TW202410920A - 包括聚合物賦形劑之抗體生物醫藥調配物 - Google Patents

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Abstract

本發明係關於聚丙烯醯胺類共聚物在抗體生物醫藥劑之調配物中充當穩定賦形劑，而不與抗體直接相互作用或改變其藥物動力學特性。該等聚丙烯醯胺類共聚物藉由阻止該抗體吸附至組合物之界面、防止不合需要的聚集事件且維持該抗體之結合活性而賦予多種抗體之高濃度組合物顯著的穩定性益處。此類抗體組合物適用於向個體投與該組合物之方法。

Description

包括聚合物賦形劑之抗體生物醫藥調配物
抗體在現代藥物療法中呈現巨大前景。此等生物醫藥傾向於在調配物中聚集，因此需要低濃度藥物調配物及/或導致不良穩定性。雖然聚集機制在抗體間略微變化，但許多抗體含有疏水性片區（hydrophobic patch）及/或可部分變性以展現分子之疏水性區段，其驅動此等蛋白質吸收至界面（例如空氣-水、玻璃-水或橡膠-水界面）上。此等界面處蛋白質分子之高局部濃度與界面介導之部分去摺疊聯合可觸發聚集事件之初始成核，此引發進一步聚集。抗體在界面處聚集之此傾向典型地隨調配物濃度增加而增加，從而不利地影響整體調配穩定性。此等固有濃度限制通常需要靜脈內遞送大體積、低濃度輸注之抗體療法。然而，IV投與給患者帶來負擔，通常需要冗長的輸注程序及獲取臨床基礎設施，使大量處於風險下之群體無法獲得有效治療。
此等限制對於需要維持高抗體血清濃度以獲得治療益處之患者的臨床適應症尤其有害。舉例而言，廣泛中和HIV抗體（HIV bnAb）係一類特異性靶向HIV套膜三聚體上之高度保守區的抗體治療劑。目前正在探索經由被動免疫將HIV bnAb用於預防性感染預防及疾病管理。雖然已在小鼠及非人類靈長類動物中證明bnAb用於HIV預防及治療之用途，但bnAb調配物典型地藉由IV輸注投與，以達到防止突破性感染所需的高血清濃度且防止抗藥性發作。鑒於目前全球有大約3800萬人攜帶HIV、每年有170萬人新感染且每年有690,000例愛滋病相關死亡，因此即使在中低收入國家在資源有限的環境中亦可部署的用於治療及預防HIV之新治療劑的開發仍具有高優先級。
許多商業賦形劑已用於嘗試克服與高濃度抗體調配物相關之挑戰，其中在生物醫藥調配物中最充分記載的係聚氧乙烯類界面活性劑，諸如聚山梨醇酯及泊洛沙姆（poloxamer）。儘管其使用廣泛，但此等系統仍受到其臨界微胞濃度（高於此濃度賦形劑將形成微胞，經由引入大的疏水性表面進一步使調配物不穩定）、經由氧化降解之可能毒性及本體中賦形劑與運載物之間不合需要的相互作用的限制。
因此，需要改良之抗體調配物。
本發明提供包括抗體及聚丙烯醯胺類共聚物之組合物。本發明人已證明特定聚丙烯醯胺類共聚物可用作抗體生物醫藥劑之調配物中之穩定賦形劑，而不直接與抗體相互作用，或改變其藥物動力學特性。本文中所呈現之結果指示本發明之聚丙烯醯胺類共聚物一般可應用於藉由阻止抗體吸附至組合物之界面，藉此防止不合需要的聚集事件且維持抗體之結合活性而賦予多種抗體之高濃度組合物顯著的穩定性益處。在一些實施例中，本發明之組合物以向患者提供皮下（SC）注射之抗體濃度調配，SC注射與例如IV投與相反，可在低資源環境中進行（圖1）。
亦提供使用抗體組合物之方法，包括經由注射（例如皮下）向有需要之人類個體投與組合物之方法。
相關申請案
本申請案主張2022年5月23日申請之美國臨時申請案第63/344,927號之優先權，該申請案以全文引用之方式併入本文中。
如上文所概述，本發明係關於包括抗體及聚丙烯醯胺類共聚物之組合物。在一些實施例中，抗體以高濃度存在於穩定組合物中，例如5 wt%或更高，諸如7 wt%、10 wt%、12 wt%、15 wt%、20 wt%或25 wt%或更高；或5 wt%、7 wt%、10 wt%或12 wt%至15 wt%、20 wt%或25 wt%，諸如5-25 wt%、5-20 wt%、5-15 wt%、10-25 wt%、10-20 wt%或15-25 wt%。在一些實施例中，與習知或當前經批准之抗體調配物相比，組合物提供較高濃度及穩定性之治療抗體。在一些實施例中，抗體實質上以單體締合狀態存在於組合物中。在一些實施例中，組合物為儲存穩定的。在一些實施例中，組合物經調配用於皮下投與治療有效量之抗體。
現將詳細參考所揭示之主題的某些實施例。儘管將結合所列舉之申請專利範圍描述所揭示之主題，但應理解，所例示之主題不意欲將申請專利範圍限制於所揭示之主題。 組合物
本發明之範疇包括包含聚丙烯醯胺類共聚物及抗體之組合物。將聚丙烯醯胺類共聚物併入組合物中可防止或減少抗體聚集，藉此維持抗體之生物活性，例如與抗原之特異性結合。
如本文所用，關於抗體使用之術語「締合狀態」描述抗體之聚集程度。舉例而言，存在於組合物中之非聚集抗體可稱為單體抗體，或以單體締合狀態存在之抗體。在另一實例中，存在於組合物中之兩種或更多種抗體之聚集體可稱為聚集抗體，或以聚集締合狀態存在之抗體。
關於抗體組合物使用之術語「實質上以單體締合狀態」係指其中50%或更多，例如60%或更多、70%或更多、80%或更多、90%或更多、95%或更多或97%或更多之抗體以單體締合狀態存在的組合物。關於抗體組合物使用之術語「穩定性」係指組合物隨時間推移保留其中抗體之至少一部分結合活性的能力。舉例而言，在一些實施例中，「穩定」組合物可歷經21天或更長時間之連續壓力老化保留其中抗體之結合活性的70%或更高（例如80%或更高、90%或更高或95%或更高）（例如根據藉由酶聯免疫吸附分析確定之半最大抑制濃度）。
在一些實施例中，組合物適用於皮下注射，例如無菌。在一些實施例中，組合物經調配用於皮下注射，具有高濃度之抗體（例如5 wt%或更高，如上文所描述）及一種或多種適用於在臨床上相關注射條件下可注射之物理特性（例如0.2 Pa*s*m或更小，諸如0.15、0.1或0.05 Pa*s*m之黏度）。
在一些實施例中，組合物之表面張力為60 nM/m或更小，例如55、50、45、40、30或25 nM/m或更小。
在一些實施例中，組合物之界面複數黏度為0.2 Pa·s·m或更小，例如0.15 Pa·s·m或更小或0.1或更小。界面複數黏度（亦稱為界面剪切黏度或界面複數剪切黏度）為存在於氣體與液體之間的界面處或兩種不可混溶液體之間的界面處之分子流動的量度。圖3，B圖展示例示性抗體組合物相對於對照溶液之界面剪切黏度量測結果。例示性聚丙烯醯胺類共聚物使所得抗體組合物之界面複數黏度降低3倍。
在一些實施例中，在0 s -1至3,000 s -1之剪切速率下，組合物具有6 mPa·s或更低，例如5.5 mPa·s或更低之高剪切速率黏度。圖3，C圖展示例示性抗體組合物在代表注射之高剪切速率下之黏度相對於對照溶液之圖。包括聚丙烯醯胺類共聚物之例示性抗體組合物在適用於注射之高剪切速率展現本體溶液黏度。
在一些實施例中，組合物能夠保留抗體對目標抗原決定基或抗原之特異性結合活性的70%或更高，例如75%或更高、80%或更高、85%或更高、90%或更高或95%或更高，例如歷經21天連續壓力老化評估。在一些實施例中，結合活性藉由酶聯免疫吸附分析確定。 聚丙烯醯胺類共聚物
術語「聚丙烯醯胺類共聚物」係指由兩種或更多種不同單體之聚合形成的聚合物，其中單體中之至少一者具有丙烯醯胺官能基（亦即，丙烯醯胺單體）。在一些實施例中，聚丙烯醯胺類共聚物由兩種結構上不同之丙烯醯胺單體（各自具有丙烯醯胺官能基之兩種結構上不同之單體）之聚合形成。
所得共聚物可為交替共聚物，其中單體物種以交替方式連接；無規共聚物，其中單體物種在無限定模式下在聚合物鏈內彼此連接；嵌段共聚物，其中一種單體物種之聚合嵌段連接至由另一單體物種構成之聚合嵌段；及接枝共聚物，其中主聚合物鏈由一種單體物種組成，且另一單體物種之聚合嵌段以側分支（亦稱為側鏈）形式連接至主聚合物鏈。在一些實施例中，本發明之聚丙烯醯胺類共聚物為無規共聚物。
「丙烯醯胺單體」係指具有丙烯醯胺官能基之單體物種。術語「丙烯醯胺單體」不僅包括單體丙烯醯胺，而且包括單體丙烯醯胺之衍生物。丙烯醯胺單體之實例包括但不限於丙烯醯胺（AM）、N-(3-甲氧基丙基)丙烯醯胺（MPAM）、4-丙烯醯嗎啉（MORPH）、N,N-二甲基丙烯醯胺（DMA）、N-羥乙基丙烯醯胺（HEAM）、N-[參(羥甲基)-甲基]丙烯醯胺（TRI）、2-丙烯醯胺基-2-甲基丙烷磺酸（AMP）、(3-丙烯醯胺基丙基)三甲基氯化銨（TMA）、N-異丙基丙烯醯胺（NIP）、N,N-二乙基丙烯醯胺（DEA）、N-三級丁基丙烯醯胺（TBA）及N-苯基丙烯醯胺（PHE）。
在一些實施例中，本發明之組合物的聚丙烯醯胺類共聚物為兩親媒性的。在一些實施例中，聚丙烯醯胺類共聚物為兩種丙烯醯胺單體，亦即水溶性載體單體及官能性摻雜劑單體之共聚物。在一些實施例中，聚丙烯醯胺類共聚物經由水溶性載體單體與官能性摻雜劑單體之無規聚合形成。
如本文所定義，術語「水溶性載體單體」係指作為聚丙烯醯胺類共聚物內之水溶性單體物種的丙烯醯胺單體物種。在一些實施例中，水溶性載體單體為聚丙烯醯胺類共聚物內之主要親水性物種。在一些實施例中，水溶性載體單體提供賦予共聚物水溶性之親水性側鏈基團。
在一些實施例中，聚丙烯醯胺類共聚物內之水溶性載體單體在水性調配物之界面處提供惰性障壁以防止蛋白質-蛋白質相互作用。在一些實施例中，界面為空氣-水界面。在一些實施例中，界面為封閉體-水界面，包括但不限於玻璃-水界面、橡膠-水界面、塑膠-水界面或金屬-水界面。在一些實施例中，界面為油-水界面。在一些實施例中，界面為液體與管之間的界面。在一些實施例中，界面為液體與導管之間的界面。在一些實施例中，封閉體-水界面在泵系統中。在一些實施例中，封閉體-水界面在閉環系統中。
在一些實施例中，水溶性載體單體為親水性及/或非離子性的。所關注水溶性載體單體之實例包括但不限於丙烯醯胺（AM）、N-(3-甲氧基丙基)丙烯醯胺（MPAM）、4-丙烯醯嗎啉（MORPH）、N,N-二甲基丙烯醯胺（DMA）及N-羥乙基丙烯醯胺（HEAM）。
