胞瘤、骨髓增生異常症候群、慢性及非慢性骨髓增生性病症、中樞神經系統腫瘤、垂體腺瘤、前庭神經鞘瘤、原始神經外胚層腫瘤、室管膜瘤、脈絡叢乳頭狀瘤、真性紅細胞增多症、血小板增多症、膽囊癌、特發性骨髓纖維化以及小兒癌症，如小兒肉瘤(例如神經母細胞瘤、橫紋肌肉瘤及骨肉瘤)。

本申請案的藥物製劑可藉由任何合適的途徑投與受試者。例如，該藥物製劑可藉由靜脈注射投與受試者。

在又一態樣中，本申請案提供藥物製劑在製備供預防及/或治療CLDN18.2相關疾病之藥物中的用途。

實施例 實驗方法總述：在以下實施例中，將抗CLDN18.2抗體進行製劑的配方篩選試驗。以下實施例中使用的抗CLDN18.2抗體含有如SEQ ID NO: 7所示的重鏈可變區及如SEQ ID NO: 8所示的輕鏈可變區。以下實施例中使用的抗CLDN18.2抗體含有如SEQ ID NO: 9所示的重鏈及如SEQ ID NO: 10所示的輕鏈。

本申請案以下實施例中測試的抗CLDN18.2抗體調配物以如下方法製備： 1. 製備目標製劑緩衝液：緩衝液的製備均使用特定的酸性及鹼性離子對。準確稱取酸性、鹼性離子對的輔料，添加目標緩衝液體積之約60%的Milli-Q水，混合均勻後，測定溶液的pH。若pH值偏離目標值，則需使用相應的離子對調節pH。接著將溶液用Milli-Q水稀釋至目標重量或目標體積。最後測定溶液的電導率，滲透壓和pH以進行驗證。 2. 製備樣品(透析法或直接稀釋法)： a) 用透析法將含有抗CLDN18.2抗體(即原液，在以下實施例中亦簡寫為DS)的緩衝液置換到目標製劑緩衝液中。具體而言，將一定體積的DS樣品置於Snake Skin ^®透析袋內，密封後，置於≧100倍體積的目標緩衝液中，持續攪拌以促進置換。透析進行3次，持續時間分別為4h、4h及隔夜，攪拌速度為150 rpm。 b) 直接稀釋法：將高濃度輔料、界面活性劑儲備液添加至高濃度DS中，接著用目標緩衝系統將DS稀釋至目標濃度。

本申請案的以下實施例用以下分析方法對所測試的抗CLDN18.2抗體調配物進行分析： 3. 動態光散(DLS)：蛋白質粒徑及分佈藉由動態光散射儀(DLS)進行測定，方法參數如下：採集時間5s，每次量測採集20次，量測溫度25℃。 4. 分子排阻層析(SEC)：使用Agilent 1260系統及TSKgel G3000SWXL管柱(300×7.8 mm，5 μm)、藉由SEC方法測定蛋白質聚集情況。移動相為50 mM磷酸鈉緩衝液，300 mM NaCl，pH 6.8±0.1。流速為1.0 mL/min。將樣品稀釋至10 mg/mL，偵測體積10 μL，偵測波長為280 nm。 5. 陽離子交換層析(CEX)：藉由CEX、使用Agilent 1260 Infinity系統中的A Thermo Propac Elite WCX-10 4mm×150mm 5um管柱測定蛋白質的電荷異質性。用移動相A與B的混合溶液將樣品稀釋至2.00 mg/mL。 6. 非還原性毛細管電泳(NR CE-SDS)：藉由CE-SDS(NR)方法測定蛋白碎片情況。將標準品或供試樣品用磷酸-檸檬酸緩衝液稀釋至4 mg/mL，接著取25 μL與75 μL SDS樣品緩衝液及5 μL NEM(100 mM N-乙基順丁烯二醯亞胺)渦旋混合進行變性處理。變性的樣品經離心後，在70±2℃下孵育10±2 min，在室溫下冷卻，接著再次離心。使用SDS分離凝膠試劑盒及無塗層的熔融石英毛細管在PA800 plus上進行分離。 7. pH：藉由安裝有Inlab®ExpertPro電極的Seven Compact pH計量測樣品pH。 8. 蛋白質濃度(Protein Conc)：藉由Nano Drop 2000分光光度計測定蛋白質在280 nm的吸光度濃度。在整個研究中使用的消光係數(E1%)為1.511 L/ g-cm。每個樣品在2.0 μL的加載體積下量測兩次。報導平均濃度。 9. 目檢(Visual Inspection)：藉由YB-2澄明度偵測儀檢查黑色背景下樣品的外觀。報導透明度、顏色。

本實驗用到的試劑來源如下，其他試劑為此項技術中的常規試劑。

試劑名稱	供應商	貨號
一水合檸檬酸	默克	137003.1000
二水合檸檬酸三鈉	默克	1.06446.1000
組胺酸	默克	1.04352.1000
一水合組胺酸鹽酸鹽	默克	1.04354.0500
三水合乙酸鈉	默克	1.37012.1000
冰醋酸	J.T Baker	UN2789
聚山梨酯80	NOF	Polysorbate80(HX2)
蔗糖	Pfanstiehl	S-124-2-MC
精胺酸鹽酸鹽	默克	1.01587.1000
氯化鈉	默克	1.16224.5000
二水合海藻糖	Pfanstiehl	T-104-4
山梨糖醇	MERCK	1.11597.9028
泊洛沙姆188	MERCK	1.37065.1000
PVDF膜	默克密理博	33mm, 0.22μm
PVDF膜	默克密理博	13mm, 0.22μm
PES膜	默克密理博	33mm, 0.22μm