如本文所用，術語「官能性摻雜劑單體」係指具有一種或多種不同於水溶性載體單體之物理化學特性（例如疏水性、電荷等）的丙烯醯胺單體物種。在一些實施例中，聚丙烯醯胺類共聚物內之官能性摻雜劑單體促進聚合物與組合物之界面的締合；此類界面可包括但不限於聚合物-空氣-水界面相互作用、聚合物-蛋白質相互作用、聚合物-肽相互作用、聚合物-微胞相互作用、聚合物-脂質體相互作用及聚合物-脂質奈米粒子相互作用。官能性摻雜劑單體可充當穩定化部分以促進與生物分子（例如蛋白質、肽、抗體、抗體-藥物結合物、核酸、脂質粒子及其組合）之相互作用（例如防止生物分子聚集）。官能性摻雜劑單體可基於其化學組成而進一步分類為氫鍵結、離子性、疏水性及芳族單體。典型地，官能性摻雜劑單體在共聚物中以與水溶性載體單體相比更低的重量百分比共聚。
術語「聚合」係指其中單體分子進行化學反應以形成聚合鏈或三維網狀結構之過程。不同類型的聚合反應為此項技術中已知的，例如加成（鏈反應）聚合、縮合聚合、開環聚合、自由基聚合、受控自由基聚合、原子轉移自由基聚合（ATRP）、單電子轉移活性自由基聚合（SET-LRP）、可逆加成斷裂鏈轉移（RAFT）聚合、氮氧介導之聚合（NMP）及乳液聚合。聚合反應可為經由自由基產生系統起始之乙烯基加成聚合。在一些實施例中，本發明之共聚物使用RAFT聚合來製備。
術語「聚合度」（DP）係指聚合物中單體單元之數目。其藉由將聚合物樣品之平均分子量除以單體之分子量來計算。聚合物之平均分子量可由以下表示：數目平均分子量（Mn）、重量平均分子量（Mw）、Z平均分子量（Mz）或在分子量分佈曲線之峰值最大值處的分子量（Mp）。聚合物之平均分子量可藉由熟習此項技術者已知之多種分析型表徵技術確定，例如凝膠滲透層析法（GPC）、靜態光散射（SLS）分析、多角度雷射光散射（MALLS）分析、核磁共振光譜法（NMR）、特性黏度測定法（IV）、熔融流動指數（MFI）及基質輔助雷射脫附/電離質譜法（MALDI-MS）及其組合。聚合度亦可使用此項技術中已知之適合分析方法以實驗方式確定，諸如核磁共振光譜法（NMR）、傅立葉變換紅外光譜法（FT-IR）及拉曼光譜法。
本文所描述之組合物可包括由以下構成之聚丙烯醯胺類共聚物：
水溶性載體單體，其選自N-(3-甲氧基丙基)丙烯醯胺（MPAM）、4-丙烯醯嗎啉（MORPH）、N,N-二甲基丙烯醯胺（DMA）、N-羥乙基丙烯醯胺（HEAM）、丙烯醯胺（AM）及其組合；及
官能性摻雜劑單體，其選自 N-[參(羥甲基)-甲基]丙烯醯胺（TRI）、2-丙烯醯胺基-2-甲基丙烷磺酸（AMP）、(3-丙烯醯胺基丙基)三甲基氯化銨（TMA）、N-異丙基丙烯醯胺（NIP）、N,N-二乙基丙烯醯胺（DEA）、 N-三級丁基丙烯醯胺（TBA）、 N-苯基丙烯醯胺（PHE）及其組合。
在一些實施例中，聚丙烯醯胺類共聚物之水溶性載體單體選自MORPH、MPAM及其組合。在一些實施例中，水溶性載體單體包括MORPH或MPAM。在一些實施例中，水溶性載體單體為MORPH。在一些實施例中，水溶性載體單體為MPAM。
在一些實施例中，聚丙烯醯胺類共聚物之官能性摻雜劑單體選自AMP、TMA、TBA、PHE及其組合。在一些實施例中，官能性摻雜劑單體包括TRI、PHE或NIP。在一些實施例中，官能性摻雜劑單體包括DEA、PHE或NIP。在一些實施例中，官能性摻雜劑單體為NIP。在一些實施例中，官能性摻雜劑單體為PHE。在一些實施例中，官能性摻雜劑單體為DEA。
在一些實施例中，水溶性載體單體選自MPAM、MORPH及其組合，且官能性摻雜劑單體選自NIP、PHE及其組合。在一些實施例中，水溶性載體單體選自MPAM、MORPH及其組合，且官能性摻雜劑單體選自DEA、NIP、PHE及其組合。在一些實施例中，水溶性載體單體選自MPAM、MORPH及其組合，且官能性摻雜劑單體選自AMP、TMA、TBA、PHE及其組合。在一些實施例中，水溶性載體單體包括MPAM，且官能性摻雜劑單體包括PHE。在一些實施例中，水溶性載體單體包括MORPH，且官能性摻雜劑單體包括PHE。在一些實施例中，水溶性載體單體包括MORPH，且官能性摻雜劑單體包括NIP。在一些實施例中，水溶性載體單體包括MORPH或MPAM，且官能性摻雜劑單體包括DEA。
在一些實施例中，共聚物含有約70 wt%至約98 wt%之水溶性載體單體，例如約70 wt%至約95 wt%、約70 wt%至約90 wt%、約75 wt%至約98 wt%、約75 wt%至約95 wt%、約75 wt%至約90 wt%、約80 wt%至約98 wt%、約80 wt%至約95 wt%、約80 wt%至約90 wt%、約83 wt%至約98 wt%、約83 wt%至約95 wt%或約83 wt%至約90 wt%之水溶性載體單體。在一些實施例中，共聚物含有約2 wt%至約30 wt%之官能性摻雜劑單體，例如約2 wt%至約20 wt%、約2 wt%至約17 wt%、約5 wt%至約30 wt%、約5 wt%至約20 wt%、約5 wt%至約17 wt%、約10 wt%至約30 wt%、約10 wt%至約20 wt%或約10 wt%至約17 wt%之官能性摻雜劑單體。
在一些實施例中，共聚物含有70 wt%至98 wt%之水溶性載體單體，例如70 wt%至95 wt%、70 wt%至90 wt%、75 wt%至98 wt%、75 wt%至95 wt%、75 wt%至90 wt%、80 wt%至98 wt%、80 wt%至95 wt%、80 wt%至90 wt%、83 wt%至98 wt%、83 wt%至95 wt%或83 wt%至90 wt%之水溶性載體單體。在一些實施例中，共聚物含有2 wt%至30 wt%之官能性摻雜劑單體，例如2 wt%至20 wt%、2 wt%至17 wt%、5 wt%至30 wt%、5 wt%至20 wt%、5 wt%至17 wt%、10 wt%至30 wt%、10 wt%至20 wt%或10 wt%至17 wt%之官能性摻雜劑單體。
在一些實施例中，共聚物含有約70 wt%至約85 wt%、約70 wt%至約80 wt%、約74 wt%至約85 wt%、約74 wt%至約80 wt%或約77 wt%之MORPH。在一些實施例中，共聚物含有約15 wt%至約30 wt%、約15 wt%至約26 wt%、約20 wt%至約30 wt%、約20 wt%至約26 wt%或約23 wt%之NIP。在一些實施例中，共聚物含有70 wt%至85 wt%、70 wt%至80 wt%、74 wt%至85 wt%、74 wt%至80 wt%或77 wt%之MORPH。在一些實施例中，共聚物含有15 wt%至30 wt%、15 wt%至26 wt%、20 wt%至30 wt%、20 wt%至26 wt%或23 wt%之NIP。
在一些實施例中，共聚物含有約80 wt%至約99 wt%、約85 wt%至約98 wt%、約88 wt%至約96 wt%、約90 wt%至約95 wt%或約94 wt%之MORPH。在一些實施例中，共聚物含有約2 wt%至約15 wt%、約4 wt%至約15 wt%、約4 wt%至約10 wt%、約5 wt%至約10 wt%或約6 wt%之PHE。在一些實施例中，共聚物含有80 wt%至99 wt%、85 wt%至98 wt%、88 wt%至96 wt%、90 wt%至95 wt%或94 wt%之MORPH。在一些實施例中，共聚物含有2 wt%至15 wt%、4 wt%至15 wt%、4 wt%至10 wt%、5 wt%至10 wt%或6 wt%之PHE。
在一些實施例中，共聚物含有約80 wt%至約99 wt%、約85 wt%至約98 wt%、約88 wt%至約96 wt%、約90 wt%至約95 wt%或約92 wt%之MORPH。在一些實施例中，共聚物含有約2 wt%至約15 wt%、約4 wt%至約15 wt%、約4 wt%至約10 wt%、約5 wt%至約10 wt%或約8 wt%之PHE。在一些實施例中，共聚物含有80 wt%至99 wt%、85 wt%至98 wt%、88 wt%至96 wt%、90 wt%至95 wt%或92 wt%之MORPH。在一些實施例中，共聚物含有2 wt%至15 wt%、4 wt%至15 wt%、4 wt%至10 wt%、5 wt%至10 wt%或8 wt%之PHE。
在一些實施例中，共聚物之聚合度為約10至約500，例如約10至約350、約10至約200、約15至約500、約15至約350、約15至約200、約20至約500、約20至約350或約20至約200。在一些實施例中，共聚物之聚合度為10至500，例如10至350、10至200、15至500、15至350、15至200、20至500、20至350或20至200。
在一些實施例中，共聚物之數目平均分子量為約2,000 g/mol至約10,000 g/mol，例如約2,000 g/mol至約7,500 g/mol、2,000 g/mol至約6,000 g/mol、約2,000 g/mol至約5,000 g/mol、約3,000 g/mol至約10,000 g/mol、約3,000 g/mol至約7,500 g/mol、約3,000 g/mol至約6,000 g/mol或約3,000 g/mol至約5,000 g/mol。在一些實施例中，共聚物之數目平均分子量為2,000 g/mol至10,000 g/mol，例如2,000 g/mol至7,500 g/mol、2,000 g/mol至6,000 g/mol、2,000 g/mol至5,000 g/mol、3,000 g/mol至10,000 g/mol、3,000 g/mol至7,500 g/mol、3,000 g/mol至6,000 g/mol或3,000 g/mol至5,000 g/mol。
在一些實施例中，組合物包括約0.1 wt%至約10 wt%之共聚物，例如約0.1 wt%至約5 wt%、約0.1 wt%至約2.5 wt%、約0.25 wt%至約10 wt%、約0.25 wt%至約5 wt%、約0.25 wt%至約2.5 wt%、約0.5 wt%至約10 wt%、約0.5 wt%至約5 wt%或約2.5 wt%之共聚物。在一些實施例中，組合物包括約1 wt%之共聚物。在一些實施例中，組合物包括0.1 wt%至10 wt%之共聚物，例如0.1 wt%至5 wt%、0.1 wt%至2.5 wt%、0.25 wt%至10 wt%、0.25 wt%至5 wt%、0.25 wt%至2.5 wt%、0.5 wt%至10 wt%、0.5 wt%至5 wt%或2.5 wt%之共聚物。在一些實施例中，組合物包括1 wt%之共聚物。 抗體
如上文所概述，本發明提供與聚丙烯醯胺類共聚物一起調配之抗體的組合物。本發明人已證明聚丙烯醯胺類共聚物可用於提供治療抗體之穩定調配物，諸如水性調配物，而不改變其藥物動力學或生物可用性。此調配物可應用於多種抗體。
術語「抗體」在本文中以其最廣泛意義使用且包括包含一種或多種特異性結合至抗原或抗原決定基之抗原結合域之某些類型的免疫球蛋白分子。抗體具體包括但不限於全長抗體（例如完整免疫球蛋白）、抗體片段、單株抗體、多株抗體、多特異性抗體（例如雙特異性抗體）、人源化完全人類抗體、嵌合抗體及單域抗體。
在一些實施例中，抗體為單株抗體。在一些實施例中，抗體為單特異性的，亦即結合單一抗原。在一些實施例中，單株抗體為IgG1抗體、IgG2抗體、IgG3抗體、IgG4抗體、IgM抗體或其任何雜交體。
在一些實施例中，抗體為嵌合抗體。術語「嵌合抗體」係指含有一個或多個來自一種抗體之區及一個或多個來自一種或多種其他抗體之區的抗體。
在一些實施例中，抗體為多特異性的，亦即結合多種抗原，例如雙特異性抗體。
在一些實施例中，抗體為抗體片段。「抗體片段」包括完整抗體之一部分，諸如完整抗體之抗原結合區或可變區。適用於本發明組合物中之抗體片段包括例如Fv片段、Fab片段、F(ab') 2片段、Fab'片段、scFv（sFv）片段及scFv-Fc片段。
在一些實施例中，抗體為單域抗體，例如駱駝抗體或奈米抗體。
在一些實施例中，抗體為抗體-藥物結合物，例如與一種或多種異源分子結合之抗體。異源分子可為小分子（例如分子量小於1000、900、800、700、600或500道爾頓之有機化合物）。在一些實施例中，異源分子為細胞毒性劑、化學治療劑或細胞生長抑制劑。
在一些實施例中，抗體為雙特異性抗體免疫結合物。
在一些實施例中，抗體為抗體片段。在一些實施例中，抗體包括單株抗體之一個或多個單鏈可變片段（scFv）。在一些實施例中，單株抗體為人源化抗體、人類抗體、鼠類抗體或嵌合（小鼠/人類）抗體。
抗體可靶向多種目標蛋白質，例如治療性目標蛋白質。
在一些實施例中，抗體之分子量為約100 kDa至約200 kDa，例如約120 kDa至約180 kDa。在一些實施例中，抗體之分子量為約150 kDa。在一些實施例中，抗體之分子量為100 kDa至200 kDa，例如120 kDa至180 kDa。在一些實施例中，抗體之分子量為150 kDa。在一些實施例中，抗體之分子量為100 kDa或更小，諸如40 kDa至80 kDa，例如約50 kDa。
在一些實施例中，組合物包括5 wt%或更多之抗體，例如7.5 wt%或更多、10 wt%或更多、11 wt%或更多、12 wt%或更多、12.5 wt%或更多、15 wt%或更多、20 wt%或更多或25 wt%或更多之抗體。在一些實施例中，組合物包括25 wt%或更少、20 wt%或更少或15 wt%或更少之抗體。
在一些實施例中，組合物包括約2.5 wt%至約25 wt%之抗體，例如約2.5 wt%至約20 wt%、約2.5 wt%至約15 wt%或約2.5 wt%至約12.5 wt%、約4 wt%至約25 wt%、約4 wt%至約20 wt%、約4 wt%至約15 wt%、約4 wt%至約12.5 wt%、約8 wt%至約25 wt%、約8 wt%至約20 wt%、約8 wt%至約15 wt%或約8 wt%至約12.5 wt%之抗體。在一些實施例中，組合物包括約5.5 wt%或約12 wt%之抗體。在一些實施例中，組合物包括2.5 wt%至25 wt%之抗體，例如2.5 wt%至20 wt%、2.5 wt%至15 wt%或2.5 wt%至12.5 wt%、4 wt%至25 wt%、4 wt%至20 wt%、4 wt%至15 wt%、4 wt%至12.5 wt%、8 wt%至25 wt%、8 wt%至20 wt%、8 wt%至15 wt%或8 wt%至12.5 wt%之抗體。在一些實施例中，組合物包括約5.5 wt%或約12 wt%之抗體，諸如5.5 wt%或12 wt%之抗體。
在一些實施例中，70%或更多之抗體，例如75 wt%或更多、80 wt%或更多、85 wt%或更多或90 wt%或更多之抗體以單體狀態存在於組合物中。 醫藥組合物
在一些實施例中，包括丙烯醯胺類共聚物（例如，如上文所描述）之抗體組合物為醫藥組合物，且進一步包括醫藥學上可接受之賦形劑。術語「醫藥組合物」係指呈准許其中所含之活性成分之生物活性投與個體且有效治療個體的形式，且不含對個體具有不可接受毒性之額外組分的製劑。
醫藥組合物可含有用於調節、維持或保持例如組合物之pH、容積滲透濃度、黏度、透明度、顏色、等張性、氣味、無菌性、穩定性、溶解或釋放速率、吸附或滲透的調配材料。適合的調配材料包括但不限於胺基酸；抗微生物劑；抗氧化劑；緩衝劑；螯合劑；錯合劑；單醣；雙醣及其他碳水化合物；乳化劑；成鹽相對離子；防腐劑；溶劑；糖醇；懸浮劑；界面活性劑或潤濕劑；穩定性增強劑；張力增強劑；遞送媒劑；稀釋劑；其他賦形劑及/或醫藥佐劑。中性緩衝鹽水或與同種血清白蛋白混合之鹽水為適當稀釋劑之實例。根據適當行業標準，亦可添加防腐劑。組合物可使用適當賦形劑溶液作為稀釋劑調配為凍乾物。適合的組分在所用劑量及濃度下對接受者無毒。可用於醫藥調配物中之組分之其他實例呈現於Remington's Pharmaceutical Sciences, 第16版(1980)及第20版(2000), Mack Publishing Company, Easton, PA中。
在一些實施例中，本文所描述之組合物進一步包括界面活性劑。在一些實施例中，組合物包括約0.001 wt%至約1 wt%，例如約0.001 wt%至約0.5 wt%、約0.001 wt%至約0.1 wt%、約0.001 wt%至約0.05 wt%、約0.005 wt%至約0.5 wt%、約0.005 wt%至約0.1 wt%、約0.005 wt%至約0.05 wt%、約0.01 wt%至約0.5 wt%、約0.01 wt%至約0.1 wt%或約0.01 wt%至約0.05 wt%之界面活性劑。在一些實施例中，組合物包括0.001 wt%至1 wt%，例如0.001 wt%至0.5 wt%、0.001 wt%至0.1 wt%、0.001 wt%至0.05 wt%、0.005 wt%至0.5 wt%、0.005 wt%至0.1 wt%、0.005 wt%至0.05 wt%、0.01 wt%至0.5 wt%、0.01 wt%至0.1 wt%或0.01 wt%至0.05 wt%之界面活性劑。在一些實施例中，界面活性劑包括泊洛沙姆。在一些實施例中，界面活性劑包括聚山梨醇酯。在一些實施例中，聚山梨醇酯為聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。在一些實施例中，組合物包括約0.01 wt%之聚山梨醇酯80。在一些實施例中，組合物包括約0.01 wt%之聚山梨醇酯80，諸如0.01 wt%之聚山梨醇酯80。
在一些實施例中，本文所描述之組合物進一步包括穩定劑。在一些實施例中，穩定劑包括糖。在一些實施例中，糖為蔗糖或海藻糖。在一些實施例中，組合物包括約0.1 wt%至約25 wt%，例如約0.1 wt%至約15 wt%、約0.1 wt%至約12.5 wt%、約2 wt%至約25 wt%、約2 wt%至約15 wt%、約2 wt%至約12.5 wt%、約5 wt%至約25 wt%、約5 wt%至約15 wt%或約5 wt%至約12.5 wt%之穩定劑。在一些實施例中，組合物包括0.1 wt%至25 wt%，例如0.1 wt%至15 wt%、0.1 wt%至12.5 wt%、2 wt%至25 wt%、2 wt%至15 wt%、2 wt%至12.5 wt%、5 wt%至25 wt%、5 wt%至15 wt%或5 wt%至12.5 wt%之穩定劑。在一些實施例中，組合物包括約9 wt%之蔗糖。在一些實施例中，組合物包括約9 wt%之蔗糖，諸如9 wt%之蔗糖。
在一些實施例中，本文所描述之組合物進一步包括緩衝液。在一些實施例中，組合物之緩衝液濃度為約1 mM至約100 mM，例如約1 mM至約75 mM、約1 mM至約50 mM、約5 mM至約100 mM、約5 mM至約75 mM、約5 mM至約50 mM、約10 mM至約100 mM、約10 mM至約75 mM或約10 mM至約50 mM。在一些實施例中，組合物之緩衝液濃度為1 mM至100 mM，例如1 mM至75 mM、1 mM至50 mM、5 mM至100 mM、5 mM至75 mM、5 mM至50 mM、10 mM至100 mM、10 mM至75 mM或10 mM至50 mM。在一些實施例中，緩衝液包括磷酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、TRIS、丁二酸鹽、其他有機酸或組胺酸。在一些實施例中，緩衝液包括一種或多種磷酸鹽。在一些實施例中，緩衝液包括磷酸鈉。在一些實施例中，組合物包括乙酸鹽緩衝液。
在一些實施例中，組合物為水性調配物。在某些實施例中，此類水性調配物具有3至7.5之pH，諸如4至6.5之pH。
最佳醫藥組合物將由熟習此項技術者根據例如預定投與途徑、遞送型式及所要劑量而確定。參見例如Remington's Pharmaceutical Sciences，同前。此類組合物可影響多肽之物理狀態、穩定性、活體內釋放速率及活體內清除速率。舉例而言，適合組合物可為注射用水、用於非經腸投與之生理鹽水溶液。