實施例1：pH篩選實驗 1. 實驗設計將抗CLDN18.2抗體蛋白進行製劑的pH篩選試驗。藉由透析將該抗CLDN18.2抗體蛋白置換到表1所示的製劑緩衝液中，用相應的製劑緩衝液稀釋將其調節至30.0 mg/mL。最後，藉由0.22 μm PVDF膜過濾樣品並使用移液槍分裝至2 mL的西林瓶包裝容器系統中。樣品在表1中列出的不同條件下孵育後進行偵測。

表 1. pH篩選實驗設計
處方	蛋白濃度	描述	穩定條件及偵測項目
F1	30.0 mg/mL	20 mM乙酸鹽，pH 4.5	第0天進行備註欄所述的X及Y類偵測，在40℃孵育14天後，在第14天進行備註欄所述的X類偵測(T0 ^{X Y}40℃ (14D)X)
F2	20 mM乙酸鹽，pH 5.0
F3	20 mM乙酸鹽，pH 5.5
F4	20 mM組胺酸，pH 5.0
F5	20 mM組胺酸，pH 5.5
F6	20 mM組胺酸，pH 6.0
F7	20 mM檸檬酸鹽，pH 5.5
F8	20 mM檸檬酸鹽，pH 6.0
F9	20 mM檸檬酸鹽，pH 6.5
備註： 1. X=Conc.、SEC、CEX、DLS、NR CE-SDS，目檢，Y=pH 2.考慮到調配物F7、F8及F9的KD為負值，在T0時外觀呈現輕微乳光且單抗分子的半徑較大，認為其穩定性與其他調配物相比明顯較差，因此F7、F8及F9不再進行其他偵測。

2. 結果分析 (1)在T0時，調配物F7、F8及F9外觀呈現無色輕微乳光液體，其他調配物均呈現無色澄明液體。在40℃孵育14天，除F7、F8及F9外的所有調配物之外觀均沒有觀察到明顯變化。

表 2. pH篩選實驗外觀、 pH和濃度結果 _40 ℃
調配物	外觀
T0	14D
F1	CC	CC
F2	CC	CC
F3	CC	CC
F4	CC	CC
F5	CC	CC
F6	CC	CC
F7	SOC	NT
F8	SOC	NT
F9	SOC	NT
備註：CC (Clear and Colorless)：無色澄明；無色，SOC (Slightly Opalescence and Colorless)：輕微乳光，NT (Not Test)：未測試

(2)在T0時，調配物F7、F8及F9的KD為負值，表明了單抗分子間的作用力為吸引力，其餘調配物的KD為正值，表明了單抗分子間的作用力為排斥力。在T0時，調配物F7、F8及F9中單抗分子的半徑明顯大於其他調配物，故F1、F2、F3、F4、F5、F6在KD及T0粒徑均滿足要求。

表 3. pH篩選實驗 DLS結果 _40 ℃
處方	T0
KD (mL/g)	粒徑	多分散指數 %
F1	65.7	2.0	0.0
F2	32.2	3.0	0.7
F3	20.5	3.5	0.2
F4	19.5	3.5	0.4
F5	18.3	3.6	0.4
F6	23.3	3.3	0.9
F7	-7.79	6.9	2.9
F8	-7.94	7.6	6.8
F9	-8.15	7.2	3.7

(3)對F1、F2、F3、F4、F5、F6進行SEC偵測。如表4所示，在40℃下孵育14天，F1、F2、F3、F4、F5、F6展現出少量的主峰(MP)降解形成了碎片(LMW)及較慢的高聚體(HMW)增加速率，符合該測試條件下的接受標準，所有調配物均滿足穩定性要求。

表 4. pH篩選實驗 SEC結果 _40 ℃
處方	T0	40 ℃_14天
MP %	HMW %	LMW %	MP %	HMW %	LMW %
F1	99.6	0.3	0.1	97.0	0.3	2.7
F2	99.5	0.4	0.2	96.9	0.5	2.6
F3	99.5	0.4	0.1	96.7	0.8	2.5
F4	99.6	0.3	0.1	97.0	0.4	2.5
F5	99.5	0.4	0.1	97.3	0.4	2.3
F6	99.5	0.4	0.1	97.3	0.5	2.2

(4)CEX。在40℃下孵育14天，所有調配物表現出主峰降解和酸性峰的形成，符合該測試條件下的接受標準。各處方沒有明顯的差異。

表 5. pH篩選實驗 CEX結果 _40 ℃
調配物	T0	40 ℃_14天
MP %	酸性峰 %	鹼性峰 %	MP %	酸性峰 %	鹼性峰 %
F1	61.9	22.3	15.8	51.8	35.4	12.8
F2	62.0	22.3	15.7	52.6	35.3	12.1
F3	62.0	22.4	15.6	53.7	34.6	11.8
F4	62.2	22.4	15.4	52.5	32.5	15.0
F5	62.2	22.5	15.3	54.1	32.5	13.5
F6	62.1	22.7	15.2	55.4	32.8	11.8

(5)NR CE-SDS。在40℃下孵育14天，所有調配物展現出少量的主峰降解並形成碎片，符合該測試條件下的接受標準。

表 6. pH篩選實驗 NR CE-SDS結果 _40 ℃
調配物	T0	40 ℃_14天
MP %	HMW %	LMW %	MP %	HMW %	LMW %
F1	97.2	0.1	2.7	94.3	0.4	5.3
F2	97.1	0.2	2.7	94.8	0.5	4.8
F3	96.9	0.3	2.8	94.5	0.6	4.9
F4	97.0	0.3	2.7	94.8	0.4	4.8
F5	97.0	0.3	2.7	95.5	0.3	4.2
F6	97.1	0.2	2.6	95.3	0.3	4.3