在一些實施例中，醫藥組合物經調配用於靜脈內、肌肉內或皮下投與。對於靜脈內、皮膚或皮下注射或在病痛部位處注射，活性成分將呈非經腸可接受之水性調配物形式，諸如溶液，其不含熱原質且具有適合的pH、等張性及穩定性。熟習此項技術者能夠很好地使用例如等張媒劑，諸如氯化鈉注射液、林格氏注射液（Ringer's Injection）、乳酸化林格氏注射液製備適合的水性調配物。視需要，可包括防腐劑、穩定劑、緩衝劑、抗氧化劑及/或其他添加劑。 方法
本發明之範疇包括使用組合物之方法，其包括向有需要之個體投與抗體組合物（例如，如本文所描述）。在一些實施例中，投與係經由靜脈內注射。在一些實施例中，投與係經由皮下注射。在一些實施例中，所投與之組合物包括治療有效量之所關注治療抗體。
如本文所用，術語「個體」意謂哺乳動物個體。例示性個體包括人類、猴、猿、狗、貓、小鼠、大鼠、牛、馬、駱駝、山羊、兔及綿羊。在某些實施例中，個體為人類。
在一些實施例中，個體患有可用如本文所描述之抗體治療的疾病或病況。術語「治療（treating）」（及其變化形式，諸如「治療（treat）」或「治療（treatment）」）係指試圖改變有需要之個體之疾病或病況之天然病程的臨床干預。可在臨床病理學之病程期間進行治療。所需治療作用可包括以下中之一者或多者：減少疾病之發生或復發、減輕症狀、減弱疾病之任何直接或間接病理學結果、預防轉移、降低疾病進展速率、改善或緩和疾病病況及緩解或改善預後。
術語「治療有效量」或「有效量」係指當向個體投與時可有效治療疾病或病症的抗體或醫藥組合物之量。精確劑量或量將視治療目的而定且將典型地可由熟習此項技術者使用已知技術確定（參見例如Lloyd (1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding）。 定義
在本發明中，除非上下文另外明確規定，否則術語「一（a/an）」及「該」用於包括一個或多於一個。除非另外指示，否則術語「或」用於指非排他性之「或」。表述「A及B中之至少一者」具有與「A、B或A及B」相同之含義。另外，應理解，本發明中所用且不以其它方式界定之措詞或術語僅出於描述而非限制之目的。使用任何章節標題意欲輔助閱讀文件而不應解釋為限制性；與章節標題相關之資訊可在該特定章節之內或之外出現。
以範圍形式表示之值應以靈活方式解釋為不僅包括如範圍界限明確所述之數值，且亦包括在該範圍內所涵蓋之所有個別數值或子範圍，如同明確敍述各數值及子範圍一般。舉例而言，「約0.1%至約5%」或「約0.1%至5%」之範圍應解釋為不僅包括約0.1%至約5%，且亦包括處於指定範圍內之個別值（例如1%、2%、3%及4%）及子範圍（例如0.1%至0.5%、1.1%至2.2%、3.3%至4.4%）。除非另外指示，否則表述「約X至Y」具有與「約X至約Y」相同之含義。類似地，除非另外指示，否則表述「約X、Y或約Z」具有與「約X、約Y或約Z」相同之含義。
如本發明所用，術語「約」可允許在所陳述之值或所陳述之範圍界限之5%之內的值或範圍之變化程度。
在本發明所描述之方法中，除在明確敍述時間或操作序列時以外，可按任何次序進行動作。此外，除非明確的申請專利範圍語言敍述應單獨地進行，否則指定動作可同時進行。舉例而言，可在單個操作內同時進行所主張的進行X之操作及所主張的進行Y之操作，且所得製程將屬於所主張的製程之文字範圍之內。
除非本文另外定義，否則結合本發明所用之科學與技術術語將具有一般熟習技術者通常理解之含義。此外，除非上下文另外需要，否則單數術語應包括複數且複數術語應包括單數。一般而言，本文所描述之與細胞及組織培養、分子生物學、免疫學、微生物學、遺傳學及蛋白與核酸化學及雜交結合使用的命名法及其技術為此項技術中熟知且常用之彼等。除非另外指示，否則本發明之方法及技術通常根據此項技術中熟知之習知方法且如本說明書通篇所引用及論述之各種一般及更特定文獻中所描述來進行。參見例如Sambrook等人Molecular Cloning:A Laboratory Manual, 第2版, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989)及Ausubel等人, Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates (1992)，以及Harlow及Lane Antibodies:A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990)，其以引用之方式併入本文中。酶促反應及純化技術係根據製造商之說明書如此項技術中通常所實現或如本文所描述來進行。結合本文所描述之分析化學、合成有機化學及醫學與醫藥化學使用的術語以及其實驗室程序及技術為此項技術中熟知且常用之彼等。標準技術可用於化學合成、化學分析、醫藥製備、調配及遞送以及患者治療。
術語「免疫球蛋白」係指一類結構上相關之蛋白質，其一般包含兩對多肽鏈：一對輕（L）鏈及一對重（H）鏈。在「完整免疫球蛋白」中，此等鏈中之所有四條鏈藉由二硫鍵互連。已充分表徵免疫球蛋白之結構。參見例如Paul, Fundamental Immunology第7版, Ch.5 (2013) Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, PA。簡言之，各重鏈通常包含重鏈可變區（V H）及重鏈恆定區（C H）。重鏈恆定區典型地包含三個域，縮寫為C H1、C H2及C H3。各輕鏈通常包含輕鏈可變區（V L）及輕鏈恆定區。輕鏈恆定區典型地包含一個域，縮寫為C L。
術語「抗原結合蛋白」（ABP）係指包含一個或多個特異性結合至抗原或抗原決定基之抗原結合域的蛋白質。在一些實施例中，抗原結合域以與天然存在之抗體類似之特異性及親和力結合抗原或抗原決定基。在一些實施例中，ABP包含抗體。在一些實施例中，ABP包含抗體片段。
術語「抗原結合域」意謂ABP能夠特異性結合至抗原或抗原決定基之部分。
術語「全長抗體」、「完整抗體」及「全抗體」在本文中可互換使用以指具有與天然存在之抗體結構實質上類似的結構且具有包含Fc區之重鏈之抗體。
術語「Fc區」意謂免疫球蛋白重鏈之C端區，在天然存在之抗體中，其與Fc受體及補體系統之某些蛋白質相互作用。各種免疫球蛋白之Fc區之結構及其中所含有的醣基化部位為此項技術中已知的。參見Schroeder及Cavacini, J. Allergy Clin.Immunol., 2010, 125:S41-52，其以全文引用之方式併入。Fc區可為天然存在之Fc區，或在本發明中別處所描述經修飾之Fc區。
V H及V L區可進一步再分成高變區（region of hypervariability）（「高變區（hypervariable region；HVR）」；亦稱為「互補決定區」（CDR）），其中穿插有較保守區。較保守區稱為構架區（FR）。各V H及V L一般包含三個CDR及四個FR，其按如下次序（自N端至C端）排列：FR1 - CDR1 - FR2 - CDR2 - FR3 - CDR3 - FR4。CDR涉及抗原結合，且影響抗體之抗原特異性及結合親和力。參見Kabat等人, Sequences of Proteins of Immunological Interest第5版(1991) 公共衛生處（Public Health Service）, 美國國家衛生研究院（National Institutes of Health）, Bethesda, MD，其以全文引用之方式併入。
來自任何脊椎動物物種之輕鏈可基於其恆定域之序列而歸為被稱為卡帕（κ）及拉姆達（λ）之兩種類型中之一者。
來自任何脊椎動物物種之重鏈可歸為五種不同類別（或同型）中之一者：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM。此等類別亦分別被稱為α、δ、ε、γ及µ。IgG及IgA類別基於序列及功能差異而進一步分成子類別。人類表現以下子類別：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2。
CDR之胺基酸序列邊界可由熟習此項技術者使用多種已知編號方案中之任一者確定，包括以下文獻中所描述之方案：Kabat等人, 同前（「Kabat」編號方案）；Al-Lazikani等人, 1997, J. Mol.Biol., 273:927-948（「Chothia」編號方案）；MacCallum等人, 1996, J. Mol.Biol.262:732-745（「Contact」編號方案）；Lefranc等人, Dev.Comp.Immunol., 2003, 27:55-77（「IMGT」編號方案）；以及Honegge及Plückthun, J. Mol.Biol., 2001, 309:657-70（「AHo」編號方案）；其各自以全文引用之方式併入本文中。
表1提供CDR1-L（V L之CDR1）、CDR2-L（V L之CDR2）、CDR3-L（V L之CDR3）、CDR1-H（V H之CDR1）、CDR2-H（V H之CDR2）及CDR3-H（V H之CDR3）之位置，藉由Kabat及Chothia方案鑑別。對於CDR1-H，殘基編號使用Kabat及Chothia編號方案兩者來提供。
CDR可例如使用抗體編號軟體，諸如在www.bioinf.org.uk/abs/abnum/可獲得之Abnum加以指定，且描述於Abhinandan及Martin, Immunology, 2008, 45:3832-3839中，其以全文引用之方式併入。
表1根據Kabat及Chothia編號方案之CDR中之殘基。
CDR Kabat Chothia
CDR1-L 24-34 24-34
CDR2-L 50-56 50-56
CDR3-L 89-97 89-97
CDR1-H （Kabat 編號） 31-35B 26-32或34*
CDR1-H （Chothia 編號） 31-35 26-32
CDR2-H 50-65 52-56
CDR3-H 95-102 95-102
當使用Kabat編號規約編號時，CDR1-H之C端在32與34之間變化，視CDR之長度而定。
當指代抗體重鏈恆定區中之殘基時，一般使用「EU編號方案」（例如，如Kabat等人, 同前文獻中所報導）。
「抗體片段」包含完整抗體之一部分，諸如完整抗體之抗原結合區或可變區。抗體片段包括例如Fv片段、Fab片段、F(ab') 2片段、Fab'片段、scFv（sFv）片段及scFv-Fc片段。
「Fv」片段包含一個重鏈可變域及一個輕鏈可變域之非共價連接二聚體。
除重鏈及輕鏈可變域外，「Fab」片段亦包含輕鏈之恆定域及重鏈之第一恆定域（C H1）。Fab片段可例如藉由重組方法或藉由全長抗體之木瓜蛋白酶消化產生。
「F(ab') 2」片段含有兩個靠近鉸鏈區藉由二硫鍵接合之Fab'片段。F(ab') 2片段可例如藉由重組方法或藉由完整抗體之胃蛋白酶消化產生。F(ab')片段可例如藉由用β-巰基乙醇處理來解離。
「單鏈Fv」或「sFv」或「scFv」抗體片段在單一多肽鏈中包含V H域及V L域。V H及V L一般藉由肽連接子連接。參見Plückthun A. (1994)。在一些實施例中，連接子為(GGGGS) n（SEQ ID NO: 11968）。在一些實施例中，n=1、2、3、4、5或6。參見Antibodies from Escherichia coli.在Rosenberg M.及Moore G.P.(編), The Pharmacology of Monoclonal Antibodies第113卷 (第269-315頁).Springer-Verlag, New York中，其以全文引用之方式併入。
「scFv-Fc」片段包含連接至Fc域之scFv。舉例而言，Fc域可連接至scFv之C端。Fc域可在V H或V L之後，視scFv中之可變域之定向（亦即，V H-V L或V L-V H）而定。可使用此項技術中已知或本文所描述之任何適合的Fc域。在一些情況下，Fc域包含IgG4 Fc域。
術語「單域抗體」係指其中抗體之一個可變域在不存在另一可變域之情況下特異性結合至抗原之分子。單域抗體及其片段描述於Arabi Ghahroudi等人, FEBS Letters, 1998, 414:521-526及Muyldermans等人, Trends in Biochem.Sci., 2001, 26:230-245中，其各自以全文引用之方式併入本文中。
「單特異性ABP」為包含特異性結合至單一抗原決定基之結合位的ABP。單特異性ABP之一實例為天然存在之IgG分子，其雖然為二價，但在各抗原結合域處識別同一抗原決定基。結合特異性可以任何適合的價數存在。
術語「單株抗體」係指來自實質上同質性抗體之群體的抗體。實質上同質性抗體之群體包含實質上類似且結合相同抗原決定基之抗體，在單株抗體產生期間可能通常出現之變異體除外。此類變異體一般僅以少量存在。單株抗體典型地藉由包括自複數種抗體選擇單一抗體之方法獲得。舉例而言，選擇方法可為自複數種殖株，諸如一組融合瘤殖株、噬菌體殖株、酵母殖株、細菌殖株或其他重組DNA殖株選擇獨特殖株。可進一步改變所選抗體以例如提高對於目標之親和力（「親和力成熟」），使抗體人源化，提高其在細胞培養物中之產量，及/或降低其在個體中之免疫原性。
術語「嵌合抗體」係指其中重鏈及/或輕鏈之一部分衍生自特定來源或物種，同時該重鏈及/或輕鏈之其餘部分衍生自不同來源或物種之抗體。
非人類抗體之「人源化」形式為含有衍生自非人類抗體之最小序列的嵌合抗體。人源化抗體一般為人類抗體（受體抗體），其中來自一個或多個CDR之殘基經來自非人類抗體（供體抗體）之一個或多個CDR的殘基置換。供體抗體可為任何適合的非人類抗體，諸如具有所需特異性、親和力或生物效應之小鼠、大鼠、兔、雞或非人類靈長類動物抗體。在一些情況下，受體抗體之所選構架區殘基經來自供體抗體之對應構架區殘基置換。人源化抗體亦可包含在受體抗體或供體抗體中未發現之殘基。可進行此類修飾以進一步優化抗體功能。關於其他細節，參見Jones等人, Nature, 1986, 321:522-525；Riechmann等人, Nature, 1988, 332:323-329；及Presta, Curr.Op.Struct.Biol., 1992, 2:593-596，其各自以全文引用之方式併入本文中。
「人類抗體」為具有對應於由人類或人類細胞產生或衍生自利用人類抗體譜系或人類抗體編碼序列（例如獲自人類來源或經從頭設計）之非人類來源的抗體之胺基酸序列的抗體。人類抗體尤其排除人源化抗體。在一些實施例中，嚙齒動物經基因工程改造以用人類抗體置換其嚙齒動物抗體序列。
「免疫結合物」為與一種或多種異源分子結合之ABP。在一些實施例中，免疫結合物為與一種或多種異源分子結合之抗體，亦即抗體-藥物結合物。異源分子可為小分子。在一些實施例中，異源分子為細胞毒性劑、化學治療劑或細胞生長抑制劑。
如本文所用，術語「細胞毒性劑」係指抑制或妨礙細胞功能及/或引起細胞死亡或破壞之物質。
「化學治療劑」為適用於治療癌症之化合物。化學治療劑包括用以調節、減少、阻斷或抑制可促進癌症生長之激素作用的「抗激素劑」或「內分泌治療劑」。
術語「細胞生長抑制劑」係指在活體外或活體內阻滯細胞生長的化合物或組合物。在一些實施例中，細胞生長抑制劑為降低S期細胞之百分比之藥劑。在一些實施例中，細胞生長抑制劑使S期細胞之百分比降低至少約20%、至少約40%、至少約60%或至少約80%。
術語「腫瘤」係指所有贅生性細胞生長及增殖，無論惡性或良性，及所有癌前及癌性細胞及組織。如本文中所提及，術語「癌症」、「癌性」、「細胞增殖性病症」、「增殖性病症」及「腫瘤」不為互相排斥的。術語「細胞增殖性病症」及「增殖性病症」係指與某種程度的異常細胞增殖相關之病症。在一些實施例中，細胞增殖性病症為癌症。
多肽（例如抗體）之變異體包含胺基酸序列，其中相對於天然多肽序列一個或多個胺基酸殘基插入胺基酸序列中、自胺基酸序列缺失及/或取代至胺基酸序列中，且保留與天然多肽基本上相同的生物活性。多肽之生物活性可使用此項技術中之標準技術量測（例如，若變異體為抗體，則其活性可藉由如本文所描述之結合分析測試）。本發明之變異體包括片段、類似物、重組多肽、合成多肽及/或融合蛋白。
術語多肽之「衍生物」為例如經由與另一化學部分（諸如聚乙二醇、白蛋白（例如人類血清白蛋白））結合、磷酸化及醣基化，經化學修飾之多肽（例如抗體）。除非另外指明，否則術語「抗體」除包含兩條全長重鏈及兩條全長輕鏈之抗體以外，亦包括其衍生物、變異體、片段及突變蛋白，其實例描述於下文中。
「親和力」係指分子（例如ABP）之單一結合位與其結合搭配物（例如抗原或抗原決定基）之間的非共價相互作用之總和強度。除非另外指示，否則如本文所用，「親和力」係指固有結合親和力，其反映結合對成員（例如ABP與抗原或抗原決定基）之間的1:1相互作用。分子X對其搭配物Y之親和力可由解離平衡常數（K D）表示。以下更詳細地描述構成解離平衡常數之動力學分量。親和力可藉由此項技術中已知之常用方法，包括本文所描述之方法來量測。親和力可例如使用表面電漿子共振（SPR）技術（例如BIACORE ®）或生物層干涉術（例如FORTEBIO ®）確定。
關於ABP與目標分子之結合，術語「結合」、「特異性結合」、「特異性結合至」、「特異於」、「選擇性地結合」特定抗原（例如多肽目標）或特定抗原上之抗原決定基及「對」其「具有選擇性」意謂與非特異性或非選擇性相互作用（例如與非目標分子）可量測地不同之結合。可例如藉由量測結合至目標分子且將其與結合至非目標分子進行比較來量測特異性結合。亦可藉由與模擬目標分子上識別之抗原決定基之對照分子競爭來確定特異性結合。在該情況下，若ABP與目標分子之結合由對照分子競爭性地抑制，則指示特異性結合。
術語「聚合物」係指由重複單體次單元組成之物質或材料。術語「共聚物」係指由兩種或更多種不同重複單體次單元構成之聚合物。 實例
一般實驗細節
材料：溶劑N,N-二甲基甲醯胺（DMF；＞99.7%；HPLC級，Alfa Aeser）、乙醇（EtOH；＞99.5%；ACS認證，Acros Organics）、丙酮（＞99.9%；Sigma-Aldrich，HPLC級別）、己烷（＞99.9%；Thermo Fisher Scientific，ACS認證）、乙醚（無水，＞99%；Sigma-Aldrich，ACS認證）及CDCl 3（＞99.8%；Acros Organics）按原樣使用。MORPH（＞97%；Sigma-Aldrich）在使用之前用鹼性氧化鋁過濾。NIP（＞99%；Sigma-Aldrich）按原樣使用。RAFT CTA 2-氰基-2-丙基十二烷基三硫代碳酸酯（2-CPDT；＞97%；Strem Chemicals）按原樣使用。起始劑2,2-偶氮雙(2-甲基-丙腈)（AIBN；＞98%；Sigma-Aldrich）自MeOH（＞99.9%；Thermo Fisher Scientific，HPLC級）再結晶，且在使用前在真空下乾燥。Z基團移除劑過氧化月桂醯（LPO；97%；Sigma-Aldrich）及過氧化氫（H2O2；30%；Sigma-Aldrich）按原樣使用。PGT121單株抗體由Just-Evotec Biologics, Inc.（Seattle, WA, USA）與Bill and Melinda Gates Foundation合作提供。PGT121在含9%（w/v）蔗糖、0.01% PS 80，pH 5.0之20 mM乙酸鹽緩衝液中以55.5 mg/mL供應。9e9抗個體基因型單株抗體由Bill and Melinda Gates Foundation資助的Protein Production Facility（PPF）使用由疫苗研究中心（Vaccine Research Center；VIRC）提供之質體合成，VIRC為美國國家衛生研究院（NIH）之國家過敏及傳染病研究所（National Institute of Allergy and Infectious Diseases；NIAID）的部門。