總結，40℃條件下孵育後，根據DLS和外觀結果排除檸檬酸系統，係因為單抗分子間的作用力為吸引力且較大的單抗分子半徑均表明了單抗分子在長期儲存中有聚集的風險，在乙酸系統及組胺酸系統(即F1、F2、F3、F4、F5、F6)均較穩定，可滿足蛋白質調配物穩定性的要求。

實施例2：界面活性劑篩選實驗-1 1. 實驗設計將抗CLDN18.2抗體蛋白進行界面活性劑篩選試驗。藉由0.22 μm PVDF膜過濾抗CLDN18.2抗體蛋白，添加蔗糖溶液及聚山梨酯80溶液，接著用20 mM乙酸緩衝液pH 5.5及milli-Q水稀釋，置換成下列調配物(F10、F11、F12和F13)。乙酸及蔗糖作為緩衝液及穩定劑。抗CLDN18.2抗體蛋白的最終濃度為30.0 mg/mL。最後，藉由0.22 μm PVDF膜過濾樣品並使用移液槍分裝至2 mL的西林瓶包裝容器系統中，接著進行表7中列出的穩定性研究。在孵育後偵測樣品。

表 7.界面活性劑篩選實驗設計
調配物	蛋白質濃度	緩衝系統	界面活性劑種類	界面活性劑濃度( W/V)	穩定性條件及偵測項
F10	30.0 mg/mL	20 mM乙酸鹽，9%(w/v)蔗糖，pH5.5	聚山梨酯 80	0.01%	第0天進行備註欄所述的X及Y類偵測，在40℃孵育7天或14天後，分別在第7天和14天進行備註欄所述的X類偵測(T0 ^{X Y}40℃ (7D、14D) ^X) 以200 rpm的速度攪拌，分別在第5天及第7天進行備註欄所述的X類偵測(200 rpm：5D、7D) ^X
F11	0.02%
F12	0.05%
F13	0.1%
備註：X=Conc.、SEC、CEX、DLS、NR CE-SDS、目檢；Y=pH

2. 結果分析

40℃(表8)及振搖(表9)的數據表明聚山梨酯80的濃度在0.01%(w/v)-0.1%(w/v)的濃度範圍內對單抗分子的穩定性均有明顯的保護作用，各調配物均滿足測試要求，後續實驗選擇濃度為0.05%(w/v)聚山梨酯80用於進一步的評估。

表 8.界面活性劑篩選實驗的結果 _40 ℃
處方	F10	F11	F12	F13
40℃持續天數	0	7	14	0	7	14	0	7	14	0	7	14
外觀	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC
濃度(mg/mL)	30.2	30.0	30.2	30.3	30.2	30.3	30.2	30.2	30.6	30.1	30.1	30.5
pH	5.4	NA	NA	5.4	NA	NA	5.4	NA	NA	5.5	NA	NA
DLS	粒徑(nm)	4.4	4.3	4.3	4.4	4.4	4.4	4.3	4.3	4.3	4.3	4.3	4.3
多分散指數%	5.6	5.3	6.2	5.8	4.9	4.8	5.7	5.1	5.7	4.7	4.7	4.2
SEC	HMW%	0.4	0.6	0.7	0.4	0.6	0.8	0.4	0.7	0.9	0.4	0.7	1.0
MP%	99.5	99.1	96.6	99.5	99.1	96.4	99.5	99.0	96.3	99.5	99.0	96.4
LMW%	0.1	0.3	2.7	0.1	0.3	2.8	0.1	0.3	2.8	0.1	0.3	2.7
NR CE-SDS	HMW%	0.2	0.4	0.5	0.3	0.3	0.6	0.2	0.4	0.5	0.2	0.3	0.6
MP%	97.1	95.7	95.0	97.0	95.7	94.5	96.8	95.7	94.8	97.0	95.9	94.4
LMW%	2.6	4.0	4.5	2.7	4.0	4.8	3.0	3.9	4.7	2.7	3.8	4.9
CEX	酸性峰%	22.8	27.8	36.0	22.8	27.9	36.6	22.9	28.0	36.9	23.0	28.1	37.5
MP%	62.1	58.4	52.4	62.1	58.3	51.9	62.1	58.1	51.7	62.2	58.1	51.2
鹼性峰%	15.1	13.8	11.6	15.0	13.8	11.5	15.0	13.8	11.3	14.9	13.8	11.3