合成MoNi：兩親媒性丙烯醯胺共聚物賦形劑丙烯醯嗎啉 77%-N-異丙基丙烯醯胺 23%（MoNi 77:23）根據由Mann等人, Sci.Transl.Med.12, eaba6676 (2020)描述之方法製備。簡言之，在配備有PTFE隔片之8 mL閃爍瓶中將MORPH（645 mg，4.57 mmol，41.5當量）、NIP（105 mg，0.93 mmol，8.5當量）、2-CPDT（38 mg，0.11 mmol，1當量）及AIBN（3.6 mg，0.02 mmol，0.2當量）組合且用DMF稀釋至2.25 mL之總體積[33.3（w/v）乙烯基單體濃度]。反應混合物用氮氣充氣10分鐘，且隨後在65℃下加熱12小時。為移除所得聚合物之Z端，將AIBN（360 mg，2.2 mmol，20當量）及LPO（88 mg，0.22 mmol，2當量）添加至反應混合物中，隨後用氮氣充氣10分鐘且在90℃下加熱12小時。藉由SEC分析中折射率與紫外光（310 nm）強度之比率來證實Z基團移除。所得聚合物自乙醚沈澱三次且在真空下乾燥隔夜。所得組合物及分子量經由 1H NMR光譜法及SEC用PEG標準品確定。
藉由SEC進行共聚物分子量表徵：MoNi之M n、M w及Ð經由SEC實施PEG標準品（American Polymer Standards Corporation）在含0.1 M LiBr之DMF的移動相中在35℃及1.0 mL min -1之流動速率下[Dionex UltiMate 3000泵、脫氣器及自動進樣器（Thermo Fisher Scientific）]通過兩個SEC管柱[內徑，7.8 mm；Mw範圍，200至600,000 g mol -1；Resolve混合床低二乙烯苯（DVB）（Jordi Labs）]之後確定。
製備高濃度、穩定PGT121調配物：PGT121單株抗體經由旋轉過濾（Corning® Spin-X® UF 5kDa MWCO）以3030 RPM濃縮，直至所需體積回收。濃縮調配物冷藏12小時，隨後用於加速老化研究。
動態光散射：在DynaPro盤讀取器II，Wyatt Technology上進行在milliQ水中製備之MoNi的DLS量測。報告5次採集之平均值。
濃度確定：PGT121調配物之濃度藉由體積回收、ELISA、Nanodrop（Thermo Scientific）或水性SEC-UV（PBS緩衝液，300 ppm疊氮化鈉）確定，視分析而定。對於水性SEC-UV，PGT121等分試樣在MilliQ水中稀釋133倍，且藉由比較使用Dionex UltiMate 3000 VWD在280 nm處（Thermo Scientific）自SEC獲得之跡線的曲線下面積來確定濃度。在此等分析中，將老化樣品與未老化55 mg/mL PGT121溶液進行比較（n=3）。對於nanodrop，將蛋白質濃度與55 mg/mL之儲備標準品進行比較。對於ELISA，藉由在GraphPad Prism 9中擬合四參數劑量-反應曲線（可變斜率）來內插濃度。高濃度PGT121調配物報告為藉由此等方法確定的此等調配物之若干製劑之濃度的平均值±標準差。
表面張力：使用連接至電動天平之鉑/銥威廉姆板（Wilhelmy plate）（KSV Nima，Finland）量測空氣-溶液界面之時間解析表面張力。將威廉姆板部分地浸沒於皮氏培養皿（Petri dish）中之水溶液中，且自新鮮界面之形成起記錄界面之表面張力50分鐘。報告平衡表面張力值（t=50分鐘），因為此等值更精確地描述攪拌前儲存小瓶中之環境。將樣品在20 mM乙酸鹽緩衝液，pH=5.0中自儲備樣品稀釋至所需分析濃度。一式三份地重複實驗。
界面流變學：使用具有包含由鉑/銥線構成之杜諾依環（Du Noüy ring）（CSC Scientific, Fairfax, VA，目錄號70542000）的界面幾何結構之Discovery HR-3流變儀（TA Instruments）量測界面剪切流變學。在各實驗之前，杜諾依環用乙醇及水沖洗且經火焰處理以移除有機污染物。溶液室由具有內部鐵氟龍圓柱及外部玻璃燒杯之雙壁庫頁特流量槽（Couette flow cell）組成。在1%之應變（在線性狀態內）及0.05 Hz之頻率（足夠低使得歸因於儀器慣性之效應將不顯著）下進行時間掃描。量測界面複數剪切黏度30分鐘。將樣品在20 mM乙酸鹽緩衝液，pH=5.0中自儲備樣品稀釋至所需分析濃度。一式三份地重複實驗。
PGT121 ELISA：將捕獲抗體9e9以2 μg/mL在磷酸鹽緩衝鹽水（PBS）中（25 μg/孔）塗佈於Corning 96孔高結合平底半區微量培養盤（Fisher Scientific）上且在4℃下培育隔夜。所用阻斷緩衝液為含2%脫脂乳粉（NFDM）之PBS，所用分析緩衝液為含2%牛血清白蛋白（BSA）之PBS，且洗滌緩衝液為PBS-T（0.05%吐溫20）。將培養盤洗滌兩次且用125 μL阻斷緩衝液阻斷，且在室溫下培育1小時。在分析緩衝液中製備樣品稀釋液及PGT121標準品。阻斷後，自培養盤移除分析緩衝液，隨後添加50 μL之各樣品且在室溫下培育1小時。將培養盤洗滌五次，隨後添加50 μL/孔之二級抗體過氧化酶親和純化F(ab') 2片段山羊抗人類IgG，Fcγ片段特異性（Jackson Immunoresearch, 109-036-008, RRID:AB\_2337591）在分析緩衝液中1:5000稀釋。在室溫下培育1小時之後，將培養盤洗滌10次，且隨後藉由添加50 μL TMB ELISA受質（高敏感性）（Abcam, ab171523）顯影。2.5分鐘後藉由添加1 N鹽酸停止顯影。PGT121濃度使用Synergy H1混合多模式盤讀取器（BioTek）藉由450 nm處之吸光度強度量測。各培養盤含有一式兩份地分析之15點標準曲線，其用於藉由在GraphPad Prism 9中擬合四參數劑量-反應曲線（可變斜率）來內插PGT121濃度。壓力老化樣品1:10000稀釋且接著連續4倍稀釋，以產生針對各樣品一式兩份地分析之7點曲線。藉由在GraphPad Prism 9中擬合四參數劑量-反應曲線（可變斜率）來確定IC 50值。報告平均值及標準差。
活體內藥物動力學研究：在經史丹福實驗動物照護及使用委員會（Stanford Institutional Animal Care and Use Committee；IACUC）批准之方案下根據實驗室動物之照護及使用準則進行動物研究。八週齡雌性B6.Cg-Fcgrt tm1DcrPrkdc scidTg(FCGRT)32Dcr/DcrJ（The Jackson Laboratory，庫存號018441）小鼠在短暫異氟醚麻醉下經由IP或SC注射投與PGT121抗體（1.5 mg/小鼠）（n=6/組）。經聚合物穩定之高濃度SC調配物用102 mg/mL PGT121（藉由ELISA確定）及1 wt% MoNi（15 μL注射體積）製備，且低濃度IP調配物以5 mg/mL（300 μL注射體積）在提供抗體之相同緩衝液中製備。在注射後24小時、48小時且接著在第4天、第7天、第10天、第14天及第21天收集血液樣品用於經由ELISA分析PGT121血清濃度。
黏度測定法：使用具有低黏度晶片之Rheosense m-VROC黏度計量測代表注射之高剪切速率下之黏度。使用Hamilton注射器自低剪切速率至高剪切速率量測樣品。各資料點在穩態下收集。
活體外穩定性分析：將150 µL PGT121溶液用7.5 μL MoNi在調配緩衝液中以21 mg/mL稀釋以達到0.1 wt.%之最終賦形劑濃度。此等調配物在50℃下以200 rpm攪拌。每24小時移出5 mL等分試樣。
擴散排序譜： 1H二維DOSY譜在0.2 mg/mL之PGT121濃度下記錄，自含9%（w/v）蔗糖、0.01% PS 80，pH 5.0之20 mM乙酸鹽緩衝液在D 2O（Acros Organics）中稀釋，且在使用之前用2000 Da MWCO Slide-A-Lyzer透析匣（Thermo Scientific）相對於D 2O透析24小時。MoNi直接在D 2O中以0.1 mg/mL製備。
使用Varian Inova 600 MHz NMR儀器獲取資料。磁場強度範圍介於2至57 G cm -1。DOSY時間及梯度脈衝分別設定在66.5 ms（∆）及2 ms（δ）下。所有NMR資料均使用MestReNova 11.0.4軟體處理。
統計資料：除非另外規定，否則所有結果均表示為平均值±標準差（SD），且使用Graphpad Prism 9.1（GraphPad Software Inc., USA）分析。
實例1.共聚物選擇性吸附至mAb調配物中之界面
為合成MoNi，採用可逆加成斷裂鏈轉移（RAFT）受控自由基聚合。利用在聚合之後連接在聚合物之Z端處的反應性三硫代碳酸酯鏈轉移劑（CTA）產生聚合物（表示為MoNi-CTA）。自MoNi-CTA共聚物移除CTA部分以產生MoNi賦形劑，隨後用於後續分析以確保化學穩定性及生物惰性兩者（ 圖 2，A圖至D圖）。
比較其中50%細胞在活體外殺死之濃度（稱為LC 50之參數）的報告值，且展示MoNi具有生物相容性且細胞毒性比常見商業界面活性劑賦形劑，諸如聚山梨醇酯80（PS80）及普朗尼克L61低超過100倍（ 圖 2，E圖）。Maikawa等人, Biomacromolecules22(8):3386-95 (2021);Arechabala等人, Journal of Applied Toxicology19(3):163-65 (1999);Demina等人, Biomacromolecules15(7):2672-81 (2104)。
MoNi共聚物賦形劑以遠低於腎小球濾過臨限值之分子量合成，以確保其在體內投與之後快速排泄而無生物累積。此外，藉由對100至1 mg/mL之MoNi之稀釋系列進行動態光散射（DLS）分析，嘗試確定MoNi之臨界微胞濃度（CMC）（ 圖 2，F圖）。在此等分析中，MoNi賦形劑在所評估濃度範圍內不形成微胞或聚集體。與展現遠低於1 mg/mL之CMC值的常見商業界面活性劑賦形劑PS80及普朗尼克L61相比，此行為係獨特的（ 圖 2，G圖）。Chou等人, J. Pharm.Sci.94(6):1368-81 (2005)；Carvalho等人, International journal of pharmaceutics602:120635 (2021)。值得注意地，大部分界面活性劑在其微胞狀態下具有毒性，表明MoNi之顯著較低細胞毒性可能與其在調配相關濃度內不展現自組裝成微胞的事實相關，與其商業對應物形成對比。Demina等人, Biomacromolecules15(7):2672-81 (2104)。
測試MoNi是否優先吸附至空氣-水界面。用抗HIV bnAb PGT121之調配物進行時間解析表面張力實驗，該bnAb為靶向gp120表面醣蛋白上高度保守V1/V2聚醣的用於針對HIV之被動免疫的有前景的候選物。Patel等人, J. Pharm.Sci.107(12):2969-82 (2018)；Stephenson等人, Nature Medicine27:1718-24 (2021)。含MoNi（0.01 wt%）之PGT121（20 mM乙酸鹽緩衝液，pH約5.2）的調配物與單獨的PGT121相比展現較低表面張力值（分別為53 mN/m及62 mN/m； 圖 3，A圖）。對於包含MoNi之PGT121調配物觀測到的較低表面張力表明，與僅含PGT121之調配物中相比，此調配物中之界面處堆積較多物種，指示MoNi優先以較高水平吸附至界面。值得注意地，發現僅MoNi於緩衝液中之調配物與PGT121及MoNi之調配物兩者的表面張力相同（ 圖 3，A圖），指示在此等濃度下，空氣-水界面實際上由MoNi支配。此等結果表明MoNi優先吸附至空氣-水界面，阻止mAb吸附。
為進一步表徵MoNi對PGT121調配物之影響，經由界面剪切流變學量測來探測此等調配物之界面黏彈性。此等量測結果展現將MoNi添加至PGT121調配物中使界面複數黏度降低3倍（約0.3 Pa*s*m至約0.1 Pa*s*m）； 圖 3，B圖）。不含MoNi之PGT121調配物的高界面複數黏度表明界面處之蛋白質相互作用實際上導致界面處凝膠狀外層形成。因此，添加MoNi後界面複數黏度之顯著降低指示共聚物賦形劑降低PGT121之界面相互作用，與上文所論述之展示阻止mAb吸附至界面的表面張力量測結果相稱。
亦使用擴散排序譜（DOSY）確定MoNi是否在本體中與mAb相互作用，DOSY為一種提供對不同物種在溶液中之擴散行為之直接評估的良好確立的NMR技術。如圖4，A圖至C圖中所示，PGT121 mAb及MoNi展現不同擴散行為，表明兩種物種在本體中不相互作用。此等結果進一步指示MoNi藉由防止界面聚集而用以穩定蛋白質運載物。
確定mAb濃度大於100 mg/mL之調配物在臨床上相關注射條件下是否可容易地注射。具有及不具有MoNi（10 mg/mL）之高濃度PGT121（119±7 mg/mL）溶液之黏度係在經由標準注射器及針頭幾何結構及流動速率注射期間典型地達成的剪切速率下。在此濃度下添加MoNi不改變調配物之注射黏度，且兩種調配物均展現容易注射之足夠低的黏度（ 圖 3，C圖）。
實例2.壓力老化分析中共聚物對mAb調配物之穩定
進行加速老化分析。將處於55.5 mg/mL之儲備PGT121調配物（20 mM乙酸鹽，9 wt%蔗糖，0.01 wt% PS80，pH約5.2）與濃縮超過2倍處於119±7 mg/mL（在本文中表示為高濃度）之調配物進行比較。隨後將具有及不具有MoNi（10 mg/mL）之此等調配物封裝於玻璃小瓶中且經歷加速老化（在50℃下持續攪拌； 圖 5，A圖）。此等調配物中之單體mAb含量用尺寸排阻層析法（SEC； 圖 5，B圖）歷經四週監測。在5天內，儲備及高濃度PGT121調配物均損失超過50%之其單體mAb含量，指示蛋白質顯著聚集。截至第7天，兩種調配物在宏觀上聚集，變得明顯不透明。相比之下，包括MoNi之儲備PGT121調配物經由三週連續壓力老化維持大於95%單體mAb含量（ 圖 5，B圖）。雖然包含MoNi之高濃度樣品歷經第一週壓力老化展現單體mAb含量之小的初始降低，此可能由濃縮過程產生，但此調配物歷經相同三週時段維持接近70%單體mAb含量（ 圖 5，B圖）。
確定結合抗原決定基活性（作為治療功效之代理）是否經由連續壓力老化得到保存。使用酶聯免疫吸附分析（ELISA）確定經歷壓力老化之樣品是否在其Fab及Fc域兩者中保留結合活性，且因此保留構形保真度（ 圖 5，C圖）。使用半最大抑制濃度（IC 50）來比較經歷壓力老化之具有及不具有MoNi（10 mg/mL）之高濃度調配物的功能效力。在不存在MoNi之情況下，PGT121 mAb快速失去功能性，在僅五天壓力老化之後損失超過65%之其效力（ 圖 5，E圖）。相比之下，添加MoNi顯著增強調配穩定性，且PGT121 mAb經由21天連續壓力老化保留超過75%之其初始效力。
綜合而言，此等結果指示將MoNi賦形劑添加至高濃度mAb調配物中藉由阻止mAb吸附至界面而賦予顯著穩定性益處，藉此在加速老化條件下防止聚集事件且維持結合活性。
實例3.經共聚物穩定之高濃度PFT121調配物的藥物動力學概況
經由嚙齒動物中之藥物動力學研究確定MoNi是否充當非活性成分。將1.5 mg之PGT121投與具有人源化FcRn受體之基因轉殖SCID小鼠（n=6/組；B6.Cg-Fcgrt tm1DcrPrkdc scidTg[FCGRT]32Dcr/DcrJ；Jackson Labs編號018441），經由SC注射15 μL經MoNi穩定之高濃度PGT121（119 mg/mL）或IP注射300 μL低濃度PGT121（5 mg/mL）。投與後收集血清三週，以經由ELISA分析全身PGT121濃度（ 圖 6，A圖至B圖）。
定量隨時間推移之血清濃度以及總PGT121暴露量（曲線下面積；AUC）證明兩種投與途徑及調配物之間的藥物動力學及生物可用性相當（ 圖 6，C圖）。當以經MoNi穩定之高濃度調配物投與時，就PGT121之血清效價或生物可用性而言，未觀測到顯著治療差異。此外，未觀測到急性體重減輕（治療相關毒性之常見度量），進一步展示MoNi之生物相容性及耐受性（ 圖 7）。
將MoNi添加至高濃度PGT121 mAb調配物中顯著改善其穩定性而不影響藥物動力學，此將為開發臨床上相關SC調配物所需。此等結果證明MoNi作為賦形劑以解決生物醫藥調配物挑戰之顯著有用性。
無
[ 圖 1]為一組示意圖，其展示使用新穎共聚物賦形劑穩定高濃度抗體調配物之概述。（A圖）生物醫藥之當前治療投與途徑的示意性概述，其中靜脈內投與由於在皮下投與所需之高濃度下生物醫藥之穩定性限制而為常見的，導致患者負擔高。（B圖）可用於使調配物中之生物醫藥穩定的兩親媒性丙烯醯胺載體/摻雜劑共聚物（AC/DC）賦形劑，諸如聚(丙烯醯嗎啉-共- N-異丙基丙烯醯胺）（MoNi）之圖示。（C圖）展示使用AC/DC共聚物作為「可直接使用之（drop-in）」賦形劑使調配物中之單株抗體穩定的示意圖。AC/DC共聚物係兩親媒性的且可優先吸收至界面，阻止調配物中之抗體界面吸附且藉此防止界面相關去穩定及聚集事件。
[ 圖 2]為一組示意圖及圖，其展示MoNi共聚物賦形劑之合成及表徵。（A圖）合成聚(丙烯醯嗎啉-共-N-異丙基丙烯醯胺)（MoNi）之合成流程。（B圖）MoNi-CTA中間物及（C圖）MoNi之尺寸排阻層析法（SEC）表徵證明，CTA在合成之第二步驟中完全移除，產生化學且物理穩定的共聚物。（D圖）MoNi之 1H-NMR表徵。（E圖）MoNi、聚山梨醇酯80（PS80）及普朗尼克（Pluronic）L61之細胞毒性的比較。（F圖）溶液中各種濃度下MoNi之DLS表徵證明，即使在高濃度下，MoNi共聚物亦不展現臨界微胞濃度（CMC）行為。（G圖）PS80及普朗尼克L61之報告CMC值的比較。
[ 圖 3]為一組圖，其展示mAb調配物中MoNi聚合物賦形劑之界面相互作用。（A圖）在時間解析表面張力量測（n=3）中PGT121（0.2 mg/mL）在具有及不具有MoNi（0.1 mg/mL）之情況下的比較。（B圖）PGT121（0.2 mg/mL）在具有及不具有MoNi（0.1 mg/mL）之情況下的界面流變學量測結果（n=3）。（C圖）對於具有及不具有MoNi（10 mg/mL）之PGT121（119 mg/mL）之高濃度調配物，藉由黏度測定法實驗在穩態下收集之高剪切速率黏度量測結果。
[ 圖 4]為（A圖）單獨的MoNi（0.1 mg/mL）、（B圖）單獨的PGT121（0.2 mg/mL）及（C圖）分別在0.2 mg/mL及0.1 mg/mL下之PGT121及MoNi之共調配物的一組擴散排序譜（diffusion ordered spectroscopy；DOSY）核磁共振（NMR）譜。
[ 圖 5]為一組示意圖及圖，其展示由PGT121之MoNi引起之穩定。（A圖）加速老化之示意圖，其中調配物封裝於玻璃小瓶中，攪拌且加熱。（B圖）經由GPC確定之老化樣品之單體組成百分比。（C圖）經由ELISA分析抗原決定基結合之示意圖。（D圖）具有及不具有MoNi之老化調配物的半最大抑制濃度（IC 50）。一式兩份地分析樣品。
[ 圖 6]為一組示意圖及圖，其展示經MoNi穩定之PGT121調配物的藥物動力學。（A圖）報告hFcRn小鼠中注射劑量及血液收集時刻表之實驗方案，用於比較低濃度PGT121（5 mg/mL）調配物之IV投與及經MoNi穩定之高濃度PGT121（119 mg/mL）調配物之SC投與。（B圖）PGT121隨時間推移之血清濃度，藉由ELISA確定（n=6/組）。（C圖）ELISA資料之曲線下面積分析（n=6/組）。
[ 圖 7]為展示處理後隨時間推移之小鼠體重的圖。

Claims (80)