表 9.界面活性劑篩選實驗的結果_振搖
處方	F10	F11	F12	F13
振搖天數	0	5	7	0	5	7	0	5	7	0	5	7
外觀	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC
濃度(mg/mL)	30.2	30.0	30.2	30.3	30.0	30.1	30.2	30.1	30.4	30.1	30.4	30.2
pH	5.4	NA	NA	5.4	NA	NA	5.4	NA	NA	5.5	NA	NA
DLS	粒徑(nm)	4.4	4.3	4.3	4.4	4.2	4.3	4.3	4.3	4.3	4.3	4.2	4.3
多分散指數%	5.6	4.9	6.0	5.8	6.1	4.8	5.7	5.5	4.8	4.7	5.3	4.8
SEC	HMW%	0.4	0.4	0.5	0.4	0.4	0.5	0.4	0.5	0.5	0.4	0.5	0.5
MP%	99.5	99.5	99.4	99.5	99.4	99.4	99.5	99.4	99.4	99.5	99.4	99.4
LMW%	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.2	0.1	0.1	0.1	0.2
NR CE-SDS	HMW%	0.2	0.4	0.3	0.3	0.3	0.2	0.2	0.3	0.2	0.2	0.3	0.2
MP%	97.1	96.8	96.9	97.0	96.9	97.0	96.8	97.0	97.1	97.0	96.6	97.0
LMW%	2.6	2.8	2.8	2.7	2.8	2.8	3.0	2.7	2.7	2.7	3.1	2.7
CEX	酸性峰%	22.8	23.5	22.9	22.8	23.5	22.9	22.9	23.5	23.1	23.0	23.7	23.1
MP%	62.1	62.4	62.0	62.1	62.4	62.0	62.1	62.5	62.0	62.2	62.4	62.1
鹼性峰%	15.1	14.1	15.1	15.0	14.1	15.0	15.0	14.0	14.9	14.9	13.9	14.9

實施例3. 界面活性劑篩選實驗-2 1. 實驗設計將抗CLDN18.2抗體蛋白進行界面活性劑篩選試驗。藉由0.22 μm PES膜過濾抗CLDN18.2抗體蛋白，添加蔗糖溶液及泊洛沙姆188 溶液，接著用20 mM組胺酸緩衝液pH5.5稀釋，置換成下列調配物。選擇組胺酸及蔗糖作為緩衝液及穩定劑。抗CLDN18.2抗體蛋白的最終濃度為30.0 mg/mL。最後，藉由0.22 μm PES膜過濾樣品，並進行表10中列出的穩定性研究。在孵育後偵測樣品。

表 10.界面活性劑篩選實驗設計
處方	處方固定成分	界面活性劑種類	界面活性劑濃度( W/V)	穩定性條件及偵測項
F14	20 mM組胺酸 _9% (W/V%)蔗糖，pH5.5	泊洛沙姆188	0.05%	第0天進行備註欄所述的X類、Y類及Z類偵測，在40℃孵育3天、7天或14天後，分別在第3天、第7天和第14天進行備註欄所述的X類偵測(T0 ^{X Y Z}40C(3D、7D、14D) ^X) 攪拌(100rpm：1D、3D、5D) ^{X Z}混合(300rpm：24H、48H) ^XYZ
F15	0.10%
F16	0.20%
備註：X=Conc.、SEC、CEX、DLS、Nr-CE-SDS Y=MFI Z=目檢

2. 結果分析從SEC、CE-SDS及CEX數據，調配物F14、F15與F16之間未觀察到明顯差異(圖1-3)。故0.05%-0.20%(W/V)的泊洛沙姆188界面活性劑亦滿足調配要求。

實施例4. 輔料篩選實驗 1. 實驗設計將抗CLDN18.2抗體蛋白進行輔料篩選試驗。藉由0.22 μm PVDF膜過濾抗CLDN18.2抗體蛋白，添加輔料溶液及聚山梨酯80溶液中置換成下列調配物，接著用20 mM乙酸-乙酸鈉緩衝液pH5.5及水稀釋。CLDN18.2抗體蛋白的最終濃度為30.0 mg/mL。最後，藉由0.22μm PVDF膜過濾樣品並使用移液槍分裝至2mL的西林瓶包裝容器系統中，接著進行表11中列出的穩定性研究。

表 11.輔料篩選實驗設計
處方	蛋白濃度	緩衝系統	輔料	穩定性條件及偵測項
F17	30.0 mg/mL	20 mM乙酸鹽，0.05%(w/v)聚山梨酯80，pH 5.5	150 mM NaCl	第0天進行備註欄所述的X類、Y類及Z類偵測，在40℃孵育7天或14天後，分別在第7天及第14天進行備註欄所述的X類及Z類偵測(T0 ^{X Y Z}40℃(7D、14D) ^X) ，凍融5次循環後進行備註欄所述的X類及Z類偵測(FT(5x) ^{X Z})
F18	9%(w/v)蔗糖
F19	9%(w/v)海藻糖
F20	150 mM精胺酸鹽酸鹽
備註: 1. X=Conc.、SEC、CEX、DLS、NR CE-SDS，目檢；Y=pH；Z= MFI 2.考慮到調配物F17及F20的KD為負值，在T0時外觀呈現輕微乳光且單抗分子的半徑較大，認為其穩定性與其他處方相比明顯較差，因此F14及F17不再進行其他偵測。

2. 結果分析 (1) 凍融試驗結果見表12，在T0時，調配物F17及F20外觀呈現無色輕微乳光液體，而調配物F18及F19均呈現無色澄明液體。在凍融5次循環後，調配物F18及F19的蛋白濃度及外觀均沒有觀察到明顯變化。在T0時，調配物F17及F20的KD為負值，表明了單抗分子間的作用力為吸引力，調配物F18及F19的KD為正值，表明了單抗分子間的作用力為排斥力。在T0時，調配物F17及F20中單抗分子的半徑明顯大於其他調配物。在凍融5個循環後，調配物F18及F19的單抗分子半徑基本無變化，並呈現單峰分佈；SEC、NR CE-SDS及CEX主峰均沒有觀察到明顯的差異及變化；亞可見微粒均沒有觀察到明顯的差異及變化。故F18及F19滿足實驗要求。