  1. 一種組合物，其包含： 聚丙烯醯胺類共聚物，該共聚物包含： 水溶性載體單體，其選自 N-(3-甲氧基丙基)丙烯醯胺（MPAM）、4-丙烯醯嗎啉（MORPH）、 N, N-二甲基丙烯醯胺（DMA）、 N-羥乙基丙烯醯胺（HEAM）、丙烯醯胺（AM）及其組合；及 官能性摻雜劑單體，其選自 N-[參(羥甲基)-甲基]丙烯醯胺（TRI）、2-丙烯醯胺基-2-甲基丙烷磺酸（AMP）、(3-丙烯醯胺基丙基)三甲基氯化銨（TMA）、 N-異丙基丙烯醯胺（NIP）、N-N-二乙基丙烯醯胺（DEA）、 N-三級丁基丙烯醯胺（TBA）、 N-苯基丙烯醯胺（PHE）及其組合；以及 抗體。
  2. 如請求項1之組合物，其中該水溶性載體單體係選自MORPH、MPAM及其組合。
  3. 如請求項1之組合物，其中該水溶性載體單體包含MORPH。
  4. 如請求項1之組合物，其中該水溶性載體單體包含MPAM。
  5. 如請求項1至4中任一項之組合物，其中該官能性摻雜劑單體係選自AMP、TMA、TBA、PHE及其組合。
  6. 如請求項1至4中任一項之組合物，其中該官能性摻雜劑單體係選自DEA、PHE、NIP及其組合。
  7. 如請求項1至4中任一項之組合物，其中該官能性摻雜劑單體包含TRI。
  8. 如請求項1至4中任一項之組合物，其中該官能性摻雜劑單體包含PHE。
  9. 如請求項1至4中任一項之組合物，其中該官能性摻雜劑單體包含NIP。
  10. 如請求項1至4中任一項之組合物，其中該官能性摻雜劑單體包含DEA。
  11. 如請求項1之組合物，其中： 該水溶性載體單體係選自MPAM、MORPH及其組合；且 該官能性摻雜劑單體係選自NIP、PHE及其組合。
  12. 如請求項1之組合物，其中： 該水溶性載體單體係選自MPAM、MORPH及其組合；且 該官能性摻雜劑單體係選自AMP、TMA、TBA、PHE及其組合。
  13. 如請求項1之組合物，其中該水溶性載體單體為MPAM，且該官能性摻雜劑單體為PHE。
  14. 如請求項1之組合物，其中該水溶性載體單體為MORPH，且該官能性摻雜劑單體為PHE。
  15. 如請求項1之組合物，其中該水溶性載體單體為MORPH，且該官能性摻雜劑單體為NIP。
  16. 如請求項1至15中任一項之組合物，其中該共聚物包含： 70 wt%至98 wt%之該水溶性載體單體；及 2 wt%至30 wt%之該官能性摻雜劑單體。
  17. 如請求項1至15中任一項之組合物，其中該共聚物包含： 80 wt%至95 wt%之該水溶性載體單體；及 5 wt%至20 wt%之該官能性摻雜劑單體。
  18. 如請求項1至15中任一項之組合物，其中該共聚物包含： 83 wt%至98 wt%之該水溶性載體單體；及 2 wt%至17 wt%之該官能性摻雜劑單體。
  19. 如請求項1之組合物，其中該共聚物包含： 70 wt%至85 wt%之MORPH；及 15 wt%至30 wt%之NIP。
  20. 如請求項1之組合物，其中該共聚物包含： 74 wt%至80 wt%之MORPH；及 20 wt%至26 wt%之NIP。
  21. 如請求項1之組合物，其中該共聚物包含： 77 wt%之MORPH；及 23 wt%之NIP。
  22. 如請求項1至21中任一項之組合物，其中該共聚物之聚合度為10至500。
  23. 如請求項1至21中任一項之組合物，其中該共聚物之聚合度為20至200。
  24. 如請求項1至23中任一項之組合物，其中該共聚物之數目平均分子量為2,000 g/mol至10,000 g/mol。
  25. 如請求項1至23中任一項之組合物，其中該共聚物之數目平均分子量為2,000 g/mol至6,000 g/mol。
  26. 如請求項1至23中任一項之組合物，其中該共聚物之數目平均分子量為3,000 g/mol至5,000 g/mol。
  27. 如請求項1至26中任一項之組合物，其包含0.1 wt%至10 wt%之該共聚物。
  28. 如請求項1至26中任一項之組合物，其包含0.5 wt%至5 wt%之該共聚物。
  29. 如請求項1至28中任一項之組合物，其包含1 wt%之該共聚物。
  30. 如請求項1至29中任一項之組合物，其中該組合物進一步包含界面活性劑。
  31. 如請求項30之組合物，其包含0.001 wt%至0.5 wt%之該界面活性劑。
  32. 如請求項30之組合物，其包含0.005 wt%至0.05 wt%之該界面活性劑。
  33. 如請求項30至32中任一項之組合物，其中該界面活性劑包含聚山梨醇酯。
  34. 如請求項33之組合物，其中該聚山梨醇酯為聚山梨醇酯80。
  35. 如請求項34之組合物，其包含0.005 wt%至0.05 wt%之聚山梨醇酯80。
  36. 如請求項34之組合物，其包含0.01 wt%之聚山梨醇酯80。
  37. 如請求項1至36中任一項之組合物，其中該組合物進一步包含穩定劑。
  38. 如請求項37之組合物，其包含0.1 wt%至25 wt%之該穩定劑。
  39. 如請求項38之組合物，其包含2 wt%至15 wt%之該穩定劑。
  40. 如請求項37至39中任一項之組合物，其中該穩定劑包含寡醣。
  41. 如請求項40之組合物，其中該寡醣為蔗糖。
  42. 如請求項40之組合物，其包含2 wt%至15 wt%之蔗糖。
  43. 如請求項40之組合物，其包含9 wt%之蔗糖。
  44. 如請求項1至43中任一項之組合物，其包含5 wt%或更多的該抗體。
  45. 如請求項44之組合物，其包含10 wt%或更多的該抗體。
  46. 如請求項44或45之組合物，其包含20 wt%或更少的該抗體。
  47. 如請求項1至43中任一項之組合物，其包含2.5 wt%至20 wt%之該抗體。
  48. 如請求項47之組合物，其包含2.5 wt%至15 wt%之該抗體。
  49. 如請求項47之組合物，其包含8 wt%至20 wt%之該抗體。
  50. 如請求項49之組合物，其包含12 wt%至20 wt%之該抗體。
  51. 如請求項1至50中任一項之組合物，其中該抗體之分子量為100 kDa至200 kDa。
  52. 如請求項51之組合物，其中該抗體之分子量為120 kDa至180 kDa。
  53. 如請求項1至50中任一項之組合物，其中該抗體之分子量為50 kDa至100 kDa。
  54. 如請求項1至53中任一項之組合物，其中該抗體為單株抗體。
  55. 如請求項1至53中任一項之組合物，其中該抗體為嵌合抗體。
  56. 如請求項1至53中任一項之組合物，其中該抗體為雙特異性抗體。
  57. 如請求項1至53中任一項之組合物，其中該抗體為全長抗體。
  58. 如請求項1至53中任一項之組合物，其中該抗體為抗體片段。
  59. 如請求項1至53中任一項之組合物，其中該抗體為抗體-藥物結合物。
  60. 如請求項1之組合物，其包含： 0.1 wt%至10 wt%之聚丙烯醯胺類共聚物，該共聚物包含： 70 wt%至98 wt%之水溶性載體單體，其選自MPAM、MORPH、DMA、HEAM、AM及其組合；及 2 wt%至30 wt%之官能性摻雜劑單體，其選自TRI、AMP、TMA、NIP、TBA、PHE及其組合；以及 5 wt%或更多的該抗體。
  61. 如請求項60之組合物，其包含10 wt%或更多（例如12 wt%至20 wt%，諸如12 wt%）的該抗體。
  62. 如請求項60或61之組合物，其中： 該水溶性載體單體係選自MPAM、MORPH及其組合；且 該官能性摻雜劑單體係選自NIP、PHE及其組合。
  63. 如請求項60至62中任一項之組合物，其中： 該水溶性載體單體為MORPH；且 該官能性摻雜劑單體為NIP。
  64. 如請求項63之組合物，其中該組合物包含： 77 wt%之MORPH；及 23 wt%之NIP。
  65. 如請求項60至64中任一項之組合物，其包含1 wt%之該聚丙烯醯胺類共聚物。
  66. 如請求項60至65中任一項之組合物，其進一步包含0.001 wt%至0.5 wt%之界面活性劑。
  67. 如請求項63至66中任一項之組合物，其進一步包含0.1 wt%至25 wt%之穩定劑。
  68. 如請求項1至67中任一項之組合物，其中該組合物係水性的。
  69. 如請求項68之組合物，其中該組合物之pH為3至7.5。
  70. 如請求項69之組合物，其中該組合物之pH為4至6.5。
  71. 如請求項69或70之組合物，其進一步包含： 0.001 wt%至0.5 wt%之界面活性劑（例如0.01 wt%之聚山梨醇酯80）； 0.1 wt%至25 wt%之穩定劑（例如9 wt%之蔗糖）；及 緩衝液（例如20 mM乙酸鹽）。
  72. 如請求項1至71中任一項之組合物，其中至少70%之該抗體以單體狀態存在於該組合物中。
  73. 如請求項72之組合物，其中至少90%之該抗體以單體狀態存在於該組合物中。
  74. 如請求項1至73中任一項之組合物，其中該組合物為具有60 mN/m或更小之表面張力的液體。
  75. 如請求項1至74中任一項之組合物，其中該組合物具有0.2 Pa·s·m或更小之界面複數黏度。
  76. 如請求項1至75中任一項之組合物，其中該組合物在0 s -1至3,000 s -1之剪切速率下具有6 mPa·s或更小之黏度。
  77. 如請求項1至76中任一項之組合物，其中根據藉由酶聯免疫吸附分析確定之半最大抑制濃度，該組合物能夠歷經21天連續壓力老化保留該抗體對目標抗原之結合活性的70%或更高。
  78. 如請求項1至77中任一項之組合物，其中該組合物經調配用於皮下投與。
  79. 一種向有需要之個體投與抗體之方法，其包含向該個體注射治療有效量之如請求項1至78中任一項之組合物。
  80. 如請求項79之方法，其中該注射為皮下注射。
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