表 12.輔料篩選實驗的結果_凍融
調配物	F17	F18	F19	F20
凍融次數	0	5	0	5	0	5	0	5
外觀	SOC	NT	CC	CC	CC	CC	SOC	NT
濃度(mg/mL)	29.7	NT	29.8	29.8	29.1	29.2	30.2	NT
pH	5.5	NT	5.5	NT	5.5	NT	5.4	NT
KD(mL/g)	-6.13	NT	9.22	NT	10.4	NT	-5.07	NT
DLS	粒徑(nm)	6.7	NT	4.3	4.4	4.4	4.3	6.3	NT
多分散指數%	3.5	NT	6.1	6.3	6.0	7.0	3.9	NT
SEC	HMW%	NT	NT	0.4	0.4	0.4	0.4	NT	NT
MP%	NT	NT	99.5	99.5	99.5	99.5	NT	NT
LMW%	NT	NT	0.1	0.1	0.1	0.1	NT	NT
NR CE-SDS	HMW%	NT	NT	0.3	0.2	0.2	0.2	NT	NT
MP%	NT	NT	97.0	96.9	97.1	96.9	NT	NT
LMW%	NT	NT	2.7	2.9	2.7	2.9	NT	NT
CEX	酸性峰%	NT	NT	22.7	22.8	22.8	22.8	NT	NT
MP%	NT	NT	62.1	62.0	62.1	62.0	NT	NT
鹼性峰%	NT	NT	15.2	15.2	15.1	15.2	NT	NT

(2) 高溫試驗結果見表13，在40℃下孵育7天及14天，F18及F19的蛋白質濃度，外觀及蛋白質粒徑均沒有觀察到明顯變化。SEC、NR-CE-SDS及CEX主峰發生少量降解，但均符合可接受標準，處方之間無明顯區別。

表 13.輔料篩選實驗的結果 _40 ℃
調配物	F18	F19
40 ℃持續天數	0	7	14	0	7	14
外觀	CC	CC	CC	CC	CC	CC
濃度(mg/mL)	29.8	29.8	30.0	29.1	29.2	29.4
DLS	粒徑(nm)	4.3	4.4	4.4	4.4	4.4	4.3
多分散指數%	6.1	4.9	5.3	6.0	5.1	4.0
SEC	HMW%	0.4	0.6	0.8	0.4	0.7	0.8
MP%	99.5	99.1	96.4	99.5	99.0	96.4
LMW%	0.1	0.3	2.7	0.1	0.4	2.7
NR-CE-SDS	HMW%	0.3	0.2	0.6	0.2	0.2	0.7
MP%	97.0	96.1	94.6	97.1	95.7	94.3
LMW%	2.7	3.7	4.8	2.7	4.1	5.0
CEX	酸性峰%	22.7	27.6	36.3	22.8	27.6	36.2
MP%	62.1	58.3	52.0	62.1	58.4	52.1
鹼性峰%	15.2	14.1	11.7	15.1	14.0	11.6

(3) 總結根據DLS及外觀結果排除輔料氯化鈉及鹽酸精胺酸，係因為該輔料的添加使單抗分子間的作用力由排斥力轉變為吸引力，導致分子在長期儲存中有聚集的風險，不利於製劑的長期儲存。40℃及凍融的研究結果表明蔗糖及海藻糖對單抗分子的穩定性方面的保護作用基本一致，均能滿足開發穩定製劑的需求。

實施例5：輔料篩選實驗-2 1. 實驗設計將抗CLDN18.2抗體蛋白進行輔料篩選試驗。藉由0.22 μm PES膜過濾CLDN18.2抗體蛋白，添加輔料溶液及聚山梨酯80溶液中置換成下列製劑，接著用20 mM組胺酸緩衝液pH5.5稀釋。CLDN18.2抗體蛋白的最終濃度為30.0 mg/mL。最後，藉由0.22 μm PES膜過濾樣品，並進行表 14中列出的穩定性研究。

表 14. 輔料篩選實驗 -2
處方	緩衝液和界面活性劑	輔料	穩定性條件及偵測項
F21	20 mM組胺酸_ 0.05%(W/V%)聚山梨酯80，pH 5.5	5%(W/V%)山梨糖醇	T0 ^{X Y Z}40℃(3D、7D、14D) ^XFT(1x、3x、5x) ^{X Z}混合(300 rpm：24H、48H) ^XYZ
F22	9%(W/V%)蔗糖
備註：X=Conc.、SEC、CEX、DLS、Nr-CE-SDS；Y=MFI；Z=目檢

2. 結果分析由攪拌實驗及SEC、CEX、CE-SDS結果可知，F21、F22均滿足要求(圖4-6，表15)。

表 15.輔料篩選實驗 -2的結果_攪拌
調配物	外觀	濃度 (mg/mL)	pH
T0	T0	24H	48H	T0	48H
F21	無色澄清	30.8	31.3	31.9	5.4	5.4
F22	無色澄清	30.8	31.0	31.7	5.4	5.3

因此，蔗糖、山梨糖醇均滿足要求。

實施例6：製劑確認實驗 1. 實驗設計綜合上述實驗，選擇滿足要求的2種調配物進行最優調配物的確認。將界面活性劑與輔料的溶液添加至具有蛋白質的緩衝系統中並將蛋白質濃度調節至30.0mg/mL來製備下表的調配物。藉由0.22 μm PVDF膜過濾樣品並使用移液槍分裝至2 mL西林瓶包裝容器系統及5 mL聚碳酸酯瓶中，接著進行穩定性研究。

表 16.調配物確認研究設計
處方	描述	穩定性條件及偵測項
F23	30.0 mg/mL DS、20 mM乙酸鹽、9%(w/v)蔗糖、0.05%(w/v)聚山梨酯80，pH5.3	T0 ^{X Z}25℃(2W、4W、6W) ^X5℃(2W、4W、6W、3M、6M) ^X-20℃於PC瓶中(1M、3M、6M) ^X
F22	30.0 mg/mL DS、20 mM組胺酸、9%(w/v)蔗糖、0.05%(w/v)聚山梨酯80，pH5.5
備註：X=Conc.、SEC、CEX、NR CE-SDS，目檢，Z=效能

2. 結果分析在加速試驗中(表17)，蛋白質純度(SEC及NR CE-SDS)在乙酸緩衝系統(F23)及組胺酸緩衝系統(F22)中均發生較小的降解，而乙酸緩衝系統(F23)的降解程度更小；乙酸緩衝系統中CEX純度沒有發生明顯改變，而組胺酸緩衝系統中CEX純度發生了明顯的降低。長期試驗(表18)及低溫試驗(表19)中，乙酸緩衝系統(F23)及組胺酸緩衝系統(F22)在外觀、pH、濃度、DLS、純度(SEC，NR CE-SDS及CEX)方面均沒有發生明顯變化。考慮到加速試驗的條件更能模擬長期儲存條件下的蛋白質降解趨勢，因此選擇在加速試驗中更穩定的乙酸緩衝系統(F23)作為最終調配物，即為：30.0 mg/mL抗CLDN18.2抗體蛋白、20 mM乙酸/乙酸鈉、9%(w/v)蔗糖、0.05%(w/v)聚山梨酯80，pH5.3。

表 17.加速實驗 _25 ℃
調配物	F23	F22
25 ℃持續週數	0	2	4	6	0	2	4	6
外觀	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC
濃度(mg/mL)	30.2	30.5	30.4	30.4	30.3	30.4	30.4	30.6
SEC	HMW%	0.4	0.5	0.5	0.6	0.4	0.6	0.6	0.9
MP%	99.4	99.3	99.3	99.1	99.4	99.3	99.1	98.7
LMW%	0.2	0.1	0.2	0.3	0.2	0.2	0.3	0.3
NR-CE-SDS	HMW%	0.1	0.2	0.4	0.3	0.1	0.3	0.4	0.4
MP%	97.0	96.6	96.4	96.2	97.1	96.4	95.8	95.6
LMW%	3.0	3.2	3.3	3.5	2.9	3.4	3.8	3.9
CEX	酸性峰%	17.0	16.5	18.0	18.7	17.3	17.9	22.4	25.6
MP%	59.7	59.6	59.6	58.0	59.6	52.9	44.2	39.9
鹼性峰%	23.3	23.9	22.4	23.2	23.1	29.2	33.4	34.5

表 18.製劑確認實驗結果 _5 ℃
調配物	F23	F22
5 ℃持續時間	T0	2W	4W	6W	3M	6M	T0	2W	4W	6W	3M	6M
外觀	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC	CC
濃度(mg/mL)	30.2	30.6	30.5	30.3	30.5	30.1	30.3	30.4	30.2	30.4	30.4	30.2
DLS	半徑(nm)	4.0	4.1	NT	4.0	NT	4.2	4.6	4.0	NT	4.7	NT	4.8
PDI %	4.3	5.1	NT	4.5	NT	9.4	4.6	5.2	NT	4.4	NT	9.4
SEC	HMW%	0.4	0.4	0.4	0.5	0.7	0.6	0.4	0.4	0.3	0.5	0.7	0.7
MP%	99.4	99.5	99.5	99.4	99.2	99.3	99.4	99.5	99.5	99.4	99.1	99.0
LMW%	0.2	0.1	0.1	0.2	0.1	0.2	0.2	0.1	0.1	0.2	0.2	0.3
NR-CE -SDS	HMW%	0.1	0.1	0.2	0.1	0.1	0.2	0.1	0.2	0.2	0.1	0.6	0.2
MP%	97.0	96.8	96.9	97.0	96.8	96.8	97.1	97.0	96.7	97.2	96.1	96.4
LMW%	3.0	3.0	2.9	2.9	3.1	3.1	2.9	2.8	3.1	2.7	3.4	3.4
CEX	酸性峰%	17.0	15.6	16.3	15.6	16.8	15.9	17.3	16.1	16.6	16.1	17.9	18.6
MP%	59.7	59.8	60.0	59.3	61.2	60.0	59.6	59.6	60.0	59.1	60.0	56.8
鹼性峰%	23.3	24.6	23.8	25.0	22.0	24.2	23.1	24.4	23.4	24.9	22.1	24.5
表 19.製劑確認實驗結果 _-20 ℃
調配物	F23	F22
-20 ℃持續月數	T0	1M	3M	6M	T0	1M	3M	6M
濃度(mg/mL)	30.2	30.2	30.8	NT	30.3	30.3	30.5	NT
SEC	HMW%	0.4	0.3	0.5	0.5	0.4	0.3	0.5	0.4
MP%	99.4	99.6	99.4	99.4	99.4	99.6	99.4	99.5
LMW%	0.2	0.1	0.1	0.1	0.2	0.1	0.1	0.1
NR-CE-SDS	HMW%	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.5	0.2
MP%	97.0	96.7	97.1	97.0	97.1	96.6	96.3	96.9
LMW%	3.0	3.2	2.9	2.9	2.9	3.3	3.2	2.9
CEX	酸性峰%	17.0	16.7	16.9	15.5	17.3	16.9	17.3	15.9
MP%	59.7	60.6	61.3	60.0	59.6	60.6	61.2	59.8
鹼性峰%	23.3	22.7	21.8	24.5	23.1	22.5	21.5	24.3

實施例7：考察依地酸二鈉(EDTA-Na ₂)的保護作用 1. 實驗設計按下表所示製備如下樣品，對F23、F24(在原液中添加EDTA，且原液混合搖勻之後，藉由透析方法移除EDTA並配製成最終調配物的製程)，F25考察依地酸二鈉對防止聚山梨酯80(PS80)降解及蛋白質量的保護作用。F24的製備方式如下：在抗體原液中添加EDTA，接著用包含緩衝液及穩定劑的製劑溶媒進行置換，從而達到同時移除EDTA以及過濾換液的效果，最終添加界面活性劑，製備得到最終調配物。

表 20.依地酸二鈉保護研究實驗設計
調配物	描述	穩定性條件及偵測項
F23	30.0 mg/mL DS、20 mM乙酸鹽、9%(w/v)蔗糖、0.05%(w/v)聚山梨酯80，pH5.3 (對照組)	T0， 40℃：2W/4W/6W/8W Visual、Conc., OD405、DLS, SEC、PS80含量、NR CE(4W)
F24	30.0 mg/mL DS、20 mM乙酸鹽、9%(w/v)蔗糖、0.05%(w/v)聚山梨酯80、pH5.3(原液中添加EDTA並藉由透析移除)
F25	30.0 mg/mL DS、20 mM乙酸鹽、9%(w/v)蔗糖、0.05%(w/v)聚山梨酯80、50 μM EDTA pH5.3(調配物含有EDTA)

2. 結果分析在40℃強制實驗條件下，由圖7可知，在下游純化時添加EDTA(F24)及在製劑中添加EDTA(F25)皆可有效防止PS80降解，由圖8可知，在F24及F25可以降低蛋白質主峰的降解。

圖1顯示在分別選用三種不同濃度的泊洛沙姆188(處方F14、F15和F16)作為界面活性劑的界面活性劑篩選實驗中，根據SEC所測得之蛋白質的穩定性數據。圖2顯示在分別選用三種不同濃度的泊洛沙姆188(處方F14、F15和F16)作為界面活性劑的界面活性劑篩選實驗中，根據CEX所測得之抗CLDN18.2抗體蛋白的穩定性數據。圖3顯示在分別選用三種不同濃度的泊洛沙姆188(處方F14、F15和F16)作為界面活性劑的界面活性劑篩選實驗中，根據CE-SDS所測得的蛋白質穩定性數據。圖4顯示在分別選用山梨糖醇和蔗糖作為穩定劑(分別為處方F21和F22)的輔料篩選實驗中，根據SEC所測得的蛋白質穩定性數據。圖5顯示在分別選用山梨糖醇和蔗糖作為穩定劑(分別為處方F21和F22)的輔料篩選實驗中，根據CEX所測得的蛋白質穩定性數據。圖6顯示在分別選用山梨糖醇和蔗糖作為穩定劑(分別為處方F21和F22)的輔料篩選實驗中，根據CE-SDS所測得的蛋白質穩定性數據。圖7顯示依地酸二鈉(EDTA二鈉)對聚山梨酯80(PS80)的防降解保護作用。圖8顯示根據NR CE-SDS所測得的依地酸二鈉(EDTA二鈉)對蛋白質穩定性之保護作用。

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Claims

一種藥物製劑，其包含抗CLDN18.2抗體及緩衝液，該緩衝液為乙酸緩衝液或組胺酸緩衝液，且pH值為4.5~6.0。
如請求項1之藥物製劑，其中該緩衝液在該藥物製劑中的濃度為5~50mM，或10~30 mM。
如請求項1或2之藥物製劑，亦包含穩定劑。
如請求項3之藥物製劑，其中該穩定劑在該藥物製劑中的濃度為1-20%(w/v)，或1~10 %(w/v)。
如請求項3或4之藥物製劑，其中該穩定劑選自：蔗糖、海藻糖和山梨糖醇。
如請求項5之藥物製劑，其中: a)該穩定劑是蔗糖或海藻糖，且該蔗糖或海藻糖在該藥物製劑中的濃度為5-10%(w/v)；或 b)該穩定劑是山梨糖醇，且該山梨糖醇在該藥物製劑中的濃度為2-8%(w/v)。
如前述請求項中任一項之藥物製劑，亦包含界面活性劑。
如請求項7之藥物製劑，其中該界面活性劑在該藥物製劑中的濃度為0.005%(w/v)-0.4%(w/v)，或0.01%(w/v)- 0.2%(w/v)。
如請求項7或8之藥物製劑，其中該界面活性劑選自：聚山梨酯80和泊洛沙姆188。
如請求項9之藥物製劑，其中： a)該界面活性劑是聚山梨酯80，且該聚山梨酯80在該藥物製劑中的濃度為0.01%(w/v)- 0.1%(w/v)，或 b)該界面活性劑是泊洛沙姆188, 且該泊洛沙姆188在該藥物製劑中的濃度為0.05%(w/v)- 0.2%(w/v)。
如前述請求項中任一項之藥物製劑，亦包含螯合劑。
如請求項11之藥物製劑，其中該螯合劑在該藥物製劑中的濃度為30-350 μM，或40-60 μM。
如請求項11或12之藥物製劑，其中該螯合劑選自：EDTA、DTPA、IDHA、EDDHA、HBED。
如前述請求項中任一項之藥物製劑，其中該抗CLDN18.2抗體在該藥物製劑中的濃度為1~200 mg/ml。
如請求項14之藥物製劑，其中該抗CLDN18.2抗體在該藥物製劑中的濃度為20~40 mg/ml。
如前述請求項中任一項之藥物製劑，其中該抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 1所示的重鏈CDR1(HCDR1)、如SEQ ID NO: 2所示的HCDR2及如SEQ ID NO: 3所示的HCDR3，以及如SEQ ID NO: 4所示的輕鏈CDR1(LCDR1)、如SEQ ID NO: 5所示的LCDR2及如SEQ ID NO: 6所示的LCDR3。
如前述請求項中任一項之藥物製劑，其中該抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 7所示之重鏈可變區的CDR1、CDR2及CDR3，以及如SEQ ID NO: 8所示之輕鏈可變區的CDR1、CDR2及CDR3。
如前述請求項中任一項之藥物製劑，其中該抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 7所示的重鏈可變區及如SEQ ID NO: 8所示的輕鏈可變區。
如前述請求項中任一項之藥物製劑，其中該抗CLDN18.2抗體包含如SEQ ID NO: 9所示的重鏈及如SEQ ID NO: 10所示的輕鏈。
如前述請求項中任一項之藥物製劑，其包含抗CLDN18.2抗體、緩衝液、穩定劑及界面活性劑，其中該緩衝液為乙酸緩衝液，該穩定劑為蔗糖或海藻糖，該界面活性劑為聚山梨酯80，且pH值為約4.5-6.0。
如請求項20之藥物製劑，其中該抗CLDN18.2抗體在該藥物製劑中的濃度為20-40 mg/ml，該乙酸緩衝液在該藥物製劑中的濃度為10-30 mM，該蔗糖或海藻糖在該藥物製劑中的濃度為5-10%(w/v)，且/或該聚山梨酯80在該藥物製劑中的濃度為0.01%(w/v)- 0.2%(w/v)。
如請求項21之藥物製劑，其中該抗CLDN18.2抗體在該藥物製劑中的濃度為約30 mg/ml，該乙酸緩衝液在該藥物製劑中的濃度為約20 mM，該蔗糖或海藻糖在該藥物製劑中的濃度為約9%(w/v)，該聚山梨酯80在該藥物製劑中的濃度為0.01%(w/v)- 0.1%(w/v)，pH值為約5.0-5.5。
如請求項22之藥物製劑，其中該穩定劑為蔗糖，該聚山梨酯80在該藥物製劑中的濃度為約0.05%(w/v)，pH值為約5.3。
如請求項20至23中任一項之藥物製劑，亦包含EDTA，該EDTA在該藥物製劑中的濃度為40-60 μM。
如請求項24之藥物製劑，該EDTA在該藥物製劑中的濃度為約50 μM。
如前述請求項中任一項之藥物製劑，其包含抗CLDN18.2抗體、緩衝液、穩定劑和界面活性劑，其中該緩衝液為組胺酸緩衝液，該穩定劑為蔗糖或山梨糖醇，該界面活性劑為聚山梨酯80或泊洛沙姆188。
如請求項26之藥物製劑，其中該穩定劑為蔗糖，該蔗糖在該藥物製劑中的濃度為6-12%(w/v)。
如請求項26之藥物製劑，其中該穩定劑為山梨糖醇，該山梨糖醇在該藥物製劑中的濃度為2-8%(w/v)。
如請求項26至28中任一項之藥物製劑，其中該界面活性劑為聚山梨酯80，該聚山梨酯80在該藥物製劑中的濃度為0.01%(w/v)- 0.1%(w/v)。
如請求項26至28中任一項之藥物製劑，其中該界面活性劑為泊洛沙姆188，該泊洛沙姆188在該藥物製劑中的濃度為0.05%(w/v)- 0.2%(w/v)。
一種製備藥物製劑的方法，該方法包括： 1)提供製劑溶媒及抗CLDN18.2抗體原液，其中該製劑溶媒包含緩衝液及穩定劑，以及視情況存在的界面活性劑； 2)使用該製劑溶媒對該抗CLDN18.2抗體原液進行換液，從而得到如請求項1至30中任一項之藥物製劑。
如請求項31之方法，其中該抗CLDN18.2抗體原液含有螯合劑(例如EDTA)，該製劑溶媒不含螯合劑，藉由過濾使該藥物製劑中幾乎不含有螯合劑。
如請求項32之方法，其中該製劑溶媒包含緩衝液和穩定劑且不含有界面活性劑。
如請求項31之方法，其中該製劑溶媒包含緩衝液和穩定劑且含有螯合劑(例如EDTA)。
如請求項33或34之方法，其中在使用該製劑溶媒對該抗CLDN18.2抗體原液進行換液後添加界面活性劑，從而得到如請求項1至30中任一項之藥物製劑。
如前述請求項中任一項之藥物製劑，其中該乙酸緩衝液為乙酸-乙酸鈉緩衝液；該組胺酸緩衝液為組胺酸-組胺酸鹽酸鹽緩衝液。
一種如請求項1至36中任一項之藥物製劑在製備供預防及/或治療CLDN18.2相關疾病之藥物中的用途。
如請求項37之藥物製劑，其中該CLDN18.2相關疾病選自胃癌、胃食管交界處腺癌、肺癌、支氣管癌、骨癌、肝膽管癌、胰腺癌、乳腺癌、肝癌、卵巢癌、睾丸癌、腎癌、膀胱癌、頭頸癌、脊柱癌、腦癌、宮頸癌、子宮癌、子宮內膜癌、結腸癌、結直腸癌、直腸癌、肛門癌、食道癌、胃腸道癌、皮膚癌、前列腺癌、垂體癌、陰道癌、甲狀腺癌、膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、黑色素瘤、骨髓增生異常症候群、肉瘤、畸胎瘤或腺癌。